PL210458B1 - Sposób unieruchamiania komórek drożdży - Google Patents

Sposób unieruchamiania komórek drożdży

Info

Publication number
PL210458B1
PL210458B1 PL383493A PL38349307A PL210458B1 PL 210458 B1 PL210458 B1 PL 210458B1 PL 383493 A PL383493 A PL 383493A PL 38349307 A PL38349307 A PL 38349307A PL 210458 B1 PL210458 B1 PL 210458B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
yeast cells
solution
aqueous solution
sodium alginate
concentration
Prior art date
Application number
PL383493A
Other languages
English (en)
Other versions
PL383493A1 (pl
Inventor
Wojciech Ambroziak
Dorota Kręgiel
Katarzyna Dziedziczak
Janusz Rosiak
Marek Kołodziejczyk
Original Assignee
Politechnika Lodzka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Lodzka filed Critical Politechnika Lodzka
Priority to PL383493A priority Critical patent/PL210458B1/pl
Publication of PL383493A1 publication Critical patent/PL383493A1/pl
Publication of PL210458B1 publication Critical patent/PL210458B1/pl

Links

Landscapes

  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób unieruchamiania komórek drożdży przeznaczonych do zastosowania w procesach biotechnologicznych, zwłaszcza w procesach fermentacji.
Wiadomo, iż znaczne skrócenie procesów biotechnologicznych, a zwłaszcza fermentacyjnych, osiąga się prowadząc je w sposób ciągły. Prowadzenie procesów fermentacji w sposób ciągły jest możliwe, między innymi, dzięki zastosowaniu techniki unieruchamiania komórek drożdży w żelu, przy czym z punktu widzenia stanu fizjologicznego unieruchomionych komórek, jakości produktów fermentacji oraz zdrowia konsumentów tych produktów najkorzystniejsze jest unieruchamianie komórek drożdży w matrycy z żelu alginianowego.
Znany jest sposób unieruchamiania komórek mikroorganizmów, w tym również drożdży, na drodze pułapkowania w żelu, polegający na wprowadzeniu komórek mikroorganizmów do wodnego roztworu alginianu sodu i poddaniu tej mieszaniny żelowaniu wodnym roztworem chlorku wapnia.
Jednak komórki drożdży unieruchomione w litym żelu alginianowym posiadają znacznie mniejszą możliwość namnażania niż komórki umieszczone w podłożu fermentacyjnym.
Znany jest także sposób unieruchamiania żywych komórek, w tym również komórek drożdży, polegający na sporządzeniu wodnego roztworu alginianu sodu o stężeniu 0,1-4,0% wagowych, zawierającego chlorek sodu, surfaktant białkowy w ilości nie mniejszej niż 0,1 g /1 l roztworu oraz komórki drożdży, następnie spienieniu przygotowanej mieszaniny mechanicznie lub w wyniku przepuszczenia przez nią gazu, sieciowaniu spienionej mieszaniny w wodnym roztworze chlorku wapnia o stężeniu nie mniejszym niż 0,05 mol/dm3 w czasie co najmniej 1 sekundy oraz zanurzeniu rdzeni zawierających żywe komórki w pożywce. Jako surfaktant białkowy stosuje się pełną surowicę inaktywowaną, jej frakcje, surowicę płodową lub albuminy.
Sposób unieruchamiania komórek drożdży przeznaczonych do zastosowania w procesach biotechnologicznych, zwłaszcza w procesach fermentacji, polegający na sporządzeniu spienionego wodnego roztworu alginianu sodu zawierającego komórki drożdży, sieciowaniu spienionej mieszaniny w roztworze wodnym chlorku wapnia i umieszczeniu wytworzonych rdzeni z komórkami drożdży w podłożu hodowlanym tych drożdży, według wynalazku polega na tym, ż e stosuje się wodny roztwór alginianu sodu o stężeniu 1-10% wagowych, który spienia się przed zmieszaniem z komórkami drożdży, po czym wprowadza się do niego komórki drożdży w postaci zawiesiny hodowlanej, w ilości 103-105 jtk (jednostek tworzących kolonie)/ml roztworu alginianu sodu, spienioną mieszaninę alginianu sodu i drożdży sieciuje się w 0,1-0,5 M roztworze chlorku wapnia w czasie 15-120 minut, następnie płucze się w wodnym roztworze soli fizjologicznej, odpowietrza, umieszcza w roztworze wodnym poli-L-lizyny na czas co najmniej 15 minut, płucze w wodzie dejonizowanej i umieszcza w roztworze wodnym krzemianu sodu o pH = 7 na czas co najmniej 30 minut i tak przygotowane rdzenie z unieruchomionymi w nich komórkami drożdży umieszcza się w podłożu hodowlanym na czas potrzebny do uzyskania 107-108 jtk/rdzeń. Do spieniania stosuje się korzystnie surfaktant niejonowy o nazwie handlowej Triton X 100 w ilości 0,1-1% wagowych w stosunku do masy roztworu alginianu sodu. Nadto stosuje się roztwór wodny soli fizjologicznej korzystnie o stężeniu 0,9%, roztwór wodny poli-L-lizyny o stężeniu 0,05-0,1% i roztwór wodny krzemianu sodu korzystnie o stężeniu 0,2 M.
Sposób według wynalazku jest korzystniejszy od znanych sposobów unieruchamiania żywych komórek pod względem stanu fizjologicznego unieruchomionych komórek drożdży. Drożdże unieruchomione sposobem według wynalazku, zastosowane w procesach fermentacji przyspieszają zafermentowanie podłoża, intensyfikują proces fermentacji i poprawiają jakość produktu fermentacji.
Sposób według wynalazku znajduje zastosowanie do unieruchamiania komórek drożdży browarniczych, gorzelniczych i amylolitycznych.
Sposób według wynalazku ilustruje poniższy przykład.
P r z y k ł a d
W celu unieruchomienia komórek dro ż d ż y przygotowano 2% wodny roztwór alginianu sodu zawierający 0,1% środka pianotwórczego w postaci preparatu o nazwie handlowej Triton X-100. Roztwór ten poddano spienieniu, po czym wprowadzono do niego uprzednio odwirowaną zawiesinę hodowlaną komórek drożdży browarniczych Saccharomyces cerevisiae w ilości 103 jtk/ml roztworu. Otrzymaną spienioną zawiesinę wkroplono następnie do 0,2 M roztworu chlorku wapnia, w którym pozostawiono ją, delikatnie mieszając, na czas 60 minut w celu usieciowania. Otrzymane w wyniku sieciowania kuliste, wielokomorowe rdzenie z zawartymi w ich komorach komórkami drożdży przepłukano 0,9% wodnym roztworem soli fizjologicznej, odpowietrzono, po czym przeniesiono do 0,1% roztworu wodnego
PL 210 458 B1 poli-L-lizyny, w którym pozostawiono je na czas 15 minut. Następnie, przepłukano rdzenie w wodzie dejonizowanej i przeniesiono do 0,2 M wodnego roztworu krzemianu sodu o pH = 7, w którym pozostawały 30 minut. Po upływie tego czasu rdzenie z komórkami drożdży przemyto w wodzie dejonizowanej i wprowadzono do podłoża hodowlanego drożdży, w którym przebywały tak długo, aż ilość komórek drożdży w tych rdzeniach była równa 108 jtk/1 rdzeń. Wytworzone wielokomorowe rdzenie, zawierające komórki drożdży browarniczych Saccharomyces cererisiae, zastosowano w procesie produkcji piwa. Do 100 ml jałowej brzeczki piwnej o ekstrakcie początkowym 12° Bx wprowadzono około 200 rdzeni z unieruchomionymi komórkami drożdży i proces fermentacji prowadzono w temperaturze 10°C, aż do chwili, gdy stężenie ekstraktu fermentującej brzeczki wynosiło 4° Bx.
Okazało się, iż zastosowanie drożdży unieruchomionych sposobem według wynalazku przyspieszyło zafermentowanie i odfermentowanie podłoża oraz spowodowało podwyższenie zawartości etanolu w produkcie końcowym. Jakość produktu końcowego była porównywalna z jakością produktu uzyskanego metodą konwencjonalną, natomiast czas fermentacji dla kolejnych pasaży wielokomorowych rdzeni z unieruchomionymi wewnątrz drożdżami został skrócony optymalnie z 14 dni do 1 dnia. Drożdże gorzelnicze Saccharomyces cerevisiae, unieruchomione sposobem według wynalazku, zastosowano także w procesie wytwarzania etanolu. Do 100 ml jałowego podłoża fermentacyjnego, zawierającego dodatek maltozy wprowadzono około 200 rdzeni zawierających drożdże gorzelnicze Saccharomyces cerevisiae i prowadzono fermentację w temperaturze 30°C w warunkach beztlenowych. Proces fermentacji prowadzono w podłożu zawierającym 5% i 12% maltozy. Po przeprowadzonej fermentacji stwierdzono zawartość etanolu wyższą niż w przypadku fermentacji prowadzonej metodą konwencjonalną. Nadto, wzrost stężenia maltozy w podłożu fermentacyjnym powodował wzrost stężenia etanolu.

Claims (5)

1. Sposób unieruchamiania komórek drożdży przeznaczonych do zastosowania w procesach biotechnologicznych, zwłaszcza w procesach fermentacji, polegający na sporządzeniu spienionego wodnego roztworu alginianu sodu zawierającego komórki drożdży, sieciowaniu spienionej mieszaniny w roztworze wodnym chlorku wapnia i umieszczeniu wytworzonych rdzeni z komórkami droż d ż y w podłożu hodowlanym tych drożdż y, znamienny tym, że stosuje się wodny roztwór alginianu sodu o stężeniu 1-10% wagowych, który spienia się przed zmieszaniem z komórkami droż dż y, po czym wprowadza się do niego komórki drożdży w postaci zawiesiny hodowlanej, w ilości 103-105 jtk/ml roztworu alginianu sodu, spienioną mieszaninę alginianu sodu i drożdży sieciuje się w 0,1-0,5 M roztworze chlorku wapnia w czasie 15-120 minut, następnie płucze się w wodnym roztworze soli fizjologicznej, odpowietrza, umieszcza w roztworze wodnym poli-L-lizyny na czas co najmniej 15 minut, płucze w wodzie dejonizowanej i umieszcza w roztworze wodnym krzemianu sodu o pH = 7 na czas co najmniej 30 minut i tak przygotowane rdzenie z unieruchomionymi w nich komórkami drożdży umieszcza się w podłożu hodowlanym na czas potrzebny do uzyskania 107-108 jtk/rdzeń.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że do spieniania stosuje się surfaktant niejonowy w iloś ci 0,1-1% wagowych w stosunku do masy roztworu alginianu sodu.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się roztwór wodny soli fizjologicznej, korzystnie o stężeniu 0,9%
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się roztwór wodny poli-L-lizyny o stężeniu 0,05-0,1%.
5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się roztwór wodny krzemianu sodu, korzystnie o stężeniu 0,2 M.
PL383493A 2007-10-08 2007-10-08 Sposób unieruchamiania komórek drożdży PL210458B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL383493A PL210458B1 (pl) 2007-10-08 2007-10-08 Sposób unieruchamiania komórek drożdży

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL383493A PL210458B1 (pl) 2007-10-08 2007-10-08 Sposób unieruchamiania komórek drożdży

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL383493A1 PL383493A1 (pl) 2009-04-14
PL210458B1 true PL210458B1 (pl) 2012-01-31

Family

ID=42985828

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL383493A PL210458B1 (pl) 2007-10-08 2007-10-08 Sposób unieruchamiania komórek drożdży

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL210458B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL383493A1 (pl) 2009-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101389240B1 (ko) 점토 혼입된 효모 조성물 및 이의 사용방법
Stewart The structure and function of the yeast cell wall, plasma membrane and periplasm
CN110527704B (zh) 一种合成乳-n-二糖的方法
KR20200138420A (ko) 단백질 정제의 신규한 방법
CN107868805B (zh) 一种通过乳酸菌发酵降解的龙眼多糖及其制备方法
CN118303634A (zh) 具有增强免疫力功能的后生元及其制备方法和应用
PL210458B1 (pl) Sposób unieruchamiania komórek drożdży
CN104911173A (zh) 一种用于处理水中有机物和氨氮的磁性生物微胶囊的制备方法
US6348335B1 (en) Low-molecular active weight ingredient extract from yeasts and method for producing it
KR20180054344A (ko) 와이셀라 시바리아 균주의 대량 생산 방법 및 상기 균주의 배양용 배지 조성물
ES2650273T3 (es) Método para la fermentación alcohólica de mosto de miel, con alto contenido de azúcar
CN113559023A (zh) 一种无水酵母精华滤液及其制备方法
CN116724892B (zh) 一种富硒葛仙米的培养方法
CN106834207A (zh) 一种中华鳖卵巢细胞分离及体外培养方法
CN115595286B (zh) 一种植物乳杆菌菌剂及其制备方法和应用
US20030186403A1 (en) Preparation of immobilised acclimated micro-organisms, production method and use for preactivating interrupted permentation processes
CN106074402A (zh) 一种猪细小病毒脂质体稀释液冻干制品及其制备方法
RU2151794C1 (ru) Способ активации дрожжей
CN117264771A (zh) 一种降解生物胺苹果酸-乳酸发酵菌粉的制备方法及其应用
CN107083383B (zh) 一种适用于产孢真菌核型分析的染色体dna制备方法
CN121313503A (zh) 一种具有控油功效的桑黄菌丝体发酵产物及其制备方法和应用
CN109182302A (zh) 一种利用酵母孢子固定化半纤维素酶的方法
US4184919A (en) Method of gelling microbial mycelia
CN113621684A (zh) 一种游离dna保存试剂及制备方法
JPS62104576A (ja) アミラ−ゼの製造法

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20101008