MXPA01002461A

MXPA01002461A - Genes inducidos por leptin.

Info

Publication number: MXPA01002461A
Application number: MXPA01002461A
Authority: MX
Inventors: Louis A Tartaglia
Original assignee: Millennium Pharm Inc
Priority date: 1998-09-10
Filing date: 1999-09-10
Publication date: 2003-03-10
Also published as: AU6031899A; WO2000015790A2; DE69926764D1; DE69926764T2; AU5911499A; CA2342965A1; WO2000015826A3; EP1109908B1; EP1109908A2; WO2000015790A3; JP2002525067A; WO2000015790A9; ATE302274T1; WO2000015826A2; US20020119517A1

Abstract

Se describen seis genes cuya expresion es inducida por leptina: (LIG46, LIG56; Tgtp, que codifica una proteina de union a GTP especifico de celulas T; LRG-47, que codifica una proteina inducible por interferon (IFN); RC10-II, que codifica una subunidad de un proteasoma del cerebro, de 20S; y Stra 13, que codifica una proteina inducible por acido retinoico). Estos seis genes inducibles por leptina y las proteinas que estos codifican representan objetivos para el desarrollo de agentes terapeuticos para uso en la modulacion del peso corporal. Por ejemplo, es posible utilizar los agentes que alteran la expresion o actividad de una o mas de las proteinas, inducidas por leptin, para modular el peso corporal. Es posible identificar estos agentes utilizando ensayos celulares in vitro o in vivo, los cuales verifican la expresion o actividad de una o mas de las seis proteinas inducidas por leptina. Los agentes terapeuticos con utilidad potencial tambien pueden ser identificados mediante el uso de ensayos disenados para identificar agentes que se unan a una de las proteinas inducidas por leptina. Los genes inducidos por leptin de la invencion, y las proteinas que codifican, pueden utilizarse para tratamiento y diagnostico.

Description

GENES INDUCIDOS POR LEPTINA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El producto de gen ob, leptína, es un regulador circulante importante del peso corporal. La leptina se une y activa la forma larga de ObR, el receptor de leptina (Tartaglia et al, (1995) Cell 83:1263-71). Se cree que la leptina modula el peso corporal mediante el hecho de influenciar el apetito y otros factores. Se cree también que compuestos otros que la leptina, por ejemplo, neuropéptido Y, melanocortinas, CART, y orexinas desempeñan también una función en la modulación del peso corporal mediante el hecho de influenciar factores tales como apetito y saciedad, almacenamiento de grasas, y producción de energía. COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa, por lo menos en parte, en la identificación de seis genes cuya expresión es inducida por la leptina. Dos de estos genes, LIG46 y LIG56 son genes novedosos. Cuatro de los genes ya han sido previamente identificados. Los genes previamente identificados son: Tgtp, que codifica una proteína de enlace de GTP específica para células T; LRG-47, que codifica una proteína inducible por interferón (IFN) ; RC10-II, que codifica una subunidad de un proteasoma de cerebro 20S; y Stral3, que codifica una proteína inducible por ácido retinoico., Los seis genes inducibles por leptina de la presente invención y las proteínas que codifican representan blancos para el desarrollo de agentes terapéuticos para su uso en la modulación del peso corporal. Por ejemplo, agentes que alteran la expresión o actividad de una o varias de las proteínas inducidas por leptina pueden emplearse para modular el peso corporal. Tales agentes pueden ser identificados empleando ensayos celulares, in vitro, o in vivo que monitorean la expresión o la actividad de una o varias de las seis proteínas inducidas por leptina. Agentes terapéuticos potencialmente útiles pueden también ser identificados a través del uso de ensayos diseñados para identificar agentes que unen con una de las proteínas inducidas por leptina. Los genes inducidos por leptina de la presente invención y las proteínas que codifican pueden ser útiles en sí, para propósitos terapéuticos y de diagnóstico. LIG46 El ADNc de LIG46 de murino descrito abajo (SEQ ID NO:l) tiene un cuadro de lectura abierto de 1191 nucleótidos (nucleótidos 3 - 1193 de SEQ ID N0:1; SEQ ID NO: 3) que codifica una proteína de 397 aminoácidos (SEQ ID NO:2) . Esta proteína incluye una secuencia de señal predicha de aproximadamente 32 aminoácidos (desde el aminoácido 1 hasta aproximadamente el aminoácido 32 de SEQ ID NO: 2) y una proteína madura predicha de aproximadamente 365 aminoácidos (desde aproximadamente el aminoácido 33 hasta el aminoácido 397 de SEQ ID NO: 2; SEQ ID NO: 4). El dominio extracelular de LIG46 se extiende desde aproximadamente el aminoácido 33 hasta aproximadamente el aminoácido 302. LIG46 posee un dominio de transmembrana predicho que se extiende desde aproximadamente el aminoácido 303 (extremo extracelular) hasta aproximadamente el aminoácido 320 (extremo intracelular) de SEQ ID NO: 2. El dominio citoplásmico de LIG46 se extiende desde aproximadamente el aminoácido 321 hasta aproximadamente el aminoácido 397. El ADNc de LIG46 humano descrito abajo (SEQ ID NO:_) tiene un cuadro de lectura abierto de 1191 nucleótidos que codifica una proteína de 397 aminoácidos (SEQ ID N0:_) . Esta proteína incluye una secuencia de señal predicha de aproximadamente 32 aminoácidos (desde el aminoácido 1 hasta aproximadamente el aminoácido 32 de SEQ ID NO:_) y una proteína madura predicha de aproximadamente 365 aminoácidos (de aproximadamente el aminoácido 33 hasta el aminoácido 397 de SEQ ID NO:_; SEQ ID NO:_) . La proteína LIG 6 tiene cierta similaridad de secuencia con varias galactosiltransferasas. Se ha implicado las galactosiltransferasas en procesos de desarrollo. Además, las galactosiltransferasas pueden desempeñar una función en señalización de célula a célula mediante la modificación del repertorio de carbohidratos en receptores de superficie celular para activar, inhibir o bien modificar de otra forma (por ejemplo, mediante la alteración de la afinidad de receptor para un ligando) la actividad de receptor. Así, LIG46 puede desempeñar una función en la regulación del peso corporal mediante el hecho de influenciar la señalización de célula a célula mediada por moléculas involucradas en la regulación del peso corporal, por ejemplo, leptina. La secuencia de polipéptidos de LIG46 de SEQ ID NO: 2 incluye sitios de N-glicosilación potenciales en los aminoácidos 30-33, 79-82, 89-92, 127-173, y 219-222; sitios potenciales de fosforilación de proteinquinasa C en los aminoácidos 54-56, 202-204, 221-223, 323-325, y 377-379; sitios potenciales de fosforilación de caseinquinasa II en los aminoácidos 31-34, 94-97, 185-188, 221-224, 234-237, y 368-371; un sitio potencial de fosforilación de tirosinquinasa en los aminoácidos 115-122/ y un sitio de amidación potencial en los aminoácidos 3-6. En un aspecto, la invención ofrece moléculas de ácido nucleico aisladas que codifican proteínas LIG46 o porciones biológicamente activas de las mismas, así como moléculas de ácido nucleico adecuadas para su uso como iniciadores o sondas de hibridación para la detección de moléculas de ácido nucleico que codifican LIG46. La invención ofrece además moléculas de ácido nucleico que presentan por lo menos una identidad de 45% (o bien 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98%) con la secuencia de nucleótidos ilustrada en SEQ ID N0:1 o bien SEQ ID NO: 3, o bien un complemento de la misma. La invención ofrece una molécula de ácido nucleico que incluye un fragmento de por lo menos 300 (325, 350, 375, 400, 425, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1300, o 1400) nucleótidos de la secuencia de nucleótidos ilustrada en SEQ ID NO:l o bien SEQ ID NO: 3, o un complemento del mismo. La invención presenta también una molécula de ácido nucleico que incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos que presenta por lo menos una identidad del 45% (o bien 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98%) con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 4. En una modalidad preferida, la molécula de ácido nucleico de LIG46 tiene la secuencia de nucleótidos ilustrada en SEQ ID NO:l o SEQ ID NO: 3. Así mismo dentro de la presente invención se encuentra una molécula de ácido nucleico que codifica un fragmento de un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 4, el fragmento incluye por lo menos 15 (25, 30, 50, 100, 150, 300, o bien 390) aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: . La invención incluye una molécula de ácido nucleico que codifica una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 4, en donde la molécula de ácido nucleico se híbrida con una molécula de ácido nucleico que comprende SEQ ID N0:1 o SEQ ID NO: 3 bajo condiciones estrictas. Así mismo, dentro de la invención se encuentran: una proteína LIG46 aislada que tiene una secuencia de aminoácidos que presenta una identidad de aproximadamente 65%, de preferencia 75%, 85%, 95%, o 98% con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4 (LIG46 de murino madura) o bien la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2 (LIG46 de murino no madura); y una proteína LIG46 aislada que tiene una secuencia de aminoácidos que presenta una identidad de por lo menos aproximadamente 85%, 95%, o bien 98% con una porción de LIG46 que tiene homología con una galactosiltransferasa (por ejemplo, aminoácidos 192-353, 142-184, 201-296, 289-347, 140-183, 367-391, 177-266, 299-343, o bien 140-184 de SEQ ID N0:2) o una proteína de señalización secretada neurogénica (por ejemplo, aminoácidos 200-291, 270-354, 144-183, 380-394, o bien 211-248 de SEQ ID NO: 2) . Así mismo, dentro de la presente invención, se encuentran: una proteína LIG46 aislada que es codificada por una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que tiene una identidad de por lo menos aproximadamente 65%, de preferencia 75%, 85%, o 95% con SEQ ID NO: 3; y una proteina de LIG46 aislada que es codificada por una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que se hibrida en condiciones de hibridación estrictas con una molécula de ácido nucleico que tiene la secuencia de nucleótidos del complemento de SEQ ID NO: 3. Así mismo, dentro de la presente invención, se encuentra un polipéptido que es una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que incluye la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 4, en donde el péptido es codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida con una molécula de ácido nucleico que comprende el complemento de SEQ ID N0:1 o SEQ ID N0:3 en condiciones estrictas. Otra modalidad de la invención ofrece moléculas de ácidos nucleico de LIG46 que detectan específicamente moléculas de ácido nucleico LIG46 (por ejemplo, una molécula de ácido nucleico que codifica LIG46 humana) con relación a moléculas de ácido nucleico que codifican otras galactosiltransferasas. Por ejemplo, en una modalidad, una molécula de ácido nucleico de LIG46 se hibrida en condiciones estrictas con una molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos de SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 3, o un complemento de los mismos, pero no se hibrida con galactosiltransferasas no relacionadas. En otra modalidad, la molécula de ácido nucleico de LIG46 tiene por lo menos 300 (325, 350, 375, 400, 425, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, o bien 1200) nucleótidos de longitud y se hibrida en condiciones estrictas con una molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos ilustrada en SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 3, o un complemento de la misma. Otro aspecto de la presente invención ofrece un vector, por ejemplo, un vector de expresión recombinante, que comprende una molécula de ácido nucleico de LIG46 de la invención. En otra modalidad, la invención ofrece una célula huésped que contiene dicho vector. La invención ofrece también un método para producir proteína LIG46 mediante el cultivo, en un medio adecuado, de una célula huésped de la invención que contiene un vector de expresión recombinante de tal manera que se produzca una proteína LIG46. Otro aspecto de esta invención ofrece proteínas y polipéptidos de LIG46 aislados o recombinantes. Proteínas y polipéptidos de LIG46 preferidos poseen por lo menos una actividad biológica poseída por LIG46 que ocurre naturalmente (por ejemplo, la capacidad de actuar como una galactosiltransferasa) y son inducidos por leptina. Las proteínas de LIG46 de la presente invención, o bien porciones biológicamente activas de las mismas, pueden estar enlazados operativamente a un polipéptido no-LIG46 (por ejemplo, secuencias de aminoácidos heterólogas) para formar proteínas de fusión de LIG46. La invención se refiere además a anticuerpos que se unen específicamente con proteínas de LIG46, como por ejemplo anticuerpos monoclonales o policlonales. Además, las proteínas de LIG46 o porciones biológicamente activas de las mismas pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas, que incluyen opcionalmente vehículos farmacéuticamente aceptables. En otro aspecto, la presente invención ofrece un método para detectar la presencia de actividad de LIG46 o su expresión en una muestra biológica mediante la puesta en contacto de la muestra biológica con un agente capaz de detectar un indicador de actividad de LIG46 de tal manera que la presencia de la actividad de LIG46 es detectada en la muestra biológica. En otro aspecto, la invención ofrece el método para modular la actividad de LIG46 que comprende la puesta en contacto de una célula con un agente que modula (inhibe o estimula) la actividad de LIG46 o su expresión de tal manera que se module la actividad o expresión de LIG46 en la célula. En una modalidad, el agente es un anticuerpo que se une específicamente con la proteína LIG46. En otra modalidad, el agente modula la expresión de LIG46 mediante la modulación de la transcripción de un gen de LIG46, mediante el empalme de ARNm de LIG46, o bien mediante la translación de ARNm de LIG46. En otra modalidad, el agente es una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que es de antisentido con relación a la cadena codificadora de ARNm de LIG46 o gen LIG46. En una modalidad, los métodos de la presente invención se emplean para tratar un sujeto que tiene un trastorno caracterizado por un nivel indeseable de expresión o actividad de proteína o ácido nucleico de LIG46 mediante la administración de un agente que es un modulador de LIG46 al sujeto. En una modalidad, el modulador de LIG46 es una proteína LIG46. En otra modalidad, el modulador de LIG46 es una molécula de ácido nucleico de LIG46. En otras modalidades, el modulador de LIG46 es un péptido, péptido mimético, o bien otra pequeña molécula. En una modalidad preferida, el trastorno es obesidad o bien caquexia. Para el tratamiento de la obesidad es deseable administrar un agente que reduce la expresión o la actividad de LIG46 (un antagonista de LIG46) . Dicho agente puede ser administrado en combinación con leptina. De preferencia, la cantidad de leptina administrada es suficiente, en combinación con leptina endógena, para hacer que el sujeto tratado sea sensible a los efectos del antagonista de LIG46. Para el tratamiento de un peso corporal bajo, es deseable administrar un agente que incrementa la expresión de la actividad de LIG46 (un agonista de LIG46) . La presente invención ofrece también un ensayo de diagnóstico para identificar la presencia o ausencia de una lesión genética o mutación caracterizada por lo menos uno de los siguientes: (i) modificación aberrante o mutación de un gen que codifica una proteína LIG46; (ii) regulación errónea de un gen que codifica una proteína LIG46; y (iii) modificación post-translacional aberrante de una proteína LIG46, en donde la forma de tipo silvestre del gen codifica una proteína con una actividad LIG46. En otro aspecto, la invención ofrece un método para identificar un compuesto que se une con una proteína LIG46 o bien que modula su actividad. En general, dichos métodos incorporan la medición de una actividad biológica de una proteína LIG46 en presencia y ausencia de un compuesto de prueba y la identificación de tales compuestos que alteran la actividad de la proteína LIG46. La invención presenta también métodos para identificar un compuesto que modula la expresión de LIG46 mediante la medición de la expresión de LIG46 en presencia y ausencia de un compuesto. LIG56 El ADNc de LIG56 de murino descrito abajo (SEQ ID NO: 5) tiene un cuadro de lectura abierto de 1200 nucleótidos (nucleótidos 1-1200 de SEQ ID NO: 5; SEQ ID NO: 7) que codifica una proteína de 400 aminoácidos (SEQ ID NO: 6). La secuencia de polipéptido de LIG56 de SEQ ID NO: 6 incluye sitios de N-glicosilación potenciales en los aminoácidos 252-255; sitios potenciales de fosforilación de proteinquinasa C en los aminoácidos 67-69, 75-77, 203-205, 218-220, 295-297, y 299-301; sitios potenciales de fosforilación de caseinquinasa II en los aminoácidos 126-129, 170-173, 203-206, 256-259, 291-294, 341-344, y 345-349/ un sitio potencial de fosforilación de tirosinquinasa en los aminoácidos 233-241; sitios de N-miristilación potenciales en los aminoácidos 66-71, 85-90, 116-121, y 308-313; y un sitio potencial de amidación en los aminoácidos 63-70. LIG56 puede ser una proteína de enlace de GTP. Porciones de la proteína LIG56 son similares a una o varias proteínas de enlace con GTP de murino (Números de Acceso Genbank: L38444; U15636; M63630; U19119; y U53219) . La proteína LIG56 posee un dominio de tipo proteína de enlace de GTP (aminoácidos 12 a 283 de SEQ ID NO: 6) y un dominio similar a LRG-47 (aminoácidos 24-177 de SEQ ID NO: 6). En un aspecto, esta invención ofrece moléculas aisladas de ácido nucleico que codifican proteínas de LIG56 o porciones biológicamente activas, así como fragmentos de ácido nucleico adecuados como iniciadores o sondas de hibridación para la detección de ácidos nucleicos que codifican LIG56. La invención ofrece una molécula de ácido nucleico que presenta una identidad de por lo menos 45% (o 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98%) con la secuencia de nucleótidos presentada en SEQ ID N0:5 o SEQ ID NO: 7 , o un complemento de la misma. La invención ofrece una molécula de ácidos nucleicos que incluye un fragmento de por lo menos 100 (200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, 1100, o bien 1200) nucleótidos de la secuencia de nucleótidos mostrada en SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7, o un complemento de la misma. La invención ofrece también una molécula de ácido nucleico que incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de por lo menos 45% (o bien 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98%) con relación a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6. En una modalidad preferida, una molécula de ácido nucleico de LIG56 tiene una secuencia de nucleótidos mostrada en SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7. Así mismo, dentro de la presente invención, se encuentra una molécula de ácido nucleico que codifica un fragmento de un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6, el fragmento incluye por lo menos 15 (25, 30, 50, 100, 150, 300, o bien 400) aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 6. La invención incluye una molécula de ácido nucleico que codifica una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6, en donde la molécula de ácido nucleico se hibrida con una molécula de ácido nucleico que tiene la secuencia del complemento de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7 en condiciones estrictas. Así mismo, dentro de la presente invención se encuentran: una proteína LIG56 aislada que tiene una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de por lo menos aproximadamente 65%, de preferencia 75%, 85%, 95%, o 98% con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6. Así mismo dentro de la presente invención se encuentran: una proteína LIG56 aislada codificada por una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que tiene una identidad de aproximadamente por lo menos 65%, de preferencia 75%, 85%, o 95% con SEQ ID NO: 7/ y una proteína aislada de LIG56 codificada por una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que se hibrida en condiciones estrictas de hibridación con una molécula de ácido nucleico que tiene la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO: 7. Así mismo, dentro de la presente invención, se encuentra un polipéptido que es una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que incluye la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6, en donde el polipéptido es codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida con una molécula de ácido nucleico que comprende SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7 en condiciones estrictas. Otra modalidad de la presente invención ofrece unas moléculas de ácido nucleico de LIG56 que detectan específicamente moléculas de ácido nucleico de LIG56 (por ejemplo, LIG56 de ser humano) con relación a moléculas de ácido nucleico que codifican otras moléculas de ácido nucleico no relacionadas que tienen una homología de secuencia con las proteínas de enlace de GTP. Por ejemplo, en una modalidad, una molécula de ácido nucleico de LIG56 se hibrida en condiciones estrictas con una molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO.7, o un complemento de la misma. En otra modalidad, la molécula de ácido nucleico de LIG56 tiene por lo menos 300 (325, 350, 375, 400, 425, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, 1100 o bien 1200) nucleótidos de longitud y se hibrida en condiciones estrictas con una molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos mostrada en SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7, o un complemento de la misma. En otra modalidad, la invención ofrece una molécula de ácido nucleico aislada que es de antisentido con relación a la cadena codificadora de un ácido nucleico de LIG56. Otro aspecto de la presente invención ofrece un vector, por ejemplo, un vector de expresión recombinante, que comprende una molécula de ácido nucleico de LIG56 de la invención. En otra modalidad, la invención ofrece una célula huésped que contiene un vector de este tipo. La invención ofrece también un método para producir una proteína LIG56 mediante cultivo, en un medio adecuado, de una célula huésped de la invención que contiene un vector de expresión recombinante de tal manera que se produzca un polipéptido de LIG56. Otro aspecto de esta invención ofrece proteínas de LIG56 aisladas o recombinantes y polipéptidos. Las proteínas y polipéptidos de LIG56 preferidos poseen por lo menos una actividad biológica poseída por LIG56 que ocurre naturalmente y son inducidos por leptina. Las proteínas de LIG56 de la presente invención, o bien porciones biológicamente activas de las mismas, pueden estar enlazadas operativamente con un polipéptido no LIG56 (por ejemplo, secuencias de aminoácidos heterólogas) para formar proteínas de fusión de LIG56. La invención presenta además anticuerpos que se unen específicamente con proteínas de LIG56, tales como anticuerpos monoclonales o policlonales. Además, las proteínas de LIG56 o porciones biológicamente activas de las mismas pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas que incluyen opcionalmente vehículos farmacéuticamente aceptables. En otro aspecto, la presente invención ofrece un método para detectar la presencia de actividad o expresión de LIG56 en una muestra biológica mediante la puesta en contacto de la muestra biológica con un agente capaz de detectar un indicador de actividad de LIG56 de tal manera que se detecte la presencia de actividad de LIG56 en la muestra biológica. En otro aspecto, la invención ofrece un método para modular la actividad de LIG56 que comprende la puesta en contacto de una célula con un agente que modula (inhibe o estimula) la actividad de LIG56 o la expresión de LIG56 de tal manera que se module la actividad o expresión de LIG56 en la célula. En una modalidad, el agente es un anticuerpo que se une específicamente con una proteína LIG56. En otra modalidad, el agente modula la expresión de LIG56 mediante la modulación de la transcripción de un gen LIG56, el empalme de un ARNm de LIG56, o una translación de ARNm de LIG56. En otra modalidad, el agente es una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que es de antisentido con relación con la cadena codificadora del ARNm de LIG56 o del gen LIG56. En una modalidad, los métodos de la presente invención se emplean para tratar un sujeto que tiene un trastorno caracterizado por un nivel indeseable de proteína LIG56 o expresión de ácido nucleico (por ejemplo, un trastorno del peso corporal) o actividad mediante la administración de un agente que es un modulador de LIG56 al paciente. En una modalidad, el modulador de LIG56 es una proteína LIG56. En otra modalidad, el modulador de LIG56 es una molécula de ácido nucleico de LIG56. En otras modalidades, el modulador de LIG56 es un péptido, péptidomi etico, o bien otra pequeña molécula. En una modalidad preferida, el trastorno es obesidad o caquexia. La presente invención ofrece también un ensayo de diagnóstico para identificar la presencia o ausencia de una lesión o mutación genética caracterizada por lo menos por uno de los siguientes: (i) modificación o mutación aberrante de un gen que codifica una proteína LIG56; (ii) regulación errónea de un gen que codifica una proteína LIG56/ y (iii) modificación post-translacional aberrante de una proteína LIG56, en donde una forma de tipo silvestre del gen codifica una proteína con una actividad de LIG56. En otro aspecto, la invención ofrece un método para identificar un compuesto que se une con una proteína LIG56 o que modula la actividad de una proteína LIG56. En general, tales métodos incorporan la medición de una actividad biológica de una proteína LIG56 en presencia y ausencia de un compuesto de prueba y la identificación de I?S compuestos que alteran la actividad de la proteína LIG56. La invención presenta también métodos para identificar un compuesto que modula la expresión de LIG56 mediante la medición de la expresión de LIG56 en presencia y ausencia de un compuesto. Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 son genes conocidos. Sin embargo, ninguno de estos genes ha sido previamente implicado en la regulación del peso corporal. La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento que la expresión de cada uno de estos genes es inducida por leptina. Puesto que Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 son inducidos por leptina, la proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 y las moléculas de ácido nucleico que las codifican son útiles en el desarrollo de compuestos farmacéuticos para el tratamiento o la prevención de trastornos del peso corporal. Tgtp (Número de Acceso Genbank L38444) codifica una proteína de enlace de trifosfato nucleótido de guanina específica para célula T (Carlo et al., (1994) J. Immunol. 154:1724-34). LRG-47 (Número de Acceso Genbank U19119) es inducido por LPS, IFN-?, y IFN-a/ß y codifica una proteína que tiene cierta homología con proteínas de unión de GTP (Sorace et al. (1995) J. Leukocyte Biol. 58:477-84). LRG-47 (Número de Acceso Genbank U19119) es un gen inducible por LPS, IFN-?, y IFN-a/ß que tiene homología con IRG-47 y Mg21, ambos son genes inducibles por IFN-? (Sorace et al. (1995) J. Leukocyte Biol. 58:477-484). LRG-47 tiene también homología con Tgtp y puede ser una proteína de unión con GTP (Sorace et al., supra). RC10-II (Número de Acceso Genbank D21800) es un gen que codifica la subunidad de 20S proteasoma de cerebro embriónico de rata (Nishimura et al. (1993) FEBS Lett. 336:462-66). Se ha sugerido que RC10-II es una unidad proteasomal que se requiere para la expresión de la actividad tríptica (Nishimura et al., supra). Stral3 (Número de Acceso Genbank AF010305) es un gen inducible por ácido retinoico que codifica una proteína de hélice-bucle-hélice básica (Boudjelal et al. (1997) Genes Dev. 11:2052-65). Stral3 puede actuar como represor de la transcripción activada y se cree que desempeña una función en la diferenciación neuronal (Boudjelal et al., supra). La invención ofrece un método para identificar un compuesto que se une o modula la actividad de una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. En general, tales métodos incorporan la medición de una actividad biológica de una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en presencia y ausencia de un compuesto de prueba y la identificación de los compuestos que se unen o alteran la actividad de la proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. La invención presenta también métodos para identificar un compuesto que modula la expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 mediante la medición de la expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en presencia y ausencia de un compuesto. Así, la invención ofrece un método para modular la actividad de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, que comprende la puesta en contacto de una célula con un agente que modula (inhibe o estimula) la actividad o expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, de tal manera que se module la actividad o expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en la célula. En una modalidad, el agente es un anticuerpo que se une específicamente a proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II o Stral3. En otra modalidad, el agente modula la expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 mediante la modulación de la transcripción de un gen Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3; la unión de un ARNm de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3; o la translación de un ARNm de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. En otra modalidad, el agente es una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos que es de antisentido para la cadena codificadora de ARNm de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o gen Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. En otra modalidad, los métodos de la presente invención se emplean para tratar un sujeto que tiene un trastorno influenciado por la expresión o actividad de proteína o ácido nucleico de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 mediante la administración de un agente que es un modulador de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 al sujeto. En una modalidad, el modulador de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 es una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. En otra modalidad, el modulador de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 es una molécula de ácido nucleico de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. En otras modalidades, el modulador de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 es un péptido, péptidomimetico, o bien otra pequeña molécula. En una modalidad preferida, el trastorno es obesidad o caquexia. La presente invención ofrece también un ensayo de diagnóstico para identificar la presencia o ausencia de una lesión o mutación genética que se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: (i) modificación o mutación aberrante de un gen que codifica una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3; (ii) regulación errónea de un gen que codifica una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3; y (iii) modificación post-translacional aberrante de una proteína Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, en donde una forma de tipo silvestre del gen codifica una proteína con una actividad Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, tales lesiones caracterizándose por trastornos del peso corporal. En otro aspecto, la presente invención ofrece un método para determinar la presencia de actividad o expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en una muestra biológica mediante la puesta en contacto de una muestra biológica con un agente capaz de detectar un indicador de actividad de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 de tal manera que se detecte la presencia de actividad de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en la muestra biológica. Otras características y ventajas de la invención serán aparentes a partir de la siguiente descripción detallada y de las reivindicaciones. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 presenta la secuencia de ADNc (SEQ ID NO:l) y la secuencia predicha de aminoácidos (SEQ ID NO: 2) de LIG46 de murino.

La figura 2 presenta una serie de alineaciones de la secuencia de aminoácidos de LIG46 con porciones de numerosas galactosiltransferasas, incluyendo (desde la parte superior hasta la parte inferior) : UDP-Gal de Mus musculus: betaGlcNAc beta 1, 3-galactosiltransferasa-I (Número de Acceso AF029790; SEQ ID N0:_); IPP-Gal de Mus muscul us : betaGlcNAc beta 1,3-galactosiltransferasa-III (Número de Acceso AF029792) ; proteína de señalización secretada neurogénica de Drosophila melanogaster ("Brainiac"; Número de Acceso U41449; SEQ ID N0:_); y UDP-galactosa de Homo sapiens : 2-acetamido-2-deoxi-D-"glucosa3beta-galactosiltransferasa (Número de Acceso Y15014/ SEQ ID N0:_) . La secuencia de aminoácidos arriba de la línea sólida es una secuencia de mayoría. La figura 3 es una gráfica de hidropatía de LIG 6. La ubicación de los dominios predichos de transmembrana (TM) , citoplásmicos (IN) , y extracelulares (OUT) se indican como la posición de las cisteínas (cys/ barras verticales inmediatamente debajo de la gráfica) . La hidrofobicidad relativa se muestra arriba de la línea de puntos, y la hidrofilicidad relativa se muestra debajo de la línea de puntos . La figura 4 presenta la secuencia de ADNc (SEQ ID NO: 5) y la secuencia predicha de aminoácidos (SEQ ID NO: 6) de LIG56 de murino. La figura 5 es una gráfica de hidropatía de LIG56. La hidrofobicidad relativa es muestra arriba de la línea de puntos, y la hidrofilicidad relativa se muestra debajo de la línea de puntos . La figura 6 es una gráfica que muestra el efecto de los oligonucleótidos de sentido y antisentido de LIG46 sobre la ingesta de alimentos de ratones machos obesos (ob/ob) en presencia y ausencia de leptina. La figura 7 muestra la secuencia de ADNc de LIG46 humano. La figura 8 presenta la secuencia de aminoácidos predicha de LIG46 de ser humano. La figura 9 presenta una alineación de la secuencia de ADNc de LIG46 de ser humano (secuencia superior) y LIG46 de murino (secuencia inferior) . La figura 10 representa una alineación de la secuencia de aminoácidos predichas de LIG46 de ser humano (secuencia superior y LIG46 de murino (secuencia inferior) La figura 11 representa el efecto de oligonucleótidos de sentido y antisentido de LIG46 sobre la ingesta de alimentos de ratones machos delgados en presencia y ausencia de leptina. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presenta invención se basa, en parte, en la identificación de seis genes cuya expresión es inducida por la leptina.

Cuatro de estos genes, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3, son genes conocidos. Dos de los genes, LIG46 y LIG56, son novedosos.

Una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína de LIG46 de murino se muestra en la figura 1 (SEQ ID NO: 1; SEQ ID NO: 3 incluye el cuadro de lectura abierto solamente) . Una secuencia de aminoácidos predicha de una proteína de LIG46 se muestra también en la figura 1 (SEQ ID NO: 2),. El ADNc de LIG46 de murino de la figura 1 (SEQ ID N0:1) codifica una proteína de 397 aminoácidos. LIG46 de murino es un miembro de una familia de moléculas (la "familia de LIG46") que tienen ciertas características estructurales y funcionales conservadas. El término "familia" cuando se refiere a la proteína y a las moléculas de ácido nucleico de la invención se refiere a dos o más proteínas o moléculas de ácido nucleico que tienen un dominio estructural común y que tienen una identidad de secuencia de nucleótidos o aminoácidos suficientes de conformidad con lo definido aquí. Tales miembros de familia pueden ocurrir naturalmente y pueden ser ya sea de la misma especie o bien de especies diferentes. Por ejemplo, una familia puede contener una primera proteína de origen de murino y un homólogo de esta proteína de origen humano, así como una segunda proteína distinta de origen humano y un homólogo de murino de esta proteína. Miembros de una familia pueden también tener características funcionales comunes. Una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína de LIG56 de murino se muestra en la figura 4 (SEQ ID NO: 5; SEQ ID NO: 7 incluye el cuadro de lectura abierto solamente). Una secuencia de aminoácidos predicha de una proteína de LIG46 se muestra también en la figura 4 (SEQ ID NO: 6). El ADNc de LIG56 de murino de la figura 4 (SEQ ID NO: 5) codifica una proteína de 400 aminoácidos. LIG56 de murino es un miembro de una familia de moléculas (la "familia de LIG56") que tienen ciertas características estructurales y funcionales conservadas. El término "familia" cuando se refiere a la proteína y a las moléculas de ácido nucleico de la invención se refiere a dos o más proteínas o moléculas de ácido nucleico que tienen un dominio estructural común y que tienen una identidad de secuencia de nucleótidos o aminoácidos suficientes de conformidad con lo definido aquí. Tales miembros de familia pueden ocurrir naturalmente y pueden ser ya sea de la misma especie o bien de especies diferentes. Por ejemplo, una familia puede contener una primera proteína de origen de murino y un homólogo de esta proteína de origen humano, así como una segunda proteína distinta de origen humano y un homólogo de murino de esta proteína. Miembros de una familia pueden también tener características funcionales comunes. Tgtp (No. de acceso GenBank L38444) codifica una proteína de enlace de trifosfato de nucleótido de guanina específico para célula T (Carlo et al. (1994) J. Immunol. 154:1724-34) . LRG- 47 (No. de acceso GenBank U19119) es inducido por LPS, IFTST- ?, y IFN-a/ß y codifica una proteína que tiene cierta homología con proteína de unión de GTP (Sorace et al. (1995) J. Leukocyte Biol. 58:477-84). LRG-47 (No. de acceso GenBank U19119) es una gen inducible por LPS, IFN-?, y IFN-a/ß que tienen una homología con IRG-47 y Mg21, ambos son genes inducidos por IFN-? (Sorace et al. (1995) J. Leukocyte Biol. 58:477-84). LRG47 tiene también una homología con Tgtp y puede ser una proteína de unión de GTP (Sorace et al., supra). RC10-II (No. de acceso GenBank D21800) es un gen que codifica una subunidad de RC10-II del 20S proteasoma de cerebro embriónico de rata (Nishimura et al. (1993) FEBS Lett. 336:462-66). Se ha sugerido que RC10-II es una subunidad proteasomal que se requiere para la expresión de la actividad tríptica (Nishimura et al., supra). Stral3 (No. de acceso GenBank AF010305) es un gen inducido por ácido retinóico que codifica una proteína hélice-bucle-hélice básica (Boudjelal et al. (1997) Genes Dev. 11:2052- 65) . Stral3 puede actuar como represor de transcripción activada y se cree que desempeña una función en la diferenciación neuronal (Boudjelal et al., supra). Varios aspectos de la invención se describen con mayores detalles en las subsecciones siguientes. I. Moléculas aisladas de ácido nucleico Un aspecto de la invención se refiere a moléculas aisladas de ácido nucleico que codifican proteínas de LIG46 o bien LIG56 o porciones biológicamente activas de las mismas, así como moléculas de ácido nucleico que puedan emplearse como sondas de hibridación para identificar moléculas de ácido nucleico que codifican LIG46 o bien LIG56 (por ejemplo, LIG46 de ser humano o LIG56 de ser humano) y fragmentos para su uso como iniciadores de reacción en cadena de polimerasa para la amplificación o mutación de moléculas de ácido nucleico de LIG46 o bien LIG56. Como se emplea aquí, el término "molécula de ácido nucleico" abarca moléculas de ADN (por ejemplo, ADNc o ADN genómico) y moléculas de ARN (por ejemplo, ARNm) y análogos de ADN o ARN generado empleando análogos de nucleótidos. La molécula de ácido nucleico puede ser ADN de cadena única o de cadena doble, pero de preferencia es ADN de cadena doble. Esta sección describe varias moléculas de ácido nucleico de LIG46 y LIG56. Evidentemente, moléculas de ácido nucleico aisladas que codifican la totalidad o una parte de Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 son útiles en los métodos de la invención, por ejemplo, métodos para identificar compuestos que modulan un trastorno de peso corporal. Así, una molécula de ácido nucleico que abraca una secuencia que codifica la totalidad o una parte de Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 (o una molécula de ácido nucleico que abarca la totalidad o una parte de la región regulatoria de un gen Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3, puede emplearse para crear células recombinantes que pueden ser empleadas en ensayos de tamizado. Además, moléculas de ácido nucleico que codifican Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 pueden emplearse para crear ratones transgénicos que sobreexpresan uno o varios Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3. Tales ratones transgénicos son útiles para elucidar la función de estos genes en la regulación del peso corporal. Así, los métodos descritos en esta sección pueden ser empleados para preparar y manipular moléculas de ácido nucleico de Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 así como homólogos humanos de Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3. Una molécula de ácido nucleico "aislada" es una molécula que es separada de otras moléculas de ácido nucleico que están presentes en la fuente natural del ácido nucleico. De preferencia, un ácido nucleico "aislado" se encuentra exento de secuencias (de preferencia secuencias codificadoras de proteína) que flanquean naturalmente el ácido nucleicp (es decir, secuencias ubicadas en los extremos 5' y 3' del ácido nucleico) en el ADN genómico del organismo a partir del cual se deriva el ácido nucleico. Por ejemplo, en varias modalidades, la molécula de ácido nucleico de LIG46 o LIG56 aislada puede contener menos que aproximadamente 5 kb, 4 kb, 3 kb, 1 kb, 0.5 kb o bien 0.1 kb de secuencias de nucleótidos que flanquean naturalmente la molécula de ácido nucleico en A N genómico de la célula a partir de la cual se deriva c.l ácido nucleico. Además, una molécula tic ácido nucleico "aislada" como por ejemplo una molécula de ADNc puede estar s?stancJ almente exenta de otro material celular, o medio de cultivo cuando se produce mediante técnicas rocoiabri nantes o b en sustancialmente exenta de precursuies, químicos o bien otros químicos cuando se sjnt.etiza químicamente . Una molécula de ácido nucleico de la presente invención, por ejemplo, una molécula de ácido nucleico qae Liene la secuencia de nucleótido- de SEQ ID NO: i, SEQ ID NO; 3, SEQ ID NO; 5 o bien SEQ ID N0:7, o un complemento de cualesquiera de an as secuencias de nucleóLidos, puede ser aislada empleando técnicas de biología molecular estándares y la información de secuencia proporcionada aquí. Empleando la totalidad o una parte de las secuencias de ácido nucleico de SF.Q ID NO:l, SEQ ID NO: 3, o bien la totalidad o una parte de la secuencia de ácido nucleico de S Q ID NO: 5 o SF.Q ID NO: 7, como sonda de. hibridación se pueden aislar moléculas de ácido nucleico de LIG46 y LIG56 empl ando técnicas estándares de hibridación y clonación (por ejemplo, de conformidad con l? descrito en Sambrook et al., eds., Molecular Cloning: A a oxatory Manual (Clonación Molecular: Un Manual de Laborator o), 2a. edición, c.d., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold spriny Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 19H9) .

Un ácido nucleico de la presente invención puede estar amplificado empleando ADNc, ARNm o ADN genómico como templado e iniciadores de oligonucleótido apropiados de conformidad con técnicas estándares de amplificación por reacción en cadena de polimerasa. El ácido nucleico amplificado de esta forma puede ser clonado en un vector apropiado y caracterizado por el análisis de secuencia de ADN. Además, oligonucleótidos que corresponden a secuencias de nucleótidos de LIG46 o LIG56 pueden prepararse mediante técnicas estándares sintéticas, por ejemplo, empleando un sintetizador de ADN automatizado. Las moléculas de v aisladas de la presente invención comprenden una molécula de ácido nucleico que es un complemento de la secuencia de nucleótidos mostrada en SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5 o bien SEQ ID NO: 7, o bien una porción de la misma) . Una molécula de ácido nucleico que es complementaria de una secuencia de nucleótidos dada es una molécula que es suficientemente complementaria con la secuencia de nucleótidos dada de tal manera que puede hibridarse con la secuencia de nucleótidos dada formando así un dúplex estable. Además, la molécula de ácido nucleico de la presente invención puede comprender solamente una porción de una secuencia de ácido nucleico que codifica LIG46 o LIG56, por ejemplo, un fragmento que puede ser empleado como sonda o iniciador o un fragmento que codifica una porción biológicamente activa de LIG46 o LIG56. La secuencia de nucleótidos determinada a partir de la clonación del gen LIG46 de murino y del gen LIG56 de murina permite la generación de sondas e iniciadores diseñados para emplearse en la identificación y/o clonación de homólogos de LIG46 o LIG56 en otros tipos de células, por ejemplo, de otros tejidos así como homólogos de LIG46 y LIG56 de otros mamíferos, por ejemplo, seres humanos. La sonda/el iniciador comprende típicamente oligonucleótidos sustancialmente purificados. El oligonucleótido comprende típicamente una región de secuencia de nucleótidos que se hibrida en •condiciones estrictas con por lo menos aproximadamente 12, de preferencia aproximadamente 25, con mayor preferencia aproximadamente 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, o 400 nucleótidos consecutivos de la secuencia de sentido o antisentido de SEQ ID NO:l o SEQ ID NO: 3, o de un mutante que ocurre naturalmente de SEQ ID NO:l o SEQ ID NO: 3, o una secuencia de sentido o antisentido de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7, o de un mutante que ocurre naturalmente de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7. Sondas basadas en las secuencias de nucleótidos de LIG46 o LIG56 pueden empelarse para detectar transcriptos o secuencias genómicas que codifican la misma proteína o proteínas relacionadas (por ejemplo, homólogos humanos) . La sonda comprende un grupo marcador fijado ahí, por ejemplo, un radioisótopo, un compuesto fluorescente, una enzima, o una cofactor enzimático. Tales sondas pueden ser empeladas como parte de un conjunto de elementos de prueba de diagnóstico para identificar células o tejido que expresan de manera errónea una proteína de LIG46 o LIG56, como por ejemplo mediante la medición de nivel de ácido nucleico que codifica LIG46 o LIG56 en una muestra de células a partir de un sujeto, por ejemplo, la detección de niveles de ARNm de LIG46 o LIG56 o la determinación de sí el gen LIG46 o LIG56 genómico ha sido mutado o removido. Un fragmento de ácido nucleico que codifica una "porción biológicamente activa de LIG46" puede prepararse mediante el aislamiento de una porción de SEQ ID N0:1 o SEQ ID NO: 3 que codifica un polipéptido que tiene una actividad biológica LIG46 que expresa la porción codificada de LIG46 (por ejemplo, por expresión recombinante in vitro) y evaluando al actividad de la porción codificada de LIG46. Por ejemplo, un fragmento de ácido nucleico que codifica una porción biológicamente activa de LIG46 incluye un dominio de tipo galactosiltransferasa, por ejemplo, SEQ ID NO: . La invención comprende además moléculas de ácido nucleico que difieren de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID N0:1 o SEQ ID NO: 3 debido a la degeneración del código genético y por consiguiente que codifican la misma proteína LIG46 que la proteína codificada por la secuencias de nucleótidos ilustrada en SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 3. Además las secuencias de nucleótidos de LIG46 mostradas en SEQ ID N0:1 y SEQ ID NO: 3, se observará por parte de los expertos en la materia que polimorfismos de secuencia de ALDN que provocan cambios en las secuencias de aminoácidos de LIG46 pueden existir dentro de una población. Dicho polimorfismo genético en el gen LIG46 puede existir entre individuos dentro de una población debido a una variación alélica natural. Como se emplea aquí, los términos "gen" y " gen recombinante" se refieren a moléculas de ácido nucleico que comprenden un cuadro de lectura abierta que codifica una proteína de LIG46, de preferencia una proteína de LIG46 de mamífero. Dichas variaciones alélicas naturales pueden resultar típicamente en una variación de 1 a 5% en la secuencia de nucleótidos del gen LIG46. Todas y cada una de estas variaciones de nucleótidos y polimorfismos resultantes de aminoácidos en LIG46 que son el resultado de una variación alélica natural y que no alteran la actividad funcional de LIG46 se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Un fragmento de ácido nucleico que codifica una "porción biológicamente activa de LIG56" puede prepararse mediante el aislamiento de una porción de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7, que codifica un polipéptido que tiene una actividad biológica LIG56, expresando la porción codificada de proteína LIG56 (por ejemplo, mediante la expresión recombinante in vitro) y evaluando la actividad de la porción codificada de LIG56. Por ejemplo, un fragmento de ácido nucleico que codifica una porción biológicamente activa de LIG56 incluye un dominio de tipo proteína de unión de GTP, SEQ ID N0:_. La invención abarca además moléculas de ácido nucleico que difieren de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7 debido a la degeneración del código genético y por consiguiente que codifican la misma proteína LIG56 que la proteína codificada por la secuencia de nucleó?idos ilustrada en SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7. Además de la secuencia de nucleótidos de LIG56 de murino mostrada en SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 7, se observará por parte de los expertos en la materia que polimorfismos de secuencias de ADN que provocan cambios en las secuencias de aminoácidos de LIG56 pueden existir dentro de una población. Dicho polimorfismo genético en el gen LIG56 pueden existir entre individuos dentro de la población debido a una variación alélica natural. Como se emplea aquí, los términos "gen" y "gen recombinante" se refieren a moléculas de ácido nucleico que comprenden un cuadro de lectura abierto que codifica una proteína LIG56, de preferencia una proteína LIG56 de mamífero. Tales variaciones alélicas naturales pueden resultar típicamente en una variación del 1 al 5% en cuanto a la secuencia de nucleótidos del gen LIG56. Todas y cada una de estas variaciones de nucleótidos y polimorfismos resultantes de aminoácidos en LIG56 que son el resultado de una variación alélica natural y que no alteran la actividad funcional de LIG56 se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Además, moléculas de ácido nucleico que codifican proteínas de LIG46 o LIG56 a partir de otras especies (homólogos de LIG46 o LIG56) , que tienen una secuencia de nucleótidos que difiere de la secuencia de nucleótidos del gen de murino, se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Moléculas de ácido nucleico que corresponden a variantes alélicas naturales y homólogos del ADNc de LIG46 o LIG56 de la invención pueden ser aisladas con base en su identidad con los ácidos nucleicos de LIG46 o LIG56 presentados aquí empleando los ADNc de murino, o una porción de los mismos, como una zona de hibridación de conformidad con técnicas estándares de hibridación en condiciones de hibridación estrictas. Por ejemplo, un ADNc de LIG46 soluble puede ser aislado con base en su identidad con LIG46 unido a membrana de murino. De la misma manera, un ADNc de LIG56 de ser humano unido a membrana puede ser aislado con base en su identidad con LIG56 soluble. Por consiguiente, en otra modalidad, una molécula de ácido nucleico aislada de la invención tiene por lo menos 300 (325, 350, 375, 400, 425, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 800, 900, 1000, o 1200) nucleótidos de longitud y se hibrida en condiciones estrictas con la molécula de ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos, de preferencia la secuencia de codificación de SEQ ID N0:1, o SEQ ID NO: 3, o SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7. Como se emplea aquí, el término "se hibrida en condiciones estrictas" describe condiciones para la hibridación y lavado en las cuales secuencias de nucleótidos con una identidad de por lo menos 60% (65%, 70%, de preferencia 75%) entre ellas permanecen típicamente hibridadas entre ellas. Tales condiciones estrictas son conocidas por parte de los expertos en la materia y pueden encontrarse en Current Protocols in Molecular Biology, (Protocolos actuales en Biología Molecular) John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6. Un ejemplo no limitativo preferido de condiciones de hibridación estrictas son hibridación en 6X cloruro de sodio/citrato de sodio (SSC) a una temperatura de aproximadamente 45° C, seguido por uno o varios lavados en 0.2 X SSC, 0.1% SDS a una temperatura de 50-65° C. De preferencia, una molécula de ácido nucleico aislada de la invención que se hibrida en condiciones estrictas con la secuencia de SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5 o SEQ ID NO: 7 corresponde a una molécula de ácido nucleico que ocurre naturalmente. Como se emplea aquí, una molécula de ácido nucleico que "ocurre naturalmente" se refiere a una molécula de ARN o ADN que tiene una secuencia de nucleótidos que ocurre en la naturaleza (por ejemplo, codifica una proteína natural) . Además de variantes alélicas que ocurren naturalmente de la secuencia de LIG46 o LIG56 que pueden existir en la población, el experto en la materia observará además que cambios pueden ser introducidos por mutación en las secuencias de nucleótidos presentadas aquí, por lo que se provocan cambios en la secuencia de aminoácidos de la proteína LIG46 o LIG56 codificada, sin alterar la capacidad funcional de la proteína de LIG46 o LIG56. Por ejemplo, se pueden efectuar sustituciones de nucleótidos que provocan sustituciones de aminoácidos en residuos de aminoácidos "no esenciales". Un residuo de aminoácido "no esencial" es un residuo que puede ser alterado a partir de la secuencia de tipo silvestre de LIG46 o LIG56 sin alterar la actividad biológica, mientras que una secuencia de aminoácido "esencial" es requerida para la actividad biológica. Por ejemplo, se predice que residuos de aminoácido conservados entre las proteínas de LIG46 o LIG56 de varias especies son particularmente difíciles de alterar. Por ejemplo, proteínas de LIG46 preferidas de la presente invención conservan aminoácidos que son conservados entre las galactosiltransferasas . Tales dominios conservados son menos receptibles a la mutación. Otros residuos de aminoácido, sin embargo, (por ejemplo, los que no son conservados o bien solamente semiconservados entre LIG 6 o LIG56 de varias especies) pueden no ser esenciales para la actividad y por consiguiente es probable que se presten a la alteración. Por consiguiente, otro aspecto de la invención se refiere a moléculas de ácido nucleico que codifican proteínas de LIG46 o LIG56 que contienen cambios en residuos de aminoácidos que no son esenciales para la actividad. Tales proteínas de LIG46 o LIG56 difieren en cuanto a la secuencia de aminoácidos de las proteínas divulgadas aquí y sin embargo conservan su actividad biológica. En una modalidad, la molécula de ácido nucleico aislada incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína que incluye una secuencia de aminoácidos que tiene por lo menos una identidad de 45%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98% con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N0:2 o SEQ ID NO: 6. Una molécula de ácido nucleico aislada que codifica una proteína de LIG46 o LIG56 que tiene una secuencia que difiere de la secuencia divulgada aquí puede ser creada mediante la introducción de una o varias sustituciones, adiciones o remociones de nucleótidos en la secuencia de nucleótidos divulgada aquí de tal manera que una o varias sustituciones, adiciones o remociones de aminoácido sean introducidas en la proteína codificada. Mutaciones pueden ser introducidas por técnicas estándares como por ejemplo mutagenesis dirigida a sitio y mutagenesis mediada por reacción en cadena de polimerasa. De preferencia, sustituciones conservadoras de aminoácidos se efectúan en uno o varios residuos predichos no esenciales de aminoácido. Una "sustitución de aminoácido conservadoras" es una sustitución en la cual el residuo de aminoácido es remplazado con un residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral similar. Familias de residuos de aminoácido que tienen cadenas laterales similares han sido definidas en la técnica. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas laterales acidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico) , cadenas laterales polares no cargadas (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteina) , cadenas laterales no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptófano) , cadenas laterales ramificadas beta (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina) . Así, un residuo de aminoácido no esencial predicho en LIG46 o LIG56 es de preferencia remplazado con otro residuo de aminoácido de la misma familia de cadena lateral. Alternativamente, se pueden introducir mutaciones de manera aleatoria a lo largo de la totalidad o una parte de una secuencia de codificación de LIG46 o LIG56, como por ejemplo mediante mutagenesis de saturación, y los mutantes resultantes pueden ser tamizados para determinar la actividad biológica de LIG46 o LIG56 con el objeto de identificar mutantes que conservan la actividad. Después de la mutagenesis, la proteína codificada puede ser expresada recombinantemente y la actividad de la proteína puede ser determinada. La presente invención abarca moléculas de ácido nucleico de antisentido, es decir, moléculas que son complementarias con un ácido nucleico de sentido que codifica una proteína, por ejemplo, complementarias con la cadena codificadora de una molécula de ADNc de cadena doble o complementarias de una secuencia de ARNm. Por consiguiente, un ácido nucleico de antisentido puede unir hidrógeno con un ácido nucleico de sentido. El ácido nucleico de antisentido puede ser complementario con una cadena de codificación entera de LIG46 o LIG56, o bien solamente con una parte de la misma, por ejemplo, la totalidad o una parte de la región codificadora de proteína (o bien cuadro de lectura abierto) . Una molécula de ácido nucleico de antisentido puede ser de antisentido con relación a una región no codificadora de la cadena codificadora de una secuencia de nucleótidos que codifica LIG46 o LIG56. Las regiones no codificadoras ("regiones no trasladadas 5' y 3'") son las secuencias 5' y 3' que flanquean la región codificadora y no son trasladadas en aminoácidos. Dadas las secuencias de cadena codificadora que codifican LIG46 o LIG56 divulgadas aquí (por ejemplo, SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, y SEQ ID NO: 7), ácidos nucleicos de antisentido de la presente invención pueden ser diseñados de conformidad con las reglas de Watson y Crick en cuanto al apareamiento de bases. La molécula de ácido nucleico de antisentido puede ser complementaria de la región codificadora entera de ARNm de LIG46 o LIG56, pero con mayor preferencia es un oligonucleótido que es de antisentido solamente con relación a una parte de la región codificadora o no codificadora de ARNm de LIG46 o LIG56. Por ejemplo, el oligonucleótido de antisentido puede ser complementario de la región que rodea el inicio de arranque de translación de ARNm de LIG46 o LIG56. Un oligonucleótido de antisentido puede tener, por ejemplo, aproximadamente 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 o 50 nucleótidos de longitud. Un ácido nucleico de antisentido de la presente invención puede ser construido empleando síntesis química y reacciones de ligación enzimática empleando procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, un ácido nucleico de antisentido (por ejemplo, un oligonucleótido de antisentido) puede ser sintetizado químicamente empleando nucleótidos que ocurren naturalmente o bien nucleótidos modificados de manera variada diseñados para incrementar la estabilidad biológica de las moléculas o para incrementar la estabilidad física del dúplex formado entre los ácidos nucleicos de antisentido y de sentido, por ejemplo, derivados de fosforotioato y nucleótidos sustituidos por acridina pueden emplearse. ejemplos de nucleótidos modificados que pueden emplearse para generar el ácido nucleico de antisentido incluyen 5-fluorouracilo, 5-bromouracilo, 5-clorouracilo, 5-yodouracilo, hipoxantina, xantina, 4-acetilcitosina, 5- (carboxihidroxilmetil) uracilo, 5-carboximetilaminometil-2-tiouridina, 5-carboximetilaminometiluracilo, dihidrouracilo, beta-D-galactosilqueosina, inosina, N6-isopenteniladenina, 1-metilguanina, 1-metilinosina, 2,2-dimetilguanina, 2-metiladenina, 2-metilguanina, 3-metilcitosina, 5-metilcitosina, N6-adenina, 7-metilguanina, 5-metilaminómetiluracilo, 5-metoxiaminometi1-2-tiouracilo, beta-D-manosilqueosina, 5'-metoxicarboximetiluracilo, 5-metoxiuracilo, 2-metiltio-N6-isopenteniladenina, ácido uracil-5-oxiacético (v) , ibutoxosina, pseudouracilo, queosina, 2-tiocitosina, 5-metil-2-tiouracilo, 2-tiouracilo, 4-tiouracilo, 5-metiluracilo, metiléster de ácido uracil-5-oxiacético, ácido uracil-5-oxiacético (v) , 5-metil-2-tiouracilo, 3- (3-amino-3-N-2-carboxipropil) uracilo, (acp3) , y 2, 6-diaminopurina. Alternativamente, el ácido nucleico de antisentido puede ser producido biológicamente empleando un vector de expresión en el cual el ácido nucleico ha sido subclonado en una orientación de antisentido (es decir, ARN transcrito a partir del ácido nucleico insertado tendrá una orientación de antisentido con relación a un ácido blanco de interés, como se describe adicionalmente en la subsección siguiente) . Las moléculas de ácido nucleico de antisentido de la presente invención se administran típicamente a un sujeto o se generan in situ de tal manera que se hibriden o unan con ARNm celular y/o ADN genómico que codifica la proteína de interés para inhibir de esta forma la expresión de la proteína como por ejemplo, mediante la inhibición de la transcripción y/o translación. La hibridación puede efectuarse por complementaridad convencional de nucleótidos para formar un dúplex estable, o bien, por ejemplo, en el caso de una molécula de ácido nucleico de antisentido que se une con dúplex de ADN, a través de interacciones específicas en la ranura mayor de la doble hélice. Un ejemplo de una vía de administración de moléculas de ácido nucleico de antisentido de la invención incluye inyección directa en un sitio de tejido. Alternativamente, las moléculas de ácido nucleico de antisentido pueden ser modificadas para dirigirse hacia células seleccionadas y después administrarse sistémicamente. Por ejemplo, en el caso de administración sistémica, moléculas de antisentido pueden ser modificadas de tal manera que se unan específicamente con receptores o antígenos expresados en una superficie de célula seleccionada, por ejemplo, mediante enlace de las moléculas de ácido nucleico de antisentido con péptidos o anticuerpos que se unen con receptores de superficie de célula o antígenos. Las moléculas de ácido nucleico de antisentido pueden también ser administradas a células empleando los vectores descritos aquí. Para lograr unas concentraciones intracelulares suficientes de las moléculas de antisentido, constructos de vectores en los cuales la molécula de ácido nucleico de antisentido se coloca bajo el control de un promotor pol II o pol III fuerte se prefiere. Una molécula de ácido nucleico de antisentido de la presente invención puede ser una molécula de ácido nucleico alfa-anomérica. Una molécula de ácido nucleico alfa-anomérica forma híbridos específicos de doble cadena con ARN complementario en donde, a diferencia de las unidades ß habituales, las cadenas son paralelas entre ellas (Gaultier et al. (1987) Nucleic Acids. Res. 15:6625-6641). La molécula de ácido nucleico de antisentido puede comprender también un 2 '-o-metilribonucleótido (Inoue et al. (1987) Nucleic Acids Res. 15:6131-6148) o bien un análogo quimérico ARN-ADN (Inoue et al. (1987) FEBS Lett. 215:327-330). La invención abarca también ribozimas. Las ribozimas son las moléculas de ARN catalíticas con actividad ribonucleasa, que pueden disociar un ácido nucleico de cadena única, como por ejemplo un ARNm, con el cual tienen una región complementaria. Así, las ribozimas (por ejemplo, ribozimas de cabeza de martillo (descritas en Haseolhoff y Gerlach (1988) Nature 334:585-591)) pueden emplearse para disociar catalíticamente transcritos de ARNm de LIG46 o LIG56 para inhibir de esta forma la translación de ARNm de LIG46 o LIG56. Una ribozima que tiene especificidad para un ácido nucleico que codifica LIG46 o LIG56 puede ser diseñada con base en la secuencia de nucleótidos de ADNc de LIG46 o LIG56 divulgado aquí. Por ejemplo, un derivado de un ARN de IVS Tetrahymena L-19 puede construirse en donde la secuencia de nucleótidos del sitio activo es complementaria de la secuencia de nucleótidos a disociar en un ARNm que codifica LIG46 o LIG56. Véase, por ejemplo, Cech et al. Patente Norteamericana No. 4,987,071, y Cech et al. Patente Norteamericana No. 5,116,742. Alternativamente, el ARNm de LIG46 o LIG56 puede emplearse para seleccionar un ARN catalítico que tiene una actividad ribonucleasa específica a partir de un conjunto de moléculas de AR?. Véase, por ejemplo, Bartel y Szostak (1993) Science 261:1411-1418. La invención abarca también moléculas de ácidos de nucleico que forman estructuras de triple hélice. Por ejemplo, la expresión de gen LIG46 o LIG56 puede ser inhibida por medio del enfoque de secuencias de nucleótidos complementarias con la región regulatoria de LIG46 o LIG56 (por ejemplo, el promotor y/o realzadores de LIG46 o LIG56) para formar unas estructuras helicoidales triples que evitan la transcripción de gen LIG46 o LIG56 en células blanco. Véase, generalmente, Helene (1991) Anticancer Drug Des. 6(6):569-84; Helene (1992) Ann. N.Y. Acad. Sci. 660:27-36; y Maher (1992) Bioassays 14(12) :807-15. En modalidades preferidas, las moléculas de ácido nucleico de la invención pueden ser modificadas en la porción de base, en la porción de azúcar o en la estructura de fosfato para mejorar, por ejemplo, la estabilidad, hibridación o solubilidad de la molécula. Por ejemplo, la estructura de desoxirobozafosfato de los ácidos nucleicos puede ser modificada para generar ácidos nucleicos de péptido (véase Hyrup et al. (1996) Bioorganic & Medicinal Chemistry 4(1): 5-23) . Como se emplea aquí, los término "ácidos nucleicos de péptidos" o "PNAs" se refieren a mímicos de ácido nucleico, por ejemplo mímicos de ADN, en donde la estructura de desoxirobosafosfato es remplazada por una estructura de pseudopéptido y se conservan solamente las cuatro nucleobases naturales. La estructura neutral de PNAs permite una hibridación específica con ADN y ARN en condiciones de baja fuerza iónica. La síntesis de oligómeros de PNA puede ser efectuada empleando protocolos estándares de síntesis de péptido de fase sólida de conformidad con lo descrito en Hyrup et al. (1996) supra; Perry-O'Keefe et al. (1996) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 93:14670-675. PNAs de LIG46 o LIG56 pueden emplearse en aplicaciones terapéuticas y de diagnóstico. Por ejemplo, se pueden emplear PNAs como agentes de antisentido o antígeno para modulación específica para secuencia de expresión de gen, mediante, por ejemplo, la inducción de suspensión de transcripción o translación o la inhibición de la replicación. Los PNAs de LIG46 o LIG56 pueden emplearse también, por ejemplo, en el análisis de mutaciones de pares de bases simples en un gen, mediante, por ejemplo, fijación por reacción en cadena de polimerasa dirigida a PNA/ como enzimas de restricción artificiales cuando se emplean en combinación con otras enzimas, por ejemplo, Sl nucleasas (Hyrup (1996) supra) ; o bien como sondas o iniciadores para secuencia de ADN e hibridación (Hyrup (1996) supra; Perry-O' -Keefe et al. (1996) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 93: 14670-675) . En otra modalidad, PNAs de LIG46 o LIG56 pueden ser modificados, por ejemplo, para incrementar su estabilidad o absorción celular, mediante la fijación de grupos lipofílicos o otros grupos auxiliares sobre PNA, mediante la formación de quimeras PNA-ADN, o bien mediante el uso de liposomas u otras técnicas de administración de fármaco conocidas en la técnica. Por ejemplo, quimeras PNA-ADN de LIG46 o LIG56 pueden ser generadas las cuales combinan las propiedades provechosas de PNA y ADN. Tales quimeras permiten que enzimas de reconocimiento de ADN, por ejemplo ARNasa H y ADN polimerasas, interactúen con la porción de ADN mientras que la porción PNA puede proporcionar una alta afinidad y especificidad de unión. Las quimeras PNA-ADN pueden ser unidas mediante el empleo de enlazadores de fuerzas apropiadas seleccionados en términos de apilamiento de bases, número de enlaces entre las nucleobases, y orientación (Hyrup (1996) supra) . La síntesis de quimeras de PNA-ADN puede efectuarse de conformidad con lo descrito en Hyrup (1996) supra y Finn et al. (1996) Nucleic Acids Research 24 (17): 3357-63. Por ejemplo, una cadena de ADN puede ser sintetizada en un soporte sólido empleando una química de acoplamiento de fosforamidita estándar y análogos modificados de nucleósidos, por ejemplo, fosfaramidita de 5'- (4-metoxitritil) amino-5'-desoxi-timidina pueden emplearse entre el PNA y el extremo 5' de ADN (Mag et al. (1989) Nucleic Acid Res. 17:5973-88). Monómeros de PNA son después acoplados de manera escalonada para producir una molécula quimérica con un segmento de PNA de 5' y un segmento de ADN 3' (Finn et al. (1996) Nucleic Acids Research 24 (17) : 3357-63) . Alternativamente, moléculas quiméricas pueden ser sintetizadas con un segmento de ADN 5' y un segmento de PNA 3' (Peterser et al. (1975) Bioorganic Med. Chem. Lett. 5:1119-11124). En otras modalidades, el oligonucleótido puede incluir otros grupos anexos tales como péptidos (por ejemplo, para dirigirse hacia receptores de células huéspedes in vivo) , o bien agentes que facilitan el transporte a través de la membrana celular (véase, por ejemplo, Letsinger et al. (1989) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 86:6553-6556; Le aitre et al. (1987) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84:648-652; Publicación PCT No. WO 88/09810) o bien a través de la barrera hemato-encefálica (véase, por ejemplo, Publicación PCT No. WO 89/10134) . Además, los oligonucleótidos pueden ser modificados con agentes de disociación activados por hibridación (véase, por ejemplo, Krol et al. (1988) Bio/Techniques 6:958-976) o bien agentes de intercalación (véase, por ejemplo, Zon (1988) Pharm. Res. 5:539-549). Para este propósito, el oligonucleótido puede ser conjugado con otra molécula, por ejemplo, un péptido, un agente de reticulación activado por hibridación, agente de transporte, agente de disociación activado por hibridación, etc. II. Proteinas de LIG46 aisladas, proteinas de LIG56 aisladas, anticuerpos anti-LIG46 y anticuerpos anti-LIG56 Un aspecto de la presente invención se refiere a proteínas aisladas LIG46 o LIG56, así como porciones biológicamente activas de las mismas, así como fragmentos de polipéptidos adecuados para su uso como inmunógenos para producir anticuerpos anti-LIG46 o LIG56. En una modalidad, proteínas LIG46 o LIG56 nativas pueden ser aisladas de células o fuentes de tejido a través de un esquema de purificación apropiado empleando técnicas estándares de purificación de proteína. En otra modalidad, proteínas de LIG46 o LIG56 son producidas por medio de técnicas de ADN recombinante.

Alternativamente a la expresión recombinante, se puede sintetizar químicamente una proteína o polipéptido de LIG46 o LIG56 empleando técnicas estándares de síntesis de péptidos. Esta sección se enfoca hacia polipéptidos de LIG46 y LIG56, anticuerpos, y su uso. Sin embargo, polipéptidos y anticuerpos, de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 (y fragmentos o variantes de los mismos) son útiles en los métodos de la invención como son proteínas de fusión que incluyen la totalidad o una parte de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Así, los métodos descritos en esta sección para la producción y uso de polipéptidos de LIG46 y LIG56 y variantes de los mismos se aplican a Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3. Anticuerpos dirigidos contra Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 son útiles en el método de la presente invención. Por ejemplo, tales anticuerpos pueden emplearse para medir la expresión de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en ensayos de tamizado diseñados para identificar agentes que modulan la expresión o actividad de Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Los métodos de descripción para la preparación y caracterización de anticuerpos anti-LIG46 y anti-LIG56 presentados a continuación pueden aplicarse a anticuerpos dirigidos contra Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Una proteína "aislada" o "purificada" o una porción biológicamente activa de la misma es sustancialmente exenta de material celular u otras proteínas contaminantes de fuente de célula o tejido a partir de la cual se deriva la proteína de interés (por ejemplo, LIG46 o LIG56) , o sustancialmente libre de precursores químicos u otros químicos cuando se sintetiza de manera química. La expresión "sustancialmente libre de material celular" incluye preparaciones en las cuales la proteína es separada de componentes celulares de las células partir de las cuales se aisla o se produce recombinantemente. Así, la proteína LIG46 o LIG56 sustancialmente exenta de material celular incluye preparaciones de proteína de LIG46 o LIG56 que tienen menos que aproximadamente 30%, 20%, 10%, o bien 5% (en peso seco) de proteína no-LIG46 o LIG56 (se conoce también aquí como "proteína contaminante") . Cuando la proteína LIG46 o LIG56 o una porción biológicamente activa de la misma es producida recombinantemente, es también de preferencia sustancialmente exenta de medio de cultivo, es decir, el medio de cultivo representa menos que aproximadamente 20%, 10%, o 5% .del volumen de la preparación de proteína. Cuando la proteína LLIG46 o LIG56 es producida por síntesis química, es de preferencia sustancialmente exenta de precursores químicos o bien otros químicos, es decir, es separada de precursores químicos u otros químicos involucrados en la síntesis de la proteína. Por consiguiente, tales preparaciones de proteína LIG46 o LIG56 tienen menos que aproximadamente 30%, 20%, 10%, 5% (en peso seco) de precursores químicos o bien químicos no LIG46 o LIG56. Porciones biológicamente activas de una proteína LIG46 o LIG56 incluyen péptidos que comprenden secuencias de aminoácidos suficientemente idénticas con la secuencia de aminoácidos de la proteína LIG46 o LIG56, o derivadas de la secuencia de aminoácidos de la proteína LIG46 o LIG56, que incluyen menos aminoácidos que las proteínas LIG46 o LIG56 de longitud completa, y presentan por lo menos una actividad de una proteína LIG46 o LIG56. Típicamente, porciones biológicamente activas comprenden un dominio o motivo con por lo menos una actividad de la proteína LIG46 o LIG56. Una porción biológicamente activa de una proteína LIG46 o LIG56 puede ser un polipéptido que tienen, por ejemplo, 10, 25, 50, 100 o más aminoácidos de longitud. Polipéptidos biológicamente activos preferidos incluyen uno o varios dominios estructurales de LIG46 o LIG56 identificados. Además, otras porciones biológicamente activas, en donde otras regiones de la proteína son removidas, pueden prepararse por técnicas recombinantes y evaluarse por una o varias de las actividades funcionales de una proteína LIG46 o LIG56 nativa. La proteína LIG46 o LIG56 preferidas tienen porciones sustancialmente identificas con la secuencia de aminoácidos divulgadas aquí. Proteínas preferidas son sustancialmente idénticas a las proteínas divulgadas aquí y conservan la actividad funcional de la proteína y sin embargo difieren en cuanto a la secuencia de aminoácidos debido a variación alélica natural o mutagénesis. Por consiguiente, una proteína LIG46 útil es una proteína que incluye una secuencia de aminoácidos que tienen una identidad de por lo menos aproximadamente 45%, de preferencia 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 99% con la secuencia de aminoácidos SEQ ID NO: 2 (o SEQ ID NO: 4) y conserva la actividad funcional de la proteína LIG46 de SEQ ID N0:2 (o SEQ ID NO:4). En otros casos, la proteína LIG46 es una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos que presenta una identidad de 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 98% con una porción de LIG46 que tiene una homología con una galactosiltransferasa (por ejemplo, aminoácidos 192-353, 142-184, 201-296, ' 289-347, 140-183, 367-391, 177-266, 299-343, o 140-184 de SEQ ID NO: 2) o bien una proteína de señalización secretada neurogénica (por ejemplo, aminoácidos 200-291, 270-354, 144-183, 380-394, o 211-248 de SEQ ID N0:2). En una modalidad preferida, la proteína LIG46 conserva una actividad funcional de la proteína LIG46 de SEQ ID NO:2 (o SEQ ID NO:4). Una proteína LIG56 útil es una proteína que incluye una secuencia de aminoácidos que presenta una identidad de por lo menos aproximadamente 45, de preferencia 55%, 65%, 75%, 85%, 95%, o 99% con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6 y conserva la actividad funcional de la proteína LIG46 de SEQ ID NO: 6. Para determinar la identidad porcentual de dos secuencias de aminoácidos o de dos ácidos nucleicos, las secuencias son alineadas para propósitos de comparación óptima (por ejemplo, huecos pueden ser introducidos en una secuencia de un primer aminoácido a secuencias de ácido nucleico para alineación óptima con una segunda secuencia de aminoácidos o ácido nucleico) . Los residuos de aminoácidos o nucleótidos en posiciones correspondientes de aminoácidos o posiciones correspondientes de nucleótidos son después comparados. Cuando una posición en la primera secuencia es ocupada por el mismo residuo de aminoácido o nucleótido que la posición correspondiente en la segunda secuencia, entonces, las moléculas son idénticas en esta posición. La identidad porcentual entre las dos secuencias depende del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias (es decir, el % de identidad = # de posiciones idénticas/total de # de posiciones x 100) . La determinación de la homología porcentual entre dos secuencias puede lograrse empleando un algoritmo matemático. Un ejemplo preferido, no limitativo de una algoritmo matemático empleando para la comparación de dos secuencias es el algoritmo de Karlin and Altschul (1990) Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 87:2264-2268, modificado como Karlin and Altschul (1993) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 90:5873-5877. Dicho algoritmo se incorpora en los programas NBLAST y XBLAST de Altschul, et al., (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410.Búsquedas de nucleótidos de BLAST pueden efectuarse con el programa NBLAST, resultado = 100, longitud de palabra = 12 para obtener secuencias de nucleótidos homologas con moléculas de ácido nucleico de LIG46 o LIG56 de la invención. Búsquedas de proteína BLAST pueden efectuarse con el programa XBLAST, resultado = 50, longitud de palabra = 3 para obtener secuencias de aminoácidos homologas con moléculas de proteína LIG46 o LIG56 de la invención. Para obtener alineaciones separadas para propósitos de comparación, se puede emplear Gapped BLAST de conformidad con lo descrito en Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Rres . 25:3389-3402. Cuando se emplean los programas BLAST y Gapped BLAST, se pueden emplear los parámetros por omisión de los programas respectivos (por ejemplo, XBLAST y NBLAST) . Véase, http: //www.ncbi.nlm.nih.gov. Otro ejemplo preferido, no limitativo de un algoritmo matemático empleado para la comparación de secuencias es el algoritmo de Myers y Miller, CABIOS (1989) . Dicho algoritmo se incorpora en el programa ALIGNE (versión 2.09 que es parte del paquete de programática de alineación de secuencias GCG. Cuando se emplea el programa ALUGNE para comparar las secuencias de aminoácidos, se puede emplear una tabla de residuos de peso de PAM120, una penalidad de longitud de espacio de 12, y una penalidad de espacio de 4. La identidad porcentual entre dos secuencias puede ser determinada empleando técnicas similares a las descritas arriba, con o sin permitir espacios. En el calculo de la identidad porcentual, solamente se cuentan correspondencias exactas. La invención ofrece también proteínas quiméricas o de fusión LIG46 o LIG56. Como se emplea aquí, una "proteína quimérica" LIG46 o LIG56 o una "proteína de fusión" LIG46 o LIG56, comprenden un polipéptido de LIG46 o LIG56 enlazado operativamente con un polipéptido no-LIG6 o LIG56. Un "polipéptido de LIG46 o LIG562 se refiere a un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos que corresponde a LIG46 o LIG56, mientras que un "polipéptido no-LIG5-46 o LIG56" se refiere a un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos que corresponde a una proteína que no es sustancialmente idéntica con una proteína LIG46 o LIG56, por ejemplo, una proteína que es diferente de la proteína LIG46 o LIG56 y que se deriva del mismo organismo o de un organismo diferente. Dentro de la proteína de fusión de LIG46 o LIG56, el polipéptido de LIG46 o LIG56 puede corresponder a la totalidad o una parte de una proteína de LIG46 o LIG56, de preferencia por lo menos una porción biológicamente activa de u8an proteína de LIG46 o LIG56. Dentro de la proteína de fusión el término "enlazado operativamente" indica que el polipéptido de LIG46 o LIG56 y el polipéptido no-LIG46 o LIG56 se fusionan en cuadro entre ellos. El polipéptido no-LIG46 o LIG56 puede estar fusionado sobre la terminal N o la terminal C del polipéptido de LIG46 o LIG56. Una proteína de fusión útil es una proteína de fusión GST-LIG46 o LIG56 en donde las secuencias de LIG46 son LIG56 se fusionan sobre la terminal C de las -secuencias GST. Tales proteínas de fusión pueden facilitar la purificación de LIG46 o LIG56 recombinante. En otra modalidad, la proteína de fusión es una proteína LIG46 que contiene una secuencia de señal heteróloga en su terminal N. Por ejemplo, la secuencia de señal de LIG46 nativa (es decir, aproximadamente los aminoácidos 1 a 32 de SEQ ID NO: 29 puede ser removida y reemplazada por una secuencia de señal para otra proteína. En ciertas células huéspedes (por ejemplo, células huéspedes de mamífero) , la expresión y/o secreción de LIG46 puede ser incrementada a través del uso de una secuencia de señal heteróloga. Por ejemplo, la secuencia secretoria de gp67 de la proteína de envoltura de baculovirus puede emplearse como una secuencia de señal heteróloga (Current Protocols in Molecular Biology (Protocolos Actuales en Biología Molecular), Ausubel et al., eds., John Wiley & Sons, 1992). Otros ejemplos de secuencias de señales heterólogas eucarióticas incluyen las secuencias secretorias de melitina y fosfatasa alcalina placental humana (Strategene; La Jolla, California) . En otro ejemplo, secuencias de señales heterólogas procarióticas útiles incluyen la señal secretoria de phoA (Molecular Cloning (Clonación Molecular), Sambrook et al., segunda edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) y la señal secretoria de proteína A (Pharmacia Biotech/ Piscataway, New Jersey) . En otra modalidad, la proteína de fusión es una proteína de fusión de LIG46 o LIG56-inmunoglobulina en donde la totalidad o una parte de LIG46 o LIG56 se fusiona con secuencias derivadas de un miembro de la familia de proteínas inmunoglobulinas. Las proteínas de fusión LIG46-inmunoglobulina de la presente invención pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas y administrarse a un sujeto para inhibir la interacción entre un ligando de LIG56 y una proteína de LIG56 en la superficie de la célula, suprimiendo de esta forma una transducción de señal mediada por LIG56 in vivo. Las proteínas de fusión LIG56-inmunoglobulina pueden ser empleadas para afectar la biodisponibilidad de un ligando cognato de LIG56. Además, las proteínas de fusión de LIG56-inmunoglobulina de la presente invención pueden emplearse como inmunógenos para producir anticuerpos de LIG56 en un sujeto, para purificar ligandos de LIG56 y en ensayos de tamizado para identificar moléculas que inhiben la interacción de LIG56 con un ligando de LIG56. Proteínas de fusión de LIG46 pueden también emplearse de manera análoga.

De preferencia, una proteína quimérica o de fusión de LIG46 o LIG56 de la presente invención se produce por técnicas estándares de ADN recombinante. Por ejemplo, fragmentos de ADN que codifican para las diferentes secuencias de polipéptidos se ligan entre ellos en cuadro de conformidad con técnicas convencionales, por ejemplo, mediante el empleo de un extremo chato o mediante el empleo de terminales de extremo escalonado para ligación, digestión por enzimas de restricción para proporcionar terminales apropiadas, rellenos de extremos cohesivos según lo apropiado, tratamiento con fosfatasa alcalina con el objeto de evitar unión indeseable, así como ligación enzimática. En otra modalidad, el gen de fusión puede ser sintetizado por técnicas convencionales incluyendo sintetizadores de ADN automatizados. Alternativamente, se puede efectuar una amplificación por reacción en cadena de polimerasa en fragmentos de gen empleando iniciadores ancla que proporcionan el surgimiento de salientes complementarias entre dos fragmentos de gen consecutivos que pueden subsecuentemente ser fusionados y reamplificados para crear una secuencia de gen quimérica véase, por ejemplo, Current Protocols in Molecular Biology (Protocolos Actuales en Biología Molecular), Ausubel et al., eds., John Wiley & Sons: 1992). Además, muchos vectores de expresión están comercialmente disponibles los cuales codifican ya una porción de fusión (por ejemplo, un polipéptido GST) . Un ácido nucleico que codifica LIG46 o LIG56 puede ser clonado en un vector de expresión de este tipo de tal manera que la fusión de proteína esté unida en cuadro con la proteína de LIG46 o LIG56. La presente invención se refiere también a variantes de proteínas de LIG46 o LIG56 que funcionan ya sea como agonistas de LIG46 o LIG56 (miméticos) o bien como antagonistas de LIG46 o LIG56. Variantes de la proteína de LIG46 o LIG56 pueden ser generadas por mutagénesis, por ejemplo, mutación de punto discreto o bien truncado de la proteína de LIG46 o LIG56. Un agonista de la proteína de LIG46 o LIG56 puede conservar sustancialmente las mismas actividades biológicas o bien un subconjunto de las actividades biológicas de la forma que ocurre naturalmente de la proteína de LIG46 o LIG56. Un antagonista de la proteína de LIG46 o LIG56 puede inhibir una o varias de las actividades de la forma que ocurre naturalmente de la proteína de LIG46 o LIG56, por ejemplo, mediante la unión competitiva sobre un miembro corriente abajo o corriente arriba de una cascada de señalización celular que incluye una proteína de LIG46 o LIG56. Así, efectos biológicos específicos pueden ser provocados por el tratamiento de una variante de función limitada. El tratamiento de un sujeto con una variante que tienen un subconjunto de las actividades biológicas de la forma que ocurre naturalmente de la proteína puede tener menos efectos colaterales en un sujeto en comparación con el tratamiento con la forma que ocurre naturalmente de la proteína de LIG46 o LIG56. Variantes de la proteína de LIG46 o LIG56 que funcionan ya sea como agonistas de LIG46 o LIG56 (miméticos) o como antagonistas de LIG46 o LIG56 pueden ser identificadas mediante el tamizado de bibliotecas combinatorias de mutantes, por ejemplo, mutantes por truncado, de la proteína de' LIG46 o LIG56 para una actividad agonista o antagonista de proteína LIG46 o LIG56. En una modalidad, una biblioteca abigarrada de variantes de LIG46 o LIG56 se genera mediante mutagenesis de combinación a nivel de ácido nucleico y se codifica a través de una biblioteca de gen abigarrada. Una biblioteca abigarrada de variantes de LIG46 o LIG56 puede producirse, por ejemplo, mediante la ligación enzimática de una mezcla de oligonucleótidos sintéticos en secuencias de genes de tal manera que pueda expresarse un conjunto degenerado de secuencias de LIG46 o LIG56 potenciales como polipéptidos individuales, o bien alternativamente, como un conjunto de proteínas de fusión más grandes (por ejemplo, para la presentación de fagos) que contienen el conjunto de secuencias de LIG46 o LIG56 aquí. Existen varios métodos que pueden ser empleados para producir bibliotecas de variantes potenciales de LIG46 o LIG56 a partir de una secuencia de oligonucleótidos degenerada. La síntesis química de una secuencia de gen degenerada puede efectuarse en un sintetizador de ADN automatizado, y el gen sintético es después ligado en un vector de expresión apropiado. El uso de un conjunto degenerado de genes permite el suministro, en una mezcla de la totalidad de las secuencias que codifican el conjunto deseado de secuencias potenciales de LIG46 o LIG56. Métodos para sintetizar oligonucleótidos degenerados se conocen en la técnica (véase, por ejemplo, Narang (1983) Tetrahedron 39:3/ Itakura et al. (1984) Annu. Rev. Biochem. 53:323/ Itakura et al. (1984) Science 198:1056/ Ike et al. (1983) Nucleic Acid Res. 11:477). Además, bibliotecas de fragmentos de la secuencia de codificación de proteína de LIG46 o LIG56 pueden emplearse para generar una población abigarrada de fragmentos de LIG46 o LIG56 para tamizado y selección subsecuente de variantes de una proteína de LIG46 o LIG56. En una modalidad, una biblioteca de fragmento de secuencias de codificación puede generarse mediante el tratamiento de un fragmento de reacción en cadena de polimerasa de doble cadena de una secuencia de codificación de LIG46 o LIG56 con una nucleasa en condiciones en las cuales ocurre un corte solamente aproximadamente una vez por molécula, desnaturalizando el ADN de doble cadena, renaturalizando el ADN para formar ADN de doble cadena que puede incluir pares de sentido/antisentido a partir de productos cortados de manera diferente, removiendo porciones de cadena única de los dúplex reformados por tratamiento Sl nucleasa y ligando la biblioteca de fragmentos resultantes en un vector de expresión. A través de este método, se puede derivar una biblioteca de expresión que codifica fragmento de terminal N e internos de varios tamaños de la proteína de LIG46 o LIG56. Se conocen varias técnicas para tamizar productos de genes de bibliotecas combinatorias efectuadas por mutaciones de punto o truncado, y para tamizar bibliotecas de ADNc para productos de genes que tienen una propiedad seleccionada. Tales técnicas pueden ser adaptadas para un tamizado rápido de bibliotecas de genes generadas por la mutagenesis combinatoria de proteínas de LIG46 o LIG56. Las técnicas más ampliamente usadas, cuando se prestan para análisis de alto rendimiento, para tamizar grandes bibliotecas de genes incluyen típicamente la clonación de la biblioteca de genes en vectores de expresión replicables, la transformación de células apropiadas con la biblioteca resultante de vectores, y la expresión de los genes de combinación en condiciones en las cuales la detección de una actividad deseada facilita el aislamiento del vector que codifica el gen cuyo producto fue detectado. La mutagenesis de ensamble recursiva (REM), una técnica que incrementa la frecuencia de mutantes funcionales en las bibliotecas, puede emplearse en combinación con los ensayos de tamizado para identificar variantes de LIG46 o LIG56 (Arkin y Yourvan (1992) Proc. Nati. Acad. S ci . USA 89:7811-7815/ Delgrave et al. (1983) Protein Engineering 6(3) :327-331) . Una proteína de LIG46 o LIG56 aislada, o una porción o fragmento de la misma, puede emplearse como inmunógeno para generar anticuerpos que se unen con LIG46 o LIG56 empleando técnicas estándares para la preparación de anticuerpos policlonales y monoclonales. La proteína de LIG46 o LIG56 de longitud completa puede emplearse o bien, alternativamente, la invención ofrece fragmentos de péptido antigénico de LIG46 o LIG56 para su uso como inmunógenos. El péptido antigénico de LIG46 o LIG56 comprende por lo menos 8 (de preferencia 10, 15, 20, o 30) residuos de aminoácidos de la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 2 y abarca un epítopo de LIG 6 o LIG56 de tal manera que un anticuerpo preparado contra el péptido forme un complejo inmune específico con LIG46 o LIG56. Epítopos preferidos abarcados por el péptido antigénico son regiones de LIG46 o LIG56 que se encuentran en la superficie de la proteína, por ejemplo, regiones hidrofílicas. Las regiones hidrofílicas y las regiones antigénicas pueden ser identificadas empleando herramientas analíticas estándares bien conocidas por parte de los expertos en la materia. Un inmunógeno de LIG46 o LIG56 típicamente es empleado para preparar anticuerpos mediante la inmunización de un sujeto adecuado, (por ejemplo, conejo, cabra, ratón o bien otro mamífero) con el inmunógeno. Una preparación inmunogénica apropiada puede contener, por ejemplo, proteína de LIG46 o LIG56 expresada recombinantemente o bien un polipéptido de LIG46 o LIG56 sintetizado químicamente. La preparación puede incluir además un adyuvante, como por ejemplo adyuvante completo o incompleto de Freund, o bien un agente inmunoestimulatorio similar. La inmunización de un sujeto adecuado con una preparación de LIG46 o LIG56 inmunogénica induce una respuesta de anticuerpo anti-LIG46 o LIG56 policlonal. Por consiguiente, otro aspecto de la presente invención se refiere a anticuerpos anti-LIG46 o LIG-56. El término "anticuerpo" como se emplea aquí se refiere a moléculas de inmunoglobulina y porciones inmunológicamente activas de moléculas de inmunoglobulina, es decir, moléculas que contienen un sitio de enlace de antígeno que se une específicamente con un antígeno, como por ejemplo LIG46 o LIG56. Una molécula que se une específicamente con LIG46 o LIG56 es una molécula que se une con LIG46 o LIG56, pero que no se une sustancialmente con otras moléculas en una muestra, por ejemplo, una muestra biológica, que contiene naturalmente LIG46 o LIG56. Ejemplos de porciones inmunológicamente activas de moléculas de inmunoglobulina incluyen fragmentos F(ab) y F(ab')2 que pueden ser generados mediante el tratamiento del anticuerpo con una enzima como por ejemplo pepsina. La invención ofrece anticuerpos policlonales y monoclonales que se unen con LIG46 o LIG56. El término "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal" como se emplea aquí, se refiere a una población de moléculas de anticuerpo que contienen solamente una especie de un sitio de enlace de antígeno capaz de inmunoreaccionar con un epítopo particular de LIG46 o LIG56. Una composición de anticuerpo monoclonal presenta por consiguiente típicamente una afinidad de enlace única para una proteína de LIG46 o LIG56 particular con la cual inmunoreacciona. Anticuerpos anti-LIG46 o LIG56 policlonales pueden ser preparados de conformidad con lo descrito arriba mediante la inmunización de un sujeto adecuado con un inmunógeno de LIG46 o LIG56. El título de anticuerpo anti-LIG46 o LIG56 en el sujeto inmunizado puede ser monitoreado con el paso del tiempo por técnicas estándares como por ejemplo mediante ensayo inmunosorbente enlazado a enzima (ELISA) empleando LIG46 o LIG56 inmovilizada. Si se desea, las moléculas de anticuerpo dirigidas contra LIG46 o LIG56 pueden ser aisladas del mamífero (por ejemplo, de la sangre) y purificadas adicionalmente por técnicas bien conocidas tales como cromatografía de proteína A para obtener la fracción IgG. En un momento apropiado después de la inmunización, por ejemplo, cuando los títulos de anticuerpo anti-LIG46 o LIG56 son los más altos, células que producen anticuerpos pueden ser obtenidas a partir del sujeto y empleadas para preparar anticuerpos monoclonales por técnicas estándares, tales como la técnica de hibridoma originalmente descrita por Kohier y Milstein (1975) Nature 256:495-497, la técnica de hibridoma de célula B humana (Kozbor et al. (1983) Immunol Today 4:72), la técnica de EBV-hibridoma (Colé et al. (1985), Molecular Antibodies and Cáncer Therapy, (Anticuerpos monoclonales y terapia del cáncer) Alan R. Liss, Inc. páginas 77-96) o bien técnicas de trioma. La tecnología para producir varios hibridomas de anticuerpos monoclonales es bien conocida (véase generalmente Current Protocols in Immunology) (Protocolos Actuales en Inmunología), (1994) Coligan et al., (eds.) John Wiley & Sons, Inc. New York, NY) . En resumen, una línea de células inmortales (típicamente un mieloma) es fusionadas con linfocitos (típicamente esplenocitos) provenientes de un mamífero inmunizado con un inmunógeno de LIG46 o LIG56 de conformidad con lo descrito arriba, y los sobrenadantes de cultivo de las células de hibridoma resultantes son tamizados para identificar un hibridoma que produce un anticuerpo monoclonal que se une con LIG46 o LIG56. Cualesquiera de muchos protocolos bien conocidos y empleados para fusionar linfocitos y líneas de células inmortalizadas pueden aplicarse para el propósito de generar un anticuerpo monoclonal anti-LIG46 o LIG56 (véase, por ejemplo, Current Protocols in Immunology) (Protocolos Actuales en Inmunología), supra/ Galfre et al., (1977) Nature 266:55052/ R.H. Kenneth, in Monoclonal Antibodies: A New Dimensión in Biological Analyses (Anticuerpos Monoclonales: Una Nueva Dimensión en Análisis Biológicos, Plenum Publishing Corp., New York, New York (1980)/ y Lerner (1981) Yale J. Biol. Med., 54:387-402. Además, una persona con conocimientos normales en la materia observará que existen muchas variaciones de tales métodos que serían también útiles. Típicamente, las líneas de células inmortales (por ejemplo, una línea de células de mieloma) se deriva de las mismas especies de mamíferos que los linfocitos. Por ejemplo, hibridomas de murino pueden formarse mediante la fusión de linfocitos de un ratón inmunizado con una preparación inmunogénica de la presente invención con una línea de células de ratón inmortalizadas, por ejemplo, una línea de células de mieloma que es sensible a un medio de cultivo que contiene hipoxantina, aminopterina y timidina ("medio HAT") . Cualesquiera de numerosas líneas de células de mieloma pueden emplearse como socio de fusión de conformidad con técnicas estándares, por ejemplo, las líneas de mieloma P3-NSl/l-Ag4- 1, P3-x63-Ag8.653 o bien Sp2/0-Agl4. estas líneas de mieloma están disponibles en ATCC. Típicamente células de mieloma de ratón sensibles a HAT son fusionadas sobre esplenocitos de ratón empleando polietilenglicol ("PEG") . Células de hibridoma que resultan de la fusión son entonces seleccionadas empleando un medio HAT, que mata las células de mieloma no fusionadas y las células de mieloma fusionadas de manera no productiva (los esplenocitos no fusionados mueren después de varios días puesto que no son transformados) . Las células de hibridoma que producen un anticuerpo monoclonal de la invención son detectadas mediante el tamizado de los sobrenadantes de' cultivo de hibridoma par anticuerpos que se unen con LIG46 o LIG56, por ejemplo, empleando un ensayo ELISA estándar. De manera alternativa a la preparación de hibridomas que secretan anticuerpos monoclonales, se puede identificar y aislar un anticuerpo anti-ILG46 o ILG56 monoclonal mediante el tamizado de una biblioteca de inmunoglobulina de combinación recombínate (por ejemplo, una biblioteca de presentación de fagos de anticuerpos) con LIG46 o LIG56 con el objeto de aislar de esta forma miembros de biblioteca de inmunoglobulina que se unen con LIG46 o LIG56. Conjuntos de elementos para generar y tamizar bibliotecas de presentación de fagos se encuentran disponibles en el comercio (por ejemplo, the Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, No. de catálogo 27-9400-01/ y the Strategene SurfZAP™ Phage Display Kit, No. de catálogo 240612) . Además, ejemplos de métodos y reactivos particularmente anticuados para su uso en la generación y el tamizado de biblioteca de presentación de anticuerpos pueden encontrarse, por ejemplo, en la Patente Norteamericana No. 5,223,409/ Publicación PCT No. WO 92/18619/ Publicación PCT No. WO 91/17271/ Publicación PCT No. WO 92/20791/ Publicación PCT No. WO 92/15679/ Publicación PCT No. WO 93/01288/ Publicación PCT No. WO 92/01047/ Publicación PCT No. WO 92/09690/ Publicación PCT No. WO 90/02809/ Fuchs et al., 81991) Bio/Technology 9:1370-1372/ Hay et al., (1992) Hum. Antibod. Hybridomas 3:81-85/ Huse et al., (1989) Science 246:1275-1281/ Griffiths et al., (1993) EMBO J 12:725-734. Además, anticuerpos anti-LIG46 o LIG56 recombinantes, tales como anticuerpos monoclonales quiméricos y humanizados, que comprenden tanto porciones humanas como porciones no humanas que pueden elaborarse empleando técnicas de ADN recombinante estándares, se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Tales anticuerpos monoclonales quiméricos y humanizados pueden ser producidos por técnicas de ADN recombínate conocidas en la técnica, por ejemplo, empleando métodos descritos en la Publicación PCT No. WO' 87/02671/ Solicitud de Patente Europea 184,187/ Solicitud de Patente Europea 171,496/ Solicitud de Patente Europea 173,494; Publicación PCT No. WO 86/01533/ Patente Norteamericana No. 4,816,567/ Solicitud de Patente Europea 125,023; Better et al. (1988) Science 240:1041-1043; Liu et al. (1987) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84:3439-3443; Liu et al. 81987) J. Immunol . 139:3521-3526; Sun et al. (1987) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84:214-218/ Nishimura et al. (1987) Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314:446-449/ y Shaw et al. (1988) J. Nati. Cáncer Inst. 80:1553-1559)/ Morrison, (1985) Science 229:1202-1207/ Oi et al. (1986) Bio/Techniques 4:214/ Patente Norteamericana No. 5,225,539/ Jones et al (1986) Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. (1988) Science 239:1534; y Beidler et al. (1988) J. Immunol. 141:4053-4060. Un anticuerpo anti-LIG46 o LIG56 (por ejemplo, anticuerpo monoclonal) puede emplearse para aislar LIG46 O LIG56 por técnicas estándares, como por ejemplo cromatografía de afinidad o inmunoprecipitación. Un anticuerpo anti-LIG46 O LIG56 puede facilitar la purificación de LIG46 O LIG56 natural de células y de LIG46 O LIG56 producido recombinantemente expresado en células huéspedes. Además, un anticuerpo anti-LIG46 O LIG56 puede emplearse para detectar una proteína LIG46 O LIG56 (por ejemplo, en un lisado celular o sobrenadante celular) con el objeto de evaluar la abundancia y patrón de expresión de una proteína LIG46 O LIG56. anticuerpos anti-LIG46 O LIG56 pueden emplearse para diagnóstico con el objeto de supervisar los niveles de proteína en tejido como parte de un procedimiento de prueba clínica, por ejemplo, para determinar la eficacia de un régimen de tratamiento dado. La detección puede ser facilitada por un medio del acoplamiento del anticuerpo con una sustancia detectable. Ejemplos de sustancias detectables incluyen varias enzimas, grupos protésicos, materiales fluorescentes, materiales luminescentes, materiales bioluminiscentes, así como materiales radioactivos. Ejemplos de enzimas adecuadas incluyen peroxidasa de rábano agrio, fosfatasa alcalina, ß-galactosidasa, o bien acetilcolinesterasa/ ejemplos de complejos de grupo protésico adecuados incluyen estreptavidina/biotina y avidina/biotina/ ejemplos de materiales fluorescentes adecuados incluyen umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, fluoresceína de diclorotriazinilamina, cloruro de dansilo o ficoeritrina/ un ejemplo de un material luminiscente incluye luminol/ ejemplos de materiales bioluminiscentes incluyen luciferasa/ luciferina, y aecuorina, y ejemplos de material radioactivo adecuado incluye 125I, 131I, 35S o 3H. Anticuerpos totalmente humanos son especialmente deseables para el tratamiento terapéutico de pacientes humanos. Tales anticuerpos pueden ser producidos empleando ratones transgénicos que son capaces de expresar genes de cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulina endógena, pero que pueden expresar genes de cadenas pesadas y ligeras de seres humanos. Los ratones transgénicos son inmunizados de manera normal con un antígeno seleccionado. Anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno pueden ser obtenidos empleando una tecnología de hibridoma convencional. Los transgenes de inmunoglobulina humana que se encuentran en los ratones transgénicos se reacomodan durante la diferenciación de cé.lulas B, subsecuentemente son sometidos a cambio de clase y mutación somática. Así, empleando dicha técnica, es posible producir anticuerpos IgG, IgA, y IgE terapéuticamente útiles. Para una reseña de esta tecnología para producir anticuerpos humanos, véase Lonberg y Huszar (1995, Int. Rev. Immunol. 13:65-93). Para un comentario detallado de esta tecnología para la producción de anticuerpos humanos y anticuerpos monoclonales humanos y protocolos para producir tales anticuerpos, véase, por ejemplo, Patente Norteamericana No. 5,625,126/ Patente Norteamericana No. 5,633,425/ Patente Norteamericana No. 5,569,825/ Patente Norteamericana No. 5,661,016/ y Patente Norteamericana No. 5,545,806. Anticuerpos humanos dirigidos contra un antígeno seleccionado pueden ser proporcionados por Abgenix, Inc. (Fremont, CA) y GenPharm, Inc. (Palo Alto, CA) . III. Vectores de expresión recombinantes y células huéspedes Otro aspecto de la presente invención se refiere a vectores, de preferencia vectores de expresión, que contienen un ácido nucleico que contienen LIG46 o LIG56 (o parte- del mismo) .

Las técnicas descritas abajo pueden también aplicarse a células huéspedes y vectores empleados para expresar Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 para su uso en la producción de proteína recombinante o animales transgénicos. Así, aún cuando la sección se refiere a LIG46 y LIG56, los métodos descritos pueden ser aplicados a Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3. Como se emplea aquí, el término "vector" se refiere a una molécula de ácido nucleico capaz de transportar otro ácido nucleico al cual a sido unida. Un tipo de vector es un "plásmido" que se refiere a un bucle de ADN de hebra doble circular en el cual se pueden ligar segmentos de ADN adicionales. Otro tipo de vector es un vector viral, en donde los segmentos de ADN adicionales pueden ser ligados en el genoma viral. Ciertos vectores son capaces de replicación autónoma en una célula huésped en la cual son introducidos (por ejemplo, vectores bacterianos que tienen un origen bacteriano de replicación y vectores de mamíferos episomales) . Otros vectores (por ejemplo, vectores de mamíferos no episomales) son integrados en el genoma de una célula huésped al introducirse en la célula huésped, y por consiguiente son replicados junto con el genoma huésped. Además, ciertos vectores, vectores de expresión, son capaces de dirigir la expresión de genes con los cuales están operativamente unidos. En general, los vectores de expresión de utilidad en técnicas de ADN recombinante se encuentran frecuentemente en forma de plásmidos (vectores) . Sin embargo, la invención pretende incluir tales otras formas de vectores de expresión, tales como vectores virales (por ejemplo, virus asociados con adeno, adenovirus y retrovirus defectuosos para la replicación), que sirven funciones equivalentes. Los vectores de expresión recombinantes de la presente invención comprenden un ácido nucleico de la presente invención en una forma adecuada para expresar el ácido nucleico en una célula huésped, lo que significa que los vectores de expresión recombinantes incluyen una o varias secuencias regulatorias, seleccionadas con base en las células huéspedes a emplear para la expresión, que se encuentra enlazada a la secuencia de ácido nucleico a expresar. Dentro de este vector de expresión recombinante, la expresión "enlazado operativamente" significa que las secuencia de nucleótidos de interés se encuentra enlazada al lugar (s) secuencia (s) regulatoria (s) de una manera que permite la expresión de la secuencia de nucleótidos (por ejemplo, en un sistema de transcripción/traslación in vitro bien en la célula huésped cuando el vector es introducido en la célula huésped. El término "secuencia regulatoria" tiene el propósito de incluir promotores, realzadores y otros elementos de control de expresión (señales de poliadenilación) . Tales secuencias regulatorias se describen, por ejemplo, en Goeddel; Gene Expression Technology; Methods in Enzimology (Tecnología de Expresión Génica: Métodos en Enzimología) 185, Academic Press, San Diego, CA (1990) . Secuencias regulatorias incluyen secuencias que dirigen la expresión constitutiva de una secuencia de nucleótidos en muchos tipos de célula huésped y las que dirigen la expresión de la secuencia de nucleótidos solamente en ciertas células huéspedes (por ejemplo, secuencias regulatorias específicas para tejido) . Los expertos en la materia observaran que el diseño del vector de expresión puede depender de tales factores como la elección de la célula huésped a transformar, el nivel de expresión de proteína deseada, etc. Los vectores de expresión de la invención pueden ser introducidos en células huéspedes con el objeto de producir de esta forma proteína o péptidos, incluyendo proteína de fusión o péptidos, codificados por ácidos nucleicos de conformidad con lo descrito aquí (por ejemplo, proteínas de LIG46 o LIG56, formas mutantes de LIG46 o LIG56, proteínas de fusión, etc.). Los vectores de expresión recombinantes de la presente invención pueden ser diseñados para expresar LIG46 o LIG56 en células procarióticas o eucarióticas, por ejemplo, células bacterianas tales como E. coli, células de insecto (empleando vectores de expresión de baculovirus) , células de levadura o células de mamíferos. Células huéspedes adecuadas se comentan adicionalmente en Goeddel; Gene Expression Technology/ Methods in Enzimology (Tecnología de Expresión Génica: Métodos en Enzimología) 185, Academic Press, San Diego, CA (1990) . Alternativamente, el vector de expresión recombinante puede ser transcrito y trasladado in vitro, por ejemplo, empleando secuencias regulatorias de promotor de T7 y T7 polimerasa. La expresión de proteínas en células procarióticas se efectúa en general en E. coli con vectores que contienen promotores constitutivos o inducibles que dirigen la expresión de proteínas de fusión o proteínas de no fusión. Vectores de fusión agregan varios aminoácidos a una proteína codificada, habitualmente en la terminal amino de la proteína recombinante. Tales vectores de fusión sirven típicamente tres propósitos: 1) incrementar la expresión de proteína recombinante/ 2) incrementar la solubilidad de la proteína recombinante/ y 3) ayudar a la purificación de la proteína recombinante mediante su acción como ligando en purificación de afinidad. Frecuentemente, en vectores de expresión de fusión, se introduce un sitio de disociación proteolítica en la unión de la porción de fusión y la proteína recombinante para permitir la separación de la proteína recombinante partir de la porción de fusión después de la purificación de la proteína de fusión. Tales enzimas, y sus secuencias de reconocimientos cognatas, incluyen el factor Xa, trombina y enteroquinasa. Vectores de expresión de fusión típicos incluyen pGEX (Pharmacia Biotech Ine; Smith and Jonson (1988) Gene 67:31-40), pMAL (New England Biolabs, Beverly, MA) y pRIT5 (Pharmacia, Piscataway, NJ) que fusionan glutationa S-transferasa (GST) , proteína de unión con maltosa E, o proteína A, respectivamente, sobre la proteína recombinante blanco. Ejemplos de vectores de expresión de E. coli de no fusión inducibles adecuados incluyen pTrc (Amann et al., (1988) Gene 69:301-315) y pET lid (Studier et al., Gene Expresión Technology: Methods in Enzimology (Tecnología de Expresión Génica: Métodos en Enzimología) 185, Academic Press, San Diego, California (1990) 60-89) . La expresión de gen blanco a partir del vector pTrc se basa en transcripción de ARHN polimerasa huésped a partir de un formato de fusión trp-lac híbrido. La expresión de gen blanco a partir del vector pET lid se basa en la transcripción a partir de un promotor de fusión T7 gn-10-lac mediada por una ARN polimerasa viral coexpresada (T7 gnl) . Esta polimerasa viral es suministrada por cepas huéspedes BL21 (DE3) o HMS174 (DE3) a partir de un prófago ? residente que contiene un gen T7 gnl bajo el control transcripcional del promotor lacUV5. Una estrategia para optimizar la expresión de proteína recombinante en E. coli es expresar la proteína en una bacteria huésped con una capacidad afectada de disociación proteolítica de la proteína recombinante (Gottesman, Gene Expresión Technology: Methods in Enzimology (Tecnología de Expresión Génica: Métodos en Enzimología) 185, Academic Press, San Diego, California (1990) 119-128) . Otra estrategia es alterar la secuencia de ácido nucleico del ácido nucleico a insertar en un vector de expresión de tal manera que codones individuales para cada aminoácido sean los empleados de preferencia en E. coli (Wada et al. (1992) Nucleic Acids Res. 20:2111-2118) . Tal alteración de las secuencias de ácido nucleico de la invención puede efectuarse por técnicas estándares de síntesis de ADN. En otra modalidad, el vector de expresión de LIG 6 o LIG56 es un vector de expresión de levadura. Ejemplos de vectores para la expresión en levadura S. cerevisae incluyen pYepSecl (Baldari et al. (19871) EMBO J. 6:229-234), pMFa (Kurjan and Herskowitz, (1982) Cell 30:933-943), pJRY88 (Schultz et al. (1987) Gene 54:113-123), pYES2 (Invitrogen Corporation, San Diego, CA) , y picZ (InVitrogen Corp, San Diego, CA) . Alternativamente, se puede expresar LIG46 o LIG56 en células de insecto empleando vectores de expresión de baculovirus . Los vectores de baculovirus disponibles para expresión en proteínas en células de insecto cultivadas (por ejemplo, células Sf 9) incluyen la serie pAc (Smith et al. (1983) Mol.

Cell Biol. 3:2156-2165) y la serie pVL (Lucklow y Summers (1989) Virology 170:31-39). En otra modalidad, un ácido nucleico de la invención es expresado en células de mamífero empleando un vector de expresión de mamífero. Ejemplos de vectores de expresión de mamífero incluyen pCDM8 (Seed (1987) Nature 329:840) y pMT2PC (Kaufman et al. (1987) EMBO J. 6:187-195). Cuando se emplean en células de mamífero, las funciones de control de vector de expresión se ofrecen frecuentemente por elementos regulatorios virales. Por ejemplo, promotores comúnmente empleados se derivan de polioma, adenovirus 2, citomegalovirus y virus del simio 40. Para otros sistemas de expresión adecuados tanto para células procarióticas como eucarióticas, véanse capítulos 16 y 17 de Sambrook et al. (supra) . En otra modalidad, el vector de expresión de mamífero recombinante puede dirigir la expresión del ácido nucleico de preferencia en un tipo de célula particular (por ejemplo, elementos regulatorios específicos para tejidos se emplean para expresar el ácido nucleico) . Elementos regulatorios específicos para tejidos se conocen en la técnica. Ejemplos no limitativos de promotores específicos para tejido adecuados incluyen el promotor de albúmina (específico para hígado; Pinkert et al. (1987) Genes Dev. 1:268-277), promotores específicos para linfoide (Caíame y Eaton (1988) Adv. Immunol. 43:235-275), particularmente promotores de receptores de células T (Winoto y Baltimore (1989) EMBO J. 8:729-733) e inmunoglobulinas (Banerji et al. (1983) Cell 33:729-740; Queen y Baltimore (1983) Cell 33:741-748), promotores específicos para neuronas (por ejemplo, el promotor de neurofilamentos; Byrne y Ruddle (1989) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 86:5473-5477), promotores específicos para páncreas (Edlund et al. (1985) Science 230:912-916), y promotores específicos para glándulas mamarias (por ejemplo, promotor de suero de leche; Patente Norteamericana No. 4,873,316 y Publicación de Solicitud Europea No. 264,166). Se incluyen también promotores regulados por el desarrollo, por ejemplo, los promotores hox de murina (Kessel y Gruss (1990) Science 249:374-379) y el promotor de alfa-fetoproteína (Campes y Tilghman (1989) Genes Dev. 3:537-546). La invención ofrece además un vector de expresión recombinante que comprende una molécula de ADN de la invención clonada en el vector de expresión en una orientación de antisentido. Es decir, la molécula de ADN se encuentra enlazado operativamente a una secuencia regulatoria de una manera que permite la expresión (por transcripción de la molécula de ADN) de una molécula de ARN que es de antisentido para ARNm de LIG46 o LIG56. Las secuencias regulatorias operativamente enlazadas con un ácido nucleico clonado en la orientación de antisentido pueden seleccionarse las cuales dirigen la expresión continua de la molécula de ARN de antisentido en varios tipos de células, por ejemplo promotores y/o realzadores virales, o bien secuencias regulatorias pueden seleccionarse las cuales dirigen la expresión constitutiva, específica para tejido o específica para tipo de células de ARN de antisentido. El vector de expresión de antisentido puede estar en forma de un plásmido recombinante, fagémido o bien virus atenuado en donde se producen ácidos nucleicos de antisentido bajo el control de una región regulatoria de alta eficiencia, cuya actividad puede ser determinada por el tipo de células en donde se introduce el vector. Para un comentario de la regulación de expresión de gen empleando genes de antisentido véase, Weintraub et al. (Reviews - Trends in Genetics, (Reseña -Tendencias en Genética), volumen 1 (1) 1986). Otro aspecto de la invención se refiere a células huéspedes en las cuales un vector de expresión recombinante de la invención ha sido introducido. Los términos "célula huésped" y "célula huésped recombinante" se emplean de manera intercambiable aquí. Se entiende que tales términos se refieren no solamente a la célula sujeto particular sino a la progenie o a la progenie potencial de dicha célula. Puesto que ciertas modificaciones pueden ocurrir en generaciones siguientes debido ya sea a mutación o influencias ambientales, dicha progenie de hecho puede no ser idéntica a la célula de origen, pero se siguen incluyendo dentro del alcance del término según se emplea aquí . Una célula huésped puede ser cualquier célula procariótica o eucariótica. Por ejemplo, la proteína de LIG46 o LIG56 puede ser expresada en células bacterianas tales como E. coli, células de insecto, células de levadura o de mamífero (como por ejemplo células de ovario de hámster Chino (CHO) o célula COS) . Otras células huéspedes adecuadas son conocidas por parte de los expertos en la materia. ADN de vector puede ser introducido en células procarióticas o eucarióticas a través de técnicas convencionales de transformación o transfección. Como se emplea aquí, los términos "transformación" y "transfección" tienen el propósito de referirse a varias técnicas reconocidas para introducir ácido nucleico foráneo (por ejemplo, ADN) en una célula huésped, incluyendo co-precipitación con fosfato de calcio o cloruro de calcio, transfección mediada por DEAE-dextrano, lipofección, o electroporación. Métodos adecuados para transformar o transfectar células huéspedes pueden encontrarse en Sambrook et al. (supra), y otros manuales de laboratorio. Para una transfección estable de células de mamífero, se sabe que, según el vector de expresión y según la técnica de transfección empleada, solamente una pequeña fracción de células pueden integrar el ADN foráneo en su genoma. Con el objeto de identificar y seleccionar estos integrantes, un gen que codifica un marcador seleccionable (por ejemplo, resistencia a los antibióticos) es generalmente introducido en las células 'huéspedes junto con el gen de interés. Marcadores seleccionables preferidos incluyen los que proporcionan resistencia a los fármacos, tales como G418, higromicina y metotrexato. Ácido nucleico que codifica un marcador seleccionable puede ser introducido en una célula huésped en el mismo vector que el vector que codifica LIG46 o LIG56 o bien puede ser introducido en un vector separado. Células transfectadas de manera estable con el ácido nucleico introducido pueden ser identificadas por selección farmacológica (por ejemplo, las células que han incorporado el gen marcador seleccionable sobrevivirán, mientras que las demás células morirán) . Una célula huésped de la invención, como por ejemplo una célula huésped procariótica o eucariótica en cultivo, puede emplearse para producir (es decir, expresar) proteína de LIG46 o LIG56. Por consiguiente, la invención ofrece además métodos para la producción de proteína LIG46 o LIG56 empleando las células huéspedes de la invención. En una modalidad, el método comprende el cultivo de la célula huésped de la invención (en donde se ha introducido un vector de expresión recombinante que codifica LIG46 o LIG56) en un medio de adecuado de tal manera que se produzca proteína LIG46 o LIG56. En otra modalidad, el método comprende además el aislamiento de LIG46 o LIG56 del medio o de la célula huésped. d6 Las células huéspedes de la presente invención pueden también emplearse para producir animales transgénicos no humanos que sobreexpresan una proteína de interés. Por ejemplo, en una modalidad, una célula huésped de la invención es un oocito fertilizado o una célula precursora embriónica en la cual se ha introducido una molécula de ácido nucleico que dirige la expresión de alto nivel de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Tales células huéspedes pueden ser empleadas para crear animales transgénicos no humanos en donde las secuencias de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 han sido introducidas en su genoma o animales recombinantes homólogos en los cuales secuencias endógenas de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 han sido alteradas. Tales animales son útiles para estudiar la función y/o actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o bien para identificar y/o evaluar moduladores de la actividad de LIG46 o LIG56. Como se emplea aquí, un "animal transgénico" es un animal no humano, de preferencia un mamífero, con mayor preferencia un roedor, como por ejemplo una rata o un ratón, en donde una o varias de las células del animal incluyen un transgen. Otros ejemplos de animales transgénicos incluyen primates no humanos, ovejas, perros, vacas, cabras, pollos, anfibios, etc. Un transgen es ADN exógeno que es integrado en el genoma de una célula a partir de la cual se desarrolla un animal transgénico y que permanece en el genoma del animal maduro, dirigiendo por consiguiente la expresión de un producto de gen codificado en uno o varios tipos de células o tejidos del animal transgénico. Como se emplea aquí, un "animal recombinante homólogo" es un animal no humano, de preferencia un mamífero, con mayor preferencia un ratón, en donde un gen endógeno LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 ha sido alterado por recombinación homologa entre el gen endógeno y una molécula de ADN exógena introducida en una célula del animal, por ejemplo, una célula embriónica del animal, antes del desarrollo del animal. Un animal transgénico de la invención puede ser creado mediante la introducción de una molécula de ácido nucleico que codifica una proteína deseada en los pronúcleos machos de un oocito fertilizado, por ejemplo, por microinyección, infección retroviral, y permitiendo el desarrollo del oocito en un animal receptor hembra pseudopreñada. La secuencia de ADNc puede ser introducida como un transgen en el genoma de un animal no humano. Alternativamente, un homólogo humano de gen LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 puede ser aislado con base en hibridación con ADNc de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 de murino y se puede emplear como transgen. Las secuencias intrónicas y las señales de poliadenilación pueden también estar incluidas en el transgen para incrementar la eficiencia de la expresión del transgen. Una(s) secuencia (s) regulatoria (s) específica (s) para tejido puede ser enlazada operativamente con el transgen para dirigir la expresión de la proteína hacia células particulares. Métodos para generar animales transgénicos a través de manipulación de embriones y microinyecciones, particularmente animales tales como ratones, se han vuelto convencionales en la técnica y se describen, por ejemplo, en las Patentes Norteamericanas Nos. 4,736,866 y 4,870,009, Patente Norteamericana No. 4,873,191 y en Hogan, Manipulating the Mouse Embryo (Manipulación del Embrión de Ratón) (Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1986) . Métodos similares se emplean para la producción de otros animales transgénicos. Un animal fundador transgénico puede ser identificado con base en la presencia del transgen en su genoma y/o expresión de ARNm en tejidos o células de los animales. Un animal fundador transgénico puede ser empleado para criar animales adicionales que llevan el transgen. Además, animales transgénicos que llevan un transgen que codifica LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 pueden adicionalmente cruzarse con otros animales transgénicos que llevan otros transgenes. Para crear un animal recombinante homólogo, se prepara un vector que contiene por lo menos una porción de un gen LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en donde se ha introducido una remoción, adición o sustitución para alterar de esta forma, por ejemplo trastornar funcionalmente, el gen.

En una modalidad preferida, el vector es diseñado de tal manera que, al efectuarse una recombinación homologa, el gen endógeno es funcionalmente trastornado (es decir, ya no codifica una proteína funcional/ se conoce también como vector "noqueado") . Alternativamente, el vector puede ser diseñado de tal manera que al efectuarse una recombinación homologa, el gen endógeno es mutado o bien alterado de otra forma pero sigue codificando una proteína funcional (por ejemplo, la región regulatoria corriente arriba puede ser alterada con el objeto de alterar de esta forma la expresión de la proteína endógena) . En el vector de recombinación homólogo, la porción alterada del gen es flanqueada en sus extremos 5' y 3' por ácidos nucleicos adicionales del gen para permitir la recombinación homologa entre el gen exógeno portado por el vector y un gen endógeno en una célula precursora embriónica. El ácido nucleico de flanco adicional tiene una longitud suficiente para una recombinación homologa exitosa con el gen endógeno. Típicamente, se incluyen varios kilobases de ADN de flanco (tanto en los extremos 5' como 3') en el vector (véase, por ejemplo, Thomas y Capecchi (1987) Cell 51:503 para una descripción de vectores de recombinación homólogos) . El vector es introducido en una línea de células precursoras embriónicas (por ejemplo, por electroporación) y las células en las cuales el gen introducido ha sido recombinado de manera homologa con el gen endógeno se seleccionan (véase, Li et al. (1992) Cell 69:915). Las células seleccionadas son después inyectadas en un blastocisto de un animal (por ejemplo, un ratón) para formar quimeras de agregación (véase, por ejemplo, Bradley en Teratocarcinomas and Embryonic Stem Cells: A Practical Approach, (Tetracarcinomas y células precursoras embriónicas: un enfoque práctico), Robertson, ed. (IRL, Oxford, 1987) páginas 113-152) . Un embrión quimérico puede ser implantado después en un animal receptor hembra pseudopreñada adecuada y el embrión es llevado a término. La progenie que contiene el ADN recombinado de manera homologa en sus células germinales puede emplearse para criar animales en los cuales la totalidad de las células del animal contienen el ADN recombinado de manera homologa por transmisión de línea germinal del transgen. Métodos para la construcción de vectores de recombinación homólogos así como animales recombinantes homólogos se describen a continuación en Bradley (1991) Current Opinión in Bio/Technology (Opinión actual en biotecnología) 2:823-829 y en las Publicaciones PCT Nos. WO 90/11354, WO 91/01140, WO 92/0968, y WO 93/04169. En otra modalidad, animales no humanos transgénicos pueden ser producidos los cuales contienen sistemas seleccionados que permiten la expresión regulada del transgen. Un ejemplo de un sistema de este tipo es el sistema cre/loxP recombinasa de bacteriófago Pl. Para una descripción del sistema cre/loxP recombinasa, véase, por ejemplo, Lakso et al. (1992) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 89:6232-6236. Otro ejemplo de sistema de recombinasa es el sistema FLP recombinasa de Saccharomyces cerevisiae (O'Gorman et al. (1991) Science 251:1351-1355). Si se emplea un sistema cre/loxP recombinasa para regular la expresión del transgen, los animales que contienen transgenes que codifican tanto Cre recombinasa como una proteína seleccionada se requieren. Tales animales pueden ser proporcionados a través de la construcción de animales transgénicos "dobles", por ejemplo, mediante el cruzamiento de dos animales transgénicos, uno que contiene un transgen que codifica una proteína seleccionada y el otro que contiene un transgen que codifica una recombinasa. Clones de los animales transgénicos no humanos descritos aquí pueden también ser producidos de conformidad con los métodos descritos en Wilmut et al. (1997) Nature 385:810-813 y Publicaciones PCT Nos. WO 97/07668 y WO 97/07669. En resumen, una célula, por ejemplo, una célula somática, del animal transgénico puede ser aislada e inducida para salir del ciclo de crecimiento y entrar en la fase Go . La célula quiescente puede después ser fusionada, por ejemplo, a través del uso de impulsos eléctricos, con un oocito enucleado de un animal de la misma especie a partir de la cual se aisló la célula quiescente. El oocito reconstruido es después cultivado de tal manera que se desarrolle en mórula o blastocito y después se transfiere a un animal receptor hembra pseudopreñada. La cría nacida de este animal receptor hembra será un clon del animal a partir del cual se aisló la célula, por ejemplo, la célula somática. IV. Composiciones farmacéuticas Las moléculas de ácido nucleico de LIG46 y LIG56, proteínas LIG46 y LIG56, y anticuerpos anti-LIG46 y anti-LIG56 (se conocen también aquí como "compuestos activos") de la presente invención pueden incorporarse en composiciones farmacéuticas adecuadas para su administración así como varios moduladores para la expresión o actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RCIO-JI, o Stral3. Composiciones terapéuticas comprenden típicamente la molécula de ácido nucleico, proteína o anticuerpo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Como se emplea aquí, la expresión "vehículo farmacéuticamente aceptable" tiene el propósito de incluir todos y cada uno de los solventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antifungales, agentes de retardo de absorción e isotónicos, y similares, compatibles con la administración farmacéutica. El uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Excepto en la medida en que un medio o agente convencional es incompatible con el compuesto activo, se contempla su uso en las composiciones. Compuestos activos complementarios pueden también ser incorporados en las composiciones. Una composición farmacéutica de la invención se formula para que sea compatible con su vía de administración prevista. Por ejemplo, las vías de administración incluyen administración parenteral, por ejemplo, intravenosa, intradérmica, subcutánea, oral (por ejemplo, inhalación) , transdérmica (tópica), transmucosal, y rectal. Soluciones o suspensiones empleadas para administración parenteral, intradérmica o subcutánea pueden incluir los siguientes componentes: un diluyente estéril como por ejemplo agua para inyección, solución salina, aceites fijos, polietilenglicoles, glicerina, propilenglicol, o bien otros solventes sintéticos/ agentes antibacterianos tales como alcohol bencílico o metilparabenos/ antioxidantes tales como ácido ascórbico o bisulfito de sodio/ agentes de quelación tales como ácido etilendiamintetraacético/ amortiguadores tales como acetatos, citratos o fosfatos y agentes para el ajuste de la tonicidad tales como cloruro de sodio o dextrosa. El pH puede ser ajustado con ácidos o bases, como por ejemplo ácido clorhídrico o hidróxido de sodio. La preparación parenteral puede estar encerrada en ampolletas, jeringas desechables o bien frascos de dosis múltiples fabricados de vidrio o plástico. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones acuosas estériles (cuando son solubles en agua) o dispersiones y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. Para administración intravenosa, vehículos adecuados incluyen soluciones salinas fisiológicas, agua bacteriostática, Cremophor EL® (BASF/ Parsippany, NJ) , o bien solución salina amortiguada con fosfato (PBS) . En todos los casos, la composición debe ser estéril y debe estar en estado fluido para proporcionar una facilidad de administración con jeringa. La composición debe presentar estabilidad en las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe presentar conservación contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El vehículo puede ser un solvente o un medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol, así como polietilenglicol líquido, y similares) , y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez adecuada puede ser mantenida, por ejemplo, mediante el uso de un revestimiento como por ejemplo lecitina, mediante el mantenimiento de tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y mediante el uso de surfactantes. La prevención de la acción de microorganismos puede lograrse a través de varios agentes antibacterianos y antifungales, como por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol, cloruro de sodio en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede ser provocada mediante la inclusión en la composición de un agente que retarda la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina. Soluciones inyectables estériles pueden prepararse mediante la incorporación del compuesto activo (por ejemplo, una proteína de LIG46 o LIG56 o un anticuerpo anti-LIG46 o LIG56) en la cantidad requerida en un solvente apropiado con uno de los ingredientes mencionados arriba o con una combinación de dichos ingredientes, según lo requerido, seguido por esterilización filtrada. Generalmente, las dispersiones se preparan mediante la incorporación del compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los demás ingredientes requeridos de los enumerados arriba. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son secados en vacío y liofilización lo que proporciona un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional a partir de una solución previamente filtrada en estado estéril. Las composiciones orales incluyen generalmente un diluyente inerte o un vehículo comestible. Pueden encontrarse en cápsulas de gelatina o bien pueden comprimirse en tabletas. Para el propósito de administración terapéutica oral, el compuesto activo puede estar incorporado con excipientes y empleado en forma de tabletas, pildoras o cápsulas. Las composiciones orales pueden también prepararse empleando un vehículo fluido para su uso como enjuague bucal, en donde el compuesto en el vehículo fluido es aplicado oralmente y expectorado o tragado. Agentes de unión farmacéuticamente compatibles y/o materiales adyuvantes pueden estar incluidos como parte de la composición. Las tabletas, pildoras, cápsulas, grageas y similares pueden contener cualesquiera de los siguientes ingredientes o compuestos de naturaleza similar: un aglomerante como por ejemplo celulosa microcristalina, goma tragacanto o gelatina, un excipiente como por ejemplo almidón o lactosa, un agente de desintegración como por ejemplo ácido algínico, Primogel, o almidón de maíz/ un lubricante como por ejemplo estearato de magnesio o Sterotes/ un agente de deslizamiento como por ejemplo dióxido de silicio coloidal/ un agente endulzante como por ejemplo sucrosa o sacarina/ o un agente saborizante como por ejemplo salicilato de metilo, o sabor a naranja. Para la administración por inhalación, los compuestos se administran en forma de un rocío de aerosol a partir de un recipiente presurizado o surtidor que contiene un impelente adecuado, por ejemplo, un gas como por ejemplo dióxido de carbono o un atomizador. La administración sistémica puede también efectuarse a través de medios transmucosales o transdérmicos. En el caso de la administración transmucosal o transdérmica, agentes de penetración apropiados para la barrera a permear se emplean en la formulación. Tales agentes de penetración son generalmente conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, para la administración transmucosal, detergentes, sales biliares, así como derivados de ácido fusídico. La administración transmucosal puede estar acompañada del uso de rocíos nasales o supositorios. Para la administración transdérmica, los compuestos activos son formulados en ungüentos, bálsamos, geles o cremas como se sabe generalmente en la técnica. Los compuestos pueden también prepararse en forma de supositorios (por ejemplo, con bases convencionales para supositorios tales como manteca de cocoa y otros glicéridos) o bien enemas de retención para administración rectal. En una modalidad, los compuestos activos se preparan con vehículos que protegerán el compuesto contra una eliminación rápida del cuerpo, como por ejemplo en el caso de una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes así como sistemas de administración microencapsulados. Se pueden emplear polímeros biodegradables, biocompatibles como por ejemplo etileno, acetato de vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágena, poliortoésteres así como ácido poliláctico. Métodos para la preparación de tales formulaciones serán aparentes a los expertos en la materia. Los materiales pueden también obtenerse comercialmente de Alza Corporation y Nova Pharmaceuticals, Inc. Suspensiones liposomales (incluyendo liposomas enfocados hacia células infectadas con anticuerpos monoclonales hacia antígenos virales) pueden también emplearse como vehículos farmacéuticamente aceptables. Estos pueden prepararse de conformidad con métodos conocidos por parte de los expertos en la materia, por ejemplo, de conformidad con lo descrito en la Patente Norteamericana No. 4,522,811. Es especialmente provechoso formular composiciones orales o parenterales en forma de unidad de dosificación para facilitar la administración y la uniformidad de dosificación. La forma unitaria de dosificación como se emplea aquí se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para el sujeto a tratar/ cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo que se calcula para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación para las formas unitarias de dosificación de la invención es dictada por las características únicas del compuesto activo y el aspecto terapéutico particular a lograr y depende de dichas características y de dicho efecto, y las limitaciones inherentes en la técnica de formar tales compuestos activos para el tratamiento de individuos.

Las moléculas de ácido nucleico de la presente invención pueden ser insertadas en vectores y empleadas como vectores de terapia génica. Los vectores de terapia génica pueden ser administrados a un sujeto, por ejemplo, por inyección intravenosa, administración local (Patente Norteamericana NO. 5,328,470) o bien por inyección estereotáctica (véase, por ejemplo, Chen et al. (1994) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 91:3054-3057). La preparación farmacéutica del vector de terapia génica puede incluir el vector de terapia génica en un diluyente aceptable, o bien puede comprender una matriz de liberación lenta en donde se integra el vehículo de administración de gen. Alternativamente, cuando se puede producir de manera intacta un vector de administración de gen completo a partir de células recombinantes, por ejemplo, vectores retrovirales, la preparación farmacéutica puede incluir una o varias células que producen el sistema de administración de gen. Las composiciones farmacéuticas pueden estar incluidas en un recipiente, empaque, o surtidor junto con instrucciones para su administración. V. Usos y métodos de la invención Las moléculas de ácido nucleico LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3, proteínas, homólogos de proteínas, y anticuerpos descritos aquí pueden emplearse en uno o varios de los siguientes métodos: a) ensayos de tamizado/ b) ensayos de detección (por ejemplo, mapeo cromosomal, tipificación de tejido, biología forense); y c) métodos de tratamiento (por ejemplo, terapéutico y profiláctico) . Las moléculas aisladas de ácido nucleico de la presente invención pueden ser empleadas para expresar la proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 (por ejemplo, a través de un vector de expresión recombinante en una célula huésped en aplicaciones de terapia génica o animales transgénicas) para detectar ARNm de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3 (por ejemplo, en una muestra biológica) o bien una lesión genética en un gen LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3., y para modular la actividad o expresión de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3. Además, proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3 pueden emplearse para tamizar fármacos o compuestos que modulan la actividad de expresión de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 así como para tratar trastornos caracterizados por una producción insuficiente o excesiva de proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3 o bien la producción de formas de proteína LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 que tienen un nivel indeseable de actividad en comparación con la proteína Tipo silvestre. Además, los anticuerpos anti-LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 de la invención pueden emplearse para detectar y aislar proteínas" de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG- 47, RC10-II, o Stral3 y modular la actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Esta invención se refiere además a agentes novedosos identificados a través de los ensayos de tamizado descritos arriba y usos de los mismos para los tratamientos descritos aquí . A. Ensayos de tamizado La invención ofrece un método (se conoce también aquí como "ensayo de tamizado") para identificar moduladores, es decir, compuestos candidatos o de prueba o agentes (por ejemplo, péptidos, péptidomimeticos, pequeñas moléculas o bien otros fármacos) que se unen con una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 y/o tienen un efecto de estimulación o inhibición por ejemplo sobre la expresión o actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3.

La invención proporciona ensayos para tamizar compuestos de prueba o candidatos que se unen o modulan la actividad de la forma unida a membrana de la proteína LIG46 o polipéptido o porción biológicamente activa de la misma. Otras modalidades abarcan el uso de una forma soluble de LIG46. Los compuestos de prueba de la presente invención pueden ser obtenidos empleando cualesquiera de numerosos enfoques en métodos de biblioteca de combinación conocidos en la técnica, que incluyen: bibliotecas biológicas: bibliotecas en fase de solución o fase sólida paralelas a las cuales se puede dirigir espacialmente; métodos de biblioteca sintética que requieren desconvolución; el método de biblioteca de "una perla, un compuesto"; así como métodos de biblioteca sintética que emplean selección por cromatografía de afinidad. El enfoque de biblioteca biológica es limitado a bibliotecas de péptidos, mientras que los demás cuatro enfoques pueden aplicarse a bibliotecas de péptidos, oligómeros que no son péptidos o bien pequeñas moléculas (Lam (1997) Anticancer Drug Des. 12:145). Ejemplos de métodos para la síntesis de bibliotecas moleculares pueden encontrarse en la técnica, por ejemplo en: DeWitt et al. (1993) Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 90:6909; Erb et al. (1994) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 91:11422; Zucker ann et al. (1994). J. Med. Chem. 37:2678; Cho et al. (1993) Science 261:1303; Carrell et al. (1994) Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2059; Carell et al. (1994) Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2061; y Gallop et al. (1994) J. Med. Chem. 37:1233. Bibliotecas de compuestos pueden encontrarse en solución (por ejemplo, Houghten (1992) Bio/Techniques 13:412-421), o bien en perlas (Lam (1991) Nature 354:82-84), lascas (Fodor (1993) Nature 364:555-556), bacterias (Patente Norteamericana No. 5,223,409), esporas (Patentes Norteamericanas Nos. 5,571,698; 5,403,484; y 5,223,409), plásmidos (Culi et al. (1992) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 89:1865-1869) o bien en fagos (Scott y Smith (1990) Science 249:386-390; Devlin (1990) Science 249:404-406; Cwirla et al. (1990) Proc. Nati. Acad. Sci. 87:6378-6382; y Felici (1991) J. Mol. Biol. 222:301-310). La invención incluye ensayos que emplean LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 solubles. Tales ensayos incluyen la puesta en contacto de una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o una porción biológicamente activa de la misma con un compuesto de prueba y la determinación de la capacidad del compuesto de prueba de unirse con proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o bien una porción biológicamente activa de la misma. La unión del compuesto de prueba con proteína LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 puede determinarse ya sea directa o indirectamente empleando los enfoques descritos arriba. En una modalidad preferida, el ensayo incluye la puesta en contacto de una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o una porción biológicamente activa de la misma con un compuesto conocido que se une con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 para formar una mezcla de ensayo, poniendo en contacto la mezcla de ensayo con un compuesto de prueba, y determinando la capacidad del compuesto de prueba para interactuar con una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, en donde la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para interactuar con proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 comprende la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para unirse preferencial con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o una porción biológicamente activa del mismo en comparación con el compuesto conocido. En otra modalidad, un ensayo es un ensayo sin célula que comprende la puesta en contacto de proteína LIG46 o LIG56 o porción biológicamente activa de la misma con un compuesto de prueba y la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para modular (por ejemplo, estimular o inhibir) la actividad de la proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o una porción biológicamente activa de la misma. La determinación de la capacidad del compuesto de prueba para modular la actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 puede lograrse, por ejemplo, mediante la determinación de la capacidad de la proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 para unirse con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 a través de uno de los métodos descritos aquí para determinar ,1a unión directa. En una modalidad alternativa, la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para modular la actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 puede lograrse mediante la determinación de la capacidad del agente para alterar la actividad de molécula blanco de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3. Por ejemplo, se puede determinar la actividad catalítica/enzimática de la molécula blanco en un sustrato apropiado. En otra modalidad, el ensayo sin células comprende la puesta en contacto de proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o bien porción biológicamente activa de la misma con un compuesto conocido que se une con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 para formar una mezcla de ensayo, poner en contacto la mezcla de ensayo con un compuesto de prueba, y determinar la capacidad del compuesto de prueba para interactuar con una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, en donde la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para interactuar con una proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 comprende la determinación de la capacidad de la proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 de unirse de manera preferencial con la molécula blanco de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o bien de modular la actividad de dicha molécula blanco. Para las proteínas unidas ,a membrana tales como LIG46, en una modalidad, un ensayo es un ensayo basado en célula en el cual una célula que expresa una forma unida a membrana de proteína de LIG46 o una porción biológicamente activa de la misma, en la superficie de la célula está en contacto con un compuesto de prueba y se determina la capacidad del compuesto de prueba para unirse con una proteína de LIG46. La célula, por ejemplo, puede ser una célula de levadura o una célula de origen de mamífero. La determinación de la capacidad del compuesto de prueba para unirse con la proteína de LIG46 puede lograrse, por ejemplo, mediante el acoplamiento del compuesto de prueba con un radioisótopo o marcador enzimático de tal manera que la unión del compuesto de prueba con la proteína de LIG46 o una porción biológicamente activa de la misma pueda determinarse mediante la detección del compuesto marcado en un complejo. Por ejemplo, los compuestos de prueba pueden ser marcados con 125I, 35S, 14C, o 3H, ya sea directa o indirectamente, y el radioisótopo puede ser detectado por conteo directo de radioe isión o por conteo de centelleo. Alternativamente, los compuestos de prueba pueden ser marcados enzimáticamente, por ejemplo, con peroxidasa de rábano agrio, fosfatasa alcalina o luciferasa, y el marcador enzimático puede ser detectado por determinación de conversión de un sustrato apropiado en producto. En una modalidad preferida, el ensayo comprende la puesta en contacto desuna célula que expresa una forma unida a membrana de proteína LIG46, o una porción biológicamente activa de la misma, en la superficie de la célula con un compuesto conocido que se une con LIG46 para formar una mezcla de ensayo, la puesta en contacto de la mezcla de ensayo con un compuesto de prueba, y la determinación de la capacidad de compuesto de prueba para interactuar con una proteína LIG46, en donde la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para interactuar con una proteína LIG46 comprende la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para unirse de manera preferencial con LIG46 o una porción biológicamente activa de la misma en comparación con el compuesto conocido. En otra modalidad, un ensayo es un ensayo basado en célula que comprende la puesta en contacto de una célula que expresa una forma unida a membrana de proteína LIG46, o una porción biológicamente activa de la misma, en la superficie de la célula con un compuesto de prueba y la determinación de la capacidad del compuesto de prueba para modular (por ejemplo, estimular o inhibir) la actividad de la proteína LIG46 o una porción biológicamente activa de la misma. La determinación de la capacidad del compuesto de prueba para modular la actividad de LIG46 o una porción biológicamente activa de la misma puede lograrse, por ejemplo, mediante la determinación de la capacidad de la proteína LIG46 para unirse o interactuar con una molécula blanco de LIG46. Como se emplea aquí, una "molécula blanco" es una molécula con la cual se une una proteína LIG46 o con la cual interactúa una proteína LIG46 en la naturaleza, por ejemplo, una molécula en la superficie de una célula que expresa una proteína LIG46, una molécula en la superficie de la segunda célula, una molécula en el medio extracelular, una molécula asociada con la superficie interna de una membrana celular o una molécula citoplásmica, una molécula blanco de LIG46 puede ser una molécula no-LIG46 o una proteína de LIG46 o polipéptido de la presente invención. En una modalidad, una molécula blanco de LIG46 es un componente de una vía de transducción de señales que facilita la transducción de una señal extracelular (por ejemplo, una señal generada mediante la unión de un compuesto con una molécula de LIG46 unida a membrana) a través de la membrana celular y en la célula. El blanco, por ejemplo, puede ser una segunda proteína intercelular que tiene una actividad catalítica o una proteína que facilita la asociación de moléculas de señalización corriente abajo con LIG46. v La determinación de la capacidad de la proteína LIG46 unida a membrana para unirse con una molécula blanco de LIG46 o interactuar con dicha molécula puede lograrse a través de uno de los métodos descritos arriba para determinar la unión directa. En una modalidad preferida, la determinación de la capacidad de la proteína de LIG46 para unirse con una molécula blanco de LIG46 o interactuar con dicha molécula puede lograrse mediante la determinación de la actividad de la molécula blanco. Por ejemplo, la actividad de la molécula blanco puede ser determinada mediante la detección de la actividad catalítica/enzimática o mediante la detección de <e una respuesta celular. Los ensayos exentos de célula de la presente invención pueden manejarse para emplear tanto la forma soluble como la forma unida a membrana de LIG46. En el caso de ensayos exentos de célula que comprenden la forma unida a membrana de LIG46, puede ser deseable utilizar un agente de solubilización de tal manera que la forma unida a membrana de LIG46 se mantenga en solución. Ejemplos de tales agentes de solubilización incluyen detergentes no iónicos tales como n-octilglucósido, n-dodecilglucósido, n-dodecilmaltósico, octanoil-N-metilglucamida, decanoil-N-metilglucamida, Tritón® X-100, Tritón® X-114, Thesit®, isotridecipoli (etilenglicoleter) n, sulfonato de 3- [ (3-colamidopropil) dimetilaminio] -1-propano (CHAPS) , sulfonato de 3- [ (3-colamidopropil) dimetilaminio] -2-hidroxi-1-propano (CHAPSO) , o bien sulfonato de N-dodecil=N,N-dimetil-3-amonio-l-propano. En más que una modalidad de los métodos de ensayo antes mencionados de la presente invención, puede ser deseable inmovilizar ya sea LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o la molécula blanco correspondiente para facilitar la separación de las formas que forman complejos de las formas que no forman complejos de una o ambas de las proteínas, así como para permitir la automatización del ensayo. La unión de un compuesto de prueba con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3, o la interacción de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 con una molécula blanco en presencia y ausencia de un compuesto candidato, puede lograrse en cualquier recipiente adecuado para contener los reactivos. Ejemplos de tales recipientes incluyen placas de microtitulación, tubos de ensayo, así como tubos de microcentrifugación. En una modalidad, una proteína de fusión puede proporcionarse la cual agrega un dominio que permite que una o ambas de las proteínas estén unidas a una matriz. Por ejemplo, glutation-S-transferasa/proteínas de fusión o bien glutation-S-transferasa/proteínas de fusión blanco pueden estar adsorbidas en perlas de glutationa sefarosa (Sigma Chemical; St. Louis, MO) o bien placas de microtitulación derivadas de glutationa, que son después combinadas con el compuesto de prueba o el compuesto de prueba y cualesquiera de la proteína blanco no adsorbida o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o bien Stral3, y la mezcla es incubada en condiciones que llevan a la formación de complejos (por ejemplo, en condiciones fisiológicas para sal y pH) . Después de la incubación, las perlas o pozos de placas de microtitulación se lavan con ,el objeto de remover los componentes no unidos, la matriz es inmovilizada en el caso de perlas, se determinan los complejos ya sea directa o indirectamente, por ejemplo, de conformidad con lo descrito arriba. Alternativamente, los complejos pueden ser disociados de la matriz, y se determina el nivel de enlace o actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 empleando técnicas estándares.

Otras técnicas para la inmovilización de proteínas en matrices pueden también emplearse en los ensayos de tamizado de la presente invención. Por ejemplo, se puede inmovilizar ya sea LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o la molécula blanco correspondiente empleando conjugación de biotina y estreptavidina. LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 biotinilada o la molécula blanco correspondiente puede prepararse a partir de biotina-NHS (N-hidroxisuccinimida) empleando técnicas bien conocidas (por ejemplo, conjunto de elementos de biotinilación, Pierce Chemicals; Rockford, IL) , e inmovilizadas en los pozos de placas de 96 pozos revestidas con estreptavidina (Pierce Chemical) . Alternativamente, anticuerpos que reaccionan con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o la molécula blanco correspondiente pero que no interfieren con la unión de la proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 sobre su molécula blanco pueden ser derivados hacia los pozos de la placa, y el blanco no unido con LIQ46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 atrapado en los pozos por conjugación de anticuerpos. Métodos para detectar tales complejos, además de los descritos arriba para los complejos inmovilizados en GST, incluyen la inmunodetección de complejos empleando anticuerpos que reaccionan con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o molécula blanco correspondiente, así como ensayos enlazados con enzima que se basan en la detección de una actividad enzimática asociada con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o molécula blanco correspondiente. En otra modalidad, se identifican moduladores de expresión de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en un ensayo basado en células en donde una célula entra en contacto con un compuesto candidato y se determina la expresión de ARNm de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 o proteína en la célula. El nivel de expresión de ARNm o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en presencia del compuesto candidato se compara con el nivel de expresión de ARNm o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en ausencia del compuesto candidato. El compuesto candidato puede ser entonces identificado como un modulador de la expresión de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 con base en esta comparación. Por ejemplo, cuando la expresión de ARNm o proteína de LIG46 es mayor (estadísticamente significativamente mayor) en presencia del compuesto candidato que en su ausencia, el compuesto candidato es identificado como un estimulador de la expresión de ARNm o proteína de LIG46. Alternativamente, cuando la expresión de ARNm de LIG46 o proteína es menor (estadísticamente significativamente menor) en presencia del compuesto candidato que en ausencia de dicho compuesto, el compuesto candidato es identificado como un inhibidor de la expresión de ARNm o proteína de LIG46. El nivel de expresión de ARNm o proteína de LIG46 en las células puede determinarse por métodos descritos aquí para la detección de ARNm o proteína de LIG46. En otra modalidad, se identifican moduladores de la actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en un ensayo basado en células en donde una célula se pone en contacto con un compuesto candidato y se determina la actividad de ARNm o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en la célula. El nivel de actividad de ARNm o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en presencia del compuesto candidato se compara con el nivel de actividad de ARNm o proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 en ausencia del compuesto candidato. El compuesto candidato puede después ser identificado como un modulador de la actividad de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 con base en esta comparación. Por ejemplo, , cuando la actividad de LIG46 es mayor (estadísticamente significativamente mayor) en presencia del compuesto candidato que en ausencia de dicho compuesto, el compuesto candidato es identificado como un estimulador de la expresión de ARNm o proteína de LIG46. Alternativamente, cuando la actividad de LIG46 es menor (estadísticamente significativamente es menor) en presencia del compuesto candidato que en ausencia de dicho candidato, el compuesto candidato es identificado como un inhibidor de la actividad de LIG46. En otro aspecto de la invención, proteína de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 puede emplearse como "proteína cebo" en un ensayo de dos híbridos o en un ensayo de tres híbridos (véase, por ejemplo, Patente Norteamericana No. 5,283,317; Zervos et al. (1993) Cell 72:223-232; Madura et al. (1993) J. Biol. Chem. 268:12046-10254; Bartel et al. (1993) Bio/Techniques 14:920-924; Iwabuchi et al. (1993) Oncogene 8:1693-1696, y Publicación PCT No. WO 94/10300), para identificar otras proteínas que se unen o interactúan con LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, o Stral3 y modulan su actividad. El sistema de dos híbridos se basa en la naturaleza modular de la mayoría de los factores de transcripción, que consisten de dominios separables de enlace con ADN y activación. Brevemente, el ensayo emplea dos constructos de ADN diferentes. En un constructo, el gen que codifica para la proteína de interés, por ejemplo, Stral3, es fusionado sobre el gen que codifica el dominio de enlace de ADN de un factor de transcripción conocido (por ejemplo, GAL-4) . En el otro constructo, una secuencia de ADN, proveniente de una biblioteca de secuencias de ADN, que codifica una proteína no identificada ("presa" o "muestra") se fusiona sobre un gen que codifica para el dominio de activación del factor de transcripción conocido. Si las proteínas "cebo" y "presa" pueden interactuar, in vivo, formando un complejo, los dominios de unión con ADN y activación del factor de transcripción se colocan en cercanía estrecha. Esta cercanía permite la transcripción de un gen reportero (por ejemplo, LacZ) unido operativamente sobre un sitio regulatorio de transcripción que responde al factor de transcripción. La expresión del gen reportero puede ser detectada y se pueden aislar y emplear colonias de células que contienen el factor de transcripción funcional para obtener el gen clonado que codifica la proteína que interactúa con Stral3. Esta invención se refiere además a agentes novedosos identificados a través de los ensayos de tamizado descritos arriba y los emplea para tratamientos de conformidad con lo descrito aquí. B. ensayos de detección Porciones o fragmentos de las secuencias de ADNc de LIG46 y LIG56 identificados aquí (y las secuencias de gen completas correspondientes) pueden emplearse de varias maneras como reactivos de polinucleótidos. Por ejemplo, estas secuencias pueden emplearse para: (i) mapear sus genes respectivos en un cromosoma; y, por consiguiente, localizar regiones génicas asociadas con una enfermedad genética; (ii) identificar un individuo a partir de una muestra biológica diminuta (tipicado de tejido); y (iii) ayudar a la identificación forense de una muestra biológica. Estas aplicaciones se describen en las subsecciones siguientes. 1. Mapeo de cromosoma Una vez aislada la secuencia (o parte de la secuencia) de un gen, esta secuencia puede ser empleada para mapear la ubicación del gen en un cromosoma. Por consiguiente, las moléculas de ácido nucleico de LIG46 o LIG56 descritas aquí o fragmentos de las mismas, pueden emplearse para mapear la ubicación de genes LIG46 o LIG56 en un cromosoma. El mapeo de las secuencias de LIG46 o LIG56 sobre cromosomas es un primer paso importante para correlacionar estas secuencias con genes asociados con enfermedad. Brevemente, genes LIG46 o LIG56 pueden ser mapeados sobre cromosomas mediante la preparación de iniciadores de reacción en cadena de polimerasa (de preferencia de 15 a 25 pares de bases de longitud) a partir de las secuencias de LIG46 o LIG56. Un análisis por computadora de secuencias de LIG46 o LIG56 puede emplearse para seleccionar rápidamente iniciadores que no abarcan más que un exón en el ADN genómico, complicando así el proceso de amplificación. Estos iniciadores pueden entonces ser empleados paira tamizado de reacción en cadena de polimerasa de híbridos de células somáticas que contiene cromosomas humanos individuales. Solamente los híbridos que contienen el gen humano que corresponde a las secuencias de LIG46 o LIG56 proporcionarán un fragmento amplificado. Los híbridos de células somáticas se preparan mediante la fusión de células somáticas provenientes de mamíferos diferentes (por ejemplo, células de ser humano y de ratón) . Conforme los híbridos de células de ser humano y de ratón crecen y se dividen, pierden gradualmente cromosomas humanos en orden aleatorio, pero conservan los cromosomas de ratón. Mediante el uso de medios en los cuales las células de ratón no pueden crecer, puesto que les falta una enzima particular, pero en donde las células humanas pueden crecer, el cromosoma humano que contiene el gen que codifica la enzima requerida será conservado. Mediante el uso de varios medios, se pueden establecer paneles de líneas de células híbridas. Cada línea de células en un panel contiene ya sea un cromosoma humano individual o un pequeño número de cromosomas humanos, y un conjunto completo de cromosoma's de ratón, lo que permite un mapeo fácil de genes individuales sobre cromosomas humanos específicos. (D'Eustachio et al. (1983) Science 220:919-924). Híbridos de células somáticas que contienen solamente fragmentos de cromosomas humanos pueden también ser producidos mediante el uso de cromosomas humanos con translocaciones y remociones. El mapeo por reacción en cadena de polimerasa de híbridos de células somáticas es un procedimiento rápido para asignar una secuencia particular a un cromosoma particular. Tres o más secuencias pueden ser asignadas por día empleando un ciclador térmico único. Empleando las secuencias de LIG46 o LIG56 para diseñar iniciadores de oligonucleótidos, se puede lograr una sublocalización con paneles de fragmentos provenientes de cromosomas específicos. Otras estrategias de mapeo que pueden ser empleadas de manera similar para mapear una secuencia de LIG46 o LIG56 sobre su cromosoma incluye la hibridación in situ (descrita en Fan et al. (1990) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 87:6223-27), el pre-tamizado con cromosomas clasificados por flujo marcados, y la preselección por hibridación en bibliotecas de ADNc específicas de cromosoma. La hibridación in situ con fluorescencia (FISH) de una secuencia de ADN sobre una extensión cromosomal en metafase puede emplearse adicionalmente para proporcionar una ubicación cromosomal precisa en un paso. Las extensiones de cromosoma pueden efectuarse empleando células cuya división ha sido apropiada en metafase por un agente químico como por ejemplo colcemida que trastorna el huso mitótico. Los cromosomas pueden ser tratados brevemente con tripsina, y después teñidos con Giemsa. Un patrón de bandas claras y oscuras se desarrolla en cada cromosoma, de tal manera que los cromosomas pueden ser identificados individualmente. La técnica FISH puede ser empleada con una secuencia de ADN de solamente 500 o 600 bases. Sin embargo, clones mayores que 1000 bases tienen una mayor probabilidad de unirse a una ubicación' cromosomal única con una intensidad de señal suficiente para una detección sencilla. De preferencia, 1,000 bases, y con mayor preferencia 2,000 bases serán suficientes para obtener buenos resultados en un período razonable de tiempo. Para una reseña de esta técnica, véase, Verma et al., (Human C romosomes : A Manual of Basic Techniques (Cromosomas humanos: Un Manual de Técnicas Básicas) (Pergamon Press, Nueva York, 1988) ) . Reactivos para mapear cromosomas pueden emplearse individualmente para marcar un cromosoma individual o un sitio individual en este cromosoma, o bien paneles de reactivos pueden emplearse para marcar varios sitios /o varios cromosomas. Reactivos que corresponden a regiones no codificadoras de los genes se prefieren de hecho para propósitos de mapeo. Secuencias codificadoras serán más probablemente conservadas dentro de familias de genes, incrementando de esta forma la probabilidad de hibridaciones cruzadas durante el mapeo cromosomal. Una vez mapeada una secuencia en una ubicación cromosomal precisa, la posición física de la secuencia en el cromosoma puede ser corroborada con datos de mapa genético. (Tales datos se encuentran, por ejemplo, en V. McKusick, Mendelian Inheritance in Man (Herencia Mendeliana en el Ser Humano) , disponible en línea a través de la Biblioteca Médica Welch de la Universidad Johns Hopkins) . Relación en tres genes y enfermedad, mapeada sobre la misma región cromosomal, puede entonces identificarse a través de análisis de relación (coherencia de genes físicamente adyacentes) , como se describe, por ejemplo, en Egeland et al. (1987) Nature, 325:783-787. Además, diferencias en las secuencias de ADN entre individuos afectados e individuos no afectados con una enfermedad asociada con el gen LIG46 o LIG56 pueden determinarse. Si se observa una mutación en algunos o la totalidad de los individuos afectados pero no en los individuos no afectados, entonces es probable que la mutación sea el agente causante de la enfermedad particular. La comparación de los individuos afectados y no afectados involucra generalmente el hecho de buscar primero alteraciones estructurales en los cromosomas tales como remociones o translocaciones que son visibles a partir de extensiones de cromosomas o detectables empleando reacciones en cadena de polimerasa basadas en esta secuencia de ADN. Finalmente, un secuenciamiento completo de genes a partir de varios individuos puede efectuarse para confirmar la presencia de una mutación y para distinguir mutaciones de polimorfismos. 2. Tipificado de tejido Las secuencias de LIG46 o LIG56 de la presente invención pueden también emplearse para identificar individuos a partir de muestras biológicas diminutas. Las autoridades militares Norteamericanas, como por ejemplo, están considerando el uso de polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP) para la identificación de su personal. En esta técnica, el ADN genómica de una persona es digerido con una o varias enzimas de restricción y sondeado en un Southern blot para proporcionar bandas únicas para propósitos de identificación. Este método no adolece de las limitaciones actuales de las "etiquetas para soldados" que pueden perderse, intercambiarse o robarse, haciendo difícil una identificación definitiva. Las secuencias de la presente invención son útiles como marcadores de ADN adicionales para RFLP (se describe en la Patente Norteamericana No. 5,272,057) . v Además, las secuencias de la presente invención pueden emplearse para proporcionar una técnica alternativa que determina la secuencia de ADN real base por base de porciones seleccionadas del genoma de un individuo. Así, las secuencias de LIG46 o LIG56 descritas aquí pueden emplearse para preparar dos iniciadores de reacción en cadena de polimerasa a partir de los extremos 5' y 3' de las secuencias. Estos iniciadores pueden ser empleados para amplificar el ADN de un individuo y secuenciarlo subsecuentemente. Paneles de secuencias de ADN correspondientes provenientes de individuos, preparados de esta forma, pueden proporcionar identificaciones individuales únicas, puesto que cada individuo tendrá un conjunto único de tales secuencias de ADN debido a las diferencias alélicas. Las secuencias de la presente invención pueden emplearse para obtener tales secuencias de identificación a partir de individuos y a partir de tejidos. Las secuencias de LIG46 o LIG56 de la invención representan de manera única porciones del genoma humano. Ocurre una variación alélica hasta cierto grado en las regiones codificadoras de estas secuencias, y en menor medida en las regiones no codificadoras. Se estima que las variaciones alélicas entre seres humanos individuales ocurren con una frecuencia de aproximadamente una vez cada 500 bases. Cada una de las secuencias descritas aquí puede, hasta cierto punto, emplearse como un estándar contra el cual se puede comparar el ADN de un individuo para propósitos de identificación. Debido a los grandes números de polimorfismos que ocurren en las regiones no codificadoras, se requieren de un número menor de secuencias para diferenciar los individuos. Las secuencias no codificadoras de SEQ ID N0:1 pueden proporcionar cómodamente la identificación definitiva de un individuo con un panel de tal vez 10 a 1,000 iniciadores cada uno proporcionando una secuencia amplificada no codificadora de 100 bases. Si se emplean secuencias codificadoras predichas, tales como las en SEQ ID NO: 3, un número más apropiado de iniciadores para identificación positiva de un individuo sería de 500 a 2,000. Si se emplea un panel de reactivos a partir de las secuencias de LIG46 o LIG56 descritas aquí con el objeto de generar una base de datos de identificación única para un individuo, estos mismos reactivos pueden emplearse después para identificar tejido a partir del individuo. Empleando la base de datos de identificación única, se puede lograr una identificación definitiva del individuo, vivo o muerto, a partir de muestras extremadamente pequeñas de tejido. 3. Uso de secuencias parciales de LIG46 o LIG56 en biología forense técnicas de identificación basadas en ADN pueden también emplearse en biología forense. La biología forense es un campo científico que emplea el tipificado genético o la evidencia biológica encontrada en el escenario de un crimen como una forma de identificar positivamente, por ejemplo, el culpable de un delito. Para efectuar dicha identificación, se puede emplear una tecnología de reacción en cadena de polimerasa para amplificar secuencias de ADN tomadas de muestras biológicas muy pequeñas tales como tejidos, por ejemplo, cabello o piel, o bien fluidos corporales como por ejemplo sangre, saliva, o semen encontrados en el escenario de un delito. La secuencia amplificada puede después ser comparada con un estándar, permitiendo así la identificación del origen de la muestra biológica. Las secuencias de la presente invención pueden emplearse para proporcionar reactivos de polinucleótidos, por ejemplo, iniciadores de reacción en cadena de polimerasa, enfocados hacia loci específicos en el genoma humano, que pueden incrementar la confiabilidad de identificaciones forenses basadas en ADN, por ejemplo, proporcionando otro "marcador de identificación" (es decir, otra secuencia de ADN que es única para un individuo particular) . Como se mencionó arriba, la información real de secuencias de bases puede emplearse para la identificación como una alternativa precisa a los patrones formados por fragmentos generados por enzima de restricción. Las secuencias enfocadas hacia regiones no codificadoras de SEQ ID N0:1 son especialmente apropiadas para este uso puesto que números mayores de polimorfismos ocurren en las regiones no ' codificadoras, lo que hace más fácil diferencial los individuos empleando esta técnica. Ejemplos de reactivos de polinucleótidos incluyen las secuencias de LIG46 o LIG56 o porciones de las mismas, por ejemplo, fragmentos derivados de las regiones no codificadoras de SEQ ID NO:l que tienen una longitud de por lo menos 20 o 30 bases. Las secuencias de LIG46 o LIG56 descritas aquí pueden emplearse además para proporcionar reactivos de polinucleótidos, por ejemplo, sondas marcadas o que pueden ser marcadas, las cuales pueden emplearse, por ejemplc, en una técnica de hibridación in situ, para identificar un tejido específico, por ejemplo, tejido cerebral. Esto puede ser muy útil en casos en los cuales un patólogo forense tiene un tejido de origen desconocido. Paneles de tales sondas de LIG46 o LIG56 pueden emplearse para identificar tejidos por especie y/o por tipo de órgano. De manera similar, estos reactivos, por ejemplo, iniciadores de LIG46 o LIG56 o sondas pueden emplearse para tamizar cultivo tisular para contaminación (es decir, tamizar para determinar la presencia de una mezcla de tipos diferentes de células en un cultivo) . Esta invención se ilustra adicionalmente a través de los siguientes ejemplos que no deben considerarse como limitativos. Los contenidos de todas las referencias, patentes y solicitudes de patente publicadas citadas en esta solicitud se incorporan aquí por referencia. EJEMPLOS Ejemplo 1: Identificación de genes inducidos por leptina Los genes inducidos por leptina de la presente invención fueron identificados mediante la comparación del patrón de expresión de células neuronales de murino tratadas con leptina que expresan OB-RL con el patrón de expresión de células tratadas de manera idéntica pero que no expresan OB-RL. Preparación de células neuronales que expresan el receptor Ob Un vector de adenovirus que expresa el receptor OB de murino de forma larga (ObR-L) (Bauman et al. (1996) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 93:8374-78) fue preparado empleando técnicas estándares. A cepa viral de alta titulación que lleva este vector fue preparado y empleado para infectar células neuronales de murino GT1-7. Las células infectadas fueron incubadas en medio de crecimiento estándar durante 48 horas y después probadas para determinar la expresión de ObR-L mediante la medición de la unión de leptina marcada ( (1995) Cell 83:1263-71). Este ensayo demostró que las células infectadas expresan ObR-L. Preparación de una biblioteca sustraída Las células neuronales de murina que expresan ObR-L descritas arriba fueron puestas en ayunas durante cuatro horas mediante cultivo en un medio exento de suero. Una muestra de las células en ayunas fue estimulada por incubación en presencia de 200 ng/ml de leptina de murino durante tres horas. Una segunda muestra de las células en ayunas fue estimulada de manera ficticia. El ARN total fue aislado para ambas muestras de células y empleado para crear ADNc empleando un conjunto de elemento de síntesis de ADNc SMPRT PCR® (Clontech, Inc.; Palo Alto, CA) . Los dos conjuntos de ADNc (generados a partir de ARN total cosechado a partir de células no tratadas y de células tratadas con leptina) creados de conformidad con lo descrito arriba fueron empleados para crear una biblioteca sustraída empleando el Clontech PCR-Select cDNA Subtraction Kit (Clontech, Inc.). Tamizado de la biblioteca sustraída y análisis de clones positivos Los clones en la biblioteca sustraída fueron clonados en plásmido T-Adv de vector T/A (Advantage PCR Cloning Kit; Clontech, Inc.). Los iniciadores de flanqueo específico de plásmido fueron empleados para amplificar por reacción en cadena de polimerasa insertos de ADNc de la biblioteca. Los productos de reacción en cadena de polimerasa fueron después empleados para crear microconjuntos en filtros de nailon. Los microconjuntos fueron sondeados con ADNc marcado a partir de biblioteca sustraída. Clones positivos identificados en el microconjunto fueron secuenciados, y la expresión diferencial de los clones positivos fue confirmada por análisis Northern virtual en las muestras tratadas y no tratadas originales (ADNc presustraído generado a partir de las muestras de células originales) . Además, un subconjunto de estos clones fue analizado para la distribución de tejido cerebral y periférico por medio de Northern blot. Dos clones positivos < que parecieron representar genes novedosos fueron empleados para sondear una biblioteca de cerebro entero de murino con el objeto de identificar clones de longitud completa. Esto resultó en la identificación de LIG46 y LIG56. Seis de los genes inducidos por leptina identificados como se describió arriba, LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 se describen, con mayores detalles a continuación.

Ejemplo 2: Caracterización de ADNc y proteina de LIG46 de murino y de ser humano El ADNc de LIG46 aislado de conformidad con lo descrito arriba (SEQ ID N0:1) tiene un cuadro de lectura abierta de 1191 nucleótidos (nucleótidos_-_ de SEQ ID N0:1; SEQ ID NO: 3) que codifica una proteína de 397 aminoácidos (SEQ ID N0:2). Esta proteína incluye una secuencia de señal predicha de aproximadamente 32 aminoácidos (del aminoácido 1 a aproximadamente el aminoácido 32 de SEQ ID NO: 2) y una proteína madura predicha de aproximadamente 365 aminoácidos (de aproximadamente el aminoácido 33 hasta el aminoácido 397 de SEQ ID NO: 2; SEQ ID NO: 4). El dominio extracelular de LIG46 se extiende desde aproximadamente el aminoácido 33 hasta aproximadamente el aminoácido 302. La proteína de LIG46 posee un dominio de transmembrana predicho que se extiende desde aproximadamente el aminoácido 303 (extremo extracelular) hasta aproximadamente el aminoácido 320 (extremo - intracelular) de SEQ ID NO: 2. El dominio citoplásmido de LIG46 se extiende desde aproximadamente el aminoácido 321 hasta aproximadamente el aminoácido 397. La proteína de LIG46 tiene cierta similaridad de secuencias con varias galatosiltransferasas . Las galactosiltransferasas han estado implicadas en el proceso de desarrollo. Además, las galactosiltransferasas pueden desempeñar una función en ía señalización de célula a célula mediante la modificación del repertorio de carbohidratos en los receptores de la superficie celular para activar, inhibir o modificar de otra forma (por ejemplo, mediante la alteración de la afinidad de receptor para un ligando) la actividad de receptor. Así, LIG46 puede desempeñar una función de regulación del peso corporal mediante el hecho de influenciar la señalización de célula a célula mediada por moléculas involucradas en la regulación del peso corporal, por ejemplo, leptina. La secuencia de polipéptidos de LIG46 de SEQ ID NO: 2 incluye sitios de N-glicosilación potenciales en los aminoácidos 30-33, 79-82, 89-92, 127-173, y 219-222; sitios potenciales de fosforilación de pr?iteinquinasa C en los aminoácidos 54-56, 202-204, 221-223, 323-325, y 377-379; sitios potenciales de fosforilación de caseinquinasa II en los aminoácidos 31-34, 94-97, 185-188, 221-224, 234-237, y 368-371; un sitio potencial de fosforilación de tirosinquinasa en los aminoácidos 115-122; y un sitio potencial de amidación en los aminoácidos 3-6. Porciones de LIG46 son similares a ciertas galactosiltransferasas. La figura 2 presenta una serie de alineaciones de porciones de la secuencia de aminoácidos de LIG46 con porciones de numerosas galactosiltransferasas, incluyendo: UDP-Gal de Mus muscul us : betaGlcNAc beta 1,3-galactosiltransferasa-I (Número de Acceso AF029790/ SEQ ID NO: )/ IPP-Gal de Mus muscul us : betaGlcNAc beta 1,3- galactosiltransferasa-III (Número de Acceso AF029792) / proteína de señalización secretada neurogénica de Drosophila melanogaster (Número de Acceso U41449/ SEQ ID NO:_) / y UDP-galactosa de Homo sapiens : 2-acetamido-2-desoxi-D-glucosa3beta-galactosiltransferasa (Número de Acceso Y15014; SEQ ID NO:_) . Una secuencia de mejoría se presenta arriba de la línea sólida. Los residuos conservados se presentan en forma sombreada. Estos residuos son más probablemente conservados en variantes funcionales de LIG46. La figura 3 es gráfica de hidropatía de LIG46. La hidrofobicidad relativa se muestra arriba de la línea de puntos^ y la hidrofilicidad relativa se muestra debajo de la línea de puntos. La figura 7 muestra la secuencia de ADNc de un clon de LIG46 humano de longitud completa. La figura 8 muestra la secuencia predicha de aminoácidos de LIG46 humano. El ADNc de LIG46 humano representado en la figura 7 (SEQ ID NO: ) tiene un cuadro de lectura abierto de 1191 nucleótidos que codifican una proteína de 397 aminoácidos (SEQ ID NO: ) . Esta proteína incluye una secuencia de señal predicha de aproximadamente 32 aminoácidos (del aminoácido 1 a aproximadamente el aminoácido 32 de SEQ ID NO: ) y una proteína madura predicha de aproximadamente 365 aminoácidos (de aproximadamente el aminoácido 33 hasta el aminoácido 397 de SEQ ID NO: ; SEQ ID NO: ) . La figura 9 representa una alineación de las secuencias de ADNc de LIG46 de ser humano (secuencia superior) y LIG46 de murino (secuencia inferior) . La figura 10 representa una alineación de las secuencias predichas de aminoácidos de LIG46 de ser humano (secuencia superior) y LIG46 de murino (secuencia inferior) . Mapeo genómico de LIG46 LIG46 fue mapeado sobre el cromosoma humano 2, 17.9 cR30oo telomérico para el marcador de estructura de Whitehead Institute D2S290 (resultado LDO = 15.5) y 23.5 cR30oo centromérico del marcador de estructura WI-6130 de Whitehead (resultado LDO = 13.6). Esta región corresponde a la ubicación citogénica 2pl2-13, dentro o justo fuera del intervalo mínimo para el síndrome de Alstróm (Macari et al. (1988) Human Genet. 103:658-61). El síndrome de Alstróm es un trastorno recesivo autosomal caracterizado por obesidad en la niñez, degeneración de pigmento retinal, sordera neurogénica, diabetes mellitus no insulinodependiente, nefropatía crónica, e hiperlipidemia. Otros síntomas incluyen: cardiomiopatía, acantosis nigricans, hipotiroidismo, deficiencia de hormona de crecimiento, alopecia progresiva, hiperuricemia, ginecomastía, así como fertilidad reducida (Russell-Eggitt et al. (1998) Ophthalmology 105:1274-80). En resumen, el gen LIG46 fue mapeado empleando el Genebridge 4 Radiation Hybrid Panel. Un par de iniciadores dentro de la región no trasladadas 3' de LIG46 (directa- CCATGTTGGGGTCTCACATTAGAG, SEQ ID NO: ; y reversa- GGTAAGTCAGACCAATATCCTGCC, SEQ ID NO: ) se emplearon para amplificar ADN a partir del panel Genebridge 4. Los productos de reacción en cadena de polimerasa fueron manejados en un gel de agarosa al 2%, teñidos con SYBR Gold y explorados. El análisis de enlaces se efectúo empleando el paquete de programática Map Manager QT623. Las moléculas de ácido nucleico de LIG46 pueden ser empleadas en el diagnóstico del síndrome de Alstróm. Además, es posible que mutaciones en LIG46 provoquen el síndrome de Alstróm. Si es el caso, el polipéptido de LIG46 y moléculas de ácido nucleico así como anticuerpos dirigidos contra LIG46 y moduladores de la expresión de LIG46 o actividad de LIG46 pueden emplearse para tratar el síndrome Alstróm y/o varios síntomas del síndrome Alstróm. Ejemplo 3: Distribución de LIG46 de ARNm La expresión de LIG46 en tejido de murino fue analizada La expresión de LIG46 en tejido de murino fue analizada empleando hibridación Northern blot. El análisis de las manchas de tejido reveló que LIG46 es expresado en su nivel más alto en el corazón y en el de hígados seguido por pulmones y riñon, después cerebro, después bazo, testículos, y músculos esqueletales. El análisis de la expresión de LIG46 en cerebro de murino indicó que LIG46 es expresado por lo menos en el hipotálamo (incluye: el núcleo arqueado, el hipotálamo ventral/medio, y el núcleo superquiasmático, el hipocampo, la corteza y el estrato. Ejemplo 4: Secreción de LIG46 La proteína de LIG 46 es homologa a brainiac de D. melanogaster (Goode et al., (1996) Development 122:3863-79), una proteína secretada (figura 2). Como se comentó arriba, LIG46 tiene una secuencia de señal predicha en su terminal amino. Por consiguiente, para determinar si la proteína de LIG46 es secretada, se fusionó LIG46 de longitud completa (aminoácidos 1-397) con fosfatasa alcalina empleando métodos similares a los métodos previamente descritos 8fusión en la terminal carboxi de LIG46; Cheng y Flanagan (1994) Cell 79:157-168/ Tartaglia et al. (1995) Cell 83:1263-71). Este constructo fue transfectado de manera transiente en células 293T humanas. 48 horas después de la transfección, el medio de crecimiento fue ensayado para determinar la actividad fosfatasa alcalina (White et al., (1997) Proc. Nati. Acad. -Sci. USA 94:10657-10662) empleando el conjunto de elementos de detección de fosfatasa alcalina Great EscAPE (Clontech Inc.). se observó un gran incremento de la actividad fosfatasa alcalina en el medio de crecimiento a partir de células transfectadas en comparación con células transfectadas de manera ficticia, lo que indica que la proteína de LIG46 es secretada y que la secuencia de señal de LIG46 es funcional.

Ejemplo 5: La expresión de LIG46 es inducida por leptina in vivo Ratones ob/ob C57BL6 recibieron una inyección (a través de interperitoneo (IP)) con 100 µl ya sea de una solución salina amortiguada con fosfato (PBS) (inyección ficticia) o bien con PBS complementado con 100 µg de leptina (leptina inyectada) (R&D Systems Inc., Minneapolis, MN) . Después de 1 o 3 horas de tratamiento, los animales fueron sometidos a eutanasia por asfixia con C02, los cerebros fueron cosechados, rebanados, y el hipotálamo analizado mediante hibridación in situ empleando una sonda de antisentido radiomarcada de 386 pares de bases, sobre al región codificadora de LIG46. Un análisis comparativo de las rebanadas hipotalámicas provenientes de los animales con inyección ficticia y con inyección de leptina indica que un transcripto de LIG46 es inducido en el núcleo arqueado y en el hipotálamo ventromedial por la leptina. Ejemplo 6: El efecto de oligodesoxinucleótidos de antisentido de LIG46 sobre la alimentación de ratones machos obesos (ob/ob) Para este estudio, se sintetizaron un oligodesoxinucleótido de antisentido protegido con fosfotioato y su secuencia de control respectiva (sentido) . El oligodesoxinucleótido de antisentido se enfoca hacia el ARNm de codón de inicio de LIG46 en la posición 39.

Antisentido: 5' CTT CGA CGC CCC ACA CTC AT 3' (SEQ ID NO: ) Sentido: 5' ATG AGT GTG GGG CGT CGA AG 3' (SEQ ID NO: ) Ratones machos obesos ob/ob C57BL/6J (45 g) fueron alojados individualmente en jaulas de macrolón (22 ± 2° C/ 12:12 horas ciclo luz/obscuridad con luces pagadas a las 6:00 pm) . Se proporcionó a los ratones agua del grifo y una dieta de alimento para ratones libi tum. Los ratones fueron implantados estereotáxicamente con una cánula de guía crónica dirigida hacia el tercer ventrículo (intracerebroventricular) una semana antes de este experimento. El efecto de tratamiento de antisentido de LIG46 sobre la disminución inducida por leptina en cuanto a ingesta de v alimentos fue estudiado el día 5. Los ratones fueron tratados de manera intracerebroventricular los días 1 y 3 con 18 µg de oligodesoxiribonucleótido de antisentido LIG46, 18 µg de oligodesoxiribonucleótido de sentido (control) o bien 2 µl de agua sin ARNasa. Las inyecciones intracerebroventriculares fueron efectuadas a las 3 pm, los pre-tratamientos de control y oligodesoxiribonucleótido fueron seguidos por una inyección intraperitoneal de 1 mg/kg de leptina o solución salina amortiguada con fosfato (vehículo) , que se llevó a cabo a las 5 pm el día 5 y la ingesta de alimento fue medida cada cuatro horas después de la aplicación de leptina o vehículo. Los resultados de este estudio aparecen en la figura 6. La disminución inducida por leptina en cuanto a la ingesta de alimentos fue mucho mayor en presencia de oligonucleótido de antisentido de LIG46 que en presencia de nucleótido de sentido LIG46 o control de PBS. Ejemplo 7: El efecto de oligodesoxinucleótidos de antisentido de LIG46 sobre la alimentación de ratones machos delgados Para este estudio, se sintetizaron un oligodesoxinucleótido de antisentido protegido con fosfotioato y su secuencia de control respectiva (sentido) . El oligodesoxinucleótido de antisentido se enfoca hacia el ARNm de codón de inicio de LIG46 en la posición 39. Antisentido: 5' CTT CGA CGC CCC ACA CTC AT 3' (SEQ ID NO: ) Sentido: 5' ATG AGT GTG GGG CGT CGA AG 3' (SEQ ID NO: ) Ratones machos delgados C57BL/6J (24 g) fueron alojados individualmente en jaulas de macrolón (22 ± 2o C; 12:12 horas ciclo luz/obscuridad con luces pagadas a las 6:00 pm) . Se proporcionó a los ratones agua del grifo y una dieta de alimento para ratones libi tum. Los ratones fueron implantados estereotáxicamente con una cánula de guía crónica dirigida hacia el tercer ventrículo (intracerebroventricular) una semana antes de este experimento. Se estudio el efecto de tratamiento de antisentido de LIG46 sobre la disminución inducida por leptina en cuanto a ingesta de alimentos fue estudiado el día 5. por consiguiente, los ratones fueron tratados de manera intracerebroventricular los días 1 y 3 con 18 µg de oligodesoxiribonucleótido de antisentido LIG46, 18 µg de oligodesoxiribonucleótido de sentido (control) o bien 2 µl de agua sin ARNasa. Las inyecciones intracerebroventriculares fueron efectuadas a las 3 pm, los pre-tratamientos de control y oligodesoxiribonucleótido fueron seguidos por una inyección intraperitoneal de 1 mg/kg de leptina o solución salina amortiguada con fosfato (vehículo) , que se llevó a cabo a las 5 pm el día 5 y se la ingesta de alimento fue medida cada cuatro horas después de la aplicación de leptina o vehículo. Los resultados de este estudio aparecen en la figura 11. La disminución inducida por antisentido de LIG46 en cuanto a la ingesta de alimentos fue mucho mayor en presencia de leptina que en de control de PBS. Así, la ingesta de alimentos puede ser disminuida en ratones delgados mediante la disminución de la expresión de proteína de LIG46. Además, esta disminución de la ingesta de alimentos es incrementada cuando se administra leptina, lo que demuestra que la leptina puede sensibilizar los ratones delgados a los efectos de un antagonista de LIG46. Ejemplo 8: Caracterización de ADNc y proteína de LIG56 El ADNc de LIG56 de longitud completa aislado de conformidad con lo descrito arriba (SEQ ID NO: 5) aparece en la figura 4. Este ADNc tiene un cuadro de lectura abierta de 1200 nucleótidos (nucleótidos 1-1200 de SEQ ID NO: 5, SEQ ID N0:7) que codifica una proteína de 400 aminoácidos (SEQ ID NO: 6).

La secuencia de polipéptido de LIG56 de SEQ ID NO: 6 incluye sitios potenciales de N-glicosilación en los aminoácidos 252-255; sitios potenciales de fosforilación de proteinquinasa C en los aminoácidos 67-69, 75-77, 203-205, 218-220, 295-297, y 299-301; sitios potenciales de fosforilación de caseinquinasa II en los aminoácidos 126-129, 170-173, 203-206, 256-259, 291-294, 341-344, y 345-349; un sitio potencial de fosforilación de tirosinquinasa en los aminoácidos 233-241; sitios potenciales de N-Miristiculación en los aminoácidos 66-71, 85-90, 116-121, y 308.313; y un sitio potencial de amidación en los aminoácidos 63-70. LIG56 puede ser una proteína de unión de GTP. Porciones de proteína de LIG56 son similares a una o varias proteínas de unión de GTP de murino (No. de acceso GenBank: L38444; U15636; M63630; U19119; y U53219) . La proteína de LIG456 posee un dominio de tipo proteína de unión con GTP (aminoácidos 12 a 283 de SEQ ID NO: 6) y un dominio de tipo LRG-47 (aminoácidos 24 a 177 de SEQ ID NO: 6). La figura 5 es una gráfica de hidropatía de LIG56. La hidrofobicidad relativa se muestra arriba de la línea de puntos, y la hidrofilicidad relativa se muestra debajo de la línea de puntos . Ejemplo 9: Distribución de ARNm de LIG56. La expresión de LIG56 es tejido de murino fue analizada empleando hibridación Northern blot. El análisis de las muestras de tejido totales reveló que LIG56 es expresado en su nivel más alto en el corazón, seguido por el hígado, después de riñones, después los pulmones y después los músculos esqueletales, después bazo. El análisis de la expresión de LIG56 en cerebro de murino indicó que LIG56 es expresado por lo menos en el hipocampo (incluye: por lo menos, el giro dentado) . Ejemplo 10: Caracterización y distribución de ARNm de clon 50 (Tgtp) Un análisis de secuencias de clon 50 identificado en el míeroconjunto descrito arriba, reveló, que el clon codifica Tgtp de murino (No. de acceso GenBank L38444), una proteína de enlace de trisfosfato de nucleótido de guanina específico para célula T (Carlow et al. (1994) J. Immunol. 154:1724-34). La expresión del gen 50 en tejido de murino fue analizada empleando hibridación de Northern blot. El análisis de las manchas de tejido totales reveló que el clon 50 es expresado en su nivel más alto en el corazón, seguido por los riñones, después pulmones y músculo esqueletal, después hígado. El análisis de la expresión de clon 50 en cerebro de murino indicó que el clon 50 es expresado por lo menos en el plexo coroideo. Ejemplo 11: Caracterización y distribución de ARNm de clon 44 (LRG-47) El análisis de secuencia de clon 44 identificado en el microconjunto descrito arriba reveló, que el clon codifica LRG-47 de murino (No. de acceso GenBank U19119) una proteína inducida por LPS, IFN-?, y IFN-a/ß y tiene cierta homología con proteína de unión de GTP (Sorace et al. (1995) J. Leukocite Biol. 58:477-84). La expresión de ARNm de LRG-47 de clon en tejido de murino fue analizada empleando hibridación de Northern blot. El análisis de las manchas de tejido totales reveló que LRG-47 es expresado en su nivel más alto en el corazón, seguido por los riñones, después hígado, después músculo esqueletal, después pulmón, después bazo. El análisis de la expresión de ARNm de LRG-47 en cerebro de murino indicó que LRG-47 es expresado por lo menos en la corteza, el hipocampo, el plexo coroideo, el núcleo habenuclear medio y el hipotálamo (incluyendo por lo menos: el núcleo arqueado y el núcleo paraventricular) . Ejemplo 12: LRG-47 es inducido por leptina in vivo Ratones ob/ob C57BL6 recibieron una inyección (IP) de 100 µl ya sea de PBS o bien PBS complementado con 100 µg de leptina (R&D Systems Ine) . Después de 70 minutos, los animales fueron sometidos a eutanasia por asfixia con C02, los cerebros fueron cosechados, rebanados, y el hipotálamo analizado mediante hibridación in situ empleando una sonda de antisentido radiomarcada de 762 pares de bases contra secuencias en la región 5' no trasladada del transcripto de LRG-47. Un análisis comparativo de rebanadas hipotalámicas provenientes de los animales que recibieron una inyección ficticia y de los animales que recibieron una inyección de leptina indica que el transcripto de LRG-47 es inducido en el núcleo arqueado por la leptina, lo que demuestra que el transcripto de LRG-47 es un gen inducido por leptina in vivo. Ejemplo 13: Caracterización y distribución de ARNm del clon 10 (RC10-II) Análisis de secuencias del clon 10 identificado en el microconjunto descrito arriba reveló que el clon codifica RC10-II de murino (No. de acceso GenBank D21800) , una subunidad de 20S proteasoma de cerebro embriónico de rata (Nishimura et al. (1993) FEBS Lett 336:462-66). Se ha sugerido que RC10-II es una subunidad proteasomal que se requiere para la expresión de la actividad tríptica (Nishimura et al., supra). La expresión de ARNm del clon 10 en tejido de murino fue analizada empleando hibridación de Northern blot. El análisis de las manchas de tejido totales reveló que el clon 10 es expresado en su nivel más alto en el corazón, hígado, músculo esqueletal y riñon, seguido por cerebro, pulmón, y testículos. El análisis de la expresión de ARNm del clon 10 en cerebro de murino indicó que el clon 10 es expresado por lo menos en la corteza, el hipocampo, el núcleo habenuclear, tálamo y el hipotálamo (incluyendo el núcleo arqueado y el hipotálamo ventromedial) . Ejemplo 14: Caracterización y distribución de ARNm del clon 67 (Stral3) El análisis de secuencias del clon 67 identificado en el microconjunto descrito arriba reveló que el clon codifica Stral3 (No. de acceso GenBank AF010305) una proteína hélice-bucle-hélice inducible por ácido retinoico (Boudjelal et al. (1997) Genes Dev. 11:2052-65). Se cree que Stral3 puede actuar como represor de transcripción activada y se cree que desempeña una función en la diferenciación neuronal (Boudjelal et al., supra). La expresión de ARNm del clon 67 en tejido de murino fue analizada empleando hibridación de Northern blot. El análisis de las manchas de tejido totales reveló que el clon 10 es expresado en su nivel más alto en hígado seguido por el corazón, después músculo esqueletal, después cerebro, después riñon. El análisis de la expresión de ARNm del clon 67 en cerebro de murino indicó que el clon 67 es expresado por lo menos en la corteza, el hipocampo (CAÍ, CA2 y giro dental) , tálamo lateral, hipotálamo (incluyendo el núcleo arqueado) . Ejemplo 15: Stral3 es inducido por leptina in vivo Ratones ob/ob C57BL6 recibieron una inyección (IP) de 100 µl ya sea de PBS o bien PBS complementado con 100 µg de leptina (R&D Systems Ine) . Después de 60 minutos, los animales fueron sometidos a eutanasia por asfixia con C02. Los cerebros fueron cosechados, rebanados, y se estudió el hipotálamo mediante hibridación in situ empleando una sonda de antisentido radiomarcada de 328 pares de bases en la región 5' no trasladada del transcripto de LRG-47. Un análisis comparativo de rebanadas hipotalámicas provenientes de los animales que recibieron una inyección ficticia y de los animales que recibieron una inyección de leptina indica que el transcripto de Stral3 es inducido en el núcleo arqueado por la leptina, lo que soporta la reclamación que el transcripto de Stral3 es un gen inducido por leptina in vivo. Ejemplo 16: Ensayos para determinar la actividad LIG46 Puesto que LIG46 parece ser una galactosiltransferasa, puede ser posible identificar moduladores de la actividad de LIG46 empleando ensayos basados en la medición de la actividad de miembros de la familia de glicosiltransferasa y galactosiltransferasa (véase, por ejemplo, Hennet et al. (1998) J. Biol. Chem 1998 273:58-65; Current Protocols in Molecular Biology (1993) Ausubel et al., eds., Wiley Interscience (New York); y Wandall et al. (199) J. Biol. Chem 272 (38) : 23503-14) . Evidentemente los sustratos donadores y receptores utilizados por LIG46 pueden diferir de los sustratos descritos en la literatura previamente. Los expertos en la materia pueden adaptar ensayos utilizados para otros miembros de la familia de glicosiltransferasa y galactosiltransferasas para su uso con LIG46.

Equivalentes Los expertos en la materia reconocerán o bien podrán determinar mediante el uso solamente de experimento de rutina muchos equivalentes de las modalidades específicas de la invención descrita aquí. Tales equivalentes se encuentran abarcados por las reivindicaciones siguientes. v LISTA DE SECUENCIAS <110> Millennium Pharmaceuticals, Inc. <120> GENES INDUCIDOS POR LEPTINA <130> 07334/126W1 <140> PCT US99/20722 <141> 1999-09-10 <150> US 09/292,228 <151> 1999-04-15 <160> 17 <170> FastSEQ para Windows Versión 3.0 <210> 1 v <211> 1196' <212> ADN <213> Mus musculus <400> 1 agatgagtg ggggcgtcga agagtcaagt tgctgggcat cctgatgatg gcaaatgtct 60 tcatttattt gattgtggaa gtctccaaaa acagtagcca agacaaaaat ggaaagggag 120 gagtaataat ccc?aaagag aagttctgga agccacccag cactccccgg gcatactgga 180 acagggaaca ggagaagctg aacaggtgg acaatcccat cttgaacag? gtggccaatc 240 agaca?ggga gctagccaca tctccaaaca caagtcacct gagctattgt gaaccágact 300 cgacggtcat gacagctgtg acagatttta ataatctgcc ggacagattt aaagactttc 360 tcttgtattt gagatgccgg aattactcgc tgcttataga tcaaccgaag aaatgtgcaa 420 agaagccctt cttactattg gcgataaagt ccctcattcc acattttgcc agaaggcaag 480 caattcggga gtcttggggc cgagaaacca acgtagggaa ccagacagta gtgagggtct 540 tsctgttggg caagacaccc ccagaggaca accaccctga cctttcggac atgettaagt 600 ttgagagtga caagcaccag gacatcctca tgt?gaacta tagagacaca ttcttcaacc 660 tgtccctgaa ggaagtgctg tttcttaggt gggtgagcac ttcctgtcca gacgcagagt 720 ttgtcttcaa gggcgatgat gacgtgtttg tgaacaccca tcacatcctt aattacttga 780 atagcttatc caagagcaaa gccaaagact tgttcatagg tgacgtgatc cacaatgctg 840 ggcctcaccg ggataagaaa ctgaagtact acatcccaga ag cttctac accggcgtct 900 acccaccgt tgccgggggt ggtggattcc tgtactccgg cccccttgcc ttgaggctgt 960 acagtgcgac tagccgggtc catctctacc ctattgatga tgtttatacg ggaatgtgcc 1020 ttcagaaact gggccttgtt ccagagaagc acaaaggctt caggacattt gatattgaag 1080 agaaaaataa gaaaaatatt tgttcctata tagacctaat gttagtacat agcagaaaac 1140 ctcaagagat gattgatatc tggtctcagt tgcaaagtcc taatttaaaa tgctga 1196 <210> 2 <211> 397 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 2 Met Ser Val Gly ?rg ?rg ?rg Val Lya Leu Leu Gly He Leu Met Met 1 5 10 15 ?la ?ßn Val Phß ?lß Tyr Leu lie Val Glu Val Smx Lys ?ßn Ser Ser 20 25 30 Gln ?ßp Lys ?sn Gly Lys Gly Gly Val He He Pro Lyß Glu Lyß Phe 35 40 45 Trp Lys Pro Pro Sßr Thr Pro ?rg ?la Tyr Trp ?ßn ?rg Glu ßln ßlu 50 55 60 Lyß Leu ?sn ?rg Trp Tyr ?sn Pro Ile Leu ?sn ?rg Val ?la ?sn Gln 65 70 75 80 Thr Gly Glu Leu ?la Thr Ser Pro ?sn Thr Ser His Uu Ser Tyr Cyß 85 90 95 Glu Pro ?ßp Sax Thr Val Met Thr ?la Val Thr ?ßp Phe ?ßn ?ßn Leu 100 105 110 Pro ?ßp ?rg Phe Lyß ?ßp Phe Leu Leu Tyr Leu ?rg Cyß ?rg ?ßn Tyr 115 120 125 Ser Leu Leu lie ?ßp Gln Pro Lyß Lyß Cyß ?la Lyß Lyß Pro Phe Leu 130 135 140 Leu Leu ?la lie Lyß Sßr Leu ?le Pro Hiß Phe ?la.?rg ?rg Gln ?la 145 150 155 160 lie ?rg Glu"Ser Trp Gly'?rg Glu Thr ?ßn Val ßly ?ßn Gln Thr Val 165 170 175 Val ?rg Val Phe Leu Leu Gly Lyß Thr Pro Pro Glu ?ßp ?ßn Hia Pro 180 185 190 ?ßp Leu Ser ?ßp Mßt Leu Lyß Phß Glu Ser ?ßp Lyß Hlß ßln ?ßp Zle 195 200 205 Leu Het Trp ?ßn Tyr ?rg ?ßp Thr Phe Phe ?ßn Leu Ser Leu Lyß ßlu 210 215 220 Val Leu Phe Leu ?rg Trp Val Ser Thr Ser Cyß Pro ?ßp ?la ßlu Phe 225 230 235 240 Val Phe Lyß Gly ?ßp ?sp ?ßp Val Phe Val ?ßn Thr His His Zle Leu 245 250 255 ?ßn Tyr. eu ?ßn Sßr Leu Ser Lys Ser Lys ?la Lyß ?sp Leu Phe He 260 265 270 Gly ?ßp Val lie Hiß ?ßn ?la Gly Pro Hiß ?rg ?ßp Lys Lys Leu Lys 275 280 285 Tyr Tyr lie Pro Glu Val Phe Tyr Thr Gly Val Tyr Pro Pro Tyr ?la 290 295 300 Gly Gly Gly Gly Phe Leu Tyr Ser Gly Pro ?la Leu Leu ?rg Leu Tyr 305 310 315 320 Ser ?la Thr Sßr ?rg Val Hlß Leu Tyr Pro He ?ßp ?ßp Val Tyr Thr 325 330 335 Gly Met Cyß Leu Gln Lys Leu Gly Leu Val Pro Glu Lys His Lys Gly 340 345 350 Phe ?rg Thr Phe ?ßp Zle Glu Glu Lyß ?sn Lyß Lyß ?ßn Xle Cys Ser 355 360 365 Tyr He ?ßp Leu Met Leu Val Hiß Ser ?rg Lyß Pro Oln Olu Mßt He 370 375 380 ?ßp He Trp Ser Gln Leu Gln Ser Pro ?ßn Leu Lyß Cyß 385 390 395 <210> 3 <211> 1191 <212> ADN <213> Mus musculus <400> 3 atgagtgtgg ggcgtcgaag agtcaagttg ctgggcatcc tgatgatggc aaatgtcttc 60 atttatttga ttgtggaagt ctccaaaaac agtagccaag acaaaaatgg aaagggagga 120 gtaataatcc cgaaagagaa gttctggaag ccacccagca ctccccgggc atactggaac 180 agggaacagg agaagctgaa caggtggtac aatcccatct tgaacaggg ggccaatcag 240 acaggggagc tagccacatc tccaaacaca agtcacctga gctattgtga accagactcg 300 acggtcatga cagctgtgac agattttaat aatctgccgg acagatttaa agactttctc 360 ttgtatttga gatgccggaa ttactcgctg cttatagatc aaccgaagaa atgtgcaaag 420 aagcccttct tactattggc gataaagtcc ctcattccac attttgccag aaggcaagca 480 attcgggagt cttggggccg agaaaccaac gtagggaacc agacag agt gagggtcttc 540 ctgttgggca agacaccccc agaggacaac caccctgacc tttcggacat gcttaagttt 600 gagagtgaca agcaccagga catcctcatg tggaactata gagacacatt cttcaacctg 660 tccctgaagg aagtgctgtt tcttaggtgg gtgagcactt cctgtccaga cgcagagttt 720 gtcttcaagg gcgatgatga cgtgtttgtg aacacccatc acatccttaa ttacttgaat 780 agcttatcca agagcaaagc caaagacttg ttcataggtg acgtgatcca c a gctgg 840 cctcaccggg ataagaaact gaagtactac atcccagaag tcttctacac cggcgtctac 900 ccaccgtatg ccgggggtgg tggattcctg tactccggcc cccttgcctt gaggctgtac 960 agtgcgacta gccgggtcca tctctaccct attgatgatg tttatacggg aatgtgcctt 1020 cagaaactgg gccttgttcc agagaagcac aaaggcttca ggacatttga tattgaagag 1080 a&aaataaga aaaatatttg ttcctatata gacctaatgt tagtacatag cagaaaacct 1140 caagagatga ttgatatctg gtctcagttg caaagtccta atttaaaatg 1191 <210> 4 <211> 365 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 4 Gln ?ßp Lyß ?sn Gly Lyß Gly Oly val Xle He Pro Lyß Glu Lyß Phe 1 5 10 15 Trp Lyß Pro Pro Sßr Thr Pro ?rg ?la Tyr Trp ?ßn ?rg ßlu ßln Olu 20 " 25 30 Lyß Leu ?an ?rg Trp Tyr ?an Pro He Leu ?ßn ?rg Val ?la ?ßn Gln 35 40 45 Thr Gly Glu Leu ?la Thr Ser Pro ?sn Thr Sßr Bis Leu Sßr Tyr Cyß 50 55 60 ßlu Pro ?ßp Ser Thr Val Met Thr ?la val Thr ?ßp Phe ?ßn ?ßn Leu 65 70 75 80 Pro ?ßp ?rg Phe Lys ?ßp Phe Leu Leu Tyr Leu ?rg Cyß ?rg ?ßn Tyr 85 90 95 Ser Leu Leu He ?sp ßln Pro Lys Lys Cys ?la Lys Lyß Pro Phe Leu 100 105 110 Leu Leu ?la He Lyß Sßr Leu He Pro Hiß Phe ?la ?rg ?rg Oln ?la .115 120 125 He ?rg ßlu Ser Trp Gly ?rg Olu Thr ?ßn Val ßly ?an ßln Thr Val 130 135 140 Val ?rg Val Phe Leu Leu Oly Lyß Thr Pro Pro Glu ?ßp ?ßn Hiß Pro 145 150 155 160 ?ßp Leu Ser ?ßp Met Leu Lyß Phe Glu Ser ?ßp Lyß Hiß ßln ?ßp Xle 165 170 175 Leu Met Trp ?ßn Tyr ?rg ?sp Thr Phß Phe ?ßn Leu Ser Leu Lyß ßlu 180 185 190 Val Leu Phe Leu ?rg Trp Val Ser Thr Sßr Cyß Pro ?ßp ?ia Olu Phe 195 200 205 Val Phe Lyß Gly ?sp ?ßp ?ßp Val Phe Val ?ßn Thr His His Xle Leu 210 215 220 ?ßn Tyr Leu ?ßn Ser Leu Ser Lyß Ser Lyß ?la Lyß ?ßp Leu Phe xle 225 230 235 240 ßly ?ßp Val He Bis ?ßn ?la ßly Pro Hiß ?rg ?ßp Lyß Lyß Leu Lyß 245 250 25S Tyr Tyr He Pro Glu Val Phß Tyr Thr ßly Val Tyr Pro Pro Tyr ?la 260 265 270 Oly Gly ßly ßly Phe Leu Tyr Ser ßly Pro ?la Leu Leu ?rg Leu Tyr 275 280 285 Ser ?la Thr Ser ?rg Val Hiß Leu Tyr Pro Xle ?ßp ?ßp Val Tyr Thr 290 295 300 Oly Met Cyß Leu Gln Lya Leu ßly Leu Val Pro Olu Lyß Hlß Lyß Gly 305 310 315 ? 320 Phe ?rg Thr Phe ?ßp He Glu ßlu Lyß ?ßn Lyß Lyß ?ßn Xle Cyß Sßr 325 330 335 Tyr He ?sp Leu Hßt Leu Val Ble Ser ?rg Lys Pro ßln Glu Ket He 340 345 350 ?sp He Trp Ser Gln Leu Gln Ser Pro ?sn Leu Lyß Cyß 355 360 365 <210> • 5 <211> • 1203 <212> • ADN <213> - Mus musculus <400> • 5 60 atgatttgcc cttcagcttt actggttatt ttaagaaatt taatacggga agaaaaaatc 120 •tttctcaag agatcctcaa tttgattgaa ttaaggatga aaaaagggaa tattcagttg 180 acaaac ctg caatcagtga tgcattaaaa gaaatcgata gtagtgtgct caatgttgct 240 gtcaccgggg agacgggatc agggaagtcc agcttcatca ataccctgag aggcattggg 300 aatgaagaag aaggtgcagc taaaactggg gtggtggagg taaccatgga aagacatcca caca 360 tacaaacacc ccaatatacc caatgtggtt ttttgggacc tgcctgggst tggaag atgagtacga tttcttcatt 420 aatttcccac caaacactta cctggagaaa atgaagttct aatcagcatg 480 attatttcgg ccacacgctt caagaaaaat gatatagaca ttgccaaagc aaatgaagca 540 atgaagaagg aattctactt cgtgagaacc aaggtggact ctgacataac ccttaactgt 600 gatggcaaac ctcaaacctt tgacaaagaa aaggtcctgc aggacatccg etetaacaaa 660 gtgaacacct ttagggagaa tggcattgct gagccaccaa tcttcctgct 720 aatgtttg c actatgactt ccccgtcctg atggacaagc tgataagtga cctccctatc 780 tacaggagac acaattttat gg ctcctta cccaatatca cagatteagt cattgaaaag 840 aagcggcaat ttctgaagca raggatttgg ctggaaggat ttgctgctga cctagtgaat 900 atcatccctt ctctgacctt tctcttggac agtgatttgg agactctgaa gaaaagcatg ßtt agctag?gac 960 tggagtggat gaaacatctt tgcagag aaattctacc gcactggt 1020 tgggaaatag aggtggatca ggtggaggcc atgataaaat ctcctgctgt gttcaaacct 1080 acagatgaag aaacaataca agaaaggctt tcaagatata ttcaggagtt ctgtttggct aatgggtact tacttcctaa aaatagtttt cttaaagaaa tattttacct gaaatattat 1140 actettetta aagagatatg tttaagaaac 1200 ttccttgaca tggtgactga ggatgc aaa 1203 tag <210> 6 <211> 400 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 6 Met He Cyß Pro Ser ?la Leu Leu Val He Leu ?rg ?sn Leu He ?rg 1 . 5 10 15 Glu Glu Lys lie He Ser ßln Glu He Leu ?ßn Leu He Glu Leu ?rg 20 25 30 Met Lyß Lyß Gly ?ßn He Gln Leu Thr ?ßn Ser ?la He Ser ?sp ?la 35 40 45 Leu Lya Olu He ?ßp Ser Smx Val Leu ?ßn Val ?la Val Thr Gly Glu 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Lys Ser Ser Phe Xle ?ßn Thr Leu ?rg Gly He Gly 65 70 75 80 ?ßn Glu Glu Glu Gly ?la ?la Lyß Thr Gly Val Val Glu Val Thr Met 85 90 95 Glu ?rg Hiß Pro Tyr Lys His Pro ?ßn He Pro ?ßn Val Val Phe Trp 100 105 110 ?ßp Leu Pro Gly Xle Gly Ser Thr ?ßn Phe Pro Pro ?ßn Thr Tyr Leu 115 120 125 Glu Lyß Met Lyß Phe Tyr Glu Tyr ?ßp Phe Phe He He Xle Ser ?la 130 135 140 Thr ?rg Phe Lys Lys ?sn ?sp He ?ßp Xle ?la Lyß ?la Xle Ser Met 145 150 155 160 Met Lyß Lyß ßlu Phe Tyr Phß Val ?rg Thr Lyß Val ?sp Ser ?ßp Xle 165 170 175 Thr ?ßn Glu ?la ?ßp Gly Lys Pro Gln Thr Phe ?ßp Lyß Glu Lyß Val 180 185 190 Leu Gln ?ßp He ?rg Leu ?ßn Cyß Val ?sn Thr Phß ?rg Glu ?an Gly 195 200 205 He ?la ßlu Pro Pro ?lß Phe Leu Leu Ser ?ßn Lyß ?an Val Cyß Hiß 210 215 220 Tyr ?ßp Phe Pro Val Leu Met ?ßp Lyß Leu He Ser ?ßp Leu Pro He 225 230 235 240 Tyr ?rg ?rg His ?ßn Phe Met Val Ser Leu Pro ?sn He Thr ?ßp Ser 245 250 255 Val Xle ßlu Lyß Lyß ?rg Gln Phe Leu Lyß Gln ?rg He Trp Leu Glu 260 265 270 Gly Phe ?la ?la ?ap Leu Val ?ßn Xle Xle Pro Ser Leu Thr Pbe Leu 275 280 285 Leu ?ßp Ser ?ßp Leu ßlu Thr Leu Lyß Lyß Ser Met Lyß Phe Tyr ?rg 290 295 300 Thr Val Phe ßly Val ?ßp ßlu Thr Ser Leu ßln ?rg Leu ?la ?rg ?ßp 305 310 315 320 Trp Glu He Glu Val ?ßp ßln Val ßlu ?la Met Xle Lyß Ser Pro ?la 325 330 335 Val Phe Lyß Pro Thr ?ßp Glu Glu Thr He Gln Glu ?rg Leu Ser ?rg 340 345 350 Tyr Xle ßln ßlu Phe Cyß Leu ?la ?ßn Oly Tyr Leu Leu Pro Lyß ?ßn 355 360 365 Ser Phe Leu Lyß ßlu He Phe Tyr Leu Lyß Tyr Tyr Phe Leu ?ßp Het 370 375 380 Val Thr Olu bp ?la Lyß Thr Leu Leu Lyß ßlu ?le Cyß Leu ?rg ?ßn 385 390 395 400 <210> 7 <211> 1200 <212> ADN <213> Mus musculus <400> 7 atgatttgcc cttcagcttt actggttatt ttaagaaatt taatacggga agaaaaaatc 60 atttctcaag agatcctcaa tttgattgaa ttaaggatga aaaaagggaa tattcagttg 120 acaaactctg caatcagtga tgcattaaaa gaaatcgata gtagtgtgct caatgttgct 180 gtcaccgggg agacgggatc agggaagtcc agcttcatca ataccctgag aggcattggg 240 aatgaagaag aaggtgcagc taaaactggg gtggtggagg taaccatgga aagacatcca 300 tacaaacacc ccaatatacc caatgtggtt tttt?ggacc tgcctgggat tggaagcaca 360 aatttcccac caaacactta cctggagaaa atgaagttct atgagtacga tttcttcatt 420 attatt cgg ccacacgctt caagaaaaat gatatagaca ttgccaaagc aatcagcatg 480 atgaagaagg aattctactt cgtgagaacc aaggtggact ctgacataac aaatgaagca 540 gatggcaaac ctcaaacctt tgacaaagaa aaggtcctgc aggacatccg ccttaactgt 600 gtgaacacct ttagggagaa tggcattgct gagccaccaa tcttcctgct etetaacaaa 660 aatgtttgtc actatgactt ccccgtcctg atggacaagc tgataagtga cc ccctatc 720 tacaggagac acaattttat ggtctcctta cccaatatca cagattcagt cattgaaaag 780 aagcggcaat ttctgaagca raggatttgg ctggaaggat ttgctgctga cctagtgaat 840 atcatccctt ctctgacctt tetcttggac agtgatttgg agactctgaa gaaaagcatg 900 aaattctacc gcactggtt tggagtggat gaaacatctt tgcagagatt agctagggac 960 tgggaaatag aggtggatca ggtggaggcc atgataaaat ctcctgctgt gttcaaacct 1020 acagatgaag aaacaataca agaaaggctt tcaagatata ttcaggagtt ctgtttggct 1080 aatgggtact tact cctaa aaatagtttt cttaaagaaa tattttacct gaaatattat 1140 ttccttgaca tggtgactga ggatgctaaa actcttctta aagagatatg tttaagaaac 1200 <210> 8 <211> 326 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8 Met ?la Ser Lyß Vai Ser Cyß Leu Tyr Val Leu Ser val Val Cyß Trp 1 5 10 15 ?la Ser ?la Leu Trp Tyr Leu Ser Xle Thr ?rg Pro Thr Ser Ser Tyr 20 25 30 Thr Gly Ser Lyß Pro Phe Ser Hiß Leu Thr Val ?la ?rg Lyß ?ßn Phe 35 40 45 Thr Phe Oly ?ßn Xle ?rg Thr ?rg Pro Xlß ?ßn Pro Hiß Ser Phe ßlu 50 55 60 Phe Leu Xle ?ßn Glu Pro ?ßn Lyß Cyß Glu Lyß ?s He Pro Phe Leu 65 70 75 80 Val He Leu Xle Ser Thr Thr Hiß Lyß ßlu Phe ?ßp ?la ?rg ßln ?la 85 90 95 He ?rg Glu ^Tr Trp Gly ?ßp Glu ?ßn ?ßn Phe Lyß Gly He Lyß He 100 105 110 ?la Thr Leu Phe Leu Leu Gly Lyß ?ßn ?la ?ßp Pro Val Leu ?ßn ßln 115 120 125 Met Val Glu Gln Glu Ser Gln Xle Phe His ?ßp Xle He Val ßlu ?ßp 130 135 140 Phe Xle ?ßp Ser Tyr Hiß ?ßn Leu Thr Leu Lyß Thr Leu Met Gly Ket 145 150 155 160 ?rg Trp Val ?la Thr Phe Cyß Ser Lyß ?la Lyß Tyr Val Met Lyß Thr 165 170 175 ?ßp Ser ?ap He Phe Val ?ßn Met ?ßp ?ßn Leu Xlß Tyr Lyß Leu Leu 180 185 190 <210> 9 <211> 331 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 9 Met ?la Pro ?la Val Leu Thr ?la leu Pro ?ßn ?rg Met Ser Leu ?rg 1 5 10 15 Ser Leu Lyß Trp Ser Leu Leu Leu Leu Ser Leu Leu Ser Phß Leu Val 20 25 30 He Trp Tyr Leu Ser Leu Pro His Tyr ?sn Val Xle Glu ?rg Val ?ßn 35 40 45 Trp Mßt Tyr Phe Tyr Glu Tyr Glu Pro Xle Tyr ?rg Gln ?ßp Phß ?rg 50 SS 60 Phß Thr Leu ?rg ßíu His Ser ?ßn Cyß Sßr Hiß ßln ?ßn Pro Phe Leu 65 70 75 80 Val He Leu Val Thr Ser ?rg Pro Sßr ?sp Val Lys ?la ?rg Gln ?la 85 90 95 He ?rg Val Thr Trp Gly Glu Lyß Lyß Sßr Trp Trp Gly Tyr ßlu Val 100 105 110 Leu Thr Phe Phe Leu Leu Oly Gln ßln ?la Glu ?rg Glu ?sp Lyß Thr 115 120 125 Leu ?la Leu Ser Leu ßlu ?ßp ßlu Hiß Val Leu Tyr Oly ?ßp He He 130 135 140 ?rg Oln ?ap Phe Leu ?ßp Thr Tyr ?an ?ßn Leu Thr Leu Lyß Thr Xle 145 150 155 160 Met ?la Phß ?rg Trp Val Met ßlu Phe Cyß Pro ?ßn ?la Lyß Tyr Xlß 165 170 175 Met Lys Thr ?ßp Thr ?ßp Val Phe Xlß ?ßn Thr Gly ?ßn Leu Val Lyß 180 185 190 Tyr Leu Leu ?ßn Leu ?ßn His Ser Glu Lyß Phe Pbe Thr ßly Tyr Pro 195 200 205 Leu Xlß ?ßp ?ßn Tyr Ser Tyr ?rg Gly Phß Phß Hiß Lyß ?ßn Hiß Xle 210 215 220 Ser Tyr Gln ßlu Tyr Pro Phe Lyß Val Phe Pro Pro Tyr Cyß Ser ßly 225 230 235 240 Leu ßly Tyr Xlß Met Sßr Oly ?ßp Leu Val Pro ?rg val Tyr Olu Met 245 250 255 Met Ser Hiß Val Lyß Pro Xle Lyß Phe ßlu ?ap Val Tyr Val Oly He 260 265 270 Cys Leu ?ßn Leu Leu Lyß Val ?ßp He Bis He Pro Glu ?ßp Thr ?ßn 275 280 285 Leu Phe Phe Leu Tyr ?rg Xle His Leu ?sp Val Cyß ßln Leu ?xg ?rg 290 295 300 Val Xlß ?la ?la His Gly Phe Ser Ser Lys ßlu He He Thr Phe Trp 305 310 315 320 ßln Val Met Leu ?rg ?sn Thr Thr Cyß Hiß Tyr 325 330 <210> 10 <211> 325 <212> PRT <213> Drosophilea melonogaster <400> 10 Met Gln Ser Lyß Hiß ?rg Lyß Leu Leu Leu ?rg Cyß Leu Leu Val Leu 1 5 10 ÍS Pro Leu Xle Leu Leu Val ?ßp Tyr Cyß Gly Leu Leu Thr Hiß Leu Hiß 20 25 30 Glu Leu ?sn Phß Glu ?rg Hiß Phe His Tyr Pro Leu ?sn ?sp ?sp Thr 35 40 45 Gly Ser Gly Ser ?la Ser Ser Gly Leu ?ap Lyß Phe ?la Tyr Leu ?rg 50 55 60 Val Pro Ser Phe Thr ?la 'Glu Val Pro Val ?ßp Oln *>ro ?la ?rg Leu 65 70 75 80 Thr Met Leu Xle Lyß Ser ?la Val ßly ?ßn Ser ?rg ?rg ?rg ßlu ?la 85 90 95 He ?rg ?rg Thr Trp Gly Tyr Giu Gly ?rg Phe Sßr ?ßp Val Hiß Leu 100 105 110 ?rg ?rg Val Phß Leu Leu Gly Thr ?la ßlu ?ßp Sßr Glu Lyß ?ßp Val 115 120 125 ?la Trp ßlu Sßr ?rg Glu His Gly ?ßp He Leu Gln ?la ?ßp Phß Thr 130 135 140 ?ßp ?la Tyr Phß ?ßn ?sn Thr Leu Lys Thr Met Leu Gly Met ?rg Trp 145 150 155 160 ?la Ser.ßlu ßln Phe ?sn ?rg Ser ßlu Phe Tyr Leu Phe Val ?ap ?ßp 165 170 175 ?ßp Tyr Tyr Val Ser ?la Lyß ?ßn Val Leu Lyß Phe Leu ßly ?rg Oly 180 185 190 Arg Gln Ser Hi. Oln Pro Glu Leu 8 Ph. ?la ßly Hi. V.l Phß ßln Thr ser Pro Leu ?rg Hi. Ly. Vto Ser Ly. Trp Tyr Val Sßr i» ßlu Glu r Pro Ph. ?.p ?rg V *» Pro Tyr Val Thr ?l. Gly ?la Ph. 32--» 230 235 7 H. Leu Ser Gln Lys ?la Leu ?rg Gln Leu Tyr ?la ?la Ser Val Bis 245 25° 7 .

Leu Pro Leu Ph. ?rg Ph. ?.p ?ßp Val Tyr Leu Cly He Val ?l. Leu 260 265 *70 Gln Bi. Cy. ?ßp ?ßp Ph. ?rg Phe Hi. ?rg 280 *ßs ?ßp Sßr Tyr Ser Ser Val He ?la Ser Hi. 295 JW Clu Het Thr ?rg Val Trp ?ßn ßlu Cy. ?rg <210> 11 <211> 422 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Mßt Leu ßln Trp ?rg ?rg ?rg Hiß Cyß Cyß Phß ?la Lyß Met Thr Trp 1 5 10 15 ?ßn ?la Lyß ?rg Ser Leu Phe ?rg Thr Hiß Leu Xle ßly Vßl Leu Ser 20 25 30 Leu Val Phe Leu Phe ?la Met Phe Leu Phß Phe ?ßn Hiß Hiß ?ßp Trp 35 40 45 Leu Pro Oly ?rg ?la Gly Phe Lyß ßlu ?ßn Pro Val Thr Tyr Thr Phß 50 55 60 ?rg ßly Phe ?rg Ser Thr Lyß Ser Glu Thr ?ßn Hiß Sßr Ser Leu ?rg 65 70 75 80 ?sn He Trp Lyß Olu Thr Val Pro Gln Thr Leu ?rg Pro Gln Thr ?la 85 90 95 Thr ?ßn Sßr ?ßn ?ßn Thr ?ßp Leu Sßr Pro Oln ßly Val Thr ßly Leu 100 IOS 110 ßlu ?ßn Thr Leu Ser ?la ?ßn Gly Ser Xle Tyr ?ßn Glu Lyß Gly Thr 115 120 125 Gly Hiß Pro ?ßn Ser Tyr Hiß Phe Lyß Tyr He He ?ßn Glu Pro Glu 130 135 140 Lyß Cys Oln Glu Lyß Ser Pro Phe Leu He Leu Leu Xle ?la ?la Glu 145 150 155 160 Pro ßly ßln He Glu ?la ?rg ?rg ?la He ?rg ßln Thr Trp ßly ?ßn 165 170 175 Glu sßr Leu ?la Pro ßly He ßln Xle Thr ?rg ?lß Phe Leu Leu Gly 180 185 190 Leu Ser Xle Lyß Leu ?sn Gly Tyr Leu Gln ?rg ?lß.He Leu Glu Glu 195 200 205 Ser ?rg ßln Tyr Hiß ?ßp'Xlß He ßln ßln Glu Tyr Leu ?ßp Thr Tyr 210 215 220 Tyr ?ßn Leu Thr He Lyß Thr Leu Met Gly Met ?ßn Trp Val ?la Thr 225 230 235 240 Tyr Cyß Pro Hiß le Pro Tyr Val Met Lyß Thr ?ap Ser ?ap Met Phe 245 250 2SS Val ?ßn Thr ßlu Tyr Leu He ?ßn Lyß Leu Leu Lya Pro ?ßp Leu Pro 260 265 270 Pro ?rg Hiß ?ßn Tyr Phe Thr Gly Tyr Leu Met ?rg ßly Tyr ?la Pro 275 280 285 ?an ?rg ?ßn Lyß ?sp Ser Lyß Trp Tyr Met Pro Pro ?ßp Leu Tyr Pro 290 295 300 Ser 320 ?rg ?rg ?rg Gln ?ßn 400 Tyr <210> - 12 <211> • 229 < <212> - PRT <213> • Secuencia . Artificia 1 <220> <221> • VARIANTE <222> • (i) .. . (229) <223> • Xaa = Cualqu.ier aminoácido <400> • 12 Mßt ?la Xaa ?rg ?rg Lyß Val Uu Uu ?rg Uu Uu Val Uu Ser Uu 1 5 10 15 Val Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Phe Xaa Phe Uu Xaa His Trp Phe Phß Pro 20 25 30 ?lß Trp Tyr Uu Ser He Pro Uu ?rg Pro Oln Thr ßly Ser Xaa Ser 35 40 45 Xaa Ser Xaa Xaa Uu Ser Hi. Uu Tyr ?ßn Thr Val Xaa ?rg Xaa ?ßn 50 55 60 Xaa Xaa Phe ?ßn ?ßn Xaa Xaa Thr ?rg Pro Xle ?ßn Ser Xaa Xaa Phe 65 70 75 80 Clu Phe Leu Xle ?ap Glu Pro Xaa Lya Cyß Xaa Lyß Lyß Pro Phe Uu 85 90 95 Val Leu Leu He Ly. Ser Xaa Pro ßly Xaa Phe Xaa ?la ?rg ßln ?la 100 IOS 110 He ?rg Glu Thr Trp Gly Xaa Glu Xaa ?ßn Phe Xaa Gly Xle Xaa Val 115 120 125 Xaa ?rg Val Phe Uu Leu Gly Lyß Xaa ?la Olu Xaa Xaa ?ßp Pro Xaa 130 135 140 Leu Xaa Xaa Met Val ßlu Xaa Glu Ser ?rg Xaa Hiß ßly ?ßp Xlß He 145 150 155 160 Gln Gln ?ßp Phe Uu ?ßp Thr Tyr Phe ?ßn Leu Thr Uu Lyß Thr Uu 165 170 175 Met Gly Met ?rg Trp Val ?la Thr Phe Cyß Pro Xaa ?la ßlu Tyr Val 180 185 190 Mßt Lyß Thr ?ap Ser ?ßp Val Phe Val ?an Thr Xaa ?ßn Uu Uu ?an 195 200 205 Lys Leu Uu Lyß Pro Ser 'Leu Ser Hiß ?rg Xaa Xaa Uu Phe Thr Cly 210 215 220 Tyr val He Xaa Oly 225 <210> 13 <211> 1707 <212> ADN <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (246) ... (1436) <221> característica_misc <222> (1) ... (1707) <223> n = A, T, C o G <400> 13 acgcgtccgc gcagcggcag cggcagcagc ggcaacaagt gccggaggct agcagagcca 60 agccggagea gtccctgccg ccgacaccgc cgggccgccc gtccggggcg ccgcgcatgg 120 agcgtgagct gcggcggtcg ccgggctgag ccgcgcggag cggccgggac gtggatgtgg 180 ccgcgatctc ccgcccttgc ccccgccccg ccgagctgga gctgctcccg gacaagatat 240 gagaa atg agt gtt gga cgt cga aga ata aag ttg ttg ggt ate ctg atg 290 Met Ser Val ßly ?rg ?rg ?rg Xle Lys Uu Uu ßly He Uu Met 1 5 10 15 atg gca aat gtc ttc att tat ttt att atg gaa gtc tcc aaa age agt 338 Met ?la ?ßn Val Phe Xle Tyr Phe Xle Met Olu Val ser Lyß Ser Ser 20 25 30 age cae gaa aaa aat gga aaa ggg gaa gta ata ata ecc aaa gag aag 386 Ser Gln ßlu Lys ?sn ßly Lys Gly Glu Val He Xle Pro Lyß Glu Lyß 35 40 45 ttc tgg aag ata tet acc cct ecc gag gca tac tgg aac cga gag cae 434 Phe Trp Lys He Ser Tbr Pro Pro ßlu ?la Tyr Trp ?ßn ?rg Oiu Oln 50 55 60 gag aag ctg aac cgg cag tac aac ecc ate ctg age atg ctg acc aac 482 Glu Lyß Uu ?ßn ?rg Gln Tyr ?ßn Pro He Uu Ser Met Uu Thr ?ßn 65 70 75 cag aeg ggg gag gcg ggc agg etc tcc aat ata age cat ctg aac tac 530 Gln Thr ßly Glu ?la ßly ?rg Leu Sßr ?an He Ser Hiß Leu ?ßn Tyr 80 85 90 95 tgc gaa cct gac ctg agg gtc aeg tcg gtg gtt aeg ggt ttt aac aac 578 Cyß ßlu Pro ?ßp Uu ?rg Val Thr Ser Val Val Thr ßly Phß ?ßn ?ßn 100 105 110 ttg ceg gac aga ttt aaa gac ttt ctg ctg tat ttg aga tgc cgc aat 626 Uu Pro ?ßp ?rg Phe Lyß ?ßp Phe Uu Uu Tyr Uu ?rg Cyß ?rg ?ßn 115 120 125 tat tea ctg ctt ata gat cag ceg gat aag tgt gca aag aaa cct ttc 674 Tyr Sßr Leu Uu Xle ?ßp Oln Pro ?ßp Lyß Cyß ?la Lyß Lyß Pro Phe 130 135 140 ttg ttg ctg gcg att aag tcc etc act cea cat ttt gcc aga ago caá Uu Leu Uu ?la He Lyß Ser Uu Thr Pro Hiß Phe ?la ?rg ?rg ßln 722 145. 150 155 gca ate cgg gaa tcc tgg ?gc caá gaa age aac gca ggg aac caá aeg 770 ?la He ?rg Olu Ser Trp Gly ßln Glu Ser ?ßn ?la ßly ?ßn Gln Thr 160 165' 170 175 gtg gtg cga gtc ttc ctg ctg ggc cag acá ecc cea gag gac aac cae 818 Val Val ?rg Val Phß Uu Uu Gly Gln Thr Pro Pro Glu ?ßp ?ßn Biß 180 185 190 ecc gac ctt tea gat atg ctg aaa ttt gag agt gag aag cae caá gac 866 Pro ?ap Uu Sßr ?ßp Met Uu Lys Phe Glu Ser ßlu Lyß Hiß Oln ?sp 195 200 205 att ctt atg tgg aac tac aga gac act ttc ttc aac ttg tet ctg aag 914 He Leu Met Trp ?an Tyr ?rg ?sp Thr Phe Phe ?sn Uu Ser Uu Lys .210 215 220 gaa gtg ctg ttt etc agg tgg gta agt act tcc tgc cea gac act gag 962 ßlu Val Uu Phe Leu ?rg Trp Val Ser Thr Ser Cyß Pro ?ßp Thr Olu 225 230 235 ttt gtt ttc aag ggc gat gac gat gtt ttt gtg aac acc cat cae ate 1010 Phe Val Phe Lyß ßly ?sp ?sp ?sp Val Phe Val ?an Thr Hiß Hiß He 240 245 250 255 ctg aat tac ttg aat agt tta tcc aag acc aaa gcc aaa gat etc ttc 1058 Uu ?ßn Tyr Uu ?ßn Ser Uu Ser Lyß Thr Lyß ?la Lyß ?ßp Leu Phe 260 265 270 ata ggt gat gtg ate cae aat gct gga cct cat cgg gat aag aag etg 1106 Xle oly ?ßp Val He Hiß ?ßn ?la ßly Pro Hiß ?rg ?ßp Lyß Lyß Leu 275 280 285 aag tac tac ate cea gaa gtt gtt tac tet ggc etc tac cea cee tat 1154 Lyß Tyr Tyr Xlß Pro Olu Val Val Tyr Sßr Gly Uu Tyr Pro Pro Tyr 290 295 300 gca ggg gga ggg ggg ttc etc tac tcc ggc c.c ctg gcc ctg .gg ctg 1202 ?l. Gly ßly ßly Oly Phß Leu Tyr Ser ßly Hiß Uu ?l. Uu ?rg Uu 305 310 315 tac cat ate aet gac cag gtc cat etc tac ecc att gat gac gtt tat 1250 Tyr Biß He Thr ?ßp Oln Val Hia Leu Tyr Pro Xle ?sp ?ßp Val Tyr 320 32S 330 335 act gga atg tgc ctt cag aaa etc ggc etc gtt cea gag aaa cae aaa 1298 Thr Gly Met Cyß Uu Gln Lys Uu Gly Uu Val Pro Glu Lys His Lyß 340 345 350 ggc ttc agg acá ttt gat ate gag gag aaa aac aaa aat aac ate tgc 1346 ßly Phe ?rg Thr Phe ?ßp He ßlu Olu Lyß ?ßn Lyß ?ßn ?ßn ?le Cyß 355 360 365 tcc tat gta gat ctg atg tta gta cat agt aga aaa cct caá gag atg 1394 Ser Tyr Val ?ßp Uu Met Uu Val Hiß Ser ?rg Lys Pro Gln Glu Met 370 375 380 att gat att tgg tet cag ttg cag agt gct cat tta aaa tgc 1436 He ?ßp He Trp Ser Gln Leu Gln Ser ?la Hia Leu Lyß Cyß 385 390 395 taaaatagat acaaaetcaa tttkgßatwg raaggggtwt tttgratwgg ycccatgttg 1496 gggtctcaca ttagagtaat ttctatttna ancatgaaat tgcctttatg agtgataccc 1556 atttanggcc tetaancett catttgnact cacgtgaaga agggaaagcg ggagaaggta 1616 atttntttat ggtgaatggc aggatattgg tctgacttac cgntagggga ntttaaaact 1676 ggnccttttt gaatctgttt ggatggccct t 1707 <210> 14 <211> 397 * <212> PRT <2.13> Homo sapiens <400> 14 Mat Ser Val Oly ?rg ?rg ?rg Xle Lyß Uu Uu Gly Xle Uu Met Mat 1 5 10 15 ?la ?sn Val Phe Xle Tyr Phe He Met Olu Val Sßr Lyß Ser Ser Ser 20 25 30 Gln Olu Lyß ?ßn Oly Lyß Oly Olu Val He Xle Pro Lyß Glu Lyß Phß 35 40 45 Trp Lyß Xle Ser Thr Pro Pro Olu ?la Tyr Trp ?ßn ?rg Glu Gln olu 50 55 60 Lyß Uu.?ßn ?rg Cln Tyr ?sn Pro He Uu Ser Met Uu Thr ?ßn Oln 65 70 75 80 Tbr Oly Olu ?la ßly ?rs Uu Ser ?ßn Xle Ser Biß Uu ?sn Tyr Cya 85 90 95 Glu Pro ?sp Leu ?rg Val Thr Ser Val Val Thr Oly Phe ?ßn ?ßn Uu 100 105 110 Pro ?sp ?rg Phe Lys ?sp Phe Uu Uu Tyr Leu ?rg Cyß ?rg ?ßn Tyr 115 120 125 Ser Uu Uu Xle ?sp ßln Pro ?ßp Lyß Cyß ?la Lyß .Lyß Pro Phe Leu 130 135 140 Leu Uu ?la Xle Lyß Ser Uu Thr Pro Hiß Phe ?la ?rg ?rg Oln ?la 145 150 155 160 Xle ?rg Glu Ser Trp ßly Gln Glu Ser ?ßn ?la ßly ?ßn Gln Thr Val 165 170 175 Val ?rg Val Phe Uu Uu Oly Gln Thr Pro Pro Olu ?sp ?ßn Hia Pro 180 185 190 ?ßp Uu Ser ?ßp Met Leu Lyß Phe Olu Smx ßlu Lyß Hiß ßln ?ßp Xle 195 200 205 Uu Met Trp ?ßn Tyr ?rg ?ßp Thr Phe Phe ?ßn Leu Ser Uu Lys Olu 210 215 220 Val Uu Phe Uu ?rg Trp Val Ser Thr Ser Cyß Pro ?ßp Thr Glu Phe 225 230 235 240 Val Phe Lyß Oly ?ßp ?ßp ?ßp Val Phe Vai ?ßn Thr Ble Biß Xle Leu 245 250 255 ?ßn Tyr Leu ?ßn Ser Leu Smx Lyß Thr Lyß ?la Lyß ?ßp Leu Phe He 260 265 270 Gly ?ßp Val Xle Hiß ?ßn ?la Oly Pro Biß ?rg ?ßp Lyß Lyß Leu Lyß 275 280 285 Tyr Tyr Xle Pro Olu Val Val Tyr Ser ßly Leu Tyr Pro Pro Tyr ?la 290 295 300 Gly Oly ßly Oly Phe Leu Tyr Sßr Gly Biß Leu ?la Leu ?rg Leu Tyr 305 310 315 320 Hiß He Thr ?ßp Oln .l Hlß Leu Tyr Pro He ?ap ?ßp Val Tyr Thr 325 330 335 ßly Met Cyß Leu Oln Lys Uu Oly Leu Val Pro ßlu Lyß Biß Lyß Oly 340 345 350 Phe ?rg Thr Phe ?ßp Xle ßlu Olu Lyß ?sn Lyß ?ßn ?ßn Xle Cyß Ser v 355 360 365 Tyr Val ?ßp Leu Met Leu Val Hiß Smr ?rg Lyß Pro Gln Glu Met He 370 375 380 ?ßp He Trp Ser Oln Uu ßln Ser ?la Biß Uu Lyß Cyß 385 390 395 <210> 15 <211> 365 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Oln Glu Lyß ?ßn Gly Lyß Oly Olu Val He He Pro Lyß Olu Lyß Phe 1 . 5 10 15 rp Lyß He Ser Thr Pro Pro Clu ?la Tyr Trp ?ßn ?rg Glu Oln Olu 20 25 30 Lyß Uu ?ßn ?rg Oln Tyr ?ßn Pro Xle Uu Ser Met Uu Thr ?ßn Ola 35 40 45 Thr Oly Olu ?la Oly ?rg Uu Ser ?ßn He Ser Hiß Uu ?ßn Tyr Cyß 50 55 60 Olu Pro ?ßp Leu ?rg Val Thr Ser val Val Thr Oly Phe ?ßn ?ßn Uu 65 70 75 80 Pro ?ßp ?rg Phe Lyß ?ßp Phe Uu Uu Tyr Leu ?rg Cyß ?rg ?ßn Tyr 85 90 95 Ser Uu Uu Xle ?ßp Oln Pro ?sp Lyß Cyß ?la Lys Lyß Pro Phe Uu 100 105 110 Leu Uu ?la Xle Lyß Ser Uu Thr Pro Hiß Phe ?la ?rg ?rg Oln ?l. 115 120 125 He ?rg Olu Ser Trp Gly ßln Olu Ser ?ßn ?la Oly ?ßn Oln Thr V.1 130. 135 140 V.l ?rg val Phe Uu Uu ßly Oln Thr Pro Pro Glu ?ßp ?ßn Biß Pro 145 150 155 160 ?ßp Uu Ser ?ßp Met Uu Lyß Phe olu Ser Olu Lyß Hiß ßln ?ßp He 165 170 175 Leu Met Trp ?ßn Tyr ?rg ?ßp Thr Phe Phe ?ßn Uu Ser Uu Lyß Olu 180 185 190 Val Uu Phe Uu ?rg Trp Val Ser Thr Ser Cyß Pro ?ßp Thr Olu Phe 195 200 205 Val Phe Lyß Oly ?ßp ?ßp ?ßp Val Phe Val ?ßn Thr Hiß Ble Xle Uu 210 215 220 ?an Tyr Leu ?ßn Ser Uu Ser Lyß Thr Lyß ?la Lyß ?ßp Leu Phe Xle 225 230 235 240 Oly ?ßp Val Xle Ble ?ßn ?la Gly Pro Hiß ?rg ?ßp Lyß Lyß Uu Lye 245 250 255 Tyr Tyr He Pro Olu Val Val Tyr Ser Oly Leu Tyr Pro Pro Tyr ?la 260 265 270 Qly Gly ßly Oly Phe Uu Tyr Ser Gly Hiß Uu ?la Leu ?rg Leu Tyr 275 280 285 Biß Xle Thr ?sp Oln V.l Hiß Uu Tyr Pro Xle ?ßp ?ßp Val Tyr Thr 290 295 300 ßly Met Cyß Leu Oln Lyß Uu Gly Uu Val Pro ßlu Lyß Hiß Lyß Oly 305 310 315 320 Phe ?rg Thr Phe ?sp Xle Glu Olu Lyß ?an Lyß ?ßn ?sn Xle Cyß Ser 325 330 335 Tyr v.l ?sp Uu Met Leu V.l Hiß Ser ?rg Lyß Pro Oln Olu Met ?le 340 345 350 ?ßp Xle Trp Ser Gln Uu Gln Ser ?la Hia Uu Lys Cyß 35S 360 365 <210> 16 <211> 20 <212> ADN <213> Homo ;sapiens <220> <221> Secuencia artificia 1 • <222> (1) ... (20) <223> iniciador generado sintéticamente <400> 16 cttcgacgcc ccacactcat <210> 17 <211> 20 <212> ADN <213> Homo sapiens <220> <221> Secuencia artificial <222> (1) ... (20) <223> iniciador generado sintéticamente <400> 17 atgagtgtgg ggcgtcgaag 20

Claims

REIVINDICACIONES Un método para determinar si un compuesto puede ser empleado para modular el peso corporal, que comprende: a) la medición del nivel de expresión de uno o varios genes seleccionados dentro del grupo que consiste de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 en una muestra de células en presencia y ausencia del compuesto; y b) la identificación del compuesto como útil para modular el peso corporal cuando el nivel de expresión del gen seleccionado o de los varios genes seleccionados en presencia del compuesto difiere del nivel de expresión del gen seleccionado o de los varios genes seleccionados en ausencia del compuesto. El método de conformidad con la reivindicación 1 en donde las células en la muestra de células son células neuronales. El método de conformidad con la reivindicación 1 en donde las células expresan el receptor Ob. El método de conformidad con la reivindicación 3 en donde la expresión se mide en presencia de leptina. Un método para determinar si un compuesto puede emplearse para modular el peso corporal, que comprende: a) la medición de la actividad de una de las proteínas seleccionadas dentro del grupo que consiste de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 en una muestra en presencia y ausencia del compuesto; y b) la identificación del compuesto como útil para modular el peso corporal cuando la actividad de la proteína seleccionada o de las varias proteínas seleccionadas en presencia del compuesto difiere de la actividad de la proteína seleccionada o de las varias proteínas seleccionadas en ausencia del compuesto . , El método de conformidad con la reivindicación 5 en donde la muestra comprende células y dichas células son células neuronales. . El método de conformidad con la reivindicación 6 en donde las células expresan el receptor Ob. . El método de conformidad con la reivindicación 7 en donde la actividad se mide en presencia de leptina. . Un método para determinar si un compuesto puede ser empleado para modular el peso corporal, que comprende: a) la medición del nivel de expresión de uno o varios genes seleccionados dentro del grupo que consiste de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 en una muestra de células aisladas de un mamífero tratado con el compuesto y en una muestra de células aisladas de un animal no tratado; y b) la identificación del compuesto como útil para modular el peso corporal cuando el nivel de expresión del gen seleccionado o de los varios genes seleccionados en la muestra de células aislada del mamífero tratado difiere del nivel de expresión del gen seleccionado o de los varios genes seleccionados en la muestra de células aisladas del mamífero no tratado. 10. El método de conformidad con la reivindicación 9 en donde las células en la muestra son células neuronales. 11. El método de conformidad con la reivindicación 9 en v donde el mamífero es un ratón. 12. Un método para determinar si un compuesto puede ser empleado para modular el peso corporal, que comprende: a) la medición del nivel de actividad de una o varias proteínas seleccionadas dentro del grupo que consiste de LIG46, LIG56, Tgtp, LRG-47, RC10-II, y Stral3 en una muestra de células aisladas de un mamífero tratado con el compuesto y en una muestra de células aisladas de un mamífero no tratado; y b) la identificación del compuesto como útil para modular el peso corporal cuando el nivel de actividad de la proteína seleccionada o de las varias proteínas seleccionadas en la muestra de células aisladas del mamífero tratado difiere del nivel de actividad de la proteína seleccionada o de las varias proteínas seleccionadas en la muestra de células aisladas del mamífero no tratado. 13. El método de conformidad con la reivindicación 12 en donde las células en la muestra son células neuronales. 14. El método de conformidad con la reivindicación 12 en donde dicho mamífero es un ratón. 15. Una molécula de ácido nucleico aislada seleccionada dentro del grupo que consiste de: a) una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que tiene una identidad de por lo menos 55% con la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7, o un complemento de la misma; b) una molécula de ácido nucleico que comprende un fragmento de por lo menos 300 nucleótidos de la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7, o un complemento de la misma; c) una molécula de ácido nucleico que codifica un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 6; d) una molécula de ácido nucleico que codifica un fragmento de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6, en donde el fragmento comprende por lo menos 15 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 6; y e) una molécula de ácido nucleico que codifica una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 6, en donde la molécula de ácido nucleico se hibrida con una molécula de ácido nucleico que comprende SEQ ID NO:l o SEQ ID NO: 3 en condiciones estrictas. 16. La molécula de ácido nucleico aislada de la reivindicación 15, que se selecciona dentro del grupo que consiste de: a) un ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7, o un complemento de la misma; y b) una molécula de ácido nucleico que codifica un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO.6. La molécula de ácido nucleico de la reivindicación 15 que comprende además secuencias de ácido nucleico de vector. La molécula de ácido nucleico de conformidad con la reivindicación 15 que comprende además secuencias de ácido nucleico que codifican un polipéptido heterólogo. Una célula huésped que contiene la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 15. La célula huésped de conformidad con la reivindicación 19 que es una célula huésped de mamífero. Una célula huésped de mamífero no humano que contiene la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 15. Un polipéptido aislado seleccionado dentro del grupo que consiste de: a) un fragmento de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6, en donde el fragmento comprende por lo menos 15 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6; b) una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 6, en donde el polipéptido es codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida con una molécula de ácido nucleico que comprende SEQ ID NO:l, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7 en condiciones estrictas; c) un polipéptido codificado por una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que tiene una identidad de por lo menos el 55% con un ácido nucleico que comprende la secuencia de nucleótidos de SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7. El polipéptido aislado de la reivindicación 22 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6. El polipéptido de la reivindicación 22 que comprende además secuencias heterólogas de aminoácidos . Un anticuerpo que se une selectivamente con un polipéptido de la reivindicación 22. Un método para producir un polipéptido seleccionado dentro del grupo que consiste de: a) un polipéptido que comprende la secuencia ,de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6; b) un fragmento del polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6, en donde el fragmento comprende por lo menos 15 aminoácidos contiguos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 6; y c) una variante alélica que ocurre naturalmente de un polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6, en donde el polipéptido es codificado por una molécula de ácido nucleico que se hibrida con una molécula de ácido nucleico que comprende SEQ ID N0:1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 5, o SEQ ID NO: 7 en condiciones estrictas; que comprende el cultivo de un huésped que comprende una molécula de ADN que codifica el polipéptido en condiciones en las cuales se expresa la molécula de ácido nucleico. El polipéptido aislado de conformidad con la reivindicación 22 que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 6. Un método para detectar la presencia de un polipéptido de la reivindicación 22 en una muestra, que comprende: a) la puesta en contacto de la , muestra con un compuesto que se une selectivamente a un polipéptido de la reivindicación 22; y b) la determinación de sí el compuesto se une con el polipéptido en la muestra. El método de conformidad con la reivindicación 28, en donde el compuesto que se une con el polipéptido es un anticuerpo. Un conjunto de elementos que comprende un compuesto que se une selectivamente con un polipéptido de la reivindicación 22 e instrucciones para su uso. Un método para detectar la presencia de una molécula de ácido nucleico de la reivindicación 15 en una muestra, que comprende los pasos de: a) poner en contacto la muestra con una sonda de ácido nucleico o iniciador que se hibrida selectivamente con la molécula de ácido nucleico; y b) determinar si la sonda de ácido nucleico o el iniciador se une con una molécula de ácido nucleico en la muestra. El método de conformidad con la reivindicación 31, en donde la muestra comprende moléculas de ARNm y está en contacto con la sonda de ácido nucleico . Un conjunto de elementos que comprende un compuesto que se hibrida de manera selectiva con una molécula de ácido nucleico de la reivindicación 15 e instrucciones para su uso . Un método para identificar un compuesto que se une con un polipéptido de conformidad con la reivindicación 22 que comprende los pasos de: a) poner en contacto un polipéptido, o una célula que expresa un polipéptido de la reivindicación 22 con un compuesto de prueba; y b) determinar si el polipéptido se une con el compuesto de prueba. 35. El método de conformidad con la reivindicación 34, en donde la unión del compuesto de prueba con el polipéptido es detectada por un método seleccionado dentro del grupo que consiste de: a) detectar la unión mediante la detección directa de la unión compuesto de prueba/polipéptido; y b) detectar la unión empleando un ensayo de unión de competición. 36. Un método para modular la actividad de un polipéptido de la reivindicación 22 que comprende la puesta en contacto de un polipéptido o una célula que expresa un polipéptido de la reivindicación 22 con un compuesto que se une con el polipéptido en una concentración suficiente para modular la actividad del polipéptido. 37. Un método para el tratamiento de un trastorno del peso, que comprende la administración de una molécula que reduce la expresión de la actividad de proteína seleccionada dentro del grupo que consiste de LIG46, LIG56, Tgtp, LRP-47, RC10-II, y Stral3. 38. El método de conformidad con la reivindicación 37 en donde dicha molécula es una molécula de antisentido. 39. El método de conformidad con la reivindicación 37 que comprende además la administración de leptina. v