PL101100B1 - Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny - Google Patents

Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny Download PDF

Info

Publication number
PL101100B1
PL101100B1 PL18788676A PL18788676A PL101100B1 PL 101100 B1 PL101100 B1 PL 101100B1 PL 18788676 A PL18788676 A PL 18788676A PL 18788676 A PL18788676 A PL 18788676A PL 101100 B1 PL101100 B1 PL 101100B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
mucosa
factor
water extraction
current water
internal
Prior art date
Application number
PL18788676A
Other languages
English (en)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed filed Critical
Priority to PL18788676A priority Critical patent/PL101100B1/pl
Publication of PL101100B1 publication Critical patent/PL101100B1/pl

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywa¬ nia suchych koncentratów, zawierajacych czynni/k przeciwanemiczny, /tak zwany czynnik wewnetrzny (lintrinsic factor), z blony sluzowej zoladków wie¬ przowych, wzglednie ich czesci, zawierajacych glównie ten czynnik, to znaczy odzwierników.
Koncentraty czynnika przectiwanemicznego znaj¬ duja zastosowanie do siporzadzania róznych farma¬ ceutycznych preparatów przeciwanemicznych, za¬ wierajacych witamine B^ czytli glówny czynnik krwiotwórczy, który jest przyswajalny przy poda¬ waniu doustnym wylacznie w obecnosci czynnika wewnetrznego.
W literaturze patentowej opisano szereg sposo¬ bów wydzielania i oczyszczania czynnika wewnetrz¬ nego, które sa jednak skomplikowane i uciazliwe, zwlaszcza przy stosowaniu w duzej skali produk¬ cyjnej. I tak na przyklad ekstrakcje przy pomocy wodnych roztworów czynników proteolitycznych podane w opisach patentowych Stanów Zjednoczo¬ nych Ameryki nr nr 2937120, 3020204 lulb opisie patentowym francuskim nr 1095593 sa kosztowne z racji otrzymywania duzej ilosci ekstraktów o malym stezeniu czynnika wewnetrznego, wzgled¬ nie stosowania uciazliwych i dlugotrwalych ope¬ racji, takich jak dializa i liofilizacja. Równiez me¬ toda opisana w opisie patentowym. Stanów Zjed¬ noczonych Ameryki nr 3015608, polegajaca na ekstrakcji czynnika wewnetrznego z blony od- zwiernika dwu- do pieciokrotna objetoscia wody i suszenie tak otrzymanych rozcienczonych eks¬ traktów w suszarkach rozpylowych, daje produkt, zawierajacy duze ilosci balastów bialkowych i tluszczów, obnizajacych jego aktywnosc, s Metody wydzielania czynnika wewnetrznego z roztworów przez wysalanie solami, jak siarcza¬ nem amonowym lub sodowym, podane w brytyj¬ skim opisie [patentowym nr 961084 i polskim nr 41903, sa wysoce kosztowne ze wzgledu na koniecz- io nosc stosowania czystych- odczynników, a uzyski¬ wany produkt jest mocno zanieczyszczony zwiazka¬ mi nieorganicznymi, obnizajacymi jego aktywnosc.
Stwierdzono, ze mozna prostym sposobem otrzy¬ mac suche koncentraty czynnika wewnetrznego is z blony sluzowej zoladków wieprzowych lub ich czesci odzwdernikowej poprzez przeciwpradowa ekstrakcje wodna rozdrobnionej sluzówki, prowa¬ dzona w temperaturze 5 do 10°C w czasie 1 do 2 godzin w srodowisku zblizonym do obojetnego, ko¬ rzystnie przy pH=6—8, w którym nie wystepuje szkodliwe dla procesu dzialanie enzymów trawien¬ nych sluzówki. Ekstrakty oddziela sie od tkanki sluzowej Lprzez wirowanie, po czym ekstrakt piierw- szy o duzej, jak dla tego rodzaju roztworów, kon¬ centracji czynnika wewnetrznego, wynoszacej 2—3%, kieruje sie do dalszego przerobu, a pozo¬ stale ekstrakty, powstajace w przeciwpradowej ekstrakcji, zawierajace nizsza koncentracje czyn¬ nika wewnetrznego, zawraca sie do nastepnych ko- lejnych ekstrakcji swiezej porcji sluzówki. 253 101100 4 Ekstrakit pierwszy, nie wymagajacy zatezenia ze wzgledu na duze stezenie czynnika wewnetrznego, zakwasza sie za (pamoca kwasów mineralnych i/lub siilnie kwasnych kationitów w formie wodorowej typu Wofatyt KPS lub Amiberldit IR-120 do pH=3,5—4,5 i wytraca balasty bialkowe, których punkty izoelektryczne leza w tym zakresie pH.
Wytracone balasty bialkowei odwirowuje sie i wy¬ rzuca, a klarowny filtrat suszy rozpylowo i uzy¬ skuje surowy, suchy koncentrat czynnika wewnetrz¬ nego, zawierajacy tluszcze i substancje barwne, ob¬ nizajace jego aktywnosc.
W celu zwiekszenia aktywnosci produktu uzy¬ skany surowy koncentrat czynnika wewnetrznego miesza sde w temperaturze pokojowej z rozpusz¬ czalnikami organicznymi z grupy chlorowcoweglo- wodorów alifatycznych, korzystnie z trójchloroety¬ lenem i przez filtracje oddziela rozpuszczalnik lacz¬ nie z zanieczyszczeniami, zawierajacymi tluszcze i substancje barwne, a osad suszy pod próznia w temperaturze, do 30°C i uzyskuje oczyszczony suchy koncentrat czynnika wewnetrznego, uzywany w polaczeniu z witamina B^, do sporzadzania do¬ ustnych preparatów farmaceutycznych o dzialaniu przeciwaneinicznym.
Gotowy koncentrat czynnika wewnetrznego stan¬ daryzuje sie znanymi metodami mikrobiologicznymi na aktywnosc wiazania witaminy B12 w kompleks z czynnikiem wewnetrznym, latwo przyswajalnym przy podawaniu doustnym: 1 n,g witaminy B12 jest zwiazany przez 5 do 10 mg czynnika wewnetrznego, w zaleznosci od stopnia jego oczyszczenia. Wyniki ba¬ dan aktywnosci czynnika wewnetrznego metodami mikrobiologicznymi sa zgodne z badaniami radio¬ logicznymi przy stosowaniu radioaktywnej wita¬ miny Bi2, zawierajacej Co57, a preparaty, sporza¬ dzone z wyzej opisanych koncentratów, sa terape¬ utycznie czynne w badaniach klinicznych.
Sposób otrzymywania suchych koncentratów czynnika wewnetrznego wyjasniaja bardziej szcze¬ gólowo ponizsze przyklady.
Przyklad I. 200 kg mrozonej blony sluzowej zolajdków wieprzowych rozdrabnia sie i ekstrahuje przeciwpradowo, uzywajac do pierwszej ekstrakcja swiezej porcji surowca zwierzecego drugi ekstrakt, pochodzacy, z poprzedniej porcji ekstrahowanej sluzówki i zawierajacy juz czynnik wewnetrzny.
Ekstrakcje prowadzi sie przez 2 godziny w tempe¬ raturze ponizej 10°C, po czym oddziela sie pierw¬ szy ekstrakt od tkanki miesnej na wirówce. Od¬ dzielona tkanke miesna poddaje sie drugiej eks¬ trakcji przy pomocy 300 1 wody o pH—6^8; od¬ dzielony drugi ekstrakt w ilosci okolo 280 1 wy¬ korzystuje sie do pierwszej ekstrakcji nastepnej porcji sluzówki. Ekstrakt pierwszy w ilosci 200— —240 1 o zawartosci 2rr&*k suchej masy zakwasza sie 10% kwasem solnym do pH=3,5—4,5 i wytraca balasty bialkowe o punkcie Bioelektrycznym, le¬ zacym w tym przedziale, pH. Wytracone balasty bialkowe oddziela sie na ultrawirówce i odrzuca jako odpad, a uzyskany klarowny filtrat zateza sie do sucha w typowych wyparkach rozpylowych.
Uzyskuje sie okolo 2,5 kg surowego czynnika we¬ wnetrznego w postaci kremowego proszku, posiada¬ jacego zdolnosc wiazania In g witaminy B^ w 10— —'15 mg substancji.
Przyklad II. 200 kg mrozonej blony sluzowej odzwferników zoladków wieprzowych rozdrabnia sie i ekstrahuje przeciwpradowo, jak podano w przykladzie I. Ekstrakt pierwszy w ilosci 200 do 240 1 o zawartosci 2^3% suchej masy zadaje sie przy mieszaniu 2-^2,5 kg kationitu w formie H+ (Wofatylt KPS lub Amberflit IR120) az do osiagnie¬ cia pH=3,5—4,5. W trakcie dodawania kationitu w wyniku wymiany jonowej uwalnia sie kation H+, zakwaszajacy ekstrakt i powodujacy wytracenie balastów bialkowych, nie zawierajacych czynnika wewnetrznego. Wytracone bialka odwirowuje sie na ultrawirówce lacznie z kationitem, a klarowny ekstrakt przerabia dalej, jak w przykladzie I.
Uzyskuje sie okolo 2,5 kg surowego czynnika we¬ wnetrznego w formie suchego proszku, który wiaze aktywnie 1 *xg witaminy B^ w 10—15 mg sub¬ stancji.
Przyklad III. 2,5 kg surowego czynnika we¬ wnetrznego, otrzymanego wedlug przykladu I i II w postaci proszku, wiazaeego atafeywnie 1 ttg wi¬ taminy Bu w 10—15 mg substancji, poddaje sie w temperaturze pokojowej dwukrotnej ekstrakcji ,piecio litrowymi porcjami trójchloroetylenu, mie¬ szajac kazdorazowo przez 1—2 godzin i odsaczajac faze ciekla. Odtluszczony osad suszy sie pod próz¬ nia w temperaturze do 30°C.
Uzyskuje sie 2—2,2 kg odtluszczonego i pozba¬ wionego substancji barwnych czynnika wewnetrz¬ nego w formie suchego proszku, który wiaze 1 ng witaminy B^ w 5—10 mg substancji.
Tak uzyskany koncentrat czynnika wewnetrznego miesza sie z ekwiwalentem witaminy B^, dodaje obciazalniki i nadaje gotowa forme leku w postaci granulek lub tabletek.

Claims (3)

Zastrzezenia, patentowe
1. Sposób otrzymywania suchych koncentratów, zawierajacych czynnik przeciwanemiczny, tak zwa- 45 ny czynnik wewnetrzny (intrinsic factor) z blony sluzowej zoladków wieprzowych lub ich czesci od- zwiernikowej, znamienny tym, ze rozdrobniona sluzówke poddaje sie pnzeciwpradowej ekstrakcji wodnej w temperaturze 5—10^ przy pH zblizo- 50 nym do obojetnego, korzystnie pH=6—8, ekstrakty oddziela od czesci stalych przez wirowanie, eks¬ trakt glówny, zawierajcy najwieksze stezenie czynnika wewnetrznego zakwasza sie do pH=3,5— —4,5 wytracony osad bialek odwirowuje, a kla- 55 równy filtrat suszy rozpylowo i uzyskany surowy, suchy koncentrat czynnika wewnetrznego oczysz¬ cza sie z tluszczu i suibstancji barwnych przez wy¬ mieszanie w temperaturze pokojowej z roz¬ puszczalnikami organicznymi z grupy chlorowco- weglowodorów alifatycznych, odsacza rozpuszczal¬ nik z zanieczyszczeniami, a osad suszy pod próznia w temperaturze do 30°C.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze uzyskany z przeciwpradowej ekstrakcji wodnej 65 sluzówki glówny ekstrakt zakwasza sie do zada-5 101100 6 nego pH za pomoca kwasów mineralnych i/lub silnie kwasnych kationitów w formie wodorowej.
3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze uzyskany z przeciwpradowej ekstrakcji wodnej sluzówki ekstrakt glówny, po usunieciu balastów bialkowych i wysuszeniu rozpylowym, poddaje sie ekstrakcji chlorowroweglowodorami alifatycznymi, korzystnie trójchloetylenem.
PL18788676A 1976-03-11 1976-03-11 Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny PL101100B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL18788676A PL101100B1 (pl) 1976-03-11 1976-03-11 Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL18788676A PL101100B1 (pl) 1976-03-11 1976-03-11 Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL101100B1 true PL101100B1 (pl) 1978-12-30

Family

ID=19975948

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL18788676A PL101100B1 (pl) 1976-03-11 1976-03-11 Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL101100B1 (pl)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5455331A (en) Enriched whey protein fractions and method for the production thereof
US4782138A (en) Process for selectively separating the alpha-lactalbumin from the proteins of whey
DE3623474C2 (de) Verfahren zur Extraktion von Lactotransferrin in der Milch und pharmazeutische Zusammensetzungen
GB1487169A (en) Production of egg white substitute from whey
EP0013055A1 (en) Process of preparing blood cell protein and heme from hemoglobin
EP0060491B1 (de) Protein (PP16), Verfahren zu seiner Anreicherung und Gewinnung sowie seine Verwendung
JP2578384B2 (ja) 天然産キモシンの回収工程
DE2456589C2 (de) Verfahren zur Herstellung eines Plasminogen-Aktivators und denselben enthaltendes Mittel
US3836686A (en) Recovery of protein hydrolysate from fish or fish products
US3758452A (en) Traction and isolectric protein precipitation detoxification and isolation of rapeseed protein by aqueous saline ex
PL101100B1 (pl) Sposob otrzymywania suchych koncentratow zawierajacych czynnik przeciwanemiczny
Jorpes et al. A method for the preparation of gastrin
CA1198672A (en) Fibrinolytically active agent and a method for the preparation thereof
Jorpes et al. The preparation of secretin
Ito et al. Milk fat globule membrane substances inhibit mouse intestinal β‐glucuronidase
US4394374A (en) Thymus gland extracts
JPH0365138B2 (pl)
JPH0653053B2 (ja) カキ肉中の低分子画分
Banks et al. The use of radioactive isotopes in immunological investigations. 2. The fate of injected 32P-containing proteins
Ortin et al. Extraction of xanthine oxidase from milk by counter-current distribution in an aqueous two-phase system
Legge et al. The chromatography and countercurrent distribution of secretin.
RU2128512C1 (ru) Способ выделения цитохрома с
EP0138784A2 (en) Arabinogalactans, their preparation and compositions containing same
JP3032508B1 (ja) イカの甲羅及びカツオの内臓を主原料とする健康食品の製造方法
WO2000027876A1 (en) Method for the isolation of lectins and the obtained purified lectins for use as a medicament