Opis patentowy opublikowano: 89 09 30 145509 C<1 i :£LNIAL- L)r<^dw Palantowego 1 fiUtiij lnu**!*- tt U«i--*j 1 Int. Cl.4 C07D 501/24' TWórcy wynalazku: Tbyonari Oine, Yosbihisa Yamada, Eisaku Yamato, Akio Nakao Uprawniony z patentu: lanabe Seiyaku Co., Ltd., Osaka (Japonia) SPOSÓB WYTWARZANIA POCHODNYCH KWASU /6R, 7R/-7-//Z/-2-/2-AMIN0TIAZ0LIL0 ^/-2-OKSYTMINOACETAMIDc7-3-CEFEW)KARBOKSYLOWEGO-4 Frzedmiotem wynalazku Jest sposób wytwarzania pochodnych kwasu /6R,7R/-7-/7z/-2- /2-aminotiazolilo-4/-2-oksyiminoacetamidq/-3-cefemokarboksylowego-4 o ogólnym wzorze 1, w którym R oznacza atom wodoru lub nizsza grupe alkilowa, R2 oznacza grupe acetoksylowa lub grupe /l-metylo-1H-tetrazolilo-5/tio, a R5 oznacza grupe karboksylowa, wzglednie R2 oznacza grupe o ogólnym wzorze 2, w którym Y oznacza atom wodoru, grupe hydroksymetylowa lub grupe karbamoilowa, a R* oznacza grupe -COO", zas n oznacza 2 lub 3, oraz farmakolo¬ gicznie dopuszczalnych soli tych zwiazków.Zwiazki cefalosporynowe o wzorze 1 i ich farmakologicznie dopuszczalne sole wykazuja silne dzialanie mikrobobójcze wobec wielu róznorodnych drobnoustrojów, w tym bakterii Gram-dodatnich i Oam-ujemnych.* Sa one uzyteczne Jako srodki przeciwbakteryjne, dodatki odzywcze do pasz dla zwierzat oraz Jako srodki chemioterapeutyczne dla zwierzat cieplo- krwistych oraz ludzi, stosowane w leczeniu chorób zakaznych powodowanych przez bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne. Przykladowo, zwiazki cefalosporynowe o wzorze 1 i ich farma¬ kologicznie dopuszczalne sole wykazuja silne dzialanie mikrobobójcze wobec bakterii nale¬ zacych do rodzaju Staphylococcus, Orterobacteriaceae i Ffeeudomonas, a szczególnie silne dzialanie wobec tych drobnoustrojów wykazuje np. /6R,7R/-7- \ /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/- -2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyiminq7acetamido j -3-/1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4# Z opublikowanego europejskiego zgloszenia patentowego nr 0 101 265 A2 znany Jest sposób wytwarzania zwiazków o ogólnym wzorze 1 przez kondensacje kwasu /z/-2-/N-zabezpie- czonego-aminotiazolilo/-2-/podstawionego-oksyimino/octowego, to Jest zwiazku o ogólnym wzorze 3, w którym grupa aminowa jest zabezpieczona grupa zabezpieczajaca, np. grupa tri- tylowa, lub Jego reaktywnej pochodnej z kwasem /6R,7R/-7-amino-3-cefemokarboksylowym-4 o ogólnym wzorze k lub Jego sola i nastepnie usuniecie grupy zabezpieczajacej grupe aminowa (i ewentualnie grupy zabezpieczajacej grupe karboksylowa) z powstalego zwiazku. Uwazano, ze2 145 509 zabezpieczenie grupy aminowej jest konieczne,by zapobiec reakcjom ubocznym, np. miedzy grupa aminowa i karboksylowa w zwiazku wyjsciowym o wzorze 3 z wytworzeniem jego dimeru.Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, ze mozna stosowac zwiazek wyjsciowy o wzorze 3 z niezabezpieczona grupa aminowa i nie zachodza zadne reakcje uboczne, a zatem zadane zwiazki mozna wytworzyc sposobem jednoetapowym, uzyskujac przy tym wyzsza wydajnosc niz dotychczas.Sposób wytwarzania zwiazków o ogólnym wzorze 1 i ich soli polega wedlug wynalazku na tym, ze kwas /z/-2-aminotiazolilo-2-/podstawiony-oksyimino/octowy o ogólnym wzorze 3, w którym R ma wyzej podane znaczenie, lub jego reaktywna pochodna poddaje sie kondensa¬ cji z kwasem /6R,7R/-7-aminocefemokarboksylowym-4 o ogólnym wzorze 4, w którym R oznacza 2 grupe karboksylowa lub zabezpieczona grupe karboksylowa, gdy R oznacza grupe acetoksylowa lub grupe /l-metylo-1 H-tetrazolilo-5/tio, wzglednie R oznacza grupe -C00", gdy FT oznacza grupe o ogólnym wzorze 2, w którym Y ma wyzej podane znaczenie, lub jego sola i w przypadku gdy R oznacza zabezpieczona grupe karboksylowa z powstalego zwiazku usuwa sie grupe za¬ bezpieczajaca, po czym otrzymany zwiazek ewentualnie przeprowadza sie w jego farmakolo¬ gicznie dopuszczalna sól# Sposób wedlug wynalazku jest prostszy w realizacji od znanego sposobu opisanego po¬ wyzej, gdyz unika sie wprowadzania i nastepnie usuwania grupy zabezpieczajacej grupe ami¬ nowa, zmniejszajac liczbe etapów procesu. Umozliwia on tez otrzymanie zadanych zwiazków z wyzsza wydajnoscia; I tak, sposobem wedlug wynalazku otrzymano zwiazek, w którym R oznacza atom wodoru, R oznacza grupe pirydyniowa, R5 oznacza grupe -C00", a n oznacza 2, 12 3 i sól sodowa zwiazku, w którym R oznacza atom wodoru, R oznacza grupe -0C0CH,, R oznacza grupe -COOH, a n oznacza 2, z wydajnoscia odpowiednio 7096 (przyklad I) i 53,1% (przyklad IX), natomiast sposobem znanym z opublikowanego europejskiego zgloszenia patento¬ wego nr 0 101 265 te same zwiazki otrzymano z wydajnoscia odpowiednio 42,7% (przyklad VI) i 36,4% (przyklad II). lak wiec wydajnosc nowego procesu jest znacznie wyzsza, pomimo nie- zabezpieczenia grupy aminoweJ.Jako substraty stosuje sie np# zwiazki o wzorze 3, w którym R oznacza atom wodoru lub nizsza grupe alkilowa, taka jak grupa metylowa, etylowa lub propylowa, zas n oznacza 2 lub 3* Gdy stosuje sie zwiazek o wzorze 4, w którym R oznacza zabezpieczona grupe kar¬ boksylowa, to grupa zabezpieczajaca powinna byc grupa dajaca sie latwo usunac w znany spo¬ sób, np. przez hydrolize, solwolize, dzialanie kwasem lub redukcje. Przykladami takich grup zabezpieczajacych sa nizsza grupa alkilowa, taka Jak IH-rz. butylowa, podstawiona lub niepodstawiona nizsza grupa fenyloalkilowa, taka Jak benzylowa, p-metoksybenzylowa i p-ni- trobenzylowa, grupa benzhydrylowa, nizsza grupa trójalkilosililowa, taka jak trójmetylo- sililowa, itp. Gdy R oznacza grupe karboksylowa, przed reakcja kondensacji korzystnie jest przeprowadzic zwiazek o wzorze 4 w sól. Odpowiednimi przykladami soli zwiazku o wzorze 4 sa sole nieorganiczne, takie jak sól sodowa lub potasowa, oraz sole organiczne, takie jak sól z trójmetyloamina lub trójetyloamina. Zwiazek o wzorze 3 moze istniec w postaci dwóch izomerów optycznych ze wzgledu na obecnosc asymetrycznego atomu wegla w grupie o wzorze 5, w którym gwiazdka wskazuje asymetryczny atom wegla, a R1 ma wyzej podane znaczenie. W spo¬ sobie wedlug wynalazku mozna stosowac kazdy z izomerów optycznych zwiazku o wzorze 3 lub jego racemat.Reakcje kondensacji zwiazku o wzorze 3 lub jego reaktywnej pochodnej ze zwiazkiem o wzorze 4 lub jego sola przeprowadza sie w znany sposób. Przykladowo, kondensacje zwiazku o wzorze 3 w wolnej postaci ze zwiazkiem o wzorze 4 prowadzi sie w obecnosci srodka odwad¬ niajacego w rozpuszczalniku. Odpowiednimi przykladami srodków odwadniajacych sa dwucyklo- heksylokarbodwuimid, N-etylo-N'-/3-dwumetyloaminopropylo/-karbodwuimid, tlenochlorek fosfo¬ ru, trójchlorek fosforu, chlorek tionylu, chlorek oksalilu, trójfenylofosfina itp. Jako srodek odwadniajacy mozna takze stosowac odczynnik Vilsmeiera otrzymany z dwumetyloforma- midu i tlenochlorku fosforu, dwumetyloformamidu i chlorku oksalilu lub dwumetyloformamidu i fosgenu. Odpowiednimi rozpuszczalnikami sa dioksan, tetrahydrofuran, acetonitryl, chlo¬ roform, chlorek metylenu, dwumetyloformamid, N, N-dwumetyloacetamid, octan etylu, pirydyna i woda. Korzystnie reakcje prowadzi sie w temperaturze od -50 do 50°C, zwlaszcza od -30 do 20°C.1*»5 509 3 Reakcje kondensacji reaktywnej pochodnej zwiazku o wzorze 3 ze zwiazkiem o wzorze U lub Jego sola mozna prowadzic z uzyciem lub bez uzycia akceptora kwasu w rozpuszczalniku.Odpowiednimi przykladami reaktywnych pochodnych zwiazku o wzorze 3 sa chlorki kwasowe, np. chlorek i bromek, mieszane bezwodniki, np. mieszany bezwodnik zwiazku o wzorze 3 z wegla¬ nem alkilu, aktywne estry, np. ester p-nitrofenyIowy, 2,4-dwunitrofenylowy, sukcynimidowy, ftalimidowy, benzotriazolowy i 2-pirolidonylowy-1, azydki kwasowe oraz amidy kwasowe,np. imidazoloamid, ^-podstawiony imidazoloamid i triazoloamld. Odpowiednimi rozpuszczalnikami sa dioksan, tetrahydrofuran, acetonitryl, chloroform, chlorek metylenu, dwumetyloformamid, N,fWwumetyloacetamid, octan etylu, pirydyna, aceton i woda. Odpowiednimi przykladami akcep¬ tora kwasu sa wodorotlenki metali alkalicznych, np. wodorotlenek potasowy i sodowy, weglany metali alkalicznych, np. weglan sodowy i potasowy, wodoroweglany metali alkalicznych, np. wodoroweglan sodowy i potasowy, trójalkiloaminy, np, trójmetyloamina i trójetyloamina, N,N-dwualkiloaniliny, np. N, N-dwumetyloaniliria i N,N-dwuetyloanilina, pirydyna i N,N- lomorfoliny, np. N-metylomorfolina. Korzystnie reakcje prowadzi sie w temperaturze od -50 do 50°C, zwlaszcza od -30 do 20°C.Gdy w otrzymanym powyzej opisanym sposobem zwiazku R oznacza zabezpieczona grupe karboksylowa, grupe zabezpieczajaca usuwa sie w znany sposób, np. przez hydrolize, solwo- lize, dzialanie kwasem lub redukcja. Frzykladowo, gdy grupa zabezpieczajaca grupe karboksy¬ lowa Jest grupa Ill-rz. butylowa lub benzhydrylowa, to grupy te nozna usunac dzialajac kwasem. Odpowiednimi przykladami takich kwasów sa np. kwas mrówkowy, trójfluorooctowy, ben- zenosulfonowy, p-toluenosulfonowy, solny, bromowodorowy i ich mieszaniny. Reakcje te mozna prowadzic z uzyciem lub bez uzycia rozpuszczalnika. Przykladami rozpuszczalników sa woda, metanol, etanol, kwas octowy lub dioksan. Korzystnie reakcje prowadzi sie w temperaturze od -30 do 70°C, zwlaszcza 0-30°C. Gdy Jako kwas stosuje sie kwas trójfluorooctowy, to wów¬ czas korzystnie reakcje prowadzi sie w obecnosci anizolu. Gdy grupa zabezpieczajaca grupy karboksylowa jest grupa benzylowa, p-metoksybenzylowa lub p-nitrobenzylowa, to wówczas takie grupy zabezpieczajace mozna usunac przez katalityczne uwodornienie zwiazku gazowym wodorem w obecnosci katalizatora. Odpowiednimi przykladami katalizatorów sa pallad - &CO,, pallad- wegiel drzewny i czern palladowa. Urfojj ornianie katalityczne korzystnie prowadzi sie w tem¬ peraturze 0-100°C, zwlaszcza 10-A0°C, pod cisnieniem atmosferycznym lub zwiekszonym, w roz¬ puszczalniku. Opodwiednimi rozpuszczalnikami sa metanol, etanol, tetrahydrofuran i woda.Zwiazki cefalosporyriowe o wzorze 1 wytwarzane sposobem wedlug wynalazku moga miec zastosowanie farmaceutyczne albo w postaci wodnej albo w postaci soli. Farmakologicznie dopuszczalnymi solami sa np. nietoksyczne sole metali, takie jak sól sodowa, potasowa, wap¬ niowa lub glinowa, sole z nietoksycznymi aminami, takimi jak trójalkiloaminy, np. fenylo- etylobenzyloamina, sole z nieorganicznymi kwasami, takimi jak kwas solny lub bromowodorowy, sole z kwasami organicznymi, takimi Jak kwas winowy, itd. Sole te latwo wytwarza sie dzia¬ lajac na zwiazek o wzorze 1 stechiometrycznie równowazna iloscia odpowiedniego srodka alkalicznego lub kwasu, w temperaturze zblizonej do pokojowej, w wodnym rozpuszczalniku.Zwiazki wyjsciowe o wzorze 3 sa nowe. Wytwarza sie Je w reakcji pochodnej kwasu maslo¬ wego o ogólnym wzorze 6, w którym -C00R oznacza grupe karboksylowa lub zabezpieczona grupe karboksylowa, X oznacza atom chlorowca, a R i n maja wyzej podane znaczenie, z tio¬ mocznikiem w obecnosci akceptora kwasu, np. trzeciorzedowej aminy organicznej, takiej Jak NfN-dwumetyloanilina, trójetyloamina lub pirydyna, w temperaturze okolo 10-80°C, w rozpusz¬ czalniku, np. w wodzie lub mieszaninie wody i nizszego alkanolu. W przypadku gdy -C00R oznacza zabezpieczona grupe karboksylowa, z powstalego produktu usuwa sie nastepnie grupe zabezpieczajaca.W opisie w zastrzezeniach patentowych okreslenie nnizsza grupa alkilowa" powinno byc rozumiane jako odnoszace sie do grupy alkilowej o ^-U atomach w^la.Dzialanie mikrobobójcze. Minimalne stezenie inhibitujace MIC fag/ml) badanego zwiazku okreslono znana metoda rozcienczen na plytce agarowej (opartej na metodzie opracowa¬ nej przez Japan Society of Chemotherapy). W doswiadczeniach stosowano agar toellera-Hintona (MHA, Missui). Wyniki podano w tablicy 1.145 509 Tablica Badany drobnoustrój ~" T Staphylococcus aureus Tterajima Staphylococcus aureus 252R Streptococcus faecalis CN-478 Bacillus subtilis ATCC 6633 KLebsiella pneumoniae 5038 Enterobacter cloacae TU-680 Serratia marcescens 7006 Ffeeudomonas aeruginosa 4096 Ifeeudomonas putida ATCC 12633 Zwiazek wytwo¬ rzony sposobem wedlug wyna¬ lazku 1/ .— 2- 0,78 25 12.5 0,2 0,05 4-0,05 S0,05 0,39 1,56 MIC Cug/ml) Cefmenoxime ::::::~2:::::::::: 1,56 ;ioo 100 1,56 0,1 0,1 0,2 6,25 100 Oeftazidime ^ 5 12,5 100 100 3,13 0,1 0,2 0,2 0,78 12,5 1/ /6R,7R/-7- / /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7- acetamjdoj -3-/l-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4 2/ ttras /6R,7R/-7-Z7z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/metoksyimino/acetamido7-3-/7l -me- tylo-1 H-tetrazolilo-5/tiometylo7-3-cefemokarboksylowy-4 3/ /6R,7R/-7- {/z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//2-karboksypropylo-2/oksyimino7aceta- midoj -3-/l-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4.Eteialanie ochronne przed zakazeniem bakteryjnym u myszy. Badania przeprowadzono stosujac 10 myszy plci meskiej o wadze 2o + 1 g w przypadku kazdej dawki zwiazku, Myszy zakazono sródotrzewnowo bakteriami w ilosci wystarczajacej dla usmiercenia ich w ciagu 24 godzin, wprowadzajac bakterie w 6% mucynie. Badany zwiazek podano sródmiesniowo w godzi¬ ne po zakazeniu* W 7 dni po zakazeniu oceniono stopien przezycia i okreslono srednia sku¬ teczna dawke EDuQ (mg/kg)# Wyniki podano w tablicy 2f przy czym w nawiasach podano' równiez wartosci minimalnego stezenia inhibitujacego MIC (ug/ml) dla kazdego badanego zwiazku, okreslone tak jak opisano w poprzednim tescie.Tablica 2 fedany drobnoustrój T— Staphylococcus aureus Snith Escherichia coli KC-14 Serratia marcescens 7006 Zwiazek wytwo¬ rzony sposobem wedlug wyna¬ lazku 1/ s 1,71 (1,56) 0,05 (0,05) 0,14 (0,05) EI^Q (mg/kg) 2/ Cefmenoxime ' i:::::::^:::::::::: 5,32 (1,56) 0,16 (0,025) 0,88 (0,2) Oeftazidime E 7,85 (12,5) 0,08 (0,05) 0.54 (0,1) 3/145 509 5 c.d. tablicy 2 Citrobacter freundii 0,06 0,19 0f15 916 (0,1) (0,05) (0,39) Orterobacter aerogenes 1#37 23,85 26,38 816 (0,39) (1,56) (6,25) 1/3-/ - Ifezwy zwiazków sa takie same jak wymienione pod tablica 1* Wynalazek ilustruja ponizsze przyklady, przy czym przyklady I-XII dotycza wytwa¬ rzania produktów, a przyklady XI11-XVI dotycza wytwarzania substratów.Przyklad I. /i/ W 150 ml chloroformu dysperguje sie 13,12 g hydratu jodo- wodorku /6R,7R/-7-amino-3-/l-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylanu-4 i dodaje sie 17,8 ml pirydyny i 3,1 g trójetyloaminy w temperaturze od -10 do 0°C. Mieszanine miesza sie w temperaturze od -5 do 0°C w ciagu 2 godzin. l2l W 200 ml N,l^dwumetyloacetamidu dysperguje sie 6,75 g kwasu /Z/-2-/2-amino- tiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirxlidonylo-3/oksyimino/octowego. Do powstalej zawiesiny dodaje sie 2f6 g trójetyloaminy i zawiesine ogrzewa sie do temperatury 65-70°C uzyskujac klarowny roztwór* R) ochlodzeniu roztworu dodaje sie don 50 ml chloroformu. Mieszanine chlodzi sie do temperatury od -20 do -25°C i w tej temperaturze wkrapla sie 3,84 g tlenochlorku fosforu, lak otrzymana mieszanine wkrapla sie w temperaturze od -15 do -20°C do roztworu otrzymanego w punkcie /1/. Rwstala mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w cia¬ gu 15 minut, po czym dodaje sie 200 ml 15# wodnego roztworu chlorku sodowego. Mieszanine miesza sie w temperaturze 0-5°C w ciagu 20 minut. Warstwe wodna oddziela sie, przemywa chloroformem i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac chloroform. Otrzymana war¬ stwe wodna przepuszcza sie przez kolumne wypelniona 700 ml niejonizowej. zywicy "Diaion HP-20" (Mitsubishi Chemical Industries Ltd., Japonia). Kolumne przemywa sie okolo 6 litra¬ mi wody i nastepnie zadany produkt eluuje sie 2o# roztworem metanolu. Eluat zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem do objetosci okolo 400 ml i liofilizuje. Otrzymuje sie 9,7 g (6R,7R)-7- {/z/-2-/2^aminotiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyiminq7acetamido j -3- -/1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylanu-4 w postaci jasnozóltego proszku. Wydajnosc 70& Widmo NMR (E^O) S : 2,2-2,7/2H,m/, 3,1-3,8 /4H,m/, 5,05/lH,t, J=7Hz/, 5,28 /lH,d, J=5Hz), 5,36 /1H, d, J=14Hz/, 5,63 /1H, d, J=l4ffe/, 5,87 /1H, d, J=5Hz/, 6,98 /1H, s/, 8,1o/2H, t, J=7,5Hz/, 8,57 /1H, t, J,7,5Hz/, 8,98 /2H, df J=7,5Hz/. [ c^ A° = -38,0° (C=1, ft0).Przyklady II-VIII. Sposobem opisanym w przykladzie I otrzymuje sie naste¬ pujace zwiazki.II. /6R,7R/-7- [/^-2-/2-aminotiazolil0^^ acetaminol -3-/1 -pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4.Widmo NMR (D^O) S : 2,1-2f7/2H,m/f 3,1-3,7 /4H,m/, 4,9-5,5 /4H,m/, 5,79 /lH,d,J=5Hz/, 6,92 /1H, s/, 7,8-9,1 /5H,m/ f ^Jl° = +45,70 (CVI, P^O) III. /6R,7R/-7- i /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//2-pirolidonylo-3/oksyimino7aceta- midoj -3-/4-karbamoilo-1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4 o temperaturze topnienia 163-166°C (rozklad).Widmo NMR (CF3CC^D) 5,9-6,2 (1H, m), 7,35 (1H, s), 8,4-8,7 (2H, m), 9,1-9,4 (2H, m).IV. /6R,7R/-7- { /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/72-pirolidonylo-3/oksyimino7aceta- midoj -3-/4-hydroksymetylo-1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4 o temperaturze topnie¬ nia 162-184°C (rozklad).6 145 509 Widmo NMR (DgO) 6 : 2,3-2,7 (2H, m), 3,1-3,7 (4H, m), 4,8-5,0 (2H, m), 5,03 (2H, s), 5,24 (1H, d, J=5 te), 5,3-5,6 (1H, m), 5,83 (1H, d, J=5 Hz), 6,81 (1H, s), 7,8-8,2 (2H, m), 8,6-9,0 (2H, m).V, /6R, 7R/-7- { /z/-2-/2-aminotia2olilo-4/-2-/72-pirolidonylo-3/oksyimino7acetami doj-3-/3-hydroksymetylo-1-pirydyniometylo/-3-cefemokarboksylan-4 o temperaturze topnienia 128-135°C (rozklad).Widmo NMR (E^O) 5" : 2,1-2,8 (2H, m), 3,1-3,8 (4H, m), 4,86 (2H, s), 4,9-5,1 (2H, m), 5,27 (1H, d, J«5 Hz), 5,3-5,6 (1H, m), 5,83 (1H, d, J=5 Hz), 6,96 (1H, s)f 7,7-8,2 (1H, m), 8,3-8,6 (1H, m), 8,6-9,1 (2H, m).VI. /6R, 7R/-7- f /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//2-piperydonylo-3/oksyiminq7aceta- mido J -3-//1 -metylo-1 H-tetrazolilo-5/tiometylg7-3-cefeTnokarboksylan-4 sodowy.Widmo NMR (E^O) $ X 1,5-2,3 (4H, m), 3,0-3,4 (2H, m), 3,4-3,6 (2H, m), 4,50 (3H, m), 4,0- 4.2 (2H, m), 5,03 (1Hf d, J=5 Hz), 5,63 (1H, d, J=5 te), 5,85 (1H, s).VII, /6R,7R/-7- { /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//2-pirolidonylo-3/oksyiminq7aceta- mido J -3-//1 -metylo-1 H-tetrazolilo-5/tiometylog/-3-cefemokarboksylan sodowy.Widmo NMR (DMS0-dA) 5" : 2,1-2,5 (2H, m), 3,1-3,5 (2H, m), 3,94 ( 3H, s ), 4,2 - 4,5 , ( 2H, m ), 4,6 - 4,8 ( 1H, m ), 5,03 ( 1H, d, J = 5 Hz), 5,5 - 5,8 ( 1Hfm ), 6,76 ( 1H, s ), 7.3 (2H, szeroki s), 8,00 (1H, s), 9,55 (1H, szeroki )# VIII. /6r,7R/-7- { /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//l-metylo-2-pirolidonylo-3/oksy- iminq7acetamido^ -3-/71 -metylo-1 H-tetrazolilo-5/tiometylq7-3-cefemokarboksylan-4 sodowy.Widmo NMR (E^O) 4,3 (2Hf m), 4,9-5,3 (2H, m), 5,73 (1H, d, J»5 Hz), 7,00 (1H, s).Przyklad IX. hi W 30 ml N,l^dwumetyloacetamidu dysperguje sie 3,0 g kwasu 7^minocefalosporanowego i dodaje sie 3 g trójmetylochlorosilanu i 6,6 ml pirydyny. Mie¬ szanine miesza sie w temperaturze 5-15°C uzyskujac klarowny roztwór, który nastepnie chlodzi sie do temperatury -25 do -2o°C. /2/ W 80 ml N,N-dwumetyloacetamidu dysperguje sie 2,7 g kwasu /Z/-2-/2-eminotia- zolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino/octowego i do zawiesiny dodaje sie 1,1 g trójetyloaminy. Zawiesine miesza sie w temperaturze 65-70°C uzyskujac klarowny roztwór, który chlodzi sie do temperatury pokojowej. Do roztworu dodaje sie 2o ml chloroformu i wkrapla sie 1,65 g tlenochlorku fosforu, mieszajac roztwór w temperaturze -30 do -20°C.Mieszanke miesza sie w tej temperaturze w ciagu 10 minut* po czym wkrapla ja w tempera¬ turze -25 do -15°C do roztworu otrzymanego w punkcie /i/ i powstala mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 30 minut. Do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 100 ml wody i 200 ml octanu etylu i calosc miesza w temperaturze 0-10°C w ciagu 30 minut. ferstwe organiczna oddziela si e, przemywa woda i ekstrahuje 5% wodnym roztworem wodoroweglanu sodowego. Ekstrakt wprowadza sie do kolumny wypelnionej zywica Diaion HP-20 i zadany produkt eluuje woda. ELuat zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem do sucha. Do pozostalosci do¬ daje sie aceton i odsacza sie osad. Otrzymuje sie 2,9 g (6R, 7R)-7- £ /z/-2-/2-aminotia- zolilo-4/-2-//(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyiminq_7acetamidoJ -cefalosporanianu sodowego.Widmo NMR (E^O)?: 2,12 (3H, s), 2,3-2,6 (2H, m), 3,2-3,9 (4H, m), 4,75 (1H, d, J-13 te), 4,95 (1H, d, J=13 te), 5,10 (1H, t, J=7 te), 5,25 (1H, d, J=5 te), 5,85 (1H, d, J«5 te), 7,08 (1H, s).Przyklad X. Do mieszaniny 4o ml N, N-dwumetyloacetamidu i 1,85 g trójbutylo- ' aminy dodaje sie 1,35 g kwasu /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^7(3S)-2-pirolidonylo-3/- oksyimina/octowego i mieszanine ogrzewa sie do temperatury 6o-70°C uzyskujac klarowny roztwór. Roztwór chlodzi sie do temperatury pokojowej i dodaje don 20 ml roztworu chlorku metylenu zawierajacego 1,65 g (6R, 7R)-7-aminocefalosporanianu III-rz.butylu. Do miesza¬ niny dodaje sie 0,88 g 1-hydroksybenzotriazolu i 1,35 g N, N'-dwucykloheksylokarbodwuimidu w temperaturze 0-5°C i calosc miesza w tej temperaturze w ciagu 5 godzin. Do mieszaniny. 145 509 7 reakcyjnej dodaje sie 50 ml wody i 100 ml octanu etylu i calosc miesza sie# Substancje nierozpuszczalne odsacza sie, a warstwe organiczna przesaczu oddziela sie, suszy i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie 30 ml kwasu trójfluoro- octowego i 1 ml anizolu i mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu 20 minut, po czym zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie 15 ml wody i mieszanine lekko alkalizuje sie wodoroweglanem sodowym. Substancje nierozpuszczalne odsacza sie, a przesacz wprowadza sie do kolumny wypelnionej 150 ml zywicy Dlaion HF-20* Zadany produkt eluuje sie woda, a eluat zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem.Otrzymuje sie 1,2 g (6R, 7R)-7- ¦£ /z/-2-/2-aminotiazolilo-4-/2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/- oksyimino/acetamido j cefalosporanianu sodowego. Wlasnosci fizykochemiczne tego produktu sa identyczne z wlasnosciami produktu otrzymanego w przykladzie UX* Przyklad XL /i/ W 30 ml tetrahydrofuranu rozpuszcza sie 2,5 g (6R, 7R)-7- amino-3-/l-metylo-lH-tetrazolilo-/5-tiometylo-3-cefemokarboksylanu-4 benzhydrylu i roztwór chlodzi sie do temperatury -20 do -15°C. lii Do mieszaniny 60 ml N, N-dwumetyloacetamidu i 0,8 g trójetyloaminy dodaje sie 2,0 g kwasu /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino-7octowego i mie¬ szanine ogrzewa sie do temperatury 65-75°C}uzyskujac klarowny roztwór. Roztwór chlodzi sie do temperatury -20 do -15°C i wkrapla sie don 1,1 g chloroweglanu izobutylu w tempe¬ raturze -20 do -15 C, po czym calosc miesza sie w tej temperaturze w ciagu 30 minut.Mieszanine dodaje sie w temperaturze -2o do -15°C do roztworu otrzymanego w punkcie /i/ i calosc miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 2 godzin, a nastepnie w ciagu 1 go¬ dziny w temperaturze -5 do 0°C. Do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 50 ml zimnej wody i 100 ml octanu etylu i calosc miesza sie. Warstwe organiczna oddziela sie i przemywa wo¬ da, po czym zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie 1 g anizolu i 30 ml kwasu trójfluorooctowego i mieszanine miesza w temperaturze pokojowej w ciagu 30 minut. Mieszanine zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem i do pozosta¬ losci dodaje sie 20 ml wody. Wodna mieszanine alkalizuje sie wodoroweglanem sodowym. Sub¬ stancje nierozpuszczalne odsacza sie, a przesacz wprowadza sie do kolumny wypelnionej 300 ml zywicy Diaion HP-20. Kolumne przemywa sie woda, a zadany produkt eluuje sie 10% wodnym roztworem metanolu. Eluat zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Do pozostalosci dodaje sie aceton, a powstaly osad odsacza sie. Otrzymuje s5 e 1,1 g (6R, 7R)- 7- {/z/-2-/2-aminotiazolilo-A/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino_7acetamido \ -3-/1 -me- tylo-1 H-tetrazolilo-5/tiometylo-3-cefemokarboksylanu sodowego.Widmo NMR (DMS0-d6) 5" : 2,0-2,5 (2H, m), 3,1-3,5 (2H, m), 3,93 (3H, m), 4,1-4,5 (2H, m), 4,6-4,8 (1H, m), 5,04 (1H, d, J=5 Hz), 5,5-5,7 (1H, m), 6,76 (1H, s), 7,3 (2H, szeroki s), 7,98 (1H, s), 9,57 (1H, szeroki).Przyklad XII. /i/ W mieszaninie 15 ml N, N-dwumetyloacetamidu i 5 ml chlo¬ roformu dysperguje sie 1,65 g kwasu (6Rf 7R)-7-amino-3-/l-metylo-1H-tetrazolilo-5/tio- metylo-3-cefemokarboksylowego-4 i dodaje sie 3,0 g N,Okbis/trójmetylosililo/acetamidu.Mieszanine miesza sie w temperaturze 10-20°C uzyskujac klarowny roztwór, który chlodzi sie do temperatury -30 do -2o°C. /2/ W 10 ml chloroformu rozpuszcza sie 44o mg dwumetyloformamidu i do roztworu wkrapla sie w temperaturze 0-5°C 820 ml chlorku oksalilu. Mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 30 minut, po czym chlodzi sie do temperatury -30 do -25°C. /3/ W 4o ml N,r*-dwumetyloacetamidu dysperguje sie 1,35 g kwasu /z/-2-/2-amino- tiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7octowego i do zawiesiny dodaje sie 0,55 g trójetyloaminy. Mieszanine ogrzewa sie do temperatury 65-70°C uzyskujac klarowny roztwór, który chlodzi sie do temperatury pokojowej. Do roztworu dodaje sie 10 ml chloro¬ formu i mieszanine chlodzi do temperatury -30 do -2o°C. Do tej mieszaniny, mieszajac w temperaturze -30 do -20°C, wkrapla sie roztwór otrzymany w punkcie lii i dalej miesza w tej samej temperaturze w ciagu 15 minut. Mieszanine reakcyjna wkrapla sie w temperaturze -25 do -15°C do roztworu otrzymanego w punkcie /i/ i calosc miesza sie w tej samej tempe¬ raturze w ciagu 30 minut. Do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 50 ml wody i 150 ml chloro-8 145 509 formu i mieszanine lekko alkalizuje sie wodoroweglanem sodowym# Warstwe wodna oddziela sie i zateza pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac chloroform, po czym wprowadza do kolumny wypelnionej 300 ml zywicy Diaion HP-20. Kolumne przemywa sie woda, a zadany produkt eluuje sie 10?6 wodnym roztworem metanolu. Eluat zateza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem i do pozostalosci dodaje sie aceton, a powstaly osad odsacza sie. Otrzymuje sie 1,8 g (6R, 7R)-7- ^/z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7acetamido\ -3- /l-metylo-1H-tetrazolilo-5/tiometylo-3-cefemokarboksylanu-4 sodowego. Wlasnosci fizyko¬ chemiczne tego produktu sa identyczne z wlasnosciami produktu otrzymanego w przykladzie XI* Przyklad XIII. /i/ W 150 ml acetonu rozpuszcza sie 31,8g 2-hydroksyimino- -3-keto-n-maslanu etylu i do roztworu dodaje sie 83 g bezwodnego weglanu potasowego. Do mieszaniny, mieszajac w temperaturze 2o-25°C, dodaje sie 33 g 3-bromo-2-pirolidonu i ca¬ losc miesza w tej samej temperaturze w ciagu 1 godziny. Do mieszaniny dodaje sie 1 litr wody z lodem i ekstrahuje octanem etylu. Ekstrakt suszy sie i zateza pod zmniejszonym cis^ nieniem usuwajac rozpuszczalnik. Pozostalosc* krystalizuje sie z eteru izopropylowego i od¬ sacza sie krysztaly, które rekrystalizuje sie z octanu etylu. Otrzymuje sie 32 g /z/-2- /"/2-pirolidonylo-3/oksyiminq/-3-keto-n-masianu etylu w postaci bezbarwnych igiel o tempe¬ raturze topnienia 92-93°C. /2/ W 60 ml chlorku metylenu rozpuszcza sie 14,5 g /z/-2-/72-pirolidonylo-3/oksy- iminq7-3-keto-n-maslanu etylu i dodaje sie 9,6 g chlorku sulfurylu. Mieszanine miesza sie w temperaturze 15-25°C w ciagu 40 godzin, po czym zateza do sucha pod zmniejszonym cis¬ nieniem. Rzostalosc rozpuszcza sie w chloroformie, a roztwór przemywa sie woda. Roztwór chloroformowy suszy sie i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Ebzostalosc krysta¬ lizuje sie z eteru i odsacza sie krysztaly, które rekrystalizuje sie z octanu etylu. Otrzy¬ muje sie 6,5 g /z/-2-/72-pirolidonylo-3/oksyimino7-3-keto-4-chloro-n-maslanu etylu o tem¬ peraturze topnienia 102-103°C. /3/ Do 200 ml etanolu dodaje sie 27,7 g /z/-2-//2-pirolidonylo-3-/oksyimino7-3-keto- 4-chloro-n-maslanu etylu i 7,6 g tiomocznika i do tej mieszaniny oddaje sie 20 g N,fWwu- metyloaniliny. Mieszanine miesza sie w temperaturze 2o-25°C w ciagu 2 godzin, po czym za¬ teza sie do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Pozostalosc rozpuszcza sie w chloroformie, a roztwór przemywa sie kolejno woda z wodnym roztworze wodoroweglanu sodowego. Roztwór chloroformowy suszy sie i zateza pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik. Po¬ zostalosc krystalizuje sie z izopropanolu i odsacza sie krysztaly. Otrzymuje sie 17,5 g /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-^72-pirolidonylo-3/oksyimino7octanu etylu o temperaturze topnienia 156-158°C.Iki W 60 ml metanolu dysperguje sie 3,0 g /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/72-piroli- donylo-3/oksyimino7octanu etylu i do zawiesiny dodaje sie 10 ml 2n wodorotlenku sodowego.Mieszanine utrzymuje sie w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna w ciagu 30 minut.R ochlodzeniu mieszanine neutralizuje sie 20 ml 1n kwasu solnego i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Rzostalosc krystalizuje sie z 10 ml wody z lodem, a krysztaly odsacza sie i suszy w temperaturze 70°C pod zmniejszonym cisnieniem. Otrzymuje sie 2,2 g kwasu /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-//2-pirolidonylo-3/oksyimino7octowego -w postaci bezbar¬ wnych slupków o temperaturze topnienia 158-159°C (rozklad).Przyklad XIV. hi W 30 ml acetonu dysperguje sie 2 g /R/-3-hydroksy-2-pi- rolidonu /Tetrahedron Letters, 2617 (1971)/ i w temperaturze pokojowej dodaje sie do za¬ wiesiny 15 ml 2n wodnego roztworu wodorotlenku sodowego uzyskujac klarowny roztwór.Roztwór chlodzi sie do temperatury -3 do -5°C i dodaje sie don 5,7 g chlorku p-tolueno- sulfonylu. Mieszanine miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 1 godziny i w tempera¬ turze 10-15°C w ciagu nocy. Mieszanine zakwasza sie do pH 2 dodajac okolo 10 ml 2n kwasu solnego i mieszanine zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac aceton. Tak otrzymana1*5 509 9 mieszanine ekstrahuje sie chloroformem, a ekstrakt przemywa sie nasyconym roztworem chlorku sodowego* Roztwór chloroformowy suszy sie i zateza pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac rozpuszczalnik, fbzostalosc krystalizuje sie z eteru, a krysztaly rekrystalizuje sie z octa¬ nu etylu. Otrzymuje sie 3,5 g /R/-3-/p-tosyloksy/-2-pirolidonu o temperaturze topnienia 148-149°C f-iJB - +17,7 (C=1, CH3OH).Ul W 5 ml dwumetylosulfotlenku rozpuszcza sie 1,07 g /z/-2-/2-aminotiazolilo-^/- -2-/hydroksyimino/octanu etylu i do roztworu dodaje sie 1 g weglanu potasowego i 1,53 g /R/-3-/p-tosyloksy /-2-pirolidonu. Mieszanine miesza sie w temperaturze pokojowej w ciagu nocy, po czym do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie wode. Mieszanine ekstrahuje sie chloro¬ formem. Ekstrakt przemywa sie woda, suszy i zateza do sucha pod zmniejszonym cisnieniem.Pozostalosc krystalizuje sie z eteru izopropylowego, a-krysztaly rekrystalizuje sie z wod¬ nego roztworu metanolu. Otrzymuje sie 0,86 g /z/-2-/2-aminotiazolilo-4/-2-/7(3S)-2-pi- rolidonylo-3/oksyimino7octanu etylu o temperaturze topnienia 160-163°C. [^J^ = 15,9°C (C=1, CI^OH). /3/ W mieszaninie 3 ml metanolu i 1 ml wody rozpuszcza sie 0,27 g wodorotlenku so¬ dowego i do roztworu dodaje sie 1 g estru otrzymanego w punkcie /2/, po czym mieszanine miesza sie w temperaturze 2o°C w ciagu 1 godziny. Mieszanine reakcyjna zakwasza sie do pH 5 dodajac M3% kwas solny i zateza sie pod zmniejszonym cisnieniem usuwajac metanol. R- zostalosc zakwasza sie do pH 3 1096 kwasem solnym i mieszanke chlodzi sie lodem. Wytracone krysztaly odsacza sie, przemywa metanolem i sus2y. Otrzymuje sie 730 mg kwasu /Z/-2-/2- aminotiazolilo-A/-2-/7(3S)-2-pirolidonylo-3/oksyimino7octowego o temperaturze topnienia 199-200°C (rozklad). [^ J^ „ -50,8° (C-1, l^O)• Przyklad XV. Rstepuje sie tak jak w przykladzie XIV, stosujac /5/-3-hydro- ksy-2-pirolidon. Otrzymuje sie kwas /z/-2-/2-aminotia2olilo-4/-2-/7(3R)-2-pirolidonylo- -3/oksyimino7octowego o temperaturze topnienia 198-200°C (rozklad). f^JjP a +50,5° (C=1, P^O).Przyklad XVI. W 85 ml wody rozpuszcza sie 250 g jodku sodowego i 32,5 g pirydyny i mieszanine ogrzewa sie do temperatury 70°C. Fb dpdaniu 50 g kwasu 7-formamido- cefalosporanowego calosc miesza sie w temperaturze 70°C w ciagu 1 godziny. R ochlodzeniu mieszaniny dodaje sie don 250 ml metanolu. Tfestepnie do mieszaniny wkrapla sie 250 ml 2296 metanolowego roztworu chlorowodoru w temperaturze 18-20° i calosc miesza sie w tej samej temperaturze w ciagu 1,5 godziny. Wytracony chlorek sodowy odsacza sie, a do prze¬ saczu dodaje sie 80 ml wody. Odczyn przesaczu doprowadza sie do pH 3,5-3,7 dodajac piry¬ dyne. Wytracone krysztaly odsacza sie, przemywa woda i metanolem, po czym suszy. Otrzymuje sie 33 g hydratu jodowodorku /6R, 7R/-7-amino-3-/l -pirydyniometylo/-3-cefemokarboksyla- nu-4 o temperaturze topnienia 160-163°C (rozklad). PL PL PL PL PL PL PL PL