MXPA06002579A - Celulas madre atrapadas, y usos de las mismas - Google Patents

Abstract

La invención se refiere a células madre, en particular células madre embrionarias;se ha encontrado que, cuando estas células madre son atrapadas de modo que su proliferación es inhibida, producen material que inhibe la proliferación de otras células no atrapadas, incluyendo células madre y células neoplásicas y/o hiperproliferativas, pero de otra manera células normales;se ha encontrado también que las células cancerosas atrapadas producirán material que inhibe la proliferación de células madre;además, se ha encontrado que el entrampado de las células madre inhibe su diferenciación, y de esta manera el proceso de entrampado puede servir como un dispositivo de almacenamiento a largo plazo para mantener el estado indiferenciado de por lo menos una porción de las células atrapadas.

Description

CÉLULAS MADRE ATRAPADAS, Y USOS DE LAS MISMAS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a células atrapadas, tales como células madre. Las células atrapadas, cuando se cultivan en el material de entrampado, producen un producto que, cuando está en contacto con otras células no atrapadas que crecen libremente in vitro o in vivo, inhiben su proliferación. Además, el entrampado de las células madre actúa para inhibir la proliferación de por lo menos algunas de las células madre atrapadas, y puede inhibir la diferenciación de por lo menos una porción de las células madre atrapadas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Y TÉCNICA ANTERIOR El entrampado de materiales biológicos, tales como células, es una técnica que se ha usado para varios fines. Ejemplos de la literatura de patentes en esta área, son las patentes de E.U.A. Nos. 6,303,151 (Asina, et al.); 6,224,912 (Asina, et al.); 5,888,497 (Jain, et al.); 5,643,569 (Jain, et al.), y el documento RE38,027 (Jain, et al.), los cuales se incorporan en su totalidad en la presente como referencia. Esta familia de patentes relacionadas, muestra que células e islotes cancerosos pueden ser atrapados en una matriz biocompatible, tal como agarosa, mezclas de agarosa/colágena y mezclas de agarosa/gelatina, y entonces pueden ser recubiertos con agarosa. Las células atrapadas resultantes producen materiales que, entre otras cosas, salen de las matrices biocompatibles permeables en las cuales son retenidos, y tienen propiedades biológicas útiles. En el caso de islotes, se produce insulina. En el caso de células cancerosas, se difunde material desde la matriz, y este material tiene un efecto sobre el crecimiento y la proliferación de células cancerosas. Como se revisa en las patentes '912 y '151 , citadas anteriormente, se mostrará que este efecto cruza las especies, es decir, las células cancerosas atrapadas o encapsuladas de una determinada especie, producen material que inhibe el crecimiento y/o la proliferación de células cancerosas de otra especie, así como la especie de la cual las células cancerosas se originaron. Otros ejemplos de técnicas de entrampado incluyen, por ejemplo, las patentes de E.U.A. Nos. 5,227,298 (Weber, et al.); 5,053,332 (Cook, et al.); 4,997,443 (Walthall, et al.); 4,971 ,833 (Larsson, et al.); 4,902,295 (Walthall, et al.); 4,798,786 (Tice, et al.); 4,673,566 (Goosen, et al.); 4,647,536 (Mosbach, et al.); 4,409,331 (Lim); 4,392,909 (Lim); 4,352,883 (Lim); y 4,663,286 (Tsang, et al.), todas estas citas siendo incorporadas en la presente como referencia. El entrampado no siempre resulta en un impacto positivo sobre las células atrapadas. Véase, por ejemplo, Lloyd-George, et al., Biomat. Art. C?lls & Immob. Biotech., 21(3): 323-333 (1993); Schinstine, et al., Cell Transplant, 41(1 ): 93-102 (1995); Chicheportiche, et al., Diabetologica, 31 : 54- 57 (1988); Jaeger, et al., Progess In Brain Research, 82: 41-46 (1990); Zekorn, et al., Diabetologica, 29: 99-106 (1992); Zhou, et al., Am. J. Physiol., 21 A: C1356-1362 (1998); Darquy, et al., Diabetologica, 28: 776-780 (1985); Tse, et al., Biotech. & Bioeng., 51 : 271-280 (1996); Jaeger, et al., J. Neurol., 21 : 469-480 (1992); Hortelano, et al., Blood, 87(12): 5095-5103 (1996); y Gardiner, et al., Transp. Proc., 29: 2019-2020 (1997), todas estas citas siendo incorporadas en la presente como referencia. Ninguna de las referencias discutidas anteriormente, trata de la clase de células conocidas como células madre, incluyendo células madre embrionarias. Una definición de células madre, propuesta por Reya, et al., Nature, 414: 105-111 (2001), cita incorporada en la presente como referencia, se refiere a células madre como células que tienen la capacidad de perpetuarse por sí mismas a través de auto-renovación, y de generar células maduras de tejidos particulares vía diferenciación. Pueden obtenerse diferentes tipos de células madre, incluyendo células neurales, hematolinfoides, mieloides, etc., y otros tipos de células madre de varios órganos. Todas estas células tienen el potencial de desarrollarse en órganos o tejidos específicos. Ciertas células madre, tales como las células madre embrionarias, son pluripotentes, porque su vía de diferenciación no se ha determinado en lo absoluto, y pueden desarrollarse en varios órganos y tejidos.

Las discusiones de los varios usos terapéuticos para los cuales las células madre pueden aplicarse son bien conocidas, y no necesitan discutirse aquí. Es digno de mención, ya que atañe a la invención descrita en la presente, que las células madre son muy raras, su purificación y separación de otros tipos de células es laboriosa y difícil, y las células madre se diferenciarán en células maduras a menos que se traten de alguna forma para prevenir esto. Se ha encontrado ahora que los procedimientos de entrampado, en línea con los descritos por Jain, et al. e Iwatta, et al., Journ. Biomedical Material and Res., 26: 967 (1992), afectan a las células madre en una forma muy deseable. Para explicar en detalle, las células madre atrapadas producen materiales que inhiben la proliferación de varios tipos de células, incluyendo células madre y células cancerosas. El efecto de este material cruza las líneas entre las especies. Además, se ha encontrado que las células madre, cuando son atrapadas como se describe en la presente, retienen sus capacidades de diferenciación, incluyendo su pluripotencialidad, por un período indefinido. Estas características, así como otras, se verán en la descripción que sigue ahora.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS EJEMPLO 1 Dos diferentes líneas de células madre embrionarias de murino (ES) (es decir, ES-D3 y SCC-PSA1 , que están disponibles públicamente), se obtuvieron de la American Type Culture Collection ("ATCC"). Ambas líneas de células se desarrollaron bajo condiciones de cultivo estándar, que incluyeron crecimiento como una monocapa, células nutricias de fibroblastos embrionarios "STO" en la cumbre. Estas células se obtuvieron también de la ATCC. Las células madre se cultivaron en medio de DMEM que había sido complementado con suero de bovino fetal calificado para ES a 100%, factor inhibidor de leucemia (LIF) y ß-mercaptoetanol (en conjunto, "medio A"). Las células, que se criopreservaron cuando eran recibidas, se descongelaron, y se establecieron como cultivos después de por lo menos 3 pasajes antes de ser cultivadas como se describió anteriormente. Después de tres días, las células ES eran 70-80% confluentes, y fueron tripsinizadas y atrapadas entonces en perlas de agarosa, recubiertas con agarosa, de acuerdo con las patentes de E.U.A. Nos. 6,303,151 ; 6,224,912; y 5,888,497, las cuales se incorporan en la presente como referencia. En resumen, sin embargo, se usó agarosa Sigma XII, a una concentración inicial de aproximadamente 1.0%. Se añadió una alícuota de 100 µl de esta solución de agarosa a 34 µl de suspensión de células. Las perlas resultantes contenían 2.0 x 105 ± 1.5 x 104 células madre embrionarias de murino. Las perlas se administraron como una segunda cubierta de agarosa, a una concentración de aproximadamente 5.0%. Las perlas se cultivaron en medio como se describió anteriormente, salvo que no estaban presentes células nutricias STO viables o LIF ("medio B"). Se evaluó la viabilidad de las células en las perlas con el tiempo, vía examen microscópico e histoquímico estándar, así como pruebas de MTT estándar, usando células removidas de perlas o mantenidas en las perlas, en varios puntos de tiempo. Se observó que las células madre atrapadas aumentan su actividad metabólica cuando son recubiertas primero. Esto va seguido de una disminución en actividad, ya que mueren células vía apoptosis, alcanzando su punto de actividad metabólica más bajo alrededor del día 21. Sin embargo, después de este punto bajo, las células supervivientes proliferan lentamente, y se observó actividad metabólica total que aumenta gradualmente hasta el día 35 post-entrampado y más allá. Esto iguala las observaciones en células cancerosas atrapadas. Morfológicamente, hubo una diferencia significativa entre las colonias formadas dentro de la capa interior de agarosa de la perla, por las células cancerosas y las formadas por las células madre. Aunque ambos tipos de colonias son de forma ovoide, las formadas por las células cancerosas se caracterizan por una zona exterior de células viables (en general, de dos a tres células de espesor), con una zona central de restos celulares eosinofílicos. Las colonias formadas por las células madre, por otra parte, son ocupadas totalmente por células viables, y no existe zona central de restos celulares.

EJEMPLO 2 En estos experimentos, se puso a prueba el efecto inhibidor de las células madre sobre la proliferación de otras células madre. Se pusieron a prueba perlas de agarosa/agarosa de diez semanas que contenían células madre (células SCC-PSA1 ) para viabilidad, usando la prueba de MTT discutida anteriormente, y se cultivaron en medio B discutido en el ejemplo 1 , por 6 días. Después de 6 días, el medio había sido acondicionado por las células madre atrapadas. Se denominó por lo tanto el medio acondicionado por células madre (SCM). Después de estos 6 días, el SCM se transfirió a placas de 6 cavidades que contenían células SCC-PSA1 nuevas. Cada una de estas placas contenía 9 x 105 células nutricias STO, que se cubrieron con 1.5 x 104 células SCC-PSA1. Las células STO se habían tratado con mitomicina C para prevenir ia proliferación. Hubo tres controles, es decir, cavidades que contenían medio B (un medio no acondicionado), y tres cavidades que contenían el SCM. Después de 3 días, los contenidos de todas las cavidades fueron tripsinizados, y se hizo el conteo del total de células, usando métodos estándar. El conteo general se ajustó para dar razón de las 9 x 105 células nutricias. Se dan a continuación los resultados: Se llevó a cabo un experimento similar, con los siguientes resultados: Además, el efecto no fue específico de la línea de células, según se demuestra mediante los siguientes resultados, en donde se añadieron células ES-D3 al medio: EJEMPLO 3 El ejemplo 2 mostró que el efecto inhibidor de las células madre sobre la proliferación, no era específico de la línea de células. En los experimentos descritos en la presente, se pusieron a prueba las células madre atrapadas para su capacidad para inhibir la proliferación de células cancerosas. En estos experimentos, se usaron células tumorales RENCA. Se sembró un total de 15,000 células tumorales por cavidad. Se usó SCM (acondicionado con SCC-PSA1 o ES-D3) como se describió anteriormente, como lo fue el medio de control (medio B), como también se describió. Con respecto al SCM, el acondicionamiento ocurrió durante 5 días. La prueba se llevó a cabo durante un período de 32 semanas. La inhibición de las células RENCA se determinó fijando las células con metanol a 100%, seguido de tinción con rojo neutro, lisis con SDS y exploración con un espectrofotómetro, para medir la cantidad de rojo neutro en el lisado de células, que es proporcional al número de células por cavidad.

Los resultados se resumen en los dos cuadros siguientes, que representan el trabajo con células madre ES-D3 y SCC-PSA1 , respectivamente. Los resultados para las semanas 1 a 3 se correlacionan con los resultados discutidos en el ejemplo 1 , es decir, muerte de las células madre atrapadas, alcanzando un punto bajo en el día 21 , seguido de regeneración.

EJEMPLO 4 En los experimentos anteriores, se puso a prueba y se demostró la capacidad de las células madre atrapadas para inhibir la proliferación de células madre y células cancerosas. Los experimentos siguientes se diseñaron para determinar si las células madre atrapadas podrían inhibir la proliferación de células madre.

Se sembraron y se cultivaron células madre de la misma forma como se describió anteriormente. Se cultivaron perlas que contenían células RENCA, preparadas como se describe en las patentes de E.U.A. Nos. 6,303,151 ; 6,224,912; y 5,888,497 en medio B para acondicionarlas, por 5 días. Este medio acondicionado para células RENCA (RCM) se añadió entonces a las células madre sembradas, y se hizo el conteo de las células madre después de 3 días. Los resultados siguientes dan los datos primero para las células ES-D3, y después para las células SCC-PSA1 : Estos resultados indican que las células cancerosas atrapadas, inhibieron la proliferación de células madre.

EJEMPLO 5 Un problema con la investigación de las células madre es el hecho de que, por su naturaleza, las células madre se diferencian. Puesto que es difícil asegurar las células madre y evitar que se diferencien en primer lugar, sería deseable contar con una metodología disponible por la cual las células madre pudieran mantenerse en su estado indiferenciado, por un período tan largo como sea posible. Para este fin, se atraparon células madre como se describió anteriormente en el ejemplo 1. Las estructuras resultantes se almacenaron en el medio B descrito anteriormente, y se pusieron a prueba durante un período de más de dos años. Durante este período de dos años, se liberó a las células madre de sus estructuras de entrampado, y se cultivaron bajo condiciones estándar (incluyendo co-cultivos de STO y aditivo de medio de LIF). En todos los casos, las células liberadas establecieron una monocapa tradicional de células madre que proliferó en una forma indiferenciada, pero mantuvieron la capacidad de diferenciarse espontáneamente. Esto demuestra que el entrampado de las células madre puede mantener sus fenotipos indiferenciados por más de dos años en ausencia de los inhibidores de diferenciación requeridos tradicionalmente (por ejemplo, STO y LIF). No obstante este hecho, si las células no reciben los materiales requeridos después de un corto período, comienzan la diferenciación.

Los ejemplos anteriores describen la invención que incluye, entre otras cosas, composiciones de materia que pueden usarse para producir material que suprime la proliferación de células tales como, pero no limitadas a, células cancerosas y células madre. Estas composiciones comprenden células madre, tales como células madre embrionarias atrapadas en un material selectivamente permeable que forma una estructura que restringe la proliferación de las células atrapadas. Como resultado de que son restringidas, las células producen cantidades de material inesperadamente altas que suprimen la proliferación de otras células. Las células restringidas producen más material, que células no restringidas comparables. El material usado para producir las estructuras de la invención, puede incluir cualquier material biocompatible que restrinja el crecimiento de células madre, induciéndolas de esta manera para que produzcan mayores cantidades de material de proliferación celular supresor del crecimiento. La estructura tiene un tamaño de poro adecuado tal, que el material anterior puede difundirse hacia el ambiente externo, y tal que puede prevenir que productos o células del sistema inmune del hospedero entren a la estructura y causen el rechazo de las células, o de otra manera deterioren su capacidad para sobrevivir y continuar produciendo el material deseado. Los materiales usados para formar la estructura serán también capaces de mantener células viables (con proliferación restringida, pero sobreviviendo), tanto in vivo como in vitro, de preferencia por períodos de hasta varios años, proveyendo la entrada de nutrientes adecuados y la eliminación de productos de desecho celulares, y un ambiente intra-estructural fisicoquímico compatible. Las estructuras resultantes proveen un ambiente adecuado para el estudio extendido de células madre y sus varios factores de diferenciación, transcripción y nucleares. Los resultados obtenidos pueden usarse para dirigir la diferenciación deseada de otras células madre. Los materiales usados para preparar la estructura son de preferencia bien tolerados cuando se implantan in vivo, más preferiblemente por la duración de implantación entera en el hospedero. Una lista no limitativa de materiales y combinaciones de materiales que podrían usarse, incluyen alginato-poli-(L-lisina); alginato-poli-(L-lisina)-alginato; alginato-poli-(L-lisina)polietilenimina; quitosán-alginato; metacrilato de polihidroxietilo-metacrilato de metilo; carbonilmetilcelulosa; carragenina-K; quitosán; agarosa-polietersulfona-bromuro de hexadimetirina (polibreno); etilcelulosa; geles de sílice; y combinaciones de los mismos. Las estructuras que comprenden las composiciones de materia pueden tomar muchas formas, tales como una perla, una esfera, un cilindro, una cápsula, una hoja, o cualquier otra forma que sea adecuada para implantación en un sujeto y/o cultivo en un ambiente in vitro. El tamaño de la estructura puede variar, dependiendo de su uso final, como será claro para el experto en la técnica. Las estructuras de la invención son selectivamente permeables, de modo que puedan entrar nutrientes a la estructura, y de modo que el material que inhibe la proliferación, así como desechos celulares, puedan salir de la estructura. Para uso in vivo, se prefiere que las estructuras prevengan la entrada de productos o células del sistema inmune de un hospedero que causarían el rechazo de las células, o de otra manera deteriorarían la capacidad de las células para producir el material supresor de la proliferación. El término "atrapadas", como se usa en la presente, significa que las células son contenidas dentro de una estructura que previene su escape hacia el ambiente que rodea a la estructura, tal como un ambiente in vivo o in vitro. No obstante la incapacidad para escapar de la misma, las células están dentro de una estructura que permite la entrada de moléculas tales como agua, nutrientes, etc., y permite el paso, desde la estructura, de materiales de desecho y productos moleculares producidos por las células. La estructura en la cual las células están contenidas, sustenta de esta manera la viabilidad/supervivencia continua de las células por largos períodos. Puede también, dependiendo de la naturaleza de la estructura/material, hacer que las células contenidas dentro de la misma alteren su comportamiento incluyendo, pero no limitado a, comportamiento tal como proliferación, estado de diferenciación y/o expresión fenotípica. Mediante la inhibición de la diferenciación, se tiene de hecho un dispositivo de almacenamiento útil para mantener células madre como células madre. Ejemplos de medios (sin ser exclusivos) para atrapar las células, incluyen encapsularlas, encajonarlas, encerrarlas, o de otra manera rodearlas en todos lados con algún material permeable. Mediante el entrampado, se inhibe la proliferación de las células madre atrapadas. Además, existen situaciones en donde por lo menos una porción de la población que es atrapada, tampoco sufre diferenciación alguna. Otro aspecto de la invención incluye composiciones que son útiles en la supresión de la proliferación celular. Las composiciones se preparan cultivando células restringidas como se describió anteriormente en un medio de cultivo adecuado, seguido de recuperación del medio acondicionado resultante. Pueden formarse entonces concentrados a partir del medio acondicionado. La invención no se limita a algún tipo particular de especie de célula madre; puede usarse cualquier tipo de célula madre de conformidad con la invención. Ejemplos de tipos de células que pueden usarse, son células madre de humano o de murino, así como células madre de otras especies, especialmente especies de mamíferos. Se prefieren especialmente las células madre embrionarias, pero pueden usarse también células madre de varios órganos y/o sistemas de órganos. Como será claro a partir de esta descripción, otro aspecto de la invención son métodos terapéuticos para el tratamiento de individuos que sufren de trastornos de proliferación celular, tales como enfermedad renal poliquística, reacción tisular hipertrófica (incluyendo formación de cicatriz), enfermedad autoinmune, trastornos linfo-proliferativos, policitemia vera, así como neoplasia de células benigna y maligna. Cuando se usa en un contexto terapéutico, como se discutirá más adelante, el tipo de célula restringida en la estructura no necesita ser el mismo tipo de célula que esté causando el trastorno del cual el individuo sufre, si bien puede ser el mismo tipo de célula. Uno de dichos métodos incluye insertar por lo menos una de las estructuras de la invención en el sujeto, en una cantidad suficiente para causar la supresión de la proliferación celular en el sujeto. De preferencia, el sujeto es un ser humano, aunque es aplicable a otros mamíferos, tales como animales domésticos, animales de graja, o cualquier tipo de animal. La composición de la presente invención puede usarse como terapia primaria en el tratamiento de varios trastornos proliferativos celulares, y como un tratamiento adyuvante en combinación con otras terapias. Por ejemplo, en trastornos neoplásicos, tales como cáncer, los pacientes pueden tratarse con las composiciones y los métodos descritos en la presente, en conjunto con radioterapia, quimioterapia o tratamiento con otros materiales biológicamente activos, tales como citocinas, moléculas antisentido, hormonas esteroides, terapia génica, y similares. Además, las composiciones y los métodos de la invención pueden usarse en conjunto con procedimientos quirúrgicos para tratar trastornos tales como cáncer, por ejemplo, implantando las estructuras después de resección de un tumor para prevenir la reanudación del crecimiento y la metástasis. Los cánceres que estén presentes en un estado inoperable, pueden hacerse operables mediante tratamiento con las composiciones anti-proliferativas de la invención. La proliferación excesiva de células que no se necesitan o son deseables para el funcionamiento adecuado de los sistemas de órganos, pero que no son neoplásicas, tales como las células de policitemia vera o enfermedad renal poliquística, puede tratarse también mediante estos medios. Trastornos hiperproliferativos, tales como policitemia vera o enfermedad renal poliquística, implican células que exhiben proliferación excesiva, pero que generan células de otra manera normales (es decir, no neoplásicas o transformadas). Dichos trastornos, que resultan en numerosas células que no son necesarias o deseables para el funcionamiento adecuado de los órganos, pueden tratarse también mediante estos medios. Además, condiciones que se caracterizan por células normales hiperproliferativas, tales como cicatrices hipertróficas, pueden tratarse también de esta forma. En condiciones tales como esta, células normales, es decir, fibroblastos, han proliferado más allá de lo necesario para la curación, pero a diferencia de las neoplasias, no se caracterizan por más proliferación no regulada en curso. Otras condiciones caracterizadas por este fenómeno son bien conocidas por los expertos en la técnica, y no necesitan exponerse aquí. Las composiciones de la invención pueden usarse también profilácticamente en individuos que estén en riesgo de desarrollar trastornos de proliferación celular, sujetos que muestren la presencia de factores de riesgo individuales, una historia familiar del trastorno en general, una historia familiar de un tipo específico (por ejemplo, cáncer de mama), y exposición a materiales ocupacionales u otros materiales problemáticos. Para profilaxis contra el cáncer, por ejemplo, una cantidad profilácticamente efectiva de las estructuras de la invención se administra al individuo tras la identificación de uno o más factores de riesgo.

Como se indicó anteriormente mediante los ejemplos, el efecto antiproliferativo no es limitado por el tipo de célula usado, ni por la especie de la cual la célula madre se originó. Por ende, pueden administrarse estructuras que contengan células madre de un primer tipo, a un sujeto de una diferente especie. Por ejemplo, pueden restringirse células madre de murino en la estructura de la invención, y pueden administrarse entonces a un humano. De hecho, las estructuras pueden contener células madre de la misma especie que se esté tratando. Aún más, las células madre pueden tomarse del individuo para ser tratadas, atrapadas y restringidas, y pueden administrarse entonces al mismo individuo. Procedimientos para producir las estructuras de la invención, son también parte de la invención. Otras facetas de la invención se aclararán para el experto en la técnica, y no necesitan exponerse aquí. Los términos y las expresiones que se han usado, se usan como términos de descripción y no de limitación, y no hay intención alguna en el uso de dichos términos y expresiones, de excluir los equivalentes de las características mostradas y descritas, o porciones de las mismas, reconociéndose que varias modificaciones son posibles dentro del alcance de la invención.

Claims (6)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Una composición de materia que comprende una muestra de células madre atrapadas en una estructura biocompatible selectivamente permeable, en donde el entrampado de dicha muestra de células madre inhibe la proliferación de por lo menos una porción de las células madre atrapadas. 2.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque dichas células madre son células madre de mamífero. 3.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque dichas células madre de mamífero son células madre de humano. 4.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque dichas células madre de mamífero son células madre de murino. 5.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque dichas células madre son células madre embrionarias. 6.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque dichas células madre son atrapadas en agarosa. 7.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada además porque dicha agarosa es recubierta con agarosa. 8.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque dichas células madre son atrapadas en una mezcla de agarosa y colágena, o una mezcla de agarosa y gelatina. 9.- La composición de materia de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada además porque dicha mezcla de agarosa y colágena o dicha mezcla de agarosa y gelatina, es recubierta con agarosa. 10.- Un procedimiento para inhibir la proliferación de por lo menos una porción de una población de células madre, que comprende atrapar dichas células madre en una estructura biocompatible selectivamente permeable que induce a que dichas células madre produzcan un factor que inhibe su proliferación. 11.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque dichas células madre son células madre de mamífero. 12.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de humano. 13.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de murino. 14.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque dichas células madre son células madre embrionarias. 15.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque dichas células madre son atrapadas en agarosa. 16.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque dicha agarosa es recubierta con agarosa. 17.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque dichas células madre son atrapadas en una mezcla de agarosa y colágena, o una mezcla de agarosa y gelatina. 18.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque dicha mezcla de agarosa y colágena o dicha mezcla de agarosa y gelatina, es recubierta con agarosa. 19.- Un método para inhibir la proliferación de por lo menos una porción de una población de células no atrapadas, que comprende cultivar dicha población de células en presencia de la composición de materia de conformidad con la reivindicación 1. 20.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es una población de células madre. 21.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es de una especie diferente de la especie de origen de las células atrapadas en dicha composición de materia. 22.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es de la misma especie que la especie de origen de las células atrapadas en dicha composición de materia. 23.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es una población de células cancerosas. 24.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es una población de células de mamífero. 25.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque dicha población de células es una población de células hiperproliferativas. 26.- El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque dicha población de células de mamífero es una población de células de humano. 27.- El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque dicha población de células de mamífero es una población de células de murino. 28.- El uso de la composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para inhibir la proliferación de por lo menos una porción de una población de células en un sujeto. 29.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde dicha población de células es una población de células madre. 30.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde dicha población de células comprende células neoplásicas. 31.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde dicha población de células es una población de células hiperproliferativas. 32.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde las células atrapadas en dicha composición de materia son de una especie diferente de dicho sujeto. 33.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde las células atrapadas en dicha composición de materia son de la misma especie que dicho sujeto. 34.- El uso que se reclama en la reivindicación 33, en donde dichas células son antologas a dicho sujeto. 35.- El uso que se reclama en la reivindicación 28, en donde dicho sujeto es un humano. 36.- El uso que se reclama en la reivindicación 33, en donde dicho sujeto es un humano. 37.- Un método para inhibir la proliferación de una población de células no atrapadas, que comprende cultivar la composición de materia de conformidad con la reivindicación 1 , en un medio por un tiempo suficiente para permitir la difusión de un material que inhibe la proliferación de células en dicho medio, y poner en contacto dicho medio con dicha población de células no atrapadas por un tiempo suficiente para inhibir la proliferación de dicha población de células no atrapadas, 38.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque dicha población de células no atrapadas es una población de células madre. 39.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque dicha población de células no atrapadas y las células atrapadas en dicha composición de materia, son de una especie diferente. 40.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque dicha población de células no atrapadas y las células atrapadas en dicha composición de materia, son de la misma especie. 41.- El método de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado además porque dicha población de células madre es una población de células de mamífero. 42.- El método de conformidad con la reivindicación 41 , caracterizado además porque dicha población de células de mamífero es una población de células de humano. 43.- El método de conformidad con la reivindicación 41 , caracterizado además porque dicha población de células de mamífero es una población de células de murino. 44.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque comprende poner en contacto dicho medio con un sujeto que necesita de inhibición de la proliferación de una población de células. 45.- El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque dicha población de células es una población de células madre. 46.- El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque dicha población de células comprende células neoplásicas. 47.- El método de conformidad con ia reivindicación 44, caracterizado además porque las células atrapadas en dicha composición de materia son de una especie diferente de dicho sujeto. 48.- El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque las células atrapadas en dicha composición de materia son de la misma especie que dicho sujeto. 49.- El método de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado además porque dichas células son antologas a dicho sujeto. 50.- Un método para inhibir la proliferación de una población de células madre no atrapadas, que comprende cultivar dichas células madre en presencia de una composición de materia que comprende una muestra de células cancerosas atrapadas en una estructura biocompatible selectivamente permeable, en donde dicha muestra de células cancerosas produce material que inhibe la proliferación de dichas células madre. 51.- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre son células madre de mamífero. 52.- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre son células madre embrionarias. 53.- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de humano. 54,- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de murino. 55.- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre y dichas células cancerosas, se originan de la misma especie. 56.- El método de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque dichas células madre y dichas células cancerosas, se originan de diferentes especies. 57.- Un método para inhibir la proliferación de células madre no atrapadas, que comprende cultivar una composición de materia que comprende una muestra de células cancerosas atrapadas en una estructura biocompatible selectivamente permeable, en donde dicha muestra de células cancerosas produce material que inhibe la proliferación de células madre y que se difunde en un medio de cultivo, y poner en contacto dicho medio de cultivo con dichas células madre. 58.- El método de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado además porque dichas células madre son células madre de mamífero. 59.- El método de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado además porque dichas células madre son células madre embrionarias. 60.- El método de conformidad con la reivindicación 58, caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de humano. 61.- El método de conformidad con la reivindicación 58, caracterizado además porque dichas células madre de mamífero son células madre de murino. 62.- El método de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado además porque dichas células madre y dichas células cancerosas, se originan de la misma especie. 63.- El método de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado además porque dichas células madre y dichas células cancerosas, se originan de diferentes especies. 64.- Una composición de materia que comprende una muestra de células madre atrapadas en una estructura biocompatible selectivamente permeable, en donde el entrampado de dicha muestra de células madre hace que por lo menos una porción de las células madre atrapadas permanezca en un estado indiferenciado. 65.- Un procedimiento para inhibir la diferenciación de por lo menos una porción de una población de células madre, que comprende atrapar dichas células madre en una estructura biocompatible selectivamente permeable que induce a que dichas células madre produzcan un factor que hace que dicha porción permanezca en un estado indiferenciado. 66.- Un método para inhibir la diferenciación de por lo menos una porción de una población de células madre, que comprende atrapar dichas células madre en una estructura biocompatible selectivamente permeable, en donde dicho entrampado hace que por lo menos una porción de dichas células madre permanezca en un estado indiferenciado.