PL203306B1 - Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy - Google Patents
Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowyInfo
- Publication number
- PL203306B1 PL203306B1 PL386374A PL38637403A PL203306B1 PL 203306 B1 PL203306 B1 PL 203306B1 PL 386374 A PL386374 A PL 386374A PL 38637403 A PL38637403 A PL 38637403A PL 203306 B1 PL203306 B1 PL 203306B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- antibiotic
- solution
- antibiotics
- matrix
- phosphate buffer
- Prior art date
Links
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims description 19
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 title 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 16
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 9
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 claims description 7
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 claims description 7
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 claims description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 7
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 claims description 6
- DDTDNCYHLGRFBM-YZEKDTGTSA-N chembl2367892 Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(O)C=C(C=4)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@H](CC=4C=C(Cl)C(O5)=CC=4)C(=O)N3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1Cl)=CC=C1OC1=C(O[C@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O3)NC(C)=O)C5=CC2=C1 DDTDNCYHLGRFBM-YZEKDTGTSA-N 0.000 claims description 6
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 claims description 6
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 6
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 claims description 5
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 claims description 5
- 108010053950 Teicoplanin Proteins 0.000 claims description 5
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 5
- 229960001608 teicoplanin Drugs 0.000 claims description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 claims description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 claims description 2
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 claims description 2
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-O vancomycin(1+) Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C([O-])=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)[NH2+]C)[C@H]1C[C@](C)([NH3+])[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-O 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 7
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 3
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 229920004934 Dacron® Polymers 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 2
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- -1 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 238000007631 vascular surgery Methods 0.000 description 2
- YUJSWFZLUCHGFO-UHFFFAOYSA-N 4-(4-azidophenyl)aniline Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YUJSWFZLUCHGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- QTENRWWVYAAPBI-YZTFXSNBSA-N Streptomycin sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.OS(O)(=O)=O.OS(O)(=O)=O.CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](N=C(N)N)[C@@H](O)[C@H](N=C(N)N)[C@@H](O)[C@@H]1O.CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](N=C(N)N)[C@@H](O)[C@H](N=C(N)N)[C@@H](O)[C@@H]1O QTENRWWVYAAPBI-YZTFXSNBSA-N 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000004053 dental implant Substances 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013097 stability assessment Methods 0.000 description 1
- 108010013480 succinylated gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229940007079 succinylated gelatin Drugs 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- SBHRWOBHKASWGU-UHFFFAOYSA-M tridodecyl(methyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(CCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCCC SBHRWOBHKASWGU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy, z grupy aminoglikozydowych lub glikopeptydowych, przeznaczonych do protez naczyń krwionośnych w angioplastyce, czy też jako trwałe matryce antybakteryjne, mające szerokie zastosowanie w medycynie, między innymi jako cewniki w urologii, endoprotezy w ortopedii, a także jako implanty zębowe w stomatologii.
W chirurgii naczyniowej stosuje się powszechnie protezy naczyniowe nasą czane antybiotykami, które w krótkim czasie, około 5-7 dni, wypłukiwane są z implantów przez krew, co powoduje tym samym pozbawienie ich właściwości antybakteryjnych.
Dotychczasowe badania nad unieruchamianiem antybiotyków do protez naczyniowych ograniczają się do jonowego wiązania lub biernej adsorpcji antybiotyku wskutek moczenia protez w roztworze leku. Po raz pierwszy jonowy sposób wiązania rifampicyny do sukcynylowanej formy żelatyny na protezie dakronowej podał T.R. Ashton i współautorzy w 1990 r. (Proc. 16th Soc. Biomaterials, 13, 235-239). W podobny sposób unieruchamiano gentamycynę - A. Haverich i współautorzy (J. Vasc. Surg., 1998, 15, 187-193). Natomiast E.V. Kinney i współautorzy wiązali jonowo ciprofloksacynę do protezy politereftalanoetylenowej z użyciem chlorku tridodecylo - metylo - amonowego (J. Surg. Res., 1991, 50, 430-435). Z kolei V. Gahtan i współautorzy wiązali jonowo rifampicynę wykorzystując jej właściwości hydrofobowe. Ci sami autorzy oraz J.J. Earnshaw stosując bierną adsorpcję impregnowali rifampicynę na włóknach dakronowych powlekanych żelatyną lub kolagenem (J. Surg. Res., 1995, 58, 105-110; J. Vasc. Endovasc. Surg., 2000, 20, 409-412). Według cytowanych autorów implanty takie charakteryzowały się działaniem bakteriobójczym ograniczonym do 7 dni.
Inne znane badania nad unieruchamianiem antybiotyków ograniczały się do prób jonowego lub adsorpcyjnego ich wiązania do matryc. Wiązania takie, opierające się na zjawiskach adsorpcji i adhezji, są możliwe dzięki siłom jonowym, wiązaniom wodorowym i innym słabym oddziaływaniom fizykochemicznym. Te słabe wiązania mogą powstawać na przykład dzięki oddziaływaniom elektrostatycznym pomiędzy przeciwnie naładowanymi grupami funkcyjnymi matryc i antybiotyków. Według H. Belta i współ autorów korzystnymi matrycami dla tego typu wią zań są : polimery syntetyczne, ż ele krzemionkowe, szkło porowate, celuloza (Biomaterials, 2001, 22, 1697-1611).
Z kolei według M.D. Phaneuf i współautorów, antybiotyki moż na również unieruchamiać przez sieciowanie (Biomaterials, 2001, 22, 463-469), działając na nie dwu- lub wielofunkcyjnymi odczynnikami typu aldehyd glutarowy, formaldehyd, czy diazobenzydyna i jej pochodne. Jednakże niska aktywność implantów wobec bakterii i mała ich stabilność pod wpływem silnej modyfikacji antybiotyków, powodują, iż metoda ta nie daje zadawalających rezultatów.
Celem wynalazku jest opracowanie sposobu wiązania antybiotyków ze stałymi matrycami, pozwalającego na uzyskanie trwałych połączeń i zachowujących jednocześnie aktywność biologiczną antybiotyku przez wiele tygodni. Cel ten osiągnięto nieoczekiwanie, opracowując nowy sposób immobilizacji antybiotyków zawierających w swej budowie komponent cukrowy na stałych matrycach, za sprawą zmodyfikowania antybiotyku w kierunku utlenienia podjednostek cukrowych leku i utworzenia w nich wolnych grup aldehydowych, zdolnych do tworzenia kowalencyjnych wią zań z grupami NH2, pochodzącymi z pokrytej białkiem matrycy i utrwalonych następnie przez redukcję wodorem.
Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy według wynalazku polega na tym, że modyfikuje się roztwór antybiotyku o stężeniu wagowym 0,3-0,4%, w buforowanym roztworze o pH w granicach 7-8, korzystnie w 0,1 M buforze fosforanowym, mieszając ze związkiem utleniającym, w postaci 5-6% roztworu kwasu nadjodowego lub jego soli, w temperaturze ok. 25°C, przez 3 do 5 godzin w warunkach zabezpieczających przed dostępem światła, potem dodając do roztworu alkohol dwuwodorotlenowy o stężeniu 4-5 x 10-4 M, korzystnie glikol etylenowy i doprowadzając środowisko pH do wartości 7-8. Tak zmodyfikowany roztwór antybiotyku inkubuje się przez 12 do 24 godzin w temperaturze 4-6°C ze stałą matrycą pokrytą warstwą białka, korzystnie keratyną, żelatyną lub kolagenem. Następnie matrycę z antybiotykiem, redukuje się wodorem „in statu nascendi” i odmywa nadmiar antybiotyku buforem fosforanowym o pH w granicach 7-8, korzystnie 0,01 M roztworem. Korzystnym jest, jeśli jako antybiotyki zawierające w swojej budowie komponent cukrowy z grupy aminoglikozydowych stosuje się gentamycynę, amikacynę, streptomycynę czy neomycynę, zaś jako antybiotyki glikopeptydowe stosuje się teikoplaninę czy wankomycynę.
PL 203 306 B1
Zaletą wynalazku, jest prosty sposób otrzymywania antybakteryjnych matryc, a immobilizowane antybiotyki poprzez kowalencyjne wiązania utrwalane wodorem, nie tracą swojej aktywności przez ponad 2 do 3 miesięcy, co znacznie podnosi wartość implantów wszczepiennych. Przedmiot wynalazku ilustrują przedstawione poniżej przykłady.
P r z y k ł a d I.
Dla przygotowania matrycy użyto 5 ml roztworu keratyny rozpuszczonej w DMSO i wytrącano ją dodając 15 ml zmrożonego do minus 20°C acetonu na ok. 10 g szklanych kulek CPG o granulacji 0,125-0,177 mm. Po inkubacji w temperaturze 4°C przez 12 godzin, zdekantowano aceton, a matrycę osuszono pod próżnią w temperaturze 20°C, po czym dodano 50 ml 5% aldehydu glutarowego i znowu mieszano pod próżnią przez ok. 30 minut. Wytworzone połączenie pomiędzy grupami aminowymi keratyny i grupami aldehydowymi redukowano wodorem z roztworu NaBH4 (50 mg/ml H2O), a nadmiar aldehydu niezwiązanego z matrycą odsączono.
Modyfikując antybiotyk, użyto 10 ml roztworu gentamycyny o stężeniu wagowym 0,4%, w 0,1 M buforze fosforanowym o pH=7,6 a następnie inkubowano go z dodatkiem 0,75 g 6% kwasu nadjodowego (HIO4 x 2 H2O) przez 4 godziny, w temperaturze 25°C w naczyniu zabezpieczonym od dostępu światła. Kolejno dodawano 0,5 ml glikolu etylenowego o stężeniu 4 x 10-4 M i ponownie inkubowano w cią gu 30 minut, po czym roztwór zoboję tniono, dodają c kroplami NaOH. Do tak zmodyfikowanej chemicznie gentamycyny, dodano 3 g keratynowanej matrycy i wytrząsano przez 3 godziny bez obecności światła. Następnie preparat inkubowano przez 24 godziny w temperaturze 6°C, po czym redukowano wodorem „in statu nascendi” i odmywano nadmiar antybiotyku 0,01 M roztworem buforu fosforanowego o pH=7,2 aż do pozbycia się niezwiązanych cząsteczek gentamycyny. Otrzymany produkt zawierał 8 mg gentamycyny na 1 g matrycy.
P r z y k ł a d II.
Do immobilizacji amikacyny, użyto protezę z przędzy sporządzonej z politereftalanu etylenu, powleczoną żelatyną pochodzenia wieprzowego. Proteza taka znana jest pod nazwą handlową TRICOGELR i stosowana przez oddziały chirurgii naczyniowej jako implant tętniczy.
Modyfikując antybiotyk, użyto 10 ml roztworu amikacyny o stężeniu wagowym 0,3%, w 0,1 M buforze PBS o pH=7,5, którą inkubowano z dodatkiem 0,8 g 5% kwasu nadjodowego (HIO4 x 2 H2O) przez 4 godziny, w temperaturze 25°C, w naczyniu zabezpieczonym od dostępu światła. Kolejno dodawano 0,5 ml glikolu etylenowego o stężeniu 5 x 10-4 M i ponownie inkubowano w ciągu 30 minut, po czym roztwór zobojętniono, dodając kroplami NaOH. W roztworze tak zmodyfikowanej amikacyny umieszczono 10 protez o masie 0,05 g i powierzchni 1 cm2 każda, i wytrząsano przez 3 godziny bez obecności światła. Preparat ponownie inkubowano przez 20 godzin w temperaturze 5°C, po czym redukowano wodorem „in statu nascendi” i odmywano nadmiar antybiotyku 0,01 M roztworem buforu fosforanowego o pH=7,0, aż do pozbycia się nie związanych cząsteczek amikacyny. Otrzymany produkt zawierał 10 mg amikacyny na 1 g matrycy.
P r z y k ł a d III.
Sposobem podanym w przykładzie I, przygotowywano matrycę ze szkła porowatego CPG, o granulacji 0,125-0,177 mm.
Modyfikując antybiotyk użyto 10 ml roztworu teikoplaniny o stężeniu wagowym 0,4% w 0,1 M buforze fosforanowym o pH=7,5, którą inkubowano z dodatkiem 0,8 g 5% nadjodanu sodu przez 4 godziny, w temperaturze 25°C, w naczyniu zabezpieczonym od dostępu ś wiatł a. Kolejno dodawano 0,5 ml glikolu etylenowego o stężeniu 5 x 10-4 M, i ponownie inkubowano w ciągu 30 minut, po czym doprowadzono pH roztworu do obojętnego, dodając kroplami NaOH. Tak zmodyfikowaną chemicznie teikoplaninę, zmieszano z 10 g keratynowanej matrycy CPG i wytrząsano przez 3 godziny bez obecności światła. Następnie preparat inkubowano przez 12 godzin w temperaturze 4°C, po czym redukowano wodorem „in statu nascendi” i odmywano nadmiar antybiotyku 0,01 M roztworem buforu fosforanowego o pH=7,8, aż do pozbycia się niezwiązanych cząsteczek teikoplaniny. Otrzymany produkt zawierał 8 mg teikoplaniny na 1 g matrycy.
P r z y k ł a d IV.
Do immobilizacji streptomycyny użyto żel krzemionkowy o granulacji 0,1-0,2 mm. Wymieniony granulat pokrywano keratyną sposobem z przykładu I.
Modyfikując antybiotyk użyto 10 ml roztworu streptomycyny o stężeniu wagowym 0,4% w 0,1 M buforze PBS o pH=7,5, którą inkubowano z dodatkiem 0,8 g 5% nadjodanu sodu przez 4 godziny, w temperaturze 25°C, w naczyniu zabezpieczonym od dostępu ś wiatł a. Kolejno dodawano 0,5 ml glikolu etylenowego o stężeniu 5 x 10-4 M i ponownie inkubowano w ciągu 30 minut, po czym dopro4
PL 203 306 B1 wadzono pH roztworu do obojętnego, dodając kroplami NaOH. Tak zmodyfikowaną streptomycynę, zmieszano z 10 g matrycy i wytrząsano przez 3 godziny bez obecności światła. Następnie preparat inkubowano przez 22 godziny w temperaturze 5°C, po czym redukowano wodorem „in statu nascendi” i odmywano nadmiar antybiotyku 0,01 M roztworem buforu fosforanowego o pH=8,0, aż do pozbycia się niezwiązanych cząsteczek streptomycyny. Otrzymany produkt zawierał 10 mg streptomycyny na 1 g matrycy. Immobilizowane według wymienionych przykładów biomateriały poddawano ocenie właściwości przeciwbakteryjnych wobec bakterii Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) i Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853). W tym celu badano strefy zahamowania wzrostu szczepów bakteryjnych na podłożu stałym Mueller-Hinton w obecności badanego biomateriału w porównaniu z kontrolnym niezawierającym antybiotyku. Strefa zahamowania wzrostu murawy bakteryjnej wokół biomateriału wynosiła: dla E. coli 11-16 mm, dla S. aureus 12-17 mm, dla P. aeruginosa 10-16 mm. Następnie preparat poddawano ocenie trwałości i stabilności. Stwierdzono, że biomateriały przechowywane przez 30 dni, w temperaturze 37°C, zachowały stabilność, a ilości antybiotyków w porównaniu z próbkami kontrolnymi, wahały się w granicach 80-97%.
Claims (7)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy i łączonych z matrycami pokrytymi warstwą białka, znamienny tym, że modyfikuje się roztwór antybiotyku o stężeniu wagowym 0,3-0,4%, w buforowanym roztworze o pH w granicach 7-8, mieszając ze związkiem utleniającym w postaci 5-6% roztworu kwasu nadjodowego lub jego soli, w temperaturze ok. 25°C, przez 3 do 5 godzin w warunkach zabezpieczających przed dostępem światła, potem dodając do roztworu alkohol dwuwodorotlenowy o stężeniu 4-5 x 10-4 M, doprowadzając środowisko pH do wartości 7-8, po czym tak zmodyfikowany roztwór antybiotyku inkubuje się przez 12 do 24 godzin w temperaturze 4-6°C ze stałą matrycą pokrytą warstwą białka, a następnie matrycę z antybiotykiem redukuje się wodorem „in statu nascendi” i odmywa nadmiar antybiotyku buforem fosforanowym o pH w granicach 7-8.
- 2. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że jako antybiotyk z grupy aminoglikozydowych stosuje się gentamycynę, amikacynę, streptomycynę lub neomycynę.
- 3. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że jako antybiotyki glikopeptydowe stosuje się teikoplaninę, wankomycynę.
- 4. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że roztwór modyfikowanego antybiotyku buforowany jest do wartości pH w granicach 7-8 0,1 M buforem fosforanowym.
- 5. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że jako alkohol dwuwodorotlenowy stosuje się glikol etylenowy.
- 6. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że do końcowego odmywania immobilizowanego antybiotyku stosuje się obojętny bufor fosforanowy o stężeniu 0,01 M.
- 7. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że matrycę pokrywa się warstwą białka w postaci keratyny, ż elatyny lub kolagenu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL386374A PL203306B1 (pl) | 2003-02-28 | 2003-02-28 | Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL386374A PL203306B1 (pl) | 2003-02-28 | 2003-02-28 | Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL203306B1 true PL203306B1 (pl) | 2009-09-30 |
Family
ID=42989047
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL386374A PL203306B1 (pl) | 2003-02-28 | 2003-02-28 | Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL203306B1 (pl) |
-
2003
- 2003-02-28 PL PL386374A patent/PL203306B1/pl unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gao et al. | Enhancing antibacterial capability and osseointegration of polyetheretherketone (PEEK) implants by dual-functional surface modification | |
| US10500317B2 (en) | Antibacterial coatings that inhibit biofilm formation on implants | |
| US6013106A (en) | Medical article with adhered antimicrobial metal ions and related methods | |
| KR101527934B1 (ko) | 골 융합 향상 및 항균 효능을 갖는 항생제와 골형성 촉진 물질 방출형 임플란트 또는 스캐폴드 및 그 제조방법 | |
| JP4408603B2 (ja) | 有機無機複合生体材料およびその製造方法 | |
| Xu et al. | A carboxymethyl chitosan and peptide-decorated polyetheretherketone ternary biocomposite with enhanced antibacterial activity and osseointegration as orthopedic/dental implants | |
| Lewis et al. | Local antibiotic delivery with demineralized bone matrix | |
| AU2014217486B2 (en) | Solid substrates for promoting cell and tissue growth | |
| Hu et al. | Immobilization strategy for optimizing VEGF's concurrent bioactivity towards endothelial cells and osteoblasts on implant surfaces | |
| CZ289981B6 (cs) | Prostředek stimulující tvrdou tkáň | |
| EP2560694B1 (en) | Implantable device with antibacterial properties and multifunctional surface | |
| US20020169120A1 (en) | Biologically active material based on an insolubilised dextran derivative and a growth factor | |
| US20080254094A1 (en) | Biomaterials Carrying Cyclodextrines Having Improved Absorption Properties and Used for the Progressive and Delayed Release of Therapeutic Molecules | |
| JP2002531180A (ja) | 合成組織形成用基材 | |
| CN110050001B (zh) | 被多巴胺官能化的硫酸化透明质酸 | |
| CN119013054A (zh) | 混合组织工程改造构建体 | |
| An et al. | Macromolecule surface coating for preventing bacterial adhesion | |
| PL203306B1 (pl) | Sposób immobilizacji antybiotyków na stałych matrycach, zwłaszcza antybiotyków zawierających w swojej budowie komponent cukrowy | |
| Słota et al. | Crosslinked hybrid polymer/ceramic composite coatings for the controlled release of clindamycin | |
| PL201383B1 (pl) | Sposób immobilizacji antybiotyków zawierających I-rzędowe grupy aminowe ze stałymi matrycami pokrytymi białkiem | |
| CN110354303A (zh) | 一种金属钛表面的抗菌修饰方法 | |
| Ginalska et al. | A covalent method of gentamicin bonding to silica supports | |
| Costa et al. | Antimicrobial Pep-tides in the Battle against Orthopedic Implant-Related Infections: A Review. Pharmaceutics 2021, 13, 1918 | |
| US20180303976A1 (en) | Covalent modification of decellularized allogeneic grafts with active pharmaceuticals | |
| Lu | Immobilization of antimicrobial peptides onto titanium surfaces |