MXPA04011007A - Metodo para reducir el dolor usando virus oncoliticos. - Google Patents

Abstract

La presente invencion proporciona un metodo para reducir el dolor asociado con neoplasmas en un mamifero, que comprende administrar una cantidad efectiva de uno o mas virus oncoliticos. Preferiblemente, el mamifero tambien recibe un analgesico, y la cantidad de analgesico requerida por el mamifero se reduce cuando es administrado el virus oncolitico. Los virus oncoliticos son preferiblemente reovirus. El mamifero puede ser adicionalmente sometido a quimioterapia, inmunoterapia, terapia hormonal y/o por radiacion.

Description

METODO PARA REDUCIR EL DOLOR USANDO VIRUS ONCOLITICOS CAMPO DE LA INVENCION La presente invención pertenece a métodos para reducir el dolor asociado con trastornos proliferativos en un mamífero usando virus oncolíticos, particularmente reovirus . ANTECEDENTES DE LA INVENCION El dolor es un síntoma prevalesciente en pacientes con cáncer, que afecta hasta el 50% de los pacientes que experimentan un tratamiento activo contra el cáncer y hasta el 90% de aquéllos con enfermedad avanzada. (Portenoy, et al., 1994; Cleeland, et al., 1994). La Organización Mundial de la Salud, organizaciones profesionales internacionales y nacionales, y agencias gubernamentales de los Estados Unidos y otros . países han reconocido la importancia del manejo del dolor como parte del cuidado de rutina del cáncer (Miguel, 2000) . Los métodos actuales para el tratamiento del dolor en pacientes con cáncer se basan principalmente en la terapia con fármacos, incluyendo la terapia con opioides, analgésicos no. opioides y adyuvantes. Sin embargo, los narcóticos como la morfina tienen la desventaja de la adicción y desarrollo de tolerancia. El uso de analgésicos no opioides y adyuvantes es limitado por los efectos laterales y se relaciona con toxicidad gastrointestinal y renal (Cleary, 2000) .

Ref: 159518 Para pacientes que no responden adecuadamente a la terapia con fármacos, son consideradas terapias con analgésicos alternativas. Esas terapias incluyen intervenciones anestesiológicas, quirúrgicas y neuroestimuladoras. Por ejemplo, la neurólisis destructiva usando fenol o alcohol es considerada cuando otros métodos no destructivos no son posibles o han fallado, el dolor está bien localizado, y el bloqueo no comprometerá la fuerza o función del esfínter. Aunque algunas técnicas neuroestimuladoras pueden ser relativamente no invasivas (por ejemplo, estimulación nerviosa eléctrica transcutánea y acupuntura) , otras son aún invasivas (por ejemplo, estimulación de la columna dorsal o estimulación cerebral profunda) . . Las técnicas neuroquirúrgicas dirigidas contra estructuras del sistema nervioso periférico o central específicas pueden beneficiar únicamente a un grupo altamente seleccionado con dolor relacionado con el cáncer refractario. La cordotomía es más f ecuentemente usada (Lesage y Portenoy, 1999) . En vista de las desventajas asociadas con los medios actuales para tratar el dolor en pacientes con cáncer, existe aún la necesidad de métodos mejorados para el tratamiento del dolor que no tengan efectos laterales negativos o toxicidad, que no sean invasivos y que no estén asociados con el desarrollo de tolerancia.

SUMARIO DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con el descubrimiento sorprendente de que los virus oncolíticos, en particular los reovirus, puedan reducir el dolor asociado con trastornos proliferativos, particularmente con el crecimiento de una masa tumoral sólida. Los reovirus son un agente antitumoral oncolítico altamente selectivo, los cuales se replican selectivamente en células activadas con ras con la salida lítica posterior de las células (véase, por ejemplo, las Patentes Estadounidenses Nos. 6,110,461; 6,136,307; 6,261,555; y 6,344,195). En la presente invención, demostramos que la administración de virus da como resultado la disminución de los síntomas del dolor asociado con un tumor directo. Esta disminución del dolor ocurrió con y sin regresión real del tumor. Además, no hubo efectos laterales significativos? o efectos adversos relacionados con la administración de reovirus . En consecuencia, la presente invención proporciona un método para reducir el dolor asociado con un neoplasma en un mamífero que comprende administrar al mamífero una cantidad efectiva de uno o más virus oncolíticos. Preferiblemente, el mamífero sufre de dolor debido al neoplasma, y depende de medidas analgésicas para reducir el dolor antes de ser tratado con virus oncolíticos. Con el virus oncolítico, sin embargo, la cantidad de medidas analgésicas requeridas por el mamífero para reducir el dolor es menor que en ausencia de virus oncolíticos. La medida analgésica puede ser un fármaco analgésico o una medida no farmacéutica, como la cirugía. El fármaco analgésico puede ser seleccionado del grupo que consiste de analgésicos opioides, analgésicos no opioides, anestésicos y agonistas alfa-2 adrenérgicos . Preferiblemente, el virus oncolítico es el reovirus. El reovirus puede ser un reovirus de mamífero o un reovirus de ave. Preferiblemente, el reovirus es un reovirus humano. El reovirus humano puede ser cualquiera de los tres serotipos: tipo 1 (cepa Lang o TIL), tipo 2 (cepa Jones, T2J) y tipo 3 (cepa Dearing o cepa Abney, T3D) . Preferiblemente, el reovirus humano es el reovirus del serotipo 3. El reovirus puede ser modificado de modo que la cápsula externa sea removida, el virión sea empaquetado en un liposoma o micela, o las proteínas de la cápsula externa hayan mutado . El reovirus puede ser administrado en una sola dosis o en dosis múltiples. El reovirus también puede ser un reovirus recombinante. El reovirus recombinante puede ser generado por - ' coinfección de células de mamífero con diferentes subtipos de reovirus . El reovirus recombinante puede ser natural o no natural . El reovirus recombinante puede estar en forma de dos o más cepas de reovirus, particularmente dos o más cepas de reovirus seleccionadas del grupo que consiste de la cepa Dearing, cepa Abney, cepa Jones y cepa Lang. El reovirus recombinante también puede resultar de la reclasificación de reovirus de diferentes serotipos, como los seleccionados del grupo que consiste de reovirus del serotipo 1, reovirus del serotipo 2 y reovirus del serotipo 3. El reovirus recombinante puede comprender secuencias que codifiquen para proteínas de recubrimiento variantes naturales o secuencias que codifiquen para proteína de recubrimiento mutantes. Puede ser administrado más de un tipo de virus oncolítico al mamífero. Para el mismo tipo de virus oncolíticos, puede ser administrado más de un tipo o cepa. El neoplasma puede ser un neoplasma sólido. El neoplasma puede ser metastásico y/o terminal . Los virus pueden ser administrados por inyección en o cerca de un neoplasma sólido, o por cualesquier otros métodos conocidos en la técnica, como la administración sistémica. Preferiblemente, el mamífero es seleccionado de perros, gatos, roedores, ovejas, cabras, ganado vacuno, caballos, cerdos, humanos y primates no humanos. De manera más preferible, el mamífero es un humano. El mamífero puede ser sometido a quimioterapia, inmunoterapia, terapia hormonal o por radiación en conjunto con los virus oncolíticos. También se proporciona una composición farmacéutica para reducir el dolor en un mamífero, que comprende un virus oncolítico y un analgésico. La composición también puede comprender un excipiente f rmacéuticamente aceptable. El virus puede ser un virus modificado. Preferiblemente, el virus oncolítico es un reovirus. El reovirus también puede ser un reovirus recombinante . El reovirus recombinante puede ser generado por coinfección de células de mamífero con diferentes subtipos de reovirus. El reovirus recombinante puede ser natural o no natural . El reovirus recombinante puede estar en forma de dos o más cepas de reovirus, particularmente dos o más cepas de reovirus seleccionados del grupo que consiste de la cepa Dearing, cepa Abney, cepa Jones y cepa Lang. El reovirus recombinante también puede resultar de la reclasificación de reovirus de diferentes serotipos, como el seleccionado del grupo que consiste de reovirus del serotipo 1, reovirus del serotipo 2 y reovirus del serotipo 3. El reovirus recombinante puede comprender secuencias que codifiquen para proteínas de recubrimiento variantes naturales o secuencias que codifiquen para proteínas de recubrimiento mutantes . Se proporciona además una composición farmacéutica para reducir el dolor en un mamífero que padece de un ' neoplasma,- que comprende dos componentes como sigue: (a) un primer componente el cual es una primera composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un virus oncolítico; y (b) un segundo componente el cual es una segunda composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un analgésico. Preferiblemente, la cantidad de analgésico es menor que la requerida si el primer componente está ausente. Cada componente también puede comprender un excipiente farmacéuticamente aceptable. Además, los dos componentes pueden ser administrados por separado. El analgésico es seleccionado preferiblemente del grupo que consiste de analgésicos opioides y analgésicos no opiodes . En particular, el virus oncolítico puede ser un reovirus . El reovirus también puede ser un reovirus recombinante . Otro aspecto de la presente invención proporciona un equipo que comprende un virus oncolítico y un analgésico. El equipo puede comprender además cualquier componente que pueda ser usado para practicar la presente invención como se describe aquí. Por ejemplo, el equipo puede comprender además al menos un virus oncolítico adicional, un agente quimioterapéutico, un agente inmunosupresor, y medios para suprimir el sistema inmune, un anticuerpo anti-antivirus , y medios para administrar cualquiera de los componentes del equipo,- y/o una instrucción para usar el equipo. Los métodos, composiciones farmacéuticas y equipos de la invención proporcionan medios efectivos para reducir el dolor asociado con trastornos proliferativos en un mamífero, sin los efectos laterales asociados con otras formas de tratamiento de dolor. En el caso de los reovirus, debido a que se sabe que los reovirus no están asociados con enfermedades, cualesquier problemas de seguridad asociados con la administración deliberada de un virus son minimizados. Los anteriores y otros objetivos, características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción más particular de las modalidades preferidas de la invención. BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS La Figura 1A muestra la escalera analgésica de 3 peldaños desarrollada por la Organización Mundial de la Salud. La Figura IB muestra el 4to peldaño propuesto en Miguel, 2000. DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con el descubrimiento sorprendente de que los virus oncoliticos, en particular los reovirus, pueden reducir el dolor asociado con trastornos proliferativos, particularmente con el crecimiento de una masa tumoral sólida. El reovirus es un agente antitumoral oncolítico altamente selectivo, el cual se replica únicamente en células activadas con ras con la salida litica posterior de las células. En la presente invención, demostramos que la administración del virus dio como resultado la disminución de los síntomas del dolor asociado con el tumor directo. Esta disminución del dolor ocurrió con y sin regresión real del tumor. Además, no existieron efectos laterales significativos o efectos adversos relacionados con la administración de los reovirus . Antes de describir la invención con mayor detalle, son definidos los términos usados en ésta solicitud, como sigue. A menos que se indique otra cosa. Definiciones "Dolor", como se usa aquí, se refiere a una experiencia sensorial y emocional desagradable la cual está asociada principalmente con el daño tisular o descrita en términos de ese daño, o ambos (Merskey et al, eds . , 1994). "Reducción del dolor", como se usa aquí, se refiere a aliviar el dolor en un mamífero para mejorar el bienestar y de este modo la calidad de vida del- mamífero. Un dolor se reduce cuando, por ejemplo, se requiere una menor cantidad de un analgésico dado, requiere un peldaño menos en la escalera analgésica (véase más adelante) , o requiere el uso menos frecuente de analgésicos. La reducción de la cantidad de frecuencia de analgésicos es, de manera preferible, de al ¦¦· menos aproximadamente 10%, de manera más preferible al menos aproximadamente 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90%, y de manera más preferible 100% (es decir, que ya no se necesita analgésico) . La reducción en los peldaños analgésicos puede ser de un peldaño; por ejemplo, un paciente usualmente necesita el tratamiento del peldaño 4 para el dolor pero se reduce al peldaño 3. La reducción en los peldaños analgésicos es preferiblemente de dos o tres peldaños y de manera más preferible de cuatro peldaños . Un "dolor de tumor" o "dolor de cáncer" es un dolor asociado con un trastorno proliferativo . El dolor puede deberse directamente a la presencia del trastorno, o asociado indirectamente con el trastorno, como el resultado de una operación efectuada para el trastorno . El término "nociceptivo" se aplica a dolores que se presume son mantenidos por el daño tisular en curso. El dolor nociceptivo es llamado somático cuando la activación en curso está relacionada con los nervios aferentes primarios en tejidos somáticos (por ejemplo, huesos, articulaciones o músculos) y visceral cuando los aferentes de las visceras son activados por el daño. En general, el dolor visceral es descrito como una sensación difusa o del tipo de presión, la cual es localizada pobremente. El dolor somático tiene una naturaleza de dolor agudo que el paciente puede localizar exactamente. Los dolores que son nociceptivos , como dolor óseo, · son del tipo más prevaleciente asociado con el cáncer. El "dolor neuropático" es el dolor que se cree es sostenido por el procesamiento somatosensorial aberrante en el sistema nervioso periférico o central. El dolor neuropático puede presentarse como una quemadura, sensación hormigueante con un componente punzante. Este puede ser subdividido además en dolores de deaferenciación (como el dolor central, dolor fantasmal, y neuralgia posterpética) , mononeuropatías periféricas y polineuropatías , y los síndromes de dolor regional complejo (distrofia o causalgia simpatética reflexiva) . Los síndromes de dolor neuropático responden menos a fármacos opioides que los síndromes de dolor nociceptivo. Los síndromes del dolor pueden ser "agudos" o "crónicos" . Los síndromes de "dolor agudo" son usualmente causados por intervenciones de diagnóstico o terapéuticas comunes . El dolor agudo también puede deberse a neoplasma (por ejemplo, colapso vertebral y otras fracturas patológicas, obstrucción aguda de visceras huecas, y hemorragia en el tumor) o patología relacionada (por ejemplo dolor agudo asociado con infección: mialgia y artralgia asociada con sepsis, dolor asociado con heridas superficiales o abcesos . El dolor agudo puede estar asociado con procedimientos de diagnóstico incluyen por ejemplo, punción lumbar, biopsia de médula ósea y paracentesis. El dolor agudo puede estar asociado con procedimientos terapéuticos incluyendo, por ejemplo, pleurodesis, embolización de tumor, e inserción de nefrostomia. El dolor agudo puede estar asociado con procedimientos analgésicos, incluyendo, por ejemplo, síndrome de hiperalgesia opioide espinal, y dolor desde de la terapia con estroncio 89. El dolor agudo también puede estar asociado con terapias, incluyendo la quimioterapia (por ejemplo, quimioterapia intraperitoneal , mucositis orofaringea, y neuropatía periférica) , terapia hormonal (por ejemplo, ginecomastia dolorosa, y ardor con dolor agudo inducido por hormona) , inmunoterapia (por ejemplo, artralgia y mialgia del interferon e interleucina) , terapia con radiación (por ejemplo, mucositis orofaringea, enteritis y proctolitis por radiación aguda, y plexopatía branquial) . Los ardores agudos de dolor también son altamente prevalecientes entre aquellos con dolor crónico. De la mitad a dos tercios de los pacientes con dolor crónico bien controlado experimentan dolores "penetrantes transitorios" (Organización Mundial de la Salud, 1996) . Los síndromes de "dolor crónico" resultan principalmente de un efecto directo del neoplasma. Ellos también pueden estar relacionados con la terapia o ¦ representar trastornos no relacionados con enfermedades o su tratamiento . Un "fármaco analgésico" es una sustancia que puede reducir el dolor en un mamífero. Un "analgésico" es un fármaco analgésico u otra medida (como la cirugía) usada para reducir el dolor en un mamífero. Los fármacos analgésicos incluyen analgésicos opioides y analgésicos no opioides. Los "analgésicos opioides", "opioides" o "analgésicos narcóticos" son sustancias naturales o sintéticas que se unen a los receptores opioides en el sistema nervioso central, produciendo una acción agonista. Los analgésicos opioides son conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, The Merck Manual, 1999) . Los ejemplos de analgésicos opioides incluyen, pero no se limitan a, la codeína, fentanil, hidromorfona, levorfanol, meperidina, metadona, morfina, oxicodona, oximorfona, propoxifeno, buprenorfina, butorfanol, dezocina, nalbufina y pentazocxna. Los "analgésicos no opioides" son sustancias naturales o sintéticas que reducen el dolor pero no son analgésicos opioides. Los analgésicos no opioides son conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, The Merck Manual, 1999) . Los ejemplos de analgésicos no opioides, incluyen, pero no se limitan a, etodolac, indometacina, sulindac, tolmetina, nabumetona, piroxicam, acetaminofeno, fenoprofeno, flurbiprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno, naproxeno sódico, oxaprozina, aspirina, trisilicato de cloruro de magnesio, diflunisal, ácido meclofenámico, ácido mefenámico, y fenilbutazona. Una "célula neoplásica" , "célula tumoral" , o "célula con un trastorno proliferativo" , se refiere a una célula la cual prolifera a una velocidad anormalmente alta. Un nuevo crecimiento que comprende células neoplásicas es un "neoplasma" , también conocido como un "tumor" . Un tumor es un crecimiento tisular anormal, que generalmente forma una masa distinta, que crece por proliferación celular más rápidamente que el crecimiento de tejido normal. Un tumor puede mostrar carencia parcial o total de organización estructural y coordinación funcional con el tejido normal. Como se usa aquí, se entiende que un tumor abarca tumores hematopoyéticos así como tumores sólidos. Un tumor puede ser benigno (tumor benigno) o maligno (tumor maligno o cáncer) . Los tumores malignos pueden ser clasificados, de manera amplia, en tres tipos principales. Los tumores malignos que surgen de estructuras epiteliales son llamados carcinomas, los tumores malignos que se originan de tejidos conectivos, como el músculo, cartílago, grasa o hueso son llamados sarcomas y los tumores malignos que afectan a las estructuras hematopoyéticas (estructuras que pertenecen a la formación de células sanguíneas) incluyendo los componentes del sistema inmune, son '" llamados leucemias y linfornas. Otros tumores incluyen, pero no se limitan a la neurofibromatosis . Un "trastorno proliferativo" , también referido como un "neoplasma" o "tumor" , es una enfermedad o condición causada por células que crecen más rápidamente que las células normales, es decir, células neoplásicas . Los trastornos proliferativos incluyen tumores benignos y tumores malignos. Cuando son clasificados por la estructura del tumor, los trastornos proliferativos incluyen tumores sólidos y tumores hematopoyéticos . Las "células neoplásicas activadas por ras" o "células neoplásicas mediadas por ras" se refieren a células las cuales proliferan a una velocidad anormalmente alta debido a, al menos en parte, la activación de la vía de ras. La vía de ras puede ser activada por medio de una mutación estructural del gen ras, el nivel elevado de expresión del gen ras, estabilidad elevada del mensaje del gen ras, o cualquier mutación u otro mecanismo que conduzca a la activación de ras o un factor o factores corriente abajo o corriente arriba de ras en la vía de ras, incrementando por lo tanto la actividad de la vía de ras. Por ejemplo, la activación del receptor de EGF, el receptor de PDGF o sos da como resultado la activación de la vía de ras. Las células neoplásicas mediadas por ras incluyen, pero no se limitan a células cancerosas mediadas por ras, las cuales son células ¦·¦ que; proliferan en una. forma maligna debido a la activación de la vía de ras . Un "cáncer terminal", como se usa aquí, se refiere a un cáncer que es inoperable y donde no es posible el tratamiento.

Un "tumor metastásico" es un tumor metastásico de un tumor localizado en otro lugar en el mismo animal. Los "virus oncolíticos" son virus los cuales son capaces de destruir células tumorales. De manera general, los virus oncolíticos son virus que compiten por la replicación con ventajas replicativas determinadas experimentalmente en células tumorales comparadas con tejido normal. Un virus oncolítico ideal introducido por una sola inoculación intratumor se replica y lisa las células infectadas, y posteriormente infecta las células tumorales circundantes hasta que alcanza el límite entre el tejido maligno y normal. Los virus oncolíticos incluyen, por ejemplo, derivados de adenovirus, derivados de HSV-1, parvovirus autónomo, poxvirus, virus de la enfermedad de Ne castle, derivados de poliovirus, virus de la estomatitis vesicular, derivados de virus de la influenza y reovirus. Los virus pueden ser naturales o modificados. El virus es "natural" : cuando puede ser aislado de una fuente en la naturaleza y que no ha sido modificado intencionalmente por humanos en el laboratorio. Por ejemplo, el virus puede ser de una "fuente de campo" , es decir, de un animal infectado . El virus puede ser pretratado química o bioquímicamente (por ejemplo, por tratamiento con una proteasa, como la quimotripsina o tripsina) antes de la administración al receptor. El · pretratarniento con una proteasa remueve el recubrimiento externo o cápsula del virus y puede incrementar la capacidad de infección del virus. El virus puede ser recubierto en un liposoma o núcela (Chandron y Nibert, (1998) para reducir o prevenir una respuesta inmune de un animal que ha desarrollado inmunidad al virus. Por ejemplo, el virion puede ser tratado con quimotripsina en presencia de concentraciones que formen micelas de detergentes de sulfato de alquilo para generar una nueva partícula subviriónica infecciosa. Un "virus in unoprotegido" es un virus modificado para reducir o eliminar una reacción inmune al virus. "Infección por virus" se refiere a la entrada y replicación del virus en una célula. De manera similar, la "infección de un tumor por un virus" se refiere a la entrada y replicación del virus en las células del tumor. "Reovirus" se refiere a cualquier virus clasificado del género reovirus, ya sea natural, modificado o recombinante . Los reovirus son virus con un genoraa de ARN segmentado, de doble hebra. Los viriones miden 60-80 nm de diámetro y poseen dos revestimientos capsulares concéntricos, cada uno de los cuales es icosaédrico. El genoma consiste de ARN de doble hebra en 10-12 segmentos discretos con un tamaño del genoma total de 16-27 kbp del producto. Los segmentos de ARN individuales varían de tamaño. Han sido recuperados tres tipos distintos, pero relacionados, de reovirus de muchas especies. Los tres tipos comparten un antígeno fijador de complemento común. El reovirus humano consiste de tres serotipos : tipo 1 (cepa Lang o TIL) , tipo 2 (cepa Jones, T2J) y tipo 3 (cepa Dearing o cepa Abney, T3D) . Los tres serotipos son fácilmente identificados sobre la base de ensayo de neutralización e inhibición de la hemaglutinina (véase, por ejemplo, Fields, B.N. et al . , 1996) . Una "cantidad efectiva" es una cantidad de una sustancia que es suficiente para dar como resultado el efecto pretendido. Por los virus usados para reducir el dolor, una cantidad efectiva es una cantidad de virus suficiente para aliviar o eliminar el dolor. La "administración a una célula neoplásica o neoplasma" indica que el virus es administrado de tal manera que entre en contacto con las células noplásticas o células de neoplasma (es decir, célula neoplásicas) . El término "formas de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis ¦ unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de virus calculada para producir el efecto deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado.

Dolores de Tumor La incidencia y severidad del dolor varia dependiendo del tipo de tumor. Por ejemplo, la tabla 1 lista varios tipos de cáncer y su asociación con el dolor (Miguel, 2000) . Tabla 1 Tipo de Cáncer y su Asociación con el Dolor El dolor puede ser nociceptivo (somático o visceral) o neuropático. Los síndromes de dolor nociceptivos relacionados con · tumores pueden deberse a la invasión neoplásica de huesos, articulaciones, músculos o tejido conectivo. Los síndromes de dolor óseo son los más prevalescientes . Las metástasis óseas con frecuencia no presentan dolor, y los factores que distinguen una lesión dolorosa de una sin dolor están pobremente comprendidos. El dolor- óseo multifocal es causado usualmente por metástasis propagadas . La columna es el sitio más común de metástasis óseas, y la lumbalgia es un problema extremadamente común en la población con cáncer. Cualquier lesión neoplásica de las vértebras tiene el potencial de dañar la médula espinal o raíces nerviosas y producir un compromiso neurológico devastante. Los patrones de dolor específicos (por ejemplo, dolor "creciente" , ardor doloroso con recumbencia, o dolor radicular), hallazgos neurológicos específicos (por ejemplo, radiculopatía) , y hallazgos radiológicos específicos (por ejemplo, colapso del 50% de un cuerpo vertebral) son sospechosos de compresión epidural . La compresión de la medula espinal epidural es un ejemplo completo del valor del reconocimiento del síndrome en la evaluación del dolor de cáncer . Los síndromes de dolor nocxceptivo visceral pueden resultar de la obstrucción, infiltración o compresión de estructuras viscerales, incluyendo las huecas, viscosas y tejido conectivo de soporte. Los síndromes del dolor neuropático relacionado con tumores pueden ser causados por infiltración tumoral o compresión de nervios, plexo, o raíces, o por los efectos remotos del proceso maligno sobre nervios periféricos. Esos síndromes son altamente variables. El carácter del dolor puede ser_ afligido o disestético (sensaciones de dolor anormales, como quemaduras) , la ubicación puede ser en cualquier lugar en la región dermatomal inervada por la estructura neural dañada, y la disfunción puede o no ser motora, sensorial o autónoma.

Los síndromes de dolor relacionados con el tratamiento pueden estar relacionados con terapias antineoplásicas . Los dolores nociceptivos relacionados con quimioterapia, terapia por radiación o cirugía parecen no ser comunes. Los regímenes de radiación o quimioterapia basada en corticoesteroides pueden inducir osteonecrosis de huesos, y el dolor visceral crónico puede seguir la quimioterapia intraperitoneal o terapia por radiación abdominal . Esos síndromes pueden estimular dolor relacionados con tumores y la exclusión de recurrencia constituye un desafío mayor. La mayoría de los síndromes de dolor postratamiento son neuropáticos . Los factores de predisposición para el dolor neuropático crónico después de un daño nervioso son desconocidos. Cualquier incisión quirúrgica, aún menor, puede inducir un síndrome de dolor neutopático. Por ejemplo, el síndrome de postmastectomía, el cual puede ser precipitado por daño el nervio intercostobraquial , produce una sensación de quemadura, fuerte, en el aspecto medio del brazo superior, la axila, y el aspecto -superior de la pared anterior del tórax. Este dolor no está asociado con recurrencia del tumor. En; contraste, el dolor .persistente o recurrente después de la toracotomía puede estar relacionado con el tratamiento, pero usualmente está relacionado con el neoplasma. La fibrosis inducida por radiación puede causar daño nervioso periférico. El dolor neuropático crónico resultante usualmente aparece de meses a años después del tratamiento . Contrario al daño nervioso relacionado con el neoplasma, el dolor es generalmente menor prominente y lentamente progresivo. Este con frecuencia está asociado con debilidad, perturbaciones sensoriales, cambios de radiación de la piel, y linfodema. Las disestesias, parestesias, calambres dolorosos y piernas nerviosas asociadas con debilidad moderada, pérdida de sensibilidad o disfunción autonómica pueden seguir el tratamiento con quimioterapia neurotóxica (por ejemplo, vincristina, cisplatina, paclitaxel) . Aunque la mayoría de los pacientes reportan mejora gradual después de descontinuar la terapia, algunos desarrollan una polineuropatia dolorosa persistente . La Escalera Analgésica En 1986, la Organización Mundial estableció una escalera de tres peldaños como guía para el tratamiento del dolor de cáncer (Figura 1A) . De este modo, es usado un no opioide en el peldaño 1 con o sin analgésico adyuvante. Si el dolor persiste o se incrementa, es usado un opioide para el dolor- de medio a moderado en el peldaño 2 , con o sin analgésico no opiode/adyuvante . Si el dolor aún persiste o se incrementa, es usado opioide para el dolor de moderado a severo en el peldaño 3 , con o sin analgésico no opioide/adyuvante .

Esos tres peldaños son más efectivos para dolores somáticos o viscerales que para dolores neuropáticos . Por lo tanto, fue propuesto un cuarto peldaño para casos en los cuales el dolor persiste o se incrementa después del peldaño 3, principalmente con dolores neuropáticos (Miguel, 2000) . En el peldaño 4, son empleadas medidas de intervención, como cirugía (por ejemplo, para inactivar nervios) , medicaciones espinales (epidural o subaracnoide) y bloqueo de nervios (Figura IB) . De este modo, el dolor neuropático puede ser tratado con las siguientes medidas analgésicas: (1) Medicinas orales neuroactivas , incluyendo antidepresivos tricíclicos (como la amitriptilina y notriptilina) , anticonvulsionantes (como la gabapentina, DPH y carbamacepina) y anestésicos locales orales (como la mexlitina) ; (2) Bloqueo de nervios, incluyendo el uso de anestésicos locales cerca de nervios que transmiten información relacionada con el dolor, o agentes neurolíticos para destruir nervios e interrumpir las vías del dolor (neurólisis) . La neurólisis puede ser química, térmica o quirúrgica. Actualmente, la neurólisis química se limita generalmente al alcohol o fenol; (3) Medicaciones espinales, incluyendo la administración subaracnoide y/o epidural de fármacos. Esta medida puede ser usada para el dolor visceral o somático también. Los fármacos que pueden ser administrados de esta manera incluyen: Para el dolor visceral y somático opioides : morfina, hidromorfona, fentanil, sufentanil anestésicos locales: lidocaína, bupivacaina, tetracaína Para el dolor neuropático anestésicos locales: lidocaina, - bupivacaina, tetracaína agonistas alfa-2 adrenérgicos : clonidina, dexmedetomidina, guanabenz antiespasmódicos : baclofen; (4) Estimulación de la médula espinal, la cual implica usar electricidad para reducir el dolor. En general, los pacientes controlan la estimulación (encendido/apagado e intensidad) con un control operado por una batería pequeña. Métodos La presente invención proporciona un método para reducir el dolor de cáncer usando virus oncolíticos. ¦ Preferiblemente, el dolor es reducido hasta el grado en el que se requiere una menor cantidad o frecuencia de medidas analgésicas, o es necesario un peldaño menos en la escalera analgésica, en comparación con la cantidad, frecuencia o peldaños requeridos en la ausencia de los virus.

Sobre la base de nuestros hallazgos recientes de que la inyección intratumoral de reovirus es capaz de producir la regresión del tumor en una variedad de modelos animales en células activadas con Ras, se condujo un estudio clínico en fase 1 para examinar cualquier efecto oncolítico del virus en pacientes humanos con cáncer metastásico que no haya respondido a terapias convencionales. El ensayo estableció la regresión del tumor promovida por el virus en una variedad de indicaciones de tumores sólidos cuando se administró intratumoralmente . De manera sorprendente, también se notó que la administración de virus puede dar como resultado la disminución de los síntomas del dolor asociado con el tumor directo en esta población de pacientes . Esta disminución del dolor ha ocurrido con o sin regresión tumoral real. En un caso la reducción del dolor fue suficiente para permitir que el paciente descontinuara el consumo de narcóticos. Además, nuevos reportes de efectos laterales significativos o efectos adversos relacionados con la administración del virus en esos pacientes . Sobre la base de esos descubrimientos, las Solicitantes han desarrollado métodos para tratar el dolor asociado con trastornos proliferativos en mamíferos mediante la administración de virus oncolíticos. Los mamíferos representativos incluyen perros, gatos, ovejas, cabras, ganado vacuno, caballos, cerdos, primates no humanos y humanos. En una modalidad preferida, el mamífero es un humano. En una modalidad preferida, el dolor está asociado con el crecimiento de una masa de tumor sólido. En los métodos de la invención, el virus es administrado a un mamífero individual. En una modalidad preferida, se usa reovirus. Los tipos representativos de reovirus humanos que pueden ser usados incluyen al tipo 1 (por ejemplo, cepa Lang o TIL) ; tipo 2 (por ejemplo, cepa Jones o T2J) ; y tipo 3 (por ejemplo cepa Dearing o cepa Abney, T3D o T3A) ; pueden ser usadas otras cepas de reovirus. En una modalidad preferida, el reovirus es el serotipo 3 del reovirus humano, de manera más preferible el reovirus es el serotipo 3 del reovirus humano, cepa Dearing. De manera alternativa,- el reovirus puede ser reovirus de mamífero no humano (por ejemplo, reovirus de primate no humano, como el reovirus de babuino; equino; o reovirus de canino) , o un reovirus que no sea de mamífero (por ejemplo, reovirus de ave) . Puede ser usada una combinación de diferentes serotipos y/o diferentes cepas de reovirus, como reovirus de diferentes especies de animales. El reovirus puede ser el reovirus recombinante resultante de la recombinación/reclasifícación de segmentos genómicos de dos o más reovirus genéticamente distintos. El reovirus recombinante puede estar en forma de dos o más tipos de reovirus con diferentes fenotipos patógenos, de modo que contenga diferentes determinantes antigénicos, reduciendo o previniendo por lo tanto una respuesta inmune por un mamífero previamente expuesto a un subtipo de reovirus. Los reovirus recombinantes también pueden exhibir diferentes actividades biológicas (por ejemplo, actividades de replicación en células neoplásicas y biodistribución) en comparación con los reovirus originales. La recombinación/reclasificación de segmentos genómicos de reovirus puede ocurrir en la naturaleza después de la infección de un organismo anfitrión con al menos dos reovirus genéticamente distintos. También pueden ser generadores viriones recombinantes en cultivo celular, por ejemplo, por coinfección de células anfitrionas permisivas con reovirus genéticamente distintos (Nibert et al . , 1996) . En consecuencia, la invención contempla el uso de reovirus recombinantes resultantes de la reclasificación de segmentos genómicos de dos o más reovirus genéticamente distintos, incluyendo pero sin limitarse a, reovirus humanos, como el tipo 1 (por ejemplo, cepa Lang) , tipo 2 (por ejemplo cepa Jones), y tipo 3 (por ejemplo cepa Dearing o cepa Abney) , '.reovirus de mamífero no humano, o reovirus de ave. La invención contempla además reovirus recombinantes resultantes de la reclasificación de segmentos de genoma de dos o más reovirus genéticamente distintos, donde al menos un virus padre está modificado genéticamente, comprende uno o más segmentos genéticos sintetizados químicamente, ha sido tratado con mutágenos químicos o físicos, o en sí es el resultado de un evento de recombinación. La invención contempla además el reovirus recombinante que ha experimentado recombinacíón en presencia de mutágenos químicos, incluyendo pero sin limitarse a sulfato de dimetilo y bromuro de etidio, o mutágenos físicos, incluyendo pero sin limitarse a luz ultravioleta y otras formas de radiación. La invención contempla además virus recombinantes que comprenden supresiones o duplicaciones en uno o más de los segmentos del genoma, que comprenden información genética adicional como resultado de la recombinación con un genoma de una célula anfitriona, o que comprende genes sintéticos. El virus puede ser modificado mediante la incorporación de proteínas de recubrimiento mutantes, como por ejemplo el reovirus s?, en la cápsula externa del virion. Las proteínas pueden ser sometidas a mutación por reemplazo, inserción o supresión. El reemplazo incluye la inserción de diferentes aminoácidos en lugar de los aminoácidos nativos . Las inserciones incluyen la inserción de aminoácidos residuales adicionales en la proteína de uno o más lugares. Las supresiones incluyen la supresión de uno o más aminoácidos residuales en la proteína. Esas mutaciones pueden ser generadas por métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, la mutagénesis dirigida al sitio de oligonucleótido del gen que codifica para una o más proteínas de recubrimiento podría dar como resultado la generación de la proteína de recubrimiento mutante . La expresión de la proteína mutante en células de mamífero infectadas con reovirus in vi tro como las células COSI dará como resultado la incorporación de la proteína mutante en la partícula virionica del reovirus (Turner and Duncan, (1992) ; Duncan et al., (1991); Man et al., (1990). El virus es preferiblemente un virus modificado para reducir o eliminar una reacción inmune al virus ("virus inmunoprotegido" ) . Es.as modificaciones podrían incluir el empaquetamiento del virus en un liposoma, una micela u otro vehículo para enmascarar el virus del sistema inmune de los mamíferos. De manera alternativa, la cápsula externa de la partícula virionica de virus puede ser removida puesto que las proteínas presentes en la cápsula externa son el determinante principal de las respuestas humorales y celulares del anfitrión. Además de los reovirus, pueden ser usados otros virus oncolíticos para reducir el dolor. Unos cuantos de esos virus oncolíticos son discutidos a continuación, y un experto en la técnica puede practicar la presente invención usando virus oncolíticos adicionales así como de acuerdo a la descripción de la presente y el conocimiento disponible de la técnica. Los virus oncolíticos pueden ser un miembro de la familia de, por ejemplo, myoviridae, siphoviridae, podpviridae, teciviridae, corticoviridae, plasmaviridae, lipothrixviridae, fuselloviridae, poxviridae, iridoviridae, phycodnaviridae- baculoviridae, herpesviridae, adnoviridae, papovaviridae, polydnaviridae, inoviridae, microviridae, geminiviridae, circoviridae, parvoviridae, hepadnaviridae, retroviridae, cyctoviridae, reoviridae, birnaviridae, paramyxoviridae, rhabdoviridae , filoviridae, orthomyxoviridae, bunyaviridae, arenaviridae , leviviridae, picornaviridae , sequiviridae, comoviridae, potyviridae, caliciviridae, astroviridae, nodaviridae, tetraviridae, tombusviridae, coronaviridae, glaviviridae, togaviridae, o barnaviridae . Con los reovirus, los virus inmunoprotegidos o reclasificados de otros virus oncolíticos también son abarcados en la presente invención. Además, también puede ser empleada una combinación de al menos dos virus oncolíticos, incluyendo reovirus, para reducir el dolor de acuerdo a la presente invención. Normalmente, cuando el virus entra a una célula, se activa la AR de doble hebra Cinasa (PKR) y bloquea la síntesis de proteína y el virus no puede replicarse en esta ¦ célula. - Algunos virus han desarrollado un sistema para inhibir la PKR y facilitar la síntesis de proteína viral así como la replicación viral. Por ejemplo, el adenovirus produce u a gran cantidad de un ARN pequeño, ARN VAl . El ARN VA1 tiene estructuras secundarias extensas y se une a la PKR en competencia con el - ARN de doble hebra (ARNdh) el cual normalmente activa la PKR. Puesto que requiere una longitud mínima de ARNdh para activar la PKR, el ADN VA1 no activa la PKR. En su lugar, secuestra la PKR en virtud de su gran cantidad. En consecuencia, la síntesis de proteína no es bloqueada y el adenovirus puede replicarse en la célula. Las células neoplásicas activadas por ras no son objeto de la inhibición de la síntesis de proteína por PKR, debido a que ras inactiva la PKR. Esas células son por lo tanto susceptibles a la infección viral aún si el virus tiene un sistema inhibidor de PKR. En consecuencia, si los inhibidores de PKR en adenovirus, vaccinia virus, virus del herpes simple o virus de orf de parapoxvirus mutantes se hace mutar para no bloquear las dos funciones de PKR, los virus resultantes no infectan células normales de vida de inhibición de la síntesis de proteína por PKR, pero se replican en células neoplásicas activadas por ras las cuales carecen de actividades de PKR. En consecuencia, un virus que sea modificado o mutado de modo que no inhiba la función de la PKR se replica selectivamente . en células neoplásicas activadas con ras, mientras que las células normales son resistentes . Preferiblemente, el virus es un adenovirus mutante en la región VA1, un vaccinia virus mutante en la región K3L y/o E3L, un virus del herpes simple mutante y el gen Yi34.5, un virus orf de parapoxvirus imitante -en el gen OV20.0L, o un virus de la influenza rautante en el gen NS-1. El virus puede ser modificado o mutante de acuerdo a la relación estructura-función conocida de los inhibidores del PKR viral. Por ejemplo, puesto que la región amino terminal de la proteína E3 interactúa con el dominio de la región carboxi- erminal de PKR, la supresión o mutación puntual de este dominio previene la función anti-PKR (Chang et al., 1992, 1993, 1995; Sharp et al., 1998; Romano et al., 1998) . El gen K3L de vaccinia virus codifica para pK3 , un pseudosustrato de PKR. Existe una mutación de pérdida de función dentro de K3L. Las truncaciones o colocación de mutaciones puntuales dentro de la porción C-terminal de la proteína K3L es homologa a los residuos 79 a 83 en eIF-2 suprime la actividad inhibidora de la PKR (Kawagishi-Kobayashi et al., 1997). El virus oncolítico puede matar selectivamente células neoplásicas por contener un gen supresor del tumor. Por ejemplo, un virus que exprese el gen p53 natural puede matar selectivamente las células neoplásicas que se vuelven neoplásicas debido a la inactivación del producto del gen p53. Ese virus ha sido construido y mostrado a inducir apoptósis en células cancerosas que expresan p53 mutante (Blagosklonny et al., 1996). Un método similar implica inhibidores virales de supresores tumorales. Por ejemplo, si la región ?1? que codifica para un inhibidor de p53 de 55 kd es suprimido, como el virus ONYX-015 (WO 94/18992), la inhibición no está ya presente. Como resultado, cuando ONYX-015 entra a una célula normal, p53 funciona suprimiendo la proliferación celular así como la replicación viral, lo cual depende de la maquinaria proliferativa celular. Por lo tanto, ONYX-015 no se replica en células normales. Por otro lado, en células neoplásicas como función de p53 perturbada, ONYX-015 puede replicarse y eventualmente hacer que la célula muera. Otro ejemplo es el virus Delta24 el cual es un adenovirus mutante que contiene una supresión de 24 pares de bases en la región E1A (Fueyo et al., 2000). Esta región es responsable de la unión al Rb supresor de tumores celulares y la inhibición de la función de Rb, permitiendo por lo tanto que la maquinaria proliferativa celular, y en consecuencia la replicación del virus, procedan en una forma no controlada. Delta24 tiene una supresión en la región de unión de Rb y no se une a Rb. Por lo tanto, en la replicación del virus mutante es inhibida por Rb en una célula normal. Sin embargo, si; Rb es inactivado y las células se vuelven neoplásicas, Delta24 no es inhibido ya. En su lugar, el virus mutante se replica eficientemente y lisa las células deficientes en Rb. Además, el virus de la estomatitis vesicular (VSV) mata selectivamente células neoplásicas (y puede ser agregado opcionalmente interferón) . Un rautante del virus del herpes simple 1 (HSV-1) el cual es defectuoso de expresión de ribonucleótido reductasa, hrR3 , demostró replicarse en células de carcinoma de colon pero no en células de hígado normal (Yoon et al., 2000) . El virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) se replica preferentemente en células malignas, y la cepa más comúnmente usada es la 73-T (Reichard et al., 1992; Zorn et al, 1994; Bar-Eli et al., 1996). Los vaccinia virus se propagaron en varias líneas de células de tumor maligno. Los virus de la encefalitis demostró tener un efecto oncolítico en un tumor de sarcoma de ratón, pero puede requerirse una atenuación para reducir su infectividad en células normales. La regresión del tumor ha sido descrita en pacientes con tumor infectados con herpes zoster, virus de la r hepatitis, virus de la influenza, varicela y sarampión (para una revisión, véase Nemunaitis, 1999) . El virus oncolítico puede ser natural o modificado. El virus puede ser pretratado química o bioquímicamente (por ejemplo por tratamiento con una proteasa, como la quimotripsina o tripsina) antes de la administración a las células neoplásicas. El pretratamiento con una proteasa remueve el recubrimiento externo o cápsula del virus y puede incrementar la capacidad de infección del virus . El virus puede ser recubierto en un liposoma o micela (Chandron y Nibert, 1998), para reducir o prevenir una respuesta inmune de un mamífero que haya desarrollado inmunidad al virus . Por ejemplo, el virión puede ser tratado con quimotripsina en presencia de concentraciones formadoras de micelas y de detergentes de sulfato de alquilo para generar una nueva partícula subvirionica infecciosa. El dolor que es particular susceptible a la reducción por los métodos de la invención está asociado con cánceres sólidos, por ejemplo, sarcoma, melanoma, cáncer de mama, cáncer de sistema nervioso central (por ejemplo, neuroblastoma y glioblastoma) , cáncer del sistema nervioso periférico, cáncer de pulmón, cáncer de próstata, cáncer colorrectal, cáncer tiroideo, cáncer renal, cáncer adrenal y cáncer de hígado. En particular, los tipos de cáncer que están altamente asociados (por ejemplo, al menos aproximadamente el 50%) con el dolor en la Tabla 1 son contemplados para ser tratados usando los métodos de la invención. La ruta por la cual es administrado el virus, así como la formulación, vehículo o partícula, dependerán de la ubicación en sí como del tipo de neoplasma. Puede ser empleada una amplia variedad de rutas de administración. Por ejemplo, para un neoplasma sólido que sea accesible, el virus puede ser administrado por una inyección directamente al neoplasma. Para un neoplasma hematopoyético, por ejemplo, el virus puede ser administrado intravenosa o intravascularmente . Para neoplasmas que no son fácilmente accesibles dentro del cuerpo como las metástasis o tumores cerebrales, el virus es administrado de tal manera que pueda ser transportado sistémicamente a través del cuerpo del mamífero y por lo tanto alcanzar el neoplasma (por ejemplo intratecal , intravenosa o intramusculármente) . De manera alternativa, el virus puede ser administrado directamente a un solo neoplasma sólido, donde este es llevado sistémicamente a través del cuerpo la metástasis. Los virus también pueden ser administrados subcutáneamente, intraperitonealmente, tópicamente (por ejemplo, para el melanoma) , oralmente (por ejemplo, para el neoplasma oral o esofágico) , rectalmente (por ejemplo para neoplasma colorrectal) , vaginalmente (por ejemplo, para neoplasma cervical o vaginal) , nasalmente o por rocío de inhalación (por ejemplo para neoplasma de pulmón) . El virus puede ser administrado sistémicamente, especialmente a mamíferos que estén inmunocomprometidos o que no hayan desarrollado inmunidad al virus. En esos casos, el virus administrado sistémicamente, es decir inyección intravenosa, entra en contacto con las células neoplásicas dando como resultado la lisis de las células. Los mamíferos inmunocompetentes previamente expuestos a un subtipo de virus pueden haber desarrollado inmunidad humoral y/o celular a ese subtipo de virus. Cuando el virus es administrado sistémicamenté a mamíferos inmunocompetentes, los mamíferos pueden producir una respuesta inmune a virus . Esa respuesta inmune puede ser evitada si el virus es un subtipo al cual el mamífero dado es arreglado en inmunidad, o el virus ha sido modificado como se describió anteriormente aguí, de modo que sea inmunoprotegido, por ejemplo, por digestión con proteasa de la cápsula externa o empaquetado en una micela. De manera alternativa, se contempló que la inmunocompetencia de mamíferos con el virus puede ser suprimida por la coadministración de fármacos conocidos en la técnica para suprimir el sistema inmune general (Cuff et'al., (1998) o de manera alternativa, por la administración de anticuerpos anti-antivirus . La inmunidad humoral del mamífero contra el virus también puede ser reducida o suprimida temporalmente por plasmaforésis de la sangre para remover anticuerpos anti-virus. La inmunidad humoral del mamífero contra el virus puede ser reducida o suprimida temporalmente, de manera adicional, por la administración intravenosa de inmunoglobulina no específica al mamífero. - Se contempló que el virus puede ser administrado a mamíferos inmunocompetentes inmunizados contra el virus en conjunto con la administración de anticuerpos anti-antivirus . Los anticuerpos anti-antivirus usados en esta invención son seleccionados, por ejemplo, de anticuerpos anti-antireovirus, anticuerpos anti-antiadenovirus, anticuerpos anti-antiHSV, anticuerpos anti-antivaccinia virus, anticuerpos anti-antiinfluenza y anticuerpos anti-antiparapoxvirus orf virus. Esos anticuerpos pueden ser producidos por métodos conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Harlow et al., 1988) . Esos anticuerpos anti-antivirus pueden ser administrados antes, al mismo tiempo, o brevemente después de la administración del virus. Preferiblemente se administra una cantidad efectiva de los anticuerpos anti-antivirus con un tiempo suficiente para reducir o eliminar una respuesta inmune por el mamífero al virus administrado. En una modalidad de esta invención un curso de terapia con virus se administra una o más veces . Después de la primera administración de terapia con virus constituyentes inmunes particulares que pueden interferir con las administraciones posteriores de virus son removidos del paciente. Esos constituyentes inmunes incluyen células B, células T, anticuerpos y similares. La remoción de cualquier población de células B o células T puede ser efectuada por varios métodos. En un método, la ' sangre puede ser filtrada y puede efectuarse hemodiálisis . Otro método es la filtración de la sangre acoplada con compuestos corpóreos extra que puedan remover poblaciones de células, por ejemplo, con anticuerpos inmovilizados que reconozcan receptores específicos sobre la población celular que va a ser removida. Otro método más para la remoción de células es supresión inmune. Esto puede hacerse primero por terapia por radiación en línea o por esteroides cíclicos como la ciclosporina . La remoción selectiva de anticuerpos anti -virus también puede evitar que el sistema inmune del paciente remueva virus administrados terapéuticamente. La prevención de la interacción del anticuerpo con el virus administrado también puede ayudar a estrategias de tratamiento sistémico. Los anticuerpos también pueden ser removidos por varios métodos, incluyendo la hemodiálisis y el peldaño de la sangre sobre virus inmovilizados (remoción selectiva de anticuerpo) ; por remoción de todos los anticuerpos IgG por hemodiálisis y haciendo pasar la sangre sobre proteína A inmovilizada (comercialmente disponible como PROSORBA, Cypress Bioscience, San Diego, CA) ; o por la administración de anticuerpos antiidiotípicos humanizados, donde el idiotipo es contra el virus a ser administrado. Otro método de esta invención es permitir que el virus actúe sistémicamente sin dañar la función inmune normal por enmascaramiento o .dañando el reconocimiento inmune del virus. Para evitar que el sistema inmune del paciente reconozca al virus administrado, el virus puede ser recubierto con anticuerpos humanizados no virotóxicos, como recubrimientos con la porción Fab del anticuerpo, o recubiertos en una micela. Adicionalmente, los virus pueden ser tratados con quimotripsina para producir una partícula subviral infecciosa (ISVP) . Una ISVP puede ser usada sola o en combinación con virus completos para proporcionar un agente que sea reconocido pobremente o que no haya sido prevenido previamente por el sistema inmune del paciente. Otra modalidad de esta invención incluye la remoción del virus del paciente después de la administración. Puesto que este método puede ser usado en pacientes que estén inmunosuprimidos o sean inmunocompetentes , puede ser de importancia remover el virus del flujo sanguíneo después del curso del tratamiento . El virus puede ser removido por cromatografía de afinidad usando anticuerpos antivirus extracorpóreos asociada con hemodiálisis, agentes proliferativos de células B, o adyuvantes para estimular una respuesta inmune contra el virus como el virus inactivado por UV o adyuvante de Freund. Composiciones y Equipos Esta invención también incluye composiciones f rmacéuticas las cuales contienen, como los ingredientes activos, uno o más virus oncolíticos, y al menos un analgésico. De manera alternativa, la composición farmacéutica puede comprender dos componentes, cada uno de los cuales es una composición farmacéutica que comprende un virus oncolítico y un analgésico, respectivamente. Los dos componentes pueden ser administrados juntos o por separado. La composición farmacéutica también puede comprender vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables. En la fabricación de las composiciones de esta invención, los ingredientes activos usualmente son mezclados con un excipiente, diluidos por un excipiente o- encerrados dentro de un portador el cual puede estar en forma de una cápsula, saco, papel, u otro recipiente. Cuando el excipiente farmacéuticamente aceptable sirve como diluente, este puede ser un material sólido, semisólido o líquido, el cual actúa como vehículo, portador · o medio para los ingredientes activos. De este modo, las composiciones pueden estar en forma de tabletas, pildoras, polvos, grageas, sacos, trociscos, elíxires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como un sólido o en un medio líquido) ungüentos que contienen, por ejemplo, hasta 10% en peso del compuesto activo, cápsulas de gelatina blanda y dura, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos empaquetados estériles. Algunos ejemplos de excipientes adecuados incluyen la lactosa, dextrosa, sucrosa, sorbitol, manitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua estéril, jarabe y metilcelulosa . Las formulaciones para incluir adicionalmente : agentes lubricantes como el talco, estearato de magnesio y aceite mineral; agentes humectantes; agentes emulsificantes y suspensores; agentes preservativos como los metil y propilhidroxibenzoatos ; agentes edulcorantes; y agentes saborizantes . Las composiciones de la invención pueden ser formuladas para proporcionar una liberación rápida, sostenida o retrasada de los ingredientes activos después de la administración al paciente empleando procedimientos conocidos en la técnica. Para preparar composiciones sólidas como tabletas, los ingredientes activos principales son mezclados con un excipiente' farmacéutico para formar una composición de preformulación sólida que contiene una mezcla homogénea de un compuesto de la presente invención. Cuando se hace referencia a esas composiciones de preformulación como homogéneas, significa que los ingredientes activos son dispersados uniformemente a través de la composición, de modo que la composición pueda ser subdividida fácilmente en formas de dosificación unitaria igualmente efectivas como tabletas, ¦ pildoras y- cápsulas. Las tabletas o pildoras de la presente invención pueden ser recubiertas o compuestas de otro modo para proporcionar una forma de dosificación que proporcione la ventaja de la acción prolongada. Por ejemplo, la tableta o pildora puede comprender un componente de dosificación interno y dosificación externo, estando el último en forma de una envoltura sobre el primero. Los dos componentes pueden estar separados por una capa entérica que sirva para resistir la desintegración en el estómago y permita que el componente interno pase intacto hacia el duodeno o sea retrasado en su liberación. Puede ser usada una variedad de materiales para esas capas o recubrimientos entéricos, incluyendo esos materiales un número de ácidos poliméricos y mezclas de ácidos poliméricos con materiales como la laca de sellar, alcohol cetílico y acetato de celulosa. Las formas líquidas en las cuales las composiciones novedosas de la presente invención pueden ser incorporadas para administrarse oralmente o por inyección incluyen soluciones acuosas, de manera adecuada j rabes saborizados, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones saborizadas con aceites comestibles como el aceite de maíz, el aceite de semilla de algodón, aceite de ajonjolí, aceite de coco, o aceite de cacahuate, así como elíxires y vehículos farmacéuticos similares. -- ¦ · · Las composiciones para inhalación o insuflación incluyen soluciones y suspensiones en solventes acuosos u orgánicos, farmacéuticamente aceptables, o mezclas de los mismos, y polvos. Las composiciones líquidas o sólidas pueden contener excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados como se describe aquí. Preferiblemente las composiciones son administradas por la ruta respiratoria oral o nasal para un efecto local o sistémico. Las composiciones en solventes farmacéuticamente aceptables preferiblemente pueden ser nebulizadas mediante el uso de gases inertes. Las soluciones nebulizadas pueden ser inhaladas directamente del dispositivo nebulizador o el dispositivo nebulizador puede ser conectado a una cámara de máscara facial, o máquina respiradora de presión positiva intermitente. Las composiciones en solución, suspensión o polvo pueden ser administradas, de manera preferible oral o nasalmente, de dispositivos que liberen la formulación en una forma apropiada. Otra formulación preferida empleada en los métodos de la presente invención emplea el dispositivo de liberación transdérmica ("parches")- Esos parches transdérmicos pueden ser usados para proporcionar la infusión continua o discontinua del virus en cantidades controladas. La construcción y uso de parches transdérmicos para la liberación de agentes farmacéuticos es bien conocida en la técnica. Véase, por ejemplo, la Patente Estadounidense 5,023,252, incorporada aquí como referencia. Esos parches pueden ser construidos para la liberación continua, pulsátil o sobredemanda de los agentes farmacéuticos. Otras formulaciones adecuados para usarse en la presente invención pueden encontrarse en Remington's Pharmaceutical Sciences . Los virus o la composición farmacéutica que comprende el virus puede ser empaquetada en equipos convenientes que proporcionen los materiales necesarios empaquetados en recipientes adecuados . Se contempló que los equipos también pueden incluir agentes quimioterapéuticos y/o anticuerpos anti-antivirus . El virus es administrado en una cantidad que sea suficiente para reducir el dolor (por ejemplo, una "cantidad efectiva") . La disminución del dolor puede ocurrir con o sin regresión real del tumor. La reducción del dolor puede ser concomitante con la reducción del tamaño del neoplasma, o eliminación del neoplasma. La reducción del tamaño del neoplasma, o en una eliminación completa del neoplasma, es causada generalmente por la lisis de las células neoplásicas ( "oncólisis" ) por el virus (Patentes Estadounidenses 6,110,461; 6,136,307; 6,261,555; y 6,344,195). Preferiblemente la cantidad efectiva es aquella cantidad capaz de suprimir completamente el dolor. Preferiblemente la cantidad efectiva es aproximadamente una ¦¦¦ unidad formadora de placa (ufp) hasta aproximadamente 1015 ufp, de manera más preferible de aproximadamente 1012 ufp hasta aproximadamente 1013 ufp. Por ejemplo, para el tratamiento de un humano, pueden usarse de aproximadamente 102 a la 1017 ufp de reovirus, dependiendo del tipo, tamaño y número de tumores presentes. La cantidad efectiva será determinada sobre una base individual y puede basarse, al menos en parte, en consideración del tipo de virus; la ruta de administración elegida; tamaño individual, edad, género; la severidad de los síntomas del paciente; el tamaño y otras características del neoplasma; y similares. El curso de la terapia puede durar de varios días a varios meses o hasta que se haya alcanzado la disminución del dolor y/o la enfermedad. El virus puede ser administrado en una sola dosis, o dosis múltiple (es decir, más de una dosis) . Las dosis múltiples pueden ser administradas concurrentemente, o consecutivamente (por ejemplo durante un periodo de días o semanas) . El virus también puede ser administrado en más de un neoplasma en el mismo individuo. Las composiciones son formuladas preferiblemente en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosis aproximadamente 102 ufp hasta aproximadamente 1013 ufp del virus. Se contempló que el virus puede ser administrado en conjunto con o además de la terapia opioide o además de administrar analgésicos no opioides y adyuvantes. También se - · contempló que el virus puede ser administrado en conjunto con o además de la terapia hormonal o inmunoterapia . Se contempló además que el virus de la presente invención puede ser administrado en conjunto con o además de la terapia de radiación. La radioterapia, también llamada terapia por radiación, es el tratamiento del cáncer y otras enfermedades con radiación, típicamente radiación ionizante.

El agente irradiante puede ser cualquiera agente irradiante conocido en la técnica, incluyendo pero sin limitarse a rayos X, rayos gamma (por ejemplo, rayos gamma producidos por radio, uranio, o cobalto 60) , y haz de partícula (por ejemplo electrones, neutrones, piones e iones pesados) . La irradiación puede ser en forma de radioterapia externa o radioterapia interna (incluyendo braquiterapia, irradiación intersticial e irradiación intracavitaria) . Los agentes irradiantes pueden ser ligados a un anticuerpo, como en la radioinmunoterapia, o empleados durante una cirugía, como en la radioterapia intraoperativa . Se contempló además aún que el virus de la presente invención puede ser administrado en conjunto con o además de compuestos anticáncer o agentes quimioterapéuticos conocidos. Los agentes quimioterapéuticos son compuestos los cuales pueden inhibir el crecimiento de tumores. Esos agentes, incluyen, pero no se limitan a, 5-fluorouracilo, mitomicina C, metotrexato, hidroxiurea, ciclofosfamida, dacarbacina, mitoxantrona, antraciclinas (Epirrubicina y Doxorrubicina) , anticuerpos para receptores, como la herceptina, etópsido, pregnasoma, compuestos de platino como el carboplatino y cisplatino, taxanos como el taxol y taxotere, terapias con hormonas como el tamoxifen y anti-estrógenos , interferones , inhibidores de aromatasa, agentes progestacionales y análogos de LHRH. Los siguientes ejemplos se ofrecen para ilustrar esta invención y no deben constituirse de ninguna manera en limitantes del alcance de la presente invención. EJEMPLOS En esta solicitud, las siguientes abreviaciones tienen los siguientes significados. Las abreviaciones no definidas tienen sus significados generalmente aceptados . °C= grados Celsius hr = hora min - minuto µ? = micromolar mM = milimolar M = Molar mi = mililitro µ? = microlitro mg = miligramo µg = microgramo PBS = solución salina amortiguada con fosfato EGF = factor del crecimiento epidérmico PDGF = factor del crecimiento derivado de las plaquetas PKR = ARM cinasa de doble hebra cinasa EJEMPLO 1 Estudio Clínico en Fase I: Uso de Reovirus para Reducir el Dolor Asociado con Melanoma Mal gno Una paciente de 54 años de edad que padecía de melanoma maligno, que formó lesiones múltiples (más de 10) sobre todo el cuerpo no había respondido a los tratamientos anticáncer convencionales. La paciente estaba permanentemente bajo narcóticos debido al dolor asociado con la lesión del cuello posterior izquierdo. La paciente recibió tres inyecciones intratumorales de 109 ufp de la cepa de Dearing del reovirus serotipo 3 en la lesión sobre el cuello posterior izquierdo. La cepa de Dearing del reovirus serotipo 3 usada en esos estudios se obtuvo por un método descrito en la Publicación de Solicitud de Patente Estadounidense No. 20020037576. De manera sorprendente, una semana después de la inyección, la paciente reportó disminución del dolor -en el sitio del tratamiento y se le retiraron los narcóticos. No hubo dolor en el sitio de tratamiento durante un periodo de 8-10 semanas después de la inyección. Como lo muestran biopsias por punción conducidas del hombro izquierdo después de dos semanas después de la inyección, no hubo efectos laterales o efectos adversos significativos relacionados con la administración del virus en el paciente. Los resultados histológicos mostraron únicamente alguna fibrosis dérmica e inflamación crónica perivascular media. EJEMPLO 2 Estudio Clínico en Fase II: Uso de Reovirus para Reducir el Dolor Asociado con Sarcoma de Ewing Un paciente terminal de 27 años de edad con sarcoma de Ewing recibió una sola inyección intratumoral de 109 ufp de la cepa de Dearing del reovirus serotipo 3 en un sitio sacroilíaco. La cepa de Dearing del reovirus serotipo 3 usada en esos estudios fue obtenida por un método descrito en la Publicación de Solicitud de Patente No. 20020037576. Una semana después de la inyección, el paciente reportó disminución del dolor en el sitio de inyección. No hubo dolor en el sitio del tratamiento durante las siguientes varias semanas después de la inyección . Todas las publicaciones, solicitudes de patente y patentes anteriores son incorporadas aguí como referencia en su totalidad en el mismo grado que si cada una de la publicación individual, la solicitud de patente o la patente fuese indicada especifica o individualmente como incorporada como referencia en su totalidad. Aunque esta invención ha sido mostrada y descrita particul rmente con referencia a modalidades preferidas de la misma, deberá ser comprendido por aquellos expertos en la técnica que pueden hacerse varios cambios en la forma y detalles en ella sin apartarse del espíritu y alcance de la invención como se define en las reivindicaciones anexas. REFERENCIAS Patente Estadounidense 5,023,252. Patente Estadounidense 6,110,461. Patente Estadounidense 6,136,307. Patente Estadounidense 6,261,555. Patente Estadounidense 6,344,195. Publicación de Solicitud de Patente Estadounidense No. 20020037576. WO 94/18992, publicada en Septiembre 1, 1994. '.: ; Bar-Eli, M. , et al., "preferential cytotoxxc effect of Newcastle disease virus on lymphoma cells", J. Cáncer Res. Clin. Oncol. 122:409-415 (1996). Blagoslelonny, .V., et al., nín vitro Evaluation of a p53-Expressin g Adenovirus as an Anti-Cancer Drug" , Int.

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Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un método para reducir un dolor en un mamífero que padece de un neoplasma, caracterizado porque comprende administrar al mamífero una cantidad efectiva de al menos un virus oncolítico. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además administrar al mamífero al menos un analgésico en una cantidad que es menor que la cantidad del analgésico requerida para reducir el dolor en ausencia del virus oncolítico en el mamífero. 3.. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el analgésico es seleccionado del grupo que consiste de analgésicos opioides y no opioides. 4. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el analgésico es seleccionado del grupo que consiste de codeína, fentanil, hidromorfona, levorfanol, meperidina, metadona, morfina, oxicodona, oximorfona,_ propoxifeno, buprenorfina, butorfanol, dezocina, nalbufina y pentazocina . 5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el neoplasma es un neoplasma sólido. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado por inyección en o cerca del neoplasma sólido. 7. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es un reovirus. 8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el reovirus es seleccionado del grupo que consiste de reovirus de mamífero y reovirus de ave. 9. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el reovirus es un reovirus de mamífero . 10. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el reovirus es un reovirus humano. 11. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el reovirus es seleccionado del grupo que consiste del reovirus del serotipo 1, reovirus del serotipo 2 y reovirus del serotipo 3. 12. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el reovirus es el reovirus del serotipo 3. 13. El método de conformidad con la reivindicación ¦'.1 - caracterizado porque el reovirus es un reovirus recombinante . 1 . El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se administra más de un tipo de virus oncolítico . 15. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porgue se administra más de una cepa del virus oncolítico. 16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el mamífero es un humano. 17. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque se administran aproximadamente 1 a 1015 unidades formadoras de placas de reovirus. 18. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado en una sola dosis. 19. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado en más de una dosis . 20. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el neoplasma es metastásico. 21. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el neoplasma es terminal. 22. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además administrar al - ¦ mamífero una cantidad efectiva de un agente quimoterapéutico . 23. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado en conjunto con terapia por radiación. 24. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado en conjunto con terapia hormonal. 25. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el virus oncolítico es administrado en conjunto con inmunoterapia . 26. Una composición farmacéutica para reducir el dolor en un mamífero que padece de un neoplasma, caracterizada porque comprende dos componentes como sigue: (a) un primer componente el cual es una primera composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un virus oncolítico; y (b) un segundo componente el cual es una segunda composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un analgésico. 27. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el analgésico es seleccionado del grupo que consiste de analgésicos opioides y analgésicos no opioides. 28. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el virus oncolítico es un reovirus. 29. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 28, caracterizada porque el reovirus es un reovirus recombinante .