MXPA06014402A - Peptido de enlace a heparina. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a nuevos fragmentos peptidicos capaces de estimular la excrescencia de neuritas, de estimular la supervivencia celular, de estimular la plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje, y de modular la motilidad celular. La actividad biologica de los fragmentos peptidicos se asocia con su capacidad para enlazarse y activar un receptor de neurotrofina de la familia Trk. Los fragmentos peptidicos de la invencion comprenden un motivo de aminoacido que es esencial para la union y activacion de un receptor de neurotrofina de la familia Trk. La invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden los compuestos y usos de los mismos para la prevencion y/o tratamiento de condiciones y/o enfermedades, en donde los receptores de neurotrofina deTkr y/o NCAM juegan un papel importante, y en donde es benefico para el tratamiento la estimulacion de la excrescencia de neuritas, supervivencia celular, plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje, y/o la modulacion de la motilidad celular.

Description

PEPTIDO DE ENLACE A HEPARINA Campo de la Invención La invención se refiere a nuevos compuestos peptídicos capaces de estimular la excrescencia de neuritas, supervivencia celular, plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje, y de modular la motilidad celular. Los compuestos de la invención son capaces del enlace y activación de un receptor de neurotrofina de la familia Trk . La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos y usos de los mismos para el tratamiento de condiciones en donde es benéfica la estimulación de la excrescencia de neuritas, supervivencia de células neuronales, plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje, y/o modulación de la motilidad celular.

Antecedentes de la Invención Las moléculas de adhesión a células neurales (CAM, por sus siglas en inglés) de la superfamilia de inmunoglobulinas, nuclean y mantienen grupos de células en sitios clave durante el desarrollo temprano y en el adulto.

Además de sus propiedades adhesivas, las interacciones homófilas y heterófilas de la CAM pueden afectar la señalización intracelular. Su capacidad para influenciar eventos de desarrollo, incluyendo migración, proliferación y REF:178191 diferenciación celular por lo tanto pueden resultar ambas de sus propiedades adhesivas así como de sus propiedades de señalización. Sin embargo, la evidencia acumulativa también indica que las células pueden usar también las propiedades adhesivas y de señalización de las CAM en asistencia de diferentes procesos fisiológicos de forma separada, independientemente entre sí. La molécula de adhesión de células neurales, NCAM, fue la primera CAM neural descubierta. Desde el descubrimiento la NCAM se ha estudiado de forma intensiva y ahora está bien caracterizada (Ronn et al. (2000) Int J Dev Neurosci 18:193-9). La NCAM corresponde a la superfamilia de inmunoglobulinas (Ig) . Su parte extracelular consiste de cinco módulos tipo Ig y dos módulos tipo III de fibronectina (F3) . La NCAM ayuda tanto a las interacciones célula-célula como a las interacciones célula-sustrato. La NCAM se enlaza a varios componentes de la matriz extracelular tal como heparina/sulfato de heparano, proteoglicanos de sulfato de condroitina, y diferentes tipos de colágeno. Las interacciones célula-célula se asisten principalmente por la interacción homófila de la NCAM. Se ha mostrado que los diferentes módulos de la NCAM realizan diferentes funciones. De esta manera, se cree que el enlace homófilo de NCAM ahora puede depender de los primeros tres módulos de Ig. La secuencia de enlace heparina se localiza en el módulo Ig2.

La NCAM también se enlaza o une a la molécula Ll de adhesión a células neurales. Se cree que esta interacción toma lugar entre el cuarto módulo de Ig de NCAM y una porción oligomannosídica expresada en Ll. Los dos módulos F3 próximos a membrana de la NCAM se ha mostrado que están comprendidos en el enlace al receptor de factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR) . Muchos de los sitios de unión de la NCAM comprendidos en diferentes interacciones de la proteína se han identificado, y se han sugerido varios fragmentos cortos de la secuencia de NCAM que comprende las secuencias de diferentes sitios de enlace para el uso como compuestos biológicamente activos en aplicaciones terapéuticas (Berezin V., Bock E. (2004) J Mol Neurosci. 22 (1-2 ): 33-39 ) . Muchos de esto fragmentos peptídicos de NCAM se derivan de los sitios de enlace homófilos de NCAM y por lo tanto se pueden usar para estimular células que expresan NCAM. Entre los compañeros de enlace heterófilos bien descritos de la NCAM está el FGFR. De esta manera, la NCAM se ha considerado como un miembro de una nueva clase de ligandos alternativos putativos de FGFR, y recientemente se ha obtenido evidencia de una interacción directa entre NCAM y el receptor (Kiselyov et al. (2003) Structure (Camb) 11:691-701) . El fragmento identificado de NCAM que tiene la secuencia EVYWAENQQGKSKA (péptido FGL) comprendida en la interacción entre NCAM y FGFR se ha sugerido recientemente como un nuevo compuesto candidato para el tratamiento de una variedad de trastornos patológicos donde la estimulación de la actividad de FGFR puede jugar el papel clave (WO 03/016351) . De forma interesante, la interacción de NCAM homófila que conduce a la estimulación de la excrescencia de neuritas se ha mostrado en parte que también comprende la estimulación de FGFR (Soroka et al. (2002) J Biol Chem. 277(27) :24676-83) . Otra clase de moléculas descritas como ligandos/receptores de NCAM son el sulfato de heparano y los proteoglicanos de sulfato de condroitina (HSPG y CSPG, respectivamente) (Colé et al. (1985). J Cell Biol. 100(4) :1192-9; Colé et al. (1986). Nature 320:445-7; Colé, G. J., Akeson, R. (1989) Neuron 2 (2 ): 1157-65) . Múltiples HSPG y CSPG pueden interactuar con la NCAM en el cerebro influyendo en la adhesión celular. De esta manera, la NCAM expresada en la superficie celular tiene la capacidad de enlace a la agrina de HSPG, mediando de este modo la adhesión celular (Storms et al. (1996) Cell Adhes Commun. 3 (6) : 497-509 ) y se ha mostrado que el neurocan de CSPG específico de cerebro se enlaza a NCAM, inhibiendo de este modo su interacción homófila y subsiguientemente la adhesión neuronal (Retzler et al. (1996) J Biol Chem. 271 (44) : 27304-10) . Cuando se usan como sustratos de crecimiento celular, los diferentes péptidos sintéticos que incluyen secuencias de aminoácidos derivadas de un dominio putativo de enlace a heparina de la NCAM (HBD) identificado en el módulo de NCAM de Ig2 se ha mostrado que promueve la adhesión de células que expresan NCAM y son capaces de estimulación moderada de la excrescencia de neuritas (Colé, G. J., Akeson, R. (1989) Neuron 2 (2) : 1157-65; Kallapur S.G., Akeson R.J. (1992) J Neurosci Res. 33(4): 538-48). Recientemente, se ha sugerido una secuencia de 14 aminoácidos derivada del dominio HBD de NCAM que abarca los residuos 152-165 de aminoácidos de la NCAM (SwissProt P13596) como un componente de fusión de un gel de matriz 3D de fibrina para mejorar la excrescencia de neuritas de neuronas incorporadas a este gel (US 2003/0119186) . Se sugirió otro fragmento de HBD de NCAM que comprende los residuos 149-166 como un inhibidor de la adhesión mediada por NCAM (US 6,333,307), sin embargo no se demostró actividad biológica de este último fragmento. El HBD de la NCAM que comprende la secuencia IWKHKGRDVILKKDVRFI contiene dos agrupaciones de aminoácidos básicos que se ha demostrado que son cruciales para la capacidad de la NCAM para enlazarse a heparina y también para la adhesión homófila de NCAM. Se ha mostrado que la mutación de estos residuos básicos de aminoácidos afecta la actividad biológica del dominio (Kallapur S.G., Akeson R.J. (1992) J Neurosci Res. 33 (4) : 538-48 ; Colé G. J., Akeson, R. (1989) Neuron 2(2) : 1157-65) .

Breve Descripción de la Invención De acuerdo a la presente invención: 1) un fragmento peptídico del dominio de enlace a heparina (HBD) de NCAM que corresponde a la secuencia que comprende los residuos 154-167 de aminoácidos de NCAM (SwissProt P13596) , llamado en la presente como péptido de enlace a heparina (HBP) , tiene una actividad neuritogénica muy alta; 2) mutantes de HBP, en donde los residuos de aminoácidos básicos que se conoce que son importantes para la actividad biológica del péptido se sustituyeron por otros residuos de aminoácidos, también son capaces de estimular la excrescencia de neuritas al mismo grado como la secuencia no mutada de HBP; 3) actividad neuritogénica de HBP y los mutantes de HBP es independiente de i) enlace de NCAM-NCAM, ii) enlace de FGFR-NCAM y iii) enlace de HSPG- o CSPG-NCAM; 4) los fragmentos peptídicos de la invención son capaces de modular la motilidad celular; 5) los fragmentos peptídicos de la invención son compuestos activos tanto como componentes inmóviles del sustrato de crecimiento celular y como componentes solubles del medio de crecimiento celular; 6) los fragmentos peptídicos de la invención comprenden un motivo de aminoácidos, que se encuentra en las neurotrofinas ; 7) los fragmentos peptídicos de la invención son capaces de la unión al receptor de neutrofina de la familia Trk. De esta manera, un aspecto de la presente invención se refiere a un péptido, que es una secuencia contigua aislada de 6 a 13 residuos de aminoácidos, esta secuencia que comprende el motivo G-xa-D/E/Q/T -V-xb-V/L de aminoácidos, en donde xa es cualquier residuo de aminoácido, xb es I, T, M o E. Las secuencias peptídicas aisladas que comprenden el motivo anterior de acuerdo con la invención son capaces de i) enlace a un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk; (ii) estimular la excrescencia de neuritas; iii) modular la motilidad celular; iii) estimular la supervivencia de células neurales; iv) estimular la diferenciación de células neurales; y/o v) estimular la plasticidad neural asociada con aprendizaje y memoria. Por consiguiente, otro aspecto de la invención se refiere al uso de secuencias peptídicas de la invención y/o compuestos que comprenden estas secuencias para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición o enfermedad en donde i) la estimulación de la excrescencia de neuritas; ii) la modulación de la motilidad celular; ii) la estimulación de la supervivencia de células neurales; iii) la estimulación de la diferenciación de células neurales; iv) la estimulación de la plasticidad neural; v) la modulación de la actividad de un receptor de neurotrofina de la familia Trk es parte de este tratamiento. Aún, en otro aspecto, se puede usar, para la producción de un anticuerpo, una secuencia peptídica de la invención o un compuesto que comprende la secuencia. La invención se refiere además a compuestos que comprenden secuencias peptídicas de la invención y composiciones farmacéuticas que comprenden las secuencias peptídicas y/o los compuestos. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un anticuerpo capaz de reconocer un epítopo que comprende el motivo de la invención también están en el alcance. La invención también se refiere a un método o tratamiento de condiciones en donde es benéfica la estimulación de la excrescencia de neuritas, la modulación de la motilidad celular, la estimulación de la supervivencia de células neurales, la estimulación de la diferenciación de células neurales, la estimulación de la plasticidad neural, y/o la actividad modulante de un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk, el método que comprende un paso de administrar una secuencia peptídica de la invención, anticuerpo de la invención o una composición farmacéutica que comprende la secuencia peptídica, el compuesto o el anticuerpo a un individuo en necesidad.

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1 muestra los fibroblastos que expresan NCAM que promueven de forma significativa la excrescencia de neuritas de neuronas (CGN) granulares cerebelares de rata en comparación a fibroblastos de control sin la expresión de NCAM, y HBP (SEQ ID NO : 1) de una manera dependiente de la dosis incrementa la excrescencia de neuritas de las CGN cultivadas en fibroblastos que expresan NCAM así como en fibroblastos sin la expresión de NCAM. En contraste, el péptido M no afecta la respuesta de excrescencia de neuritas de las CGN cultivadas en fibroblastos que expresan NCAM, pero aún estimula la excrescencia de neuritas de las CGN cultivadas en fibroblastos sin la expresión de NCAM. La Figura 2 demuestra que el efecto neuritogénico de HBP (SEQ ID NO: 1) en CGN cultivadas en monocapas de fibroblastos sin la expresión de NCAM no se bloquea por el tratamiento con SU5402, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR) , y la excrescencia de neuritas mediada por NCAM de las CGN cultivadas en monocapas de fibroblastos que expresan NCAM sólo se inhibe parcialmente, sin embargo, SU5402 bloquea la excrescencia de neuritas mediada por NCAM en la ausencia de HBP. La Figura 3 demuestra el efecto de HBP (SEQ ID NO: 1) y el péptido M (SEQ ID NO: 2) en CGN individuales en la presencia o ausencia de heparinasa III, la enzima, que se conoce que escinde específicamente sulfato de heparano principalmente en disacáridos. La Figura 4 demuestra un efecto neuritogénico de los péptidos HBP (SEQ ID NO : 1), M (SEQ ID NO : 2) Mln (SEQ ID NO: 3), y M3n (SEQ ID NO: 4) en la presencia y ausencia de heparinasa III. La Figura 5 demuestra que el tratamiento tanto de fibroblastos que expresan NCAM como de fibroblasto de control sin la expresión de NCAM con el péptido HBP (SEQ ID NO : 1) y M (SEQ ID NO: 2) da por resultado una inhibición clara de la motilidad celular como se refleja por una disminución pronunciada de la velocidad de difusión (R) , velocidad celular media (St) , y el índice locomotor ( Ll) de las células . La Figura 6 presenta los resultados del análisis de diferentes fragmentos peptídicos del HBP de NCAM. Las Figuras 7A-7B demuestran el enlace de HBP (SEQ ID NO: 1) (figura 7A) y el módulo Ig2 recombinante de NCAM (figura 7B) al receptor B de Trk recombinante.

Descripción Detallada de la Invención 1. Secuencia peptídica El primer aspecto de la presente invención se refiere a una secuencia peptídica contigua aislada que consiste de 6 a 13 residuos de aminoácidos, que comprende el motivo de aminoácidos G-?a-D/E/Q/T -V-?b-V/L, en donde x es cualquier residuo de aminoácido, xb es I, T, M o E. En una modalidad, xa puede ser un residuo básico de aminoácido. En algunas modalidades preferidas, se compete que xa sea K, otras modalidades preferidas competen que xa sea R, y aún otras modalidades preferidas competen que xa sea H. En otra modalidad, xa puede ser L, y en aún otra modalidad, xa puede ser G. De esta manera, la invención se refiere a una secuencia peptídica de al menos 6 aminoácidos que están contiguos entre sí y comprenden el motivo anterior, esta secuencia peptídica que es la secuencia peptídica aislada. Esto significa que la invención se refiere a una secuencia peptídica que existe como entidad química individual y se usa para los propósitos de la invención como entidad química individual. La invención no se refiere a secuencias peptídicas que comprenden el motivo de la invención que 1) son secuencias peptídicas aisladas de 14 residuos de aminoácidos o más, por ejemplo, péptidos de bi-dominio de la US 2003/0119186, tal como el péptido de bi-dominio que contiene un fragmento peptídico de antitrombina III y el fragmento de HBP de NCAM fusionado conjuntamente en la secuencia LNEQVSPKHKGRDVILKKDVR; 2) son las secuencias integradas de polipéptidos naturales o recombinantes, tal como por ejemplo polipéptidos o fragmentos de la molécula de adhesión a células neurales (NCAM) , factor de crecimiento de nervios (NGF) , neurotrofina-3 (NT-3), neurotrofina-4/5 (NT-4/5) o factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF) que son de más de 14 aminoácidos de largo, 3) son partes integradas de cualquier clase de estructura 3D, por ejemplo, fibrina o gel de colágeno. De manera más específica, la invención se refiere a una secuencia peptídica contigua aislada que se puede definir por la fórmula (I) x0-x1-x2-x3-x4-x5-x6-x7-x8-x9-x10-x9-x9-x10-x11-x12-x13 en donde x0 es K, R, N, A o un enlace xx es G, x2 es un residuo básico o hidrófobo de aminoácido, x3 es E o D, x4 es V, x5 es un residuo hidrófobo de aminoácido x6 es V o L, x7 es cualquier residuo de aminoácido, x8 es cualquier residuo de aminoácido, x9 es E, D, K o Q, x10 es V o L, xn es cualquier residuo de aminoácido, x12 es un residuo hidrófobo de aminoácido o T, x13 es I, N, S, G, A o un enlace. El residuo x0 en algunas modalidades puede ser un residuo de aminoácido seleccionado de K, R, N, A. En otras modalidades, una secuencia peptídica aislada que corresponde a la fórmula no puede tener el residuo x0. En este caso, el primer residuo de la secuencia es xx. x0 puede ser un enlace cuando la secuencia es una parte del compuesto descrito más adelante. De acuerdo a una modalidad preferida, x3 se puede seleccionar de Q, N o T. De acuerdo a otra modalidad preferida, x5 se puede seleccionar de T o E. Otras modalidades preferidas se refieren a secuencias peptídicas en donde x7 y x8 se seleccionan independientemente a partir de K, R, N, I, L, G, E o A. En algunas modalidades preferidas, x7 es L, en otras modalidades preferidas, x8 puede ser G o E. Las diferentes modalidades preferidas pueden referirse a las secuencias en donde xxl se selecciona de R, K, L, N o P y x12 es un residuo hidrófobo de aminoácidos seleccionado de F, V, I, T ó A. x13 se puede seleccionar de los residuos de aminoácido I, N, S, G, Ó A, o puede ser un enlace cuando la secuencia sea una parte del compuesto descrito más adelante. También hay algunas modalidades preferidas cuando x0 y/o x13 es un enlace. Adicionalmente, algunas modalidades preferidas de la invención se refieren a secuencias que se pueden definir por la fórmula ( ( ) x0-G-x2-D/E-V-I-L-x7-xB-x9-V-x11-x12-x13 en donde x0 es un residuo de aminoácido seleccionado de K, R, A ó N, x2 es un residuo de aminoácido seleccionado de R ó L, x7 es un residuo de aminoácido seleccionado de K, A, N ó L, xß es un residuo de aminoácido seleccionado de K, N ó L, x„ es un residuo de aminoácido seleccionado de D ó Q, es un residuo de aminoácido seleccionado de R ó L, x12 es un residuo de aminoácido seleccionado de V ó F, x13 es un residuo de aminoácido seleccionado de I, L ó V. Otras modalidades preferidas de la invención se pueden referir a secuencias que se pueden definir por la fórmula (III) x0-G-x2-x3-V-x5-V-L-G/E-x9-V/L-x10-x11-x12-x13 en donde x0-x2-x3-x5-x9-x10, como se definen por la fórmula (I) anterior, xu es N, K ó P, x12 es I, T, A ó V, y x13 es S, A, N ó G. Las diferentes modalidades preferidas pueden abarcar las secuencias en donde x3 es Q y x l se selecciona de R, N, P ó L. Independiente de las diferentes modalidades analizadas anteriormente, las secuencias peptídicas que corresponden a las fórmulas I, II y III, comprenden todas, el motivo de la invención. La presencia de una estructura definida en una secuencia peptídica, por ejemplo un motivo específico de aminoácido, frecuentemente es un requerimiento para una actividad biológica común de un grupo de diferentes secuencias peptídicas. De acuerdo a la presente invención, el motivo descrito anteriormente se requiere para la actividad biológica de las secuencias de la invención. La invención identifica en la presente un grupo de secuencias peptídicas que comprenden el motivo descrito anteriormente que corresponde a las fórmulas I, II ó III, y demuestran en la presente una actividad biológica común de estas secuencias, que se asocia con la característica estructural común (el motivo) de las secuencias. El grupo consiste de las siguientes secuencias: KGRDVILKKDVRFI (SEQ ID NO : 1), KGRDVILAKDVRVI (SEQ ID NO : 2 ) , KGRDVILNNDVRFI (SEQ ID NO : 3), KGRDVILNNQVRFI (SEQ ID NO: 4), AGRDVILNNDVRFI (SEQ ID NO : 5), NGRDVILKKDVLFI (SEQ ID NO : 6), NGLDVILIIDVRFI (SEQ ID NO: 7), KGKEVMVLGEVNIN (SEQ ID NO : 8), RGHQVTVLGEIKTG (SEQ ID NO : 9), RGREVEVLGEVPAA (SEQ ID NO : 10) y SGGTVTVLEKVPVS (SEQ ID NO : 11). Se entiende que las secuencias de la lista anterior representan una lista de ejemplos no limitados de secuencias que comprenden el motivo de la invención y/o el motivo de la fórmula II o fórmula III y poseen al menos una actividad biológica común asociada con la presencia de estos motivos en la estructura de las secuencias peptídicas. Las actividades biológicas asociadas con las características estructurales descritas anteriormente se pueden seleccionar, pero no limitar a, una capacidad para estimular la diferenciación celular, memoria y aprendizaje, supervivencia de células neurales, activación de un receptor de neurotrofina, o modulación de la motilidad celular. Una secuencia peptídica asilada que comprende el motivo G-xa-D/E/Q/T-V-xb-V/L, en donde ?a es cualquier residuo de aminoácido, x es I, T, M ó E, de acuerdo a la invención comprende 6 a 13 residuos de aminoácidos. Sin embargo, puede ser una secuencia de 14 residuos de aminoácidos, si esta secuencia corresponde a la fórmula I, II ó III de lo anterior, tal como por ejemplo las secuencias de SEQ ID Nos. 1-11. La invención también abarca fragmentos de las secuencias que corresponden a las fórmulas I-III, en particular fragmentos de las secuencias identificadas como SEQ ID NOs: 1-11, y también cualesquiera de las secuencias peptídicas de 6-13 residuos de aminoácido de largo que comprenden estos fragmentos. De esta manera, los fragmentos de la invención pueden ser de 12, 11, 10, 9, 8, 7 ó 6 residuos de aminoácido de largo. Un fragmento que comprende cualquiera de los motivos de las fórmulas definidas anteriormente es un fragmento preferido de la invención. Sin embargo, algunas modalidades pueden referirse más preferentemente a fragmentos que comprenden el motivo G-x2-D/E-V-I-L de la fórmula II, en donde x2 es R ó L, en tanto que las otras modalidades pueden referirse más preferentemente a los fragmentos que comprenden el motivo V-L-G/E-x9-V/L de la fórmula III, en donde x9 es E, D, K ó Q. La invención también se refiere a variantes y homólogos de las secuencias descritas anteriormente que poseen al menos alguna actividad biológica de las secuencias. De manera preferente, estas variantes y homólogos comprenden un motivo de aminoácido descrito anteriormente, específicamente i) el motivo de la invención: G-?a-D/E/Q/T-V-xb-V/L, en donde xa es cualquier residuo de aminoácido, y xb es I, T, M ó E, ii) el motivo de la fórmula II: G-x2-D/E-V-I-L, en donde x2 es R ó L, o iii) el motivo de la fórmula III: V-L-G/E-x9-V/L, en donde x9 es E, D, K ó Q. En la presente solicitud, el código normal de una letra para los residuos de aminoácido así como el código normal de tres letras, se aplican. Las abreviaciones para los aminoácidos están de acuerdo con las recomendaciones de la IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature Eur. J. Biochem, 1984, vol. 184, pp 9-37. A todo lo largo de la descripción y reivindicaciones se usan ya sea el código de tres letras o el código de una letra para aminoácidos naturales. Donde no se han especificado la forma L ó D, se va a entender que el aminoácido en cuestión tiene la fórmula L natural, comparar Puré & Appl. Chem. Vol. 56(5) pp 594-624 (1984) o la forma D, de modo que los péptidos formados puedan estar constituidos de aminoácidos de la forma L, forma D, o una secuencia de formas L y formas D mezcladas. Donde no se especifique, se va a entender que el aminoácido C-terminal de un péptido de la invención existe como el ácido carboxílico, que también se puede especificar como "-0H". Sin embargo, el aminoácido C-terminal de un compuesto de la invención puede ser el derivado amidado, que se indica como "-NH2". Donde tampoco se dice nada, el aminoácido N-terminal de un polipéptido comprende un grupo amino libre, esto también se puede especificar como "H-". Donde tampoco se especifica nada, el aminoácido se puede seleccionar de cualquier aminoácido, ya sea que se presente de forma natural o no, tal como alfa-aminoácidos, beta-aminoácidos y/o gamma-aminoácidos. Por consiguiente, el grupo comprende pero no está limitado a: Ala, Val, Leu, lie, Pro, Phe, Trp, Met, Gly, Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn, Gln, Asp, Glu, Lys, Arg, His, Aib, Nal, Sar, Orn, análogos de lisina, DAP, DAPA y 4Hyp . También, de acuerdo a la invención, se pueden realizar modificaciones de los compuestos/péptidos, tal como glicosilación y/o acetilación de los aminoácidos. Los residuos básicos de aminoácidos están de acuerdo con la invención representada por los residuos de los aminoácidos Arg, Lys, y His, residuos ácidos de aminoácido, por los residuos de aminoácido Glu y Asp, residuos hidrófobos de aminoácido, por los residuos de los aminoácidos Leu, lie, Val, Phe, Trp, Tyr y Ala, y residuos cargados de aminoácidos, por los residuos de aminoácido Arg, Lys, Glu y Asp. Como se mencionó anteriormente, la presente invención se refiere a fragmentos, variantes y homólogos de las secuencias peptídicas descritas anteriormente. En presente contexto i) un fragmento es una secuencia que tiene al menos 40 %, de manera más preferente al menos 50 %, de manera más preferente, al menos 60 %, de manera más preferente al menos 70 %, de manera más preferente al menos 80 %, de manera más preferente al menos 90 %, de manera más preferente al menos 95 % de la longitud de una secuencia que corresponde a una secuencia definida por la fórmula I, II, ó III o una secuencia seleccionada de las secuencias de SEQ ID NOs: 1-11; ii) una variante es una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 60 %, de manera más preferente al menos 70 %, de manera más preferente al menos 80 %, de manera más preferente al menos 90 %, de manera más preferente 95 % de homología a una secuencia definida por las fórmulas I, II ó III, o una secuencia seleccionada de las secuencias de SEQ ID NOs: 1-11, o es una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 60 %, de manera más preferente al menos 70 %, de manera más preferente al menos 80 %, de manera más preferente al menos 90 %, de manera más preferente 95 % de correspondencias positivas de aminoácido en comparación a una secuencia definida por la fórmula I, II ó II, o a una secuencia de SEQ ID NOS: 1-10. Una correspondencia positiva de aminoácidos se define en la presente como una identidad o similitud definida por propiedades físicas y/o químicas de los aminoácidos que tienen la misma posición en dos secuencias comparadas. Las correspondencias positivas de aminoácido, preferidas, de la presente invención son K a R, E a D, L a M, Q a E, I a V, l a L, A a S, Y a , K a Q, S a T, N a S y Q a R. La homología de una secuencia de aminoácidos con otro aminoácido, se define como un porcentaje de aminoácidos idénticos en las dos secuencias cotejadas. La homología de las secuencias se puede calcular usando algoritmos bien conocidos tal como BLOSUM 30, BLOSUM 40, BLOSUM 45, BLOSUM 50, BLOSUM 55, BLOSUM 60, BLOSUM 62, BLOSUM 65, BLOSUM 70, BLOSUM 75, BLOSUM 80, BLOSUM 85, o BLOSUM 90; iii) un homólogo es una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 60 %, pero más de 30 %, tal como 50-59 %, por ejemplo 55 %, tal como 40-49 %, por ejemplo 45 %, tal como 30-39 %, por ejemplo 35 % de homología a una secuencia definida por la fórmula I, II ó II, o una secuencia de SEQ ID NOs: 1-11. Se presume que el fragmento, variante y homólogo como se describe anteriormente mantiene al menos alguna actividad biológica de la secuencia original, por ejemplo una capacidad para estimular la plasticidad neural, tal como asociada con diferenciación de células neurales y/o tal como asociada con memoria y aprendizaje, estimulación de supervivencia celular, tal como inhibición de apoptosis, activación de un receptor de neurotrofina, tal como activación del receptor Trk, modulación de la motilidad celular, tal como la inhibición de la motilidad celular. De acuerdo con la invención, una secuencia como se describe anteriormente que comprende el motivo de la invención y/o el motivo de la fórmula II o fórmula III puede derivarse de la secuencia de la molécula de adhesión a células neurales (NCAM) de SwissProt Acc. No: P13596, por ejemplo de la secuencia del módulo Ig2 de NCAM. Un ejemplo de esta secuencia puede ser la secuencia KGRDVILKKDVRFI identificada en la presente como SEQ ID NO: 1. Esta secuencia es una parte del dominio de enlace a heparina del módulo Ig de NCAM. En otra modalidad, una secuencia puede derivarse de una neurotrofina, tal como factor de crecimiento de nervios (NGF) , por ejemplo de la secuencia del polipéptido de NGF identificado de acuerdo con SwissProt Acc. No: NP_02497, neurotrofina-3 (NT-3), por ejemplo de la secuencia del polipéptido NT-3 identificado de acuerdo con SwissProt Acc. No: NP_002518, neurotrofina-4/5 (NT-4/5), por ejemplo de la secuencia del polipéptido de NT-4/5 identificado de acuerdo con SwissProt Acc. No:AAAV38176, o factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF) , por ejemplo de la secuencia del polipéptido de BDNF identificado de acuerdo con SwissProt Acc. No: NP_733928. De acuerdo a la invención, la secuencia KGKEVMVLGEVNIN (SEQ ID NO : 8) se deriva del polipéptido de NGF identificado anteriormente, la secuencia RGHQVTVLGEIKTG (SEQ ID NO: 9) se deriva del polipéptido de NT-3 identificado anteriormente, la secuencia RGREVEVLGEVPAA (SEQ ID NO: 10) se deriva del polipéptido de NT-4/5 identificado anteriormente y la secuencia SGGTVTVLEKVPVS (SEQ ID NO: 11) se deriva del polipéptido de BDNF identificado anteriormente. De acuerdo a la presente invención, una secuencia peptídica aislada como se describe anteriormente se puede formular como un compuesto, Un compuesto puede contener una copia individual de una secuencia individual de aminoácidos seleccionada de cualquiera de las descritas anteriormente, o puede contener dos o más copias de esta secuencia de aminoácidos. Esto significa que el compuesto de la invención se puede formular como un monómero de una secuencia peptídica, tal como que contiene una secuencia peptídica individual, simple, o se puede formular como un multímero de una secuencia peptídica, es decir, que contiene dos o más secuencias peptídicas individuales, en donde las secuencias peptídicas individuales se pueden representar por dos o más copias de la misma secuencia o por dos o más secuencias peptídicas individuales diferentes. Un multímero también puede comprender una combinación de la secuencia de longitud completa y uno o más fragmentos del mismo. En una modalidad, un compuesto puede contener dos secuencias de aminoácidos, este compuesto se define en la presente como un dímero, en otra modalidad, un compuesto puede contener más de dos secuencias de aminoácidos, tal como por ejemplo tres, cuatro o más secuencias. La presente invención se refiere de manera preferente a compuestos que contienen dos o cuatro secuencias peptídicas de la invención. Sin embargo, los compuestos que contienen 3, 5, 6, 7, 8 ó más secuencias también están en el alcance de la invención. Los fragmentos peptídicos formulados como dímeros o multímeros pueden tener las secuencias idénticas de aminoácidos, o pueden tener diferentes secuencias de aminoácidos. Un ejemplo de este compuesto puede ser un compuesto que contiene SEQ ID NO: 1 y SEQ ID NO : 2, otro ejemplo puede ser un compuesto que contiene SEQ ID NO: 1 y SEQ ID NO: 8. Se puede elaborar cualquier otra combinación de las secuencias de la invención dependiendo de las diferentes modalidades de la invención. Las secuencias se pueden conectar entre sí mediante enlace peptídico; o conectar entre sí a través de una molécula ligadora o agrupamiento ligador. En otra modalidad, el compuesto puede contener dos o más copias idénticas de una secuencia, tal como por ejemplo dos copias de una secuencia seleccionada de SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, y 11, en donde se pueden conectar entre sí dos secuencias mediante una molécula o agrupamiento ligador. Se prefiere un compuesto, en donde las secuencias se conectan mediante un agrupamiento ligador. Un ejemplo de este agrupamiento ligador puede ser un ácido di-, tri- o tetra-carboxílico aquiral . Los ácidos di-, tri-o tetra-carboxílico aquirales y un método para producir este compuesto (un método de montaje de presentación de ligando (LPA) ) se analizan en detalle adicional en la especificación de la invención. Otro ejemplo de un posible ligador puede ser el aminoácido a lisina. Se pueden unir secuencias peptídicas individuales a una molécula de núcleo tal como lisina formando de este modo un multímero dendrítico (dendrímero) de una secuencia peptídica individual. La producción de dendrímeros es bien conocida en la técnica (PCT/US90/02039, Lu et al., (1991) Mol Immunol . 28:623-630; Defoort et al., (1992) Int J Pept Prot Res. 40:214-221; Drijfhout et al. (1991) Int J Pept Prot Res. 37:27-32), y los dendrímeros se usan en la actualidad ampliamente en investigación y aplicaciones médicas. Es una modalidad preferida de la invención proporcionar un compuesto dendrimérico que comprende cuatro secuencias individuales de aminoácidos unidas a la molécula núcleo de lisina. También se prefiere que al menos una de las cuatro secuencias individuales de aminoácidos comprenda una secuencia de aminoácidos de la fórmula definida anteriormente. Es aún más preferido si las cuatro secuencias individuales de aminoácidos de un compuesto dendrimérico comprenden individualmente una secuencia de aminoácidos de la fórmula definida anteriormente. Los compuestos multiméricos de la invención, tal como LPA-dímeros o lisina-dendrímeros, son compuestos preferidos de la invención. Sin embargo, se pueden preferir otros tipos de compuestos multiméricos que comprenden dos o más secuencias individuales de la invención, dependiendo de las modalidades . Los compuestos multiméricos, que comprenden una o más copias de una secuencia individual de la invención, o fragmento, variante u homólogo de la misma, y otro compuesto biológicamente activo, por ejemplo otra secuencia peptídica, también están en el alcance de la invención. Entre estos compuestos, más preferible son aquellos que comprenden al menos una secuencia peptídica de la invención y comprenden además cualquier otra entidad química que tenga la capacidad de estimular a un receptor de neuritrofina de la familia Trk, por ejemplo esta entidad química puede ser una secuencia peptídica derivada del ligando del receptor Trk o la proteína activadora del receptor Trk, en donde la secuencia es diferente de las secuencias de la invención. 2. Actividad biológica Una secuencia peptídica de la invención y un compuesto que comprende una secuencia de la invención poseen actividad biológica. La invención se refiere de manera preferente a actividad biológica seleccionada de una capacidad para estimular plasticidad neural asociada con diferenciación de células neurales, tal como por ejemplo estimular excrescencia de neuritas, y/o plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje, tal como por ejemplo estimular la eficiencia sinóptica, capacidad para estimular la supervivencia celular, tal como por ejemplo para inhibir la apoptosis, capacidad para activar un receptor de neurotrofina, tal como por ejemplo activar el receptor de Trk, y capacidad para modular la motilidad celular, tal como por ejemplo inhibir la motilidad celular. De esta manera, en una modalidad, una secuencia peptídica aislada como se describe anteriormente es capaz de la unión a un receptor de neurotrofina seleccionado de Trk A, Trk B y Trk C. En una modalidad preferida, el receptor puede ser Trk A, en otra modalidad preferida, el receptor puede ser Trk B, en aún otra modalidad preferida, el receptor puede ser Trk C. Los autores de la presente invención han identificado un motivo de aminoácido que está presente tanto en neurotrofinas (NGF, NT-3, NT-4/5, BDNF) y NCAM y asociando la presencia de este motivo con la actividad biológica de fragmentos peptídicos de la presente invención. El motivo de acuerdo con la invención es esencial para el enlace de las secuencias peptídicas de la invención a un receptor de Trk, en particular Trk, los receptores de Trk son receptores principales en el sistema nervioso que activan la diferenciación de células neurales. Los receptores de Trk también son importantes para la promoción de supervivencia neuronal y están comprendidos en la plasticidad neural asociada con aprendizaje y memoria, en particular el receptor B de Trk. La capacidad de las secuencias peptídicas de la invención para enlazarse y activar los receptores sirve para modular las respuestas biológicas dependientes de la actividad de los receptores. Por consiguiente, la invención proporciona un método para modular la actividad de un receptor de neurotrofina de la familia de Trk que comprende usar una secuencia peptídica aislada de la invención o un compuesto que comprende la secuencia. En la modalidad preferida, la invención se refiere a un método para activar un receptor de neurotrofina de la familia de Trk. Una secuencia peptídica aislada de la invención es capaz de estimular la diferenciación de células neuronales. El término "diferenciación neuronal" se entiende tanto como diferenciación de células precursoras neurales, o células madre neurales, como la diferenciación de neuronas, tal como maduración de neuronas diferenciadas. Un ejemplo de esta diferenciación puede ser la excrescencia de neuritas de neuronas inmaduras, ramificación de neuritas, regeneración de neuronas. En una modalidad preferida, la invención puede relacionarse a la estimulación de la diferenciación de células madre/precursoras neurales o neuronas inmaduras, en otra modalidad preferida, la invención puede relacionarse a la estimulación de la excrescencia de neuritas de las neuronas maduras, por ejemplo neuronas que se traumatizaron pero sobrevivieron. De esta manera, la invención también proporciona un método para estimular la diferenciación de células neuronales que comprende usar una secuencia peptídica de la invención o un compuesto que comprende la secuencia. Una modalidad más preferida de la invención se refiere a la actividad de las secuencias peptídicas en unión con el aprendizaje y memoria. En particular, una modalidad de la invención se refiere a las secuencias peptídicas que pueden estimular la formación de espina, en otra modalidad, las secuencias pueden promover la eficacia sináptica. De esta manera, la invención proporciona además un método para estimular la memoria y/o aprendizaje que comprende usar una secuencia peptídica de la invención y/o compuesto que comprende la secuencia. La invención se refiere tanto a memoria a corto plazo como a memoria a largo plazo. Una secuencia peptídica de la invención también puede estimular la supervivencia de células neuronales. La invención se refiere a la capacidad de estimular la supervivencia de células neuronales tanto debido a trauma como a enfermedad degenerativa. Por consiguiente, la invención proporciona un método para estimular la supervivencia celular, de manera preferente supervivencia de células neuronales al usar una secuencia peptídica de la invención y/o compuesto que comprende la secuencia. En aún otra modalidad, una secuencia peptídica de la invención puede modular la motilidad celular. El término "modular la motilidad celular" incluye tanto estimular como inhibir la motilidad celular. Se prefiere la actividad de una secuencia peptídica que da por resultado la inhibición de la motilidad celular. De esta manera, un método para modular la motilidad celular, en particular para inhibir la motilidad celular, al usar una secuencia peptídica de la invención o un compuesto que comprende la secuencia, está entre los métodos para modular los procesos celulares y fisiológicos proporcionados por la presente. Las secuencias peptídicas de la invención y compuestos que las comprenden son biológicamente activos tanto como sustancias solubles/móviles de medio de crecimiento celular y sustancias inmóviles de sustrato de crecimiento celular. En algunas modalidades, se puede preferir una sustancia peptídica o un compuesto que comprende la misma como sustrato celular. Sin embargo, son más preferidas las secuencias peptídicas solubles o compuestos que las comprenden. Los ejemplos no limitantes de actividad biológica de las secuencias peptídicas de la invención y compuestos que comprenden las mismas se describen en la solicitud (ver más adelante y en los ejemplos 2, 3 y 5) .

Estimulación de excrescencia de neuritas Las sustancias con el potencial de promover la excrescencia de neuritas así como de estimular la regeneración y/o diferenciación de células neuronales, tal como ciertos factores tróficos endógenos, son objetivos principales en la búsqueda de compuestos que faciliten por ejemplo la regeneración neuronal y otras formas de plasticidad neuronal. Para evaluar el potencial del presente compuesto, se puede investigar la capacidad para estimular la señalización relacionada a la excrescencia de neuritas, para interferir con adhesión celular, para estimular la excrescencia de neuritas, de degeneración de nervios. Los compuestos de la presente invención se muestra que promueven la excrescencia de neuritas y por lo tanto se considera que son buenos promotores de la regeneración de conexiones neuronales, y de este modo la recuperación funcional después de daños así como promotores de función neuronal en otras condiciones donde se requiera este efecto. En el presente contexto, "diferenciación" se relaciona a los procesos de maduración de neuronas y extensión de neuritas, que toma lugar después de la última división celular de las neuronas. Los compuestos de la presente invención pueden ser capaces de detener la división de células neurales e iniciar la maduración de las células, tal como iniciar la extensión de las neuritas. De otro modo, "diferenciación" se relaciona al inicio de los procesos de transformación genética, bioquímica, morfológica y fisiológica de células progenitores neuronales, células neurales inmaduras o células madre embriónicas que conducen a la formación de células que tienen características funcionales de las células neurales normales puesto que estas características se definen en la técnica. La invención define "célula neural inmadura" como una célula que tiene al menos una característica de la célula neural aceptada en la técnica como un rasgo característico para la célula neural. De acuerdo a la presente invención, un compuesto que comprende al menos una de las secuencias peptídicas anteriores es capaz de estimular la excrescencia de neuritas. La invención se refiere a la mejora/estimulación de excrescencia de neuritas tal como 75 % de mejora/estimulación por arriba del valor de excrescencia de neuritas de células de control/no estimuladas, por ejemplo 50 %, tal como aproximadamente 150 %, por ejemplo 100 %, tal como aproximadamente 250 %, por ejemplo 200 %, tal como aproximadamente 350 %, por ejemplo 300 %, tal como aproximadamente 450 %, por ejemplo 400 %, tal como aproximadamente 500 %. La estimación de la capacidad de un compuesto candidato para estimular la excrescencia de neuritas se puede hacer al usar cualquier método o ensayo conocido para la estimación de la excrescencia de neuritas, tal como por ejemplo el descrito en el Ejemplo 2 de la presente solicitud. De acuerdo a la invención, un compuesto tiene actividad neuritogénica como un componente inmóvil insoluble de sustrato de crecimiento celular y como un componente soluble del medio de crecimiento celular. En el presente contexto "inmóvil" significa que el compuesto está unido/enlazado a una sustancia que es insoluble en agua o una solución acuosa y de este modo llega a ser insoluble en esta solución también. Para aplicaciones médicas, se consideran compuestos insolubles y solubles por la solicitud, sin embargo, se prefieren compuestos solubles. Bajo "compuesto soluble" se entiende un compuesto, que es soluble en agua o en solución acuosa.

Inhibición de la motilidad celular Se requiere la migración celular durante el desarrollo del sistema nervioso, curación de heridas e invasión tumoral. La formación correcta y función normal del sistema nervioso requieren ambos que la mayoría de las neuronas migren a todo lo largo del sistema nervioso en desarrollo desde sus sitios de origen a sus posiciones finales . Algunos tipos de células mantienen una capacidad para moverse también en un organismo maduro, en tanto que otros tipos la pierden. En algunas condiciones extremas, tal como en enfermedad o trauma, una capacidad de una célula para mover se puede definir el comienzo del rescate o muerte de la enfermedad, tal como curación de heridas o invasión de células de cáncer y metástasis. Por lo tanto, son objetivos principales las sustancias con el potencial para modular la motilidad celular, tal como ciertos factores tróficos endógenos, en la investigación de compuestos que por ejemplo faciliten la recuperación de trauma, impidan la diseminación de células de cáncer o inhiban la extensión de la inflamación. Para evaluar el potencial del presente compuesto, se puede investigar la capacidad para modular la señalización relacionada a la motilidad celular, de interferir con la adhesión celular, de estimular o inhibir la motilidad celular. Los compuestos de la presente invención son capaces de inhibir la motilidad celular y por lo tanto se consideran buenos compuestos candidatos para inhibir por ejemplo la invasión y diseminación de células de cáncer así como de inhibir cualquier tipo de invasión celular en condiciones cuando se requiere esta inhibición. De acuerdo a la presente invención, un compuesto que comprende al menos una de las secuencias anteriores es capaz de inhibir la motilidad celular. La invención se refiere a la inhibición de la motilidad celular, que se estima que es de aproximadamente 75 % en comparación a la motilidad de células de control, por ejemplo cerca de 50 %, tal como aproximadamente 150 %, por ejemplo aproximadamente 100 %, tal como aproximadamente 250 %, por ejemplo cerca de 200 %, tal como aproximadamente 350 %, por ejemplo aproximadamente 300 %, tal como aproximadamente 450 %, por ejemplo aproximadamente 400 %, tal como por ejemplo cerca de 500 %. El término "motilidad" se define en la presente como desplazamiento de una célula desde un lugar donde estaba a otro lugar en un cierto periodo de tiempo, y en la presente solicitud la motilidad celular se estima como la distancia Euclidiana entre dos puntos que corresponden a las posiciones inicial y final de la célula. Cuando se considera la cuantificación de la motilidad celular y el potencial inhibitorio de los compuestos, tal como el "valor" de inhibición o motilidad mencionada anteriormente, la presente solicitud se refiere a los "valores" definidos de estos parámetros tal como la velocidad de difusión ( R) , velocidad celular media (St) e índice locomotor (LJ) de células. Estos últimos parámetros se usan comúnmente en la técnica para cuantificación de la motilidad celular y se describen por ejemplo por Walmod et al. (2001) Methods Mol Biol. 161:59-83, como se caracteriza más adelante. El análisis de la motilidad celular se puede realizar al usar cualesquiera de los métodos y ensayos disponibles desarrollados en la técnica para el propósito.

Se puede realizar por ejemplo como se describe en la presente solicitud en el Ejemplo 3. 3. Producción de secuencias peptídicas Los compuestos de la presente invención se producen de manera preferente de forma sintética. Sin embargo, también se contempla la producción recombinante de los compuestos.

Producción recombinante De esta manera, en una modalidad, las secuencias peptídicas de la invención se pueden producir por el uso de tecnologías de ADN recombinante. Las secuencias de ADN que codifican para un péptido o la proteína correspondiente de longitud completa de la cual se origina el péptido, se puede preparar de forma sintética por métodos normales establecidos, por ejemplo, el método de fosfoamidina descrito por Beaucage y Caruthers, 1981, Tetrahedron Left. 22:1859-1869, o el método descrito por Matthes et al., 1984, EMBO J. 3:801-805. De acuerdo al método de fosfoamidina, se sintetizan los oligonucleótidos, por ejemplo, en un sintetizador automático de ADN, se purifican, se fijan, se ligan y se clonan en vectores adecuados . La secuencia de ADN que codifica para un péptido también se puede preparar por fragmentación de las secuencias de ADN que codifican para la proteína correspondiente de longitud completa de origen peptídico, usando ADNasa I de acuerdo a un protocolo normal (Sambrook et al., Molecular cloning: A Laboratory manual. 2 rd ed. , CSHL Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989) . La presente invención se refiere a proteínas de longitud completa seleccionadas de los grupos de proteínas identificadas anteriormente. El ADN que codifica para las proteínas de longitud completa de la invención se puede fragmentar de manera alternativa usando endonucleasas de restricción específicas. Los fragmentos de ADN se purifican adicionalmente usando procedimientos normales descritos en Sambrook et al., Molecular cloning: A Laboratory manual. 2 rd ed. , CSHL Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989. La secuencia de ADN que codifica para una proteína de longitud completa también puede ser de origen genómico o de ADNc, por ejemplo obtenida al preparar una biblioteca genómica o de ADNc y detección para secuencias de ADN que codifican para toda o una parte de la proteína de longitud completa por hibridación usando sondas de oligonucleótidos, sintéticas, de acuerdo a técnicas normales (comparar Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed. , Cold Spring Harbor, 1989). La secuencia de ADN también se puede preparar por la reacción en cadena de la polimerasa usando cebadores específicos, por ejemplo como se describe en la patente de los Estados Unidos número 4,683,202 o Saiki et al., 1988, Science 239:487-491. La secuencia de ADN entonces se puede insertar en un vector de expresión recombinante, que puede ser cualquier vector, que se puede someter de manera conveniente a procedimientos de ADN recombinante. La elección del vector dependerá frecuentemente de la célula hospedadora en la cual se va a introducir. De esta manera, el vector puede ser un vector que se replica de forma autónoma, es decir, un vector que existe como una entidad extracromosómica, la replicación del cual es independiente de la replicación cromosómica, por ejemplo, un plásmido. De manera alternativa, el vector puede ser uno que, cuando se introduce en una célula hospedadora, se integra en el genoma de la célula hospedadora y se replica junto con los cromosomas en los cuales se ha integrado. En el vector, la secuencia de ADN que codifica para un péptido o una proteína de longitud completa se deben conectar de manera operable a una secuencia promotora adecuada. El promotor puede ser cualquier secuencia de ADN, que muestre actividad transcripcional en la célula hospedadora de elección y se puede derivar de genes que codifican para proteínas ya sea homologas o heterólogas a la célula hospedadora. Los ejemplos de promotores adecuados para dirigir la trascripción de la secuencia codificante de ADN en células de mamífero son el promotor SV 40 (Subramani et al., 1981, Mol. Cell Biol. 1:854-864), el promotor MT-1 (gen de metalotioneína) (Palmiter et al., 1983, Science 222: 809-814) o el promotor tardío principal de adenovirus 2. Un promotor adecuado para el uso en células de insecto es el promotor de polihedrina (Vasuvedan et al., 1992, FEBS Lett. 311:7-11). Los promotores adecuados para el uso en células hospedadoras de levadura incluye promotores de genes glicolíticos de levadura (Hitzeman et al., 1980, J. Biol. Chem. 255:12073-12080; Alber y Kawasaki, 1982, J. Mol. Appl. Gen. 1: 419-434) o genes de alcohol-deshidrogenasa (Young et al., 1982, in Genetic Engineering of Microorganisms for Chemicals, Hollaender et al, eds., Plenum Press, New York), o el promotor TPIl (US 4,599,311) o ADH2-4c (Russell et al., 1983, Nature 304:652-654) . Los promotores adecuados para el uso en células hospedadoras de hongo filamentoso son, por ejemplo, el promotor ADH3 (McKnight et al., 1985, EMBO J. 4:2093-2099) o el promotor tpiA. La secuencia de ADN codificante también se puede conectar de manera operable a un terminador adecuado, tal como el terminador de hormona de crecimiento humana (Palmiter et al., op. cit.) o (para hospedadores fúngales), los promotores TPIl (Alber y Kawasaki, op . cit.) o ADH3 (McKnight et al., op. cit.) . El vector puede comprender además elementos tal como señales de poliadenilación (por ejemplo, de SV 40 o la región Elb de adenovirus 5) , las secuencias intensificadoras transcripcionales (por ejemplo, el intensificador de SV 40) y las secuencias intensificadoras transduccionales (por ejemplo, las que codifican para los ARN de VA de adenovirus) . El vector de expresión recombinante puede comprender además una secuencia de ADN que permite que el vector se replique en la célula hospedadora en cuestión. Un ejemplo de esta secuencia (cuando la célula hospedadora es una célula de mamífero) es el origen de replicación de SV 40. El vector también puede comprender un marcador seleccionable, por ejemplo un gen, el producto del cual complementa un defecto en la célula hospedadora, tal como el gen que codifica para dihidrofoleato-reductasa (DHFR) o uno que confiere resistencia a un fármaco, por ejemplo, neomicina, hidromicina o metotrexato. Los procedimientos usados para ligar las secuencias de ADN que codifican para los péptidos o proteínas de longitud completa, el promotor y el terminador, respectivamente, y para insertarlos en vectores adecuados que contiene la información necesaria para la replicación, son bien conocidos por expertos en la técnica (comparar, por ejemplo, Sambrook et al., op.cit.). Para obtener péptidos recombinantes de la invención, las secuencias de ADN codificantes se pueden fusionar de forma útil con una segunda secuencia peptídica codificante y una secuencia codificante de sitio de escisión de proteasa, dando una construcción de ADN que codifica para la proteína de fusión, en donde la secuencia codificante del sitio de escisión de proteasa, colocada entre el fragmento de HBP y el segundo ADN codificante peptídico, insertado en un vector de expresión recombinante, y expresado en células hospedadoras recombinantes. En una modalidad, el segundo péptido seleccionado de, pero no limitado por el grupo que comprende glutationa-S-reductasa, timosina de becerro, tiorredoxina bacteriana o variantes naturales o sintéticas de ubiquitina humana, o péptidos de los mismos. En otra modalidad, una secuencia peptídica que comprende un sitio de escisión de proteasa puede ser el factor Xa, con la secuencia de aminoácidos IEGR, enterocinasa, con la secuencia de aminoácidos DDDDK, trombina, con la secuencia de aminoácidos LVPR/GS, o Acharombacter lyticus, con la secuencia de aminoácidos XKX, sitio de escisión. La célula hospedadora en la cual se introduce el vector de expresión puede ser cualquier célula que sea capaz de la expresión de los epítopos o proteínas de longitud completa, y, de manera preferente es una célula eucariótica, tal como células de invertebrados (insecto) o células de vertebrados, por ejemplo, oocitos de Xenopus laevis o células de mamífero, en particular células de insecto y de mamífero. Los ejemplos de líneas de células de mamífero adecuadas son las líneas de células HEK293 (ATCC CRL-1573), COS (ATCC CRL-1650), BHK (ATCC CRL-1632, ATCC CCL-10) o CHO (ATCC CCL-61). Los métodos para transfectar células de mamífero y para expresar secuencias de ADN introducidas en las células se describen por ejemplo en Kaufman y Sharp, J. Mol. Biol. 159, 1982, pp. 601-621; Southern y Berg, 1982, J. Mol. Appl. Genet. 1:327-341; Loyter et al., 1982, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 79: 422-426; Wigler et al., 1978, Cell 14:725; Corsaro y Pearson, 1981, in Somatic Cell Genetics 7, p. 603; Graham y van der Eb, 1973, Virol. 52:456; y Neumann et al., 1982, EMBO J. 1:841-845. De manera alternativa, se pueden usar células fúngales (incluyendo células de levadura) como células hospedadoras. Los ejemplos de células de levadura adecuadas incluyen células de Saccharomyces spp. o Schizosaccharomyces spp., en particular cepas de Saccharomyces cerevisiae. Los ejemplos de otras células fúngales son células de hongos filamentosos, por ejemplo, Aspergillus spp. o Neurospora spp., en particular cepas de Aspergillus oryzae o Aspergillus niger. El uso de Aspergillus spp., para la expresión de proteínas se describe por ejemplo en EP 238 023. El medio usado para cultivar las células puede ser cualquier medio convencional adecuado para cultivar células de mamífero, tal como un medio que contiene suero o libre de suero que contiene complementos apropiados, o un medio adecuado para cultivar células de insecto, levadura u hongos. Los medios adecuados están disponibles de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo a recetas publicadas (por ejemplo, en catálogos de American Type Culture Collection) . Los péptidos o proteínas de longitud completa producidos recombinantemente por las células entonces se pueden recuperar del medio de cultivo por procedimientos convencionales incluyendo la separación de las células hospedadoras del medio por centrifugación o filtración, precipitación de los componentes proteináceos del sobrenadante o filtrado por medio de una sal, por ejemplo, sulfato de amonio, purificación por una variedad de procedimientos cromatográficos, por ejemplo HPLC, cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de afinidad, o similar.

Producción sintética de secuencias peptídicas individuales Los métodos para la producción sintética de péptidos son bien conocidos en la técnica. Las descripciones detalladas así como la asesoría práctica para producir péptidos sintéticos se puede encontrar en Synthetic Peptides: A User ' s Guide (Advances in Molecular Biology), Grant G. A. ed. , Oxford University Press, 2002, o en: Pharmaceutical Formulation: Development of Peptides and Proteins, Frokjaer y Hovgaard eds., Taylor y Francis, 1999. Los péptidos pueden sintetizar por ejemplo al usar química de Fmoc y con cisteínas protegidas con Ac . Después de la purificación por HPLC de fase invertida, los péptidos se pueden procesar adicionalmente para obtener por ejemplo isoformas modificadas C- o N-terminales o cíclicas. Los métodos para la ciclización y modificación terminal son bien conocidos en la técnica y se describen en detalle en los manuales citados anteriormente. En una modalidad preferida, las secuencias peptídicas individuales de la invención se producen de forma sintética, en particular, por el método de Síntesis de Péptidos Asistido por Secuencia (SAPS) descrito en los manuales anteriores . De otro modo, la síntesis de una secuencia peptídica individual de la invención se puede ordenar y comprar de un fabricante comercial, tal como por ejemplo Sigma-Genosys (EUA) .

Método LPA de producción de multímeros de secuencias peptídicas individuales El método de LPA se describe en WO 00/18791. El método comprende esencialmente los siguientes pasos : (a) proporcionar por síntesis de fase sólida o acoplamiento de fragmentos, fragmentos peptídicos que comprenden las secuencias deseadas, los fragmentos peptídicos que se unen a una fase sólida; (b) si es necesario, desproteger cualquiera de los grupos amino N-terminales completamente, los fragmentos peptídicos aún están unidos a una fase sólida, (c) hacer reaccionar los fragmentos peptídicos que tienen grupos N-terminales desprotegidos con un ácido di-, tri-, o tetra-carboxílico aquiral para proporcionar una construcción que tiene una estructura de anillo, y (d) extinguir la construcción de la fase sólida para proporcionar un LPA que comprende los fragmentos peptídicos que tienen grupos C-terminales libres. En el método anterior, antes del paso (d) se pueden realizar los siguientes pasos: (cl) si están presentes, desproteger cualquiera de los grupos N-protegidos que se originan del ácido carboxílico usado en el paso (c) , (c2) continuar la síntesis en fase sólida o el acoplamiento de fragmentos para proporcionar fragmentos peptídicos que comprenden secuencias deseadas que tienen al menos un grupo de aminoácido N-terminal N-protegido y/o unir las porciones químicas, y (c3) desproteger, si están presentes, cualquiera de los grupos amino N-terminales (antes o después del paso (d) ) . El método proporciona LPA que presentan secuencias deseadas de la invención con orientación N a C (paso (c) ) . Y también simultáneamente secuencias con orientación C a N (paso (c2) ) . De esta manera, para obtener un compuesto de la invención, dos cadenas peptídicas unidas a una fase sólida se van a montar por medio de ácidos di-, tri- o tetra-carboxílicos aquirales. Los ácidos di-, tri- o tetra-carboxílicos aquirales adecuados que se van a usar en el presente método tienen la fórmula general X[ (A)nCOOH] [ (B)mCOOH] en donde n y m son independientemente un número entero de 1 a 20, X es HN, A y B son independientemente un C?-?oalquilo sustituido o insustituido, un C2_?oalquenilo sustituido o insustituido, una porción cíclica sustituida o insustituida, una porción heterocíclica sustituida o insustituida, una porción aromática sustituida o insustituida, o A y B forman conjuntamente una porción cíclica sustituida o insustituida, porción heterocíclica sustituida o insustituida, porción aromática sustituida o insustituida. En otra modalidad, los ácidos di-, tri- o tetra-carboxílicos aquirales adecuados que se van a usar en el presente método tienen la fórmula general X[ (A)nCOOH] [ (B)mCOOH] en donde n y m son 0 o un número entero de 1 a 20, X es H2N(CR2)?CR, o RHN(CR )pCR, en donde p es 0 o un número entero de 1 a 20, en donde cada R es H, un C?_?oalquilo sustituido o insustituido, un C2_?oalquenilo sustituido o insustituido, una porción cíclica sustituida o insustituida, una porción heterocíclica sustituida o insustituida, una porción aromática sustituida o insustituida, o A y B forman conjuntamente una porción cíclica sustituida o insustituida, porción heterocíclica sustituida o insustituida, porción aromática sustituida o insustituida. En aún otra modalidad, los ácidos di-, tri- o tetra-carboxílicos aquirales adecuados que se van a usar en el presente método tienen la fórmula general X[ (A)nCOOH] [ (B)mCOOH] en donde n y m son 0 o un número entero de 1 a 20, X es HO(CR2)pCR, HS(CR2)pCR, halógeno- (CR2) pCR, HOOC (CR2)pCR, ROOC(CR2)pCR, HCO(CR2)pCR, RC0(CR2)pCR, o [HOOC(A)n] [HOOC(B)m]CR(CR2)pCR, en donde p es 0 o un número entero de 1 a 20, cada R es independientemente H o un Ci-loalquilo sustituido o insustituido, un C2_?oalquenilo sustituido o insustituido, una porción cíclica sustituida o insustituida, una porción heterocíclica sustituida o insustituida, una porción aromática sustituida o insustituida, o A y B forman conjuntamente una porción cíclica sustituida o insustituida, porción heterocíclica sustituida o insustituida, porción aromática sustituida o insustituida. En aún otra modalidad, los ácidos di-, tri- o tetra-carboxílicos aquirales adecuados que se van a usar en el presente método tienen la fórmula general X[ (A)nCOOH] [ (B)mCOOH] en donde n y m son 0 o un número entero de 1 a 20, X es H2N(CR2)P, RHN(CR2)p, HO(CR2)p, HS(CR2)p, halógeno- (CR2) p, HOOC(CR2)p, R0OC(CR2)p, HC0(CR2)p, RCO(CR2)p, o [HOOC (A)n] [HOOC(B)m] (CR2)p, en donde p es 0 o un número entero de 1 a 20, cada R es independientemente H o un C?_ ?0alquilo sustituido o insustituido, un C2_?oalquenilo sustituido o insustituido, una porción cíclica sustituida o insustituida, una porción heterocíclica sustituida o insustituida, una porción aromática sustituida o insustituida, o A y B forman conjuntamente una porción cíclica sustituida o insustituida, porción heterocíclica sustituida o insustituida, porción aromática sustituida o insustituida.

Bajo el término C?-?oalquilo se quiere decir grupos alquilo de cadena recta o ramificada que tienen de 1 a 10 átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, isopropilo, butilo y ter-butilo. Bajo el término C2-?oalquenilo se quiere decir grupos alquenilo de cadena recta o ramificada que tienen de 2 a 10 átomos de carbono, por ejemplo, etinilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, y ter-butenilo . Bajo el término porción cíclica se quiere decir ciciohexano y ciclopentano . Bajo el término porción aromática se quiere decir fenilo. "A y B forman una porción cíclica, heterocíclica o aromática" denota ciciohexano, piperidina, benceno y piridina. Por reacción con un ácido carboxílico, se obtiene una construcción del tipo X(CO-secuencia) 2-fase sólida, donde X es como se define anteriormente. Por el término "secuencia" en el presente contexto se quiere decir un péptido que comprende aminoácidos que se presentan de forma natural y/o que no se presentan de forma natural, una secuencia PNA, un compuesto peptidomimético. Por "aminoácidos que se presentan de forma natural" se proponen las formas L y D de los 20 aminoácidos encontrados en la naturaleza. Los aminoácidos que no se presentan de forma natural son por ejemplo aminoácidos que se presentan de forma natural, modificados. El término secuencia se propone además que comprenda una o más de estas secuencias . Los ejemplos de compuestos peptidomiméticos adecuados se describen en Marshall G.R., (1993) Tetrahedron, 49:3547-3558. El término "porciones químicas" denota una entidad que mejora la solubilidad o actividad biológica del LPA, y entidad para dirigir el LPA a su objetivo o un marcador. Las modalidades preferidas para las secuencias se describen anteriormente. El grupo X permite síntesis gradual directa o indirectamente continuada o un acoplamiento de fragmentos de la misma secuencia, o de una o más secuencias diferentes y/o porciones diferentes. La orientación de los fragmentos peptídicos (N a C, o de C a N) en LPA se define como se desea. En una modalidad, la presente invención incorpora el LPA con orientación N a C, en otra modalidad se refiere a los compuestos con presentación simultánea de N a C y C a N de las secuencias, y en aún otra modalidad, las secuencias tienen la orientación de C a N. En el caso donde X comprenda una función amino temporalmente protegida, se puede llevar a cabo la síntesis o acoplamiento directamente después de la protección. La activación adecuada de todos los grupos que contienen carboxilo se proporciona formación efectiva del sistema de anillo (en el paso (c) , ver anteriormente) se puede asegurar usando ácido carboxi medio equivalente. En el caso de ácidos tri- o tetra-carboxílieos, el grupo carboxi activado se puede derivatizar adicionalmente con una diamina tal como etilendiamina o una amina adecuadamente funcionalizada para reacciones adicionales tal como un grupo mercapto-, oxi-, oxo o carboxilo. En el caso de la diamina, la síntesis peptídica o acoplamiento de fragmentos se puede continuar directamente de acuerdo a la secuencia deseada o porción química deseada. En una modalidad preferida, se usa estrategia de protección con Fmoc, pero se puede usar cualquier grupo de protección de amino dependiendo de la síntesis o estrategia de acoplamiento. Los ejemplos son la estrategia del grupo de protección Boc. Puesto que la síntesis gradual continuada o el acoplamiento de fragmento se realiza con uno, o en el caso de una porción química bifuncional tal como lisina, con dos grupos de aminoácidos, se ha encontrado de manera sorprendente que se puede obtener un resultado mucho mejor en comparación a los dendímeros de lisina tetraméricos convencionales obtenidos por la síntesis de MAP. Adicionalmente, se pueden usar procedimientos de acoplamiento o procedimientos de síntesis de péptidos, óptimos para las cadenas individuales unidas a la fase sólida, y se puede verificar su homogeneidad antes de formar el LPA. Se puede realizar la escisión de la fase sólida y desprotección simultánea de cadena lateral por procedimientos normales de síntesis de péptidos (descritos anteriormente) . „ De esta manera se puede obtener un producto final que tiene composición óptima y bien definida. La purificación por métodos normales de cromatografía tal como HPLC o filtración en gel se pueden realizar fácilmente, si se desea o necesita. Los ácidos di-, tri- y tetra-carboxílieos favorables para proporcionar la estructura de anillo se pueden seleccionar de ácido imino-diacético, ácido 2-amino-malónico, ácido 3-amino-glutárico, ácido 3-cloro-glutámico, ácido 3-metoxi-carbonil-glutárico, ácido 3-acetil-glutárico, ácido glutárico, ácido tricarbalílico, ácido 3,4-bis-carboximetil-adípico, ácido 4- (2-carboxietil) -pimélico, ácido (3 , 5-bis-carboximetil-fenil) -acético, ácido 3,4-bis-carboximetil-adípico, ácido benceno-1, 2 , 4, 5-tetra carboxílico, ácido 4- (3-carboxi-alilamino) -but-2-enoico, ácido 4, 4-imino-dibenzoico, ácido 1, 4-dihidropiridin-3 , 5-dicarboxílico, ácido 5-amino-isoftálico, ácido 2-cloro-malónico, ácido 3-hidroxi-glutárico, y ácido benceno-1, 3 , 5-tricarboxílico . Se puede realizar el acoplamiento de fragmentos (acoplamiento de fragmentos o condensación de fragmentos) de acuerdo a procedimientos normales, por ejemplo como se describe en Peptide Synthesis protocols, Methods in Molecular Biology Vol. 35, Chapter 15, 303-316, Nyfeler R, Pennington MW y Dunne BM Eds., Humana Press, 1994. Por consiguiente, se pueden sintetizar fragmentos en una fase sólida, escindir de la fase sólida con conservación completa de los grupos protectores, purificar y caracterizar como se describe anteriormente. Los fragmentos adecuados también se pueden obtener por otras técnicas descritas anteriormente. Es una modalidad preferida de la invención usar el método de LPA anterior para la producción de un compuesto de la invención. 4. Anticuerpo Es un objetivo de la presente invención proporcionar un anticuerpo, fragmento de enlace a antígeno o proteína recombinante de los mismos capaz de reconocer y enlazarse selectivamente a un epítopo que comprende o está comprendido por una secuencia que corresponde a la fórmula I de la invención, o fragmento, variante u homólogo de la secuencia, en una modalidad preferida, un epítopo que comprende un motivo de la invención. En una modalidad preferida, el anticuerpo es un anticuerpo que reconoce y se enlaza a un epítopo que comprende el motivo G-x-D/E/Q/T -V-xb-V/L, en donde xa es cualquier residuo de aminoácido, xb es I, T, M o E. En otra modalidad preferida, el anticuerpo es un anticuerpo que reconoce y se enlaza a un epítopo que comprende el motivo G-x2-D/E-V-I-L, en donde x es R o L. En aún otra modalidad preferida, el anticuerpo es un anticuerpo que reconoce y se enlaza a un epítopo que comprende el motivo V-L-G/E-xg- V/L, en donde x9 es E, D, K o Q. En otras modalidades preferidas, el anticuerpo se puede seleccionar de anticuerpos que reconocen y se enlazan a un epítopo que comprende o está comprendido por una secuencia seleccionada de cualquiera de las secuencias de SEQ ID NOs: 1-11, o un fragmento, o variante u homólogo de las secuencias. De manera preferente, el epítopo se localiza en el polipéptido de NCAM, NGF, NT-3 o NT-4/5. Por el término "epítopo" se quiere decir el grupo específico de átomos (en una molécula de antígeno) que se reconoce por los anticuerpos (de ese antígeno) (provocando de este modo una respuesta inmunitaria) . El término "epítopo" es el equivalente al término "determinante antigénico" . El epítopo puede comprender 3 ó más residuos de aminoácidos, tal como por ejemplo 4, 5, 6, 7, 8 residuos de aminoácidos, localizados en proximidad cercana, tal como dentro de una secuencia contigua de aminoácidos, o localizados en partes distantes de la secuencia de aminoácidos de un antígeno, pero debido al plegado de la proteína se han aproximado entre sí . Las moléculas de anticuerpo corresponden a una familia de proteínas de plasma llamadas inmunoglobulinas, cuyo bloque básico de construcción, el pliegue o dominio de inmunoglobulina, se usa en varias formas en varias moléculas del sistema inmunitario y otros sistemas de reconocimiento biológico. Una inmunoglobulina típica tiene cuatro cadenas de polipéptido, que contienen una región de enlace a antígeno conocida como una región variable y una región no variable conocida como la región constante. Los anticuerpos nativos e inmunoglobulinas, son usualmente glicoproteínas heterotetraméricas de aproximadamente 150,000 daltons, compuestas de dos cadenas ligeras (L) idénticas y dos cadenas pesadas (H) idénticas. Cada cadena ligera está enlazada a una cadena pesada por un enlace de disulfuro equivalente, en tanto que el número de enlaces de disulfuro varía entre las cadenas pesadas de los diferentes isotipos de inmunoglobulina. Cada cadena pesada y ligera también tiene puentes de disulfuro intra-cadena regularmente separados. Cada cadena pesada tiene en un extremo un dominio variable (VH) seguido por varios dominios constantes. Cada cadena ligera tiene un dominio variable en un extremo (VL) y un dominio constante en su otro extremo. El dominio constante de la cadena ligera se alinea con el primer dominio constante de la cadena pesada, y el dominio variable de cadena ligera se alinea con el dominio variable de la cadena pesada. Los residuos de aminoácido particulares se cree que forman una zona de contacto entre los dominios variables de cadena ligera y pesada (Novotny J, & Haber E. Proc Nati Acad Sci U S A. 82 (14) : 4592-6, 1985).

Dependiendo de las secuencias de aminoácidos del dominio constante de sus cadenas pesadas, se pueden asignar inmunoglobulinas a diferentes clases. Hay al menos cinco (5) clases principales de inmunoglobulinas: IgA, lgD, IgE, IgG e IgM, y varias de éstas se pueden dividir adicionalmente en subclases (isotipos), por ejemplo, IgG-1, IgG-2, IgG-3 e IgG-4; IgA-1 e IgA-2. Los dominios constantes de las cadenas pesadas que corresponden a las diferentes clases de inmunoglobulina se llaman alfa ( ) , delta (d) , epsilón (e) , gamma (?) y mu (µ) , respectivamente. Las cadenas ligeras de los anticuerpos se pueden asignar a uno de dos tipos claramente distintos, llamados kappa (K) y lambda (?) , en base a las secuencias de aminoácidos de su dominio constante. Las estructuras de subunidad y las configuraciones tridimensionales de diferentes clases de inmunoglobulinas son bien conocidas. El término "variable" en el contexto del dominio variable de anticuerpos, se refiere al hecho que ciertas porciones de los dominios variables difieren extensivamente en secuencia entre los anticuerpos. Los dominios variables son para el pliegue y determinan la especificidad de cada anticuerpo particular para su antígeno en particular. Sin embargo, la variabilidad no se distribuye uniformemente a través de los dominios variables de los anticuerpos. Se concentra en tres segmentos llamados regiones determinantes de complementariedad (CDR) , también conocidas como regiones hipervariables tanto en los dominios variables de cadena ligera como de cadena pesada. Las porciones más altamente conservadas de los dominios variables se llaman el encuadre (FR) . Los dominios variables de las cadenas pesada y ligera nativas comprenden cada uno cuatro regiones FR, adoptando en su mayor parte una configuración de ß-hoja, conectadas por tres CDR, que forman asas que conectan, y en algunos casos que forman parte de, la estructura de ß-hoja. Las CDR en cada cadena se mantienen conjuntamente en proximidad cercana por las regiones FR y con las CDR de la otra cadena, contribuyen a la formación del sitio de unión a antígeno de los anticuerpos. Los dominios constantes no están comprendidos directamente en el enlace de un anticuerpo a un antígeno, pero exhiben varias funciones efectoras, tal como participación del anticuerpo en toxicidad celular dependiente de anticuerpo. Un anticuerpo que se contempla para el uso en la presente invención de esta manera puede estar en cualquiera de una variedad de formas, incluyendo una inmunoglobulina entera, un fragmento de anticuerpo tal como Fv, Fab, y fragmentos similares, un anticuerpo de cadena individual que incluye las regiones determinantes de complementariedad (CDR) de dominio variable, y formas similares, todas las cuales caen dentro del término amplio "anticuerpo" como se usa en la presente. La presente invención contempla el uso de cualquier especificidad de un anticuerpo, policlonal o monoclonal, y no se limita a anticuerpos que reconocen e imnmunorreaccionan con un antígeno específico. En modalidades preferidas, en el contexto tanto de métodos terapéuticos como de detección, descritos más adelante, un anticuerpo o fragmento del mismo se usa que es inmunoespecífico para un antígeno o epítopo de la invención. El término "fragmento de anticuerpo" se refiere a una porción de un anticuerpo de longitud completa, en general la región variable o de enlace a antígeno. Los ejemplos de fragmentos de anticuerpo incluyen fragmentos Fab, Fab1, F(ab')2 y Fv. La digestión con papaína de los anticuerpos produce dos fragmentos idénticos de enlace a antígeno, llamados el fragmento Fab, cada uno con un sitio individual de enlace a antígeno, y un fragmento "Fe" residual, llamado por su capacidad para cristalizar rápidamente. El tratamiento con pepsina produce un fragmento F(ab')2 que tiene dos fragmentos de enlace a antígeno que son capaces de reticular el antígeno, y otro fragmento residual (que se llama pFc ' ) . Los fragmentos adicionales pueden incluir diacuerpos, anticuerpos lineales, moléculas de anticuerpo de cadena individual, y anticuerpos multiespecíficos formados de fragmentos de anticuerpo. Como se usa en la presente, "fragmento funcional" con respecto a anticuerpos, se refiere a fragmentos Fv, F(ab) y F(ab')2. El término "fragmento de anticuerpo" se usa en la presente de forma indistinta con el término "fragmento de enlace a antígeno" . Los fragmentos de anticuerpo pueden ser tan pequeños como aproximadamente 4 aminoácidos, 5 aminoácidos, 6 aminoácidos, 7 aminoácidos, 9 aminoácidos, aproximadamente 12 aminoácidos, aproximadamente 15 aminoácidos, aproximadamente 17 aminoácidos, aproximadamente 18 aminoácidos, aproximadamente 20 aminoácidos, aproximadamente 25 aminoácidos, aproximadamente 30 aminoácidos o más. En general, un fragmento de anticuerpo de la invención puede tener cualquier límite superior de tamaño en tanto que tenga propiedades similares o inmunológicas con relación al anticuerpo que se enlaza con especificidad a un epítopo que comprende una secuencia peptídica seleccionada de cualquiera de las secuencias identificadas en la presente como SEQ ID NOs: 1-11, o un fragmento de estas secuencias. De esta manera, en el contexto de la presente invención, el término "fragmento de anticuerpo" es idéntico al término "fragmento de enlace a antígeno" . Los fragmentos de anticuerpo retienen alguna capacidad para unirse selectivamente con su antígeno o receptor. Algunos tipos de fragmentos de anticuerpo se definen como sigue: (1) Fab es el fragmento que contiene un fragmento monovalente de enlace a antígeno de una molécula de anticuerpo. Se puede producir un fragmento Fab por digestión con anticuerpo entero con la enzima papaína para producir una cadena ligera intacta y una porción de una cadena pesada. (2) Fab' es el fragmento de una molécula de anticuerpo que se puede obtener al tratar el anticuerpo entero con pepsina, seguido por reducción, para producir una cadena ligera intacta y una porción de la cadena pesada. Se obtienen dos fragmentos Fab' por molécula de anticuerpo. Los fragmentos Fab' difieren de los fragmentos Fab por la adición de unos pocos residuos en el término carboxilo del dominio CHl de cadena pesada que incluye una o más cisteínas de la región de charnela del anticuerpo. (3) (Fab')2 es el fragmento de un anticuerpo que se puede obtener al tratar el anticuerpo completo con la enzima pepsina sin reducción subsiguiente. (4) F(ab')2 es un dímero de dos fragmentos Fab' mantenidos conjuntamente por dos enlaces de disulfuro. Fv es el fragmento mínimo de anticuerpo que contiene un sitio completo de enlace y reconocimiento de antígeno. Esta región consiste de un dímero de un dominio variable de cadena pesada y cadena ligera en una asociación estrecha, no covalente (dímero VH -VL) . Es en esta configuración que las tres CDR de cada dominio variable interactúan para definir un sitio de enlace a antígeno en la superficie del dímero VH-VL. Colectivamente, las seis CDR confieren especificidad de enlace a antígeno al anticuerpo. Sin embargo, aún un dominio variable individual (o la mitad de un Fv que comprenden sólo tres CDR específicas para un antígeno) tiene la capacidad para reconocer y unirse al antígeno, aunque a una menor afinidad que el sitio de enlace completo . (5) el anticuerpo de cadena individual ("SCA"), definido como una molécula genéticamente manejada que contiene la región variable de la cadena ligera, la región variable en la cadena pesada, enlazada por un ligador polipeptídico adecuado con una molécula de cadena individual genéticamente fusionada. Estos anticuerpos de cadena individual también se refieren como fragmentos de anticuerpo "Fv de cadena individual", o "sFv" . En general, el polipéptido de Fv comprende además un ligador de polipéptido entre los dominios VH y VL que permite que el sFv forme la estructura deseada para el enlace a antígeno. Para una revisión de sFv, ver Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies 113: 269-315 Rosenburg y Moore eds. Springer-Verlag, NY, 1994. El término "diacuerpos" se refiere a fragmentos de anticuerpo pequeño con dos sitios de enlace a antígeno, fragmentos que comprenden un dominio variable (VH) de cadena pesada conectado a un dominio variable (VL) de cadena ligera en la misma cadena de polipéptido (VH-VL) . Al usar un ligador que es demasiado corto para permitir el apareamiento entre los dos dominios en la misma cadena, los dominios se fuerzan a aparearse con los dominios complementarios de otra cadena y crean dos sitios de enlace a antígeno. Los diacuerpos se describen más completamente por ejemplo en EP 404,097; WO 93/11161, y Hollinger et al., Proc. Nati. Acad Sci. USA 90: 6444-6448 (1993). La invención contempla anticuerpos tanto policlonales como monoclonales, fragmentos de enlace a antígeno y proteínas recombinantes de los mismos que son capaces de enlazarse a un epítopo de acuerdo con la invención. La preparación de anticuerpos policlonales es bien conocida por aquellos expertos en la técnica. Ver, por ejemplo Green et al. 1992. Production of Polyclonal Antisera, in: Immuno-chemical Protocols (Manson, ed.), páginas 1-5 (Humana Press); Coligan, et al., Production of Polyclonal Antisera in Rabbits, Rats Mice and Hamsters, en: Current Protocols in Immunology, section 2.4.1, que se incorporan de este modo como referencia. La preparación de anticuerpos monoclonales igualmente es convencional. Ver, por ejemplo Kohier & Milstein, Nature, 256:495-7 (1975); Coligan, et al., sections 2.5.1-2.6.7; y Harlow, et al., in: Antibodies: A Laboratory Manual, page 726, Cold Spring Harbor Pub. (1988) . Los anticuerpos monoclonales se pueden aislar y purificar del cultivo de hibridoma por una variedad de técnicas bien establecidas. Estas técnicas de aislamiento incluyen cromatografía de afinidad con sefarosa de proteína A, cromatografía de exclusión de tamaño, y cromatografía de intercambio iónico. Ver, por ejemplo Coligan, et al., sections 2.7.1-2.7.12 y sections 2.9.1-2.9.3; Barnes, et al., Purification of Immunoglobulin G (IgG) . In: Methods in Molecular Biology, 1992, 10:79-104, Humana Press, NY. Los métodos de manipulación in vitro e in vivo de anticuerpos monoclonales son bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales que se van a usar de acuerdo con la presente invención se pueden elaborar por el método de hibridoma descrito primero por Kohier y Milstein, 1975, Nature 256, 495-7, o se pueden elaborar por métodos recombinantes, por ejemplo como se describe en la US 4,816,567. Los anticuerpos monoclonales para el uso con la presente invención también se pueden aislar en bibliotecas de anticuerpos de fagos usando las técnicas descritas en Clackson et al., 1991, Nature 352: 624-628, así como en Marks et al., 1991, J Mal Biol 222: 581-597. Otro método comprende humanizar un anticuerpo monoclonal por medios recombinantes para generar anticuerpos que contienen secuencias reconocibles y específicas humanas. Ver, para revisión, Holmes, et al., 1997, J Immunol 158:2192-2201 y Vaswani, et al., 1998, Annals Allergy, Asthma & Immunol 81:105-115. El término "anticuerpo monoclonal" como se usa en la presente se refiere a un anticuerpo obtenido de una población de anticuerpos sustancialmente homogéneos, es decir, los anticuerpos individuales que comprenden la población son idénticos excepto por las posibles mutaciones que se presentan de forma natural que pueden estar presentes en cantidades menores. Los anticuerpos monoclonales son altamente específicos, que se dirigen contra un sitio antigénico individual. Adicionalmente, en contraste a preparaciones convencionales de anticuerpos policlonales que incluyen típicamente diferentes anticuerpos dirigidos contra diferentes determinantes (epítopos) , cada anticuerpo monoclonal se dirige contra un determinante individual en el antígeno. Adicional a su especificidad, los anticuerpos monoclonales son ventajosos ya que se sintetizan por cultivo de hibridoma, se descontaminan por otras inmunoglobulinas. El modificador "monoclonal" indica el carácter del anticuerpo como que se obtiene de una población sustancialmente homogénea de anticuerpos, y no se va a considerar como que requiere producción del anticuerpo por cualquier método particular.

Los anticuerpos monoclonales incluyen específicamente en la presente anticuerpos "quiméricos" (inmunoglobulinas) en los cuales una porción de la cadena pesada y/o ligera es idéntica con u homologa a las secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de una especie particular o que corresponden a una clase o subclase particular de anticuerpos, en tanto que el resto de la cadena (s) es idéntico con u homologa a las secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de otras especies ya que corresponden a otra clase o subclase de anticuerpos, así como fragmentos de estos anticuerpos, en tanto que exhiben la actividad biológica deseada (US 4,816,567); Morrison et al., 1984, Proc Nati Acad Sci 81: 6851-6855. Los métodos para elaborar fragmentos de anticuerpo también se conocen en la técnica (ver, por ejemplo Harlow y Lañe, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, NY, 1988. Los fragmentos de anticuerpo de la presente invención se pueden preparar por hidrólisis proteolítica del anticuerpo o por la expresión en E. coli de ADN que codifica para el fragmento. Se pueden obtener fragmentos de anticuerpo por digestión con pepsina o papaína de los anticuerpos enteros usando métodos convencionales. Por ejemplo, los fragmentos de anticuerpo se pueden producir por escisión enzimática de anticuerpos con pepsina para proporcionar un fragmento 5S denotado F(ab')2. Este fragmento se puede escindir adicionalmente usando el agente reductor de tiol, y opcionalmente un grupo bloqueador para los grupos sulfhidrilo que resultan de la escisión de enlace de disulfuro, para producir fragmentos monovalentes 3.5S Fab'. De manera alternativa, una escisión enzimática que usa pepsina produce dos fragmentos Fab' monovalentes y un fragmento Fe, directamente. Estos métodos se describen, por ejemplo, en US 4,036,945 y US 4,331,647, y las referencias contenidas en las mismas. Estas patentes se incorporan de este modo en sus totalidades como referencia. Otros métodos para escindir anticuerpos, tal como separación de cadenas pesadas para formar fragmentos monovalentes de cadena ligera-pesada, escisión adicional de fragmentos, u otras técnicas enzimáticas, químicas o genéticas también se pueden usar, en tanto que los fragmentos se unan al antígeno que se reconoce por el anticuerpo intacto. Por ejemplo, los fragmentos Fv comprenden una asociación de las cadenas VH y VL. Esta asociación puede ser no covalente por las cadenas variables se pueden enlazar por un enlace disulfuro intermolecular o reticular por productos químicos tal como glutaraldehído . De manera preferente, los fragmentos Fv comprenden cadenas VH y VL conectadas por un ligador peptídico. Estas proteínas de enlace a antígeno de cadena individual (sFv) se preparan al construir un gen estructural que comprende secuencias de ADN que codifican para los dominios VH y VL conectados por un oligonucleótido. Los genes estructurales se insertan en un vector de expresión, que se introduce de forma subsiguiente en una célula hospedadora tal como E. coli. Las constantes hospedadoras recombinantes sintetizan una cadena individual de polipéptido con un péptido ligador que enlaza los dos dominios V. Los métodos para producir sFv se describen, por ejemplo, por Whitlow, et al., 1991, In: Methods: A Companion to Methods in Enzymology, 2:97; Bird et al., 1988, Science 242:423-426; US 4,946,778; y Pack, et al., 1993, BioTechnology 11:1271-77. Otra forma de un fragmento de anticuerpo es un péptido que codifica para una región recombinante de complementariedad (CDR) individual. Los péptidos de CDR ("unidades de reconocimiento mínimo") frecuentemente están comprendidos en el reconocimiento y enlace a antígeno. Los péptidos de CDR se pueden obtener al clonar o construir genes que codifican para las CDR de un anticuerpo de interés. Estos genes se preparan, por ejemplo, al usar la reacción en cadena de la polimerasa para sintetizar la región variable del ARN de las células productoras de anticuerpo. Ver, por ejemplo, Larrick, et al., Methods: a Companion to Methods in Enzymology, Vol. 2, page 106 (1991). La invención contempla formas humanas y humanizadas de anticuerpos no humanos (por ejemplo, murinos) . Estos anticuerpos humanizados son inmunoglobulinas quiméricas, cadenas de inmunoglobulina o fragmentos de los mismos (tal como Fv, Fab, Fab', F(ab')2 u otras subsecuencias de enlace a antígeno de los anticuerpos) que contienen un secuencia mínima derivada de inmunoglobulina no humana, tal como la secuencia reconocedora de epítopo. Para la mayor parte, los anticuerpos humanizados son inmunoglobulinas humanas (anticuerpo receptor) en las cuales los residuos de una región determinante de complementariedad (CDR) del receptor se reemplazan por residuos de una CDR de una especie no humana (anticuerpo donador) tal como de ratón, rata c conejo que tiene la especificidad, afinidad y capacidad deseadas. El (los) anticuerpo (s) humanizado (s) que contiene(n) un(s) secuencia (s) mínima (s) de anticuerpo (s) de la invención, tal como una(s) secuencia (s) que reconoce un (unos) epítopo (s) descrito (s) en la presente, es una de las modalidades preferidas de la invención. En algunos casos, los residuos de encuadre Fv de la inmunoglobulina humana se reemplazan por los correspondientes residuos no humanos. Adicionalmente, los anticuerpos humanizados pueden comprender residuos que no se encuentran ni en el anticuerpo receptor ni en la CDR importada o las secuencias de encuadre. Estas modificaciones se hacen para refinar y optimizar adicionalmente el desempeño del anticuerpo. En general, los anticuerpos humanizados comprenderán sustancialmente todo de al menos uno, y típicamente dos, dominios variables, en los cuales todas o sustancialmente todas las regiones de CDR corresponden a aquellas de una inmunoglobulina no humana y todas o sustancialmente todas las regiones de FR son aquellas de una secuencia de consenso de inmunoglobulina humana. El anticuerpo humanizado también comprenderá de forma óptima al menos una porción de una región constante (Fe) de inmunoglobulina, típicamente aquella de una inmunoglobulina humana. Para detalles adicionales, ver: Jones et al., 1986, Nature 321, 25 522-525; Reichmann et al., 1988, Nature 332, 323-329; Presta, 1992, Curr Op Struct Biol 2:593-596; Holmes et al., 1997, J Im unol 158:2192-2201 and Vaswani , et al., 1998, Annals Allergy, Asthma & Immunol 81:105-115. La generación de anticuerpos se puede lograr por métodos normales en la técnica para producir anticuerpos policlonales y monoclonales usando fragmentos naturales o recombinantes de NCAM, NGF, NT3 , o NT/4/5 que comprende el motivo de la invención, tal como por ejemplo las secuencias identificadas como SEQ IS Nos: 1-11, como un antígeno. Estos anticuerpos también se pueden generar usando variantes, homólogos o fragmentos de secuencias peptídicas de SEQ ID Nos: 1-11, o cualesquiera otras secuencias peptídicas inmunogénicas o fragmentos inmunogénicos de las mismas, que cumplen con los siguientes criterios: (i) que son una secuencia de aminoácidos continua de al menos seis aminoácidos, y (ii) que comprenden al menos un motivo de aminoácido analizado anteriormente. Los anticuerpo también se pueden producir in vivo por el individuo que se va a tratar, por ejemplo, al administrar un fragmento inmunogénico de acuerdo con la invención al individuo. Por consiguiente, la presente invención se refiere además a una vacuna que comprende un fragmento inmunogénico descrito anteriormente. La solicitud también se refiere a un método para producir un anticuerpo de la invención, el método que comprende un paso de proporcionar un fragmento inmunogénico descrito anteriormente. La invención de refiere tanto a 1) un anticuerpo, que es capa de modular, tal como intensificar o atenuar, la función biológica de NCAM humana y/o una neurotrofina y/o receptor de Trk, en particular una función relacionada a crecimiento, diferenciación y supervivencia celular, plasticidad neural asociada con aprendizaje y memoria, y/o motilidad celular, 2) un anticuerpo, que puede reconocer y enlazarse específicamente a NCAM y/o a un ligando de receptor de Trk, tal como NGF, NT-3 o NT-4/5, y modular la función de NCAM y/o ligando de receptor de Trk; y 3) un anticuerpo, que puede reconocer y enlazarse específicamente a NCAM y/o un ligando de receptor de Trk, tal como NGF, NT-3 o NT-4/5 sin modular la actividad biológica del mismo. Se prefiere que este anticuerpo se produzca al usar una secuencia peptídica inmunogénica descrita anteriormente. La invención se refiere al uso de los anticuerpos descritos anteriormente para 1) aplicaciones terapéuticas que comprenden la modulación de la actividad de las neurotrofinas, NCAM y/o receptores Trk; 2) para modular procesos celulares y fisiológicos que incluyen diferenciación, supervivencia y motilidad celular, y plasticida neural asociada con aprendizaje y memoria; 3) detectar y/o monitorizar neurotrofinas, NCAM y/o receptores Trk in Vitro y/o in vivo para propósitos de diagnóstico, 4) propósitos de investigación. En una modalidad, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo descrito anteriormente .

. Medicamento La presente invención proporciona secuencias peptídicas y compuestos, capaces de i) estimular la excrescencia de neuritas; ii) modular la motilidad celular; ii) estimular la supervivencia de células neurales; iii) estimular la diferenciación de células neurales; iv) estimular la plasticidad neural asociada con memoria y aprendizaje; v) modular la actividad de un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk. Por consiguiente, los compuestos pueden ser útiles para la estimulación de la excrescencia de neuritas, para estimulación de la supervivencia de células neurales, para la estimulación de la plasticidad neural, para la estimulación de la diferenciación de células neurales, para modular la actividad de un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk y para modular la motilidad celular y para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y/o condiciones, en donde la estimulación o modulación se requiera. En algunas modalidades, las secuencias peptídicas y los compuestos de la invención incluyen fragmentos aislados de péptidos de neurotrofinas, tal como NGF, NT-3 y NT-4/5, y/o NCAM. El factor de crecimiento de nervios (NGF) estimula la función colinérgica, mejora la memoria e impide la degeneración colinérgica en modelos en animal de lesión, sobreexpresión amiloide y enve ecimiento, estimula la excrescencia de neuritas y supervivencia neuronal (Tuszynski MH, et al. Nat Med. 2005 Jun; 11 (6) : 551-5 ; Jakubowska-Dogru E, Gumusbas U Neurosci Lett. 2005 Jul 1; 382 (1-2) : 45-50; Walz R, et al Neurochem Res. 2005 Feb; 30 (2) : 185-90 ; Hu Z et al. Neurobiol Dis. 2005 Feb; 18 (1) : 184-92 ) . Adicionalmente, el nivel de expression y actividad de diferentes receptores de Trk se han correlacionado con supervivencia de pacientes con cáncer (Schramm A et al. Cáncer Lett. 2005 May 24, PubMed Epub ahead of print) y el comportamiento invasivo de células de cáncer es dependiente tanto de la expression como de la actividad de NCAM, receptores de Trk y NGF (Chen-Tsai CP et al Dermatol Surg. 2004 Jul ; 30 (7) : 1009-16) . Se ha mostrado que la función de NCAM es importante para una variedad enorme de condiciones normales y patológicas de diferentes sistemas y órganos corporales, en particular el sistema nervioso (Sandi C. Nat Rev Neurosci. 2004 Dec;5(12) :917-30; Kiryushko D et al. Ann N Y Acad Sci. 2004 Apr; 1014: 140-54; Gniadecki R et al. Arch Dermatol. 2004 Apr;140 (4) :427-36; Berezin V, Bock E. J Mol Neurosci. 2004 ; 22 (1-2 ): 33-39) . De esta manera, se puede usar una secuencia peptídico y/o compuesto de la invención para la prevención y/o tratamiento de una condición o enfermedad, en donde la función de una neurotrofina o receptor de neurotrofina, o función de NCAM juega un papel importante. Por consiguiente, los siguientes ejemplos no limitados de condiciones y enfermedades se pueden contemplar en donde el uso de una secuencia peptídica y/o compuesto de la invención puede tener un efecto benéfico en el tratamiento o prevención de las mismas. 1) enfermedades y condiciones del sistema nerviosos central y periférico tal como o asociadas con daño pos-operativo de nervios, daño traumático de nervios, mielinación deteriorada de fibras de nervios, daño pos-isquémico, por ejemplo que resulta de un ataque, enfermedad es enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, demencias tal como demencia por múltiples infartos, esclerosis, degeneración de nervios asociada con diabetes mellitas, trastornos que afectan el reloj circadiano o transmisión neuro-muscular . 2) enfermedades y trastornos mentales, tal como un trastorno de pensamiento y humor, trastornos neuropsiquiátricos que incluyen trastornos afectivos bipolares (BPD) , unipolares genéticamente relacionados, trastornos de desilusión, parafrenia, psicosis paranoide, esquizofrenia, trastorno esquizotípico, trastorno esquizoafectivo, trastornos afectivos bipolares y unipolares genéticamente relacionados, psicosis psicogenética, catatonía, trastornos afectivos bipolares periódicos y unipolares genéticamente relacionados, psicosis cicloide, trastorno de personalidad esquizoide, trastorno de personalidad paranoide, trastornos afectivos unipolares genéticamente relacionados y bipolares relacionados a trastornos afectivos y tipo secundarios de trastorno afectivo unipolar, y/o 3) enfermedades o condiciones de los músculos incluyen condiciones con fusión deteriorada de conexiones neuromusculares, tal como después de trasplante de órganos, o tal como trastornos genéticos o traumáticos de músculos atrofíeos; y/o 4) enfermedades o condiciones de varios órganos, tal como condiciones degenerativas de las gónadas, del páncreas tal como diabetes mellitas tipo I y II, o del riñon tal como nefrosis y del corazón, hígado e intestino, y/o 5) capacidad deteriorada para aprender y/o memoria deteriorada a corto plazo y/o a largo plazo. En particular, la invención se refiere al tratamiento de células que presentan NCAM, receptor de Trk y/o neurotrofina, normales, degeneradas o dañadas. Los compuestos de la invención también son capaces de modular la motilidad celular, es decir, de inhibir la motilidad celular. De esta manera, estos compuestos también se relacionan por la invención para modular la motilidad celular, de manera preferente para inhibir la motilidad celular. De esta manera, a este respecto, se puede usar un compuesto y medicamento de la invención para la prevención y/o tratamiento de 1) cáncer, 2) enfermedad inflamatoria, 3) condición alérgica, y/o 4) neoangiogénesis. La invención se refiere a cáncer que es de cualquier tipo de tumores sólidos que requiere neoangiogénesis y cualquier cáncer maligno. En particular, la invención se refiere a cáncer del sistema neural. Una secuencia peptídico y/o compuesto de la invención también se puede usar para tratar individuos que tienen daños corporales debido a consumo de alcohol y para tratar individuos que sufren de enfermedades por prion. De esta manera, es un objetivo usar una secuencia peptídica, compuesto, y/o anticuerpo para la elaboración de un medicamento. Un medicamento de la invención se puede usar para tratamiento de cualquier condición o enfermedad en donde sea benéfica para el tratamiento la estimulación de la excrescencia de neuritas, la estimulación de supervivencia de células neurales, la estimulación de la plasticidad neural, la estimulación de la diferenciación de células neurales, la modulación de la actividad de un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk y la modulación de la motilidad celular. Los ejemplos no limitados de condiciones y enfermedades se describen anteriormente. El medicamento de la invención puede comprender una cantidad efectiva de una o más secuencias peptídicas aisladas, compuestos o anticuerpos como se describe anteriormente, o se pueden formular como una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de una o más secuencias peptídicas aisladas, compuestos o anticuerpos como se describe anteriormente y aditivos farmacéuticamente aceptables. En algunas modalidades, un medicamento o composición farmacéutica puede comprender una combinación de una cantidad efectiva de una o más secuencias peptídicas aisladas, compuestos y/o anticuerpos como se describe anteriormente . De esta manera, la invención en otro aspecto también se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos una secuencia peptídico aislada, compuesto, y/o anticuerpo de la invención. Un aspecto adicional de la invención es un proceso para producir una composición farmacéutica, que comprende mezclar una cantidad efectiva de una o más secuencias peptídicas aisladas, compuestos o anticuerpos de la invención, o una composición farmacéutica de acuerdo a la invención con uno o más aditivos soportadores farmacéuticamente aceptables. En una modalidad del proceso como se menciona anteriormente, los compuestos se usan en combinación con un dispositivo protésico, en donde el dispositivo es una guía protésica de nervios. De esta manera, en un aspecto adicional, la presente invención se refiere a una guía protésica de nervios, caracterizada en que comprende uno o más de los compuestos o la composición farmacéutica como se define anteriormente. Se conocen en la técnica las guías de nervios . La invención también se refiere al uso de una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la invención para el tratamiento o profilaxis de cualquiera de las enfermedades y condiciones mencionadas en la solicitud. En algunas modalidades, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo capaz de reconocer un epítopo que comprende el motivo de aminoácido de la invención. Esta composición farmacéutica también puede ser útil en el tratamiento de condiciones y enfermedades descritas en la presente. Un medicamento y/o composición farmacéutica de la invención se puede formular de manera adecuada para administración oral, percutánea, intramuscular, intravenosa, intracraneal, intratecal, intracerebroventricular, intranasal o pulmonar . Las estrategias en el desarrollo de la formulación, de medicamentos y composiciones basadas en los compuestos de la presente invención corresponden en general a las estrategias de formulación para cualquier otro producto de fármaco basado en proteína. Los problemas potenciales y la guía requerida para superar estos problemas se tratan con varios libros de texto, por ejemplo, "Therapeutic Peptides and Protein Formulation. Processing and Delivery Systems", Ed. A.K. Banga, Technomic Publishing AG, Basel, 1995. Los productos inyectables se preparan usualmente ya sea como soluciones o suspensiones líquidas, formas sólidas adecuadas para solución en, o suspensión en, líquido antes de la inyección. La preparación también se puede emulsionar. El ingrediente activo frecuentemente se mezcla con excipientes que son farmacéuticamente aceptables y compatibles con el ingrediente activo. Los excipientes adecuados son, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa, glicerol, etanol o similares, y combinaciones de los mismos. Además, si se desea, la preparación puede contener cantidades menores de sustancias auxiliares tal como agentes humectantes o emulsionantes, agentes amortiguadores de pH, o que mejoran la efectividad o transporte de la preparación. Las formulaciones de los compuestos de la invención se pueden preparar por técnicas conocidas por una persona experta en la técnica. Las formulaciones pueden contener portadores y excipientes farmacéuticamente aceptables incluyendo microesferas, liposomas, microcápsulas, nanopartículas o similares. La preparación se puede administrar de manera adecuada por inyección, opcionalmente en el sitio, donde el ingrediente activo va a ejercer su efecto. Las formulaciones adicionales que son adecuadas para otros modos de administración incluyen supositorios, formulaciones nasales, pulmonares, y en algunos casos, orales. Para supositorios, los aglutinantes y portadores tradicionales incluyen polialquilenglicoles o triglicéridos. Estos supositorios se pueden formar de mezclas que contienen los ingredientes activos en el intervalo de 0.5 % a 10 %, de manera preferente 1-2 %. Las formulaciones orales incluyen excipientes normalmente empleados tal como por ejemplo, grados farmacéuticos de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina sódica, celulosa, carbonato de magnesio y similares. Estas composiciones toman la forma de soluciones, suspensiones, tabletas, pildoras, cápsulas, formulaciones de liberación sostenida o polvos y contienen en general de 10-95 % de los ingredientes activos, de manera preferente 25-7 0%. Otras formulaciones son adecuadas para administración nasal y pulmonar, por ejemplo inhaladores y aerosoles . El compuesto activo se puede formular como formas neutrales o de sal. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácido (formadas con los grupos amino libres del compuesto peptídico) y que se forman con ácidos inorgánicos tal como por ejemplo, ácidos clorhídrico o fosfórico, o ácidos orgánicos tal como ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido mandélico, y similares. Las sales formadas con el grupo carboxilo libre también se pueden distribuir de bases inorgánicas tal como por ejemplo, hidróxidos de sodio, potasio, amonio, calcio o férricos, y bases orgánicas tal como isopropilamina, trimetilamina, 2-etilamino-etanol, histidina, procaína, y similares. Las preparaciones se administran de una manera compatible con la formulación de dosis, y en una cantidad como será terapéuticamente efectiva. La cantidad que se va a administrar depende del sujeto que se va a tratar, incluyendo, por ejemplo el peso y edad del sujeto, la enfermedad que se va a tratar y la etapa de la enfermedad. La dosis adecuada duraría como por kilo de peso corporal normalmente del orden de varios cientos de µg de ingrediente activo por administración con un intervalo preferido de aproximadamente 0.1 µg a 5000 µg por kilo de peso corporal. Usando formas monoméricas de los compuestos, las dosis adecuadas frecuentemente están en el intervalo de 0.1 µg a 5000 µg por kilo de peso corporal, tal como en el intervalo de aproximadamente 0.1 µg a 3000 µg por kilo de peso corporal, y especialmente en el intervalo de aproximadamente 0.1 µg a 1000 µg por kilo de peso corporal. Usando formas multiméricas de los compuestos, las dosis adecuadas frecuentemente están en el intervalo de 0.1 µg a 1000 µg por kilo de peso corporal, tal como en el intervalo de aproximadamente 0.1 µg a 750 µg por kilo de peso corporal, y especialmente en el intervalo de aproximadamente 0.1 µg a 500 µg por kilo de peso corporal tal como en el intervalo de aproximadamente 0.1 µg a 250 µg por kilo de peso corporal. En particular, cuando se administran nasalmente se usan dosis más pequeñas que cuando se administran por otras rutas. La administración se puede realizar una vez o se puede seguir con administraciones subsiguientes. La dosis también dependerá de la ruta de administración y variará con la edad y peso del sujeto que se va a tratar. Una dosis preferida de formas multiméricas estará en el intervalo de 1 mg a 70 mg por 70 kg de peso corporal. Para algunas indicaciones, se prefiere una aplicación localizada o sustancialmente localizada. Para otra aplicación, se prefiere aplicación intranasal . Algunos de los compuestos de la presente invención son suficientemente activos, pero para algunos otros, el efecto se mejorará si la preparación comprende además aditivos y/o portadores farmacéuticamente aceptables. Estos aditivos y portadores se conocerán en la técnica. En algunos casos, será ventajoso incluir un compuesto, que promueva la distribución de la sustancia activa a su objetivo. En muchos casos, será necesario administrar la formulación múltiples veces. La administración puede ser una infusión continua, tal como infusión intraventricular o administración en más dosis tal como más veces por día, diariamente, más veces por semana, semanalmente, etc. Se prefiere que la administración del medicamento se inicie antes o brevemente después que el sujeto se ha sometido al factor que puede conducir a muerte celular. De manera preferente, el medicamento se administra en el espacio de 8 horas desde el comienzo del factor, tal como en el espacio de 5 horas desde el comienzo del factor. Muchos de los compuestos exhiben un efecto a largo plazo, por lo que la administración de los compuestos se puede llevar a cabo con intervalos prolongados, tal como 1 semana o 2 semanas. En unión con el uso en guías de nervios, la administración puede ser continua o en pequeñas porciones en base a liberación controlada de los compuestos activos. Adicionalmente, se pueden usar precursores para controlar la velocidad de liberación y/o sitio de liberación. Otras clases de implantes y cavidades como administración oral se pueden basar de manera similar en liberación controlada y/o el uso de precursores . 6. Tratamiento El tratamiento por el uso de las secuencias peptídicas, compuestos que las comprenden, anticuerpos, medicamentos que las comprenden, y/o composiciones farmacéuticas que comprenden las mismas de acuerdo con la invención es en una modalidad útil para inducir diferenciación, modular la proliferación celular y motilidad celular, estimular la regeneración, supervivencia y plasticidad neuronal. De esta manera, el tratamiento comprende el tratamiento y/o profilaxis de enfermedades o condiciones del sistema nervioso central y periférico, tal como daño postoperativo a nervios, daño traumático a nervios, por ejemplo que resulta de lesión de médula espinal, mielinación dañada en fibras de nervios, daño pos-isquémica, por ejemplo, que resulta de un ataque, demencia de muíti-infarto, esclerosis múltiple, degeneración de nervios asociada con diabetes mellitus, degeneración neuro-muscular, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, o enfermedad de Huntington. También, con relación a enfermedades o condiciones de los músculos incluyendo condiciones con función deteriorada de conexiones neuromusculares, tal como trastornos genéticos o traumáticos de músculos atrofíeos; o para el tratamiento de enfermedades o condiciones de varios órganos, tal como condiciones degenerativas de las gónadas, el páncreas, tal como diabetes mellitas tipo I y II, del riñon, tal como nefrosis, los compuestos de acuerdo con la invención se pueden usar para inducir diferenciación, modular la proliferación, estimular la regeneración, la plasticidad neuronal.

La invención se refiere además al uso del compuesto y/o composición farmacéutica en el tratamiento de cáncer. Es importante la regulación de la motilidad de células de cáncer para el crecimiento de tumores que comprenden células de cáncer, invasión, angiogénesis y extensión de las mismas. De esta manera, el compuesto se puede usar de manera ventajosa como un medicamento para la inhibición de estos últimos procesos en profilaxis y terapia de cáncer. En aún una modalidad adicional, la invención se refiere al uso del compuesto, y medicamento que comprende el mismo y/o composición farmacéutica que comprende el mismo para la estimulación de memoria a corto y/o largo plazo y/o la capacidad para aprender. La excrescencia mejorada de neuritas y el establecimiento de nuevas conexiones neuronales son una parte del mecanismo de consolidación de memoria. Las secuencias peptídicas y compuestos que comprenden las mismas pueden ser útiles para la estimulación de memoria tanto a largo plazo como memoria a corto plazo. Un compuesto, medicamento y/o composición farmacéutica de la invención se puede usar, por ejemplo, en el tratamiento de condiciones clínicas tal como neoplasmas tal como neoplasmas malignos, neoplasmas benignos, carcinoma in situ y neoplasmas de comportamiento incierto, enfermedades de glándulas endocrinas, tal como diabetes mellitus, psicosis, tal como condiciones sicóticas orgánicas seniles y preseniles, psicosis alcohólica, psicosis por drogas, condiciones sicóticas orgánicas momentáneas, enfermedad de Alzheimer, lipidosis cerebral, epilepsia, paresis general [sífilis] , degeneración hepatolenticular , corea de Huntington, enfermedad de Jakob-Creutzfeldt , esclerosis múltiple, enfermedad de Pick del cerebro, sífilis, trastornos esquizofrénicos, psicosis afectiva, trastornos neuróticos, trastornos de personalidad, incluyendo neurosis de carácter, trastorno de personalidad no psicótico asociado con síndromes orgánicos de cerebro, trastornos de personalidad paranoide, personalidad fanática, personalidad paranoide (trastorno) , rasgos paranoides, desviaciones y trastornos sexuales, retardo mental, enfermedad en el sistema nervioso y órganos de percepción, anomalías cognitivas, enfermedad inflamatoria del sistema nervioso central, tal como meningitis, encefalitis, degeneraciones Cerebrales tal como enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, degeneración senil de cerebro, hidrocéfalo comunicante, hidrocéfalo obstructivo, enfermedad de Parkinson incluyendo otra enfermedad extra-piramidal y trastornos anormales de movimiento, enfermedad espinocerebelar , ataxia cerebelar, enfermedad de Marie, Sanger-Brown, Disinergia cerebelaris mioclónica, degeneración cerebelar primaria, tal como atrofia muscular espinal, atrofia muscular espinal familiar, juvenil y de adulto, enfermedad de neuronas motoras, esclerosis lateral amiotrópica, enfermedad de neuronas motoras, parálisis bulbar progresiva, parálisis pseudobulbar, esclerosis lateral primaria, otras enfermedades de células cornufoides anteriores, enfermedad de células cornufoides anteriores, no especificada, otras enfermedades de médula espinal, siringomielia y siringobulbia, mielopatías vasculares, infarto agudo de médula espinal (embólico) (no embólico) , trombosis arterial de médula espinal, edema de médula espinal, mielopatía necrótica subaguda, degeneración combinada subaguda de médula espinal en enfermedades clasificadas en otra parte, mielopatía, inducida por fármaco, mielitis inducida por fármaco, mielitis inducida por radiación, trastornos del sistema nervioso autonómico, trastornos del sistema autonómico, simpatético, parasimpatético o vegetativo periférico, disautonomía familiar [síndrome de Riley-Day] , neuropatía autonómica periférica idiotípica, síncope de seno carótido, o síndrome, distrofia o parálisis simpatético cervical, neuropatía autonómica periférica en trastornos clasificados en otro lado, amiloidosis, enfermedades del sistema nervioso periférico, lesiones del plexo braquial, síndrome de costilla cervical, síndrome costoclavicular, síndrome anterior escalenoso, síndrome de salida torácica, neuritis o radiculitis braquial, incluyendo en recién nacido. Neuropatía inflamatoria y tóxica, incluyendo polineuritis infectiva aguda, síndrome de Guillain-Barre, polineuritis pos-infecciosa, polineuropatía en enfermedad vascular de colágeno, trastornos que afectan estructuras múltiples del ojo, endoftalmitis purulenta, enfermedades del oído y proceso mastoide, enfermedad cardiaca reumática crónica, enfermedad cardiaca isquémica, arritmia, enfermedades en el sistema pulmonar, anormalidad de órganos de tejidos blandos en recién nacido, incluyendo en el sistema nervioso, y complicaciones de la administración de anestésicos u otros sedantes en labor y parto, enfermedades en la piel incluyendo infección, problema de circulación insuficiente, lesiones, incluyendo después de cirugía, lesión por aplastamiento, quemaduras. Lesiones a nervios y médula espinal, incluyendo división de nervios, lesión en la continuidad (con o sin herida abierta), neuroma traumático (con o sin herida abierta) , parálisis momentánea traumática (con o sin herida abierta) , punción o laceración accidental durante procedimientos médicos, lesión a nervio óptico y rutas ópticas, lesión a nervio óptico, segundo nervio cranial, lesión a quiasma óptico, lesión a rutas ópticas, lesión a corteza visual, ceguera no especificada, lesión a otros nervios craniales, lesión a otros nervios y nervios no especificados. Envenenamiento por fármacos, sustancias médicas y biológicas, trastornos musculares atrofíeos genéticos o traumáticos; o para el tratamiento de enfermedades o condiciones de varios órganos, tal como condiciones degenerativas de las gónadas, del páncreas, tal como diabetes mellitas tipo I y II, del riñon, tal como nefrosis, tembladera lumbar, enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, enfermedad de Gerstmann-Straussler-Sheinker (GSS) . De acuerdo a la invención, un método de tratamiento y/o prevención de las condiciones y síntomas anteriores comprende un paso de administrar una cantidad efectiva de una secuencia peptídica y/o compuesto, y/o anticuerpo y/o medicamento, y/o composición farmacéutica de la invención a un individuo en necesidad. 7. Ejemplos Ejemplo 1. Síntesis de secuencias peptídicas Los péptidos se sintetizan en resina TentaGel con ligador de amida Rink ácido (p- (R, S) -a- (1- (9H-fluoren-9-il) -metoxiformamido) -2 , 4-dimetoxibencil) -fenoxiacético (Novabiochem) ) usando aminoácidos protegidos con Fmoc (3 eq. ) . El acoplamiento se realiza durante más de 60 minutos con TBTU (3 eq) , HOBt (3 eq) y DIEA (4.5 eq) en un aparato manual de múltiples columnas. El Fmoc se desprotege con piperidina al 20 % en DMF durante 10 minutos. La síntesis de dendrímeros de los péptidos se logra al acoplar Fmoc-Lys(Fmoc)-OH (No-vabiochem) a la resina ligadora seguido por desprotección con Fmoc del grupo Fmoc y se realiza el acoplamiento adicional de Fmoc-Lys (Fmoc) -OH. Después de la desprotección con Fmoc, la síntesis de péptidos se realiza como antes para péptidos monoméricos. Las resinas peptidílicas se desprotegen con 90 % de TFA, 5 % de H20, 3% de EDT, 2% de tioanisol, se precipitan en éter dienílico, se lavan tres veces con éter dietílico, se solubilizan en 5 % de AcOH y se liofilizan. Se realiza el análisis de aminoácidos usando una picomarca Waters y bomba Waters 501 conectada a WISP 712. Se usa un detector de arreglo de fotodiodos Waters 996 equipado con Waters 600E para HPLC analítica y preparativa en columnas C18 (Delta-Pak 100A 15um, Millipore) . Maldi-MS se puede realizar en un VG TOF Spec E, Fisions Instrument. Los péptidos van a ser al menos 95 % puros como se estima por HPLC.

Ejemplo 2. Estimulación de excrescencia de neuritas por HBP de NCAM Co-cultivo de fibroblastos con o sin expresión de NCAM y CGN primarias Los fibroblastos genéticamente modificados (células L fibroblastoides de ratón) con o sin expresión de NCAM se sembraron en portaobjetos de cámara de cultivo de tejido LabTek de ocho cavidades (Nunc, Roskilde, Dinamarca) a una densidad de 7xl04 células/cavidad y se mantuvieron a 37°C y C02 al 5 % en DMEM con HS al 10 %, 100 U/ml de penicilina y 100 µg/ml de estreptomicina. 24 horas después de la colocación en placa, el medio se remueve y se siembran CGN (104 células/cavidad) en monocapas de fibroblastos con o sin expresión de NCAM en medio Neurobasal-A que contiene 100 U/ml penicilina, 100 µg/ml de estreptomicina, 1 % de glutamax y se complementa con B27, y se cultivan en co-cultivo durante 24 horas, después que se mide la excrescencia de neuritas. Se preparan las CGN a partir de crías de rata del día 3-4 postnatales de acuerdo a R0nn, L.C., Doherty, P., Holm, A., Berezin, V., Bock, E. (2000). J Neurochem. 75 (2) : 665-71. Para evaluar el efecto del péptido de enlace a heparina (HBP) de NCAM (KGRDVILKKDVRFI) (SEQ ID NO: 1) (aminoácido 154-167 de NCAM Igll (SwissProt P13596) . Se siembra la CGN en fibroblastos con o sin expresión de NCAM en la presencia de diferentes concentraciones de HBP o el péptido M (KGRDVILAKDVRVI) (SEQ ID NO : 2), en el cual se sustituyen Lys-161 y Phe-166 (que corresponden a los residuos de la secuencia de HBP) por Ala y Val, respectivamente. De la Figura 1, parece que los fibroblastos que expresan en NCAM promueven de forma significativa las CGN de excrescencia de neuritas en comparación a los fibroblastos de control sin la expresión de NCAM, y el HBP de una manera dependiente de la dosis incrementa la excrescencia de neuritas de las CGN cultivadas en fibroblastos que expresan en NCAM así como en fibroblastos sin la expresión de NCAM. En contraste, el péptido M no afecta la respuesta de excrescencia de neuritas en las CGN cultivadas en fibroblastos que expresan NCAM, pero aún estimulan la excrescencia de neuritas de las CGN cultivadas en fibroblastos sin expresión de NCAM. De la Figura 2, parece que el efecto neuritogénico de HBP en las CGN cultivadas en fibroblastos de control no se bloquea por el tratamiento con SU5402, un inhibidor del receptor de factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR) , y la excrescencia de neuritas mediada por NCAM en cultivos de CGN con fibroblastos que expresan NCAM sólo se inhiben parcialmente, sin embargo, SU5402 bloquea la excrescencia de neuritas mediada por NCAM en la ausencia de HBP. Esto indica que la excrescencia de neuritas inducida por HBP es dependiente al menos de dos mecanismos: 1. dependiente de la activación de la señalización de NCAM-FGFR, cuando está comprendida la trans-interacción homófila de NCAM, y 2. independiente de la señalización de FGFR, cuando no hay trans-interacción homófila de NCAM.

Cultivo primario de neuronas CGN individuales Se preparan neuronas de granulo cerebelar (CGN) primarias de crías de rata del día 3-4 pos-natales de acuerdo con R0nn, L.C., Doherty, P., Holm, A., Berezin, V., Bock, E. (2000). J Neurochem. 75 (2 ): 665-71. Las células celebelares desasociadas se cultivan a 37°C y C02 al 5 % en medio Neurobasal A que contiene Hepes 20 mM, 100 U/ml de penicilina, 100 µg/ml de estreptomicina, 1% de glutamax y se complementan con B27 (todos de Gibco BRL) . Para probar el efecto de los péptidos, se siembran CGN en portaobjetos de cámara de tejido LabTech de ocho cavidades con una superficie de crecimiento de plástico Permanox (Nunc) a una densidad de 104 células/cavidad del medio Neurobasal-A que 100 U/ml de penicilina, 100 µg/ml de estreptomicina, 1 % de glutamax y se complementa con B27. Cuando se trata con heparinasa III (1 U/ml), la enzima se adiciona al medio de cultivo inmediatamente después de la colocación en placa. Las CGN se tratan con enzima durante 1 hora antes de la adición de diferentes concentraciones (1 µg/ml, 5 µg/ml, y 20 µg/ml) de los péptidos. Después de 24 horas de cultivo, las células se fijan con paraformaldehído, se inmunotiñen con anticuerpos primarios de ratón contra CD90 (Thy-1) (1:200) (Caltag Laboratories, USA) (células PC12-E2) o GAP-43 (1:1000) (Chemicon, USA) (CGNs) y anticuerpo secundario de cabra Alexa FluorMR488 contra IgG de ratón (1:1000) (Molecular Probes, Países Bajos) , y se mide la longitud de las neuritas por un método estereológico como se describe anteriormente (R0nn, L. C, Ralets, I., Hartz, B. P., Bech, M. , Berezin, A., Berezin, V., M0oller, A., Bock, E (2000). J Neurosci Methods. 100(1-2) , 25-32) . La figura 3 demuestra el efecto del HBP de NCAM (SEQ ID N0:1) en las CGN primarias individuales, cultivadas en cultivo en la presencia o ausencia de heparinasa III, la enzima, que se conoce que escinde específicamente sulfato de heparano principalmente en los disacáridos. El HBP inmovilizado en plástico de cultivo de tejido fue capaz de inducir excrescencia de neuritas en las CGN de una manera dependiente de la dosis con un efecto máximo de 680 % a una concentración de revestimiento de 5 µg/ml. El péptido M tiene efecto máximo de 400 % a una concentración de revestimiento de 5 µg/ml. El tratamiento con heparinasa III redujo el efecto de HBP, pero no el péptido M. Estos resultados sugieren que la actividad estimuladora de excrescencia de neuritas del HBP de NCAM es dependiente de dos objetivos que actúan al unísono, un agente sensible a sulfato de heparano y un agente insensible a sulfato de heparano. La Figura 4 demuestra el efecto neuritogénico de los péptidos: HBP (KGRDVILKKDVRFI) (SEQ ID NO: 1), péptido M (KGRDVILAKDVRVI) (SEQ ID NO: 2), péptido Mln (KGRDVILNNDVRFI) (SEQ ID NO: 3), y el péptido M3n (KGRDVILNNQVRFI) (SEQ ID NO: 4) en la presencia y ausencia de heparinasa III. Todos los péptidos tienen actividad neuritogénica muy fuerte reflejada por una longitud de neuritas incrementada 4-7 veces de las neuronas tratadas. La actividad de unión a heparina del HBP de NCAM (SEQ ID NO : 1) no es un pre-requisito para la estimulación de la excrescencia de neuritas por el péptido, sin embargo un potencial neuritogénico de la secuencia es más fuerte en la presencia de sulfato de heparano.

Ejemplo 3. Modulación de la motilidad de fibroblastos por HBP de NCAM Para la evaluación del efecto de los péptidos en la motilidad celular, se desalojaron cultivos confluentes de fibroblastos con o sin expresión de NCAM con 0.5 mg/ml de tripsina y EDTA 0.75 mM de solución salina de Puck modificada (Gibco BRL) , se sembraron en placas de cultivo de tejido de seis cavidades (Nunc) a una densidad de 4 x 103 células/cm2 y se cultivaron durante 24 horas a 37°C y a C02 al 5 % . Se evaluó la motilidad celular al asar por el uso de análisis de imágenes y grabación de vídeo en lapso de tiempo como se describe anteriormente (Walmod, et al. (1998). Cell Motil Cytoskeleton. 40(3), 220-37). De forma breve, cajas de cultivo de tejido selladas herméticamente con cinta adhesiva se colocan en una etapa termoestáticamente controlada (Lincam Scientific Instruments Ltd. , Reino Unido) montada en un microscopio invertido Nikon Diaphot 300 (Nikon, Dinamarca) . La temperatura dentro del incubador plexiglás montado alrededor de la etapa microscópica se mantiene a 37°C usando un ventilador de calentamiento termostáticamente controlado (DFA, Dinamarca) . Una etapa motorizada montada en microscopio, permite grabaciones simultáneas desde muchos campos microscópicos diferentes (50-100) . Las grabaciones de vídeo de células vivas se hacen usando una cámara de vídeo CCD de blanco y negro (Burle, Lancaster, PA) unida al microscopio. La adquisición y almacenamiento de imágenes de 768 x 576 pixeles, automatizada se realiza con óptica de contraste de fase usando un objetivo lOx a intervalos de 15 minutos durante 4 horas usando el software PRIMA (Protein Laboratory, Copenhagen, Dinamarca) . La evaluación de la motilidad y morfología celular se realiza usando el software de procesamiento de imágenes PRIMA. Las posiciones de las células individuales se determinan por marcación manual de los centros de los núcleos. El seguimiento de una célula individual se define como una secuencia de coordenadas de centros nucleares en diferentes puntos de tiempo. Los parámetros de la velocidad celular cuadrática media (St) , velocidad de difusión (R) e índice locomotor (Ll) se determinan de acuerdo a Walmod, et al. (2000) (Methods Mol. Biology. 161, 59-83) como se describe más adelante.

Análisis de motilidad celular El desplazamiento de una célula es la distancia euclideana entre dos puntos que corresponden a las posiciones inicial y final de la célula. Se realizaron determinaciones de posiciones de células con un periodo de tiempo constante, entre observaciones sucesivas. El desplazamiento celular medio cuadrático de una población celular después de un tiempo (ti) de observación se calculó como donde i es el número de observación (i=0, 1, 2, ...k) , k es el número total de observaciones menos uno, ti es el intervalo de tiempo entre la observación inicial (to) y el número de observación i (ti = i x t) , xm(ti ) e ym(ti) son las coordenadas del número celular m en el punto de tiempo ti, y N es el número total de células. La velocidad de difusión, R, se estimó al graficar de desplazamiento medio cuadrático, <d2>, contra tiempo contra ajuste subsiguiente a la curva a la ecuación: donde P es el tiempo de persistencia en la dirección (23) . La velocidad celular media, St, se calculó como la relación del desplazamiento medio de las células (<dt>) al intervalo de tiempo t. Esto se realizó de acuerdo a la ecuación: La longitud de ruta celular media (L) , para una muestra de una población de células en un tiempo dado de observación, se calculó como: El índice locomotor, Ll, se calculó como la relación de desplazamiento celular medio (<d>) y la longitud de ruta celular media: < d > LI = < L > Se usó Ll como una medida de la persistencia direccional de las células. Las células que se mueven en líneas perfectamente rectas tendrán una Ll de uno, en tanto que una persistencia direccional menor dará por resultado valores de Ll menores. Para células que se mueven al azar, se ha demostrado que Ll exhibe una correlación estadísticamente significativa al tiempo de persistencia de dirección (P) , un parámetro, que refleje el tiempo promedio entre cambios significativos en el movimiento direccional de una célula individual . De la Figura 5 parece que, los fibroblastos que expresan NCAM se mueven mucho más rápido que los fibroblastos de control (275%) como se refleja por una mayor velocidad de difusión (R) de los fibroblastos positivos a NCAM en comparación a los fibroblastos sin expresión de NCAM. El tratamiento tanto de los fibroblastos que expresan NCAM como de los fibroblastos de control con HBP da por resultado una inhibición clara de la motilidad celular como se refleja por una disminución pronunciada de R, St, y LJ. El péptido M (SEQ ID NO: 2) tiene un efecto inhibidor en el comportamiento móvil de los fibroblastos similar al efecto de HBP. Estos resultados indican que HBP inhibe la motilidad de los fibroblastos independiente de la expresión de NCAM y posiblemente independiente del enlace a heparina. Esto último soporta la sugerencia que la actividad estimuladora de la excrescencia de neuritas por HBP de NCAM contiene un componente insensible a sulfato de heparano.

Ejemplo 4. Análisis de secuencias peptídicas de la invención La Figura 6 presenta los resultados del análisis comparativo de las secuencias peptídicas de la invención (identificadas en SEQ ID NO: 1-7) y fragmentos de HBP de NCAM que se han descrito en la técnica. De la Figura aparece que 1) los fragmentos peptídicos de la presente solicitud, específicamente HBP, M, Mln, M3n, M4, M5 y M6 , son estimuladores muy potentes de la excrescencia de neuritas (tratamiento de neuronas con los péptidos in vitro conduce a más de 400 % de estimulación de excrescencia de neuritas en comparación a las neuronas de control (no tratadas) ) , en tanto que los fragmentos conocidos en la técnica de HBP de NCAM son mucho menos potentes (la estimulación reportada es menos de 50%) . De manera interesante, la mutación de los residuos de aminoácido reportó ser importante para la actividad biológica de HBP de NCAM que no tiene influencia en la actividad de los péptidos mutantes señala de esta manera la presencia de otra estructura en las secuencias peptídicas que es responsable de su actividad biológica tal como estimulación de excrescencia de neuritas y motilidad celular. La comparación de las secuencias de aminoácidos de 14 fragmentos peptídicos de aminoácidos de HBP de NCAM de la presente invención y un péptido de 14 aminoácidos de largo de la US 2003/0119186 revela una diferencia sustancial entre las secuencias de los fragmentos y la secuencia del péptido. El péptido tiene dos residuos de aminoácidos negativamente cargados, adicionales en el N-término y carece de dos residuos hidrófobos en el C-término. Otra secuencia reportó tener un efecto estimulador en la excrescencia de neuritas (Kallapur et al., 1992) (ver Figura 6) que es de 18 aminoácidos de largo y comprende ambos residuos hidrófobos C-terminales y residuos básicos adicionales. La secuencia es mucho menos potente como un estimulante que las secuencias de la solicitud. Tomando en cuenta el análisis anterior y el umbral de efecto estimulador de las secuencias peptídicas en la excrescencia de neuritas que es comparable con el efecto de las neurotrofinas que son estimuladores principales bien conocidos de la diferenciación de células neurales y la excrescencia de neuritas, los autores de la presente invención comparan la secuencia de los péptidos de la invención a las secuencias de las neurotrofinas, en particular a las secuencias de NGF, NT-3, NT-4/5 y BDNF, e identificaron de esta manera un nuevo motivo de enlace a receptor Trk de neurotrofina. Las neurotrofinas se enlazan a, y activan dos tipos de receptores: el receptor p75NTR, la activación del cual se asocia con inducción de apoptosis de células neuronales, y receptores de la familia Trk, la activación de los cuales se asocia con estimulación de excrescencia de neuritas. De manera sorprendente, las secuencias peptídicas de la invención parecieron tener muy alta homología a un fragmento de la secuencia de NGF que se localiza en la asa 1 de beta-horquilla de la proteína que comprende el motivo de aminoácido TDIKGKE, que se reporta que es crucial para la unión de NGF al receptor p75NTR (Williams et al, J Biol Chem 280:5862-69, 2005; Ibanez et al., Cell 69:329-341, 1992; He y García, Science 304:870-875, 2004), pero las secuencias peptídicas de la invención no comprenden el motivo de aminoácido RGE reportado como que sea importante para la unión de activación del receptor Trk (Williams et al, J Biol Chem 280:5862-69, 2005; WO2005025514) . Sin embargo, los autores de la presente invención muestran en la presente un enlace directo del péptido HBP al receptor Trk B y reivindican un nuevo motivo de aminoácido de enlace al receptor Trk que se describe en detalle anteriormente. El motivo de aminoácido descrito en la solicitud señala los residuos de aminoácidos de las secuencias peptídicas de la invención que son cruciales para su actividad neuritogénica. Por consiguiente, la secuencia del péptido HBP de NCAM de US 2003/0119186, que carece de un importante residuo hidrófobo C-terminal, no es capaz de estimular la excrescencia de neuritas al mismo grado como las secuencias peptídicas de la invención. Por otra parte, los residuos negativamente cargados en el N-término parecen ser no esenciales para el enlace a receptor Trk, puesto que la secuencia correspondiente de BDNF (SEQ ID NO: 11 de la presente solicitud) , que es un ligando natural de receptor Trk B, no tiene estos residuos. Esto último puede explicar un efecto disminuido de la secuencia de HBP de NCAM que comprende estos residuos (Kallapur et al., 1992) en la excrescencia de neuritas. De esta manera, los autores de la presente invención identifican y reivindican en la presente la fórmula de una secuencia peptídica que es más efectiva para el enlace del receptor Trk que da por resultado la activación del receptor.

Ejemplo 5. Unión de HBP de NCAM al receptor Trk B Se preparó el módulo Ig2 recombinante de NCAM usando un sistema de expresión de levadura de P. pastoris (Invitrogen, EUA) como se describe anteriormente (Kiselyov et al., Biol. Chem. 272, 10125-10134, 1997). El receptor de Trk B recombinante se compró de RD Systems (EUA) . El análisis de enlace se realizó usando el instrumento BlAcoreX (Biosensor AB) a 25°C usando sulfato de sodio 10 mM pH 7.4, NaCl 150 mM como amortiguador de corrida. La velocidad de flujo fue de 5 µl/min. Los datos se analizaron por ajuste a la curva no lineal usando el software del fabricante. El HBP o módulo Ig2 recombinante de NCAM se inmovilizaron en un chip sensor CM5 usando el equipo de acoplamiento de amina (Biosensor AB) como sigue: 1) las dos mitades del chip (designadas Fcl y Fc2) se activaron por 20 µl de solución de activación; 2) la proteína se inmovilizó en Fcl usando 12 µl de proteína 20 µg/ml en amortiguador de fosfato de sodio 10 mM, pH 6.0; 3) se bloquearon Fcl y Fc2 por 35 µl de solución de bloqueo. El enlace de Trk B al HBP inmovilizado o al módulo II de Ig de NCAM se estudió como sigue: se inyectó simultáneamente Trk B en Fcl (con el HBP inmovilizado o módulo II Ig de NCAM) y Fc2 (sin nada inmovilizado) . La curva que representa el enlace no específico del compuesto en la superficie de Fc2 se sustrajo de la curva que representa el enlace de Trk B a la proteína inmovilizada (HBP o el módulo Ig2 de NCAM) y la superficie de Fcl. La curva resultante que demuestra el enlace registrado se demuestra en la Figura 7. El HBP de NCAM se enlaza al receptor Trk B tanto como la secuencia peptídica aislada como la secuencia integrada del módulo Ig2 de NCAM con KD~10"8-10"7 M y KD~10"9-10"8 M, de forma correspondiente. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la presente invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención.

Claims (66)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Secuencia peptídica contigua aislada, la secuencia peptídica definida por la fórmula (I) x0-x1-x2-x3-x4-x5-x6-x7-x8-x9-x10-x9-x9-x10-x11-x12-x13 caracterizada porque x0 es K, R, N, A o está ausente Xi es G, x2 es un residuo básico o hidrófobo de aminoácido, x3 es E o D, x, es V x5 es un residuo hidrófobo de aminoácido, x6 V o L x7 es cualquier residuo de aminoácido x8 es cualquier residuo de aminoácido x9 es E, D, K o Q x10 es V o L x.lx es cualquier residuo de aminoácido x12 es un residuo hidrófobo de aminoácido o T, x13 es I, N, S, G, A o está ausente.
2. 2. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque X3 es Q, N o T.
3. 3. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque X5 es T o E.
4. 4. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque x7 y x8 se seleccionan independientemente de K, R, N, I, L, G, E o A.
5. 5. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 2, 3, o 4, caracterizada porque x7 es L.
6. 6. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1, 3 y 5, caracterizada porque x8 es G.
7. 7. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1, 3 y 5, caracterizada porque x8 es E.
8. 8. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque x11 es R, K, L, N o P.
9. 9. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque X12 es un residuo hidrófobo de aminoácido y se selecciona de F, V, I, T o A.
10. 10. Secuencia peptídica contigua aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la secuencia peptídica se define por la fórmula (II) X0-G-x2-D/E-V-I-L-x7-x8-x9-V-x11-x12-x13 en donde x0 es un residuo de aminoácidos seleccionado de K, R, A o N x2 es un residuo de aminoácidos seleccionado de R o L. x7 es un residuo de aminoácidos seleccionado de K, A, N o L. x8 es un residuo de aminoácidos seleccionado de K, N o L. x9 es un residuo de aminoácidos seleccionado de D o Q. xn es un residuo de aminoácidos seleccionado de R o x12 es un residuo de aminoácidos seleccionado de V o x13 es un residuo de aminoácidos seleccionado de I, L o V.
11. 11. Secuencia peptídica contigua aislada de conformidad con la reivindicación 1, la secuencia peptídica se define por la fórmula (III) X0-G-x2-x3-V-x5-V-L-G/E-x9-V/L-x10-x11-x12-x13 caracterizada porque x0, x2, x3, x5, x9, x10, son como se definen en la reivindicación 1, xn es N, K o P, X12 es I, T, A o V y X13 es S, A, N o G.
12. 12. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque x3 es Q.
13. 13. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 u 11, caracterizada porque xu es R, N, P o L.
14. 14. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es KGRDVILKKDVRFI (SEQ ID NO:l).
15. 15. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es KGRDVILAKDVRVI (SEQ ID NO: 2) .
16. 16. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es KGRDVILNNDVRFI (SEQ ID NO : 3 ) .
17. 17. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es KGRDVILNNQVRFI (SEQ ID NO:4).
18. 18. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es AGRDVILNNDVRFI (SEQ ID NO: 5) .
19. 19. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es NGRDVILKKDVLFI (SEQ ID NO: 6).
20. 20. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1 o 10, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es NGLDVILIIDVRFI (SEQ ID NO: 7) .
21. 21. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1, 5, 6 u 11, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es KGKEVMVLGEVNIN (SEQ ID NO: 8).
22. 22. Secuencia peptídica aislada de conformidad con las reivindicaciones 1, 2, 3, 5, 6, u 11, caracterizada porque la secuencia de aminoácidos es RGHQVTVLGEIKTG (SEQ ID NO : 9 ) .
23. 23. Péptido de conformidad con las reivindicaciones 1, 2, 3, 5, 6, u 11, caracterizado porque la secuencia de aminoácidos es RGREVEVLGEVPAA (SEQ ID NO: 10).
24. 24. Péptido de conformidad con las reivindicaciones 1, 2, 3, 5, 6, u 11, caracterizado porque la secuencia de aminoácidos es SGGTVTVLEKVPVS (SEQ ID NO: 11).
25. 25. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la secuencia peptídica es un fragmento, variante u homólogo de cualquiera de las secuencias de SEQ ID NOS: 1-11.
26. 26. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-25, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz del enlace a un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk que comprende Trk A, Trk B y Trk C.
27. 27. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el receptor es trk A o Trk B.
28. 28. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de estimular la diferenciación de células neuronales.
29. 29. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de estimular la excrescencia de neuritas.
30. 30. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de estimular la supervivencia de células neuronales.
31. 31. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de modular la motilidad celular.
32. 32. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualguiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de inhibir la motilidad celular.
33. 33. Secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 anteriores, caracterizada porque la secuencia peptídica es capaz de estimular la plasticidad neural asociada con aprendizaje y/o memoria .
34. 34. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la secuencia peptídica es un fragmento peptídico de una molécula de adhesión a células neurales (NCAM) .
35. 35. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque la secuencia peptídica es un fragmento peptídico de factor de crecimiento de nervios (NGF) .
36. 36. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque la secuencia peptídica es un fragmento peptídico de neurotrofina-3 (NT-3).
37. 37. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada porque el péptido es un fragmento peptídico de neurotrofina-4/5 (NT-4/5).
38. 38. Secuencia peptídica aislada de conformidad con la reivindicación 24, caracterizada porque el péptido es un fragmento peptídico de factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF) .
39. 39. Compuesto, caracterizado porque comprende una secuencia peptídica aislada de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-38.
40. 40. Compuesto de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque la secuencia peptídica se formula como monómero que consiste de la copia individual de una secuencia peptídica individual .
41. 41. Compuesto de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque la secuencia peptídica se formula como un multímero que consiste de dos o más copias de una secuencia peptídica individual, tal como un dímero o tetrámero de una secuencia peptídica individual .
42. 42. Compuesto de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el multímero es un dendrímero de dos o más secuencias peptídicas individuales.
43. 43. Compuesto de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el multímero es un dímero que comprende dos secuencias peptídicas idénticas.
44. 44. Compuesto de conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque el multímero es un dímero que comprende dos secuencias peptídicas diferentes.
45. 45. Uso de una secuencia peptídica individual de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-38 o un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 39-44 como un medicamento.
46. 46. Uso de conformidad la reivindicación 45, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición o enfermedad, en donde es una parte del tratamiento la estimulación de la diferenciación de células neurales, la supervivencia de células neurales, la plasticidad de células neurales, la estimulación del aprendizaje y/o memoria, la modulación de la motilidad celular, o la modulación de la actividad de un receptor de neurotrofina de los receptores de la familia Trk.
47. 47. Uso de conformidad con la reivindicación 46, en donde la condición o enfermedad es una condición o enfermedad del sistema nerviosos central y periférico.
48. 48. Uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde la condición o enfermedad se selecciona de daño pos-operativo a nervios, daño traumático a nervios, mielinación deteriorada de fibras de nervios, daño pos-isquémico, tal como después de ataque, degeneración de nervios asociada con diabetes mellitus, trastornos que afectan el reloj circadiano o transmisión neuro-muscular .
49. 49. Uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición o enfermedad seleccionada de condiciones o enfermedades de los músculos que incluyen condiciones con función deteriorada de conexiones neuro-musculares, tal como después de transplante de órganos, o tal como trastornos genéticos o traumáticos de músculos atrofíeos.
50. 50. Uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición o enfermedad asociada con neoangiogénesis, remodelado de tejido y/o motilidad incrementada de las células.
51. 51. Uso de conformidad con la reivindicación 50, en donde la enfermedad es cáncer.
52. 52. Uso de conformidad con la reivindicación 51, en donde el cáncer es cualquier cáncer que comprende neoangiogénesis .
53. 53. Uso de conformidad con la reivindicación 51, en donde el cáncer es un cáncer del sistema neural.
54. 54. Uso de conformidad con la reivindicación 46, en donde la condición o enfermedad es una capacidad deteriorada para aprender y/o memoria deteriorada.
55. 55. Uso de conformidad con la reivindicación 46 o 54, en donde la condición o enfermedad es enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington o demencia tal como demencia por múltiples infartos.
56. 56. Uso de conformidad con la reivindicación 46, en donde la condición o enfermedad es una enfermedad mental, tal como un trastorno de pensamiento y humor, trastornos neuropsiquiátricos que incluyen trastornos bipolares (BPD) , trastornos afectivos unipolares genéticamente relacionados, trastornos de decepción, parafrenia, psicosis paranoide, esquizofrenia, trastorno esquizotípico, trastorno esquizoafectivo, trastorno bipolaresquizoafectivo y afectivo unipolar genéticamente relacionados, psicosis psicogenética, catatonía, trastornos afectivos unipolares genéticamente relacionados y bipolares periódicos, psicosis cicloide, trastorno de personalidad esquizoide, trastorno de personalidad paranoide, trastornos afectivos unipolares genéticamente relacionados y bipolares relacionados a trastornos afectivos y tipo secundarios de trastorno afectivo unipolar.
57. 57. Uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición o enfermedad asociada con daños corporales debido a consumo de alcohol.
58. 58. Uso de conformidad con la reivindicación 45, en donde el medicamento es para el tratamiento de enfermedades por priones.
59. 59. Uso de una secuencia peptídica individual según cualquiera de las reivindicaciones 1-38 o un compuesto de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 39-44 para la elaboración de un medicamento, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición o enfermedad como se define en cualquiera de las reivindicaciones 46-58.
60. 60. Medicamento, caracterizado porque comprende una secuencia peptídica individual de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 1-38 o un compuesto de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 39-44.
61. 61. Composición farmacéutica, caracterizada porque comprende una cantidad efectiva de un medicamento de acuerdo a la reivindicación 60.
62. 62. Método de tratamiento, caracterizado porque comprende administrar un individuo en necesidad de una cantidad efectiva de una secuencia peptídica de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 1-38, compuesto con cualquiera de las reivindicaciones 39-44, medicamento de acuerdo a la reivindicación 60 y/o composición farmacéutica de acuerdo a la reivindicación 61.
63. 63. Método para estimular la diferenciación de células neurales, supervivencia de células neurales, plasticidad de células neurales y/o para modular la motilidad celular, el método está caracterizado porque comprende usar una secuencia peptídica individual de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 1-38, un compuesto de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 39-44, medicamento de acuerdo a la reivindicación 60 o composición farmacéutica de acuerdo a la reivindicación 61.
64. 64. Uso de una secuencia peptídica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25 para la producción de un anticuerpo.
65. 65. Anticuerpo capaz de reconocer y enlazarse a un epítopo, caracterizado porque comprende una secuencia peptídica de conformidad con caulquiera de las reivindicaciones 1 a 25.
66. 66. Composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un anticuerpo de acuerdo a la reivindicación 65.