NO168710B

NO168710B - Analogifremgangsmaate ved fremstilling av et terapeutisk aktivt antracyklinglykosid

Info

Publication number: NO168710B
Application number: NO911043A
Authority: NO
Inventors: Michele Caruso; Antonino Suarato; Francesco Angelucci; Federico Arcamone
Original assignee: Erba Carlo Spa
Priority date: 1987-04-21
Filing date: 1991-03-15
Publication date: 1991-12-16
Also published as: NO168710C; NO911043D0; NO911043L

Description

Oppfinnelsen vedrører analogifremgangsmåte ved fremstilling

av et terapeurisk aktivt antracyklinglykosid med formel (A):

hvor Ri betyr et hydrogenatom, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Glykosidet med formel (A) fremstilles ved en fremgangsmåte

som omfatter å omsette et N-trifluoracetyl-beskyttet derivat av et daunomycinon-derivat med formel (I):

hvor 4-aminogruppen er beskyttet,

med et beskyttet halogensukker med formel (II):

hvor Hal betyr et halogenatom som fortrinnsvis er et kloratom, og å fjerne de beskyttende grupper fra det erholdte produkt for å oppnå et antracyklinglykosid med formel (A) hvor R^. er hydrogen; og, hvis ønsket, å omdanne nevnte glykosid med formel (A) til et farmasøytisk akseptabelt salt.

Kondensasjonen av 4-demetoksy-4-N-trifluoracetamido-daunomycinon (I) og beskyttet halogensukker (II) kan foregå i nærvær av sølvtriflat. Fremgangsmåten som er beskrevet i US-A-4107423, kan anvendes, hvilket gir (7S, 9S)-trifluoracetylbeskyttede derivater av a-glykosidene. 4-demetoksy-4-N-trifluoracetamido-daunomycinonet kan oppløses i vannfritt metylenklorid, og reaksjonen kan foregå ved 5-10°C. De N-beskyttende grupper kan fjernes ved mild alkalisk behandling.

Fremstillingen av daunomycinonderivatet med formel I og av dets n-beskyttede derivat er blitt beskrevet i patentansøk-ning nr. 881710 fra hvilken denne ansøkning er avdelt.

Eksempel 1

4- demetoksy- 4- amino- daunorubicin (A)

0,08 g av 4-demetoksy-4-N-trifluoracetamido-daunomycinon (I), beskrevet i ansøkning 88.1710, ble oppløst i vannfritt metylendiklorid, og løsningen ble avkjølt til 5-10°C. En løsning av 0,024 g 1-klor-N,O-ditrifluoracetyl-daunosamin II, som ble fremstilt ifølge fremgangsmåten som er beskrevet i Cancer Chemotherapy Reports, del 3, vol. 6, nr. 2, side 123, i dietyleter, og en løsning med 0,150 g sølv-trifluor-metansulfonat i metylendiklorid ble tilsatt samtidig og hurtig under kraftig omrøring.

Etter 5 minutter ble ytterligere 0,070 g sølv-trifluor-metansulfonat tilsatt, og etter 5 minutter ble reaksjonen hurtig avkjølt med kollidin.

Blandingen ble filtrert, vasket med en mettet vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat og med vann, tørket og konsentrert under vakuum.

Det gjenværende ble kromatografert i en kolonne av silikagel og eluert med metylendiklorid, for å gi 4-demetoksy-4-N-trifluoracetamido-N-trifluoracetyl-daunorubicin.

WlR (200 MHz, CDC13) :

13.76 (s, 1H, 6-0H); 13.41 (s, 1H, 11-010; 7.69 (dd, J=l.2, 7.5 Hz,

1H, 1-H); 7.49 Idd, J=7.5, 8.3 Hz, 1H, 2-H); 6.97 (dd, J=l .2, 8.3 Hz,

1H, 3-H); 6.80 (broad signal, 2H, NH }; 6.64 (d, J=8.9 Hz, 1H, NHCOCF^;

5.50 (d, J=3.9 Hz, 1H, l'-H); 5.26 (dd, J = 1.8, 3.7 Hz, 1H, 7-H);

4.3-4.2 (in, 3H, 9-0H, 5'-H, 3'-H); 3.65 (ni, 4'-H); 3.26 (dd, J = 1.5, 19.0 Hz, 1H, 10-Heq); 2.95 (d, J = 19.U Hz, 1H, 10-Hax); 2.41 (s, 3H, C0CH )•, 2.30 (ddd, J=1.5, 1.8, 15.6 Hz, 1H, 8Heq); 2.16 (dd, J ■= 3.7, 15.6 Hz, 1H, 8-Hax); 2.0-1.6 (in, 2H, 2'-CH2); 1.30 (d, J= 6.6 Hz,

3H, 5'-.CH ).

Forbindelsen ble oppløst i 10 ml aceton og behandlet med 3 0 ml 0,1N vandig natriumhydroksyd ved 0°C i 3 timer. Deretter ble en 0,1N vandig saltsyreløsning tilsatt blandingen for å justere pH til 4,5, og aglykonet ble eliminert ved å ekstrahere med metylendiklorid. Så ble den vandige løsning justert til pH 8,6 og ekstrahert med metylendiklorid, tørket over vannfritt natriumsulfat, konsentrert til et lite volum, og surgjort til pH 4,5 med 0,1N metanol-hydr<p>genklorid for å gi den nevnte forbindelse som dens hydroklorid. Tynnskiktskromatografi på kiselgelplate F254 (Merck) med elueringssystem metylenklorid/metanol/eddiksyre/vann (80/20/7/3 volumdeler) gav Rf = 0,63; FD-MS/m/z 512 [M<+>].

Glykosidet er et antitumormiddel. Aktiviteten av 4-demetoksy-4-amino-daunorubicin (A) er blitt undersøkt ved å sammenligne dets in vitro cytotoksisitet med daunorubicin (DNR) i adenocarcinomceller fra menneskelig tykktarm, hvilke celler er følsomme (L0V0) eller resistente (L0V0/DX) overfor doxorubicin. Resultatene er vist i tabell 1.

In vitro aktiviteten av (A) og DNR mot disseminert Gross leukemi ble også bestemt. Resultatene er vist i tabell 2:

T/C % betyr den mediale overlevelsestid for behandlede mus/den mediale overlevelsestid for kontrollene x 100.

TOX betyr toksisk døde.

Claims

Analogifremgangsmåte ved fremstilling av terapeutisk aktivt antracyklinglykosid med formel (A):

hvor Ri betyr et hydrogenatom, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav,

karakterisert ved å omsette 4-demetoksy-4-N-trifluoracetamido-daunomycinon, oppløst i vannfritt metylenklorid, ved en temperatur på 5-10°C, med en eterisk løsning av 1-klor-N,0-ditrifluoracetyldaunosamin i nærvær av sølvtrifluormetansulfonat, rense på en kolonne med kiselgel det N-trifluoracetylbeskyttede daunorubicinderivat ved å eluere med metylendiklorid, underkaste det beskyttéde derivat en mild alkalisk hydrolyse med 0,1N vandig riatrium-hydroksyd ved 0°C i aceton i 3 timer, etterfulgt av ekstraksjon med metylendiklorid og påfølgende behandling av den konsentrerte løsning med 0,1N metanolisk hydrogenklorid for å erholde det ønskede 4-demetoksy-4-amino-daunorubicin i form av dets hydroklorid.