MX2011004138A

MX2011004138A - Sales del (1r, 2r, 4r*)-2-(2-{[3-(4,7-dimetoxi-1h-benzoimidazol- 2-il)-propil]-metil-amino}-etil)-5-fenil-biciclo[2.2.2]oct-5-en-2 -il ester del acido isobutirico.

Info

Publication number: MX2011004138A
Application number: MX2011004138A
Authority: MX
Inventors: Kurt Hilpert; Francis Hubler; Stefan Abele; Dorte Renneberg; Markus Von Raumer; Stephanie Combes; Jacques-Alexis Funel; Katharina Reichenbaecher
Original assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2008-10-22
Filing date: 2009-10-21
Publication date: 2011-07-20
Also published as: CN102186828B; CA2740722A1; CN102186828A; ZA201103734B; IL212405A; US8492555B2; NZ592996A; WO2010046857A1; CL2011000921A1; HUE032044T2; BRPI0920635B8; MX342043B; MY160597A; CA2740722C; IL212405A0; US20110263667A1; AR074049A1; TWI463981B; RU2011120042A; DK2344461T3

Abstract

La presente invención se refiere a sales cristalinas de (1R*,2R*,4R*)-2-(2-{ [3-(4,7-dimetoxi-1H- benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil- biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico, los procesos para la preparación del mismo, composiciones farmacéuticas que contienen las sales cristalinas, y su uso como medicamentos, en especial como bloqueadores de los canales de calcio.

Description

SALES DEL (IR* , 2R*, 4R*) -2 - (2-{ [3- (4,7 -DIMETOXI - 1H- BENZOIMIDAZOL-2-IL) -PROPIL] -METIL-AMINO} -ETIL) -5-FENIL- BICICLO[2.2.2]OCT-5-EN-2-IL ESTER DEL ACIDO ISOBUTIRICO Campo de la Invención La presente invención se relaciona con formas novedosas de sal cristalina de (IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico (de aquí en adelante también referido en este texto como "COMPUESTO" ) , o enantiómeros del mismo, procesos para la preparación del mismo, composiciones farmacéuticas que contengan las formas de sal cristalina, y su uso como bloqueadores de canal de calcio en el tratamiento o en la prevención de angina estable crónica, hipertensión, isquemia (renal o cardiaca) , arritmias cardiacas incluyendo fibrilación atrial, hipertrofia cardiaca, o falla cardiaca congestiva. Las formas de sal cristalina de la presente invención pueden también ser empleadas, por sí solas o en composiciones farmacéuticas, para el tratamiento de enfermedades renales, diabetes y sus complicaciones, hiperaldosteronismo, epilepsia, dolor neuropático, o cáncer en humanos y en otros mamíferos.

Antecedentes de la Invención Muchos trastornos cardiovasculares han sido Re : 219444 asociados con una 'sobrecarga de calcio', lo que resulta de un ingreso anormalmente alto de calcio a través de la membrana plasmática de las células musculares lisas cardíacas y vasculares. Existen 3 rutas principales a través de las cuales el calcio extracelular puede ingresar a estas células: 1) canales de calcio activados por receptor, 2) canales de calcio abiertos por ligando y 3) canales de calcio operados por voltaje (VOCs) .

Los VOCs han sido clasificados en 6 categorías principales: L (de larga duración), T (Temporales), N (Neuronales) , P (células de Purkinje) , Q (después de P) y R (Restante o Resistente) .

Los canales de calcio de tipo L son responsables del movimiento hacia el interior del calcio que inicia la contracción en las células musculares cardíacas lisas,, lo que sugiere una aplicación putativa para los bloqueadores de estos canales en el área cardiovascular. A este respecto, se han empleado bloqueadores de canales de calcio de tipo L en clínica desde los inicios de los años 60 y hoy en día son recomendados como una primera línea de tratamiento para la hipertensión sistólica-diastólica y angina de pecho.

Los canales de calcio de tipo T son encontrados en diversos tejidos tales como la vasculatura coronaria y periférica, el nodo sinoatrial y las fibras de Purkinje, cerebro, glándulas adrenales y en el riñon. Esta amplia distribución sugiere que un bloqueador de canal de calcio de tipo T ejercería de manera putativa una protección cardiovascular, la que tendría efecto en trastornos del sueño, trastornos del estado de ánimo, depresión, migraña, hiperaldosteronemia, trabajo de parto prematuro, incontinencia urinaria, envejecimiento del cerebro o trastornos neurodegenerativos tales como la enfermedad de Alzheimer.

Mibefradil (Posicor®) , el primer bloqueador de canales de calcio de tipo L y de tipo T ha demostrado un mejor efecto respecto de los bloqueadores de canales de calcio, que está dirigido de manera predominante al canal L.

Mibefradil fue empleado para el tratamiento de hipertensión y angina sin mostrar efectos secundarios negativos frecuentemente observados en otros bloqueadores de canales de calcio de tipo L tales como inotropia, taquicardia refleja, liberación de hormonas por vasoconstricción o edema periférico. De manera adicional, mibefradil presentó un efecto potencialmente cardioprotector (Villame, Cardiovascular Drugs and Therapy 15, 41-28, 2001; Ramires, J" Mol Cell Cardiol 1998, 30, 475-83), un efecto de protección renal (Honda, Hipertensión 19, 2031-37, 2001), y presentó un efecto positivo en el tratamiento de falla del corazón (Clozel, Proceedings Association American Physicians 1999, 111, 429-37) .

A pesar de la enorme demanda por un compuesto con este perfil, mibefradil fue retirado del mercado en 1998 (un año después de su lanzamiento) debido a interacciones inaceptables con el fármaco CYP 3A4. Más aún, también se informaron anormalidades en los ECG (electrocardiogramas) (es decir, prolongaciones de intervalo QT) e interacción con flujo de salida de MDR-1 mediado por digoxina (du Souich, Clin Pharmacol Ther 67, 249-57, 2000; Wandel, Drug Me ab Dispos 2000, 28, 895-8) .

Ahora se ha descubierto que bajo ciertas condiciones se pueden encontrar las formas cristalinas del COMPUESTO (IR*, 2R*,4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-'il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico) . Las formas cristalinas del COMPUESTO son nuevas y tienen propiedades ventajosas, especialmente en comparación con la base libre (WO2008/132679) o con la sal di-clorhidrato del COMPUESTO. Tales ventajas pueden incluir mejores propiedades de flujo, mejor solubilidad, menor higroscopicidad, mejor reproducibilidad durante la fabricación (por ejemplo, mejores parámetros de filtración, mejor reproducibilidad de formación, mejor sedimentación) , morfología definida y/o mayor estabilidad de largo plazo.

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-clorhídrico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo de Referencia SI. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (2T) (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40°, 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%) : 3.02° (100%) 9.19° (88%) , 9 77° (81%) 10.81° (16%) , 12.50° (19%) , 12 .94° (21%) , 13. 15° (30%) 14.30° (26%) ; 14.62° (24%) , 15 .36° (66%) , 16. 14° (37%) 17.08° (73%) , 18.12° (76%) , 19 .46° (45%) , 19. 71° (40%) 20.54° (35%) , 20.92° (31%) , 21 .17° (29%) , 21. 56° (41%) 22.47° (29%) , 22.90° (22%) , 23 .99° (24%) , 25. 41° (52%) 26.05° (31%) , 26.90° (32 %) , 27. 28° (24% , y 28. 45° (37%) .

La Figura 2 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-metilsulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S2. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%) : 3. .97° (100%) ' , 7 .21° (42%) , 10. 00° (39%) , 14.09° (40%) , 14. .45° (29%) , 15 , .99° (55%) , 16. 38° (22%) , 17.16° (51%) , 18. .12° (44%) , 18 , .34° (53%) , 18. 60° (19%) , 19.38° (25%) , 20. .62° (35%) , 21. .02° (74%) , 21. 79° (18%) , 22.24° (25%) , 26 , .66° (30%) , y 27.63° (29%) .

La Figura 3 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-toluensulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S3. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%) : 4.35° (31%), 5.79° (100%), 7.43° (16%), 8.62° (17%), 10.93° (19%), 11.51° (31%), 13.98° (34%), 15.81° (26%), 18.06° (30%), 19.00° (20%), 19.39° (21%), 19.84° (31%), 20.30° (25%), y 25.51° (20%) .

La Figura 4 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido sulfúrico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S4. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes, (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-30° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 2.85° (100%), 8.50° (21%), 9.50° (28%), 11.78° (85%), 13.26° (41%), 13.69° (51%), 14.19° (82%), 15.78° (40%), 16.47° (39%), 17.12° (38%), 18.91° (40%), 19.48° (43%), 26.77° (65%), y 27.24° (63%).

La Figura 5 muestra ' el diagrama de difracción en polvo de rayos X del ácido di-maleico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S5. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 5.07° (26%), 8.19° (12%), 10.15° (93%), 15.26° (39%), 17.20° (12%), 17.61° (18%), 20.39° (100%), 20.88° (12%), 22.63° (47%), 23.93° (43%), 24.27° (26%), 24.51° (13%), 24.73° (17%), 25.61° (21%), 29.42° (25%), y 32.93° (16%).

La Figura 6 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido sesqui-fumárico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S6. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%) : 5.27° (57%), 8.05° (100%), 12.93° (18%), 15.20° (10%), 15.50° (20%), 19.45° (14%), 20.31° (31%), 20.61° (62%), 21.11° (27%), 22.77° (15%), 25.42° (11%), 26.22° (11%), y 31.27° (21%).

La Figura 7 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-bromhídrico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del Ejemplo S7. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 1 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 2-40° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 3.1° (59%), 6.2° (28%), 9.3° (18%), 14.4° (11%), 15.6° (100%), 17.3° (33%), 18.1° (15%), 19.4° (20%), 20.0° (37%), 21.4° (14%), 22.8° (16%) , y 34.8° (43%) .

La Figura 8 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido sesqui-naftalen-1, 5-disulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del procedimiento general de formación de sales. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 8-26.5° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 9.9° (40%), 10.4° (18%), 12.8° (42%), 14.2° (100%), 15.0° (73%), 18.3° (68%), 19° (54%), 20.1° (39%), 20.6° (48%), 21.3° (83%), 23.8° (13%), 24.9° (14%), y 26.2° (22%).

La Figura 9 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-bencensulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del procedimiento general de formación de sales. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (la.s intensidades relativas de los picos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los picos seleccionados desde el intervalo 8-26.5° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 8.1° (16%), 8.5° (18%), 10.9° (20%), 11.4° (16%), 12.3° (20%), 12.6° (37%), 12.9° (22%), 13.4° (55%), 14.6° (32%), 15.3° (37%), 16.1° (27%), 17.5° (71%), 17.9° (37%), 19.1° (22%), 19.4° (25%), 20.1° (46%), 21.3° (91%), 21.8° (46%), 22.7° (100%), 23.6° (18%), 24.5° (20%) , y 25.5° (21%) .

La Figura 10 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-etansulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del procedimiento general de formación de sales . El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 2 muestra picos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los máximos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los máximos seleccionados desde el intervalo 8-26.5° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%) : 9.6° (25%), 9.9° (21%), 10.5° (23.3%), 11.2° (27%), 11.9° (17%), 12.9° (48%), 14.5° (53%), 15.0° (40%), 15.7° (100%), 16.5° (65%), 17.0° (40%), 17.7° (49%), 19.0° (67%), 19.7° (69%), 20.4° (68%), 21.5° (55%), 22.6° (67%), y 23.3° (47%).

La Figura 11 muestra el diagrama de difracción en polvo de rayos X de la sal de ácido di-na talen-2-sulfónico del COMPUESTO en una forma cristalina tal como se obtiene a partir del procedimiento .general de formación de sales. El diagrama de difracción de rayos X medido con el método 2 muestra máximos que tienen una intensidad relativa, en comparación con el pico de mayor intensidad en el diagrama, con los siguientes porcentajes (las intensidades relativas de los máximos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2-teta indicados (se informan los máximos seleccionados desde el intervalo 8-26.5° 2-teta con una intensidad relativa mayor que 10%): 9.8° (98%), 11.2° (45%), 11.8° (24%), 13.7° (20%), 14.6° (33%), 15.6° (100%), 16.9° (90%), 19.4° (96%), 22.4° (45%), y 23.9° (23%).

En los diagramas de difracción de rayos X de las Figuras 1 a la Figura 11 el ángulo de refracción 2-teta (2T) es graficado en el eje horizontal y las cuentas en el eje vertical .

Descripción detallada de la Invención 1) La invención se relaciona con una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura del COMPUESTO (IR*, 2R*,4R*) -2- (2-{ [3- (4, 7-dimetoxi-lH- benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-araino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2 ] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico) ; en donde la sal cristalina consiste en: • 1 equivalente del COMPUESTO; • un componente ácido que consiste de 1 a 2 equivalentes de un ácido seleccionado desde el grupo que consiste de ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido metanosulfónico, ácido para- toluensulfónico, ácido bencensulfónico, ácido naftalen- 1, 5-disulfónico, ácido naftalen-2-sulfónico, y ácido etansulfónico ; y • 0 a 5 equivalentes de agua. 2) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 1) , en la cual el COMPUESTO es (IR, 2R, 4R) -2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico enantioméricamente enriquecido. 3) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 1) , en la cual el COMPUESTO (1S , 2S , 4S) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico enantioméricamente enriquecido. 4) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 1) , en la cual el COMPUESTO es (1R*,2R*,4R*) -2- (2-{ [3- (4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico en una forma enantioméricamente enriquecida que tiene una rotación óptica negativa. 5) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 4) , en la cual la sal cristalina contiene 0 a 3 (especialmente 0.5 a 3, de manera destacable 1 a 2) equivalentes de agua. 6) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 4) , en la cual la sal cristalina contiene 0 equivalentes de agua. 7) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 6) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido bromhídrico, 1 ó 2 equivalentes de ácido sulfúrico, 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido maleico, 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de ácido fumárico, 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido metanosulfónico, 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido para-toluensulfónico, 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido bencensulfónico, 1 a 2 (especialmente 1,5) equivalentes de ácido naftalen-1 , 5-disulfónico, 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido naftalen-2-sulfónico, o 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido etansulfónico .

En una sub-modalidad, el componente ácido de la sal cristalina consiste preferentemente en 2 equivalentes de ácido bromhídrico, 1 ó 2 equivalentes de ácido sulfúrico, 2 equivalentes de ácido maleico, 1 a 2 (especialmente 1.5) equivalentes de ácido fumárico, 2 equivalentes de ácido metanosulfónico, 2 equivalentes de ácido para-toluensulfónico, o 2 equivalentes de ácido bencensulfónico . En otra sub-modalidad, el componente ácido de la sal cristalina consiste preferentemente en 1 ó 2 (especialmente 2) equivalentes de ácido maleico, o 1 a 2 (especialmente 1.5) equivalentes de ácido fumárico. 8) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido bromhídrico. Una sub-modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 5) ó 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido bromhídrico; y en la cual la sal cristalina contiene aproximadamente 3 equivalentes de agua. 9) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1 ó 2 equivalentes de ácido sulfúrico. 10) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido maleico. 11) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1 a 2 (especialmente 1.5) equivalentes de ácido fumárico. 12) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido metanosulfónico . 13) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido para-toluensulfónico . 14) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido bencensulfónico . 15) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1 a 2 (especialmente 1.5) equivalentes de ácido naftalen-1, 5-disulfónico. 16) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido naftalen-2-sulfónico . 17) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 7) , en la cual el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido etansulfónico . 18) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 1) ó 10) , en la cual la sal cristalina consiste en: . 1 equivalente del COMPUESTO, o del COMPUESTO enantioméricamente enriquecido tal como se define en una de las modalidades 2) a 4) ; · 2 equivalentes de ácido maleico; y • O equivalentes de agua. 19) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 10) ó 18) , caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 20: 10.15°, 20.39°, y 22.63°. 20) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 10) ó 18) , caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.07°, 8.19°, 10.15°, 15.26°, 17.61°, 20.39°, 22.63°, 23.93°, 24.27°, y 25.61°. 21) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 10) ó 18) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 5. 22) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 10) ó 18) a 21) , que tiene un punto de fusión de aproximadamente 147°C tal como se determina mediante calorimetría de escaneo diferencial empleando el método que se describe en este texto . 23) En otra modalidad, la presente invención se relaciona con una sal cristalina de conformidad con cualquiera de las modalidades 10) ó 18) a 22) , que puede ser obtenida mediante : 1. someter a reflujo una solución del COMPUESTO (682 g, 84% peso/peso, 1.05 mol) en EtOAc (6.3 L, 11 volúmenes) ; 2. agregar ácido maleico (256 g, 2.2 mol, 2.1 eq) disuelto en MeOH (630 mL, 1.1 volúmenes); 3. agitar la mezcla bajo reflujo durante 15 minutos y enfriar hasta 65-68 °C dentro de 30 minutos; 4. de manera opcional, sembrar con 0.04% peso/peso de cristales semilla; 5. enfriar la mezcla hasta 40 °C dentro de 3 horas ,- 6. enfriar la mezcla hasta 20°C dentro de 1 hora; 7. filtrar el sólido bajo 0.2 bar de nitrógeno y lavar el sólido con EtOAc (1500 mL 2.6 volúmenes); y 8. secar el sólido bajo 1 atmósfera de nitrógeno durante 24 horas . 24) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 8) , caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 9.3°, 15.6°, y 17.3°. 25) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 8) ó 24) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 6.2, 9.3°, 15.6°, 17.3°, 18.1°, 19.4o, 20.0°, y 22.8°. 26) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 8) , 24) ó 25), que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 7. 27) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 11) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.27°, 8.05°, y 20.61°. 28) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 11) ó 27) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.27°, 8.05°, 12.93°, 19.45°, 20.61°, 21.11° y 31.27° . 29) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 11) , 27) ó 28) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 6. 30) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 11) , ó 27) a 29) , que tiene un punto de fusión de aproximadamente 180°C según se determina mediante calorimetría de escaneo diferencial empleando el método tal como se describe en este texto . 31) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 12) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 7.21° y 10.00°. 32) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 12) ó 31) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 3.97°, 7.21°, 10.00°, 15.99°, 17.16°, y 21.02° . 33) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 12) , 31) ó 32), que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 2. 34) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 13) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.79° y 19.84°. 35) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 13) ó 34) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción' 2T: 4.35°, 5.79°, 10.93°, 13.98°, 15.81° y 19.84° . 36) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 13) , 34) ó 35) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 3. 37) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 14) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 13.4°, 17.5°, y 21.3°. 38) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 14) ó 37) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 12.6o, 13.4°, 14.7°, 17.5°, 21.3°, y 22.7°. 39) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 14) , 37) ó 38) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 9. 40) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 15) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2?: 9.9°, 14.2°, y 21.3°. 41) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 15) ó 40), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 9.9°, 12.9°, 14.2°, 20.1°, 20.6°, y 21.3°. 42) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 15) , 40) ó 41) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 8. 43) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 16) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 9.8°, 11.2°, y 15.6°. 44) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 16) ó 43), caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 9.8°, 11.2°, 15.6°, 22.4°, y 23.9°. 45) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 16) , 43) ó 44) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 11. 46) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 17) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 11.2°, 15.7o, y 20.4°. 47) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 17) ó 46) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 11.2°, 14.5°, 15.7o, 17.7o, 20.4°, y 22.6°. 48) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 17) , 46) ó 47) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 10. 49) La invención se relaciona además con una sal cristalina, especialmente una sal cristalina esencialmente pura del COMPUESTO ( ( IR* , 2R* , 4R* ) -2- ( 2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico) ; en donde la sal cristalina consiste en: . 1 equivalente del COMPUESTO; • un componente ácido que consiste de aproximadamente 1 equivalente de ácido sulfúrico; y • aproximadamente 6 equivalentes de agua. 50) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 49) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 11.78°, 13.69°, y 14.19°. 51) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 49) ó 50) , caracterizada por la presencia de picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 2.85°, 8.50°, 9.50°, 11.78°, 13.26°, 13.69°, y 14.19°. 52) Otra modalidad se relaciona con una sal cristalina del COMPUESTO de conformidad con la modalidad 49) , 50) ó 51) , que presenta esencialmente el patrón de difracción en polvo de rayos X tal como se ilustra en la Figura 4.

Para evitar cualquier duda, cada vez que una de las modalidades, en especial una de las modalidades 19) , 20) , 24) , 25) , 27), 28) , 31), 32) , 34) , 35), 37) , 38) , 40) , 41) , 43) , 44) , 46) , 47) , 50) y 51) , se refiera a "picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T" , el diagrama de difracción en polvo de rayos X es obtenido empleando radiación Cu Kal (? = 1,5406 Á) ; y se debe entender que la precisión de los valores 2T tal como se proveen en este texto se encuentra en el intervalo de +/- 0.1-0.2°. De manera destacable, cuando se especifique un ángulo de refracción 2-teta (2T) para un máximo en la invención y en las reivindicaciones, el valor 2T presentado debe ser entendido como un intervalo desde el valor menos 0.2° hasta el valor más 0.2° (2T +/- 0.2°); y preferentemente desde el valor menos 0.1° hasta el valor más 0.1° (2T +/-0.1°) .

Para evitar cualquier duda, la configuración relativa de los estereoisómeros se anota tal como sigue: (IR* , 2R* , R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico denomina (IR, 2R, 4R) -2- (2-{ [3-(4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico, o (1S, 2S, 4S) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico, o mezclas de estos dos enantiómeros, tales como por ejemplo el racemato.

Abarcadas en el alcance de la presente invención se encuentran las formas cristalinas de la sal del COMPUESTO, es decir, (IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico, descrito en este texto; en donde el COMPUESTO puede estar en forma racémica; en una forma enantioméricamente enriquecida del enantiómero de configuración absoluta (1R,2R,4R); en una forma enantioméricamente enriquecida del enantiómero de configuración absoluta (1S,2S,4S); o en la forma de una mezcla de estos dos enantiómeros . Se prefiere la forma enantioméricamente enriquecida que tiene una rotación óptica negativa tal como se determina empleando el método que se describe en este texto.

Cuando se emplea la forma plural para estos compuestos, sales, composiciones farmacéuticas, enfermedades y similar, también se quiere citar la forma singular de un compuesto, sal o similar.

En el contexto de la presente invención, se entiende que término "enantioméricamente enriquecido" significa especialmente que al menos 90, preferentemente al menos 95, y más preferentemente al menos 99 por ciento en peso del COMPUESTO está presente en la forma de un enantiómero del COMPUESTO.

En el contexto de la presente invención, se entiende que término "esencialmente pura" significa que especialmente al menos 90, preferentemente al menos 95, y más preferentemente al menos 99 por ciento en peso de los cristales de un COMPUESTO se encuentran presentes en una forma cristalina de conformidad con la presente invención, especialmente en una única forma cristalina de la presente invención.

Cuando se define la presencia de un máximo en, por ejemplo, un diagrama de difracción en polvo de rayos X, un enfoque común para hacer esto es en términos de la relación S/N (S = señal, N = ruido) . De conformidad con esta definición, cuando se declara que un máximo tiene que estar presente en un diagrama de difracción en polvo de rayos X, se entiende que el máximo en el diagrama de difracción en polvo de rayos X está definido como teniendo una razón S/N (S = señal, N = ruido) mayor que x (siendo x un valor numérico mayor que 1) , frecuentemente mayor que 2, especialmente mayor que 3.

En el contexto en el cual se establece que la forma cristalina presenta esencialmente un patrón de difracción en polvo de rayos X como se muestra en la Figuras 1 hasta la Figura 11, respectivamente, el término "esencialmente" significa que tienen que estar presentes al menos los picos principales del diagrama que se muestran en las figuras, es decir, aquellos que tienen una intensidad relativa de más que 10%, especialmente más que 20%, en comparación con el máximo de mayor intensidad en el diagrama. Sin embargo, las personas experimentadas en la técnica de la difracción en polvo de rayos X reconocerán que las intensidades relativas en los diagramas de difracción en polvo de rayos X pueden estar sometidas a fuertes variaciones de intensidad debido a efectos de orientación preferida.

Salvo respecto de las temperaturas, el término "aproximadamente" ubicado antes de un valor numérico WX" se refiere en la presente solicitud a un intervalo que se extiende desde X menos 10% de X hasta X más 10% de X, y preferentemente a un intervalo que se extiende desde X menos 5% de X hasta X más 5% de X. En el caso particular de las temperaturas, el término "aproximadamente" ubicado antes de una temperatura "Y" se refiere en la presente solicitud a un intervalo que se extiende desde Y menos 10 °C hasta Y más 10 °C, y preferentemente a un intervalo que se extiende desde Y menos 5 °C hasta Y más 5 °C. Temperatura ambiente se refiere a una temperatura de aproximadamente 25 °C. Cuando en la presente solicitud se emplea el término n equivalente (s) , en donde n es un número, se quiere decir y se encuentra en el alcance de la presente solicitud, que n se refiere a aproximadamente el número n, preferentemente n se refiere al número n de manera exacta.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) pueden ser empleadas como medicamentos, por ejemplo, en la forma de composiciones farmacéuticas para administración entérica o parenteral .

La producción de las composiciones farmacéuticas puede ser llevada a cabo de una manera que sea familiar a cualquier persona experimentada en la técnica (ver por ejemplo Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21a edición (2005) , parte 5, "Pharmaceutical Manufacturing" [publicado por Lippincott Williams & Wilkins] ) llevando las formas cristalinas de la presente invención, opcionalmente en combinación con substancias de valor terapéutico, a una forma de administración galénica en conjunto con materiales portadores sólidos o líquidos adecuados no tóxicos, farmacéuticamente aceptables e inertes, y si se desea, con los adyuvantes farmacéuticos acostumbrados.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) pueden ser empleadas como un único componente o como mezclas con otras formas cristalinas o con formas amorfas del COMPUESTO.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) son útiles en la preparación de un medicamento y/o son adecuadas • para el tratamiento o la prevención de angina estable crónica, hipertensión, isquemia (renal y cardiaca) , arritmias cardiacas incluyendo fibrilación atrial, hipertrofia cardiaca o insuficiencia cardiaca congestiva.

Las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) además son útiles en la preparación de un medicamento y/o son adecuadas para los siguientes grupos de enfermedades por sí solas o en cualquier combinación: • para el tratamiento de enfermedades renales, diabetes y sus complicaciones, hiperaldosteronismo, epilepsia, dolor neuropático, o cáncer en humanos y en otros mamíferos ; • para ser empleado como un agente anti-fibrilatorio, como un agente anti-asmático, como un agente anti- aterosclerótico, como un aditivo para las soluciones cardioplégicas para las derivaciones pulmonares en conjunto con una terapia trombolítica, como un agente anti-aglomerante, o como un agente para el tratamiento de angina inestable; • para el tratamiento o la profilaxis de hipertensión, especialmente hipertensión portal, hipertensión posterior a tratamiento con eritropoyetina e hipertensión por renina baja; • para ser empleadas en enfermedades hipóxicas o isquémicas, o como un agente anti isquémico para el tratamiento de por ejemplo isquemia y reperfusión cardiaca, renal y cerebral (por ejemplo que ocurren después de cirugía de derivación) , vaso espasmo coronario y cerebral y similares, terapia para las enfermedades vasculares periféricas (por ejemplo enfermedad de Raynaud, claudicación intermitente, enfermedad de Takayashus) , enfermedad de células falciformes incluyendo inicio y/o evolución de crisis de dolor; para el tratamiento o la profilaxis de trastornos relacionados con la función de células renales, glomerulares y mesangiales, incluyendo falla renal aguda y crónica, nefropatía diabética, nefropatía inducida por hipertensión, daño glomerular, daño renal relacionado con la edad o con diálisis, nefrosclerosis, nefrotoxicicidad relacionada con agentes de imagen y contraste y con ciclosporina, isquemia renal, reflujo vesicoureteral primario, o glomerulosclerosis ; para ser empleado en la terapia de infarto al miocardio, en el tratamiento de hipertrofia cardiaca, hipertensión pulmonar primaria y secundaria, terapia para insuficiencia cardiaca congestiva incluyendo inhibición de fibrosis, inhibición de la dilatación del ventrículo izquierdo, remodelamiento y disfunción, o restenosis posterior a una angioplastía o a la instalación de una endoprótesis vascular; para el tratamiento de endotoxemia o de choque de endotoxinas, o de choque hemorrágico ; para el tratamiento de la disfunción sexual tanto en hombres (disfunción eréctil por ejemplo debida a diabetes mellitus, daño de la espina dorsal, prostatectomia radical, etiología psicogénica y otras causas) y en mujeres mediante la mejora del flujo sanguíneo a los genitales, especialmente al cuerpo cavernoso; para la prevención y/o reducción de cáncer o de daño final de órganos asociado con la proliferación celular; para la terapia de trastornos metabólicos o de enfermedades inflamatorias crónicas, diabetes mellitus dependiente de la insulina y no dependiente de la insulina y .de sus complicaciones (por ejemplo, neuropatía, retinopatía) , hiperaldosteronismo, remodelado óseo, psoriasis, artritis, artritis reumatoide, osteoartritis sarc'oidosis, o dermatitis eczematosa; para el tratamiento de hepatotoxicicidad y muerte súbita, daño y enfermedad temprana y avanzada del hígado incluyendo complicaciones derivadas (por ejemplo hepatotoxicicidad, fibrosis, cirrosis), consecuencias dañinas de tumores tales como hipertensión que resulta de hemangiopericitoma, enfermedades espásticas del tracto urinario y/o de la vejiga, síndrome hepatorenal, enfermedades inmunológicas que involucran vasculitis tales como lupus, esclerosis sistémica, crioglobulinemia mixta, fibrosis asociada con disfunción renal y hepatotoxicicidad; para ser empleadas, en enfermedades gastrointestinales tales como colitis ulcerante, enfermedad de Crohn, daño de la mucosa gástrica, úlcera, enfermedad inflamatoria del intestino y enfermedad isquémica del intestino, enfermedades de la vesícula biliar o de los conductos biliares tales como colangitis, pancreatitis, regulación del crecimiento celular, hipertrofia benigna de la próstata, o transplante, o para ser empleadas como agente antidiarreico; para el tratamiento de trastornos que involucran broncoconstricción o trastornos de inflamación crónicos o agudos tales como enfermedad pulmonar obstructiva y síndrome de angustia de adultos; para el alivio de dolor incluyendo dolor neuropático, dolor periférico y dolor asociado con cáncer tal como dolor asociado con cáncer de la próstata o cáncer óseo; para el tratamiento de trastornos del sistema vascular del sistema nervioso central tales como embolia, ataques isquémicos temporales, migraña y hemorragia subaracnoidea, trastornos del sistema nervioso central, trastornos del comportamiento, tratamiento de la demencia incluyendo demencia de Alzheimer, demencia senil y demencia vascular, epilepsia, o trastornos del sueño; o para la reducción de morbidez y/o de la mortalidad general como resultado de los beneficios anteriores.

La presente invención también se relaciona con un método para la prevención o el tratamiento de una enfermedad o trastorno mencionado en este texto, método que comprende la administración a un sujeto una cantidad farmacéuticamente activa de una sal cristalina, especialmente de una sal cristalina esencialmente pura del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) .

Más aún, las sales cristalinas, especialmente las sales cristalinas esencialmente puras del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) también pueden ser empleadas de manera favorable en combinación con uno o más agentes seleccionados de entre agentes que disminuyen los lípidos tales como estatinas, anticoagulantes tales como cumarinas, agentes antitrombóticos tales como clopidogrel, ß-bloqueadores , y otros agentes cardioprotectores .

La presente invención también se relaciona con un proceso para la preparación del COMPUESTO en una forma enriquecida racémica y enantioméricamente , y con procesos para la preparación y la caracterización de sales cristalinas del COMPUESTO de conformidad con cualquiera de las modalidades 1) a 51) , procesos que se describen en la parte experimental a continuación.

Parte Experimental Los siguientes Ejemplos ilustran la invención en mayor detalle. Las temperaturas se presentan en grados Celsius. Si no se indica de otra manera, los porcentajes se presentan en peso. Abreviaturas tal como se las emplea en este texto y en la descripción anterior: ac . acuoso aprox . aproximadamente CC cromatografía de columna en gel de sílice DCM diclorometano DIPA diisopropil-amina DIPEA diisopropil-etilamina, base de Hünig, etil- diisopropilamina DMAP 4-dimetilamino- piridina DMF dimetilformamida DSC calorimetría de escaneo diferencial eq. equivalente (s) Et20 éter de dietilo EtOAc acetato de etilo EtOH etanol Fig. figura h hora (s) 1H-NMR resonancia magnética nuclear de hidrógeno-1 Hept heptano Hex hexano HOBt 1-hidroxibenzotriazol MEK 2-butanona MeCN acetonitrilo MeOH metanol NEt3 trietilamina Pd/C paladio en carbono 2-PrOH isopropanol Red-Al hidruro de sodio-bis (2-metoxietoxi) aluminio RH humedad relativa ta temperatura ambiente rpm rotaciones por minuto sat . saturado TBME metil éter de tere-butilo terc. terciario THF tetrahidrofurano TsOH ácido para (p) -toluensulfónico XRPD difracción en polvo de rayos X Análisis de difracción en polvo de rayos X (XRPD) : Método 1: Se recuperan los patrones de difracción en polvo de rayos X en un difractómetro de rayos X Bruker D8 Advance equipado con un detector LynxEye con una ventana de 3o operado con radiación Cu Ka en geometría de reflexión (Bragg-Brentano) . Típicamente, el tubo de rayos X es usado a 40 kV/40 mA. Se aplica un paso de 0.02° de tamaño (2T) y un tiempo de paso de 37 segundos para un intervalo de escaneo de 2 - 50° en 2-teta (2T) . La hendidura de divergencia se fija a variable V12 o V20, dependiendo de la profundidad del soporte de muestra. El polvo (aproximadamente 15 mg para una profundidad de 0.1 mm y aproximadamente 80 mg para una profundidad de 1 mm) se presiona levemente en un soporte de muestras de cristal único de silicio con una profundidad de 0.1 mm o de 1 mm y las muestras son rotadas en su propio plano durante la medición. Algunas muestras elegidas se cubren con una película de Kapton. Los datos de la difracción son informados empleando Cu ?a? (? = 1.5406 Á) , después que el componente Ka2 ha sido retirado empleando el programa de evaluación del instrumento (EVA) . De manera adicional, la señal de fondo ha sido retirada empleando el programa de evaluación del instrumento (EVA) , para las muestras que están cubiertas con Kapton durante la adquisición de los datos. La precisión de los valores 2T tal como se los provee en este texto se encuentra en el intervalo de +/- 0.1-0.2° como en general es el caso para los patrones de difracción en polvo de rayos X registrados de manera convencional.

Método 2: Los patrones de difracción en polvo de rayos X son recolectados en un difractómetro de rayos X Bruker D8 HTS equipado con un detector GADDS HiStar operado con radiación Cu Ka en geometría de reflexión. Típicamente, el tubo de rayos X es empleado a 40 kV/40 mA. El instrumento es verificado por su eficiencia empleando un estándar Corundum certificado (NIST 1976) . Las muestras corridas a condiciones ambientales fueron preparadas como especímenes de placa plana empleando el polvo tal como fue recibido. Se presionan de manera suave aproximadamente 3 mg de la muestra en una placa de microscopía. Los datos son recolectados en un intervalo angular de 7.6° hasta 26.7° 2T en 1 marco con un tiempo de adquisición de 180 segundos. Los datos de difracción son informados sin la eliminación del componente Ka2 y la señal de fondo ha sido retirada empleando el programa de evaluación del instrumento (EVA) . La precisión de los valores 2T tal como se la provee en este texto se encuentra en el intervalo de +/- 0.1-0.2° tal como en general es el caso para los patrones de difracción en polvo de rayos X registrados de manera convencional.

Los puntos de fusión son medidos en un aparato Buchi B-540 y no son corregidos; o son medidos, si se indica de manera explícita, mediante calorimetría de escaneo diferencial (DSC) : Los datos de DSC son recolectados en un Perkin Elmer DSC7. Típicamente, 2-3 mg de muestra, previamente almacenada abierta bajo nitrógeno seco durante 16 horas, son calentados en un contenedor cerrado de oro a 20 °C min"1 desde -20 °C hasta 200 °C. Los puntos de fusión son informados como temperaturas máximas .

Las rotaciones ópticas son medidas en un aparato Jasco P-1030 a temperatura ambiente empleando la línea D de sodio (? = 589 nm) .

Los •''H-RMN son medidos en un Bruker Avance 400 (400 Hz) ; los cambios químicos son presentados en ppm en relación al solvente empleado; las multiplicidades: s = singlete, d = doblete, t = triplete, q = cuarteto, p = pentuplete, hex = hexete, sept = septuplete, m = muítiplete, dm - doblete de multiplete, br = amplio, las constantes de acoplamiento se presentan en Hz) . Los ensayos RMN son medidos empleando dimetiléter de hidroquinona como un estándar interno.

La higroscopicidad es evaluada mediante mediciones de absorción de vapor escaneadas gravimétricamente en un SPSll-lOOm (Projekt Messtechnik, Ulm, Alemania) (la tasa de escaneo es un cambio de 5% en la humedad relativa por hora, ciclo que se inicia a un 50% de humedad relativa seguido por un escaneo hasta sequedad y un escaneo hacia arriba hasta un 95% de humedad relativa) . La clasificación se lleva a cabo de conformidad con la Guía Técnica de Farmacopea Europea (Edición de 1999) (por ejemplo, levemente higroscópico: el aumento en la masa es menor que 2% y mayor o igual que 0.2% masa/masa) . Se consideran cambios de masa en el escaneo hacia arriba entre 40% de humedad relativa y 80% de humedad relativa .

El LC-MS es llevado a cabo empleando las siguientes condiciones: Finnigan Navigator con bomba binaria HP 1100 y DAD, columna: 4.6 x 50 mm, Zorbax SB-AQ, 5 µ???, 120 Á, gradiente: 5-95% de acetonitrilo en agua, 1 min, con 0.04% de ácido trifluoroacético , flujo: 4.5 mL/min, tR es presentado en minutos .

Los compuestos son purificados mediante HPLC preparativa (columna: X-terra RP18, 50x19 mm, 5 µp?, gradiente: 10-95% acetonitrilo en agua que contiene 0.5% de ácido fórmico) o mediante cromatografía de columna en gel de sílice. Los racematos pueden ser separados en sus enantiómeros mediante HPLC preparativa (condiciones preferidas: Daicel, ChiralCel OD 20 x 250 mm, 10 µ??, 4% de etanol en hexano, flujo 10-20 mL/min) .

I. Preparación y caracterización del COMPUESTO La preparación del COMPUESTO es conocida a partir de WO2008/132679 : Preparación de intermediarios Procedimientos generales para la preparación de intermediarios clave K: Los intermediarios clave K1A y K2A que son derivados de biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ilo o biciclo [3.2.2] non-8-en-6-ilo se obtienen como una mezcla entre el racemato principal que tiene la configuración relativa (R*,R*,R*) (es decir, el puente -(CH2)2- de la porción ciclohexeno está cis respecto del grupo -OR2 detrás del hidroxilo) y del racemato secundario que tiene una configuración relativa (R*,S*,R*) (es decir, el puente - (CH2) 2- de la porción ciclohexano está trans respecto del grupo -0R2 detrás del hidroxilo) . Los racematos principal y secundario pueden ser separados tal como se describe para el intermediario K1A en el procedimiento Al .5. El racemato principal es aislado y es empleado en la preparación de los ejemplos a continuación.

K1A: terc-butil éster del ácido rae- (IR* , 2R* , 4R*) - (2-hidroxi- 5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético K1A.1 (Procedimiento Al .1) : rae- (IR* , 4R*) -biciclo [2.2.2] octan-2 , 5-diona Se mezclan 25 mL de 2- ( trimetilsililoxi) -1, 3-ciclohexadieno y 13 mL de -acetoxiacrilonitrilo y son calentados a 150 °C en un contenedor cerrado durante 22 h. El aceite viscoso anaranjado oscuro obtenido es disuelto en 200 mL de MeOH. Después de la adición gota a gota de una solución de 2.2 g de metóxido de sodio en 150 mL de MeOH la mezcla de reacción es agitada durante 3 h a temperatura ambiente, vertida en hielo/agua y es extraída con DCM. Las fases orgánicas son concentradas in vacuo y el residuo crudo es purificado mediante CC con EtOAc-Hept (1:2) para proveer 7.9 g de rae- (IR* , 4R*) -biciclo [2.2.2] octan-2 , 5-diona .

LC-MS: tR = 0.44 min.

K1A .2 (Procedimiento Al .2 ) : rae- (IR*, 4R*) - Espiro [biciclo [2.2.2] octan-2 , 2' - [1 , 3] dioxolan] -5-ona A 4.0 g de rae- (IR* , 4R*) -biciclo [2.2.2] octan-2 , 5- diona (intermediario K1A.1), disueltos en 1¾0 mL de tolueno, se agregan 1.7 mL de etilen glicol y 0.27 g de TsOH y la solución se calienta con agitación vigorosa hasta reflujo durante 3.5 h. La mezcla de reacción es enfriada hasta temperatura ambiente, es apagada con NaHC03 acuoso saturado, es extraída con Et20, y la fase orgánica es evaporada. El producto crudo es purificado mediante CC con Hex-EtOAc (7:3) para proveer 2.41 g de rae- (IR* , 4R* ) -espiro [biciclo [2.2.2 ] octan-2 , 2 ' - [1, 3] dioxolan] -5-ona como un aceite amarillo.

LC-MS: tR = 0.64 min.; [M+H+CH3CN] + : 224,35.

K1A.3 (Procedimiento Al.3): Mezcla de rae- (7R* , 8R* , 10R* ) - y rae- (7R*, 8S*, 10R*) -7, 10- (1, 2-etilen) -8-fenil-1 , 4-dioxa-espiro [4.5] decan-8-ol A una solución de 2.41 g de rae- ( IR* , 4R* ) -espiro [biciclo [2.2.2] octan-2 , 2 ' - [1 , 3] dioxolan] -5-ona (intermediario K1A.2) en 80 mL Et20, se agregan gota a gota 14.5 mL de solución de bromuro de fenilmagnesio (1 M en Et20) durante 10 min. La mezcla de reacción es agitada durante 4 h a temperatura ambiente. Entonces, la mezcla es apagada cuidadosamente con hielo, se agregan 8 mL de HC1 2 N y las fases son separadas . La fase orgánica es evaporada y el producto crudo es purificado mediante CC con Hept-EtOAC (7:3) para proveer 0.37 g de 7, 10- (1, 2-etilen) -8-fenil-l, 4-dioxa-espiro [4.5] decan-8-ol como un aceite incoloro. (La separación de los diastereómeros mediante CC es posible pero no se lleva a cabo en este caso) .

LC- S: tR = 0.84 min . ; [M-H20+H] + : 243.34.

K1A.4 (Procedimiento Al .4) : rae- (1R*,4R*) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ona A una solución de 0.54 g de 7 , 10- ( 1 , 2-etilen) -8-fenil-1 , 4-dioxa-espiro [4.5] decan-8-ol (intermediario K1A.3) en 20 mL se agregan acetona, 200 mg de TsOH y luego la mezcla es agitada durante 2 días a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es apagada con NaHC03 acuoso saturado, extraída con EtOAC y la fase orgánica es evaporada. El producto crudo es purificado mediante CC con Hept-EtOAC (7:3) para proveer 0.34 g de rae- ( IR* , 4R* ) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ona como un aceite incoloro.

LC-MS: tu = 0.93 min.; [M+H+CH3CN] + : 240.11.

K1A.5 (Procedimiento Al.5) : terc-butil éster de ácido rac-(1R* , 2R* , 4R* ) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético y terc-butil éster de ácido rae- (IR* , 2S* , R*) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético A una solución de 0.51 mL de DIPA en 0.5 mL de THF se agregan gota a gota 2.2 mL de n-butillitio (1.6 M en Hex) a -20 °C. Después de 10 min, se agregan 0.5 mL de tolueno y la solución es agitada durante 30 min. La mezcla es enfriada hasta -50 °C, se agregan 0.73 mL de acetato de tere-butilo y se mantiene la agitación durante 1 h a -50 °C. Luego se agregan 0.32 g de rae- (IR* , 4R* ) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ona (intermediario K1A.4) disueltos en 1 mL de THF y la solución se agita a -50 hasta -20 °C durante 2.5 h. La mezcla de reacción es vertida en hielo/HCl acuoso, la fase orgánica es separada, lavada y evaporada. El producto de reacción crudo es purificado mediante CC con Hept-EtOAc (9:1) para proveer 0.30 g del racemato principal, terc-butil éster de ácido rae- (IR*, 2R* , 4R*) -2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético, como un sólido blanco y 0.07 g del racemato secundario, terc-butil éster de ácido rac- (1R* , 2S* , 4R*) -2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético, como un aceite incoloro.

LC-MS (racemato principal) : tR = 1.06 min. ; [M- (CH3) 3-H2O+H] +: 241.11.

LC-MS (racemato secundario): tR = 1.05 min.; [M+H]+: 315.18.

K1A.6: terc-butil éster de ácido (1S, 2S, 4S) - ( 2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético y terc-butil éster de ácido (IR, 2R, 4R) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético Se separa terc-butil éster de ácido rac-(1R* , 2R* , 4R*) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético en sus enantiómeros respectivos empleando HPLC preparativa quiral (columna: Daicel ChiralPak AD-H, 20x250 mm, 5 µp?; Hex/ EtOH 95:5, flujo 16 mL/min) HPLC analítico quiral (Daicel ChiralPak AD-H, 4.6 x 250 mm, 5 µp\; Hex/ EtOH 95:5, flujo 0.8 mL/min) : Terc-butil éster de ácido (IR, 2R, 4R) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético : Enantiómero A: tR = 6.70 rain.

Terc-butil éster de ácido (1S, 2S, 4S) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético : Enantiómero B: tR = 7.93 min.

BB . [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amina BB .1 3 , 6-dimetoxi-bencen-l , 2-diamina Se sintetiza 3 , 6-dimetoxi-bencen-l , 2^diamina mediante la disolución de 6.0 g de 1 , 4-dimetoxi-2 , 3-dinitro-benceno (Eur. J. Org. Chem. 2006, 2786-2794) en 220 mL de EtOH, evacuando 3 veces con N2 y agregando 600 mg de Pd/C al 10% en peso. La reacción es agitada bajo una atmósfera de H2 (balón) . Se agregan otros 300 mg de Pd/C al 10% en peso después de 2 días y la mezcla es agitada durante otras 24 h. La filtración a través de una almohadilla de celite y el lavado con EtOH y EtOAc proveen, después de concentración in vacuo 4.3 g de 3 , 6-dimetoxi-bencen-l , 2-diamina como un sólido negro .

LC-MS: tR = 0.48 min.; [M+H] + : 169.09.

BB.2 bencil éster de ácido [3- (2-amino-3 , 6-dimetoxi-fenilcarbamoil) -propil] -metil-carbámico A una solución de 3.1 g de ácido 4- (benciloxicarbonil-metil-amino) -butírico en 80 mL de DCM se agregan 6.5 mL de DIPEA, 1.8 g de HOBt, 2.6 g de EDC y 154 mg de DMAP . Después de agitación durante 10 min, se agregan 2.1 g de 3 , 6-dimetoxi-bencen-l , 2-diamina, disueltos en 20 mL de DCM, y la mezcla es agitada a temperatura ambiente durante toda la noche. La reacción es apagada con NaHC03 acuoso saturado, las fases son separadas y la fase orgánica es lavada con solución salina, secada empleando MgS04 y concentrada in vacuo para proveer el compuesto del título crudo como un aceite negro.

LC-MS: tR = 0.88 min.; [M+H]+: 402.06.

BB.3' bencil éster de ácido [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-carbámico A una mezcla del bencil éster de ácido 3-(2-aminq-3 , 6-dimetoxi-fenilcarbamoil) -propil] -metil-carbámico crudo anterior en 16 mL de tolueno, se agregan 4 mL de DMF y 1.9 g de TsOH y la reacción es calentada hasta 150 °C durante 2 horas en un microondas . Se agrega NaHC03 acuoso saturado y las fases son separadas . La fase orgánica es lavada con solución salina, secada empleando MgS04, concentrada in vacuo, filtrada empleando una almohadilla corta de gel de sílice con EtOAc y nuevamente concentrada. Mediante purificación empleando CC con EtOAc se obtienen 2.7 g de bencil éster de ácido 3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) - propil] -metil-carbámico como una resina café.

LC-MS: tR = 0.85 min.; [ +H] + : 384.62.

BB .4 [3- (4 , 7-Dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amina Una solución de 2.6 g de bencil éster de ácido 3-(4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-carbámico en 60 mL de EtOH se evacúa 3 veces con N2 antes de agregar 260 mg de Pd/C al 10% en peso. La mezcla de reacción es entonces agitada bajo una atmósfera de H2 (balón) durante 5 h a temperatura ambiente. La filtración empleando una almohadilla de celite y el lavado con EtOH proveen después de concentración in vacuo 1.7 g de 3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amina como una espuma café.

LC-MS: tR = 0.57 min.; [M+H] + : 250.13.

Preparación del COMPUESTO Ejemplo de referencia 1A: (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido raéisobutIrico 1.1 (Procedimiento Pl.l): ácido rae- (IR* , 2R* , 4R* ) -(2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético A una solución de 4.0 g de terc-butil éster de ácido rae- (IR* , 2R* , 4R*) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético en 25 mL de EtOH se agregan 2.1 g de LiOH.H20, 8 mL de H20 y 22 mL de MeOH. La mezcla de reacción es agitada a temperatura ambiente durante 3 días y luego es concentrada. El residuo es dividido entre agua y Et20. La fase acuosa es separada y acidificada con HC1 1 N, lo que resulta en la formación de un sólido blanco. El sólido es filtrado, lavado con 5 mL de HC1 acuoso y es secado in vacuo para obtener 3.2 g de ácido rae- (IR* , 2R* , 4R*) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético como un sólido blanco .

LC-MS: tR = 0.86 min.; [M-H20+H] + : 241.28. 1.2 (Procedimiento P1.2): rae- ( IR* , 2R* , 4R* ) -N- [3- ( , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -2- (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -N-metil-acetamida A una solución de 280 mg de ácido rac- (1R* , 2R* , 4R*) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético en 7 mL de THF sea agregan 0.58 mL de DIPEA, 175 mg de HOBt y 250 mg de EDC a temperatura ambiente. Después de agitación durante 10 min, se agregan 270 mg de 3- (4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amina y la mezcla de reacción es agitada a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción es apagada con NaHC03 acuoso saturado, las fases son separadas y la fase orgánica es lavada con agua y solución salina, secada empleando MgS04 y concentrada in vacuo. Mediante purificación empleando CC usando EtOAc-MeOH (5:1 hasta 2:1) se obtienen 475 mg de rac- (1R* , 2R*, 4R*) -N- [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) - propil] -2- (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -N-metil-acetamida como una espuma blanca.

LC-MS: tR = 0.91 min.; [M+H]+: 490.06. 1.3 (Procedimiento Pl.3): rae- (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol A una solución de 310 mg de rae- (IR* , 2R*, 4R*) -N- [3-(4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -2- (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -N-metil-acetamida en 8 mL de tolueno se agregan gota a gota 0.77 mL de una solución de rojo de aluminio (65% en tolueno) a 0 °C. Después de agitación durante 10 min a 0 °C, se retira el baño de enfriamiento y se mantiene la agitación durante 3 ' h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción es cuidadosamente vertida sobre una mezcla de NaOH 1 M/hielo y se agita durante 10 min. La fase acuosa se extracta con tolueno, las fases orgánicas combinadas son lavadas con solución salina, secadas empleando MgS04 y concentradas in vacuo. La purificación mediante CC empleando EtOAc-MeOH (2:1) provee 230 mg de rac- (IR* , 2R*, 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol como una espuma blanca .

LC-MS: tR = 0.79 min.; [M+H]+: 476.13. 1.4: IR*, 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5- en-2-il éster de ácido rac-isobutírico A una solución de 199 mg de rae- (IR* , 2R* , R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol en 4 mL de DCM se agregan 0.2 mL de NEt3 y 0.1 mL de isobutirilcloruro a 0 °C. La mezcla de reacción es agitada durante toda la noche permitiendo que la temperatura alcance lentamente la temperatura ambiente. La reacción es apagada con NaHC03 acuoso saturado, las fases son separadas y la fase acuosa es nuevamente extraída con DCM. Las fases orgánicas combinadas son lavadas con solución salina, secadas empleando MgS04 y concentradas in vacuo. El residuo es re-disuelto en 3 mL de EtOAc, se agregan gel de sílice y 1.5 mL de MeOH y la mezcla es agitada vigorosamente durante 7 días. La mezcla es filtrada, cuidadosamente lavada con EtOAc-MeOH (2:1) y evaporada. Mediante purificación empleando CC usando EtOAc-MeOH (5:1 a 3:1 + 0.1% de NEt3) se obtienen 186 mg de (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster de ácido rac-isobutírico como una espuma beige.

LC-MS: tR = 0.90 min.; [M+H]+: 546.23.

Ejemplo de referencia 2A: (1S, 2S, 4S) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico 2.1: ácido (1S, 2S, 4S) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5- en-2-il) -acético Preparado de conformidad con el procedimiento Pl .1 en el Ejemplo de Referencia 1A empleando el enantiómero B de terc-butil éster de ácido rae- (IR* , 2R* , 4R* ) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético (ver K1A.6) .

LC-MS: tR = 0.91 min . ; [M-H20+H]+: 241.10. 2.2: (1S, 2S, 4S) -2- (2-{ [3- (4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-aminoj-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol Preparado de conformidad con los procedimientos Pl .2 a Pl .3 en el Ejemplo de Referencia 1A empleando el ácido (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético anterior LC-MS: tR = 0.78 min.; [M+H]+: 476.09. 2.3: - (1S, 2S, 4S) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-aminoj-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico Preparado de conformidad con el procedimiento Pl .4 en el Ejemplo de Referencia 1A empleando el 2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol anterior.

LC-MS: tR = 0.89 min.; [M+H] + : 546.19.

Ejemplo de Referencia 3A: (IR, 2R, R) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico 3.1: ácido ( IR, 2R, 4R) - ( 2-Hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético Preparado de conformidad con el procedimiento Pl .1 en el Ejemplo de Referencia 1 empleando el enantiómero A de terc-butil éster de ácido ra - (IR* , 2R* , 4R* ) - (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il) -acético (ver K1A.6) .

LC-MS: tR = 0,91 min. ; [M-H20+H] + : 241,16. 3.2: (ÍR, 2R, 4R) -2-(2-( [3-(4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol Preparado de conformidad con los procedimientos P1.2 a P1.3 en el Ejemplo de Referencia 1 empleando el ácido (2-hidroxi-5-fenil-biciclo [2.2 . 2 ] oct-5-en-2-il) -acético anterior .

LC-MS: tR = 0.79 min.; [M+H] + : 476.09. 3.3: (IR, 2R, 4R) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico Preparado de conformidad con el procedimiento P1.4 en el Ejemplo de Referencia 1A empleando el 2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-ol anterior .

LC-MS: tR = 0.89 min.; [M+H]+: 546.11.

Rotación óptica: alfa D (c = 10 mg/mL EtOH) XH R N (MeOD, 400 MHz) d 7.39-7.37 (m, 2H) , 7.30 (t, J = 6.4 Hz, 2H) , 7.24-7.20 (m, 1H) , 6.60 (s, 2 H) , 6.43 (br d, J = 7.6 Hz, 1H) , 3.91 (s, 6H) , 3.27-3.23 (m, 1H) , 3.18-3.15 (m, 1H) , 2.87 (t, J = 7.6 Hz , 2H) , 2.54 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.47-2.37 (m, 4H) , 2.21 (s, 3H) , 2.19-2.12 (m, 1H) , 2.01-1.92 (m, 5H) , 1.75-1.65 (m, 2H) , 1.48-1.38 (m, 1H) , 1.27-1.19 (m, 1H) , 1.16 (d, J = 7.0 Hz, 6H) .

Ensayos biológicos Ensayo in vitro del canal L La actividad antagonista del canal L (valores IC50) de los Ejemplos de Referencia 1A, 2A, y 3A es determinada de conformidad con el siguiente método experimental.

Se cultivan células de ' riñon de embrión humano (HEK293) que expresan el canal Cavl .2 humano de manera adicional a las sub-unidades auxiliares -2 y a2d-1, en medio de cultivo (DMEM que contiene 10% de suero bovino fetal inactivado mediante calor (FCS) , 100 U/ml de penicilina, 100 g/ml de estreptomicina, 100 µg/ml de G418, 40 g/ml de zeocina y 100 g/ml de higromicina) . Las células son sembradas a 20,000 células/cavidad en placas estériles negras con fondo traslúcido de 384 cavidades (recubiertas con poli-L-lisina, Becton Dickinson) . Las placas sembradas son incubadas durante toda la noche a 37 °C en 5% de C02. La solución de KCl es preparada como una solución base de 80 mM en amortiguador de ensayo (HBSS que contiene 0.1% de BSA, 20 mM de HEPES , 0.375 g/1 de NaHC03, pH ajustado a 7.4 con NaOH) para ser empleada en el ensayo a una concentración final de 20 mM. Los antagonistas son preparados como soluciones base de 10 mM en DMSO, a continuación son diluidas en placas de 384 cavidades primero en DMSO, luego amortiguador de ensayo para obtener soluciones base 3x. El día del ensayo, se agregan 25 µ? del amortiguador de tinción (HBSS que contiene 20 mM de HEPES, 0.375 g/1 de NaHC03, y 3 µ? del indicador fluorescente de calcio fluo-4 AM (solución base de 1 mM en DMSO, que contiene 10% de plurónico) a cada cavidad de la placa sembrada. Las placas con células de 384 cavidades son incubadas durante 60 minutos a 37 °C en 5% de C02 seguido de lavado con 2 x 50 µ? por cavidad empleando amortiguador de ensayo pero dejando 50 µ?/cavidad de este amortiguador para equilibrio a temperatura ambiente (30-60 min) . Dentro del lector de imágenes fluorescentes de placas (FLIPR, Molecular Devices) , se agregan los antagonistas a la placa en un volumen de 25 µ?/cavidad, se incuba durante 3 min., y finalmente se agregan 25 µ?/ cavidad de solución de KCl para la despolarización celular. La fluorescencia es medida para cada cavidad a intervalos de 2 segundos durante 8 minutos, y el área bajo la curva de cada máximo fluorescente es comparada con el área del máximo de fluorescencia inducido por 20 mM de KCl con vehículo en lugar de antagonista. Para cada antagonista, se determina el valor IC50 (la concentración (en nM) de un compuesto necesaria para inhibir un 50 % de la respuesta de fluorescencia inducida por KCl) hasta 10 µ?.

Se han medido los valores IC50 de los compuestos de los compuestos de los ejemplos de referencia 1A, 2A, y 3A, y estos se encuentran en el intervalo de 156 a 439 nM.

Ensayo in vitro del canal T: Se determina la actividad antagonista del canal T (valores IC50) de los Ejemplos de Referencia 1A, 2A, y 3A de conformidad con el siguiente método experimental, y los datos se presentan en la Tabla 1.

Se cultivan células de riñon de embrión humano (HEK293) que expresan el canal Cav3.1 Cav3.2 o Cav3.3 humano, respectivamente, en medio de cultivo (DMEM que contiene 10% de suero bovino fetal inactivado mediante calor (FCS) , 100 U/ml de penicilina, 100 pg/ml de estreptomicina y 1 mg/ml de G418) . Las células son sembradas a 20,000 células/ cavidad en placas estériles negras de fondo traslúcido de 384 cavidades (recubiertas con poli-L-lisina, Becton Dickinson) . Las placas sembradas son incubadas durante toda la noche a 37 °C en 5% de C02. La solución de Ca2+ es preparada como una solución base de 100 mM en 100 mM de cloruro de tetraetilamonio (cloruro de TEA), 50 mM de HEPES, 2.5 mM de CaCl2, 5 mM de KCl, 1 mM de MgCl2, pH ajustado a 7.2 con hidróxido de TEA, para ser empleado en el ensayo a una concentración final de 10 mM. Los antagonistas son preparados como soluciones base de 10 raM en DIVISO, y posteriormente diluidas en placas de 384 cavidades, en primer lugar en DMSO, luego en 100 mM de cloruró de TEA, 50 mM de HEPES, 2.5 mM de CaCl2, 5 mM de KC1, 1 mM de MgCl2, pH ajustado a 7.2 con hidróxido de TEA, para obtener soluciones base 9x. El día del ensayo, se agregan a cada cavidad de la placa sembrada 25 µ? de amortiguador de tinción (HBSS que contiene 20 mM de HEPES, 0.375 g/1 de NaHC03 y 3 µ? del indicador fluorescente de calcio fluo-4 AM (solución base de 1 mM en DMSO, que contiene 10% de plurónico) . Las placas de 384 cavidades con células son incubadas durante 60 min a 37 °C en 5% de C02 seguido de lavado con 2 x 50 µ? por cavidad' empleando HBSS que contiene 0.1% de BSA, 20 mM de HEPES, 0.375 g/1 de NaHC03 , dejando 50 µ?/ cavidad de este amortiguador para equilibrio a temperatura ambiente (30-60 min) . Dentro del lector de imágenes fluorescentes de placas (FLIPR, Molecular Devices) , se agregan los antagonistas a la placa en un volumen de 6.25 µ?/ cavidad, se incuba durante 3 min, y finalmente se agregan 6.25 µ?/ cavidad de solución de Ca2+. La fluorescencia se mide para cada cavidad a intervalos de 2 segundos durante 8 minutos, y el área bajo la curva de cada máximo de fluorescencia se compara con el área del máximo de fluorescencia inducido por 10 mM de Ca2 + con vehículo en lugar de un antagonista. Para cada antagonista se determina el valor IC50 (la concentración (en nM) de compuesto necesaria para inhibir un 50% de la respuesta fluorescente inducida por Ca2+) hasta ·10 µ? .

Tabla 1: Efecto sobre corazones aislados de conformidad con el método de Langendorff (Lgdff) Los Ejemplos de Referencia 1A, 2A, y 3A son probados por su potencial para reducir la presión sanguínea y su efecto en la contractabilidad del músculo cardíaco. Los valores EC50 en corazones aislados de ratón son determinados de conformidad con la literatura (Doring HJ. , The isolated perfused heart according to Langendorff technigue—function— application, Physiol. Bohemoslov. 1990, 39(6), 481-504; Kligfield P, Horner H, Brachfeld N. , A model of graded ische ia in the isolated perfused rat heart, J. Appl. Physiol. 1976 Jun, 40(6), 1004-8).

El compuesto del ejemplo de referencia 1A ha sido medido empleando el procedimiento descrito anteriormente para el experimento de Langendorff con un EC50 de 5 nM.

II. Preparación de las formas salinas del COMPUESTO II . a) Procedimiento general para la formación de una sal con el COMPUESTO: Se disuelve 1 eq. , de COMPUESTO en el SOLVENTE 1. La solución es llevada a 50 °C. Se agregan 2 equivalentes de ácido disueltos en SOLVENTE 2. La mezcla es agitada a 50 °C durante 5 min y la fuente de calor es apagada. Se permite que la mezcla se enfríe hasta temperatura ambiente durante 1 hora. Si se observa un precipitado, la mezcla es filtrada y el sólido es aislado. En el caso en que no se obtenga sólido, la mezcla es evaporada a sequedad y se agregan 6 volúmenes de heptano. La mezcla es calentada a reflujo, se agregan 3 volúmenes de EtOAc hasta que todo se disuelva. En el caso én que la disolución no esté completa, se agregan 3 volúmenes adicionales de EtOAc . Si la disolución aún no es completa, se agrega tan poco como sea posible de MeOH hasta la disolución se completa. Se permite que la mezcla se enfríe lentamente hasta temperatura ambiente. A temperatura ambiente el contenedor es raspado con una espátula y es enfriado aún más hasta 0 °C. La mezcla es filtrada y la solución es evaporada hasta sequedad en un rotavapor.

Tal como se lo emplea en este texto, el término "volúmenes" significa 1 L por 1 kg de material sólido.

SOLVENTE 1 = 8 volúmenes EtOAc para: ácido bencensulfónico, ácido benzoico, ácido salicílico, sacarina, ácido para-toluensulfónico, ácido malónico, ácido metanosulfónico, ácido naftalen-2-sulfónico, ácido naftalen-1 , 5-disulfónico, ácido etansulfónico, ácido málico, ácido glicólico, ácido cetoglutárico, y ácido fumárico,- SOLVENTE 1 = 1.8 volúmenes de EtOAc para: ácido bromhídrico, y ácido clorhídrico; SOLVENTE 1 = 8 volúmenes de acetona para: ácido sulfúrico, y ácido fosfórico; SOLVENTE 1 = 7 volúmenes de acetona para: ácido cítrico, ácido succínico, y ácido tartárico.

SOLVENTE 2 = 7 volúmenes de EtOAc para: ácido cítrico; SOLVENTE 2 = 3 volúmenes de EtOAc para: ácido bencensulfónico, ácido benzoico, ácido metanosulfónico, ácido salicílico, y sacarina (parcialmente soluble) ; SOLVENTE 2 = 3 volúmenes MeOH para: ácido para-toluensulfónico, ácido malónico, ácido naftalen-2-sulfónico, ácido naftalen-1 , 5-disulfónico, ácido málico, ácido glicólico, ácido cetoglutárico, y ácido fumárico; SOLVENTE 2 = 15 volúmenes de acetona para: ácido succínico; SOLVENTE 2 = 12 volúmenes de EtOH para: ácido tartárico; SOLVENTE 2 = agua para: ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, y ácido fosfórico.

Los resultados obtenidos empleando el procedimiento general descrito anteriormente se resumen en las Tablas 1 y 2. En el caso en que se hayan empleado procedimientos particulares para la preparación de las formas cristalinas de las sales del COMPUESTO, tales procedimientos se describen en el Ejemplo de Referencia SI y en los Ejemplos S2 a S7 más adelante .

Tabla 1: Datos de caracterización para las formas de sales cristalinas del COMPUESTO obtenidas de conformidad con el procedimiento general Sal Punto de fusión/ 1H-RMN XRPD sal de Punto de fusión a aproximadamente 93 °C. Cristalino ácido 1H-RMN consistente con la estructura. , forma di-brom El diagrama de difracción de rayos X medido cristalina hídrico con el método 2 muestra máximos que tienen una idéntica intensidad relativa, en comparación con el al Ejemplo máximo de mayor intensidad en el diagrama, con S7 más los siguientes porcentajes (las intensidades adelante relativas de los máximos se presentan entre paréntesis) en los ángulos de refracción 2- theta indicados (Se informan los máximos seleccionados desde el intervalo 8-26.5° 2- theta con una intensidad relativa mayor que 10%): 9.1° (22%), 9.5° (62%), 12.3° (23%), 12.6° (27%), 14.1° (36%), 14.6° (18%), 15.3° (86%), 15.8° (49%), 17.0° (71%), 17.9° (100%), 19.1° (81%), 19.6° (67%), 20.2° (52%), 20.6° (44%), 21.1° (54%), 22.5° (35%), 23.6° (16%), 24.5° (48%), 25.0° (42%), 25.4° (28%), y 26.1° (43%) . Los máximos anteriores corresponden con la Figura 7 medida para el Ejemplo S7 más adelante. Un corrimiento de 2-theta de 0.2- 0.3° puede ser explicado por el uso del método 1 para la medición del diagrama de difracción de rayos X en el Ejemplo S7. sal de ácido 1H-RMN (D6-D S0, 400 MHz, sólo se Cristalino, sesqui- describen los máximos principales) d 8.88 ver Figura naftalen-1 , 5- (d, J = 9.2 Hz, 2.7 H, 1.5 moléculas de 8 disulfónico ácido naftalen-1 , 5-disulfónico) , 7.94 (d, J = 7.0 Hz, 2.7 H, 1.5 moléculas de ácido naftalen-1, 5-disulfónico) , 7.47-7.25 (m, 8.6 H, 1.5 moléculas de ácido naftalen- 1, 5-disulfónico + 5H) , 6.99 (s, 2H) , 6.54 (dd, J = 8.0 Hz, 1H) , 3.94 (s, 6H) , 3.24- 3.03 (m, 8H) , 2.72 (s, 3H) , 2.56 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 1.14-1.06 (m, 6H) . sal de ácido 1H-RMN (MeOD, 400 MHz) d 7.84-7.80 (m, Cristalino, di- 4H, 2 moléculas de ácido ver Figura bencensulfónico bencensulfónico) , 7.45-7.38 (m, 8H, 2 9 moléculas de ácido bencensulfónico + 2H) , 7.34-7.29 (m, 2H) , 7.26-7.22 (m, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 6.51 (br d, J = 6.4 Hz, 1H) , 4.00 (s, 6H) , 3.32-3.20 (m, 8H) , 2.87 (S, 3H) , 2.60 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.46-2.27 (m, 4H) , 2 06-1 97 (m, 1H) , 1.95-1.91 (m, 1H) , 1.76-1 69 (m, 2H) , 1.49-1.40 (m, 1H), 1..29-1 22 (m, 1H) , 1.19 (d, J 2.9 Hz, 3H) , 1.18 (d, = 2. 9 Hz, 3H) . sal de ácido XH-RMN (MeOD, 400 MHz) d 7.48-7.46 (m, Cristalino, di- 2H) , 7.35-7.31 (m, 2H) ,. 7.27-7.24 (m, ver Figura etansulfónico 1H) , 7.00 (s, 2H) , 6.55 (dd, J = 7.0, 1.2 10 Hz, 1H) , 4.01 (s, 6H) , 3.22-3.15 (m, 8H) , 2.87 (s, 3H) , 2.79 (q, J = 7.8 Hz, 4 H, 2 moléculas de ácido etansulfónico) , 2.62 (sept, J = 7.2 Hz, 1H) , 2.50-2.29 (m, 4H) , 2.07-1.94 (m, 2H) , 1.80-1.71 (m, 2H) , 1.50-1.41 (m, 1H) , 1.29 (t, J = 7.8 Hz, 6H, 2 moléculas de ácido etansulfónico) , 1.23-1.27 (m, 1H) , 1.22 (d, J = 1.9 Hz, 3H) , 1.19 (d, J = 2.4 Hz , 3H) . sal de ácido 1H-RMN (MeOD, 400 MHz) d 8.34 (br s, 2H, Cristalino, di-naftalen-2- 2 moléculas de ácido naftalen-2- ver Figura sulfónico sulfónico) , 7.91-7.85 (m, 8H, 2 moléculas 11 de ácido), 7.57-7.51 (m, 4H, 2 moléculas de ácido naftalen-2-sulfónico) , 7.38-7.35 (m, 2H) , 7.39-7.19 (m, 3H) , 6.88 (s, 2H) , 6.44 (br d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.95 (s, 6H) , 3.31-3.10 (m, 8H) , 2.87 (s, 3H) , 2.58 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.47-2.25 (m, 4H) , 2.04-1.94 (ra, 1H) , 1.93-1.86 1H) , 1.74-1.64 (m, 2H) 1.46-1.36 (m, 1H) , 1.27-1.19 (m, 1H) 1.18 (d, J = 1 Hz, 3H) , 1.16 (d, J = 2.4 Hz, 3H) .

Tabla 2: Datos de caracterización para formas salinas adicionales del COMPUESTO obtenidas de conformidad con el procedimiento general Ejemplo de Referencia SI: Preparación y caracterización de la sal de ácido di-clorhídrico del COMPUESTO Se agregan 7.598 mL de HC1 acuoso (0.1 N) a 200.7 mg del COMPUESTO, lo que resulta en una suspensión blanca. Se agregan 5 mL de 2-PrOH y la solución transparente que se obtiene es evaporada a sequedad bajo nitrógeno. Se agregan 4 mL de TBME al residuo y la suspensión es entonces agitada con un ciclo de temperatura (TI = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de mantención 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5°C/h, 500 rpm) . Después de 18 repeticiones la suspensión es filtrada y el sólido es secado en vacío para proveer 265 mg de la ' sal del ácido di-clorhídrico del COMPUESTO .

Tabla SI: Datos de caracterización de la sal del ácido di- clorhídrico del COMPUESTO Ejemplo S2 : Preparación y caracterización de la sal de ácido di-metanosulfónico del COMPUESTO Se agregan 0.0476 mL de ácido metanosulfónico a una solución clara de 199.7 mg del COMPUESTO disueltos en 7 mi de EtOAc . La . solución clara es evaporada a sequedad bajo nitrógeno y el residuo obtenido es suspendido y agitado en 4 mL de una mezcla EtOAc/ eptano (1:3) con un ciclo de temperatura (TI = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de mantención 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5°C/h, 500 rpm) . Después de 18 repeticiones la suspensión es filtrada y el sólido es secado al vacío. El sólido obtenido es suspendido y agitado en 1 mL de TBME (ciclo de temperatura: TI = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de mantención 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5°C/h, 500 rpm) . Después de 18 repeticiones la suspensión es filtrada y el sólido es secado al vacío para proveer la sal de ácido di-metanosulfónico del COMPUESTO.

Tabla S2 : Datos de caracterización para la sal de ácido di- metanosulfónico del COMPUESTO Técnica Resumen de los datos Observaciones XRPD Cristalino ver Figura 2 1H-RMN XH R N (MeOD, 400 Hz) d 7.48-7.46 (m. 2H) , 7.35-7.32 (m, 2H) , 7.27-7.23 (m, 1H) , 7.00 (s, 2H) , 6.57 (br d, J = 7.0 Hz, 1H) , 4.01 (s, 6H) , 3.35-3.20 (m, 8H) , 2.89 (s, 3H) , 2.71 (s, 6H, 2 moléculas de ácido metansulfónico) , 2.63 (sept, J = 7.2 Hz, 1H) , 2.53- 2.26 (m, 4H) , 2.07-1.94 (m, 2H) , 1.79-1.71 (m, 2H) , 1.51-1.42 (m, 1H) , 1.32-1.23 (m, 1H) , 1.21 (d, J = 2.4 Hz, 3H) , 1.20 (d, J = 1.8 Hz, 3H) .

Análisis elemental Consistente con la sal de ácido di- metansulfónico .

Ejemplo S3: Preparación y caracterización de la sal de ácido di-para-toluensulfónico del COMPUESTO Se disuelven 199.7 mg del COMPUESTO en 7 mL de EtOAc. Se agregan 139.2 mg de ácido para- oluensulfonico disueltos en 10 mL de EtOAc . La solución clara se evapora a sequedad bajo nitrógeno y el residuo se suspende en 4 mL de una mezcla EtOAc/Hept (1:3), y se agita con un ciclo de temperatura (ciclo de temperatura: TI = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de mantención 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5 °C/h, 500 rpm) . Después de 18 ciclos el solvente es evaporado bajo vacío y el residuo sólido es suspendido en 2 mi de EtOAc. Después de una sonicación breve (3 min) la suspensión es agitada con un ciclo de temperatura (ciclo de temperatura: TI = 20 °C, T2 = 25 °C, tiempo de mantención 1 h, respectivamente; tasa de calentamiento y de enfriamiento 5 °C/h, 500 rpm) . Después de 18 repeticiones la suspensión es filtrada y el sólido es secado al vacío para proveer 173.8 mg de la sal de ácido di-para-toluensulfónico del COMPUESTO.

Tabla S3 : Datos de caracterización para la sal de ácido di-para-toluensulfónico del COMPUESTO Técnica Resumen de los datos Observaciones XRPD Cristalino ver Figura 3 1H-RMN lH RMN (MeOD, 400 MHz) d 7.71-7.68 (ra, 4H, 2 moléculas de TsOH), 7.45-7.42 (m, 2H, 2 moléculas de TsOH) , 7.34-7.30 (m, 2H, 2 moléculas de TsOH) , 7.27-7.25 (m, 1H) , 7.21-7.19 (m, 4H) , 7.00 (s, 2H) , 6.35 (br d, J = 8.0 Hz, 1H) , 4.00 (s, 6H) , 3.23-3.15 (m, 8H) , 2.87 (s, 3H) , 2.60 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.36 (s, 6H, 2 moléculas de TsOH) , 2.36-2.29 (m, 4H) , 2.01-1.98 (m, 1H) , 1.97-1.91 (m, 1H) , 1.75-1.69 (m, 2H) , 1.49-1.41 (m, 1H) , 1.32-1.23 (m, 1H) , 1.20 (d, J = 2.9 Hz, 3H) , 1.17 (d, J = 2.9 Hz, 3H) .

Análisis Consistente con sal di-para- elemental toluensulfónica .

Ejemplo S4 : Preparación y caracterización de la sal de ácido sulfúrico del COMPUESTO Se agregan 0.733 mL de ácido sulfúrico acuoso (0.5 M) a una solución de 200.2 mg del COMPUESTO en 10 mL de MEK, lo que resulta en una solución clara. Después de 2 días la suspensión obtenida es filtrada y el sólido es secado al vacío durante 1 h, proveyendo la sal de ácido mono- sul fúrico del COMPUESTO, conteniendo aproximadamente 6 equivalentes de agua .

Tabla S4 : Datos de caracterización para la sal de ácido di- sulfúrico del COMPUESTO Ejemplo S5: Preparación y caracterización de la sal de ácido di-maleico del COMPUESTO Se agrega ácido maleico (256 g, 2.2 mol, 2.1 eq) , disuelto en MeOH (630 mL, 1.1 volúmenes) a una solución a reflujo del COMPUESTO (682 g, 84% peso/peso (ensayo RMN) , 1.05 mol) en EtOAc (6.3 L, 11 volúmenes). La mezcla resultante se agita bajo reflujo durante 15 minutos y a continuación es enfriada hasta 65-68 °C dentro de 30 minutos y es sembrada con 0.04% peso/peso de cristales de siembra de sal de ácido di-maleico del COMPUESTO (Los cristales de siembra se obtienen después de una cristalización cuidadosa empleando el mismo protocolo) . La mezcla es entonces enfriada desde 65-68 °C hasta 40 °C dentro de 3 h. La suspensión obtenida es entonces enfriada hasta 20 °C durante 1 h, filtrada bajo 0.2 bar de nitrógeno y lavada con EtOAc (1,500 mL, 2.6 volúmenes) . El sólido blanco obtenido es entonces secado bajo 1 atmósfera de nitrógeno durante 24 horas para proveer 715 g (88%) de la sal de ácido di-maleico del COMPUESTO .

Tabla S5: Datos de caracterización para la sal de ácido di- maleico del COMPUESTO Técnica Resumen de los datos Observaciones XRPD Cristalino ver Figura 5 DSC Endoterma de fusión con punto de fusión a aproximadamente 147 °C Hí-R N LH RMN ( eOD, 400 MHz) d 7.31-7.21 (m, 5H) , 6.68 (s, 2 H) ( 6.38 (br d, J = 5.8 Hz, 1H) , 6.27 (s, 4H, 2 moléculas de ácido maleico) , 3.88 (s, 6H) , 3.32-3.10 (m, 8H) , 2.86 (s, 3H) , 2.60 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.52-2.45 (m, 2H) , 2.29- 2.23 (m, 2H) , 2.06-2.02 (m, 1H) , 1.96 (dd, J = 14.2, 2.4 Hz, 1H) , 1.76-1.69 (m, 2H) , 1.48-1.39 (m, 1H) , 1.29-1.21 (m, 1H) , 1.19 (d, J = 2.5 Hz, 3H) , 1.18 (d, J = 2.5 Hz, 3H) .

Análisis Consistente con la sal de ácido di- elemental maleico .

Higroscopicidad No higroscópico (cambio de masa de 0.1%) Ejemplo 36: Preparación de la sal sesqui-fumarato del COMPUESTO Se disuelven 199.5 mg de COMPUESTO en 5 mL de EtOAc . Se agrega lentamente una solución clara de 85.4 mg de ácido fumárico en 5 mL de THF . La solución clara que se obtiene es concentrada hasta 3 mL de solución bajo nitrógeno, lo que produce precipitación. La mezcla es filtrada y el sólido es secado al vacío. El sólido obtenido es la sal de ácido sesqui-fumárico del COMPUESTO.

Tabla S6 : Datos de caracterización para la sal de ácido sesqui-fumárico del COMPUESTO Técnica Resumen de los datos Observaciones XRPD Cristalino ver Figura 6 DSC Endoterma de fusión con punto de fusión a aproximadamente 180°C H-RMN H RMN (MeOD, 400 MHz) d 7.25-7.20 (m, 5H) , 6.73 (s, 3 H, 1.5 moléculas de ácido fumárico) , 6.59 (s, 2H) , 6.35 (dd, J = 7.1, 1.6 Hz, 1H) , 3.86 (s, 6H) , 3.29-3.22 (m, 4H) , 3.22-3.18 (m, 1H) , 3.15-3.11 (m, 3H) , 2.85 (s, 3H) , 2.60 (sept, J = 7.0 Hz, 1H) , 2.53-2.46 (m, 2H) , 2.28-2.21 (m, 2H) , 2.07-1.98 (m, 1H) , 1.96 (dd, J = 14.0, 2.8 Hz, 1H) , 1.76-1.69 (m, 2H) , 1.48-1.39 (m, 1H) , 1.29-1.21 (m, 1H) , 1.19 (d, J = 2.8 Hz, 3H) , 1.18 (d, J = 2.8 Hz, 3H) .

Análisis Consistente con la sal de ácido sesqui- elemental fumárico .

Higroscopicidad No higroscópica (cambio de masa de 0.1%)' Ejemplo S7: Preparación de la sal de ácido di-bromhldrico del COMPUESTO Se agregan lentamente 0.3665 mL de ácido bromhídrico acuoso 2 molar a una solución de 199.8 mg del COMPUESTO en 0.4 mi de THF y la suspensión obtenida es calentada (pistola de aire caliente) . La solución clara es enfriada hasta temperatura ambiente, lo que produce una precipitación. Se agregan 3 mL de THF, la suspensión es agitada, filtrada y el sólido es secado al vacío (1 h, 3 mbar) . El sólido obtenido es la sal del ácido di-bromhídrico del COMPUESTO que contiene aproximadamente 3 equivalentes de agua.

Tabla S7 : Datos de caracterización para la sal del ácido di- bromhídrico del COMPUESTO Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico; caracterizada porque consiste en: . 1 equivalente de (IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi- lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5- fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico ; • un componente ácido que- consiste de 1 a 2 equivalentes de un ácido seleccionado desde el grupo que consiste de ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido metanosulfónico, ácido para- toluensulfónico, ácido bencensulfónico, ácido naftalen- 1 , 5-disulfónico, ácido naftalen-2-sulfónico, y ácido etansulfónico; y • 0 a 5 equivalentes de agua.

2. Sal cristalina del compuesto ( IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el compuesto es (IR, 2R, 4R) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutí>:ico enantioméricamente enriquecido.

3. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil ) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizada porque el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1 ó 2 equivalentes de ácido bromhídrico, 1 ó 2 equivalentes de ácido sulfúrico, 1 ó 2 equivalentes de ácido maleico, 1 a 2 equivalentes de ácido fumárico, 1 ó 2 equivalentes de ácido metanosulfónico, 1 ó 2 equivalentes de ácido para-t'oluensulfónico, 1 ó 2 equivalentes de ácido bencensulfónico, 1 a 2 equivalentes de ácido naftalen-1 , 5-disulfónico, 1 ó 2 equivalentes de ácido naftalen-2-sulfónico, o 1 ó 2 equivalentes de ácido etansulfónico .

4. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido bromhídrico, 2 equivalentes de ácido maleico, o 1.5 equivalentes de ácido fumárico.

5. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4, 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il áster del ácido isobutlrico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la sal cristalina consiste en: • 1 equivalente del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil- amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico; • 2 equivalentes de ácido maleico; y • 0 equivalentes de agua.

6. Sal cristalina del compuesto ( IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 10.15°, 20.39°, y 22.63°; en el cual el diagrama de difracción en polvo de rayos X es obtenido mediante el uso de radiación Cu Kal; y la precisión de los valores 26 se encuentra en el intervalo de 2T +/- 0.2°.

7. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.07°, 8.19°, 10.15°, 15.26°, 17.61°, 20.39°, 22.63°, 23.93°, 24.27°, y 25.61°; en el cual el diagrama de difracción en polvo de rayos X es obtenido mediante el uso de radiación Cu Kal; y la precisión de los valores 2T se encuentra en el intervalo de 2T +/- 0.2°.

8. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R*, 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque tiene un punto de fusión de aproximadamente 147 °C tal como se determina mediante calorimetría de escaneo diferencial empleando el método descrito en este texto.

9. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque se obtiene mediante: 1. Sometiendo a reflujo una solución de (IR* , 2R* , 4R*) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il ) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico (682 g, 84% peso/peso, 1.05 mol) en EtOAc (6.3 L, 11 volúmenes); 2. adición de ácido maleico (256 g, 2,2 mol, 2,1 eq) disueltos en MeOH (630 mL, 1,1 volúmenes); 3. agitación de la mezcla resultante a reflujo durante 15 minutos y enfriamiento hasta 65-68 °C dentro de 30 minutos ; 4. siembra opcional con 0.04% peso/peso de cristales de siembra; 5. enfriamiento de la mezcla hasta 40 °C dentro de 3 horas ; 6. enfriamiento de la mezcla hasta 20°C dentro de 1 hora; 7. filtración del sólido bajo 0'.2 bar de nitrógeno y lavado del sólido con EtOAc (1500 mL 2.6 volúmenes) ; y 8. secado del sólido bajo 1 atmósfera de nitrógeno durante 24 horas.

10. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , R*) -2-(2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el componente ácido de la sal cristalina consiste de 1.5 equivalentes de ácido fumárico.

11. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R* ) -2- (2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 5.27°, 8.05°, y 20.61°; en el cual el diagrama de difracción en polvo de rayos X es obtenido mediante el uso de radiación Cu Kal; y la precisión de los valores 2T se encuentra en el intervalo de 2T +/- 0.2°.

12. Sal cristalina del compuesto ( IR* , 2R* , 4R* ) -2-(2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de ' las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el componente ácido de la sal cristalina consiste de 2 equivalentes de ácido bromhídrico.

13. Sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R*) -2-(2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque presenta picos en el diagrama de difracción en polvo de rayos X en los siguientes ángulos de refracción 2T: 9.3°, 15.6°, y 17.3°; en el cual el diagrama de difracción en polvo de rayos X es obtenido mediante el uso de radiación Cu Kal; y la precisión de los valores 2T se encuentra en el intervalo de 2T +/- 0.2°.

14. Composición farmacéutica caracterizada porque comprende una sal cristalina del compuesto (IR* , 2R* , 4R* ) -2-(2- { [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, y un portador farmacéuticamente aceptable .

15. El uso como medicamento de la sal cristalina del compuesto ( IR* ,2R*,4R*)-2-(2-{ [3- ( , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino} -etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a' 13, o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15.

16. Uso de una sal cristalina del compuesto (IR* , 2R*, 4R* ) -2- (2-{ [3- (4 , 7-dimetoxi-lH-benzoimidazol-2-il) -propil] -metil-amino}-etil) -5-fenil-biciclo [2.2.2] oct-5-en-2-il éster del ácido isobutírico de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento o la prevención de angina estable crónica, hipertensión, isquemia (renal y cardiaca) , arritmias cardiacas incluyendo fibrilacion atrial, hipertrofia cardiaca, o insuficiencia cardiaca congestiva.