NO851495L - Syntese av cyklopropanaminosyrer og -peptider - Google Patents
Syntese av cyklopropanaminosyrer og -peptiderInfo
- Publication number
- NO851495L NO851495L NO851495A NO851495A NO851495L NO 851495 L NO851495 L NO 851495L NO 851495 A NO851495 A NO 851495A NO 851495 A NO851495 A NO 851495A NO 851495 L NO851495 L NO 851495L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- amino acid
- cyclopropyl
- peptide
- stereospecific
- acid
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 105
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims description 51
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 37
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title description 24
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title description 24
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title description 5
- 125000006317 cyclopropyl amino group Chemical group 0.000 claims description 104
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 103
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 claims description 71
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 55
- -1 3-indolyl Chemical group 0.000 claims description 47
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 47
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 45
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 43
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 41
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical group N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 36
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 34
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 31
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 30
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 claims description 23
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 23
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 claims description 23
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 20
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 18
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 claims description 18
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 17
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 17
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 17
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 15
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 13
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 11
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 11
- 125000006310 cycloalkyl amino group Chemical group 0.000 claims description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 11
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 claims description 11
- 229910052717 sulfur Chemical group 0.000 claims description 11
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 10
- VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N methyl L-phenylalaninate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 10
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UQBOJOOOTLPNST-UHFFFAOYSA-N Dehydroalanine Chemical class NC(=C)C(O)=O UQBOJOOOTLPNST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000005864 Sulphur Chemical group 0.000 claims description 7
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 7
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 7
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 6
- 150000008049 diazo compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 6
- ULAUUWLHNYSRAV-NSHDSACASA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC1CC1)C1=CC=CC=C1 ULAUUWLHNYSRAV-NSHDSACASA-N 0.000 claims description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical class [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 3
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 claims description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 2
- VHVYIBZNLBAVEM-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC1CC1 VHVYIBZNLBAVEM-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 4
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 claims 4
- OJNDWNWAHYLTHO-ZDUSSCGKSA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C1CC1 OJNDWNWAHYLTHO-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims 2
- DKVOTNPNNGKMQP-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)-3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC1CC1 DKVOTNPNNGKMQP-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims 1
- LRLIEDUIPVZCKP-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC1CC1 LRLIEDUIPVZCKP-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 1
- YZLCKGYOMVFLCV-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclopropylamino)-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC1CC1 YZLCKGYOMVFLCV-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims 1
- WSDQIHATCCOMLH-UHFFFAOYSA-N phenyl n-(3,5-dichlorophenyl)carbamate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC(NC(=O)OC=2C=CC=CC=2)=C1 WSDQIHATCCOMLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 127
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 107
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 90
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 73
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid group Chemical group C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 36
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 33
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 32
- 239000000047 product Substances 0.000 description 31
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 27
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 27
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 22
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 21
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 19
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 19
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 19
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 15
- TYXZKFKUZCKSRM-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl)methyl 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]prop-2-enoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC(=C)C(=O)OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYXZKFKUZCKSRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 14
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 14
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 13
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 13
- RFCVXVPWSPOMFJ-STQMWFEESA-N Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RFCVXVPWSPOMFJ-STQMWFEESA-N 0.000 description 12
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 12
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 11
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 11
- USBXNNHDEWHYDX-KDOFPFPSSA-N 2-[[(2r)-2-[[(2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]propanoyl]amino]acetic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 USBXNNHDEWHYDX-KDOFPFPSSA-N 0.000 description 10
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 10
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 10
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 9
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FHOAKXBXYSJBGX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 8
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 8
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 8
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101150041968 CDC13 gene Proteins 0.000 description 7
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 description 7
- YQRAKZZSVFNBSE-UHFFFAOYSA-N 1-diazo-2-methylpropane Chemical compound CC(C)C=[N+]=[N-] YQRAKZZSVFNBSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101500007657 Crotalus durissus terrificus Crotoxin chain gamma Proteins 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 6
- VMLDXUJBSPINNM-UHFFFAOYSA-N N1C(NC(=O)OC(C)(C)C)(C(O)=O)CCN1CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 Chemical compound N1C(NC(=O)OC(C)(C)C)(C(O)=O)CCN1CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VMLDXUJBSPINNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical compound [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNXIASIHZYFFRO-UHFFFAOYSA-N pyrazoline Chemical compound C1CN=NC1 DNXIASIHZYFFRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CLQUPNNJBFCKPG-LBPRGKRZSA-N (4-nitrophenyl)methyl (2s)-2-[cyclopropyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N([C@@H](C)C(=O)OCC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1CC1 CLQUPNNJBFCKPG-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 5
- OTOWPXDBYRBLEQ-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl)methyl 3-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-propan-2-ylpyrazolidine-3-carboxylate Chemical compound N1NC(C(C)C)CC1(NC(=O)OC(C)(C)C)C(=O)OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 OTOWPXDBYRBLEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 5
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002461 renin inhibitor Substances 0.000 description 5
- 229940086526 renin-inhibitors Drugs 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- MXFDTAAFXOYLGV-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-[cyclopropyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N([C@@H](C)C(O)=O)C1CC1 MXFDTAAFXOYLGV-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical group [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 4
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 4
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- BPGKVZUGBOOARZ-NSHDSACASA-N (2s)-2-[cyclopropyl-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)C1CC1 BPGKVZUGBOOARZ-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- AWHHJUZGCYAGSK-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl)methyl 5-[1-(4-methylphenyl)sulfonylindol-3-yl]-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pyrazolidine-3-carboxylate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)N1C2=CC=CC=C2C(C2NNC(NC(=O)OC(C)(C)C)(C2)C(=O)OCC=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=C1 AWHHJUZGCYAGSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 125000002755 pyrazolinyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 3
- BLGXFZZNTVWLAY-SCYLSFHTSA-N yohimbine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN3C[C@@H]4CC[C@H](O)[C@@H]([C@H]4C[C@H]33)C(=O)OC)=C3NC2=C1 BLGXFZZNTVWLAY-SCYLSFHTSA-N 0.000 description 3
- VPDSRBSISSQLPZ-GJZGRUSLSA-N (3s)-3-amino-4-[cyclobutyl-[(2s)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)N(C1CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=CC=C1 VPDSRBSISSQLPZ-GJZGRUSLSA-N 0.000 description 2
- ULXPEVUCRDQGBC-HOTGVXAUSA-N (3s)-3-amino-4-[cyclopentyl-[(2s)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)N(C1CCCC1)C(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=CC=C1 ULXPEVUCRDQGBC-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 2
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVOXXMXXWRVIOK-UHFFFAOYSA-N 3-o'-tert-butyl 3-o-[(4-nitrophenyl)methyl] 5-(3-chloropropyl)pyrazolidine-3,3-dicarboxylate Chemical compound C=1C=C([N+]([O-])=O)C=CC=1COC(=O)C1(C(=O)OC(C)(C)C)CC(CCCCl)NN1 OVOXXMXXWRVIOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ICGLPKIVTVWCFT-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzenesulfonohydrazide Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NN)C=C1 ICGLPKIVTVWCFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100460385 Caenorhabditis elegans nhx-2 gene Proteins 0.000 description 2
- 229910021591 Copper(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 2
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 2
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 2
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 2
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 2
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- UEIHHVGIYYSXAY-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide;tetrachloromethane Chemical compound O=C=O.ClC(Cl)(Cl)Cl UEIHHVGIYYSXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M copper(I) chloride Chemical compound [Cu]Cl OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N dichloromethyl Chemical compound Cl[CH]Cl ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- CCAPAEDBMPKXDM-ZDUSSCGKSA-N methyl (2s)-2-(cyclobutylamino)-3-phenylpropanoate Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)NC1CCC1)C1=CC=CC=C1 CCAPAEDBMPKXDM-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000003586 protic polar solvent Substances 0.000 description 2
- 238000000197 pyrolysis Methods 0.000 description 2
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical group C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- RLHIWMRQDUCBDO-NJGYIYPDSA-N (1S,2S)-1-amino-2-ethylcyclopropanecarboxylic acid Chemical compound CC[C@H]1C[C@@]1(N)C(O)=O RLHIWMRQDUCBDO-NJGYIYPDSA-N 0.000 description 1
- TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- DOGKAHAEQCHFHI-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-(cyclopropylazaniumyl)propanoate Chemical class OC(=O)[C@H](C)NC1CC1 DOGKAHAEQCHFHI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MCRMUCXATQAAMN-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- SIQXWEVMXTVOTK-OALUTQOASA-N (3s)-3-(tert-butylamino)-4-[cyclopentyl-[(2s)-1-methoxy-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)N(C1CCCC1)C(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(C)(C)C)C1=CC=CC=C1 SIQXWEVMXTVOTK-OALUTQOASA-N 0.000 description 1
- YSHHLFIEUCPHRE-HNNXBMFYSA-N (4-nitrophenyl)methyl (2s)-6-amino-2-(cyclopropylamino)hexanoate Chemical compound N([C@@H](CCCCN)C(=O)OCC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1CC1 YSHHLFIEUCPHRE-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RNHDAKUGFHSZEV-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane;hydrate Chemical compound O.C1COCCO1 RNHDAKUGFHSZEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYERPRNWAFFNAP-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(z)-diazomethyl]phenoxy]-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC1=CC=C(C=[N+]=[N-])C=C1 AYERPRNWAFFNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopropanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CC1 PAJPWUMXBYXFCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWWCCNVRNHTGLV-UHFFFAOYSA-N 1-phenylcyclopropane-1-carboxylic acid Chemical class C=1C=CC=CC=1C1(C(=O)O)CC1 IWWCCNVRNHTGLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MEKOFIRRDATTAG-UHFFFAOYSA-N 2,2,5,8-tetramethyl-3,4-dihydrochromen-6-ol Chemical compound C1CC(C)(C)OC2=C1C(C)=C(O)C=C2C MEKOFIRRDATTAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-2-phenylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)(C)C1=CC=CC=C1 HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQBITTBZTXUIPN-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropylurea Chemical compound CC(C)CNC(N)=O MQBITTBZTXUIPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOLRSQPSJGXRNJ-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzyl bromide Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(CBr)C=C1 VOLRSQPSJGXRNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 5-hydroxy-L-tryptophan Chemical compound C1=C(O)C=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229940000681 5-hydroxytryptophan Drugs 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N Cyclopropylamine Chemical class NC1CC1 HTJDQJBWANPRPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- VLJNHYLEOZPXFW-BYPYZUCNSA-N L-prolinamide Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1 VLJNHYLEOZPXFW-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 241001274216 Naso Species 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010027597 alpha-chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 229940030600 antihypertensive agent Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000012839 cake mixes Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001314 canonical amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000006364 carbonyl oxy methylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])OC([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000003421 catalytic decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- HCAJEUSONLESMK-UHFFFAOYSA-N cyclohexylsulfamic acid Chemical class OS(=O)(=O)NC1CCCCC1 HCAJEUSONLESMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000021185 dessert Nutrition 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N ethanol;hexane Chemical compound CCO.CCCCCC GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hexane Chemical compound CCOCC.CCCCCC ZKQFHRVKCYFVCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;methanol Chemical compound OC.CCOCC MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 235000021554 flavoured beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000007983 food acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002238 fumaric acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021189 garnishes Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl Chemical compound O[CH2] CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- JOYFPXGYOIROJG-AWEZNQCLSA-N methyl (2s)-2-(cyclopentylamino)-3-phenylpropanoate Chemical compound C([C@@H](C(=O)OC)NC1CCCC1)C1=CC=CC=C1 JOYFPXGYOIROJG-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- HGVNLOSOAISYIT-KBPBESRZSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HGVNLOSOAISYIT-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- 125000004492 methyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020124 milk-based beverage Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- FZFLTDNAHASQQC-RVDMUPIBSA-N n-[(e)-benzylideneamino]-4-methylbenzenesulfonamide Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)N\N=C\C1=CC=CC=C1 FZFLTDNAHASQQC-RVDMUPIBSA-N 0.000 description 1
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002832 nitroso derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 229940127240 opiate Drugs 0.000 description 1
- LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N oxitriptan Natural products C1=C(O)C=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006303 photolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015843 photosynthesis, light reaction Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003219 pyrazolines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000029865 regulation of blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/30—Artificial sweetening agents
- A23L27/31—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives
- A23L27/32—Artificial sweetening agents containing amino acids, nucleotides, peptides or derivatives containing dipeptides or derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
- C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
- C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D231/44—Oxygen and nitrogen or sulfur and nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
- C07K14/70—Enkephalins
- C07K14/702—Enkephalins with at least 1 amino acid in D-form
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/081—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/18—Kallidins; Bradykinins; Related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår en ny klasse aminosyrederi-vater som i stor grad aldri har vært beskrevet i litteraturen og som først ble syntetisert til et peptid som viste uventet stabilitet mot hydrolytisk spalting og nedbryting av organiske syrer og enzymer. Et spesifikt bruksområde for det nye produkt er i drikkevareblandinger som inkluderer et nytt peptid-søtningsmiddel som er stabil mot sur hydrolyse på grunn av slike organiske syrer som sitronsyre og fumar-syre og enzymnedbryting og spalting, for å gi forlenget søthet til produktet. Næringsmiddelblandinger beskrives også som benytter de nye peptider som bestanddeler.
Den eneste prosess som er beskrevet i litteraturen og som angår den nye prosess som her beskrives, er addisjon av forbindelen (1) der R^=R2=hydrogen til forbindelse (2)
for å danne en cyklopropylaninsyre (4), nemlig:
12 3 4
hvori R , R , R og R er som angitt nedenfor, slik som angit av Bregovec og T. Jakovcic, "Monats Zeitschrift fur Chemie", 1972 103, 288. Den generelt kjente addisjon
av Cf^^ til umetttede azlaktoner (M. Bernabe et al.,
"Ann de Quimica" 1972, 68, 501, 1055: "Eur. J. Med. Chem." 1979, 14, 33, (1979); og "Synthesis Comm." 1977, 191; "J. Heterocyclic Chem." 1983, 20, 607; Pages, R.A. Burger, A; "J. Medicinal Chemistry" 1966, 9 , 766; og 10_, 435, (1967);
Awad, W. I. et al. "Tetrahedron", 1964, 20, 891) i en tilsvarende men ikke den samme prosess og produkt som ifølge oppfinnelsen. Foreliggende syntese krever addisjon av et substituert diazometan spesifikt til et dehydroalaninderivat som må syntetiseres for dette formål for å danne et 5-substituert pyrazolin. I motsetning til dette, er initialproduktet som dannes i den prosess som beskrives i den kjente teknikk et 4-substituert pyrazolin som så
Viktig informasjon
Av arkivmessige grunner har Patentstyret for denne allment tilgjengelige patentsøknad kun tilgjengelig dokumenter som inneholder håndskrevne anmerkninger, kommentarer eller overstrykninger, eller som kan være stemplet "Utgår" eller lignende. Vi har derfor måtte benytte disse dokumentene til skanning for å lage en elektronisk utgave.
Håndskrevne anmerkninger eller kommentarer har vært en del av saksbehandlingen, og skal ikke benyttes til å tolke innholdet i dokumentet.
Overstrykninger og stemplinger med "Utgår" e.l. indikerer at det under saksbehandlingen er kommet inn nyere dokumenter til erstatning for det tidligere dokumentet. Slik overstrykning eller stempling må ikke forstås slik at den aktuelle delen av dokumentet ikke gjelder.
Vennligst se bort fra håndskrevne anmerkninger, kommentarer eller overstrykninger, samt eventuelle stemplinger med "Utgår" e.l. som har samme betydning.
omdannes til cyklopropylaminosyre.
Andre angitte synteser av cyklopropylaminosyreanaloger
til foreliggende oppfinnelse, er rapportert av V. Schollkopf R. Harms og D. Hoppe, "Liebigs Ann. Chem." 611, (1973); også Martinez-Garcia, F.H. Cano og S. Garcia-Blanco, "Acta Crystallographis", 31 (1980), Sect A. Suppl. S103, også A.Ichihara, K. Shiraishi og S. Sakamura, "Tetrahedron Letters" 269, (1977) for syntese av koronaminsyre.
Når det gjelder forsøk på kjente synteser i retning peptider inneholder cyklopropylaminosyrer, se F.H.C. Stewart, "Austrian Jour. of Chemistry", 3_4 pp 2431 (1981).
Når det gjelder patenter, beskriver ES-PS 448.771 et cyklopropylfenylalanin og cyklopropyltyrosin.
Et cyklopropylfenylalanin er beksrevet i litteraturen av King et al., "Synthesis of Racemic (E) and (Z)-l-amino-2-phenylcyklopropanecarboxylic Acid: (E) og (Z) CYclopropyl-phenylalanine" "jour. of Organic Chem.", 1982, 47, 3270-3273 . I tillegg beskriver US-PS 3.313.842 fenylcyklopropan-karboksylsyrer og estere som hypotensive midler. US-PS 3.050.559 beskriver cyklopropylaminer. Videre beskriver US-PS 4.298.760 en forbedret fremgangsmåte for fremstilling av 1-aminocyklopropan-l-karboksylsyre for bruk som plate-vekstregulator. Kimura et al beskriver i "Biochemical andBiophysical Research Communications", vol. 115, side 112-115 Nr. 1, (1983), syntesen av cyklopropylfenylalanin og denne forbindelses anvendelse ved fremstilling av et stabilisert peptid.
Slik det fremgår av det ovenfor angitte, er flere cyklopropylaminosyrer kjente stoffer, og et peptid som benytter en av disse kjente aminosyreanaloger er angitt i den kjente teknikk.
Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse beskriver
en metode som direkte gir kirale cykloalkylamiosyrer.
Dette betyr at hvis kiraliteten er tilstede i et dehydroalaninderivat, kan optisk aktive cykloalkylaminosyrer fremstilles direkte uten nødvendig oppløsning. Dette er ikke mulig i andre angitte kjente prosesser.
I produktaspektene ifølge oppfinnelsen beskrives nye stereospesifike cykloalkylaminosyrer.
Andre prosessaspekter ved oppfinnelsen omfatter en fremgangsmåte for syntetisering av en syre eller et enzym-stabilt peptid inneholdende minst en stereospesifik cyklo-alkylaminosyrerest. Disse totalt unike peptider bibeholder for største delen sin opprinnelige biologiske aktivitet,
men på grunn av sterisk blokkering eller behindring ved innarbeiding av de nye krevede aminosyreanaloger som erstatning for en eller flere vanlige aminosyrerester i peptidkjeden, blir peptidet spaltingsresistent.
Som et resultat av den endrede aminosyrestruktur forringes peptidproduktene ifølge oppfinnelsen ikke ved kontakt med hydrolytiske enzymer eller organiske syrer. Den økede stabilitet bekreftes ved den nye motstandsevne mot spalt-
ing av peptidbindingene og metylesterbindingene. Denne Stabilitet har farmakologiske fordeler.
Det første er de beskrevne nye og unike cykloalkylsubstituerte aminos yrer. Disse variantaminosyrer virker når de benyttes istedet for vanlige aminosyrer i en peptidkjede til å stabilisere peptidet mot spalting på grunn av enzymer og hydrolyse på grunn av syrer. Peptidene som dannes på denne måte er i seg selv unike produkter med en disti nkt forskjellig molekylst£^ktur_ pg videre langtids _s/tabilitet. Et tredje produktaspekt ifølge oppfinnelsen, ligger i frem-stillingen av et næringsmiddelprodukt, f . eks_._...et ..drikke,,.»
med lenge varende søthet når peptidsøtningsmidlet erstattes
av det cykloalkylaminosyremodifiserte peptidsøtninsmiddel ifølge oppfinnelsen.
Spesifike eksempler på hvert av disse prosess- og produkt-aspekter ifølge oppfinnelsen skal gis nedenfor. Det er selvfølgelig klart at på grunn av det store antall peptider som er kjent for et stort antall anvendelser når det gjelder næringsmiddelkjemi, farmakologi, herbicid- og peptidcid-sluttanvendelse, er det selvfølgelig vanskelig å gi kon-krete utførelsesformer for å understøtte alle de mulige brede implikasjoner av oppfinnelsen i et enkelt dokument. Imidlertid skal basiskonseptet og anvendelsen av dette
for nye næringsmiddelpreparater angis for å eksemplifisere oppfinnelsens brede område.
En gjenstand for oppfinnelsen er derfor å tilveiebringe
nye stereospesifike cyklopropylaminosyrer. Det er en ytterligere gjenstand å tilveiebringe nye peptider inneholdende minst en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest. Det er en ytterligere gjenstand å tilveiebringe et sluttanvend-elsesprodukt som inneholder peptidet som bestanddel. Disse og andre gjenstander, aspekter og fordeler ved oppfinnelsen vil bli åpenbare ut fra den følgende beskrivelse og krav.
Oppfinnelsen gjennomføres ved å tillate en diazo-forbindelse (1) i nærvær eller fravær av en katalysator eller lys,
å reagere med et dehydroalaninderivat (2). Initial-reaksjons-produktet kan være et pyrazolinderivat (3) som pyrolyseres, fotolyseres eller behandlet med en katalysator for derved å gi cyklopropylaminosyrederivatet (4) som er en av produktutførelsesformene. Reaksjonen er som vist i ligningene A og B nedenfor:
Produktet (4), et cyklopropylaminosyrederivat, kan bestå
av en blanding av stereoisomerer som er separerbare på fysikalsk måte til E- og Z-diastereomerer. Hver av disse består av et par (2R, 2S) enantiomerer som kan separeres ved standard oppløsningsmetoder. Separering til E- og Z-diastereomerer og separering av enantiomerene kan skje enten før eller etter deblokkering av produktet (4).
1 2
I diazoforbmdelsen (1), kan R og R være hydrogen, en alkyl (alifatisk) gruppe, en aromatisk gruppe (aryl, slik som fenyl, indolyl, imidazolyl o.l.), en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe eller en aromatisk gruppe substituert med en halogen-, oksygen-, nitrogen-, svovel-, aromatisk eller alifatisk gruppe.
I dehydroalaninforbindlsen (2), kan R 3 være en hvilken
som helst alkyl- eller aromatisk gruppe, eller alkoksy-eller aryloksygruppe. R 4 kan være en hvilken som helst alkyl- eller arylgruppe. Foretrukne lavere alkylgrupper er metyl, etyl, propyl, isopropyl og butyl.
Oppløsningsmidlet som benyttes i reaksjon A kan være et hvilket som helst aprotisk oppløsningsmiddel, slik som CHCl^, CH2C12, tetrahydrofuran, dioksan, dietyleter osv., eller protiske oppløsningsmidler, slik som metanol eller etanol.
Reaksjonstemperaturen i det første trinn er 0-30°C og i
det andre 0-150°C. Et oppløsningsmiddel, slik som benzen eller toluen e.l., kan benyttes i det andre trinn.
I den hensikt å oppnå den frie cyklopropylaminosyre (AA), kan forbindelse (4) C-termianl deblokkeres, avhengig av arten av , ved standard prosedyrer slik som forsåpning eller hydrogenolyse for å oppnå syren (5) som vist i ligning C nedenfor;
og N-terminal deblokkering av (5) ved bruk av vannfri syre, tørr HC1 eller CF,C09H, ved hydorgenolyse, eller ved hydrolyse, avhengig av arten av R 3, gjennomført ved standard-prosedyrer som vist i ligning D nedenfor:
Deblokkering av aminogruppen (N-terminal deblokkering)
som vist i ligning E nedenfor, kan foregå deblokkering av karboksylgruppen (C-terminal deblokkering) (ligning C), noe som resulterer i en cyklopropylaminosyre.
A - Foretrukket utførelsesform, fremgangsmåte for fremstilling av cyklopropylaminosyre.
Et trekk ved oppfinnelsen beskriver en fremgangsmåte for syntetisering av en cyklopropylaminosyre valgt blant (2S)-E-, (2R)-E-, (2S)-Z-, (2R)-Z-, (2S)-, (2R)-, (2RS)-E-,
og (2RS)-Z-isomerer der cyklopropylaminosyren velges blant cyklopropylaminosyre, analoger, derivater og lignende derav, omfattende følgende trinn: (a) omsetning av en diazo-forbindelse med formelen
12 1
R R CH2 der R er valgt blant hydrogen, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, der R<2>
er valgt blant hydrogen, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, med et dehydroalaninderivate med formelen
hvor R 3 er valgt blant alkyl, en aromatisk gruppe,
en alkoksygruppe og en aryloksygruppe og der R 4er valgt blant alkyl og aryl, for å oppnå et initialt reaksj onsprodukt;
(b) dekomponering av initialreaksjonsproduktet (3)
for å oppnå et cyklopropylaminosyrederivat med formelen
der cyklopropylaminosyrederivatet er en blanding av stereoisomerer; (c) separering av blandingen av stereoisomerer på fysikalsk måte til E- og Z-diastereomerer der E- og Z-diastereomerene omfatter et par enantiomerer; (d) separering av paret enantiomerer ved standard oppløsning for å oppnå et stereospesifikt cyklopropylaminosyrederivat; (e) deblokkering av initialreaksjonsproduktet for å oppnå en stereospesifik cyklopropylaminosyre med formelen 1 2 Hvis R og R inneholder syregrupper valgt blant karboksyl, merkapto og fenolisk hydroksyl, blokkeres R 1 og R<2>ved standardmetoder for å beskytte slike grupper under prosessen. Syntese av de følgende cyklopropylaminosyrer krever slik blokkering: aspartinsyre, tyrosin, 3,4-dihyd-roksyfenylalanin (DOPA), 5-hydroksytryptofan, cystein og 3 4
homocystem. Hvis R og R i dehydroalaninderivatet er optisk aktivt, kan en optisk aktiv stereospesifik cyklopropylaminosyre, kan fremstilles uten trinn (d) i prosessen. Diazoforbindelsen omsettes med dehydroalaninderivatet i nærvær eller fravær av en katalysator og i eventuelt nærvær av lys. Pyrolyse, fotolyse eller katalytisk dekomponering kan benyttes for å dekomponere initialreaksjonsproduktet. Et oppløsningsmiddel valgt blant aprotiske og protiske oppløsningsmidler kan benyttes. Trinnet som gir initialreaksjonsproduktet gjennomføres ved en temperatur innen område 0-30°C og trinnet som gir cyklopropylaminosyrederivatet gjennomføres ved en temperatur innen området 0-150°C. Når pyrolyse benyttes for å dekomponere initialreaksjonsproduktet, kan et oppløsningsmiddel valgt blant benzen, toluen og et lignende oppløsningsmiddel, benyttes i trinnet som gir cyklopropylaminosyrederivatet. Hvis det stereospesifike cyklopropylaminosyrederivat er C-terminal deblok-kert for å gi en sterospesifik cyklopropylsyre med formelen
kan forsåpning eller hydrogenolyse benyttes for C-terminal
deblokkering av det stereospesifike cyklopropylsyrederivatet. Etter C-terminal deblokkering deblokkeres den stereospesifike cyklopropylsyre N-terminalt for å oppnå den stereospesifike
cyklopropylaminosyre. Vannfrie syrer, den stereospesifike cyklopropylsyre, tørr hydrogenklorid, trifluoreeddiksyre, hydrogenolyse, den stereospesifike cyklopropylsyre eller hydrolyse, kan benyttes for N-terminal deblokkering av den stereospesifike cyklopropylsyre. N-terminal deblokkering kan foregå karboksylterminal deblokkering for å oppnå den stereospesifike aminosyre. Trinnene (c) og (d) i den ovenfor angitte prosess kan gjennomføres før eller etter deblokkering.
Peptidsyntese ved bruk av aminosyrer.
For å fremstille peptider, preparares forbindelse (5) med
R 3 = OCH2Ph eller OC(CH3)3. Standard koblingsmetoder, blandet anhydrid, karbodiimid osv., benyttes for å koble (5) med C-terminal blokkerte aminosyrer eller -peptider. N-termianl deblokkering av (4) for å oppnå (6), gjennomføres ved bruk av vannfrie syrer, tørr HC1 eller CF^CO^H, eller hydrogenolyse, avhengig av arten av R og R som vist i ligning E nedenfor:
Forbindelse (6) er brukbar ved kobling med N-blokkert kar-boksylaktiverte aminosyrer, eller -peptider for å oppnå
de ønskede peptider.
Foretrukne utførelsesformer, metoder ved peptidsyntese.
Foreliggende oppfinnelse beskriver en fremgangsmåte for syntetisering av peptider med minst 2 aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerester der aminosyrerestene velges blant gruppen omfattende aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater o.l. derav, omfattende følgende trinn: (a) syntetisering av cyklopropylaminosyredervatet ved bruk av trinnene (a) og (b) i den ovenforbeskrevne prosess, for syntetisering av stereospesifik cyklopropylaminosyre ; (b) separering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre ved bruk av trinnene (c) og (d) i den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifik cyklopropylaminosyrer; (c) deblokkering av det stereospesifike cyklopropylaminosyrederivat ved standardmetoder for å oppnå en N-terminal blokkert stereospesifik cyklopropylaminosyre ; (d) kobling av den N-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en C-terminal blokkert aminosyre eller et peptid; og (e) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter nødvendig-het for å oppnå et ønsket peptid. Trinn (d), deblokker-ingen, kan gjennomføres før trinn (b), separerings-trinnet.
En alternativ prosess for syntetisering av peptider benytter stereospesifike cyklopropylsyrer oppnådd som beskrevet ovenfor, omfatter følgende trinn: (a) N-terminal blokkering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre ved standardmetoder for å oppnå N-terminal blokkert stereospesifik cyklopropylaminosyre; (b) kobling av den N-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en C-terminal blokkert aminosyre eller -peptid; og (c) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter nødvendighet for å oppnå et ønsket peptid med minst to og ikke mer enn 20 aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerestene der aminosyrerestene velges blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav,
og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklo-propy laminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav.
En andre alternativ prosess for syntetisering av peptider med minst 2 aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerester der aminosyrerestene er valgt blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav,
og der minst en av aminosyrerestene er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, omfatter følgende trinn:
(a) syntetisering av en cyklopropylaminosyre ved anvendelse av trinnene (a), (b) og (c) beskrevet ovenfor for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer ; (b) N-terminal blokkering av cyklopropylaminosyren ved standard metoder for å fremstille en N-terminal blokkert cyklopropylaminosyre; (c) separering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre under anvendelse av trinnene (c) og (d) i den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer; (d) kobling av den N-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en C-terminal blokkert aminosyre eller et peptid; og (e) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter nødvendig-het for å oppnå et ønsket peptid.
Trinn (c) i denne andre alternative prosess for syntetisering av peptider, kan gjennomføres før trinn (b).
En tredje alternativ prosess for syntetisering av peptider med minst 2 aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerester der aminosyrerestene er valgt blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav,
og der minst en av aminosyrerestene er en stereospesifik
cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, omfatter følgende trinn: (a) syntetisering av cyklopropylaminosyrederivatet under anvendelse av trinnene (a) og (b) i den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer; (b) separering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre under anvendelse av trinnene (c) og (d) i den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer; (c) N-terminal deblokkering av det stereospesifike cyklopropylaminosyrederivat ved standardmetoder for å oppnå en C-terminal blokkert aminosyre; (d) kobling av den C-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en N-terminal blokkert aminosyre eller -peptid; og (e) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter nødvendig-het for å oppnå et ønsket peptid.
Trinn (c) i denne tredje alternative fremgangsmåte for syntetisering av peptider kan gjennomføres før trinn (b).
En fjerde alternativ prosess for syntetisering av peptider ved bruk av stereospesifike cyklopropylaminosyrer oppnås som beskrevet ovenfor, omfatter følgende trinn: (a) C-terminal blokkering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre ved standardmetoder for å oppnå den C-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre ; (b) kobling av den C-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en N-terminal blokkert aminosyre eller -peptid; og (c) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter nødvendighet for å oppnå et ønsket peptid med minst to og ikke mer enn 20 aminosyrerester valgt blant D- og L-isomerer av aminosyrerester der aminosyrerestene velges blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav,
og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav.
En femte alternativ prosess for syntetisering av et peptid med minst 2 og ikke mer enn 20 aminosyrerester valgt blant D- og L-isomerer av aminosyrerester, der aminosyreresten velges blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, omfatter følgende trinn: (a) syntetisering av en cyklopropylaminosyre ved bruk av trinnene (a), (b) og (e) i den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer ; (b) C-terminal blokkering av cyklopropylaminosyren ved standardmetoder for derved å gi en C-terminal blokkert cyklopropylaminosyre; (c) separering av den C-terminal blokkerte stereospe-sif ike cyklopropylaminosyre ved bruk av trinnene (c) og (d) ved den ovenfor beskrevne prosess for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer; (d) kobling av den C-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en N-terminal blokkert aminosyre eller -peptid; og (e) å gjenta de ovenfor angitte trinn ettersom det er nødvendig for å oppnå en ønsket peptid.
Trinn (c) i denne femte alternativt prosess for syntetisering av peptider, kan gjennomføres før trinn (b).
En sjette alternativ prosess for syntetisering av peptider ved bruk av stereospesifike aminosyrer oppnådd som beskrevet ovenfor, der R 3 og R 4 i dehydroalaninderivatet er optisk aktivt, trinn (d) i prosessen som beskrives ovenfor for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer ikke er nødvendig, omfatter følgende trinn:
(a) N-terminal blokkering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre ved standardmetoder for å oppnå den N-terminale blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre ; (b) kobling av den N-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en C-terminal blokkert aminosyre eller -peptid, og (c) å gjenta de ovenfor angitte trinn etter som de er nødvendige, for å oppnå et ønsket peptid med minst 2 og ikke mer enn 20 aminosyrerester valgt blant D-eller L-isomerer av aminosyrerester der aminosyreresten velges blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav. En syvende alternativ prosess for syntetisering av peptider ved bruk av stereospesifike aminosyre oppnås som beskrevet 3 4
ovenfor, der R og R i dehydroalaninderivatet er optisk aktive og trinn (d) i prosessen som beskrevet ovenfor for syntetisering av stereospesifike cyklopropylaminosyrer ikke er nødvendig, omfatter følgende trinn: (a) C-terminal blokkering av den stereospesifike cyklopropylaminosyre ved standardmetoder for å oppnå den C-terminale blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre ; (b) kobling av den C-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en N-ternimal blokkert aminosyre eller -peptid; og (c) å gjenta de ovenfor angitte trinn etterhvert som de er nødvendige for å oppnå et ønsket peptid, med minst to og ikke mer enn 20 aminosyrerester valgt blant D-eller L-isomerer av aminosyrerester derav aminosyreresten velges blant aminosyrerester, analoger, derivater og lignende derav, og der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropylaminosyrerest valgt blant
cyklopropylaminosyrerester, analoger, derivater og lignende .derav.
Foretrukne utførelsesformer, cyklopropylaminosyrer.
Oppfinnelsen beskriver nye stereospesifike cyklopropylaminosyrer valgt blant (2S)-E-, (2R)-E-, (2S)-Z-, (2R)-Z-, (2S)-, (2R)-, (2RS)-E-, og (2RS)-Z-isomerer der cyklopropylaminosyrene velges blant cyklopropylaminosyrer, analoger, derivater og lignende derav, med formelen
Der R"*" velges blant hydrogen, en karboksylgruppe eller laverealkylester derav, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, hvori R^er valgt blant hydrogen, en karboksylgruppe eller en lavere alkyleter derav, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, hvori R 1 og R 2 ikke begge er hydrogen, vhvios rCi ,HR 1 C, ohg vR or2i iR kk1 e og er R 2 Ci6 ,Hkk5r e heer nho4-lHd0sCvi,Hs . Hh, eenhlolelr dsvH ihs enHh,olds-od b4 „
eller H henholdsvis 4-HOCgH4, og derR<1>og R ikke er 4(5)-imidazolyl henholdsvis H eller H henholdsvis 4(5) imidazolyl.
Cyklopropylaminosyrer (AA) som kan fremstilles ifølge oppfinnelsen, er vist i tabell I nedenfor. Bortsett fra valin, pyroglytaminsyre, proplin og prolin-analoger, er de ovenfor angitte cyklopropylaminosyrer vist som E- og Z-diastereomerer. Det skal være klart at alle de ovenfor angitte cyklopropylaminosyrer har (2R)- og (2S)-enantiomerer.
Alternative generelle strukturer for andre cykloalkylaminosyrer .
Fra kjente utgangsstoffer kan cykloalkylaminosyrederivater med den følgende generelle formel også fremstilles ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen. Disse forbindelser representeres generelt ved formelen
hvor R^og R2er som angitt ovnefor og n betyr et helt tall fra 1 til 4. Mere spesielt er forbindelser der R^
er H, fenyl eller COOH og R2er H, eller der R^er hydrogen ogR2er fenyl, H eller COOH, foretrukne typer av forbindelser innenfor oppfinnelsens generelle ramme for spesielt
stabile aminosyrer for peptidsyntese.
For peptidsyntesens formål, vil den ovenfor angitte forbindelse AA<1>behandles på analog måte med forbindelse AA ovenfor og de etterfølgende derivater som angitt i instruksjonene for peptidsyntese.
Foretrukne utførelsesformer - Polypeptider.
Peptider med minst 2 aminosyrerester og opp til 20 slike rester med minst en av disse i form av et cyklopropylderivat, fremstilles ved å gjennomføre en av de mange metoder ifølge oppfinnelsen som angitt ovenfor. Aminosyrerestene som utgjør peptidkjeden kan være enten D- eller L-isomerer. Aminosyreresten kan velges blant gruppen (2S)-E-, (2R)-
E, (2S)-Z, (2R)-Z, (2S)- og (2R)-isomerer av de angitte aminosyrer i peptidkjeden.
Valgte eksempler på peptider som er istand til syntese
ved hjelp av oppfinnelsen og deres spesifike anvendeligehet er angitt i den følgende tabell II. De forskjellige stabili-stabiliserte peptider har et spredt felt av anvendelses-områder fra matvareadditive dipeptid-søtningsmidler i gruppe I til de komplekse bradykin eller sjokkinhibitor-peptider
i gruppe VII eller antihypertensiver i gruppe V. Mengden av hvert peptidpreparat som benyttes varierer med en spesifike ønskede bruk og administreringsmåten. Når det gjelder de peptideneAAsp-Phe OCH^ eller Asp- A Phe OCH^som benyttes som drikkesøtningsmiddel, vil en relativt stor mengde være nødvendig. Disse oralt inntatte peptidsøtningsmidler har fra 100 til 200 ganger søtningskraften til sukkrose.
På den annen side, er relativt små mengder (50-100 mg/kg kroppsvekt) stabiliserte peptider fra gruppene V til VIII prinsippielt benyttet ved intravaskulær farmasøytiske administrering for å oppnå et terapeutisk resultat.
I den følgende tabell beskrives en kort oppsummering av
12 valgte, nye stabiliserte peptider i området fra R -R (et relativt kortkjedet søtningsmiddel bipeptid) sil R 1 -R9
(et mere komplekst sentralnervesystem regulerende hormon). Denne liste er kun illustrerende for typene av polypeptider som kan syntetiseres ved bruk av det nye og unike konsept som er beskrevet i de forskjellige spesifike eksempler nedenfor.
I den ovenfor angitte tabell II ble følgende liste av for-kortelser benyttet:
A = cyklopropyl
cb = cyklobutyl cp = cyklopentyl
ch = cykloheksyl
Phe"OCH3= fenylalanin metylester Arg = arginin
Ala = alanin
Asp = aspartinsyre
p Glu = pyroglutaminsyre
Gly = glycin
His = histidin
Ile = isolencin
Leu = leucin
Met = metionin
Phe = fenylalanin
Pro=prolin
Phe = fenylalanin
Pro = prolin
Pro.,NH2 = prolinamid
Sar = sarcosin
Ser = serin
Tyr = tyrosin
Val = valin
De følgende spesifike eksempler på fremstilling av cyklopropyl (a) aminosyrer såvel som peptider der på et eller flere steder i aminokjeden vanlige aminosyrer er erstattet, skal illustreres nedenfor. Til slutt vil eksemplet på minst et forbedret næringsmiddelpreparat og et farmasøytisk preparat tjene til å illustrere sluttanvendelsen for de nye modifiserte aminosyrer og peptidpreparater som her beskrives.
Eksempel 1.
Boc- Ser" OBzl( N02) ( 1)
Boc-Ser"OH (0,097 mol) ble oppløst i 140 ml etylacetat
og p-nitrobenzylbromid (21 g, 0,097 mol), fulgt av trietylamin (9,7 g, 0,097 mol) ble tilsatt til blandingen som ble kokt under tilbakeløp i 18 timer. Etter avkjøling ble 200 ml vann tilsatt til reaksjonsblandingen, sjiktene ble separert og det vandige sjikt ekstrahert med AcOEt. Ekstraktene ble vasket med 100 ml 5% NaHCO^oppløsning, mettet NaCl oppløsning, tørket over Na2S04og fordampet under vakuum. Den resulterende blekgule olje ble oppløst i 100 ml Et2<D og holdt i kjøleskap i 4 timer. De fargeløse krystaller ble filtrert ved sug og man oppnådde Boc-Ser" OBzl(N02) (1) (18,0 g, 54,5%) som prismer; fra filtratet ble det oppnådd et andre utbytte i en mengde av 3,5 g . Totalt utbytte 65%, smeltepunkt 92-93°C; IR: (KBr) 3320-3420 (NH,OH), 1745 (C=0), 1660 (C=0). NMR (CDC13)6: 8,2 og 7,2 (AB d, J = 12 Hz, 4H, ArH). 5,5 (br, d, 1H,NH), 5,25 (s, 2H, OCH2) 4,25-4,5 (m, 1H, CH), 3,90 (d, 2H, CH2OH), 2,60 (br, 1H, OH), 1,38 (s, 9H, Boe).
Eksempel II
Boc- dehydroalanin- p- nitrobenzylester ( 2).
a) Ved bruk av EDC.
Til en suspensjon av Boc-Ser "OBzl (NC>2) (1) (6,0 g, 0,0176
mol) og CuCl (1,8 g, 0,018 mol) i CHC13(180 ml) ble det tilsatt l-etyl-3(3-dimetylamino-propyl)-karbodiimid hydro-klorid (EDC, 4,14 g, 0,0216 mol) ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt over natt ved romtemperatur i løpet av hvilket tidsrom det skilte seg ut en brun olje. 150 ml vann ble tilsatt og CHCl^sjiktet separert og vasket med vann, tørket over Na2CO^ og fordampet under vakuum. Det resulterende faststoff ble omkrystallisert fra etylacetat: n-heksan og man oppnådde fargeløse prismer i en mengde av 4,5 g tilsvarende 79,3% av Boc-dehydroalanin-p-nitrobenzylester (2), smp. 94-95°C; IR; (KBr); 3420 (NH), 1710 (C=0), 1632 (C=0), 1600 (C=C). NMR (CDC13)6: 8,19 og 7,5 (d, J = 12 Hz, 4H, ArH), 6,93 (br, s, 1H, NH), 6,20 (s,
1H, H-C=C), 5,75 (s, 1H, H-C=C), 5,30 (s. 2H, OCH2). Analyse beregnet for C^^H^gN2<Og;>
C 55,0, H 5,63, N 8,69
Funnet C 55,85, H 5,67, N 8,65.
b) Ved bruk av DCC.
Til en suspensjon av Boc-Ser"OBzl(N02) (1) (6,0 g, 0,0176
mol) og CuCl (1,8 g, 0,018 mol) i 180 ml CHC13ble det tilsatt dicykloheksylkarbodiimid (DCC; 4,9 g, 0,0216 mol) under iskjøling og blandingen ble omrørt i 3 dager ved romtemperatur. 200 ml vann ble tilsatt til reaksjonsblandingen og ytterligere omrøring ble fortsatt i 3 minutter, hvoretter CHC13sjiktet ble separert, og det vandige sjikt ekstrahert med CHC13. De kombinerte CHC13sjikt ble vasket med vann, tørket over Na2S04og fordampet i vakuum. Den oppnådde rest ble kromatografert ved eluering med benzen (60-200 mesh silikagel, 40 g, Baker Analyzed), og man oppnådde 4,1 g (72,3%) Boc-dehydroalanin-p-nitrobenzylester (2), smp. 94-96°C.
Eksempel III.
p- nitrobenzyl- 3 ^ t- butoksykarbonylaminopyrazolin- 3-karboksylat ( 3).
Til en oppløsning av Boc-dehydroalanin-p-nitrobenzylester (2) (700 mg, 2,2 mmol) i CH2C12(10 ml) ble det dråpevis tilsatt eterisk CH2N2 oppløsning (fremstilt fra Diazald, 4,12 g, 19 mmol) i 40 ml Et20 i løpet av 40 minutter under iskjøling. Etter omrøring i 1 time ved 0-5°C, ble overskud-det av CH2N2dekomponert ved tilsetning av CaCl2ved romtemperatur og blandingen ble filtrert. Filtratet ble fordampet i vakuum, og man oppnådde et hvitt, fast stoff,
og dette ble triturert med n-heksan og filtrert ved sug,
og man oppnådde (3) (710 mg, 88,5%), smp. 79-80°C. Omkrystallisering fra AcOEt-n-heksan ga ren p-nitrobenzyl-3-t-butoksykarbonylaminopyrazolin-3-karboksylat (3) som farge-løse prismer, smp. 84°C (dekomp.) ; IR: (KBr) 3270 (NH), 1700-1740 (C=0), 1600 (N=N). NMR (CDC13)5: 8,2 og 7,45 (dd, 4H, ArH, H), 6,38 (s, 1H, NH), 5,29 (s, 2H, OCH2), 4,4-5,2 (m, 2H, NCH2), 1,95-2,25 (m, 2H, CH2), 1,40 (s,
9H, Boe).
Analyse beregnet for C'i6H20<N>4<^6:
C 52,74, H 5,53, N 15,38
Funnet C 52,62, H 5,59, N 15,34.
Eksempel IV.
p- nitrobenzyl- 3- t- butoksykarbonylaminopyrazolin- 3-karboksylat ( 3)
En blanding av pyrazolin, p-nitrobenzyl-3-t-butoksykarbonylamino-pyrazolin-3-karboksylat (3) (550 mg), og 10 ml benzen ble kokt under tilbakeløp i 1<*>2time, badetemperatur ca. 90°C, og benzen ble fjernet i vakuum, hvorved man oppnådde et fast stoff som ble omkrystallisert fra AcOEt-N-heksan hvorved man oppnådde 508 mg Boc-cyklopropylalanin p-nitro benzylester (4) (100%); smp. 117-118°C (IR (KBr) 3350 (NH), 1730 (C=0), 1680 (C=0). NMR (CDCl-jJfi : 8,2 og 7,48 (Ab d, 4H, ArH), 5,2 (s, 2H, 0CH2), 5,15 (br, s, 1H, NH), 1,00-1,75 (m, 4H, CH2x2), 1,44 (s, 9H, Boe).
Analyse beregnet for C^<gH>2Q<N>2<0g;>
C 57,14; H 5,99; H 8,33
Funnet C 57,05; H 5,99; N 8,31.
Eksempel V.
Boc- Cyklopropylalanin ( 5).
Til en oppløsning av Boc-cyklopropylalanin p-nitrobenzylester (4) (450 mg, 1,34 mmol) i MeOH (20 ml) ble det tilsatt 1 N NaOH (2,6 ml, 2,6 mmol) ved romtemperatur. Etter at blandingen var omrørt i 3 timer ble 10 ml vann tilsatt,
og MeOH fjernet under vakuum. Den vandige rest ble vasket med Et20 for å fjerne p-nitrobenzylalkohol og det vandige sjikt ble separert, avkjølt i et isbad, hvoretter 10% sitronsyre ble tilsatt til pH 3.Blandingen ble mettet med NaCl og ekstrahert med AcOEt og ekstraktene vasket med mettet NaCl oppløsning, tørket overNa2S04og fordampet i vakuum, hvorved man oppnådde et hvitt faststoff som ble omkrystallisert fra AcOEt-n-heksan for å oppnå 260 mg Boc-cyklopropylalanin (5) (96,3%) som fargeløse nåler med smp. 176-177°C (dekomp.); IR (KBr); 3230 (NH), 1630-1680 (C=0).
NMR (CDC13+DMSO)s: 9,45 (br, s, 1H, COOH), 5,88 (br,
s, 1H, NH) 1,3-1,7 (m, 2H, CH2), 1,0-1,2 (m, 2H, CH2),
1,50 (s, 9H, Boe).
Analyse beregnet for CgH^NO^C:
C 53,72; H 7,51; n 6,96.
Funnet C 53,59; H 7,58; N 6,88.
Eksempel VI.
Diazoisobutan ( 6).
Til en oppløsning av isobutylurea (2,0 g, 0,016 mol) i
HOAc/H20 (6:1) (6 ml) ble det dråpevis tilsatt 6 ml 4,8
M NaNC^oppløsning under iskjøling i 1 time. Etter omrøring i ytterligere 1 time ble 20 ml vann tilsatt til reaksjonsblandingen og de gule krystaller ekstrahert til CHCl-j. Ekstraktene ble vasket med vann og fordampet ved 25°C til tørr tilstand, hvorved man oppnådde et gult, faststoff.
Den resulterende urene nitrosoforbindelse ble oppløst i
Et20 (20 ml) og oppløsningen tilsatt dråpevis til en blanding av 5,4 ml 40%-ig KOH oppløsning og 20 ml Et20 ved - 15 til -20°C i løpet av 1 time. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time ved den samme temperatur og Et20 sjiktet inneholdende diazoisobutan (6) ble separert og brukt ved den neste reaksjon umiddelbart.
Eksempel VII.
p- nitrobenzyl 3- t- butoksykarbonylamino- 5- isopropylpyrazolin-3-karboksylat (7).
Den eteriske diazoisobutan (6) ble gradvis tilsatt til
en oppløsning av Boc-dehydroalanin-p-nitrobenzylester (2)
(967 mg, 3 mmol) i CH2C12(15 ml) ved -10 til -15°C under omrøring. Etter omrøring i 1 time ved den samme temperatur ble oppløsningsmidlet fordampet i vakuum, og den resulterende rest triturert med heksan og filtrert ved sug, hvorved man oppnådde 1,2 g p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-isopropylpyrazolin-3-karboksylat (7) (87,4%), smp. 78-79°C (dekomp.) Omkrystallisering fra AcOEt-n heksan ga fargeløse prismer med smp. 87-89°C ; IR (KBr) 3390(NH), 1745(00), 1690(C=O), 1605(N=N).NMR (CDC13)5: 8,2 og 7,5
(d, d, 4H, ArH), 6,2 (br, s, 1H, NH); 5,30 (s, 2H, 0CH2), 4,8-5,2 (m, 1H, CH-N=N), 1,5-2,3 (m, 3H, (CH^CH og CH2) , 1,35 (s, 9H, Boe), 1,00-1,30 (m, 3H, CH3), 0,1-1,10 (m,
3H, CH3).
Analyse beregnet for <-]_gH26N4^6 :
C 56,15, H 6,45, N 13,79.
Funnet C 55,93, H 6,53, N 13,75.
Eksempel VIII.
Boc- cyklopropyl leucin p- nitrobenzylester ( 8).
Pyrazolinet, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-iso-propylpyrazolin-3-karboksylat (7) (1,1 g, 2,7 mmol), ble oppløst i 20 ml benzen, oppløsningen ble kokt under tilbake-løp i 2 timer og fordampet i vakuum, for å gi et hvitt, faststoff som ble omkrystallisert fra AcOEt-n-heksan for derved å gi fargeløse prismer av Boc-cyklopropyl leucin pø-nitrobenzylester (8), 950 mg (95%), smp. 139-143°C,
IR (KBr) 3360(NH), 1725(C=0), 1680(C=O). NMR (CDC13)6:
8,20 og 7,52 (d,d, 4H, ArH), 5,25 (s, 2H, 0CH2), 5,22 (br, s, 1H, NH), 1,2-1,8 (m,4H, CH2, CHx2), 1,4 (s, 9H, Boe), 0,8-1,15 (m, 6H, (CH^CH).
Analyse beregnet for C]_gH26N2°6:
C 60,30, H 6,93, N 7,40.
Funnet C 59,73, C 7,05, N 8,27.
Eksempel IX.
Boc-cyklopropyl-leucin (9).
Til en suspensjon av Boc-cyklopropyl leucin p-nitrobenzylester (8) (300 mg, 7,9 mmol) i 20 ml MeOH ble det tilsatt 7 ml 2N NaOH (7 ml) oppløsning under iskjøling, og blandingen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur, utgangs-materialet gradvis oppløst og blandingen ble gul. 10 ml vann ble tilsatt og MeOH ble fordampet under vakuum. Den vandige rest ble vasket med AcOEt, avkjølt i et isbad og surgjort ved tilsetning av 10%-ig sitronsyre til pH 3.
Det resulterende hvite bunnfall ble ekstrahert med AcOEt (3x20 ml) og ekstrakteene ble vasket med mettet NaCl opp-løsning, tørket over Na2S04og fordampet i vakuum. Det resulterende Boc-cyklopropyl-leucin (9) ble omkrystallisert fra AcOEt-n-heksan hvorved man oppnådde 140 mg (72,5%)
som fargeløse prismer med smp. 196-197°C (dekomp.); IR; (KBr) 3230 (NH), 1690 (C=O), 1645(C=0). NMR (CDCl3 -,+DMSOdD,.) 6 : 5,78 (s, 1H, NH), 1,2-1,8 (m, 4H, CH2, CHx2), 1,4 (s, 9H, Boe), 0,1-1,1 (m, 6H, (CH3)2CH).
Analyse beregnet for C12H21N04:
C 59,24; H 8,70; 5,76.
Funnet C 59,28; H 8,74, N 5,72.
Eksempel X.
Benzaldehyd p- toluensulfonyl hydrazin ( 10).
En blanding av benzaldehyd (5,25 g, 0,05 mol), p-toluensul-fonylhydrazin (9,3 g, 0,05 mol) og 20 ml dAcOH ble ytterligere omrørt i 15 minutter ved 70°C og tillatt å stå over natt ved romtemperatur. 20 ml Et20 ble tilsatt til blandingen, det utfelte faststoff ble triturert med eter og krystallene filtrert ved sug og vasket med Et20 for å oppnå benzaldehyd p-toluensulfonyl hydrazin (10), 9,7 g (70,7%), smp. 126-128°C (dekomp.)
Eksempel XI.
Boe E- cyklopropyl fenylalanin p- nitrobenzylester ( 11).
Natrium (138 mg, 6 mmol) ble oppløst i 10 ml etylenglykol og tosylhydrazon, benzaldehyd p-toluensulfonyl hydrazon, (923 g, 3 mmol) ble tilsatt til oppløsningen. Etter at oppløsningen var ferdig, ble 20 ml heksan tilsatt og blandingen kokt under tilbakeløp i 20 minutter, med en badtemp. på 85-90°C under heftig omrøring. Deretter ble blandingen avkjølt i et isbad og det resulterende rødfarge produkt ble ekstrahert med 3x20 ml kald n-heksan. De kombinerte ekstrakter ble vasket med 20 ml IN NaOH oppløsning, 20
ml mettet NaCl oppløsning og deretter tørket over Na^O^. Etter filtrering ble det rosa filtrat tilsatt til en blanding avBoc-dehydroalanin-p-nitrovbenzylester (2) (322 mg,
1 mmol) i CH2C12(10 ml) i løpet av 15 minutter ved 0°C.Blandingen ble omrørt over natt ved romtemperatur og rød- fargen forsvant. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum og resten triturert med n-heksan-eter. Det resulterende faststoff ble filtrert under sug og man oppnådde Boe E-cyklopropyl fenylalanin p-nitrobenzylester (11) (380 mg, 92,2%); smp. 115-116°C; IR; (KBr) 3390(NH), 1715(C=0).
NMR (CDC13)5: 8,1 og 7,1 (dd, 4H,ArH), 7,1-7,50 (m, 5H, ArH), 5,45 (br. s, 1H, NH), 4,9 (s, 2H, CH20 ), 2,8-3,1
(m, 1H, CH), 2,0-2,4, 1,2 1,8 (m, 2H, CH2), 1,45 (s, 9H, Boe) .
Eksempel XII.
Boe E-cyklopropyl fenylananin (12).
En blanding av Boe E-cyklopropyl fenylalanin p-nitrobenzylester (11) 200 mg, 0,485 mmol), MeOH (10 ml) og 2N NaOH oppløsning (3 ml) ble omrørt over natt ved romtemperatur.
10 ml vann ble tilsatt og MeOH fordampet i vakuum. Resten ble vasket med AcOEt og det vandige sjikt avkjølt i et isbad og surgjort med 10% sitronsyre til pH 3. Blandingen ble mettet med NaCl og ekstrahert med AcOEt. Ekstraktet ble vasket med mettet NaCl oppløsning, tørket over Na2S0^
og fordampet i vakuum. Det resulterende faststoff ble omkrystallisert fra AcOEt-n-heksan og man oppnådde Boe E-cyklopropyl fenylalanin (12) (90 mg, 67,2%) som fargeløse prismer med smp. 158-160°C (dekomp.); NMR (CDC13)6: 7,2-
7,4 (m, 5H, ArH), 2,7-2,9 (m, 1H, CH), 2,0-2,3 og 1,5-1,7
(m, 2H, CH2), 1,5 (s, 9H, BOC). NMR var identisk med tidligere oppnådde verdier.
Eksempel XIII.
p- nitrobenzyl 3- t- butoksykarbonylamino- 5-( N- tosylindol-3- yl)- pyrazolin- 3- karboksylat ( 13).
En oppløsning av N-tosylindol-3-yl diazometan (3 ml) i CH2C12(20 ml) tilsettes til en oppløsning av Boc-dehydro alanin-p-nitrobenzylester (2) i 20ml CH2C12ved -15°C. Etter omrøring i 1 time ved -15°C og 4 timer ved 25°C, fordampes oppløsningen til tørr tilstand og resten tritureres med heksan. Det faste produkt, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-(N-tosylindol-3-yl)-pyrazolin-3-karboksylat (13), omkrystalliseres fra etylacetat til konstant smeltepunkt.
NMR (CDC13)6: 4,8-5,4 (m, 1H, CH-N=N).
Eksempel XIV.
boe cyklopropyl tryptofan p- nitrobenzylester ( 14).
Pyrazolinet, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-(N-tosylindol-3-yl)-pyrazolin-3-karboksylat (13), (1 mmol) suspenderes i 50 ml toluen og blandingen kokes under tilbake-løp inntil NMR spektret viser nærværet av cyklopropanpro-toner (63,0-3,5 og 0,8-1,2 ppm) og tapet av pyrazolinsignalet ved65,0 (2 timer). Oppløsningen fordampes og resten av Boe cyklopropyl tryptofan p-nitrobenzylester (14) krystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)6: 2,7-2,0 (m, 1H, CH), 2,0-2,3 og 1,5-1,7 (m,
2H, CH2).
Eksempel XV.
p- nitrobenzyl 3- t- butoksykarbony1- 5-( 3- klorporpyl)- pyrazolin- 3- karboksylat ( 15).
4-korbutyraldehyd tosylhydrazin (3 mmol) tilsettes til en oppløsning av 6 mmol natrium i 15 ml etylenglykol. 25
ml heksan tilsettes og blandingen omrøres i 30 minutter ved 90° C. Etter avkjøling blir diazoforbindelsen ekstra-hert til 3x20 ml kald heksan. De kombinerte ekstrakter vaskes med 20 ml IN NaOH og 25 ml mettet NaCl oppløsning og tørkes over vannfri Na2S04. Etter filtrering blir filtratet tilsatt til en blanding av Boe- dehydroalanin-p-
nitroenzylester (2) (1 mmol) i CH2C12(10 ml) ved 0°C
i løpet av 15 minutter. Etter omrøring ved 25°C i 16 timer, fordampes oppløsningen og resten tritureres med Et20-heksan. Det faste pyrazolin, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonyl-5-(3-klorpropyl)-pyrazolin-3-karboksylat (15), krystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)64,5-5,4 (m, 1H, CH-N=N).
Eksempel XVI.
Boe 3-( 3- klorpropyl) cyklopropyl alanin p- nitrobenzylester ( 16) .
Pyrazolinet, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonyl-5-(3-klorpropyl ) -pyrazolin-3-karboksylat (15), (1 mmol) suspenderes i 50 ml toluen og blandingen kokes under tilbakeløp inntil NMR spektret viser nærværet av cyklopropan-protoner (63,0-3,5 og 0,8-1,2 ppm) og tapet av pyrazolinsignalet ved 6 5,0 (2 timer). Oppløsningen fordampes og resten av Boe 3-(3-klorpropyl) cyklopropylalanin p-nitrobenzylester (16) krystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)6 2,7-3,0 (m, 1H, CH), 2,0-2,3 og 1,5-1,5 (m,
2H, CH2).
Eksempel XVII.
Boe cyklopropyl lysin p- nitrobenzylester ( 17).
Cyklopropylalaninderivatet Boe 3-(3-klorpropyl)cyklopropylalanin p-nitrobenzylester (16) behandles med en IM oppløs-ning av ammoniakk i isopropanol ved 50°C i en tettet trykk-flaske i 48 timer. Fordamping av oppløsningen gir en fast rest som oppløses i 5 ml varm etylacetat og oppløsningen vaskes med 3x25 ml mettet NaCl oppløsning og tørkes over vannfri Na2SO^. Fordamping av oppløsningen gir Boe cyklo-propyllysin p-nitrobenzylester (17) som omkrystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)61,2-1,8 (m, 5, CH2CH2CH), 0,8-1,1 (m, 2H,
CH2), 2,5 (m, 2H, CH2NH2).
Eksempel XVIII.
p- nitrobenzyl 3- t- butoksykarbonylamin- 5-( 4-/ 2, 4- dinitro-fenoksyl/- fenyl)- pyrazolin- 3- karboksylat ( 18).
En oppløsning av 4-(2,4-dinitrofenoksy)-fenyldiazometan
i CH2C12(20 ml) tilsettes til en oppløsning av Boc-dehydroalanin-p-nitrobenzylester (2) i 20 ml CH2C12ved -15°C. Etter omrøring i 1 time ved -15°C og 4 timer ved 25°C, fordampes oppløsningen til tørr tilstand, og resten tritureres med heksan. Det faste produkt, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-(4-/2,4-dinitro-fenoksy1/-fenyl)-pyrazolin-3-karboksylat (18), omkrystalliseres fra etylacetat:heksan til konstant smeltepunkt.
NMR (CDC13)5 : 4,8-5,4 (m, 1H, CH-N=N).
Eksempel XIX.
Boc- 0- 2, 4- dinitrofenyl cyklopropyl tyrosin p- nitrobenzyl ester ( 19) .
Pyrazolinet, p-nitrobenzyl 3-t-butoksykarbonylamino-5-(4-/2,4-dinitrofenoksyl/-fenyl)-pyrazolin-3-karboksylat (18), suspenderes i 50 ml toluen og blandingen kokes under tilbake-løp inntil NMR spektret viser nærværet av cyklopropanproto-ner (63,0-3,5 og 0,1-1,2 ppm) og tap av pyrazolinsignalet ved65,0 (2 timer). Oppløsningen fordampes og resten av Boc-0-2,4-dinitrofenyl cyklopropyltyrosin p-nitrobenzylester (19) krystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)6: 2,7-3,0 (m, 1H, CH), 2,0-2,3 og 1,5-1,7 (m,
2H,. CH2 ) .
Eksempel XX.
Boe cyklopropyltyrosin p- nitrobenzylester ( 20).
En oppløsning av Boe 0-2,4-dinitrofeny1 cykloprpropyltyro-sin p-nitrobenzylester (19) (1 mmol) i 2 ml DMF behandles med 22 mmol merkaptoetanol. Etter 1 time ved 25°C fordampes DMF og resten av Boe cyklopropyltyrosin p-nitrobenzylester (20) krystalliseres fra etylacetat:heksan.
NMR (CDC13)6: 2,7-2,9 (m, 1H, CH), 2,0-2,3, 1,5-1,7 (m,
2H, CH2).
Eksempel XXI.
Z-( 2RS)- AEPhe- Leu' OMe, ( 21).
En oppløsning av 546 mg,(4 mmol), isobutylkloroformat i
10 ml kloroform tilsettes dråpevis til en oppløsning av BOc-Ser"OBzll(N02) (1) (1,24 g, 4 mmol) og 404 mg (4 mmol) N-metylmorfolin i 30 ml kloroform ved 0,5°C. Etter omrøring i 20 minutter blir en oppløsning av Leu"OMe'HCl (1,45 g, 8 mmol) og N-metylmorfolin (0,81 g, 8 mmol) i 20 ml kloroform tilsatt ved 10°C. Etter omrøring i 2 timer ved 0,5°C og deretter over natt ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen vasket med H20, 5% sitronsyre og 5% NaHCO^, og tørket over Na2S04. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum og resten omkrystallisert fra etylacetat:heksan, hvorved man oppnådde Z-(2RS)-A<E>Phe-Leu"OMe (21) (1,13 g, 64,4%)
som fargeløse krystaller med smp. 94-97°C.
Rf(I) = 0,85, Rf(III) = 0,12.
Analyse beregnet for C25H3o<N>2°5<:>
C 68,47, H 6,90, N 6,39.
Funnet C 68,50, H 6,99, N 6,38.
Separering av Z-( 2RS)- A Phe- Leu* OMe, ( 21), til diastereomerer ved HPLC.
E
Z-(2RS)-a Phe-Leu'OMe, (21) ble separert i de diastereo-mere bestanddeler ved bruk av HPLX (C1 ,o0 Lichrosorb, 20
cm x 0,46 cm, CH^CN-H 0 (55:45), 2 ml/min.).
E E
(2S)a Phe isomeren viste t R= 6,2 min., og (2R)A Phe-isomeren viste t K=8,1 min. Denne forbindelse har anvendelse ved syntese av et mellomprodukt for å oppnå et enkefalinpeptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXII.
( 2S)- AEPhe- Leu Orne TFA ( 22).
En oppløsning av (Z-(2S)-A Phe-Leu OMe (1,31 g, 3 mmol)
og tioanisol (2 ml) i 20 ml trifluoreeddiksyre, TFA, ble omrørt ved 0°C i 3 timer og så romtemperatur over natt.
TFA ble fjernet under redusert trykk og resten ble triturert med 30 ml eter, hvoretter utfelte krystaller ble samlet ved sug og vasket med eter for a o oppnå o (2S)-A EPhe-Leu OMe (22) (1,14 g, 91,2%), smp. 251-252°C (dekomp.); /a/<D->89,6° (C=0,5 H20). NMR (CF3C02H- CDC13(1:1)6 : 0,67 (6H, br s (CH3)), 0,78-1,40 (3H, m, CH2CH), 2,28 (2H, d, J = 10 Hz, a^), 3,50 (1H, t, J = Hz, H<->A), 3,85 (3H, s, CH30), 4,20-4,50 (1H, m, CHC02Me), 5,66-5,88 (1H, m, NH), 7,53 (5H, s, ArH)m 7,70-8,20 (2H, br, NH3). Rf (IV) = 0,74 .
Analyse beregnet for ^19H25F3N2°5:
C 54,54, H 6,02, N 6,70.
Funnet C 54,61, H 6,05, N 6,66.
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et enkefalinpeptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXIII.
Z-( 2S)- AEPhe- Leu Orne ( 23).
En oppløsning av Z (2S) A Phe (1,24 g, 4 mmol) og Leu OMe
HC1 (1,09 g, 6 mmol) i 50 ml THF ble avkjølt til 0°C og trietylamin (0,61 g, 6 mmol) HOBt (0,54 g, 4 mmol), og DCC (0,83 g, 4 mmol), ble suksessivt tilsatt ved 0°C under omrøring. Etter omrøring i 4 timer ved 0°C og romtemperatur over natt, ble det utfelte krystaller filtrert og filtratet fordampet i vakuum. Resten ble ekstrahert med etylacetat og ekstraktene vasket med 5% sitronsyre, 5% NaHCO^og vann, og deretter tørket over Na-^SO^. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og det resulterende faststoff ble omkrystallisert fra etylacetat:heksan, hvorved man oppnådde Z-(2S)-A<E>Phe-Leu OMe (23) (1,48 g, 84,5%), som fargeløse nåler med smp. 114-115°C; /i/<25->132,l° (c=l,0, MeOH).
NMR (CDC13) 6: 0 ,78 6H, d, J = 6 Hz, (CH^CH), 1,10-1,70
(4H, m, CH-CH2og H), 2,18 (1H, d av d, J = 9 Hz, og 6
Hz, AH), 2,80 (1H, t, J = 9 Hz, Ph<H>A), 3,56 (3H, s, CH30), 4,17-4,45 (1H, m, CHC02Me), 5,25 (2H, s, PhCH20), 5,56-
5,80 (1H, br, NH), 6,60-6,95 (1H, br, NH), 7,33 (5H, br s, PhA), 7,47 (5H, s, PhCH2 ). Rf(I)=0,85, Rf (IV)
= 0,12.
Analyse beregnet for C25H30N2^5:
C 68, 471, H 6,90, N 6,39 .
Funnet C 68,53, H 6,93, N 6,35.
Forbindelsen kan benyttes som mellomprodukt ved syntese
av et enkefalinpeptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXIV.
Z-( 2S)- AEPhe. Leu OMe ( 24).
Ved å følge den samme prosedyre som ovenfor, for Z-(2S)-A<E>Phe-Leu- OMe (23), b^le Z-(2R)-A"Fhe (1,24 g, 4 mmol)
og Leu OMe HC1 (1,09 g, 6 mmol) behandlet med Et_,N (0,61
g, 6 mmol), HOBt (0,54 g, 4 mmol) og DCC (0,83 g, 4 mmol)
i 50ml THF for derved å oppnå Z-(2S)-A<E>Phe-Leu OMe (24)
(1,41 g, 80,5%) som prismer (etylacetat:heksan); /2/D
87,6° (0=1,0, MeOH); NMR (CDC13=: 0,57 (3H, d, J = 6 Hz, CH3), 0,68 (3H, d, J = 6 Hz, CH3), 0,70,1,45 (4H, m, CH2CH,
t>-H), 2,25 (1H, d av d, J = 9 Hz og 6 Hz, |> - H) , 2,77 (1H, t, J = 9 Hz IX^) 3,65 (3H, s, CH30), 4,15-4,50 (1H, m, CHC02Me), 5,27 (2H, s, PhCH20), 5,73 (1H, s, NH), 6,83-7,15 (1H, br, NH), 7,32 (5H, br s Ph-CH-), 7,55 (5H, s, PhCH2). Rf (I) = 0,85, Rf (III) = 0,12.
Analyse beregnet for C25<H>3<qN>2<0j-:>
C 68,47, H 6,90, N 6,39
Funnet C 68,30, H 6,96, N 6,32.
Eksempel XXV.
( 2R)- AEPhe. Leu OMe TFA ( 25).
Ved å følge en prosedyre tilsvarende den ovenfor for (2S)-A<E>Phe-Leu OMe TFA (22), ble Z(2R)AEPhe (l,31g, 4 mmol) behandlet med 2 ml tioanisol og 20 ml TFA for derved å oppnå (2R)-A<E>Phe-Leu OMe TFA (25) (1,09 g, 87%), smp. 256-257°C (dekomp.); A/^<2>24, 2°, NMR (CDC13-CF3C02H (1:1))6: 0,83 (6H, d, J = 4 Hz, CH3), 1,05-1,53 (3H, m, CH2CH), 2,03-
2,45 (2H, n,l><2) 3,53 (1H, t, J = 10 Hz, tx" 3,75 (3H, s, ri ri CH30), 4,23, 4,52 (1H, m, CHC02Me), 5,80 (1H, d, J = 8 Hz, NH), 7,52 (5H, s, ArH), 7,80-8,20 (2H, br NH). Rf (IV) 0,77, R (V) = 0,80.
Analyse beregnet for C]_gH25F3N2°5 :
C 54,54, H 6,02, N 6,70
Funnet C 54,56, H 6,06, N 6,66.
Denne forbindelse har anvendelse aom mellomprodukt ved syntese av et enkefalinpeptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXVI.
Z- D- Ala- Gly- OMe ( 26).
En oppløsning av Z-D-Ala (2,23 g, 10 mmol) og Gly OMe HC1 (1,26 g, 10 mmol) i 50 ml THF ble avkjølt til 0°C og trietylamin (1,01 g, 10 mmol), HOBt (1,35 g, 10 mmol) ogDCC(2,06 g, 10 mmol) ble suksessivt tilsatt ved 0°C under omrøring. Etter omrøring i 4 timer ved 0°C, ble reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur over natt, og utfelte krystaller ble filtrert og filtratet fordampet i vakuum. Resten ble ekstrahert med etylacetat og ekstraktet ble vasket med 5% sitronsyre, 5% NaHCO^ og vann og tørket over vannfri Na2S04. Oppløsningsmidlet fordampes i vakuum og den faste rest omkrystalliseres fra etylacetat:heksan for derved å oppnå Z-D-Ala-Gly-OMe (16) (2,48 g, 84,4%) som
--2 2
fargeløse krystaller med smp. 96-97°C; /a</D>23,3°C (c=
1,0, MeOH); NMR (CDC13) 6: 1,39 (3H, d, J = 8 Hz, CH3),
3,76 (3H, s, CH30), 4,03 (2H, d, J = 6 Hz, CH2NH),
4,15-4,50 (1H, m, -CH-NH), 5,15 (2H, s, CH20), 5,58 (1H,
d, J = 7 Hz, NH), 6,70-6,95 (1H, br, NH), 7,42 (5H, s, Ar-H). Rf(I) = 0,62, Rf (VI) = 0,38.
Analyse beregnet for C.^H^gN20(-:
C 57,14, H 6,16, N 9,52
Funnet C 57,19, H 6,210, N 9,50.
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXVII.
Z- Try- D- Ala- Gly OMe ( 27).
En suspensjon av Z-D-Ala-Gly-OMe (26) (5,88 g, 0,02 mmol) og 10% Pd-C (0,4 g) i 300 ml metanol ble omrørt under en hydro-genatomsfære ved romtemperatur i lh time. Katalysatoren ble filtrert og filtratet fordampet i vakuum. Resten og Z-Tyr (6,30 g, 0,02 mol) ble oppløst i 300 ml tørrTHF, avkjølt til 0°C og HOBt (2,70 g, 0,02 mol) og DCC (4,12
g, 0,02 mol) ble tilsatt suksessivt ved 0°C. Oppløsningen ble omrørt i 3 timer ved 0°C over natt ved rmotemperatur.Utfelte krystaller ble filtrert. Filtratet ble fordampet under redusert trykk, de gjenværende krystaller oppløst i EtOAc og oppløsningen vasket med 5% NaHC03, 0,2 N HC1
og vann, og tørket over vannfri Na2S04. Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og det resulterende faststoff renset ved silikagelkolonne-kromatografi ved bruk av CHCl^CH^OH (98:2) som elueringsmiddel, hvorved man oppnådde Z-Tyr-D-Ala-Gly-OMe (27) (8,62 g, 94,3%), smp. 154-155°C (AcOEt-heksan); /a/D 33,4° (c = 1,0, MeOH); NMR (CDCI3-DMSO-dg (4:1)6: 1,25 (3H, d, J = 7 Hz, CH3), 2,82-3,03 (2H, m, CH2), 3,70 (3H, s, CH30), 3,80-3,95 (2H, m, CH2PhOH), 4,15-4,60 (2H, m, 2CH), 5,50 (2H, s, CH20), 6,70-7,25 (4H, m, ArH), 6,70-6,90 (1H, br, NH), 7,36 (5H, s, ArH), 7,70-8,10 (2H, br, NH). Rf(I) = 0,48; Rf(VI) = 0,08.
Analyse beregnet for C^H^N^O^ _
C 60,39, H 5,95, N 9,18
Funnet C 60,23, H 6,00, N 9,08.
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon .
Eksempel XXVII
Z- Tyr- D- Ala- Gly. OH ( 28).
Til en oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly-OMe (27) (4,57 g, 0,01 mol) i 10 ml MeOH ble det tilsatt 20 ml eller 0,02 mol IN NaOH ved 0°C under omrøring. Suspensjonen ble om-rørt i 2 timer ved 0°C, fortynnet med 80 ml vann og nøytra-lisert med 20 ml IN HC1. De utfelte krystaller ble samlet med sug, vasket med vann og tørket under redusert trykk,
og man oppnådde Z-Tyr-D-Ala-Gly.OH (28) (3,59 g, 81,0%), smp. 102-104°C (AcOEt) (lit.tsmp. 124°C); /a/<22>18,0°(c = 1,0,DMF, /i?<22>16,7° (c 0,54, DMF)); NMR (DMSO-Dg)6: 1,16 (3H, d, J = 7 Hz, CH3), 2,60-2,90 (2H, m, CH2), 3,80 (2H, d, J = 6 Hz, CH2PHOH), 4,10,4,45 (2H, m, 2CH), 5,02 (2H, s, CH20), 6,63-7,20 (4H, m, HOPh-), 7,40
(5H, s, ArH), 8,10-8,30 (2H, br, 2 NH), 9,10-9,40 (1H,
br, OH). Rf(IV) = 0,20.
Analyse beregnet for <-22H25N3^7:
C 59,59, H 5,68, N 9,48.
Funnet C 58,23, H 5,79, N 9,39.
tS. Shinagawa, M, Fujini, H. Ishii og K. Kawai; "Chem. Pharm. B ull.", 29, 3630 (1981).
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon .
Eksempel XXIX.
Z- Tyr- D- Ala- Gly( 2S)- AEPhe.Leu OMe (29).
Til en oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly OH (887 mg, 2 mmol)
og (2S)-A<E>Phe.Leu TFA (836 mg, 2 mmol) i 80 ml THF ble det tilsatt N.metylmorfolin (202 mg, 2 mmol) HOBt (270
mg, 2 mmol) og EDC (l-etyl-3(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid HC1) (384 mg, 2 mmol) ved 0°C. Etter omrøring i 3 timer ved 0°C og over natt ved romtemperatur, ble opp-løsningsmidlet fjernet under redusert trykk, og resten ekstrahert med 100 ml AcOEt. De kombinerte ekstrakter ble vasket med 5% NaHCO^, 0,2 N HC1, vann, og tørket over vannfri Na-jSO^. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og faststoffet omkrystallisert fra etylacetat: heksan hvorved man oppnådde 1,212 g (83%) Z-Tyr-D-Ala-Gly(2S)-A Phe-Leu OMe (29) som et fargeløst pulver med smp. 162-163°C; /a/D-56,8°C (C = 0,5, DMF).
NMR (DMSO-dg) w6: 0,78 (6H, t, J = 5 Hc, CH3x2), 1,00-1,67 (4H, m, CH2CH og cyklopropy1-H), 1,18 (3H, d, J = 7 Hz, CH3), 1,90-2,15 (1H, m, cyklopropy1-H), 2,46-3,00 (3H, m, CH2og cyklopropyl-H), 3,48 (3H, s, CH30), 3,70-3,80 (2H, br, CH2) 3,95-4,43 (3H, m, 3 CH), 5,01 (2H, s,CH2), 6,77-7,18 (4H, m, HOPh-), 7,32 (5H, s, ArH), 7,40 (5H, s, Ar-H), 7,30-7,60 (1H, m, NH), 7,72 (1H, d, J = 8 Hz, NH), 8,10-8,40 (2H, m, 2 NH), 8,68 (1H, s, NH), 9,28
(1H, s, OH). Rf(II) = 0,79; Rf(IV) = 0,63.
Analyse beregnet for C^gH^N^-Og :
C 64,18, H 6,49, N 9,60
Funnet C 64,04, H 6,54, N 9,56.
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Eksempel XXX.
Z- Tyr- D- ala- Gly-( 2R)- AEPhe- Leu OMe ( 30).
Ved å følge en prosedyre tilsvarende den som er beskrevet for Z-Tyr-D-Ala-Gly (2S)-A<E>Phe-Leu OMe (29), ga Z-Tyr-D-Ala-Gly OM (887 mg, 2 mmol), (R)-<E>Phe-Leu OME TFA (836
mg, 2mmol), N-metylmorfolin (202 mg, 2 mmol), HOBt (270
mg, 2 mmol), EDC (384 mg, 2 mmol) og 80 ml THF, 1,287 g (88,2%) Z-Tyr-D-Ala-Gly-(2R)-A<E>Phe-Leu OMe (30) som farge-løst pulver med smp. 160-170°C (EtOH-heksan).
NMR (DMSO-dg)6: 0,53 (3H, d, J = 5 Hz, CH3), 0,73 (3H,
d, J = 5 Hz, CH3), 1,20 (3H, d, J = 6 Hz, CH3), 1,05-1,45 (4H, m, CH2CH ogAH), 1,87-2,13 (1H, m,AH), 2,43-2,60
(1H, m,AH), 2,60-2,90 (3H, m, CH3), 3H, s, CH30), 3,70-3,85 (2H, br, CH2), 3,90-4,45 (3H, m, CHx3), 5,03 (2H,
s, CH2), 6,66-7,23 (4H, m, HOPh) 7,31 (5H, s, ArH), 7,40 (5H, s, ArH), 7,40-7,85 (2H, m, NHx2), 8,15-8,40 (2H, br, NHx2), 8,70 (1H, s, NH), 9,25 (1H, s, OH). Rf(II) =
0,81, Rf(IV) 0,63.
Analyse beregnet for C^H^Nj-Og :
C 64,18, H 6,49, N 9,60.
Funnet C 63,99, H 6,51, N 9,56.
Denne forbindelse har anvendelse som mellomprodukt ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon.
E ksempel XXXI.
Z- Tyr- D- Ala- Gly-( 2S) AEPhe- Leu OH ( 31).
Z-Tyr-D-Ala-Gly-(2S)A<E>Phe-Leu OMe (29) (365 mg, 0,5 mmol) ble oppløst i 1 ml metanol, oppløsningen ble avkjølt i et is-vannbad og IN NaOH (1 ml, 1 mmol) ble tilsatt ved 0°C. Etter omrøring i 2 timer ved 0°C, ble oppløsningen nøytralisert med IN HC1 og fortynnet med vann. Utfelt faststoff ble samlet ved sug og tørket under redusert trykk. Faststoffet ble renset ved silikagel kolonnekromatografi ved bruk av kloroform:metanol (19:1) og kloroform:metanol: eddiksyre (95:5:1) som elueringsmidler. Etter at utgangs-stoffene var fjernet ved bruk av CHCl^/MeOH i forholdet 19:1, ble Z-Tyr-Ala-Gly-(2S)A<E>Phe-Leu OH (31) (230 mg, 64%), smp. 153-155°C (AcOEt). Mellomproduktet til eksempel XXXIV. Rf(IV) = 0,48; Rf(V)=0,88; /<a>/<22->98,2°C (C 0,5, DMF) ble eluert med CHC13:MeOH:HOAc (95:5:1).
Analyse beregnet for gH^ ^N,-Og . H20:
C 62,60, H 6,46, N 9,54.
Funnet C 62,39; H 6,50, N 9,30.
Eksempel XXXII.
Z- Tyr- D- Ala- Gly-( 2R)- AE Phe- Leu OH ( 32).
I henhold til det som er beskrevet ovenfor, ga Z-Tyr-D-Ala-Gly .(2R)AEPhe-Leu OMe (30) (365 mg, 0,5 mmol) 270 mg (75%) Z-Tyr-D-Ala-Gly-(2R)A<E>Phe-Leu OH (32), smp. 204-205°C.
(AcOEt); Rf(IV) = 0,40; Rf(V) = 0,80; /a/<22->41-2°C (c 0,5, DMF).
Analyse beregnet for C3gH4^<->N,-<H>20:
C 62,60, H 6,46, N 9,54,
Funnet C 62,28, H 6,46, N 9,38.
Eksempel XXXIII.
Tyr- D- Ala- Gly-( 2S) AEPhe- Leu ( 33).
En oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly-(2S)A Phe-Leu OH (31)
(143 mg, 0,2 mmol) og 0,3 ml tioanisol i 3 ml TFA ble om-rørt i 1 time ved 0°C og 4 timer ved romtemperatur. Opp-løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og resten triturert med eter for derved å gi TFA-saltet. Saltet ble oppløst i 5% AcOH og ført gjennom en kolonne inneholdende et stort overskudd av "Amberlite CG400" (acetatform), fulgt av en kolonne av "BioGel P-2" (1,9x8,9 cm, 200 400 mesh) (4 ml/20 min.). Fraksjonene inneholdt Tyr-D-Ala-Gly-(2S)APhe-Leu (33) ble samlet og lyofilisert for derved å gi 70 mg (60,1%) (S)-10, smp. 197°C (dekomp.); Ret. tid = 4,4 min (HPLC, C18-Lichrosorb (20 cm x 0,46 cm), CH3CN: HgO:TFA (30_70:1),1 ml/min; Rf(IV) = 0,05; Rf(VI) 0,38 /a/p - 7,12°C (c, 0,25 AcOH).
Aminosyreforhold i surt hydrolysat: Tyr 0,94; Ala 0,92; Gly 1,0; Leu 1,01; /T2S)<E>Phe ble ikke påvist/.
Denne forbindelse har anvendelse som et sluttpeptid ved syntese av et analgetisk peptid som inhiberer muskelkontraksjon .
Eksempel XXXIV.
Tyr- D- Ala- Gly-( 2R)- AEPhe- Leu ( 34).
Ved å følge en prosedyre tilsvarende den som beskrives ovenfor, ga Z-Tyr-D-Ala-Gly-(2R)A<E>Phe-Lue OH (32) (0,43 mg, 0,2 mmol) 82 mg (70,4%) (2R)-10, smp. 185°C (dekomp.); retensjonstid 8,1 min. /HPLC, C-^g-Lichrosorb (20 cmx0,46 cm), CH,CN:H90:TFA (30:70:1), 1 ml/min^/: Rf(IV) = 0,03;
--22
Rf(V) = 0,35; /a/D 89,6 (c 0,25, AcOH). Aminosyre-forholdet i det sure hydrolysat: Tyr 0,91, Ala 0,98,Gly 1,0; Leu 0,95. /T2RS)<E>Phe ble ikke påvist/.
Analyse beregnet for C3QH3g<N>5<0>7.CH3C02H:1,5H20:
C 57,47, H 6,93, N 10,47
Funnet C 57,56, H 6,67, N 10,08.
Dette peptid er et aktivt analgetisk middel også.
Disse nye peptider er ekstremt standhaftige overfor hydrolyse. Cyklopropanringen i variantaminosyren hindrer ster-iske reaksjoner på de ved siden av hverandre liggende karbo-nyl- og aminofunksjoner og -gruppene C02H og fenyl vil forsinke enzymspalting av peptidbindingene.
Kortkjedede dipeptider der begge aminosyrer var cyklopropyli-sert vil være spesielt stabile mot sur hydrolyse på metyl-estergruppen og på peptidbindingen. Hvis ikke peptidene selv er giftige for mennesker, kommer det ingen tilsatt giftighet på grunn av de modifiserte unaturlige aminosyrekomponenter.
Det følgende eksempel illustrerer en spesifik sluttprodukt-utførelsesform innenfor oppfinnelsens ramme, og skal ikke anses som begrensende for denne. Der oppfinnelsen er beskrevet under henvisning til en spesifik utførelsesform,
er den ikke begrenset slik. Det skal være klart at varia-sjoner og modifikasjoner kan gjennomføres av fagmannen uten å gå utenfor oppfinnelsens ramme.
Det skal være klart at søtningsegenskapene for aspartan-typen peptider avhenger av seriokjemiene for de individuelle aminosyrekomponenter i peptidet. Hver av aminosyrene kan foreligge i enten dekstro-, (D), eller laevo-, (L), roterende form. L-formen av forbindelsene har de søthetskarakteris-tika som best kan bestemmes på dette punkt. D-formen av isomerene er vanligvis bitter eller uten smak. Kombinasjo-ner av D- og L-formene er noen ganger søte, men vanligvis ikke så intenst søte som L-isomerene.
De nye dipeptid cyklopropylderivater i det følgende eksempel er vannoppløselige stoffer som kan benyttes ved et antall anvendelser der ikke-toksiske ikke sukkersøtnignsstoffer er ønskelige. De er 100-200 ganger så søte som sukrose og viser langtids retensjon av søtningsegenskapene. Videre viser de nye dipeptider ikke den ubehagelige ettersmak som er karakteristisk for sakkarin og cyklamater.
Disse dipeptid-blandinger er vanligvis verdifulle som søt-ningsmidler for karbonerte og ikke-karbonerte drikker, tyggegummistoffer, slik som fruktsafter, vegetabiler, frukt, meieriprodukter, slik som eggprodukter, melkedrikker, iskrem, siruper, kakeblandinger,■ pulverdrikkeblandinger, is og dessertpynt, kjøttprodukter, vin- og salatblandinger samt dressing.
Eksempel XXXV.
N- CBZ- 6- benzyl- L- aspartyl- A - fenylalanin metyleter.
Tilsammen 1,57 g (4,1 mmol) N-CBZ-aspartinsyre-B-benzyl-ester oppløses i 50 ml tørr THF ble avkjølt til -20°C i et tørris-karbontetrakloridbad og 0,58 ml (5,3 mmol) N-metylmorfolin og 0,68 ml (5,3 mmol) isobutylkloroformat ble tilsatt. Etter 20 minutter ble en oppløsning av 1,0
g, (4,4 mmol) Z-cyklopropylfenylalanin metylester i 20
ml dioksanrvann (7:3) inneholdende 0,61 ml (4,4 mmol) trietylamin tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natt, THF fjernet under vakuum, 5 ml eter og 10 mlH20 tilsatt, og oppløsningen ekstrahert. Den vandige andel ble ekstrahert med ytterligere 2 x 25 ml eter, etersjiktene kombinert, vasket med 2 x 25 ml 5% sitronsyre, 2 x 25 ml 5%NaHCO^, 1 x 2 ml mettet NaCl og tørket over vannfriNa2S04.
Oppløsningen ble filtrert, konsentrert til ca. 25 ml og heksanet tilsatt til uklarhet. Krystallisering ved rom temperatur ga 1,73 g 35 som et hvitt, krystallinsk faststoff. Filtratet ble lagret ved 5°C for å gi ytterligere 0,22 g 35, noe som ga et totalt utbytte på 84% med smp. 99-104°C; Rf(I)V = 0,80; IR (KBr) 3310 (amid NH), 1750-1650 cm (BCZ C=0, ester C=0, Amid C=0); NMR (CDC13)6: 7,5-7,4 (m, 15H, ArH), 6,5 (br, sl 1H, NH), 5,9-5,7 (m,
1H, NH), 5,2-5,0 (dd, 4H, PhCH2OCO-), 4,5
(m, 1H, a-H), 3,7 (2S, 3H, diastereomer COOCH2), 3,1-2,9
(, 1H, „-*)# 2,8 (m, 2H, COO-CH~-), 2,3-2,1 og 1,9-1,8
H
(m, 2H, X).
Analyse beregnet for C^qH^qO.^^ :
C 67,92, H 5,66; N,5,28
Funnet C 67,98, H 5,73, N 5,30.
L- aspartyl- A 2 fenylalanin metylester ( 37).
1,0 g (1,9 mmol) 27 ble oppløst i 50 ml absolutt metanol, 70 mg 10% Pd/C ble tilsatt, hydrogen boblet gjennom oppløs-ningen i 5 timer. Oppløsningen ble filtrert gjennom celutt og filtratet konsentrert i vakuum. Fordelings-kromatografi av dette materiale på "Sephadex G-10" ved bruk av n-BuOH/HOAc/H20 4:1:5 øvre fase som elueringsmiddel ga en ren diastereomer av 3_7 (heretter kalt 37A) , i fraksjonene 41-90, og den andre rene diastereomer i fraksjonene 112-150,(heretter kalt 37B) og en blanding av de to diastereomerer i fraksjonene 91-111. Fraksjonene 41-90 ble kombinert, konsentrert i vakuum, 40 ml 5%-ig eddiksyre ble tilsatt og oppløsningen lyofilisert, hvorved man oppnådde 150 mg 37A. Fraksjonene 91-111 ble behandlet på tilsvarende måte for å gi 147 mg 37A og 37B. Fraksjonene 112-150 ble behandlet på samme måte, og man oppnådde 210 mg 37B med et totalt utbytte på 88%, smeltepunkt 37B 126-180°Ctt;<25>3_7A = 35°C (c. 0,7, i IN HC1), /a/^<5>37B = 1,3°C (c 1,1, i IN HC1); Rf = 37A (V) = 0,36, Rf 37B (V) = 0,30; NMR (CD30D) 37A og 37B 67,5-7,4 (br s. 5H, ArH), 5,3 37B og 5,1 37A (amid NH), 4,6-4,2 (m, 1H, a-H), 3,8 (2s, 3H, C00CH3), 3,2-3,0 (m, 1H, O- E), 2,6-2,4 (m,
(m, 2H, OOC-CH--), 2,3-1,8 (m, 2H,*!?).
Z ri
Dette peptid er et potent langtidssøtningsmiddel for karbonerte drikker når det benyttes i en dose på 373 mg pr. 12 ouncers karbonert appelsinsoda- eller cola-drikke. Analyse beregnet for C15<H>lg<0>5<N>2.<l><H>20 ( 37B).
C 55,5, H 6,17, N 8,64.
Funnet C 55,71, H 5,92, N 8,38.
Eksempel XXXVI.
N- CBZ- B~ benzyl- L- aspartyl- a fenylalanin metylester ( 36).
Tilsammen 0,86 g (2,4 mmol) N-CBZ-L-aspartinsyre-g-benzyl-ester oppløst i 30 ml tørr THF ble avkjølt til 20°C i et tørris-karbontetrakloridbad, og 0,32 ml (2,9 mmol) N-metylmorfolin og 0,38 ml (2,9 mmol) isobutyl kloroformat ble tilsatt. Etter 20 minutter ble en oppløsning av 0,55
g, (2,4 mmol) E-cyklopropylfenylalanin metylester tilsatt. Blandingen ble tilatt omrøring ved romtemperatur over
natt, THF ble fjernet i vakuum, 30 ml eter og 10 ml H20
ble tilsatt, og oppløsningen ekstrahert. Den vandige del ble ekstrahert med ytterligere 2 x 10 ml eter, etersjiktene kombinert, vasket med 2 x 20 ml 5% sitronsyre, 2 x 20 ml 5% NaHCO^, 1 x 20 ml vann og tørket over vannfri Na2S04. Oppløsninge ble filtrert, konsentrert i vakuum og den resulterende olje tørket i vakuum over ^ 2®$' hvorved man oppnådde 1,1 g (86%) 36 som et amorft faststoff. R^(V) = 0,38; NMR (CDC13)6: 7,5-7,4 (br, s. 4H, PhCH2OCO-,), 4,8-4,6 (m, 1H,>-H), 3,4 (br, s, 3H, COOH3) , 3,1-3,7 (m, 3H, H og COO-CH2), 2,4-2,1 og 1,6-1,4 (m, 2H, K jj) .
Denne forbindelse er et mellomprodukt forXXXVII.
Eksempel XXVII.
L-aspartyl-a fenylalanin metylester (38).
Til sammen 1,5 g (2,8 mmol) 36 ble oppløst i 50 ml absolutt metanol, 100 ml 10% Pd/C ble tilsatt, hydrogen boblet gjennom oppløsningen i 4 timer. Oppløsningen ble filtrert gjennom celitt, og filtratet konsentrert i vakuum. Fordel-ingskromatografi av dette materialet på "Sephadex-10" ved bruk av n-BuOH/HOAc 4:1:5 øvra fase som elueringsmiddel, ga ren 38 i fraksjonene 94-107. Disse fraksjoner ble kombinert, oppløsningsmidlet fordampet i vakuum, og den resulterende olje felt ut fra metanol-eter, hvorved man oppnådde 140 mg (16%) 38, Rf(V) = 0,25; NMR (CD3OD)6: 7,6-7,3 (m, 5H, arH), 4,5-4,1 (m, 1H, a-H), 3,4 (s, 3H, COOCH3), 3,1-3,9
(m, 1H, H-&), 2,5-2,3 (m, 2H, 00C-CH2"), 2,3-1,7 (m, 2H,
Dette peptid er et potent søtningsmiddel med langtids virk-ning for drikke- og matvareprodukter.
Eksempel XXXVIII.
Syntese av cyklopropyl aspartyl fenylalanin metylester.
a. N- Boc- Dehydro- aspartinsyre B- t- butyl a- metylester.
En oppløsning av 5 g N-Boc-B-hydroksy aspartinsyreester
i 25 ml eddiksyreanhydrid oppvarmes til en temperatur av ca. 100°C i 1 time og fordampes til tørr tilstand i vakuum. Rå-dehydroaspartinsyre-derivatet felles ut fra et egnet oppløsningsmiddel, slik som metylacetat ved bruk av petrol-eter, og brukes direkte i det neste trinn. Utbyttet er kvantitativt. Dette er det første mellomprodukt.
b. N- Boc cyklopropyl aspartinsyre B- t- butyl a- metylester.
Det urene dehydroaspartinsyrederivat oppløses i 50 ml metylenklorid og gassformig diazometan føres inn i oppløs-ningen inntil overskytende reagens er tilstede i oppløs-ningen. Etter henstand over natt fordampes oppløsningen og resten oppløses i 10 ml tørr benzen og kokes under til-bakeløp inntil det ikke utvikles ytterligere N2. Fordamping av oppløsningen i det råproduktet som renses ved krystallisering fra et egnet oppløsningsmiddel, eller kromato-graferes på en silisium dioksyd-kolonne. Hvis E- og Z-isomerene er tilstede, separeres disse ved omhyggelig kromatografi. Utbyttet er 60-70%. Dette er det andre mellomproduktet .
c. N- Boc Cyklopropyl aspartinsyre B- t- butylester.
Til en oppløsning av 5 g N-Boc cyklopropyl aspartinsyre B-t-butyl a-metylester i 50 ml metanol tilsettes det en
1,1 molart overskudd av 4N NaOH og oppløsningen tillates å stå ved romtemperatur i 4 timer. Oppløsningen fordampes så til et meget lite volum i vakuum, fortynnes med 50 ml vann og 10% sitronsyreoppløsning innsettes inntil pH-verdien er 5-6. Produktet felles ut og samles på et filter. Etter vasking med vann, tørkes produktet i en desikator
og krystalliseres fra etylacetat. Utbyttet er kvantitativt.
d. n- Box B- t- butyl cyklopropyl aspartyl fenylalanin
metylester.
Til en oppløsning av 5 g N-Boc B-t-butyl cyklopropyl aspartinsyre i 50 ml metylenklorid tilsettes 1 mol ekvivalent hver av dicykloheksyl karbodiimid, N-hydroksybenztriazol,
og fenylalanin metylester. Etter 16 timer ved romtemperatur filtreres blandingen, og filtratet vaskes suksessivt med 10% NaHCO^, 10% HC1 og saltoppløsning og tørkes over vannfri Na2S04. Etter fordamping til tørr tilstand, krystalliseres resten fra et egnet oppløsningsmiddel, som metylacetat. Utbyttet er 70%.
Cyklopropyl aspartyl fenylalanin metylester.
Til en 1:1 oppløsning av trifluoreddiksyre og 50 ml metylen klorid tilsettes 5 g N-Boc B-t-butyl cyklopropyl aspartyl fenylalanin metylester og oppløsningen tillates å stå i romtemperatur i 1 time og fordampes til tørrhet. Det urene peptid oppløses i 10% eddiksyre og oppløsningen føres gjennom en kolonne av "Biogel P-2" og de ninhydrin-reaktive fraksjoner samles og lyofiliseres. Krystallisering av det rene peptid fra vandig alkohol eller en annen egnet oppløsningsmiddelblanding gir ren cyklopropyl aspartyl fenylalanin metylester, i kvantitative utbytte. Dette er sluttproduktet.
Dette pepetider har en meget søt smak, og kan benyttes
for å søte drikker, næringsmidler av alle typer osv.
Som angitt ovenfor, har de nye søtningsforbindelser ca. 100-200 ganger søtningsevnen til vanlig sukrose. For å gjøre en vanlig 8 ouncers kaffe søt, kan en 1 g mengde av det nye produkt anvendes, noe avhengig av brukerens smak. En pakke på ca. 1 g av produktet fra eksemplene XXXV eller XXXVIII er når det gjelder søthet ekvivalent med 2 teskjefuller sukrose.
En signifikant fordel ved foreliggende produkt er at det ikke hydrolyserer i innvollene til brukeren ved kontakt med fordøyelsessystemet, slik som karboksypeptidase og chymotrypsin for å danne metanol som fører til dannelse av formaldehyd. Dette betyr at en bruker kan drikke en kopp kaffe, soda eller en annen drikk søtgjort med det cyklopropyliderte dipeptidAAsp-Phe-OCH^eller ASP-APhe.OCH^og mens søtningsmidlet bevarer sin mente funksjon, hverken hydrolyseres, spaltes eller nedbrytes forbindelsen i før-døyelseskanalen eller i blodet de første 24 timer. Dette er tilstrekkelig tid for at produktet igjen skilles ut av kroppen, enten med avføring eller med urin.
Det vesentlige ved denne mangel på hydrolyse er at det
er antatt at metabolske fragmenter, dvs. hydrolyseprodukter
av vanlig L-Asp-Phe OCH^, hos enkelte brukere forårsaker bivirkninger, slik som oppførselsmodifisering, hyperaktivi-tet, genetiske forandringer og hjernetumorer. De følgende sammenlignende in vitro studier av kommersiell aspartan og det nye søtningsmiddel ifølge eksempel XXXV gis for å vise den uventede og fordelaktige brukbarhet ved synte-tiske søtere ifølge oppfinnelsen.
Sammenlignende peptid- stabilitets prøver.
Aspartam og nytt, stabilisert Asp-A<2->Phe-OMe (37) fra eksempel XXXV ble sammenlignet med henblikk på stabiliteten mot enzymatisk hydrolyse på grunn av a-chymotrypsin. Hydro-lyseproduktet av aspartan vil være Asp-Phe-OH og hydrolyse-produktet fra forbindelse (37) Asp-A -Phe-OH. Et forhold på 10:1 substrat:enzym ble brukt i en 0,5 M ammoniumacetat oppløsning som ble pH-justert til 8 med 10% ammoniumhydrok-syd. Etter 15 minutter ved romtemperatur var aspartam hydrolysert og syren (2) forelå sammen med metanol. Etter 24 timer ved romtemperatur hadde forbindelse (37) ikke begynt å hydrolysere. Således er responsen på hydrolyse på grunn av -chymotrypsin totalt forskjellig fra den til aspartam. Det nye næringsmiddelproduktet ifølge eksempel XXXV viser seg således å ha en skarp og distinkt ny egenskap når det gjelder motstanden mot peptidnedbrytning ved hydrolyse .
Eksempel XXXIX
En pulverformig søtnerblanding for bruk som ekvivalent
til sukrose, kan fremstilles ved å blande:
Dette tørre pulverformige materialet er frittrislende og øyeblikkelig oppløselig i vandige, varme og kalde væsker.
En enkelt dose pa 1 g av dette produkt vil gjøre 300 cm<3>karbonert eller ikke-karbonert vandig drikke søt. Produktet er stabilt mot alle typer hydrolyserende midler inkludert næringsmiddelsyrer.
Den nye peptidsøtner som fremstilles ved fremgangsmåten
i de foregående eksempler, kan med fordel benyttes i nye drikkeblandinger. Disse nye drikkeblandinger har den ytterligere fordel i forhold til vanlige aspartamsøtede drikker, at på tross av nærværet av en organisk syre i formuleringen, har blandingen langtids stabilitet når det gjelder søtnings-middel bestanddelene. Det følgende skal vise en slik prak-tisk anvendelse, selv om det er klart at et antall andre næringsmiddelanvendelser kan tenkes.
Eksempel XL.
En fruktsmak-drikke kan fremstilles ved å bruke følgende formulering som inkluderer den nye peptidsøtner:
6,5 g av denne blanding kan rekonstitueres i en h liter vann for å gi en drikke som muliggjør en meget akseptabel smak, en blakningsstabilitet og naturlig fruktsaft utseendet.
Eksempel XLI
En drikke kan fremstilles og anbringes i 12 ounce bokser med høy frihetsmargin mot peptidsøtner dekomponering og derav følgende metanoldannelse. Blandingen omfatter:
Dette gir 300 cm^ karbonert soda.
Foretrukket utførelsesform, farmasøytisk anvendelse, polypeptider.
De følgende eksempler XLII og XLIII tjener til å illistrere fremstilling av flere nye peptider med forbedret stabilitet mot enzymatisk spalting, anvendt for kontroll av blodtrykket. Disse peptider er renin inhibitorer og blir administrert oralt, intramuskulært eller intravenøst i enhetsdoser sammenlignbare de for kjente renin inhibitorer. Når f.eks. et peptid formuleres i en 20 cm 3 ampulle, kan den inneholde en 50 mg dose peptid i glukose eller isotonisk saltoppløs-ning for intravenøs administrering. Det modifiserte peptid ifølge eksemplene XLII og XLIII vil være egnet i lik mengde og konsentrasjon uansett dosen gitt ved oral eller systemisk administrasjon til subjektet.
Syntese av renin inhibitorer.
Eksempel XLII.
Boc- ALeu- Val- Tyr- OMe.
Til en oppløsning av 2,43 g (10 mmol) Boc-ALeu-OH i 50
ml CH^C^ tilsettes det 1,0 g (10 mmol) trietylamin og 1,4 g (10 mmol) isobutyl kloroformat ved 0°C. Etter 15 minutter blir en oppløsning av 2,94 g (10 mmol) Val-Tyr-OMe i det samme oppløsningsmiddel tilsatt og blandingen omrøres i 1 time ved 0°C og 2 timer ved romtemperatur. Etter fordamping av oppløsningen oppløses resten i etylacetat og oppløsningen vaskes suksessivt med 2x25 ml vann, 2x25 ml 0,1N HC1, 2x25 ml 5%-ig NaHCC>3 og 2x25 ml saltopp-løsning. Etter tørking over vannfri Na2S0^ble oppløs-ningen fordampet til tørr tilstand og det urene peptid krystallisert fra etylacetat eller et egnet oppløsnings-middel, utbytte var 89%. Denne forbindelse er et brukbart mellomprodukt.
A Leu- Val- Tyr- OMe.
Til 25 ml av en 1:1 blanding av Cr^C^ og trifluoreddiksyre tilsettes det 5,19 g (10 mmol) Boc-ALeu-Val-Tyr-OMe og oppløsningen settes hen i 1 time ved romtemperatur. Fordamping av oppløsningen gir det urene tripeptid som
TFA-saltet,ALeu-Val-Tyr-OMe-TFA som kan benyttes direkte
i det neste trinn.
Boe- Pro- Phe- His- Leu- ALeu- Val- Tyr- OMe.
Til en oppløsning av 6,26 g (10 mmol) Boc-Pro-Phe-His-Leu-NHNH2i 50 ml tørr DMF tilsettes 1,17 g (10 mmol) AmONO under avkjøling i et isbad. Etter 1 time tilsettes det en DMF oppløsning inneholdende 5,33 g (10 mmol)ALeu-Val-Tyr-OMe-TFA og 1,01 g (10 mmol) trietylamin i løpet av
15 minutter. Etter 1 time ved 0-5°C og 5 timer ved romtemperatur, fordeles oppløsningen mellom 250 ml vann og 500
ml etylacetat i en skilletrakt. Det organiske sjikt separeres og vaskes suksessivt med 3x50 ml vann, 2x50 ml 0,INHC1, 2x25 ml 5% NaHC03og 2x25 ml saltoppløsning og tørkes
over vannfri Na2S04. Fordampning av oppløsningen gir det urene blokkerte heptapeptid som renses ved krystallisering fra etylacetat eller et annet egnet oppløsningsmiddel.
Dette er også et mellomprodukt.
Boc- Pro- Phe- His- Leu- ALeu- Val- Tyr- OH■
Til en oppløsning av 10,1 g (10 mmol) Boc-Pro-Phe-His-Leu-ALeu-Val-Tyr-OMe i 50 ml metanol tilsettes det 5 ml 2N
NaOH ved romtemperatur. Etter 2 timer fordampes oppløsningen til tørr tilstand og resten oppløses i 25 ml vann. Oppløs-ningen surgjøres til pH 4 med 10% sitronsyre og utfelt peptid filtreres og vaskes med vann. Etter tørking av faststoffet i vakuu, krystalliseres det fra vann og etanol eller et annet egnet oppløsningsmiddel, og man oppnår 90% utbytte Boc-Pro-Phe-His-Leu-ALeu-Val-Tyr-OH. Dette er et mellomprodukt.
Pro- Phe- His- Leu- ALeu- Val- Tyr- OH.
En oppløsning av 9,99 g (10 mmol Boc-Pro-Phe-His-Leu-ALeu-Val-Tyr-OH i 25 ml 1:1 CH2C12/TFA settes hen ved romtemperatur i 1 time. Etter fordamping til tørr tilstand oppløses resten i 5% HOAc oppløsning og føres gjennom en "Biogel P-2" kolonne og de fraksjoner som er reaktive mot ninhydrin samles og lyofiliseres, hvorved man oppnår ren Pro-Phe-His-Leu- ALei-Val-Tyr-OH i et utbytte på 90%.
Dette peptid binder renin meget sterkt og er aktiv som renin inhibitor.
EksempelXVIII
Boe- ALeu- Leu- Val- Tyr- OH.
Til en oppløsning av 2,43 g (10 mmol) Boc-ALeu-OH i 50
ml THF i en 250 ml rundkolbe tilsettes det 1,0 g (10 mmol) trietylamin og 1,4 g (10 mmol) isobutyl kloroformat under
iskjøling. Etter 15 minutter tilsettes 4,07 g (10 mmol) Leu-Val-Tyr-OMe og oppløsningen omrøres ved 0-5°C i 1 time
og ved romtemperatur over natt. Etter fjerning av oppløs-ningsmidlet i vakuum oppløses resten i 100 ml etylacetat og vaskes suksessivt med 2x25 ml 0,1 NHC1, 2x25 ml 5%-ig NaHCO-j og 2x25 ml mettet NaCl. Etter tørking over vannfri NaS04fordampet oppløsningen til tørr tilstand i vakuum. Råproduktet omkrystalliseres fra et egnet oppløsningsmiddel som etylacetat og man oppnår det rene tripeptid, Boc-ALeu-Leu-Val-Tyr-OMe, i et utybytte av 75%.
ALeu- Leu- Val- Tyr- OMe.
Til en 1:1 blanding av CH2C12og trif luoreddiksyre, tilsettes 6,32 g, (10 mmol) Boe-ALeu-Leu-Val-Try-OMe og oppløsningen settes hen 1 time ved romtemperatur. Fordamping av oppløs-ningsmidlet gir det urene tetrapeptid TFA salt, ALeu-Leu-Val-Tyr-OMe-FTA, som benyttes uten rensing i det neste
trinn.
Eksempel XLIV.
Boe- Pro- Phe- His- ALeu- Leu- Val- Tyr- OMe.
Til en oppløsning av 5,13 g (10 mmol) Boc-Pro-Phe-HisNHNH2
i 50 ml tørr DMF tilsettes 1,17 g (10 mmol) AmONO under avkjøling i et isbad. Etter 1 time tilsettes en DMF oppløs-ning inneholdende 6,46 g (10 mmol)ALeu-Leu-Val-Tyr-OMe-
TFA og 1,01 g (10 mmol) trietylamin i løpet av 15 minutter. Etter 1 time ved 0-5°C og 5 timer ved romtemperatur, fordeles oppløsningen mellom 250 ml vann og 500 ml etylacetat i en skilletrakt. Det organiske sjikt separeres og vaskes suksessivt med 3x50 ml vann, 2x50 ml 0,IN HC1, 2x50 ml 5%-ig NaHCO^ og 2x25 ml saltoppløsning og tørkes over vannfri Na2S04. Fordamping av oppløsningen gir det urene blokkerte heptapeptid som renses ved omkrystallisering fra etylacetat eller et annet egnet oppløsningsmiddel.
Dette er et mellomprodukt.
Boe- Pro- Phe- His- ALeu- Val- Tyr- OH.
Til en oppløsning av 10,1 g (10 mmol) Boc-Pro-His-ALeu-Leu-Val-Tyr-OMe i 50 ml metanol tilsettes 5 ml 2N NaOH
ved romtemperatur. Etter 2 timer fordampes oppløsningen til tørr tilstand i vakuum og resten oppløses i 25 ml vann. Oppløsningen surgjøres til pH 4 med 10% sitronsyre, og utfelt peptid filtreres og vaskes med vann. Etter tørking over vannfri CaCl2i vakuum, blir faststoffet omkrystallisert fra etanol og vann og man oppnår 90% utbytte Boc-Pro-Phe-His-ALeu-Leu-Val-Tyr-OH. Dette er et mellomprodukt.
Pro- Phe- His- ALeu- Leu- Val- Tyr- OH.
En oppløsning av 9,99 g (10 mmol) Boc-Pro-Phe-His-ALeu-Leu-Val-Tyr-OH i 25 ml 1:1 CH2C12/TFA settes hen ved romtemperatur i 1 time. Etter fordamping av oppløsningen blir resten ført gjennom en "Biogel P-2" kolonne i 5% HOAc oppløsning og fraksjonene som er reaktive mot ninhydrin samles og lyofiliseres, utbytte av ren Pro-Phe-His-ALeu-Leu-Val-Tyr er 90%.
Dette peptid binder renin meget sterkt og er aktiv som I renininhibitor.
N- Boc- B- t- butylaspartyl cyklobutyl fenylalanin metylester.
Til en oppløsning av 5 g N-Boc 8-t-butylaspartinsyre i
50 ml metylenklorid, tilsettes 1 mol ekvivalent hver av dicykloheksy1 karbodiimid, hydroksybenztriazol og cyklo-butylfenylalanin metylester. Etter 16 timer ved romtemperatur filtreres blandingen og filtratet vaskes suksessivt med 10% NaHCO^, 10% HC1 og saltoppløsning og tørkes over vannfri Na2S04- Etter fordamping til tørr tilstand, krystalliseres resten fra et egnet oppløsningsmiddel, slik som
etylacetat. Utbytte er 70%.
N- Boc- B~ t- butylaspartyl cyklopentyl fenylalanin metylester.
Til en oppløsning av 5 g N-Boc g-t-butylaspartinsyre i
50 ml metylenklorid tilsettes 1 mol ekvivalent hver av dicykloheksyl karbodiimid, hydroksybenztriazol og cyklo-pentryl fenylalanin metylester. Etter 16 timer ved romtemperatur filtreres blandingen og filtratet vaskes suksessivt med 10% NaHCO^, 10% HC1 og saltoppløsning, og tørkes over vannfri Na2SO^. Etter fordampning til tørr tilstand krystalliseres resten fra et egnet oppløsningsmiddel, slik som metylacetat, utbyttet er 70%.
Aspartyl cyklobutyl fenylalanin metylester.
Til 50 ml av en 1:1 oppløsning av trifluoreddiksyre og metylenklorid, tilsettes 5 g N-Boc-g-t-butylaspartyl cyklo-butylfeny1-alanin metylester og oppløsningen settes hen ved romtemperatur i 1 time og fordampes til tørr tilstand. Råpeptidet oppløses i 10% eddiksyre, og oppløsningen føres gjennom en "Biogel P-2" kolonne, og de ninhydrinreaktive fraksjoner samles og lyofiliseres. Krystallisering av det rene peptid fra vandig alkohol eller en egnet oppløs-ningsmiddelblanding, gir ren aspartyl cyklobutyl fenylalanin metylester i kvantitativt utbytte. Dette er sluttproduktet.
Dette peptid er meget søtt, og kan benyttes for å søte drikker, næringsmidler av alle typer osv.
Aspartyl cyklopentyl fenylalanin metylester.
Til 50 ml av en 1:1 oppløsning av trifluoreddiksyre og metylenklorid tilsettes 5 g N-Boc-g-t-butylaspartyl cyklo-pentylfenylalanin metylester og oppløsningen settes hen ved romtemperatur i 1 time og fordampes til tørr tilstand. Det urene peptid oppløses i 10% eddiksyre og oppløsningen føres gjennom en "Biogel P-2" kolonne, og ninhydrinreaktive fraksjoner s.åmles ^og. ly/of iliseres . " Krystallisering av det rene peptid fra vandig alkohol eller en annen egnet oppløsningsmiddelblanding gir ren aspartyl cyklopentyl fenylalanin metylester i kvantitativt utbytte. Dette er sluttproduktet.
Dette peptid er søtt og kan benyttes for søting av drikker, mat av alle typer osv.
Z- cyklopentyl Phe- Leu- OMe.
En oppløsning av isobutyl kloroformat (546 mg, 4 mmol)
i 10 ml kloroform ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av Z-cyklopentyl Phe OH (1) (4 mmol) og N-metylmorfolin (404 mg, 4 mmol) i 30 ml kloroform ved 0-5°C. Etter omrør-ing i 20 minutter, ble en oppløsning av Leu OMe HC1 (1,45
g, 8 mmol), og N-metylmorfolin (0,81 g, 8 mmol) i 20 ml kloroform tilsatt ved 10°C. Etter omrøring i 2 timer ved 0-5°C, og så over natt ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen vasket med H20, 5% sitronsyre henholdsvis 5% NaHCO^
og tørket over vannfri Na2S04. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum, og resten omkrystallisert fra etylacetat-heksan, og man oppnådde produktet som fargeløse nåler i et utbytte av 60%.
Z- cyklobutyl Phe- Leu OMe.
En oppløsning av isobutyl kloroformat (546 mg, 4 mmol)
i 10 ml kloroform, ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av Z-cyklobutyl Phe OH (1) (4 mmol) og N-metylmorfolin (404 mg, 4 mmol) i 30 ml kloroform ved 0,5°C. Etter omrør-ing i 20 minutter ble en oppløsning av Leu OMeHC1 (1,45
g, 8 mmol) og N-metylmorfolin (0,81 g, 8 mmol) i 20 kloroform tilsatt ved 10°C. Etter omrøring i 2 timer ved 0-
5°C og så over natt ved romtemperatur, ble reaksjonsblandingen vasket med t^O, 5% sitronsyre og 5% NaHCO^og tørket overNa2S04. Oppløsningsmidlet ble fordampet i vakuum
og resten omkrystallisert fra etylacetat:heksan, hvorved man oppnådde produktet som fargeløst nåler i et utbytte av 70%
Cyklopentyl Phe- Leu OMe TFA.
En oppløsning av Z-cpPhe-Leu OMe (3 mmol) og 2 ml tioanisol i 20 ml trifluoreddiksyre ble omrørt ved 0°C i 3 timer og så ved romtemperatur over natt. TFA ble fjernet under redusert trykk og resten triturert med 30 ml eter og utfelte krystaller ble samlet ved sug og vasket med eter for derved å gi produktet i et utbytte av 90%.
Denne forbindelse kan anvendes som mellomprodukt ved syntese av et enkefalin peptid som har opiate egenskaper.
Z- Tyr- D- Ala- Gly- cbPhe- Leu■ OMe.
Til en oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly OH (887 mg, 2 mmol)
og cbPhe-Leu TFA (2 mmol) i 80 ml THF ble det tilsatt N-metylmorfolin (202 mg, 2 mmol), HOBt (270 mg, 2 mmol) og EDC (l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid HC1) (384 mg, 2 mmol) ved 0°C. Etter omrøring i 3 timer ved 0°C
og over natt ved romtemperatur, ble oppløsningsmidlet fjernet under redusert trykk, og resten ekstrahert 3 ganger med 100 ml AcOEt. De kombinerte ekstrakter ble vasket med 5% NaHCO^, 0,2 NHC1, vann, og tørket over vannfri Na2S04. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og faststoffet omkrystallisert fra etylacetat:heksan, og man oppnådde Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu OMe som fargeløst pulver i et utbytte av 90%.
Denne forbindelse kan anvendes som mellomprodukt ved syntese av et enkefalinpeptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Z- Tyr- D- Ala- Gly- cpPhe- Leu OMe.
Til en oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly OM (887 mg, 2 mmol)
og cpPhe-Leu TFA (2 mmol) i 80 ml THF ble det tilsatt N-metylmorfolin (202 mg, 2 mmol), HOBt (270 mg, 2 mmol) og EDC (l-ety1-3(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid<*>HC1)
(384 mg, 2 mmol) ved 0°C. Etter omørring i 3 timer ved 0°C og over natt ved romtemperatur, ble oppløsningsmidlet fjernet under redusert trykk, og resten ekstrahert 3 ganger med 100 ml AcOEt. De kombinerte ekstrakter ble vasket med 5% NaHCO^, 0,2N HC1, vann og tørket over vannfri Na2SO^. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og faststoffet omkrystallisert fra etylacetat:heksan, og man oppnådde Z-Tyr-D-Ala-Gly-cpPhe-Leu"OMe som et fargeløst pulver i et utbytte på 90%.
Forbindelsen kan anvendes som mellomprodukt ved syntese
av et enkefalin peptid som inhiberer muskelkontraksjon.
Z- Tyr- D- Ala- Gly- cbPhe- Leu * OH.
Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu * OMe (365 mg, 0,5 mmol) ble oppløst 1 1 ml etanol, oppløsningen ble avkjølt i et is/vannbad og IN NaOH (1 ml, 1 mmol) ble tilsatt ved 0°C. Etter om-røring i 2 timer ved 0°C ble oppløsningen nøytralisert med IN HC1, og fortynnet med vann. Utfelt faststoff ble samlet ved sug og tørket under redusert trykk. Faststoffet ble renset ved silikagel kolonnekromatografi ved bruk av kloroform:etanol i forholdet 19:1 og kloroform:metanol: eddiksyre i forholdet 95:5:1. Etter at utgangsstoffet var fjernet ved bruk av CHCl^/MeOH (19:1), oppnådde man Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu"OH i et utbytte på 90%.
Z- Tyr- D- Ala- Gly- cbPhe- Leu * OH.
Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu<*>OMe (365 mg, 0,5 mmol) ble oppløst i 1 ml etanol, oppløsningen ble avkjølt i et is/vannbad og INNaOH (1 ml, 1 mmol)) ble tilsatt ved 0°C. Etter omrøring i 2 timer ved 0°C ble oppløsningen nøytralisert med IN HC1 og fortynnet med vann. Utfelt faststoff ble samlet ved sug og tørket under redusert trykk. Faststoffet ble renset ved silikagel kolonnekromatografi ved bruk av kloroform:etanol i forholdet 10:1 og kloroform:metanol: eddiksyre i forholdet 95:5:1. Etter at utgangsstoffet var fjernet ved bruk av CHCl^/MeOH (19:1), oppnådde man Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu'OH i et utbytte på 90%.
Tyr- D- Ala- Gly- cbPhe- Leu.
En oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu"OH (143 mg,
0,2 mmol) og tioanisol (0,3 ml) i trifluoreddiksyre (3
ml) ble omrørt i 1 time ved 0°C og 4 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og resten triturert med eter, og man oppnådde TFA saltet. Dette salt ble oppløst i 5% AcOH og ført gjennom en kolonne inneholdende et stort overskudd "Amberlite CG400" i acetatform, fulgt av en "BioGel P-2" kolonne (1,9 x 8,9 cm, 200-400 mesh) (4 ml/20 min.). Fraksjonene inneholdende produktet ble samlet og lyofilisert, og man oppnådde 75% produkt.
Denne forbindelse kan anvendes som et stabilt opiatpeptid og inhiberer muskelkontraksjon.
Tyr- D- Ala- Gly- cbPhe- Leu.
En oppløsning av Z-Tyr-D-Ala-Gly-cbPhe-Leu'OH (143 mg,
0,2 mmol) og tioanisol (0,3 ml) i trifluoreddiksyre (3
ml) ble omrørt i 1 time ved 0°C og 4 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet'ble fjernet under redusert trykk og resten triturert med eter, og man oppnådde TFA saltet. Dette salt ble oppløst i 5% AcOH og ført gjennom en kolonne inneholdende et stort overskudd "Amberlite CG400" i acetatform, fulgt av en "BioGel P-2" kolonne (1,9 c 8,9 cm, 200-400 mesh) (4 ml/20 min.). Fraksjonene inneholdende produktet ble samlet og lyofilisert, og man oppnådde 75% produkt.
Denne forbindelse kan anvendes som et stabilt opiatpeptid og inhiberer muskelkontraksjon.
Claims (26)
1. Cyklopropylaminosyre valgt blant gruppen omfattende (2S)-E-, (2R)-E-, (2S)-Z-, (2R)-Z-, (2S)-, (2R)-, (2RS)-E-, og (2RS)-Z-isomerer med formelen:
hvori R"*" velges blant hydrogen, en karboksylgruppe eller laverealkylester derav, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, hvori R 2 er valgt blant hydrogen, en karboksylgruppe eller en lavere alkyleter derav, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller 1 2
alifatisk gruppe, hvori R og R ikke begge er hydrogen,
1 2
hvori R og R ikke er C,HC henholdsvis H, eller henholds-1 2 6 5
vis Cr Enl hvor R og R ikke er 4-H0C,H. henholdsvis H,
eller H henholdsvis 4-HOCgH^ , og der R og R ikke er 4(5)-imidazolyl henholdsvis H, eller H henholdsvis 4(5) imidazolyl.;
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakteri-
1 2
sert ved at R og R er CH^ og forbindelsen er cyklopropylvalin.;
3 .F remgangsmåte ifølge krav 1, karakteri-
1 2
sert ved at R er (CH-J-CH og R er H, eller der R 1 er H og R 2 er (CH^ ^CH, og forbindelsen er cyklopropyl-leucin.;
4. Forbindelse ifølge krav 1, karakteri-
12 1 sert ved at R er CO^H og R er H, eller der R er H og R 2 er CC^ H, og hvori forbindelsen er cyklopropyl-aspartinsyre.;
5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R 1 er CH-CO-H og R 2er H, eller hvor 12
R H og R CH^ CC^ H, og hvori forbindelsen er cyklopropyl-aspartinsyre.;
6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R 1 er CH^ SCH- og R 2 er H, eller hvori 12
R er H og R er CH^ SCf^, og hvor forbindelsen ercyklo-propyImetionin.;
7. Forbindelse ifølge krav 1, karakteri-
1 2
sert ved at R er 3-indolyl og R er H, eller 1 2
hvor R er H og R er 3-indolyl, og hvor forbindelsen er cyklopropyltryptofan.;
8. Fremgangsmåte for syntetisering av en cyklopropylaminosyre valgt blant (2S)-E-, (2R)-E-, (2S)-Z-, (2R)-Z-, (2S)-, (2R)-, (2RS)-E-, og 2RS)-Z-isomerer, karakterisert ved at den omfatter følgende trinn:
(a) omsetning av en diazo-forbindelse med formelen12 1
R R CH2 der R er valgt blant hydrogen, en alkylgruppe, en aromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe der R 2er valgt blant hydrogen, en alkylgruppe, en sromatisk gruppe, en alkylgruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen eller svovel, en alkylgruppe substituert med en aromatisk gruppe, og en aromatisk gruppe substituert med halogen, oksygen, nitrogen, svovel, en aromatisk eller alifatisk gruppe, med et dehydroalaninderivat med formel: ;3
hvor R er valgt blant alkyl, en aromatisk gruppe, en alkoksygruppe og en aryloksygruppe, og der R 4er valgt blant alkyl og aryl, for å oppnå et initialt reaksj onsprodukt;
(b) dekomponering av initialreaksjonsproduktet (3) for å oppnå et cyklopropylaminosyrederivat med formel: ;der cyklopropylaminosyrederivatet er en blanding av stereoisomerer;
(c) separering av blandingen av stereoisomerer på fysikalsk måte til E- og Z-diasteromerer der E- og Z-diastereomerene omfatter et par enantiomerer;
(d) separering av paret enantiomerer ved standard oppløsning for å oppnå et stereospesifikt cyklopropylaminosyrederivat ;
(e) deblokkering av initialreaksjonsproduktet for å oppnå en stereospesifik cyklopropylaminosyre med formel: ;
9. Fremgangmsåte ifølge krav 8, karakterisert ved at det stereospesifike cyklopropylaminosyrederivat C-terminal-deblokkeres for derved å gi en stereospesifik cyklopropylsyre med formelen: ;
10. Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at N-terminal deblokkering fore-tas før C-terminal deblokkering for å oppnå den stereospe-sif ike cyklopropylaminosyre.;
11. Fremgangmsåte ifølge krav 8, k a r a k -
1 2 terise2 rt ved at 1R er (CH^ )7 CH og R er H, eller der R er (CH3 )2 CH og R er H, og der den stereospesifike cyklopropylaminosyre er cyklopropylleucin.;
12. Fremgangsmåte ifølge krav 8, k a r a k -
1 2
terisert ved at R og R inneholder sure grupper valgt blant karboksyl, merkapto, og fenolisk hydroksyl 12 2 er blokkert, og der R er CO-H og R er H, eller hvor R
er CO2 H og R 1 er H, og der cyklopropylaminosyren er cyklo-propylaspartinsyre.;
13. Fremgangsmåte ifølge krav 8, k a r a k -
1 2 terisert ved at R er C,H og R er H, eller der R 2 er CgH,_ og R 1 er H, og der cyklopropylaminosyren er cyklopropylfenylalanin.;
14. Fremgangsmåte ifølge krav 8, ka ra k -
1 2
terisert ved at R og R inneholder sure grupper valgt blant karboksyl, merkapto, og fenolisk hydroksyl 1 2
er blokkert, og der R er 4-H0CfiH. og R er H, eller der R 2 er 4-HOCgH^ og R 1, og der cyklopropylaminosyren er cyklo-propy 1 tyr i son .;
15. Fremgangsmåte ifølge krav 8, k a r a k -
1 2 terisert ved at R er 3-indolyl og R er H,
2 1
eller der R er 3-mdolyl og R er H, og der cyklopropylaminosyren er cyklopropyltryptofan.;
16. Peptid med minst to aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerester der minst en aminosyrerest er en cykloalkyl aminosyrerest.
12 1 2
17. Peptid med formelen R -R der R og R er amino-
1 2 syrerester og der R er cyklopropyl aspartinsyre, og R er fenylalanin metylesteren derav eller der R"*" er cyklo-propylaspartinsyre og R 2 er cyklopropylfenylalaninesteren derav.
18. Peptid med formelen R1-R2-R3-R4-R5-R6-R7 hvori hver R er en aminosyrerest og der R 1 er prolin, R 2 er fenyl-3 4 5 alanin, R er histidin, R er cyklopropylleucin, R er leucin, R 6 er valin, og R 7 er tyrosin, eller der R 1 er prolin, R <2> er fenylalanin, R er histidin, R <4> er cyklopropylleucin, R 5 er leucin, R <6> er valin, og R <7> er prolin, 12 3 eller der R er prolin, R er fenylalanin, R er histidin, R 4 er cyklopropylleucin, R 5 er leucin, R 6 er valin, og 7 1?
R er tyrosin, eller der R er prolin, R er fenylalanin,
3 4 5 R er histidin, R er cyklopropylleucin, R er leucin,
6 7
R er valin, og R er tyrosin.
19. Fremgangsmåte for syntetisering av et peptid med minst to aminosyrerester valgt blant D- eller L-isomerer av aminosyrerester, der minst en aminosyrerest er en stereospesifik cyklopropyl aminosyrerest, karakterisert ved at den omfatter følgende trinn:
(a) syntetisering av cykloalkylaminosyrederivatet ved å benytte trinnene (a) og (b) i krav 8;
(b) separering av cykloalkylamionsyren ved bruk av trinnene (c) og (d) i krav 8;
(c) deblokkering av cykloalkylaminosyrederivatet for å oppnå en N-terminal blokkert stereospesifik cyklo-alkylaminosyre;
(d) kobling av den N-terminal blokkerte stereospesifike cyklopropylaminosyre med en C-terminal blokkert aminosyre eller et peptid; og
. (e) å gjenta trinnene ovenfor etter behov for å oppnå et ønsket peptid.
20. Smaksatt drikke, omfattende et spiselig surt stoff, en spiselig smak, en spiselig fargebestanddel og en søtningsbestanddel, karakterisert ved at søtningsbestanddel består av et dipeptid med formelen
Asp--APhe OCH3 eller
Asp-AAla OC^H^ eller
A Asp--Phe OCH3 eller
A Asp--APhe OCH3
og isomerer derav.
21. Ikke-toksiske søtningspreparater for næringsmiddelkvalitet-syreholdige drikker, karakterisert ved at den omfatter en i det vesentlige ikke hydrolyserbar metylester av et dipeptid av aspartinsyre koblet til fenylalanin eller alanin idet dipeptidet sterisk er hindret ved en cyklopropylgruppe bundet til en eller begge aminosyrerestkomponentene i dipeptidet.
22. Ikke-toksisk søtningsmiddel for næringsmiddel-syreholdige drikker ifølge krav 25, karakterisert ved at den omfatter en søtende mengde av peptidet -Asp-APhe o OCH3 og en spiselig vannoppløselig bærer.
23. Ikke-toksisk søtningsmiddel for næringsmiddel-syreholdig drikker ifølge krav 25, karakterisert ved at den omfatter en søtende mengde av peptidet A-Asp--Phe-OCH3 og en spiselig vannoppløselig bærer.
24. Ikke-toksisk søtningsmiddel for næringsmiddel-syreholdige drikker ifølge krav 25, karakterisert ved at den omfatter en søtende mengde av peptidet A-Asp- Phe o OCH3 og en spiselig vannoppløselig bærer.
25. Karbonert drikke, omfattende karbonert vann,
en næringsmiddelkvalitet-syre, en spiselig farge, spiselig farge, spiselig smak og en søtende mengde av et ikke-toksisk søtningsmiddel ifølge krav 21.
26. Fremgangsmåte for søting av karbonerte drikker omfattende tilsetning av en søtende men ikke-toksisk mengde av et dipeptid søtningspreparat ifølge krav 21.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US52380883A | 1983-08-16 | 1983-08-16 | |
US63609184A | 1984-08-03 | 1984-08-03 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO851495L true NO851495L (no) | 1985-04-15 |
Family
ID=27061274
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO851495A NO851495L (no) | 1983-08-16 | 1985-04-15 | Syntese av cyklopropanaminosyrer og -peptider |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0135429B1 (no) |
AU (1) | AU579835B2 (no) |
DE (1) | DE3485587D1 (no) |
DK (1) | DK171385D0 (no) |
FI (1) | FI851508L (no) |
HU (1) | HUT38914A (no) |
MX (1) | MX7527E (no) |
NO (1) | NO851495L (no) |
OA (1) | OA08010A (no) |
PT (1) | PT79088B (no) |
WO (1) | WO1985000809A1 (no) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4716623A (en) * | 1984-11-02 | 1988-01-05 | Toyota Jidosha Kabushiki Kaisha | Side door hinge mechanism in motor vehicle |
EP0204826A4 (en) * | 1984-12-11 | 1989-02-09 | Patrick Joseph Joyce | THERMOSTABLE PEPTIDE SWEETENERS. |
EP0205610A4 (en) * | 1985-01-03 | 1988-01-25 | Patrick Joseph Joyce | TABLE SALT REPLACEMENT WITH HEAT-STABILIZED PEPTIDE. |
JPS63500634A (ja) * | 1985-08-09 | 1988-03-10 | ザ ユニバ−シティ− オブ ジョ−ジア リサ−チ ファウンデ−ション、インコ−ポレ−テッド | 安定化されたペプチド甘味料 |
CS277405B6 (en) * | 1986-06-12 | 1993-03-17 | Vyzk Ustav Farm Biochem Sp | Peptides with 1-amino-1-cycloalkane carboxylic acid |
JPH02502457A (ja) * | 1987-03-09 | 1990-08-09 | ジ・アップジョン・カンパニー | シクロプロピル含有レニン抑制ペプチド |
FR2652082B1 (fr) * | 1989-09-15 | 1991-11-22 | Rhone Poulenc Chimie | Procede de preparation de l'acide-1 cyclopropanecarboxylique ou d'un de ses sels, produits de depart et leurs procedes de preparation. |
US5629020A (en) * | 1994-04-22 | 1997-05-13 | Emisphere Technologies, Inc. | Modified amino acids for drug delivery |
JPH07501444A (ja) * | 1991-11-12 | 1995-02-16 | プロメガ コーポレイション | 非放射性酵素検定 |
US5773647A (en) * | 1997-02-07 | 1998-06-30 | Emisphere Technologies, Inc. | Compounds and compositions for delivering active agents |
US6358504B1 (en) | 1997-02-07 | 2002-03-19 | Emisphere Technologies, Inc. | Compounds and compositions for delivering active agents |
TWI411441B (zh) * | 2003-03-18 | 2013-10-11 | Suntory Holdings Ltd | 血管收縮素轉化酶抑制性肽類 |
US9101160B2 (en) | 2005-11-23 | 2015-08-11 | The Coca-Cola Company | Condiments with high-potency sweetener |
US8017168B2 (en) | 2006-11-02 | 2011-09-13 | The Coca-Cola Company | High-potency sweetener composition with rubisco protein, rubiscolin, rubiscolin derivatives, ace inhibitory peptides, and combinations thereof, and compositions sweetened therewith |
CN114436731B (zh) * | 2022-01-10 | 2023-07-11 | 北京航天试验技术研究所 | 一种环丙烷衍生物的制备方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3050559A (en) * | 1962-08-21 | Substituted phenylcyclopropylamjnes | ||
DK326477A (da) * | 1976-07-27 | 1978-01-28 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Kemiske forbindelser og fremgangsmade til fremstilling af samme |
DE2936038A1 (de) * | 1979-09-06 | 1981-03-26 | Bayer Ag, 51373 Leverkusen | Verfahren zur herstellung von 1-aminocyclopropan-carbonsaeure und deren derivaten |
US4273704A (en) * | 1979-12-03 | 1981-06-16 | G. D. Searle & Co. | N-Adamantane-substituted tetrapeptide amides |
-
1984
- 1984-08-13 DE DE8484401665T patent/DE3485587D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-13 EP EP84401665A patent/EP0135429B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-08-13 MX MX84101989U patent/MX7527E/es unknown
- 1984-08-14 AU AU33142/84A patent/AU579835B2/en not_active Ceased
- 1984-08-14 HU HU843555A patent/HUT38914A/hu unknown
- 1984-08-14 PT PT79088A patent/PT79088B/pt unknown
- 1984-08-14 WO PCT/US1984/001278 patent/WO1985000809A1/en active Application Filing
-
1985
- 1985-04-12 OA OA58570BISD patent/OA08010A/xx unknown
- 1985-04-15 FI FI851508A patent/FI851508L/fi not_active Application Discontinuation
- 1985-04-15 NO NO851495A patent/NO851495L/no unknown
- 1985-04-16 DK DK171385A patent/DK171385D0/da active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
PT79088B (en) | 1986-08-14 |
WO1985000809A1 (en) | 1985-02-28 |
EP0135429A1 (en) | 1985-03-27 |
DE3485587D1 (de) | 1992-04-23 |
FI851508A0 (fi) | 1985-04-15 |
PT79088A (en) | 1984-09-01 |
OA08010A (fr) | 1987-01-31 |
MX7527E (es) | 1989-07-25 |
DK171385A (da) | 1985-04-16 |
EP0135429B1 (en) | 1992-03-18 |
DK171385D0 (da) | 1985-04-16 |
AU3314284A (en) | 1985-03-12 |
AU579835B2 (en) | 1988-12-15 |
HUT38914A (en) | 1986-07-28 |
FI851508L (fi) | 1985-04-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO851495L (no) | Syntese av cyklopropanaminosyrer og -peptider | |
CA1288547C (en) | 1-(3-mercapto-2-methylpropanoyl) prolyl amino acid derivatives and salts thereof, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing such compounds | |
US4668796A (en) | Racemates of optically active bicyclic imino-alpha-carboxylic esters | |
KR880000890B1 (ko) | 두고리 화합물의 제조방법 | |
FR2575753A1 (fr) | Nouveaux derives peptidiques a structure polycyclique azotee, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
NZ200164A (en) | N-substituted amido-amino acids and pharmaceutical compositions | |
IE60128B1 (en) | Hydroxylamine derivatives,their preparation and use as medicaments | |
US3808190A (en) | Process for the preparation of aspartyl dipeptide esters involving little racemization | |
EP0054862A1 (en) | Substituted dipeptides, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them and their use in the inhibition of enkephalinase | |
JPH03386B2 (no) | ||
US4707490A (en) | Anti-hypertensive agents | |
AU603052B2 (en) | Aminomalonyl alanine compounds and use as dietary sweeteners | |
CA1285349C (en) | L-aminodicarboxylic acid amides | |
US4620012A (en) | Spirocyclic aminoacid derivatives, processes for their preparation, agents containing them and their use and new spirocyclic aminoacids as intermediates and processes for their preparation | |
US5750506A (en) | Bradykinin antagonists with extended hydrophobic side chains | |
WO2001068114A1 (en) | Novel peptides with anti-hypertensive activity | |
FR2585709A1 (fr) | Nouveaux derives peptidiques a structure lactonique ou cycloamidique, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
KR910001438B1 (ko) | 광학적 활성 비시클릭 이미노-α-카복실산 에스테르 라세미체의 분할방법 | |
EP0201844A1 (en) | L-Aminodicarboxylic acid alkenes and an edible composition containing same | |
US4456594A (en) | N-Carboxyalkylproline-containing tripeptides | |
EP0297815B1 (en) | Fluorine containing renin inhibitors | |
FR2535715A1 (fr) | Peptides biologiquement actifs, procede pour leur preparation et leur emploi comme medicaments | |
EP0080283B1 (en) | N-carboxyalkylproline-containing tripeptides | |
EP0199257A2 (en) | L-Aminodicarboxylic acid esters and an edible composition containing same as sweeteners | |
JPH10114798A (ja) | ペプチド誘導体及び抗真菌剤 |