PL48555B1 - - Google Patents

Description

Przesacza sie, odparowuje w prózni i pozostalosc krystalizuje z mieszaniny izopropanol (woda) eter etylowy. Otrzymuje sie 34 g dwuchlorowodorku L-arginylo-L-prolilo-L- -proHIoglicylo*L-feny|Malanilo-L-serylo-L-prolilo)- -L-fenyloalanilo-L-argininy. Nonapepty4 posiada punkt izoelektryczny 10,5. Prrzez hydrolize kwaso¬ wa otrzymuje sie arginine, proline,glicyne, fenylo- alanine i seryne w stosunku 2:3:1:2:1.Przyklad II. 30,2 g N^karbobenzoksynitro-L- -argmylo-L-prolilo-L-proliloglicyny i 7,0 ml troj^ etyloaminy rozpuszcza sie w 500 ml dioksanu w temperaturze —10° z dodatkiem 4,8 ml estru etylowego kwasu chloromrówkowego i dolewa po 10 minutach 32,6 g L-fenyloalanilo-L^serylo-L-pro- lilo-L-fenyloalanilo-L-argininy (otrzymanej na przyklad przez uwodornienie estru p-nitrobenzylo¬ wego N-karbobenzoksy-Lr-fenyloalanilo-Li-serylo- -L-prolilo-L-fenyloalanilo-nitro-L-argiininy) w 200 ml wody i 7 ml trójetyloaminy. Miesza sie w ciagu 5 godzin w temperaturze 20°, odparowuje, przemy¬ wa pozostalosc woda, rozcienczonym kwasem octo¬ wym i metyloetyloketonem i uwodarnia w miesza¬ ninie 750 ml lodowatego kwasu octowego, 100 ml 2-n kwasu solnego i 650 ml wody w ciagu 24 godzin pod normalnym cisnieniem, w obecnosci kataliza¬ tora palladowego. Dalej postepuje sie jak w przy¬ kladzie I.Przyklad III. 30,9 N-karbobenzoksy-L-argi- niny, 16,5 g chlorowodzianu estru metylowego L-proliny i 24y8 g dwucyklokatfbodwuimidu roz¬ puszcza sie w temperaturze —10° w 250 ml dwu¬ metyloformamidu i 100 ml acenitrylu, pozostawia sie na noc w temperaturze 20°, odparowuje w próz¬ ni i pozostalosc uciera z eterem naftowym, rozpusz¬ cza w 300 ml metanolu i 300 ml 1-n lugu sodowego, pozostawia na 1 godzine, dodaje 500 ml wody, prze-* sacza, zobojetnia rozcienczonym kwasem solnym, znowu przesacza, przemywa woda i suszy. Otrzy-48555 * muje sie 28 g N-karbobenzoksy-L-arginino-Li-pro- liny, która rozpuszcza sie w 250 ml dwumetylofor¬ mamidu i 100 ml acetonitrylu. Dolewa sie w tem¬ peraturze ^10° 18 g dwucykloheksylokarbodwuimi- du, 16,5 g estru III-rzed. butylowego L-prolilogli- 5 cyny i 12 g kwasu toluenosulfonowego, pozostawia na 16 godzin w temperaturze pokojowej, wytraca eterem etylowym, rozpuszcza w 200 ml lodowatego kwasu / octowego, przepuszcza w ciagu 2 godzin suchy chlorowodór, odparowuje, dodaje 100 ml 1-n 10 lugu sodowego i 100 ml metanolu, zobojetnia kwa¬ sem solnym, przesacza i przemywa woda i izopro- panolem. Otrzymuje sie 32,5 g N-karbobenzoksy-L- arginylo-L-prolilo-L-proliloglicyny (ciezar cza¬ steczkowy 560, znaleziono 557), która rozpuszcza sie w 200 ml dwumetyloformamidu i 50 ml aceto- 15 nitrylu w obecnosci 9,9 g ikwasu toluenosulfonowe¬ go. Dodaje sie 20 g p-nitrofenolu i 20 g dwucyklo- heksylokarbodwuimidu, pozostawia na noc w tem¬ peraturze pokojowej i dolewa 32,6 g L-fenyloala- nilo-L-serylo-L-prolilo-L-fenyloalanilo-L- argininy 20 (otrzymanej na przyklad przez uwodornienie estru p-nitrobenzylowego N^arbobenzoksy-L-fenylo- alanilo-L-serylo-L-prolilo-L- fenylonitro-L- argini¬ ny), 100 ml wody i 7 ml trójetyloaminy. Po 16 go¬ dzinach stania w temperaturze pokojowej odpa- 25 rowuje sie w prózni i pozostalosc krystalizuje z mieszaniny izopropanol/woda. Otrzymuje sie 41 g N-karbobenzoksy- L- arginylo- Lnprolilo- L-prolilo- glicylo-L-fenyloalanilo-L-serylo-L-prolilo-L-feny- loalanilo--L-argininy, iktóra rozpuszcza sie w 500 ml 30 lodowatego kwasu octowego i 500 ml 1-n kwasu solnego i uwodarnia w ciagu 1 godziny pod nor¬ malnym cisnieniem w obecnosci katalizatora pal¬ ladowego. Dalej postepuje sie jak w przykladzie I.Przyklad IV. Postepuje sie jak w przyikla- 35 dzie III. W celu odszczepienia grupy karbobenzo- ksylowej rozpuszcza sie nonapeptyd w 4 literach cieklego amoniaku i traktuje, mieszajac metalicz¬ nym sodem az do wystapienia niebieskiego zabar¬ wienia. Po odparowaniu amoniaku postepuje sie 40 dalej jak w przykladzie I.Przyklad V. Rozpuszcza sie 39 g N-karboben- zoksytosylo-L-arginine, 36 g bromowodorku estru etylowego L-prolilo-proliloglicyny i 19 g karbo- 45 dwuimidu dwucylkoheksylowego w temperaturze —10° w 240 ml pirydyny i 240 ml acetonitrylu. Na¬ stepnie postepuje sie jak to opisano w przykla¬ dzie III. Otrzymuje sie 35 g N-karbobsnzoksytosy- lo-L-arginylo-L-prolilo-L-proliloglicyne, która roz- 50 puszcza sie w 200 ml dwumetyloformamidu i 50 ml acetonitrylu. Do tego roztworu dodaje sie 20 g karbodwuimidu dwucykloheksylowego i 20 g o-nitrofenylu i pozostawia w spokoju przez noc, po czym dodaje sie 32,6 g L-fenyloalanilo-L-sery- 55 lo-L-prolilo-L-fenyloalanilo-L-argininy, 100 ml wody i 7 ml trójetyloaminy. Po 16 godzinach od¬ parowuje sie mieszanine reakcyjna w Temperaturze pokojowej pod pTóznia i przekrystalizowuje pozo¬ stalosc z mieszaniny izopropanolu i wody. Otrzy- 60 muje sie 47 g N^karbobenzóksy-tosylo-L-arginylo- -Lnprolilo-L-proliloglicylo-'Ij-feriyloalanilo-L-sery- lo-L-prolilo-L-fenyloalanilo-L-arginine, której grupy ochronne odszczepia sie w sposób opisany w przykladzie IV. ¦.•'.-;¦• 65 Przyklad VI. Rozpuszcza sie 32 g NJkarboben- zoksy-L-arginylo-L-prolilo-L-prolilo-glicyny i 9,9 g kwasu toluenosulfonowego w 200 ml dwumetylo¬ formamidu i 50 ml acetonitrylu, dodaje 20 g kar¬ bodwuimidu dwucykloheksylowego i 38,1 g estru p-nitrobenzylowego L-fenyloalanilo-L-prolilo-L- -fenyloaanilonitro-L-argininy. Po 5 godzinach utrzymywania mieszaniny reakcyjnej w tempera¬ turze pokojowej saczy sie ja, odparowuje pod próz-: nia i krystalizuje pozostalosc z mieszaniny izopro- panolu i wody. Otrzymuje sie 48 g estru p-nitro- -benzylowego N-karbobenzoksy-L-arginylo-L-pro- ldlo- Li-prolilo-glicylo- L-fenyloalanilo- L-iserylo-L- prolilo- L-fenyloalanilo- nitro- L-argininy, który uwodarnia sie w sposób opisany w przykladzie Ie. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania nowego polipeptydu, obni¬ zajacego cisnienie krwi, o wzorze 1, znamienny tym ze pochodna nonapeptydu o wzorze 4, w którym R oznacza grupe ochronna nadajaca sie do ochrony grupy aminowej, zwlaszcza grupe karbobenzoksy- lowa odszczepialna za pomoca bezwodnej hydrolizy kwasowej lub przez traktowanie metalem alkalicz¬ nym w cieklym amoniaku, grupe toluenosulfony- lowa odszczepialna przez traktowanie metalem al¬ kalicznym w cieklym amoniaku, trzeciorzedowa grupe karbobutoksylowa odszczepialna przez hy¬ drolize kwasowa w bezwodnych rozpuszczalnikach, w rozpuszczalnikach zawierajacych wode Tuto w wodzie, grupe ftalilowa odszczepialna przez traktowanie hydrazyna, grupe formylowa odszcze¬ pialna przez kwasna alkoholize lub kwasna hydro¬ lize, grupe p-nitro-karbobenzoksylowa odszczepial¬ na przez uwodornienie, bezwodna hydrolize kwaso¬ wa lub traktowanie metalem alkalicznym w ciek¬ lym amoniaku, R' oznacza atom wodoru lub grupe nadajaca sie do ochrony grupy guanidowej, zwla¬ szcza grupe karbobenzoksylowa, odszczepialna przez uwodornienie, bezwodna hydrolize kwasowa, lub traktowanie metalem alkalicznym w cieklym amo¬ niaku, grupe toluenosulfonylowa odszczepialna przez traktowanie metalem alkalicznym w cieklym amoniaku, trzeciorzedowa grupe karbobutoksylo¬ wa odszczepialna przez kwasna hydrolize w bez¬ wodnych rozpuszczalnikach, w rozpuszczalnikach uwodnionych lub w wodzie, grupe ftalilowa od¬ szczepialna przez traktowanie hydrazyna, grupe formylowa odszczepialna przez kwasna alkoholize, lub kwasna hydrolize, grupe p-nitro-kabrobenzo- ksylowa odszczepialna przez uwodornienie, bez¬ wodna hydrolize kwasowa lub przez traktowanie metalem alkalicznym w cieklym amoniaku, R" oznacza atom wodoru lub grupe nadajaca sie do ochrony grupy guanidowej, zwlaszcza grupe karbo¬ benzoksylowa odszczepialna przez uwodornienie, bezwodna hydrolize kwasowa lub przez traktowa¬ nie metalem alkalicznym w cieklym amoniaku, grupe toluenosulfonowa odszczepialna przez trak¬ towanie metalem alkalicznym w cieklym amonia¬ ku, reszte nitrowa odszczepialna przez uwodornie¬ nie, R'" oznacza atom wodoru, lub grupe nadajaca sie do ochrony grupy karboksylowej, zwlaszcza grupe benzylowa odszczepialna przez uwodornie^48555 nie, przez bezwodna hydrolize kwasowa, albo przez traktowanie metalem alkalicznym w cieklym amo¬ niaku, grupe p-nitrobenzylowa odszczepialna przez hydrolize, przez traktowanie metalem alka¬ licznym w cieklym amoniaku albo przez zmydle- nie, grupe metylowa odszczepialna przez zmydle- nie, grupe etylowa odszczepialna przez zmydlenie, 10 trzeciorzedowa grupe butylowa odszczepialna przez kwasna hydrolize w bezwodnym lub uwodnionym rozpuszczalniku, poddaje sie traktowaniu srodkami odszczepiajacymi odpowiednie grupy ochronne, przy czym proces ten prowadzi sie jednostopniowo lub ewentualnie w kilku stopniach. hn=c-nh. NH I CH, I 2 CH, I 2 CH* CH, CH, I *¦ J 2 i ' H N-CH N—CH * \/ I (T C CH, CH, | 2 | 1 N CH NH-CH„ u y o o OH I CH. qH2 ch. |6 5 CH, i a HN=C-NH- l 2 NH l CH, I L CH, i * CH, I z I ^ . NH-CH NH-CH N—CH NH-CH NH-CH \y 1/ i/ i/ ' 4 C II 0 C-OH II 0 h/Tor 1 HN=C-NH-R' i NH CH2 CH. I ' CH. R-HN-CH er II O /H2 N—CH CH2 (JH2 N—CH NH-CH2 er c-oh Nzor- l48555 HN=C-NH-R" CH, CeH5 HN-CH NH-CH, 2 y y c c II II o o CH2 CH2 N—CH C^ ?6H5 NH-CH II O NH l CHa NH-CH C-O-R" ' II O h/zof 5 HN=C-NH-R' I NH I * CH, I 2 CH2 R-NH-CH CL^ CH l * i N— 2 T CH, CH, C I O N—CH l C II O NH-CH., C II O C«H5 C«2 OH I CH, I NH CH-NH CH x/ ' II II o o CH2 CH^CH. J. 2 ' l HN=C-NH-R" NH I ?6H5 CH2 CH2 CH, N—CH NH-^H NH-CH C^ V C-O-R II II h 0 0 0 II I Hzór *t BIBLIOTEK, ;,;er,towegc ZG „Ruch" W-wa, zam. 892-64 naklad 250 egz. PL