MX2012014996A - Compuestos heterociclicos y su uso como inhibidores de la actividad pi3k. - Google Patents

Abstract

Se describen heteroarilos bicíclicos sustituidos y composiciones que los contienen, para el tratamiento de inflamación general, artritis, enfermedades reumáticas, osteoartritis, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos de la vejiga inestables o inflamatorios, psoriasis, dolencias de la piel con componentes inflamatorios, afecciones inflamatorias crónicas, incluyendo pero no restringidas a enfermedades autoinmunitarias tales como lupus eritematoso sistémico (SLE), miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, púrpura trombocitopénica idiopática, esclérosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemolítica autoinmunitaria, afecciones alérgicas incluyendo todas las formas de hipersensibilidad. La presente invención también permite métodos para tratar canceres que están mediados por, dependen de o se asocian con actividad p110, incluyendo pero no restringidas a leucemias, tales como leucemia mieloide aguda (AML), síndrome mielo-displástico (MDS), enfermedades mielo-proliferativas (MPD), leucemia mieloide crónica (CML), leucemia linfoblástica aguda de célula T (T-ALL), leucemia linfoblástica aguda de célula 5 (B-ALL), linfoma no Hodgkins (NHL), linfoma de célula B y tumores sólidos, tales como cáncer de mama.

Description

COMPUESTOS HETEROCICLICOS Y SU USO COMO INHIBIDORES DE LA ACTIVIDAD PI3K CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención actual se refiere generalmente a enzimas de fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K), y más particularmente a inhibidores selectivos de actividad PI3K y a métodos de uso de tales materiales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La señalización por medio de fosfoinositidas 3' -fosforiladas se ha implicado en una variedad de procesos celulares, por ejemplo, transformación maligna, señalización del factor de crecimiento, inflamación, e inmunidad (ver Rameh et al., J. .Biol Ghem, .274:8347-8350 (1999) para una revisión) . La enzima responsable para generar estos productos de señalización fosforilados, cinasa fosfatidilinositol 3 (cinasa PI 3; PI3K) , se identificó originalmente como una actividad asociada con oncoproteinas virales y tirosina cinasa del receptor . del factor de crecimiento que fosforilan fosfatidilinositol (PI) y sus derivados fosforilados en el 3'-hidroxilo del anillo inositol (Panayotou et al., Trends Cell Biol 2:358-60 (1992)).

Los niveles de fosfatidilinositol-3 , 4 , 5-trifosfato (PIP3) , el producto primario de la activación de cinasa PI 3, se incrementan durante el- tratamiento de células con una variedad de estímulos. Estos incluyen señalización a través de receptores para. la. mayoría de factores de crecimiento y muchos estímulos inflamatorios, hormonas, neurotransmisores. y antígenos, y de esta manera la activación de PI3K . representa uno, si no el más prevalente, de los eventos de transducción de señal asociados con activación del receptor de superficie de célula de mamífero (Cantley, Science 296:1655-1657 (2002); Vanhaesebroeck et al. Annu. Rev. Biochem, 70: 535-602 (2001)). La activación de la cinasa PI 3, por lo tanto, está involucrada en una amplia variedad de respuestas celulares que incluyen crecimiento celular, migración, diferenciación, y apoptosis (Parker et. al., Current Biology, 5:577-99 (1995); Yao et al., Science,'.. 267:2003-05 (1995)). Aunque los objetivos cadena debajo de los lípidos fosforilados generados después de la activación de cinasa PI 3 no se han caracterizado completamente, se conoce que las proteínas que contienen dominio de homología de pleckestrina (PH) y dominio de dedo PYVE se activan cuando se enlaza a varios lípidos de fosfatidilinositoí (Sternmark et al., J. Cell Sci, 112:4175-83 (1999); Lemmon et al., Trends Cell' Biol, 7 : 237-42 (199 )) . Se han estudiado dos grupos de efectores PI3K que contienen el dominio PH en el contexto de señalización celular inmunitaria, miembros de la familia TEC de tirosina cinasa. y las serina/treonina cinasas de la familia AGC. Los miembros de la familia Tec que contienen dominios PH con selectividad aparente para Ptdlns (3,4,5)P3 incluyen Tec, Btk, Itk y Etk. El enlace de PH a PIP3 es. critico para la · actividad de tirosina cinasa de los miembros de la familia Tec (Schaeffer y Schwartzberg, Curr . Opin . Immunol . 12: 282-288 (2000))'. Los miembros de la familia AGC que se regulan por ' PI3K incluyen la cinasa dependiente de fosfoinositida (PDK1), AKT (también llamdos PKB) y ciertas isoformas de proteína cinasa C (PKC)-". y cinasa S6. Hay tres . isoformas . de AKT y la activación de' AKT está fuertemente ' asociada con proliferación dependiente de PI3K y señales de supervivencia. La activación de AKT depende de la fosforilación por PDK1, que también tiene un dominio PH selectivo de 3-fosfoinositida para reclutar a la membrana donde interactúa con AKT. Otros sustratos PDK1 importantes son cinasa PKC y S6 (Deane y Fruman, Annu . Rev. Immunol . 22_563-598 (2004)). In vitro, algunas isoformas de la proteína cinasa C (PKC) están activadas directamente por PIP3. (Burgering et al., Nature, 376:599-602 (1995)). ' Actualmente, la familia de la enzima cinasa PI 3. se. ha dividido en tres clases con base en . sus especificidades de sustrato. Las. Pl3Ks Clase .1 pueden fosforilár fosfatidilinositol (PI), fosfatidilinositol- -fosfato, y fosfatidilinositol-4 , 5-bifosfato (PIP2) para . producir fosfatidilinositol-3-fosfato (PIP), fosfatidilinositol-3 , 4-bifosfato, y fosfatidilinositol-3, 4', 5-trifosfato, respectivamente. Las Pl3Ks Clase II fosforilan PI y fosfatídilinositol-4-fosfato, mientras que las PI3Ks Clase III sólo pueden fosforilar PI.

La purificación inicial y clonación molecular de la cinasa PI 3 revela que fue un heterodímero consistente de subunidades p85 y pllO (Otsu et al.,. Cell., 65:91-104 (1991); Hiles et al., Cell,, 70 : 419-29 (1992)). Desde entonces, se han identificado cuatro Pl3Ks de Clase I, designadas PI3K a, ß, d, y ?, cada una consiste de una subunidad catalítica de 110 kDa distinta y una subunidad reguladora. Más específicamente, tres de las subunidades catalíticas, es decir, ???? , ????ß y ????d, cada una interactúan con la misma subunidad reguladora, p85; mientras que ????? interactúa con una subunidad reguladora distinta, plOl. Como se describe enseguida, los patrones de expresión de cada uno de . estos Pl3Ks en células y tejidos humanos, también son distintos. Aunque se ha acumulado una abundancia de información en el pasado reciente en las funciones celulares de cinasas PI 3 en general, los papeles jugados por las isoformas individuales no se entienden completamente.

Se ha descrito la clonación de : pllOa de bovino: Se identificó esta proteina como se relaciona con la proteina Saccharomyces cerevisiae: Vps34p, una proteina involucrada en el procesamiento de proteina vacuolar. El producto pllO recombinante también se mostró que se asocia con p85 , para proporcionar una . actividad PI3K en células COS-1 transfectadas. Ver Hiles et al., Cell, 70, 419-29 (1992).

La clonación de una segunda isoforma pllO humana, designada ????ß, se describe en Hu et al., Mol Cell Biol, 13:7677-88 (1993). Esta forma se. dice que se asocia con p85 en células, y se expresa ubicuamente, como mARN ????ß. se ha encontrado en numerosos tejidos humanos y de ratón asi como en células endoteliales de la vena umbilical humanos, células T leucémicas humanas Jurkat, células de riñon embriónicas humanas. 293, fibroblastos 3T3 de ratón, células HeLa, y células de carcinoma de vejiga de rata NBT2. Tal expresión amplia sugiere que esta isoforma es ampliamente importante en las trayectorias de señalización.

La identificación de la isoforma ????d de einasa PI 3 se describe en Chantry et al., J Biol Chem, 272:19236-41 (1997).. Se observó que la isoforma ????d humana se expresa en una manera restringida al tejido. Se expresa a altos niveles en linfocitos y tejidos linfoides y se há mostrado que juega un papel clave en la señalización mediada por einasa PI 3 en el sistema, inmunitario (Al-Alwan etl al. JI 178: 2328-2335 (2007); Okkenhaug et al JI, 177: 5?22-5128 (2006) ; Lee et al. PNAS, 103: 1289-1294 (2006)). También se ha mostrado que ????d se expresa a niveles inferiores en células de mama, melanocitos y células endoteliales (Vogt et al. Virplogy, 344: 131-138 (2006) y se ha implicado en conferir propiedades migratorias selectivas a las células, de cáncer de mama (Sawyer et al. Cáncer Res. 63:1667-1675 (2003)). Los detalles concernientes a la isoforma ????d también pueden encontrarse en las Pat . E.U.A. Nos. 5, 858,753; 5, 822, 910; y 5,985,589. Ver también, Vanhaesebroeck et al., Proc Nat.'Acad Sci USA, 94:4330-5 (1997), y publicación internacional WO 97/46688.

En cada uno de. los subtipos ??3?a, ß, y d,. la subunidad p85 actúa para localizar la cinasa PI 3 a la membrana de plasma por la interacción' de este dominio SH2 con residuos de tirósina fosforiladá (presente en un contexto de secuencia apropiado) en proteínas objetivo (Rameh et al., Cell, 83:821-30 (1995)). Se. han identificado cinco isoformas' de p85 (p85a, ?85ß, ?55?, ?55a y ?50 ) codificadas por tres genes. Los transcriptos alternativos del gen Pik3rl que codifican · las proteínas ?85 , p55 y p50 (Deane y Fruman, Annu. Rev. Immunol . 22: 563-598 (2004)).. La p85a se expresa ubicuamente mientras que la ?85ß, se encuentra primariamente en tejidos cerebral y linfoide (Volinia et al., Oncogene, 7:789-93 (1992)). La asociación de la subunidad p85 a las subunidades catalíticas pllOa, ß, o d de la cinasa PI 3 parece que se requiere para la actividad y estabilidad catalítica de estas enzimas. Además, el enlace de las proteínas Ras también sobre regula la actividad de la cinasa PI 3.

La clonación de ????? revela todavía una complejidad adicional dentro de la familia PI3K de enzimas (Stoyanov et al., Science, 269:690-93 (1995)). La isoforma ????? está cercanamente relacionada a pllOa y ????ß (45-48% de identidad en el dominio catalítico) , pero como se nota no hace uso de p85 como una subunidad de - dirección. En su lugar, ????? enlaza una subunidad reguladora plOl que también enlaza a las subunidades ß? de las proteínas G heterotriméricas . La subunidad reguladora . plOl para Pl3Kgammá se clonó originalmente en cerdas, y el ortólogo humano identificado posteriormente (Krugmann et al., J Biol Chem, .274:17152-8 (1999)). La interacción, entre la región de terminal N de p-1-01 con la región de terminal N de ????? se conoce para activar ??3?? a través, de GPY. Recientemente, se ha identificado un homólogo plOl, p84 o p87PIKAP (proteína adaptadora PI3KY de 87 kDa) que enlaza pllOy (Voigt et al. JBC, 281: 9977-9986 (2006), Suire et al. Curr.Biol. 15: 566-570 (2005)). La p87PIKAP es homologa a plOl en áreas que enlazan ????? y ? ?' y también media la activación de ?????. cadena abajo de receptores acoplados a la proteina G. Al contrario de plOl, pg- PiKAP se eXpresa altamente en el corazón y puede ser crucial para la función cardiaca de ??3??.

Se describe un polipéptido PI3K constitutivamente activo en. la publicación internacional WO 96/25488. Esta publicación describe la preparación de una proteina de fusión quimérica en la cual el fragmento de residuo' 102 de p85 conocido como la región inter-SH2 (iSH2) se fusiona a través 'de una.. región ligadora a la terminal ' de pllO de murino. El dominio p85 iSH2 aparentemente es capaz de activar, la actividad PI3K de una manera comparable a la p85 intacta (Klippel et al., Mol Cell Biol, 14:2675-35 (1994) ) .

De esta manera, las cinasas PI 3 pueden definirse por su identidad de aminoácido o por su actividad. ¦ Los miembros adicionales de esta. familia de genes: de crecimiento incluyen proteina cinasas y lipidos más distantemente relacionados que incluyen Vps34 TOR1, y TOR2 de Saccharornyces cerevisiae (y sus homólogos mamíferos tales como FRAP y mTOR) , el producto de gen de ataxia telángiectasia (ATR) y la subunidád catalítica de la proteína cinasa dependiente del ADN (ADN-PK) . Ver generalmente,. Hunter, Cell, 83:1-4 (1995).

La cinasa PI 3 también está involucrada en un. número de aspectos de la activación del leucocito. Se ha mostrado una actividad de cinasa PI 3 asociada con p85 para asociarse físicamente con el . dominio citoplásmico de CD28, que es una molécula coestimuladora importante para la activación de células T en respuesta al antígeno (Pages et al., Nature, 369:327-29 (1994); Rudd, Immunity, 4:527-34 (1996)). La activación de células T a través de CD28 disminuye¦ el umbral para la activación por antígeno e incrementa la magnitud y duración de la respuesta proliferativa . Estos efectos están ligados para incrementar en la transcripción de un número de genes que incluyen interleucina 2 (IL2), un. factor de crecimiento de célula T importante (Fraser et al., Science, 251:313-16 (1991)). La mutación de CD28 tal que no pueda interactuar más con la cinasa PI 3 lleva a una falla para iniciar la producción de IL2, lo que sugiere un papel crítico para la cinasa PI 3 en -la activación de célula T.

Los inhibidores específicos contra miembros individuales de la familia de enzimas proporcionan herramientas invaluables para descifrar funciones de cada enzima. Dos compuestos, LY294002 y . wortmanina, se han usado ampliamente como inhibidores de cinasa PI 3. Estos compuestos, sin embargo, son inhibidores PI3K no específicos, ya que no distinguen entre los cuatro miembros de las cinasa PI 3 Clase I. Por ejemplo, los valores IC50 de wortmanina contra cada una de las varias cinasas PI 3 de Clase I están en el intervalo de l-10nM. Similarmente, los valores IC50 para LY294002 contra cada una de estas cinasas PI 3 es de alrededor de ?µ? (Fruman et al., Ann Rev Biochem, 67:481-507 (1998)). Por lo tanto, la utilidad de estos compuestos para estudiar los papeles de las cianasas PI 3 de Clase I individual es limitada.

Con base, en los estudios usando wortman'ina, hay evidencia de que la función de ciñasa PI '3 también se requiere para algunos aspectos de la señalización de leucocito a través de los receptores acoplados a la proteina G (Thelen et al., Proc Nati Acad Sci USA, 91:4960-64 (1994)). Por otro lado, se ha mostrado que la wortmanina y LY294002 bloquean la migración del neutrófilo y la liberación del superóxido. Sin embargo, puesto que estos compuestos no distinguen entre las varias isoformas de PI3K, se mantiene no claro a partir de estos estudios que isoforma PI3K particular o isoformas están involucradas en estos fenómenos y que funciones realizan las enzimas PI3K Clase I diferentes en tejidos tanto normales como enfermos en general. La coexpresión de varias isoformas PI3K en la mayoría de los tejidos tiene esfuerzos confundidos para segregar las actividades de cada enzima hasta recientemente.

La separación de las . actividades de las varias isozimas PI3K se ha avanzado recientemente con el desarrollo de ratones genéticamente manipulados que permiten el estudio de ratones inactivos en el gen específieos en isoforma y con gen activado muerto por cinasa y el desarrollo de inhibidores más selectivos para algunas de las isoformas diferentes. Se han generado ratones inactivos en el gen PllOa y ????ß y son ambos embriónicos. letales y puede obtenerse poca información de estos ratones con respecto a la expresión, y. función de pllO alfa y beta (Bi et al . amm. Genome, 13:169-172 (2002); Bi et al. J.Biol.Chem. 274:10963-10968 (1999)). Más recientemente, se generaron ratones con inactivación de gen muertos por cinasa pllOa con un punto sencillo de mutación en la porción CFG de la cavidad de enlace ATP (pll0aD933A) que afecta la actividad de cinasa pero conserva la expresión de cinasa pllOa mutante. En contraste para ratones con remplazo de gen, el enfoque de inactivación de gen conserva la estequiometria del' complejo de señalización, funciones de andamiaje e imita los enfoques de molécula pequeña más realmente que los ratones con remplazo de gen. Igual que' los ratones KO pllOa, los ratones homocigotos pll0aD933A son embrióticos letales. Sin embargo, los ratones heterocigotos son viables y fértiles pero exhiben señalización severamente menguada por medio de las proteínas del sustrato del receptor de insulina (IRS), mediadores clave de insulina, factor 1 del crecimiento tipo insulina y acción de leptina. La ' capacidad de respuesta defectuosa a estás hormonas lleva a hiperinsulinemia, intolerancia a la glucosa, hiperfagia, adiposidad incrementada y crecimiento general reducido en hetetocigotos (Foukas, et al. Nature, 441: 366-370 (2006)). Estos estudios revelan un papel no redundante definido para pllOa como un intermediario e . IGF-1, señalización de insulina y leptina que no se sustituye por otras isoformas. Esperaremos la descripción para ratones con inactivación de gen muertos por cinasa ????ß para entender de forma adicional la función de esta isoforma (los ratones ya se han hecho pero aún no se publican; Vanhaesebroeck) .

Los ratones con inactivación de gen muertos por cinasa y con remplazo de gen ????? ambos se han generado y muestran en general fenotipos similares y moderados con defectos primarios en la migración de células del sistema¦ inmunitario innato y un defecto en el desarrollo timico de células T (Li et al. Science, 287: 1046-1049 (2000), Sasaki et al. Science, 287: 1040-1046 (2000), Patrucco et al. Cell, 118: 375-387 .(2004) ) . · Igual que ?????, los ratones con inactivación de' gen muertos por cinasa y con remplazo de gen PI3K delta se han hecho y están disponibles con fenotipos moderados y similares. Los ratones con inactivación de gen mutantes pll05D910A demuestran un papel importante para delta, en el desarrollo y función de célula B, con células' B en zona marginal y células Bl CD5+ casi indetectables , y señalización del receptor de antígeno de célula B y T (Clayton et al. J.Exp.Med. 196:753-7.63 (2002); Okkenhaug et al. Science, 297: 1031-1034 (2002)). Los ratones pll05D910A se han estudiado extensivamente y han. elucidado 'el; papel diverso que juega delta en el sistema inmunitario. Las respuestas inmunitarias independientes de célula T y dependientes de célula T se atenúan severamente en pll05D910A y la secreción de.' citoquina TH1 (INF-Y) y TH2 (IL-4, IL-5) son dispares (Okkenhaug et al. J.Immunol. 177: 5122-5128 (2006)). Un paciente . humano con una mutación en ????d también se ha descrito recientemente-. Un niño de Tai án con una inmunodeficiencia de célula B primaria y una gamma-hipog.lobulinemia de actiologia previamente desconocida presentada con una sustitución de par base sencilla, m.3256G para A en el codón 1021 en el exón 24 de ????d. . Esta mutación resulta en una sustitución de aminoácidos de sentido erróneo (E a K) en el codón 1021, que se localiza en el dominio catalítico altamente . conservado de la proteína ????d.. El paciente no tiene otras mutaciones identificadas y su fenotipo es consistente con' la definición de ????d en ratones en la medida de lo estudiado. (Jou et al. Int. J. Immunogenet. 33: 361-369 (2006)).

Se han desarrollado compuestos de. molécula pequeña selectivos en. isoforma con éxito variado en todas las isoformas de cinasa PI3 de Clase I -(Ito.et al . J..Pharm. Exp.

Therapeut., 321:1-8 (2007.)). Son deseables los inhibidores para alfa debido a que las mutaciones en ?'??? se han identificado en varios tumores sólidos; por- ejemplo, una mutación de amplificación de alfa se asocia con 50% de cáncer de ovarios, cérvico, de pulmón y mama y se ha descrito una mutación de activación en más del 50% de cáncer de intestino y 25% de cáncer mama (Hennessy et al. Nature Reviews, 4: 988-1004 (2005)). Yamanouchi ha desarrollado un compuesto YM-024 que inhibe alfa y delta equipotentemente y es 8. y 28 veces selectivo sobre beta y. gamma respectivamente (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321:1-8 (2007)).

La ????ß está involucrada en la formación de trombos (Jackson et al. Nature Med. ll: 507-514 (2005)) y los inhibidores de molécula pequeña específicos para esta isoforma se piensan después para indicación que involucra trastornos de coagulación (TGX-221: 0.007uM en beta; 14 veces selectivo sobre delta,, y más de 500 veces selectivo sobre gamma y alfa) (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321:1-8 (2007) ) .

Los compuestos selectivos' para¦' ????? se hah desarrollado por varios grupos como agentes inmunosupresores para enfermedad autoiñmunitaria (Rueckle et al. Nature Reviews, 5: 903-918 (2006)). De notar, AS 605240 se ha mostrado para ser eficaz en un modelo de ratón de artritis reumatoide (Camps et al. Nature Medicine, 11: 936-943 (2005)) y para retardar el inicio de la enfermedad en un modelo de lupus eritematoso sistémico (Barber et al. Nature Medicine, 11: 933-935 (205)).

También se han descrito recientemente inhibidores selectivos delta. Los compuestos más selectivos incluyen . los inhibidores de quinazolinona purina (PIK39 y IC87114.) . El IC87114 inhibe ????d en el intervalo nanomolar alto (dígito triple) y tiene más de 100 veces la selectividad contra contra pllO , es 52 veces selectivo contra ????ß pero carece de selectividad contra ????? (aproximadamente-' 8 veces) . No muestra actividad contra, ninguna proteína cihasas probadas (Knight et al. Cell, 125: 733-747 (2006)). Se mostró que usando compuestos' selectivos delta o ratones genéticamente manipulados (pll05D910A) además de jugar un papel- clave en la activación de célula B y T, delta también está parcialmente involucrado en la migración del neutrófilo y el arrebato respiratorio de neutrófilo cebado y lleva a ' un bloqueo parcial de desgranulación de célula, madre mediada pór el antígeno IgE (Condliffe et al. Blood, 106: 1432-1440 (2005); Ali et al. Nature, 431: 1007-1011 (2002)). Por lo tanto ????d emerge como un mediador importante de muchas respuestas inflamatorias clave que también se conoce que participan en condiciones inflamatorias aberrantes, que incluyen pero no se limitan a enfermedad autoinmunitaria y alergia. Para soportar esta noción, hay un cuerpo de crecimiento . de 'datos de validación de objetivo ????d derivados de estudios que usan tanto herramientas genéticas como agentes farmacológicos. De esta manera, al usar el compuesto selectivo delta IC 87114 y los ratones pll05D910\ Ali et al. (Nature, 431: 1007-1011 (2002)) ha demostrado que delta juega un papel critico en un modelo murino de enfermedad alérgica. En ausencia de delta funcional, la anafilaxis cutánea pasiva (PCA).- .se reduce significativamente y puede atribuirse a una' reducción en activación y desgranulación de células madre inducido por el alérgeno IgE. Además, la inhibición de delta con IC 87114 se ha mostrado que aminora significativamente la inflamación y enfermedad en un modelo murino de asma usando inflamación de las vías respiratorias inducida por ovalbúmina (Lee et al. FASEB, 20: 455-465 (2006). Estos datos que utilizan el compuesto se corroboraron en ratones pll05D910A mutantes usando el mismo modelo de inflamación de vías respiratorias alérgicas por un grupo diferente (Nashed et . al. Eur.J.Immunol. 37:416-424 (2007)). .

Existe la necesidad para una caracterización adicional de la función PI3K5 en escenarios inflamatorios y. auto-inmunitarios . Adicionalmente, el entendimiento del solicitante de PI3 5 'requiere la elaboración , adicional de interacciones estructurales de ????d, ambos con. su subunidad reguladora y con otras · proteínas en la célula. También queda una necesidad para inhibidores más potentes y selectivos o específicos de . PI3K delta, con objeto de evitar la toxicología potencial asociada' con actividad en isozimas pllO alfa (señalación de insulina) y beta (actividad de plaquetas) . En particular, los inhibidores .selectivos de PI3K5 son deseables para explorar el papel de esta isozima adicional y para desarrollo de farmacéuticos superiores para modular la actividad de la isozima .

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La invención, actual comprende una clase nueva de compuestos que tienen la fórmula general que son útiles para inhibir la actividad biológica de PI3K5 humana. Otro aspecto de la invención es proporcionar compuestos que inhiben. PI3K5 selectivamente mientras tienen potencia inhibidora relativamente baja contra las otras isoformas PI3K. Otro aspecto de la invención es proporcionar métodos de caracterización de la función de PI3K5 humana.

Otro aspecto de , la invención es proporcionar ' métodos de modular selectivamente la actividad de PI3K6 humana, y promover por ello el tratamiento médico de enfermedades mediadas por disfunción de PI3K5. Otros aspectos y. ventajas de la invención serán fácilmente aparentes para \ el practicante que tiene . experiencia ordinaria en la técnica.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Un aspecto de la invención se refiere a compuestos que tienen la estructura: . o cualquier sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde : X1 es C ( R10 ) o N ; X2 es C(R6) o N; X3 es C (R7) o N; X4 es C(R1C) o N; Y es N (R8 ) , CRRa, S u 0; R1 se selecciona de H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4 , . ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaR ,.. 0Ra, OC(=0)Ra, OC(=0).NRaRa, OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, ¦ . S(=0)2Ra, . S(=0)2NRaRa, N (Ra) C (=0) NRaRa, N ( Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, . NRaalqC2-6NRaRa, NRaalqC2-6ORa, NRaalqC2. 6C02Ra, NRaalqC2-6S02Rb, CH2C(=0)Ra, CH2C(=0)ORa, CH2C (=0) NRaRa, CH2C (=NRa) NRaRa, CH2ORa, CH2OC(=0)R , CH2OC(=0)NRaRa, CH2OC(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, CH20alqC2_6NRaRa, CH2OalqC2-6ORa, / CH2SRa, CH2S (-0) Ra, CH2S(=0)2R , CH2S (=0) 2NRaRa, CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, CH2NRaRa, CH2N.(Ra) C (=0) Ra, CH2N (Ra) C (=0) 0Ra, CH2N (Ra).C (=0) NRaRa, CH2N (Ra) G (=NRa) NRaRa, CH2N (Ra) S (=0) 2Ra, CH2N (Ra) S (=0) 2NRaRa, CH2NRaalqC2-6NRaRa, CH2NRaalqC2-6ORa, GH2NRaalqC2_6C02Ra y' CH2NRaalqC2-6S02Rb; o R1 es un anillo bicíclico de 8, 9, 10 u 11 ' miembros o monociclico de 3, 4, 5, 6 o .7. miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, ligado a alqCi-4, ligado a OalqCi_2, ligado a alqCi-20, ligado a N(Ra) o ligado a 0, de enlace directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un átomo 0, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6 , haloalqCi-4, · ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C (=0) NRaR , C (-NRa) NRaRa, 0Ra, OG (=0) Ra, OC (=0) NRaRa, OC(=0)N(Ra)S(=0)2R%. OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S.(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)ORa, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa,. NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) ORa, N (Ra) C (=0) NRaRa, N ( Ra) C N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2_ 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos adicionalmente por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, y en donde el anillo está adicionalmente sustituido por 0 o 1. grupo ligado a S02, ligado a C(=0) o ligado a CH2, enlazado directamente seleccionado de fenilo, piridilo, pirimidilo, morfolino, piperazinilo, piperadinilo, . pirrolidinilo, · ciclopentilo, ciclohexilo todos los cuales están sustituidos además' por 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de halo, alqCi_6, haloalqCi- 4 , ciano, nitro, C (=0)Ra, C(=0)0Ra, C (=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, ·' NRaRa, y N(Ra)C(=0)Ra; R2 se selecciona de un anillo biciclico de 8, 9, 10". u 11 miembros o monocíclico de 5, 6 o. 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo está sustituido adicionalmente por - 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)ORa, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, ORa, OC(=0)Ra, OC(=0) NRaRa, OC (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, ÓalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0.) 0Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa„ NRaRa, N ( Ra) C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) OR N'( Ra) C ( =0) NRaRa, N(Ra)C(=NRa)NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, . N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqe2-6ORa;' o R3 se selecciona de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)R , C(=0)ORa, C(=0)NRaRa, C (=NRa)NRaRa, 0Ra, OC(=0)Ra, 0C(=0) NRaRa, OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, 0alqC2-6NRaRa, 0alqC2_6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) R\ S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) 0Ra, N'.(Ra) C (=0) NRaRa, N(Ra)C (=NRa)NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, . NRaalqC2. 6NRaRa y NRaalqC2-50Ra; R3 . se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alqCi- , Oalqd-4, OhaloalqCi- , NHalqCi-4, N'(alqCi_4) alqCi-4, C(=0)NH2, C (=0) NHalqCi-4, C (=0) N (alqCi-4 ) alqCi-4 , N (H) C (=0) alqCi-4, N(alqCi_ 4 ) C (=0) alqCi-4 y haloalqCi-4 ; R4. se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alqCi-4, OalqCi-4, OhaloalqCi-4, . NHalqCi-4, N (alqCi-4 ) alqCi_4, C(=0)NH2, C (=0) NHalqd-4, C (=0) N (alqCi_4) alqCi-4, N (H) C (=0) alqCi-4, N(alqCi_ 4) C (=0) alqCi-4 y ha.loalqCi-4 ; R5 es, independientemente, cada que se presenta, H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4, o alqCi-6 sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, OalqCi-4, alqCi-4, haloalqCl-3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi_ y N (alqCi_4 ) alqCi-4; o ambos grupos R5 juntos forman un espiroalqC3-6 sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, 0alqCi-4, alqCi-4, haloalqCi_3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi-4 y N (alqCi-4 ) alqCi-4 ; R6 se selecciona de halo, ciano, OH, OalqCi-4/ alqCi-4, haloalqC!-3, OalqCi-4, NHR9, N (alqCi- ) alqCi_4,'' ' C(=0)ORa, C (=0) N (Ra) Ra, N (Ra)C(=0)Rb y un anillo heterocíclico de 5 o 6 miembros saturado o parcialmente saturado que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, 0 y S, en donde el . anillo está sustituido por 0, 1, 2 o 3' sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, oxo, OalqC^, alqCi-4, haloalqCi-3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi-4 y N (alqCi-4) alqCi-4./ R7 se selecciona de H, halo, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra,. C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, ORa, OC (=0) Ra, 0C (=0) ,NRaRa, 0C (-0)N(Ra)S(=0)2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, ;S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0)2N (Ra)C(=0)ORa, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N ( Ra) C (=0) Ra , N (Ra) C (=0) 0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N(Ra)C(=NRa)NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaR\ . NRaalqC2-gNRaRa, NRaalqC2-60Ra y alqC¿_6, en donde el' alqCi-g está sustituido por 0, 1 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ¦ haloalqCi-4, ; ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C(=NRa)NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C(=0)NRaRa, 0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, · ¦ S (=0)2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra . S(=0)2N(R )C(=0)NRaRa, . NRaRa, N(Ra)C(=0)Ra, N(Ra)C(=0)0Ra, N ( Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra ) S (=0) 2NRaRa, . NRaalqC2_ 6NRaRa y NRaalqC2-S0Ra, y el alqGi-s está ' sustituido adicionalmente por 0 o 1 anillos monociclicos de 5, 6 o 7 miembros saturados, parcialmente saturados o insaturados que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, nitro, ciano, alqCi-4, 0alqCi_4, GhaloalqCi-4, HalqCx-4, N (alqCi-4) alqCi-4 y haloalqCi-4; o R7 y R8 juntos forman un puente C=N en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o .un anillo monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, I, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, l o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C (=NRa)NRaR\ OC(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, OálqC2_6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0·)-2? (Ra) C (=0) Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N(Ra)C(=0)Ra, N(Ra)C(-0)0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-5NRaRa y NRaalqC2-6ORa; o R7 y R9 juntos forman a ·'.· un puente N=C en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, 0Ra, NRaRa, C (=0) Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, .C (=NRa) NRaRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra. o S (=0) 2NRaRa; .. .

R8 es H, alqCi-6, C'(=0) N (Ra) Ra, C(=0)Rb o haloalqCi_4; R9 es H, alqCi-6 o haloalqCi-4 ; R10 es independientemente cada que se presenta H, . halo, alqCi-3, haloalqCi-3¦ o ciano; R11 se selecciona de H, halo, alqCi-6/ haloalqCi-4,. ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0) 0Ra, C(=0) NRaRa, C (=NRa) NRaRa, ORa, 0C(=0)Ra, 0C(=G)NRaRa, 0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, . OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S (=0)2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)ORa, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N { Ra) C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) 0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N ( Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-.6NRaRa y NRaalqC2-6ORa; Ra es independientemente, cada que se presenta, H o Rb; y Rb es independientemente, cada que se presenta, fenilo, bencilo o alqCi_6, el fenilo, bencilo y alqCi-6 siendo sustituidos por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alqCi-4, haloalqCi-3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi-4 y N (alqCx-4) alqCi- .

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, X1 es N.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, X.4 es N.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, X1 es N y X4 es N.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, Y es N(R8).

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, Y es N(H).

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es un anillo biciclico de 8, 9, 10 u 11 miembros o monocíclico de 5. 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o .insaturado de enlace' directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un átomo 0, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqCi- , ciano, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, OalqC2_6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S (=0) Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) ORa, ' S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N(Ra)C(=0)Ra, N(Ra)C(=0)0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, . N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2. 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos adicionalmente por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es un anillo monociclico de 6 miembros insaturado de enlace directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un átomo 0, o ' S, sustituido por 0, 1, 2 o ; 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C(=0)NRaRa, 0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra,. OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S (=0) 2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, . NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, N(Ra)C(=0)0Ra,- N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2-6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es fenilo, piridilo o pirimidinilo, todos los cuales están sustituidos por ?,. 1, .2 o. 3 sustituyentes . seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)ORa, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa,¦ NRaRa, N(Ra)C(=0)Ra, N (Ra) C (=0) 0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2_ 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa .

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es fenilo sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqC! - 4 , ciano, nitro., C(=0)Ra, ¦ C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C(=NRa)NRaRa, OR , 0C(=0)Ra, OC(=0)NRaRa, OC(=0)Ñ(Ra)S(=0)2Ra, OálqC2-6NRaRa, OalqG2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0)2N(Ra)C (=0)ORa, S (=0)2N (Ra)C (=0)NRaRa, . NRaRa, N(Ra)C(-0)Ra, N(Ra)C(=0)0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (R ) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, ' NRaalqC2. 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es fenilo, piridilo o pirimidinilo, todos los cuales están sustituidos por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, . y haloalqCi-4.

En otra modalidad, . en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R1 es fenilo que está sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados' independientemente de halo, alqCi-6,. y haloalqCi- .

En otra, modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R2 es H.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R3 se selecciona de H y halo.

En otra modalidad, en conjunto con las. modalidades anteriores y siguientes, R4 se selecciona de H y halo.

En otra modalidad, . en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R3 y R4 ambos son H.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R5 es, independientemente,- cada que se presenta, H, halo, alqCi_6, y haloalqCi-4.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, un R5 es H y el otro R5 es alqCi-6.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, un R5 es H y el otro R5 es metilo.

En otra modalidad,¦ en .conjunto- con las modalidades anteriores y siguientes, un R5 es H y el otro R5 . es (R) -metilo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, un. R5 es H y el otro R5 es (S)-metilo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R6 es NHR9.' En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R7 es ciano.

En otra modalidad, en .conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R7 y R8 juntos forman un puente C=N en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o un anillo monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)ORa, . C(=0)NRaRa, . C (=NRa) NRaRa, ORa, OC(=0)Ra, OC (=0)NRaRa, OC (=0) N (Ra) S (=0) 2R , OalqC2-6NRaRa, . OalqC2-6ORa, SRa,-S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, . .

S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, NRaRa, N (Ra) C (=0 ) Ra , N (Ra) C (=0) 0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa,- N (Ra) S (=0) 2Ra, N. (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2-6ORa .

En otra modalidad, en conjunto, con las modalidades anteriores y siguientes, R7 y R9 juntos forman un puente N=C en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4 , ciano, nitro, ORa,' NRaRa, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa', S(=0)R\. . S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa. . .

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R7 y R9 juntos forman .un puente N=C en donde el átomo de carbono está sustituido por H o halo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R11 se selecciona de H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4 y ciano.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades anteriores y siguientes, R11 se selecciona de H, halo y alqCi-6.

Otro aspecto de la invención se. refiere a un método para tratar trastornos o afecciones mediadas por PI3K.

En ciertas modalidades, el trastorno' o afección mediada por. PI3K se selecciona de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias. En otras modalidades, ¦ el trastorno o afección mediado por PI3K se selecciona de enfermedades cardiovasculares, ateroesclerosis , hipertensión, trombosis de vena profunda, apoplejía, infarto al miocardio, angina inestable, tromboembolismo, embolismo pulmonar, enfermedades trombolíticas, isquemia arterial aguda,. oclusiones trombóticas periféricas, y enfermedad de la arteria coronaria. Todavía en otras modalidades, el trastorno o afección mediada por PI3K se selecciona de cáncer, cáncer de colon, glioblastoma, carcinoma endometrial, cáncer hepatocelular, cáncer pulmonar, melanoma, carcinoma de célula renal, carcinoma de tiroide, linfoma celular, trastornos linfoproliferativos, cáncer pulmonar de célula¦ pequeña, carcinoma pulmonar de célula escamosa, glioma, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de ovarios, cáncer cervical, y leucemia. Aún en otra modalidad, el trastorno o afección mediado por PI3K se selecciona de diabetes tipo II. Todavía en otras modalidades, el trastorno o afección mediada por PI3K se selecciona de enfermedades respiratorias, bronquitis, asma, y enfermedad pulmonar obstructiva crónica. En ciertas modalidades, el sujeto es un humano.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de artritis reumatoide, . espondilitis anquilosante, osteoartritis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias o enfermedades autoinmunitarias que comprenden la etapa de administrar un compuesto de · acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis,' enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos de la vejiga inestables o inflamatorios, dolencias de la piel con componentes inflamatorios, afecciones inflamatorias crónicas, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistémico (SLE) , miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, púrpura trombocitopénica idiopática, esclerosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemolítica autoinmunitaria, afecciones alérgicas e hipersensibilidad, que comprenden la: etapa de administrar un compuesto de acuerdo a cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de cánceres que están mediados por, dependen de .o asocian con actividad ????d, que' comprende la etapa de administrar un compuesto de acuerdo a cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida. · Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de cánceres que son seleccionados de leucemia mieloide aguda, síndrome mielo-displástico, enfermedades '.mielo-proliferativas, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda de célula T, leucemia linfoblástica aguda de célula B, linforna no Hodgkins, linfoma ¦ de célula B, tumores sólidos y. cáncer de mama, que comprende la etapa de administrar un compuesto de acuerdo a . cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida.

Otro aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un . compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Otro aspecto de la invención se refiere , al uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba como un medicamento.

Otro aspecto, de la invención se refiere al uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de ' artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartrítis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias .

Los compuestos . de esta invención pueden tener en general varios centros asimétricos y se representan en la forma de mezclas racémicas. Esta invención se pretende para abarcar mezclas racémicas, parcialmente mezclas racémicas y enántiomeros y diaestereomeros separados.

A menos que se especifique de otra manera, las siguientes definiciones aplican para términos formados en la especificación y reivindicaciones: "alq Cc- " significa un grupo alq que comprende- un mínimo de átomos de carbono a y un' máximo de ß en' una relación ramificada, cíclica o lineal o cualquier combinación de las tres, en donde OÍ y ß representan enteros. Los grupos alq descritos en esta sección también pueden contener uno o dos enlaces dobles o triples. Lós ejemplos de alq¦ Ci-e incluyen, pero no se limitan a lo siguiente.: "Grupo benzo", solo ' o en combinación, significa que el radical divalente. una. representación . del cual es -CH=CH-CH=CH-, que cuando se une vecinalmente a otro anillo forma un anillo tipo benceno -- por ejemplo tetrahidronaffileno, indol y similares.

Los términos "oxo" y "tioxo" representan los grupos =0 (como en carbonilo) y =S (como en tiocarbonilo) , respectivamente.

"Halo" o "halógeno" significan . átomos de halógeno seleccionados de F, Cl, Br e I .

"Haloalq Cv-w" significa, un grupo alq, como se describe arriba, en donde cualquier número --al menos uno-- de los átomos de hidrógeno unidos a la cadena alq se reemplaza por F, Cl, Br o I. ' "Heterociclo" significa un anillo. que comprende al menos uno átomo de carbono y al menos otro átomo seleccionado de .N, 0 y S. Los ejemplos de heterociclos que pueden encontrarse en las reivindicaciones incluyen, pero no se limitan a, lo siguiente: "Átomos de nitrógeno disponibles" son aquellos átomos de nitrógeno que son parte de un heterociclo y se unen por. dos enlaces sencillos . (por ejemplo piperidina) , dejando un enlace externo disponible para sustitución por, por ejemplo, H o CH3.

"Sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal preparada por medios convencionales, y son bien conocidos por aquellos experimentados en la técnica. Las "sales farmacológicamente aceptables" incluyen sales básicas de ácidos orgánicos, e inorgánicos, incluyendo pero no limitados a ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, . ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido málico, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido maléico, ácido salicílico, ácido benzoico, ácido enilacético, ácido mandélico y similares. Cuando los compuestos de la ; invención incluyen una función ácida tal como un grupo carboxi, entonces los pares de catión farmacéuticamente . aceptables adecuados para el grupo carboxi son bien conocidos para aquellos experimentados, en la técnica e incluyen cationes alcalinos, alcalinotérreos , de amonio, de amonio cuaternarios y similares. Para ejemplos adicionales de "sales farmacológicamente aceptables,", ver infra y Berge et al., J. P.harm. Sci. 66:1 (1977)..

"Saturado, parcialmente saturado o no saturado" incluye sustituyentés saturados con hidrógenos, sustituyentes completamente no saturados con hidrógenos y sustituyentes parcialmente saturados con hidrógenos.

"Grupo de partida" generalmente se refiere a grupos fácilmente despiazables por un nucleófilo, tal como una amina, un tiol o un nucleófilo de alcohol. Tales grupos de partida son bien conocidos en la técnica. Los ejemplos de tales grupos de partida incluyen, pero, no se limitan a, N-hidroxisuccinimida ,. N-hidroxibenzotriazol , haluros, triflatos, tosilatos y similares. Los grupos de partida preferidos se indican en la presente donde sean apropiados.

"Grupo protector" generalmente se refiere a grupos bien conocidos en la técnica que se usan para prevenir que grupos reactivos seleccionados, tales como carboxi, ámino, hidroxi, mercapto y similares, experimenten reacciones indeseadas, tales como nucleofilicas, electrofílicas, oxidación, reducción y similares. Los grupos protectores preferidos Se indican en la presente donde sea apropiado. Los ejemplos de grupos protectores amino incluyen, pero no se limitan a, aralquilo, aralquilo sustituido, cicloalquenilalquilo y cicloalquenil alquilo sustituido, alilo, alilo' sustituido, acilo, alcoxicarbonilo, .aralcoxicarbonilo, sililo y similares. ¦ Los ejemplos de aralquilo incluyen, pero no se limitan a, bencilo., orto-metilbencilo, tritilo y benchidrilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, nitro, acilamino, ' acilo y similares, y sales, tales como sales de fosfonio y amonio. Los ejemplos de , grupos arilo incluyen fenilo, naftilo, indanilo, antracénilo, 9- (9-fenilfluorenil) , fenantrenilo, durenilo y similares. Los ejemplos de . radicales cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo. sustituido, preferiblemente tienen 6-10 átomos de carbono, incluyen, pero no se limitan a, ciclohexenil metilo y similares. Los grupos acilo, alcoxicarbonilo y aralcoxicarbonilo adecuados incluyen benciloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, iso-butoxicarbonilo, benzoilo, benzoilo sustituido, . butirilo, acetilo, trifluoroacetilo, tricloro acetilo, ftaloilo ; y similares.

Una mezcla de grupos protectores puede usarse para proteger el mismo grupo amino, tal como un grupo amino primario puede protegerse por tanto un grupo aralquilo como . un ' grupo aralcoxicarbonilo . Los. grupos protectores amino también pueden formar un anillo heterociclico con el nitrógeno al cual se unen, por ejemplo, 1 , 2-bis (metilen) benceno, ftalimidilo, succinimidil.o, maleimidilo y similares y- donde estos grupos heterociclicos pueden incluir además anillos arilo y cicloálquilo' contiguos. Además, los grupos heterociclicos pueden ser mono-, di o tri-sustituidos, tales como nitroftalimidilo . Los grupos amino también pueden protegerse contra ' reacciones indeseadas, tales como oxidación, aunque la formación de una sal de adición, tal como clorhidrato, ácido toluensulfónico , ácido trifluoroacético y similares. . Muchos de. los grupos protectores amino también son adecuados para proteger grupos carboxi, hidroxi y mercapto. Por ejemplo, grupos aralquilo. Los grupos alquilo también son grupos adecuados para proteger grupos hidroxi y mercapto, tal como tert-butilo.

Los grupos protectores sililo son átomos de silicio opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alquilo, arilo y aralquilo. Los ' grupos protectores sililo adecuados incluyen, pero no se limitan a, trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, tert-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1, 2-bis (dimetilsilil)benceno, 1 , 2-bis (dimetilsilil ) etano y difenilmetilsililo . La sililación de los grupos amino proporciona grupos mono o di-sililamino. La sililación de compuestos de aminoalcohol puede llevar a un derivado de N, N, O-trisililo . La eliminación de. la. función sililo de. una función de éter de sililo se realiza fácilmente por tratamiento con, por ejemplo, un reactivo de hidróxido de metal o fluoruro de amonio, ya sea como una etapa de reacción discreta o in situ durante una reacción con el grupo de alcohol. Los agentes de sililación adecuados son, por ejemplo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de tert-butil-dimetilsililo, cloruro de fenildimetilsililo, cloruro de difenilmetilo sililO, o Sus productos de combinación con imidazol o DMF. ' Los métodos para sililación de aminas y eliminación. de grupos . protectores sililo son bien conocidos para aquellos experimentados en la técnica. Los métodos de preparación de estos derivados de amina de aminoácidos correspondientes, amidas de aminoácidos o esteres de aminoácidos también son bien conocidos para aquellos experimentados en la técnica de química orgánica incluyendo aminoácido/éster de aminoácido o química' de aminoalcohol.

Los grupos protectores se remueven bajo condiciones que no afectarán la porción restante de la molécula. 1 Estos métodos son . bien conocidos en la técnica e incluyen hidrólisis ácida, hidrogenólisis y similares. Un método preferido involucra eliminación de un grupo protector, tal como eliminación de un grupo benciloxicarbonilo por hidrogenólisis que utiliza paladio en carbono en un sistema de solvente adecuado tal como un alcohol, ácido acético, y similares o mezclas de los mismos. Un grupo protector t-butoxicarbonilo puede removerse utilizando un ácido orgánico o inorgánico, tal como HC1 o ácido trifluoroacético, en un sistema de solvente adecuado, tal como dioxano o cloruro de metileno. La sal amino resultante puede fácilmente neutralizarse para proporcionar la amina libre. . El grupo protector carboxi, tal como metilo, etilo, bencilo, tert-butilo, 4-metoxifenilmetilo y similares, puede removerse bajo condiciones de hidrólisis e hidrogenólisis bien conocidas para aquellos experimentados en la técnica.

Debe notarse que los- compuestos de la invención pueden contener grupos que pueden existir en formas tautoméricas , tales como grupos cíclicos y de amidina y guanidina acíclicos, heteroátomo sustituido por grupos heteróarilo (Y' = 0, S, NR) , y similares, que se ilustran en los siguientes ejemplos: y aunque una forma se nombra, describe, muestra y/o reivindica en la presente, todas las formas tautoméricas se pretenden para incluirse inherentemente en tal nombre, descripción, exhibición y/o reivindicación.

Los profármacos de los compuestos de esta invención también se contemplan por esta invención. Un profármaco es un compuesto activo o inactivo que se modifica químicamente a través de acción fisiológica in' vivo, tal como hidrólisis, metabolismo y similares, en un compuesto de esta invención después de la administración del profármaco a un paciente. Lo idóneo y. técnicas involucradas en hacer y usar profármacos son bien conocidos por aquellos experimentados en la técnica. Para una discusión general de profármacos que involucran ésteres ver Svensson y Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985) . Los ejemplos de un anión de carboxilato enmascarado incluyen una variedad de esteres, tales como alquilo (por ejemplo., metilo, etilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo) , aralquilo (por ejemplo, . bencilo, p-metoxibencilo) , y alquilcarboniloxialquilo (por ejemplo, pivaloiloximetilo).. Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos de arilcarboniloximetilo que se desdoblan por esterases in vivo liberando el fármaco libre y formaldehido (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). También, los fármacos que contienen un grupo NH ácido, tales como imidazol, imida, indol y similares, se han enmascarado con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985))'. Los¦ grupos hidroxi se han enmascarado como ésteres y éteres. EP 039,051 (Sloan y Little, 4/11/81) describe profármacos, de ácido hidroxámicos de base Mannich, su preparación y üso.

La especificación y reivindicaciones contienen listado de especies usando el lenguaje "seleccionados de . . . y . . . " y "es . . . o . . . " (algunas veces referidos como grupos Markush) . Cuando este lenguaje se usa en esta solicitud, a menos que se establezca de otra manera significa incluir el grupo como un todo, o' cualquiera de los miembros sencillos del mismo, o cualquiera de los subgrupos de los mismos. El uso de este lenguaje se meramente para propósitos. de taquigrafía y no significa de ninguna manera limitar la eliminación de elementos o subgrupos individuales como sea necesario .

La presente invención también '¦ incluye compuestos etiquetados isotópicamente, que son idénticos a aquellos recitados en la presente,, pero por el hecho de que: uno. o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa usualmente encontrada en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxigeno, fósforo, flúor y cloro, tal como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 160, 170, 31P, 32P, 35S, 18F, y 36C1. ' ¦ Los compuestos de la presente invención que contienen los isótopos antes mencionados y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos etiquetados isotópicamente de la- presente invención, por ejemplo' aquellos en los cuales los isótopos radioactivos tales como 3H y 14C se incorporan, son útiles en ensayos de distribución de tejido de sustrato /o fármaco. Los isótopos tritiados, esto es, 3H, y carbono 14, esto es, 14C, se prefieren particularmente por su facilidad de preparación y detección.. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, esto es, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de mayor estabilidad metabólica, por ejemplo vida media in vivo incrementada o requerimientos de dosificación reducidos y, por lo tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos isotópicamente etiquetados de esta invención pueden generalmente prepararse al sustituir un reactivo isotópicamente etiquetado fácilmente . disponible para un reactivo no isotópicamente etiquetado.

Experimental usan las siguientes abreviaturas ac . - acuoso BINAP - 2, 2' -bis (difenilfosfino) -1, 1' -binaftilo conc - concentrado DCM - diclorómetaño DIAD - diisopropil a odicarboxilato D F - ?,?-dimetilformamida Et20 - diétilo éter EtOAc. - acetato de etilo EtOH - alcohol etílico h - hora ( s ) min - minutos MeOH - alcohol . metílico sCl cloruro de metansulfonilo ta - temperatura ambiente sat - saturado THF - tetrahidrofurano General Los reactivos y solventes usados a continuación pueden obtenerse de fuentes comerciales. Los espectros XH-RMN se registraron en los espectrómetros Bruker 400' MHz y 500 MHz RMN . Los picos importantes se tabulan en el orden: número de. protones, multiplicidad (s, singlete; d, doblete; t, tripiete; q, cuarteto;, m, multiplete; br s, singlete amplio)./ constantes de acoplamiento en hercios (Hz) . Los resultados de espectrometría de masa, se reportan como la relación de masa sobre carga, seguido por la abundancia relativa de cada ion (entre paréntesis ionización de Electrorocío (ESI)) se condujo .el análisis de espectrometría de masa en un espectrómetro de masa de electrorocío Agilent 1100 series LC/MSD. Todos los compuestos pueden analizarse en el modo ESI positivo usando acetonit rilo : agua con ácido fórmico al 0.1% como el solvente de suministro. Se llevó a cabo HPLC analítica de fase inversa usando un Agilent serie 1200 en columna Agilent Eclipse XDB-C18 5 µ?? (4.6 x 150 mm) como la fase estacionaria y eluyendo con acetónitrilo : agua con TFA al 0.1%. Se llevó a cabo HPLC semi-prep de fase inversa usando un Agilent Serie 1100 en una columna Phenoraenex Gemini™ 10 µt . C18 (250 x 21.20 mm) como la fase estacionaria y eluyendo con acetonitrilo : H20 con TFA al 0.1%. ¦ .

Ejemplo 1 1- (2-Bromo-6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etanol A una solución de 2-bromo-6-clorotiéno [2 , 3-b] piridin-5-carbaldehido (2.4 g, 8.7 mmol) (Meth-Cohn, O. Narine B. Tetrahedron Lett., 1978, 2045) en THF (50 mL) a -20°C se agregó cloruro de metilmagnesio (3.04 mL de 3N en THF,- 9.1 mmol) gota a gota. La reacción se agitó a -20°C durante 45 minutos y luego apagó con 25 mL de NH4C1 (sat) y 25 mL de agua. La reacción se diluyó con éter y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y concentró. La purificación por cromatografía de columna proporciona 1-(2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etanol. LC/ S ' (M+l, encontrado = 293.8). XH RMN (400 MHz,. CDC13) d 8.21 (s, 1H) , 7.30 (s, 1H) , 5.32 (qd, J = 6.3, .2.7 Hz, 1H) , 2.19- (br s, 1H), 1.55 (d, J = 6.3 Hz, ' 3H) ppm. 2- (1- (2-Bromo-6-clorotieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona A un matraz de fondo redondo que contiene 1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanol (2.0 g,' 6.8 mmol) , ftalimida (1.2 g, 8.2 mmol, 1.2 q) , y trifenilfosfina (2.15 g, ' 8.2 mmol) se agregó THF (45 mL). La solución se enfrió hasta 0°C y se agregó gota a gota diisopró.pila zodicarboxilato (DIAD, 1.6 mL, 8.2 mmol, 1.2 eq) . La reacción se permitió entibiar hasta temperatura ambiente. Después de 1 h, la reacción se consideró para ser completa por LC/MS. El solvente se removió in vacuo y el residuo . se volvió ' a disolver en éter y lavó con agua. La capa de agua se volvió a extraer con éter. Las capas de éter combinadas se lavaron con salmuera y secaron sobre MgS04, filtraron, y concentraron. El producto crudo se purificó' por cromatografía de columna usando EA al 15% en' hexanos para, proporcionar 2- ( 1- ( 2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b]piridin-5-il)etil) isoindolin-1 , 3-diona . LC/MS (M+l,. encontrado = 422.8). 1H RMN ( 00 MHz , CDC13) d 8.40 (s, 1H) , 7.82 (m, 2H) , 7.72 (m, 2H) , 5.92 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 1.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 2- (1- (6-Cloro ieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona: En un aparato de ' hidrogenación, se. combinaron 2-(l— (2-bromo-6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona (800 mg, 1.9 mmol) y paladio en carbono al .5% (151 mg) . El recipiente de ' reacción se purgó con nitrógeno y. se agregaron 60 mL de acetato de etilo, 15 mL de etanol, y 15 gotas de HC1 concentrado. El recipiente de reacción se presurizó con gas de hidrógeno hasta 3.515 kg/cm2 (50 psi) . Después de 4 días, el aparato se purgó con nitrógeno y los contenidos se filtraron a- través de celite. La almohadilla de Celite™ se lavó con acetato de etilo para proporcionar- una solución anaranjada. El solvente se removió en el rotoevaporador y se volvió a disolver en diclorometano . Se agregó gel de sílice (3.2 g) a la solución de diclorometano y el solvente se removió en el rotoevaporador. El gel de sílice se transfirió a la cabeza de una columna de cromatografía y eluyó con acetato de etilo al .15% . en hexános para proporcionar 2- ( 1- ( 6-clórotieno [2 , 3-b] piridin-5-il ) etil ) isoindolin-1 , 3-dióna y recuperar 2- ( 1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona .

LC/ S (M+l, encontrado = 343.0).. 1H RMN (400 MHz, CDC13) d 8.52 (s, 1H) , 7.82 (m, 2H) , 7.72 (m, 2H) , 7.54 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 5.95 (q, J = 7.0 Hz, 1H) , 1.95 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. 2- (1- (6- (Piridin-2-il) tieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona: Una mezcla de 2- ( 1- ( 6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il ) etil ) isoindolin-1 , 3-diona (300 mg, 0.875 mmol.) , 2-(tributilestanil ) piridina (340 µ?,, 1.05 mmol, 1.2 eq) y tetraquis ( trifenilfosfin) paladio (0) (101 mg, . 0.0.875 mmol, 0.1 eq) se disolvió en 10 mL de dioxano bajo nitrógeno. La reacción se calentó hasta 100°C durante 2 dias, enfrió hasta ta y concentró in: vacuo. La purificación por cromatografía de columna usando acetato de etilo/hexanos proporciona 2-(l-(6-(piridin-2-il ) tieno'[2, 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona. LC/MS (M+l, encontrado = 386.0).. XH RMN (400 MHz, CDCl-3) d 8.69 (s, 1H) , 8.66 (ddd, J = 4.9, 1.6, 0.8 Hz, 1H)., 7.76 (td, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H) , 7.73-7.62, serie de m, 5H) , 7.57 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.9 Hz, 1?)· (ddd, J = 7.2, 4.7, 1.4 Hz, 1H) , 6.33 (q, J = 7.2 Hz 1.99 (d, J = 7.2 Hz, 3H) pp .. 1- (6- (Piridin-2-il) tieno [2 ,3-b]piridin-5-il) etanamina Se hizo en mezcla espesa 2- ( 1- ( 6- ( Piridin-2-il ) tieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etil ) isoindolin-1 , 3-diona (220 mg, 0.57 mmol) en etanol (5 mL) . A esta mezcla espera se agregó hidrato de hidracina (500 uL, 10.3 mmol, 18 eq) . La reacción se calentó hasta 60°C durante 2 h, luego se enfrió hasta ta y filtró. El filtrado se concentró y volvió a disolver en acetato. de etilo y agua: Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera, secaron sobre- MgSO/j, filtraron, y concentraron in vacuo para proporcionar l-(6-(piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanamina (134 mg, 91.9% de rendimiento). XH RMN (400 MHz , . CDC13) 5 8.69 (ddd, J = 4.7, 1.6, 0.8 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H) , 7.87 (m, 2H) , 7.57 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.3 (ddd, J = 6.8, 5.1, 2.0, 1H) , 7.31 (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 4.63 (q, J = 6.7 hz, 1H) , 1.44 (d, J =' 6.7 Hz, 3H) ppm.

N- (1- (6- (Piridin-2-il) tieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil)¦ purin-6-amina: A un matraz de reacción que contiene 1- ( 6- (piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanamina (134 mg, 0.525 mmol)', 6-cloropurina (97 mg, 0.63 mmol, 1.2 eq) y diisopropiletilamina (137 pL, 0.79 mmol, 1.5 eq) se agregó 5 mL de n-butanol. La reacción se calentó hasta 110°C durante 24 h, luego se enfrió hasta ta y concentró' in vacuo. El residuo se disolvió en acetato de etilo (~ 50 mL) con calor' y sonicación, luego se. lavó con 5' mL de agua y 5 . mL de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgS04, filtró, y concentró. La purificación por cromatografía de columna usando gradiente al 0-80% de (90:9:1 DCM : MeOH : NH40H) en dielorometano proporciona N- ( 1- ( 6- (piridin-2-il ) tieno [ 2 ,3-b] piridin-5-il) etil ) -9H-purin-6-amina racémica. El espectro RMN a temperatura ambiente en CDCI3 existe como una mezcla aproximadamente de 3 : 1 de isómeros. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.80 (br d, J - 4.3 Hz, 0.75 H) , 8.73 (br d, J = .3.1 Hz, 0.25 H), 8.55 (s, 0.25 H), 8.36-8.26 (serie de m, 1.75 ?) , 8.15- 8.03 (serie de m, 1.5 H) , 7.93 (br s, 0.75 H) , 7.88 (m, 1.4 H) , 7.56 (m, 0.5 H) , 7,55 (d, J = 5.9 Hz, 0.75.?), 7.37 (dd, J = 6.6, 5.1 Hz, 0.75 H) , 7.26 (d, J = 5.9 Hz, 0.75 H), 7.20 (d, J = 5.9 Hz, 0.25 H) , 6.65 (m, 0.25 H) , 6.35 (m, 0.25 H) , 6.15 (br s, 0.75 H) , 1.55 (d, J = 7.0 Hz, 2.25 H) , 1.35 (d, J = 6.3 Hz, 0.75 H) ppm. LC/ 'S (M+L, encontrado = 374.0). La separación SFC quiral del racemato. proporciona los enantiómeros individuales, (S) -N- ( 1- ( 6- (piridin-2- il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etil) -9H-purin-6-amina y (R) -N- (1- (6- (piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) -9H-purin- 6-amina.

Ejemplo 2 1- (2-Brorno-6-cloro ieno [2 , 3-b]piridin-5-i1) etanona: Una porción de 2.2 g (7.5 mmol) de 1- (2-brómo-6- clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanol se disolvió en tolueno y trató con dióxido de manganeso (6.5 g, 75 mmol, 10 eq) . La mezcla se calentó hasta' 90°C durante la noche, luego se enfrió a ta y filtró a través de Celite™. La torta filtro se lavó con tolueno . y .concentró para proporcionar material crudo. El residuo se purificó por cromatografía de columna usando acetato de etilo en hexanos para proporcionar 1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanona . · LC/MS (M+l, encontrado = 291.9). XH RMN (400 MHz, CDC13) d 8.17 (s, 1H) , 7.36 (s, 1H), 2.75 (s, 3H) ppm.

(R) -1- (2-Bromo-6-clorotieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etanol : En 30 mL de THF se disolvió (+) -dip-cloruro (tm) (3.3 g, 10.2 itifflol, 2.2 eq) y la solución resultante se enfrió hasta . -55°C. A esta solución se agregó 1- (2-bromo-6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etanona .en 10 mL de THF por' medio de cánula, seguido por un enjuague con 10 mL de THF. La reacción se permitió entibiar hasta TA lentamente durante la noche y luego apagó con 5 mL de acetona y Ná2CC>3 sat al 50%. Después de agitar durante 1 h, la reacción se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y transfirió a un embudo separador. La capa orgánica se lavó con 2 x 50 mL de Na2C03 sat. al 50%, 2 x 50 mL de agua, y 2 x 50 mL de salmuera. La capa orgánica se secó sobre gSC>4, filtró, y concentró.. La purificación del crudo se alcanzó al hacer mezcla espesa 20 mL de agua y 50 mL de hexanos. El sólido resultante se filtró y secó durante la noche para proporcionar un polvo blanco puro, (R) -1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etanol . ¦ HPLC quiral (Chiralcel-AD, isopropanol/hexanos al 30%) = 92% ee. '?? RMN (400 Hz, CDC13) d 8.22 (s, 1H) , 7.31 (s, 1H) , 5.32 (dq, J = 5.9, 3.5 Hz, 1H), 2.17 (d, J = 3.5 Hz., 1H), 1.56 (d, J. = 6.3 Hz, 3H) ppm.

(S) -2- (1- (2-Bromo-6-clorotieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona: Se obtuvo (S) -2- ( 1- (2-Bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona de ( ) -1- (2-bromo-6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il ) etanol en la manera descrita para 2 - (1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etil ) isoindolin-1 , 3-diona racémica. LC/MS (M+l, encontrado = 423.0). 1H RMN (400 ' MHz , CDC13) d 8.40 (s, 1H) , 7.82 (m, 2H) , 7.72 (m, 2H) , 5.92 (q, J = 7.0 Hz, 1H) , 1.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm.

(S) -2- (1- (6-Clorotieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1,3-diona: Se obtuvo (S) -2- (1- (6-Clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona de (S) -2- (1- (2-bromo-6-clorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-l> 3-diona en la manera descrita para 2- (1- ( 6-clorotieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona racémica. LC/MS (M+l, encontrado = 343.0). XH RMN (400 MHz , CDCI3) . d 8.52' (s, 1H)., 7.82 (m, 2H) , 7.72 (m, 2H) , 7.54. (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 7,32 (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 5.95 (q, J.= 7.0 Hz, 1H) , 1.95 (d, J.= 7.0 Hz, 3H) ppm.

(S) -1- (6- (3-Fluorófenil) tieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etanamina: En un matraz de reacción de fondo redondo de 25 mL combinó tetraquistrifenilfosfinpaladio ( 0 ) (25 mg, 22 µ????) , ácido 3-fluorofenilborónico (67 mg, 481 µp???) , carbonato de sodio (232 mg, 2188 µ?a??) , y (S ) -2- ( 1- ( 6-clorotieno [ 2 , 3-b] piridin-5-il) etil) isoindolin-l,-3-diona (150 mg, 4.38 µ?t???)·. El matraz de reacción se mojó con nitrógeno antes de la adición de 4 mL de 3:1 acetonitrilo : agua . La reacción se calentó hasta 90°C durante tres días, después de cuyo tiempo la reacción no se completó. La reacción¦ se trabajó al remover el solvente y dividió entre 10 mL de diclorometano y 10 mL de agua. La capa de diclorometano se separó y extrajo con 10 mL de. Na2C03 sat. al 50%. El pH de las capas ac¦ combinadas se ajustó hasta 1 usando 20 mL de HC1 1N, formando un sólido blanco. Se agregó diclorometano para disolver el sólido y la capa orgánica se separó completamente. La capa ac. se extrajo dos veces con 10 mL de diclorometano y los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, filtraron, y concentraron. El material crudo se disolvió en 3 mL de MeCN y 1 mL de agua. A esto se agregó 115 mg de Na2C03, 35 mg de ácido 3-fluoro-fenilborónico, y 13 mg de tetraquis trifenilfosfina . La reacción se calentó hasta 90°C durante la noche,, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y trabajo como arriba. Se sometió a cromatografía de columna ( DC : MEOH) para proporcionar ácido 2- ( ( (S) -1- (6- (3-fluorofehil) tieno [2,3-bl piridin-5-il) etil) carbamoil) benzoico. El producto luego se disolvió en 3 mL de etanol y trató con HC1 concentrado (118 µ?,, 1427 µp???) . La reacción se calentó hasta 8Ó°C. durante 2 días, después de cuyo tiempo una carga adicional de HC1 (118 L, 1427 µp???) se agregó y calentó a 80°C durante 1 dia. La reacción se enfrió hasta ta y diluyó con 6 mL dé agua. El pH de la solución se ajustó hasta 10 usando NaOH 1N..La reacción se extrajo con diclorometano y la capa orgánica se secó sobre Na2S04, filtró y concentró. El residuo, se trató con 2 mL de etartol, formando una suspensión. A esta suspensión se ' agregó monohidrato de hidracina (71. µL, 1427 µ????).. Después- de agitar a 60°C durante 2 h, la reacción se enfrió hasta ta y diluyó con acetato de etilo, filtró, y concentró. El residuo se disolvió en 20 mL de acetato de etilo y lavó con 1 x 3 mL de agua, y 1 x 3 mL de salmuera, secó sobre MgS04, filtró, concentró · para proporcionar (1S) -1- ( 6- (3-fluorofenil ) tieno [·2 , 3-b] piridin-5-il ) etanamina -..cruda . LC/MS ( +l, encontrado. = 273.0).

N- ( (S) -1- (6- (3-Fluorofenil) ieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) -9H-purin-6-amina: En un matraz de reacción se combinó ( 1S ) -1- ( 6- ( 3-fluorofenil) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanamina (39 mg, 143 µp???) , 6-cloropurina (24 mg, 158 µ?t???), Base de Hunig ..(38 µ?,, 215 µ????) y n-butanol (1.'5 mL) . La solución se calentó hasta 110°C. Después de 24 h, el solvente se removió y el residuo se purificó por cromatografía de columna usando un gradiente al 0-70% de (90:9:1 CH2C12 : MeOH : NH4OH) en CH2C12 para proporcionar N- ( (S) -1- (6- ( 3-fluorofenil ) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) -9H-purin-6-amina. XH RMN (400 MHz, DMS0-d6) d 12.90 (br s, 1H) , 8.51 (br s, 1H) , 8.34 (br s , 1H) , 8.10 (m, 2H) , 7.88 (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 7.59 (m, 3H) , 7.45 (d, J = 5.9 hz, 1H) , 7.30 (br t, J = 6.3 Hz, 1H) , 5.60 (br s, .1H) , 1.44 (br d, J = 5.1 Hz, 3H) ppm. LC/MS (M+l, encontrado = 391.1).

Ejemplo 3 Oxima de (E) -1- (5-Clorotiofen-2-il) etanona: Se combina 1- (5-clorotiofen-2-il) etanona ¦ (lOOg, 622 mmol) , clorhidrato de hidroxilamina (47.6 g, 685 mmol, 1.1 eq) y acetato de sodio (56.2 g, 685 mmol, l.l -.eq) en 1 L de etanol y 300 mL de agua. La reacción se calentó hasta reflujo. Después de 3 h, la reacción se enfrió hasta ta y concentró. El residuo se hizo mezcla espesa en 500 mL de agua durante la noche, filtró y seco para proporcionar el sólido crudo. Se purifica por extracción del' sólido con diclorometano caliente, enfriado hasta ta y filtrado para remover material . de. partida no' reaccionado. El sólido se hizo mezcla espesa en diclorometano caliente varias veces' para extraer el sólido enriquecido en el primer compuesto eluido (E-oxima) (DCM al .100%) después de la concentración.. El material altamente cristalino se purificó por . cromatografía de columna usando diclorometano al 100% para proporcionar oxima de (E) -1- (5-clorotiofen-2-il ) etanona . RMN (400 Hz, DMSO-d6) d 11.31 (s, 1H), 7.21 (d, J = 3.9 Hz, : 1H) , 7.07 (d, J = 3.9 Hz, 1H) , 2.12 (s, 3H) ppm.

N- (5-Clorotiofß?-2-il) acetamida : La oxima de. (E) -1- ( 5-Clorotiofen-2-il ) etanona (10.7 g, 60.9 mmol) se disolvió en 180 mL de acetona. ?· esta solución se agregó cloruro de 4-metilbencen-l-sulfonilo ( 11.61 g, 60.9 mmol, 1 eq) e hidróxido de sodio (2.437 g, 60.9 mmol, 1 eq) en 61 mL de agua a 0°C. La reacción se permitió entibiar hasta ta durante 1 h. Después de 3 h, la reacción se entibió hasta 60°C durante .1.5 h. Después- de enfriar- hasta ta, el solvente se removió in vacuo. El residuo se disolvió en acetato de etilo (300 mL) y lavó con agua, ÑaHC03 sat., y salmuera. La capa orgánica se secó sobre gS04, filtró y concentró. El residuo se hizo mezcla espesa en 60 mL de diclorometano caliente, se enfrió hasta 0°C y filtró para proporcionar N- ( 5-clorotiofen-2-il ) acetamida como un polvo gris. RMN (400 MHz, DMSO-d6). d 11.34 (s, 1H), 6.83 (d, J = 3.9, 1H), 6.42 (d, J =3.9 Hz, 1H) , 2.05.(s, 3H) ; ppm. 2 , 6-Diclorotieno [2 , 3-b]piridin-5-carbaldehido : A tricloruro de fosforilo (32.8 mL, 359 mmol) a 0°C se agregó , -dimetilformamida (11.90 mL, 154 mmol) gota a' gota. Después de agitar durante 20 min, la solución se entibió hasta ta durante 30 min y N- (5-clorotipfen-2-il) acetamida (9 g, 51.2 mmol) se agregó como un sólido. La mezcla se calentó hasta 75°C durante h, enfrió hasta ta, y vació én 500 g de agua con hielo. La reacción apagada se agitó en un baño de hielo durante 30 minutos y filtró. El sólido se secó bajo vacio durante la noche para proporcionar el sólido crudo. El sólido crudo se extrajo con acetato de etilo hervido y se decantó para separar esto de un alquitrán insoluble. La capa orgánica se concentró y el residuo se recristalizó de acetato de etilo para proporcionar el producto puro. El licor madre se pasó a través de un tapón de gel de. sílice y recristalizó de acetato de etilo para ' proporcionar el producto adicional, 2, 6-diclorotieno [2, 3-b] piridin-5-carbaldehído . ¾ R N .(400 MHz , CDC13) d 10.50. (s,. 1H) , 8.46 (s, 1H) , 7.25 (s, 1H) ppm. 1- (2 , 6-Diclorotieno [2 , 3-b] iridin-5-il) etanol : A un matraz . de reacción que contiene 2,6- diclorotieno [2 , 3-b] piridin-5-carbaldehído (5.1 g, 21.97 mmol) en 300 mL de THF a -20°C se agregó cloruro de metilma'gnesio, solución 3.0M en tetrahidrofurano (7.69. mL, 23.07 mmol) gota a gota. Después de 1 h, se agregó una carga adicional de 0.7 mL de MeMgCl . Después, de 15 min, la reacción se apagó por la adición de 50 mL de NH4C1 sat. y 50 mL de agua. Después de entibiar hasta ta, se agregó acetato de etilo y la capa orgánica se separó y lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó . sobre MgS04, . filtró, y concentró para proporcionar .1- (2, 6-diclorotieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etanol . XH RMN (400 MHz , CDC13) d 8.19. (d, J = 0.8 Hz, 1H) , 7.14 (s, 1H) , 5.32 (qdd, J = 6.3, 3.5, 0.8 Hz, 1H) , 2.07 (J = 3.5 Hz, 1H), 1.56 (d, J = 6.'6 Hz, 3H) ppm. 1- (2 , 6-Diclorotieno [2 , 3-b] iridin-5-il) etanona: A una solución de .1- (2 , 6-diclorotieno [2 ,.3-b] iridin-5-il) etanol (5 g, 20.15 mmol) en 200 mL de tolueno anhidro ,se agregó Mn02 (14 g, 161 mmol). La reacción se calentó hasta reflujo durante la noche, enfrió hasta ta, filtró a través de Celite™ y enjuagó con acetato de etilo. La concentración . y purificación por cromatografía de columna proporcionan 1-(2,6.-diclorotieno[2,3-b]piridin-5-il)etanona. RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.15 (s, 1H) , 7.19 (s, 1H), 2.75 (s,."3H) ppm. V (R) -1- (2 , 6-Diclorotieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etanol : Se disolvió 1- (2, 6-Diclorotieno [2, 3-b] piridin-5-il)etanona (3.6 g, 14.63 mmol) en. THF (100 mL) y enfrió hasta -55°C en un balo de hielo seco/MeCN. A esta solución se agregó una solución de (+) -dip-cloruro (tm) (10.32 g, 32.2 mmol) en THF gota a gota. La reacción se permitió entibiar lentamente hasta ta durante la noche y apagó por adición de 10 mL de acetona y 50 mL de Na2C03 sat . al 50%. La reacción se agitó durante 1 h y diluyó con 400 mL de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con 2 x 100 mL de Na2C03 sat al 50%, 2 x 100 mL de agua, y 2 x 100 mL de salmuera. La reacción se secó sobre MgS04, filtró y concentró. El residuo se hizo mezcla espesa en 100 mL de agua/200 mL de hexanos durante 3'h para formar ppt blanco que se filtró y secó para proporcionar (R)-1- (2, 6-diclorotieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanol . El exceso enantiomérico como se determina por HPLC quiral se encontró para ser = 99%. 1H RMN (400 MHz, CDC13) d 8.19 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.32 (qdd, J = 6.3, 3.5, 0.8 Hz, 1H) , 2.07 (J = 3.5 Hz, 1H) , 1.56 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ppm.

(S) -2- (1- (2 , 6-Diclorotieno [2 , 3-b] iridin-5 ±1) etil) isoindolin-1 , 3-diona : En un matraz de reacción se combinó ftalimida (1.530 g, 10.40 mmol), trifenilfosfina (2.73 g, : 10.40 mmol), (R)-l-(2, ß-diclorotiéno [2, 3-h] piridin-5-il) etanol (2.15 g, 8.66 mmol) y tetrahidrofurano (57.8 mL) . La reacción se enfrió hasta 0°C y diisopropil azodicarboxilato (2.043 mL, 10.40 mmol) se agregó gota a gota. La reacción se removió del baño de hielo y se permitió entibiar a ta y agitar durante la noche. La reacción se diluyó con' acetato de etilo y lavó con NaHC03 y salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSC , filtró y concentró. La purificación usando acetato de etilo al 5-10% en hexanos proporciona (S) -2- (1- (2, 6-diclorotieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etil) isoindolin-1, 3-diona. 1H RMN (400 MHz, CDC13) d· 8.37 (s, 1H) , 7.82 (m, '2H), 7.73 *m, 2H), 7.18 (s, 1H) , 5.90 (q, 7.3 Hz, 1H) , 1.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H) ppm.

(S) -2- (1- (6-Cloro-2-metiltieno [2 , 3-b]piridin-5 il) e'bil) isoindolin-1 , 3-diona : En un recipiente de microondas se combinó carbonato de potasio (183 mg, 1.325 mmol), trimetilboroxina (0.018 mL, 0.133 mmol), (S) -2- (1- (2, 6-diclorotieno [2, 3-b].piridin-5-il) etil) isoindolin-1, 3-diona (100. mg, 0.265 mmol), tetraquis trifenilfosfina paladio (0) (45.9 mg, 0.040 mmol),. y 2.5 mL de D F. La reacción se sometió a calentamiento por micrpondas durante 30 min a 120°C. Después del enfriamiento, la reacción se disolvió en acetato de etilo y lavó con agua y salmuera, secó sobre gSC , filtró y concentró. . La purificación por cromatografía de columna proporciona la (S) -2-.(l- (6-cloro-2-metiltieno [2 , 3-b] piridin-5-il ) etil) isoindolin-1 , 3-diona impura (30 mg, 0.084. mmol, 31.7% de rendimiento.) . ¾ RM (400 MHz, CDC13) d 8.31. (s, . 1H) , 7.81 (m,. 2H), 7.71 ·. (m, 2H) , 6.95 (q, 1.2 Hz, 1H) ,. 5.91 (q, J = 6.8 Hz, 1H) , 2.60 (d, J = 1.2 Hz, 3H) , 1.91 (d, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. .

(S) -2- (1- (2-Metil-6- (piridin-2-il) tieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona : En un recipiente de reacción se combinó 2- (1,1,1-tributilestanil) piridina (0.124 mi, 0.370 mmol) , tetraquis trifenilfosfina (0) (35.6 mg, 0.031 mmol), (S ) -2- ( 1- ( 6-cloro-2-metiltieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etil) isoindolin-1, 3-diona (110 mg, 0.308 mmol) . en dioxano (3 mL) . La reacción se calentó hasta 100°C durante 2 d, enfrió hasta ta, y diluyó con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con NaHC03 y salmuera, secó sobre ' MgSCU, filtró y concentró. La purificación por cromatografía de columna proporciona (S)-2-(1- (2-metil-6- (piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5- . il) etil) isoindolin-1, 3-diona . XH RMN (400 Hz, CDC13) d 8.64 (ddd, J = 4.7, 1.8,' 0.8 Hz, " 1H) , .72 (td J = 7.8, 2.0 Hz, 1H) ,' 7.67 (m, 3H) , 7.62 (m, 2H) , .7.29 (ddd, J = 7.4, 4.9, 1.6 Hz, 1H), 6.98 (q, J = 1.4 Hz, 1H) , -6.30 (q, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.60 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 1.97 (d, J = 7.2 Hz, 3H) ppm.

(S) -1- (2-Metil-6- (piridin-2-il) tieno [2 , 3-b]piridin-5-il) etanamina: La (S) -2- (1- (2-raetil-6- (piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etil) isoindoli'n-l,.3-diona hecha en mezcla espesa (60 mg, 0.150 mmol) en 3,5 mL de etanol se calentó hasta 60°C y se agregó monohidrato de hidracina (73.0 µ?,, 1.502 mmol). La reacción se agitó a 60°C durante 2 h, enfrió hasta TA y diluyó con acetato de etilo. La reacción se filtró y concentró. El residuo resultante se volvió a disolver en acetato de etilo' y lavó con agua y salmuera, secó sobre MgS04, filtró y concentró, para proporcionar (S) -1- (2-metil-6-(piridin-2-il) tieno [2 , 3-b] piridin-5-il) etanamina cruda. 1H RMN (400 MHz , CDC13) d 8.67 (ddd, J = 4.9 , 2.7, 1.2 Hz, 1H) , 8.19 (s, 1H), 7.85 (m, 2H) , 7.32 (ddd J = 7.0, 4.9, 1.8 Hz, 1H) , 6.93 (q, J = 1.2 Hz, 1H)., 4.60 (q, J "= 6.6 Hz, 1H) , 2.63 (d, J = 1.2 Hz, 3H)., 2.20 (br s, 3H), .1.43 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ppm. L.C/MS (M+ , encontrado = 270.1).

S) -N- (1- (2-Metil-6- (piridin-2-il) tieno [2 ,3-b]piridin-5-il) etil) -9H-purin-6-amina: Sé disolvió 6-cloropurina (26.4 mg, 0.171 mmol) , (S)-l- (2-metil-6- (piridin-2-il ) tieno [2, 3-b] piridin-5-il) etanamina. (40 mg, 0.148 mmol) y base de hunig (38.9 L, 0.223 mmol) en 2 mL de n-butanol y calentó hasta 120°C durante la noche. La reacción se enfrió hasta ta y purificó por cromatografía de fase inversa para proporcionar (S)'-N- (1- (2-metil-6- (piridin-2-il) tieno [2, 3-b] piridin-5-il ) etil) -9H-purin-6-amina . ?? RMN (400 MHz , CDC13) d 12.5 (br s, 1H) , 8.78 (br m, 1H) ,. 8.55-7.80 (serie de m, 6H) , 7.60-7.30 (br m, 1H) , '7.26 (m, 1H) , 6.89 (br s, 1H) , 6.40-6.0.0 (br m, 1H) , 2.60 (br s, 3H) , 1.60-1.25 (serie de M 3H) . LC/ S ( +l, encontrado = 388.1).

Ensayos biológicos Expresión recombinante de Pl3Ks Las subunidades pllO de longitud completo de Pl3k , ß y d, etiquetadas con terminal N con etiqueta polyHis, se coexpresaron con p85 con vectores de expresión de virus Báculo en células de insecto sf9. Los heterodimeros P110/p85 se purificaron por. Ni-NTA secuencial, Q-HP, . cromatografía Superdex-100. Las isozimas a, ' ß . y d purificadas se almacenaron a -20°C en Tris 20mM, pH 8, NaCl 0.2M,' glicerol al 50%, DTT 5mM, colato- de Na 2mM. El ??3?? truncado, residuos 114-1102, . etiquetados con terminal N. con etiqueta polyHis, se expresó con virus Báculo en células de insecto Hi5. La isozima ? se purificó por cromatografía Ni-NTA, Superdex-200 , Q-HP secuencial. La isozima ? se almacenó congelada a -80°C en NaH2P04, pH 8, NaCl 0.2M, etilén glicol al 1%, ß-mercaptoetanol 2mM.

Ensayos de enzima en vi ro.

Los ensayos. . se realizaron en 25 ]i con las concentraciones finales de arriba de componentes en placas de polipropileno blancas (Costar 3355) . El fo'sfoaceptor de fosfatidil inositol, Ptdlns (4, 5) P2 P4508, fue de Echelon Biosciences. La actividad ATPase de las isbzimas alfa y gamma no se estimuló mucho por Ptdlns (4, 5) P2 bajo estas condiciones y por lo tanto se omitió del ensayo de estas isozimas. Los compuestos de prueba se disolvieron en sulfóxido de dimetilo · y diluyeron con diluciones en serie tres veces. El compuesto en DMSO (1 iL) se agregó por pozo de prueba, y la inhibición relativa a reacciones que no contiene compuesto, con y sin' enzima se determinó. Después de la incubación del ensayo a ta, la reacción se detuvo y el ATP residual se determinó por adición de un volumen igual de un kit de bioluminiscencia ATP comercial (Perkin Elmer Easilite) de acuerdo a las instrucciones del fabricante, y detectó usando un luminómetro AnalystGT.

Proliferación de Células B Humanas estimulada por anti-IgM Células B humanas aisladas : Se aislan PBMCs de Leukopac o de sangre fresca humana. Se aislan células B humanas al usar protocolo Miltenyi y kit ?? de aislamiento de célula B. Se purificaron células B humanas al usar AutoMacs . column .

Activación de células B humanas Se usa placa de fondo plano de 96 pozos, la placa 50000/pozo purifica células B en medio de proliferación de célula B (DMEM + FCS al 5%, Hepes 10 mM, 50 µ 2-mercapto-etanol) ; 150 µL de medio contiene 250 ng/mL de proteina recombinante CD40L-LZ (Amgen) y 2 ^g/mL de anticuerpo IgM anti-humano (Jackson ImmunoReseach Lab. #109-006-129) , se mezcla con 50 µL de medio de célula B que contiene inhibidores PI3K y se incuba 72 h a 37°C en la incubadora. Después de 72h, se pulsan células B etiquetadas con 0.5-1 uCi/pozo 3H timidina durante la noche ~18 h, y se cosecha la célula usando cosechador TOM.

Proliferación de Células B Humanas estimulada por IL-4 Células B humanas aisladas: Se aislan PBMCs humanos de Leukopac o de sangre fresca humana. Se aislan células B humanas usando protocolo Miltenyi- kit de aislamiento de célula B. Las células B humanas se purificaron por AutoMacs . column .

Activación de células B humanas Se usa placa de fondo plano de 96 pozos, la placa 50000/pozo purifica células B en medio de proliferación de célula B (DMEM + .FCS al 5%, 50 µ? de 2-mercaptoetanol , Hepes lOmM) . El medio (150 µL) contiene .250 ng/mL de proteina recombinante CD40L-LZ (Amgen) y 10 ng/mL de IL-4 (R&D system # 204-IL-025) , se mezcla con 50 150 µL de medio de célula B que contiene compuestos e incuba 72 . h a 37 °C en la incubadora. Después de 72 h, se pulsan células B etiquetadas con 0.5-1 uCi/pozo 3H timidina durante la noche ~18 h, y se cosecha la célula usando cosechador TOM.

Antigeno T especifico (toxoide de Tétanos) inducido por ensayos de proliferación PBMC humano Los PBMC humanos se prepararon de soluciones madre congeladas o se purifican de sangre humana fresca usando un gradiente Ficoll. - Se usa placa de fondo redondo de 96 pozos y placa 2xl05 PBMC/pozo con medio de cultivo (RPMI1640 + FCS al 10%., 50uM 2-Mercaptoetanol , Hepes. 10 " mM) . Para determinaciones IC50, los inhibidores PI3K se probaron desde 10 µ? hasta 0.001 µ?, en la mitad de los incrementos lo.g y en triplicado. Se agregó toxoide. de tétanos, antigeno especifico de célula T (University of Massachusetts Lab) a 1 g/mL e incubó. 6. dias a 37 °C en la incubadora. Los sobrenadantes se recolectan después de 6 dias durante ensayo IL2 ELISA, luego las células se pulsan con : 3H-timidina durante ~18 h para medir la proliferación.' Ensayos GFP para detectar inhibición de PI3 Clase la y Clase III AKT1 (PKBa) se regula por PI3K Clase la activado por factores mitogénicos (IGF-1, PDGF, insulina, trombina, NGF, etc.) . En respuesta a estimulo mitogénico, AKT1 se transubica del citosol al Forkhead de membrana de plasma (FKHRL1) es un sustrato para AKT1. Es citoplásmico'. cuando se fosforila por AKT (sobrevivencia/crecimiento) . · La inhibición de AKT (estasis/apoptosis ) - transubicación forkhead. a los dominios FYVE del núcleo enlaza a PI(3)P. La mayoría se genera por acción constitutiva de PI3K Clase III.

Ensayo para alterar la membrana AKT (células CHO-IR-AKT1-EGFP/GE Healthcare) Lavar células con solución amortiguadora de. ensayo. Tratar con compuestos en solución amortiguadora de ensayo 1 h. Agregar 10 ng/mL de insulina. Fijar después de 10 min a temperatura ambiente y hacer en imagen.

Ensayo de transublcaclón Forkhead (células GFP Forkhead-Di-versa MDA ??46T) Tratar células con compuesto en medio de crecimiento 1 h. Fijar y hacer en imagen.

Ensayo PI(3)P Clase III (células Ü20S EGFP-2XFYVE/GE Healthcare) Lavar células con solución amortiguadora de ensayo. Tratar con compuestos en la solución amortiguadora de ensayo 1 h. Fijar y hacer en imagen.

Control para los 3. ensayos es Wortmanina lOuM: AKT es citoplásmico Forkhead es nuclear.

PI(3)P eliminado de endosomas Ensayo biomarcador : Estimulación del receptor de célula B de expresión CD69 o B7.2 (CD86) La sangre completa humana heparinizada se estimuló con 10 g/mL de anti-IgD (Southern Biotech, #9030-01) . 90 uL de la sangre estimulada luego se colocó en alícuota por pozo de una placa de 96 pozos y trató con . 10 de . varias concentraciones de compuesto de bloqueo (desde 10-0.0003 µ ) diluido en IMD + FBS al 10% (Gibco) . Las muestras se incubaron juntas durante 4 h (para expresión CD69) hasta' 6 h (para expresión B7.2) a 37 °C. La sangre tratada (50 uL) se transfirió a una placa de pozo profundo de 96 pozos (Nunc) para tinción de anticuerpo con 10 uL cada uno de CD45-PerCP (BD Biosciences, #347464), CD19-FITC (BD . Biosciences, #340719), y CD69-PE (BD Biosciences, #341652) . Los segundos 50 L de la sangre tratada se transfirieron a una segunda placa de pozo profundo de 96 pozos para . tinción' de anticuerpo con 10 \iL cada uno de CD19-FITC (BD Biosciences, #340719) y CD86-PeCy5 (BD Biosciences, #555666) . Todas las tinciones se realizaron durante 15-30 min en la oscuridad a ta. La sangre luego se lisó y fijó usando 450 i de solución de lisis FACS (BD Biosciences, #349202) durante 15 min a ta. Las muestras luego se lavaron 2X en PBS .+ FBS al 2% antes del análisis FACS. Las muestras se separaron en ya sea células positivas dobles CD45/CD19 para tinción CD69, o- células positivas CD19 para tinción CD86.

Contra selección Gamma: Estimulación de monocitos humanos para expresión fosfo-AKT Una linea celular de monocito humana, THP-1, se mantuvo en RP I + FBS al 10% (Gibco)'. Un día antes de la estimulación, las células se contaron usando exclusión de azul de tripano en un hemocitómetro y suspendieron en una concentración de 1 x 106 células por mL de medio. 100. de células más medio (1 x 105 células) luego se colocó en alícuota por pozo de- 4-96-pozo, platos de pozo profundo (Nunc) para probar ocho diferentes compuestos..-. Las células se reposaron durante la noche antes del tratamiento con varias concentraciones (desde 10-0.0003µ?) del compuesto de bloqueo. El compuesto diluido en medio (12 L) se agregó a las células durante 10 min a 37 °C. El MCP-1 humano (12 L, R&D Diagnostics, #279-MC) se diluyó en medio y agregó a cada pozo en una concentración final de 50 ng/mL. La estimulación se prolongó durante 2 mi.n a ta. La solución¦ amortiguadora FACS Fosflow Lysé/Fix precalentada (1 mL de 37°C) . (BD Biosciénces, #558049) 'se agregó a cada pozo. Las placas luego se incubaron, a 37°C durante unos 10-15 min adicionales. Las placas se giraron en 1500 rpm durante ,10 min, el sobrenadante se aspiró completamente, y 1 mL de MEOH al 90% enfriado con hielo se agregó a cada pozo con agitación vigorosa. Las placas luego se incubaron ya sea- durante la noche a -70°C o en hielo durante 30 min antes de la tinción del anticuerpo. Las placas se giraron y lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco) . El lavado se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. pAKT de conejo (50 i , Señalización Celular, #4058L) en 1:100, se agregó a cada muestra durante 1 h a ta con agitación. Las células se lavaron y giraron en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El' anticuerpo secundario, Alexa 647 anti-conejo de cabra (50 L, Invitrogen, #A21245) en 1:500, se agregó durante 30 min a ta con agitación. Las células luego se lavaron IX en solución amortiguadora y suspendieron en 150 \i de solución amortiguadora para análisis FACS. Las células necesitan dispersarse muy bien por pipeteo antes de correrlas en el citómetro de flujo. Las células se corrieron en. un LSR II (Becton . Dickinson) y separaron en dispersión lateral y delantera para determinar niveles de expresión de pAKT en la población de monocito.

Contra selección gamma: Estimulación de monocitos para expresión fosfo-AKT en médula ósea de ratón Los fémures de ratón se disecaron de cinco¦ ratones BALB/c hembra (Charles River Labs.) y recolectaron en RPMI + medio FBS al 10% (Gibco) . La médula ósea de ratón se removió al cortar los extremos del fémur y al mojar con 1 mL de medio usando una jeringa de calibre 25. . La médula ósea luego se dispersó en medio usando una aguja de calibre 21. El volumen del medio se incrementó hasta 20 mL y las células se contaron usando exclusión de azul de tripano en un hemocitómetro . La suspensión celular luego se incrementó, hasta 7.5 x ?06 células por 1 mL de medio y 100 uL (7.5 x 105 células) se puso en alícuota por pozo en platos de pozo profundo de 4-96 pozos (Nunc) para probar ocho diferentes compuestos. Las células se reposaron a 37 °C durante 2 h antes del tratamiento con varias concentraciones (desde 10-0.0003µ?) de compuesto de bloqueo. El compuesto diluido en el medio (12 iL) se agregó a las células de la médula ósea durante 10 min a 37 °C. El MCP-1 de ratón (12 uL, R&D Diagnostics, #479.-JE)- se diluyó en medio y agregó a cada pozo en una concentración final de 50 ng/mL. La estimulación s prolonga durante 2 min a ta. · 1 mL de solución amortiguadora FACS Fosflow Lyse/Fix pre-calentada a 37°C (BD Biosciences, #558049) se agregó a cada pozo. Las placas luego se incubaron a 37°C durante unos 10-15 min adicionales. Las placas se giraron en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró completamente y 1 mL de MEOH al 90% enfriado cón hielo se agregó a cada pozo con agitación vigorosa. Las placas luego se incubaron ya sea durante la noche a -7Ó°C o en hielo durante 30 min antes .de la tinción del anticuerpo. Las placas se giraron y lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco) . El lavado se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El bloqueo Fe (2 i , BD Pharmingen, #553140) luego se agregó por pozo durante 10 min a ta. Después: del bloqueo, 50 L de anticuerpos primarios diluidos en solución amortiguadora; CDllb-Alexa488 (BD Biosciences, #557672) en 1:50, CD64-PE (BD Biosciences, #558455)' en 1:50, y pAKT de conejo (Cell Signaling, #4058L) en 1:100, se agregaron a cada muestra durante 1 h a ta con agitación. La. solución amortiguadora de lavado se agregó a células y giró en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El anticuerpo secundario; Alexa 647 anti-conejo de cabra (50 yL, Invitrogen, #A21245) en 1:500, se agregó durante 30 min a ta con agitación. Las células luego se lavaron IX en solución amortiguadora y suspendieron en 100 ]i de solución amortiguadora para análisis FACS. Las. células se corrieron en un LSR II .(Becton Dickinson) y seccionaron en células positivas dobles CDllb/CD64 para determinar los niveles de expresión de pAKT en la población de monocito.

Ensayo pAKT en vivo ¦ El vehículo y compuestos se administran p.o. (0.2 mL) al dar (Oral Gavage Needles Popper & Sons, New Hyde Park, NY) a ratones (3751 de línea transgénica, hembra, · 10-12 semana Amgen Inc, Thousand Oaks, CA) 15 min antes de la inyección i.v (0.2 mLs) de FITC anti-IgM (50 ug/ratón) (Jackson Immuno Research, West Grove, PA) . Después de 45 min los ratones se sacrifican dentro de una cámara C02. La sangre¦ se retira por medio de punción . cardiaca (0.3 mL) (jeringas Ice de 2.5 g, Sherwoód, St. Louis, MO) y transfiere en un vial cónico de 15 mL (Nalge/Nunc International, Dinamarca). La sangre se fija inmediatamente con 6.0 mL de solución amortiguadora BD Fosflow Lyse/Fix (BD Bioscience, San José, CA) , invierte 3X's y colocó en baño de agua a 37°C. La mitad del bazo se remueve y transfiere a un tubo eppendorf que contiene 0.5 mL de PBS (Invitrogen Corp, Grand Island, NY) . El bazo se aplasta usando un molinillo de tejido (Pellet Pestle, Kimble/Kontes , Vineland, NJ) y fija inmediatamente con 6.0 mL de solución amortiguadora BD Fosflow Lyse/Fix, invierte ,3X y coloca en baño de agua' a 37°C. Una vez que los tejidos se han recolectado el ratón se disloca cervicalmente y es carcasa para eliminarse. Después de 15 min, los viales cónicos de 15 mL se remueven del baño de agua a 37 °C y colocan en hielo hasta que los tejidos además se procesan.. Los bazos aplastados se filtran á través de. un colador de célula 70 µ?a (BD Bioscience, Bedford, MA) en otro vial cónico de 15 mL y lavan con 9 mL de PBS. Los esplenocitos y sangre se giran @ 2,000 rpms durante 10 min (frió) y la solución amortiguadora se aspira. Las células se volvieron a suspender en 2.0 mL de alcohol metílico. al 90% frío (-20°C) (Malíinckrodt Chemicals, Fillipsburg, NJ) . MeOH se agrega lentamente mientras que el vial cónico se coloca en vórtice rápidamente. Los tejidos luego se almacenan a -20°C hasta que las células pueden teñirse para análisis FACS.

Inmunización TNP de dosis múltiple La . sangre se recolectó por sangrados del ojo retro-orbital de ratones hembra BALB/c de 7-8 semanas de edad (Charles River Labs.) en el día 0 antes de la' inmunización. La sangre se permitió coagular durante 30 min y giró a 10,000 rpm en tubos microcontenedores de suero (Becton Dickinson) durante 10 min. Los sueros se recolectaron, colocaron en alícuotas en tubos Matrix (Matrix Tech. Corp.) y almacenaron a -70 °C hasta que · se realizó el ELISA. Los ratones se les dio oralmente el compuesto antes de' la inmunización y en periodos de tiempo posteriores con base en la vida de la molécula. Los ratones luego se inmunizaron con ya sea 50 g de TNP-LPS (Biosearch Tech.,- #T-5065) , 50 iq de TNP-Ficoll (Biosearch Tech., #F-1300), o 100 yg de TNP-KLH (Biosearch Tech., #T-5060) más alumbre al 1% (Brenntag, #3501) en PBS . La solución de TNP-KLH más alumbre se preparó al invertir suavemente la mezcla 3-5 veces cada 10 min durante 1 h antes de la- inmunización. En el día 5, . después del último tratamiento, los ratones se sacrificaron con . C02 y punción cardiaca. La sangre se permitió coagular durante 30 min y giró a 10,000 rpm en tubos microcontenedores de suero durante 10 min. Los sueros se recolectaron, colocaron en alícuota en tubos Matrix, y almacenaron a -70°C hasta que se realizó el análisis adicional. Los. niveles IgGl, IgG2a, IgG3 e Ig específicos de TNP en el suero luego se midieron por medio de ELISA. TNP-BSA (Biosearch Tech., #T-5050) se usó para capturar los anticuerpos específicos TNP. TNP-BSA (10 ug/mL) se usó para recubrir placas ELISA de '384 pozos (Corning Costar) durante la noche. Las placas luego se lavaron y bloquearon durante 1 h usando solución de Bloqueo ELISA BSA al 10% (KPL) . Después del bloqueo, las placas ELISA se lavaron y muestras/estándares de suero se diluyeron en serie y permitieron para enlazar a las placas durante 1 h. Las placas se lavaron y los anticuerpos secundarios ' conjugados Ig-HRP (IgGl de anti-ratón de cabra, Southern Biotech #1070-05, IgG2a anti-ratón de cabra, Southern Biotech #10.80-05, IgM anti-ratón de cabra, Southern Biotech #1020-05, IgG3 anti-ratón de cabra, -Southern Biotech. #1100-05) se diluyeron en 1:5000 e incubaron, en las placas durante 1. h. . Se usó solución de peroxidasa de TMB (SureBlue Reserve TMB de KPL) para visualizar los anticuerpos. Las placas se lavaron y las muestras se permitieron desarrollar en la solución TMB aproximadamente 5-20 min dependiendo del. Ig analizado. La reacción se detuvo con ácido sulfúrico 2M y las placas se leyeron en un OD de 450. nm.

Para el tratamiento de enfermedades mediadas por PI3K5, tales como artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis , artritis psoriática, psoriasis,' enfermedades inflamatorias, y enfermedades · autoinmunitarias, los compuestos de la presente invención pueden administrarse oralmente, parentalmente, por roció por inhalación, rectalmente, o" tópicamente en formulaciones de dosificación unitaria que contienen portadores, adyuvantes, y vehículos farmacéuticamente aceptables convencionales. El término parenteral como se. usa en la presente incluye, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intrasternal , · técnicas de infusión o intraperitonealmente.

El tratamiento de .· enfermedades y trastornos n la presente se pretende también para incluir la administración profiláctica de un compuesto de la invención, una sal farmacéutica del mismo, o una composición farmacéutica de cualquier sujeto (esto es, un animal, preferiblemente un mamífero, lo más preferiblemente un humano) considerado . que necesita de tratamiento preventivo, tal como,, por ejemplo, artritis reumatoide, espondilitis ; anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis,- enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias y similares.

El régimen de. dosificación para tratar enfermedades mediadas por PI3K5, cáncer, e/o hiperglicemia con los compuestos de esta invención y/o composiciones de esta invención se basa en una variedad de factores, incluyendo el tipo de enfermedad,, la edad, peso, sexo, afección médica del paciente, la severidad de la afección, . la ¦ ruta de administración, y él compuesto particular empleado. De esta manera, el régimen de dosificación puede variar ampliamente, pero puede determinarse de forma rutinaria usando métodos estándares. Los niveles de dosificación del orden desde alrededor de 0.01 mg hasta 30 mg por kilogramo de peso corporal por día, preferiblemente desde alrededor de 0.1 mg hasta 10 mg/kg, más preferiblemente desde alrededor de 0.25 mg hasta 1 mg/kg son útiles para todos los métodos de uso descritos en la presente.

Los compuestos farmacéuticamente activos . de . esta invención pueden procesarse de acuerdo con métodos convencionales de farmacia para producir agentes medicinales para administración a pacientes, incluyendo humanos y otros mamíferos.

Para administración oral, la composición farmacéutica puede estar en la forma de, por ejemplo, una' cápsula, un comprimido, una suspensión, o líquido. La composición farmacéutica preferiblemente se hace en la forma de una dosificación unitaria que contiene una · cantidad dada del ingrediente activo. Por ejemplo, estas pueden contener una cantidad de ingrediente activo desde alrededor de 1 hasta 2000 mg, preferiblemente desde alrededor de 1 hasta 500 mg, más preferiblemente desde . alrededor de 5 hasta 150 mg. Una dosis diaria adecuada para un humano u otro mamífero puede variar ampliamente dependiendo de la afección del paciente y otros factores, pero, una vez de nuevo, puede determinarse usando métodos de rutina.

El ingrediente activo también puede administrarse por inyección como una composición con portadores adecuados incluyendo solución salina, dextrosa, o agua. El régimen de dosificación parenteral diario será desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 30 mg/kg ¦ de peso corporal total, preferiblemente desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 10 mg/kg, y más preferiblemente desde alrededor de 0.25 mg hasta 1 mg/kg.

Las preparaciones inyectables, tales como suspensiones oleaginosas o ac. inyectables estériles, pueden formularse de acuerdo a lo conocido se usan agentes de suspensión y agentes de humectación o dispersión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un solventé o diluyente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como una solución en 1 , 3-butandiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden emplearse son agua, solución de Ringer, y solución de cloruro de sodio isotónico. Además, los aceites fijos, estériles se emplean convencionalmente como- un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo blando puede emplearse, incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables.

Los supositorios para administración rectal del fármaco pueden prepararse al mezclar el fármaco con un excipiente no irritante adecuado tal como manteca de cacao y polietilen glicoles que son sólidos a temperaturas ordinarias pero líquidos a la temperatura rectal y por lo tanto se fundirán en el recto y liberarán el fármaco.

Una dosis tópica adecuada de ingrediente activo de un compuesto de la invención es 0.1 mg hasta 150 mg administrada una hasta cuatro, preferiblemente una o dos veces al día. Para' administración tópica, el ingrediente ' activo ' puede comprender desde 0.001% hasta 10% p/p, por ejemplo, desde 1% hasta 2% en peso de la formulación, aunque puede comprender tanto como 10% p/p, pero preferiblemente no más de 5% p/p, y más preferiblemente. desde 0.1% hasta 1% de la formulación.

Las formulaciones adecuadas- para .administración tópica incluyen preparaciones liquidas o semi-liquidas adecuadas para penetración a través de la piel (por ejemplo, linimentos, lociones, ungüentos, cremas, o pastas) y gotas adecuadas para administración al ojo, oído, o nariz.

Para administración, los compuestos de esta invención se combinan ordinariamente con uno o más adyuvantes apropiados por la ruta indicada de administración. Los compuestos pueden mezclarse con lactosa, sacarosa, polvo de almidón, ásteres de celulosa de ácido alcanoico, ácido esteárico, talco, estearato de magnesio, óxido de¦ magnesio, sodio y sales de calcio de ácidos fosfórico y sulfúrico, acacia, gelatina, alginato . dé sodio, polivinil-pirrolidina, y/o alcohol de polivinílico, y comprimido o encapsulado para administración convencional. Alternativamente, los compuestos de esta invención pueden disolverse en solución salina, agua, polietilenglicol, propilenglicol, etanol, aceite de maíz, aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de ajonjolí, goma de tragacanto, y/o varias soluciones amortiguadoras. Otros adyuvantes y modos de administración son bien conocidos en la técnica farmacéutica. El portador o diluyente puede incluir material para retardar el tiempo, tal como monoestearato. de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera, u otros materiales bien conocidos en la técnica.

La composición farmacéutica puede hacerse- en una forma sólida (incluyendo gránulos, polvos o supositorios) o en una forma líquida (por ejemplo, soluciones, suspensiones, .o emulsiones). 'Las composiciones farmacéuticas pueden someterse a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización y/o pueden contener adyuvantes convencionales, tales, como conservadores, estabilizadores, agentes humectantes, emulsificadores, soluciones amortiguadoras etc.

Las formas de dosificación sólidas para .administración oral pueden incluir cápsulas, comprimidos, pildoras, polvos, y gránulos. En tales formas de dosificación sólida, el compuesto activo puede, mezclarse, con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa, o almidón. Tales' formas de dosificación también pueden comprender, como en la práctica normal, sustancias adicionales diferentes - de diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de : cápsulas, comprimidos, y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguantes. Los- comprimidos y pildoras adicionalmente pueden prepararse con recubrimientos entéricos . '.

Las formas de dosificación líquidas para administración oral pueden incluir emulsiones farmacéuticamente aceptables, soluciones, suspensiones, jarabes, y elixires que contienen diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tales como agua. Tales composiciones también pueden comprender adyuvantes, tales como agentes humectantes, edulcorantes, saborizantes , y de perfume.

Los compuestos de la presente invención pueden poseer uno o más átomos de carbono asimétricos y de esta manera son capaces de existir en la forma de isómeros ópticos asi como en la forma de mezclas racémicas o no racémicas de · los mismos. Los isómeros ópticos pueden obtenerse por resolución de las mezclas racémicas de acuerdo a procesos convencionales, por ejemplo, por formación de sales diaestereoisoméricas , por tratamiento con un ácido o base ópticamente activo. . Los ejemplos de ácidos apropiados son ácido tartárico,. diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluoiltartárico, y ácido · canforsulfónico y luego separación de la mezcla de diaestereoisómeros por cristalización seguido ' por liberación de las bases ópticamente activas de estas . sales. Un proceso diferente para separación dé. isómeros ópticos involucra el uso de una columna de cromatografía quiral óptimamente elegida para maximizar la separación de los enantiómeros . Todavía otro método disponible involucra síntesis de moléculas diaestereoisómericas covalentes al hacer reaccionar compuestos de la invención con un ácido ópticamente puro en una forma activa o un isocianato ópticamente puro. Los diaestereoisómeros sintetizados pueden separarse por medios convencionales tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación, y luego hidrolizarse para suministrar el compuesto enantioméricamente puro. Los compuestos ópticamente activos . de la invención pueden igualmente obtenerse al usar materiales de partida activos. Estos isómeros pueden estar en la forma de un ácido libre, una base libre, un éster p una sal.

De la misma manera, los compuestos de esta invención pueden existir como isómeros, que son compuestos de la misma fórmula molecular pero en la cual los átomos, uno con respecto al otro, se configuran diferentemente. En particular, los sustituyentes alquileno de los compuestos de esta invención, normalmente y preferiblemente se configuran e insertan en las moléculas como se indica en las definiciones para cada uno de estos grupos, que se leen de izquierda a derecha. Sin embargo, en ciertos casos,' alguien expérimentadó en la técnica apreciará que es posible preparar compuestos de esta invención en los cuales estos sustituyentes están inversos en orientación con relación, a los otros átomos en la molécula. Esto es, el sustituyente a insertarse puede ser el mismo como aquel señalado arriba excepto que se inserta en la molécula en la orientación inversa. Alguien, experimentado en la técnica apreciará que estas formas isoméricas de los compuestos de esta invención son para construirse como se abarca dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en la forma de sales derivadas de ácidos orgánicos o inorgánicos. Las sales incluyen, pero no se limitan a, las siguientes: acetatp, ádipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, bütirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, ciclopentanpropionato, dodecilsulfato, _ etansulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietansulfonato, lactato, maleato, metansulfonato, nicotinato, 2-naftalensulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 2-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, . succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, mesilato, y undecanoato. También, los grupos que contienen nitrógeno básicos pueden cuaternizarse con tales agentes como haluros de alquilo inferior, tales como cloruro, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo, y de. butilo; sulfatos de dialquilo tipo sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo, y diamilo, haluros de cadena larga tales · como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo tipo bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Agua o productos dispersables o solubles en aceite, por ello se obtienen.

Los ejemplos de ácidos · que pueden emplearse para sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables incluyen tales ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico y tales ácidos orgánicos como ácido oxálico, ácido maleico, ácido succínico y ácido cítrico. Otros ejemplos incluyen sales con metales alcalinos o metales alcalinotérreos , tales como sodio, potasio, calcio o magnesio o con bases orgánicas.

También abarcados en el alcance de la presente invención son ésteres farmacéuticamente aceptables de un ácido carboxílico o hidroxilo que contiene el grupo,¦ incluyendo un éster metabólicamente voluble o una forma de profármaco de un compuesto de esta invención. Un éster metabólicamente voluble es uno que puede producir, por ejemplo, un incremento en niveles sanguíneos y prolongar la eficacia de la forma no esterificada correspondiente del compuesto. Una forma de profármaco es una que no está en una forma activa de la molécula ya. que . se administra pero que se vuelve terapéuticamente activa después de alguna actividad en vivo o biotransformación, tal como metabolismo, por ejemplo, desdoblamiento enzimático o hidrolitico. . Para una discusión general de profármacos que involucran ésteres ver Svehsson y Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Los ejemplos de un anión de carboxilato enmascarado incluyen una variedad de ésteres, tal como alquilo (por ejemplo, metilo, etilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo) , aralquilo (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo) , y alquilcarboniloxialquilo (por ejemplo, pivaloiloximetilo) . · Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos de arilcarboniloximetilo que se desdoblan por esterasas en vivo que se liberan del fármaco libre y formaldehido (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)).. También, los fármacos que contienen^ un grupo H ácido, tal como imidazol, . imida, indol y similares, se han enmascarado con g^pos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Los grupos hidroxi se han enmascarado como ésteres y éteres. EP 039,051 (Sloan y Little, 4/11/81) describe profármacos de ácido hidroxámico de base Mannich, su preparación y uso. Los ésteres de un. compuesto de esta invención, pueden incluir, por ejemplo, los ésteres de metilo, etilo, propilo, y butilo, asi como otros ésteres adecuados formados. entre una porción ácida y un hidroxilo que contiene la porción. Los ésteres metabólicamente : volubles , pueden incluir, por ejemplo, metoximetilo, etoximetilo, iso-propoximetilo, a-metoxietilo, grupos tales como a- (alquiloxi (C1-C4 )) etilo, por ejemplo, metoxietilo, etoxietilo, propoxietilo, iso^propoxietilo, etc.; grupos 2-oxo-l,3-dioxolen-4-ilmetilo, tales como 5-metil-2-oxo-l , 3, dioxplen-4-ilmetilo, etc.; grupos alquiltiometilo C1-C3, por ejemplo, metiltiometilo, .etilt'iometilo, isopropiltiometilo, etc.; grupos aciloximetilo, por ejemplo, pivaloiloximetilo, OÍ-acetoximetilo, etc.; etoxicarbonil-l-metilo; o grupos metilo a-aciloxi-a-sustituido, por ejemplo a-acetoxietilo .

Además, los compuestos de la invención pueden existir como sólidos cristalinos que pueden cristalizarse de solventes comunes tales como etanol, N, N-dimetil-formamida, agua, o similares. De esta manera, las formas cristalinas de los compuestos de la- invención pueden 'existir como polimorfos, solvatos e/o hidratos de los compuestos precursores o sus. sales farmacéuticamente aceptables. Todas de tales formas de manera similar son para construirse ya que caen dentro del alcance de la invención.

Aunque los compuestos de la invención pueden administrarse como el agente farmacéutico activo único, también pueden usarse en combinación con uno o más compuestos de la invención u otros agentes. . Guando se administran como una combinación, los agentes terapéuticos pueden formularse como composiciones, separadas que se dan al mismo tiempo o tiempo diferente, o los agente terapéuticos pueden darse como una composición sencilla.

Lo anterior es meramente ilustrativo de la invención y no se pretende limitar la invención para los compuestos descritos. Las variaciones y cambios que son obvios para alguien experimentado en la. técnica se pretenden para estar dentro del alcance y naturaleza de la invención que se definen en las reivindicaciones anexas.

De la descripción anterior, alguien experimentado en la técnica puede fácilmente establecer las características esenciales de esta invención, y sin alejarse del espíritu y alcance de la misma, pueden hacer varios cambios y modificaciones de la invención para adaptarse a varios usos' y condiciones .

Claims (4)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que tiene la estructura: o cualquier sal farmacéuticamente aceptable . del mismo, caracterizado porque: X1 es C (R10) o N; X2 es C(R6) p N; X3 es C(R7) o.N; X4 es C(R10) o N; Y es N (R8) , CRaRa, S u 0; R1 se selecciona de H, halo, alqCi-6, haloalqCi- , ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C(=0)NRaRa, OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, OalqC2-eNRaRa, OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, . S(=0)2NRaRa, S(=0)'2N(Ra)C(=0)Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)0R?, NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, ' N (Ra) C (=0) 0Ra, N (R ) C (=NRa)NRaRa, N (Ra) S (=0) 2R\ N(Ra)S(=0)2NRaRa, NRaalqC2_6NRaRa, NRaalqC2-6ORa, NRaalqC2_ CH2OalqC2-5ORa, CH2SRa, CH2S(=0)Ra, CH2S(=0)2Rb, CH2S (=0) 2NRaRa, CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, CH2S (=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, CH2NR R . CH2N (Ra) C (=0) Ra, CH2N (Ra) C (=0) 0Ra, CH2N (Ra) C (=0) NRaRa, CH2N (Ra) C (=NRa) NRaRa, CH2N (Ra) S (=0) 2Ra, · CH2N(Ra)S(=0)2NRaRa, CH2NRaalqC2-6NRaRa, CH2NRaalqC2-6ORa, . CH2NRaalqC2-6C02Ra y CH2NRaalqC2 6S02Rb; o R1 es un anillo biciclico de 8, 9, 10 u 11 miembros' o monociclico de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado, ligado a alqC!_4, ligado a 0alqCi-2, ligado a alqCi-20, ligado a N(Ra) o ligado a 0, de enlace directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un átomo 0, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi-6, haloalqCi-4, ciarto, nitro, C(=0).Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C( =0)NRaRa, 0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, ÓalqC2-6NRaRa, OalqC2_6ORa, . SRa, S (=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(-0)Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N(Ra)C(=0).Ra, N(Ra)C(=0)ORa, N ( Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2_ 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa, en donde los. átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos adicionalmente por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, y en donde el anillo está adicionalmente sustituido por 0 o 1 grupo ligado a S02, ligado a C(=0) o ligado a CH2, enlazado directamente seleccionado de fenilo, piridilo, pirimidilo, . morfolino, piperazinilo, piperadinilo, pirrolidinilo, ' ciclopentilo, ciclohexilo todos los cuáles están sustituidos¦ además por 0, 1, 2 o 3 grupos seleccionados de halo, alqCi-6, haloalqd-4, ciano,' nitro, C (=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, ¦ C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, NRaR , y N (Ra) C (=0) Ra; R2 se selecciona de un. anillo biciclico de 8, 9, 10 u 11 miembros o monociclico de 5, 6 o .7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S,' pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0 o 1 sustituyentes R2, y el anillo está sustituido adicionalmente por 0, 1, 2 o 3 ¦sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alqCi- 6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C (=0) Ra, C(=0)ORa, C (=0) NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, OC(=0)R\ OC(=0)NRaRa, OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, . OalqC2-6NRaRa, OalqC2-6ORa, SRa,. S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRRa, , NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) 0Ra, N ( Ra) C ( =0) NRaRa, N ( Ra) C (=NRa ) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2-6ORa; o R3 se selecciona de . halo, alqCi-6, haloalqCi_4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0).NRaRa, C (=NRa)NRaRa, . 0Ra, 0C(=0)Ra, . . 0C(=0)NRaRa, 0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2.6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S (=0).2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, . S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N(Ra)C (=0)Ra, N(Ra)C(=0)0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, . N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2.6ORa; R3 se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alqCi-4, OalqCi-4, OhaloalqCi-4 , NHalqCi_4, N (alqCi-4) alqCi_4, ¦ C (=0)NH2, C (=0)NHalqCi-4, C (=0) N (alqCi_4) alqCi-4, N (H) C (=0) alqGi- , N (alqd-4 ) C (=0) alqCi-4 y haloalqCi-4 ; R4 se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alqCi-4, 0alqCi-4, 0haloalqCi-4,. NHalqCi-4, N (alqCi-4) alqGi-4, C(=0)NH2, C (=0) NHalqCi- , C (^0) N (alqCi-4 ) alqd-4, N (H) C (=0) alqCi_4, N (alqCi-4) C (=0) alqCi-4 y. haloalqCi_4; R5 es, independientemente, cada que se presenta, H, halo, alqCi-6, haloalqCi-4, o alqCi-6 sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, OalqCi-4, alqCi- , haloalqCl-3, OalqCi_ , NH2, NHalqCi-4 y N (alqCi- ) alqCi-4; o ambos grupos R5 juntos forman un espiroalqC3-6 sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, OalqCi-4, alqCi-4, haloalqCi-3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi-4 y N (alqCi-4 ) alqCi-4 ; R6 se selecciona de halo, ciano, OH, OalqCi-4, alqCi-4, haloalqCl-3, OalqCi-4, NHR9, N (alqCi-4) alqCi-4, C(=0)ORa, C (=0) N (Ra) Ra, N (Ra) C (=0) Rb y un anillo heterociclico de 5 0 6 miembros saturado o parcialmente saturado que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde . el anillo está sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, oxo, OalqCi-4, alqCi-4, haloalqCí-3, OalqCi-4, NH2, NHalqCi-4 y N (alqCi-4) alqCi-4; R7 se selecciona de H, halo, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C (=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, .0C(=0)Ra, 0C(=0)NRaR , OC (=.0)N (Ra) S (=0)2Ra, OalqC2-6NRaRa, . OalqC2.6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, ¦ S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra', . S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, . NRaRa, N (Ra)C (=0) Ra, N (Ra) C (=0) 0R , N (Ra ) C (=0) NRaRa , N (Ra) C (=NRa) NRaRa, . N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, . NRaalqC2. 6NRaRa, NRaalqC2-60Ra y alqCi-6, en donde el. alqCi_6 está sustituido por ?,. 1 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, ORa,. · OC(=G)Ra, . OC(=0)NRaRa, OC(=0)N(Ra)S(=0)2Ra,. OalqC2-6NRaRa, OalqC2.5ORa, SRa,. S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, . S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N (Ra) C (=0) ORa, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2-6ORa, y el alqCi-6 está sustituido adicionalmente por 0 o 1 anillos monociclicos de 5, 6 o 7 miembros saturados, parcialmente saturados o insaturados que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados dé N, O y S, pero que contiene no más de un 0, o- S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido · por 0, 1, 2 o 3 sustitüyentes seleccionados . independientemente -de halo, nitro, ciano, alqCi-4, OalqCi-4, OhaloalqGi-4 , NHalqCi-4, N (alqCi-4) alqCi-4 y haloalqCi-4; o R7 y R8 juntos forman un puente C=N en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o un anillo monocíclico dé 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o insaturado que contiene 0, I, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, . pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0/ 1 o 2- grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alqCi_5, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, ' C(=0)ORa, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, ORa, OC(=0)Ra, OC (=G) NRaRa, OC(=0)N(Ra)S(=0)2Ra,. OalqC2-6NRaRa, ' OalqC2-6ORa, SRa, S(=0)Ra, S(=0)2Ra, S(=0)2NRaRa, S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, S (=0) 2N (Ra) C (=0) ORa, S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, NRaRa, N (Ra) C (=0) Ra, N(Ra)C(=0)0Ra N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra)C (=NRa)NRaRa, . N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2_ 6NRaRa y NRaalqC2-6ORa; o R7 y R9 juntos forman a un puente N=C en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alqCi-6, haloalqCi_4, ciano, nitro, 0Ra, NRaRa, C(=0)Ra, C(=0)ORa, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaR , S (=0) Ra, S(=0)2Ra O S (=0) 2NRaRa; R8 es H, alqd-e, C (=0) N (Ra) Ra, C(=0) Rb o haloalqCi_4; R9 es H, alqCi-6 o haloalqCi- ; R10 es independientemente cada que se presenta H, halo, alqCi-3, haloalqCi-3' o ciano;. R11 se selecciona de H, halo, alqCi_6, haloalqCi-4, ciano, nitro, C(=0)Ra, C(=0)0Ra, C(=0)NRaRa, C (=NRa) NRaRa, 0Ra, 0C(=0)Ra, 0C(=0)NRaRa, 0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, OalqC2-6NRaRa, OalqC2_6ORa, SRa, S (=0) Ra, ' S(=0)2Rb, ' S.(=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, S (=0)2N (Ra)C (=0)ORa, S (=0)2N(Ra)C(=0)NRRa, NRaRa, N (Ra) C (=0).Ra, . N (Ra) C (=0) 0Ra, N (Ra) C (=0) NRaRa, N (Ra) C (=NRa) NRaRa, N (Ra) S (=0) 2Ra, N (Ra) S (=0) 2NRaRa, NRaalqC2-6NRaRa y NRaalqC2-6ORa; Ra es independientemente, cada que se presenta, H o Rb; y Rb es independientemente, cada que se presenta, fenilo, bencilo o alqCi- 6 , . el fenilo, bencilo y alqCi- 6 siendo sustituidos por .0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alqCi- 4 , haloalqCi-3, OalqCi-4, . NH2, NHalqCi- 4 ' y N (alqCi- 4 ) alqCi-4 .

2. Un método para tratar artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos de la vejiga inestables o inflamatorios, dolencias de la- piel con componentes inflamatorios,- afecciones inflamatorias crónicas, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistémico (SLE) , miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, purpura trombocitopénica idiopá.tica, esclerosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemolítica autoinmunitaria, afecciones alérgicas e hipersensibilidad, caracterizado porque comprende la etapa de administrar el compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

3. Un método para tratar cánceres,' que están mediados por, dependen de o asociados con actividad ????d, caracterizado porque comprende la etapa de adminsitrar el compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

4. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. RESÜMEN DE LA INVENCIÓN Se describen heteroarilos bicíclicos sustituidos y composiciones que los contienen, para el tratamiento de inflamación general, artritis, enfermedades reumáticas, osteoartritis, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos' de la vejiga inestables o inflamatorios, psoriasis, dolencias de la piel con componentes inflamatorios, afecciones inflamatorias crónicas, incluyendo pero no restringidas a.' enfermedades autoinmunitarias tales como lupus eritematoso sistémico (SLE) , miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, púrpura trombocitopénica idiopática, esclérosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemolítica autoinmunitaria, afecciones alérgicas incluyendo todas las formas de hipersensibilidad. La presente invención también, permite métodos para tratar canceres que están mediados por, dependen de o¦ se asocian con actividad pllO, incluyendo pero no restringidas a leucemias, tales como leucemia mieloide aguda¦ (AML) , síndrome mielo-displástico (MDS) , enfermedades mielo-proliferativas (MPD) , leucemia mieloide crónica . (CML) , leucemia linfoblástica aguda de célula T (T-ALL) , leucemia linfoblástica aguda' de célula B (B-ALL), linfoma no Hodgkins (NHL) , linfoma de célula B y tumores sólidos, tales como cáncer, de mama.