PL235994B1 - Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek - Google Patents
Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek Download PDFInfo
- Publication number
- PL235994B1 PL235994B1 PL427797A PL42779718A PL235994B1 PL 235994 B1 PL235994 B1 PL 235994B1 PL 427797 A PL427797 A PL 427797A PL 42779718 A PL42779718 A PL 42779718A PL 235994 B1 PL235994 B1 PL 235994B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- solution
- weight
- ophthalmic
- aureus
- suspension
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 201000007032 bacterial conjunctivitis Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 17
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 claims abstract description 17
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 claims abstract description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 12
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims abstract description 11
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims abstract description 11
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 239000002997 ophthalmic solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229940054534 ophthalmic solution Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims abstract description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229960001927 cetylpyridinium chloride Drugs 0.000 claims description 2
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 claims 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 abstract description 5
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 3
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 2
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest sposób otrzymywania kompozycji w postaci kropli okulistycznych do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek wywołanego szczepami St. aureus odpowiedzialnymi za występowanie choroby u psów i kotów polega na tym, że z bakteriofagów swoistych dla szczepów St. aureus otrzymuje się zawiesinę, którą następnie zagęszcza się i zawiesza się w roztworze przygotowanym do kropli okulistycznych metodą kolejnych rozcieńczeń do uzyskania rozcieńczenia wynoszącego od 10-8 do 10-10 PFU/mL. Roztwór do kropli okulistycznych ma skład: 0,004% - 0,05% wagowych środka konserwującego z grupy czwartorzędowych związków amoniowych, 0,01% - 0,09% wagowych soli sodowej EDTA, środek do wyregulowania pH do wartości 6,8 - 7,2, od 0,8% - 1,1% wagowych jonowy środek regulujący toniczność roztworu w postaci chlorku sodu oraz woda do 100,0% objętościowych, przy ciśnieniu osmotycznym 286 mOsm/kg. Otrzymaną zawiesinę rozcieńcza się w roztworze okulistycznym o powyższym składzie i parametrach, stosując rozcieńczenie 1:5.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania preparatu w postaci kropli okulistycznych do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek wywołanego szczepami St. aureus odpowiedzialnymi za występowanie choroby u psów i kotów.
St. aureus są bakteriami często wywołującymi zapalenia spojówek u psów i kotów. Flurochinolony, erytromycyna i chloramfenikol są najczęściej stosowanymi antybiotykami w terapii bakteryjnego zapalenia spojówek u psów i kotów. Natomiast infekcje wywoływane pałeczkami gram-ujemnymi dodatkowo zwalcza się antybiotykami z grupy aminoglikozydów. Należy podkreślić, że szczególnie przewlekłe zapalenia są trudne w leczeniu i cechują się nawrotami spowodowanymi przez bakterie oporne na większość antybiotyków.
Z publikacji europejskiego opisu patentowego EP2197284 (B1) znany jest sposób oraz kompozycja do dezynfekcji zawierająca nośnik i dwa lub więcej fagi, o składzie w proporcjach co najmniej fagi (PFU/mL):bakterie (cfu) 5:1. Wykorzystuje się fagi P68 lub jego mutanty. Nośnikami są lanolina lub parafina. Kompozycja może mieć postać płynu, balsamu, maści, pasty, żelu, albo pianki i może być stosowana na skórę ssaków. Kompozycja przewiduje ponadto stosowanie fagów będących patogenami w odniesieniu do bakterii wybranych spośród Staphylococcus, Helicobacter, Klebsiella, Listeria, Mycobacterium, Escherichia, Meningococcus, Campylobacter, Streptococcus, Enterococcus, Shigella, Pseudomonas, Burkholderia, Clostridium, Legionella, Acetinobacter lub Salmonella.
Celem wynalazku jest opracowanie sposobu uzyskiwania preparatu w postaci kropli okulistycznych dla psów i kotów.
Istota sposobu otrzymywania preparatu w postaci kropli okulistycznych do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek wywołanego szczepami St. aureus odpowiedzialnymi za występowanie choroby u psów i kotów polega na tym, że z bakteriofagów swoistych dla szczepów St. aureus otrzymuje się zawiesinę, którą następnie zagęszcza się i zawiesza się w roztworze przygotowanym do kropli okulistycznych metodą kolejnych rozcieńczeń do uzyskania rozcieńczenia wynoszącego od 10-8 do 10-10 PFU/mL, przy czym roztwór do kropli okulistycznych ma skład: 0,004%-0,05% wagowych środka konserwującego z grupy czwartorzędowych związków amoniowych, 0,01%-0,09% wagowych soli sodowej EDTA, środek do wyregulowania pH do wartości 6,8-7,2, 0,8%-1,1% wagowych jonowy środek regulujący toniczność roztworu w postaci chlorku sodu oraz woda do 100,0% objętościowych, przy ciśnieniu osmotycznym 286 mOsm/kg, po czym otrzymaną zawiesinę rozcieńcza się w roztworze okulistycznym o powyższym składzie i parametrach, stosując rozcieńczenie 1:5.
Korzystnie, jako środek konserwujący stosuje się chlorek benzakoniowy albo chlorek cetylpirydyniowy.
Substancją czynną kompozycji są zawieszone w roztworze okulistycznym bakteriofagi wykazujące właściwości lityczne w stosunku do patogennych szczepów S. aureus wyizolowane od psów i kotów z zapaleniem spojówek wywołanym tymi szczepami.
Kompozycję można aplikować psom i kotom bezpośrednio do worka spojówkowego w postaci kropli okulistycznych przez co najmniej 14 kolejnych dni od pierwszego podania. Kompozycja może również znaleźć zastosowanie w celowanych terapiach zastępczych samodzielnie lub jako lek wspomagający w leczeniu antybiotykami. Opracowana kompozycja w postaci kropli okulistycznych umożliwia ich wielokrotne stosowanie bez obniżenia miana litycznego bakteriofagów przez okres nawet do 21 dni, ze względu na przygotowanie opakowania wielokrotnego zastosowania (5 lub 10 mL).
Na podstawie rezultatów uzyskanych w badaniach in vitro potwierdzono szerokie spektrum aktywności przeciwbakteryjnej opracowanej kompozycji fagowej w stosunku do bakterii z rodzaju Staphylococcus izolowanych od psów i kotów z objawami bakteryjnego zapalenia spojówek. Przygotowany preparat zachowywał swoje właściwości antybakteryjne przez okres minimum 3 tygodni od rozpakowania hermetycznie zapakowanego pojemnika przechowywanego w temp. 8°C. Co więcej, w badanym okresie nie ulegał również zanieczyszczeniom wtórnym zarówno bakteryjnym jak też grzybiczym.
Przedmiot wynalazku został szczegółowo opisany poniżej w przykładzie wykonania.
Załączony rysunek przedstawia efekt antybakteryjny (lityczny) przykładowych fagów badanych w warunkach in vitro zawieszonych w roztworze kropli do oczu.
PL 235 994 B1
Przygotowanie zawiesiny bakteriofagów
Materiałem wyjściowym do produkcji są bakteriofagi swoiste dla szczepów St. aureus wyizolowane od psów i kotów, można również wykorzystać fagi swoiste dla referencyjnego szczepu St. Aureus ATCC.
Z uwagi na fakt, że bakteriofagi nie posiadają bariery gatunkowej, wyizolowane z bakterii wywołujących schorzenia u ludzi mogą z powodzeniem być wykorzystywane u zwierząt. Podobnie fagi izolowane na szczepach pozyskiwanych od zwierząt mogą być stosowane w zwalczaniu infekcji u ludzi.
Uzyskane szczepy wzorcowe fagów namnaża się na odpowiednim dla danego faga szczepie bakteryjnym będącym jego gospodarzem. Technika izolacji prowadzona jest zgodnie z procedurą zaproponowaną przez Han i wsp. (2013). Po 24 godz. inkubacji w 37°C uzyskane bakteriofagi zbierane są z agaru miękkiego z obszaru, w którym wystąpiła liza bakterii - brak wzrostu tzw. łysinki, a następnie przenoszone do 2 ml płynnego podłoża TSB. Całość zawiesza się w bulionie TSB, z dodatkiem 250 μΙ 1M CaCl2, 250μΙ 1M MgSO4 oraz 250μΙ 3-godz. hodowli szczepu St. aureus i inkubuje w wytrząsarce przez 18 godz. w temp. 37°C przy obrotach 120 rpm. Następnie, po odwirowaniu w wirówce 12 000 x g/30 min do uzyskanego supernatantu dodaje się chloroform do końcowego stężenia 2% v/v. Zawiesinę po worteksowaniu przez 5 min i odwirowaniu (5000 x g/10 min/20°C) oraz przefiltrowaniu przechowuje się w temp. 4°C do dalszych analiz.
W kolejnym etapie badań określa się miano lityczne uzyskanych bakteriofagów metodą płytek dwuwarstwowych na agarze TSA oraz zakres aktywności litycznej w stosunku do badanych patogenów, a także oznacza tolerancję pH dla badanych fagów metodą oceny przeżywalności oraz stabilności miana litycznego wg Niu i wsp. (2012). Analizę morfologiczną uzyskanych bakteriofagów wykonuje się metodą mikroskopii elektronowej z wykorzystaniem preparatów barwionych negatywowo 2% octanem uranylu (Xie i wsp. 2005).
Zagęszczanie lizatu bakteriofagowego prowadzi się metodą precypitacji glikolem polietylenowym w roztworze PEG 8000 wg Chibani-Chennoufi i wsp. (2004). W tym celu do probówek zawierających zawiesinę bakteriofagów po dodaniu po 6,5 ml 20% buforu PEG 8000NaCl, wymieszaniu na worteksie, inkubacji w temp. 4°C przez 24 godz. oraz odwirowaniu 8500 x g/10 min/4°C, uzyskany osad zawiesza się w określonej objętości buforu TE. Następnie, po odwirowaniu 11 000 x g/10 min/4°C, do zawiesiny dodaje się 120 μl 20% PEG 8000NaCl i prowadzi inkubację w temp. 4°C przez 1,5 godz. Następnie, po odwirowaniu 13 000 x g/10 min/4°C i usunięciu supernatantu do osadu ponownie dodaje się bufor TE. Otrzymaną zawiesinę ekstrahuje się równą ilością chloroformu w stosunku 1:1, a następnie miesza na worteksie przez 30 sek. w celu usunięcia resztek glikolu polietylenowego. Uzyskaną zagęszczoną zawiesinę bakteriofagów po odwirowaniu 4500 x g/7 min/4°C i zebraniu fazy wodnej, po uprzednim oznaczeniu miana litycznego, wykorzystuje się jako składnik kropli okulistycznych. Taką zawiesinę można przechowywać w temp. - 80°C przez 9 mies. lub w temp. 4°C przez 8 tyg.
Przygotowanie roztworu do kropli okulistycznych
Przygotowano roztwór o składzie:
- chlorek sodu 0,9% wagowych, do regulacji toniczności,
- chlorek benzalkoniowy 0,01% wagowych, jako środek konserwujący,
- sól sodowa EDTA 0,05% wagowych, jako środek chelatujący,
- wodorotlenek sodu do wyregulowania pH do wartości 7,07,
- woda do wstrzykiwań do 100,0% objętościowych. pH 7,07; ciśnienie osmotyczne 286 mOsm/kg.
Oznaczanie miana bakteriofagów swoistych dla St. aureus
Miano bakteriofagów określono metodą kropelkową w seryjnych rozcieńczeniach lizatu fagowego zawieszonego ww. roztworze przygotowanym do kropli okulistycznych. Do probówki typu Eppendorf zawierającej 90 μl roztworu okulistycznego po dodaniu 10 μl lizatu fagowego, worteksowaniu, następnie 10 μl zawiesiny przenoszono do kolejnych probówek zawierających 90 μl buforu. Proces powtarzano do momentu uzyskania rozcieńczenia wynoszącego 10-10 PFU/mL. Na płytkę z podłożem TSA z uprzednio wylanym agarem górnym zawierającym bakterie St. aureus po naniesieniu po 2,5 μl każdego z rozcieńczeń fagów, płytki inkubowano w termostacie przez 18 godz. w 37°C. Następnego dnia liczono powstałe łysinki, a miano, czyli gęstość fagów określono dla 1 ml zawiesiny fagowej, na podstawie poniższego wzoru.
PL 235 994 B1
Wzór do obliczenia miana fagów
X = a x b x 10 gdzie X - miano faga PFU/ml a - średnia liczba łysinek b - odwrotność rozcieńczenia
- przeliczenie na 1 ml wyjściowej zawiesiny
Wykonanie kropli do oczu
Skład %
Zawiesina bakteriofagów o mianie litycznym 10-10 PFU/mL 20,0% v,
Chlorek sodu 0,9% w,
Sól sodowa EDTA 0,05% w,
Chlorek benzalkoniowy 0,01% w,
Wodorotlenek sodu do pH 7,07
Woda do wstrzykiwań do 100,0% v
Ciśnienie osmotyczne 286,0 mOsm/kg
Postać farmaceutyczna: krople
W celu przygotowania kompozycji w postaci kropli do oczu rozpuszczono chlorek sodu w ilości 0,9 części wagowych, chlorek benzalkoniowy w ilości 0,01 % wagowych oraz sól sodową EDTA w ilości 0,05% wagowych w wodzie do wstrzykiwań w ilości około 79,0 części objętościowych. Roztwór doprowadzono do pH=7,07 za pomocą wodorotlenku sodu. Następnie dodano wodny roztwór z fagami w ilości - 20,0% objętościowych i uzupełniono do 100,0% objętościowych wodą do wstrzykiwań. Następnie sączono przez sączek membranowy o wielkości porów 0,22 μm wprost do jałowej butelki. Roztwór mieszano i rozfazowano w warunkach aseptycznych w opakowania jednostkowe z ciemnego szkła z zakraplaczem.
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób otrzymywania preparatu w postaci kropli okulistycznych do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek wywołanego szczepami St. aureus odpowiedzialnymi za występowanie choroby u psów i kotów, znamienny tym, że z bakteriofagów swoistych dla szczepów St. aureus otrzymuje się zawiesinę, którą następnie zagęszcza się i zawiesza się w roztworze przygotowanym do kropli okulistycznych metodą kolejnych rozcieńczeń do uzyskania rozcieńczenia wynoszącego od 10-8 do 10-10 PFU/mL, przy czym roztwór do kropli okulistycznych ma skład: 0,004%-0,05% wagowych środka konserwującego z grupy czwartorzędowych związków amoniowych, 0,01%-0,09% wagowych soli sodowej EDTA, środek do wyregulowania pH do wartości 6,8-7,2, od 0,8%-1,1% wagowych jonowy środek regulujący toniczność roztworu w postaci chlorku sodu oraz woda do 100,0% objętościowych, przy ciśnieniu osmotycznym 286 mOsm/kg, po czym otrzymaną zawiesinę rozcieńcza się w roztworze okulistycznym o powyższym składzie i parametrach, stosując rozcieńczenie 1:5.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako środek konserwujący stosuje się chlorek benzakoniowy albo chlorek cetylpirydyniowy.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL427797A PL235994B1 (pl) | 2018-11-16 | 2018-11-16 | Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL427797A PL235994B1 (pl) | 2018-11-16 | 2018-11-16 | Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL427797A1 PL427797A1 (pl) | 2020-05-18 |
| PL235994B1 true PL235994B1 (pl) | 2020-11-16 |
Family
ID=70725722
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL427797A PL235994B1 (pl) | 2018-11-16 | 2018-11-16 | Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL235994B1 (pl) |
-
2018
- 2018-11-16 PL PL427797A patent/PL235994B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL427797A1 (pl) | 2020-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| LeBel et al. | Antimicrobial activity of nisin against the swine pathogen Streptococcus suis and its synergistic interaction with antibiotics | |
| US9635862B2 (en) | Method of producing partially purified extracellular metabolite products from bacillus coagulans and biological applications thereof | |
| AU2010212270B2 (en) | Disinfectant composition comprising phage | |
| CN109689861A (zh) | 用于治疗痤疮的组合物和方法 | |
| CN116870118A (zh) | 一种杂化膜囊泡及其制备方法和抗菌应用 | |
| CN108348453B (zh) | 包含莫匹罗星及新霉素的抗微生物组合物 | |
| Bekale et al. | Eradication of bacterial persister cells by leveraging their low metabolic activity using adenosine triphosphate coated gold nanoclusters | |
| Boddie et al. | Evaluation of postmilking teat germicides containing Lauricidin®, saturated fatty acids, and lactic acid | |
| EP2234497A2 (de) | Bakteriophagenpräparation und verwendung | |
| Urban-Chmiel et al. | The in vitro efficacy of eye drops containing a bacteriophage solution specific for Staphylococcus spp. isolated from dogs with bacterial conjunctivitis | |
| US10675301B2 (en) | Chitosan oligomer and zinc oxide nanoparticle compositions for treating drug resistant bacteria and biofilm | |
| PL235994B1 (pl) | Sposób otrzymywania preparatu do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek | |
| US11452757B2 (en) | Antibacterial composition effective in treating gram negative bacterial infections and method for preparing the same | |
| PL235995B1 (pl) | Sposób otrzymywania kompozycji do leczenia bakteryjnego zapalenia spojówek | |
| US20030235560A1 (en) | Mastitis prevention | |
| RU2672869C1 (ru) | Антибактериальное средство на основе бактериофага | |
| Alvarez‐Gonzalez et al. | Bioprocessing of bacteriophages via rapid drying onto microcrystals | |
| AU2022261987B2 (en) | Compositions and methods for treatment of conditions using fractionated honey | |
| KR20230038491A (ko) | 파지의 상승적 조성물 및 이의 형성 방법 | |
| ElMokadem et al. | Inhibitory effects of pomegranate peel extract against staphylococcus aureus causing animals mastitis in Sohag Governorate | |
| PL240083B1 (pl) | Sposób otrzymywania kompozycji w postaci zawiesiny do leczenia syndromu oddechowego z udziałem Mannheimia haemolytica u bydła | |
| Mahenthiran et al. | Potential for neutralizing chicken egg yolk (IgY) generated against mastitis bovine, caused by Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae | |
| RU2831173C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka1 для лечения и/или профилактики инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa | |
| US20150224177A1 (en) | Methods for therapeutic or prophylactic treatment of melioidosis and/or associated diseases | |
| US10576100B2 (en) | Chitosan zinc oxide nanoparticle formulation for treating drug resistant bacteria |