PL30314B3

PL30314B3 -

Info

Publication number: PL30314B3
Application number: PL30314A
Authority: PL
Filing date: 1938-02-15
Publication date: 1942-02-28

Description

Najdluzszy czas trwania patentu do 26 marca 1950 Wjiiadomo, ze przy redukcji grupy keto- mliesziainitaja izomerów o róznym dzialaniu nowej w estronie (hormonie pecherzyko- fizjologicznym, lecz przy nieodjpowiednini wyin) albo w podobnych, lecz ubozszych doborze warunków reakcji moze ulec uwo- w wodór zwiazkach, jak w ekwilinie, ekwi- dornieniu pierscien aromatyczny w cza- leninie lub w ich pochodnych, jak estrach steczce hormonu i wskutek tego zostanie lub eterach, za pomoca metod chemicznych, zniweczione samo dzialanie estronu (hoirmo- np. na drodze katalitycznej albo za pomoca nu pecherzykowego). wodoru in startu njaiscendi, powstaje miesza- Stwierdzono, ze stosujac biochemiczne nima izomeryczinych, fizjologicznie bardzo metody redukcji, opisane np, w dziele czynnych estradioli (hormonów pecherzy- Oppenheimera „Methoden der Fermente", kowyoh) lub podobnych, lecz ubozszych 1929, str. 12112 przez Neuberg'a i Grossa, w wodór zwiazków wzglednie ich po- unika sie nie tylko mozliwosci uwodornie- chodnych. Przy stosowaniu tych metod niia pierscienia aromatycznego, lecz równiez chemicznych tworzy sie jednak nie tylko wskutek asymetrycznego przebiegu bioche-Ulicznego procesu redukcyjnego nadspo¬ dziewanie tworzy sie scisle okreslony fizjo¬ logicznie czynny izomer optyczny. Wedlug wynalazku otrzymuje sie mianowicie przez redukcje estrami zasadniczo bardzo czyn¬ na postac ,,trans" estradiolu, podczas gdy za pomoca dJotychozais znanych metod re- dtokcjl otrzymywano w ogóle mieszaniny zwiazków „dis" ii „trans".Aczkolwiek zastosowanie biochemicz¬ nych procesów redukcyjnych do przepro¬ wadzania ketonów w alkohole samo prztez sie nie jest rzecza nowa, to jednak w da¬ nym przypadku fakt stosowania tych pro¬ cesów do wytwarzania fizjologicznie czyn¬ nych substancji o scisle okreslonych wla¬ sciwosciach optycznych i o najwiekszym stopniu czystosci stanowi bardzo cenna zdo¬ bycz chemiczna.Przyklad I. Zmiieszanjo 100 g cukru in- wiertowanego, 600 cm3 woidy i 50 g drozdzy.Do mieszaniny, znajdujacej sie w pelnym rozwoju fermentacji, wtkraplano stopniowo wstrzasajac roztwór 330 mg hormonu pe¬ cherzykowego (estronu) o wzorze C18//22O2 w 40 cm3 alkoholu. Po wprowadzeniu calej ilosci roztworu hormonu pecherzykowego mieszanine poddano w dalszym ciagu fermentacji w temperaturze zwyklej (18—20°C) w ciagu okolo 40—45 godzin, po czym dodano ponownie 20 g cukru in¬ wertowanego, 200 cm3 wody i 20 g droz¬ dzy.Po uplywie okolo 90 godzin fermentacja zostala zasadniczo zakonczona i, gdy juz roztwór reakcyjny w slabym stopniu re¬ dukowal roztwór Fehlinga, ciecz zlano z drozdzy, po czym ciecz i drozdze wy¬ ciagano kilkakrotnie eterem. Polaczone roztwory eterowe odparowano, sucha po¬ zostalosc rozpuszczono w alkoholu i z roz¬ tworu alkoholowego wydzielono w sposób znany ewentualnie hormon pecherzykowy (estron), który nie wszedl w reakcje, w po¬ staci semikarbazonu. Pozostalosc otrzy¬ mana po odparowaniu lugu macierzystego wydzielonego semikarbazonu oczyszczono przez przekrystalizowanie z alkoholu ewen¬ tualnie po destylacji w prózni pod bar¬ dzo zmniejszonym cisnieniem i w ten spo¬ sób otrzymano bardzo czynny fizjologicz¬ nie hormon dyuliydropecherzykowy jako transestradiol o wzorze C18H2AO2 o punkcie topnienia 174° C.Przyklad IL 200 mg octanu estronu rozpuszczono w 20 cm3 alkoholu i roztwór ten wprowadzono stopniowo do roztworu 40 g cukru trzcinowego w 300 cm3 wody wodociagowej, znajdujacego sie w stanie pelnej fermentacji pod dzialaniem 20 g drozdzy piekarskich. Po dwudniowej fer¬ mentacji do masy fermentujacej dodano jeszcze 40 g cukru trzcinowego, rozpusz¬ czonego w 50 cm3 wody, a nastepnie pozo¬ stawiono cala te mase do fermentowania w temperaturze pokojowej w ciagu 5 dni.Nastepnie przerwano fermentacje i pod¬ dano mense fermentowana wyczerpujacemu wyciaganiu eterem. Roztwór eterowy prze¬ myto woda, wysuszono ponad siarczanem sodowym i odparowano eter. Pozostalosc, która stanowila mieszanine, poddano roz¬ dzielaniu na skladniki bedace ketonami i skladniki nie bedace ketonami, czyli sub¬ stancje uwodornione, za pomoca odczyn¬ nika Girarda T(5) na ketony. W tym celu rozpuszczono pozostalosc w 30 cm3 abso¬ lutnego alkoholu, dodano 3 g lodowatego kwasu octowego oraz 1,5 g odczynnika T na ketony i gotowano mieszanine w ciagu godziny. Nastepnie mase reakcyjna wylano do 200 cm3 wody, zawierajacej tyle lugu sodowego, azeby mozna bylo zobojetnic 2,7 g lodowatego kwasu octowego, po czym trzykrotnie wyciagano eterem. Roztwór eterowy, zawierajacy skladniki nie bedace ketonami, czyli uwodornione, przemyto wo¬ da, wysuszono ponad siarczanem stodu i od¬ parowano eter. Po przekrystalizowaniu z alkoholu otrzymano 118 mg transestra- diolu o punkcie topnienia 173 — 174° C (bez poprawki). — 2 —Wodny roztwór, pozostaly po reakcji za pomoca odczynnika Girarda, zadano 10 g kwasu siarkowego i po 2 godzinach wyciagnieto eterem, przy czym mtfzna bylo odzyskac 30 mg estronu.Przyklad III. 200 mg propionianu estro¬ nu potraktowano i przerobiono dokladnie w taki sam sposób, jak w przykladzie II.Otrzymano 110 mg transestradiolu o punk¬ cie topndeiiiia 173 — 174° i 28 mg es¬ tronu.Przyklad IV. 200 mg n-maslanu estro¬ nu potraktowano i przerobiono, jak wyzej, otrzymujac 108 mg transestradiJolu o punk¬ cie topnienia 173 ,— 174° i 28 mg es¬ tronu.Wydzielanie produktu redukcji z mie¬ szaniny fermentacyjnej mozna przeprowa¬ dzac w inny niz opisany powyzej sposób, jak to jest wiadomo chemikowi obeznane¬ mu z procesem fermentacyjnym. Warunki redukcji, jak równiez stosowane drobno¬ ustroje, mozna zmieniac bez wykraczania poza zakres wynalazku.Mozna równiez prace prowadzic w obec¬ nosci substancji pobudzajacych fermenta¬ cje, np. soli, jak pierwszorzedowego lub drugorzedowego fosforanu sodowego, we¬ glanu wapniowego lub zwiazków zawiera¬ jacych azot, które przyspieszaja rozwój ustrojów fermentacyjnych.Podobnie otrzymuje sie przy stosowa¬ niu ekwiliny lub ekwileniny, octanu, pro¬ pionianu lub mailami estronowego, eteru estronobetnizyloiwego i innych pochodnych estronu (hormonu pecherzykowego) odpo¬ wiednie produkty redukcji, w których grupa karbonylowa zostala przeprowa¬ dzona w drugorzedowa grupe alkoholowa CH. OH. • PL

Claims

Zastrzezenia patentowe. 1. Sposób wytwarzania transestradiolu (folikulosteronu) lub podobnych, lecz uboz¬ szych w wodór zwiazków, jak równiez ich podhodnych, wedlug patentu nr 21271, znamienny tym, ze estron (hormon peche¬ rzykowy) albo jego pochodne poddaje sie biochemicznym procesom redukcyjnym.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamien¬ ny tym, ze redukcje przeprowadza sie za pomoca drozdzy.
3. Sposób wedlug zastrz. 1—2, zna¬ mienny tym, ze do redukcji enzymatycz¬ nej jako material wyjsciowy do fermen¬ tacji stosuje sie drobnoustroje.
4. Sposób wedlug zastrz. 1 — 3, zna¬ mienny tym, ze do enzymatycznej redukcji stosuje sie jako material wyjsciowy do fermentacji roztwór cukru.
5. Sposób wedlug zastrz. 1 — 4, zna¬ mienny tym, ze wspomnianego materialu wyjsciowego dodaje sie do wodnej zawie¬ siny cukru i drozdzy, mieszanine reakcyj¬ na poddaje fermentacji, roztwór reakcyj¬ ny po skonczonej fermentacji wyciaga sie rozpuszczalnikiem organicznym, np. ete¬ rem, w którym transestradiol jest roz¬ puszczalny, i wydziela sie ten hormon z wyciagu.
6. Sposób wedlug zastrz. 1 — 3, zna¬ mienny tym, ze transestradiol oddziela sie w wyciagu od nie weszlego do reakcji materialu wyjsciowego za pomoca odczyn¬ nika na ketony i niezmieniony material wyjsciowy odzyskuje sie z powrotem. Schering Aktiengesellschaft Zastepca: M. Skrzypkowski rzecznik patentowy Staatsdruckerei Warschau — Nr. 7423-42. PL