PL57031B1 - - Google Patents

Description

Przedmiotem niniejszego wynalazku jest otrzy¬ mywanie mieszanki szczepionek przeciw odrze i ospie w postaci wysuszonej. Szczepionka w ta¬ kiej postaci wykazuje niewatpliwe zalety w po¬ slugiwaniu sie nia w warunkach polowych, zwlaszcza dzieki zmniejszeniu do minimum mozli¬ wosci bledów w manipulacjach i wprowadzenia zanieczyszczen. Stwierdzono bowiem, ze wysusze¬ nie obu tych skladników w postaci mieszaniny jest technicznie wykonalne i nie zmniejsza w zna- 20 2 cznym stopniu dzialania uodparniajacego kazdego ze skladników.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze zmieszane ze soba znane szczepionki zawierajace zywe wirusy odry i ospy, poddaje sie liofilizacji.Liofilizacji poddaje sie mieszanine umieszczona w zbiorniczkach jednostkowych.Wirusem odry przydatnym w sposobie wedlug wynalazku moze byc kazdy material szczepionko¬ wy odpowiedni dla ludzi, na przyklad szczepionka Endersa o poziomie B oparta na oslabionych zy¬ wych wirusach odry rozmnazanych w hodowlach tkankowych z zarodka kurczecia. Taka szczepion¬ ke dostepna w handlu, wytwarza firma Merck and Co., Inc. pod nazwa „Rubeovax". Inna odpowied¬ nia szczepionka przeciw odrze jest szczepionka oparta na oslabionych zywych wirusach ze szczepu Schwartz równiez dostepna w handlu. Szczepionka przydatna w sposobie wedlug wynalazku powinna posiadac takie dzialanie zakazne, aby jedna dawka produktu koncowego wstrzykiwana czlowiekowi, zawierala co najmniej 1000 jednostek DZHT50 (dawka zakazajaca hodowla tkankowa w 50°/o) oslabionych zywych wirusów odry.Zamiast handlowej szczepionki przeciw odrze mozna równiez uzyc szczepionke sporzadzona me¬ todami konwencjonalnymi. W typowym procesie wytwarzania stosuje sie wirus rozmnazany w pre¬ paratach tkankowych z zarodka kurczecia. Kultu¬ ry tkankowe hoduje sie na sztucznej pozywce, ta- 57 03157 031 3 kiej jak pozywka „Medium 199" zawierajacej oso¬ cze z krwi wolu i stosowne antybiotyki. W celu zaszczepienia hodowli tkankowych stosuje sie czysta kulture wirusa odry szczepu Edmonstona lub inna o udowodnionej nieobecnosci obcych wi¬ rusów. Wirusy zebrane z hodowli tkankowych kla¬ ruje sie droga filtracji, w celu uwolnienia od resztek obcych tkanek, a nastepnie poddaje sie ba¬ daniom zgodnie z przepisami.Szczepionka ospowa moze byc kazda szczepionka uzaana jako odpowiednia do stosowania u ludzi.. Mozna ja wyhoclowac na jalówce, w zarodkach kurczecia, w hodowlach tkankowych z zarodka kurczecia lub innej odpowiedniej tkanki, albo inna stosowna metoda.Najczesciej szczepionke ospowa stanowi zywy wirus krowianki otrzymany z pecherzyków ospo- wych ektodermy jalówki (lub innego odpowiednie¬ go zwierzecia) w okresie kulminacyjnym tworze¬ nia pecherzy, wywolanego przez sztuczne zakaze¬ nie zwierzecia stosownym preparatem wirusa kro¬ wianki. Pecherzyki zbiera sie z jalówki lub innego zwierzecia i w postaci miazgi lub „limfy" poddaje badaniu zgodnie z przepisami. Nastepnie miazge poddaje sie zabiegom, w wyniku których usuwa sie obce bialka i w znacznym stopniu obniza, albo calkowicie usuwa zanieczyszczenie bakteriami i grzybkami. Z kolei poddaje sie ja badaniom w celu okreslenia jej nieszkodliwosci, jalowosci i ak¬ tywnosci.Do obu szczepionek dodaje sie stosowny srodek utrwalajacy w celu zabezpieczenia przed utrata aktywnosci lub zmniejszenia tej utraty do mini¬ mum, na skutek suszenia. Koncowy produkt moze zawierac równiez siarczan neomycyny lub inny odpowiedni antybiotyk albo srodek konserwujacy.Mieszanie szczepionek przeprowadza sie w wa¬ runkach aseptycznych, po czym mieszanine te standaryzuje sie w taki sposób, aby objetosc daw- kowa przeznaczona dla ludzi zawierala co naj¬ mniej 103 DZHT50 wirusa odry oraz okolo 105 ITP (jednostek tworzenia plamek) na 0,1 ml wirusa krowianki. Miano wirusa oznaczone metoda plam¬ kowa zwykle jest równe mianu uzyskanemu przez ocene efektu cytopatycznego (DZHT50). Ilosci te wywoluja produkcje przeciwcial, przeciw obu wi¬ rusom w zasadzie u wszystkich osób nieuodpor- nionych. Równiez, w zasadzie u wszystkich osob- 10 15 20 25 30 35 40 45 ników daja dodatni odczyn krowiankowy z utwo¬ rzeniem blizny.Mieszana szczepionke umieszcza sie w szklanych zbiorniczkach, zamraza do temperatury —60°C i nastepnie wysusza za pomoca liofilizacji.Mieszane szczepionki otrzymane sposobem we¬ dlug wynalazku mozna stosowac do wstrzykiwania ludziom za pomoca aparatu do szczepien maso¬ wych przy uzyciu glowicy skosnej albo glowicy pionowej. Mozna równiez dokonywac wstrzykiwan sródskórnych albo podskórnych za pomoca strzy¬ kawki do wstrzykiwan podskórnych. Glowica skosna aparatu do szczepien masowych umozliwia wstrzykniecie 0,1 ml mieszanej szczepionki sród- skórnie. Natomiast glowica pionowa, jezeli jest wyposazona w nasadke stwarzajaca odpowiednia odleglosc pomiedzy dysza i skóra, umozliwia wpro¬ wadzenie 0,1 ml mieszanej szczepionki sródskórnie, albo 0,4 ml tej szczepionki w tkanki polozone gle¬ biej. Uzycie glowicy bez nasadki dystansujacej po¬ woduje, ze praktycznie biorac, cala szczepionke wj*owadza sie w tkanke podskórna. Nastawiajac odpowiednio aparat mozna regulowac objetosc dawki.Ponizsze przyklady ilustruja sporzadzanie serii mieszanych szczepionek sposobem wedlug wyna¬ lazku.Przyklad I. Uzyto szczepionke przeciw odrze o poczatkowym mianie 103,4 DZHT50/0,1 ml oraz krowianke o wyliczonym mianie 108,4 ITP/0,1 ml.Szczepionke ospowa zmieszano ze szczepionka przeciw odrze w stosunku 1 czesc : 59 czesci.Mieszana szczepionke rozlewano w porcjach po 11 ml, zamrozono do —60°C i wysuszono za pomo¬ ca liofilizacji. W celu uzycia lub do badan, bute¬ leczki uzupelniano woda destylowana w ilosci 11 ml. £ W próbie sprawdzajacej uzyskano nastepujace wyniki: krowianka (próba plamkowa) 105,6 /o,l ml krowianka (próba probówkowa) 105,4 DZHT50/0,1 ml odra 102,9 DZHT\.0/0,1 ml.Przyklad II—V. Postepujac w sposób opisa¬ ny w przykl. I szczepionke ospowa zmieszano ze szczepionka przeciw odrze w podanych stosunkach i w rezultacie sprawdzenia mieszanej szczepionki uzyskano nastepujace wyniki: Przy¬ klad II III IV V Stosunek szczepionka ospowa: szczepionka przeciw odrze (czesci) 1:9 0,1 :9,9 0,01:9,99 0,001:9,999 Stan zamrozony wysuszony zamrozony wysuszony zamrozony wysuszony zamrozony wysuszony Szczepionka ospowa DZHT50/0,1 ml 105.6 105,6 10V 104,6 103.6 103,8 102,6 10M ITP/0,1 ml 10V 105,9 105,1 105,1 10',8 103,8 102,9 103,0 Szczepionka przeciw odrze DZHT50/0,1 ml 10V 102,8 io2.6 102.9 157 031 5 6 Przyklad VI. Mieszanine sporzadzono w spo- ksób identyczny jak w przykladzie I z tym, ze uzy¬ to szczepionki ospowej i przeciw cdrze z innej partii. Wyniki zawiera ponizsze zestawienie. j J Wirus ospa, zamrozony ospa, wysuszony odra Wynik próby DZHT50/0,1 ml 10V 104,6 iov ITP/0,1 ml 105,2 105,1 Wszystkie podatne dzieci zaszczepione mieszana .-szczepionka wedlug przykladu I uzyskaly dodatni odczyn krowiankowy i wytworzyly hamujace he¬ maglutynacja przeciwciala przeciw wirusowi kro- wianki oraz uzyskaly odpornosc na ospe jak to wykazala reakcja na szczepionke ospowa zastoso¬ wana w pózniejszym terminie w zwykly sposób, ^metoda wielokrotnych nakluc.Wszystkie dzieci wykazaly reakcje serologiczna na szczepionke przeciw odrze produkujac przeciw¬ ciala na poziomach miana zblizonych do stanu gdy szczepionke przeciw odrze stosuje sie osobno.Powyzsze przyklady dowodza, ze mieszaniny dwóch szczepionek zawierajacych zywy wirus sa zgodne, trwale i pozwalaja uzyskac suchy produkt w wysokim stopniu skuteczny dla uodparniania ludzi. PL PL PL

Claims (2)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania szczepionki mieszanej prze¬ ciw odrze i ospie przez zmieszanie szczepionek, zawierajacych zywe wirusy odry i ospy, zna¬ mienny tym, ze mieszanine szczepionek podda¬ je sie liofilizacji. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze liofilizacji poddaje sie mieszanine zawierajaca wirusy zmieszane ze soba w stosunku co naj¬ mniej 103 jednostek DZHT50 wirusa odry z 105 ITP na 0,1 ml wirusa krowianki.

2. 20 « PL PL PL