PL46190B1 - - Google Patents

Description

l # '"**, »w«* atóais wtmrftiiatmz V, POLSKIEJ RZECZYPOSPOLITEJ LUDOWEJ OPIS PATENTOWY aaea Nr 46190 Tarchominskie ZaWady Fasmaceutyezne ^fialia"*) Przedsiebiorstiuo PanstWD»e ¦Watasaawai, Polaka Sposób otrzymywani 2 wysoka wydajnoscia witaminy Ru hib 4MB9U propionowego Patent trwa od dinia 7 lipca; HWl r.W proaesiite biosyntezy witaminy B12 za po¬ moca bakterii propionowyeh otrzymuje sie ulbocaaiie jaiko produkt [metabolizmu balkteiii kwas propionowy w róznych, na ogól nieopK sywamych w literaturze ilosciach. W znam^en spoiscitach wydajnosc wtiitiiminy B\2 sfcairano die podwyzszac atoaujac rózne 4c«ywiki oraz pH bijzfccrfci fmnentacynei albo równiez, jiak podaje patent brytyjski nr 829232,, natlenianie brz£»2ziki w koncowej fazie fermentacyjnej, Dzjijaiki zmiancni tych parametrów uzyslktiiwiano rózne wydiadmtcsci wifcamany B42, które np. wedlug patentu poMnego nr 42378 wynosily pday 20-*Ui -dlrmeweg tonsentacji ^10 mg/litr ltoeezflri feiimentacyjnej, wedlug patentu USA t) Wlurfiimll pa-tatetu oswiadczyl, ze wispol- twtóiraaBnii wymalasfliui sa mgr Zygpmint €toajrp«oL dr Joarf- Janaoki, mgr Ludomir y!irtirL'\ ^r Jony Tnihrwj dr Fnnmgreil" Ehc- dzdw&ilk i mgr Danuta Sikora. nir 2&16.S56 -przy 4-*ri& diniioiwej fermenMcji - 4,6 mag/litr, wedlug Bernhauetfa (Congnefcs of Milkajcibiok-gy im Stoncholim August 19Sftyprzy 8-mriiGi dlndofwej fennentacji — ¦ 12 nifefliitr,, a wedlug Wfiipamniifittego wyzej patentu bry- tyjsMegO' nr 829232 przy 5-6 dniowej fermen¬ tacji - 21-24 tmg/Mtr.Kwas propionowy otrzymywany przy pro- dluBócdii witaminy B12 nie stanowil ?dot)*chczas waritosciciwego produktu ubocznego zarówno zte wzgledu na mala zawartosc jego w brzecz¬ ce, jtak i truiefihcóci przy j*got iaaloiWftnfcu. Wfca- d&no jednak, ze kwas prepktfwrwy jestr oenr aj^n-awnawoem przy fakisyn/tefflie «t^tt«iiijW* ny.Gelem wynalsaku ljplo satóefcieaite ajjoeotou^ za poniosa któtfego nuoznia byloby mjfcAiBC ^fryr setka w^dlaincsc ws4amatay Bu, lufc, teay 4P^ 6tnvo«jrdtEoiDo rwteflpfe, ^K^nrtwadaió w fetaxin9lu otsczymtanitaj ^6WttJe Ittteami pionowego..-Sposób^ wedtMg •' 'wynalazku polega tia sci¬ slym rejgulciwiainiu' stezenia czynników wzro¬ stowych w brzieczce przez stosowanie inhibi¬ torów lub przez blokowanie chemicznie (unie- czyjiinianie) grup czynnych w przypadku po- zywkU zbyt bogatej w czynniki wzrostowe allbo przezi stosowanie stymulatorów wzrostu w przypadku pozywki zbyt ubogiej w czyn¬ niki wzrostowe. Sposobem wedltfg ' wynalazku mozna w stosunkowo krótkim czasie uzyskac wysoka wydajnosc witaminy Bi2 albo kwasu propionowego.Okazalo sile, ze przy stezeniu czynników wzrostowych w ilosci 5-12 mg w 1 lirbrze brzeczki uzyskuje sie w czasie fermentacji trwajacej okolo 100 godzin, na typowych po¬ zywkach i przy wartosci pH okolo 7 — okolo 2.5 mg witaminy B12, natomiast przy stezeniu czynników wzrostowych w ilosci okolo 50 mg na 1 lito" w tych samych warunkach fermen¬ tacji uzyskuje sie okolo 110 g kwasu propiono¬ wego w 1 litrze brzeczki.Ponizej podaje sie opracowana na podstawie wynaJazku tabele, okreslajaca zaleznosc riiie- dzy stezeniem czynników wzrostowych a bio¬ synteza witaminy B!2 i kwasu propionowego: B % 4 30 La u *•* 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 £ BcS£ 25 24,5 22 19 16,5 14 11 8 5 3 O fe a, .^t li Pi 30 48 55 65 70 75 85 95 100 , 100 pH brze¬ czki 7 7 7 7 7 7 7 7 7 7 t°C fermen- 1 tacji 1 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 Jak z tabeli wynika, stezenie czynników wzaipsitowych najkorzystniej utrzymywac jest pmy bicsyinltezie witaminy B12 w granicach 5-10 mg/litr baraczki, natomiast przy biosyn¬ tezie kwasu propionowego — w granicach 45-50 mg/Wer.Tabela obejmuje najkorzystniejsze graniczne stezenia czynników wzrostowych. Przy zmniej¬ szeniu ffllosci czynników wzrostowych ponizej 5 img/lilr brzeczki znacznie wzrasta, jak stwierdzono, czas biosyntezy witaminy &\2 zas przy zwiekszeniu jego ilosci ponad 50 mg/- litr mie zwieksza sie istotnie ilosc otrzymywa¬ nego kwasu propionowego.Przyklad I. Do pozywki o skladzie: hydrolizat kazeiny glikoza: MgCla H3PO4 CcS04 woda uzupelniona do 35 g 100 g 0, 4 g 1 g 0, 012 g 1000 ml dodeno czynników wzrostowych w ilosci 5 mg (mieszanina biotyny i kwasu pantotenowego w stosunku 1:10). Pozywke zaszczepiono za po¬ moca 20%. inoculum bakterii propionowych i inkubowano w teimiperaiturze 30° C. Hodo¬ wle prowadzono przez 4 doby utrzymujac od^ czyn podloza w granicach wartosci pH = 6,8—7.2. W tak prowadzonej hodowli stezenie kwasu propionowego wynosilo 30 g/litr, a ste¬ zenie witaminy B!2 — 25 mg w 1 litrze brzeczki . feirmenitacyjnej.Przyklad II. Do pozywki o skladzie jak w przykladzie I dodano czynników wzrosto¬ wych w ilosci 50 mg. Po czberodobowej ho- dowlli prowadzonej wedlug parametrów jak w przykladzie I uzyskano stezenie kwasu pro¬ pionowego 100 g w 1 litrze brzeczki a witaminy B12 — 3 mig/litr.Przyklad III. Pozywka o skladzie: wodny namok kukuirydzy 86 g glikoza 100 g MgCl2 0,4 g H3PO4 1,0 g O0SO4 0,012 g woda uzupelniona do 1000 ml po wyjalowieniu przy wartosci pH = 7,5 zawiera czynniki wzrostowe w- ilosci oko lo 5 mig/Hitr. Po 4-dobowej hodowli prowadzo¬ nej jak w przykladziiie I uzyskano stezenie kwasu propionowego 40 g, a witaminy B12 — 25 mg w 1 litrze brzeczki fermentacyjnej.Przyklad IV. Pozywka o skladzie jak w przykladzie III wyjalowiona przy wartosci. pH =4,5 — 5,8 zawiera w 1 lotrze ckolo 50 mg czynników1 wzrostowych. Po czterodobcwej hodowli prowadzonej jak w przykladzie I uzyskano w 1 litrze brzeczki fermentacyjnej 105 g kwasu propionowego i 3,5 mg witaminy B12 . - 2 -Przyklad V. Do pozywki o skladzie jak uzyciu bakterii propcicnowych oraz przy war- w przykladzie III wyjalowionej przy wartosci tosci pH brzeczki fermentacyjnej okolo 7, pH okolo 4,5 dodiamo 0,1 g benzoesainu sodu znamienny tym, ze stezenie czynników wzro- (infhiiibditor). Po 4-dobowej hodowli prowadzo- stowych w brzeictzce fenmienitacyjnej reguluje nej jak w przykladzie I uzyskano w 1 litrze sie przez stasowanie inhibitorów lub przez brzeczki 23 mig witaimtoiy B12 i 50 g kwasu blokowanie chemicznie (uinieczynntiande) grup proptionoweigo. czynnych ailbo przez stosowanie sitymulatorów t, 1 * j T7T t^ ^ n • 1*«,j-~ ^b- wzrostu tak, alby przy otrzymywaniu wiitami- Przyklad VI. Do pozywki o skladziejak ' -^T^ , w przykladnie III wyjalowionej przy wartosci ™ B" wymmio ^ =* »« 1 ** brzeczkr, pH okolo 4,5 dodam) 0,15 g NaA Os (0,1 gS02) «*»*** W otayfnywandu kwasu propio- dzialajacego jako fcUtattor. Po 4-dobowej ho- ncwe8° ctoto 50 m^- dowli jak w przykladzie I uzyskano w 1 litrze m m . , , . i . A^ e x • ^. ^o^i « Tarchominskie Zaklady brzeczki 24,5 mg witaminy B!2 oraz 48 gkwa- J Farmaceutyczne ,.P o 1 f a" su propaonowego. „ _ . _ . x „, A Przedsiebiorstwo Panstwowe PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Zastepca: mgr Snz. Antona Sentek Sposób otrzymywania, z wysoka wydajnoscia rzecznik patentowy witaminy Bi2 lub kwasu propionowego przy 1903. RSW „Prasa", Kielce PL