PL223376B1 - Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina - Google Patents
Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeinaInfo
- Publication number
- PL223376B1 PL223376B1 PL407937A PL40793714A PL223376B1 PL 223376 B1 PL223376 B1 PL 223376B1 PL 407937 A PL407937 A PL 407937A PL 40793714 A PL40793714 A PL 40793714A PL 223376 B1 PL223376 B1 PL 223376B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- genistein
- caffeine
- formula
- cocrystal
- crystal
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest kokryształ genisteina-kofeina, charakteryzujący się zwiększoną rozpuszczalnością w stosunku do genisteiny znajdujący zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym lub kosmetycznym.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina metodą roztworową oraz zawiesinową.
Genisteina (4',5,7-trihydroksyizoflawon, wzór 1) jest głównym izoflawonem obecnym w soi (ok. 3 mg/g), co opisano w publikacji Dixon, R. A. & Ferreira, D. (2002). Phytochemistry 60, 205.
Ponadto, zgodnie z publikacją Brandi, M. L. (1997). Calcif. Tissue Int. 61, S5, genisteina wykazuje aktywność estrogenową.
Z publikacji Han, R. M., Tian, Y. X., Liu, Y., Chen, C. H., Ai, X. C., Zhang, J. P. & Skibsted, L. H. (2009). J. Agric. Food. Chem. 57, 3780; Borras, C., Gambini, J., López-Grueso, R., Pallardó, F. V. & Vina, J. (2010). Biochim. Biophys. Acta. 1802, 205; Rusin, A., Krawczyk, Z., Grynkiewicz, G., Gogler, A., Zawisza-Puchałka, J. & Szeja, W. (2010). Acta Biochim. Pol. 57, 23; Park, C. E., Yun, H., Lee, E., Min, B., Bae, H., Choe, W., Kang, F, Kim, S. & Ha, J. (2010). J. Med. Food. 13, 815; Zhang, Y., Chen, W. F., Lai, W. P. & Wong, M. S. (2008). Inflammopharmacology 16, 213 wiadomo, że genisteina posiada właściwości przeciwzapalne i przeciwutleniające.
Z publikacji Radzikowski, Cz., Wietrzyk, J., Grynkiewicz, G. & Opolski, A. (2004). Postępy Hig. Med. Dośw. 58, 128; Nakagawa, H., Yamamoto, D., Kiyozuka, Y., Tsuta, K., Uemura, Y., Hioki, K., Tsutsui, Y. & Tsubura, A. (2000). J. Cancer. Res. Clin. Oncol. 126, 448; Polkowski, K. & Mazurek, A. P. (2000). Acta Pol. Pharm. 57, 135; Setchell, K. D. & Cassidy, A. (1999). J. Nutr. 129, 758S wiadomo, że genisteina wykazuje potencjalne wielokierunkowe zastosowanie w leczeniu i prewencji chorób nowotworowych.
W publikacji Rostagno, M. A., Manchon, N., D'Arrigo, M., Guillamon, E., Yillares, A. GarciaLafuente, A., et al. (2011). Anal. Chim. Acta, 685, 204 opisano, że kofeina (1,3,7-trimetyloksantyna, wzór 2) jest naturalnym alkaloidem roślinnym, występującym m.in. w kawie, herbacie i nasionach k akaowca (i produktach z nich wytwarzanych, jak czekolada). Jako związek biologicznie czynny, znana jest ze stymulacji ośrodkowego układu nerwowego oraz przyspieszania metabolizmu. Kofeina jest związkiem farmaceutycznie akceptowalnym i może być stosowana jako składnik preparatów farmaceutycznych i suplementów diety.
Kokrystalizacja od kilku lat jest jedną z obiecujących metod modyfikowania niekorzystnych parametrów fizykochemicznych substancji farmaceutycznie czynnych.
W roku 2011 opublikowano pierwszą pracę dotyczącą kokrystalizacji flawonoidów w aspekcie farmaceutycznym.
Otrzymany kokryształ kwercetyny i kofeiny charakteryzuje się 14-krotnie zwiększoną rozpuszczalnością i 10-krotnie zwiększoną biodostępnością w porównaniu z kwercetyną (Smith, A. J., Kavuru, P., Wojtas, Ł., Zaworotko, M. J. & Shytle, R. D. (2011). Mol. Pharm. 8, 1867)
Termin kokryształ nie posiada jednoznacznej definicji i jest przedmiotem rozległej debaty - publikacja Aitipamula, S., etal. (2012). Cryst. Growth Des. 12, 2147.
Jedna z definicji zakłada, że kokryształ jest strukturalnie homogenicznym ciałem stałym, zawierającym dwa (lub więcej) składników w określonej stechiometrii, które pozostają w obojętnej elektrycznie formie, a w warunkach pokojowych są ciałami stałymi.
Głównym składnikiem kokryształu farmaceutycznego jest substancja farmaceutycznie czynna (ang. API), pozostałe zwane są koformerami.
Niewystarczająca biodostępność genisteiny stoi na przeszkodzie ku opracowywaniu skutecznych leków, preparatów farmaceutycznych oraz suplementów diety i jest związana z niewielką rozpuszczalnością w środowiskach wodnych, co opisano w publikacji Wu, J. G. etal. (2010). J. Chem. Eng. Data, 55, 5287.
Próby modyfikacji rozpuszczalności genisteiny podejmowane były poprzez kompleksowanie β-cyklodekstrynami, co opisano w kolejnej publikacji Daruhazi, A. E. etal. (2008). J. Pharm. Biomed. Anal. 48, 636.
W publikacji Smith, A. J., Kavuru, P., Wojtas, Ł., Zaworotko, M. J. & Shytle, R. D. (2011). Mol. Pharm. 8, 1867 opisano kokryształy farmaceutyczne kwercetyny.
W publikacji Kavuru, P. (2008). MSc Thesis, University of South Florida, USA opisano kokryształy farmaceutyczne hesperytyny.
PL 223 376 B1
W publikacji Sowa, M., Ślepokura, K. & Matczak-Jon, E. (2012). Ada Cryst. C68, o262 opisano kokryształ farmaceutyczny bajkaleiny.
Kokryształy flawonoidów fizetyny, genisteiny oraz luteoliny z nikotynamidem i izonikotynamidem zostały ujawnione w publikacjach Sowa, M., Ślepokura, K. & Matczak-Jon, E. (2013). CrystEngComm 15, 7696 oraz Sowa, M., Ślepokura, K. & Matczak-Jon, E. (2013). Ada Cryst. C69, 1267.
Kokryształ flawonoidu mirycetyny i piracetamu opisano w publikacji Sowa, M., Ślepokura, K. & Matczak-Jon, E. (2014),.J. Mol. Strud. 1058, 114.
W amerykańskim zgłoszeniu patentowym nr US 2010 0 204 204 opisano kokryształy flawonoidów.
Istotą wynalazku jest kokryształ genisteina-kofeina o wzorze 3.
Wynalazek dotyczy również sposobu otrzymania kokryształu genisteina-kofeina o wzorze 3, który polega na tym, że genisteinę o wzorze 1 w ilości 25.0 mg do 50.0 mg oraz kofeinę o wzorze 2 w ilości od 18.1 mg do 36.2 mg w stosunku stechiometrycznym 1:1 rozpuszcza się w od 5 do 10 ml metanolu, etanolu, izopropanolu, 2-metoksyetanolu lub 1-metoksy-2-propanolu, po czym całość miesza się, przesącza, a następnie pozostawia się do powolnego odparowania w temperaturze pokojowej, natomiast po 4 do 24 dniach zbiera się kryształy.
W odmianie sposobu otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina o wzorze 3, genisteinę o wzorze 1 i kofeinę o wzorze 2 w ilości stechiometrycznej 1:1 zawiesza się w octanie etylu lub acetonitrylu w ilości 2 ml na każde 50 mg genisteiny, całość miesza przez 24 h w temperaturze pokojowej, po czym otrzymany materiał mikrokrystaliczny przesącza się i suszy w temperaturze pokojowej przez okres 12 do 24 godzin, a następnie poddaje analizie na dyfraktometrze proszkowym lub spektrometrze FT-Raman.
Przedmiot wynalazku został bliżej przedstawiony w przykładach jego wykonania, na schemacie reakcji oraz na rysunkach, gdzie:
Rys. 1 przedstawia część niezależną komórki elementarnej kokryształu genisteina-kofeina, wraz z numeracją atomów i wiązaniami wodorowymi (szare przerywane linie). Wiązania H-C atomów wodoru udokładnionych w dwóch alternatywnych pozycjach przy grupach metylowych C3A i C74 kofeiny zaznaczono czarnymi przerywanymi liniami.
Rys. 2 przedstawia upakowanie cząsteczek w sieci krystalicznej, ukazujące tworzenie warstwy molekularnej przez wiązania wodorowe (szare przerywane linie).
Rys. 3 przedstawia porównanie dyfraktogramu teoretycznego kokryształu genisteina-kofeina (GenCaf calc) z eksperymentalnymi dyfraktogramami kokryształu genisteina-kofeina otrzymanego przez powolne odparowanie roztworu metanolowego (GenCaf SE MeOH) oraz na drodze metody zawiesinowej z zastosowaniem octanu etylu (GenCaf SLR EtOAc). Różnice w wartościach kąta 2Θ wynikają z kontrakcji kryształu, zachodzącej podczas jego chłodzenia w trakcie pomiaru dyfrakcji pr omieniowania rentgenowskiego.
Rys. 4 przedstawia porównanie widm FT-Raman kokryształu genisteina-kofeina otrzymanego:
a) przez powolne odparowanie roztworu metanolowego (GenCaf SE MeOH),
b) przez powolne odparowanie roztworu etanolowego (GenCaf SE EtOH),
c) przez powolne odparowanie roztworu izopropanolowego (GenCaf SE iPrOH),
d) przez powolne odparowanie roztworu 2-metoksyetanolowego (GenCaf SE 2-OMe-EtOH),
e) przez powolne odparowanie roztworu 1-metoksy-2-propanolowego (GenCaf, SE, 1-OMe-2-prOH),
f) wykorzystując metodę zawiesinową z zastosowaniem acetonitrylu (GenCaf SLR MeCN),
g) wykorzystując metodę zawiesinową z zastosowaniem octanu etylu (GenCaf SLR EtOAc).
Rys. 5 przedstawia widmo FT-IR kokryształu genisteina-kofeina.
Rys. 6 przedstawia krzywą TG-DTA kokryształu genisteina-kofeina.
Rys. 7 przedstawia krzywe rozpuszczalności genisteiny oraz kokryształu genisteina-kofeina, w mieszaninie etanol-woda 50:50 (v/v), w okresie pierwszych 2h (a) oraz w okresie 24h (b).
Rys. 8 przedstawia zdjęcie kryształu genisteina-kofeina widzianego pod mikroskopem stereoskopowym z przystawką polaryzacyjną.
P r z y k ł a d 1
Genisteinę (25,0 mg, 0,093 mmol) oraz kofeinę (18,1 mg, 0,093 mmol) rozpuszczono w 5 ml metanolu za pomocą mieszania. Roztwór przesączono do zlewki, którą szczelnie zaklejono parafilmem i wykonano kilka niewielkich otworów umożliwiających powolne parowanie roztworu. Zlewkę pozostawiono w temperaturze pokojowej, a po 4 dniach zebrano jasnożółte kryształy na dnie zlewki.
PL 223 376 B1
Spośród otrzymanych kryształów wybrano monokryształ do analizy rentgenostrukturalnej oraz dyfra kcji proszkowej.
P r z y k ł a d 2
Genisteinę (50,0 mg, 0,186 mmol) oraz kofeinę (36,2 mg, 0,18 mmol) rozpuszczono w 10 ml 2-metoksyetanolu za pomocą mieszania. Roztwór przesączono do zlewki, którą szczelnie zaklejono parafilmem i wykonano kilka niewielkich otworów umożliwiających powolne parowanie roztworu. Zle wkę pozostawiono w temperaturze pokojowej, a po 24 dniach zebrano jasnożółte kryształy na dnie zlewki.
P r z y k ł a d 3
Genisteinę (100,0 mg, 0,370 mmol) oraz kofeinę (71,9 mg, 0,370 mmol) umieszczono w zlewce i dodano 4 ml octanu etylu. Otrzymaną zawiesinę mieszano z wykorzystaniem mieszadła magnetycznego, w temperaturze pokojowej, przez okres 24 godzin. Otrzymany materiał odsączono i wysuszono w warunkach pokojowych przez okres 12 godzin, a następnie poddano analizie na dyfraktometrze proszkowym i spektrometrze Ramana. Porównanie otrzymanego dyfraktogramu z dyfraktogramem kokryształu otrzymanego metodą roztworową pozwala na potwierdzenie tożsamości oraz stwierdzenie 100% konwersji (rys. 3). Porównanie widma FT-Raman uzyskanego materiału z widmem kokryształu otrzymanego metodą roztworową również pozwala na potwierdzenie struktury (rys. 4).
P r z y k ł a d 4
Analizę rentgenograficzną wykonano w temperaturze -173°C, na czterokołowym dyfraktometrze Xcalibur R o geometrii kappa, z kamerą CCD, wykorzystując promieniowanie Mo-κα (δ = 0,71073 A). Rejestrację, redukcję i analizę danych wykonano z wykorzystaniem programów CRYSALISCCD i CRYSALISRED. Strukturę rozwiązano metodami bezpośrednimi wykorzystując program SHELXS2013 i udokładniono z wykorzystaniem programu SHELXL-2013.
P r z y k ł a d 5
Dyfraktogramy proszkowe wykonano w temperaturze pokojowej, na aparacie Bruker D8 Advance wykorzystując promieniowanie Cu-κα (δ = 1,5418 A, generowane przy 30 kV i 40 mA) oraz detektor VANTEC-1. Każdą próbkę analizowano pomiędzy kątami 20 3° a 40°, z krokiem 0,01608° i łącznym czasem pomiaru 40 minut.
P r z y k ł a d 6
Widmo Ramana wykonano z wykorzystaniem fourierowskiego spektrometru ramanowskiego (FT-Raman, Bruker Multi-Ram) ze wzbudzeniem laserem Nd:YAG (1064 nm) i detektorem germanowym. Próbkę skanowano w zakresie 50-3600 cm-1, z rozdzielczością 2 cm-1.
P r z y k ł a d 7
Widmo IR wykonano z wykorzystaniem próżniowego, fourierowskiego spektrometru podczerwieni (FT-IR, Bruker Vertex 70v) działającego w technice osłabionego całkowitego odbicia, przy wyk orzystaniu jednoodbiciowej przystawki ATR z kryształem diamentowym. Próbkę skanowano w zakresie 4000-400 cm- , z rozdzielczością 2 cm- .
P r z y k ł a d 8
Analizę termograwimetryczną wykonano w atmosferze azotu, na aparacie Setaram SETSYS 16/18, z prędkością ogrzewania 5°C/min i w zakresie 20-400°C.
P r z y k ł a d 9
Rozpuszczalność genisteiny oraz kokryształu genisteina-kofeina zbadano w mieszaninie etanol-woda 50:50 (v/v), wykorzystując technikę spektroskopii UV/Vis. Fazy stałe przesiano aby otrzymać frakcje o rozmiarze ziaren pomiędzy 50 a 90 pm.
Rozpuszczalność określono zawieszając ok. 500 mg fazy stałej (genisteiny lub kokryształu genisteina-kofeina) w 50 mL mieszaniny etanol-woda, następnie mieszając zawiesinę za pomocą mieszadła magnetycznego, w termostatowanym (27°C) naczyniu.
Próbki zawiesiny pobierane były w określonych interwałach czasowych (5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 240, 480 i 1440 min), przepuszczane przez nylonowy filtr o średnicy porów 0,45 pm i natychmiast rozcieńczane.
Stężenie genisteiny wyznaczono na podstawie uprzednio określonej zależności absorbancji od stężenia. Absorbancję mierzono przy długości fali 324 nm warunkującej brak interferencji ze strony koformera. Widma UV/Vis zarejestrowano wykorzystując dwuwiązkowy aparat Hitachi U-2900.
Kokryształ genisteina-kofeina krystalizuje w grupie przestrzennej P21/c krystalograficznego układu jednoskośnego. Wybrane dane krystalograficzne znajdują się w tabeli 1.
PL 223 376 B1
T a b e l a 1
Wybrane dane krystalograficzne kokryształu genisteina-kofeina
| C15H10O5 · C8H10N4O2 | β = 108,64 (3)° | R[F2 > 2σ (F2)] = 0,074 |
| Mr = 464,43 | T = 100 K | wR(F2) = 0,164 |
| Układ jednoskośny, P21/C | Z = 4 | GoF = S = 1,11 |
| a = 8,455 (3) A | V= 1984,9 (12) A3 | Refleksów zmierzonych = 23160 |
| b = 18,668 (6) A | Rint = 0,072 | Refleksów niezależnych = 4647 |
| c= 13,272 (4) A | Refleksów obserwowanych = 3309 |
Część niezależna komórki elementarnej kokryształu genisteina-kofeina (rys. 1) zawiera jedną cząsteczkę genisteiny oraz jedną cząsteczkę kofeiny, w formach obojętnych elektrycznie. Analiza upakowania w sieci krystalicznej pokazuje tworzenie warstw molekularnych na drodze wiązań wodorowych zilustrowanych na rys. 2.
Otrzymane dyfraktogramy proszkowe oraz widma FT-Raman i FT-IR (rys. 3, 4, 5) są charakterystyczne dla kokryształu genisteina-kofeina i pozwalają na jego jednoznaczną identyfikację.
Analiza termograwimetryczna (rys. 6) wskazuje na stabilność kokryształu genisteina-kofeina do temperatury ok. 247 °C, w której następuje przemiana endotermiczna, skutkująca jego rozkładem. Brak utraty masy do momentu rozkładu potwierdza niesolwatowany charakter kokryształu oraz cz ystość próbki.
Porównanie krzywych rozpuszczalności genisteiny (Gen) oraz kokryształu genisteina-kofeina (GenCaf) (rys. 7) wskazuje na zwiększenie maksymalnej rozpuszczalności genisteiny z 0,549 mg/mL (genisteina) do 0,749 mg/mL (kokryształ genisteina-kofeina). Ponadto, krzywe rozpuszczalności wskazują na wyrównanie rozpuszczalności obu form po maksymalnym czasie eksperymentu (24 h, 1440 min), będąc zachowaniem typowym dla kokryształów (tzw. efekt „wybicia i spadochronu”), co opisano w publikacji Babu, N. J. & Nangia, A., (2011). Cryst. Growth Des. 11,2662.
Claims (3)
- Zastrzeżenia patentowe1. Kokryształ genisteina-kofeina o wzorze 3.
- 2. Sposób otrzymania kokryształu genisteina-kofeina o wzorze 3, znamienny tym, że genisteinę o wzorze 1 w ilości 25,0 mg do 50,0 mg oraz kofeinę o wzorze 2 w ilości od 18,1 mg do 36,2 mg w stosunku stechiometrycznym 1:1 rozpuszcza się w od 5 do 10 ml metanolu, etanolu, izopropanolu, 2-metoksyetanolu lub 1-metoksy-2-propanolu, po czym całość miesza się, przesącza, a następnie pozostawia się do powolnego odparowania w temperaturze pokojowej, natomiast po 4 do 24 dniach zbiera się kryształy.
- 3. Sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina o wzorze 3, znamienny tym, że genisteinę o wzorze 1 i kofeinę o wzorze 2 w ilości stechiometrycznej 1:1 zawiesza się w octanie etylu lub acetonitrylu w ilości 2 ml na każde 50 mg genisteiny, całość miesza przez 24 h w temperaturze pok ojowej, po czym otrzymany materiał mikrokrystaliczny przesącza się i suszy w temperaturze pokojowej przez okres 12 do 24 godzin, a następnie poddaje analizie na dyfraktometrze proszkowym lub spektrometrze FT-Raman.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL407937A PL223376B1 (pl) | 2014-04-17 | 2014-04-17 | Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL407937A PL223376B1 (pl) | 2014-04-17 | 2014-04-17 | Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL407937A1 PL407937A1 (pl) | 2014-12-22 |
| PL223376B1 true PL223376B1 (pl) | 2016-10-31 |
Family
ID=52106938
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL407937A PL223376B1 (pl) | 2014-04-17 | 2014-04-17 | Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL223376B1 (pl) |
-
2014
- 2014-04-17 PL PL407937A patent/PL223376B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL407937A1 (pl) | 2014-12-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2531196B1 (en) | Pterostilbene cocrystals | |
| Sowa et al. | Improving solubility of fisetin by cocrystallization | |
| Chadha et al. | Cocrystals of telmisartan: characterization, structure elucidation, in vivo and toxicity studies | |
| Luo et al. | Pharmaceutical cocrystals of naringenin with improved dissolution performance | |
| JP6211072B2 (ja) | ダサチニブと、選択された共結晶形成剤とを含んでなる多成分結晶 | |
| Zhou et al. | Crystal structures, dissolution and pharmacokinetic study on a novel phosphodiesterase-4 inhibitor chlorbipram cocrystals | |
| WO2008153945A2 (en) | Nutraceutical co-crystal compositions | |
| ME01572B (me) | Polimorfni oblici 3-(4 -amin0-1-0ks0- 1, 3-dihidro-izoindol-2- il)-piperidin-2, 6-diona | |
| CA3048591A1 (en) | Polymorphs and solid forms of (s)-2-((2-((s)-4-(difluoromethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-d][1,4]oxazepin-9-yl)amino)propanamide, and methods of production | |
| US20220380308A1 (en) | Crystalline salts of psilocin | |
| Lv et al. | A 5-fluorouracil–kaempferol drug–drug cocrystal: a ternary phase diagram, characterization and property evaluation | |
| WO2014118808A2 (en) | Ticagrelor solid dispersion | |
| Mohite et al. | Synthesis of fisetin co-crystals with caffeine and nicotinamide using the cooling crystallization technique: biopharmaceutical studies | |
| MX2015004979A (es) | Forma amorfa de derivado de quinolina y metodo para su produccion. | |
| Jaywant et al. | Development of efavirenz cocrystals from stoichiometric solutions by spray drying technology | |
| Zhang et al. | A pharmaceutical cocrystal of apigenin with piperazine: Preparation, structural characterization, and dissolution performance | |
| US10004726B2 (en) | Polymorphs of cocrystals of P-coumaric acid:nicotinamide | |
| PL223376B1 (pl) | Kokryształ genisteina-kofeina oraz sposób otrzymywania kokryształu genisteina-kofeina | |
| Pai et al. | Fabrication and solid state characterization of ticagrelor co-crystals with improved solubility and dissolution | |
| Octavia et al. | Multicomponent Crystals of Piperine-Nicotinic Acid: The Physicochemical and Dissolution Rate Properties. | |
| JP2022525125A (ja) | ブレイアコニチンａのｅ結晶形及びその製造方法と応用 | |
| JP2020516685A (ja) | ＥＯＣ３１５ Ｍｏｄ．Ｉ結晶形化合物及びその製造方法 | |
| WO2020168155A1 (en) | L-pipecolic acid cocrystal of cannabidiol | |
| Sgarioni et al. | Supercritical fluid extraction of yerba mate: Decaffeination, purification, encapsulation, and controlled release | |
| CA3058252A1 (en) | Crystalline sodium salt of 5-methyl-(6s)-tetrahydrofolic acid |