MXPA98008456A - Metodo para mejorar la exactitud de la determinacion semicuantitativa de analito en muestras fluidas - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un método para determinar la concentración de un primer analito en una muestra de prueba fluida como una función de un segundo analito presente también en la muestra cuya concentración en la muestra fluida se relaciona clínicamente a aquella del primer analito. El método implica determinar la concentración del primer analito, y, si esta concentración estáfuera de su rango analíticoútil, dividiendo esta concentración por la concentración normal del segundo analito. Este método para proporcionar la concentración del primer y segundo analito es ventajoso ya que la exactitud se incrementa con pocos resultados de positivos falsos y negativos reportados.

Description

MÉTODO PARA MEJORAR LA EXACTITUD DE LA DETERMINACIÓN SEMICUANTITATIVA DE ANALITO EN MUESTRAS FLUIDAS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Se emplean comúnmente varios procedimientos y dispositivos analíticos en ensayos para determinar la presencia y/o concentración de sustancias de significado clínico las cuales pueden estar presentes en fluidos biológicos tales como orina, sangre entera, plasma, suero, sudor o saliva, "¡-al s sustancias son referidas comúnmente como analitos y pueden incluir patrones de enlace específicos, por ejemplo anticuerpos o antígenos, fármacos y hormonas. Un tipo de dispositivo de prueba es la llamado varilla medidora, que contiene enzimas las cuales son interactivas con el analito e interaccionarán con el en una forma la cual resulta en la oxidación de un tinte redox para provocar un cambio de color el cual puede ser correlacionado con la presencia o, en métodos semi cuantitativos, la concentración del analito en la muestra de fluido. Han sido desarrolladas más recientemente tiras de prueba las cuales operan en el principio de inmunocromatografía en la cual anticuerpos marcados, específicos para el analito son aplicados a una tira de material absorbente a través del cual el fluido de prueba y anticuerpos marcados pueden fluir por capilaridad. Inmovilizando el analito (o un análogo del mismo) en una porción particular de la tira, es decir zona de captura, y midiendo la cantidad del anticuerpo marcado el cual es capturado a través de enlace específico, puede ser determinada cuantitativamente la concentración del analito en la muestra prueba. Se describe más totalmente este tipo de ensayo, en el cual la marca es una enzima y se coloca un substrato para la enzima en la zona de captura para relacionar una respuesta colorida, en la Patente de los Estados Unidos 4,446,232. En la Patente de los Estados Unidos 4,703,017 se describe un ensayo similar en el cual la marca es un material particulado el cual, después del agregado en la zona de captura debido al enlace específico entre el analito inmovilizado y anticuerpo marcado con partícula, proporciona una respuesta detectable visible. La utilidad clínica de análisis para varios analitos puede ser mejorada determinando la concentración de un analito secundario cuya concentración en el fluido biológico se relaciona clínicamente con aquella del analito primario. El ejemplo más notable del segundo analito es creatinina, el metabolito final cuando la creatina llega a ser fosfato de creatina el cual se usa como una fuente de energía para contracción muscular. Se filtra la creatinina producida por los glomérulos del riñon y se excreta entonces en la orina sin reabsorción. Con el fin de incrementar la sensibilidad de ensayos urinarios y minimizar el problema de altas proporciones de flujo de orina las cuales resultan en la dilución de la orina, se usan proporciones de analito/creatinina en ensayos de proteína de orina para normalizar la concentración de la orina. Ensayos de creatinina comunes incluyen los métodos de Jaffe y Benedict-Behre alcalinos los cuales son corridos a pH alto, típicamente en el rango de 11.5 a 12.5 Más recientemente, ha sido desarrollado un ensayo de creatinina en el cual se pone en contacto la muestra de orina con iones cúpricos en la presencia de citrato, un hidroperóxido y un tinte oxidable lo cual proporciona una respuesta colorida en la presencia de radicales libres de oxígeno y un pseudoperóxido. Puede también ser realizada la cuantificación de creatinina inmunológicamente como se describe en WO 96/34271. Aquellos analitos secundarios cuya concentración en la muestra del fluido corporal se relacionan clínicamente con la concentración del primer analito no son limitados a creatinina en orina ni es la orina el único fluido corporal que puede ser ensayado por el método de la presente invención. De esta forma, por ejemplo, el fluido corporal probado puede ser sangre entera y el primer analito puede ser HbA?c con el segundo analito que es hemoglobina total ya que la concentración aparente de HbA?c puede ser ajustada a la concentración de hemoglobina total de sangre entera paa ser factor influyente en el ensayo de HbAlc . La inulina, administrada intravenosamente, es, como la creatinina, un indicador de flujo renal. Son típicos de otros analitos primarios los cuales pueden ser ensayados junto con la creatinina como el segundo analito la sangre oculta, leucocitos, proteína y glucosa. La concentración de IgC en orina puede ser corregida en base a la albúmina como el segundo analito . En WO-96/34271 se describe un dispositivo para determinar un analito objetivo (primario) y creatinina en una muestra prueba fluida en la cual el dispositivo tiene una tira de ensayo para la detección de creatinina y una segunda tira de ensayo para la detección del analito objetivo. La concentración de creatinina puede ser determinada colorimétricamente o por la captura específica de patrones que enlazan creatinina marcada. Se corrige la concentración del analito objetivo en base a la concentración de la muestra en la cual la correción puede ser hecha ya sea manualmente o por medio de un analizador de reflectancia pre programado. Los sistemas de la técnica anterior para corrección de una determinación de la concentración del primer analito en base a la concentración del segundo analito implica ya sea relacionar directamente la respuesta de color a partir del primer analito a aquella del segundo analito o convirtiendo primero las respuestas coloridas a valores de concentración y determinar la proporción de estos valores aritméticamente. La proporción directa de las respuestas de color se lleva a cabo cpnvirtiendo color en valores numéricos tales como absorbancia o reflejancia. Estos métodos de proporción directa para corrección de determinación semicuantitativa de analito resultan en sufrir la limitación de que no toman en cuenta errores grandes en los estimados que ocurren cuando un método está alcanzando el final de su rango analítico. La presente invención incrementa la exactitud de métodos semi cuantitativos que implican proporción de dos analitos tomando en cuenta el error en estimados que ocurren cuando un método está alcanzando el final de su rango analítico. La presente invención implica una mejora para el análisis colorimétrico de una muestra de fluido corporal para la concentración de un primer analito cuya concentración en el fluido corporal está siendo buscada y la concentración de un segundo analito cuya concentración en la muestra fluida se relaciona clínicamente a aquella del primer analito donde se usa la proporción de la concentración del primer analito a aquella del segundo analito para corregir la concentración del primer analito en la muestra fluida. El método mejorado comprende las etapas de : a) determinar la concentración no corregida del primer analito; b) determinar si la concentración no corregida del primer analito está dentro o fuera del rango analítico útil para este analito; c) si la concentración no corregida del primer analito está dentro del rango útil para este analito, entonces determinar la concentración del segundo analito y asignar una proporción del primer analito al segundo analito dividiendo la respuesta del primer analito por la respuesta del segundo analito y asignar un nivel de salida a la proporción en la cual el nivel de salida corresponde a la concentración del primer analito corregido dividiendo la concentración no corregida del primer analito por la concentración del segundo analito; o d) si la concentración no corregida del primer analito está fuera del rango analítico útil para este analito, entonces determinar una proporción del primer analito al segundo analito en base a la concentración no corregida del primer analito como se determina en la etapa (a) y la concentración normal del segundo analito. La primera etapa para llevar a cabo la presente invención es determinar la concentración no corregida del primer analito. Esto puede ser llevada a cabo aplicando la muestra de prueba fluida a una tira de prueba ya sea directamente a la porción de la tira que contiene los reactivos como en el caso de una reacción enzimática o, en el caso de una tira inmunocromatográfica, a un cojincillo de aplicación de muestra en comunicación fluida con la zona de captura de la tira, de tal forma que la muestra puede fluir a la zona de captura por acción capilar. En cualquier caso de cambio de color provocado por el analito en el fluido de prueba que interacciona con los reactivos de la tira este puede ser leido manualmente comparando el color con una carta de color estándar o, más exactamente, con la ayuda de un medidor de reflejancia. Una vez que se determina la concentración no corregida del primer analito, la siguiente etapa es determinar si esta concentración está dentro del rango analítico útil para este analito. El término rango analítico útil indica las concentraciones del analito que es capaz de medir el método con exactitud. Por ejemplo, en el caso de albúmina de orina el rango analítico útil es 30 a 300 mg/l en base al error del estimado que es sustancialmente más pequeño, es decir por lo menos tres veces más pequeño, que aquel de la concentración del analito que es estimado. Si la determinación de la albúmina como primer analito está dentro de este rango, entonces se determina el segundo analito, típicamente creatinina, y la proporción del primer analito al segundo analito; es decir se calcula [albúmina] / [creatinina] para relacionar un nivel de salida cuyo valor representa la concentración corregida de albúmina en la muestra de prueba de orina. Si la concentración no corregida del primer analito está fuera del rango analítico útil, por ejemplo menor de 30 mg/l o más de 300 mg/l de albúmina, entonces no se determina la concentración del segundo analito, pero en su lugar se usa la concentración normal del segundo analito para determinar la proporción del primer al segundo analito. El término concentración normal se propone para significar el valor fisiológico esperado obtenido con pacientes saludables típicos. En el caso de creatinina este valor es 1,000 mg/l ya que el cuerpo típicamente excreta 1,000 mg de creatinina y 1 litro de orina por día. Esto está en contraste con los métodos de proporción de la técnica anterior en los cuales se usa la concentración determinada, mas que la normal del segundo analito incluso en los casos donde se determina la concentración del primer analito para estar fuera del rango analítico útil. El método de la presente invención proporciona mayor precisión para determinar la concentración del primer analito ya que los valores los cuales son determinados sin exactitud no son permitidos para tener el error adicional agregado al resultado. El método para practicar la presente invención se ilustra adicionalmente por los siguientes ejemplos. Ejemplo general En un análisis de orina en el cual la albúmina es el primer analito y creatinina es el segundo analito cuya concentración se determina, por ejemplo, para corregir el flujo renal, se asigna un rango predeterminado de 30 mg/l a 300 mg/l de albúmina el cual es el rango analítico útil para el ensayo de albúmina de orina. Si el reactivo para albúmina produce un resultado colorimétrico equivalente a 30 a 300 mg/l, se asigna una proporción de albúmina a creatinina usando la proporción de colores producidos (color de albúmina/color de creatinina) . Si el reactivo de albúmina produce un resultado de menos de 30 mg/l o más de 300 mg/l se asigna una proporción de albúmina a creatinina sin el uso del reactivo para creatinina por upo de la concentración de creatina normal. Esto evita resultados a usar los cuales estén fuera del rango analítico del ensayo de albúmina ya que los resultados fuera de este rango tienen grandes errores y son inexactos . Los resultados los cuales están fuera del rango analítico son conocidos con exactitud para ser menores de 30 mg/l o mayores de 300 mg/l lo cual es médicamente información importante . Si el reactivo para albúmina produce un resultado entre 30 mg/l y 300 mg/l, se asigna una proporción dividiendo el resultado correspondiente al color formado por la albúmina en la muestra prueba con aquel correspondiente al color formado por el reactivo de creatinina. La proporción de color se convierte entonces a la proporción de concentración de albúmina a creatinina asignando a un grado específico de proporción de color un nivel de salida lo cual puede ser realizado por un espectrómetro de reflectancia apropiadamente programado. Si la concentración de albúmina es menor que 30 mg/l, se asigna un valor de umbral de menos de 30 mg/g lo cual representa 30 mg de albúmina por gramo de creatina. Se considera menos de 30 mg/g una proporción normal para una persona saludable. Un resultado menor tal como 20 ó 10 mg/g no cambia esto ya que el umbral representa todos los valores debajo de 30 mg/g. Inversamente, si la concentración de albúmina es mayor que 300 mg/l se asigna un valor de umbral de más de 300 mg/g lo cual representa todos los valores mayores de 300 mg/g. Los resultados menores de 30 mg/g y mayores de 300 mg/g son referidos en la presente como fuera de resultados de enlace . Es generalmente conocido que los colores puedep ser medidos solamente dentro de un cierto rango de absorbancia, típicamente menores de 1.0 a mayores de 0.1 unidades de absorbancia o mayores de 10% o menores de 99% de reflectancia. Por esta razón, los espectrofotómetros y medidores de reflectancia son programados típicamente para asignar un color fuera de este rango al color más cercano que es capaz de medir el medidor. Por ejemplo, una reflectancia del 7% se lee como reflectancia del 10% y este es el valor que se usa en la determinación . Se presenta un cálculo de muestra en la Tabla 1 lo cual demuestra que el método presente tiene una concordancia mayor del reactivo de albúmina y creatinina que la proporción obtenida de dos métodos de la técnica anterior. TABLA 1 Método de proporción Numero total de Observaciones resultados correctos División 70% Como en el Ej . 1 Método de proporción de 60% Como en el Ej . 2 color Método de proporción de 70% Como en el Ej . 3 color con corte para fuera de resultados de enlace De la Tabla 1, puede ser determinado que puede ser obtenida más exactitud del ensayo con el método de la presente invención que con la simple división o con un método de proporción de color que no elimina los resultados de enlace. Los siguientes ejemplos implican reactivos de tira para orina los cuales implican típicamente ensayos colorimétricos cuyo color se lee - visualmente o instrumentalmente como reflectancia o absorbancia. El color producido es directamente proporcional a la concentración del analito. En el caso de albúmina, a mayor color formado del reactivo de albúmina, mayor albúmina está presente en el espécimen de orina. Con el fin de convertir el color a la concentración del analito, se asigna un grado específico como el nivel de salida. Los niveles de salida de un analito son asignados a un rango de concentración que representa el error típico de la estimación. Esta es una práctica común para todas las tiras de reactivo para orina y se muestra para reactivos de albúmina y creatinina en la siguiente Tabla 2. Por ejemplo un, un espécimen clínico con un valor de 30 mg/l de albúmina por un método estándar puede ser 20 a 39 mg/l como se determina por un color de tira de albúmina pero puede todavía ser asignada una concentración de albúmina de 30 mg/l. Entre menor sea el error de la estimación, más cuantitativo es el método. TABLA 2 Valor de Rango de concentración Valor de Rango ¿e. concentración salida esperado d-e albúmina salida esperado d= creatinina (mg/l) (mg/l) 0 0-20 30 0-64.9 30 20-39.9 100 65.0-149.9 80 40-119.9 200 150.0-249.9 150 120-199.9 300 250.0-350.0 Ej emplo 1 - Método de la técnica anterior para relacionar dos analitos El método más común para relacionar dos analitos es usar una tabla de búsqueda (Tabla 3 a continuación) . TABLA 3 Tabla de proporción de Mg de albúmina/gramdo de creatinina : Salida asignada Albúmina creatinina 0 mg/l 30 mg/l 80 mg/l 150 mg/l mg/dl 100 mg/dl 200 mg/dl 300 mg/dl Se asigna a cada combinación de las salidas de la tira una salida esperada de proporción. La proporción de salida esperada se basa en la división del resultado medio de cada tira como se muestra en Tabla 4. TABLA 4 Tabla de proporción de Mg de albúmina/gramdo de creatinina: valor medio de la división de cada tira Albúmina creatinina o mg/l 30 mg/l 80 mg/l 150 mg/l mg/dl 100 mg/dl 200 mg/dl 300 mg/dl Este método introduce error, ya que cada resultado de salida medio representa un rango esperado y los extremos de los rangos esperados no concuerda siempre con la salida asignada.

Por ejemplo, 30 mg/l de albúmina tienen un extremo bajo de 19.9 m-j/l Y 100 mg/dl de creatinina tienen un extremo alto de 150 mg/dl. La salida de proporción esperada de estos extremos es 13 mg/g el cual no está en el rango asignado de 30-299 mg/g. Esta asignación errónea puede ser un resultado de proporción incorrecta incluso si los reactivos concuerdan 100% con los métodos estándar. Se muestra el error en este método en la siguiente tabla verdadera en la cual se comparan los resultados de la tira a valores estándar de 275 especímenes clínicos. El rango del espécimen clínico asignado a una albúmina dada para salida de tira de creatinina es mucho mayor que el rango de concentración esperado el cual hace a este método inexacto e ineficaz. El número total de resultados corregidos para dos niveles de salida, es decir menos de 30 mg/g y más de 30 mg/g, es 70% (86 y 109 de 225) con más del 35% de >30 mg/g especímenes que son asignados incorrectamente como puede ser determinado por los 76 resultados de 185 resultados totales los cuales son mayores que 30 mg/g por la tira son menores de 30 mg/g por el método estándar. Tabla verdadera para relacionar por el método del Ejemplo 1 Albúmina Métodos Proporción de varilla medidora estándar de creatinina <30 mg/g >30 mg/g total <30 mg/g 162 >30 mg/g 113 total 90 185 275 E emplo 2. Otro método común para relacionar dos analitos conocido en la técnica anterior es convertir el resultado de cada reactivo individual a concentraciones del analito a ser detectado. Se hace esta conversión comparando un espécimen estándar que tiene una concentración conocida con el espécimen no conocido y asignar al desconocido una concentración con relación a las diferencias del color de los dos especímenes. Pueden ser divididas entonces las concentraciones del analito para producir una proporción de concentración. Este procedimiento es muy común con métodos de ensayo colorimétricos que tienen un alto grado de exactitud. Sin embargo, usar este método con métodos de ensayo colorimétricos que tienen un menor grado de exactitud, por ejemplo métodos de varilla medidora de orina, tiene una desventaja ya que tienen un rango analítico más pequeño que los métodos de solución los cuales pueden hacer diluciones y adición sincronizada de reactivos para limitar el error incrementan interferencias. Estos métodos cuantitativos tienen rangos analíticos que se extienden mas allá de las concentraciones que son esperadas para ser encontradas . Los resultados de este método para proporción, como se muestra en la siguiente Tabla 5, solamente son ligeramente mejores que el método discutido en el Ejemplo 1. El número total de resultados corregidos para dos niveles de salida es 79% (125 + 93 = 0.79). 275 TABLA 5 Tabla verdadera para proporcionar por el método del Ejemplo 2 Albúmina Métodos Proporción de varilla medidora estándar de creatinina <30 mg/g _ 30 mg/g total <30 mg/g 162 _ 30 mg/g 113 total 145 130 275 Ejemplo 3 El método de proporción de la presente invención usa el resultado dividido del color formado por dos reactivos en combinación con los colores formados por el reacitvo individuo. Inicialmente, se convierte el color del reactivo que es sensible para el primer analito a la concentración del primer analito, es decir se asigna un grado específico de color a un valor de salida. Se examina el nivel de salida y si el nivel está fuera del rango analítico útil, se usa este para asignar una proporción usando el valor normal del segundo analito. Por ejemplo, un reactivo para albúmina que produce un resultado de menos de 30 mg/l o más de 300 mg/l de orina es asignado con una proporción de salida sin referencia al resultado del reactivo de creatinina y en su lugar usar el valor de creatina normal a 1,000 mg/l. La albúmina a una concentración de menos de 30 mg/l se le asigna una proporción de <30 mg/g y la albúmina a más de 300 mg/l se le asigna una proporción de >300 mg/g. Esta asignación asume la excreción promedio de creatinina de 1,000 mg/l. si la salida del primer analito está dentro del rango analítico útil, se divide el color formado por el reactivo que es sensible al primer analito por el color formado por el reactivo que es sensible al segundo analito. La proporción de colores se convierte entonces a una concentración de proporción como en la Tabla 6. TABLA 6 Valor de salida* Proporción de color < 30 < 1.5 30-300 1.5 a 3 > 300 < 3 * mg de albúmina/ g de creatinina Por ejemplo, un reactivo de albúmina que produce un resultado de 80 mg/l se le asigna una proporción de salida en base a la proporción de color de los reactivos de albúmina y creatinina, en el cual una proporción de color de 1.7 puede ser asignado a una proporción de salida de 30-300 mg/g. La siguiente Tabla 7 muestra que este método tiene una concordancia mayor que cualquiera de los métodos descritos previamente. La concordancia mayor se debe a excluir el mayor error con frecuencia observado con un reactivo en los extremos de su rango de salida, es decir pasar los niveles de salida más bajos o más altos. Los resultados fuera del rango analítico tienen grandes errores y son inexactos. Pueden ser excluidos ya sea o ambos niveles de salida más bajos y más altos por cualquier reactivo que es proporcionado. En la Tabla 7, el número total de resultados corregidos para dos niveles de salida, es decir menos de 30 mg/g o más de 30 mg/g es 95%. Esto puede ser determinado por el número de especímenes determinados correctamente (149 + 112) dividido por 275 el cual es el número total de especímenes . TABLA 7 Tabla verdadera para proporcionar por el método del Ejemplo 3 Albúmina Métodos Proporción de varilla medidora estándar de creatinina < 30 mg/g 30 mg/g total < 30 mg/g 149 13 162 .> 30 mg/g 112 113 total 150 125 275

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES 1. En el análisis colorimétrico de una muestra de fluido corporal para la concentración de un primer analito cuya concentración en el fluido corporal está siendo buscada y un segundo analito cuya concentración en la muestra fluida se relaciona clínicamente a aquella del primer analito donde se usa la proporción del primer analito al segundo analito para corregir la determinación de la concentración del primer analito en la muestra fluida, la mejora que se caracteriza porque comprende : a) determinar la concentración no corregida del primer analito; b) determinar si la concentración no corregida del primer analito está dentro o fuera del rango analítico útil para este analito; c) si la concentración no corregida del primer analito está dentro del rango útil' para este analito, entonces determinar la concentración del segundo analito y asignar una proporción del primer analito al segundo analito dividiendo la respuesta del primer analito por la respuesta del segundo analito y asignar un nivel de salida a la proporción en la cual el nivel de salida corresponde a la concentración del primer analito corregido dividiendo la concentración no corregida del primer analito por la concentración del segundo analito; o d) si la concentración no corregida del primer analito está fuera del rango analítico útil para este analito, entonces determinar una proporción del primer analito al segundo analito en base a la concentración no corregida del primer analito como se determina en la etapa (a) y la concentración normal del segundo analito.
2. 2. La mejora de conformidad con la reivindicación 1 caracterizada porque el fluido corporal es orina y el segundo analito puede ser usado para corregir cambios en el flujo renal.
3. 3. La mejora de conformidad con la reivindicación 2 caracterizada porque el primer analito es albúmina y el segundo analito es creatinina.
4. 4. La mejora de conformidad con la reivindicación 1 caracterizada porque los pares de primer analito/segundo analito son sangre oculta/creatinina; leucocitos/creatinina; proteína/creatinina; glucosa/creatinina o IgG/albúmina .
5. 5. Un método para el análisis de una muestra fluida corporal para determinar la concentración de un primer analito de albúmina y un segundo analito contenido en la misma el cual se caracteriza porque comprende las etapas de: a) Proporcionar una tira de prueba de un material absorbente a través del cual la muestra fluida puede fluir, en la cual la tira de prueba contiene una primera región para la determinación colorimétrica del primer analito y una segunda región para la determinación colorimétrica del segundo analito; b) revelar la tira tratándola con una muestra fluida de tal forma que la muestra fluida puede ponerse en contacto con la primera y segunda regiones; c) determinar la concentración no corregida del primer analito en la muestra fluida leyendo el cambio de color en la primera región de la tira; d) determinar si la concentración no corregida del primer analito está dentro o fuera del rango analítico útil para este analito; ) si la concentración no corregida del primer analito está dentro del rango útil para este analito, entonces determinar la concentración del segundo analito leyendo la segunda región de la tira y asignar una proporción del primer analito al segundo analito dividiendo la respuesta de color del primer analito por la respuesta de color del segundo analito y asignar un nivel de salida a un grado específico de la proporción de color en la cual el nivel de salida corresponde a la concentración del primer analito corregido dividiendo la concentración no corregida del primer analito por la concentración del segundo analito; o f) si la concentración no corregida del primer analito está fuera del rango analítico útil para este analito, entonces asignar una proporción del primer analito al segundo analito en base a la concentración no corregida del primer analito como se determina en la etapa (c) dividida por la concentración normal del segundo analito.
6. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5 caracterizado porque el fluido corporal es orina y el segundo analito puede ser usado para corregir cambios en el flujo renal.
7. 7. El método de conformidad con la reivindicación 6 caracterizado porque el primer analito es albúmina y el segundo analito es creatinina.
8. 8. Un método para el análisis de una muestra de fluido corporal para determinar la concentración de un primer analito en la muestra de prueba como una proporción de la concentración de un segundo analito en el fluido corporal cuya concentración se relaciona clínicamente con aquella del primer analito en la muestra fluida en el cual el método se caracteriza porque comprende las etapas de : a) Proporcionar una tira de prueba de un material el cual permite a la muestra de prueba así como también analitos y patrones de enlace marcados para el analito fluir a través de este por capilaridad, en la cual la tira de prueba comprende las siguientes regiones las cuales están en comunicación fluida entre sí : i) una región absorbente para aplicación de la muestra fluida; ii) una región que contiene patrones de enlace específicos para el primer analito en el cual los patrones de enlace portan un particulado, una marca visualmente detectable; iii) una primera zona de reactivo que contiene el primer analito en una forma inmovilizada; y iv) una segunda zona de reactivo que es capaz de proporcionar una respuesta colorida detectable la intensidad de la cual es proporcional a la concentración del segundo analito en la muestra fluida; b) aplicar la muestra de prueba fluida a la región absorbente de la tira de prueba y permitir que fluya a lo largo de la tira por capilaridad; c) determinar la concentración no corregida del primer analito como una función de la intensidad de la señal visualmente detectable de la marca particulada y determinar si esta concentración no corregida está dentro o fuera del rango analítico útil para este analito; d) si la concentración no corregida del primer analito está dentro del rango analítico útil, entonces determinar la concentración del segundo analito leyendo la segunda región de la tira y asignar una proporción del primer analito al segundo analito dividiendo la respuesta de color del primer analito por la respuesta de color del segundo analito y asignar un nivel de salida a un grado específico de la proporción de color en la cual la proporción de salida corresponde a la concentración corregida del primer; o e) si la concentración no corregida del primer analito está fuera del rango analítico útil para este analito, entonces asignar una proporción del primer analito al segundo analito en base a la concentración no corregida del primer analito como se determina en la etapa (c) dividida por la concentración normal del segundo analito.
9. 9. El método de conformidad con la reivindicación 8 caracterizado porque el fluido corporal es orina, el primer analito es albúmina y el segundo analito es creatinina.
10. 10. Un análisis colorimétrico para albúmina en una muestra de orina el cual se caracteriza porque comprende las etapas de : a) Determinar la concentración no corregida de albúmina en la muestra de orina por un medio colorimétrico; y b) Si la concentración no corregida de albúmina es menor de 30 mg/l o mayor de 300 mg/l entonces dividir la concentración no corregida por 1,000 mg/l para obtener una proporción que representa la concentración corregida de albúmina.