MX2015002816A - Composiciones mejoradas para la cicatrizacion de heridas que comprenden microesferas. - Google Patents

Abstract

Se proporcionan composiciones farmacéuticas o médicas para el tratamiento de una herida, la composición comprende microesferas como un ingrediente activo y agua como un portador para dichas microesferas. En algunas modalidades, se proporcionan composiciones que comprenden un agente espesante disuelto dentro del agua para formar una solución que tiene una gravedad específica similar a la de las microesferas.

Description

COMPOSICIONES MEJORADAS PARA LA CICATRIZACIÓN DE HERIDAS QUE COMPRENDEN MICROESFERAS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige al campo de la cicatrización de heridas. En particular, la invención se dirige a composiciones mejoradas que comprenden microesferas para el tratamiento de heridas y métodos para la fabricación de las mismas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las heridas crónicas y difíciles de curar representan una carga significativa para los pacientes, profesionales de la salud y el sistema de salud, que afectan sólo en los Estados Unidos a casi 6 millones de pacientes y cuestan un estimado de 20 billones de dólares anualmente. Individuos con enfermedades subyacentes tienden a sufrir de heridas crónicas, y la alteración de la curación de heridas es un rasgo distintivo de una variedad de condiciones médicas.

Normalmente, los procesos de cicatrización de heridas se componen de las siguientes etapas: (1) respuesta vascular (hemostasia); (2) respuesta inflamatoria (inflamación); (3) una fase proliferativa (granulación, epitelización) también conocida como la fase de crecimiento activo; y (4) una fase de maduración (fase de reconstrucción). La duración, eficiencia y orden de las etapas de cicatrización de heridas pueden verse alteradas, lo que conduce a una herida crónica. Un número de factores exógenos y endógenos, asi como una variedad de condiciones médicas puede causar dicha alteración. Ejemplos de dichos factores incluyen infecciones, ulceración, trastornos de la circulación, desnutrición, estrés, radioterapia y/o quimioterapia del cáncer, envejecimiento y trauma.

La Patente de los Estados Unidos No. 5,861,149 y 6,086,863, para un inventor de la presente solicitud, relacionada con una composición y un método para tratar una herida que consiste esencialmente de un agente que es capaz de formar un contacto de múltiples puntos con una membrana celular, dicho agente siendo sustancialmente no biodegradable durante el periodo de tratamiento. En modalidades particulares, el agente son microesferas hechas de polímero no biodegradable (por ejemplo, poliestireno) y lleva una considerable carga eléctrica.

La Patente de los Estados Unidos No. 7,465,463 se refiere a composiciones de microesferas que tienen una capacidad de cicatrización de heridas con propiedades antiinflamatorias para aplicación a la inflamación o heridas oculares, y para métodos de uso de dicha composición sola o en combinación con otros agentes en la prevención y tratamiento de la inflamación o heridas oculares. El contenido de la Patente de los Estados Unidos No. 5, 861,149 y 6, 086,863 y 7, 465,463 está incorporado por referencia en el presente documento en su totalidad.

A pesar del creciente número de terapias disponibles, la cicatrización de heridas, tales como heridas crónicas y difíciles de cicatrizar permanecen como una rigurosa carga médica, social y económica. En la actualidad, hay una creciente necesidad de alcances terapéuticos que promuevan la cicatrización de heridas. Sigue siendo una necesidad insatisfecha, y sería muy ventajoso haber mejorado, composiciones de larga duración y rentables para la cicatrización de heridas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención proporciona composiciones farmacéuticas para tratar una herida, las composiciones comprenden microesferas de poliestireno como un ingrediente activo. En algunas modalidades, la composición comprende microesferas una solución hipotónica (por ejemplo, agua) como portador para las microesferas. En modalidades adicionales, las composiciones comprenden un agente (por ejemplo, un excipiente) disuelto dentro del agua para formar una solución que tiene una gravedad especifica similar a la de las microesferas. La invención proporciona además métodos para cicatrizar una herida en un sujeto utilizando dichas composiciones, y métodos para la preparación de dichas composiciones.

La presente invención se basa, en parte, en el sorprendente descubrimiento que las microesferas de poliestireno suspendidas en una solución hipotónica son significativamente más efectivas en la cicatrización de heridas que las microesferas suspendidas en solución salina, una solución isotónica. Mientras que la solución salina es considerada el estándar del cuidado para limpiar, humedecer, empapar e hidratar heridas, la cicatrización de heridas fue significativamente más rápida cuando se usa, una solución hipotónica como portador para las microesferas.

Como se ejemplifica en el presente documento más adelante, las heridas de espesor total inducidas en ratas Sprague-Dawlcy fueron tratadas con múltiples aplicaciones de microesferas de poliestireno en solución salina o microesferas de poliestireno en agua destilada. Inesperadamente, las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en agua destilada alcanzaron el 50% de cierre de la herida significativamente más rápido que las heridas tratadas con raicroesferas de poliestireno suspendidas en solución salina.

En modalidades adicionales, la invención proporciona composiciones mejoradas que comprenden un agente espesante añadido a o disuelto dentro del agua para formar una solución portadora que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno. Sin querer estar unida a ninguna teoría o mecanismo de acción, utilizando una solución que tiene una gravedad específica similar a esa de las microesferas que previene la agregación o asentamiento de las microesferas con el tiempo, de ese modo asegurando la aplicación exacta y precisa de la composición que cicatriza las heridas.

De acuerdo con un primer aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica para el tratamiento de una herida que comprende microesferas de poliestireno cargadas negativamente, agua y agente espesante disuelto dentro del agua para formar una solución que tiene una gravedad específica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno. En modalidades particulares, las microesferas de poliestireno tienen una gravedad específica de alrededor de 1.05 gramos por centímetro cúbico. En modalidades específicas, el agente espesante forma una solución que tiene una gravedad específica en el rango de 1.02-1.07 gramos por centímetro cúbico.

Los ejemplos no limitantes de agentes espesantes útiles en el aumento de la gravedad específica del agua son seleccionados del grupo que consiste de: polímeros sintéticos hidrofílicos, azúcares o derivados de los mismos, glicerol o glicerina sus derivados o combinaciones de los mismos. En algunas modalidades, es seleccionado el polímero sintético hidrofílico del propilenglicol (PPG) y polietilenglicol (PEG). En algunas modalidades, los azúcares son seleccionados del grupo que consiste de sacarosa, glucosa, sorbitol y manitol. Ejemplos no limitantes adicionales de los agentes espesantes son ácido cítrico y resorcinol. En una modalidad ejemplificada, el agente espesante es glicerol, o un derivado del mismo.

En algunas modalidades, los agentes espesantes, constituyen alrededor de 1% a alrededor de 50% en peso de la composición, alrededor de 10% a alrededor de 30% en peso de la composición, o alrededor de 20% a alrededor de 25% en peso de la composición.

De acuerdo con otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica para tratar una herida que consiste esencialmente de microesferas de poliestireno cargadas negativamente en una solución hipotónica. En algunas modalidades, dicha solución hipotónica es agua, por ejemplo, agua destilada. En una modalidad ejemplificada, dicha agua es agua estéril. En una modalidad ejemplificada, dicha agua es agua para inyección (WFI).

En otra modalidad, las microesferas de poliestireno de las composiciones de la invención tienen un diámetro en un rango de alrededor de 0.02 mm a alrededor de 20 pm. En otra modalidad, las microesferas de poliestireno tienen un diámetro de alrededor de 0.1 pm a alrededor de 20 pm o de alrededor de 1 pm a alrededor de 10 pm.

En aún otra modalidad, las microesferas de poliestireno constituyen alrededor de el 0.001% a alrededor de 10% en peso de la composición. En una modalidad particular, la pluralidad de las microesferas de poliestireno que constituyen alrededor de el 0.001% a alrededor de 0.09%, o alrededor de 0.025% en peso de la composición.

En modalidades particulares, las microesferas de las composiciones y métodos de la invención forman un contacto de múltiples puntos con una membrana celular. En otra modalidad, dichas microesferas tienen grupos de superficie cargados negativamente. En aún otra modalidad, dichas microesferas son sustancialmente no biodegradables durante el periodo de tratamiento.

En otra modalidad, la composición está formulada para administración tópica sobre una herida.

De acuerdo con otro aspecto, se proporciona un método para tratar una herida en un sujeto en necesidad del mismo, el método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de las composiciones farmacéuticas de la invención.

De acuerdo con un aspecto adicional, se proporciona el uso de una composición farmacéutica para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una herida en un sujeto en necesidad del mismo, la composición comprende microesferas de poliestireno cargadas negativamente, agua y opcionalmente un agente espesante, dicho agente espesante forma una solución que tiene una gravedad específica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

De acuerdo con otro aspecto, se proporciona una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de una herida en un sujeto en necesidad del mismo, la composición comprende microesferas de poliestireno cargadas negativamente, agua y opcionalmente un agente espesante, dicho agente espesante forma una solución que tiene una gravedad específica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

En algunas modalidades, la herida es seleccionada del grupo que consiste de una quemadura, una herida difícil (o lenta) para cicatrizar, trauma y una herida crónica. En otra modalidad, la herida crónica es seleccionada del grupo que consiste de úlcera diabética, una úlcera por presión, una úlcera arterial, una úlcera venosa, úlceras de decúbito asociadas con las úlceras de presión y discapacidad a largo plazo, una herida aguda o una herida quirúrgica. En una modalidad adicional, la herida se asocia con estados en los que se debilita la capacidad de reparación normal de la herida.

De acuerdo con otro aspecto, se proporciona una composición farmacéutica contenida en un paquete para el tratamiento de una herida en un sujeto, la composición que comprende alrededor de 0.001% - 10% en peso de microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en una solución hipotónica. En algunas modalidades, la solución hipotónica es agua esterilizada. En modalidades adicionales, la solución hipotónica es agua destilada. En modalidades particulares, dicha solución hipotónica es WFI. De acuerdo con aún otra modalidad, dicha solución hipotónica es agua, y la composición farmacéutica comprende además un agente espesante que forma una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

De acuerdo con otro aspecto, se proporciona un equipo para tratar una herida en un sujeto, el equipo que comprende (i) un contenedor, (ii) una composición farmacéutica dentro de un contenedor, y (iii) instrucciones para aplicar dicha composición farmacéutica a la herida, la composición farmacéutica que comprende alrededor de 0.001%-10% en peso de microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en una solución hipotónica. En algunas modalidades, la solución hipotónica es agua esterilizada. En modalidades adicionales, la solución hipotónica es agua destilada. En modalidades particulares, dicha solución hipotónica es WFI. De acuerdo con aún otra modalidad, dicha solución hipotónica es agua, y la composición farmacéutica comprende además un agente espesante que forma una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

Otros objetos, características y ventajas de la presente invención se convertirán claras a partir de la siguiente descripción y figuras.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 representa el efecto de cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno en agua para inyección (WFI) en comparación con solución salina. Las ratas fueron anestesiadas y las heridas de espesor total fueron producidas en su lado dorsal (día 0). En cada animal las microesferas de poliestireno en WFI fueron aplicadas en la herida izquierda y solución salina fue aplicada en la herida derecha Las heridas después fueron cubiertas con gasa. Las ratas fueron anestesiadas, fotografiadas, tratadas y vendadas en los dias 0, 2, 4, 7, 9, 11 y 14.

La Figura 2A es una gráfica que muestra las cinéticas de la cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno en WFI (linea discontinua) en comparación con la solución salina (línea continua).

La Figura 2B es una gráfica que muestra las cinéticas de la cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno en WFI (línea continua) en comparación con las microesferas en solución salina (línea discontinua).

La Figura 3 es una gráfica que muestra las cinéticas de la cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% (línea discontinua) en comparación con las microesferas en DMEM (línea continua).

La Figura 4 es una gráfica que muestra las cinéticas de la cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% (pH 5) (mostrada utilizando una línea discontinua) en comparación con las microesferas en DMEM (línea continua).

La Figura 5 es una gráfica que muestra las cinéticas de la cicatrización de la herida de las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% (pH 7) (mostrada utilizando una linea discontinua) en comparación con las icroesferas en DMEM (linea continua).

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona, en algunas modalidades, composiciones farmacéuticas y/o médicas que comprenden microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en agua. La invención proporciona además composiciones farmacéuticas o médicas que comprenden las microesferas de poliestireno y un agente espesante disuelto o dispersado dentro del agua para formar una solución con una gravedad especifica sustancialmente similar a dichas microesferas de poliestireno. La presente invención proporciona además métodos para cicatrizar una herida en un sujeto utilizando dichas composiciones, y métodos para la preparación de los mismos y equipos que comprenden dichas composiciones.

Como se ejemplifica en el presente documento más adelante, las heridas de espesor total inducidas en ratas Sprague-Dawlcy fueron tratadas con múltiples aplicaciones de microesferas de poliestireno en solución salina o microesferas de poliestireno en agua para inyección (WFI). Inesperadamente, las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en WFI alcanzaron el 50% de cierre de la herida significativamente más rápido que las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en solución salina.

Asi, en algunas modalidades de la presente invención, las microesferas son suspendidas o dispersadas en agua. En virtud de utilizar agua como el portador de las microesferas, las composiciones se esterilizan fácilmente y pueden ser guardadas a temperatura ambiente (es decir, no requiere refrigeración). En algunas modalidades, las composiciones son ventajosas para el uso de sujetos que demuestran hipersensibilidad a composiciones terapéuticas, tales como las composiciones descritas en la Publicación de las Solicitud de Patente Internacional números WO 98/055108 y WO 00/024378.

En algunas modalidades, la invención proporciona una composición farmacéutica o médica para el tratamiento de una herida que comprende o que consiste de microesferas de poliestireno cargadas negativamente. En modalidades adicionales, las composiciones de la invención comprenden además un excipiente (por ejemplo, un agente espesante soluble en agua) añadido a o disuelto dentro del agua para formar una solución que tiene una gravedad específica similar a la de las microesferas. En algunas modalidades, el agente espesante está disperso en el agua para formar una dispersión que ttiieennee una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

En algunas modalidades, las microesferas permanecen en suspensión o dispersión durante un largo periodo de tiempo cuando se utiliza una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a la de las microesferas. El uso de dichas composiciones mejoradas asegura la aplicación precisa de la composición de cicatrización de la herida. Por ejemplo, la etapa esencial de la mezcla de la composición antes de su aplicación a la herida (para asegurar que las microesferas están suspendidas/dispersadas) puede ser evitable, que es particularmente ventajoso en gran parte de los sujetos que tienen heridas crónicas, tales como sujetos ancianos.

En una modalidad ejemplificada, se proporciona una composición farmacéutica que comprende (i) alrededor de 0.001% - 10% en peso de microesferas de poliestireno cargadas negativamente, (ii) alrededor de 10% - 30% en peso de glicerol, glicerina, una combinación o un derivado de los mismos y (iii) agua como un portador para dichas microesferas.

De acuerdo con ciertas modalidades, se proporciona un método para la preparación de las composiciones de la presente invención. En algunas modalidades, el método comprende de las siguientes etapas generales: añadir un agente espesante a una solución hipotónica (por ejemplo, agua destilada o WFI) para formar una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas (por ejemplo, en el rango de 1.02 g/cm3 y 1.07 g/cm3); y añadiendo dichas microesferas cargadas negativamente a la solución.

En algunas modalidades, se prepara la solución portadora y después se agregan las microesferas a la solución. En otras modalidades, las microesferas se agregan a la solución antes del ajuste de la gravedad especifica de la solución. Preferentemente, la gravedad especifica de la solución portadora es ajustada y opcionalmente inspeccionada, antes a y/o después de la adición de las microesferas. Un téenico experto apreciará que dependiendo en el tipo de agente espesante se requieren de varios intervalos de tiempo de mezclado para la preparación de la solución portadora. En modalidades no limitantes, se agrega el agente espesante y se mezcla por al menos 5 minutos, al menos 10 minutos, al menos 15 minutos, al menos 20 minutos, al menos 30 minutos o al menos 60 minutos, antes de la adición de las microesferas.

En modalidades particulares, la composición de la invención tiene un pH de alrededor de 4 a alrededor de 8, de alrededor de 4.5 a alrededor de 7.5, o de alrededor de 5 a alrededor de 7. En una modalidad, dicha composición tiene un pH de alrededor de 4.5 a alrededor de 5.5 (por ejemplo, 5). En otra modalidad, dicha composición tiene un pH de alrededor de a alrededor de 6.5 a 7.5 (por ejemplo, 7).

Normalmente, el agua utilizada en las composiciones y los métodos de la invención es agua esterilizada. En algunas modalidades, el agua es agua destilada. En una modalidad ejemplificada, dicha agua es agua para inyección (WFI).

El agua para inyección (WFI) es conocida en la téenica como estéril, no pirogénica, agua destilada comercialmente disponible en un contenedor de una sola dosis para la administración intravenosa después de la adición de un soluto adecuado. El pH de WFI es 5.5 (5.0 a 7.0) y la osmolaridad es 0.

Una "solución salina" es conocida en la técnica como una solución de cloruro de sodio obtenida mediante la disolución de alrededor de 9 gramos de cloruro de sodio (NaCl) en 1 litro de agua destilada.

Como se utiliza en el presente documento, los términos "hipotónica", "isotónica" e "hipertónica" relacionados a una concentración relativa a la concentración de soluto en el citoplasma de una célula.

Gravedad especifica La gravedad especifica es una expresión del peso de una sustancia relativa al peso de un volumen igual de agua.

Normalmente, la gravedad especifica se mide en 25°C. Por ejemplo, el agua tiene una gravedad especifica de uno. En algunas modalidades de la invención, un agente espesante se disuelve dentro del portador del agua para formar una solución que tiene una gravedad especifica adecuada. En modalidades particulares, una gravedad especifica adecuada es similar a la de las microesferas dentro de las composiciones de la invención. La gravedad especifica de las microesferas de poliestireno está normalmente en el rango de 1.05. En modalidades particulares, el agente espesante soluble en agua tiene un efecto estabilizador de solución. El término "efecto estabilizador de solución" se refiere a las microesferas que permanecen en suspensión/dispersión (es decir, no agregación) durante un periodo de tiempo considerablemente largo. Un "periodo de tiempo sustancialmente largo" como se utiliza en el presente documento se relaciona a un periodo de tiempo de al menos 10%, al menos 15%, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40% o al menos 50% más largo que las composiciones que comprenden microesferas que carecen de un agente espesante. Como se divulgó en el presente documento, dicho efecto estabilizador de solución se mantiene durante al menos tres meses.

En algunas modalidades, una cantidad suficiente de un disolvente (es decir, un agente espesante soluble en agua) se disuelve dentro del agua de tal manera que la solución tiene una gravedad especifica entre 1.02 g/cm3 y 1.07 g/cm3, particularmente entre 1.03 g/cm3 y 1.06 g/cm3, más concretamente entre 1.04 g/cm3 y 1.06 g/cm3. El agente espesante es cualquier articulo capaz de modificar la gravedad especifica de la solución que sea sustancialmente similar a la de las microesferas dentro de la composición. Los agentes adecuados incluyen sales y disolventes orgánicos. Los solventes orgánicos adecuados para aumentar la gravedad especifica del agua incluyen glicoles, tales como etilenglicol, propilenglicol, polietilenglicol y polipropilenglicol.

Ejemplos no limitantes de agentes espesantes y su gravedad especifica son: glicerol (1.129 a 25°C), propilenglicol (1.036 a 25°C), ácido cítrico (1.665 a 25° C), glicerina (1.263 a 25° C), glicerina 50% en agua (1.13 a 20° C), resorcinol (1.272 a 25°C), PEG 300 (1.12 - 1.13 a 25°C), melaza (1.40-1.49 a 15.6°C), jarabe de maíz seleccionado de 86.4 Brix, 84.4 Brix y 78.4 Brix (1.405-1.459 a 15.6 ° C), sacarosa seleccionada de 60 Brix, 64 Brix, 68 Brix , 72 Brix, 74 Brix , 76 Brix (1.29-1.39 a 15.6°C); glucosa (1.35-1.44 a 15.6°C), sorbitol (1.29 a 20°C), manitol (1.50 a 25°C), manitol 20% en agua (0.965-1.070 a 25°C) y meltodextrina (2.95 a 25° C).

Además, el agente espesante está presente en la composición en un volumen adecuado para generar una gravedad específica dentro de los rangos deseados (por ejemplo, sustancialmente similar a la de las microesferas). Como un ejemplo no limitante, el agente espesante es aproximadamente 0.75 a 75.0 por ciento, 1 a 50 por ciento, 10 a 35 por ciento, alternativamente 15 a 25 por ciento, del volumen de la solución. En algunas modalidades, el agente espesante es al menos 1, al menos 5, al menos 10, al menos 15, al menos 16, al menos 17, al menos 18, al menos 19, al menos 20 por ciento del volumen de la solución. En otra modalidad, el agente espesante es máximo 50, máximo 40, máximo 35, máximo 34, máximo 33, máximo 32, máximo 31, máximo 30, máximo 29, máximo 28, máximo 27, máximo 26, máximo 25 por ciento del volumen de la solución. En una modalidad ejemplificada, el agente espesante (por ejemplo, glicerol) es alrededor de 22 por ciento del volumen de la solución.

En modalidades adicionales, el agente espesante no interfiere con la capacidad de las microesferas dentro de la composición para formar un contacto de múltiples puntos con una membrana celular. En otra modalidad, el agente espesante no interfiere con la carga negativa de dichas microesferas. En modalidades especificas, el agente espesante es no iónico.

En algunas modalidades, la gravedad especifica del portador está dentro de 0.04 de la gravedad especifica de las microesferas. En otra modalidad, la gravedad especifica del portador está dentro de 0.03 de la gravedad especifica de las icroesferas. En otra modalidad, la gravedad especifica del portador está dentro de 0.02 de la gravedad especifica de las microesferas. En aún otra modalidad, la gravedad especifica del portador está dentro de 0.01 de la gravedad especifica de las microesferas. Una gravedad especifica dentro de "X" se refiere a un intervalo gue se extiende de menos X a más X de la gravedad especifica que se hace referencia.

Como se utiliza en el presente documento los términos "sustancialmente similar", "sustancialmente idéntico" o "sustancialmente igual" con respecto a la gravedad especifica de las microesferas de poliestireno, se refiere a la alteración de la gravedad especifica del portador para parecerse a la gravedad específica de las microesferas, de manera que las microesferas permanecen en suspensión o dispersión por periodos de tiempo más largos (en comparación con un portador inalterado). Por ejemplo, una gravedad específica sustancialmente similar se refiere a un intervalo que se extiende de menos 0.04 de la gravedad específica que se hace referencia a más 0.04 de la gravedad específica que se hace referencia, o a un intervalo que se extiende de menos 0.03 de la gravedad especifica que se hace referencia a más 0.03 de la gravedad especifica que se hace referencia, alternativamente a un intervalo que se extiende de menos 0.02 de la gravedad especifica que se hace referencia a más 0.02 de la gravedad especifica que se hace referencia.

Microesferas Las microesferas dentro de las composiciones de la invención son capaces de promover la cicatrización de heridas sin la adición o inclusión adicional de ningún fármaco u otra sustancia terapéutica. Dichas microesferas no degradan o someten otra alteración química con el fin de producir su efecto terapéutico y son considerados el ingrediente activo en las composiciones de la presente invención, en lugar de actuar solamente como un portador para otro, ingrediente activo diferente.

En una modalidad, las microesferas de la invención forman un contacto de múltiples puntos con una membrana celular, tales como la membrana celular externa. En otra modalidad, dichas microesferas son substancialmente no biodegradables durante el período de tratamiento (es decir, hasta que la herida haya esencialmente cicatrizado). En aún otra modalidad, dichas microesferas promueven la cicatrización de las heridas sin una alteración o degradación química significante. Las microesferas son sustancialmente insolubles en medios acuosos y forman una suspensión o dispersión en dichos medios.

En otra modalidad, dichas microesferas tienen grupos de superficie cargados negativamente. Normalmente, la carga general llevada por las microesferas puede medirse como Z o potencial zeta, tal como por movilidad electroforética (ilivoltios ) por un ZetaMaster (Malvem Instruments, Reino Unido). En algunas modalidades, el término "cargado" se refiere a un potencial Z con un valor de por lo menos alrededor de -1 mV, de por lo menos alrededor de -10 mV, o por lo menos alrededor de -20 mV. En otras modalidades, la carga negativa oscila de alrededor de -30 mV a alrededor de -80 mV.

La estructura de estas microesferas incluye un núcleo y por lo menos un tipo de grupo de superficie cargado que está presente por lo menos en el exterior del núcleo de la microesfera. Los ejemplos de materiales adecuados para el núcleo incluyen pero no se limitan a polímeros de cadena larga tales como poliestireno, poliestireno derivatizado, látex, ro??-b-alanina, polilisina, bromuro de poli-N-etil-4-vinilpirídinio, poli etilacrilato (PMMA) y silicona. Preferentemente, el material se selecciona del grupo que consiste de poliestireno y poliestireno derivatizado. Ejemplos de grupos de superficie incluyen pero no se limitan a sulfato, bromuro de poli-N-etil-4- vinilpiridinio, protamina, sulfato de protamina, sales de protamina, polilisina, carboxilo, poliestireno y poliestireno derivatizado. Más preferentemente, el grupo de superficie se selecciona del grupo que consiste de poliestireno, poliestireno derivatizado, polilisina y carboxilo. Estos grupos de superficie pueden estar presentes como parte del núcleo de la microesfera, o pueden ser añadidos después mediante dichos procesos químicos como derivatización del polímero de cadena larga. En lo sucesivo el término "derivatización" se refiere al proceso de alterar, modificar o cambiar químicamente una molécula o una porción de la misma.

Así, la estructura de las microesferas incluye un "núcleo" y un "grupo de superficie", que son dos elementos separados, aunque la lista de las especies posibles de cada uno de estos elementos se superpone. Por ejemplo, el poliestireno puede ser tanto un grupo de superficie como un material de núcleo de la microesfera.

Será apreciado por los téenicos expertos que estas microesferas, más generalmente descritas como "agentes", pueden ser perlas, partículas o glóbulos que son sólidos o huecos. La forma de los agentes puede ser estándar, tal como esférico o elíptico, o formas estándar no esférico; o la forma de la partículas pueden ser no estándar, de manera que la superficie no sea una sola curva continua o de manera que la superficie no es lisa. Además, los agentes pueden ser una mezcla de diferentes polímeros y también pueden ser una mezcla de diferentes partículas, perlas o glóbulos de diferentes tamaños. Los agentes también pueden tener poros de diferentes tamaños.

En modalidades particulares, las microesferas de la invención están hechas de poliestireno, ya sea con grupos de superficie carboxílo o amino o sin grupos de superficie adicionales.

Uso terapéutico En modalidades particulares, las composiciones farmacéuticas de la presente invención son útiles para tratar una herida en un sujeto en necesidad del mismo.

Una amplia variedad de heridas pueden ser tratadas con la composición de la invención, incluyendo, pero no limitado a, heridas de quemadura de espesor total y parcial, quemaduras de sol, congelación; las lesiones ulcerosas tal como las úlceras por presión (decúbito) y varicosas, úlceras por estasis y tróficas; heridas asociadas con procedimientos quirúrgicos tales como la amputación, incisión, circuncisión y la episiotomía; heridas traumáticas y piogénicas; vaginitis; cervicitis; heridas de quiste pilonidal; fisura patológica y hemorroides patológicas.

De acuerdo con ciertas modalidades, las heridas son asociadas con estados en los que se debilita la capacidad de reparación normal de la herida. De acuerdo con modalidades normales, las heridas son asociadas con estados tales como diabetes y/o ocurren en pacientes en su edad más madura o durante tratamiento con esteroides o quimioterapia. De acuerdo con modalidades normales, la herida es seleccionada del grupo que consiste de úlceras del pie diabético, úlceras neuropáticas que incluyen úlceras del antepié neuropáticas, quemadas, úlceras por presión diabéticas o úlceras venosas diabéticas; úlceras de decúbito o úlceras por presión asociadas con discapacidad a largo plazo, cada una representando una modalidad separada de la presente invención.

Anatómicamente, los tejidos que pueden ser tratados con la presente invención incluyen, pero no se limitan a, piel y músculo. El término "sujeto" se refiere en las modalidades particulares a un mamífero, preferiblemente un ser humano.

El método de la presente invención también puede ser usado cosméticamente, tal como para prevenir la formación excesiva de cicatriz en un corte u otra herida en la piel tal como la piel de la cara y para tratar el aené. En un sentido cosmético, eell ttéérrmmiinnoo "formación excesiva de cicatriz" incluye cualquier cicatriz que es cosméticamente indeseable o inaceptable.

Tal como se utiliza en el presente documento, el término "quemadura" se refiere a una lesión en los tejidos causada por calor, frío, productos químicos, electricidad o los efectos de la irradiación.

El término "heridas crónicas" o "heridas difíciles de cicatrizar" como se usa en el presente documento se refiere a las condiciones clínicas que tienen síntomas característicos en donde las heridas no cicatrizan durante un tiempo prolongado y pueden tener una tendencia a la recurrencia. Las heridas crónicas generalmente están asociadas con estados en los que se debilita la capacidad de cicatrización normal de la herida, tal como la diabetes, los pacientes en su edad avanzada, pacientes con capacidad limitada de movimiento o pacientes durante el tratamiento con esteroides o quimioterapia. Así, los pacientes con dichas heridas con mala cicatrización son normalmente aquellas que sufren de úlceras diabéticas, que incluyen úlceras del pie diabético, úlceras neuropáticas diabéticas que incluyen úlceras del antepié neuropáticas, úlceras por presión diabéticas o úlceras venosas diabéticas, así como los pacientes con capacidad limitada de movimiento que sufren de úlceras de decúbito. Las úlceras de decúbito generalmente afectan a las personas que están en un sólo lugar durante tiempo prolongado por cualquier motivo.

Tal como se utiliza en el presente documento, los términos "severidad de la quemadura" o la "severidad de la herida" se refieren a uno o más parámetros utilizados para clasificar la quemadura o herida, tal como el grado de la quemadura/herida, el porcentaje del área total de la superficie del cuerpo afectado por la quemadura/herida y la profundidad de la herida/quemadura.

La severidad de una herida o una quemadura se clasifica generalmente en etapas y grados, respectivamente.

Las heridas etapa uno no tienen ningún corte en la piel visible. Sin embargo, la piel que cubre la herida puede ser notablemente diferente del área circundante. Las diferencias pueden ser cambios en la temperatura, firmeza o color de la piel. La herida también puede ser dolorosa o con picazón. En una herida etapa dos las capas más superiores de la piel es cortada (epidermis y dermis). Puede haber algún drenaje. Heridas etapa tres son más profundas que las heridas de la etapa 2. Suelen ir a más abajo, a la capa de "grasa" (subcutánea), pero no se extiende más. Puede haber drenaje y tejido muerto. Heridas etapa cuatro son muy graves. Estas heridas se caracterizan por ir tan lejos como al hueso y el músculo. El drenaje y tejido muerto casi siempre están presentes. A menudo, en esta etapa, la herida también está infectada.

Las quemaduras de primer grado resultan en algún enro ecimiento e hinchazón de la parte lesionada, sin necrosis de ningún tejido o la formación de ampollas. Las quemaduras de segundo grado muestran una destrucción variable de partes de la dermis de manera que se producen ampollas. La cicatrización por regeneración en dichas quemaduras superficiales no necesitan injertos de piel, a menos que sucedan infecciones secundarias. Las quemaduras de tercer grado están marcadas por la destrucción completa de una región de piel, incluyendo la necrosis de las estructuras accesorias de la piel tales como pelo y glándulas sudoríparas. Una costra negra-cafesosa (costra seca o esfacelos) marca el tejido destruido. En quemaduras de tercer grado profundas, también clasificadas como quemaduras de cuarto grado, el tejido está destruido al nivel de o por debajo de la fascia profunda que se destruye tejido a nivel o debajo de la fascia profunda que yace bajo la grasa subcutánea y el tejido conectivo del cuerpo. El músculo, huesos, nervios más profundos e incluso órganos pueden estar lesionados o destruidos por este severo grado de quemadura.

En algunas modalidades, las composiciones de la invención son capaces de tratar las heridas cutáneas y subcutáneas.

La cantidad de composición y el régimen de administración se establecerá de acuerdo con el tipo de quemadura o herida y severidad y parámetros del sujeto incluyendo edad, género y salud general según lo medido por un profesional experto y lo establecido para ser seguro y eficaz en los ensayos clínicos.

De acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones se aplican al área tratada en régimen diario una vez a dos veces. De acuerdo con modalidades adicionales, las composiciones son aplicadas al área tratada cada otro día, o dos veces por semana. El número de administraciones repetidas dependería de la severidad de la herida inicial.

El término "farmacéuticamente aceptable" significa aprobado por una agencia reguladora del gobierno Federal o Estatal o enlistado en la Farmacopea de Estados Unidos, la Farmacopea europea u otra Farmacopea generalmente reconocida para su uso en animales y más particularmente en los seres humanos. El término "portador" se refiere a un diluyente, excipiente o vehículo con el cual se administra la microesfera. Los portadores son más o menos sustancias inertes que cuando se añaden a la formulación para conferir una consistencia o forma apropiada a la formulación.

Los términos "cantidad efectiva" como se utiliza en relación con las composiciones de la presente invención se refiere a una cantidad de la composición que es suficiente para lograr un efecto previsto de cicatrización de la herida. Por lo tanto, "una cantidad efectiva" se refiere a una cantidad no-tóxica, pero suficiente de la composición para alcanzar los resultados terapéuticos en el tratamiento de una quemadura o una herida como-se describe en el presente documento. Diversos factores biológicos y la característica del portador pueden afectar la capacidad de una sustancia para realizar su tarea prevista. Por lo tanto, una "cantidad efectiva" o una "cantidad terapéuticamente efectiva" puede depender de factores biológicos. La determinación de una cantidad efectiva está bien dentro del experto en la materia de dispositivo médicos, farmacéuticos, nutraceúticos, herbacéuticos y ciencias de la salud. Véase, por ejemplo, Meiner y Tonascia, "Clinical Triáis : Design, Conduct , and Analysis Monographs in Epidemiology and Biostatistics , Vol . 8 (1986) . De acuerdo con ciertos aspectos de la invención, el término "cantidad efectiva terapéutica" se refiere a la cantidad capaz de promover la cicatrización de una herida o una quemadura, hasta la completa cicatrización de los tejidos de la piel.

Según lo utilizado en el presente documento los términos "alrededor de", "similar" o "aproximadamente", colocados antes de un valor numérico "X", se refiere a un intervalo que se extiende desde X menos 10% de X a X más 10% de X y preferentemente a un intervalo que se extiende desde X menos 5% de X a X más 5% de X.

Las concentraciones, cantidades, proporciones, y otros datos numéricos pueden ser expresados o presentados en el presente documento en un sólo número o un formato de rango. Se debe entender que el formato de rango se utiliza simplemente para mayor comodidad y brevedad y asi debe interpretarse con flexibilidad para incluir no sólo los valores numéricos explícitamente recitados como los limites del rango, sino también para incluir todos los valores numéricos individuales o subrangos abarcados dentro de ese rango como si cada valor numérico y subrango es explícitamente recitado.

Los siguientes ejemplos se presentan con el fin de ilustrar más plenamente algunas modalidades de la invención. Deben, de ninguna manera ser interpretados, sin embargo, como limitantes de la amplitud del alcance de la invención.

EJEMPLOS MATERIALES Y MÉTODOS Animales 11 ratas Sprague-Dawlcy (hembra, 250-300g, Harían Laboratories, Jerusalén, Israel) Articulo de prueba microesferas de poliestireno al 0.025% en agua para inyección (WFI).

Materiales Cóctel de anestesia: una mezcla de: lmL de Ketamin (100 mg/ml, Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Estados Unidos), lmL de Xilacina (20 mg/ml, Europet) y 13 mL de NaCl 0.9%.

Analgésicos: Buprinorfina (0.3 mg/ml, VetMarket, Petach-Tikva, Israel) 3.3 mi de Buprinorfina fue diluido en 1 litro de agua potable.

Perlas de poliestireno al 0.025 en solución salina. Las soluciones de tratamiento fueron suministradas en el mismo contenedor blanco, polipropileno, gotero de oreja 15mL .

Incisión de la herida Las ratas fueron numeradas y colocadas en jaulas separadas y se les dio acceso libre al alimento y al agua. Las ratas fueron anestesiadas para los cambios de vendas.

El dorso de las ratas anestesiados fue rasurado y esterilizado con EtOH (70%). La piel se estiró y marcó para dos heridas que miden 1 x 2 cm en el lado dorsal de la rata. Utilizando bisturí y tijeras se practicó una incisión de heridas de espesor total, que se extienden a la fascia muscular (no incluido).

Las heridas derecha e izquierda de cada rata fueron tratadas con solución codificada (4 gotas para poder cubrir totalmente el área de la herida). Las heridas estaban vendadas. Durante el experimento las ratas recibieron anestesia en su agua potable (Buprinorfina).

Tratamiento de la herida Después de cada retiro de vendaje, se tomaron fotos de las heridas en el Día 0 y todos los otros días.

Se midió el área de las heridas utilizando un software de análisis de imagen. Se calculó la tasa de cicatrización de la herida de cada herida mediante la ecuación: Aaea 1,, - Area 1, Anea L. donde: (área tO área original de la herida, tx tiempo de la herida).

EJEMPLO 1 La tasa de cicatrización de la herida de las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en Agua para inyección (WFI) o con solución salina.

La tasa de cicatrización de la herida de las heridas tratadas con solución salina o microesferas en solución salina fue comparada con las heridas que fueron tratadas con microesferas de poliestireno en WFI. El experimento se llevó a cabo en el centro médico Soroka de acuerdo con los procedimientos detallados anteriormente.

Prueba de cicatrización de la herida (tasa de cicatrización) Las ratas fueron anestesiadas y las heridas de espesor total fueron producidas en su lado dorsal (dia 0). Se aplicó en cada animal 5pm de microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en WFI en la herida izquierda y se aplico solución salina en la herida derecha. El segundo conjunto de prueba, se aplicó 5ym de microesferas de poliestireno suspendidas en solución salina en la herida izquierda y se aplicó 5pm de microesferas de poliestireno suspendidas en WFI en la herida derecha. Las heridas fueron vendadas con gasa, rollo Kerlex, y vendaje de red. Las ratas fueron anestesiadas, fotografiadas, tratadas y vendadas cada día. La X indica que la rata expiró.

La Figura 1 muestra el seguimiento hasta la cicatrización de la herida hasta el dia 14. La Figura 2A presenta la comparación de la cinéticas de cicatrización de las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en WFI y solución salina. Es decir 50% del tiempo de cicatrización fue calculado mediante extrapolación de la regresión no lineal (polinomio de tercer orden) ajuste gráfico (lineas discontinuas) utilizando el software Prisma 5. Heridas tratadas con solución salina alcanzaron 50% de cicatrización de la herida en el día 6.23 (95% IC, 5.59 -6.84), mientras que las heridas tratadas con perlas de poliestireno en WFI, alcanzaron 50% de la cicatrización de la herida en el día 5.31 (95% CI, 4.71 - 5.89). La diferencia es estadísticamente significativa p = 0.0476 (prueba t pareada) o p = 0.0476 (prueba de rango con signo).

La Figura 2B presenta la comparación de la cinéticas de cicatrización de las microesferas de poliestireno en WFI en comparación a las microesferas en solución salina. Las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en WFI alcanzaron 50% de cicatrización de la herida en el dia 6.62 (95% IC, 6.01 - 7.21), mientras que las heridas tratadas con microesferas de poliestireno en solución salina, alcanzaron 50% de la cicatrización de la herida en el dia 7.42 (95% CI, 6.97 - 7.88).

El ejemplo 1 muestra que las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI inesperadamente demuestran actividad más alta significativa en la cicatrización de la herida en comparación con las microesferas suspendidas en solución salina o solo solución salina que es considerada el estándar del cuidado en el tratamiento o limpieza de heridas.

EJEMPLO 2 Evaluación in vivo de la tasa de cicatrización de la herida después de las aplicaciones del las microesferas de poliestireno en formulaciones basadas en agua El objetivo de este estudio fue evaluar la tasa de cicatrización de la herida después de las múltiples aplicaciones de microesferas de poliestireno (0.025%) suspendidas en WFI y glicerol al 22% en 3 formulaciones separadas: (i) formulación sin ajuste del pH; (ii) formulación ajustada a pH 5; y (iii) formulación ajustada a pH 7. Las formulaciones que comprende microesferas de poliestireno negativamente cargadas (5pm), suspendidas en un medio modificado Eagle de Dulbecco (DMEM) fue utilizado como un control positivo.

Antes de llevar a cabo los estudios, las formulaciones fueron probadas para la estabilidad y fueron encontradas estables durante al menos 3 meses sin mostrar la agregación de microesferas ni sedimentación. Además, no se observaron cambios de pH significativos durante ese periodo de tiempo.

Las heridas de espesor total inducidas en ratas Sprague-Dawlcy fueron tratadas con múltiples aplicaciones de solución salina o perlas de poliestireno en WFI. La cicatrización de la herida se siguió hasta el día 14. Se calculó la tasa de cicatrización de la herida como % de diferencia del área de la herida original.

La formulación (i) que comprende perlas de poliestireno en WFI y glicerol al 22% alcanzó el 50% de cicatrización de la herida en el día 7.47 (95% CI, 6.98 -7.97), mientras que las heridas tratadas con la formulación de control alcanzó el 50% de cicatrización de la herida en el día 7.50 (95% CI, 7.07 - 7.94) (Figura 3). Este resultado muestra que las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% exhiben una eficacia idéntica en la cicatrización de la herida comparada con el control positivo.

La formulación (ii) que comprende perlas de poliestireno en WFI y glicerol al 22% (pH 5) alcanzó el 50% de cicatrización de la herida en el dia 6.5 (95% CI, 5.93 - 7.06), mientras que las heridas de control tratadas alcanzaron el 50% de cicatrización de la herida en el dia 7.03 (95% CI, 6.57 - 7.50) (Figura 4). De acuerdo con las estadísticas, la diferencia es estadísticamente significativa p=0.048 (prueba t pareada). Este resultado indica que las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% en un pH 5 exhiben una eficacia superior en la cicatrización de la herida sobre las microesferas de poliestireno suspendidas en DMEM.

La formulación (iii) que comprende perlas de poliestireno en WFI y glicerol al 22% (pH 7) alcanzó el 50% de cicatrización de la herida en el día 6.95 (95% CI, 6.38 7.50), mientras que las heridas de control tratadas alcanzaron el 50% de cicatrización de la herida en el día 7.95 (95% CI, 7.51 - 8.41) (Figura 5). De acuerdo con las estadísticas, la diferencia no es estadísticamente significativa p=0.0720 (prueba t pareada). Este resultado indica que las microesferas de poliestireno suspendidas en WFI y glicerol al 22% en un pH 7 exhiben una eficacia similar en la cicatrización de la herida en comparación con las microesferas de poliestireno suspendidas en DMEM.

La descripción anterior de las modalidades especificas revelarán completamente la naturaleza general de la invención gue otros pueden, mediante la aplicación de los conocimientos actuales, fácil modificación y/o adaptar para diversas aplicaciones, dichas modalidades especificas sin experimentación indebida y sin apartarse del concepto genérico, y, por lo tanto, dichas adaptaciones y modificaciones deben y tienen la intención a ser comprendidas dentro del significado y el rango de eguivalentes de las modalidades divulgadas. Se debe entender que la fraseología y la terminología empleadas en el presente documento son para el propósito de descripción y no de limitación. Los medios, materiales y etapas para llevar a cabo distintas funciones divulgadas pueden tomar una variedad de formas alternativas sin apartarse de la invención.

Claims (30)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una herida que comprende microesferas de poliestireno cargadas negativamente, agua y un agente espesante, en donde el agente espesante forma una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

2. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, en donde el agente espesante forma una solución que tiene una gravedad especifica en el rango de 1.02-1.07 gramos por centímetro cúbico.

3. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicaciónl, en donde el agente espesante es seleccionado del grupo que consiste de: polímeros sintéticos hidrofilicos, azúcares o derivados de los mismos y glicerol o glicerina sus derivados o combinaciones de los mismos.

4. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 3, en donde es seleccionado el polímero sintético hidrofilico del propilenglicol (PPG) y polietilenglicol (PEG).

5. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 3, en donde se seleccionan los azúcares o derivados de los mismos del grupo que consiste de sacarosa, glucosa sorbitol y manitol.

6. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 3, en donde se selecciona el agente espesante de glicerol o glicerina.

7. La composición de conformidad con la reivindicación 1, en donde la concentración del agente espesante constituye alrededor del 1% a alrededor del 50% en peso de la composición.

8. La composición de conformidad con la reivindicación 1, en donde la concentración del agente espesante constituye alrededor del 10% a alrededor del 30% en peso de la composición.

9. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, en donde dicha agua es agua destilada.

10. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, en donde dicha agua es agua para inyección (WFI).

11. Una composición farmacéutica para tratar una herida que consiste esencialmente de microesferas de poliestireno cargadas negativamente en una solución hipotónica.

12. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde las microesferas de poliestireno tienen un diámetro en un rango de alrededor de 0.02 mm a alrededor de 20 pm.

13. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde las microesferas de poliestireno tienen un diámetro de alrededor de 1 pm a alrededor de 10 pm.

14. La composición de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde las microesferas de poliestireno constituyen alrededor del 0.001% a alrededor del 10% en peso de la composición.

15. La composición de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde las microesferas de poliestireno constituyen alrededor del 0.001% a alrededor del 0.09% en peso de la composición.

16. La composición de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde las microesferas de poliestireno son no biodegradables durante el periodo de tratamiento.

17. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde el pH es alrededor de 4.5 a alrededor de 7.5.

18. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde el pH es alrededor de 4.5 a alrededor de 5.5.

19. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 u 11, en donde el pH es alrededor de 6.5 a alrededor de 7.5.

20. Un método para el tratamiento de una herida en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende el administrar al sujeto las composiciones farmacéuticas de cualquiera de las reivindicaciones 1 u 11.

21. El método de conformidad con la reivindicación 20, en donde la herida se selecciona del grupo que consiste de una quemadura, trauma, una herida crónica o difícil de cicatrizar.

22. El método de conformidad con la reivindicación 21, en donde la herida crónica es seleccionada del grupo que consiste de úlcera diabética, una úlcera de presión, una úlcera arterial, una úlcera venosa, una herida aguda, postraumática y una herida quirúrgica.

23. Una composición farmacéutica contenida en un paquete para el tratamiento de una herida en un sujeto, la composición que comprende alrededor de 0.001% - 10% en peso de microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en una solución hipotónica.

24. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 23, en donde la solución hipotónica es esterilizada y agua destilada.

25. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 23, en donde dicha solución hipotónica es WFI.

26. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 23, en donde dicha solución hipotónica es agua, y la composición farmacéutica comprende además un agente espesante que forma una solución que tiene una gravedad especifica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.

27. Un equipo para tratar una herida en un sujeto, el equipo que comprende (i) un contenedor, (ii) una composición farmacéutica dentro de un contenedor, y (iii) instrucciones para aplicar dicha composición farmacéutica a la herida, la composición farmacéutica que comprende alrededor de 0.001%-10% en peso de microesferas de poliestireno cargadas negativamente suspendidas en una solución hipotónica.

28. El equipo de conformidad con la reivindicación 27, en donde la solución hipotónica es esterilizada y agua destilada.

29. El equipo de conformidad con la reivindicación 27, en donde dicha solución hipotónica es WFI.

30. El equipo de conformidad con la reivindicación 27, en donde dicha solución hipotónica es agua, y la composición farmacéutica comprende además un agente espesante que forma una solución que tiene una gravedad específica sustancialmente similar a las microesferas de poliestireno.