NO802858L - Virkestoffblandinger og fremstilling derav - Google Patents

Description

iForeliggende oppfinnelse vedrører virkestoffkombinasjoner

.med antibiotiske egenskapér, fremstilling og anvendelse av idisse samt farmasøytiske preparater på basis av disse. .Forbindelser med den generelle formel

<;>hvori R1 er hydrogen, metyl, hydroxymetyl, en mono-,

di - eller trihalogenmetylgruppe;

1 'R 2 er en lavere alkyl-, hydroxylavere alkyl-eller guanidino-lavere alkylrest, som er karakteristisk .for en a-aminosyre som'

ikke normalt forekommer i proteiner,"og

konfigurasjonen på c-atomene (a) og (b) er R (når. R<1>f h)

hhv. L, og deres fysiologisk fordragelige salter er kjente. Disse forbindelser har anti-bakteriell aktivitet.

Det er nå funnet at virkestoffkombinasjonen som inneholder en

forbindelse med' formel I. eller et av dens fysiologisk fordragelige salter sammen med et nokardicin-antibiotikum, . altså kombinasjoner som hittil ikke er beskrevet, er spesielt

interessante med henblikk på potensiefingen av et nokardicin-antibiotikum.

I foreliggende ansøkning og de tilhørende krav betyr uttrykket "lavere alkyl" rette eller forgrenede alkylrester med fortrinnsvis opp til ,8 karbonatomer, så som f.eks. etyl, propyl, butyl. tert. butyl, pentyl og hexyl. Eksempler på hydroxylavere alkylgrupper er hydroxyetyl, 3-hydroxypropyl og 4-hydroxybutyl. Uttrykket "halogen" omfatter fluor, klor, brom og,jod; eksempler på halogenmetylgrupper er klormetyl, di-klormetyl og trifluormetyl.

'Foretrukne forbindelser med formel I er sådanne hvori R"<*>"

er hydrogen eller metyl. Likeledes foretrukne forbindelser med(formel I> hvori R 2. er lavere alkyl, spesielt etyl, n-propyl eller n-butyl. Eksempler på forannevnte angitte forbindelser., med formel I er

(lR)-l-[L(a-aminobutyryl)-amino]-etylfosfonsyre

(IR)-1-(L-norleucylamino)-etylfosfonsyre

i (IR)-1-(L-norvalylamino)-etylfosfonsyre (L-a-aminobutyrylamino)-metylfosfonsyre

(L-norleucylamirio)-metylfosfonsyre

(L-norvalylamino)-metylfosfonsyre

(IR)-1-(L-homoarginylamino)-etylfosfonsyre (L-homoarginylamino)-metylfosfonsyre.

.De foran anførtéforbindelser er

(IR)-1-(L-norvalylamino)-etylfosfonsyre).

Fysiologisk fordraglige salter av forbindelser med formel I dannes med fysiologisk fordragelige sterke syrer (f. eks. HC1, HBr, I^SO^, metansulf onsyre og p-toluen-sulfonsyre) og baser (f.eks. NaOH og KOH).

i

Nokardicin- antibiotikumet i foreliggende kombinasjoner kan være ett av de som eksempelvis er' nevnt i det tyske Offen-, legungsschrift Nr. 25 29 941, men er fortrinnsvis nokardicin

A.

Vektforholdet av forbindelsen I eller en av dens salter i forhold til nokardicin-antibiotikumet kan i kombinasjonene ifølge oppfinnelsen variere innenfor vide grenser. I almin-nelighet ligger det på 1:100 til 100:1, fortrinnsvis på

1:64 til 64:1. Særlig foretrukket er et forhold fra 1:16 til 16:1.

Virkestoffkombinasjonen i foreliggende søknad fremstilles

,ved at man blander en forbindelse med formel I eller et'

.fysiologisk, fordragelig salt derav, og et nokardicin-antibiotikum i de ovenfor nevnte vektforhold med hverandre.. Virkestoffkombinasjonen ifølge oppfinnelsen har anti-bakteriell aktivitet, idet aktivitetene mot pseudomonas-, .proteus- og serratia-arter (f.eks. pseudomonas aeruginosa, proteus mirabilis,p-roteus morganii, proteus vulgaris og ,'serratia marcescens) er av særlig interesse. De kan- derfor anvendes for terapi og profylakse av bakterielle infeksjoner. Virkestoffkombinasjoner kan gis.oralt eller parenteralt.

In vitro aktiviteten til virkestoffkombinasjonen ifølge

.oppfinnelsen ble påvist på følgende måte:

Man fremstilte konsentrerte løsninger av blandinger av forbindelsene med formel I og nocardicin A i de ønskede vektforhold som så ble fortynnet etter ønske. Aliquote .deler av de fortynnede løsninger ble blandet med en egnet næringsagar i petriskåler. Til sammenligning ble lignende agarskåler fremstilt, som foruten næringsmediet inneholdt forbindelsen I hhv. nokardicin A alene. Etter overflate— inokulering med.mikroorganismene oppbevarte man skålene 24 .timer ved 3 7°C, bestemte så den minimale hemningskonsentrasjon (M.I.C.) og beregnet F.I.C.-indeksene. Resultatene under anvendelse av representative'forbindelser med formel ■ I, nemlig (IR)-1-(L-norvalylamino).-etylf osf onsyre og 1- (L-norvalylamino).-metylf osf onsyre er sammenfattet i tabellene I - IV.

In ..vitro aktiviteten til kombinasjonen ifølge oppfinnelsen kan også vises ved mikrotiter-sjakkbrettmetoden..Ved denne metoden fremstilles filter-steriliserte basisløsninger av forbindelser I og et nocardicinantibiotikum, som er 4,8 ganger så konsentrert som løsningene som skal undersøkes. Aliquote deler av kulturmediet (50 ul) ble satt i alle 12 (1-12) x 8 (A-H) hull på mikrotiter-platen med unntagelse a/hullene 12 H. 50 ul av peptid-løsningen ble så anbragt

.• i hvert hull i 12 rekker og 100 ul L i hullet 12 H. Dé peptidholdige løsninger ble så fortynnet innenfor rekkene

A-H ved at man hver gang overførte 50 ul fra rekken 12 i rekken 11, blandet'godt og igjen overførte 50 ul i rekken 10, og.denne fremgangsmåte ble gjentatt frem til rekke 2, slik at rekke 1 ble utelatt. Så ble 50 ul av en løsning av et nocardicin-ahtibiotikum dosert i hvert hull i rekken H og likeledes fortynnet på forhånd beskrevne måte i løpet av rekkene 1-12, hvorunder det siste hullet i hver rekké igjen ble utelatt. Etter at volumene overalt var bragt på 100 ul ved tilsetning av 50 ul hæringsvæske, ble 20 ul av en 1/1000 fortynning av en kultur som var ansatt natten over av en forsøksorganisme tilsatt. Ved rysting sørget man for en jevn fordeling, hvorpå platene ble lukket med klebe-strimler. Den minimale hemningskonsentrasjon ble bestemt sem den minimale konsentrasjon som etter 18 timers inkubering

.| av kulturene forhindret en synlig uklarhet. Resultatene med 1 (IR)-1-(L-norvalylamino)-etylfosfonsyre og nbcardicin D

er sammensatt.i tabell V.

In vivo aktiviteten til kombinasjonene ifølge foreliggende .oppfinnelse ble undersøkt ved hjelp av pseu.domonas-septi-kemier på mus, hvorunder administreringen fant 1 time, 3 timer og 5 timer etter intraperiotoneal infeksjon. Resultatene som ble oppnådd med (IR)-1-(L-norvalylamino)-etyl-fosfonsyre og nocardicin A, er sammenfattet i den følgende tabell VI. Virkestoffkombinasjonene ifølge oppfinnelsen kan gis i form av farmasøytiske preparater hvilke likeledes er gjenstand for foreliggende oppfinnelse. For fremstilling av preparater kommer de vanlige farmasøytiske bæremidler som er fordragelige med forbindelsene med formel I, hhv. deres "salter og nocardicin-antibiotika på. tale. Bærematerialer kan

være flytende eller faste, av organisk eller uorganisk karakter og f.eks. omfatte vann, gelatin, mannitol, mineralske oljer, vegetabilske oljer, gummi arabicum, propylenglycoler eller polyalcylenglycoler.

Fremstillingen av -de farmasøytiske preparaterkan skje på i og for seg kjent måte, f.eks. ved at man blander de enkelte komponenter med de egnede bærematerialer og bringer dem i en egnet galenisk form.

De farmasøytiske preparatene kan foreligge i fast form, (f.eks. som lyofilisater) eller i flytende form (f.eks.

som løsninger, suspensjoner eller emulsjoner}. De er eventuelt sterilisert og hhv. eller inneholder ytterligere hjelpestoffer så som konserveringsmidler, stabiliserings-, fukte- eller emulgeringsmidler, midler for smaksforbedring, salter for endring av .det osmotiske trykk eller puffer-substanser. Ved anvendelse av puffere kan preparatenes pH-verdier variere innenfor de vanlige grenser.

Innholdet av virkestoffkombinasjonen ifølge oppfinnelsen i1 farmasøytiske preparater kan videre variere innenfor vide grenser. Den optimale daglige dosering avhenger av de praktisk anvendte komponenter, applikasjonsvegen, typen av infeksjon osv. Således ligger f.eks. den daglige dose ved parenterale applikasjon på ca. 200 - 2000 mg av blandinger av de aktive komponenter. Denne dose kan gis som engangs-dose eller i deldoser- og kan i spesielle situasjoner økes eller reduseres etter legens, forskrifter ut fra de. individu-elle behov.

EKSEMPLER

; Eksempel' L

Blanding, for fremstilling av injeksjonsløsninger som "inneholder de følgende bestanddeler:

De malte enkelte bestanddeler ble grundig blandet med hverandre og fylt i egnede beholdere under sterile betingelser. For fremstilling av en injeksjonsløsning kan den erholdte blanding løses i 2 ml vann for injeksjonsformål.

Eksempel 2

Lyof ili.sat for fremstilling av'injeksjonsløsninger som inneholder de følgende bestanddeler:

En vandig løsning av disse bestanddeler ble frysetørket. For å fremstille en injeksjonsløsning ble.det erholdte lyofilisat oppløst i 2 ml vann for injeksjonsformål.

Eksempel 3

■ En injeksjonsløsning fremstilles ved oppløsning av 100 ml nocardicin A-natriumsalt i 1 ml av en løsning som inneholder 100 mg (IR).-1-(L-norvalylamino)-etylf osf onsyre per

•ml av en egnet puffer. En egnet puffer kan ha følgende sammensetning:

Eksempel 4

En pulverblanding for fremstilling av injeksjonsløsninger kan ha'følgende sammensetning:

Denne blandingen fremstilles på analog måte som i eksempel 1. For f rems/tilling av en injeks jonsløsning oppløses blandingen i 2 ml vann for injeksjonsformål.

Eksempel 5

Pulverblanding for fremstilling-av injeksjonsløsninger med følgende sammensetning:

Blandingen fremstilles på analog måte som i eksempel 1.

For fremstilling av en injeksjonsløsning oppløses blandingen i 2 ml vann for injeksjonsformål.

Claims (6)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av.virkestoffkombinasjoner med antibiotiske egenskaper som inneholder en forbindelse med den generelle formel

hvori R"*" er hydrogen, metyl, hydroxymetyl, en mono-, di- eller trihalogenmetylgruppe; 2 R er en lavere alkyl, hydroxylavere alkyl- eller guanidionolavere alkylrest som er karakteristisk for en a-aminosyre som ikke normalt forekommer i proteiner og konfigurasjonen på C-atomene (a) og (b) er R- (nårR<1> f K) hhv. L, eller et fysiologisk fordragelig salt av en slik forbindelse og et nocardicin-antibiotikum,. karakterisert ved at man blander en forbindelse med formel I eller et fysiologisk fordragelig salt derav og et nocardicin-antibiotikum med hverandre.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man som nocardicin-antibiotikum anvender, nocardicin A.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved . at R"'" i forbindelse med formel I er hydrogen eller metyl.

4. Fremgangsmåte ifølge ett av kravene 1-3, karakterisert ved at man anvender en forbindelse med formel I hvori R 2 er lavere alkylrest.

5. Fremgangsmåte ifølge ett av kravene 1-4, karakterisert ved at■man anvender en forbindelse med formel I som er .(IR)-1- (L-norvalylamino) - etylfosfonsyre.

6. Fremgangsmåte ved fremstilling av farmasøytiske-preparater på basis av virkestoff-kombinasjoner som er-holdes ifølge kravene 1-5, karakterisert v. e d. at man blander' et peptid med formel I eller et fysiologisk fordragelig salt derav og et nocardicin-antibiotikum med et ikke-toksisk, inert, terapeutisk .fordragelig fast eller flytende bæremiddel og bringer den erholdte blanding i den ønskede galeniske form.