NO790100L

NO790100L - USE OF XANTHOMONAS POLYSACARIDES FOR THE PREPARATION OF WATER GELS WITH IMPROVED FILTERABILITY

Info

Publication number: NO790100L
Application number: NO790100A
Authority: NO
Inventors: Francois Contat; Guy Lartigau; Olivier Nicolas
Original assignee: Rhone Poulenc Ind
Priority date: 1978-01-16
Filing date: 1979-01-12
Publication date: 1979-07-17
Also published as: FR2414555B1; IT7919344A0; GB2012792A; MX5647E; BR7900252A; OA06150A; ES476854A1; GB2012792B; BE873480A; FR2414555A1; CA1123768A; DE2901485A1; IT1110711B

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av polysakkarider fremstilt ved gjæring av sakkarider ved hjelp av en mikro-orga-nisme av slekten Xanthomonas, for ved tilsetning av vann og fremstille geler med god filtrerbarhet. The present invention relates to the use of polysaccharides produced by fermentation of saccharides with the aid of a micro-organism of the genus Xanthomonas, for by adding water and producing gels with good filterability.

Man vet at for fremstilling av ekstracellulære polysakkarider ved hjelp av mikro-organismer av slekten Xanthomonas at gjæringsmiljøet vanligvis må omfatte en kilde for sakkarider, en kilde for fosfor, en kilde for magnesium som er en enzymaktiyator og en kilde for nitrogen som vanligvis utgjøres av såkalte "gjæringsekstrakter" It is known that for the production of extracellular polysaccharides by means of micro-organisms of the genus Xanthomonas that the fermentation environment must usually include a source of saccharides, a source of phosphorus, a source of magnesium which is an enzyme activator and a source of nitrogen which is usually constituted by so-called "fermentation extracts"

(US patentskrift 3.000.790), videre kli eller mel av hele korn som f.eks. sorghum, soya eller mais (US patentskrift 3.271.267) eller såkalt "kornstøpevæske" (US patentskrift 3.355.447). (US patent 3,000,790), further bran or whole grain flour such as e.g. sorghum, soy or corn (US patent 3,271,267) or so-called "grain casting liquid" (US patent 3,355,447).

De produkter som tilfører assimilerbart nitrogen frembyr imidlertid den ulempe at de innfører uoppløselige forurensninger som gjenfinnes i det polysakkarid som ekstraheres fra gjæringsmosten. Disse forurensninger, som blant annet meddeler en viss farge til de rekonstituerte vandige geler fra ekstraksjonsproduktet, er et brysomt forhold, på grunn av at gelen ikke er anvendelig for visse formål som f.eks. utvinning av olje. Nærværet av lite oppløselige forurensninger nedsetter filtrerbarheten av gelene oppnådd ved å gå However, the products which add assimilable nitrogen present the disadvantage that they introduce insoluble impurities which are found in the polysaccharide extracted from the fermentation must. These impurities, which among other things impart a certain color to the reconstituted aqueous gels from the extraction product, are a troublesome situation, due to the fact that the gel is not usable for certain purposes such as e.g. extraction of oil. The presence of poorly soluble impurities reduces the filterability of the gels obtained by walking

ut fra disse polysakkarider og gjør deres inntrengning i fjell- from these polysaccharides and make their penetration into mountain

sprekkene vanskelig.the cracks difficult.

Man har foreslått forskjellig teknikk for å rense bestående f.eks. i å underkaste gjæringsmosten, eller bedre den rekonstituerte vandige gel fra polysakkarider ekstrahert fra mosten for filtrer-ingsoperasjoner gjennom diatoméjord, innvirkning av enzymer av typen protease eller NaOH, men disse rensemetoder har vist seg dyre og dertil lite tilfredsstillende. Different techniques have been proposed to clean existing e.g. in subjecting the fermentation must, or better the reconstituted aqueous gel from polysaccharides extracted from the must for filtration operations through diatomaceous earth, to the action of enzymes of the protease or NaOH type, but these purification methods have proved expensive and moreover unsatisfactory.

Man har videre foreslått for fremstilling av polysakkarider ved hjelp av Xanthomonas-bakterier å anvende et gjæringsmiljø som inneholder en fullstendig oppløselig uorganisk nitrogenkilde, men heller ikke her var resultatene tilfredsstillende. Man har faktisk kon-statert at når gjæringen foregår i et miljø som ikke er fullstendig sterilt, som i vanlige tilfeller med industrielle operasjoner i middels eller stor målestokk, at anvendelse av en næring hoved-sakelig på basis av uorganisk nitrogen begunstiger utvikling av forurensninger til skade for selve Xanthomonas-bakteriene, og likeledes medfører forurensningen et merkbart fall i innholdet av polysakkarid i gjæringsblandingen. It has also been proposed for the production of polysaccharides using Xanthomonas bacteria to use a fermentation environment which contains a completely soluble inorganic nitrogen source, but here too the results were not satisfactory. It has actually been found that when the fermentation takes place in an environment that is not completely sterile, as in normal cases with industrial operations on a medium or large scale, that the use of a food mainly based on inorganic nitrogen favors the development of contaminants to damage to the Xanthomonas bacteria themselves, and likewise the contamination causes a noticeable drop in the content of polysaccharide in the fermentation mixture.

Det er i samsvar med den foreliggende oppfinnelse funnet at det er mulig å oppnå geler av polysakkarider med vesentlig forbedrede fil-treringsegenskaper på betingelse av at man anvender polysakkarider av Xanthomonas spesielt tilpasset som produkter fra gjæringen i nærvær av et nitrogenholdig organisk næringsmiddel hvor mengden er bestemt innen et nøyaktig område. In accordance with the present invention, it has been found that it is possible to obtain gels of polysaccharides with significantly improved filtration properties on the condition that polysaccharides of Xanthomonas specially adapted as products from the fermentation in the presence of a nitrogen-containing organic nutrient are used, the amount of which is determined within a precise area.

Oppfinnelsen vedrører således anvendelse av polysakkarider som oppnådd ved å anvende en fremgangsmåte som går ut på følgende trinn: The invention thus relates to the use of polysaccharides obtained by using a method which consists of the following steps:

a) fremstilling av et kimprodukt fra en Xanthomonas-kultur,a) production of a germ product from a Xanthomonas culture,

b) eventuelt etterfulgt av et mellomliggende trinn med vekst av mikro-organismene, og c) fremstilling av polysakkarid ved inokulering, ved hjelp av kulturen fra trinn a) eller i tilfellet med trinn b) av et miljø omfattende et sakkarid og en passende nitrogenkilde og gjæring av dette miljø, b) optionally followed by an intermediate step of growth of the micro-organisms, and c) production of polysaccharide by inoculation, using the culture from step a) or in the case of step b) of a environment comprising a saccharide and a suitable nitrogen source and fermentation of this environment,

idet nitrogenkilden omfatter i det minste et nitrogenholdig produkt av organisk opprinnelse, idet mengden av det nevnte organiske nitrogenprodukt, uttrykt i gram elementært nitrogen pr. liter gjæringsblanding, utgjør mellom 0,01 og 0,3 g/l. with the nitrogen source comprising at least one nitrogen-containing product of organic origin, with the quantity of said organic nitrogen product, expressed in grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, amounts to between 0.01 and 0.3 g/l.

Som organisk nitrogenkilde kan man anvende produkter som vanligvis anvendes innenfor denne teknikk, for gjennomføring av lignende gjær-inger, og man kan her nevne peptoner, gelatin, kasein, kjøtt-ekstrakt og gjærekstrakt. As an organic nitrogen source, you can use products that are usually used within this technique, for carrying out similar fermentations, and here you can mention peptones, gelatin, casein, meat extract and yeast extract.

De mengder som foretrekkes av det organiske nitrogenholdige produkt, uttrykt som gram elementært nitrogen pr. liter gjæringsblanding, utgjør mellom 0,02 og 0,2 g/l. The preferred quantities of the organic nitrogen-containing product, expressed as grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, amounts to between 0.02 and 0.2 g/l.

Man har fastslått at det kan være fordelaktig for gjennomføringIt has been determined that it can be advantageous for implementation

av fremstillingstrinnet c) blant .annet til gjæringsblandingen å tilsette et nitrogenholdig næringsstoff av uorganisk opprinnelse. Denne foranstaltning tillater merkbar økning av gjæringstakten. of the manufacturing step c) among other things, to add a nitrogen-containing nutrient of inorganic origin to the fermentation mixture. This measure allows a noticeable increase in the rate of fermentation.

Som uorganisk nitrogenkilde som passer ved utøvelse av oppfinnelsen kan man f.eks. nevne ammoniumsalter som ammoniumklorid, ammonium-nitrat, mono- eller diammoniumkarbonater, samt mono- eller di-ammoniumsulfater, mono- eller diammoniumfosfater, nitrater som natriumnitrat og kaliumnitrat. As an inorganic nitrogen source suitable for practicing the invention, one can e.g. mention ammonium salts such as ammonium chloride, ammonium nitrate, mono- or diammonium carbonates, as well as mono- or di-ammonium sulphates, mono- or diammonium phosphates, nitrates such as sodium nitrate and potassium nitrate.

Nitrogenproduktet av uorganisk opprinnelse, når man velger å anvende dette, innføres i gjæringsblandingen i variable mengder som bestemmes ut fra den totale mengde av nitrogenholdig organisk produkt og nitrogenholdig uorganisk produkt, uttrykt i gram elementært nitrogen pr. liter gjæringsblanding, slik at denne er høyest 0,5 g/l. The nitrogen product of inorganic origin, when one chooses to use it, is introduced into the fermentation mixture in variable amounts which are determined from the total amount of nitrogen-containing organic product and nitrogen-containing inorganic product, expressed in grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, so that this is no more than 0.5 g/l.

Gjæringen av sakkaridet i fremstillingstrinnet for polysakkaridet gjennomføres i vandig miljø inneholdende opptil 60 g/l av det nevnte sakkarid. The fermentation of the saccharide in the production step for the polysaccharide is carried out in an aqueous environment containing up to 60 g/l of the said saccharide.

De foretrukne mengder av sakkarid er mellom 10 og 40 g/l. De sakkarider som kan anvendes omfatter blant annet glukose, rør-sukker, cerelose, fruktose, maltose, laktose, stivelse fra hvete eller mais og hydrolysater derav. The preferred amounts of saccharide are between 10 and 40 g/l. The saccharides that can be used include glucose, cane sugar, cerelose, fructose, maltose, lactose, starch from wheat or corn and hydrolysates thereof.

Gjæringsblandingen i fremstillingstrinnet for polysakkaridet kan videre inneholde magnesiumioner. Den mengde som anvendes, uttrykt i gram elementært magnesium pr. liter gjæringsblanding, utgjør f.eks. mellom 0,001 og 0,05 g/l og som kilder for magnesiumioner kan nevnes magnesiumsulfat-heptahydrat, magnesiumacetat, magnesium-klorid. The fermentation mixture in the production step for the polysaccharide can also contain magnesium ions. The quantity used, expressed in grams of elemental magnesium per liter of fermentation mixture, constitutes e.g. between 0.001 and 0.05 g/l and magnesium sulfate heptahydrate, magnesium acetate, magnesium chloride can be mentioned as sources of magnesium ions.

En annen bestanddel som er nyttig for gjennomføring av gjæringen består i en kilde for fosfor og den mengde som anvendes, uttrykt i gram fosfor pr. liter gjæringsblanding, kan f.eks. utgjøre mellom 0,01 og 1,5 g/l. Fordelaktig kan fosforet innføres i form av di-natriumfosfat eller dikaliumfosfat som samtidig, hvis de anvendes i overskudd i forhold til de tidligere nevnte mengder, kan utgjøre en buffersubstans egnet for regulering av pH. I dette henseende foregår gjæringen som man vet når pH holdes i området 6 til 7,5, foretrukket mellom 6,5 og 7,2. Hvis blandingen ikke er bufret kan man anvende en automatisk regulator for pH som i blandingen inn-fører nødvendige mengder av et alkalisk reagens, som soda, pottaske eller kalk. Another component that is useful for carrying out the fermentation consists of a source of phosphorus and the amount used, expressed in grams of phosphorus per liter fermentation mixture, can e.g. amount to between 0.01 and 1.5 g/l. Advantageously, the phosphorus can be introduced in the form of disodium phosphate or dipotassium phosphate which, if used in excess of the previously mentioned amounts, can also constitute a buffer substance suitable for regulating pH. In this respect, the fermentation takes place as is known when the pH is kept in the range 6 to 7.5, preferably between 6.5 and 7.2. If the mixture is not buffered, an automatic regulator for pH can be used which introduces the necessary quantities of an alkaline reagent, such as soda ash, pot ash or lime, into the mixture.

Fosforet kan tilsettes i gjæringsblandingen i form av mono- eller diammoniumfosfater som samtidig, helt eller delvis, kan utgjøre kilden for uorganisk nitrogen anvendelig i det siste trinn av oppfinnelsen . Phosphorus can be added to the fermentation mixture in the form of mono- or diammonium phosphates which at the same time, in whole or in part, can constitute the source of inorganic nitrogen applicable in the last step of the invention.

Et antiskummemiddel kan likeledes innføres i gjæringsblandingen. An antifoam agent can also be introduced into the fermentation mixture.

Etter gjennomført gjæring, men før man går videre med utvinning av polysakkaridet fra mosten, er det fastslått at det er interessant å underkaste .den gjærede most en oppvarming i et temperaturområde fra 80 til 13 0°C i 1 til 40 minutter. Foretrukket er temperaturen 100 - 110°C og varigheten av oppvarmingen er 10 til 15 minutter. Man isolerer polysakkaridet fra mosten, eventuelt oppvarmet på forhånd som angitt ovenfor, ved å anvende vanlige metoder, f.eks. utfelling ved tilsetning til mosten av en lavere alkohol som metanol, etanol, isopropanol, tertiærbutanol eller aceton, eller en blanding. :av disse fellingsmidler. Man kan også anvende et uorganisk salt som kaliumklorid, natriumklorid eller natrium- After complete fermentation, but before proceeding with extraction of the polysaccharide from the must, it has been determined that it is interesting to subject the fermented must to heating in a temperature range from 80 to 130°C for 1 to 40 minutes. The preferred temperature is 100 - 110°C and the duration of the heating is 10 to 15 minutes. The polysaccharide is isolated from the must, optionally heated in advance as indicated above, by using common methods, e.g. precipitation by adding to the must a lower alcohol such as methanol, ethanol, isopropanol, tertiary butanol or acetone, or a mixture. :of these felling agents. You can also use an inorganic salt such as potassium chloride, sodium chloride or sodium

sulfat for å gjennomføre en lønnsom utfelling av polysakkaridet.sulfate to carry out a profitable precipitation of the polysaccharide.

Som nevnt fraskilles polysakkaridet, vaskes med utfellingsvæskenAs mentioned, the polysaccharide is separated, washed with the precipitation liquid

og tørkes og males.and dried and painted.

Det produkt som oppnås på denne måte kan anvendes for ved tilsetning av vann å danne geler. De konsentrasjoner av polysakkarider som vanlig anvendes utgjør mellom 0,0 05 og 2 vektprosent. Gelene kan underkastes en.sluttbehandling ved filtrering, f.eks. gjennom di-atomé jord, eller ved sentrifugering. Oppløsningen av polysakkarid, oppnådd på denne måte og eventuelt behandlet, har vist seg å ha utmerkede egenskaper med hensyn til filtrerbarhet og frembringer ikke tilstopning av poremiljøet. Under de samme forsøksbetingelser frembyr geler av polysakkarider, oppnådd ved hjelp av gjæring med en organisk nitrogenkilde anvendt i en mengde større enn den som tilsvarer konsentrasjonsområdet ved den foreliggende oppfinnelse, ikke de samme fordeler og spesielt strømmer de vanskeligere i de porøse miljøer som de tilstopper. De typer bakterier som er rep-resentative for slekten Xanthomonas kan tjene til fremstilling av polysakkaridene i samsvar med oppfinnelsen omfatter f.eks. Xanthomonas begoniae, Xanthomonas campestris, Xanthomonas carotaen, Xanthomonas hederae, Xanthomonas incanae, Xanthomonas malvacearum, Xanthomonas faseoli, Xanthomonas pisi, Xanthomonas vasculorum, Xanthomonas vesicatoria, Xanthomonas vitians og Xanthomonas pelargonii. Den type som anvendes foretrukket er Xanthomonas campestris. The product obtained in this way can be used to form gels by adding water. The concentrations of polysaccharides that are usually used are between 0.005 and 2% by weight. The gels can be subjected to a final treatment by filtration, e.g. through diatomaceous earth, or by centrifugation. The solution of polysaccharide, obtained in this way and optionally treated, has been shown to have excellent properties with regard to filterability and does not cause clogging of the pore environment. Under the same experimental conditions, gels of polysaccharides, obtained by fermentation with an organic nitrogen source used in an amount greater than that corresponding to the concentration range of the present invention, do not offer the same advantages and in particular they flow more difficult in the porous environments which they clog. The types of bacteria that are representative of the genus Xanthomonas can be used to produce the polysaccharides in accordance with the invention include e.g. Xanthomonas begoniae, Xanthomonas campestris, Xanthomonas carotaen, Xanthomonas hederae, Xanthomonas incanae, Xanthomonas malvacearum, Xanthomonas faseoli, Xanthomonas pisi, Xanthomonas vasculorum, Xanthomonas vesicatoria, Xanthomonas vitians and Xanthomonas pelargonii. The type used preferably is Xanthomonas campestris.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen.The following examples illustrate the invention.

EKSEMPEL 1.EXAMPLE 1.

Eksempel på fremstilling av polysakkarid som inngår i rammen for oppfinnelsen. Example of the production of polysaccharide that is part of the scope of the invention.

a) Fremstilling av podekultur:a) Preparation of inoculum:

Man xjår ut fra en kultur av Xanthomonas campestris opprettholdt på agar i rør og poder ved suspensjon i en erlenmeyerkolbe på 1 liter, 100 cm 3 oppløslig soyaekstrakt. Denne laboratoriefremstilte dyrk-ningblanding har følgende sammensetning pr. liter: One starts from a culture of Xanthomonas campestris maintained on agar in tubes and inoculates by suspension in an Erlenmeyer flask of 1 liter, 100 cm 3 of soluble soy extract. This laboratory-produced cultivation mixture has the following composition per liters:

Blandingen har en naturlig pH på 7,3 og steriliseres i autoklav i 1 time 30 min. ved 1,3 bar. Inkubasjonstiden ved 28°C er 72 timer. Operasjonen.gjennomføres under stadig omrøring. The mixture has a natural pH of 7.3 and is sterilized in an autoclave for 1 hour 30 minutes. at 1.3 bar. The incubation time at 28°C is 72 hours. The operation is carried out with constant stirring.

b) Mellomliggende veksttrinn:b) Intermediate growth stages:

Man anvender 0,15. vektprosent av denne dyrkningskultur for i et laboatoriegjæringskar på 20 liter å pode 15 liter av en steril blanding med følgende sammensetning pr. 1 liter: 0.15 is used. weight percent of this cultivation culture in order to inoculate 15 liters of a sterile mixture with the following composition per 1 liter:

Blandingen har en pH på 7,2 og steriliseres på stedet ved inn-føring av vanndamp i 45 minutter ved 1 bar, volumet stiger da fra 9 liter til 15 liter. Etter 24 timers inkubasjon ved 28°C under omrøring og lufting har blandingen en viskositet (målt i Brookfield- viskosimeter LVT på 30 o/mn med rotasjonslegeme nr. 4) på 600 centipoise og en pH på 7,10. The mixture has a pH of 7.2 and is sterilized on site by introducing steam for 45 minutes at 1 bar, the volume then rises from 9 liters to 15 litres. After 24 hours of incubation at 28°C with stirring and aeration, the mixture has a viscosity (measured in Brookfield viscometer LVT at 30 rpm with rotary body No. 4) of 600 centipoise and a pH of 7.10.

c) Fremstilling av polysakkarid:c) Preparation of polysaccharide:

Man anvender 1,5% av den ovennevnte vekstblanding for poding av et gjæringskar på 1,4 m 3 forsynt med 0,8 m 3 av en steril blanding med følgende sammensetning pr. 1 liter: 1.5% of the above-mentioned growth mixture is used to inoculate a fermentation vessel of 1.4 m 3 supplied with 0.8 m 3 of a sterile mixture with the following composition per 1 liter:

Sterilisering av blandingen gjennomføres to ganger, nemlig første gang i 350 liter vann oppløses cerelosen og steriliseringen gjen-nomføres i en autoklav i 3 0 minutter ved 1 bar, og den annen gang i 320 liter vann hvor man oppløser resten av bestanddelene og sterilisering foretas ved injeksjon av vanndamp i 1 time 30 min. ved 1,3 bar. Blandingen av de to steriliserte deleblandinger har en pH på 7,37 og et volum på 0,8 m 3. Gjæringen varer omtrent 75 timer under omrøring og lufting og pH reguleres til mellom 6,7 og 6,9 ved tilsetning av en vandig løsning av soda på 300 g NaOH pr. liter. Ved slutten av dette tidsrom forefinnes ikke mer cerelose og viskositet Brookfield igjæringsblandingen er 7400 centipoise. Sterilization of the mixture is carried out twice, namely the first time in 350 liters of water the cerelose is dissolved and the sterilization is carried out in an autoclave for 30 minutes at 1 bar, and the second time in 320 liters of water where the rest of the components are dissolved and sterilization is carried out at injection of water vapor for 1 hour 30 min. at 1.3 bar. The mixture of the two sterilized partial mixtures has a pH of 7.37 and a volume of 0.8 m 3. The fermentation lasts approximately 75 hours under stirring and aeration and the pH is adjusted to between 6.7 and 6.9 by adding an aqueous solution of soda at 300 g NaOH per litres. At the end of this time, no more cerelose is present and the viscosity of the Brookfield fermentation mixture is 7400 centipoise.

Man arbeider videre med en termisk behandling av mosten ved å bringe denne til å sirkulere i et rørsystem med dobbelte vegger hvori det sirkulerer en oppvarmingsvæske bragt til en passende temperatur og mosten oppvarmes ved 120°C i 30 minutter. One further works with a thermal treatment of the must by causing it to circulate in a pipe system with double walls in which a heating liquid brought to a suitable temperature circulates and the must is heated at 120°C for 30 minutes.

Den avkjølte most tilsettes deretter isopropanol på klassisk måte for å felle ut polysakkaridet som vaskes, tørkes og males. Det tørre material utfelt ved hjelp av isopropanol utgjør 15,7 g/kg, tilsvarer et vektmessig utbytte på 71,4%. The cooled must is then added to isopropanol in the classic way to precipitate the polysaccharide, which is washed, dried and ground. The dry material precipitated using isopropanol amounts to 15.7 g/kg, corresponding to a yield by weight of 71.4%.

EKSEMPEL 2.EXAMPLE 2.

Fremstilling av polysakkarid i henhold til oppfinnelsen.Production of polysaccharide according to the invention.

Man går frem som i eksempel 1 og poder et gjæringskar på 1,4 m<3>fylt med 0,8 m 3 av en steril blanding med følgende sammensetning pr. liter: You proceed as in example 1 and inoculate a fermentation vessel of 1.4 m<3> filled with 0.8 m 3 of a sterile mixture with the following composition per liters:

Sterilisering av blandingen gjennomføres som beskrevet i eksempel Sterilization of the mixture is carried out as described in the example

1 to ganger. Samling av de to steriliserte blandinger gir en pH på 7,24 og et volum på 0,8 m 3. Gjæringen varer omtrent 41 timer under omrøring og lufting, idet pH reguleres mellom 6,7 og 6,9 1 twice. Combining the two sterilized mixtures gives a pH of 7.24 and a volume of 0.8 m 3. The fermentation lasts approximately 41 hours with stirring and aeration, with the pH being regulated between 6.7 and 6.9

ved tilsetning av NaOH-løsning 300 g NaOH pr. liter. Etter denne tid finnes ikke lenger cerelose i blandingen og Brookfield-viskositet er 5400 centipoise. by adding NaOH solution 300 g NaOH per litres. After this time, cerelose is no longer present in the mixture and the Brookfield viscosity is 5400 centipoise.

Man går deretter frem med en termisk behandling av mosten ved oppvarming av denne ved 110°C i 15 minutter. Etter avkjøling utfelles polysakkaridet som angitt i eksempel 1 og det isoleres 14,6 g/kg tørt polysakkarid som fører til et vektmessig utbytte på 66,4%. The must is then thermally treated by heating it at 110°C for 15 minutes. After cooling, the polysaccharide is precipitated as indicated in example 1 and 14.6 g/kg of dry polysaccharide is isolated, which leads to a yield by weight of 66.4%.

EKSEMPEL 3.EXAMPLE 3.

Fremstilling av polysakkarid ved gjæring i nærvær av en organisk nitrogenkilde anvendt i mengder større enn tilsvarende oppfinnelse. Production of polysaccharide by fermentation in the presence of an organic nitrogen source used in quantities greater than corresponding invention.

Man går frem som i eksempel 1 og poder et gjæringskar med volumYou proceed as in example 1 and inoculate a fermentation vessel with volume

3 3 3 3

1,4 m fylt med en blanding på 1 m av en steril blanding med følgende sammensetning pr. liter: 1.4 m filled with a mixture of 1 m of a sterile mixture with the following composition per liters:

Den samlede blanding har en pH på 7,3 og steriliseres ved injeksjon av damp i 1 time 30 min. ved 1,3 bar hvor volumet stiger fra 0,74 m 3 til 1 m 3. Gjæringen tar omtrent 52 timer under omrøring og lufting idet pH reguleres mellom 6,7 og 6,9 ved tilsetning av NaOH-løsning anvendt i de foregående eksempler. Etter denne tid forefinnes ikke lenger sakkarose og viskositeten under de angitte betingelser måles til 6900 centipoise. Etter en termisk behandling av mosten og utfelling under de angitte betingelser i eksempel 1 isoleres 15,6 g/kg av tørt material tilsvarende et ubytte på 78%. The combined mixture has a pH of 7.3 and is sterilized by injecting steam for 1 hour 30 minutes. at 1.3 bar where the volume rises from 0.74 m 3 to 1 m 3. Fermentation takes approximately 52 hours with stirring and aeration as the pH is regulated between 6.7 and 6.9 by adding the NaOH solution used in the previous examples . After this time, sucrose is no longer present and the viscosity under the specified conditions is measured at 6900 centipoise. After a thermal treatment of the must and precipitation under the stated conditions in example 1, 15.6 g/kg of dry material is isolated, corresponding to a yield of 78%.

EKSEMPEL 4.EXAMPLE 4.

Man anvender de polysakkaridpulvere som er oppnådd i eksemplene 1 - 3 for å teste filtrerbarheten. Filtrerbarhetsforsøkene består i følgende operasjoner: - 3,2 g polysakkaridpulver dispergeres ved vanlig teknikk i 2 liter saltholdig vann inneholdende 5 g NaCl pr. liter, med pH nøyaktig 7, og forhåndsfiltrert gjennom et filter "Millipore" på 0,22 y; The polysaccharide powders obtained in examples 1 - 3 are used to test the filterability. The filterability tests consist of the following operations: - 3.2 g of polysaccharide powder is dispersed using the usual technique in 2 liters of saline water containing 5 g of NaCl per liters, with pH exactly 7, and pre-filtered through a filter "Millipore" of 0.22 y;

- konsentrasjonen av polysakkarid i denne oppløsning (eller gel)- the concentration of polysaccharide in this solution (or gel)

på 0,16 vektprosent nedsettes til 0,04% ved fortynning ved hjelp av den samme vandige saltløsning; - man fortsetter så med en filtreringsbehandling gjennom diatoméjord av oppløsningen med konsentrasjon 0,04% i mengde 0,05 g diatomejord for 100.cm 3 av den nevnte oppløsning; - man måler deretter volum av filtrert løsning 0,04% som er filtrert ved å ha gått gjennom et filter "Millipore" med porøsitet 3 u og 47 mm diameter, under et trykk frembragt av en nivåfor-skjell på 10 cm vann mellom inngang og utgang i filtrerings-apparatet. of 0.16% by weight is reduced to 0.04% by dilution using the same aqueous salt solution; - one then continues with a filtration treatment through diatomaceous earth of the solution with a concentration of 0.04% in an amount of 0.05 g of diatomaceous earth for 100.cm 3 of the aforementioned solution; - one then measures the volume of filtered solution 0.04% which has been filtered by passing through a filter "Millipore" with porosity 3 u and 47 mm diameter, under a pressure produced by a level difference of 10 cm of water between entrance and output in the filtering device.

De oppnådde resultater fremgår av vedføyde fig. 1 som viser de volum som er filtrert som funksjon av tiden: - oppløsninger av polysakkarider fremstilt som angitt i eksemplene 1 og 2 vises som kurve A henholdsvis B; - oppløsningen av polysakkarid fremstilt i eksempel 3 vises som kurve C; - den vandige saltløsning, med 5 g pr. liter NaCl, har tjent som kontroll ved filtrerbarhetstesten vises som kurve D. The results obtained appear from the attached fig. 1 which shows the volumes filtered as a function of time: - solutions of polysaccharides prepared as indicated in examples 1 and 2 are shown as curves A and B respectively; - the solution of polysaccharide prepared in example 3 is shown as curve C; - the aqueous salt solution, with 5 g per liter of NaCl, has served as a control in the filterability test is shown as curve D.

Det sees av disse filtrerbarhetsforsøk at det opptrer en hurtig tilstopning av filteret "Millipore" på 3 y med en oppløsning av polysakkarid oppnådd ved gjæring i et miljø rikt på organisk nitrogen, til tross for en forhåndsklaring av polysakkaridløsningen (kurve C). Derimot frembringer ikke oppløsningen av polysakkarid oppnådd ved gjæring i et miljø tilsvarende oppfinnelsen, dvs. fattig på organisk nitrogen, ikke noen tilstopning av det porøse miljø og oppløsningen strømmer lett (kurvene A og B). It is seen from these filterability tests that a rapid clogging of the filter "Millipore" of 3 y occurs with a solution of polysaccharide obtained by fermentation in an environment rich in organic nitrogen, despite a preliminary clarification of the polysaccharide solution (curve C). In contrast, the solution of polysaccharide obtained by fermentation in an environment corresponding to the invention, i.e. poor in organic nitrogen, does not produce any clogging of the porous environment and the solution flows easily (curves A and B).

Claims

1. Use of Xanthomonas polysaccharides particularly suitable for, by adding water, to produce gels with significantly improved filterability, characterized in that the said polysaccharides have been obtained by means of a method which consists in carrying out the following operations: a) preparing inoculum from a Xanthomonas culture; b) optionally followed by an intermediate step for propagating the micro-organisms; c) production of polysaccharide by inoculation using the cultivation culture from step a) or optionally from step b) of a mixture comprising a saccharide and a suitable nitrogen source and fermentation of this mixture, the nitrogen source comprising at least one nitrogen-containing product of organic origin, the quantity of said nitrogen-containing product of organic origin, expressed as grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, is between 0.01 and 0.3 g/l.

2. Application as stated in claim 1, characterized in that the amount of nitrogen-containing organic product used in production step c), expressed as grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, is between 0.0 2 and 0.2 g/l.

3. Use as stated in claim 1 or 2, characterized in that in the production step c) the fermentation mixture contains, among other things, a nitrogen-containing product of inorganic origin.

4. Application as stated in claim 3, characterized in that the amount of nitrogen-containing product of inorganic origin that is introduced into the fermentation mixture is determined so that the total amount of the nitrogen-containing organic product and the nitrogen-containing inorganic product, expressed as grams of elemental nitrogen per liter of fermentation mixture, is no more than 0.5 g/i.

5. Use as stated in claims 1-4, characterized in that after completed fermentation, the fermented must containing the polysaccharide is subjected to heating in the temperature range 80 to 130°C for 1 to 40 minutes.

6. Use as stated in claims 1-5, characterized in that the gels have a concentration of polysaccharide of between 0.005 and 2% by weight.