PL223266B1 - Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę - Google Patents

Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę

Info

Publication number
PL223266B1
PL223266B1 PL398115A PL39811512A PL223266B1 PL 223266 B1 PL223266 B1 PL 223266B1 PL 398115 A PL398115 A PL 398115A PL 39811512 A PL39811512 A PL 39811512A PL 223266 B1 PL223266 B1 PL 223266B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
carnosine
anserine
mixture
enriching
solution
Prior art date
Application number
PL398115A
Other languages
English (en)
Other versions
PL398115A1 (pl
Inventor
Wiesław Kopeć
Remigiusz Zapolski
Dorota Chorążyk
Ewa Biazik
Anna Pudło
Teresa Skiba
Original Assignee
Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Przyrodniczy We Wrocławiu filed Critical Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority to PL398115A priority Critical patent/PL223266B1/pl
Publication of PL398115A1 publication Critical patent/PL398115A1/pl
Publication of PL223266B1 publication Critical patent/PL223266B1/pl

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Sposób wzbogacania mieszanin dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę przy użyciu chromatografii jonowymiennej polega na tym, że zmianę składu mieszaniny uzyskuje się w wyniku procesu adsorpcji przebiegającego w roztworach o pH od 6,0 do 8,0 i desorpcji (elucji) przy użyciu roztworu chlorku sodu o stężeniu od 0,3 M do 3,5 M na złożu wymieniacza jonowego słabo zasadowego anionitu. Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym i spożywczym, głównie do wytwarzania suplementów diety lub produktów typu żywności funkcjonalnej.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych anseryny (β-alanylo-L-l-metylohistydyny) lub karnozyny (β-alanylo-L-histydyny), przy użyciu chromatografii jonowymiennej.
Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym i spożywczym, głównie do wytwarzania suplementów diety lub produktów typu żywności funkcjonalnej.
Działanie fizjologiczne karnozyny i jej pochodnej - anseryny, jest wszechstronne i polega między innymi na utrzymaniu równowagi kwasowo-zasadowej w mięśniach zwierząt i ludzi (działanie buforujące).
Ponadto, dipeptydy zmniejszają toksyczność: jonów metali (działanie chelatujące), reaktywnych form tlenu (działanie antyoksydacyjne) i drobnocząsteczkowych aldehydów (działanie antyglikacyjne). (Guiotto A., Calderan A., Ruzza P., Borin G. 2005. Carnosine and carnosine-related antioxidants: a review. Current Medicinal Chemistry, Vol. 12, 2293-2315).
Dipeptydy różnią się szybkością rozpadu w tkankach ludzkich, głównie plazmie krwi. Anseryna rozkłada się wolniej, co może powodować jej dłuższe, korzystne działanie antyutleniające (Peters V., Jansen E. W., Jakobs C., Riedl E., Janssen B., Yard B. A., Wedel J., Hoffmann G. F., Zschocke J., Gotthardt D., Fischer C., Koppel H., 2011: Anserine inhibits carnosine degradation but in human serum carnosinase (CN1) is not correlated with histidine dipeptide concentration. Clinica Chimica Acta vol. 412, s. 263-267). Dlatego też istotna jest możliwość regulowania w preparatach stosunku ilościowego anseryny do karnozyny.
Znana jest metoda wydzielania aminokwasów zasadowych, która obejmuje rozdział roztworu obojętnego zawierającego szereg aminokwasów, z użyciem - jako wymieniacza - słabo kwaśnego kationitu, w celu zaadsorbowania aminokwasów zasadowych oraz ich elucję z kwasem hydrochlorowym (US Patent No. 2,549,378).
Znana jest także metoda izolacji i oczyszczania anseryny i karnozyny z, zawierającego zasadowe aminokwasy, koncentratu zupy rybnej bonito, która obejmuje adsorpcję anseryny i karnozyny na słabo kwaśnym kationowym wymieniaczu jonowym i ich elucję z amoniakiem (Japanese Published Examined Patent Application No. 93827/1994).
Znana jest również metoda oczyszczania i rozdziału neutralnych aminokwasów i oligopeptydów z nich zbudowanych, z użyciem słabych kwaśnych wymieniaczy jonowych oraz słabych zasadowych wymieniaczy jonowych (patent USA 0306340A1 /2009).
Istotą wynalazku jest sposób wzbogacania mieszanin dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę przy użyciu chromatografii jonowymiennej, który polega na tym, że zmianę składu mieszaniny uzyskuje się w wyniku procesu adsorpcji przebiegającego w roztworach o pH od 6,0 do 8,0 i desorpcji (elucji) przy użyciu roztworu chlorku sodu o stężeniu od 0,3 M do 3,5 M na złożu wymieni acza jonowego słabo zasadowego anionitu.
Korzystnie jest, gdy proces adsorpcji prowadzi się z roztworów o pH 7,0 a jako eluent stosuje się jest roztwór chlorku sodu o stężeniu 0,5 M.
Korzystnie też jest, gdy proces adsorpcji prowadzi się na złożu wymieniacza jonowego słabo zasadowego anionitu, którym jest IRA 70 RF.
Postępując zgodnie z wynalazkiem uzyskuje się wzbogacanie mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę.
Wynalazek jest bliżej wyjaśniony w przykładach wykonania:
P r z y k ł a d 1. Roztwór wodny (400 cm ) zawierający karnozynę i anserynę w stosunku 1:2,8 o pH 7,0 podaje się na kolumnę, wypełnioną wymieniaczem jonowym IRA 70 RF, z szybkością
0,6 dm /godz. i zbiera się frakcje po 10 cm . W otrzymanych frakcjach oznacza się zawartość karnozyny i anseryny metodą HPLC (detektor fluoroscencyjny). Po zebraniu frakcji, o objętości równej łącz3 nej ilości wprowadzonego roztworu na kolumnę, wprowadza się 0,5 M roztwór NaCl w ilości 400 cm 3 z szybkością 0,6 dm /godz. i ponownie zbiera się frakcje, które również poddaje się analizie na zawartość karnozyny i anseryny.
Stwierdzono, że stan równowagi (brak zmian składu roztworu przepływającego przez kolumnę) wystąpił po przepływie 50% objętości podanego na kolumnę roztworu, a w elucji warunki procesu ustabilizowały się również po dodaniu około 50% użytego eluentu.
W roztworze wypływającym z kolumny do stanu równowagi stosunek karnozyny do anseryny wyniósł średnio jak 1:4, maksymalnie, dla jednej frakcji, jak 1:10.
PL 223 266 B1
W roztworze eluentu (0,5 M NaCl) do uzyskania stanu równowagi średni stosunek karnozyny do anseryny wyniósł 2,9:1 a maksymalny, w jednej frakcji, jak 4,7:1.
P r z y k ł a d 2. Roztwór anseryny oraz karnozyny o pH 7,7 i stosunku ilościowym dipeptydów jak 3,1:1 miesza się ze złożem wymieniacza jonowego IRA 70 RF, w proporcji 3:10, przez 30 min. Następnie oddziela się złoże i ustala się stężenie oraz stosunek karnozyny do anseryny w roztworze po adsorpcji, wyniósł on 1:3,9. W celu przeprowadzenia procesu desorpcji złoże z zaadsorbowanymi dipeptydami zawiesza się w eluencie, którym jest roztwór 0,5 M NaCl, miesza się przez kolejne 30 minut i oddziela się złoże. W eluencie oznacza się zawartość dipeptydów i stosunek karnozyny do anseryny, który wyniósł jak 1,9:1.
P r z y k ł a d 3. Prowadzi się proces adsorpcji jak w przykładzie 1 z tą różnicą, że stosuje się roztwór dipeptydów o pH 6, a jako złoże używa się wymieniacz jonowy WA 30 Diadion. Stosunek anseryny do karnozyny w roztworze wypływającym z kolumny, do stanu równowagi, wyniósł jak 3,0:1.
P r z y k ł a d 4. Prowadzi się proces adsorpcji jak w przykładzie 1 z tą różnicą, że jako złoże używa się wymieniacz jonowy WA 30 Diadion. Stosunek anseryny do karnozyny w roztworze wypływającym z kolumny, do stanu równowagi, wyniósł jak 3,6:1
P r z y k ł a d 5. Prowadzi się proces adsorpcji jak w przykładzie 1 z tą różnicą, że jako złoże używa się wymieniacz jonowy Dowex Maraton WBA a proces elucji prowadzi się 3,0 M roztworem NaCl. Stosunek karnozyny do anseryny w roztworze elucyjnym, do stanu równowagi, wyniósł jak 1,4:1.

Claims (4)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wzbogacania mieszanin dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę przy użyciu chromatografii jonowymiennej, znamienny tym, że zmianę składu mieszaniny uzyskuje się w wyniku procesu adsorpcji przebiegającego w roztworach o pH od 6,0 do 8,0 i desorpcji (elucji) przy użyciu roztworu chlorku sodu o stężeniu od 0,3 M do 3,5 M na złożu wymieniacza jonowego słabo zasadowego anionitu.
  2. 2. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że proces adsorpcji jest prowadzi się z roztworów o pH 7,0.
  3. 3. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że jako eluent stosuje się jest roztwór chlorku sodu o stężeniu 0,5 M.
  4. 4. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że proces adsorpcji prowadzi się na złożu wymieniacza jonowego słabo zasadowego anionitu, którym jest IRA 70 RF.
PL398115A 2012-02-15 2012-02-15 Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę PL223266B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL398115A PL223266B1 (pl) 2012-02-15 2012-02-15 Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL398115A PL223266B1 (pl) 2012-02-15 2012-02-15 Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL398115A1 PL398115A1 (pl) 2012-07-16
PL223266B1 true PL223266B1 (pl) 2016-10-31

Family

ID=46575890

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL398115A PL223266B1 (pl) 2012-02-15 2012-02-15 Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL223266B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL398115A1 (pl) 2012-07-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2299271B9 (en) Kokumi-imparting compositions
ES2565380T3 (es) Método para aislar osteopontina usando alimentaciones concentradas
CN102295696A (zh) 由冷沉淀制备凝血因子ⅷ、纤维蛋白原和纤维结合蛋白的方法
CN102331471B (zh) 超高效液相色谱测定奶粉和牛奶中牛乳清蛋白含量的方法
US12405252B2 (en) Method for detecting contents of whey protein and casein, and/or ratio thereof in milk powder
Geoffroy et al. Semi-industrial scale-up of EDUF technology for the electroseparation of bioactive cationic peptides: Impact of process parameters and cell configurations on eco-efficiency
Hippauf et al. Towards a continuous adsorption process for the enrichment of ACE-inhibiting peptides from food protein hydrolysates
Rocco et al. Miniaturized separation techniques as analytical methods to ensure quality and safety of dietary supplements
SE452250C (sv) Sätt att framställa ett koncentrat av protrombinkomplex
Rudenko et al. Determination of water-soluble vitamin B and vitamin C in combined feed, premixes, and biologically active supplements by reversed-phase HPLC
JPWO2007013679A1 (ja) 試料溶液中のアルブミンの分析方法
Kiss et al. Solution speciation of bioactive Al (III) and VO (IV) complexes
PL223266B1 (pl) Sposób wzbogacania mieszaniny dipeptydów histydynowych w anserynę lub karnozynę
CN104098697A (zh) 一种重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体的纯化方法
Hippauf et al. Enhancing ACE-inhibition of food protein hydrolysates by selective adsorption using porous carbon materials
Carotti et al. N-Decyl-S-trityl-(R)-cysteine, a new chiral selector for “green” ligand-exchange chromatography applications
Vanhoute et al. Effect of haem on the fractionation of bovine haemoglobin peptic hydrolysate by electrodialysis with ultrafiltration membranes
CN105399817A (zh) 金枪鱼的肌红蛋白的提取与纯化方法
CN104833755B (zh) 一种麻附甘药物双酯型生物碱的含量测定方法
BR112019012273A2 (pt) processo para a purificação de antibióticos lipopolipeptídicos de caldos de cultura e usos de uma resina de troca catiônica
Hanušová et al. Influence of salts on selective coagulation of whey proteins and their application in the isolation of β-lactoglobulin.
EP4588491A1 (en) Production method of intermediate for radiopharmaceutical composition, and purification kit for intermediate for radiopharmaceutical composition
Chang et al. The reappraisal of nephrocalcin–its role in the inhibition of calcium oxalate crystal growth and interaction with divalent metal ions
Majumdar et al. Cation exchange behaviour of strontium on dowex 50W-X8: Separation from mixtures
CN121385161A (en) High performance liquid chromatography analysis method for tosituba phosphate