MX2011006766A - Particulas dirigidas a la inflamacion. - Google Patents

Abstract

Las micro o nanoparticulas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, tal como un agente para la formación de imágenes o terapéutico; que tiene una carga superficial positiva y que no contienen en su superficie ligandos dirigidos, tales como anticuerpos, péptidos o aptáremos, pueden utilizarse para tratar y/o dar seguimiento a una condición asociada con una inflamación, tal como inflamación estimulada por las citocinas.

Description

PARTÍCULAS DIRIGIDAS A LA INFLAMACIÓN DECLARACIÓN PARA LA INVESTIGACIÓN FINANCIADA FEDERALMENTE Alguna investigación subyacente a la invención ha sido apoyada por fondos federales bajo las subvenciones nos. W81XWH-07-1-0596 y DoD TATRC W81XWH-07-2-0101. El gobierno de E.U.A. puede tener ciertos derechos en esta invención.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente descripción se relaciona generalmente con vehículos para suministrar agentes activos, tales como un agente terapéutico o un agente para la formación de imágenes y, en particular, con micro o nanopartículas capaces de dirigirse a la inflamación.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con una modalidad, un método para tratar o dar seguimiento a una condición asociada con una inflamación comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo, una composición que comprende micro o nanopartículas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, en donde una superficie de las micro o nanopartículas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos.

De acuerdo con otra modalidad, una composición comprende micro o nanopartículas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, en donde una superficie de las micro o nanopartículas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos. Aún de acuerdo con otra modalidad, un método para seleccionar las células inflamadas en un sujeto, comprende administrar al sujeto, una composición que comprende micro o nanopartículas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, en donde una superficie de las micro o nanopartículas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Las Figuras 1A-1 C se relacionan con la captación de partículas de silicio oxidadas, APTES o PEGiladas, por las Células Endoteliales de la Vena Umbilical Humana (HUVEC) y las células del macrófago J774. La Figura 1A presenta las microfotog rafias de exploración electrónica de la internalización libre de suero de partículas de silicio de 3.2 pm por las HUVEC. Las imágenes de la izquierda tienen una barra de resolución de 5 pm; las imágenes a la derecha tienen una barra de resolución de 2 pm. La Figura 1 B es un diagrama que compara la internalización por las HUVEC entre las partículas libres de suero y opsonizadas después de una incubación de 1 hora a 37°C. La Figura 1 C demuestra un impacto del suero en la captación de las partículas de 1.6 pm por el macrófago J774 (* p< 0.03) después de una incubación de 1 hora a 37°C. El eje Y en las Figuras 1 B y 1 C es el porcentaje de células con partículas (células con dispersión lateral alta).

Las Figuras 2A-2C se relacionan con la captación de las partículas de silicio opsonizadas de IgG por las células HUVEC y las células del macrófago J774. Las Figuras 2A y 2B presentan los resultados de los análisis de citometría de flujo de la captación por las células HUVEC (Figura 2A) y J774 (Figura 2B) libres de suero vs las micropartículas oxidadas de 3.2 pm opsonizadas con IgG después de una incubación de 1 hora a 37°C. La Figura 2C presenta la expresión superficial cuantitativa de FC7R.S, determinada mediante análisis de citometría de flujo.

Las Figuras 3A-3D se relacionan con la captación de partículas de silicio por células HUVEC y células del macrófago J774 estimuladas con citocina. La Figura 3A es un diagrama que compara una captación de las partículas de silicio oxidadas, APTES y PEGiladas de 3.2 pm entre las células HUVEC de control y las células HUVEC estimuladas con citocina. La Figura 3B es un diagrama que compara la captación de las partículas de silicio oxidadas, APTES y PEGiladas de 3.2 pm entre las células J774 de control y las células J774 estimuladas con citocina. Las Figuras 3C y 3D son microfotog rafias de la exploración electrónica de una partícula de silicio de 3.2 pm captada por las células HUVEC (Figura 3C) y J774 (Figura 3D) (30 minutos de incubación a 37°C).

Las Figuras 4A-4C se relacionan con la internalización de partículas de silicio oxidadas por las HUVEC (libres de suero). La Figura 4A muestra las microfotografías de la exploración electrónica de las HUVEC cultivadas en microplaquetas de silicio después de la incubación con partículas de silicio oxidadas de 1.6 µ??, 3.2 µ?? o ambos tamaños a 37°C durante 15 minutos, 30 ó 60 minutos. La Figura 4B muestra las microfotografías confocales de las HUVEC incubadas con micropartículas de silicio de 3.2 µ?t? oxidadas, durante 15 y 120 minutos a 37°C, utilizando Faloidina Alexa Fluor 555 para la tinción con actina. La Figura 4C muestra las imágenes de la proyección confocal recolectadas del centro, para ilustrar la ubicación de las partículas a los 60 ó 120 minutos.

Las Figuras 5A-5C se relacionan con una captación inicial de las partículas de silicio oxidadas y FITC dextrano por las HUVEC (libres de suero). Las Figuras 5A y 5B son microfotografías de transmisión electrónica que muestran la captación de HUVEC de las partículas de silicio de 1.6 pm (Figura 5A) o 3.2 µ?t? (Figura 5B) después de la incubación a 37°C durante 15 minutos. La Figura 5C muestra los resultados del análisis de la citometría de flujo de la internalización con FITC Dextrano por las HUVEC incubadas durante 1 hora sin partículas (pico verde sólido, segundo a la izquierda), partículas de silicio de 1.6 pm (pico rojo abierto, pico a la derecha), o 3.2 pm (pico púrpura abierto, segundo a la derecha). El pico azul sólido (el pico de la izquierda), representa las HUVEC incubadas en el medio sin FITC Dextrano. En la Figura 5C, el eje x es la fluorescencia debida al FITC dextrano internalizado y el eje y es los conteos (la altura es dependiente del número de las células).

Las Figuras 6A-6B demuestran la ubicación celular de las partículas internalizadas a las 2 horas. La Figura 6A muestra que las partículas de 1.6 µ?? más pequeñas se localizan en la región perinuclear de la célula. Las membranas pueden observando algunas de las partículas. La Figura 6B muestra que las partículas de 3.2 µ?? más grandes están más dispersas y carecen de membranas aparentes, lo que pueden ser indicativo de un escape endosomal. La barra de la escala de resolución es de 10 mieras para las imágenes principales en las Figuras 6A y 6B y 500 nm para los insertos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Solicitudes relacionadas Los siguientes artículos de investigación y documentos de patente, que se incorporan todos en la presente como referencia en su totalidad, pueden ser útiles para entender las presentes invenciones: 1 ) publicación del PCT no. WO 2007/120248, publicada en Octubre 25, 2007; 2) publicación del PCT no. WO 2008/041970, publicada en Abril 10 del 2008; 3) publicación del PCT no. WO 2008/021908, publicada en Febrero 21 del 2008; 4) Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0102030, publicada en Mayo 1 del 2008; 5) Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2003/0114366, publicada en Junio 19 del 2003; 6) Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0206344, publicada en Agosto 28 del 2008; 7) Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0280140, publicada en Noviembre 13 del 2008; 8) Tasciotti E. et al, 2008 Nature Nanotechnology 3, 151 -157.

Definiciones A menos que se especifique de otra manera "un, una", significa uno o más.

"Micropartícula", significa una partícula que tiene un tamaño característico máximo de 1 miera a 1000 mieras, o de 1 miera a 100 mieras. "Nanopartícula", significa una partícula que tiene un tamaño característico máximo de menos de 1 miera.

"Opsonina" es una proteína que, cuando se una a una partícula, incrementa la fagocitosis de la partícula.

"Disopsonina" es una proteína que, cuando se una a una partícula, disminuye la fagocitosis de la partícula.

"Opsonizable", se refiere a una partícula, que puede someterse a opsonización cuando se expone a la sangre o a un componente de la sangre, tal como suero, es decir, la partícula que puede unirse a una o más proteínas de la sangre o su componente. De manera preferida, cuando se expone a la sangre o al componente de la sangre, la partícula opsonizable se une a una o más opsoninas y no se une a las disopsoninas.

"Nanoporoso" o "nanoporos", se refiere a los poros con un tamaño promedio de menos de 1 miera.

"Biodegradable", se refiere a un material que puede disolverse o degradarse en un medio fisiológico o un material polimérico biocompatible que puede degradarse bajo condiciones fisiológicas por enzimas fisiológicas y/o condiciones químicas.

"Biocompatible", se refiere a un material que, cuando se expone a las células vivientes, soportará una actividad celular apropiada de las células sin causar un efecto indeseable en las células, tales como un cambio en el ciclo de vida de las células; un cambio en la velocidad de proliferación de las células y un efecto citotóxico.

Descripción Los presentes inventores descubrieron que las micro o nanopartículas opsonizables, que tienen una carga superficial positiva, pueden someterse a la opsonización en la sangre o un componente de la sangre, tal como suero, de tal manera que las partículas pueden unirse de manera preferencial a las proteínas, que pueden permitir que las partículas, después de someterse a la opsonización, se dirijan de manera específica a las células inflamadas en un cuerpo de un sujeto. De manera preferida, antes de la opsonización, las micro o nanopartículas opsonizables con carga positiva no contienen ligandos dirigidos, tales como anticuerpos, péptidos y/o aptámeros, colocados en su superficie.

Después de someterse a la opsonización, las micro o nanopartículas opsonizables cargadas de manera positiva, también pueden tener una captación menor de las células inmunes, tales como macrófagos, en comparación con las micro o nanopartículas idénticas de otra manera, que tienen, antes de la opsonización, una carga superficial negativa o ninguna carga superficial. En el presente contexto, la captación menor puede significar que puede tomar un tiempo mayor para que las partículas cargadas de manera positiva opsonizadas se internalicen por las células inmunes que para las partículas cargadas de manera negativa opsonizadas o las neutras. Como resultado, las partículas cargadas de manera positiva opsonizadas pueden evitar una captación por las células inmunes en el cuerpo del sujeto, cuando se dirigen a las células inflamadas.

De manera preferida, antes de la opsonización, una superficie de la partícula opsonizable no contiene un recubrimiento antiopsonízación, tal como un recubrimiento formado por polietilenglicol (PEG) u otras cadenas hidrofílicas. Aunque las partículas de recubrimiento con cadenas hidrofílicas, conocidas como PEGilación, pueden reducir o evitar una intemalización rápida de las partículas por los macrófagos, al mismo tiempo, la PEGilación con frecuencia evita que las partículas se unan a las células objetivo.

En muchas modalidades, la superficie de las partículas opsonizables, antes de la opsonización, no contiene albúmina. En muchas modalidades, la superficie de las partículas opsonizables, antes de la opsonización, no contiene ninguna opsonina. En muchas modalidades, la superficie de la partícula opsonizable, antes de la opsonización, no contiene ninguna proteína.

Las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden utilizarse para tratar, prevenir y/o dar seguimiento a una condición asociada con una inflamación, tal como una inflamación estimulada por las citocinas, en un sujeto, tal como un animal con un sistema sanguíneo, seleccionando de manera específica las células inflamadas en el cuerpo del sujeto. En muchas modalidades, el sujeto puede ser un mamífero, tal como un humano.

Las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden utilizarse para seleccionar de manera específica la vasculatura inflamada y por lo tanto, para el tratamiento, prevención y/o seguimiento de una condición o enfermedad asociada con una inflamación.

Los ejemplos de tales condiciones incluyen, de manera no exclusiva, alergias, asma, enfermedad de Alzheimer, diabetes, desequilibrios hormonales, enfermedades autoinmunes, tales como artritis reumatoide y soriasis, osteoartritis, osteoporosis, aterosclerosis, incluyendo enfermedad de la arteria coronaria, vasculitis, condiciones inflamatorias crónicas, tales como obesidad, úlceras, tales como úlcera de Marjolin, inflamaciones respiratorias causadas por asbestos o humo de cigarro, inflamaciones del prepucio, inflamaciones causadas por viruses, tales como el virus del papiloma Humano, Hepatitis B o C o virus de Epstein-Barr, Esquistosomiasis, enfermedad inflamatoria pélvica, inflamación epitelial ovárica, metaplasia de Barrett, gastritis por H. pylori, pancreatitis crónica, infestación por tremátodos Chinos del hígado, colecistitis crónica y enfermedad inflamatoria del intestino; y cánceres asociados con la inflamación, que incluyen cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de mama; cánceres del tracto gastrointestinal, tales como cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, cáncer colorrectal, cáncer pancreático, cáncer gástrico, cáncer nasofaríngeo, cáncer esofágico, colangiocarcinoma, cáncer de la vesícula biliar y cáncer anogenital; cáncer intergumentario, tal como carcinoma de la piel; cánceres del tracto respiratorio, tales como cáncer bronquial y mesotelioma; cáncer del tracto genitourinario, tales como fimosis, carcinoma del pene y cáncer de la vejiga urinaria; cáncer del sistema reproductor, tal como cáncer de ovario.

En particular, las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden utilizarse para evitar ciertos tipos, dirigiendo de manera específica las células inflamadas asociadas con una condición inflamatoria, que puede conducir al cáncer. Por ejemplo, al seleccionar la inflamación causada por la úlcera de Marjolin, las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden evitar el carcinoma de la piel; al seleccionar la inflamación causada por asbestos, sílice o por fumar, las partículas pueden evitar el cáncer bronquial; al seleccionar la inflamación del prepucio, las partículas pueden evitar la fimosis; al seleccionar la inflamación causada por el virus del papiloma Humano, las partículas pueden evitar el carcinoma de pene y/o el cáncer anogenital; al seleccionar la inflamación causada por la Esquistosomiasis, las partículas pueden evitar el cáncer de vejiga; al seleccionar la inflamación causada por la enfermedad inflamatoria pélvica o la inflamación epitelial ovárica, las partículas pueden evitar el cáncer de ovario; al seleccionar la inflamación causada por el virus de Epstein-Barr, las partículas pueden evitar el cáncer nasofaríngeo; al seleccionar la inflamación causada por la metaplasia de Barrett, las partículas pueden evitar el cáncer esofágico; al seleccionar la inflamación causada por gastritis por H. pylori, las partículas pueden evitar el cáncer gástrico; al seleccionar la inflamación causada por la pancreatitis crónica, las partículas pueden evitar el cáncer pancreático; al seleccionar la inflamación causada por la infestación por tremátodos Chinos del hígado, partículas pueden evitar el colangiocarcinoma; al seleccionar la inflamación causada por la colecistitis crónica, las partículas pueden evitar el cáncer de la vesícula; al seleccionar la inflamación causada por la Hepatitis B o C, las partículas pueden evitar el carcinoma hepatocelular; al seleccionar la inflamación causada por la enfermedad inflamatoria del intestino, las partículas pueden evitar el cáncer colorrectal.

Las condiciones y enfermedades asociadas con una inflamación se describen en las siguientes referencias: 1 ) M. Macarthur et al. Am. J.

Physiol Gastrointest Livel Physiol. 286" G515-520, 2004; 2) Calogero et al. Breast Cáncer Research, v. 9(4), 2007; Wienberg et al. J. Clin. Invest, 112:1796-1808, 2003; Xu et. al., J. Clin Invest, 12:1821-1830, 2003.

Las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden utilizarse como parte de un sistema de suministro del fármaco con múltiples etapas, descrito en la solicitud de patente de E.U.A. no. US2008280140, y en la publicación del PCT no. WO200802 908. Por ejemplo, en algunas modalidades, las partículas opsonizables cargadas de manera positiva pueden contener al menos una partícula de segunda etapa, que puede comprender un agente activo.

Partícula La partícula opsonizable puede tener una variedad de formas y tamaños.

Las dimensiones de la partícula opsonizable no están limitadas particularmente, y dependen de una aplicación. Por ejemplo, para la administración intravascular, un tamaño característico máximo de la partícula puede ser más pequeño que el radio del capilar más pequeño en un sujeto, que es de aproximadamente 4 a 5 mieras para los humanos.

En algunas modalidades, el tamaño característico máximo de la partícula puede ser menor que aproximadamente 100 mieras, o menos que aproximadamente 50 mieras, o menos que aproximadamente 20 mieras, o menos que aproximadamente 10 mieras, o menos que aproximadamente 5 mieras, o menos que aproximadamente 4 mieras, o menos que aproximadamente 3 mieras, o menos que aproximadamente 2 mieras, o menos que aproximadamente 1 miera. Aún en algunas modalidades, el tamaño característico máximo de la partícula puede ser de 100 nm a 3 mieras, o de 200 nm a 3 mieras, o de 500 nm a 3 mieras, o de 700 nm a 2 mieras.

Aún en algunas modalidades, el tamaño característico máximo de la partícula puede ser mayor que aproximadamente 2 mieras, o mayor que aproximadamente 5 mieras, o mayor que aproximadamente 10 mieras.

La forma de la partícula no está limitada particularmente. En algunas modalidades, la partícula puede ser una partícula esférica. Aún en algunas modalidades, la partícula puede ser una partícula no esférica. En algunas modalidades, la partícula puede tener una forma simétrica. Aún en algunas modalidades, la partícula puede tener una forma asimétrica.

En algunas modalidades, la partícula puede tener una forma no esférica seleccionada, configurada para facilitar un contacto entre la partícula y la superficie del sitio objetivo, tal como la superficie del endotelio de la vasculatura inflamada. Los ejemplos de las formas apropiadas incluyen, de manera no exclusiva, un esferoide achatado en los polos, un disco o un cilindro. En algunas modalidades, la partícula puede ser tal que solo una porción de su superficie externa define una forma configurada para facilitar el contacto entre la partícula y una superficie del sitio objetivo, tal como la superficie del endotelio, mientras que el resto de la superficie externa no. Por ejemplo, la partícula puede ser una partícula esferoide con los polos achatados, trunca.

Las dimensiones y la forma de la partícula que pueden facilitar un contacto entre la partícula y la superficie del sitio objetivo, pueden evaluarse utilizando los métodos descritos en la Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0206344 y la Solicitud de E.U.A. no. 12/181 ,759, presentada en Julio 29 del 2008.

En muchas modalidades, la partícula opsonizable puede ser una partícula porosa, es decir, una partícula que comprende un material poroso. El material poroso puede ser un material de óxido poroso o un material grabado poroso. Los ejemplos de los materiales de óxido poroso incluyen, de manera no exclusiva, óxido de silicio poroso, óxido de aluminio poroso, óxido de titanio poroso y óxido de hierro poroso. El término "materiales grabados porosos" se refiere a un material, en el cual los poros son introducidos vía una técnica de grabado en húmedo, tal como grabado electroquímico. Los ejemplos de materiales grabados porosos incluyen materiales semiconductores porosos, tales como silicio poroso, germanio poroso, GaAs poroso, InP poroso, SiC poroso, SixGei-x poroso, GaP poroso, GaN poroso. Los métodos para hacer las partículas grabadas porosas se describen, por ejemplo, en la Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0280140.

En muchas modalidades, la partícula porosa puede ser una partícula no porosa.

En algunas modalidades, un tamaño de poro promedio de la partícula porosa puede ser de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 1 miera, o de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 800 nm, o de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 500 nm, o de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 300 nm, o de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 200 nm, o de aproximadamente 2 nm a aproximadamente 100 nm.

En algunas modalidades, el tamaño de poro promedio de la partícula porosa puede ser no más de 1 miera, o no más de 800 nm, o no más de 500 nm, o no más de 300 nm, o no más de 200 nm, o no más de 100 nm, o no más de 80 nm, o no más de 50 nm.

En algunas modalidades, el tamaño de poro promedio de la partícula porosa puede ser un tamaño de aproximadamente 5 a aproximadamente 100 nm, o de aproximadamente 10 a aproximadamente 60 nm, o de aproximadamente 20 a aproximadamente 40 nm, o de aproximadamente 30 nm a aproximadamente 30 nm.

En algunas modalidades, el tamaño de poro promedio de la partícula porosa puede ser de aproximadamente 1 nm a aproximadamente 10 nm, o de aproximadamente 3 nm a aproximadamente 10 nm, o de aproximadamente 3 nm a aproximadamente 7 nm.

En general, los tamaños de los poros pueden determinarse utilizando varias técnicas, incluyendo adsorción/desorción de N2 y microscopía, tales como microscopía con exploración electrónica.

En algunas modalidades, los poros de la partícula porosa pueden ser poros lineales. Aún en algunas modalidades, los poros de la partícula porosa pueden ser poros similares a una esponja.

En algunas modalidades, al menos una de la partícula porosa puede comprender una región biodegradable. En muchas modalidades, toda la partícula puede ser biodegradable.

En general, el silicio poroso puede ser bioinerte, bioactivo o biodegradable, dependiendo de su porosidad y del tamaño del poro. También, una proporción o velocidad de biodegradación del silicio poroso puede depender de su porosidad y del tamaño del poro, véase, por ejemplo, Canham, Biomedical Applications of Silicon, en Canham LT, editor. Properties of porous silicon. Serie de revisión de datos EMIS No. 18. Londres INSPEC. p. 371 -376. La velocidad de biodegradación también puede depender de la modificación de la superficie. Las partículas de silicio poroso y los métodos para su fabricación se describen, por ejemplo, en Cohén M. H. et al Biomedical Microdevices 5:3, 253-259, 2003; publicación de la solicitud de patente de E.U.A. no. 2003/0114366; patentes de E.U.A. nos. 6,107,102 y 6,355,270; Publicación de la Solicitud de Patente de E.U.A. no. 2008/0280140; publicación del PCT no. WO 2008/021908; Foraker, A.B. et al., Pharma. Res. 20 (1 ), 1 10-1 16 (2003); Salonen, J. et al., Jour. Contr. Reí. 108, 362-374 (2005). Las partículas de óxido de silicio poroso y los métodos para su fabricación se describen, por ejemplo, en Paik J.A. et al. J. Mater. Res., Vol 17, Agosto del 2002, p. 2121.

Las partículas opsonizables pueden prepararse utilizando varias técnicas.

En algunas modalidades, la partícula opsonizable puede ser una partícula fabricada de arriba hacia abajo, es decir, una partícula producida utilizando una técnica de microfabricación o nanofabricación de arriba hacia abajo, tal como fotolitografía, litografía con haz de electrones, litografía con rayos X, litografía con UV profundo, litografía con nanoimpresión o nanolítografía con depósito de inmersión. Tales métodos de fabricación pueden permitir una producción escalada de las partículas, que son de dimensiones uniformes o sustancialmente idénticas Agente activo El agente activo puede ser un agente terapéutico, un agente para la formación de imágenes o una combinación de los mismos. El agente activo puede ser un agente que puede liberarse de una partícula que lo contiene. La selección del agente activo depende de la aplicación.

Agente terapéutico El agente terapéutico puede ser cualquier sustancia fisiológica o farmacológicamente activa, que puede producir un efecto biológico deseado en un sitio seleccionado en un animal, tal como un mamífero o un humano. El agente terapéutico puede ser cualquier compuesto inorgánico u orgánico, sin limitación, incluyendo péptidos, proteínas, ácidos nucleicos y moléculas pequeñas, cualquiera de las cuales puede estar caracterizada o no caracterizada. El agente terapéutico puede estar en varias formas, tales como moléculas sin cambio, un complejo molecular, una sal farmacéuticamente aceptable, tal como clorhidrato, bromhidrato, sulfato, laurato, palmitato, fosfato, nitrito, nitrato, borato, acetato, maleato, tartrato, oleato, salicilato y lo similar. Para el agente terapéutico ácido, pueden utilizarse las sales de metales, aminas o cationes orgánicos, por ejemplo, amonio cuaternario. Los derivados de fármacos, tales como bases, ésteres y amidas, también pueden utilizarse como un agente terapéutico. Un agente terapéutico que es insoluble en agua puede utilizarse en una forma que es un derivado soluble en agua del mismo, o como un derivado de base del mismo, que en cualquier caso, o mediante su suministro, se convierte a enzimas, se hidroliza por el pH corporal, o mediante otros procesos metabólicos a la forma terapéuticamente activa original.

El agente terapéutico pueden ser un agente quimioterapéutico, un agente inmunosupresor, una citocina, un agente citotóxico, un compuesto nucleolítico, un isótopo radioactivo, un receptor y una enzima que activa el profármaco, que puede ser natural o producido mediante métodos sintéticos o recombinantes, o cualquier combinación de los mismos.

Los fármacos que son afectados por la resistencia a múltiples fármacos clásica, tales como los vincaalcaloides (por ejemplo, vinblastina y vincristina), las antraciclinas (por ejemplo, doxorrubicina y daunorrubicina), los inhibidores de la transcripción del ARN (por ejemplo, actinomicina D) y los fármacos que estabilizan los microtúbulos (por ejemplo, paclitaxel) pueden tener una utilidad particular como el agente terapéutico.

Un agente de quimioterapia para el cáncer puede ser un agente terapéutico preferido. Los fármacos de quimioterapia para el cáncer útiles incluyen mostazas de nitrógeno, nitrosoureas, etilenimina, alcansulfonatos, tetrazina, compuestos de platino, análogos de pirimidina, análogos de purina, antimetabolitos, análogos de folato, antraciclinas, taxanos, vincaalcaloides, inhibidores de la topoisomerasa y agentes hormonales. Los fármacos de quimioterapia ejemplares son Actinomicina D, Alkeran, Ara-C, Anastrozol, Asparaginasa, BiCNU, Bicalutamida, Bleomicina, Busulfano, Capecitabina, Carboplatina, Carboplatino, Carmustina, CCNU, Clorambucilo, Cisplatino, Cladribina, CPT-1 1 , Ciclofosfamida, Citarabina, Citosin arabinósido, Citoxano, Dacarbacina, Dactinomicina, Daunorrubicina, Dexrazoxano, Docetaxel, Doxorrubicina, DTIC, Epirrubicina, Etilenimina, Etopósido, Floxuridina, Fludarabina, Fluorouracilo, Flutamida, Fotemustina, Gemcitabina, Herceptina, Hexametilamina, Hidroxiurea, Idarrubicina, Ifosfamida, Irinotecano, Lomustina, Mecloretamina, Melfalano, Mercaptopurina, Metotrexato, Mitomicina, Mitotano, Mitoxantrona, Oxaliplatina, Paclitaxel, Pamidronato, Pentostatina, Plicamicina, Procarbacina, Rituximab, Esteroides, Estreptozocina, STI-571 , Estreptozocina, Tamoxifeno, Temozolomida, Tenipósido, Tetracina, Tioguanina, Tiotepa, Tomudex, Topotecano, Treosulfano, Trimetrexato, Vinblastina, Vincristina, Vindesina, Vinorelbina, VP-16 y Xeloda.

Los fármacos de quimioterapia para el cáncer útiles también incluyen agentes alquilantes, tales como Tiotepa y ciclofosfamida; sulfonatos de alquillo tales como Busulfan, Improsulfan y Piposulfan; aziridinas tales como Benzodopa, Carbocuona, Meturedopa y Uredopa; etileniminas y metilamelaminas, incluyendo altretamina, t etilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosfaoramida y trimetilolomelamina; mostazas de nitrógeno tales como Clorambucilo, Clornafacina, Colofosf amida, Estramustina, Ifosfamida, mecloretamina, clorhidrato de óxido de mecloretamina, Melfalano, Novembiehina, Fenesterina, Prednimustina, Trofosfamida, mostaza de uracilo; nitroureas tales como Carmustina, Clorozotocina, Fotemustina, Lomustina, Nimustina y Ranimustina; antibióticos tales como Aclacinomisinas, Actinomicina, Autramicina, Azaserina, Bleomicinas, Cactinomicina, Caliqueamicina, Carabicina, Carminomicina, Carzinofilina, Cromoinicinas, Dactinomicina, Daunorrubicina, Detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, Doxorrubicina, Epirrubicina, Esorrubicina, Idambicina, Marcelomicina, Mitomicinas, ácido micofenóico, Nogalamicina, Olivomicinas, Peplomicina, Potflromicina, Puromicina, Quelamicina, Rodorrubicina, Estreptonigrina, Estreptozocina, Tubercidina, Ubenimex, Zinostatina y Zorrubicina; antimetabolitos tales como Metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); análogos de ácido fólico tales como Denopterina, Metotrexato, Pteropterina y Trimetrexato; análogos de purina tales como Fludarabina, 6-mercaptopurina, Tiamiprina y Tioguanina; análogos de pirimidina tales como Ancitabina, Azacitidina, 6-azauridina, Carmofur, Citarabina, Didesoxiuridina, Doxifluridina, Enocitabina, Floxuridina y 5-FU; andrógenos tales como Calusterona, Propionato de Dromostanolona, Epitiostanol, Rnepitiostano y Testolactona; antiadrenales tales como aminoglutetimida, Mitotano y Trilostano; reabastecedores del ácido fólico tales como ácido frolínico; aceglatona; glucósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; Amsacrina; Bestrabucilo; Bisantreno; Edatraxato; Defofamina; Demecolcina; Diazicuona; Elfornitina; acetato de. eliptinio; Etoglucid; nitrato de galio; hidroxiurea; Lentinan; Lonidamina; Mitoguazona; Mitoxantrona; Mopidamol; Nitracrina; Pentostatina; Fenamet; Pirarrubicina; ácido podofilínico; 2-etilhidrazida; Procarbacina; PSK®; Razoxana; Sizofrran; Espirogermanio; ácido tenuazónico; triazicuona; 2,2',2"-triclorotrietilamina; Uretano; Vindesina; Dacarbacina; Manomustina; Mitobronitol; Mitolactol; Pipobroman; Gacitosina; Arabinósido ("Ara-C"); ciclofosfamida; tiotepa; taxoides, por ejemplo, Paclitaxel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, NJ) y Doxetaxel (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, Francia); Clorambucilo; Gemcitabina; 6-tioguanina; Mercaptopurina; Metotrexato; análogos de platino tales como Cisplatino y Carboplatino; Vinblastina; platino; etopósido (VP-16); Ifosfamida; Mitomicina C; Mitoxantrona; Vincristina; Vinorrelbina; Navelbina; Novantrona; Tenipósido; Daunomicina; Aminopterina; Xeloda; Ibandronato; CPT-1 1 ; inhibidor de la topoisomerasa RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO); ácido retinoico; Esperamicinas; Capecitabina; y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de lo anterior. También están incluidos los agentes antihormonales que actúan para regular o inhibir la acción de la hormona en los tumores, tales como antiestrógenos, incluyendo, por ejemplo, Tamoxifen, Raloxifeno, 4(5)-¡midazoles que inhiben la aromatasa, 4 Hidroxitamoxifen, Trioxifeno, Keoxifeno, Onapristona y Toremifeno (Fareston); y antiandrógenos tales como Flutamida, Nilutamida, Bicalutamida, Leuprólida y Goserelina; y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de lo anterior.

Las citocinas también pueden utilizarse como el agente terapéutico. Los ejemplos de tales citocinas son linfocinas, monocinas y hormonas polipeptídicas tradicionales. Entre las citocinas están incluidas las hormonas del crecimiento, tales como la hormona del crecimiento humano, hormona del crecimiento humano N-metionilo y la hormona del crecimiento bovino; hormona paratiroidea; tiroxina; insulina; proinsulina; relaxina; prorelaxina; hormonas de glucoproteína tales como hormona que estimula el folículo (FSH), hormona que estimula la tiroides (TSH), y hormona luteinizante (LH); factor de crecimiento hepático; factor del crecimiento del fibroblasto; prolactina; lactógeno de placenta; factor de necrosis en tumor a y ß; sustancia que inhibe la muleriana; péptido asociado con la gonadotropina de ratón; inhibina; activina; factor de crecimiento endotelial vascular; integrina; trombopoyetina (TPO); factores del crecimiento nervioso tales como NGF-ß; factor del crecimiento de las plaquetas; factores de crecimiento transformantes (TGF) tales como TGF-a y TGF-ß; factor de crecimiento similar a la insulina I y II; eritropoyetina (EPO); factores osteoinductivos; interferones tales como ¡nterferón-a, ß y ?, factores que estimulan la colonia (CSF) tales como macrófago-CSF (M-CSF); granulocito-macrófago-CSF (GM-CSF); y granulocito-CSF (GCSF); interleucinas (IL) tales como IL-1 , IL-1a, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-1 1 , IL-12, IL-15; un factor de necrosis del tumor tal como TNF-a o TNF-ß; y otros factores polipeptídicos incluyendo LIF y ligando kit (KL). Como se utiliza en la presente, el término citocina incluye proteínas de fuentes naturales o de un cultivo celular recombinante y equivalentes biológicamente activos de las citocinas de secuencia nativa.

En algunas modalidades, el agente terapéutico puede ser un agente terapéutico basado en un anticuerpo, tal como herceptina.

En algunas modalidades, el agente terapéutico puede ser una nanopartícula. Por ejemplo, en algunas modalidades, la nanopartícula puede ser una nanopartícula que puede utilizarse para una ablación térmica o una terapia térmica. Los ejemplos de tales nanopartículas incluyen nanopartículas de hierro y de oro.

Agente para la formación de imágenes El agente para la formación de imágenes puede ser cualquier sustancia que proporcione información de la formación de imágenes sobre un sitio seleccionado en el cuerpo de un animal, tal como un mamífero o un ser humano. El agente para la formación de imágenes puede comprender un material magnético, tal como óxido de hierro o un compuesto que contiene gadolinio, para la formación de imágenes con resonancia magnética (MRI).

Para la formación de imágenes ópticas, el agente activo puede ser, por ejemplo, un nanocristal semiconductor o un punto cuántico. Para la formación de imágenes con tomografía con coherencia óptica, el agente para la formación de imágenes puede ser un metal, por ejemplo, oro o plata, partículas de nanojaula. El agente para la formación de imágenes también puede ser un agente de contraste con ultrasonido, tal como una micro o nanoburbuja o una micro o nanopartícula de óxido de hierro.

Administración Las micro o nanopartículas opsonizables pueden administrarse como parte de una composición, que incluye una pluralidad de las partículas, a un sujeto, tal como un humano, vía un método de administración adecuado, con el fin de tratar, prevenir y/o dar seguimiento a una condición fisiológica, tal como una enfermedad.

Las micro o nanopartículas opsonizables se administran de tal manera que, tras la administración, las partículas pueden someterse a la opsonización en la sangre del sujeto.

El método particular empleado para una aplicación específica puede determinarse por el médico que atiende. Típicamente, la composición puede administrarse mediante una de las siguientes rutas: tópica, parenteral, inhalación/pulmonar, oral, vaginal y anal.

Las partículas pueden ser particularmente útiles para aplicaciones oncológicas, es decir, para el tratamiento y/o seguimiento del cáncer o una condición, tal como un tumor asociado con el cáncer.

La mayoría de las aplicaciones terapéuticas puede involucrar algún tipo de administración parenteral, que incluye inyección intravenosa (i.v.), intramuscular (i.m.) y subcutánea (s.c). La administración de las partículas puede ser sistémica o local. Los ejemplos no parenterales de administración expuestos anteriormente, son ejemplos de administración local. La administración intravascular puede ser local o sistémica. El suministro intravascular local puede utilizarse para llevar una sustancia terapéutica a la vecindad de una lesión conocida mediante el uso de un sistema de catéter guiado, tal como un catéter guiado con exploración CAT. La inyección general, tal como una inyección i.v. de un bolo o una infusión i.v. de alimentación continua/por goteo, son típicamente sistémicas.

De manera preferida, la composición que contiene las partículas opsonizables se administra vía infusión i.v., vía administración intraductal o vía intratumoral.

Las partículas opsonizables pueden formularse como una suspensión que contiene una pluralidad de las partículas. De manera preferida, las partículas son uniformes en sus dimensiones y su contenido. Para formar la suspensión, las partículas como las descritas anteriormente, pueden suspenderse en cualquier vehículo portador acuoso adecuado. Un portador farmacéutico adecuado es uno que es no tóxico para el receptor a las dosificaciones y concentraciones empleadas, y que es compatible con otros ingredientes en la formulación. La preparación de la suspensión de la suspensión de partículas microfabricadas, se describe, por ejemplo, en la publicación de la solicitud de patente de E.U.A. No. 20030114366.

Las modalidades descritas en la presente se ilustran adicionalmente mediante los siguientes ejemplos de trabajo, aunque de ninguna manera están limitadas a los mismos.

EJEMPLO Las micropartículas de silicio semiesféricas nanoporosas se diseñaron, construyeron y fabricaron en el Centro de Investigación de Microelectrónicos, en la Universidad de Texas en Austin. Se generaron dos tamaños de micropartículas, con diámetros medios de 1.6 ± 0.2 y 3.2 ± 0.2 pm, y tamaños del poro que varían de 5-10 ó 30-40 nm (la porosidad puede alterarse para diferentes aplicaciones). Los detalles del procesamiento se describen en Tasciotti E. et al, 2008 Nature Nano technology 3, 151-157.

Brevemente, las pastillas de silicio del tipo p++ altamente adulteradas (100) con resistividad de 0.005 ohm-cm (Silicon Quest, Inc, Santa Clara, CA), se utilizaron como la fuente de silicio. Una capa de 100 nm de nitruro de silicio con bajo esfuerzo se depositó utilizando un sistema de Deposición de Vapor Química a Baja Presión (LPCVD). Se utilizó fotolitografía estándar para ordenar las micropartículas sobre la pastilla utilizando un alineador de contacto (alineador EVG 620) y una fotorresistencia AZ5209. El nitruro en los patrones de la partícula se retiró selectivamente mediante grabado iónico reactivo basado en CF4 (RIE). Después de que la fotorresistencia se desprendió en una solución de piraña, la pastilla se colocó en una celda de Teflón hecha en casa para el grabado electroquímico de dos pasos. Primero, las pastillas se grabaron en una mezcla de ácido fluorhídrico (HF) y Etanol (1 :1 en volumen/volumen), aplicando una densidad de corriente de 6 mA/cm2 durante 105 segundos para las partículas de 3.2 pm o 40 segundos para las partículas de 1.6 pm, respectivamente. A continuación, se formó una capa de liberación de alta porosidad, cambiando la densidad de corriente a 320 mA/cm2 durante 6 segundos en una mezcla 2:5 en volumen/volumen de HF y Etanol. Finalmente, la capa de nitruro se retiró en HF después del grabado, y las micropartículas se liberaron mediante ultrasonido en alcohol isopropílico (IPA) durante 1 minuto. La solución de IPA que contiene micropartículas de silicio poroso se recolectó y almacenó a 4°C. La morfología de las micropartículas se examinó mediante SEM.

Oxidación de las micropartículas de silicio Las micropartículas de silicio en alcohol isopropílico (IPA), se secaron en un vaso de precipitados de vidrio mantenido en una placa caliente (1 10°C). Las micropartículas secas se trataron a continuación con solución de piraña (1 volumen de H2O2 y 2 volúmenes de H2SO4). La suspensión se calentó a 110-120°C durante 2 horas con sonicación intermitente para dispersar las micropartículas. La suspensión se lavó a continuación en agua desionizada (DI) hasta que el pH de la suspensión fue de ~ 5.5-6.

Modificación de la superficie de las micropartículas de silicio con APTES Las micropartículas oxidadas se lavaron en IPA 3-4 veces. A continuación, se suspendieron en IPA que contiene 0.5% (volumen/volumen) de APTES (Sigma) durante 2 horas a temperatura ambiente. Las micropartículas modificadas con APTES se lavaron y almacenaron en IPA. La modificación con APTES se evaluó midiendo en potencial zeta y el análisis colorimétrico de la densidad de la amina. Se encontró que lo último se correlaciona con las mediciones del potencial zeta.

Conjugación con PEG Las micropartículas modificadas con APTES se hicieron reaccionar con mPEG-SCM-5000 10 m (succinimidil carboximetil metoxi polietilenglicol; comprado de Laysan Bio Inc) en acetonitrilo durante 1.5 horas. Las micropartículas se lavaron a continuación en agua destilada 4-6 veces para eliminar cualquier mPEG sin reaccionar. Se utilizaron las mediciones del potencial zeta para indicar el recubrimiento superficial adecuado.

Las micropartículas de silicio de 1.6 pm y 3.2 µ?t? se oxidaron con solución de piraña [30:70 (volumen/volumen); H202:H2S04], para crear micropartículas cargadas de manera negativa, hidroxiladas. A continuación, las micropartículas oxidadas se modificaron en la superficie con 3-aminopropiltrietoxisilano (APTES), que proporcionó micropartículas cargadas de manera positiva, modificadas con amina. Las micropartículas modificadas con APTES se conjugaron además, con PEG, para comparación.

En general, los siguientes tres tipos de micropartículas de silicio se han comparado: 1) micropartículas cargadas de manera negativa hidroxiladas; 2) micropartículas cargadas de manera positiva, modificadas con amino; 3) micropartículas PEGiladas.

Utilizando las células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC), que se conocen como un modelo para el endotelio vascular, véase Klein et al., Pathobiology, 1994, 62, 199-208, las imágenes con microscopio con exploración electrónica (SEM), se tomaron de las células después de la incubación con las micropartículas. Las HUVEC se compraron de Lonza Walkersville, Inc (Walkersville, Maryland), y se cultivaron en un medio EBM®-2 (Clonetics®, CC-3156). Las células se mantuvieron a 37°C en una atmósfera de CO2 al 5% humidificada. Las muestras de HUVEC se recubrieron por bombardeo iónico con una capa de 10 nm de oro, utilizando un Sistema de Bombardeo Iónico de Plasma Sciences CrC-150 (Torr International, Inc.). Las imágenes SEM se adquirieron bajo alto vacío, a 20.00 kV, tamaño del punto 3.0-5.0, utilizando un ESEM FEI Quanta 400 FEG equipado con un detector de ETD (SE).

Después de una hora a 37°C, las micropartículas positivas y negativas se internalizaron por las HUVEC en medio libre de suero (Figura 1A). Aunque ambas micropartículas positivas y negativas se internalizaron por las HUVEC en medio libre de suero, se encontró de manera sorprendente que la opsonización con suero inhibe la captación de las micropartículas negativas (oxidadas), sin afectar de manera significativa las partículas amino modificadas cargadas de manera positiva.

Para la opsonización, las partículas se suspendieron en 100% de suero durante 1 hora en hielo. El suero en los experimentos fue suero bovino fetal de Clonetics®. La modificación de la superficie de las micropartículas de silicio con PEG, suprimió la internalización de las micropartículas por las HUVEC (Figura 1 B). En la Figura 1 B, el eje y es un porcentaje de las partículas internalizadas. Los experimentos de internalización en la Figura 1 B se realizaron durante 1 hora a 37°C. La relación de células a partículas fue de 1 célula por 20 partículas en cada uno de los experimentos.

El Cuadro A presenta el potencial electrostático (zeta) de micropartículas de 3.2 pm antes y después de la opsonización en suero (100% de suero durante 60 minutos, 4°C).

CUADRO A LIBRES DE SUERO SUERO Óxido -43.48 ± 1.65 -32.21 ± 3.43 APTES 15.12 ± 4.33 -40.28 + 2.78 PEG -3.84 + 1.99 -27.82 + 1.71 La activación de las células endoteliales por las citocinas proinflamatorias puede alterar la expresión de los receptores de la superficie celular, y por lo tanto, pueden alterar la unión a las partículas, véase Klein et al., Pathobiology, 1994, 62, 199-208. Las células endoteliales (HUVEC), se estimularon con citocinas [TNF- (10 ng/ml) y IFN-? (100 U/ml), ambos obtenidos de Invitrogen] durante 48 horas. Posteriormente, las HUVEC estimuladas, incubadas con partículas de silicio, ya sean partículas negativas (oxidadas) o positivas [modificadas con amina (APTES)], siguieron la opsonización en suero de las partículas. La internalización de las micropartículas de silicio opsonizadas en suero por las HUVEC, se mejoró para todos los grupos de micropartículas después de la exposición al TNF-a y IFN-?; sin embargo, continúa existiendo una cara preferencia por las micropartículas positivas opsonizadas, véase la Figura 3A. En contraste con las células endoteliales, los macrófagos (células J774), ¡nteractuaron de manera preferida con las micropartículas negativas opsonizadas en suero. Esta preferencia por las micropartículas negativas opsonizadas, oxidadas, por los macrófagos, se mejoró de manera significativa (1 1%) en la presencia de citocinas (p = 0.045), véase la Figura 3B. Por otra parte, la captación de las micropartículas modificadas con APTES y PEG por los macrófagos, no se afectó por la exposición al TNF-a y al IFN-?.

Los experimentos en las células HUVEC y J774 expuestas a TNF-a e IFN-?, se realizaron como sigue: Las HUVEC (1 .5 x 05 células/pozo), se sembraron en placas de 6 pozos, y 24 horas más tarde, las células se incubaron con micropartículas de silicio opsonizadas en suero (20 micropartículas/célula) durante 1 hora a 37°C. Las células se lavaron a continuación con PBS, se recolectaron mediante tripsinización (HUVEC) o raspado (J774), y se resuspendieron en PBS que contiene BSA al 1.0% y azida de sodio al 0.1 % (amortiguador de lavado FACS). La asociación de las micropartículas con las células, se determinó midiendo la dispersión lateral, utilizando un FACSCalibur Flow de Becton Dickinson equipado con un láser de argón de 488 nm y el programa CellQuest (Becton Dickinson; San José, CA). Los datos se presentan como el porcentaje de células con micropartículas (por ciento de células con alta dispersión lateral). La dispersión lateral debido a las células en la ausencia de las partículas, se ha sustraído de los datos presentados.

Las células del macrófago J774A.1 se compraron de la Colección Americana de Cultivos Tipo (Manassas, VA). El medio de cultivo fue Medio de Eagle Modificado por Dulbecco, que contiene FBS al 10%, 100 pg/ml de estreptomicina y 100 U/ml de Penicilina (Invitrogen; Carlsbad, CA). Las células se recolectaron mediante raspado.

Las figuras 3C-3D son imágenes SEM de la captación de las micropartículas de silicio por las células HUVEC (Figura 3C) y J774 (Figura 3D) (30 minutos, 37°C), en la presencia del suero. Las células se emplacaron en placas de 24 pozos que contienen Soportes para Espécimen de Microplaqueta de Silicio de 5 x 7 mm (Ted Pella, Inc., Redding, CA) a 5 x 10 células por pozo. Cuando las células estuvieron confluentes, se introdujo el medio que contiene las micropartículas (1 : 10, células:micropartículas, 0.5 ml/pozo) y las células se incubaron a 37°C durante 30 minutos. Las muestras se lavaron con PBS y se fijaron en glutaraldehído al 2.5% durante 30 minutos (Sigma-Aldrich; St. Louis, MO). Después del lavado en PBS, las células se deshidrataron en concentraciones ascendentes de etanol (30%, 50%, 70%, 90%, 95% y 100%), durante 10 minutos cada una. Las HUVEC se incubaron a continuación en una solución de alcohol hexametildisilazano al 50% (Sigma) durante 10 minutos, seguido por la incubación en HMDS puro durante 5 minutos, para preparar la incubación durante la noche en un desecador. Los especímenes se montaron en soportes SEM (Ted Pella, Inc.), utilizando cinta adhesiva conductora (12 mm OD PELCO Tabs, Ted Pella, Inc.). Las muestras se recubrieron con bombardeo iónico de una capa de 10 nm de oro utilizando un Sistema de Bombardeo Iónico Plasma Sciences CrC-150 (Torr International, Inc.). Las imágenes SEM se adquirieron bajo alto vacío, a 20.00 kV, tamaño del punto 3.0-5.0, utilizando un ESEM FEI Quanta 400 FEG equipado con un detector de ETD (SE).

Esta investigación puede sugerir que la selección vascular de las células endoteliales puede mejorarse por las opsoninas en suero que se unen de manera preferida a las micropartículas cargadas de manera positiva. En contraste, las opsoninas en suero que se unen a las micropartículas cargadas de manera negativa, inhiben en gran medida la captación por las células endoteliales. Desafortunadamente, los fagotitos profesionales, tales como los macrófagos, mostraron una preferencia por las micropartículas opsonizadas cargadas de manera negativa. Aunque las presentes invenciones no están limitadas por una teoría, puede sugerirse que las opsoninas que se unen a las micropartículas cargadas de manera negativa pueden reflejar los componentes del suero, que pueden decorar las bacterias y las células apoptóticas, ambas de las cuales tienen una carga superficial negativa neta, y pueden ser objetivos para la captación por los neutrófilos y los macrófagos, véase, por ejemplo, Fadok, V.A. et al. J. Immunol. 148, 2207-2216 (1992) y Dickson, J.S. & Koohmaraie, M. Appl. Environ. Microbiol. 55, 832-836 (1989). La dirección de la captación de las micropartículas a través de la opsonización en suero dirigida, puede resistir la necesidad de la PEGilación y las velocidades de degradación seleccionadas y alteradas comprometidas concurrentes.

La internalización de la micropartícula por las células endoteliales puede mejorarse por la estimulación de la citocina proinflamatoria, soportando una captación superior de las micropartículas cargadas de manera positiva en los sitios de la inflamación crónica. Así, las partículas microdiseñadas opsonizadas con una carga superficial positiva pueden seleccionar de manera preferida el endotelio asociado con las patologías inflamadas, tales como enfermedad de la arteria coronaria, vasculitis y cáncer.

Referencias adicionales 1. Campos S. The oncologist 2003; 8 Supl 2: 10-6. 2. Lyass O, Uziely B, Ben-Yosef R, et al. Cáncer 2000; 89:1037-47. 3. Valero V. Oncology (Williston Park) 2002; 16:35-43. 4. Blum JL, Savin MA, Edelman G, et al. Clinical breast cáncer 2007; 7:850-6. 5. Gradishar WJ. Expert Opin Pharmacother 2006; 7: 1041 -53. 6. lyer AK, Khaled G, Fang J, Maeda H. Drug Discov Today 2006; 1 1 :812-8. 7. Publicación de la solicitud de patente de E.U.A. no. 20070237827.

Aunque lo anterior se refiere a las modalidades preferidas particulares, se entenderá que la presente invención no está así limitada. Se les ocurrirá a aquellos con experiencia ordinaria en la técnica, que pueden hacerse varias modificaciones a las modalidades descritas, y que tales modificaciones pretenden estar dentro del alcance de la presente invención.

Todas las publicaciones, solicitudes de patente y patentes citadas en esta especificación, se incorporan en la presente como referencia en su totalidad.

Claims (37)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1 .- El uso de una composición que comprende micro o nanopartículas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, en donde la superficie de las micro o nanopartículas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos, para preparar un medicamento para tratar o dar seguimiento a una condición asociada con una inflamación en un sujeto en necesidad del mismo.

2 - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la inflamación es una inflamación estimulada por citocina.

3.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición es una enfermedad de la arteria coronaria.

4.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición es vasculitis.

5. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la condición es cáncer.

6. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la administración se realiza intravascularmente.

7. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el sujeto es un humano.

8. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la composición es una suspensión que comprende las micro o nanoparticulas opsonizables.

9. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la superficie de las micro o nanoparticulas no contiene cadenas poliméricas hidrofílicas.

10. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde las micro o nanoparticulas son partículas micro o nanofabricadas.

11. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde las micro o nanoparticulas son partículas porosas.

12. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 11 , en donde las micro o nanoparticulas son partículas nanoporosas.

13. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 11 , en donde las micro o nanoparticulas son partículas porosas de silicio.

14.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde las micro o nanoparticulas son partículas porosas de óxido.

15. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 14, en donde las micro o nanoparticulas son partículas porosas de óxido de silicio.

16. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la superficie de las micro o nanoparticulas es una superficie aminomodificada.

17. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 16, en donde la superficie de las micro o nanopartículas está aminomodificada por un aminosilano.

18. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agente activo es un agente terapéutico.

19. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agente activo es un agente para la formación de imágenes.

20 - El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicha opsonización de las micro o nanopartículas resulta después de que el medicamento es administrable y las células asociadas con la inflamación son seleccionadas por las micro o nanopartículas opsonizadas.

21. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 20, en donde las células asociadas con la inflamación son células endoteliales.

22. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 20, en donde las micro o nanopartículas opsonizadas evitan la captación por los macrófagos del sujeto.

23. - Una composición que comprende micro o nanopartículas opsonizables, que contiene al menos un agente activo, en donde una superficie de las micro o nanopartículas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos.

24. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque comprende adícionalmente una solución, y en donde las micro o nanopartículas están suspendidas en la solución.

25. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque la superficie de las micro o nanopartículas no contiene cadenas poliméricas hidrofílicas.

26. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque las micro o nanopartículas son partículas micro o nanofabricadas.

27. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque las micro o nanopartículas son partículas porosas.

28.- La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada además porque las micro o nanopartículas son partículas nanoporosas.

29. - La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada además porque las micro o nanopartículas son partículas porosas de silicio.

30. - La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada además porque las micro o nanopartículas son partículas porosas de óxido.

31. - La composición de conformidad con la reivindicación 30, caracterizada además porque las micro o nahopartículas son partículas porosas de óxido de silicio.

32. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque la superficie de las micro o nanoparticulas es una superficie aminomodificada.

33. - La composición de conformidad con la reivindicación 32, caracterizada además porque la superficie de las micro o nanoparticulas está modificada por un aminosilano.

34. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque el agente activo es un agente terapéutico.

35. - La composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque el agente activo es un agente para la formación de imágenes.

36. - Un kit que comprende la composición de la reivindicación 23.

37. - El uso de una composición que comprende micro o nanoparticulas opsonizables, que contienen al menos un agente activo, en donde una superficie de las micro o nanoparticulas a) tiene una carga eléctrica positiva, y b) no contiene ligandos dirigidos, para preparar un medicamento para seleccionar células inflamadas en un sujeto.