MXPA06006291A

MXPA06006291A - Composiciones anti-cancer sinergisticas.

Info

Publication number: MXPA06006291A
Application number: MXPA06006291A
Authority: MX
Inventors: Evan M Hersh
Original assignee: Univ Arizona
Priority date: 2003-12-08
Filing date: 2004-12-08
Publication date: 2006-08-23
Also published as: AU2004296863B2; BRPI0416870A; IL175665A0; WO2005055952A2; US20050176696A1; EP1691801A2; NZ547252A; ZA200604579B; JP2007513202A; KR20060103947A; WO2005055952A3; AU2004296863A1; US20080146653A1; US20080153891A1; EP1691801A4; CA2548491A1; CN1889943A

Abstract

La presente invencion proporciona composiciones utiles para tratar cancer. Las composiciones incluyen una combinacion sinergistica de un oxidante mitocondrial de union a tiol antineoplastico con un agente de union de acido nucleico antineoplastico, un analogo base de antimetabolito antineoplastico, o docetaxel. Tambien se proporcionan metodos para ensayar los efectos sinergisticos de las combinaciones y metodos para tratar cancer utilizando las combinaciones sinergisticas.

Description

COMPOSICIONES ANTI-CANCER SINERGISTICAS REFERENCIA CRUZADA CON SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama la prioridad de la Solicitud de Patente Provisional de EE. UU. número 60/528, 1 81 , presentada el 8 de Diciembre de 2003, la descripción de la cual se incorpora en la presente para referencia en su totalidad para todos los propósitos.

DECLARACIÓN CONSIDERANDO INVESTIGACIÓN FEDERALMENTE PATROCINADA Esta invención se hace con el soporte gubernamental bajo CA 17094 conferida por el Instituto de Cáncer Nacional, Institutos Nacionales de Salud. El gobierno tiene ciertos derechos en la invención.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a métodos y composiciones para tratar cáncer utilizando una combinación sinergística de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico seleccionado de un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico, un análogo base de antimetabolito antineoplástico, y docetaxel.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Es difícil predecir el efecto de muchas terapias de combinación. Por ejemplo, algunos fármacos interactúan entre sí para reducir la efectividad terapéutica o causar efectos secundarios indeseados. Estos fármacos se categorizan típicamente como teniendo un efecto antagonístico. Otras combinaciones de fármacos manifiestan su efectividad terapéutica como la suma de fármacos individuales. Estas combinaciones se categorizan como teniendo un efecto aditivo. Aún otras combinaciones de fármaco resultan en un índice terapéutico que es mayor que la suma de fármacos individuales. Estas se categorizan como teniendo un efecto sinergístico. Terapias de combinación teniendo un efecto sinergístico son altamente deseables por muchas razones. Por ejemplo, cada componente en la terapia de combinación sinergística puede utilizarse en una cantidad inferior a la cantidad terapéutica de cada fármaco individual en monoterapia (es decir, administración de fármaco único). Además, el riesgo y/o la severidad de los efectos secundarios pueden reducirse de manera significativa al reducir la cantidad de cada fármaco. Además, la terapia de combinación puede incrementar significativamente la efectividad total de tratamiento. Desafortunadamente, sin embargo, el descubrimiento de combinaciones de fármacos con efecío sinergístico es grandemente empírico. Las acciones sinergísticas de terapia de combinación son particularmente útiles en tratamientos donde los efectos secundarios son extremos o severos y/o donde la eficacia de monoterapia es menor que la deseable. Por ejemplo, el tratamiento de cáncer con frecuencia resulta en náuseas, vómito, supresión de médula ósea, y otra incomodidad severa para el paciente. De manera similar, el tratamiento de infecciones virales, tal como infección de VI H, también resulta en uno o más de estos tipos de efectos secundarios. Además, la tasa de eficacia del tratamiento de la infección de VIH o cáncer es menor al ideal. Además, el desarrollo de resistencia se ha vuelto recientemente un mayor interés en el tratamiento de infecciones virales, tales como infecciones de HBV y VIH, así como también quimioterapias existentes. La resistencia usualmente ocurre cuando los fármacos que se utilizan no son lo suficientemente potentes para detener completamente la réplica del virus. Si el virus puede reproducirse del todo en la presencia de fármacos, tiene la oportunidad de mutar hasta que encuentra uno que le permite reproducirse a pesar de los fármacos. Una vez que ocurre la mutación, crece entonces in verificar y tan pronto sea la cepa dominante del virus en el individuo. El fármaco se vuelve progresivamente más débil contra la nueva cepa. También existe un interés creciente acerca de resistencia cruzada. La resistencia cruzada ocurre cuando las mutaciones causando resistencia a un fármaco también causan resistencia a otro. Varios estudios han mostrado la combinación de dos fármacos retrasa el desarrollo de resistencia uno o ambos fármacos en comparación con cuando cualquier fármaco se utiliza solo. Otros estudios sugieren que combinaciones de tres fármacos extienden este beneficio aún más. Como un resultado, se cree que la mejor manera de prevenir, o al menos retrasar la resistencia es utilizar terapias de combinación de múltiples fármacos. Aunque algunas terapias de combinación están actualmente disponibles para tratar cáncer e infecciones virales, aún existe una necesidad de terapias de combinación adicionales para infecciones virales y cáncer. La presente invención resuelve estos y otros problemas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Se ha descrito que, sorprendentemente, la combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico con un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico, un análogo base de antimetabolito antineoplástico, o docetaxel, es sinergística cuando se utiliza para tratar individuos con cáncer. En un primer aspecto, la presente invención proporciona un método para tratar cáncer en un humano en necesidad de tal tratamiento. El método incluye administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición. La composición incluye un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico. La cantidad proporciona un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para tratar cáncer en un humano en necesidad de tal tratamiento. El método incluye administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición. La composición incluye un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un análogo base de antimetabolito antineoplástico. La cantidad proporciona un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para tratar cáncer en un humano en necesidad de tal tratamiento. El método incluye administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición. La composición incluye un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un docetales. La cantidad proporciona un efecto citotóxico terapéutico sinergístico.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIG. 1 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con cisplatina, decarbazina (DTIC), melfalan o taxotero en células A375. La FIG. 2 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con cisplatina, dacarbazina (DTIC), melfalan o taxotero en células 8226/s. La FIG. 3 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con citarabina, 5-fluorouracil o gemcitabina en células A375. La FIG. 4 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con citarabina, 5- fluorouracil o gemcitabina en células 8226/s. La FIG. 5 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con metotrexato o doxorubicina en células A375. La FIG. 6 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con dexametasona, doxorubicina, metotrexato o paclitaxel en células 8226/s. La FIG. 7 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con dexametasona, paclitaxel, o vinorelbina en células A375. La FIG. 8 es una representación de datos de índice de combinación para imexon en combinación con vinorelbina en células 8226/s. La FIG. 9 es una representación de los efectos de tumor anti-pancreático de imexon en combinación con gemcitabina en ratones. La FIG. 10 es una representación de los efectos de antileucemia de imexon en combinación con citarabina en ratones. La FIG. 1 1 es una representación del efecto antagonístico de imexon en combinación con el irinotecan inhibidor de topoisomerasa en Células de Mieloma Múltiple Humanas (8226/s) in vitro. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN I. Definiciones Como se utiliza en la presente, el término "cáncer" se refiere a todos tipos de cáncer, neoplasma o tumores malignos encontrados en mamíferos, incluyendo leucemia, carcinomas y sarcomas. Cánceres ejemplificativos incluyen cáncer de cerebro, mama, cervical, de colón, cabeza & cuello, hígado, riñon, pulmón, pulmón de célula no pequeña, melanoma, mesotelioma, ovárico, sarcoma, estomacal, útero y Meduloblastoma. Los ejemplos adicionales incluyen, Enfermedad de Hodgkin, Linfoma de No Hodgkin, mieloma múltiple, neuroblastoma, cáncer ovárico, rabdomiosarcoma, trombocitosis primaria, macroglobulinemia primaria, tumores cerebrales primarios, cáncer, insulanoma pancreático maligno, carcinoide maligno, cáncer de vejiga urinaria, lesiones de piel premalignas, cáncer testicular, linfomas, cáncer tiroidal, neuroblastoma, cáncer esofágico, cáncer de tracto genitourinario, hipercalcemia maligna, cáncer endométrico, cáncer córtico adrenal, neoplasmas del páncreas exocrino y endocrino, y cáncer prostático. El término "leucemia" se refiere ampliamente a enfermedades malignas, progresivas de los órganos formadores de sangre y se caracteriza generalmente por una proliferación distorsionada y desarrollo de leucocitos y sus precursores en la sangre y médula ósea. La leucemia generalmente se clasifica clínicamente en la base de (1 ) la duración y carácter de la enfermedad, aguda o crónica; (2) el tipo de célula incluido; mieloide (mielógeno), linfoide (linfógeno), o monocítico; y (3) el incremento o no incremento en el número de células anormales en la sangre leucémica o aleucémica (subleucémica). La modelo de leucemia P38ß se acepta ampliamente como siendo predictivo de actividad antileucémica in vivo. Se cree que un compuesto que prueba positivo en el ensayo P38ß generalmente mostrará algún nivel de actividad anti-leucémica in vivo sin considerar el tipo de leucemia que se trata. De acuerdo con lo anterior, la presente invención incluye un método para tratar leucemia y, preferentemente, un método para tratar leucemia no linfocítica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia granulocítica aguda, leucemia granulocítica crónica, leucemia promileocítica aguda, leucemia de célula T adulta, leucemia aleucémica, una leucemia leucocitémica, leucemia basofílica, leucemia de blastocito, leucemia bovina, leucemia mielocítica crónica, cutis de leucemia, leucemia embriónica, leucemia eosinofílica, leucemia de Gross, leucemia de célula pilosa, leucemia hemoblástica, leucemia hemocitoblástica, leucemia histiocítica, leucemia de célula germinal, leucemia monocítica aguda, leucemia leucopénica, leucemia linfática, leucemia linfoblástica, leucemia linfocítica, leucemia linfógena, leucemia linfoide, leucemia de célula de linfosarcoma, leucemia de mastocito, leucemia megacariocítica, leucemia micromieloblástica, leucemia monocítica, leucemia mieloblástica, leucemia mielocítica, leucemia granulocítica de mieloide, leucemia mielomonocítica, leucemia Naegeli, leucemia de célula de plasma, mieloma múltiple, leucemia plasmacítica, leucemia primielocítica, leucemia de célula Rieder, leucemia de Schilling, leucemia de célula germinal, leucemia subleucémica, y leucemia de célula sin diferenciar.

El término "sarcoma" generalmente se refiere a un tumor que se hace de una substancia similar al tejido conector embriónico y se compone generalmente de células cercanamente empacadas en una substancia homogénea o fibrilar. Los sarcomas que pueden tratarse con una combinación de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente anticáncer incluyen un condrosarcoma, fibrosarcoma, linfosarcoma, melanosarcoma, mixosarcoma, osteosarcoma, sarcoma de Abemethy, sarcoma adiposo, liposarcoma, sarcoma de parte suave alveolar, sarcoma ameloblástico, sarcoma botrioide, sarcoma cloroma, carcinoma corio, sarcoma embriónico, sarcoma de tumor de Wilm, sarcoma endométrico, sarcoma estromal, sarcoma de Ewing, sarcoma facial, sarcroma fibroblástico, sarcoma de célula gigante, sarcoma de granulotico, sarcoma de Hodgkin, sarcoma hemorrágico pigmentado múltiple idiopático, sarcoma inmunoblástico de células B, linfoma, sarcoma inmunoblástico de células T, sarcoma de Jensen, sarcoma de Kaposi, sarcoma de célula Kupffer, angiosarcoma, leucosarcoma, sarcoma mesenquimoma maligna, sarcoma parosteal, sarcoma reticulocítica, sarcoma Rous, sarcoma serocística, sarcona sinovial, y sarcoma telangiectáltico. El término "melanoma" se toma por significa un tumor originándose del sistema melanocítico de la piel y otros órganos. Los melanomas que pueden tratarse con una combinación de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente anticáncer incluyen, por ejemplo, melanoma acral-lentigino, melanoma amelanótico, melanoma juvenil benigno, melanoma de Cloudman, melanoma S91 , melanoma Harding-Passey, melanoma juvenil, melanoma maligno lentigo, melanoma maligno, melanoma nodular, melanoma subungal, y melanoma de difusión superficial. El término "carcinoma" se refiere a un nuevo crecimiento maligno formado de células epiteliales para infiltrar los tejidos circundantes y dan origen a metástasis. Los carcinomas ejemplificativos que pueden tratarse con una combinación de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente anticáncer incluyen, por ejemplo, carcinoma acinar, carcinoma acinoso, carcinoma adenocístico, carcinoma cístico adenoide, carcinoma adenomatoso, carcinoma de corteza adrenal, carcinoma alveolar, carcinoma de célula alveolar, carcinoma de célula basal, carcinoma basocelular, carcinoma basaloide, carcinoma de célula basoescamosa, carcinoma bronquioalveolar, carcinoma broquiolar, carcinoma broncogénico, carcinoma cerebriforme, carcinoma colangiocelular, carcinoma croriónico, carcinoma coloidal, carcinoma comedo, carcinoma hábeas, carcinoma cibriforme, carcinoma en coraza, carcinoma cutáneo, carcinoma cilindrico, carcinoma de célula cilindrico, carcinoma de ducto, carcinoma duro, carcinoma embriónico, carcinoma encefaloide, carcinoma epiermoide, carcinoma de adenoides epiteliales, carcinoma exofítico, carcinoma ex úlcera, carcinoma fibroso, carcinoma gelatiniforni, carcinoma gelatinoso, carcinoma de célula gigante, carcinoma gigantocelular, carcinoma glandular, carcinomade célula granulosa, carcinoma de matriz piloso, carcinoma hematoide, carcinoma hepatocelular, carcinoma de célula Hurthle, carcinoma hialina, carcinoma hipemefroide, carcinoma embriónico infantil, carcinoma in situ, carcinoma intraepidérmico, carcinoma intraepitelial, carcinoma de Krompecher, carcinoma de célula Kulchitzky, carcinoma de célula larga, carcinoma lenticular, carcinoma lipomatoso, carcinoma línfoepitelial, carcinoma medilar, carcinoma melanótico, carcinoma mol, carcinoma mucinoso, carcinoma muciparo, carcinoma mucocelular, carcinoma mucoepidermoide, carcinoma mucoso, carcinoma de moco, carcinoma mixomatodos, carcinoma nasofaringeal, carcinoma de célula en grano de avena, carcinoma osificante, carcinoma de osteoide, carcinoma papilar, carcinoma periportal, carcinoma preinvasivo, carcinoma de célula espinosa, carcinoma pultácea, carcinoma de célula renal de riñon, carcinoma de célula de reserva, carcinoma sarcomátodos, carcinoma de esqeideriano, carcinoma cirroso, carcinoma escroti, carcinoma de célula de anillo de sello, carcinoma simple, carcinoma de célula pequeña, carcinoma solanoide, carcinoma de célula esferoidal, carcinoma de célula de husillo, carcinoma esponjosa, carcinoma escamosa, carcinoma de célula escamosa, carcinoma de cadena, carcinoma telangiectatico, telangiectodos de carcinoma, carcinoma de célula transitoria, tuberoso de carcinoma, carcinoma de tuberoso, carcinoma verroca, y carcinoma velloso. El término "antineoplástico" significa inhibir o prevenir el crecimiento de cáncer. "Inhibición o prevención del crecimiento de cáncer" incluye reducir el crecimiento de cáncer relativo a la ausencia de un tratamiento o terapia dada. Los ensayos citotóxicos útiles para determinar si un compuesto es antineoplástico se tratan abajo (ver Assays for Testing the Anticancer Synergistic Activity of a Combination of an Antineoplastic Thiol-binding Mitochondrial Oxidant and a Second Antineoplastic Agent). Como se utiliza en la presente "terapia de combinación" o "terapia adjunta" significa que el paciente en necesidad del fármaco se trata o dando otro fármaco para la enfermedad junto con oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico. Esta terapia de combinación puede ser terapia secuencial donde el paciente se trata primero con un fármaco y después el otro o los dos fármacos se dan simultáneamente. "Imexon" se refiere a 4-imino-1 ,3-diazabiciclo[3.1.0]-hexan-2-ona no substituido, o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. "Paciente" se refiere a un sujeto de mamífero, incluyendo humano. Un "efecto citotóxico terapéutico sinergístico" como se utiliza en la presente, significa que una combinación dada de al menos 2 compuestos muestra sinergia cuando se prueba en un ensayo citotóxico (ver Assays for Testing the Anticancer Synergistic Activity of a Combination of an Antineoplastic Thiol-binding Mitochondrial Oxidant and a Second Antineoplastic Agent, abajo). La sinergia se ensaya utilizando el principio de efecto medio (Chou, eí al., Adv Enzyme Regul 22:27-55 (1984)). Este método se basa en cinéticas Michaelis-Menton y reduce los efectos de combinación a un indicador numérico, el índice de combinación (C. I.). Donde el índice de combinación es menor a 1 , se indica sinergismo. Donde el índice de combinación es igual a 1 , se indica suma (también comúnmente referida como adición). Donde el índice de combinación es mayor a 1 , se indica antagonismo. El término "alquilo" por si mismo o como parte de otro substituyente, significa, al menos que se establezca de otra manera, una cadena recta o ramificada, o radical de hidrocarburo cíclico, o combinación del mismo, que puede ser completamente saturado, mono- o poliinsaturado y puede incluir radicales di- y multivalentes, teniendo el número de átomos de carbono designado (es decir, C-?-C10 significa uno a diez carbonos). Ejemplos de radicales de hidrocarburo saturados incluyen, pero no se limitan a, grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, ciciohexilo, (cilohexil)metilo, ciclopropilmetilo, homólogos e isómeros de, por ejemplo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo y lo similar. Un grupo alquilo insaturado es uno teniendo uno o más enlaces dobles o enlaces triples. Ejemplos de grupos alquilo insaturados incluyen, pero no se limitan a, vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1 ,4-pentadienilo), etinilo, 1 - y 3-propinilo, 3-butinilo, y los homólogos más altos e isómeros. El término "alquilo" al menos observado de otra manera, también significa incluir aquellos derivados de alquilo definidos en más detalle abajo, tal como "heteroalquilo". Los grupos alquilo que se limitan a grupos hidrocarburo se denominan "homoalquilo".

El término "alquileno" por si mismo o como parte de otro substituyente significa un radical divalente derivado de un alcano, como se ejemplifica, pero no se limita por, -CH2CH2CH2CH2-, e incluye además aquellos grupos descritos abajo como "heteroalquileno". Típicamente, un grupo alquilo (o alquileno) tendrá de 1 a 24 átomos de carbono, con aquellos grupos teniendo 10 o menos átomos de carbono siendo preferidos en la presente invención. Un "alquilo inferior" o "alquileno inferior" es un grupo alquilo o alquileno de cadena más corta, generalmente teniendo ocho o menos átomos de carbono. Los términos "alcoxi", "alquilamino" y "alquiltio" (o tioalcoxi) se utilizan en su sentido convencional, y se refieren a aquellos grupos alquilo unidos al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno, un grupo amino, o un átomo de azufre, respectivamente. El término "heteroalquilo" por si mismo o en combinación con otro término, significa, al menos que se establezca de otra manera, una cadena recta o ramificada estable, o radical de hidrocarburo cíclico, o combinaciones de los mismos, consistiendo del número establecido de átomos de carbono y al menos un heteroátomo seleccionado del grupo consistiendo de O, N, Si y S, y en donde los átomos de nitrógeno y azufre pueden oxidarse opcionalmente y el heteroátomo de nitrógeno puede cuaternizarse opcionalmente. El(los) heteroátomo(s) O, N y S y Si puede(n) colocarse en cualquier posición interior del grupo heteroalquilo o en la posición en la cual el grupo alquilo se une al resto de la molécula. Ejemplos incluyen, pero no se limitan a, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH=N-OCH3 y -CH=CH-N(CH3)-CH3. Hasta dos heteroátomos pueden ser consecutivos, tales como, por ejemplo, -CH2-NH-OCH3 y -CH2-O-Si(CH3)3. De manera similar, el término "heteroalquileno" por si mismo o como parte de otro substituyente significa un radical divalente derivado de heteroalquilo, como se ejemplifica pero no se limita por, -CH2-CH2-S-CH2-CH2 y -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-. Para grupos heteroalquileno, los heteroátomos pueden ocupar también cualquiera o ambos de las terminales de cadena (por ejemplo, alquilenooxi, alquilenodioxi, alquilenoamino, alqulenodiamino, y lo similar). Aún además, para grupos de enlace alquileno y heteroalquileno, sin orientación del grupo de enlace se implica por la dirección en la cual la fórmula del grupo de enlace se escribe. Por ejemplo, la fórmula -C(O)2R' representa tanto -C(O)2R'-y -R'C(O)2-. Los términos "cicloalquilo" y "heterocicioalquilo", por si mismos o en combinación con otros términos, representan, al menos que se establezca de otra manera, versiones cíclicas de "alquilo" y "heteroalquilo", respectivamente. Adicionalmente, para heterocicloalquilo, un heteroátomo puede ocupar la posición en la cual el heterociclo se une al resto de la molécula. Ejemplos de cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopentilo, ciciohexilo, 1 -ciciohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicioheptilo y lo similar. Ejemplos de heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, 1 -(1 , 2,5,6-tetrahidropiridil), 1 -piperidinil, 2-piperidinil, 3-piperidinil, 4-morfolinil, 3-morfolinil, 3-tiomorfolinil, tetrahidrofuran-2-il, tetrahidrofuran-3-il, tetrahidrotien-2-il, tetráhidrotien-3-il, 1 -piperazinil, 2-piperazinil y lo similar. Los términos "halo" o "halógeno", por si mismos o como parte de otro substituyente, significan, al menos que se establezca de otra manera, un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo. Adicionalmente, los términos tales como "haloalquilo", significan incluir monohaloalquilo y polihaloalquilo. Por ejemplo, el término "haloíC^ C )alquilo" se entiende que incluye, pero no se limita a, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropiio, y lo similar. El término "arilo" significa, al menos que se establezca de otra manera, un substituyente hidrocarburo aromático, poliinsaturado que puede ser un anillo único o múltiples anillos (preferentemente de 1 a 3 anillos) que se fusionan juntos o enlazan covalentemente. El término "heteroarilo" se refiere a grupos arilo (o anillos) que contienen de uno a cuatro heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde los átomos de azufre y nitrógeno se oxidan opcionalmente, y el(los) átomo(s) de nitrógeno se cuaterniza(n) opcionalmente. Un grupo heteroarilo puede unirse al resto de la molécula a través de un heteroátomo. Ejemplos no limitantes de grupos arilo y heteroarilo incluyen fenilo, 1 -naftilo, 2-naftilo, 4-bifenilo, 1 -pirroliio, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 3-pirazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, pirazinilo, 2- oxazoiilo, 4-oxazolilo, 2-fenil-4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4- isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, 5-benzotiazolilo, purinilo, 2-benzimidazolilo, 5-indolilo, 5-isoquinolilo, 2-quinoxalinilo, 3-quinolilo, y 6-quinolilo. Los substituyentes para cada uno de los sistemas de anillo arilo y heteroarilo arriba observados se seleccionan del grupo de substituyentes aceptables descritos abajo. Para brevedad, el término "arilo" cuando se una en combinación con otros términos (por ejemplo, arilooxi, ariltioxi, arilalquilo) incluyen tanto anillo de arilo y heteroarilo como se define arriba. De esta manera, el término "ariloalquilo" significa que incluyen aquellos radicales en los cuales el grupo arilo se une a un grupo alquilo (por ejemplo, benzilo, fenetilo, piridilmetilo y lo similar) incluyendo aquellos grupos alquilo en los cuales un átomo de carbono (por ejemplo, un grupo metileno) se ha reemplazado mediante, por ejemplo, un átomo de oxígeno (por ejemplo, fenoximetilo, 2-piridoiloximetilo, 3-(1 -naftilooxi)propil, y lo similar). El término "oxo" como se utiliza en la presente significa un oxígeno que se enlaza doble a un átomo de carbono. Cada uno de los términos anteriores (por ejemplo, "alquilo", "heteroalquilo", "arilo" y "heteroarilo") se entiende que incluyen tanto formas substituidas como insubstituidas del radical indicado. Los substituyentes preferidos para cada tipo de radical se proporcionan abajo.

Los substituyentes para los radicales alquilo y heteroalquilo (incluyendo aquellos grupos con frecuencia referidos como alquileno, alquenilo, heteroalquileno, heteroalquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, y heterocicloalquenilo) puede ser uno o más de una variedad de grupos seleccionados, pero no limitados a: -OR\ =O, =NR\ =N-OR\ -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR'R"R'", -OC(O)R', -C(O)R\ -CO2R\ -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR,,R,,, 1 -NR"C(O)2R', -NR-C(NR,R"R,")=NR"", -NR-C(NR,R")=NR", ) -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN y -NO2 en un número que varía de cero a (2m'+1 ), donde m' es el número total de átomos de carbono en tal radical. R', R", R'" y R"" cada uno preferentemente se refiere de manera independiente a hidrógeno, heteroalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, por ejemplo, arilo substituido con 1 -3 halógenos, alquilo substituido o no substituido, grupos alcoxi o tioalcoxi, o grupos ariloalquilo. Cuando un compuesto de la invención incluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R es independientemente seleccionado como son cada R', R", R'" y R"" cuando más de uno de estos grupos está presente. Cuando R' y R" se unen al mismo átomo de nitrógeno, pueden combinarse con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 5, 6 o 7 miembros. Por ejemplo, -NR'R" se entiende que incluyen, pero no se limitan a, 1 -pirrolidinilo y 4-morfolinilo. A partir de la discusión anterior de substituyentes, un experto en la materia entiende que el término "alquilo" significa que incluye grupos incluyendo átomos de carbono unidos a grupos diferentes a grupos hidrógeno, tales como haloalquilo (por ejemplo, -CF3 y CH2CF3) y acilo (por ejemplo, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3 y lo similar). Similar a los substituyentes descritos para el radical alquilo, los substituyentes para los grupos arilo y heteroarilo se varían y se seleccionan de, por ejemplo, halógeno, -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR,R,,R,,, l -OC(O)R', -C(O)R\ -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R'", -NR"C(O)2R', -NR-C(NR,R"R'")=NR"", -NR-C(NR'R")=NR,,, 1 -S(O)R', -S(O)2R\ -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN y -NO2, -R', -N3, -CH(Ph)2, fluoro(C-C4)alcoxi, y fluoro(C1-C )alquilo, en un número que varía de cero al número total de valencias abiertas en el sistema de anillo aromático; y en donde R', R", R'" y R"" se seleccionan preferentemente de manera independiente de hidrógeno, alquilo, heteroalquilo, arilo y heteroarilo. Cuando un compuesto de la invención incluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R se selecciona independientemente como son cada R', R", R'" y R"" cuando más de uno de estos grupos está presente. Dos de los substituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo puede reemplazarse opcionalmente con un substituyente de la fórmula -T-C(O)-(CRR')q-U-, en donde T y U son independientemente -NR-, -O-, -CRR'- o un enlace único, y q es un entero de desde 0 a 3. Alternativamente, dos de los substituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden reemplazarse opcionalmente con un substituyente de la fórmula -A- (CH2)T-B-, en donde A y B son independientemente -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR'- o un enlace único, y r es un entero de desde 1 hasta 4. Uno de los enlaces únicos del nuevo anillo así formado puede reemplazarse opcionalmente con un enlace doble. Alternativamente, dos de los substituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden reemplazarse opcionalmente con un substituyente de la fórmula -(CRR')s-X-(CR"CR"')d-, en donde s y d son independientemente enteros de desde 0 hasta 3, y X es -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2- o -S(O)2NR'-. Los substituyentes R, R\ R" y R'" se seleccionan independientemente de manera preferente de (C -C6)alquilo substituido o no substituido. Como se utiliza en la presente, el término "heteroátomo" se entiende que incluye oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S) y silicón (Si). Como se utiliza en la presente, "ácido nucleico" significa ya sea ADN, ARN, motivos de filamento único, de doble filamento, o de hibridización más altamente agregada, y cualquier modificación química de los mismos. Las modificaciones incluyen, pero no se limitan a, aquellos que proporcionan otros grupos químicos que incorporan carga adicional, polarizabilidad, unión de hidrógeno, interacción electroestática, y funcionalidad a las bases de ligando de ácido nucleico o al ligando de ácido nucleico como una totalidad. Tales modificaciones incluyen, pero no se limitan a, ácidos nucleicos de péptido, modificaciones de grupo fosfodiéster (por ejemplo, fosforotioatos, metilfosfonatos), modificaciones de azúcar en posición 2', modificaciones de pirimidina de posición 5, modificaciones de purina de posición 8, modificaciones de aminas exocíclicas, substitución de 4-tiouridina, substitución de 5-bromo o 5-yodo-uracil; modificaciones de estructura, metilaciones, combinaciones de par base inusual tales como las isobases de isocitidina e isoguanidina y lo similar. Las modificaciones también pueden incluir 3' y 5' modificaciones tal como cobertura. El término "sales farmacéuticamente aceptables" se entiende que incluye sales de los compuestos activos que se preparan con ácidos o bases relativamente no tóxicas, dependiendo de los substituyentes particulares encontrados en los compuestos descritos en la presente. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente acidas, las sales de adición base pueden obtenerse al contactar la forma neutral de tales compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, ya sea pura o en un solvente inerte adecuado. Ejemplos de sales de adición base farmacéuticamente aceptables incluyen sodio, potasio, calcio, amonio, amino orgánico, o sal de magnesio, o una sal similar. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funcionalidades relativamente básicas, las sales de adición acidas pueden obtenerse al contactar la forma neutral de tales compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, ya sea puro o en un solvente inerte adecuado. Ejemplos de sales de adición acidas farmacéuticamente aceptable incluyen aquellos derivados de ácidos inorgánicos como ácido hidroclórico, hidrobrómico, nítrico, carbónico, monohidrogencarbónico, fosfórico, monohidrogenfosfórico, dihidrogenfosfórico, sulfúrico, monohidrogensulfúrico, hidriódico, o fosforoso y ío similar, así como también las sales derivadas de ácidos orgánicos relativamente no tóxicos como acético, propiónico, ¡sobutírico, maléico, malónico, benzoico, succínico, subérico, fumárico, láctico, mandélico, eftálico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, cítrico, tartárico, metanosulfónico y lo similar. También se incluyen sales de aminoácidos tales como arginato y lo similar, y sales de ácidos orgánicos como ácido glucurónico o galactunórico y lo similar (ver, por ejemplo, Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1 -19). Ciertos compuestos específicos de la presente invención contienen tanto funcionalidades básicas como acidas que permiten que los compuestos se conviertan en ya sea sales de adición acidas o base. Las formas neutrales de los compuestos se regeneran preferentemente al contactar la sal con una base o ácido y aislar el compuesto de origen en la manera convencional. La forma de origen del compuesto difiere de las diversas formas de sal en ciertas propiedades físicas, tal como solubilidad en solventes polares. Además de las formas de sal, la presente invención proporciona compuestos, que está en una forma de profármaco. Los profármacos de los compuestos descritos en la presente son aquellos compuestos que experimentan fácilmente cambios químicos bajo condiciones fisiológicas para proporcionar los compuestos de la presente invención. Adicionalmente, los profármacos pueden convertirse en los compuestos de la presente invención por métodos químicos o bioquímicos en un ambiente ex vivo. Por ejemplo, los profármacos pueden convertirse lentamente en los compuestos de la /* presente invención cuando se colocan en un recipiente de parche transdérmico con una enzima o reactivo químico adecuados. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en formas no solvatadas así como también formas solvatadas, incluyendo formadas hidratadas. En general, las formas solvatadas son equivalentes a formas no solvatadas y se comprenden dentro del alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en múltiples formas amorfas o cristalinas. En general, todas las formas físicas son equivalentes para los usos contemplados por la presente invención y se proponen encontrarse dentro del alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos) o enlaces dobles; los racematos, diastereómeros, isómeros geométricos e isómeros individuales se comprenden dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la presente invención también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden radiomarcarse con isótopos radioactivos, tales como por ejemplo, tritio (3H), yodo-125 (125l) o carbono-14 (14C).

Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, ya sea radioactivas o no, se comprenden dentro del alcance de la presente invención. II. Composiciones Sinergísticas Útiles para Tratar Cáncer En un aspecto, la presente invención proporciona nuevas composiciones útiles para tratar cáncer. Las composiciones incluyen un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico seleccionado de agente de unión de ácido nucleico antineoplástico, análogo base de antimetabolito antineoplástico, y docetaxel. Se ha descubierto que, sorprendentemente, la combinación del oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y el segundo agente antineoplástico muestra un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. Las composiciones de la invención actual son útiles para tratar una amplia variedad de cánceres, incluyendo carcinomas, sarcomas, y otras formas de cáncer. Los cánceres ejemplificativos incluyen mieloma múltiple, un plasmacitoma de ß-linfocito, cáncer ovárico (por ejemplo, cáncer celular epitelial ovárico de etapa avanzada), melanoma (por ejemplo, melanoma metastática, leucemia (incluyendo leucemias de origen linfoide y no linfoide), cáncer de colón (por ejemplo, cáncer de pulmón mestastático) y cáncer pancreático (incluyendo neoplasmas del páncreas endocrino y exócrino). Desórdenes pancreáticos endoneoplásticos ejemplificativos incluyen neoplasma endocrino no funcional, somatostatinoma, glucagonoma, VIPoma, gastrinoma e insulinoma.

A. Oxidantes Mitocondriales de Unión a Tiol Antineoplástico Los oxidantes mitocondriales de unión a tiol antineoplásticos de la presente invención son aquellos compuestos que inhiben o previenen el crecimiento de cáncer, son capaces de unirse a una porción tiol en una molécula que contiene tiol, y promover la tensión oxidante e interrumpir el potencial de membrana mitocondrial celular. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico típicamente induce alteraciones gruesas en ultraestructura mitocondrial (tal como hinchamiento), mientras induce poco o nada de alteraciones a otros organelos celulares. Las alteraciones en la ultraestructura mitocondrial se causa típicamente por inducción de tensión oxidativa a bimoléculas mitocondriales, tal como ADN mitocondrial. Además de daño oxidativo a ADN mitocondrial y cambio en morfología mitocondrial, los oxidantes mitocondriales de unión a tiol antineoplásticos típicamente causarán una formación de especie de oxígeno reactiva (ROS) además de perturbaciones en potencial de membrana mitocondrial, conduciendo a liberación de citocromo c, activación de caspasas 3, 8 y 9, e inducción de apoptosis. En algunas modalidades, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico inhibe o reduce la actividad de un inhibidor de reductasas de ribonucleótido (relativo a la actividad en la ausencia de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico). En otras modalidades, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico no alquila ADN. En otra modalidad, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico no reacciona con el grupo e-amino de lisina. Las técnicas para medir las características de oxidantes mitocondriales de unión a tiol antineoplásticos se tratan abajo y describen en detalle en Dvorakova eí al., Neoplasia 97: 3544-3551 (2001 ), Dvorakova eí al., Biochemical Pharmacology 60: 749-758 (2000), Dvorakova eí al., Anti-Cancer Drugs 13: 1031 -1042 (2002), Dvorakova eí al., Molecular Cáncer Therapeutics 1 : 185-195 (2002), y lyengar eí al., J. Med. Chem. 47, 218-223 (2004). En una modalidad ejemplificativa, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico incluye un anillo de aziridina (por ejemplo, los compuestos de las Fórmulas (I), (I I) y (lll)). El anillo de aziridina permite al oxidante mitocondrial de unión a tiol antineóplástico unir tioles celulares, tales como transferasa de glutationa S (GSH) y residuos de cisteína dentro de proteínas celulares. Como una consecuencia de eliminación de tioles celulares tales como cisteína y GSH, las células de tumor se vuelven altamente susceptibles a oxidación. En una modalidad ejemplificativa, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico teniendo un anillo de aziridina es una aziridina-1-carbaoxamida substituida o no substituida teniendo la fórmula: (I) En la Fórmula (I), R1 , R2, R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R4 y R5 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R4 es ciano, CO2R4A, o CONR4BR4C. R4A es seleccionado de alquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, y arilo substituido o no substituido. R4B es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido. R C es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido o arilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada adicional, R4 es ciano. En otra modalidad relacionada, R1 , R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo(C1-C6) substituido o no substituido, heteroalquilo de 2 a 6 miembros substituido o no substituido, cicloalquiloíCi-Cß) substituido o no substituido, heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. R4 es ciano, carboxamida no substituida o éster de ácido carboxílico no substituido. R5 es hidrógeno o alquilo(C1-C4) substituido o no substituido. R6 es substituido o no substituido, un heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido, o un arilo substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R4 y R5 se unen para formar un anillo de 5 miembros substituido. En una modalidad relacionada adicional, el compuesto de la Fórmula (I) es imexon. En una modalidad ejemplificativa donde imexon es el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico, la concentración de imexon en la composición es al menos 0.5 µg/ml. En otra modalidad ejemplificativa, la concentración de imexon en la composición es al menos 1 .0 µg/m!. En otra modalidad ejemplificativa, la concentración de imexon en la composición es entre 1 .0 µg/ml y 500 µg/ml. En otra modalidad ejemplificativa, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico se selecciona de una aziridina-1 -carboxamida substituida o no substituida y una 4-imino-1 ,3-diazobiciclo[3.1 .0]-hexano-2-ona substituida o no substituida. Aziridina-1 -carboxamidas y derivados cíclicos de las mismas útiles en la presente invención se tratan en detalle en la Patente de Estados Unidos No. 6,297,230 y Patente de Estados Unidos No. 6,476,236, que se ceden al cesionario como la presente solicitud y se incorporan en la presente para referencia en su totalidad para todos los propósitos. Las 4-imino-1 ,3-d¡azobiciclo[3.1 .0]-hexano-2-onas substituidas o no substituidas pueden tener la fórmula: (I I) En la Fórmula (I I), R\ R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. En una modalidad ejemplificativa, R1 , R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, substituido o no substituido, heteroalquilo de 2 a 6 miembros substituido o no substituido, cicloalquilo(C-?-C6) substituido o no substituido, heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R1, R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno y alquilo^-Ce) substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R\ R2 y R3 son hidrógeno. Un experto en la materia reconocerá que donde R\ R2 y R3 sean hidrógeno, el compuesto de la Fórmula I es imexon. De esta manera, en una modalidad relacionada, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico es imexon.

En una modalidad ejemplificativa, la azíridina-1 -carboxamida substituida o no substituida tiene la fórmula: (lll) En la Fórmula (lll), R1 , R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, heteroarílo substituido o no substituido. R4 es ciano, CO2R4A, o CONR4BR4C. R4A es seleccionado de alquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, y arilo substituido o no substituido. R B es hidrógeno o alquilo substituido o no substituido. R4C es hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido o arilo substituido o no substituido. R5 es hidrógeno o alquilo substituido o no substituido. R6 es alquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, o arilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R4 es ciano. Donde R4 es ciano, la molécula puede referirse en la presente como una cianoaziridina substituida o no substituida. En una modalidad ejemplificativa, R1 , R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo(d-Ce) substituido o no substituido, heteroalquilo de 2 a 6 miembros substituido o no substituido, cicloalquiloíC^Ce) substituido o no substituido, heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R4 es ciano, carboxamida no substituida o éster de ácido carboxílico no substituido. Rd es hidrógeno o alquilon-C,*) substituido o no substituido. R6 es alquilo(C-|-C8) substituido o no substituido, un heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido, o un arilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R\ R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno y alqu¡lo(C?-C6) substituido o no substituido. R4 es ciano y R5 es hidrógeno. B. Agentes de Unión de Ácido Nucleico Antineoplástico En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica incluyendo un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico. Se ha descubierto que, sorprendentemente, la combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico muestra un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. Los agentes de unión de ácido nucleico antineoplástico inhiben o previenen el crecimiento de cáncer y unen covalentemente los grupos alquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, o grupos heteroarilo substituido o no substituido a sitios nucleofílicos en un ácido nucleico celular. Típicamente, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico son especies electrofílicas que causarán degradación de filamentos de ácido nucleico, par de base anormal, depurinación, reparación de excisión de ácidos nucleicos alquilados, y/o rompimiento de filamento de ácido nucleico. De esta manera, los agentes de unión de ácido nucleico antineoplástico pueden ser monofuncionales (un grupo reactivo), bifuncionales (dos grupos reactivos) o polifuncionales (tres o más grupos reactivos). Aunque los agentes de unión de ácido nucleico antineoplásticos no se limitan por un mecanismo particular de acción, N7, O6, y 2-amino nitrógeno de guanina son particularmente susceptibles a agentes de unión de ácido nucleico antineoplástico. Los ensayos para determinar si un compuesto se une de manera covalente a un sitio nucleofílico en un ácido nucleico celular se conocen bien en la materia. Una discusión más detallada de tales ensayos se describen en detalle, por ejemplo en Price eí al., "Chemistry Alkilation" en Antineoplastic and Immunosuppresive Agents, Part II, Ed by Sartorelli eí al. , Berlín, Springer-Verlag, 1975, pp. ; Johnson et al. , Molec Pharmacol 3: 195 (1967); y Kohn, et al. , Cáncer Res 37: 1450 (1977). En una modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico une covalentemente grupos alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, o grupos heteroarilo substituido o no substituido, a sitios nucleofílicos en un ácido nucleico. En una modalidad adicional, el sitio nucleofílico en el ácido nucleico es N7, O6 y 2-amino nitrógeno, una base nitrogenosa de guanina. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico es un agente de unión de ADN antineoplástico. Un agente de unión de ADN antineoplástico une covalentemente grupos alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, o grupos heteroarilo substituido o no substituido a sitios nucleofílicos en ADN celular. Una variedad de agentes de unión de ácido nucleico antineoplástico son útiles en la presente invención, incluyendo por ejemplo, mostazas de nitrógeno antineoplástico, sulfonatos de alquilo antineoplásticos, úreas nitrosas antineoplásticas, complejos de platino antineoplásticos, carboxamidas de imidazola antineoplásticos, altretamia y derivados de los mismos, mitomicina C y derivados de los mismos, agentes de unión que contienen benzoquinona, y tiotepa y derivados de los mismos. En una modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona de mostaza de nitrógeno antineoplástico, carboxamida de imidazola antineoplástica, y complejo de platino antineoplástico. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona de melfalan, ciclofosfamida, carmustina, mecloretamina, tiotepa, clorambucil, lomustina, ifosfamida, mitomicina C, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina y dacarbazina. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona de melfalan, carmustina, mecloetamina, tiotepa, clorambucil, lomustina, ifosfamida, mitomicina C, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina y dacarbazina. De esta manera, en algunas modalidades, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico no es ciclofosfamida. Las mostazas de nitrógeno antineoplástico útiles en la invención actual incluyen aquellos compuestos teniendo grupos salientes clorinados que se unen covalentemente a grupos reactivos en ADN, ARN, y/o moléculas de polipéptido. En una modalidad ejemplificativa, la mostaza de nitrógeno tiene la fórmula: (CI2CH2)2N-R1 (IV) En la Fórmula (IV), R1 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R1 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heterocicloalquilo substituido o no substituido. En una modalidad adicional, R se selecciona de alquilo^-Cs) substituido o no substituido, fenilo substituido o no substituido, y ciclofosfamida substituida o no substituida. En otra modalidad relacionada, R1 es fenilo substituido. En otra modalidad ejemplificativa, la mostaza de nitrógeno se selecciona de mecloretamina, melfalan, ciclofosfamida, y clorambucil y derivados de los mismos. En una modalidad relacionada, la mostaza de nitrógeno se selecciona de melfalan y ciclofosfamida. En otra modalidad relacionada, la mostaza de nitrógeno se selecciona de clorambucil y melfalan. En otra modalidad ejemplificativa, la mostaza de nitrógeno no es ciclofosfamida. Los complejos de platino antineoplásticos útiles en la invención actual incluyen aquellos compuestos que forman aductos de interfilamento o intrafilamento a y/o degradan las macromoléculas celulares, tal como ADN. Típicamente, los complejos de platino incluyen un platino II (Pt2+) o especies platino IV (Pt4+). En una modalidad ejemplificativa, el complejo de platino antineoplástico tiene la fórmula: (V) En la Fórmula (V), R1 , R2, R3 y R4 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R1 y R2 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo con el platino al cual se unen. R5 se selecciona de halógeno y OR7. R6 se selecciona independientemente de halógeno y OR8. R7 y R8 se seleccionan independientemente de alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R7 y R8 se une unen opcionalmente junto con los átomos a los cuales se unen para formar un anillo. En otra modalidad ejemplificativa, el complejo de platino antineoplástico se selecciona cisplatina, carboplatina, oxaliplatina y derivados de los mismos. En otra modalidad ejemplificativa, el complejo de platino antineoplástico se selecciona de cisplatina, carboplatina, y xoaliplatina. En otra modalidad ejemplificativa, el complejo de platino antineoplástica se selecciona de cisplatina, carboplatina. En una modalidad ejemplificativa, la carboxamida de imidazola antineoplástica tiene la fórmula: (VI) En la Fórmula (VI), R1, R2 y R3 se selecciona independientemente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquiltf substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R1 y R3 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo. En una modalidad relacionada, R2 es -N=N-N-R4. R4 es alquiloíC^Cs) substituido o no substituido o un alquileno (C^Cg) substituido o no substituido junto con R1 para formar un anillo. En una modalidad relacionada, R3 es hidrógeno. En otra modalidad ejemplificativa, la carboxamida de imidazola antineoplástica se selecciona de temozolomida, dacarbazina, y derivados de los mismos. En otra modalidad ejemplificativa, la carboxamida de imidazola antineoplástica. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se secciona de melfalan, ciclofosfamida, carmustina, mecloretamina, tiotepa, clorambucil, lomustina, ifosfamida, mitomicina C, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, decarbazina, y derivados de los mismos. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona de melfalina, cisplatina y decarbazina y derivados de los mismos. En otra modalidad ejemplificativa, el agente de unión de ácido nucleico antineoplástico no es ciclofosfamida. Sulfonatos de alquilo antineoplástico de la presente invención típicamente contienen al menos un grupo sulfonato deficiente de electrón. Los iones de carbonilo se forman rápidamente después de la absorción sistémica de sulfonatos de alquilo antineoplástico conduciendo a alquilación de ADN. En una modalidad ejemplificativa, el sulfonato de alquilo tiene la estructura: O O R1-0-S-R2-S-R3 En la Fórmula (Vil), R1 y R3 se seleccionan independientemente de alquilo substituido y no substituido y heteroalquilo substituido y no substituido. R2 se selecciona de alquileno substituido y no substituido y heteroalquilo substituido y no substituido. En una modalidad relacionada R1 y R3 son alquilo no substituido y R2 es alquileno no substituido. En una modalidad relacionada adicional, R1 y R3 son alquilo^-Cs) no substituido y R2 es alquileno (C-?-C5) no substituido. En otra modalidad, el sulfonato de alquilo es bisulfano o un derivado del mismo. En una modalidad relacionada, el sulfonato de alquilo es busulfan. En otra modalidad ejemplificativa, los derivados de mitomicina de la presente tienen la fórmula (VI II) En la Fórmula (VI II), X se selecciona de =NR\ NHR2 y OR3. R1 se selecciona de alquilo substituido y no substituido y heteroalquilo substituido y no substituido. R2 y R3 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo substituido y no substituido, heteroalquilo substituido y no substituido, y arilo substituido y no substituido. Y es OR3, en donde R3 se selecciona de hidrógeno y alquilo substituido y no substituido. Z se selecciona de hidrógeno y alquilo substituido y no substituido. En una modalidad relacionada, R1 es heteroalquilo de 2 a 5 miembros substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R2 es un hidrógeno, heteroalquilo de 2 a 5 miembros substituido o no substituido y arilo substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada Y se selecciona de -OCH3 y -OH. En otra modalidad relacionada, Z se selecciona de hidrógeno y -CH3. En otra modalidad ejemplificativa, los derivados de mitomicina incluyen Mitomicina A, Mitomicina B, Mitomicina C, Porfiromicina, BMY-25282, BMS-181 174, KW2149 y M83. En otra modalidad ejemplificativa, los agentes de unión que contienen benzoquinona tienen la fórmula: (IX) En la Fórmula (IX), R1 se selecciona de NHR3, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, y heterocicloalquilo substituido o no substituido. R2 se selecciona de hidrógeno, NHR4, alquilo substituido o no substituido, y heteroalquilo substituido o no substituido. R3 y R4 se seleccionan independientemente de alquilo substituido o no substituido y heteroalquilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R1 se selecciona de metilo, azridinilo, y NHR3, en donde R3 es un alquilo Ci-Cs substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R3 es CO2CH2CH3 o CH2CH2OH. En otra modalidad ejemplificativa, las ureas nitrosas de la presente invención incluyen bis-cloroetilnitrosourea (BCNU), N-(2-cioroetil)-N'-(4-ciclohexil)-N-nitrosourea (CCNU), N-(2-cloroetil)-N'-(4-ciclohexil)-N-nitrosourea (metil-CCNU), y derivados de los mismos.

En otra modalidad ejemplificativa, las nitrosourea tuvieron la fórmula: V0 H O (X) En la Fórmula (X), R se selecciona de alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. En una modalidad relacionada, R1 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, y cicloalquilo substituido o no substituido.

C. Análogos Base de Antimetabolito Antineoplásticos En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica incluyendo un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un análogo base de antimetabolito antineoplástico. Se ha descubierto que, sorprendentemente, la combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un análogo base de antimetabolito antineoplástico muestra un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. Los análogos base de antimetabolito antineoplásticos inhiben o previenen el crecimiento de cáncer e interrumpen la síntesis de ácido nucleico celular al inhibir las enzimas de síntesis de ácido nucleico celular. La inhibición de enzimas de síntesis de ácido nucleico celular se realiza típicamente al imitar la estructura de nucleósidos naturales, nucleótidos y/o bases nitrogenosas (es decir, adenina, guanina, uracil, citosina, o timina). De esta manera, los análogos base de antimetabolito antineoplásticos de la presente invención incluyen análogos de adenina, guanina, uracil, citosina, o nucleótidos de timina, nucleósidos y/o bases nitrogenosas. Los ensayos para determinar si un compuesto inhibe enzimas de ácido nucleico celular se conocen bien en la materia. Una descripción más detallada de tales ensayos se describen en detalle, por ejemplo, en Hitehings eí al., "Mechanisms of action of purine and pyrimidine analogs" en Cáncer Chemotherapy, Basic and Clinical Applications, ed. por Brodsky, eí al, New York, Gruñe and Stratton, 1967, pp: 26-36; Santi, eí al., Biochemistry 13: 471 (1974); Waqar et al., Biochem. Journal, 121 : 803 (1971 ) ; y Huang eí al., Cáncer Res: 61 10-61 17, (1 991 ). En una modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico tiene la fórmula: (XI) En la Fórmula (XI), R1 se selecciona de hidrógeno, ribosa substituida y deoxiribosa substituida. R2 se selecciona de hidrógeno, halógeno, -SH, -NH2, -OH, =O y -SR4. R4 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. R3 se selecciona de hidrógeno, halógeno, -SH, -NH2 y -OH. La línea rayada a es un enlace único o enlace doble. X se selecciona de =N- o -NH-, en donde si a es un enlace doble y m es 0 entonces X es =N-, y si m es 1 entonces X es -NH-. El símbolo m es el entero 0 o 1 . Donde R2 es =O y m es 1 , la línea rayada a es un enlace único. En una modalidad relacionada, R2 se selecciona de -NH2, -OH, -SH y -SR4. En otra modalidad relacionada, R4 se selecciona de cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R4 se selecciona de heterocicloalquilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R3 se selecciona de hidrógeno, F, Cl, y -NH2. En otra modalidad relacionada, R1 se selecciona de ribosa substituida y deoxiribosa substituda. La ribosa substituida y deoxiribosa substituda pueden ser idénticos a los anillos de ribosa y deoxiribosa encontrados en ADN o ARN celular. Alternativamente, la ribosa substituida y deoxiribosa substituida pueden ser análogos de los anillos de ribosa y deoxiribosa encontrados en el ADN o ARN celular. Por ejemplo, el hidroxilo unido a 2'C de una rubosa puede ser una a-OH y una ß-OH. 5'C puede unirse a un hidroxilo, un fosfoéster, un fosfodiéster, o una porción fosfotriéster, o derivados de fosfoéster de los mismos (tales como fosfotioésteres). En otra modalidad relacionada, m es 0. De esta manera, en otra modalidad ejemplifícativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico tiene la fórmula: (XII) En la Fórmula (XII), R2 y R3 son como se definen en la Fórmula (XI) arriba. R6, R7, R8 y R9 se seleccionan independientemente de hidrógeno, halógeno, -OH, y OR10. R10 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, y heteroalquilo substituido o no substituido. R5 se selecciona de alquilo substituido o no substituido y -P(X1)O2-R1 1. R1 1 se selecciona de alquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, -P(X1)O2 y -P(X )O-P(X1)O2. X1 , X2 y X3 se seleccionan independientemente de O y S. La línea rayada a es un enlace único o enlace doble. Donde R2 es =O, la línea rayada a es un enlace único. X se selecciona de =N- y -NH-, en donde si a es un enlace doble entonces X es =N- y si es un enlace único entonces X es -NH-. En una modalidad relacionada R6, R7, R8 y R9 se seleccionan independientemente de hidrógeno, F, -OH y OR10. En otra modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico tiene la fórmula: (Xl ll) En la Fórmula (Xl l l), R1 se selecciona de hidrógeno, ribosa substituida y deoxiribosa substituida. R2 se selecciona de hidrógeno, halógeno, y alquilo substituido o no substituido. R3 se selecciona de hidrógeno, =O, NH2, NH2-HCI, y alquilo substituido o no substituido. La línea rayada a es un enlace único o enlace doble. En donde R3 es =O, la línea rayada a es un enlace único. X se selecciona de =N- y -NH-, en donde si a es un enlace doble entonces X es =N-, y si a es un enlace único entonces X es -NH-. En una modalidad relacionada, R2 se selecciona de hidrógeno, F y alquilon-Cs) substituido o no substituido. En otra modalidad relacionada, R2 se selecciona de hidrógeno, F y alquilones) no substituido. En otra modalidad relacionada, R1 se selecciona de ribosa substituida y deoxiribosa substituida. La ribosa substituida y deoxiribosa substituda pueden ser idénticas a los anillos de ribosa y deoxiribosa encontrados en ADN o ARN celular. Alternativamente, la ribosa substituda y deoxiribosa substituda pueden ser análogos de los anillos de ribosa y deoxiribosa encontrados en ADN o ARN celular. Por ejemplo, el hidroxilo unido a 2'C de un ribosa puede ser una a-OH y una ß-OH. 5'C puede unirse a un hidroxilo, un fosfoéster, un fosfodiéster, o una porción de fosfotriéster, o derivados de fosfoéster de los mismos (tal como fosfotioésteres). De esta manera, en otra modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico tiene la fórmula: (XIV) En la Fórmula (XIV), R2, R3, X y a son como se definen arriba en la Fórmula (Xlll), R5, R6, R7, R8 y R9 son como se definen arriba en la Fórmula (XI I). En otra modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico se selecciona de mercaptopurina, tioguanina, azatioprina, fludarabina, cladribina, pentostatina, fluorouracil, citarabina, capecitabina, gemcitabina, floxuridina, y derivados de los mismos. En otra modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico se selecciona de mercaptopurina, tioguanina, azatioprina, fludarabina, cladribina, pentostatina, fluorouracil, citarabina, capecitabina, gemcitabina, y floxuridina. En otra modalidad ejemplificativa, el análogo base de antimetabolito antineoplástico se selecciona de 5-fluorouracil, citarabina y gemcitabina. D. Docetaxel En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica incluyendo un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineopiástico y docetaxel (también referido en la presente por su marca comercial, Taxotere®). Se ha descubierto que, sorprendentemente, la combinación de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y docetaxel muestra un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. lll. Ensayos para probar la actividad sinergística anticáncer de una combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico En otro aspecto, la presente invención proporciona ensayos para determinar si una combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico tiene un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. Como se define arriba, un "efecto citotóxico terapéutico sinergístico" significa que una combinación ada de al menos 2 compuestos muestra sinergia cuando se prueba en un ensayo citotóxico. En una modalidad ejemplificativa, la sinergia se valora utilizando el principio de efecto medio (Chou, eí al., Adv Enzyme Regul 22 : 27-55 (1984)). Este método se basa en cinéticas Michaelis-Menton y reduce los efectos de combinación a un indicador numérico, el índice de combinación (C.I.). Donde el índice de combinación es menor a 1 , el sinergismo se indica. Donde el índice de combinación es igual a 1 , se indica suma. Donde el índice de combinación es mayor a 1 , se indica antagonismo. Un experto en la materia reconocerá que es posible ver efectos mezclados sobre un rango de valores C.I.. Por lo tanto, solamente las combinaciones que se consideran consistentes sobre al menos la mayoría del rango de concentración de fármaco se clasifican como sinergísticas, aditivas o antagonísticas. En una modalidad ejemplificativa, el índice de combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico es menor a 1 .0. En otra modalidad ejemplificativa, el índice de combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico es al menos menor a 0.9. En otra modalidad ejemplificativa, el índice de combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico es al menos menor a 0.8. En otra modalidad ejemplificativa, el índice de combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico es al menos menor a 0.7. En otra modalidad ejemplificativa, el índice de combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico es al menos menor a 0.6. Un número de ensayos biológicos están disponibles para evaluar y optimizar la elección de combinaciones específicas de compuestos para actividad antitumor óptima. Estos ensayos pueden separarse aproximadamente en dos grupos aquellos incluyendo exposición in vitro de agentes a células de tumor y ensayos antitumor in vivo en modelos roedores y raramente, en animales más grandes. Tanto ensayo in vitro utilizando células de tumor como ensayos in vivo en modelos animales se tratan abajo, y se aplican por igual para determinar si un oxidante mitocondrial de unión a tiol, un agente de unión de ácido nucleico, o un análogo base de antimetabolito muestran propiedades antineoplásticas. Los ensayos citotóxicos in vitro para una combinación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico generalmente incluyen el uso de estirpe de célula de tumor establecidas tanto de animal y, especialmente de origen humano. Estas estirpes de célula pueden obtenerse de fuentes comerciales tales como Laboratorio de Cultivo de Tejido Tipo Americano en Bethesda, Maryland y de bancos de tumor en instituciones de búsqueda. Las exposiciones a combinaciones de la presente invención pueden llevarse a cabo bajo condiciones fisiológicas simuladas de temperatura, oxígeno y disponibilidad de nutriente en el laboratorio. Los puntos finales de estos ensayos in vitro pueden incluir: 1 ) formación de colonia; 2) una cuantificación simple de división celular con el tiempo; 3) la toma de los así llamados tintes "vitales" que se excluyen de las células con una membrana citoplásmica intacta; 4) la incorporación de nutrientes radiomarcados en una célula de proliferación (viable). Los ensayos de formación de colonia se han utilizado tanto con estirpes de célula establecidas, así como también biopsias de tumor reciente quirúrgicamente removido del paciente con cáncer. En este tipo de ensayo, las células se desarrollan típicamente en cápsula de Petri en agar suave, y el número de colonias o grupos de células (> 60 µ en tamaño) se cuentan ya sea visualmente, o con un sistema de análisis de imagen automático. Una comparación se hace entonces a las células de control sin tratar permitidas para desarrollar colonias bajo condiciones idénticas. Debido a que la formación de colonia es una de las marcas del fenotipo de cáncer, solamente las células malignas formarán colonias sin adherencia a una matriz sólida. Esto puede utilizarse por lo tanto como combinaciones del procedimiento de selección de la presente invención, y existe un número de publicaciones que muestran que los resultados obtenidos en los ensayos de formación de colonia se correlaciona con descubrimientos de prueba clínica con los mismos fármacos. La enumeración del número total de células es un planteamiento simplístico a prueba in vitro con ya sea estirpes de célula o biopsias de tumor reciente. En este ensayo, las masas de células se desagregan típicamente en unidades únicas que pueden entonces contarse ya sea manual en una ranura microscópica o utilizando un sistema de flujo automático tal como ya sea citometría de flujo o un contador Coulter®. Las tasas de crecimiento celular de control (sin tratar) se comparan entonces con la tasas de crecimiento celular tratadas (con una combinación de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico). La coloración del tinte vital es otra de las marcas anteriores de ensayos antitumor. En este tipo de células de planteamiento, ya sea tratadas o sin tratar, con un fármaco de cáncer, se exponen subsiguientemente a un tinte tal como azul de metileno, que se excluye normalmente de células intactas (viables). El número de células tomando el tinte (inactivo o tintura) son el numerador con un denominador siendo el número de células que excluyen el tinte. Estos son ensayos laboriosos que no se utilizan actualmente de manera exclusiva debido al tiempo y la naturaleza relativamente no específica del punto final. Además de la coloración del tinte vital, la viabilidad puede valorarse utilizando la incorporación de los nutrientes radiomarcados y/o nucleótidos. Este es el método de prueba que se utiliza en Viking Lander para mirar la vida en Marte con el punto final siendo cuanto de una substancia radioactiva se toma en una muestra como evidencia de actividad de vida. En ensayos de célula de tumor, un experimento típico incluye la incorporación de ya sea (3H) tritio o nucleótidos marcados con 14C tal como timidina. Se muestran las células de control (sin tratar) tomando una cantidad substancial de este bloque de formación de ADN normal por tiempo unitario, y la tasa de incorporación se compara con aquel en las células tratadas de fármaco. Esto es un ensayo rápido y fácilmente cuantificable que tiene la ventaja adicional de funcionar bien para las células que pueden no formar colonias grandes (contables). Las desventajas incluyen el uso de radioisótopos que presentan intereses de desecho y manejo. Estos son grandes bancos de estirpes de célula de tumor de roedor y humano que están disponibles para estos tipos de ensayos. El sistema de prueba corriente utilizado por el Instituto de Cáncer Nacional utiliza un banco de más de 60 estirpes de célula de humano resistentes a múltiples fármacos y sensibles, establecidas de una variedad de subtipos celulares. Esto típicamente incluye 5-6 células de tumor de humano bien caracterizadas, establecidas de un subtipo particular, tal como cáncer de pulmón de célula pequeña o célula no pequeña, para probar nuevos agentes. Utilizando un sistema de análisis gráfico llamado Compare®, la sensibilidad total en términos de toma de tinte (ya sea sulforhodamina B o tinte de tetrazolio MTT) se utilizan. El objetivo específico de este planteamiento es identificar combinaciones que son únicamente activas en un subtipo histológico único de cáncer humano. Además, existen pocas sublíneas de cáncer humano que demuestran resistencia múltiples agentes y se conocen, en algunos casos, por expresar la bomba de resistencia a múltiples fármacos, p-glicoproteína. Los ensayos utilizando estas células resistentes se toman actualmente para seleccionar compuestos tanto de laboratorios NCI así como también cualquiera presentado de partes universitarias o privadas. El punto final para los ensayos NCI es la incorporación de un tinte de proteína denominado sulforhodamina B (para células de tumor adherentes) y la reducción de un tinte de tetrazolio (azul) en enzimas mitocondriales activas (para tipos de célula que flotan libremente, no adherentes). Este último método es particularmente útil para cáncer hematológicos incluyendo mielomas, leucemias y linfomas. Generalmente, una vez que una combinación ha demostrado algún grado de actividad in vitro en inhibir el crecimiento celular de tumor, tal como formación de colonia o toma de tinte, los experimentos de eficacia de tumor se realizan in vivo. Los sistemas de roedor se utilizan casi de manera exclusiva para ensayos iniciales de actividad de antitumor ya que las tasas de crecimiento de tumor y puntos finales de supervivencia se definen bien, y ya que estos animales generalmente reflejan los mismos tipos de toxicidad y patrones de metabolismo de fármaco como en humanos. Para este trabajo, los tumores singenéicos (misma estirpe de gen) se recolectan típicamente de animales donadores, desagregan, cuentan y después se inyectan de nuevo a ratones huéspedes singenéicos (misma cepa). Las combinaciones anticáncer se inyectan típicamente en algún tiempo después, ya sea por vía intraperitoneal, intravenosa o se administra por vías orales, y tasas de crecimiento de tumor y/o supervivencia se determinan, en comparación con controles sin tratar o controles teniendo solamente un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico o un segundo agente antineoplástico. En estos ensayos, las tasas de crecimiento se miden típicamente para tumores inyectados desarrollándose, en el flanqueo frontal del animal, en donde los diámetros perpendiculares de ancho de tumor se traducen en un estimado de masa de tumor total o volumen. El tiempo para alcanzar una masa predeterminada se compara entonces con el tiempo requerido para crecimiento de tumor igual en los animales de control sin tratar. En algunas modalidades, los descubrimientos significativos generalmente incluyen un incremento >25% en el tiempo para alcanzar la masa predeterminada en los animales tratados comparado con los controles. En otras modalidades, los descubrimientos significativos incluyen un incremento >42% en el tiempo para alcanzar la masa predeterminada en los animales tratados comparado con los controles. Los descubrimientos significativos se denominan inhibición de crecimiento de tumor. Para tumores no localizados tales como leucemia, supervivencia puede utilizarse como un punto final y una comparación se hace entre los animales tratados y los controles tratados con solvente o no tratados.

En general, un incremento significativo en el periodo de vida para un nuevo agente positivo es de nuevo >20-42% de periodo de vida más largo debido al tratamiento. Muertes tempranas, aquellas que ocurren antes de cualquier control sin tratar, generalmente indican toxicidad de un nuevo compuesto. Para todos estos ensayos, las combinaciones anticáncer se prueban generalmente en dosis muy cercanas a la dosis letal y 10% (LD10) y/o en la dosis máximamente tolerada, determinada, tal dosis produce toxicidad significativa, pero no letalidad en la misma cepa de animales y utilizando la misma vía de administración y programación de dosificación. Los estudios similares también pueden realizarse en modelos de tumor de rata aunque, debido al gran peso y dificultad de manejo de estos animales, se prefieren menos que los modelos de murina. Más recientemente, los tumores de humano se han transplantado exitosamente en una variedad de modelos de ratón inmunlógicamente deficientes. En el trabajo inicial, un ratón llamado el ratón "pelón" o nu/nu se utiliza para desarrollar ensayos in vivo de crecimiento de tumor de humano. En ratones pelones, que típicamente no tienen cabello y carecen de una glándula de timo funcional, tumores humanos (millones de células) se inyectan típicamente en el flanco y el crecimiento de tumor ocurre solamente después. Este desarrollo visible de una masa de tumor palpable se denomina una "toma". Los fármacos anticáncer se inyectan entonces por alguna vía (IV, IM, SQ, PO) distal al sitio de implante de tumor, y velocidades de crecimiento se calculan por mediciones perpendiculares de los anchos de tumor más amplios como se describe anteriormente. Un número de tumores humanos se conocen por "tomarse" exitosamente en modelo de ratón pelón, aún cuando estos animales son más susceptibles de intercalar infecciones debido a la deficiencia inmunológica subyacente. Un modelo de ratón alternativo para este trabajo incluye ratones con una enfermedad de inmunodeficiencia combinada severa (SCID) en donde existe un defecto en maduración de linfocitos. Debido a esto, los ratones SCID no producen linfocitos B y T funcionales. Sin embargo, estos animales no tienen actividad celular asesina T citotóxica, normal. Sin embargo, los ratones SCID "tomarán" un gran número de tumores de humano. Los animales con fenotipo SCID se seleccionan por "faltante" al medir la producción de inmunoglobulina de suero que debe ser mínima a no detectable si el fenotipo SCID se mantiene. Las mediciones de tumor y dosificación de fármaco se realizan generalmente como arriba. El uso de ratones SCID en muchos casos ha desplazado el ratón pelón ya que los ratones SCID parecen tener una mayor habilidad para tomar un gran número de tumores de humano y son más robustos en términos de falta de sensibilidad para intercalar infecciones. De nuevo, compuestos positivos en el modelo de ratón SCI D son aquellos que inhiben el crecimiento de tumor por >20-42% en comparación con el control sin tratar. La prueba para resistencia de fármaco puede incluir cualquiera de los modelos in vitro e in vivo, aunque los modelos in vitro se caracterizan mejor. En estas pruebas, una sublínea celular se desarrolla por resistencia a un agente particular generalmente por exposición serial a concentraciones crecientes de la combinación anticáncer ya sea in vitro o raramente in vivo. Una vez que un alto grado de resistencia se demuestra (generalmente >4 a 5 veces) a un agente particular, la estirpe celular se estudia además para mecanismos de resistencia tal como la expresión de bombas de membrana de resistencia de multifármacos tal como p-glicoproteína u otros. Estas estirpes de célula resistentes pueden probarse entonces para resistencia cruzada con agentes anticáncer clásicos para desarrollar un patrón de respuesta para una estirpe de célula particular. Utilizando esta estirpe de célula uno puede entonces evaluar un nuevo agente para su potencial para ser activo en las células resistentes. Esto ha permitido la demostración de tanto mecanismos de resistencia de fármaco, así como también la identificación de agentes que pueden tener utilizad en cánceres humanos que han vuelto resistentes a agentes de quimioterapia existentes. Más recientemente el uso de células de tumor humano resistentes se ha extendido al modelo de ratón SCID con el desarrollo de un modelo in vivo de mieloma múltiple de humano resistente a múltiples fármacos. Todos estos sistemas se combinan generalmente en un orden serial, moviéndose de in vitro a in vivo, para caracterizar la actividad antitumor de una combinación anticáncer. En general, uno desea descubrir que tipos de tumor son particularmente sensibles a una combinación y conversamente que tipos de tumor son intrínsecamente resistentes a una combinación in vitro. Utilizando esta información, los experimentos se planean entonces en modelos roedores para evaluar si las combinaciones que han mostrado actividad in vitro se tolerarán o no, y están o no activas en animales. Los experimentos iniciales en animales generalmente incluyen prueba de toxicidad para determinar un programa de dosis tolerable y después utilizar ese programa de dosificación, para evaluar la eficacia de antitumor como se describe arriba. Las combinaciones activas de estos dos tipos de ensayos pueden entonces probarse en tumores humanos desarrollándose en SCID o ratones pelones y si la actividad se confirma, estas combinaciones se vuelven entonces candidatas de desarrollo de fármaco clínico potencial. IV. Ensayos para Medir Características de Oxidantes Mitocondriales de Unión a Tiol Antineoplásticos Como se describe arriba, los oxidantes mitocondriales de unión a tiol antineoplásticos de la presente invención son aquellos compuestos que inhiben o previenen el crecimiento de cáncer, son capaces de unir porciones de tiol, y promover tensión oxidativa e interrupción de potencial de membrana mitocondrial celular. En algunas modalidades, el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico inhibe o reduce la actividad de un inhibidor de reductasa de ribonucleótido. Los ensayos citotóxicos útiles para determina si un compuesto es antineoplástico se tratan arriba (ver Assays for Testing the Anticancer Synergistic Activity of a Combination of an Antineoplastic Thiol-binding Mitochondrial Oxidant and a Second Antineoplastic Agent). Los ensayos para medir otras características se describen abajo. A. Ensayos de Unión a Tiol La habilidad de un compuesto prueba para unirse a una molécula que contiene tiol puede valorarse al mezclar el compuesto prueba en solución acuosa con una molécula que contiene tiol, tales como cisteína o glutationa. La solución se incuba por tiempo suficiente para permitir la unión de la porción de tiol al compuesto prueba para formar un producto de reacción. Después de incubar la mezcla por un tiempo suficiente, cualquier método de separación apropiado (por ejemplo, cromatografía de capa delgada (TLC)) puede realizarse en la solución para aislar el producto de reacción. Después del aislamiento, el producto de reacción se purifica opcionalmente además (por ejemplo, filtración) y se detecta utilizando cualquier técnica apropiada, tal como resonancia magnética nuclear o espectroscopia de masa. La selección de los tiempos de reacción apropiados, ios solventes de reacción, y solventes de elusión se encuentra bien dentro de la experiencia de aquellos practicados en las técnicas químicas y bioquímicas. Una discusión más detallada de ensayos de unión de tiol se proporciona en lyengar eí al., J. Med. Chem. 47, 218-223 (2004). B. Ensayos Potenciales de Membrana Mitocondrial y Tensión Oxidativa La presencia de tensión oxidativa puede valorarse utilizando un anticuerpo capaz de unirse a nucleótidos oxidados, tal como el anticuerpo monoclonal bien caracterizado 8-OHdG. La estirpe de célula apropiada, tales como células de mieloma, pueden tratarse con un compuesto prueba en diversos puntos de tiempo. Las células pueden entonces fijarse con formaldehído y subsecuentemente permeabilizarse con metanol. La célula puede entonces inmunocolorarse con el anticuerpo nucleótido anti-oxidado apropiado y visualizado utilizando cualquier técnica de detección apropiada, tal como un sistema de anticuerpo secundario (por ejemplo, anticuerpo secundario biotinilado y adición subsiguiente de estreptavidina conjugada con Cy5). La localización nuclear puede entonces realizarse utilizando una coloración nuclear apropiada, tal como coloración YOYO-1® (Molecular Probes). La microscopia confocal láser puede entonces utilizarse para visualizar el daño oxidativo dentro del compartimiento celular mitocondrial. La perdida del potencial de membrana mitocondrial ("MMP") puede medirse por citometría de flujo en base a la toma de y retención de tintes cargados catiónicos en mitocondria sin dañar. Ejemplos de tintes útiles incluyen MitoTracker Red®, también conocido como CMX-Ros, y JC-1 (ambos disponibles de Molecular Probes, Eugene OR). Los tintes pueden difundirse pasivamente a través de membranas de plasma y tomarse y preferentemente retenerse en mitocondria con membranas sin dañar que retienen el ambiente de membrana interior electronegativo. A medida que MMP disminuye, la intensidad de señal de tinte se reduce en comparación con mitocondria sin dañar en células de control. El reactivo JC-1 experimenta un cambio de emisión fluorescente de rojo a verde cuando el interior mitocondrial se depolariza después de que MMP se pierde. Para una discusión más detallada de ensayos MMP, ver Decaudin eí al., Cytometry 25:333-340 (1996); y Manzini eí al., J Cell Biol 138:449-469 (1997). Los detalles adicionales en ensayos para medir tensión oxidativa y potencial de membrana mitocondrial pueden encontrarse en Dvorakova eí al., Neoplasia 97: 3544-3551 (2001 ), Dvorakova eí al., Biochemical Pharmacology 60: 749-758 (2000), Dvorakova eí al., Anti-Cancer Drugs 1 3: 1031 -1042 (2002), Dvorakova eí al., Molecular Cáncer Therapeutics 1 : 185-195 (2002). C. Ensayos de Actividad de Reductasa de Ribonucleótido La actividad de reductasa de ribonucleótido ("RNR") puede medirse al contactar primero un cultivo celular con el compuesto prueba apropiado. Las células se recolectan entonces y el lisato celular es purificado por una técnica apropiada para separar deoxicitidina (el producto específico de actividad RNR) y histidina después de fosforilación (tal como columna Affigel 601 o una columna HPLC C-1 8 de alta resolución). La cantidad de producto de deoxicitina se mide y compara con la cantidad de producto producido por la célula en la ausencia de compuesto prueba agregado determinado así la habilidad del compuesto prueba para inhibir o disminuir actividad RNR.

En un método alternativo, deoxiribonucleótidos (el producto de actividad RNR) se detectan a través de acoplamiento de la reacción de polimerasa de ADN con detección aumentada utilizando RNAsa para degradar ARN endógeno. Para una descripción más detallada de ensayos de actividad RNR, ver Wright eí al., Adv Enzyme Regul 19: 105-127 (1981 ) ; y Jong eí al., J Biomed Sci 5:62-68 (1998). V. Dosificación Una composición farmacéutica de la presente invención puede micronizarse o pulverizarse de manera que se distribuye y solubiliza más fácilmente por el cuerpo. Los procesos para triturar o pulverizar los fármacos se conocen bien en la materia, por ejemplo, al utilizar una trituradora de martillos o dispositivo triturador similar. Las formas de dosificación (composiciones) adecuadas para administración interna contienen desde aproximadamente 1 .0 miligramos a aproximadamente 5000 miligramos de ingrediente activo por unidad. En estas composiciones farmacéuticas, el ingrediente activo puede estar presente en una cantidad de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 95% en peso en base al peso total de la composición. Otra convención para denotar la forma de dosificación es en mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal (BSA). Típicamente, un adulto tendrá aproximadamente 1 .75 m2 de BSA. En base al peso corporal del paciente, la dosificación puede administrarse en una o más dosis varias veces por día o por semana. Unidades de múltiples dosis pueden requerirse para lograr una cantidad terapéuticamente efectiva. Por ejemplo, si la forma de dosificación es 1000 mg, y el paciente pesa 40 kg, una tableta o cápsula proporcionará una dosis de 25 mg por kg para aquel paciente A manera de guía general, para humanos una dosificación de tan poco como aproximadamente 1 miligramo (mg) por kilogramo (kg) de peso corporal y hasta aproximadamente 10000 mg por kg de peso corporal es adecuado como una dosis terapéuticamente efectiva. Preferentemente, desde aproximadamente 5 mg/kg a aproximadamente 2500 mg/kg de peso corporal se utiliza. Otras dosis preferidas varían entre 25 mg/kg a aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal. Sin embargo, una dosificación de entre aproximadamente 2 miligramos (mg) por kilogramo (kg) de peso corporal hasta aproximadamente 400 mg por kg de peso corporal también es adecuada para tratar algunos cánceres. Intravenosamente, las velocidades de administración más preferidas pueden variar de aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 mg/kg/minuto durante una infusión de velocidad constante. Una composición farmacéutica de la presente invención puede administrarse en una dosis diaria única, o la dosis diaria total puede administrarse en dosis divididas de dos, tres, o cuatro veces al día. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico se da generalmente en una o más dosis en una base diaria de desde una a tres veces en una semana. Una composición farmacéutica de la presente invención se administra por cualquier medio convencional disponible para utilizarse junto con farmacéuticos, ya sea como agentes terapéuticos individuales o en combinación con otros agentes terapéuticos. La cantidad e identidad de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y segundo agente antineoplástico para tratar cánceres, respectivamente, pueden variar de acuerdo a respuesta de paciente y fisiología, tipo y severidad de efectos secundarios, la enfermedad tratándose, el régimen de dosificación preferida, pronóstico de paciente u otros de tales factores. La proporción de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico al segundo agente antineoplástico puede variarse según sea necesario de acuerdo al efecto terapéutico deseado, los efectos secundarios observados de la combinación, u otras tales consideraciones conocidas por aquellos de experiencia ordinaria en las materias médicas. Generalmente, la proporción de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico al segundo agente antineoplástico puede variar de aproximadamente 0.5%:99.5% a aproximadamente 99.5%:0.5% en una base de peso. En una modalidad ejemplificativa, la proporción varía de aproximadamente 20%:80% a aproximadamente 80%:20%. En otra modalidad ejemplificativa, la proporción varía de aproximadamente 40%:60% a aproximadamente 60%:40%. En otra modalidad ejemplificativa, la proporción varía de aproximadamente 45%:55% a aproximadamente 55%:45%. En otra modalidad ejemplificativa, la proporción varía de aproximadamente 50%:50%. Cuando un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico se administra antes o después del segundo agente antineoplástico, las dosis respectivas y el régimen de dosificación de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y el segundo agente antineoplástico pueden variar. La terapia de combinación o adjunta puede ser secuencial, es decir, el tratamiento con oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y después el segundo agente antineoplástico (o viceversa), o puede ser tratamiento concomitante en donde el oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y segundo agente antineoplástico se administran substancialmente al mismo tiempo. La terapia secuencial puede ser dentro de un tiempo razonable después de la administración del oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico antes de administrar el agente antineoplástico. El tratamiento con ambos agentes al mismo tiempo puede ser en la misma dosis diaria o en dosis separadas. El régimen exacto dependerá de la enfermedad que se trata, la severidad de la enfermedad y la respuesta para el tratamiento. Por ejemplo, un régimen de dosificación completo de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico puede administrarse ya sea antes o después de un régimen de dosificación completa del segundo agente antineoplástico, o dosis alternas de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y el segundo agente antineoplástico pueden administrarse. Como un ejemplo adicional, un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico puede administrarse concomitantemente con el segundo agente antineoplástico. La identidad del segundo agente antineoplástico, el vehículo farmacéutico y la cantidad de oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico administrado puede variar ampliamente dependiendo de las especies y peso corporal del mamífero y el tipo de cáncer o infecciones virales que se tratan. La dosificación administrada puede variar dependiendo de factores conocidos, tales como características farmacodinámicas de un segundo agente antineoplástico y su modo y vía de administración; la edad, sexo, velocidad metabólica, eficiencia absorbente, saludo y peso del receptor; la naturaleza y grado de los síntomas; la clase de tratamiento concurrente que se administra; la frecuencia de tratamiento con; y el efecto terapéutico deseado. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y el segundo agente antineoplástico pueden administrase juntos en una forma de dosificación única o por separado en dos o más formas de dosificación diferentes. Estas pueden administrarse independientemente por la misma vía o por dos o más vías de administración dependiendo de las formas de dosificación empleadas. Las composiciones farmacéuticas adecuadas y formas de dosificación comprenderán preferentemente un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y opcionalmente un agente anticáncer o un compuesto antiviral. La proporción de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico a agente anticáncer o compuesto antiviral puede variar de aproximadamente 1 :0.01 a 10: 1 , y preferentemente 1 :0.05 a 1 : 1 en una base de peso. La dosis y el rango de agente anticáncer o compuesto antiviral dependerán del agente particular o compuesto y el tipo de cáncer o infección viral que se trata. Un experto en la materia será capaz de acertar la dosis apropiada. VI. Forma de Dosificación Una unidad de dosificación puede comprender un compuesto único o mezclas de un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico con uno o más segundos agentes antineoplásticos. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico puede administrarse en formas de dosificación orales tales como tabletas, cápsulas, pildoras, polvos, granulos, elixires, tinturas, suspensiones, jarabes y emulsiones. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico o segundo agente antineoplástico también pueden administrarse en forma intravenosa (bolo o infusión), intraperitoneal, subcutánea, o intramuscular, todas formas de dosificación útiles bien conocidas por aquellos expertos en la materia farmacéutica. Un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico o segundo agente antineoplástico se administra típicamente en mezcla con diluyentes, extensores, excipientes o vehículos farmacéuticos adecuados (colectivamente referidos en la presente como un vehículo farmacéuticamente aceptable o materiales vehículo) seleccionados de manera adecuada con respecto a la forma propuesta de administración y como consistente con prácticas farmacéuticas convencionales. La unidad será en una forma adecuada para administración oral, recta, tópica, inyección intravenosa, o parenteral. Las composiciones farmacéuticas pueden administrarse solas o pueden mezclarse con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Este vehículo puede ser un sólido o líquido, y el tipo de vehículo se elige generalmente en base al tipo de administración que se utiliza. Los ejemplos específicos de vehículos farmacéuticamente aceptables y excipientes que pueden utilizarse para formular formas de dosificación oral de la presente invención se conocen bien por un experto en la materia. Ver, por ejemplo, Patente de EE.UU. No. 3,903,297, que se incorpora en la presente para referencia en su totalidad para todos los propósitos. Las técnicas y composiciones para hacer formas de dosificación útiles en la presente invención también se conocen por un experto en la materia. Ver, por ejemplo, 7 Modern Pharmaceutics, Capítulos 9 y 10 (Banker & Rodees, Eds. , 1979); Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (Lieberman eí al., 1981 ); Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 2nd Ed. (1976); Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed. (Mack Publishing Company, Easto, Pa., 1 985); Advances in Pharmaceutical Sciences (David Ganderton, Trevor Jones, Eds., 1992); Advances in Pharmaceutical Sciences Vol. 7 (David Ganderton, Trevor Jones, James McGinity, Eds. , 1 995); Aqueous Polymerci Coatings for Pharmaceutical Dosage Forms (Drugs and the Pharmaceutical Sciences, Series 36 (James McGinity, Ed. , 1989); Pharmaceutical Particulate Carriers: Therapeutic Applications: Drugs and the Pharmaceutical Sciences, Vol. 61 (Alain Rolland, Ed., 1 993); Drug Delivery to the Gastrointestinal Tract (Ellis Horwood Books in the Biological Sciences, Series in Pharmaceutical Technology; J. G. Hardy, S. S. Davis, Clive G. Wilson, Eds.); Modern Pharmaceutics Drugs and the Pharmaceutical Sciences, Vol. 40 (Gilbert S. Banker, Christopher T. Rhodes, Eds. ,), todos de los cuales se incorporan en la presente para referencia en su totalidad para todos los propósitos. Las tabletas pueden contener aglutinantes adecuados, lubricantes, agentes desintegrantes, agentes colorantes, agentes saborizantes, agentes inductores de flujo, y agentes de fusión. Por ejemplo, para administración oral en la forma de unidad de dosificación de una tableta o cápsula, el componente de fármaco activo puede combinarse con un vehículo oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, inerte tales como lactosa, gelatina, agar, almidón, sucrosa, glucosa, celulosa de metilo, estearato de magnesio, fosfato de dicalcio, sulfato de calcio, manitol, sorbitol y lo similar. Los aglutinantes incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, endulzantes de maíz, gomas sintéticas y naturales tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, glicol de polietileno, ceras y lo similar. Los lubricantes utilizados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, esterato de sodio, esterato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y lo similar. Los desintegradores incluyen, sin limitación, almidón, celulosa de metilo, agar, bentonita, goma de xantano y lo similar.

Las composiciones farmacéuticas también pueden administrase en la forma de sistemas de suministro de liposoma, tales como vesículas unilamelares, vesículas unilamelares grandes, y vesículas multilamelares. Los liposomas pueden formarse de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina, o fosfatidilcolinas. Las composiciones farmacéuticas también pueden acoplarse a polímeros adecuados tales como vehículos de fármaco objetivo o como un profármaco. Los polímeros solubles adecuados incluyen polivinilpirrolidona, copolímero de piran, polihidroxiipropilmetacrilamida-fenol, poli hidroxietilasparta-midef enol, y polietilenóxido-polilisina con residuos de palmitoil. Además, un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico puede acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles para lograr liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, ácido poliglicólico, copolímeros de ácido poliláctico y poliglicólico, caprolactona de poliepsilón, ácido butírico de polihidroxi, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrlatos, y copolímeros de bloque anfifático o degradado de hidrogeles. El ingrediente activo puede administrarse oralmente en formas de dosificación sólida, tales como cápsulas, tabletas, y polvos, o en formas de dosificación líquida, tales como elíxires, jarabes, y suspensiones. También puede administrarse parenteralmente, en formas de dosificación líquida estéril. Las cápsulas de gelatina pueden contener el ingrediente activo y vehículos en polvo, tales como lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio, ácido esteárico, y lo similar. Los diluyentes similares pueden utilizarse para elaborar tabletas comprimidas. Tanto tabletas como cápsulas pueden elaborarse como productos de liberación inmediata o como productos de liberación sostenida para proporcionarse para la liberación continua de medicación durante un período de horas. Las tabletas comprimidas pueden ser revestidas de azúcar o revestidas de película para enmascarar cualquier sabor desagradable y proteger la tableta de la atmósfera, o entéricas revestidas para la desintegración selectiva en el tracto gastrointestinal. Para la administración oral en forma de dosificación líquida, los componentes de fármaco oral se combinan con cualquier vehículo oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable inerte tal como etanol, glicerol, agua, y lo similar. Los ejemplos de formas de dosificación líquida adecuadas incluyen soluciones o suspensiones en agua, grasas y aceites farmacéuticamente aceptables, alcoholes u otros solventes orgánicos, incluyendo esteres, emulsiones, jarabes o elixires, suspensiones, soluciones y/o suspensiones reconstituidas de granulos no efervescentes y preparaciones efervescentes reconstituidas de granulos efervescentes. Tales formas de dosificación líquida pueden contener, por ejemplo, solventes adecuados, conservadores, agentes emulsificadores, agentes de suspensión, diluyentes, edulcorantes, espesantes, y agentes de fusión.

Las formas de dosificación líquida para la administración oral pueden contener colorante y saborizante para aumentar aceptación del paciente. En general, agua, un aceite adecuado, salina, dextrosa acuosa (glucosa), y soluciones de azúcar relacionadas y glicoles tales como propilénglicol o polietilénglicol son vehículos adecuados para soluciones parenterales. Las soluciones para administración parenteral preferentemente incluyen una sal soluble en agua del ingrediente activo, agentes de estabilización adecuados, y si es necesario, sustancias reguladoras. Los agentes antioxidantes tales como bisulfuro de sodio, sulfuro de sodio, o ácido ascórbico, ya sea solos o combinados, son agentes de estabilización adecuados. También se utilizan ácido cítrico y sus sales y EDTA de sodio. Además, las soluciones parenterales pueden contener conservadores, tales como cloruro de benzalconio, metil- o propil-paraben, y clorobutanol. Los vehículos farmacéuticos adecuados se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, un texto de referencia estándar en este campo. Las composiciones farmacéuticas también pueden administrarse en forma intranasal por medio de uso de vehículos intranasales adecuados, o por medio de vías transdérmicas, utilizando aquellas formas de parches de piel transdérmicos bien conocidos por aquellos expertos en la materia. Para administrarse en la forma de un sistema de suministro transdérmico, la administración de dosificación generalmente será continua en lugar de intermitente a lo largo del régimen de dosificación.

Las formas intravenosas y parenterales también pueden incluir minerales y otros materiales para hacerlos compatibles con el tipo de inyección o sistema de suministro elegido. Las formas de dosificación farmacéutica útiles para la administración de un oxidante mitocondrial de unión tiol antioneoplástico se ilustran como sigue: A. Cápsulas Un gran número de cápsulas de unidad se preparan al llenar cápsulas de gelatina dura de dos piezas estándar cada una con 10 a 500 miligramos de ingrediente activo en polvo, 5 a 150 miligramos de lactosa, 5 a 50 miligramos de celulosa, y 6 miligramos de estearato de magnesio. B. Cápsulas de Gelatina Suave Una mezcla de ingrediente activo en un aceite digerible tal como aceite de soya, aceite de semilla de algodón o aceite de oliva se prepara y se inyecta por medio de una bomba de desplazamiento positivo en gelatina para formar cápsulas de gelatina suave conteniendo 100-500 miligramos del ingrediente activo. Las cápsulas se lavan y se secan. C. Tabletas Un gran número de tabletas se preparan mediante procedimientos convencionales de tal forma que la unidad de dosis fue 100-500 miligramos de ingrediente activo, 0.2 miligramos de dióxido de silicio coloidal, 5 miligramos de estearato de magnesio, 50-275 miligramos de celulosa microcristalina, 1 1 miligramos de almidón y 98.8 miligramos de lactosa. Los revestimientos adecuados pueden aplicarse para aumentar apeticibilidad o absorción retardada. D. Solución Inyectable Una composición parenteral adecuada para la administración por inyección se prepara al agitación 1 .5% en peso de ingrediente activo en 10% en volumen de propilénglicol y agua. La solución se hace isotónica con cloruro de sodio y se esteriliza. E. Suspensión Se prepara una suspensión acuosa para la administración oral de tal forma que cada 5 ml contienen 1 00 mg de ingrediente activo finamente dividido, 200 mg de carboximetilcelulosa de sodio, 5 mg de benzoato de sodio, 1 .0 g de solución de sorbitol, U.S.P. , y 0.025 ml de vainilla. F. Equipos La presente invención también incluye equipos farmacéuticas útiles, por ejemplo, para ei tratamiento de cáncer, que comprenden uno o más contenedores conteniendo una composición farmacéutica comprendiendo una cantidad terapéuticamente eficaz de un oxidante mitocondrial de unión de tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico, respectivamente. Tales equipos pueden además incluir, si se desea, uno o más de varios componentes de equipo farmacéutico convencionales, tales como, por ejemplo, contenedores con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, contenedores adicionales, etc. , según será fácilmente aparente para aquellos expertos en la materia. Las instrucciones impresas, ya sea como inserciones o como etiquetas, indicando cantidades de los componentes a administrar, directrices para administración, y/o directrices para mezclar los componentes, también pueden incluirse en el equipo. Deberá entenderse que a pesar de que los materiales específicos y condiciones son importantes en la práctica de la invención, los materiales y condiciones no especificadas no se excluyen mientras que no prevengan los beneficios de la invención de realizarse. Los vehículos farmacéuticos pueden ser un sólido o líquido y el tipo se selecciona generalmente en base al tipo de administración que se utiliza. El agente activo puede coadministrarse en la forma de una tableta o cápsula, liposoma, como un polvo aglomerado o en una forma líquida. Los ejemplos de vehículos sólidos adecuados incluyen lactosa, sucrosa, gelatina y ágar. Las cápsulas o tabletas pueden formularse fácilmente y pueden hacerse fáciles de absorber o masticar; otras formas sólidas incluyen granulos, y polvos voluminosos. Las tabletas pueden contener aglutinantes adecuados, lubricantes, diluyentes, agentes de desintegración, colorantes, saborizantes, agentes inductores de flujo, y agentes de fusión. Los ejemplos de formas de dosificación líquida adecuadas incluyen soluciones o suspensiones en agua, grasas y aceites farmacéuticamente aceptables, alcoholes u otros solventes orgánicos, incluyendo esteres, emulsiones, jarabes o elixires, suspensiones, soluciones y/o suspensiones reconstituidas de granulos no efervescentes y preparaciones efervescentes reconstituidas de granulos efervescentes. Tales formas de dosificación líquida pueden contener, por ejemplo, solventes adecuados, conservadores, agentes emulsificadores, agentes de suspensión, diluyentes, edulcorantes, espesantes, y agentes de fusión. Las formas de dosificación orales opcionalmente contienen saborizantes y colorantes. Las formas intravenosas y parenterales también pueden incluir minerales y otros materiales para hacerlos compatibles con el tipo de inyección o sistema de suministro seleccionado. Vil. Métodos de Tratamiento El método de tratamiento puede ser cualquier método adecuado que sea eficaz en el tratamiento del cáncer particular o tipo de tumor que se trata. El tratamiento puede ser de administración oral, rectal, local, parenteral o intravenosa o por inyección en el tumor o cáncer. El método para aplicar una cantidad eficaz también varía dependiendo del desorden o enfermedad que se trata. Se cree que el tratamiento parenteral por aplicación intravenosa, subcutánea, o intramuscular de un oxidante mitocondrial de unión de tiol antineoplástico, formulado con un vehículo adecuado, compuesto inhibidor de cáncer adicional o compuestos o diluyente para facilitar la aplicación serán el método preferido de administración de los compuestos para animales de sangre caliente. Un experto en la materia reconocerá que la eficacia de los compuestos puede lograrse a través de la selección rutinaria utilizando estirpes de célula de cáncer conocidas tanto in Vitro como in vivo. Las estirpes de célula se encuentran disponibles de Cultivo de Tipo Tejido Americano u otros laboratorios. Los siguientes ejemplos son ilustrativos y no se pretende que sean limitantes de la invención. A. Respuesta de Medición para Formulaciones Farmacéuticas La carga de tumor se valora antes de la terapia por medio de exploraciones objetivas del tumor tal como con radiografías de rayos X, tomografía computarizada (exploraciones CAT), exploraciones de resonancia magnética nuclear (NMR) o palpación física directa de la masa tumoral. Alternativamente, el tumor puede secretar una sustancia marcadora tal como alfafetoproteína de cáncer de colon, antígeno CA125 de cáncer ovárico, o proteína "M" de mieloma de suero de mieloma múltiple. Los niveles de estos productos secretados se absorben así por un estimado de carga de tumor a calcular. Estas mediciones indirectas y directas de la carga de tumor se hacen preterapia, y se repiten así en intervalos siguiente a la administración del fármaco a fin de medir si se ha obtenido o no una respuesta objetiva. Una respuesta objetiva en terapia de cáncer generalmente indica >50% de encogimiento de la enfermedad tumoral medible (una respuesta parcial), o desaparición completa de toda la enfermedad medible (una respuesta completa). Típicamente, estas respuestas deben mantenerse por un cierto período de tiempo, usualmente un mes, a clasificarse como una respuesta completa o parcial cierta. Además, puede haber estabilización del rápido crecimiento de un tumor o puede hacer encogimiento de tumor que es <50%, denominada una respuesta menor o enfermedad estable. En general, la supervivencia aumentada se asocia con la obtención de una respuesta completa a la terapia y en algunos casos, una respuesta parcial si se mantiene por períodos prolongados también puede contribuir a la supervivencia mejorada en el paciente. Los pacientes que reciben quimioterapia también se "clasifican" típicamente al grado de su enfermedad antes y siguiente a la quimioterapia se vuelven a clasificar así para ver si este grado de enfermedad ha cambiado. En algunas situaciones, el tumor puede encogerse de manera suficiente y si no se presentan metastasas, después puede ser posible la escisión quirúrgica después del tratamiento de quimioterapia en donde no fue posible antes que nada debido a la enfermedad esparcida. En este caso, el tratamiento de quimioterapia con las nuevas composiciones farmacéuticas se está utilizando como un adyuvante para la cirugía potencialmente curativa. Además, los pacientes pueden tener lesiones individuales en la espina o en cualquier parte que producen problemas sintomáticos tales como el dolor y estos pueden necesitar que tener radioterapia local aplicada. Esto puede hacerse además del uso continuado de las composiciones farmacéuticas sistémicas de la presente invención. B. Valoración de Toxicidad y Fijación de Regímenes de Dosificación Los pacientes se valoran para la toxicidad con cada curso de quimioterapia, típicamente buscando efectos en las enzimas de función de hígado y enzimas de función renal tal como liberación de creatinina o BUN así como también efectos en la médula ósea, típicamente una supresión de granulocitos importantes para luchar la infección y/o una supresión de plaquetas importantes para la hemostasis o detención de flujo sanguíneo. Para tales fármacos mielosupresores, el nadir en estos conteos de sangre normales, se alcanza entre 1 -3 semanas después de la terapia y recuperación después de seguir durante las siguientes 1 -2 semanas. En base a la recuperación de conteos de glóbulos blancos normales, los tratamientos pueden resumirse así. En general, las respuestas parciales y completas se asocian con al menos de 1 -2 de reducción de logaritmo en el número de células tumoral (un 90-99% de terapia eficaz). Los pacientes con cáncer avanzado típicamente tendrán >109 de células de tumor en diagnóstico, múltiples tratamientos se requerirán a fin de reducir la carga de tumor a un estado muy bajo y potencialmente obtener una cura de la enfermedad. C. Manejo Clínico de Pacientes Al final de un ciclo de tratamiento con una nueva formulación farmacéutica que podría comprender varias semanas de dosificación de fármaco continua, los pacientes se evaluarán para respuesta a terapia (reemisiones parciales y completas), toxicidad medida por trabajo de sangre y bienestar general, estado de rendimiento clasificado o calidad de análisis de vida. El último incluye el nivel de actividad general del paciente y su habilidad para hacer funciones diarias normales. Se ha encontrado que es un fuerte predictor de respuesta y algunos fármacos anti-cáncer pueden actualmente mejorar el estado de rendimiento y un sentido general de bienestar sin originar un encogimiento de tumor importante. La gemcitabina antimetabolita es un ejemplo de tal fármaco que se aprobó en cáncer pancreático para beneficiar la calidad de vida sin cambiar la supervivencia total o productor una tasa de respuesta objetiva alta. De esta manera, para ciertos cánceres que no son curables, las formulaciones farmacéuticas pueden proporcionar de igual forma un beneficio importante, estado de rendimiento de bienestar, etc. , sin afectar la remisión parcial o completa cierta de la enfermedad. En los desórdenes hematológicos tales como mieloma múltiple, linfoma y leucemia, las respuestas no se valoran por medio de la medición de diámetro de tumor ya que estas enfermedades son ampliamente metastáticos a lo largo de todas las áreas linfáticas y hematógenas del cuerpo. De esta manera, las respuestas para estas enfermedades difusamente diseminadas se miden usualmente en términos de los resultados de biopsia de médula ósea en donde el número de blastos de célula de tumor anormales se cuantifican y las respuestas completas se indican por la falta de detección (por ejemplo, detección microscópica) de cualquiera de las células tumor.ales en un espécimen de biopsia de médula ósea. Con el mieloma múltiple de neoplasma de célula B un marcador de suero, la proteína M, puede medirse por electroforesis y si se reduce sustancialmente esta es evidencia de la respuesta del tumor primario. Nuevamente, en mieloma múltiple, las biopsias de médula ósea pueden utilizarse para cuantificar el número de células de plasma de tumor anormal presentes en el espécimen. Para estas enfermedades generalmente la terapia de dosis más alta se utiliza típicamente para afectar las respuestas en la médula ósea y/o compartimientos linfáticos. Los usos cínicos proyectados para las nuevas formulaciones farmacéuticas son como tratamientos para: cáncer de pulmón, cáncer de mama, melanoma maligno, linfoma relacionado al SI DA, tumores resistentes a multifármaco (MDR) (Mieloma, Leucemia de Mama y Carcinoma de Colon), cáncer de próstata, mieloma múltiple, una plasmacitoma ß-linfocito, cáncer de célula epitelial ovárica de etapa avanzada, melanoma metastático, leucemias de linfoide y origen no linfoide, cáncer de colon metastático, cánceres de mama y cánceres de pulmón metastático, y neoplasmas del páncreas exocrino y endocrino. Los términos y las expresiones que se han empleado en la presente se utilizan como términos de descripción y no de limitación, y no existe intención en el uso de tales términos y expresiones de excluir equivalentes de las características mostradas y descritas, o partes de las mismas, se reconoce que varias modificaciones son posibles dentro del alcance de la invención reivindicada. Además, cualquiera o más características de cualquier modalidad de la invención pueden combinarse con cualquiera u otras más características de cualquier otra modalidad de la invención, sin alejarse del alcance de la invención. Por ejemplo, las características de las combinaciones sinergísticas de la presente invención son igualmente aplicables a los métodos para tratar los estados de enfermedad y/o composiciones farmacéuticas descritas en la presente. Todas las publicaciones, patentes, y solicitudes de patente citadas en la presente se incorporan de tal modo para referencia en su totalidad para todos los propósitos. EJEMPLOS Los siguientes ejemplos se ofrecen para ilustrar, pero no limitar la invención reivindicada. Materiales Imexon se obtuvo como una donación generosa del Institución Nacional de Cáncer y se elaboró por Seres Laboratorios Incorporated (Santa Rosa, CA). Cisplatin se obtuvo de Bayer Crop (Spokane, WA). Cytarabine se adquirió de Bedford Laboratorios (Bedford, OH), dexametasona se adquirió de Sigma (St. Louis, MO), doxorubicina se obtiene de Fujisawa USA (Deerfield, IL), y dacarbazine (DTIC) se adquirió de Bayer Corp. (West Haven, CT). 5-fluorouracil se adquirió de Allergan, Inc. (Irving, CA), gemcitabina se adquirió de Eli Lilly and Co. (Indiana, IN), melfalan y vinorelbina se obtuvieron de GlaxoWeIlcome, Inc. (Research Triangle Park, NC, y metotrexato se obtuvo de Bristol (Syracuse, NY). Paclitaxel se adquirió de Bristoí (Princeton, NJ), y taxotere se obtuvo de Aventis (Collegeville, PA). , Las células A375 de melanoma maligno humano y células 8226/s de mieloma humano se obtuvieron de la Colección de Cultivo Tipo Americano (Rockville, MD). Las células de leucemia mielógena aguda (KG-1 ) se proporcionan de tipo por Dr. Alan List (Universidad de Arizona, Tucson, AZ) y la estirpe de célula de cáncer pancreática, MiaPaCa, se proporciona generosamente por Dr. Daniel Von Hoff (Universidad de Arizona, Tucson, AZ). Todas las estirpes de célula se cultivaron en RPMI 1640 medio (Gibco-BRL Products, Gran Isla, NY) mejorado con 10% (v/v) de suero de cabra de bovino inactivado por calor (Hyclone-Laboratories, Logan, UT), 2 mM de L-glutamina, penicilina (100 U/ml) y estreptomicina (100 g/ml) en una incubadora humecta que contiene 5% de CO2 a37°C. Los ratones SCID hembra (c.B-17/lcrACC SCID) de (5-6) semanas de edad se adquirieron de una colonia de reproducción mantenida por la Universidad de Arizona, instalación de Cuidado de Animal (Tucson, AZ), y se alojaron de acuerdo a las directrices de la Asociación Americana para el Cuidado de Animal de Laboratorio bajo protocolos aprobados por la Universidad de Arizona, Cuidado de Animal Institucional y Comité de Uso. Los ratones se alojaron en cajas micro-aislante estándar en cría de chip vegetal y proporcionado con Isoblox (Harlan/Tekiad, madison, Wl). Los ratones recibieron comida para roedor esterilizada estándar (Harlan/Tekiad, Madison, Wl) y agua estéril ad libitum mientras que se mantuvo en un horario de 12 horas/12 horas luz/oscuridad. La Institución de Cuidado de Animal y Comité de Uso para la Universidad de Arizona aprobó todos los protocolos. A la terminación del experimento, los ratones se eutanizaron de acuerdo a los procedimientos señalados por la Asociación Americana Médica Veterinaria. Eiemplo 1 El Ejemplo 1 ilustra un método para determinar si una combinación de un oxidante mitocondrial de unión de tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico muestra un efecto citotóxico sinergístico in Vitro. Las placas de 96 cavidades (BD Biosciences, Lexington, KY) se cultivaron con aproximadamente 2500 células en 160 µ\ de medio de crecimiento por cavidad en las últimas once columnas de cada placa. La primera columna de cada placa se rellenó con 160 µ\ de medio de crecimiento que no contiene células a utilizar como un blanco. Después de un período de incubación de 24 horas, las células en las últimas diez columnas se drogaron (dejando la fila uno como un blanco y fila dos como un control con crecimiento de célula no inhibida) con ya sea 40 µ\ de imexon (un oxidante mitocondrial de unión de tiol antineoplástico), 40 µ\ de un segundo agente antineoplástico, o 20 µ\ de imexon y 20 µ\ de segundo agente antineoplástico. Doce segundos agentes antineoplásticos se probaron: cisplatin, citarabina, dexametasona, doxorubicina, dacarbazine (DTIC), 5-fluorouracil, gemcitabina, irinotecan, melfalan, metotrexato, paclitaxel, taxotere, y vinorelbina. Las concentraciones de fármaco y proporciones utilizadas en los estudios de combinación se determinaron de los valores IC5o de experimentos de fármaco único. Los rangos de fármaco utilizados para cada estudio de combinación se desarrollaron al elaborar los cambios de concentración pequeña arriba y abajo del valor IC50 por cada agente antitumoral. El IC50 de cada segundo agente antineoplástico se comparó al valor IC50 para imexon para establecer una proporción constante fija que se utilizó en las exposiciones de fármaco de combinación subsecuente. Cinco días después de medicar las células, las placas de 96 cavidades conteniendo 8226/células se analizaron utilizando el ensayo MTT (Rubinstein, L.V. eí al. J Nati Cáncer Inst 82: 1 1 13-1 1 1 (1990)) mientras que las placas que contienen células A375 se analizaron utilizando el ensayo SRB (Skehan, P. et al. J. Nati. Cáncer Inst 82: 1 107-1 1 12 (1 990)). La sinergia se determinó del índice de combinación calculado de acuerdo a los métodos de Chou eí al. , Advances in Enzyme Regulation 22:27-33 (1984). Los índices de combinación para las diversas combinaciones se muestran como una función de concentración de imexon en las FIGs. 1 -8. La tabla 1 muestra cuáles de los segundos agentes antineoplásticos en combinación con imexon demostraron de efectos sinergísticos.

Tabla 1 Ejemplo 2 El Ejemplo 2 ilustra un método para determinar si una combinación de un oxidante mitocondrial de unión de tiol antineoplástico y un segundo agente antineoplástico muestra un efecto anticáncer sinergístico in vivo. Ejemplo 2.1 : Cáncer Pancreático en ratones SCID Gemcitabine e imexon se utilizaron en combinación para tratar cáncer pancreático en ratones SCI D. Dieciséis ratones SCID se inocularon con 10x106 de células tumorales MiaPaCa viables en el día 0 por inyección subcutánea en el flanco posterior izquierdo. Cuatro ratones se utilizaron como controles y no recibieron tratamiento. Otros 4 ratones se trataron subsecuentemente con imexon por un horario de 100 mg/kg/día por 9 días comenzando en el día 1 . Un grupo de 4 ratones que reciben gemcitabina se trataron en 180 mg/kg/día en los días 1 , 5, y 9. Los 4 ratones finales recibieron imexon a 100 mg/kg/día por 9 días y gemcitabina a 180 mg/kg/día en los días 1 , 5 y 9. El crecimiento tumoral se midió en milímetros semanalmente utilizando calibradores para determinar la longitud y anchura. El peso de ratón y supervivencia también se monitoreo semanalmente. El volumen del tumor se calculó utilizando la fórmula: (longitud x anchura2) / 2 Según se muestra en la FIG. 9, los ratones SCID se trataron con una combinación de gemcitabina e imexon demostraron un grado superior de inhibición de crecimiento de tumor que los ratones de control, ratones tratados de imexon, y ratones tratados de gemcitabina. Ejemplo 2.2: Leucemia Mieloide en ratones SCID Citarabina e imexon se utilizaron en combinación para tratar leucemia mieloide aguda KG1 humana en ratones SCID. Veinte ratones SCID se inocularon con 10x106 de células de leucemia KG-1 viables en el día 0 por inyección subcutánea en el flanco posterior izquierdo. Cuatro ratones se utilizaron como controles y no recibieron tratamiento. Un grupo de 4 ratones se trataron subsecuentemente con imexon por un horario de 100 mg/kg/día por 9 días comenzando en el día 1 . Otro grupo de 4 ratones recibieron imexon a 150 mg/kg/día por cinco días comenzando en el día 1 Cuatro ratones se trataron con citarabina en 800 mg/kg/día en los días 1 , 5, y 9. El grupo final se trató con una combinación de los dos fármacos, recibiendo imexon a 100 mg/kg/día por nueve días y citarabina a 800 mg/kg/día en los días 1 , 5, y 9. El crecimiento tumoral se midió en milímetros semanalmente utilizando calibradores para determinar la longitud y anchura. El peso de ratón y supervivencia también se monitoreo semanalmente. El volumen del tumor se calculó utilizando la fórmula: (longitud x anchura2) / 2 Según se muestra en la FIG. 10, la combinación de citarabina e imexon mostró un grado superior de inhibición de crecimiento de tumor que cualquier concentración de ratones tratados con imexon, ratones tratados con citarabina, o el grupo de control. Eiemplo 3 El Ejemplo 3 muestra resultados toxicológicos de un experimento en el cual imexon y un segundo agente antineoplástico se administra a ratones. Un estudio toxicológico se realizó en ratones que portan no tumor (es decir, normales) dándose imexon (100 mg/kg/día x 9 días) ya sea con gemcitabina (180 mg/kg días 1 , 5 y 9 ) o citarabina (800 mg/kg días 1 , 4 y 7). Las pruebas se condujeron para evaluar si hubo aumento de la toxicidad de médula ósea o se redujo la función hepática y renal para imexon combinado con cualquier agente. Los resultados de los conteos de plaqueta para ratones tratados con imexon y citarabina o gemcitabina se muestran abajo en la Tabla 2.

Tabla 2 Los resultados muestran que no hubo efectos importantes en la función del hígado y renal para la combinación. Hubo una reducción en el conteo de glóbulo blanco para cada combinación, pero los niveles no alcanzaron el límite inferior para el rango normal de valores WBC. Casi toda la reducción incluyó los linfocitos. No hubo efectos en los neutrófilos, que se cree que son las células de médula ósea normales de objetivo principal en humanos. El número de glóbulos rojos aumentó ligeramente con imexon. De igual forma, los conteos de plaquetas cayeron con cada combinación, pero no disminuyeron significativamente los niveles. De manera global no se observó toxicidad de médula ósea importante en combinaciones de dosis completa de imexon con citarabina o gemcitabina.

Claims

REIVINDICACIONES 1 . Un método para tratar cáncer en un paciente humano en necesidad de tal tratamiento, dicho método comprendiendo administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición comprendiendo un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un agente de unión de ácido nucleico antineoplástico, dicha cantidad proporcionando un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. 2. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico comprende un anillo de aziridina. 3. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico es una aziridina-1 -carboxamida substituida o no substituida. 4. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico tiene la fórmula: en donde R\ R2, R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido, en donde R4 y R5 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido. 5. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico es imexon. 6. El método según la reivindicación 4, caracterizado porque R4 es ciano. 7. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho agente de unión de ácido nucleico antineoplástico es un agente de unión de ADN antineoplástico. 8. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona del grupo que consiste de mostaza de nitrógeno, derivado de mitomicina, sulfonato de alquilo, urea nitrosa, complejo de platino, altretamina, y carboxamida de imidazola. 9. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona del grupo consistiendo de mostaza de nitrógeno, carboxamida de imidazola y complejo de platino. 10. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho agente de unión de ácido nucleico antineoplástico se selecciona del grupo que consiste de melfalan, ciclofosfamida, carmustina, mecloretamina, tiotepa, clorambucil, lomustina, ifosfamida, mitomicina C, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina y dacarbazina. 1 1 . El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque dicho cáncer se selecciona de mieloma múltiple, plasmacitoma de ß-linfocito, cáncer ovárico, melanoma, leucemia, cáncer de colón, cáncer de mama, cánceres de pulmón y cáncer pancreático. 12. El método según la reivindicación 1 1 , caracterizado porque dicho cáncer pancreático es adenocarcinoma del páncreas. 13. El método según la reivindicación 5, caracterizado porque dicho agente de unión de ácido nucleico antineoplástico no es ciclofosfamida. 14. Un método para tratar cáncer en un paciente en necesidad de tal tratamiento, dicho método comprendiendo administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición comprendiendo un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y un análogo base de antimetabolito antineoplástico, dicha cantidad proporcionado un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. 15. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico comprende un anillo de aziridina. 16. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico tiene la fórmula: en donde R1 , R2, R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido, en donde R4 y R5 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido. 17. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico es imexon. 18. El método según la reivindicación 16, caracterizado porque R4 es ciano. 19. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho análogo base de antimeboltio antineoplástico se selecciona del grupo consistiendo de merpcaptopurina, tioguanina, azatioprina, fludarabina, cladribina, pentostatina, fluoroaracilo, citarabina, capecitabina, gemcitabina, y floxuridina. 20. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho análogo base de antimetabolito antineoplástico se selecciona del grupo que consiste de 5-fluorouracilo, citarabina y gemcitabina. 21 . El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho análogo base de antimetabolito antineoplástico es gemcitabina. 22. El método según la reivindicación 14, caracterizado porque dicho cáncer se selecciona de mieloma múltiple, plasmacitoma de ß-linfocito, cáncer ovárico, melanoma, leucemia, cáncer de colón, cáncer de mama, cánceres de pulmón y cáncer pancreático. 23. El método según la reivindicación 22, caracterizado porque dicho cáncer pancreático es adenocarcinoma del páncreas. 24. Un método para tratar cáncer en un paciente en necesidad de tal tratamiento, dicho método comprendiendo administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende un oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico y docetaxel, dicha cantidad proporcionando un efecto citotóxico terapéutico sinergístico. 25. El método según la reivindicación 24, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico comprende un anillo de aziridina. 26. El método según la reivindicación 24, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico tiene la fórmula: en donde R1 , R2, R3, R4 y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, y heteroarilo substituido o no substituido, en donde R4 y R5 se unen opcionalmente juntos para formar un anillo de 5 a 7 miembros substituido o no substituido. 27. El método según la reivindicación 26, caracterizado porque R4 es ciano. 28. El método según la reivindicación 24, caracterizado porque dicho oxidante mitocondrial de unión a tiol antineoplástico es imexon. 29. El método según la reivindicación 24, caracterizado porque dicho cáncer se selecciona de mieloma múltiple, plasmacitoma de ß-linfocito, cáncer ovárico, melanoma, leucemia, cáncer de colón, cáncer de mama, cánceres de pulmón y cáncer pancreático. 30. El método según la reivindicación 24, caracterizado porque dicho cáncer pancreático es adenocarcinoma del páncreas.