MX2011002204A - Aceite comestible que contiene sn-2 miristato. - Google Patents

Abstract

Se describe una composición a base de grasa o aceite nutricional para incrementar el nivel de colesterol HDL, reducir el nivel de colesterol LDL y reducir la relación de colesterol LDL/HDL en el plasma de un ser humano. La composición ventajosamente puede incluir por lo menos 1% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, incluye entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, y además incluye entre 30% y 65% en peso de ácido oleico y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados. La relación de ácido sn-2 mirístico y ácido sn-2 palmítico es típicamente mayor que 1:1 y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos saturados, mono-saturados y poliinsaturados es igual a 100%. En casos deseables, la composición está substancialmente libre de colesterol.

Description

ACEITE COMESTIBLE QUE CONTIENE SN-2 MIRISTATO SOLICITUDES RELACIONADAS No aplicable.

CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a composiciones y métodos para aumentar el nivel de colesterol HDL, reducir el nivel de colesterol LDL y la relación de LDL a HDL en plasma humano al suplementar o remplazar grasas dietéticas convencionales con una clase particular de grasas dietéticas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La siguiente discusión se proporciona únicamente para ayudar al entendimiento del lector, y no constituye una admisión de que cualquier información discutida o referencias citadas constituyen la técnica previa para la presente invención.

En los pasados 40 años se ha reportado un ensayo clínico que estudia grasas dietéticas y su papel al modular especies mayores de lipoproteínas de plasma. Se ha escrito un número de artículos de revisión sobre ei tema de enfermedad cardiaca coronaria, controlar los niveles de colesterol en plasma (por ejemplo, Steigberg y otros 1999; JAMA, 282(21): 2043-2050) y específicamente en el papel de grasas dietéticas al alternar niveles de lipoproteína de plasma (por ejemplo, Mensink y otros 2003; Am J Clin Nutr, 77:1146-1155). Otro ensayo ha estudiado cambios en niveles de lipoproteína que result n de grasas dietéticas que son ricas en varios ácidos grasos. Por ejemplo, Tholstrup y otros (1994; Am J Clin Nutr, 59:371-377) estudiaron cambios en niveles de lipoproteína que resultan de dietas ricas en diferentes ácidos grasos saturados que incluyen ácido esteárico (proporcionado por manteca de karité), ácido palmítico (aceite de palma) y ácidos laúrico y miristico (proporcionados por aceite del núcleo de palma).

Por más de treinta años los investigadores han estudiado y comparado diferentes ácidos grasos por sus capacidades de elevar o descender los niveles de colesterol generales en plasma humano. Aunque existen opiniones divergentes sobre muchos aspectos de este tema, la mayoría de los expertos nutricionales acuerdan que la clase saturada de ácidos grasos (aquí abreviado SFA) eleva niveles de colesterol totales (en lo sucesivo abreviado a niveles TC), mientras los ácidos grasos poliinsaturados (en lo sucesivo abreviado PUFA) los disminuye, y ácidos de grasa mono-insaturados (MUFA), por ejemplo, ácido oleico, son más naturales en su efecto.

Como un punto de aclaración y para evitar confusión, las grasas que contienen la mayoría de SFA se denominan grasas saturadas (o SATS) aunque aquellas grasas que contienen la mayoría de MUFA se denominan grasas mono-insaturadas (o MONOS), y aquellas grasas que contienen la mayoría de PUFA se denominan grasas poliinsaturadas (o POLYS). Más allá de esta vista simplista, también se entiende que el metabolismo de especies de ácido graso individuales dentro de cada clase, puede impactar los niveles de colesterol HDL y LDL a diferentes grados.

Un número de estudios de investigación ha utilizado análisis de regresión para sugerir que de los SFA más comunes que incluyen ácido laúrico (C12:0), ácido mirístico (C14:0) ácido palmitico (C16:0) y ácido esteárico (C18:0) encontrado en muchas grasas y aceites comestibles, el ácido mirístico con 14 átomos de carbono y 0 sitios insaturados de carbón-carbón (C14:0) parece ser muy potente al elevar niveles de colesterol totales (TC) en el plasma. Consistente con estos hallazgos, algunos fabricantes de alimentos procesados evitan el uso de grasas de endurecimiento tal como aceite de coco o aceite de núcleo de palma que contienen altos niveles de ácido mirístico, a favor de estearina de palma y aceite de palma regular que también son grasas de endurecimiento, pero contienen altos niveles de ácidos palmitico y esteárico a su vez.

De esa forma, una margarina comercial recientemente producida conocida como un cable de despensa Smart Balance® (GFA Brands, Inc., Cresskill, NJ) que combina las propiedades de disminución de colesterol LDL benéficas de PUFA, por ejemplo, encontradas en aceite de soya, con la propiedad de endurecimiento de aceite benéfica y propiedad de elevación de colesterol HDL de SFA, incorpora aceite de palma en lugar de aceite de núcleo de palma para lograr la textura endurecida de requisito. Esta margarina y las mezclas de grasas saludables relacionadas se basan en el trabajo de Sundram y otros, descrito en la Patente de E.U.A. No. 5,578,334, No. 5,843,497, No. 6,630,192 y 7,224,653 incorporadas aquí en sus totalidades. Sundram y otros describen una composición de grasa mezclada libre de colesterol que combina una grasa poliinsaturada (como aceite linoleico que proporciona entre 15% y 40% en peso de la composición), y una grasa saturada libre de colesterol (con uno o más SFA del grupo que incluye táurico, mirístico, y palmítico que proporciona entre 20% y 40% en peso de la composición). El efecto de la grasa saturada, es decir, aceite de palma, en esta margarina es aumentar tanto los niveles de colesterol HDL como LDL mientras el efecto del aceite vegetal poliinsaturado es disminuir el colesterol LDL. El efecto neto de consumir regularmente tal composición de mezcla de grasa en lugar de una grasa dietética americana típica se mostró para hacer un aumento modesto en la concentración de HDL y un aumento en la relación de concentración HDL/LDL en la sangre.

Con respecto a la selección de aceite de palma como una grasa saturada, en la Patente de E.U.A. No. 5,578,334 se mostró, por Khosla y Hayes (Biochem, Biophys, Acta; 1991, 1083: 46-50), que la combinación de ácidos laúricos y miristicos encontrada en el aceite de núcleo de palma o aceite de coco puede producir un-1 grupo LDL mayor y una relación HDL/LDL más pobre (inferior) que ácidos palmíticos y oleicos. Similarmente Mensink (Am J Clin Nutr, 1993; 57 (suppl.) 711S-714S) señala que el ácido mirístico es más hipercolesterolémico que el ácido palmítico. Estos y otros estudios han llevado a la conclusión que los ácidos grasos 12:0 y 14:0 dietéticos son peor que 16:0 y 18:0 en términos de elevar LDL, y ha vuelto a asegurar que el aceite de palma en lugar del aceite de núcleo de palma se utiliza usualmente como espesante en margarinas y en acortamientos de horneado y fritura. Consistente con estos hallazgos, Sundram y otros en las series antes citadas de las patentes de EíU.A. indican que el ácido palmítico (en lugar de ácido laúrico o mirístico) es el ácido graso saturado preferido que se va a incluir en la composición grasa (ver, por ejemplo, reivindicaciones 11 y 12 en la Patente de E.U.A. No. 7,229,653).

Como se discutió en lo anterior brevemente, existe un cuerpo de investigación en donde se han estudiado los SFA de diferente longitud de cadena por sus capacidades de aumentar niveles de colesterol de plasma HDL y LDL. Más recientemente, alguna investigación se ha reportado concerniente al efecto posicional de ácidos grasos dentro de la molécula de triglicérido. Es decir, la capacidad de un ácido graso debe alterar niveles de colesterol de plasma puede depender de cuál de las tres posiciones de glicerina-éster, es decir, las sn-1 y sn-3 (posiciones de extremo), o la sn-2 (posición media) ocupa. Este efecto posicional puede ser debido a la diferencia en separación enzimática y degradación preferencial contra absorción del ácido graso. Por ejemplo, las enzimas de lipasa pancreática que separan ácidos grasos individuales de la estructura de base de glicerol de la molécula grasa selectivamente hidrolizan y remueven los ácidos grasos y las posiciones sn-1 y sn-3 mientras dejan el ácido graso sn-2 unido a la estructura de base de glicerol para generar un monoglicérido sn-2. El último puede absorberse en · las células intestinales y reformarse como un triglicerido o fosfolípidos para transporte en la corriente sanguínea. Algunas de estas moléculas pueden alcanzar el hígado en donde pueden afectar el colesterol y el metabolismo de triglicérido en formas variadas y complejas. Es bien conocido que los ácidos grasos libres liberados de TG por la acción de varias lipasas en el intestino, vasos sanguíneos periféricos, o tejido adiposo pueden catabolizarse para proporcionar energía para el cuerpo, o pueden utilizarse en la resíntesis de triglicéridos.

Para el beneficio del lector, lo siguiente es una breve descripción que muestra la digestión, transporte y oxidación de grasa. Los ácidos grasos se ingieren principalmente como triglicéridos, es decir, grasas y aceites, que no pueden absorberse inmediatamente por el intestino. Las grasas se dividen en ácidos grasos libres más monoglicéridos por la enzima de lipasa pancreática que en se une con una proteína denominada colipasa que es necesaria para su actividad. El complejo puede funcionar únicamente en una interfase de agua-grasa. Para que la digestión de grasa enzimática sea eficiente, es esencial que los ácidos grasos y las grasas se emulsionen por sales de bilis de la vesícula biliar. Las grasas absorben como ácidos libres de grasa y 2-monogliceridos, pero se absorbe una pequeña fracción como libre de glicerol y como glicéridos. Una vez a través de la red intestinal, los ácidos grasos pueden reformarse en triglicéridos o fosfolípidos y empaquetarse en quilomicrones o liposomas, que se liberan en el sistema linfático y entonces en la sangre. Las grasas ya sea se almacenan u oxidan para energía, y el hígado actúa como el órgano principal para el metabolismo de ácido graso y el procesamiento de remanentes de quilomicrón y liposomas en las varias lipoproteínas que incluyen VLDL y LDL. Los ácidos grasos sintetizados en el hígado se convierten a triglicéridos y se transportan a la sangre como VLDL. En tejidos periféricos, la lipasa de lipoproteína convierte parte del VLDL en LDL y ácidos grasos libres, que se toman para metabolismo. LDL se toma a través de receptores LDL por el hígado y otros tejidos. Eso proporciona un mecanismo para el inicio de LDL por la célula, y para su división en ácidos grasos libres, colesterol, y otros componentes de LDL.

Cuando el azúcar en sangre es baja, la hormona, glucagón. da señales a adipocitos para activar lipasa sensible a hormona para convertir triglicéridos en ácidos grasos libres. Aunque los ácidos grasos tienen muy baja solubilidad en la sangre (típicamente aproximadamente 1 pm), la proteína más abundante en la sangre, albúmina de suero, se une a ácidos grasos libres, lo que aumenta su solubilidad efectiva a -1 mM, permitiendo que el ácido graso se transporte a órganos tales como músculos e hígado para oxidación cuando el azúcar en sangre es baja. El catabolismo de ácido graso o división que resulta en la liberación de energía involucra tres pasos mayores que incluyen activación y transporte en la mitocondria, beta-oxidación, y transporte de electrón. Más específicamente, los ácidos grasos ingresan a la mitocondria principalmente a través de carnitina-palmitoil transferasa I (CPT-I). Se cree que la actividad de esta enzima es el paso del limite de índice en oxidación de ácido graso. Una vez dentro de la matriz mitocondrial , los ácidos grasos se someten a beta-oxidación. Durante este proceso, dos moléculas de carbono (acetil-CoA) se separan repetidamente del ácido graso. El acetil-CoA entonces puede ingresar al Ciclo Krebs, lo que produce NADH de alta energía y FADH, que se utilizan subsecuentemente en la cadena de transporte de electrón para producir ATP de alta energía para procesos celulares.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención se refiere a composiciones de grasa y métodos relacionados para aumentar HDL y/o reducir la relación LDL: HDL en suero humano y/o mejorar (es decir, disminuir) niveles de glucosa sanguínea en ayuno. Esto se realiza al crear y utilizar una composición de grasa que incluye un balance apropiado de ácidos grasos. En composiciones de grasa particularmente ventajosas, niveles sustanciales pero no excesivos de ácidos grasos saturados totales, ácido mirístico y/o ácido laúrico se incluyen con niveles bajos o moderados de ácido linoleico junto con un porcentaje correspondiente de ácidos grasos mono-insaturados (generalmente ácido oleico). En ciertas composiciones ventajosas adicionales, los niveles efectivos de sn-2 miristato sin sn-2 palmitato excesivo incluyen, junto con los niveles apropiados de ácido linoleico, ácido oleico, y ácidos grasos saturados totales.

De esa forma, un primer aspecto de la invención se refiere a una composición de grasa comestible que incluye entre 10% y 40% en peso del ácido graso poliinsaturado, ácido linoleico (18:2), y entre 15% y 50% en peso de ácidos grasos saturados en total, con el resto para formar 100% que son ácidos grasos mono-insaturados (generalmente ácido oleico, por ejemplo, desde 10 hasta 75%) y cantidades menores de otros ácidos grasos poliinsaturados. (Es decir, la suma de porcentajes de peso para ácidos grasos saturados, mono-insaturados y poliinsaturados es igual a 100%). Preferiblemente la composición de grasa incluye no más de 40% en peso de ácido mirístico o una combinación de ácido mirístico y ácido laúrico. También preferiblemente, la composición de grasa incluye no más de 20% en peso de ácido palmítico (más preferiblemente no más de 10%). Además, preferiblemente la composición de grasa incluye no más de 10% de ácido esteárico (más preferiblemente no más de 5%). En ciertos casos, el nivel especificado de ácido linoleico se reemplaza con una combinación de al menos 2, 3, ó 4 ácidos grasos poliinsaturados tomados en cualquier combinación seleccionada del grupo que consiste de ácido linoleico, ácido alfa-linoleico, ácido eicosapentaenoico (EPA), y ácido docosahexaenoico (DHA), preferiblemente tal combinación incluye 3-7, 3-10, 3-14.9, 3-20, 3-30, 3-38, 5-10, 5-12, 5-14.9, 5-20, 5-30, 5-38, 10-12, 10-14.9, 10-20, 10-30, 10-38, 12-14.9, 12-20, 12-30, 12-38, 15-30, ó 15-38% de ácido linoleico. Altamente preferible la composición de grasa está substancialmente libre de colesterol.

En ciertas modalidades, la composición de grasa incluye 10-30, 10-25, 10-20, 10-15, 15-40, 15-30, 15-25% de ácido linoleico, o menos de 15% de ácido linoleico (por ejemplo, 3-5, 3-7, 3-10, 3-12, 3-14.9, 5-7, 5-10, 5-12, 5-14.9, 10-12, 10-14.9, ó 12-14.9% de ácido linoleico) y/o la composición incluye no más de 40, 35, 30, 25, ó 20%, por ejemplo, 10 a 20, 10 a 30, 10 a 40, 15 a 20, 15 a 25, 15 a 30, 15 a 35, 15 a 40, 20 a 25, 20 a 30, 20 a 35, 20 a 40, 25 a 30, 25 a 35, ó 25 a 40% de ácido mirístico.

En cierta modalidad, que específicamente incluye aquellas modalidades especificadas anteriormente, la composición de grasa incluye no más de 50% de ácidos de grasos saturados (por ejemplo, desde 15 a 50, 15 a 40, 15 a 30, 20 a 50, 20 a 45, 20 a 40, 20 a 35, ó 20 a 30% en peso de ácidos grasos saturados). También preferiblemente, el ácido palmítico (16:0) constituye no más de 20% de grasa total, más preferiblemente no más de 15%), e incluso más preferiblemente no más de 12, 10, 9, 8, 7, 6, ó 5% del total. El ácido esteárico preferiblemente constituye no más de 10%, más preferiblemente no más de 9, 8, 7, 6, 5, 4, ó 3% de la grasa en peso. Substancialmente el resto de los ácidos grasos en la composición de grasa son preferiblemente ácido oleico (18:1), y/o el ácido linoleico puede reemplazarse con una combinación de ácidos grasos poliinsaturados como se indica anteriormente. Preferiblemente cuando se incluyen ácidos grasos poliinsaturados, el ácido linoleico es al menos 10% de la grasa total, por ejemplo, 10-14.9% en peso.

En ciertas modalidades, la composición de grasa comestible incluye al menos 1% y preferiblemente al menos 2 ó 3% en peso de ácido mirístico esteríficado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, preferiblemente desde 10% a 40% en peso de ácido linoleico (u otro porcentaje como se especifica aquí), desde 30% hasta 65% en peso de ácido oleico (o un porcentaje suficiente para totalizar 100% después de tomar en cuenta los porcentajes de ácidos grasos poliinsaturados y saturados), y desde 15 a 50% (preferiblemente 15% a 40%) en peso de ácidos grasos saturados en total, en donde la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es al menos 1:1.

En modalidades particulares, la ingestión consistente de la composición de grasa comestible (por ejemplo, como parte de una dieta diaria) aumenta el colesterol HDL, disminuye el colesterol LDL, y/o disminuye la relación de colesterol LDL/HDL en plasma humano y/o disminuye la concentración de glucosa de sangre en ayunas.

Para algunas modalidades, la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es al menos 1:1, 1.1:1, 1.2:1, 1.3:1, 1.4:1, 1.5:1, 1.7:1, 2:1, 2.2:1, 2.5:1, 3:1, 3.5:1, ó 4:1 o está en un rango definido al tomar cualquiera de dos de los valores de relación que se acaban de especificar como puntos finales del rango; la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 laúrico es al menos 0.8:1, 0.9:1, 1:1, 1.1:1, 1.2:1, 1.3:, 1.4:1, 1.5:1, 1.7:1, 2:1, 2.2:1, ó 2.5:1 o está en un rango definido al tomar cualquiera de dos de los valores de relación que se acaban de especificar como puntos finales del rango; la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a (ácido sn-2 palmítico más ácido sn-2 laúrico) es al menos 0.3:1, 0.4.1, 0.5:1, 0.6:1, 0.7:1, 0.8:1, 0.8:1, 1:1, 1.2:1, 1.5:1, 1.7:1, ó 2:1, o está en un rango definido al tomar cualquiera de dos de los valores de relación que se acaban de especificar como puntos finales del rango; la relación de peso de mirístico sn-2 a ácido esteárico sn-2 es al menos 1:1, 1.1:1, 1.2:1, 1.3:, 1.4:1, 1.5:1, 1.7:1, 2:1, 2:2:1, ó 2.5:1, 3:1, 3.5:1, ó 4:1.

En ciertas modalidades, al menos 20, 30, 40, 50, 60, ó 70% del ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido se produce por inter-esterificación química o enzimática o ambos; la composición incluye al menos 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 17, 20, ó 25%, o en un rango de 3 a 25%, 3 a 20%, 3 a 10%, 3 a 5%, 5 a 25%, 5 a 20%, 5 a 15%, 5 a 10%, 5 a 8%, 8 a 20%, 8 a 17%, 8 a 16%, 8 a 15%, 8 a 12%, 10 a 25%, 10 a 20%, ó 10 a 15%, 12 a 20%, 12 a 17%, 12 a 16%, ó 12 a 15% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido; no más de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ó 12% en peso de las moléculas de triglicérido que incluyen ácido mirístico que tienen tres residuos de ácido mirístico; al menos 20, 30, 40, ó 50% de las moléculas de triglicérido que incluyen ácido mirístico tienen únicamente dos residuos de ácido mirístico; al menos 20, 30, 40, ó 50% de las moléculas de trigiicérido que incluyen ácido mirístico tienen únicamente un residuo de ácido mirístico; el ácido sn-2 mirístico está esterificado en moléculas de glicérido seleccionadas del grupo que consiste de triglicéridos, diglicéridos, monoglicéridos y combinaciones de los mismos; al menos 70, 80, 90, 95, ó 97% del ácido sn-2 mirístico está esterificado dentro de moléculas de trigiicérido.

También en ciertas modalidades, la relación en peso de ácidos grasos saturados a ácido línoleico en la composición de grasa comestible es mayor que 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.7, 2.0, 2.5, ó 3.0, o está en un rango de 0.5 a 3.0, 0.5 a 2.0, 0.5 a 1.0, 1.0 a 3.0, 1.0 a 2.0, ó 2.0 a 3.0.

Para algunas modalidades, al menos 50, 60, 70, 80, ó 90% de las moléculas de trigiicérido que tienen un ácido sn-2 mirístico transportan ácidos grasos insaturados esterif icados en cualquiera o ambas de las posiciones de glicérido sn-1 y sn-3, por ejemplo, seleccionadas del grupo que consiste de ácido oleico, ácido linoleico, ácido alfa-linoleico, EPA, DHA y combinaciones de los mismos; al menos 40, 50, 60, 70, 80, ó 90% de las moléculas de trigiicérido que incluyen ácido sn-2 mirístico también incluyen ácido mirístico esterificado en cualquiera de la posición de glicérido sn-1 o sn-3 o ambas, o en cualquiera de la posición sn-1 o sn-3 pero no ambas.

Los aceites comestibles de la presente invención pueden utilizarse ventajosamente en preparación de cualquiera de una variedad de productos diferentes. De esa forma, un aspecto relacionado de la invención se refiere a un producto alimenticio preparado que incluye la composición de grasa comestible del aspecto precedente o una modalidad del mismo.

En ciertas modalidades, el producto alimenticio preparado es un aceite de cocina, un untable de aceite (por ejemplo, una margarina), un acortamiento, un aderezo de ensalada; una salsa de barbacoa o aderezo u otro condimento, un bien horneado (por ejemplo, pan, tortilla, bizcochos, pastel, galleta, o pie), o un producto lácteo (por ejemplo, una leche, yogurt, o queso); en ciertas modalidades, la presente composición de grasa comestible es 2 a 10, 5 a 15, 10 a 30, 30 a 50, ó 50 a 100% en peso del producto alimenticio preparado.

Otro aspecto relacionado se refiere a una dieta para ser humano o formulación de dieta que se pretende o tiene el efecto de aumentar la concentración de colesterol HDL, disminuyendo el colesterol LDL, y/o aumentando la relación de concentración HDL/LDL en plasma humano, y/o disminuyendo la concentración de glucosa en la sangre en ayunas, en donde una cantidad substancial, por ejemplo, 10 a 100%, 10 a 90%, 10 a 80%, 10 y 75%, 10 a 50%, 20 a 100%, 20 a 80%, 20 a 60%, 30 a 100%, 30 a 80%, 50 a 100%, ó 50 a 80% en peso de la grasa dietética diaria se proporciona por la composición de grasa comestible del primer aspecto de una modalidad del mismo.

En modalidades particulares, la formulación de dieta para ser humano se proporciona en forma líquida o en forma empaquetada, por ejemplo, indicada para pérdida de peso, para suplemento nutricional o reemplazo para pacientes mayores o pacientes con sistemas digestivos comprometidos, o para mejora de un perfil de lipoproteína de paciente.

De forma similar, la invención proporciona un método para ayudar a una persona a aumentar la concentración de colesterol HDL, disminuir el colesterol LDL, y/o aumentar la relación de colesterol HDL/LDL en su plasma, y/o disminuir la concentración de glucosa en la sangre en ayunas. El método involucra proporcionar composición de grasa dietética de acuerdo con el primer aspecto anterior.

En ciertas modalidades, la composición de grasa dietética es o incluye una composición de grasa dietética a base de triglicérido estructuralmente modificada, en donde la composición de grasa dietética incluye al menos 1% y preferiblemente al menos 2 ó 3% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, en donde la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1 y/o la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido esteárico sn-2 es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos saturados, poliinsaturados y mono-insaturados es igual a 100%. Preferiblemente la composición de grasa esta substancialmente libre de colesterol.

En modalidades particulares, la composición de aceite comestible es como se describe para el primer aspecto anteriormente o una modalidad del mismo; la composición de aceite comestible se proporciona al menos en parte o principalmente en uno o más alimentos preparados o dietas o formulaciones de dieta (por ejemplo, formulaciones de dieta líquida) como se especifica para un aspecto anterior una modalidad del mismo.

En ciertas modalidades, la persona sufre de alto colesterol LDL y/o de baja relación de colesterol HDL/LDL en su plasma; la persona es clínicamente obesa.

Similarmente, otro aspecto relacionado se refiere a un método para aumentar la concentración de colesterol HDL, disminuir el colesterol LDL, y/o aumentar la relación de colesterol HDL/LDL, y/o disminuir la concentración de glucosa en la sangre en ayunas, en el plasma de un sujeto humano. El método involucra ingerir consistentemente una composición de grasa dietética del primer aspecto anterior, por ejemplo, una composición de grasa dietética a base de triglicérido estructuralmente modificada que incluye al menos 1% y preferiblemente al menos 2 ó 3% en peso de ácido mirístico esterificado en posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, en donde la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1 y la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido esteárico sn-2 es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos poliinsaturado y mono-insaturados es igual a 100%. Preferiblemente la composición de grasa es substancialmente libre de colesterol.

En modalidades particulares, la composición de grasa dietética es como se especifica como una composición de aceite comestible para el primer aspecto anterior o una modalidad del mismo.

Un aspecto adicional se refiere a un método para preparar una composición de grasa comestible al mezclar un aceite comestible rico en sn-2 miristato con al menos otro aceite comestible, con lo cual forma un aceite comestible mezclado del primer aspecto anterior.

En ciertas modalidades, la composición de grasa comestible incluye al menos una porción y preferiblemente al menos 2 ó 3% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos saturados, poliinsaturados y mono-insaturados es igual a 100%. Preferiblemente el aceite comestible rico en sn-2 miristato, al menos otro aceite comestible, y/o la composición de grasa comestible están substancialmente libres de colesterol .

En ciertas modalidades, el aceite comestible rico en sn-2 miristato se forma por un método que incluye inter-esterif icación enzimática o química, que generalmente resulta en un aumento en el nivel de sn-2 miristato; la composición de grasa comestible es como se especifica para el aceite comestible del primer aspecto anterior o una modalidad del mismo.

En algunas modalidades, la composición de grasa se forma al mezclar un aceite vegetal oleico alta (tal como aceite de girasol con alto contenido oleico o ácido de soya con alto contenido oleico) con aceite de núcleo de palma o aceite de coco.

Modalidades adicionales serán evidentes a partir de la descripción detallada y de las reivindicaciones.

DESCRIPCION DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS A. Revisión La presente invención se enfoca en diferencias sutiles en la respuesta reguladora de lipoproteína del cuerpo humano a grasas dietéticas, que pueden incluir grasas dietéticas que contienen un número de diferentes moléculas de ácido graso saturadas que se esterifican ya sea en carbonos de glicerina iguales o diferentes (ubicaciones de isómero estructurales sn-1, sn-2 o sn-3) dentro de la molécula de triglícérido (y/o molécula de mono- o di-glicérido). Debido a que los estudios clínicos humanos involucran grandes números de sujetos y diferentes dietas son muy costosas y laboriosas, y debido a que existen muchas variables experimentales de interés, existe una cantidad limitada de datos experimentales que se relacionan con el efecto en metabolismo del lipoproteína de ácidos grasos saturados dietéticos de diferentes pesos moleculares (es decir, 10, 12, 14, 16, y 18 carbonos por ácido graso). También existen datos de ensayo clínico mínimos en donde diferentes isómeros estructurales de triglicérido sn-1, sn-2 y sn-3 de triglicéridos dietéticos se han construido y alimentado a sujetos humanos en un periodo de tiempo, en donde éstos isómeros contienen cantidades fijas de ácidos grasos saturados especificados localizados en diferentes carbonos de glicerilo.

De esa forma, esta invención además se refiere a composiciones y métodos para aumentar selectivamente el nivel de plasma de colesterol "bueno" HDL (HDL-C), disminuir el nivel de colesterol "malo" LDL (LDL-C), y/o reducir la relación LDL/HDL, y/o reducir glucosa en la sangre en ayunas al consumir una composición a base de grasa o aceite nutricional substancialmente libre de colesterol que contiene un balance apropiado de ácido linoleico, ácido oleico, y ácidos grasos saturados. En algunos casos, la composición puede contener ventajosamente una cantidad apropiada de ácido sn-2 mirístico con bajo sn-2 palmitato y sn-2 estearato.

Pocos investigadores han propuesto recientemente que el ácido mirístico puede incorporarse en la estructura de triglicérido y la posición sn-2 (es decir, posición de éster de glicerilo medio) para mejorar la calidad de salud de grasas dietéticas al causar un aumento en el nivel de colesterol HDL. De forma inversa, se cree que la cantidad de este ácido graso puede minimizarse en las posiciones sn-1 y sn-3 del triglicérido. Esto es debido a que la separación enzimática de lipasa durante la digestión de grasa remueve los ácidos grasos exteriores mientras deja la mayoría del ácido graso sn-2 intacto en la estructura de base del glicerol para absorberse en la corriente sanguínea como un monoglicérido. Por consiguiente, un número de investigadores ha preparado grasas dietéticas enriquecidas con grasa de leche en la cual se localiza gran parte de su 10% en peso de ácido mirístico, en naturaleza, en la posición sn-2 de la molécula de triglicérido. Sin embargo, la grasa de leche también contiene aproximadamente 26% en peso de ácido palmítico (ácidos grasos saturados de 16 carbonos) que también está preferiblemente localizado en la posición sn-2. Aunque el ácido sn-2 palmítico en la leche materna puede ser benéfico para los recién nacidos, su beneficio para adultos es cuestionable.

Como una alternativa al utilizar la grasa de leche como una fuente de ácido sn-2 mirístico, los isómeros estructurales de triglicérido con sn-2 mirístato también puede producirse al utilizar el ácido graso libre de mirístato en reacciones de inter-esterif icación con grasas naturales y/o sintéticas. La redisposíción estructural de trigücéridos naturales y sintéticos que contiene ácido mirístico en las posiciones sn-1 y sn-3 también puede utilizarse para mover algo del mirístato a la posición sn-2. Por ejemplo, la inter-esteríficación puede utilizarse para colocar de forma aleatoria la distribución de ácido mirístico sobre las tres posiciones de la molécula de triglicérido. Los investigadores han propuesto que la entrada dietética regular de grasas que contienen sn-2 miristato puede permitir que el sistema regulatorio del lipoproteína humana responda al lamentar benéficamente niveles de colesterol HDL de plasma. Aunque se han explorado algunos experimentos nutricionales para uso de diferentes niveles de ácido sn-2 mirístico en grasas dietéticas, algunos investigadores han ajustado sistemáticamente el nivel de otros ácidos grasos dietéticos (saturados, mono-insaturados y poliinsaturados) en armonía con ácido sn-2 mirístico para además mejorar la grasa dietética, y además aumentar el nivel de colesterol HDL y la relación HDL/LDL, y ninguno ha reconocido el balance ventajoso que caracteriza la presente invención.

B. Estudios clínicos/nutricionales Los obstáculos al llevar a cabo experimentos dietéticos incluyen el requerimiento de cantidades sustanciales de grasas dietéticas sintéticas que contienen ácidos grasos específicos integrados en la molécula de grasa en posiciones específicas, así como control estricto en la entrada de los sujetos de grasas dietéticas. Sin embargo, en uno de tales estudios, Sanders y otros (Am J Clin Nutr 2003; 77:777-782) proporcionan dos comidas similares a 17 hombres adultos saludables (comidas al menos separadas por una semana) que contienen 50g de grasa que consiste de mantequilla de cacao no aleatoria (normal) (abreviada N-c mantequilla) o mantequilla de cacao aleatoria (inter-esterificada) (abreviada IE-cmantequilla). Estas dos grasas se produjeron de un grupo individual de mantequilla de cacao, lo que por lo tanto proporciona la misma composición de ácido graso pero diferentes isómeros estructurales que exhiben diferentes puntos de fusión (35°C para N- y 50°C para I E-cmantequílla). Aunque casi todos los ácidos grasos saturados palmíticos y esteáricos en N-cmantequilla están localizados en las posiciones sn-1 y sn-3, el proceso de inter-esterif icaci ón colocó de forma aleatoria las ubicaciones de ácidos grasos para que 22% de las moléculas de tríglicérido resultantes contuvieran ácido palmitico (10%) y ácido esteárico (12%) en la posición sn-2, con lo cual aumenta el punto de fusión de la grasa. Este estudio nutricional comparó únicamente los cambios a corto plazo (3 y 6 horas después de la comida) en los niveles de plasma de lipoproteínas y grasas. De forma notable, en el período de 6 horas que sigue cada comida no hubieron cambios medibles en niveles de colesterol TC y HDL, pero dentro de 3 horas a continuación de las comidas los incrementos en plasma palmitico, en ácido palmitico, esteárico y oleico de plasma (mmol/L) fueron tanto como tres veces mayor a N-cmantequilla que para I E-cmantequilla. Esta observación sugiere que la digestión enzimática y la absorción trabajan mucho más eficientemente en mantequilla de. cacao natural que mantequilla de cacao inter-esterificada con su punto de fusión superior que está significativamente sobre la temperatura corporal. El estudio también sugiere que cambios relacionados con la dieta significativos en niveles de colesterol TC y HDL no pueden esperarse después de comidas individuales. En lugar de esto, típicamente se recomiendan cuatro regímenes dietéticos semanales para establecer niveles de lipoproteínas de estado estable en el plasma.

En otro estudio nutricional que examina la respuesta de lipoproteína a un ácido graso saturado localizado en diferentes posiciones en la molécula de triglicérido, Nelson y otros (Am J Clin Nutr 1999; 70:62-69) estudiaron infantes nacidos a término que se alimentaron con la fórmula desde el nacimiento hasta los 120 días, en donde la fórmula contuvo 25-27% de ácido palmítico (16:0) en donde 6% del 16:0 (fórmula de grasa estándar) o 39% del 16:0 (fórmula de grasa sintetizada) se esterificó en el sn-2 carbón de glicerilo. La fórmula de grasa estándar se hizo de una mezcla de grasas naturales que incluyen oleína de palma, soya, girasol y coco mientras la fórmula de grasa sintetizada (que tiene una composición de ácido graso casi idéntica a la grasa estándar) se denominó "Betapol-2" (fabricado por Loders Croklaan, Inc., Holanda). Betapol-2 contuvo aceite de palma inter-esterificado en donde una porción considerable de 16:0 se ha movido al sn-2 carbón de glicerilo. Otros infantes se amamantaron, en donde la leche materna contuvo 23% de 16:0 de los cuales 81% en peso se esterificó en la posición sn-2. Se obtuvieron muestras de sangre en 30 y 120 días, y se dividieron y ensayaron las lipoproteínas de plasma. Las lipoproteínas/quilomicrones ricos en triacilglicerol se fraccionaron por ultracentrifugación y el lípido de nuevo ensayo por porcentaje de 16:0 en la posición sn-2 del triglicérido de grasa de infantes alimentados con grasa estándar, alimentados con grasa sintetizada y alimentados con leche materna. Por consiguiente, de las muestras de sangre, 8.3%, 15.8% y 28.0% del 16:0 se recuperó en la posición sn-2 para fórmula de grasa estándar, fórmula de grasa inter-esterificada y leche materna respectivamente. Los autores sugieren que aproximadamente 50% del ácido graso de 16:0 original localizado en la posición sn-2 se conservó a través del proceso de hidrólisis de lipasa pancreática sn-1, sn-3, absorción intestinal del ensamble de monoglicérido y triglicérido sn-2. De forma más interesante, el colesterol de plasma, triglicéridos, ácidos grasos, así como apoA-i y apo B se midieron. Los infantes alimentados con Betapol-2 inter-esterificado mostraron un perfil de lipoproteína significativamente más pobre con colesterol HDL de plasma inferior y apo A-1 así como niveles apo B más altos asociados con colesterol LDL, mientras los infantes alimentados con la fórmula estándar natural mostraron niveles de colesterol totales similares pero niveles HDL benéficamente superiores después de 120 días (1.6 contra 1.2 mmoles/L) y niveles apo A-1 superiores (127 contra 100 mg/L). Este estudio eleva los problemas potenciales en el uso de inter-esterificado, cuando se compara con grasas saturadas naturales.

Una revisión actual extensiva por Karupaiah y otros (Nutrición y metabolismo; 2007, 4:16, titulada "efectos de colocación esteroespecíf ica de ácidos grasos en estructuras de triacilglicerol en grasas nativas y aleatorias: una revisión de sus implicaciones nutricionales" discute un gran cuerpo de investigación que se relaciona con nutrición y la modulación de metabolismo de lipoproteína que resulta de alteraciones en la colocación de ácidos grasos en triglicéridos, y es relevante al entender el contexto de la presente invención. Se incorpora aquí por referencia en su totalidad.

El solicitante encontró un pequeño número de estudios nutricionales animales y humanos que han investigado cambios en niveles de colesterol HDL y LDL de plasma cuando las grasas dietéticas se proporcionan y contienen al menos una porción del ácido mirístico (14:0) en el sn-2 carbón de glicerilo de la molécula de triglicérido. Por ejemplo, Temme y otros (J. Lipid Res. 1997:38-1746-1454) describen un estudio clínico humano con 60 sujetos que consumen grasas de prueba (40% de la energía dietética) durante 6 semanas siguiendo un periodo de prueba. Durante esta prueba, los sujetos consumieron una dieta enriquecida con una margarina de ácido oleico alto que contiene 24% de grasa saturada (esencialmente libre de miristato), 70% de ácido oleico y 6% de ácido linoleico. Durante el estudio, se reemplazó 63% de la grasa dietética (25% de energía) por la margarina con al contenido oleico o una grasa sintética hecha al inter-esterificar 34% de estearina de palma, 17% de aceite de girasol con alto contenido oleico, 9% de aceite de girasol y 40% de trinidistina para proporcionar una grasa que contiene 64% de ácidos grasos saturados, 26% de mono-insaturados (ácido oleico) y únicamente 9% de poliinsaturados (ácido linoleico). Por consiguiente, el ácido mirístico indicó 40% por 25% de energía = 10% de energía, mientras el ácido sn-2 mirístico indicó estadísticamente 1/3 ó 3.3% de energía o 1/3 por 40% por 63% = a 8% de la grasa dietética. Con 34% de estearina del canal presente junto con el 40% de trimiristina en la mezcla de inter-esterificación, una proporción sustancial de los sn-2 ácidos grasos fue ácido palmítico junto con ácido mirístico. Los niveles de lípidos y lipoproteínas de los sujetos se midieron, y mostraron un aumento neto promedio en colesterol TC (10.6%), HDL (8.6%) y LDL (14.7%). Desafortunadamente, tanto la relación de colesterol LDL/TC como la relación LDL/HDL aumentaron. El primero aumentó de 0.608 a 0.622 mientras que el último aumentó de 2.06 a 2.18.

En unos estudios de humano separado por Dabadie y otros (J.

Nutr, Biochem. 2005; 16(6): 375-382) se alimentaron 25 monos saludables con dos dietas durante 5 semanas cada uno respectivamente proporcionando 30% y 34% de las calorías de la grasa, en donde 8% y 11% de estas calorías vienen de ácidos grasos saturados con 0.6% y 1.2% que vienen de ácido mirístico que representa 2.5% y 3.5% en peso de la grasa. PUFA (como ácido linoleico) representó 6.3% de las calorías que representan aproximadamente 20% en peso de la grasa para ambas dietas. Aunque no se reportó ningún aumento en HDL, otros efectos benéficos se notaron incluyendo una reducción en TC, colesterol LDL y triglicéridos, y un aumento benéfico en la relación apo ?-1/apo B.

En otro estudio de humano por Dabadie y otros (Br. J. Nutr. 2006; 96(2): 283-289) se alimentaron 29 monos saludables con dos dietas (33% y 36% de las calorías dietéticas de grasas) durante 3 meses en donde el ácido mirístico proporcionó 1.2% y 1.8% de calorías, ácido alfa-linoleico proporcionó 0.9%, y ácido linoleico proporcionó 4.5% de calorías (aproximadamente 14% en peso de la grasa dietética). En la dieta de línea base, el ácido mirístico proporcionó 1.2% de calorías, ácido alfa-linoleico proporcionó 0.4% de calorías, y el ácido linoleico proporcionó 5.5% de calorías. Gran parte de los ácidos mirístico y alfa-linoleico se reportaron que están en la posición de sn-2 triglicérido. La dieta 1 (con 3.7% en peso de ácido mirístico) produjo una disminución pequeña en TC, LDL-C, HDL-C, TG y la relación TC/HDL-C, mientras la dieta 2 (con 4.7% en peso de ácido mirístico) no produjo ninguna disminución en TC o LDL-C, sino una disminución pequeña en TG y la relación TC/HDL-C y un pequeño aumento (6%) en HDL-C.

Ambos estudios por Dabadie y otros emplearon grasa de leche como la fuente de ácido sn-2 mirístico. En el primer estudio la relación de peso de grasa saturada: grasa mono-insaturada: grasa poliinsaturada (abreviada S:M:P) en las grasas de prueba se mantuvo en aproximadamente 30%: 45%: 25%, y en el segundo estudio aproximadamente 34%: 41%: 25% con ácido linoleico (18:2) que representa aproximadamente 15%-20% de la grasa. Desafortunadamente los niveles de 2%-5% en peso de ácido mirístico en estas grasas dietéticas son pequeños cuando se comparan con el 12 % - 17 % en peso de ácido palmítíco en estas mismas gasas, en donde el ácido palmítico, como el ácido mirístico, preferiblemente está localizado en la posición sn-2 en los triglícéridos. Por consiguiente, es difícil interpretar que cambios de lipoproteínas medidos se causaron porque ácidos grasos localizados en la posición sn-2.

Similarmente, en un estudio de hámster por Loison y otros (Br. J. Nutr. 2002; 87:199-210), tanto como 2.4% de la energía dietética total de los roedores se proporcionó por ácido miristico de la grasa de leche y/o manteca en donde gran parte del ácido miristico está localizado en la posición sn-2 de triglicérido. Ya que los investigadores aumentaron el nivel de ácido miristico paso a paso de 2% a 4% a 6.5% y a 8.5% de la grasa dietética, los niveles de ácidos grasos mono-insaturados (como ácido oleico) y poliinsaturados (predominantemente como ácido linoleico) se mantuvieron aproximadamente constantes a 40-45% y 9-10% en peso de la grasa, respectivamente. Únicamente los niveles de ácidos grasos saturados variaron apreciablemente, en donde, a medida que el nivel de ácido miristico aumentaba paso a paso desde 2% hasta 8.5% en peso, el nivel de ácido esteárico disminuyó desde 14% hasta aproximadamente 6% en peso. En este estudio de hámster, los átomos demostraron aumentos sustanciales en ambos niveles de colesterol HDL y las relaciones de HDL al colesterol HDL cuando el ácido miristico reemplazaba parcialmente ácidos esteáricos y palmíticos. De forma interesante, los niveles de colesterol sin HDL (que representan LDL-C + VLDL-C) permanecieron relativamente constantes a medida que el nivel dietético de ácido miristico aumentó.

Aunque los resultados interiores anteriores son interesantes. las composiciones de ácido graso proporcionadas por Loison y otros no pueden utilizarse para construir las composiciones de grasa actualmente inventadas por varias razones. Las grasas dietéticas de Loison y otros contienen una variedad de otros ácidos grasos saturados localizados en la posición sn-2 además del ácido mirístico, que incluye ácidos palmitico y laúrico, en niveles que son significativamente superiores que el ácido mirístico, y los investigadores no investigan el grado al cual éstos han impactado negativamente el perfil de colesterol de plasma. También, estas grasas incorporaron grasa de leche y manteca, dos grasas animales que contienen niveles sustanciales de colesterol que habrán impactado negativamente el perfil de colesterol de plasma. Además, los investigadores fallaron al considerar ajustar el nivel de ácidos grasos poliinsaturados, por ejemplo, mientras mantienen un nivel constante de sn-2 miristato. El solicitante cree que probar estas variables importantes afectará significativamente sus perfiles de lipoproteína resultantes.

Como se discutió anteriormente, un número de estudios sugiere que ácido sn-2 mirístico puede alterar el nivel de lipoproteínas que contienen colesterol que incluyen LDL, DLD y colesterol HDL. Sin embargo, no está claro si solamente el nivel de sn-2 miristato en una grasa dietética es crítico y qué papel juegan otros ácidos grasos saturados, mono-insaturados y poliinsaturados al aumentar HDL-C y disminuir la relación LDL-C/HDL-C. Por ejemplo, en un sistema de alguna forma diferente, Sundram y otros en la patente de E.U.A. No. 5,578,334, No. 5,843,497, No. 6,630,192 y No. 7,229,653 mostraron que la grasa que contiene ácido Iinoleico (18:2) podría agregarse a una grasa saturada (aceite de palma) que contuvo altos niveles de ácido palmítico localizados en las posiciones sn-1 y sn-3 de las moléculas de triglicérido para disminuir benéficamente LDL-C. Al mismo tiempo, el aumento relacionado con aceite de palma en HDL-C persistirá si el nivel de ácido Iinoleico no es excesivo, es decir, si permaneció dentro del rango de 15% a 40% en peso de los ácidos grasos dietéticos mientras los ácidos grasos saturados permanecieron dentro del rango de 20% a 40%. Sin embargo, las patentes antes mencionadas de Sundram y otros no consideran ácidos grasos saturados en cualquier posición de estereoisómero que incluye la posición sn-2, y no sugieren ni predicen lo que sucedería si se reemplazarán los ácidos grasos saturados libres de colesterol (típicamente proporcionados por el aceite de palma con ácido sn-1 y sn-3 palmítico) por ácido sn-2 mirístico de grasas inter-esterif ¡cadas. De hecho, no existe ninguna sugerencia por Sundram y otros para reemplazar ácido palmítico en cualquiera de sus composiciones con ácido mirístico.

Sin importar la investigación de lipoproteína reciente que involucra ácido mirístico, el solicitante ha descubierto un cuerpo extensivo de datos clínicos muy previos publicados en 1970 por McGandy y Hangsted (Am J Clin Nutr, 23(10), 1288-1298, 1970) antes de que se reconociera la importancia de colesterol HDL se midiera. Dentro del contexto de la presente invención, el solicitante ha analizado estos datos al utilizar una ecuación que permite el cálculo de colesterol VLDL, entonces colesterol HDL y la relación de colesterol LDL/HDL. Resultados sorprendentes y no anticipados más allá de aquellos originalmente descritos y entendidos por McGandy y otros y más allá del entendimiento subsecuente por otros expertos en el campo han surgido del nuevo cálculo de sus datos, lo que lleva a un mejor entendimiento del papel de ácidos grasos saturados sn-2 y el papel de otros ácidos grasos dietéticos al regular el nivel de colesterol HDL y la relación de colesterol HDL a LDL.

C. Selección de ácido graso saturado y ubicación de triglicérido Como se enseñó por Khosla y Hayes (Biochem, Biophys, Acta, 1083: 46-50, 1991) y por Sundram y otros (ver anteriormente), entre los varios ácidos grasos saturados presentes en grasas individuales y mezclas de grasa que incluyen aceite de palma, aceite de coco y/o aceite de núcleo de palma, su ácido palmítico se ha preferido sobre ácido laúrico y mirístico (ver, por ejemplo, reivindicaciones 11 y 12 en la Patente de E.U.A. No. 7,229,653) para proporcionar un perfil de lipoproteína de plasma humano favorable. De hecho, el ácido palmítico está presente en un nivel de más de 40% en peso en aceite de palma, y la selección de grasas y aceites naturales de acuerdo con la enseñanza de Sundram y otros para aumentar HDL de plasma la relación HDL/LDL no sugiere colocar ácido mirístico (14:0) en la posición sn-2 de moléculas de triglicérido. Con la excepción de grasa de leche, las grasas y aceites naturales que contienen niveles sustanciales de ácido mirístico transportan el ácido mirístico ya sea en la posición sn-1 (aceite de núcleo de palma) o la posición sn-3 (aceite de coco) en lugar de una posición sn-2. Alternativamente, si una grasa modificada tal como una grasa vegetal inter-esterificada se preparará como se mencionó brevemente en Sundram y otros, estas patentes no hacen sugerencia de inter-esterif icar una grasa o grasas específicas de acuerdo con cualquier procedimiento particular que colocaría el ácido mirístico en la posición sn-2 de moléculas de triglicérido.

Para una grasa dietética humana, es intrigante considerar la posibilidad de que la ubicación del éster de glicerilo de un ácido graso saturado entre las posiciones sn-1, sn-2 y sn-3 dentro de la molécula de triglicéridos pueden afectar los niveles de HDL y LDL en diferentes formas y a diferentes extensiones, con diferentes consecuencias de salud. También es intrigante considerar la posibilidad que sustituir un ácido graso saturado por otro ácido graso saturado de diferente longitud de cadena de carbono (tal como miristato C14 para palmitato C16) en cualquiera de las tres ubicaciones de éster de glicerilo puede también afectar niveles HDL y/o LDL en diferentes formas y a diferentes grados. Existe un número de estudios de investigación en los cuales una grasa dietética rica en un ácido graso saturado se ha reemplazado por una grasa dietética rica en otro ácido graso saturado (por ejemplo, al reemplazar grasa de coco rica en ácidos laúricos y mirísticos por ácido de palma rico en ácido palmítico).

Sin embargo, en el contexto de la presente invención, únicamente ha existido un pequeño número de estudios dietéticos humanos en donde se han mediado niveles de colesterol HDL y LDL, comparando dos (o más) composiciones de grasa dietética similares en donde un nivel definido de un ácido graso saturado con una estructura de triglicérido definida se reemplaza por un segundo ácido graso saturado con una estructura de triglicéridos similar. Por ejemplo, un estudio dietético que compara el perfil de lipoproteína de gente que consume aceite de palma natural y después aceite de palma inter-esterificado está comparando dietas que contienen los mismos ácidos grasos en diferentes estructuras de triglicérido. De esa forma, el ácido oleico (18:1) que predomina en la posición sn-2 en aceite de palma natural se desplazará parcialmente durante la inter-esterificación por ácido palmítico que originalmente predomina en las posiciones sn-1 y sn-3 en aceite de palma natural.

Sin embargo, en 1970 cGandy y Hegsted (Am J Clin Nutr, 23(10), 1288-1298, 1970) público un estudio clínico elegante con 18 sujetos humanos que es sencillo durante 1.5 años, en donde se reemplazaron grasas dietéticas normales por triglicéridos semi-sintéticos que proporcionan 38% de las calorías diarias totales. Cada dieta que contiene grasa se proporcionó a sujetos durante un periodo de 4 semanas en una secuencia aleatoria de 30 formulaciones de grasa dietética. Estás grasa semi-sintéticas se produjeron al inter-esterificar 25% en peso de ácidos grasos saturados individuales (en la forma de serie de triglicéridos tri-saturados C12 a C18) con 75% en peso de aceites vegetales naturales bajos en ácidos grasos saturados (ya se aceite de oliva o cártamo).

En algunas otras dietas que contienen grasa, 60% en peso de ácido graso saturado C10 (como triglicéridos de cadena media C10 tri-saturados, también conocido como, "aceite en MCT") se inter-esterificó primero con 40% en peso de los ácidos grasos saturados de cadena más larga (como triglicéridos tri-saturados C14 a C18) para formar productos "60-40 inter-esterificados C10-SFA". Subsecuentemente, cualquiera de 50% u 80% en peso de estos productos "60-40 inter-esterificados C10-SFA" se mezclaron con el resto (es decir, ya sea 50% a 20% en peso) de aceite vegetal (ya sea aceite de oliva o cártamo).

Se obtuvieron muestras de suero de los sujetos en los días 24 y 28 para el ensayo de colesterol total (TC abreviado), colesterol de beta-lipoproteína, fósforo de lípido, y niveles de triglicéridos (abreviado como TG). Para cada sujeto y cada ensayo, se calculó un valor promedio (basándose en dos muestras). Para cada sujeto, se calcularon cambios en estos valores promedio para cada grasa dietética, y entonces cambios medios de la línea base "Dieta Americana Promedio" (Dieta A. A.) se calcularon para el grupo completo de sujetos.

Al momento de la publicación de 1970 por McGandy y otros, mientras beta-lípoproteinas se entendió como colesterol "malo" (ahora conocido como colesterol LDL), el concepto de HDL como colesterol "bueno" fue desconocido y únicamente se aclaró en 1974 por Mahley y otros (Circ. Res. 35:713-721, 1974). El estimado de colesterol VLDL de la ecuación de Friedwald descrita en 1972 también fue desconocido en el momento. El solicitante está inconsciente de cualquiera de los intentos o reanalizar los datos de McGandy y otros. Sin embargo, basándose en la corazonada de que estos datos retienen información valiosa pero no detectada, el solicitante calculó los valores de colesterol VLDL y HDL y las relaciones LDL/HDL para todos los grupos dietéticos de sujetos que utilizan estas dietas excepcionalmente controladas y las tablas de datos originales por McGandy y otros. Los cálculos se basan en la siguiente ecuación: HDL-C = TC - (LDL-C + VDL-C) en donde VLDL = TG/5 (estimado de Friedwald) Los nuevos estimados de datos basados en McGandy y otros se proporcionan en los Cuadros 1 y 2. Estos datos incluyen relaciones de colesterol VLDL-C, HDL-C y LDL/HDL. Junto con el conocimiento de metabolismo de lipoproteína de otras fuentes, se cree que las grasas dietéticas novedosas pueden ensamblarse lo que será más efectivo que aquellas grasas descritas por McGandy y otros al aumentar benéficamente HDL-C de plasma mientras se disminuye la relación LDL-C/HDL. También se anticipa que estas grasas novedosas serán más efectivas que aquellas descritas en Sundram y otros en la Patente de E.U.A. No. 5,578,334, Patente de E.U.A. No. 5,843,497 y Patente de E.U.A. No. 6,630,192.

La clave para los Cuadros 1 y 2 es como sigue: S:M:P representan las proporciones relativas de la energía dietética total (en kilocalorías, con 38% de la energía proporcionada por grasa abreviada a 38% en), proporcionado por las diferentes categorías de ácidos grasos, saturados (S), mono-insaturados (M) y poliinsaturados (P).

P/S representa la relación de peso de ácidos grasos poliinsaturados a saturados proporcionados en la grasa dietética; colesterol total TC; y colesterol asociado con lipoproteínas de baja densidad LDL-C; colesterol asociado con lipoproteína de muy baja densidad VLDL; colesterol asociado con lipoproteína de alta densidad HDL-C; LDL-C/HDL-C representa la relación de peso de LDL-C a HDL-C.

MCT (10:0) se refiere a un triglicérido de cadena media que transporta tres ácidos grasos saturados, cada diez carbonos de longitud.

MCT+14 inter-esterificado (60:40) se refiere a una grasa hecha al inter-esterificar 60 partes en peso de MCT (10:0) y 40 partes de ácido mirístico (14:0). Similarmente MCT+16 y MCT+18 inter-esterificados se refieren al uso de ácidos palmítico y esteárico en lugar de ácido mirístico.

Oliva + 12 inter-esterificado (75:25) se refiere a una grasa hecha al inter-esterificar 75 partes en peso de aceite de oliva y 25 partes de ácido laúrico (12:0). Similarmente, oliva + 14 inter-esterificado (75:25) se refiere a una grasa hecha al inter-esterificar 75 partes en peso de aceite de oliva y 25 partes de ácido mirístico (14:0). Similarmente, cártamo+12 inter-esterif icado (75:25) se refiere a una grasa hecha al inter-esterificar 75 partes en peso de aceite de cártamo y 25 partes de ácido laúrico (12:0).

Mezclas (MCT+14): cártamo (80:20) se refiere a una mezcla de grasa hecha al mezclar 80% en peso del producto MCT+14 de inter-esterificado descrito anteriormente, con 20% en peso de aceite de cártamo.

Por analogía, mezclas (MCT+16): oliva (50:50) se refiere a una mezcla de grasa hecha al mezclar 50% en peso del producto MCT+16 inter-esterificado descrito anteriormente, con 50% en peso de aceite de oliva.

Resultados del Cuadro 1 y Cuadro 2.

En el panel superior del Cuadro 1 es evidente que la relación P/S para grasas dietéticas comestibles ha aumentado, el nivel de HDL aumentó y la relación de LDL a colesterol HDL disminuyó para estos 20 sujetos que consumen 38% de sus calorías de estas grasas. Esta mejora de lipoproteína no es sorprendente, considerando aceite de cártamo comparado con mantequilla.

En el segundo panel del Cuadro 1, es evidente que 14:0 y 16:0 de ácidos grasos en lugar de 18:0, cuando se inter-esterifican con MCT (10:0) produce productos de grasa inter-esterificados más saludables basándose en las relaciones HDL superiores y LDL/HDL inferiores para estos sujetos. La grasa inter-esterificada 14:0 también es más saludable que el 100% del triglicéridos MCT original basándose en estos mismos criterios. Ya que los ácidos grasos sn-1 y sn-3 se separan durante la digestión, parece probable que el sn-2 monoglicérido restante con su 14:0 es más saludable que el sn-2 monoglicérido que contiene 10:0. Este resultado solamente se vuelve evidente con el cálculo de HDL aquí.

El tercer panel del Cuadro 1 presenta resultados en donde la grasa dietética el 75% en peso de aceite de oliva inter-esterificado con 25% en peso de varios ácidos grasos saturados que varían desde 12:0 hasta 18:0. Aunque el solicitante cree que la proporción de ácidos grasos poliinsaturados (9% en peso) en la grasa dietética es inadecuado, es interesante que el nivel HDL-C sea superior para el producto 14:0, y la relación LDL/HDL es más baja. Este resultado de nuevo sugiere que ácido sn-2 mirístico tiene el mayor potencial al formular una grasa dietética que puede proporcionar niveles máximos de HDL-C y la mejor relación de colesterol bueno o malo.

Los resultados del cuarto panel en el Cuadro 1 son mucho más similares que el tercer panel excepto que 75% en peso de aceite de cártamo que contiene una gran proporción de ácido linoleico (68% en peso) se sustituyó para 75% de aceite de oliva en la reacción de inter-esterificación para producir la grasa dietética que contuvo aproximadamente 50% de ácidos grasos poliinsaturados. Como un resultado, la mayoría de los valores absolutos VLDL-C y HDL-C son inferiores a los valores correspondientes con aceite de oliva debido a que altos niveles de ácido linoleico pueden disminuir ambos niveles LDL-C y HDL-C. Las relaciones LDL-C/HDL-C también de algunas formas se comprometen (indeseablemente más altas que con aceite de oliva) lo que sugiere que el nivel de 50% de ácido linoleico en los productos inter-esterificados es excesivo. Esto se compara con el nivel de 9% con aceite de oliva (ver anteriormente). A partir de estos datos es evidente que el nivel de ácido linoleico en una grasa dietética que minimizará HDL-C mientras minimiza la relación de LDL-C/HDL-C yace de alguna forma entre 10% y 50%, y probablemente más cerca de 15%-20% en peso de la grasa dietética. El nivel LDL-6 inusualmente bajo para el producto de aceite de cártamo 18:0 inter-esterificado (129 MG/decilitros) también es notable. Esto sugiere una respuesta atípica asociada con alta inter-esterificación 18:0 que espera investigación adicional.

Los datos presentados en el Cuadro 2 son más difíciles de interpretar. El panel 1 repite los datos proporcionados en el Cuadro 1 para proporcionar una respuesta de colesterol y lípoproteína de línea base de sujetos a triglicéridos tri-saturados inter-esterificados [por ejemplo, MCT + 14 (60:40), que representa 60 partes de 10:0 inter-esterificado con 40 partes de 14:0], Los paneles 2 y 3 proporcionan las respuestas correspondientes de sujetos que consumen estos mismos tri-saturados inter-esterificados pero mezclados ya sea a 80:20 ó 50:50 con aceite de cártamo (68% de ácido linoleico 18:2) en el Panel 2, y aceite de oliva en el Panel 3 (aceite de oliva: 11% de ácido linoleico 18:2 + 70% de ácido oleico mono-insaturado).

Al comparar línea por línea de datos en el Panel 2 con aquel en el Panel 1, está claro que la adición de aceite vegetal poliinsaturado a una dieta rica en grasa tri-saturada disminuye LDL-C y VLDL-C mientras aumenta HDL-C. Consecuentemente, las relaciones de colesterol LDL/HDL resultantes disminuyeron.

Es difícil ver un patrón comparable cuando se compara similarmente los datos en el Panel 3 con el Panel 1. Es evidente que agregar un aceite vegetal rico en ácido oleíco (oliva) a una dieta rica en grasa tri-saturada no es equivalente a las propiedades colesterolémicas o mejorar el perfil de lipoproteína de la dieta al mismo grado que un aceite vegetal poliinsaturado (cártamo) es decir, MONOS no trabaja bien por sí mismos contra SATS. Por otro lado, las mezclas 50:50 con aceite de oliva muestran una mejora substancial en perfil de lipoproteína sobre las mezclas que contienen únicamente 20% de aceite de oliva. El solicitante nota que las mezclas 50:50 contienen 6% de ácido linoleico mientras las mezclas 80:20 contienen únicamente 2%. Es probable que el nivel 18:2 superior sea substancialmente más efectivo al reducir LDL y aumentar colesterol HDL, lo que implica que una masa crítica de ácido linoleico es necesaria para hacer cualquier mejora de lipoproteína calculada una realidad.

En resumen, los datos en los Cuadros 1 y 2 derivados de McGandy y otros muestran niveles de lipoproteína tanto originales como recientemente calculados en sujetos humanos, y muestran cambios en estos niveles para sujetos cuyas dietas incluyen cambios de una grasa dietética a otra, de MCT altamente saturado, a MONOS, a POLYS altamente insaturados (al mover de una línea de datos a la siguiente en los Cuadros 1 y 2). Diferente a cualquier otro de los estudios de la técnica previa, estos datos son particularmente valiosos debido a que muestran cambios de lipoproteína llevados por un cambio de un aceite de grasa saturada a otro en grasas dietéticas de otra forma idénticas, en donde el ácido graso saturado también se esterifica en la posición sn-2 de moléculas de triglicérido. McGandy y otros enseñan que están probando exclusivamente la adición simple en SFA específico en grupos de SFA, MUFA o PUFA, y no anticipan que su diseño también abarcará el problema de estructura molecular de triglicérido. Al enfocarse en su modulación única de ácidos grasos saturados individuales, es posible concluir definitivamente que el ácido mirístico fue el ácido graso saturado más efectivo en la posición sn-2 para aumentar benéficamente y de forma máxima HDL-C en la mayoría de las situaciones. Al mismo tiempo, el solicitante encuentra que ácido sn-2 mirístico significativamente reduce LDL-C, dependiendo de la dieta de referencia que se considera. Por ejemplo, en el panel 3 del Cuadro 1, el valor LDL-C de 149 mg/decilitros para la grasa dietética inter-esterificada "Oliva + 14" es idéntica que para el aceite de oliva simple, pero cuando se compara con las otras grasas inter-esterificadas en el mismo grupo (que difieren únicamente en la longitud de cadena de ácido graso, saturado) se disminuyó benéfica y significativamente incluso ya que el HDL-C asociado fue notablemente superior.

Los datos de lipoproteína recientemente calculados después de McGandy y otros condujeron a una conclusión que difiere de la técnica previa. Otros han utilizado grasa de leche en mezclas de grasa dietética para proporcionar un sn-2 miristato y mejorar el perfil de lipoproteína en plasmas humanos y otros mamíferos. Sin embargo, ahora es evidente a partir de los datos recalculados de McGandy y otros que los ácidos grasos saturados "sin miristato" que incluyen ácido laúrico (12:0) y ácido palmítico (16:0) en la posición sn-2 de moléculas de triglicérido (presentes en grasa de leche) se reducen/comprenden el nivel HDL-C aumentado y aumentan inversamente la relación LDL-C/HDL-C. De esa forma la grasa de leche que contiene casi tres veces más ácido palmítico que el ácido mirístico en la posición sn-2 es la elección incorrecta para una grasa ideal. El solicitante cree que para una grasa dietética agregada que sea efectiva al mejorar perfiles de lipoproteína humanos en una amplia población, debe contener más ácido sn-2 mirístico que ácido sn-2 palmítico (y también más ácido sn-2 mirístico que ácido sn-2 laúrico). Además, la grasa de leche también es problemática debido a que contiene un nivel sustancial de colesterol (al menos 0.25% en peso) que aumenta LDL-C de plasma mientras disminuye HDL-C. Desprender la grasa de leche de su colesterol sería útil con respeto a esto, pero no reduciría el nivel de ácido palmítico. Por otro lado, considerando las grasas vegetales comerciales saturadas, ninguna de estas contiene cantidades apreciables de ácido mirístico en la posición sn-2. Aquellos que contienen niveles significativos de ácido mirístico (aceite de coco y aceite del núcleo de palma) también contienen ácido laúrico en niveles casi tres veces mayores que mirístico, y el ácido en laúrico en lugar del ácido mirístico se esterifica preferencialmente en la posición sn-2. Por lo tanto, en este caso, la colocación aleatoria isomérica por inter-esterif icación de grasa no es una buena opción tampoco.

Considerando las opciones limitadas con tecnología actualmente disponible, el solicitante ha concluido que la inter-esteríficación que combina ácido mirístico y/o trimiristina por otro lado, y ácido oleico/trioleína o al menos un aceite vegetal rico en ácido oleico (por ejemplo, variedades de cañóla, soya o aceite de girasol con niveles medios altos de ácido lírico) por otro lado, es una opción viable para producir triglicéridos que contienen sn-2 miristato en donde al menos uno de los tres ácidos grasos debe ser no saturado.

Cuadro 1: Respuesta de Colesterol en Humanos a Grasas de Diferente Saturación Grasa S:KI:P (%) P/S TC mg/dl LDL-C VLDL-C HDL-C LDL- (38% en) mg/dl mg/dl mg/dl C/HDL-C Mantequilla 24:13:02 0.08 254 196 16 43 4.6 Dieta A.A. 19:13:06 0.32 221 154 16 51 3.0 Oliva 7:27:04 0.57 217 149 13 55 2.7 Cártamo 5:07:26 5.2 178 116 12 50 2.3 MCT(10:0) 34:03:01 0.03 214 148 24 41 3.6 Inter-esterificado MCT+14 (60:40) 34:03:01 0.03 253 181 18 54 3.4 MCT+16(60:40) 34:03:01 0.03 267 193 19 55 3.5 MCT+18{60:40) 34:03:01 0.03 226 162 19 45 3.6 Oliva 7:27:04 0.57 217 149 13 55 2.7 Inter-esterificado OI¡va+12(75:25) 15:19:04 0.24 230 157 12 61 2.6 Oliva+14 (75:25) 15:20:04 0.25 234 150 17 67 2.2 Oliva+16 (75:25) 14:20:04 0.26 233 165 13 55 3 Oliva+18 (75:25) 14:21:04 0.26 233 160 16 58 2.8 Cártamo 5:07:26 5.2 178 116 12 50 2.3 Inter-esterificado Cártamo+12 13:06:19 1.5 192 135 11 46 2.9 (75:25) Cártamo+14 13:06:19 1.5 201 132 16 53 2.5 (75:25) Cártamo+16 13:6:19 1.5 206 149 11 46 3.3 (75:25) Cártamo+18 12:07:19 1.5 202 130 15 57 2.3 (75:25) Cuadro 2: Respuesta de Colesterol en Humanos a Grasas de Diferente Saturación Grasa S:M:P (%) P/S TC mg/dl LDL-C VLDL-C HDL-C LDL- (38% en) mg/dl mg/dl mg/dl C/HDL-C Inter-esterificado MCT+14 (60:40) 34:03:01 0.03 253 181 18 54 3.4 CT+16(60:40) 34:03:01 0.03 267 193 19 56 3.5 CT+18 (60:40) 34:03:01 0.03 226 162 19 45 3.6 Mezclas Cártamo:(MCT+14) (20:80) 28:04:06 0.21 252 175 15 62 2.8 (50:50) 20:05:13 0.68 207 147 ¦ 14 46 3.2 Cártamo:(MCT+16) (20:80) 28:04:06 0.22 242 159 14 69 2.3 Cártamo:(MCT+18) (20:80) 28:04:06 0.22 235 170 19 46 3.7 (50:50) 19:05:14 0.70 208 144 15 49 2.9 Mezclas Oliva:(MCT+14) (20:80) 29:08:02 0.06 252 186 15 51 3.6 (50:50) 21:15:03 0.13 234 159 15 60 2.6 Oliva:(MCT+16) (20:80) 28:08:02 0.06 242 168 15 59 2.8 Oliva:(MCT+18) (20:80) 28:08:02 0.06 240 177 19 44 4 (50:50) 20:15:03 0.13 227 147 15 65 2.3 D. Composiciones de grasas ventajosas De esa forma, en vista de la discusión anterior, preferiblemente en la composición de grasa al menos 3% en peso de la composición es ácido sn-2 mirístico, mientras las cantidades de sn-2 palmitato y laurato sn-2 se minimizan. La composición también preferiblemente incluye entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico (que ayuda a reducir LDL-C), entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, y entre 30% y 65% en peso de ácido oleico. El ácido oleico se considera un ácido graso esencialmente "neutro" que diluye los ácidos grasos saturados y poliinsaturados que son biológicamente más activos al elevar y disminuir niveles de lipoproteína. La relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico, y la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 laúrico son ambos mayores que 1:1. La suma de porcentajes de peso para ácidos grasos saturados, mono-insaturados y poliinsaturados es igual a 100%.

El fundamento para utilizar la composición de triglicérido anterior como un componente reemplazo para una porción significativa de una grasa dietética es como a continuación: 1. Existe un cuerpo extensivo de evidencia clínica de que la intervención dietética con grasas comestibles y aceites que aumenta niveles de plasma de colesterol HDL, mientras disminuye los niveles LDL-C, niveles de VLDL-C, y la relación de LDL-C a HDL-C todos proporcionan beneficios de salud sustanciales en términos de reducir el riesgo de enfermedad cardiaca coronaria y otros problemas de salud. 2. El solicitante ha encontrado nueva evidencia que el consumo de grasa dietética que proporciona entre aproximadamente 3% y 20% de la grasa total como ácido sn-2 mirístico es benéfico, a pesar de aumentos y disminuciones variados y algunas veces contradictorios en HDL-C, LDL-C y relaciones LDL/HDL (por ejemplo, ver Dabadie y otros y Temme y otros) con sn-2 miristato relativo para controlar dietas. Se forma una hipótesis de estas inconsistencias que se provocan por el consumo variable de ácidos grasos saturados sn-2 sin miristato (es decir, palmitato y laurato sn-2) así como consumo variable de ácidos grasos poliinsaturados (18:2).

El solicitante ha calculado datos HDL-C para experimentos clínicos de 1970 previos de McGandy y otros cuando se desconocía el colesterol "bueno" HDL, en donde se controló esencialmente todo el consumo de ácido graso saturado dietético. Se ha vuelto evidente aquí, por primera vez (ver Cuadro 1 y 2 a continuación), que con una dieta que contiene ácido graso no variante de otra forma, el sn-2 miristato puede aumentar predeciblemente HDL-C y reducir la relación LDL-C/HDL que otros ácidos grasos saturados en la posición sn-2, que típicamente degradan o disminuyen estos índices de lipoproteína. El efecto de ácido sn-2 mirístico en el perfil de lipoproteína parece más relevante cuando muchos o la mayoría de ácidos grasos vecinos en las moléculas de triglicérido son ácido oleico. Estos resultados particulares se obtuvieron por McGandy y otros, cuando se esterificaron 75 partes de aceite de oliva con 25 partes de miristato. Cuando se compara con una dieta rica en aceite de oliva solo, la dieta con aceite de oliva de ácido mirístico inter-esterificado semi-sintético sorprendentemente no altera niveles LDL-C de plasma (149 contra 150 mg/decilitro) incluso aunque aumentó HDL-C de 55 a 67 mg/decilítro. 3. Junto con los hallazgos novedosos calculados de McGandy y otros, el solicitante reevaluó otros datos clínicos animales y humanos, y determinó que los triglicéridos tri-saturados, especialmente tripalmitina y algún grado menor trimiristina, son colesterolémicos al elevar TC y LDL-C (Snook y otros, Eur. J. Clin. Nutr. 199, 53: 597-605) y debe minimizarse en la dieta (también ver Mukherjee y otros, J. Atheroscler. Res. 1969, 10(1): 51-54). La molécula de triglicéridos de triestearina de punto de fusión alto cerosa parece ser una excepción, en parte debido a que se digiere deficientemente.

Por consiguiente, se deduce que las relaciones estequiométricas de ácidos grasos (que incluyen ácido mirístico/trimiristina) combinados en reacciones de inter-esterificación deben elegirse para minimizar la formación de triglicéridos tri-saturados. Esto puede realizarse por ejemplo al incluir una cantidad suficiente de ácido oleico en la reacción para actuar como moléculas diluyentes. Se sugiere que triglicéridos con cualquiera de uno o dos ácidos grasos saturados (pero no 3) pueden producirse por inter-esterificación, y son adecuados para aumentar niveles de ácido sn-2 mirístico en grasas dietéticas. Por lo tanto, la relación estequiométrica de ácido oleico (o relación de ácido oleico más ácido linoleico) a residuos de ácido mirístico debe acercarse a 1:1, y preferiblemente de alguna forma mayor que 1.0/1.0 para mantener concentraciones de triglicérido de trimiristina bajo 10% en peso. Por ejemplo, en una mezcla de inter-esterificación 1:1 de ácido oleico (O) y ácido mirístico (M), aproximadamente 1/8 de las moléculas son trimiristina ( M M M ) si los ocho triglicéridos (sn-1-sn-2-sn-3) están aleatoriamente constituidos como OMM, MOM, MMO, MOO, OMO, OOM, OOO, y MMM. 4. La proporción de ácidos grasos poliinsaturados, es decir, ácido linoleico, para utilizarse en una composición de grasa dietética también es una consideración importante. El concepto de ácidos grasos balanceados entre ácidos grasos poliinsaturados y saturados se describe por Sundram y otros, en una serie de patentes de E.U.A. citado anteriormente, con la proporción de ácido linoleico que se establece entre el 15% y 40% en peso y los saturados totales que se establecen entre 20% y 40% en peso. Al considerar la información aquí del análisis nuevo de McGandy y otros, se cree que el rango de ácido linoleico en una grasa dietética puede expandirse de forma modesta para entre 10% y 40% en peso. Esto se basa en la observación que agregar tampoco como 8% en peso de ácido linoleico (proporcionado por 75% en peso de aceite de oliva) a una grasa inter-esterificada que contuvo 25% en peso de ácido mirístico, substancialmente aumentó HDL-C mientras disminuye LDL-C, cuando se compara con los componentes solos (ver "aceite de oliva" y "MCT+14" en el Cuadro 1). Se sugiere que 10% a 20% de ácido linoleico es el rango preferido de ácido linoleico para balancear entre el 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales en la grasa dietética.

Sorprendentemente, y contrario a la enseñanza nutricional convencional, niveles indefinidamente superiores de poliinsaturados no son mejores. Es decir, cuando el nivel de ácidos grasos poliinsaturados se aumenta sobre ese nivel requerido para lograr "balance", el perfil de lipoproteína se degrada. Esto es evidente en el Cuadro 1, comparando grasas inter-esterif icadas homologas todas hechas con 25% de grasa saturada y ya sea 75% de aceite de oliva (8% de ácido linoleico final en el panel 3) o alternativamente 75% de aceite de cártamo (51% de ácido linoleico final en el panel 4). Es evidente que tres de las cuatro grasas inter-esterificadas que contienen aceite de oliva proporcionaron perfiles de lipoproteinas superiores basados en HDL-C superior y relaciones LDL-C/HDL-C inferiores que aquellas con aceite de cártamo.

La proporción de ácidos grasos saturados en la grasa dietética también es un asunto que se debe de considerar. Claramente, el nivel de ácido mirístico y la proporción de residuos de miristato en la posición sn-2 bioactiva de la molécula de triglicérido son importantes. Debido a que esto es una cuestión abierta sobre si la proporción total de los ácidos grasos saturados en la dieta es crítica (excluyendo miristato). En el panel superior del Cuadro 1 sin considerar la dieta de mantequilla, es evidente ya que los ácidos grasos saturados aumentan substancialmente (y la relación P/S disminuye 16 veces de 5.2 a 0.57 a 0.32), el perfil de lipoproteína únicamente se degrada de forma moderada. Es decir, la relación LDL-C a HDL-C aumenta de 2.3 a 2.7, a 3.0 pero los niveles HDL-C permanecen substancialmente constantes (50-55 mg/decilitro). Por otro lado, con la dieta de mantequilla, el valor HDL-C cae dramáticamente (a 41 mg/decilitro) y LDL-C aumenta dramáticamente (hasta aproximadamente 200 mg/decilitro desde 150 mg/decilitro), que se cree que es debido en gran parte a que PUFA se vuelve limitante.

Estos datos también sugieren que el colesterol dietético es un problema más sustancial que los ácidos grasos saturados al degradar un perfil de lipoproteínas saludable. Sin embargo, debido a que las grasas animales saturadas en carnes y mantequilla se consumen ampliamente y contienen niveles sustanciales de colesterol, y debido a que las grasas vegetales saturadas libres de colesterol (por ejemplo, aceite de palma) son menos comunes en la dieta americana, existe un concepto erróneo común de que toda la grasa saturada es dañina. De hecho, en vista de los datos de HDL-C y LDL-C/HDL-C presentados en el Cuadro 1, se sugiere que el rango de ácidos grasos saturados totales en una grasa dietética puede variar de forma segura entre 15% y 40% en peso en la ausencia sustancial de colesterol dietético y en la presencia de PUFA adecuado. 5. La proporción de ácidos grasos mono-insaturados, es decir, ácido oleico, en la grasa dietética representa el contenido restante de ácidos grasos esencialmente naturales después de considerar los ácidos grasos poliinsaturados y saturados más biológicamente activos. Como se explicó anteriormente, si la proporción de ácido linoleico se agrega a ácido oleico, entonces la relación calculada de (ácido oleico + ácido linoleico) a ácidos grasos saturados totales en la reacción de inter-esterificación debe acercarse a 1.0:1.0, y preferiblemente excede 1:1, para minimizar la formación de triglicéridos tri-saturados . Por consiguiente, la grasa dietética debe contener entre 30% y 65% en peso de ácido oleico dependiendo del nivel de ácidos grasos saturados en la reacción. 6. La concentración de colesterol en una grasa dietética debe minimizarse para evitar degradar el perfil de lipoproteína (ver mantequilla problemática, panel 1, Cuadro 1). Es preferible que el colesterol dietético no exceda 2 mg por porción ya que éste es el nivel de colesterol máximo permisible permitido bajo las regulaciones de la FDA de los Estados Unidos para un producto que se va a etiquetar como libre de colesterol. Para una porción de 14g de un producto untable de mesa, este nivel representa 0.014% en peso de colesterol. En comparación, un alimento bajo en colesterol puede contener hasta 20 mg (0.14% en peso) del colesterol por porción, mientras la mantequilla típicamente contiene 0.22% en peso de colesterol (16 veces más que un producto libre de colesterol).

E. Relaciones de inter-esterificación Un objetivo de la presente invención es proporcionar recetas para ser grasas inter-esterificadas que no únicamente contienen ácido sn-2 mirístico, sino también proporcionan otros ácidos grasos que mejorarán el perfil de lipoproteína humano. Las consideraciones sobre tales recetas no incluyen la elección ingredientes sino también sus concentraciones que afectan la generación de varios productos de triglicérido y las propiedades físicas de la grasa resultante tal como él punto de fusión y la tendencia de cristalización, por ejemplo beta primo contra beta cristales). Ya que la inter-esterificacíón involucra un proceso de redisposición relativamente aleatorio para ácidos grasos en la molécula de triglicérido, la generación de porcentaje práctico de sn-2 miristato, con base en el peso de entrada de dos ingredientes principales puede variar en aproximadamente un rango de dos veces. De esa forma, una mezcla 3:1 de trimiristato a trioleato producirá obviamente un resultado mucho mayor (por ciento en peso) de triglicéridos que contienen un sn-2 miristato que una mezcla 1:3 de los mismos materiales. Sin embargo, el punto de fusión de triglicéridos que contienen una proporción sustancial de trimiristato en lugar de dimiristato y monomiristato se eleva indeseablemente. Consecuentemente, el solicitante favorece una estequiométrica en donde una parte del ácido mirístico y/o trimiristina se inter-esterifica con entre una y tres partes del aceite vegetal rico en ácido oleico (o alternativamente ácido oleico/trioleina). McGandy y otros utilizaron una relación de 75:25 ó 3:1 de aceite vegetal para grasa saturada al sintetizar la grasa dietética "oliva + 14" en el Cuadro 1.

Existen ventajas particulares al seleccionar otras relaciones de inter-esterificación, es decir, estequiométricas, al combinar dos o más grasas diferentes y/o ácidos grasos. Esto se ilustra aquí por ejemplo, cuando se selecciona una relación molecular 1:1 de ácido mirístico a ácido oleico. Tal mezcla 1:1 en una grasa inter-esterificada puede constituirse de triglicérido de trimiristina y aún aceite vegetal de ácido oleico alto tal como aceite de girasol que contiene 82% en peso de ácido oleico actualmente disponible de Cargill Inc. (Minneapolis, MN). Las estructuras de triglicérido resultantes producidas, por ejemplo, de 12 ácidos grasos mirísticos (M) y 12 ácidos grasos oleicos (O) (en donde los ácidos grasos se disponen aleatoriamente a lo largo de las posiciones sn-1, sn-2 y sn-3 para formar ocho estructuras de estereoisómero diferentes, 7 de las cuales contienen ácido mirístico) son como sigue: MMM, MMO, MOM, OMM, MOO, OMO, OOM, 000. Ya que dos y tres ácidos grasos saturados por molécula producirán una "grasa dura", es decir, una que tiene una consistencia sólida a la temperatura de refrigerador, esta inter-esterificación produce aproximadamente 50% de grasa dura que puede ser muy benéfica para producir margarinas y mantecas sólidas. En contraste, la relación 75:25 de aceite de oliva y ácido graso saturado, por ejemplo, ácido mirístico utilizado en las inter-esterificaciones descritas por McGandy y otros produce triglicéridos que contienen ácido mirístico que son casi exclusivamente mono-insaturados, es decir, OOM, OMO, MOO, y estos triglicéridos no funcionan para endurecer aceites vegetales.

La contribución importante de McGandy y otros en la producción y el estudio clínico de las grasas dietéticas que incluyen "oliva+14" y "cártamo + 14" se reconoce. Sin embargo, basándose en él nuevo análisis actual del solicitante de sus datos, se cree que una grasa dietética únicamente no debe contener al menos 3% de sn-2 miristato, sino también debe contener más (preferiblemente al menos dos veces más) sn-2 miristato que sn-2 palmitato, y más sn-2 miristato que laurato sn-2 para obtener los beneficios de la presente invención. Esto es debido a que el sn-2 palmitato y sn-2 laurato parecen afectar negativamente (aumentar) la relación LDL-C/HDL-C (ver "Oliva + 16" y "cártamo+ 16"). El solicitante también encuentra que las composiciones de grasa dietética proporcionadas por McGandy y otros contienen muy poco ácido linoleico (8% con 75:25" oliva + 14") o demasiado ácido linoleico (15% con 75:25 "cártamo + 14") para lograr los objetivos aquí descritos, es decir, para maximizar el nivel de HDL-C mientras se minimiza la relación LDL-C/HDL-C en plasma humano. Por consiguiente, el solicitante aumenta el nivel requerido de ácido linoleico sobre 8% en peso, a un nivel de ácido linoleico entre 10% y 40% en peso de la grasa dietética. De forma similar, el solicitante encuentra que algunas de las composiciones de grasa dietética de McGandy y otros contienen muy poco ácido oleico y mucho ácido linoleico (14% 18:1 con 75:25 "cártamo+14") o demasiado ácido oleico, pero muy poco ácido linoleico (53% 18:1 con 75:25 "oliva+14") para lograr un perfil de lipoproteína mejorado. Por lo tanto, se utiliza aquí un nivel de ácido oleico superior, en donde el nivel final de ácido oleico en la composición de grasa dietética está entre 30% y 65% en peso para maximizar el nivel de HDL-C mientras se minimiza la relación LDL-C/HDL-C en plasma humano.

Los estudios de Dabadie y otros y Loison y otros discutidos previamente también se reconocen, pero ambos grupos utilizaron grasa de leche en sus estudios. Con grasa de leche que proporciona más ácido sn-2 palmítico que ácido sn-2 mirístico, sus grasas dietéticas no son compatibles con la presente invención y no pueden optimizarse los perfiles de lipoproteína.. Similarmente, las grasas dietéticas de Temme y otros discutidas previamente que involucran inter-esterificar altos niveles de estearina de palma, miristina, y niveles muy bajos de ácido linoleico no son compatibles con los requerimientos de la presente invención debido a los niveles sustanciales de palmitina sn-2 que son equivalentes a los beneficios de sn-2 miristina, y debido a que el nivel de ácido linoleico en la grasa dietética es inadecuado.

Aunque los estudios de McGandy y otros proporcionan grasas ¡nter-esterificadas que de alguna forma están más cerca los requerimientos de la presente invención, los niveles de ácidos grasos poliinsaturados requeridos por la presente invención para reducir colesterol LDL no se satisfacen. Además, McGandy y otros no exploran que papel de estequiometría de inter-esterificación juega al mejorar el perfil de lipoproteína. Es decir, al variar la relación de ácido oleico a ácido mirístico utilizado para inter-esterificación, se anticipa que puede alterarse el perfil de lipoproteína. Más específicamente, McGandy y otros utilizaron una relación 1:3 fija de grasa tri-saturada a aceite de oliva (70% de ácido oleico) o aceite de cártamo (68% de ácido linoleico) para producir triglicéridos inter-esterificados que contienen ácidos grasos saturados sn-2 (por ejemplo, sn-2 miristato). Esta estequiometría produce una predominancia de triglicéridos que contiene un ácido graso saturado individual. El solicitante aquí varía substancialmente esta relación de estequiometría, por ejemplo, hacia arriba hasta aproximadamente 1:1, para introducir ácidos grasos saturados adicionales en la grasa dietética sintética/semi-sintética durante la inter-esterificación. Esto tiene consecuencias importantes cuando se inter-esterifica un triglicérido tri-saturado o un ácido graso saturado simple con cualquiera de una grasa rica en ácido graso monoinsaturado, o rica en ácido graso poliinsaturado. Este cambio produce moléculas de triglicérido inter-esterificadas que contienen mucho más triglicéridos di-saturados. En el caso de ácido mirístico inter-esterificado con un aceite vegetal alto en oleato o alto en linoleato, dos de los tres triglicéridos di-saturados (con 2 miristatos y un oleato o linoleato) contendrá el sn-2 miristato bioactivo.

Los triglicéridos de di-miristato inter-esterificados también pueden servir a una segunda función. Como una grasa dura, los triglicéridos di-saturados poseen un punto de fusión significativamente superior que los triglicéridos mono-saturados formados por McGandy y otros (con dos ácidos oleico o linoleico y un miristato). El punto de fusión sin embargo, permanece también bajo la temperatura de la boca humana para que la grasa tenga una sensación en la boca excelente. Esto es particularmente aplicable para hacer productos untables de margarina y mantecas, por ejemplo. De esa forma, dependiendo de cómo se afecta el perfil de lipoproteína por la presencia de di-saturados, la relación de miristato a oleato y linoleato puede ser cambiada en la reacción de inter-esterificación.

F. Composiciones de grasa que contienen bajos niveles de ácido linoleico Se realizaron estudios adicionales con composiciones de grasa experimentales con jerbos, al utilizar mezclas de aceite natural y mezclas que contienen aceites inter-esterif icados. Cuando se considera estos resultados es importante notar que el jerbo es muy sensible entre todas las especies, y proporciona el mejor modelo animal para identificar el efecto de ácidos grasos dietéticos en la respuesta de lipoproteína de suero (Pronczuk, A., P. Khosla. K.C. Hayes. Dietary myristic, palmitic, and linoleic acids modúlate cholesterolemia in gerbils. FASEB J. 8:1191-1200, 1994.), especialmente para revelar la importancia de ácido linoleico al disminuir colesterol de plasma en LDL-C. El jerbo también parece útil para valorar la respuesta de glucosa en la sangre a ácidos grasos dietéticos en una forma previamente atestiguada en humanos. (Sundram K, Karupaiah T, Hayes KC. Grasa inter-esterificada rica en ácido esteárico y grasa rica trans aumenta la relación LDL/HDL y glucosa de plasma con relación a la oleína de palma en humanos.

Nutr Metab 4:23, 2007.) En ese estudio de seres humano, una grasa IE hecha al inter-esterificar tri- 18:0 con aceite de soya, fue la causa de glucosa en la sangre elevada y un aumento en la relación LDL/HDL después de únicamente 1 mes a dieta.

De acuerdo con los resultados de estos estudios, la invención también incluye el descubrimiento adicional de que la mezcla de grasa balanceada apropiada, los niveles de ácidos grasos poliinsaturados (especialmente ácido linoleico) que son más bajos que lo que previamente se cree efectivo pueden incluir relación LDL/HDL ventajosa cuando se ingieren. En particular, los niveles inferiores de ácidos grasos poliinsaturados son efectivos al disminuir la relación LDL/HDL en combinación con niveles adecuados de ácidos grasos mono-insaturados (generalmente ácido oleico) y ácidos grasos saturados que incluyen niveles suficientes pero no excesivos de ácido mirístico o una combinación de ácido mirístico y ácido laúrico. Gran parte de la literatura concerniente a ácidos grasos sugiere que entre mayor sea el nivel de ácidos grasos poliinsaturados en las grasas dietéticas, mejor, debido a la ingestión de ácidos grasos insaturados, y en particular ácido linoleico, se entiende que disminuye el colesterol total en la sangre. Sin embargo, el consumo de grasas dietéticas que contiene altos niveles de ácido linoleico disminuye tanto LDL como HDL, pero no llega a la reducción más benéfica de la relación LDL/HDL. Como se describió previamente en las Patentes de E.U.A. Nos. 5,578,334; 5,843,497; 6,630,192; y 7,229,653, se encontró por los presentes inventores que la combinación entre 15% y 40% en peso de ácido linoleico junto con los niveles apropiados de ácidos grasos saturados (especialmente ácido palmítico, 16:0) y ácidos grasos mono-insaturados (especialmente ácido oleico 18:1) es ventajosa para lograr una relación de lipoproteína de colesterol benéfica.

De esa forma, experimentos recientes por los presentes inventores indican que el nivel y la proporción de ácidos grasos poliinsaturados como ácido linoleico (18:2) en la porción de grasa de la dieta de mamífero es importante al alterar la relación de colesterol LDL/HDL de plasma. Muy sorprendentemente, un nivel inesperadamente bajo de ácido linoleico en la composición de grasa total de la dieta parece suficiente para disminuir LDL a casi su nivel más bajo, cuando se alimenta en presencia de un nivel sustancial pero no excesivo de ácido mirístico (14:0) o la combinación de ácidos grasos de ácido laúrico (12:0) y ácido mirístico (14:0). Al mismo tiempo, este bajo nivel de ácido linoleico parece importante al permitir que el nivel de colesterol HDL benéfico permanezca alto cuando se alimenta con la combinación 14:0 ó 12:0 + 14:0. Estos resultados indican que del 100% total de ácidos grasos (en peso) contenidos en una grasa, menos de 15% en peso (por ejemplo, aproximadamente 10-14.9% o incluso tan poco como aproximadamente 9, 8, 7, 6, 5, 4, ó 3%) de ácido linoleico puede ser suficiente o incluso óptimo cuando se combina con una dieta que contiene los niveles apropiados de combinación de ácido graso mirístico o laúrico-mirístico para minimizar la relación de colesterol LDL/HDL.

Como un resultado, incluso aunque la invención incluye composiciones de grasa comestible que incluyen 15 a 40% de ácido linoleico, composiciones de grasa dietética sorprendentemente ventajosas (y alimento que contiene tales composiciones de grasa) pueden prepararse para que la composición de grasa contenga menos de 15% de ácido linoleico (por ejemplo, 3-5, 3-7, 3-10, 3-12, 3-14.9, 5-7, 5-10, 5-9, 5-14.9, 10-12, 10-14.9, ó 12-14.9%). Tales composiciones de grasa también contienen desde 15 hasta 50, 15 a 40, 15 a 30, 20 a 50, 20 a 25, 20 a 40, 20 a 35, ó 20 a 30% en peso de ácidos grasos saturados. El ácido mirístico (14:0) preferiblemente proporcionan no más de 40% de la grasa total en peso, más preferiblemente no más de 35, 30, 25, ó 20%, por ejemplo, 10 a 20, 10 a 30, 10 a 40, 15 a 20, 15 a 25, 15 a 30, 15 a 35, 15 a 40, 20 a 25, 20 a 30, 20 a 35, 20 a 40, 25 a 30, 25 a 35, ó 25 a 40%. También preferiblemente, el ácido palmítico (16:0) constituye no más de 20% de la grasa total, más preferiblemente no más de 15%, e incluso más preferiblemente no más de 12, 10, 9, 8, 7, 6, ó 5% de la grasa total. El ácido esteárico preferiblemente constituye no más de 10%, preferiblemente no más de 9, 8, 7, 6, 5, 4, ó 3% de los ácidos grasos en peso. Substancialmente el resto de los ácidos grasos en la composición de grasa son preferiblemente ácido oleico (18:1) y también incluyen cantidades menores de otros ácidos grasos poliinsaturados.

Como se discutió anteriormente, ventajosamente la composición de grasa puede incluir triglicéridos con un porcentaje sustancial de ácidos grasos mirístico y/o laúrico esterificados en la posición sn-2. De esa forma, preferiblemente al menos 1% y preferiblemente entre 3% y 16% en peso es ácido mirístico y/o ácido laúrico localizada en la posición sn-2 de la molécula de triglicérido. Preferiblemente, la relación de peso del ácido sn-2 mirístico al ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1 y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos saturados, mono-insaturados y poliinsaturados es igual a 100%. En ciertos casos, el nivel especificado de ácido linoleico se remplaza con una combinación de al menos 2, 3, ó 4 ácidos grasos poliinsaturados tomados en cualquier combinación seleccionada del grupo que consiste de ácido linoleico, ácido alfa-linoleico, ácido eicosapentaenoico (EPA), y ácido docosahexaenoico (DHA). Altamente preferible la composición de grasa esta substancialmente libre de colesterol.

Ciertas de las composiciones de grasa pueden prepararse al mezclar diferentes grasas que tienen perfiles de ácido graso apropiados. Por ejemplo, el aceite del núcleo de palma o el aceite de coco pueden utilizarse para proporcionar cantidades sustanciales de ácido mirístico y laúrico. Basándose en 100% en peso de los ácidos grasos contenidos en una grasa, el aceite de núcleo de palma comúnmente contiene aproximadamente 49% de ácido laúrico (12:0), aproximadamente 17% de ácido mirístico (14:0), aproximadamente 8% de ácido palmítico (16:0), aproximadamente 12% de ácido oleico (18:1), y aproximadamente 2-3% de ácido linoleico (18:2), junto con aproximadamente 2-4% de cada uno de otros ácidos grasos saturados (esteárico 18:0, cáprico 10:0, y caprílico 8:0). El ácido oleico puede proporcionarse, por ejemplo, al mezclar en aceite de girasol a oleico alto tal como ese de Cargill Inc., Minneapolis o aceite de soya oleico alto de DuPont. El aceite de girasol con alto contenido oleico de Cargill contiene aproximadamente 82% de ácido oleico, 8-9% de ácido linoleico y 8-9% de ácidos grasos saturados, mientras el aceite de soya oleico alto de DuPont contiene aproximadamente 84% de ácido oleico, 3% de ácido linoleico, y 13% de ácidos grasos saturados. Si se desea, el ácido linoleico adicional puede contribuirse al agregar cualquiera de una variedad de aceites vegetales que contienen cantidades sustanciales de ácido linoleico, por ejemplo, aceite de soya, cártamo, girasol, y/o maíz estándares o de uso común.

Además de las mezclas de aceites que se acaban de indicar, las mezclas también pueden incluir aceites inter-esterificados como se describe aquí que tienen ácido mirístico aumentado y/o ácido laúrico en la posición sn-2.

Los cuadros a continuación presentan resultados de estudios de jerbo para una variedad de dietas de prueba.

Cuadro 3. Pesos de Cuerpo y Órgano. Glucosa en Sangre y Lípidos de Plasma de Jerbos Alimentados con Grasas de Control o IE Durante 4 Semanas (Jerbo GFA 1) MediotSD (n=7-8, excepto lipoproteínas obtenidas de plasmas de rata individuales 2-4 combinados, n = 2-3) a,b,c,d. Mec|¡os en una j|a que comparte un superíndice común son significativamente diferentes (p<0.05) que utilizan ANOVA unidireccional y prueba PLSD de Fisher Cuadro 4-1. Pesos de Cuerpo y Órgano, Glucosa en Sangre y Lípidos de Plasma de Jerbos Alimentados Con Dietas de Control o Experimentales Durante 4 Semanas INGREDIENTE #687 #688 #689 #690 PKO Control PKO/HOSun PKO/HOSun tri12:0/HOSun mezcla 60/40 IE 50/50 IE 50/50 CHO:Grasa:Proteína (% en) 41:41:18 41:41:18 41:41:18 41:41:18 Kcal/g 4.3 4.3 4.3 4.3 Peso corporal (g) Inicial 50±4 50±4 50±4 50±4 Ganancia Final 70±4" 67±7 65±7 69±13 (9/d) 0.62+.0.12" 0.53±0.18 0.48±0.3 0.61 ±0.38" Consumo de alimento (g/d) 10.8±0.8 9.9±0.7 10.0±0.8 10.5±1.5 (Kcal/d) 27±2a 25±2° 25±2 26±4 (Kcal/d/kg BW) 386±29 373±30 385±31 377±58 Glucosa en la sangre en 87± 8 98±21 82±9a 102±21aACO ayunas, 4wk (mg/dL) Longitud de intestino delgado 36±2" 35±2 35±2 36±1Dca (crin) Plasma TC (mg/dL) 218±52abcAe 1 0±21a'' 185±20" 191±12 VLDL-C (mg/dL) 31 + 10" 42±10D 38±5C 25±7a LDL-C (mg/dL) 124±25 "'° ?a'ß''·8" 98±12" 102±11" 117±4y HDL-C (mg/dL) (57) (58) (55) (61) Relación de LDL-C/HDL-C 0.58±0.09a'Dca 0.36±0.023 0.37±0.06° 0.42±0.03a TG (mg/dL) 66±33 42±17 47±24 69±42 Cuadro 4-2. Pesos de Cuerpo y Órgano, Glucosa en Sangre y Lípidos de Plasma de Jerbos Alimentados Con Dietas de Control o Experimentales Durante 4 Semanas (Estudio IE 2) INGREDIENTE #684 #691 #692 #693 tri14:0/HOSun tri14:0/HOSun tri14:0/HOSun PKS/HOSun 50/50 IE 40/60 IE 25/75 IE 60/40 IE CHO:Grasa:Proteína (% en) 41:41:18 41:41:18 41:41:18 41:41:18 Kcal/g 4.3 4.3 4.3 4.3 Peso corporal (g) Ganancia Inicial 50±4 50±4 50±4 50±4 Final 65±4a 65±5 68±6 62±2ab (g/d) 0.48±0.16 0.47±0.2 0.56±0.24c 0.33±0.0SW Consumo de alimento (g/d) 10.3±0.5 10.0±0.7 10.4±0.7 10.2±0.5 (Kcal/d) 26±1 25±2 26±2 26+1 (Kcal/d/kg BW) 400±15 385±31 382±29 419±116 Glucosa en la sangre en 82±10" 93±17 84±17c 85±19" ayunas, 4wk (mg/dL) Longitud de intestino delgado 34±2" 34±1at 34±1" 33.6±1.0W (cm) Plasma 185±23° 178±28°5 178±44011 214±37'°'n TC (mg/dL) 33±4" 39±8' 44±17° VLDL-C (mg/dL) 48±12 40±7e 29±10,I J 47±12°'J LDL-C (mg/dL) 97±8C 101±8°'g 103±2" 102±0' HDL-C (mg/dL) (52) (57) (58) (48) Relación de LDL-C/HDL-C 0.49±0.10' 0.41±0.10a 0.28±0.10°,|! 0.47±0.129 TG (mg/dL) 54±22 45±13 61 ±42 29±12 Cuadro 5. Perfil de Ácido Graso de Dietas Experimentales (Jerbos Cuadro 5. Perfil de Ácido Graso de Dietas Experimentales (Jerbos IE #2) Dieta #687 #688 #689 «690 #684 #691 #692 #693 PKO PKO/HOSun PKO/HOSun tri12:Q/HOSun tri14:0/HOSun tri14:0HOSun tri14:0/HOSun PKS/HOSun (PUFA% Mezcla 50/50 60/40 IE 5050 IE 50/50 IE 40/60 2575 60/40 en) (3) (3.5) (¾ (3) (¾ (¾ (3) (3) % de ácido graso 8:0+10:0 5.6 2.9 3.4 0.0 0.0 0.0 0.0 2.3 12:0 44.5 22.7 26.3 44.6 0.0 0.0 0.0 28.2 14:0 15 7.7 9.3 0.2 45.8 36.5 21.3 12.0 16:0 8.8 6.3 6.7 1.8 2.0 2.2 2.6 6.7 18:0 2.3 3.8 3.0 1.8 1.8 2.1 2.8 3.2 18:1 16.6 47.6 44.2 42.7 42.0 51.0 64.5 40.2 18:2 7.2 8.7 7.0 7.6 7.7 7.2 7.1 7.4 18:3 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 El cuadro 3 y el Cuadro 4 (Cuadros 4-1 y 4-2) anteriores muestran los efectos de alimentar grasas dietéticas inter-esterificadas (IE) a jerbos, que incluyen cambios en lipoproteínas de plasma, triglicéridos y niveles de glucosa en la sangre. El Cuadro 5 enlista los perfiles de ácido graso para las dietas en el estudio que corresponde al Cuadro 3, mientras el Cuadro 6 enlista los perfiles de ácido graso para las dietas en el estudio que corresponde al Cuadro 4.

El Cuadro 3 proporciona los resultados obtenidos de la alimentación de cinco grasas dietéticas diferentes a jerbos. Estas grasas incluyen una mezcla que representa una mezcla de grasa AHA (Asociación de Corazón Americana) (control) que proporciona un balance de ácidos grasos saturados, mono-insaturados, y poliinsaturados en cantidades aproximadamente iguales (#682); una segunda grasa de control que representa una grasa saturada basada en aceite de palma (#683); una tercera grasa con t ri - 1 :0 (ácido t r i -mirístico) inter-esterificado con aceite de girasol oleico alto (HOSUN) a una relación 50/50 (#684); una cuarta grasa similarmente inter-esterificada que utiliza t r¡ - 16:0 (ácido tri-palm ítico) inter-esterificado con aceite de girasol oleico alto a una relación 50/50; y finalmente una quinta grasa similarmente inter-esterificada al utilizar tri-18 (ácido tri-esteárico) inter-esterificado con aceite de girasol oleico alto a una relación 50/50.

Los resultados en el Cuadro 3 muestran que todos los jerbos crecieron a la misma velocidad, pero aquellos alimentados con tri- 18:0 consumieron más alimento que todos los otros grupos de grasa con el fin de crecer normalmente. Esto sugiere que cuando se inter-esterifica ácido esteárico en un aceite normal a alta concentración, la grasa IE es resultante no se metaboliza eficientemente, arriesgando el crecimiento. La grasa t r i - 18:0 también elevó el nivel de glucosa en la sangre con relación a tr i- 1 : 0. De hecho, la grasa tri- 14:0 IE indujo el nivel de glucosa en la sangre en ayunas más bajo (72 mg/decilitro) y la relación LDL-HDL más baja (0.32) entre las grasas probadas. Fue evidente que t r i - 14 : 0 produjo la mejor respuesta metabólica en términos de energía dinámica, como se reflejó en marcadores de metabolismo de glucosa y lipoproteína en la sangre en ayunas.

El Cuadro 4 extiende la comparación de efectos de diferentes grasas dietéticas en el metabolismo de jerbo. La comparación ahora incluye (aceite de núcleo de palma, PK0), un aceite vegetal natural rico en ácido laúrico (12:0) y ácido mirístico (14:0). También incluidas están mezclas de aceite vegetal naturales y productos de grasa IE hechos al combinar PKO con HOSUN. Este experimento se dirigió al comparar y además aclarar la eficiencia funcional de esterificar aceites vegetales cuando se compara con la mezcla simple de dos aceites naturales para lograr las características de composición de ácido graso deseadas. Además, el ácido mirístico (tri- 14:0) y aceite HOSUN se combinaron a diferentes relaciones al utilizar inter-esterificación. Finalmente, el ácido laúrico (tri- 12:0) se inter-esterificó con aceite HOSUN al utilizar una relación 50/50 de los aceites.

Como en el Cuadro 3, diferentes composiciones de grasa IE influenciaron niveles de glucosa en la sangre a diferentes extensiones. Un nivel de glucosa en ayunas elevado (102 mg/decilitro) se midió con grasa dietética en donde tri-12:0 se inter-esterificó 50/50 con HOSUN (dieta #690). En comparación, la grasa IE producida de tri-14:0 y HOSUN al utilizar una relación 50/50 de nuevo mejoró el nivel de glucosa en la sangre en ayunas (82 mg/decilitro, dieta #684), como lo hizo la grasa IE producida al utilizar una relación 60/40 de PKO y HOSUN (82 mg/decilitro, dieta #689). La grasa IE producida al inter-esterificar tri-14:0 y HOSUN, pero al utilizar una relación reducida de 25/75 para tri-14:0 y HOSUN (dieta #692) resultó en una relación particularmente favorable de colesterol LDL/HDL (0.28) así como nivel de glucosa en ayunas favorable de 84 mg/decilitro). En la misma serie de experimentos, es interesante observar que PKO natural sólo (dieta #687) produjo la peor relación de colesterol LDL/HDL. Colectivamente, estos datos sugieren que la inter-esterificación que combina ácido mirístico (tri-14:0) y ácido oleico (por ejemplo, ácido HOSUN), o la mezcla de PKO (al proporcionar tanto ácidos mirístico como laúrico (14:0 y 12:0) junto con un aceite que contiene ácido oleico alto (por ejemplo, HOSUN) puede ser particularmente ventajoso.

G. Definiciones En el contexto de la presente invención y las reivindicaciones asociadas, los siguientes términos tienen los siguientes significados: El término "grasa nutricional" o "grasa dietética" como se utiliza aquí significa cualquier aceite o grasa comestible a base de triglicérido predominantemente, sin importar si se deriva o es purificado de fuentes vegetales o animales, o es de origen sintético o semi-sintético, o alguna combinación de éstos. Una grasa nutricional o dietética también contener otros constituyentes de elección tal como monoglicéridos, diglicéridos, saborizantes, vitaminas solubles en grasa, fitoesteroles y otros ingredientes comestibles, aditivos, de alimento, suplementos dietéticos y similares. Como se enseñó en la presente invención, cierta composición a base de grasa o aceite dietético puede formularse por ingeniería química o genética de una grasa o aceite al utilizar inter-esterif icación química o enzimática para unir ciertos ácidos grasos (o remover ciertos ácidos grasos y unir otros) a la estructura de base de g I icérido de la grasa. Una grasa nutricional o dietética puede inter-esterificarse por métodos químicos y/o enzimáticos conocidos en la técnica que utilizan relaciones definidas de ingredientes cuidadosamente controlados para producir ciertos productos de triglicérido previstos como se enseña aquí.

El objetivo de la presente invención es aumentar colesterol "bueno" HDLC, disminuir colesterol "malo" LDL, y/o disminuir la relación de LDL a relación de colesterol HDL en plasma humano. Otro efecto puede ser reducir niveles de glucosa en la sangre en ayunas.

Es importante que la composición a base de grasa resultante sea substancialmente libre de colesterol debido a que la presencia de colesterol degrada el perfil de üpoproteína, aumentando indeseablemente el colesterol LDL y aumentando la relación LDL/HDL en el plasma. El término "substancialmente libre" con referencia al nivel de colesterol significa que la grasa dietética contiene menos de 10 mg de colesterol por porción de un alimento que contiene la grasa dietética, más preferiblemente menos de 5 mg por porción, y muy preferiblemente menos de 2 mg por porción para calificar como "libre de colesterol" bajo estándares obligatorios de FDA de E.U.A. actuales.

Con referencia a ácidos grasos y su unión a la porción de glicérido de la molécula de triglicérido, existen tres posiciones de hidroxilo para esterificación de los ácidos grasos. Estas posiciones permite que se formen diferentes isómeros estructurales de glicérido, es decir, esteroisómeros. Los tres puntos de unión conocidos como las posiciones sn-1, sn-2 y sn-3 tienen importancia metabólica. Aunque las propiedades físicas de la grasa (por ejemplo, dureza, estructura de cristal de punto de fusión) se afectan por el ácido graso unido en cada posición, el ácido graso en la posición media o sn-2 tienen mayor impacto al afectar el nivel de diferentes lipoproteínas de plasma. Esto es debido a que la digestión y la hidrólisis enzimática por lipasa pancreática remueven los ácidos grasos esterif icados sn-1 y sn-3, dejando que el monoglicérido de ácido graso sn-2 se absorba en la corriente sanguínea.

El uso aquí del término "ácidos grasos" se refiere a tales ácidos grasos esterif icados a una estructura de base de glicerol. Principalmente los ácidos grasos se presentarán como triglicéridos, aunque también pueden estar presentes cantidades apreciables de di-y mono-glicéridos, junto con pequeñas cantidades de ácidos grasos libres.

Como se utiliza aquí, a menos que se especifique de otra forma, se proporcionan porcentajes y sus rangos especificados como composiciones de porcentaje en peso tal como "entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico" o desde "10% a 40% de ácido linoleico". A menos que se indique claramente lo contrario, tales referencias de rango incluyen los puntos finales del rango.

Las composiciones de grasa dietética como se proporcionan y calculan aquí se expresan en términos de formación de ácido graso en una base de porcentaje en peso. Para simplicidad, el porcentaje en peso total de ácidos grasos en grasas a base de triglicérido aquí descrito se establece a 100% (no ~95% como se utiliza en los cuadros de USDA). De esa forma, el carbono de glicerilo enlazado a éster unida a ácido graso se agrega efectivamente a ese ácido graso debido a que facilita los cálculos. Este concepto se describe en otra parte aquí por las siguientes palabras alternativas: "la suma de porcentajes en peso para grasa saturada, poliinsaturada y mono-insaturada (y ácidos grasos) es igual a 100% (basándose en los pesos de ácidos grasos esterificados en dicha composición)".

Los métodos actuales de inter-esterificación química y enzimática no se describen aquí debido a que son bien conocidos en la técnica y se describen en la literatura publicada.

El término "ácidos grasos insaturados" como si utiliza aquí se refiere a ácidos grasos que contienen al menos un enlace doble de carbono-carbono, como tal, incluye todos los ácidos grasos excepto los ácidos grasos saturados. Los ácidos grasos insaturados más comunes incluyen el ácido graso monoinsaturado, ácido oleico (18:1), y el ácido graso poliinsaturado, ácido linoleico (18:2). Los poliinsaturados también incluyen el ácido a-linoleico de ácidos grasos omega-3 (18:3. n-3 o ALA), y los denominados ácidos grasos poliinsaturados omega-3 de cadena larga, ácido eicosapentaenoico (EPA) y ácido docosahexaenoico (DHA). EPA (20:5, n-3) y ácido docosahexaenoico (22:6, n-3) contienen 5 y 6 enlaces dobles en cadenas de carbono de 20 y 22 átomos de carbono.

EJEMPLOS Las grasas dietéticas inter-esterificadas se prepararon por Stepan Company al utilizar la inter-esterificación química aleatoria para combinar las siguientes grasas o ácidos grasos y aceites vegetales: Ejemplo 1.

Una parte en peso trimiristina y tres partes en peso de aceite de girasol con alto contenido oleico. El aceite de girasol (Cargill Inc., Minneapolis, MN) contuvo aproximadamente 82% de ácido oleico, 8-9% de ácido linoleico y 8-9% de ácidos grasos saturados. Esta grasa inter-esterifícada refleja de forma cercana la grasa de "oliva+14" inter-esterificada (75:25) de McGandy y otros enlistada en el Cuadro 1 (panel 3). La mayoría del ácido mirístico en estos trigl icéridos se encuentra en moléculas de monomiristina-dioleina (aceite liquido) cuyo punto de fusión de beta-cristalino es 14°C, es decir, bajo la temperatura ambiente.

Ejemplo 2.

Igual que el Ejemplo 1 excepto 3.9 partes de trimiristina y 6.1 partes de aceite de girasol oleico alto se incorporaron en la grasa dietética inter-esterificada. La grasa resultante contiene aproximadamente 5% en peso de ácido linoleico y aproximadamente 39% de ácido mirístico, un tercio del cual (13%) es ácido sn-2 mirístico. Algunos de los triglicéridos resultantes que contendrán dos ácidos grasos saturados (di-saturados) que proporcionan un componente de sólidos de grasa a temperatura ambiente.

Ejemplo 3.

Igual que el Ejemplo 1 excepto una parte de trimiristina y una parte de aceite de girasol oleico alto se incorporan en la grasa dietética inter-esterificada. La grasa resultante contiene únicamente 4% en peso de ácido linoleico y aproximadamente 50% de ácido mirístico, un tercio de los cuales es ácido sn-2 mirístico. Si el aceite de girasol contiene aproximadamente 82% en peso de ácido oleico (como actualmente disponible de Cargill Inc. Minneapolis, MN), las estructuras de triglicéridos resultantes con ácidos mirísticos y oleicos producidas por inter-esterificación/redisposición química aleatoria incluyen ocho estructuras de esteroisómeros principales, cuatro de las cuales contienen ácido sn-2 mirístico, es decir, MMM, MMO, MOM, OMM, MOO, OMO, OOM, OOO. Aproximadamente se encontró 40% de los residuos de ácido mirístico en los triglicéridos de monomirístina-dioleina mientras se encontró aproximadamente 40% en triglicéridos de dimiristina-monooleina. El mirístato restante (únicamente aproximadamente 10% de las moléculas de triglicérido inter-esterificada) se encontró en el triglicérido de trimidistina. Los triglicéridos de dimiristina-monooleina tienen un punto de fusión cristalino beta-primo conveniente de 20-23°C, que proporciona una grasa dura muy útil para un producto untable de mesa refrigerado que se derretirá fácilmente en la boca.

Ejemplo 4.

Igual que el Ejemplo 3 excepto una parte de tripalmitina (en lugar de trimiristina) y una parte de aceite de girasol oleico alto se incorporan en una grasa dietética inter-esterificada. Los productos de grasa inter-esterificada que contienen palmitina pueden compararse con los productos homólogos que contienen miristina del Ejemplo 3. Utilizadas como grasas dietéticas en una configuración nutricional controlada, estos dos productos se utilizan para probar críticamente la hipótesis de que los triglicéridos que contienen sn-2 miristato en lugar de los triglicéridos de sn-2 palmitato homólogos preferencialmente aumentan colesterol HDL y reducen en la relación de colesterol LDL/HDL en plasma humano.

Como se describió anteriormente, cantidades iguales de tripalmitina y aceite de girasol con alto contenido oleico se incorporan en una grasa dietética inter-esterificada. La grasa resultante contiene únicamente 4% en peso de ácido oleico y aproximadamente 52% de ácido palmítico, un tercio (17%) del cual es ácido sn-2 palmítico. Si el aceite de girasol contiene aproximadamente 82% en peso de ácido oleico (como actualmente disponible de Cargill Inc., Minneapolis, MN), las estructuras de triglicérido resultantes con ácidos palmíticos y oleicos producidos por inter-esterificación/redisposición química aleatoria incluyen ocho estructuras de esteroisómeros principales, cuatro de las cuales contienen ácido sn-2 palmítico, es decir, PPP, PPO, POP, OPP, POO, OPO, OOP, OOO. Aproximadamente 40% de los residuos de ácido palmítico se encontró en triglicéridos de monopalmitina-dioleina mientras aproximadamente 40% se encontró en triglicéridos de dipalmitina-monooleina. La palmitina restante (únicamente aproximadamente 10% de las moléculas de triglicérido inter-esterificadas) se encontró en triglicérido de tripalmitina. Los triglicéridos dipalmitina-monooleina tienen un punto de fusión cristalino beta-primo de 20-23°C.

Ejemplo 5.

Igual que el Ejemplo 3 excepto una parte de trimiristina y una parte de aceite de cártamo regular (Cargill Inc.) se inter-esterificación. El aceite de cártamo proporciona un nivel alto de ácido linoleico, es decir, 78% en peso, y también 13% de ácido oleico y 9% de ácidos grasos saturados. El resultado de inter-esterificación aleatoria es igual en el Ejemplo 3 excepto que el aceite oleico de girasol se reemplaza por el ácido linoleico de cártamo (L) para producir principalmente MM , MML, MLM, LMM, MLL, LML, LLM, y LLL.

Ejemplo 6.

Se proporciona un análisis adicional de las primeras cuatro grasas ilustrativas descritas anteriormente a continuación en el Cuadro 7, en donde estas grasas inter-esterificadas se mezclan subsecuentemente, es decir, se combinan, con aceite de cártamo natural para aumentar el nivel de ácido linoleico en la grasa dietética para lograr niveles finales de 10%, 15% y 20% en peso de ácido linoleico.

MEZCLAS DE GRASA DIETÉTICA CON TRIGLICERIDOS INTER-ESTERIFICADOS INGREDIENTES Triglicérido de trimiristina (14:0) Trig I icé rido de tripalitina (16:0) Aceite de girasol (oleico alto) [8% de SFA (4% 16:0, 4% 18:0), 82% de MUFA (18:1), 8% de PUFA (18:2) Aceite de cártamo (regular) [9% de SFA (7% 16:0, 2% 18:0), 12% de MUFA (18:1), 78% de PUFA (18:2) GRASAS 1NTERESTERIFICADAS IE1: 25% de Trimiristina: 75% de Girasol (31% de SATS, 63% de MONOS, 6% de POLYS) Triglicéridos: en su mayoría monomiristina IE2: 39% de Trimiristina: 61% de Girasol (44% de SATS, 50% de MONOS, 5% de POLYS) Triglicéridos: mezcla intermedia de mono-y dimiristina IE3: 50% de Trimiristina: 50% de Girasol (54% de SATS, 41% de MONOS, 4% de POLYS) Triglicéridos: aproximadamente 40% de monomiristina, 40% de dimiristina, 10% de Trimiristina IE4: 50% Tripalmitina: 50% de Girasol (54% de SATS, 41% de MONOS, 4% de POLYS) Triglicéridos: aproximadamente 40% de monopalmitina, 40% de dipalmitina, 10%de tripalmitina CUADRO 7 A menos que se defina aquí de otra forma, todos los términos tienen sus significados ordinarios como se entiende por un experto en la técnica al cual pertenece la invención. El uso del artículo "un" o "uno" pretende incluir uno o más.

Todas las patentes y otras referencias citadas en la especificación son indicativas de nivel de elegibilidad de aquellos expertos en la técnica a los cuales pertenece la invención, y se incorporan por referencia en su totalidades, que incluyen cualquiera de los cuadros y figuras, a la misma extensión como si cada referencia se hubiera incorporado por referencia en su totalidad individualmente.

Un experto en la técnica apreciará fácilmente que la presente invención está bien adaptada para obtener los fines y ventajas mencionadas, así como aquellos inherentes aquí. Los métodos, variaciones, y composiciones aquí descritas como actualmente representativos de modalidades preferidas son ilustrativos y no se pretenden como limitaciones del alcance de la invención. Cambios aquí y otros usos ocurrirán para aquellos expertos en la técnica, que se abarcan dentro del espíritu de la invención, se definen por el alcance de las reivindicaciones.

Será fácilmente evidente para un experto en la técnica que pueden hacerse sustituciones y modificaciones variables a la invención aquí descrita sin apartarse del alcance y espíritu de la invención. Por ejemplo, además de grasas dietéticas naturales, sintéticas y semi-sintéticas enlistadas aquí, otras que no se enlistas pueden incorporarse en las composiciones aquí descritas. De forma similar, otras fuentes de ácido mirístico, ácido sn-2 mirístico, ácido linoleico y otros ácidos grasos y grasas no se enlistan aquí que aumenta niveles de plasma de HDL-C, disminuye niveles de plasma de LDL-C y disminuye la relación de LDL-C/HDL-C, pueden incorporarse en las composiciones aquí descritas, y utilizarse en combinaciones y concentraciones no descritas aquí, para producir grasas sintéticas y semi-sintéticas que caen dentro del alcance de la presente invención. Las especies de planta con ingeniería genética y seleccionadas naturalmente que producen grasas cuyos trig I icéridos son estructurados y cuyos niveles de ácido graso son de acuerdo con la presente invención también caen dentro del alcance de la presente invención. De esa forma, tales modalidades adicionales están dentro del alcance de la presente invención y las siguientes reivindicaciones.

La invención descrita aquí ilustrativamente puede practicarse de forma adecuada en la ausencia de cualquier elemento o elementos, limitación o limitaciones que no se describen aquí específicamente. De esa forma, por ejemplo, en cada caso aquí cualquiera de los términos "que comprende", "que consiste esencialmente de" y "que consiste de" puede reemplazarse con cualquiera de los otros dos términos. Los términos y expresiones que se han empleado se utilizan como términos de descripción y no limitación, y no existe la intención que en el uso de tales términos y expresiones de excluir cualquiera de los equivalentes de las características mostradas y descritas o porciones de las mismas, pero se reconoce que son posibles varias modificaciones dentro del alcance de la invención reclamada. De esa forma, se debe entender que aunque la presente invención se describió específicamente por modalidades específicas y características opcionales, pueden reclasif icarse la modificación y variación de los conceptos aquí descritos por aquellos expertos en la técnica, y tales modificaciones y variaciones se considera que están dentro del alcance de esta invención como se define por las reivindicaciones anexas.

Además, en donde se describen características o aspectos de la invención en los términos de grupos Markush u otra agrupación de alternativas, aquellos expertos en la técnica reconocerán que la invención también se describe consecuentemente en términos de cualquier miembro individual o sub-grupo de miembros del grupo Markush u otro grupo.

A menos que se indique lo contrario, en donde se proporcionan varios valores numéricos o puntos finales de rango de valor para modalidades, se describen modalidades adicionales al tomar cualquiera de dos valores diferentes como los puntos finales o un rango o al tomar dos puntos finales de rango diferente de rangos especificados como los puntos finales de un rango adicional. Tales rangos también están dentro del alcance de la invención descrita. Además, la especificación de un rango numérico que incluye valores mayores que uno incluye descripción específica de cada valor de entero dentro de ese rango.

De esa forma, las modalidades adicionales están dentro del alcance de la invención y dentro de las siguientes reivindicaciones.

Claims (29)

REIVINDICACIONES

1. - Una composición de grasa comestible que comprende: al menos 1% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido; entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico; entre 30% y 65% en peso de ácido oleico; y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados en total, en donde la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es al menos 1:1, la suma de porcentajes de peso para ácidos grasos saturados, mono-insaturados y poliinsaturados es igual a 100%.

2. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicha composición está substancialmente libre de colesterol.

3. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende al menos 3% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido.

4.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la ingesta consistente de dicha grasa comestible aumenta el colesterol HDL, disminuye el colesterol LDL y disminuye la relación de colesterol LDL/HDL en plasma humano.

5.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicha relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es al menos 2:1.

6.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la relación de peso de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 laúrico es al menos 1:1.

7.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde al menos 50% de dicho ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido se produce por inter-esterificación química o enzimática, o ambas.

8. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende entre 3% y 20% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido.

9. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende entre 5% y 10% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en las moléculas de triglicérido.

10. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde al menos 10% de las moléculas de triglicérido que comprenden ácido mirístico comprenden tres residuos de ácido mirístico.

11. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la rei indicación 1, en donde al menos 40% de las moléculas de triglicérido que comprenden ácido mirístico comprenden dos residuos de ácido mirístico.

12.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde al menos 40% de las moléculas de triglicérido que comprenden ácido mirístico comprenden únicamente un residuo de ácido mirístico.

13. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la relación en peso de ácidos grasos saturados a ácido linoleico es mayor que uno.

14. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde al menos 95% del ácido sn-2 mirístico se esterifica dentro de moléculas de triglicérido.

15.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde al menos 90% de las moléculas de triglicérido que tienen un ácido sn-2 mirístico llevan ácidos grasos insaturados esterificados en cualquiera o ambas de las posiciones de glicérido sn-1 y sn-3.

16.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 13, en donde dichos ácidos grasos insaturados se seleccionan del grupo que consiste de ácido oleico, ácido linoleico, ácido alfa-linoleico, EPA, DHA y combinaciones de los mismos.

17. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde las moléculas de triglicérido que comprenden ácido sn-2 mirístico además comprenden ácido mirístico esterificado en cualquiera de la posición de triglicérido sn-1 o sn-3.

18. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el porcentaje en peso de ácido mirístico esterificado en la posición de glicérido sn-2 está entre 3% y 5%.

19. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el porcentaje en peso de ácido mirístico esterificado en la posición de glicérido sn-2 está entre 5% y 8%.

20. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el porcentaje en peso de ácido mirístico esterificado en la posición de glicérido sn-2 está entre 8% y 12%.

21. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el porcentaje en peso de ácido mirístico esterificado en la posición de glicérido sn-2 está entre 12% y 16%.

22.- La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el porcentaje en peso de ácido mirístico esterificado en la posición de glicérido sn-2 está entre 16% y 20%.

23. - La composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho ácido linoleico se reemplaza por al menos dos ácidos grasos poliinsaturados seleccionados del grupo que consiste de ácido linoleico, ácido alfa-linoleico, EPA, DHA y combinaciones de los mismos.

24. - Un producto alimenticio preparado que comprende la composición de grasa comestible de acuerdo con la reivindicación 1.

25.- Una dieta para ser humano para aumentar la concentración de colesterol HDL mientras se reduce el colesterol LDL en plasma humano, en donde entre 10% y 75% de la grasa dietética diaria se proporciona por la composición de grasa comestible de la reivindicación 1.

26.- Un método para ayudar a una persona a aumentar la concentración de colesterol HDL mientras reduce el colesterol LDL en su plasma, que comprende: proporcionar una composición de grasa dietética a base de triglicérido estructuralmente modificada que está substancialmente libre de colesterol, en donde dicha composición de grasa dietética comprende al menos 1% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre el 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, en donde la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes en peso para ácidos grasos saturados, poliinsaturados y mono-insaturados es igual a 100%.

27.- Un método para aumentar la concentración de colesterol HDL mientras disminuye el colesterol LDL en el plasma de un sujeto humano, que comprende: ingerir consistentemente una composición de grasa dietética a base de triglicérido estructuralmente modificada que está substancialmente libre de colesterol, en donde dicha composición de grasa dietética comprende al menos 1% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, en donde la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes de peso para ácidos grasos saturados, poliinsaturados y mono-insaturados es igual a 100%.

28.- Un método para preparar una composición de grasa comestible, substancialmente libre de colesterol, que comprende: mezclar un aceite comestible substancialmente libre de colesterol rico en sn-2 miristato con al menos otro aceite comestible substancialmente libre de colesterol, con lo cual forma un aceite comestible mezclado que comprende: al menos 1% en peso de ácido mirístico esterificado en la posición sn-2 en moléculas de triglicérido, entre 10% y 40% en peso de ácido linoleico, entre 30% y 65% en peso de ácido oleico, y entre 15% y 40% en peso de ácidos grasos saturados totales, en donde la relación de ácido sn-2 mirístico a ácido sn-2 palmítico es mayor que 1:1, y la suma de porcentajes de peso para ácidos grasos saturados, poliinsaturados y mono-insaturados es igual a 100%.

29.- El método de acuerdo con la reivindicación 28, en donde dicho aceite comestible rico en sn-2 miristato se forma a través de un método que comprende inter-esterificación enzimática o química.