MXPA01001775A - Miscelios que cubren a los hongos. - Google Patents

Abstract

Un lecho de hongos que tiene una capa de composta y una capa de cubierta. La capa de cubierta comprende un micelio de cubierta que comprende una mezcla de: (a) al menos, un ingrediente proteinaceo en una cantidad para proporcionar al menos 3.5% de nitrogeno en una base de peso seco; (b) 2 a 30% en peso, basado en el peso seco de las pelotillas de papel (c) 5 a 60% en peso basado en el peso seco de al menos, un material particulado, (d) un amortiguado en una cantidad efectiva para proporcionar un pH de aproximadamente 6 a 7.8, y (e) agua; y colonizado con un micelio de hongo.

Description

MISCELIOS QUE CUBREN A LOS HONGOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a la técnica de cultivación de hongos y específicamente pertenece a un micelio mejorado que cubre a los hongos, que efectivamente inocula la capa que cubre a los hongos y acorta el tiempo requerido para el comienzo de la producción de hongos. Esta invención también proporciona una fuente de nutrientes en la capa que cubre a los hongos para además, promover el crecimiento de los hongos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La producción comercial de hongos ( Agari c us bi sporus ) involucra una serie de etapas, incluyendo la preparación de compostas, pasteurización de compostas, inoculación de las compostas con los fungos del hongo (micelios), incubación para permitir la completa colonización de la composta con el micelio del hongo, abonando la parte superior de la composta con la turba musgosa humedecida (que la cubre) , y controlando el REF. :127568 ambiente para promover el desarrollo del hongo maduro. El proceso de crecimiento del hongo se describe en detalle en varias publicaciones (por ejemplo, Chang & Hayes, 1978; Flegg et al., 1985; Chang & Miles, 1989, Van Griensven, 1988) . La producción del hongo procede vía una secuencia de etapas. Primero, el medio nutritivo (composta) es inoculado con el micelio del hongo mediante la distribución del material particulado con el micelio del hongo (micelios) a través de este, y después la composta es colonizada con el micelio. El micelio del hongo se hace de manera general, con grano esterilizado que es inoculado con cultivos puros de las cepas de hongos deseadas. Virtualmente, todos los micelios usados para inocular la composta de los hongos, se hacen usando centeno, mijo, trigo, sorgo u otro substrato de grano. Después, la composta colonizada es cubierta por una capa de un material escasamente nutriente (que lo cubre) . La capa que lo cubre o película, está compuesta usualmente de turba musgosa humedecida y piedra caliza. El micelio procede a -colonizar esta capa, y una vez que la capa de cubierta o película es colonizada, el ambiente del lugar de crecimiento se altera para promover la formación de esporas. Estas esporas o cuerpos que producen esporas son cosechados y vendidos como hongos comerciales . Las etapas de tiempo de consumo de la producción de hongos son los periodos cuando los micelios están colonizando un nuevo material. Una forma que se ha usado para acelerar el proceso, es mezclando el material colonizado, tal como compostas colonizadas, dentro de la capa que los cubre o película en la parte superior de la composta en el lecho. El tiempo de producción total se reduce, debido a que el crecimiento del micelio en la cubierta o película inicia a muchos puntos a través de la capa de cubierta o película preferentemente justo en la interfase con la composta colonizada. Incluyendo una cantidad pequeña de material colonizado en la capa de cubierta de nutriente escaso, la capa de cubierta o película es colonizada más rápidamente y ocurre el inicio temprano de la producción del hongo. Esto incrementa efectivamente la capacidad anual de unos productos de hongos sin la inversión de capital. Este procedimiento es comúnmente referido como "CACing" ("Composta En Cubierta o Película) . Aunque el procedimiento de CACing acelera la producción e incrementa la capacidad para un área fija de lecho de hongos, la composta colonizada que es agregada a la capa de cubierta o película como inoculo, podría llegar de cualquier parte. Si llega de lechos de hongos, la capacidad igual a la cantidad de volumen de lecho usado para proporcionar el inoculo de cubierta o película se pierde. Otro problema con el uso del inoculo localmente desarrollado es controlar la calidad. Si la composta es débilmente colonizada, entonces el procedimiento CACing no incrementará la velocidad de colonización lo suficiente para compensarlo por la pérdida de la capacidad del lecho. Aún peor, debido a que este inoculo complementario no es esterilizado, tiene el potencial para esparcir la infección mediante la contaminación de microorganismos a través de los alojamientos de hongos, con ello, se reduce la capacidad productiva del alojamiento. Algunos agricultores de hongos han intentado resolver estos problemas mediante la inoculación de la capa de cubierta o película con el mismo micelio que es usado para inocular la capa de composta. Los micelios para inoculación de la capa de composta se producen mediante el micelio del hongo puro asépticamente mezclado con granos estériles e incubación para permitir la colonización del grano. Los micelios del grano tienen un nivel consistente de contenido micelial vivo, pero tienen un contenido de nutriente relativamente alto (contribuido por el grano) . Con el fin de ser efectivo, el inoculo podría ser suministrado a niveles relativamente altos, y el nivel de nutriente resultante en la capa de cubierta o película, podría inhibir la formación del primordio del hongo (esporas o cuerpos que forman esporas) . También se incrementa el potencial para el crecimiento de contaminación de organismos (especialmente mohos) al proporcionarlos con nutrientes que están normalmente ausentes de la capa de cubierta o película. Reconociendo estos problemas, Romaine (Patente Estadounidense No. 4,803,800) muestra la producción de un agente CACing sinstético para el hongo (es decir, micelio que cubre o película) mediante la encapsulación de nutrientes en un polímero de hidrogel. El substrato esterilizado es inoculado con cultivos puros del fungo del hongo e inoculado de una manera eguivalente al micelio del grano, resultando en un nivel consistente de contenido micelial vivo. El agente CACing sintético es usado para inocular la capa de cubierta del hongo en lugar de la composta. El uso de este agente CACing sintético, acelera la formación de esporas de la misma manera como el CACing natural con la composta. Los contenidos de nitrógeno en el agente CACing sintético Romaine son generalmente bajos, los cuales ayudan a reducir el crecimiento de microorganismos competidores. Por ejemplo, Romaine muestra los niveles de nutrientes totales de 2 hasta 6% (p/vol de fórmula) . Asumiendo el uso de 100% de proteína como la fuente de nutrientes, el nitrógeno total podría ser aproximadamente 0.96%. Algunas formulas de Romaine contienen Perlita, vermiculita, sémola de soya o materiales similares a aproximadamente 2 hasta 6% (peso/volumen) de la fórmula como agentes texturizantes . Dahlberg & LaPolt (Patente Estadounidense No. 5,503,647) muestra el desarrollo de un micelio que cubre a los hongos preparado a partir de partículas nutricionalmente inertes (tierra calcinada, vermiculita, Perlita, etc.) corregida con nutrientes. Los micelios de cubierta o película son formulados con contenidos de nitrógeno bajos (generalmente menos de 15) para permitir la inoculación de la capa de cubierta o película del hongo con el micelio Agari cus bi sporus sin promover el crecimiento de plagas y patógenos. Dahlberg & LaPolt muestran que niveles altos de ingredientes proteináceos tales como soya fina, etc. son inhibidores al crecimiento de Agari cus bi sporus . Generalmente, los niveles de nitrógeno arriba de aproximadamente 24% en una fórmula de micelio de cubierta resulta en un crecimiento reducido del micelio Agari cus bi sporus . Esta formulación de micelio de cubierta también está propuesta como un substrato para la inoculación de los micelios durante su preparación. Se han mostrado un número de micelios "sintéticos" o "no de granos". Stoller (Patente Estadounidense No. 3,828,470) muestra micelios para usarse en la inoculación de composta en el cual, el substrato de cereal se ha diluido con un material inorgánico que contiene carbonato de calcio o un agente de floculación orgánico. Stoller también muestra que el micelio del hongo no crecerá en forrajes tales como harina de grano de algodón, harina de soya, etc., cuando se usan solos como un substrato sometido a autoclave. Los contenidos de nitrógeno en los ejemplos de Stoller son generalmente bajos. Por ejemplo, el ejemplo 16 de Stoller está estimado que contiene aproximadamente 0.22% de nitrógeno. El ejemplo 18 de Stoller está estimado que contiene aproximadamente 0.7% de nitrógeno. Stoller también muestra que un micelio fino, granular o en polvo, es preferible para las partículas de grano completas, grandes del micelio del hongo. Esto es generalmente debido al número de "puntos de inoculo" por peso de unidad de micelio. Mientas no haya evidencia de que cualquiera de las formulaciones de Stoller han sido usadas siempre como micelios de cubierta, no hay razón conocida de como ellos podrían no ser satisfactorios para este propósito Fritsche (1978) describe una fórmula reportada por Lemke (1971) para micelios en un substrato de perlita. La fórmula es como sigue: perlita (1450 g), pan de trigo (1650 g) , CaS04 2H20 (200 g) , CaC03 (50 g) , agua (6650 ml ) . El pH después de la esterilización es 6.2 a 6.4. Esta fórmula se calcula por contener 1.10 a 1.34% de nitrógeno en una base de peso seco (asumiendo un contenido de nitrógeno típico de salvado de trigo de 2.24 a 2.72%) . Mientras no haya evidencia de que esta fórmula de micelio de perlita ha sido usada siempre como micelio de cubierta, no hay razón conocida de porqué podría no ser satisfactoria para este propósito. Brini & Sartor (Solicitud de Patente Europea No. EP 0 700 884 AI) muestra un substrato para la inoculación de composta de hongo que consiste de un agente de dispersión que retiene agua (por ejemplo turba), un amortiguador, un componente que contiene proteína (por ejemplo, harina de soya), un material promotor del crecimiento (por ejemplo gluten de maíz y/o almidón de maíz) y agua. La mezcla es esterilizada, inoculada con el fungo del hongo, y usada para composta del micelio del hongo. Los contenidos de nitrógeno de las mezclas son 1.4 a 8.0% en peso de nitrógeno (basado en el rango especificado de 4 a 20% de proteína) . Uno no podrá esperar que esta formulación sea exitosa como un micelio de cubierta o película, debido a su alto contenido de nitrógeno y el efecto inhibitorio de los contenidos de nitrógeno en las capas que cubren a los hongos (Patente Estadounidense No. 5,503,647) . Varios marcadores de micelios han desarrollado productos de micelios de cubierta. Mientras las formulaciones específicas sean patentadas, podrían aparecer como combinaciones de turbas musgosas, vemiculita, perlita, carbón mineral, compostas trituradas, u otros ingredientes patentados complementados con niveles bajos de nutrientes. La Tabla 1 resume los contenidos de nitrógeno de cualquiera de los productos de micelios de cubierta comercialmente disponibles. Los análisis de los micelios de cubierta o película se realizaron por los presentes inventores. Siete de los productos tienen contenidos de nitrógeno a o por debajo de 1.2%, mientras un producto tiene un contenido de nitrógeno de 2.01%. Los contenidos bajos de nitrógeno de las formulaciones de micelios de cubierta o película comercialmente exitosos confirman lo ampliamente sustentado y declarado (Patente Estadounidense No. 5,503,647) creyendo que los contenidos altos de nitrógeno en la capa que cubre a los hongos son deteriorantes para la producción de hongos .

Tabla 1. Contenidos de Nitrógeno de las formulaciones de micelios de cubierta comercialmente disponibles.

La literatura de ciencia de los hongos, contiene varias referencias a los efectos deteriorantes de los niveles de nutrientes altos, en la capa de cubierta. La Patente Estadounidense No. 5,503,647, específicamente declara que las fórmulas de micelios de cubiertas contienen mayor de 0.7% del nitrógeno Kjeldahl biodisponible que resulta en rendimientos reducidos del hongo. Es importante distinguir los nutrientes disponibles de los nutrientes no disponbiles. La turba musgosa de musgo esfagnáceo frecuentemente usada en las capas que cubren a los hongos pueden contener desde 0.75 hasta 3.5% de nitrógeno Kjeldahl (Fuchsman, 1986) . Hypnum o "turba negra", contiene niveles de nitrógeno significantemente superiores. Ambas de estas turbas sin embargo, suministran buenas esporas de Aga ri cus bi sporus cuando se usan como material de cubierta. Los materiales nitrogenoso en las turbas son generalmente "húmicos" en carácter, tal como lignina y otros nutrientes mineralizados. Estos no son fácilmente disponibles al fungo del hongo y la mayoría de los microorganismos son capaces de colonizar las capas de cubiertas o películas. Si se agregan los compuestos de nitrógeno nutricionalmente disponibles adicionales a la capa de cubierta, se inhibe la formación de esporas. La única excepción conocida al paradigma del efecto inhibitorio del nitrógeno comercialmente disponible en la capa de cubierta está reportada por Nair et al. (1993) . Estos autores trataron harina de semilla de algodón con ya sea, formaldehido o sulfato de calcio para preparar o un complemente de liberación retardada similar a la tecnología usada para los suplementos de compostas (es decir, véase Patente Estadounidense No. 3,942,969) . Los suplementos se agregaron a la capa de cubierta del musgo hasta 8% del peso fresco de la mezcla. El rendimiento del hongo se incrementa entre 0.5% y 52%, se atribuyó a esta sumplementación de capa de cubierta. Los autores especulan que los tratamientos preservativos desnaturalizan a las proteínas en la harina de semilla de algodón y las hacen no disponibles a los microorganismos competitivos. También consideran la posibilidad de que el formaldehido residual podría suprimir el crecimiento de los competidores microbianos. Mientras Nair et al (1993) reportó que la adición de harina de semilla de algodón tratada con la mezcla de cubierta no resultó en el crecimiento de contaminantes fúngales, las pruebas en el laboratorio de los inventores actuales mostró que esta estrategia de suplementación a menudo falla, debido al crecimiento pesado de los mohos. Además, el uso de formaldehido como un tratamiento preservativo podría representar un daño a la seguridad y salud. Para reconocimiento de los inventores, la estrategia de suplementación descrita por Nair et al. (1993) no se ha comercializado exitosamente.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Es un objeto de la presente invención, proporcionar un micelio que cubre a los hongos para inocular capas que cubren a los hongos y minimizar el tiempo entre la cubierta y el comienzo de la producción de hongos. Es un objeto adicional de esta invención, proporcionar un micelio de cubierta o película en el cual, el nivel de nutrientes disponibles se maximize para proporcionar nutrientes suplementarios a las esporas de los hongos desarrollados. Es un objeto adicional de esta invención, proporcionar nutrientes complementarios a la capa de cubierta de los hongos sin soportar el crecimiento de patógenos o plagas tales como mohos. Es un objeto adicional de esta invención, proporcionar nutrientes sumplementarios a la capa de cubierta de los hongos, sin la necesidad de txatar nutrientes con pesticidas, desnaturantes y otros tratamientos químicos o físicos para eliminar el crecimiento de microorganismos competidores. Es un objeto adicional de la invención, proporcionar un micelio de cubierta que es completamente esterilizado antes de la inoculación con Agari cus bi sporus para eliminar la posibilidad de transmisión de padecimientos o plagas. Es un objeto adicional de esta invención, proporcionar un micelio de cubierta con partículas pequeñas para proporcionar el número máximo de puntos de inoculación en la capa de cubierta del hongo . Es todavía otro objeto de esta invención, proporcionar un micelio que cubre a los hongos que reduce el' riesgo de fallas de esterilización y colonización incompleta de las mezclas mediante el mejoramiento de la aireación de las mezclas y reduciendo la formación de masas. Es otro objeto de la presente invención, proporcionar un lecho de hongos que tiene una capa de composta y una capa de cubierta o película. Es otro objeto de la presente invención, proporcionar un método de preparación de un lecho de hongos, mediante la aplicación de una capa de cubierta en una capa de composta. Estos y otros objetos son sugeridos por la presente invención, los cuales comprenden un micelio que cubre a los hongos mejorado, el cual está formulado con mezclas de: (a) ingredientes proteináceos tales como gluten de maíz, harina de plumas, frijol de soya partido, harina de frijol de soya, harina de semilla de algodón y otros ingredientes para proporcionar un contenido de nutriente alto; (b) papel de desecho desmenuzado, en pelotillas, para proporcionar puntos múltiples de inoculo y capacidad de contener agua; (c) materiales particulados tales como tierra calcinada, vermiculita, Perlita, o material similar para proporcionar puntos múltiples del inoculo, capacidad de contener agua, aireación de mezclas, densidad y un carácter de fluido libre a las mezclas, (d) carbonato de calcio (CaC03) para neutralizar el pH, (e) opcionalmente, yeso (CaS04 . 2 H20) para reducir las masas, y (f) agua. El micelio de cubierta puede contener opcionalmente una fracción menor de grano (es decir, centeno, mijo, trigo) como se usó en la técnica anterior. Los ingredientes oleaginosos tal como varios aceites vegetales pueden ser agregados para incrementar el contenido de nutrientes totales del micelio de cubierta o película. Los componentes proteináceos y oleaginosos de los micelios de cubierta, pueden ser combinados mediante el uso de ingredientes tales como frijol de soya triturado completo, el cual contiene tanto proteínas como aceites . El micelio que cubre a los hongos, de conformidad con la invención, contiene de manera general (en una base de peso seco) : 5 a 80% de ingredientes proteináceos, 2 a 30% en peso de desechos de papel desmenuzados en pelotillas, 5 a 60% en peso de material particulado, y 1 a 10% en peso de CaC03, 1 a 10% de CaS04. Se agrega agua entre 40 y 54%, Si se usa, el grano se agrega a l a 50% en peso (base en peso seco) . Las mezclas son esterilizadas, inoculadas, e incubadas de una manera consistente con la técnica anterior. Los micelios que cubren a los hongos son usados de manera general para inocular capas que cubren a los hongos a velocidades entre 0.10 y 2.4% (micelios de cubierta de peso fresco/ cubierta de peso fresco), equivalente a 0.007 hasta 0.15 lb/ft2 del área de cubierta. Cuando se preparan y usan como se describe aquí, los micelios que cubren a los hongos reducen el tiempo para alcanzar la colonización completa de la capa que cubre a los hongos y proporcionan incrementos inesperados en el rendimiento del hongo y eficiencia en la producción. Los micelios que cubren a los hongos también eliminan el riesgo de crecimiento de moho y calentamiento de la composta, asociado con el uso de suplementos de composta tradicionales, y no soportan el crecimiento de mohos u otros patógenos y plagas en la capa de cubierta. Debido a que las micelios de cubierta o película como se describe, son difícilmente colonizados con Agari cus bi sporus y otros tipos de micelios, la mayoría de los microorganismos ajenos no pueden crecer bien en el material. Por lo tanto, la invención también proporciona un micelio que cubre a los hongos con niveles altos de nutrientes y que no contienen pesticidas, desnaturantes, u otros tratamientos químicos o físicos para el control del crecimiento de los microorganismos competidores. La invención se describe diferente de la técnica anterior, como se muestra por Romaine (Patente Estadounidense No. 4,803,800), Dahlberg & LaPolt (Patente Estadounidense No. 5,503,647), Lemke (1971) y Fritsche (1978), y varios productos comercialmente disponibles en aquellos de contenido nutriente de micelios de cubierta, especialmente el contenido de nitrógeno de proteína, se maximiza. Los contenidos de nitrógeno típicos de los micelios de cubierta, son aproximadamente tres partes a ocho partes superiores de las formulaciones de micelios de cubierta existentes. Los contenidos de nutrientes generalmente bajos de los micelios de cubierta existentes, no resultan en el rendimiento de los hongos incrementado, observado con la presente invención. El propósito primario propuesto de la invención, es proporcionar un medio de inoculación de la capa de cubierta del hongo, con Agari cu s bi sporus que crece activamente u otro micelio y nutrientes complementarios para facilitar la colonización de la capa de cubierta e incrementar el rendimiento del hongo. Sin embargo, el material de esta invención puede también ser usado como un soporte de inoculo para un amplio rango de hongos filamentosos y otros microorganismos par aun número de propósitos. Estos incluyen, pero no están limitados a, inoculación de la composta con el micelio de Aga ri cus bi sporu s , inoculación de substratos para otros hongos (incluyendo Pl euro t us spp . , Len tím ul a spp . , y otros), la inoculación de otros hongos en los substratos sólidos, inoculación de agentes de biocontrol, y otros propósitos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Como se describe, la presente invención comprende un micelio que cubre a los hongos, formulado con un contenido de nutriente suficientemente alto que los rendimientos del hongo se incrementan, comparados con las fórmulas de micelios que cubren a los hongos de nutrientes bajos. La adición de nutrientes a la capa de cubierta puede ser en adición a o en lugar de suplementos agregados a la composta. Se prepararon las mezclas de ingredientes proteináceos (gluten de maíz, harina de soya, harina de plumas, salvado de trigo, etc.) y/o ingredientes oleaginosos (frijol de soya triturado, frijol de soya fino, aceite de frijol de soya, aceite de maíz, etc.), composición de papel de desecho en pelotillas, materiales particulados para mejorar la capacidad de retener agua, y airear la mezcla (tierra calcinada, vermiculita, Perlita, etc.), CaC03, CaS0 .2H20 (opcional), y agua, tallos esterilizados, se inoculan con cultivos iniciadores de Agari c us bi sporus, y se incuban a condiciones permisibles.

Después de la inoculación para permitir la colonización de los micelios de cubierta por el micelio Agari cus bí sporus , el micelio de cubierta es usado para inocular la capa que cubre a los hongos de una manera equivalente a la técnica anterior para los micelios que cubren a los hongos y composta, usados para CACing. A pesar de que el Agari cus bi sporus se discutirá, se entiende que otras especies pueden ser usadas tales como especies de Agari cus así como también especies de Capri nu s y especies de Vol vari ella . Una fórmula de micelio de cubierta típico (véase ejemplo 1), contiene aproximadamente 6.0 hasta 6.5% (peso seco) de nitrógeno (Kjeldahl), aunque las fórmulas con contenidos de nitrógeno superiores o inferiores pueden ser preparados. Este contenido de nitrógeno es substancialmente superior que aproximadamente 2.25% (peso seco) del nitrógeno presente en una composta usada para CACing, substancialmente superior que aproximadamente ' 0.60% a 2.0% de nitrógeno, típicamente presente en las fórmulas de micelios de cubierta de la técnica anterior, y substancialmente superiores que la fórmula de micelio no de grano Perlita, descrita por Fritshce (1978) y Lemke (1971) . Mientras el fenómeno no sea completamente entendido, y la especulación no deberá limitarse en las reivindicaciones, se cree que la colonización difícil del substrato de micelio de cubierta por el micelio Agari cus bi sporus ejerce un control biológico en la biodisponibilidad de los nutrientes. Los nutrientes colonizados no son disponibles para microorganismos competitivos, y el micelio Agari c u s bi sporus puede usar los nutrientes para producir eficientemente más hongos maduros. No se sabe que si el Aga ri cus bi sporus puede absorber los nutrientes directamente a partir de la capa de cubierta o si la práctica del riego a la capa de cubierta transporta los nutrientes a la composta.

Puntos del Inoculo. Los micelios de cubierta como se describen, contienen significantemente más partículas por unidad de peso que los micelios de cubierta en la técnica anterior. El micelio de cubierta tiene al menos, 10,000 partículas por 100 g, preferiblemente al menos 20,000 partículas por 100 g, más preferiblemente al menos 30,0000 partículas por 100 g, y más preferiblemente al menos, 40,000 partículas por 100 g. Mientras Fritsche (1978) no especifique el tamaño de partícula Perlita usado, las partículas de Perlita típicamente tendrán dimensiones de al menos, varios milímetros. Los micelios de cubierta como se describen en la Patente Estadounidense No. 4,803,800, usan ingredientes texturizantes entre aproximadamente 100 hasta 6,000 µM (0.1 hasta 6 mm) . Las partículas en el producto final, podrían tener diámetros promedios de al menos varios milímetros. Los micelios de cubierta como se describen en la Patente Estadounidense No. 5,503,647, especifican un rango de tamaño de partículas entre 0.5 y 15 mm, más preferiblemente entre 2 y 4 mm en un tamaño promedio. Los micelios de cubierta (ejemplo de fórmula 1) se estima contienen sobre 42,000 partículas por 100 g (48% de contenido de humedad) . Es difícil estimar exactamente el número total de partículas, debido a su tamaño pequeño y gran número. Aproximadamente 30% de las partículas son menores de 2.0 mm, y aproximadamente 12% son menores de 1.0 m . Muchas de estas partículas son mucho menores de aproximadamente 0.2 a 0.4 mm . Un gran incremento en el número de puntos de inóculos resulta del uso de ingredientes con densidades de volumen bajas y texturas finas. Las partículas menores son completamente colonizadas con el micelio Agari cus bi sporus . Cuando se mezclan con la mezcla de cubierta, pueden inocular eficientemente la capa que cubre al hongo. Debido al gran número, la distancia promedio entre las partículas que cubren a los hongos es menor que con las fórmulas de la técnica anterior. Dado que el Agari cus bi sporus tiene una velocidad de crecimiento lineal fijo, la distancia del micelio que podría crecer para alcanzar la confluencia se reduce. Como un resultado, el tiempo para colonizar completamente la capa de cubierta se reduce también comparado con las capas de cubierta sin un micelio de cubierta o corregido con un material CACing. La terminación del periodo de mantenimiento de la condición (es decir, el tiempo para levantar la cosecha) está señalado por la aparición del micelio del hongo en la superficie de la capa de cubierta. El uso de micelio de cubierta puede por lo tanto, reducir el tiempo total entre la cubierta y el levantamiento. La terminación del periodo de mantenimiento de la condición está determinada subjetivamente. En la ausencia de un material CACing o micelio de cubierta, las cosechas son usualmente levantadas 9 a 11 más días después de la cubierta. El uso de un material CACing o micelio de cubierta puede permitir a la cosecha, ser levantada a los 4 a 6 días después de la cubierta. El micelio de cubierta mejorado puede permitir a la cosecha ser levantada tan tempranamente como a los 3 o 4 días después de la cubierta. Mientras las formulaciones del micelio de cubierta específico y velocidades de empleo se puedan desarrollar para permitir el levantamiento aún más temprano que este periodo de 3 a 4 días, el levantamiento más temprano no es recomendado. La colonización completa de la capa de cubierta es el desarrollo de anastomosis de micelio en la interfase de la capa de cubierta de la composta, puede ser deteriorante a la salud de la cosecha del hongo, y puede resultar en rendimientos reducidos del hongo, asegurado entre la superficie de la capa de cubierta, y hongos sucios. Una especulación acerca de los sucesos de la fórmula de micelio de cubierta como se describe, es que el nivel alto de nutrientes en las fórmulas permite mejor el desarrollo de la interfase importante de la capa que cubre la composta. Las velocidad empleadas para los micelios de cubierta mejoradas son usualmente diseñados para proporcionar el levantamiento a los 4 o 5 días después de la cubierta.

Micelios de cubierta resistentes al crecimiento microbiano: En micelios de cubierta, las partículas son colonizadas con el micelio de Agari cus bi sporus . Este crecimiento micelial difícil se cree que reduce previene efectivamente el crecimiento de los microorganismos de competición en las partículas. Para demostrar el efecto del micelio Agari c us bi sporus que crece en organismos competidores, se realizaron los siguientes experimentos. La fórmula de micelio de cubierta 83b se preparó y se esterilizó de manera usual.. Se inoculó una réplica con Aga ri c us bi sporus y se dejo crecer por 14 días. Una segunda réplica no se inoculó y se dejó bajo condiciones estériles por 14 días. Una fórmula de cubierta de centeno se preparó de la manera usual, con una réplica inoculada y otra dejada sin inocular. La esterilidad se sometió a relajación al día 0 de esta prueba, y todos los materiales se colocaron en cajas de petri no estériles, y se mantuvieron a 25°C, aproximadamente 80% de humedad relativa. Los materiales se inspeccionaron diariamente para la evidencia del crecimiento de moho y la contaminación bacteriana. Los resultados de esta prueba se resumen en la Tabla 2.

Esta prueba muestra claramente que la colonización de un substrato de nutriente por el micelio Agari cu s bi sporu s ejerce un efecto protector contra el ataque por mohos y bacterias. Un efecto microbiano similar se observa cuando se agregan los micelios de cubierta y micelios a la composta o mezclas de cubierta. Como se muestra en varios ejemplos, los micelios de cubierta no soportan el crecimiento de mohos en las mezclas de cubiertas. La ausencia de crecimiento de los microorganismos competidores resulta en una formación de primordio mejor y mejor calidad de hongos maduros.

Ausencia de tratamientos químicos y calor: Una ventaja clara de las fórmulas de micelios de cubierta como se describe, es que el incremento del rendimiento y la protección contra los microorganismos protectores se alcanza sin el uso de tratamientos físicos o químicos, como se describe por Nair et al. (1993) para el suplemento de cubierta. La adición de químicos tal como formaldehido o fungicidas a las mezclas de suplementos de nutrientes, puede resultar en desventajas substanciales en los costos. Los químicos usados pueden representar seguridad o daños ambientales. Como se notó por Romaine & Marlowe (Patente Estadounidense No. 5,427,592), el uso adicional de los químicos biopeligrosos en la industria de los hongos es tenuoso. El formaldehido ha sido restringido por la Environmental Protection Agency de los Estados Unidos, y California ahora requiere el monitoreo de rutina de los trabajadores que manipulan un suplemento de hongos para la exposición de formaldehido. Al incluir nutrientes suplementarios en el material que es ya sujeto a corriente de calor para alcanzar la esterilización, se pueden alcanzar ventajas en costos substanciales.

Fuente de nutriente principal: La fuente de nutriente principal es una que proporciona altos niveles de la proteína del nitrógeno. Mientras el gluten de maíz es una fuente de nutriente principal favorecida, otros ingredientes pueden ser substituidos exitosamente. La harina de gluten de maíz es el residuo seco del maíz después de la remoción de la gran parte del almidón y germen, y la separación del salvado por el proceso empleado en la manufactura del molido en húmedo del almidón de maíz o suspensión, o por tratamiento enzimático del endosperma. El gluten de maíz es insoluble en agua e hidrofílico, haciendo particularmente adecuado para usar como un nutriente por un hongo saprofítico. El gluten de maíz es disponible a partir de varias fuentes, incluyendo Cargill Inc. El gluten de maíz típicamente contiene ya sea, 60% del contenido de proteína (9.6% 'de nitrógeno) o 48% del contenido de proteína (7.68% de nitrógeno) . No hay diferencia cualitativa aparente en la realización usando ya sea 60% o 48% de proteína de gluten de maíz. Sin embargo, el uso del 60% de la proteína de gluten de maíz, permite la adición de contenidos de nitrógeno superiores a una fórmula dada de micelios que cubren a los hondos.

La harina de plumas hidrolizada es también un nitriente principal favorecido que puede ser usado solo o en combinación con gluten de maíz u otras fuentes de nutrientes. La harina de plumas es el producto resultante a partir del tratamiento bajo presión de plumas descompuestas, limpias, de aves de corral sacrificadas. La harina de plumas típicamente contiene de 80-85% de proteínas, sobre el 75% de la proteína cruda en una forma digestible. Las plumas contiene un alto contenido de queratina, una clase de proteínas fibrosas encontradas en los animales vertebrados. Debido a la reticulación extensiva de los enlaces disulfuro, las queratinas son más resistentes a la hidrólisis que la mayoría de las otras proteínas. Esta resistencia ala hidrólisis hace a las queratinas adecuadas para usarse como un nutriente mediante un hongo saprótico . La queratina puede absorber y mantener el agua, pero es insoluble de manera general en el agua y solventes orgánicos. Otras fuentes de nutrientes principales que han sido usados exitosamente en la preparación de micelios de cubierta se lista en la Tabla 3. Los nutrientes con los contenidos de nitrógeno más altos son favorecidos para usarse en los micelios de cubierta, puesto que permitirán el contenido de nitrógeno total más alto posible en el producto terminado. Las fuentes de nutriente generalmente contendrán nitrógeno de proteína y pueden contener grasas, aceites, carbohidratos y icronutrientes . Las personas expertas en la técnica podrán imaginar muchas fuentes de nutrientes más posibles. Mientras una abundancia de datos experimentales muestran que la proteína de nitrógeno es una fuente de nutriente favorecida para Agari c us bi sporus , otros nutrientes en la forma propia y proporción, podrían fácilmente ser definidos por la experimentación de rutina.

Pelotillas de papel: La fórmula preparada para las pelotillas de papel se de 53% de papel desmenuzado (papel periódico o papel bond) , 22% de turba musgosa (<35% humedad), 17% material proteináceo (soya fina, etc), 5.45 % de CaC03, y 1.6 % de CaS0 . 2 H 0. La mezcla es formada en pelotillas en cilindros de 1/8" diámetro 160 a 180 F y una velocidad de alimentación de 40 Ib/hora.

Mediante la seguridad de que el ingrediente de la turba musgosa tiene una humedad de <35%, las pelotillas terminadas tienen un contenido de humedad de <12%, y por lo tanto no soporta el crecimiento del moho. El material típicamente tiene un contenido de nitrógeno de 1.5 a 1.6%. Las pelotillas se hacen para mejorar la manipulación del material. El material en forma de pelotillas tiene una densidad superior y volumen más bajo que el material no formado en pelotillas, y se mezcla bien. Las pelotillas son molidas por martillo de manera tal que aproximadamente 80% de los fragmentos resultantes son de <4.75 mm y >0.85 mm en tamaño. Las pelotillas caen aparte después de ser hidratadas para proporcionar un número grande de partículas pequeñas y "puntos de inóculos". Aquellos expertos en la técnica podrían desarrollar un ingrediente de micelio de cubierta que es funcionalmente equivalente a las pelotillas de papel usando un rango de ingredientes y/o procesos.

Material Particulado Un material particulado tal como tierra calcinada, perlita, vermiculita, u otro ingrediente se agrega a la fórmula del micelio de cubierta para proporcionar puntos múltiples del inoculo, incrementando la capacidad de retención de agua, aireación de las mezclas, control de la densidad de las mezclas, y ayuda para mantener una característica de flujo libre. Los ingredientes particulados típicos incluyen tierra calcinada, vermiculita y perlita, pero otros materiales particulados pueden ser substituidos exitosamente. La tierra calcinada es una material a base de arcilla que es sometido a un proceso de calcinación. La arcilla es calentada a una temperatura por debajo de su punto de fusión, para llevar a aproximadamente un estado de descomposición térmica. El proceso de calcinación resulta en un material poroso que absorbe fácilmente agua. Dependiendo del tamaño de las partículas, la tierra calcinada puede absorber al menos, 100% de su peso en agua. La tierra calcinada es comercialmente disponible bajo los nombres de "Turface", "Oil Dri" y otros salvados. La tierra calcinada es disponible en un rango de tamaños de partículas. Los varios tamaños de partículas afectan la densidad del producto del micelio de cubierta terminado y por lo tanto, son empleados en la formulación del producto. Las características funcionales de la tierra calcinada son similares con respecto al tamaño de partícula. Los tamaños de partículas de tierras calcinadas más pequeños son percibidos como preferibles en aquellos que liberan más puntos del inoculo por unidad de peso. La vermiculita es un silicato de magnesio-hierro-aluminio hidratado, tratado a altas temperaturas para causar expansión. El material tiene una densidad baja (97 a 109 g/1), es insoluble en agua, y puede absorber 200 a 500% de su peso en agua. La perlita es un material vitreo volcánico que es calentado para causar su expansión y mejorar su capacidad para mantener la humedad. Se usa típicamente como un medio de crecimiento de la planta. Tiene una densidad baja de aproximadamente 109 g/1, y puede absorber aproximadamente 250% de su peso en agua. La selección del material particulado apropiado para la fórmula de micelio de cubierta se basa en la densidad del producto final deseado, tamaño de partículas, número deseado de partículas (puntos de inoculo), costo, facilidad de manipulación y uso, y otras características. El equipo de aplicación usado para los cultivadores de hongos se diseña y optimiza para liberar pesos específicos y volúmenes del material CACing o material de cubierta. Los materiales de densidad alta tal como tierra calcinada, pueden ser mezclados con materiales de baja densidad tal como vermiculita y perlita para acercarse aproximadamente a la densidad de los micelios existentes en la fórmula de micelio de cubierta terminados . Una característica benéfica de los materiales particulados usados en las fórmulas de micelios son aquellos que generalmente contiene poros, huecos, y una textura rugosa. El micelio Agari cus bi sporu s se hizo crecer en estos poros, y se protegió del daño debido a la abrasión cuando los micelios son sacudidos durante la preparación o inmediatamente antes de ser agregados a las mezclas de cubiertas. En muchos micelios, virtualmente el crecimiento micelial es en al superficie de los granos. Cuando se gastan, los micelios de la superficie son efectivamente frotados, exponiendo la superficie a contaminación potencial por los microorganismos competidores. La protección de la abrasión proporcionada por la textura rugosa del material particulado hace al micelio de cubierta resistente al efecto dañino del sacudimiento y abrasión . La textura de los materiales particualdos es también de valor en que los poros y huecos permiten la buena aireación de las mezclas, y ayuda a evitar la formación de masa de las mezclas. La buena aireación también ayuda en el proceso de esterilización. La esterilización por vapor exitosa de un material, requiere que el vapor penetre a través de la masa. Una mezcla escasamente aireada restringe la penetración del vapor. Las masas densas de material también restringen la penetración del vapor. Una falla del vapor al penetrar la mezcla, resulta en manchas frías que no serán esterilizadas exitosamente. Las áreas no esterilizadas localmente de las mezclas reinoculadas del substrato, resultan en la combinación del producto. Las fallas de esterilización son a menudo, debido a la presencia de esporas bacteriana, tal como Ba ci l l u s spp . La contaminación por Ba ci l l us se refiere a los micelios inadecuados para usarse. En una ocasión, una masa densa de una mezcla alcanza la esterilidad comercial, pero no es adecuadamente colonizada por el micelio Agari cus bisporus debido a la penetración escasa de oxígeno. El Agari c us bi sporus es un hongo estrictamente aeróbico. La disponibilidad escasa del oxígeno en el centro de una maza de material no mezclado, restringe el crecimiento de los hongos en la masa. Cuando la masa no es colonizada es eventualmente mezclada con numerosas capas que cubren a los hongos, los nutrientes pueden llegar a ser disponibles a los microorganismos en la mezcla. La disponibilidad de los nutrientes resulta en el crecimiento de los mohos competidores. La inclusión de un material particulado (es decir, tierra calcinada) en la fórmula de micelio de cubierta, reduce la formación de masas en las mezclas y permite la mejor penetración de oxígeno en las masas que lo forman.

Componentes Inorgánicos: Se agrega CaC03 a la fórmula de micelio de cubierta o película, hasta aproximadamente 7 a 8% del peso seco total. Estos componentes ayudan al control del pH del micelio de cubierta a través de un efecto de amortiguación. El Aga ri cus bi sporus típicamente libera los ácidos orgánicos durante el crecimiento. La inclusión de CaCOj en la fórmula, evita una reducción significante en el pH durante el crecimiento. Las fórmulas de micelios de cubierta típicamente tienen un pH de aproximadamente 7.2, inmediatamente antes de ser inoculado cuando se elaboran con agua de la llave. El pH del producto terminado es típicamente de aproximadamente pH 6.7. El contenido exacto de CaC03 no parece ser crítico. El CaS04 . 2H20 (yeso) puede ser agregado a la fórmula de micelio de cubierta hasta aproximadamente 7 a 8% del peso seco total. El CaS04 parece cubrir el exterior de las partículas para evitar la formación de masas y hace que se rompa más fácilmente cualquier grupo que se forme. El CaS04 es un componente opcional pero deseable de la fórmula. El CaS04 y CaC03 puede ser premezclado en una mezcla de 1:1 para simplificar la adición de los ingredientes .

Contenido de agua/humedad. El contenido de humedad óptimo para el micelio de cubierta es 48% de humedad al tiempo de la adición de las mezclas de cubiertas. Mientras el centeno y los micelios de mijo generalmente pierden humedad durante la esterilización y crecimiento, las fórmulas de los micelios de cubierta no pierden una cantidad significante de humedad debido a la evaporación. Por lo tanto, la mayoría de las fórmulas son ajustadas a 48 a 50% de humedad antes de la esterilización. Este contenido de humedad permite el crecimiento vigoroso del micelio Agari cus bi sporus en el substrato y resolución óptima en la composta. Este contenido de humedad más bajo también ayuda a prevenir la formación de masas y permite la mejor penetración del oxígeno en las mezclas. Esto ayuda a prevenir la falla de esterilización y las áreas no colonizadas del producto final.

Preparación de Micelios de Cubierta o película . Las mezclas de micelios de cubierta o película se prepararon por la colocación de los ingredientes secos en un contenedor de mezclado grande tal como un mezclador de paleta o hélice, mezclador de cemento y otro contenedor adecuado en el cual los mezcladores pueden ser mezclados para obtener la homogeneidad. Los ingredientes son pesados, colocados en el mezclador y se mezcla hasta que es uniformemente mezclado. Se agrega suficiente agua como un rocío fino para llevar las mezclas a aproximadamente 48% humedad. EL mezclado adicional después de la adición de agua, reduce cualquier formación de masas que pueda ocurrir. Las jarras o recipientes de policarbonato (160 oz de capacidad total) son llenadas con 6.2 libras de las mezclas hidratadas. Este peso de una fórmula de micelio de cubierta estándar (es decir, fórmula 83) llena los recipientes hasta aproximadamente 75 a 80% de capacidad. Algunas fórmulas son más densas que la fórmula 83. Con las fórmulas más densas, los recipientes contienen menos volumen total. Los recipientes son llenados ya sea manualmente o con una máquina de llenado de recipiente automatizada. Los recipientes son tapados con tapaderas que contienen un elemento de filtro respirable que permite el paso del aire y vapor, pero previene el paso de microorganismos que podrían contaminar el producto terminado. Las mezclas son vapores esterilizados a tiempos y temperaturas necesarias para alcanzar la esterilidad comercial. Esto es típicamente 255F por 150 minutos. Después de la esterilización, las mezclas son enfriadas a menos de 80 F. Los recipientes son brevemente abiertos bajo condiciones asépticas, y se agrega una inoculación. El inoculo puede consistir de grano de mijo o centeno, colonizado con una cepa adecuada del hongo Agari c us bi sporus , y se agrega a los recipientes a aproximadamente 1.1 hasta 1.3% (vol/vol) . Las mezclas pueden también ser inoculadas con substratos no de grano colonizados con el micelio de Agarí c us bi sporus (Patente Estadounidense No. 5, 503, 647) a una velocidad de inoculación similar. Inmediatamente después de la inoculación, los recipientes son brevemente sacudidos en un sacudidor de teñido comercial modificado para distribuir el inoculo a través de la mezcla y el rompimiento de cualquier grupo que pueda formarse durante la esterilización. Los recipientes son incubados a aproximadamente 25C por 4 a 6 días, al tiempo del cual son nuevamente sacudidos para distribuir uniformemente el micelio en crecimiento. Después de unos 4 o 6 días de incubación adicionales a 25 C, las mezclas son igualmente colonizadas con el micelio del hongo. El micelio de cubierta puede ser usado inmediatamente o puede ser almacenado en recipientes bajo condiciones refrigeradas (menos de 38 a 40F) . Alternativamente, los contenidos de los recipientes pueden ser transferidos a bolsas de plástico ventiladas y almacenadas para uso pendiente. Los micelios de hongo envasados, que incluyen los micelios de cubierta o películas descritos actualmente, son típicamente almacenados a menos de aproximadamente 42F por aproximadamente 14' a 21 días para permitir el "recrecimiento" del micelio y el desarrollo de un color casi blanco asociado con la colonización difícil del micelio. Mientras la descripción anteior describe el método de cubierta de micelio usado por los inventores, las personas con habilidades ordinarias en la técnica, podrían fácilmente preparar formulas de micelios de cubierta por otros métodos usados para la producción de micelios.

Uso de Micelios de Cubierta o Película: Los micelios de cubierta como se describen, son usados de una manera similar a los micelios de cubierta estándares y material CACing. Los detalles de uso son inherentes en los ejemplos citados, y son similares a aquellos expertos en la técnica de cultivación de hongos. La cubierta puede incluir un número de diferentes ingredientes tal como, pero no limitado a, turba musgosa, piedra caliza, arcilla y agua. Otros materiales han sido usados tales como fibras de coco, lodos tratados con aguas, y otros materiales exóticos o no exóticos. Brevemente, los micelios de cubierta son mezclados con un material que cubre a los hongos antes de, durante o después de que el material de cubierta se ha agregado a la superficie de la composta del hongo. Si se mezclan antes de la cubierta, se agregan a la mezcla usada para combinar al turba musgosa, lima, y agua antes de la cubierta. Mientras se crea que la mejor realización del micelio de cubierta se alcance cuando se agrega a ala mezcla después de que los otros ingredientes sean completamente mezclados, la resolución satisfactoria también se alcanza cuando todos los ingredientes son mezclados juntos al mismo tiempo, Si el micelio de cubierta es aplicado durante la cubierta, puede agregarse a un cinturón de cubierta, mezclador de turba continuo, u otro sistema que prepara y libera el material de cubierta a la superficie de la composta. Es importante que el micelio de cubierta a ser mezclado, se alcance aún la distribución uniforme dentro de la capa de cubierta. Si se agrega el micelio de cubierta después de la cubierta, puede ser rociado uniformemente sobre la superficie de la cubierta. En este caso, el micelio de la cubierta debería ser mezclado con la capa de cubierta con una máquina cavadora, rastrillo, u otra herramienta para alcanzar una distribución uniforme. Después del envasado y almacenamiento bajo condiciones refrigeradas, el micelio Agari c us bisporus puede usar entrelazar el substrato para junto como una masa sólida. Para la resolución óptima, es importante que esta masa se rompa para restaurar la textura fina del material. La masa puede romperse manualmente o con una variedad de herramientas manuales y/o tamices o pantallas para alcanzar la textura apropiada. Un método más efectivo usa un triturador de jardín (tal como una trituradora de hoja eléctrica Sears) . Los dispositivos equivalentes podrían ser obvios para aquellos expertos en la técnica. La velocidad de uso típica para el micelio de cubierta mejorado es entre 0.01 y 0.15 lb/ft2 de área de superficie de lecho por el material de cubierta, preferiblemente 0.025 a 0.10 lb/ft2, y más preferiblemente 0.04 a 0.055 lb/ft2. No hay deterioro en el uso de velocidades de micelio de cubierta de hasta 0..15 lbs/ft2, pero los niveles sobre aproximadamente 0.15 lbs/ft2 resultan en un rendimiento reducido del hongo. Las reducciones de rendimiento, progresivamente se incrementan con las velocidades empleadas incrementadas sobre 0.015 lb/ft2. Las velocidades de uso similar son efectivas para los micelios de cubierta inoculados con otros hongos que requieren una capa de cubierta, tal como Strophari a .

E emplo 1 Fórmula 83 Gluten de maíz (60% de proteína). ... 29.0 g Pelotillas de papel 16.1 g Tierra calcinada (8/16 malla). . ... 29.0 g Harina de plumas (15.4 de nitrógeno) 19.4 g CaC03/CaS04 (1:1) 6.5 g Agua 75 ml El contenido de nitrógeno de esta fórmula es 6.63%. La fórmula 83 del micelio de cubierta o película se preparó esencialmente como se describe anteriormente, y se almacenó a <42F para uso pendiente, en la planta piloto de investigación de hongos OH Vlasic Farms, Inc., Napoleón. En este ejemplo especifico, la composta de hongo de fase II, se obtuvo de Vlasic Farms Brighton Mushroom Farm (Howe, IN) . La composta fue una fórmula de mezcla madura de pila/paja de trigo, que se ha sometido a 22 días del proceso de composta de fase I y un proceso de 9 días de fase II. La composta (193 Ibs de peso fresco, equivalente a 72 lbs por peso seco a 63% de humedad) como el llenado en cada una de las 16 bandejas de madera 4' x 30' (6 lbs/ft2 en peso seco) . La bandejas fueron individualmente vaciadas en una cinta transportadora. Todas las 16 bandejas se inocularon con 982 g de una formulación de micelio de cubierta patentado, cepa M466 (3% velocidad) y se corrigieron con un suplemento de 654 g S41 (velocidad 2%, S41 consiste de frijol de soya triturado tratado con un revestimiento hidrofóbico y composición inhibidora del moho) . El micelio y suplemento se mezclaron uniformemente en la composta, y la composta se regresó a las bandejas. La composta en todas las 16 bandejas fueron comprimidas hidráulicamente, cubiertas con hojas de polietileno para reducir la pérdida de humedad, y se colocaron en un lugar controlado ambientalmente. La humedad en el sitio se mantuvo a 85%, y la temperatura del aire se controló por un modelo Fancom de computadora para hongos 1060 en un intento por mantener una temperatura de la composta de 76 F. Las temperaturas de la composta y el aire se registraron a intervalos de 240 minutos, con un sistema de adquisición de datos, a intervalos de 255 segundos por la computadora Fancom, y a intervalos diarios usando termómetros de mercurio. Las bandejas se inspeccionaron diariamente para asegurar el crecimiento del micelio Agari cus bí sporus y para la presencia de moho. Después de 15 días de corrida del micelio, las ' bandejas se abonaron en la parte superior con una capa de cubierta de 2" que consiste de turba musgosa de salvado Sunshine, CaC03 y agua (a 85% de humedad) . La capa de cubierta usada para 8 bandejas se inoculó con 0.05 lbs/ft2. Los micelios de cubierta de Vlasic Farms (comercialmente disponible, fórmula patentada) . Dos atados de turba musgosa (125 lbs/ft2 a 35% de humedad) y 22 lbs de CaC03 se colocaron en un mezclador de banda. Se agregó suficiente agua durante el mezclado continuo para alcanzar un contenido de humedad del 85%. Después del mezclado uniforme, el micelio de cubierta se agregó y la mezcla se mezcló por unos 2 minutos adicionales. La capa de cubierta usada para las 8 bandejas restantes se inoculó con 0.05 lbs/ft2 del micelio de cubierta de la fórmula 83. Se usó el mismo procedimiento de mezclado. Todas las bandejas se colocaron en un sitio de crecimiento ambientalmente controlado. Se mantuvo un régimen de temperatura estándar para promover el crecimiento micelial en la capa de cubierta, y las bandejas se regaron como fue necesario. Debido al crecimiento vigoroso del micelio de cubierta de la fórmula 3, aquellas bandejas cubiertas con la fórmula requieren más agua que aquellas cubiertas con la fórmula comercial de Vlasic Farms. Todas las bandejas fueron "levantadas" por la introducción de aire fresco y la reducción de la temperatura del aire a 66 F. Todas las bandejas se levantaron al día 5 después de la cubierta. Los hongos se cosecharon primero 17 días después de la cubierta. Los datos de rendimiento del hongo (lb/pie2) para esta prueba fueron como sigue: Tabla 3. Datos de rendimiento (en lb/ft2) para el experimento 907.

Los valores con la misma letra en cada columna, no son estadísticamente significantes al nivel de 95% de confidencia. El rendimiento promedio usando el micelio de cubierta de la fórmula 83 fue 0.74 lb/ft2 superior que usando el micelio de cubierta comercial de Vlasic Farms estándar. Este rendimiento se incrementa estadísticamente significante al nivel de confidencia de 95%. No se observó moho en las capas de cubierta de cualquier tratamiento.

Ejemplo 2 Fórmula 80 Gramos Gluten de maíz 30.3 Pelotillas de papel 22.4 Vermiculita 19.4 Tierra calcinada 18.8 CaC03 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale) 3.54% % Humedad (Cale) 48.23% Ej emplo 3 Fórmula 68 Gramos Grano de centeno 27.8 Gluten de maíz 27.8 Pelotillas de papel 27.8 Vermiculita 8.3 Agua 75.0 % Nitrógeno (Cale) 4.16% % Humedad (Cale) 48.23% Ejemplo 4 Fórmula 78 Gramos Grano de centeno 23.1 Gluten de maíz 17.0 Pelotillas de papel 23.1 Salvado de trigo 23.1 Vermiculita 6.9 CaC03/CaS04 (1:1) 6.9 Agua 73.7 % Nitrógeno (Cale) 4.27% % Humedad (Cale) 48.23% Ejemplo 5 Fórmula 80b Gramos Gluten de maíz 30.3 Pelotillas de papel 22.4 Vermiculita 19.4 Tierra calcinada 18.8 CaC03/ CaS 04 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale) 3.54% % Humedad (Cale) 48.78% Ejemplo 6 Fórmula 80c-2 Gramos Gluten de maíz 8.0 Pelotillas de papel 33.6 Vermiculita 32.8 Tierra calcinada 13.6 CaC03 12.0 Agua 80 % Nitrógeno (Cale! 1.38% % Humedad (Cale) 48.64% Ejemplo 7 Fórmula 80c-16 Gramos Gluten de maíz 63.5 Pelotillas de papel 13.3 Vermiculi t a 13.0 Tierra calcinada 5.4 CaC03 4.8 Agua 73.0 % Nitrógeno (Cale! 7.01% % Humedad (Cale) 48.12% Ejemplo 8 Fórmula 80d Gramos Gluten de maíz (60%) 33.3 Pelotillas de papel 22.4 Vermiculita 18.2 Tierra calcinada 17.0 CaC03 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale 7% % Humedad (Cale) 48.89% Ejemplo 9 Fórmula 80d-4 Gramos Gluten de maíz (60%) 78.4 Pelotillas de papel 7.3 Vermiculita 5.9 Tierra calcinada 5.5 CaCOj 2.9 Agua 72.5 % Nitrógeno (Cale! 8.57% % Humedad (Cale) 48.37% Ejemplo 10 Fórmula 80d-4 Gramos Harina de Plumas 69.4 Pelotillas de papel 10.3 Vermiculita 8.3 Tierra calcinada 7.8 CaC03 4.2 Agua 72.2 % Nitrógeno (Cale! 10.10% % Humedad (Cale) 48.01% Ej emplo 11 Fórmula 80e-7 (P55) Gramos Harina de linaza 51.1 Pelotillas de papel 15.7 Vermiculita 13.2 Tierra calcinada 13.6 CaC03 6.4 Agua 74.5 % Nitrógeno (Cale) 3.63% % Humedad (Cale) 48.66% Ejemplo 12 Fórmula 83 (P57) Gramos Gluten de maíz 30.3 Pelotillas de papel 22.4 Tierra calcinada 20.0 Harina de plumas 18.2 CaC03 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale) 6.58% % Humedad (Cale) 48.78% Ejemplo 13 Fórmula 83-C5 (P57) Gramos Desechos de semilla de aldogón 30.3 Pelotillas de papel 22.4 Tierra calcinada 20.0 Harina de plumas 18.2 CaCOj 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale! 4.69% % Humedad (Cale) 48.78% Ejemplo 14 Fórmula 83-s5 (P59) Gramos Frijol de soya completo 51.5 Pelotillas de papel 15.7 Tierra calcinada 14.0 Harina de plumas 12.8 CaC03 6.4 Agua 76.6 % Nitrógeno (Cale! 6.03% % Humedad (Cale) 48.74' Ej emplo 15 Fórmula 83-c3 (P59) Gramos Harina de semilla de algodón 46.5 Pelotillas de papel 17.2 Tierra calcinada 15.3 Harina de plumas 14.0 CaC03 7.0 Agua 76.7 % Nitrógeno (Cale! 6.48% % Humedad (Cale) 48.66% Ejemplo 16 Fórmula 83-c4 (P59) Gramos Maíz de cosecha 54.5 Pelotillas de papel 13.5 Tierra calcinada 12.0 Harina de plumas 14.5 CaC03 5.5 Agua 76.4 % Nitrógeno (Cale) 3.61% % Humedad (Cale) 48.74% Ej emplo 17 Fórmula 83-sh2 (P61) Gramos Vainas de frijol de soya 30.3 Pelotillas de papel 22.4 Tierra calcinada 20.0 Harina de plumas 18.2 CaC03 9.1 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale) 3.94: % Humedad (Cale) 48.71 Ejemplo 1 Fórmula P69-I Gramos Harina de plumas 16.5 Gluten de maíz 24.8 Tierra calcinada 33.9 Pelotillas de papel 16.5 CaC03 8.3 Agua 78.4 % Nitrógeno (Cale) 5.58% % Humedad (Cale) 48.23% Ejemplo 19 Fórmula P69-2 Gramos Harina de plumas 24.8 Gluten de maíz 16.5 Tierra calcinada 33.9 Pelotillas de papel 16.5 CaC03 8.3 Agua 78.4 % Nitrógeno (Cale) 6.09% % Humedad (Cale) 48.23% Ejemplo 20 Fórmula P71 Gramos Vaina de frijol de soya 53.6 Pelotillas de papel 8.9 Tierra calcinada 17.0 Harina de plumas 14.3 CaC03 5.4 Agua 75.0 % Nitrógeno (Cale) 3.61 % Humedad (Cale) 48.12% Ej emplo 21 Fórmula P71-4 Gramos Harina de hueso 55.6 Pelotillas de papel 9.3 Tierra calcinada 18.5 Harina de plumas 11.1 CaCO, 5.6 Agua 75.9 % Nitrógeno (Cale! 3.53% % Humedad (Cale) 48.48% Ejemplo 22 Fórmula P73-w4 Gramos Harina de trigo 55.6 Pelotillas de papel 9.3 Tierra calcinada 18.5 Harina de plumas 11.1 CaC03 5.6 Agua 75.9 % Nitrógeno (Cale! 3.69% % Humedad (Cale) 48.48% E emplo 23 Fórmula P73-cs4 Gramos Almidón de maíz 50.0 Pelotillas de papel 8.3 Tierra calcinada 16.7 Harina de Plumas 20.0 CaC03 5.0 Agua 230 % Nitrógeno (Cale! 3.50% % Humedad (Cale) 48.45% Ejemplo 24 Fórmula P73-bf4 Gramos Harina de cebada 53.6 Pelotillas de papel 8.9 Tierra calcinada 17.9 Harina de plumas 14.3 CaC03 5.4 Agua 73.2 % Nitrógeno (Cale! 3.59% % Humedad (Cale) 47.59% Ejemplo 25 Fórmula P83-cf8 Gramos Harina de maíz 62.5 Pelotillas de papel 6.3 Tierra calcinada 12.5 Harina de plumas 15.0 CaC03 3.8 Agua 75.0 % Nitrógeno (Cale) 3.61% % Humedad (Cale) 48.40% Ejemplo 26 Fórmula p75-yc4 Gramos Harina de maíz amarillo 43.5 Pelotillas de papel 10.9 Tierra calcinada 21.7 Harina de plumas 17.4 CaC03 6.5 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale) 3.69% % Humedad (Cale) 48.66% Ejemplo 27 Fórmula P75-bc4 Gramos Harina de maíz azul 43.5 Pelotillas de papel 10.9 Tierra calcinada 21.7 Harina de plumas 17.4 CaC03 6.5 Agua 78.8 % Nitrógeno (Cale! 3.79% % Humedad (Cale) 48.66% Ejemplo 28 Fórmula P75-rf4 Gramos Harina de centeno 53.6 Pelotillas de papel 8.9 Tierra calcinada 17.9 Harina de plumas 14.3 CaC03 5.4 Agua 75.0 % Nitrógeno (Cale) 3.63% % Humedad (Cale) 48.12% Ejemplo 29 Fórmula P75-pm2 Gramos Harina de cacahuate 29.4 Pelotillas de papel 14.7 Tierra calcinada 29.4 Harina de plumas 17.6 CaCOj 8.8 Agua 79.4 % Nitrógeno (Cale) 5-72% % Humedad (Cale) 48.62% Ejemplo 30 Fórmula P87-rf Gramos Harina de centeno 64.1 Pelotillas de papel 6.4 Tierra calcinada 12.8 CaC03 3.8 Agua 74.4 % Nitrógeno (Cale! 3.58% % Humedad (Cale) 48.28% Ejemplo 31 Fórmula P87-wf Gramos Harina de trigo 63.4 Pelotillas de papel 7.6 Tierra calcinada 15.2 Harina de plumas 9.1 CaC03 4.6 Agua 76.2 % Nitrógeno (Cale! 3.58% % Humedad (Cale) 48.83% Ejemplo 32 Fórmula P87-bf Gramos Harina de cebada 64.1 Pelotillas de papel 6.4 Tierra calcinada 12.8 Harina de plumas 12.8 CaC03 3.8 Agua 74.4 % Nitrógeno (Cale) 3.53% % Humedad (Cale) 48.281 Ejemplo 33 Fórmula P87-yc Gramos Harina de maíz amarillo 51.7 Pelotillas de papel 8.6 Tierra calcinada 17.2 Harina de plumas 17.2 CaCO, 5.2 Agua 75.9 Nitrógeno (Cale! 3.76% Humedad (Cale) 48.29! Ejemplo 34 Fórmula P87-bc Gramos Harina de maíz azul 58.8 Pelotillas de papel 7.4 Tierra calcinada 14.7 Harina de plumas 14.7 CaC03 4.4 Agua 76.5 % Nitrógeno (Cale) 3.57% % Humedad (Cale) 48.721 Ej emplo 35 Fórmula P89-83b Gramos Harina de plumas 20.0 Gluten de maíz 30.0 Tierra calcinada 20.0 Pelotillas de papel 20.0 CaC03 10.0 Agua 77.9 % Nitrógeno (Cale! 6.80% % Humedad (Cale) 48.40% Ejemplo 36 Fórmula P89-8b3-3 Gramos Harina de plumas 20.0 Gluten de maíz 30.0 Tierra calcinada 20.0 Pelotillas de papel 16.6 CaC03 10.0 Fibra de avena incrementada 3.4 Agua 71.1 % Nitrógeno (Cale) 6.99% % Humedad (Cale) 48.24% REFERENCIAS Chang, S.T. & W. A. Hayes. 1978. The Biology and Cultivation of Edible Mushrooms . Academic Press, New York. 819 pp .

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Tabla 3. Fuentes de nutrientes para el suplemento del micelio .

FUENTE DE NUTRIENTE % NITRÓGENO Urea 42.00 Harina de plumas 15.30 Harina de jugo 14.38 Gluten de maíz 11.00 Solubles de pescado condensado 9.68 Algas secas (escendesmus) 8.14 Harina de cacahuate 8.00 Harina de frijol de soya 7.68 Lodo de levadura 7.65 Harina de semilla de algodón 7.50 Harina de cártamo 7.31 Suero de queso 7.31 Harina de girasol 7.16 Frijol de soya triturado completo 6.40 Frijol de soya completo 6.40 Harina de cañóla 6.06 Harina de linaza 5.98 Grano seco destilados 4.75 Desechos de algodón 3.89 Licor en etapa de maíz 3.65 Cañóla completa 3.52 Alfalfa 2.96 Salvado de trigo 2.75 Harina de trigo 2.71 Pollitos 2.70 Harina de amaranto 2.58 Harina de huesos 2.45 Pavos pequeños 2.20 Piedra pómez 2.03 Vainas de girasol 1.84 Harina de centeno 1.83 Vainas de cacahuates 1.79 Harina de cebada 1.76 Vainas de frijol de soya 1.62 Maíz de cosecha 1.53 Harina de maíz azul 1.48 Harina de maíz 1.40 Harina de maíz amarillo 1.26 Vainas de algodón 0.64 Almidón de maíz 0.11 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes.

Claims (25)

RÉ?VIND?CÁCÍONfcS

1. Un lecho de hongos que tiene una capa de composta y una capa de cubierta, caracterizado porque la capa de cubierta comprende un micelio de cubierta que comprende una mezcla de: (a) al menos, un ingrediente proteináceo en una cantidad para proporcionar al menos 3.5% de nitrógeno en una base de peso seco; (b) 2 a 30% en peso, basado en el peso seco de las pelotillas de papel (c) 5 a 60% en peso basado en el peso seco de al menos, un material particulado, (d) un amortiguador en una cantidad efectiva para proporcionar un pH de aproximadamente 6 a 7.8, y (e) agua; y colonizado con un micelio de hongo .

2. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de hongo es Aga ri cus bi sporus .

3. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque la capa de cubierta además comprende una turba musgosa, piedra caliza, arcilla, agua y mezclas de los mismos

4. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el ingrediente proteináceo se selecciona a partir del grupo que consiste de gluten de maíz, harina de plumas, frijol de soya triturado, harina de soya, harina de semilla de algodón, y mezclas de los mismos .

5. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el ingrediente proteináceo es gluten de algodón.

6. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta además comprende al menos, un ingrediente oleaginoso .

7. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 6, caracterizado porque el ingrediente oleaginoso se selecciona del grupo que consiste de frijol de soya triturado, soya fina, girasol, girasol triturado y aceite de maíz.

8. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el material particulado se selecciona del grupo que consiste de tierra calcinada, vermiculita, perlita, y mezclas de los mismos .

9. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta demás comprende (f) yeso en una cantidad efectiva para reducir la formación de masas.

10. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta comprende una base en peso seco de: 5 a 80% en peso del ingrediente proteináceo, 2 a 30% en peso de las pelotillas de papel, 5 a 60% en peso del material particulado, 1 a 10% en peso de CaC03, y entre 40 y 54% de agua.

11. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta además comprende 1 a 10% en peso de CaS04.

12. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 11, caracterizado porque el micelio de cubierta comprende de 7-8% en peso de CaC03.

13. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque 80% de las pelotillas de papel tienen un tamaño de entre aproximadamente 0.85 y 4.75 mm.

14. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 13, caracterizado porque el micelio de cubierta además comprende 1 a 50% en peso de grano .

15. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta tiene un contenido de humedad de entre aproximadamente 46 a 52%.

16. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 15, caracterizado porque el contenido de humedad es entre 48 y 50%.

17. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el ingrediente proteináceo está presente en una cantidad para proporcionar entre aproximadamente 6 y 6.5% de nitrógeno basado en el peso seco.

18. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el amortiguador es carbonato de calcio.

19. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el pH es entre 6.2 y 7.4

20. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque (b) las pelotillas de papel, (c) material particulado, o ambos, están presentes en una cantidad efectiva para proporcionar al menos, 10,000 partículas por lOOg de producto terminado.

21. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 20, caracterizado porque (b) las pelotillas de papel, (c) material particulado, o ambos, están presentes en una cantidad efectiva para proporcionar al menos, 20,000 partículas por lOOg de producto terminado.

22. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado porque el micelio de cubierta se prepara mediante la colonización de una mezcla de (a) al menos, un ingrediente proteináceo en una cantidad para proporcionar al menos, 3.5% de nitrógeno basado en el peso seco; (b) 2 a 30% basado en el peso seco de las pelotillas de papel, (c) 5 a 60% en peso basado en el peso seco de al menos, un material particulado, (d) un amortiguador en una cantidad efectiva para proporcionar un pH de aproximadamente 6 a 7.8, y (e) agua; con un micelio de hongo.

23. El lecho de hongos como se reivindica en la reivindicación 22, caracterizado porque el micelio de hongo es Agari c u s bi sporus .

24. Un método de preparación de un lecho de hongos caracterizado porque comprende la aplicación de una capa de cubierta a una capa de composta en donde la capa de composta comprende un micelio de cubierta que comprende una mezcla de: (a) al menos un ingrediente proteináceo en una cantidad para proporcionar al menos 3.5% de nitrógeno basado en el peso seco; (b) 2 a 30% basado en el peso seco de las pelotillas de papel, (c) 5 a 60% en peso, basado en el peso seco de al menos, un material particulado, (d) un amortiguador en una cantidad efectiva para proporcionar un pH de aproximadamente 6 a 7.8, y (e) agua; con un micelio de hongo.

25. El método como se reivindica en la reivindicación 23, caracterizado porque el micelio de hongo es Agari cus bi sporus .