PL39766B1 - - Google Patents

Description

Opublikowano Aria 8 'Kwietni* 4987 r. /m\ ; " POLSKIEJ RZECZYPOSPOLITEJ LUDOWEJ OPIS PATENTOWY Nr 39766 Ki. 30 h 2/04 Instytut Farmaceutyczny*) Warszawa, Polska Sposób oczyszczania surowej liepdryny Patent trwa od dnia 15 lutego 1956 r.Wynalazek dotyczy sposobu oczyszczania su¬ rowej heparyny. Heparyna jest substancja o wy¬ bitnym dzialaniu przeciwskrzepowym. Sposób jej otrzymywania polega na autolizie tkanki zwie¬ rzecej, ekstrakcji alkalicznej, wytracaniu kom¬ pleksu bialkowego- heparyny, a nastepnie podda¬ niu go trawieniu enzymatycznemu w celu oddzie¬ lenia bialka. Otrzymany produkt — surowa he¬ paryne — poddaje sie dalszemu oczyszczaniu.Wedlug Charlesa i Scotta z roztworu wytraca sie heparyne acetonem, rozpuszcza ja w siarcza¬ nie amonowym, oczyszcza odczynnikiem Lloyda 1 powtórnie wytraca acetonem. , Wedlug Kuizengi i Spauldinga do wytracania nieczynnych domieszek, stosuje sie 35%-owy al¬ kohol, a nastepnie przeprowadza heparyne w sól •) Wlasciciel patentu oswiadczyl, ze wspól¬ twórcami wynalazku sa mgr inz. Zofia Bury, mgr Janina Hennig, inz. Maria Iwaszkiewicz, mgr inz. Romana Jaworska, mgr inz. Wieslaw Lewenstein, mgr Irena Malkiewicz, mgr inz. Zbi¬ gniew Lopatek i mgr inz. Stanislaw Krzyzanowski barowa, a pózniej w sól sodowa, która wytraca sie acetonem.Wedlug farmakopei brytyjskiej zanieczyszcze¬ nia usuwa sie za pomoca chlorku kadmowego, a jego resztki usuwa sie za pomoca weglanu amonowego, po czym heparyne wytraca sie ace¬ tonem i oczyszcza przez polaczenie z brucyna lub benzydyna, a nastepnie przez krystalizacje w postaci soli barowych.Wedjug innej metody zanieczyszczenia towa¬ rzyszace heparynie wytraca sie w postaci kom¬ pleksowych soli kadmowych. Resztki kadmu usuwa sie siarkowodorem, a heparyne wytraca sie acetonem. Wedlug Homana i Lensa surowa heparyne rozpuszcza sie w amoniaku i weglanie amonu i oczyszcza przez ekstrakcje fenolem, a nastepnie usuwa zanieczyszczenia przez wy¬ tracenie ich w postaci polaczen z olowiem.Z przesaczu otrzymuje sie czysta heparyne.Sposób wedlug wynalazku pomija zupelnie stosowanie metali ciezkich oraz metali ziem al¬ kalicznych, przy czym jest on krótszy i prostszy od sposobom zmanycfr o*az wydajniejszy.Sposób wedlug wynalazku polega na jedno- lub dwukrotnej frakcjonowanej krystalizacji he¬ paryny, a nastepnie dwukrotnym oczyszczaniu jej za pomoca roztworów kwasów organicznych, które daja osady z zanieczyszczeniami o charak¬ terze bialkowym (bialka lub produkty hydrolizy bialek), np. kwasu sulfosalicylowego lub trój- chlorooctowego.Przyklad I. lkg surowej heparyny roz-: puszcza sie w 15 1 wody destylowanej i po do¬ prowadzeniu pH do wartosci 6 — 6,5 wytraca sie heparyne równa objetoscia 96Vo-owego alkoholu etylowego. Po wydzieleniu pierwszej frakcji he¬ paryny, druga frakcje wytraca sie nastepna rów¬ na objetoscia alkoholu. Oba osady przerabia sie oddzielnie, suszy sie bezwodnym alkoholem, a na¬ stepnie pod próznia. Czynnosc pierwszej frakcji wynosi 30—40 j/mg, a drugiej frakcji 3—10 j/mg W przypadku gdy czynnosc pierwszej frakcji jest nizsza niz 30 j/mg krystalizacje nalezy powtó¬ rzyc. 500 g heparyny o czynnosci nie nizszej niz 30 j/mg rozpuszcza sie w 5 litrach wody destylo¬ wanej, po czym dodaje sie 750 ml 20°/o-owego roztworu kwasu sulfosalicylowego. Zanieczysz¬ czenia wytracaja sie w postaci osadu, który usu¬ wa sie z roztworu i po przemyciu 2°/o-owyia roztworem kwasu sulfosalicylowego odrzuca, a z roztworu o pH = 6 —-6,5 wytraca sie hepa¬ ryne o czynnosci okolo 75 j/mg równa objetosci 96Vo-owego alkoholu etylowego.Przyklad II. 500 g heparyny o czynnosci nie nizszej niz 30 j/mg rozpuszcza sie w 5 1 wo¬ dy destylowanej, po czym wytraca sie zanie^ czyszczenia przez dodanie 1200 ml 3%-owego roztworu wodnego kwasu trójchlorooctowego. Po oddzieleniu osadu wytraca sie heparyne o czyn¬ nosci okolo 80 j/mg równa objetoscia 96%-owego alkoholu etylowego.Przyklad III. 1000 g heparyny o czynnosci okolo 75 j/mg rozpuszcza sie w 1 1 wody de¬ stylowanej i dodaje sie 100 ml 20%-owego roz¬ tworu wodnego kwasu sulfosalicylowego. Po od¬ dzieleniu osadu na filtrze Seitz'a lub lejku poro¬ watym G — 4, wytraca sie heparyne o czynnosci okolo j/mg równa objetoscia 96€/o-owego alko¬ holu etylowego. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób oczyszczania surowej heparyny, zna¬ mienny tym, ze do oczyszczania stosuje sie kwa¬ sy organiczne, dajace osady z bialkami lub pro¬ duktami hydrolizy bialek, np. kwas sulfosalicyIo¬ wy lub trójchlorooctowy. Instytut Farmaceutyczny Zastepca i Kolegium Rzeczników Patentowych Wzór Jednoraz. CWD, zam. 62/PL/Ke. Czst. zam. 802 14.2.57. 100 egz. Al pism. ki. 3, B-757 , PL