MX2010011370A - Inhibidores de fosfatidilinositol 3-cinasa. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos útiles como inhibidores de PI3K, particularmente de PI3K ggr. La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden los compuestos y métodos para usar las composiciones en el tratamiento de varias enfermedades, afecciones, o trastornos.

Description

INHIBIDORES DE FOSFATIDILINOSITOL 3-CINASA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos útiles como inhibidores de fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K) . La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden los compuestos de la invención y métodos de uso de las composiciones en el tratamiento de varios trastornos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las PI3Ks son una familia de lipido cinasas que catalizan la fosforilación del lipido fosfatidilinositol (PI) de membrana en el 3' -OH del anillo de inositol para producir el 3-fosfato de PI [PI(3)P, PIP] , 3 , 4-bifosfato de PI [PI(3,4)P2,. PIP2] y 3 , 4 , 5-trifosfato de PI [PI (3 , 4 , 5) P3 , PIP3] . PI(3,4)P2 y PI(3,4,5)P3 actúan como sitios de reclutamiento para varias proteínas de señalización intracelulares , las cuales a su vez forman complejos de señalización para retrasar las señales extracelulares a la cara citoplásmica de la membrana de plasma.

Ocho PI3K de mamífero se ha identificado hasta ahora, cuatro PI3Ks clase I. La clase la incluye ??3?a, ??3?ß y PI3K5. Todas las enzimas de clase la son complejos heterodiméricos que comprenden una subunidad catalítica (PIIOOÍ, ????ß o ????d) asociada con una subunidad adaptadores REF.214855 p85 que contiene dominio SH2. Las PI3Ks . clase Ia| son activadas a través de la señalización de tirosina cinasa y están involucradas en la supervivencia y proliféración celular. Las PI3Ko¡ y ??3?ß también se han implicado en la tumorigénesis en una variedad de cánceres humanos. Por consiguiente, los inhibidores farmacológicos de PI3Ka y ??3?ß son útiles, para- tratar varios tipos de cáncer.

?G3??, el único miembro de las PI3Ks Clase Ib, consiste de una subunidad catalítica ?????, la cual; está asociada con una subunidad regulatoria plOl. ??3?? se' regula por los receptores acoplados a proteína G (GPCRs) vía asociación con subunidades ß? de proteínas G heterotriméricas . ??3?? se expresa principalmente en células hematopoyéticas y cardiomiocitos y está involucrada en la inflamación y función de mastocitos. Por consiguiente, los inhibidores farmacológicos de ??3?? son útiles para tratar una variedad de enfermedades inflamatorias, alergias y enfermedades cardiovasculares .

Aunque un número de inhibidores de PI3K se han desarrollado, existe una necesidad de compuestos adiciónales para inhibir PI3Ks para tratar varios trastornos y enfermedades, especialmente aquellos que afectan el sistema nervioso central (CNS) . Por consiguiente, podría ser deseable desarrollar compuestos adicionales que son útiles como inhibidores de PI3K que penetran la barrera hematoencefálica (BBB) .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN encontrado que los compuestos invención, y composiciones de los mismos farmacéuticamente aceptables, son efectivos como inhibidores de PI3K, particularmente ??3??. Por consiguiente, la invención caracteriza compuestos que tienen la fórmula general: o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable, donde cada uno de R1 y X es como se define en la presente. invención también proporciona composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de fórmula I y un portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable. Estos compuestos y composiciones farmacéuticas son útiles para tratar o disminuir la severidad de una variedad de trastornos, incluyendo enfermedades autoinmunitarias y enfermedades inflamatorias del CNS .

Los compuestos y composiciones proporcionados por esta invención también son útiles para el estudio de PI3K en fenómenos biológicos y patológicos; el estudio de las trayectorias de transducción de señal intracelular mediadas por tales cinasas; y evaluación comparativa de nuevos inhibidores de cinasa.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones y Terminología General Como se usa en la presente, las siguientes definiciones se deberán aplicar a menos que se indique de otra forma. Para propósitos de esta invención, los elementos químicos son identificados de conformidad con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, y el Manual de Química y Física, 75a Ed. 1994. Adicionalmente, los principios generales de la química orgánica se describen en "Organic Chemistry" , Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y "March's Advanced Organic Chemistry," 5th Ed. , Smith, M.B. and March, J., eds. John Wiley & Sons, New York: 2001, los contenidos completos de las cuales se incorporan para referencia.

Como se describe en la presente, los compuestos de la invención pueden ser opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes , tales como se ilustran generalmente anteriormente, o como se ejemplifica por las clases, subclases, y especies particulares de la invención. Se apreciará que la frase "opcionalmente sustituido" se usa intercambiablemente con la frase "sustituido o no sustituido". En general, el término "sustituido", si es precedido por el término "opcionalmente" o no, se refiere al reemplazo de uno o más radicales hidrógeno en una estructura dada con el radical de un sustituyente especificado. A menos que se indique de otra forma, un grupo opcionalmente sustituido puede tener un sustituyente en cada posición sustituible del grupo. Cuando más de una posición en una estructura dada se puede sustituir con más de un sustituyente seleccionado de un grupo especificado, el sustituyente puede ser ya sea el mismo o diferente en cada posición.

Como se describe en la presente, cuando el término "opcionalmente sustituido" precede una lista, el término se refiere a todos los grupos sustituibles subsecuentes eri esta lista. Por ejemplo, si X es halógeno; alquilo de Ci-3 o fenilo opcionalmente sustituido; X puede ser ya sea alquilo opcionalmente sustituido o fenilo opcionalmente sustituido. Igualmente, si el término "opcionalmente sustituido" sigue de una lista, el término también se refiere a todos los grupos sustituibles en la lista previa a menos que se indique de otra forma. Por ejemplo: si X es halógeno, alquilo de Ci-3, o fenilo, en donde X es opcionalmente sustituido por Jx, entonces tanto alquilo de Ci-3 como fenilo puederi ser opcionalmente sustituidos por Jx. Como es evidente para uno que tiene experiencia ordinaria en el arte, los grupos tales como H, halógeno, N02, CN, NH2, OH, u OCF3 no se podrían incluir debido a que son grupos no sustituibles. Si una estructura o radical sustituyente no se identifica o define como "opcionalmente sustituido" , la estructura o radical r sustituyente es no sustituido. j Las combinaciones de sustituyentes contempladas por esta invención son preferiblemente aquellas que resultan en la formación de compuestos estables o químicamente factibles . El término "estable" , como se usa en la presente, se refiere a compuestos que no son sustancialmente alterados cuando se ' someten a condiciones para permitir su producción, detección, y, preferiblemente, su recuperación, purificación, y uso para uno o más de los propósitos descritos en la presente. En algunas modalidades, un compuesto estable o compuesto químicamente factible es uno que no es sustancialmente alterado cuando se mantiene a una temperatura de 40°C o menos, en la ausencia de humedad u otras condiciones químicamente reactivas, por al menos una semana.

El término "alifático" o "grupo alifático" , cómo se usa en la presente, significa una cadena de hidrocarburo sustituida o no sustituida, de cadena recta (es decir, no ramificada) o ramificada que está completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación . A menós que se especifique de otra forma, los grupos alifáticos contienen 1-20 átomos de carbono. En algunas modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-10 átomos de carbono. En otras modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-8 átomos de carbono. En aún otras modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-6 átomos de carbono, y en todavía otras modalidades, los grupos alifáticos contienen 1-4 átomos de carbono. Los grupos álifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo, alquenilo, o alquinilo sustituidos o no sustituidos, lineales o ramificados. Los ejemplos adicionales de grupos alifáticos incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, isopropilo, isobutilo, vinilo, y sec-butilo. Los términos "alquilo" y el prefijo "alk-", como se usa en la presente, son inclusives tanto de cadena de carbono saturada ramificada como cadena recta. El término "alquileno" , como se usa en la presente, representa un grupo hidrocarburo de cadena recta o ramificada, divalente, saturado y se ejemplifica por metileno, etileno, isopropileno y similares. El término "alquilideno" , como se usa en la presente, representa un grupo enlazante alquilo de cadena recta divalente . El término "alquenilo" , como se usa en la presente, representa grupo hidrocarburo de cadena recta o ramificada monovalente que contiene uno o más enlaces dobles carbono-carbono . El término "alquinilo", como se usa en la presente, representa un grupo hidrocarburo de cadena recta o ramificada monovalente que contiene uno o más enlaces triples carbono-carbono .

El término "ciclolif tico" (o "carbociclo" ) se refiere a hidrocarburo de C3-C8 monocíclico o hidrocarburo de C8-Ci2 bicíclico que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero el cual no es aromático, que tiene un punto único de unión al resto de la molécula, y en donde cualquier anillo individual en el sistema de anillo bicíclico tiene 3-7 miembros. Los grupos cicloalifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, cicloalquilo, cicloalquenilo, y cicloalquin lo . Los ejemplos adicionales de grupos alifáticos incluyen ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo, y cicloheptenilo .

El término "heterociclo" , "heterocicilo" , "heterocicloalifático" , o "heterocíclico" como se usa en la presente se refiere a un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, o tricíclico en el cual al menos un anillo en el sistema contiene uno o más heteroátomos, el cual es el mismo o diferente, y que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero el cual no es aromático, y que tiene un punto de unión único al resto de la molécula. En algunas modalidades, el grupo "heterociclo", "heterociclilo" , heterocicloalifático" , o "heterocíclico" tiene tres a catorce miembros del anillo en los cuales uno o más miembros del anillo es un heteroátomo independientemente seleccionado de oxígeno, azufre, nitrógeno, o fósforo, y cada anillo en el sistema contiene 3 a 8 miembros del anillo.

Los ejemplos de anillos heterocíclicos incluyen, pero no se limitan a, los siguientes monociclos: 2-tetrahidrofuranilo, 3 -tetrahidrofuranilo, 2-tetrahidrotiofenilo, 3 -tetrahidrotiofenilo, 2-morfolino, 3- morfolino, 4-morfolino, 2-tiomorfolino, 3 -tiomorfolino, 4-tiomorfolino, 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo, 3-pirrolidinilo, 1-tetrahidropiperazinilo, 2-tetrahidropiperazinilo, 3 -tetrahidropiperazinilo, l-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 1-pirazolinilo, 3-pirazolinilo, 4-pirazolinilo, 5-pirazolinilo, 1-piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-piperidinilo, 2-tiazolidinilo, 3-tiazolidinilo, 4-tiazolidinilo, 1-imidazolidinilo, 2-imidazolidinilo, 4-iraidazolidinilo, 5-imidazolidinilo; y los siguientes biciclos: 3-lH-bencimidazol-2-ona, 3- (1-alquil) -bencimidazol- 2-ona, indolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, benzotiolano, benzoditiano, y 1,3-dihidro-imidazol-2-ona .

I El término "heteroátomo" significa uno o más de oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo, o silicio, incluyendo cualquier forma oxidada de nitrógeno, azufre, o fósforo; la forma cuaternizada de cualquier nitrógeno básico; o un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico, por ejemplo N (como en 3 , 4-dihidro-2H-pirrolilo) , NH (como en pirrolidinilo) o NR+ (como en pirrolidinilo N-sustituido) .

El término "insaturado" , como se usa en la presente, significa que una porción tiene una o más unidades de insaturación.

El término "alcoxi" , o "tioalquilo" , como se usa en la presente, se refiere a un grupo alquilo, como se definió previamente, unido a la cadena de carbono principal a través de un átomo de oxígeno ("alcoxi") o azufre ( "tioalquilo" ) .

Los términos "haloalquilo" , "haloalquenilo" , y "haloalcoxi" significan alquilo, alquenilo, o alcoxi, como pueda ser el caso, sustituido con uno o más átomos de halógeno. El término "halógeno" significa F, Cl, Br, o I.

El término "arilo" usado solo o como parte de una porción grande como en "aralquilo" , "aralcoxi" , o ariloxialquilo" , se refiere a un sistema de anillo carbocíclico monocxclico, bicíclico, o tricíclico que tiene un total de seis a catorce miembros del anillo, en donde el sistema de anillo tiene un punto de unión único al resto de la molécula, al menos un anillo en el sistema es aromático y en donde cada anillo en el sistema contiene 3 a 7 miembros del anillo. El término "arilo" se puede usar intercambiablemente con el término "anillo arilo" . Los ejemplos de anillos arilo incluyen fenilo, naftilo, y antraceno .

El término "heteroarilo" , usado solo o como parte de una porción grande como en "heteroaralquilo" , o "heteroarilalcoxi" se refiere a un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, y tricíclico que tiene un total de cinco a catorce miembros del anillo, en donde el sistema de anillo tiene un punto de unión único al resto de la molécula, al menos un anillo en el sistema es aromático, al menos un anillo en el sistema contiene uno o más heteroátomos independientemente seleccionados de nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo, y en donde cada anillo en el sistema contiene 3 a 7 miembros del anillo. El término "heteroarilo" se puede usar intercambiablemente con el término "anillo heteroarilo" o el término "heteroaromático" .

Los ejemplos adicionales de anillos heteroarilo incluyen los siguientes monociclos: 2-furanilo, 3-furanilo, N-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 5-imidazolilo, 3 -isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo, N-pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo, piridazinilo (por ejemplo, 3 -piridazinilo) , 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, tetrazolilo (por ejemplo, 5-tetrazolilo) , triazolilo (por ejemplo, 2-triazolilo y 5-triazolilo) , 2-tienilo, 3-tienilo, pirazolilo (por ejemplo, · 2-pirazolilo) , isotiazolilo, 1, 2, 3-oxadiazolilo, 1, 2 , 5-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1, 2, 3-triazolilo, 1, 2, 3-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, 1 , 2 , 5-tiadiazolilo,. pirazinilo, 1,3,5-triazinilo, y los siguientes biciclos: bencimidazolilo, benzofurilo, benzotiofenilo, indolilo (por ejemplo, 2-indolilo) , purinilo, . quinolinilo (por ejemplo, 2-quinolinilo, 3-quinolinilo, 4 -quinolinilo) , e isoquinolinilo (por ejemplo, 1-isoquinolinilo, 3 -isoquinolinilo, ó 4-isoquinolinilo) . i En algunas modalidades, un grupo arilo (incluyendo aralquilo, aralcoxi, arilooxialquilo, y similares) o heteroarilo (incluyendo heteroaralquilo, heteroariloalcoxi, y similares) puede contener uno o más sustituyentes .| Los sustituyentes adecuados en el átomo de carbono insaturado de un grupo arilo o heteroarilo incluyen: halógeno; -R0;, |-0R°; -SR° ; 1 , 2 -metilendioxi ; 1 , 2-etilendioxi ; fenilo ¦ (Ph) , opcionalmente sustituido con R°; -O(Ph), opcionalmente sustituido con R°; - (C¾) a-2 (Ph) , opcionalmente sustituido con : i R°; -CH=CH(Ph), opcionalmente sustituido con R°; -N02;j -CN; -N(R°)2; -NR°C(0)R°; -NR°C(S)R°; -NR°C (O) N (R° ) 2 ; i -NR°C(S)N(R°)2; -NR°C (O) OR° ; -NR°NR°C (0) R° ; -NR°NR°C (0) N (R° ) 2 ; -NR°NR°C(0)OR° ; -C(0)C(0)R°; -C (O) CH2C (0) R° ; -C(0)0R°; i -C(0)R°; -C(S)R°; -C (0) N (R° ) 2; -C(S)N(R°)2; -B(ÓR°)2; i -0C(0)N(R°) 2; -0C(0)R°; -C (0) N (0R° ) R° ; -C(N0R°)R°; -.S(.0)2R°; ¡ -S(0)3R°; -S(0)2N(R°)2; -S(0)R°; -NR°S (0) 2N (R° ) 2 ; -NR°S (6) 2R° ; -N(0R°)R°; -C(=NH) -N(R°)2; - (CH2) 0-2NHC (0) R° ; -L-R° ; -L-N!(R°)2; -L-SR0 ; -L-0R0; -L- (cicloalif tico de C3-10) , -L- (arild de C6- 10, -L- (heteroarilo de 5-10 miembros), -L- (heterociclilo i de 5-10 miembros) , oxo, haloalcoxi de Ci- , haloalquilo de Cx-4 , -L-N02, -L-CN, -L-0H, -L-CF3; o dos sustituyentes, en · el mismo carbono o en diferentes carbonos, conjuntamente con el carbono o carbonos que intervienen a los cuales se ¡unen, forman un anillo saturado, insaturado, o parcialmente saturado de 5-7 miembros, en donde L es un grupo alquileno de Ci-6 en el cual hasta tres unidades de metileno se reemplazan por -NH-, -NR° - , -0-, -S-, -C(0)0-, -0C(0)-, -C(0)C0-, -C(0)-, -C(0)NH-, -C(0)NR°-# -C(=N-CN) , -NHCO- , -NR°C0-, -NHC(0)0-, -NR°C(0)0-, -S(0)2NH-, -S(0)2NR°-, -NHS(0)2-, -NR°S(0)2-, -NHC(0)NH-, -NR°C (0) H- , -NHC(0)NR°-, -NR°C(0)NR°, -0C(0)NH-, -0C(0)NR°-, -NHS(0)2NH-, -NR°S (0) 2NH- , -NHS (O) 2NR° - , -NR°S(0)2NR°-, -S(0)-, o -S(0)2-, y en donde cada ocurrencia de R° se selecciona independientemente de hidrógeno, alif tico de Ci-6 opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo o heterocíclico de 5 a 6 miembros insustituido, fenilo, o -CH2(Ph), o, dos ocurrencias independientes de R°, en el mismo sustituyente o diferentes sustituyentes , tomados conjuntamente con los átomos a los cuales cada grupo R° se une, forman un anillo heterociclilo, arilo, o heteroarilo de 5-8 miembros o un anillo cicloalquilo de 3 a 8 miembros, en donde el anillo heteroarilo o heterociclilo tiene 1 a 3 heteroátomos independientemente seleccionados de nitrógeno, oxígeno, o azufre. Los sustituyentes opcionales no limitantes en el grupo alifático de R° incluyen -NH2, -NH (alifático de d-4) , -N(alifático de Ci-4)2, halógeno, alifático de Ci-4, -OH, -O(alifático de C1-4) , -N02, -CN, -C(0)0H, -C (0)0 (alifático de Ci-4) , -0(halod-4alifático, o haloCi-4alif tico, en- donde cada . uno de los grupos alifáticos de C1-4 anteriores de R° es no sustituido.

En algunas modalidades, un grupo alif tico o heteroalifático, o un anillo heterocíclico no aromático puede contener uno o más sustituyentes . Los sustituyentes adecuados en el carbono saturado de un grupo alifático o heteroalif tico, o de un anillo hetercíclico no aromático se seleccionan de aquellos listados anteriormente para el carbono no saturado de un grupo arilo o heteroarilo y adicionalmente incluyen los siguientes: =0, =S, =NNHR*, =NN(R*)2, = NHC(0)R*, = NHC (0)0 (alquilo) , = NHS (0) 2 (alquilo) , o =NR* , donde cada R* se selecciona independientemente de hidrógeno o un alifático de Ci opcionalmente sustituido. Los sustituyentes opcionales en el grupo alifático de R* se seleccionan de -NH2, NH(alifático de d-4) , -N(alifático de Ci-4)2, halógeno, alifático de Ci-4, -OH, -0 (alifático de Ci-4) , -N02, -CN, - C(0)0H, -C(0)0(alifático de Ci-4) , -C(0)NH2, -C (0) NH (alifático i de Ci-4) , -C(0)N(alifático de Ci-4)2, -0 (halo-Ci-4alifático) , y halo (alifático de Ci-4) , donde cada uno de los grupos alifáticos de Ci-4 anteriores de R* es no sustituido; o dos R* en el mismo nitrógeno se toman conjuntamente con el nitrógeno para formar un anillo heterociclilo o heteroarilo de 5-8 miembros que tiene 1-3 heteroátomos independientemente seleccionados de nitrógeno, oxígeno, y azufre.

En algunas modalidades, los sustituyentes opcionales en el nitrógeno de un anillo heterocíclico no aromático incluyen -R+, -N(R+)2, -C(0)R+, -C(0)OR+, -C(0)C(0)R+, -C(0)CH2C(0)R+, . -S(0)2R+, -S (O) 2N (R+) 2 , -C(=S)N(R+) 2, -C(=NH) -N(R+)2, o -NR+S (0) 2R+; en donde R+ es hidrógeno, un alif ico de Ci-6 opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, -O(Ph) opcionalmente sustituido, -CH2(Ph) opcionalmente sustituido, - (CH2) i-2 (Ph) opcionalmente sustituido; -CH=CH(Ph) opcionalmente sustituido; o un anillo heteroarilo o heterociclico de 5-6 miembros no sustituido que tiene uno a cuatro heteroátomos independientemente seleccionados de oxígeno, nitrógeno, . o azufre, o, dos ocurrencias independientes de R+, en el mismo sustituyente o diferentes sustituyenets , tomados conjuntamente con los átomos a los cuales cada grupo R+ se une, forman un anillo heterociclilo, arilo, o heteroarilo de 5-8 miembros o un anillo cicloalquilo de 3-8 miembros, en donde el anillo heteroarilo o heterociclilo tiene 1-3 heteroátomos independientemente seleccionados de nitrógeno, oxígeno, o azufre. Los sustituyentes opcionales en el grupo alifático o el anillo fenilo de R+ se seleccionan de -NH2, -NH(alifático de Ci- ) , -N(alifático de Ci-4)2, halógeno, alifático de Ci- , -OH, -O(alifático de C1-4) , -N02, -CN, -C(0)OH, -C (O) 0 (alifático de Ci-4) , -0 (halo (alifático de Ci- ) ) , o halo (alifático de C1- ) , en donde cada uno de los grupos alifáticos de C1-4 anteriores de R+ es no sustituido.

Como se detalló anteriormente, en algunas modalidades, dos ocurrencias independientes de R° (o R+, o cualquier otra variable definida de manera similar en la presente) , se pueden tomar conjuntamente con los átomos a los cuales cada variable se une para formar un anillo heterociclilo, - arilo, o heteroarilo de 5-8 miembros o un anillo cicloalquilo de 3-8 miembros. Los anillos ejemplares que se forman cuando dos ocurrencias independientes de R° (ó R+, o cualquier otra variable definida de manera similar en la presente) se toman conjuntamente con los átomos a los cuales cada variable se une incluyen, pero no se limitan a los siguientes: a) dos ocurrencias independientes de R° (o R+, o cualquier otra variable definida de manera similar en la presente) que se unen al mismo átomo y se toman conj ntamente con este átomo para formar un anillo, por ejemplo, N(R°)2, donde ambas ocurrencias de R° se toman i conjuntamente con el átomo de nitrógeno para formar un grupo piperidin-l-ilo, piperazin-1- ilo, o morfolin-4-ilo; y b) dos ocurrencias independientes de R° (o R+, o cualquier otra variable definida de manera similar en la presente) que se unen a diferentes átomos y se toman conjuntamente con ambos átomos para formar un anillo, por ejemplo donde un grupo fenilo es sustituido con dos ocurrencias de OR° de R° se toman conjuntamente con los átomos de oxígeno a los cuales se unen para formar un anillo de 6 miembros que contiene oxígeno, fusionado: Se podrá apreciar que una variedad de otros anillos se pueden formar cuando dos ocurrencias independientes de R° (o R+, o cualquier otra variable definida de manera similar en la presente) se toman conjuntamente con los átomos a los cuales cada variable se une y que los ejemplos detallados anteriormente no se proponen para ser limitantes.

En algunas modalidades, una unidad de metileno de la cadena de alquilo. o alifático es opcionalménte reemplazada con otro átomo o grupo. Los ejemplos de tales átomos o grupos podrían incluir, pero no se limitan a, -NR°-, -O-, -S-, C(0)0-, -OC(O)-, -C(0)C0-, -C(O)-, -C(0)NR°-, -C(=N-CN), -NR°CO-, -NR°C(0)0-, -S(0)2NR°-, -NR°S(0)2-, - R°C (0) NR° - , -OC(0)NR°-, -NR°S (O) 2NR°- , -S(0)-( o -S(0)2-, en donde R° se define en la presente. A menos que se especifique dé otra forma, los reemplazos opcionales forman un compuesto químicamente estable. Los reemplazos de grupo o átomo opcionales pueden ocurrir tanto dentro de la cadena como en cualquier extremo de la cadena; es decir tanto en el punto.de unión como/o también en el extremo terminal. Dos reemplazos opcionales también pueden estar adyacentes entre si dentro de una cadena siempre y cuando resulte en un compuesto químicamente estable. A menos que se especifique de otra forma, si el reemplazo ocurre en el extremo terminal, el átomo de reemplazo se une a un H en el extremo terminal . Por ejemplo, si una unidad de . metileno de -CH2CH2CH3 fue opcionalmente reemplazada con -0-, el compuesto resultante podrá ser -OCH2CH3, -CH2OCH3, o -CH2CH2OH.

Como se describe en la presente, un enlace dibujado de un sustituyente al centro de un anillo dentro de un sistema de múltiples anillos (como se muestra posteriormente) representa la sustitución del sustituyente en cualquier posición sustituible en cualquiera de los anillos dentro del sistema de múltiples anillos. Por ejemplo, la Estructura a representa la posible sustitución en cualquiera de las posiciones mostradas en la Estructura b.

Estructura a Estructura b Esto -también se aplica a sistemas de múltiples anillos fusionados a sistemas de anillo opcionales (los cuales podrían ser representados por líneas de puntos) . Por ejemplo, en la Estructura c, X es un sustituyente opcional tanto para el anillo A como el anillo B.

Estructura c Sin embargo, si dos anillos en un sisterria de múltiples anillos tienen cada uno diferentes sustituyentes dibujado nos que se e nte represen Por ejemplo, nal para el nal para el Estructura d El término "grupo protector" , como se usa en la presente, representa aquellos grupos propuestos para proteger un grupo funcional, tal como, por ejemplo, un alcohol, amina, carboxilo, etc., contra las reacciones indeseables durante los procedimientos sintéticos. Los grupos protectores comúnmente usados se describen en Greene and Wuts, Protective Groups In Organic Synthesis, 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999) , la cual se incorpora en la presente; para referencia. Los ejemplos de grupos protectores nitrógeno incluyen, grupos acilo, aroilo, o carbamilo tales ; como formilo, acetilo, propionilo, pivaloilo, t-butilacetilo, 2-cloroacetilo, 2-bromoacetilo, trifluoroacetilo, tricloroacetilo, ftalilo, o-nitrofenoxiacetilo, 1 a- clorobutirilo, benzoilo, 4-clorobenzoilo, 4-bromobenzoilo, 4-nitrobenzoilo y auxiliares quirales tales como D, L o p, L-aminoácidos protegidos o no protegidos tales como alanine, leucina, fenilalanina y similares; grupos sulfonilo ¡tales como bencensulfonilo, p-toluensulfonilo y similares; grupos carbamato tales como benciloxicarbonilo, p-clorobenciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, p- j nitrobenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo,' i p-bromobenciloxicarbonilo, 3 , 4 -dimetoxibenciloxicarbonilo,i 3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, 2 , 4 -dimetoxibenciloxicarbonilo, 4 -metoxibenciloxicárbonilo , 2-nitro-4 , 5-dimetoxibenciloxicarbonilo , 3,4,5-trimetoxibenciloxicarbonilo, 1- (p-bifeniloilo) -1-metiletoxicarbonilo , . OÍ, D-dimetil-3 , 5-dimetoxibenciloxicarbonilo , benzhidriloxicarbonilo, t-buti1oxicarboni1o, diisopropilometoxicarbonilo , isopropiloxicarbonilo, etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, aliloxicarbonilo, 2,2,2, - tricloroetoxicarbonilo, fenoxicarbonilo, 4-nitrofenoxicarbonilo, fluorénil-9-metoxicarbonilo, ciclopentiloxicarbc-nilo, adamanti1oxicarbonilo , ciclohexiloxicarbonilo, feniltiocarbonilo y similares, grupos arilalquilo tales . como bencilo, trifenilmetilo, benciloximetilo y similares y grupos sililo tal como trimetilsililo y similares. Los grupos N-protectores preferidos son formilo, acetilo, benzoilo, pivaloilo, t-butilacetilo, alanilo, fenilsulfonilo, bencilo, j t-butiloxicarbonilo (Boc) y benciloxicarbonilo (Cbz) .

El término "prof rmaco", como se usa en la presente, representa un compuesto que se transforma in vivo ; en un i compuesto de fórmula I o un compuesto listado en la Tabla 1.

I Tal transformación puede ser afectada, por ejemplo, por hidrólisis en la transformación sanguínea o enzimática de la forma de profármaco a la forma progenitora en sangre o tejido. Los profármacos de los compuestos de la invención puedénj ser, por ejemplo, ásteres. Los ásteres que se pueden utilizar como profármacos en la presente invención son esteres de fenilo, ásteres alifáticos (Ci-C24) , ásteres de aciloximetilo, carbonatos, carbamatos, y ásteres de aminoácido. Por ejemplo, un compuesto de la invención que contiene un grupo OH puede ser acilado en esta posición en su forma de profármaco, Otras formas de profármaco incluyen fosfatos, tales como, por ejemplo aquellos fosfatos resultantes de la fosfonacióri ¡de un grupo OH en el compuesto progenitor. Una discusión completa de profármacos se proporciona en T. Higuchi and V. Stella,j Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol . 14 of the Á.C.S. Symposium Series, Edward B. Roche, ed. , Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, y Judkins et al., Syn hetic Communications 26 (23) : 4351-4367, 1996, cada una de las cuales se incorpora en la presente para referencia.

A menos que se establezca de otra forma, las estructuras representadas en la presente también se entiende que incluyen todas las formas isoméricas (por ejemplo, enantioméricas , diastereoméricas, y geométricas (o conformacionales) ) de la estructura; por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico', isómeros de doble enlace (Z) y (E) , e isómeros conformacionales (Z) y (E) . Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos sencillos así como también mezclas enantioméricas, diastereoméricas; y geométricas (o conformacionales) de los presentes compuestos están dentro del alcance de la invención.

A menos que se establezca de otra forma, todas las formas tautoméricas de los compuestos de la invención están dentro del alcance de la invención. Adicionalmente, a menos que se establezca de otra forma, las estructuras representadas en la presente también se entiende que incluyen compuestos que difieren solamente de la presencia de uno o más átomos isotópicamente enriquecidos. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras excepto para el reemplazo de hidrógeno por deuterio o tritio, o el reemplazo de un carbono por un carbono enriquecido 13C o 14C están dentro del alcance de esta invención. Tales compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas, sondas en ensayos biológicos, o como inhibidores de PI3K con perfil terapéutico mejorado.

Descripción de los Compuestos de la Invención En un aspecto, la invención caracteriza los compuestos que tienen la fórmula I : ¡ o una sal de los mismos farmacéuticamente aceptable, en donde : X es N o CH ; R1 es - C ( 0 ) N (Rla) ( Rlb) , en donde ,1a es alifático de Ci- 4 o cicloalifático de c3 3--6 opcionalmente sustituido con JR; cada JR es independientemente fluoro, JR1( o -OJR1; TR1 se selecciona de alifático de Ci-4 o cicloalifático de C3.

R Ib es hidrógeno o R y R , conjuntamente con el nitrógeno al cual se unen, forman un anillo heterocíclico de 4 - 6 miembros, en donde el anillo heterocíclico opcionalmente comprende un átomo de oxígeno adicional y es opcionalmente sustituido con JR2; y TR2 se selecciona independientemente de fluoro, alquilo de Ci-2, cicloalifático de C3.6 , o - OCi-2alquilo .

En una modalidad, X es N. En otra modalidad X es CH .

En una modalidad, R1 se selecciona de En otra modalidad, R1 se selecciona de En otra modalidad, R1 es -C (O) NH-C2-3alquil-0-Ci- alquilo .

En todavía otra modalidad, R1 se selecciona una modalidad adicional, R1 se selecciona de En otra modalidad, la invención caracteriza compuesto seleccionado del grupo de compuestos listados en Tabla 1. 10 La invención también caracteriza una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención! y un í i portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable.

En una modalidad, la composición incluye un agente terapéutico seleccionado de un agente para tratar esclerosis múltiple, un agente anti-inflamatorio, un agente inmunomodulador, o un agente inmunosupresor .

En otra modalidad, la invención caracteriza un i método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad o afección seleccionada de una enfermedad autoinmuni aria o una enfermedad inflamatoria del cerebro o médula espinal, que comprende la etapa de administrar al paciente un compuesto de la invención o una composición farmacéutica del mismo.

En una modalidad adicional, la enfermedad o trastorno es esclerosis múltiple.

En otra modalidad, el método de tratamiento incluye administrar a un paciente un compuesto o composición de la invención y un agente terapéutico adicional, en donde el agente terapéutico adicional es apropiado para la enfermedad que es tratada y se administra conjuntamente con el compjuesto o composición como una forma de dosificación única, o separadamente como parte de una forma de dosificación múltiple. Los ejemplos de tales agentes terapéuticos adicionales son aquellos útiles para tratar esclerosis múltiple, tal como beta interferón, glatiramir, natalizumab, o mitoxantrona.

'La invención también caracteriza un método no terapéutico para inhibir la actividad de PI3K-gamma cinasa en una muestra biológica que comprende poner en contacto la muestra biológica con un compuesto de—la fórmula I, o una composición que contiene el compuesto.

Composiciones, Formulaciones, y Administración de los Compuestos de la Invención En otra modalidad, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las fórmulas o clases descritas en la presente. En una modalidad adicional, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Tabla 1. En una modalidad adicional, la composición adicionalmente comprende un agente terapéutico adicional.

De acuerdo con otra modalidad, la invención proporciona una composición que comprende un compuesto de esta invención o un derivado del. mismo farmacéuticamente aceptable y un portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable. En una modalidad, la cantidad de compuesto en una composición de esta invención es tal que es efectiva para inhibir de manera medible una PI3K, particularmente ??3??, en una muestra biológica o en un paciente. En otra modalidad, la cantidad de compuesto en las composiciones de esta invención es tal que es efectiva para inhibir de manera medible la PI3KOÍ. En una modalidad, la composición de esta invención se formula para la administración a un paciente en necesidad de tal composición. En una modalidad adicional, la composición de esta invención se formula para administración oral a un paciente.

El término "paciente", como se usa en la presente, significa un animal, preferiblemente un mamífero, y muy preferiblemente un humano.

También se apreciará que ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en forma libre para tratamiento, o donde sea apropiado, como un derivado farmacéuticamente aceptable de los mismos. De acuerdo con la presente invención, un derivado farmacéuticamente aceptable incluye, pero no se limita a, profármacos, sales, ésteres, sales de tales ésteres, o cualquier otro aducto o derivado farmacéuticamente aceptable el cual en administración a un paciente en necesidad es capaz de proporcionar, directamente o indirectamente, un compuesto como se describe de otra forma en la presente, o un metabolito o residuo del mismo. Como se usa en la presente, el término "metabolito o residuo del mismo activo inhibitorio" significa, que un metabolito o residuo del mismo también es un inhibidor de PI3K.

Como se usa en la presente, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales las cuales son, dentro del alcance del juicio médico acertado, adecuadas para uso en contacto con los tejidos de humanos y animales inferiores sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica indebidas, y similares.

Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en el arte. Por ejemplo, S. . Berge et al., describen sales farmacéuticamente aceptables en detalle en J. Pharmaceutical Sciences, 66:1-19, 1977, la cual se incorpora en la presente para referencia. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen aquellas derivadas de ácidos y bases inorgánicas y orgánicas adecuadas. Los ejemplos de sales de adición de ácido no tóxicas, farmacéuticamente aceptables son sales de un grupo amino formado con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, I ácido sulfúrico y ácido perclórico o con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido malónico o usando otros métodos usado en el arte tal como intercambio iónico. Otras sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencensulfonato, benzoato, bisulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanpropionato, digluconato, dodecilsulfato, etansulfonato, formiato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, yodhidrato, 2-hidroxi-etansulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metansulfonato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3 -fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, p-toluensulfonato, undecanoato, valerato, y similares. Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen sales de metal álcali, metal alcalinotérreo, amonio y N+ (alquilo de Ci-4)4. Esta invención también contempla la cuaternización de cualquiera de los grupos que contienen nitrógeno básico de los compuestos descritos · en la presente. Los productos dispersables o solubles en agua o aceite se pueden obtener por tal cuaternización. Las sales de metal álcali o alcalinotérreo representativas incluyen sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables adicionales incluyen, cuando sea apropiado, amonio no tóxico, amonio cuaternario, y cationes amina formados usando contraiones tales como haluro, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de Ci-8 y aril sulfonato.

Como se describió anteriormente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención adicionalmente comprenden un portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable, el cual, como se usa en la presente, incluye todos y cada uno de los solventes, diluyentes, u otro vehículo líquido, auxiliares de dispersión o suspensión, agentes de superficie activa, agentes isotónicos, agentes espesantes o emulsionantes, conservadores, aglutinantes sólidos, lubricantes y similares, como sea adecuado para la forma de dosificación particular deseada. En Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2005, ed. D.B. Troy, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds . J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York, los contenidos de cada una se incorporan para referencia en la presente, se describen varios portadores usados en la formulación de composiciones farmacéuticamente aceptables y técnicas conocidas para la preparación de las mismas. Excepto en la medida que cualquier medio portador convencional sea incompatible con los compuestos de la invención, tal como produciendo cualquier efecto biológico indeseable o interactuar de otra forma en una manera perjudicial con cualquiera de los otros componentes de la composición farmacéuticamente aceptable, su uso se contempla que está dentro del alcance de esta invención .

Algunos ejemplos de materiales los cuales pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, intercambiadores iónicos, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, tal como albúmina de suero humana, sustancias amortiguadoras tales como fosfato, glicina, ácido sórbico, o sorbato de potasio, mezclas de glicéridos parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, tales como sulfato de protamina, fosfato ácido de disodio, fosfato ácido de potasio, cloruro de sodio, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio,- polivinil pirrolidona, poliacrilatos , ceras, polímeros de bloque de polietileno-polioxipropileno, grasa de lana, azúcares tales como lactosa, glucosa y sucrosa; almidones tales como almidón de maíz y almidón de papa; celulosa y sus derivados tales como carboximetil celulosa de sodio, etil celulosa y acetato de celulos; ' tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; excipientes tales como ' manteca de cacao y ceras para supositorios; aceites tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón; aceite de cártamo; aceite de sésamo; aceite de oliva; aceite de maíz y aceite de soya; glicoles; tales como propilenglicol o polietilenglicol ; ásteres tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; agentes amortiguadores tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico, y soluciones amortiguadoras de fosfato, así como también otros lubricantes compatibles no tóxicos tales como lauril sulfato de sodio y estearato de magnesio, así como también agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, edulcorantes, agentes saborizantes y perfumantes, conservadores y antioxidantes también pueden estar presentes en la composición de acuerdo con el juicio del formulador.

Las composiciones de la presente invención se pueden administrar oralmente, parenteralmente, por aerosol para inhalación, tópicamente, rectalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente o vía un reservorio implantado. El término "parenteral" como se usa en la presente incluye técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial, intraesternal, intratecal, intraocular, intrahepática, intralesional , epidural, intraespinal , e intracraneal. Preferiblemente, las composiciones se administran oralmente, intraperitonealmente o intravenosamente. Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones se pueden formular de acuerdo con las técnicas conocidas en el arte usando agentes de dispersión y humectación y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo como una solución en 1 , 3 -butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear están agua, solución de Ringer y solución isotónica de cloruro de sodio. Además, los aceites fijos estériles son convencionalmente empleados como un solvente o medio de suspensión.

Para este propósito, cualquier aceite fijo blando se puede emplear incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Ácidos grasos, tal como ácido oleico y sus derivados de glicérido son útiles en la preparación de inyectables, como lo son los aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tales como aceite de oliva o aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas . Estas soluciones o suspensiones aceitosas también pueden contener un diluyente o dispersante alcohólico de cadena larga, tal como carboximetil celulosa o agentes de dispersión similares que son comúnmente usados en la formulación de formas de dosificación farmacéuticamente aceptables incluyendo emulsiones y suspensiones. Otros tensioactivos comúnmente usados, tales como Tween, Spans y otros agentes emulsionantes o mejoradores de biodisponibilidad los cuales son comúnmente usados en la manufactura de formas de dosificación sólidas, liquidas f rmacéuticamente aceptables, u otras también se pueden usar para los propósitos de formulación.

Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar oralmente en cualquier forma de dosificación oralmente aceptable incluyendo, pero no limitado a, cápsulas, tabletas, suspensiones o soluciones acuosas. En el caso de tabletas para uso oral, los portadores comúnmente usados incluyen lactosa y almidón de maíz. Los agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, también se agregan típicamente. Para administración oral, en una forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando se requieren suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsionantes y de suspensión. Si se desea, ciertos agentes edulcorantes, saborizantes o colorantes también se pueden agregar.

Alternativamente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar en la forma de supositorios para administración rectal. Se pueden preparar mezclando el agente con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Tales materiales incluyen manteca de cacao, cera de abeja y polietilenglicoles .

Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención también se pueden administrar tópicamente, especialmente cuando el objetivo de tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles por la aplicación tópica, incluyendo enfermedades del ojo, la piel, o el tracto intestinal inferior. Las formulaciones tópicas adecuadas son fácilmente preparadas para cada una de estas áreas u órganos.

La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior se puede efectuar en una formulación para supositorio rectal (ver anteriormente) o en una formulación de enema adecuada. Los parches tópicamente transdérmicos también se pueden usar.

Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticamente aceptables se pueden formular en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más portadores. Los portadores para administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, petrolato líquido, petrolato blanco, propilenglicol, polioxiet leno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Alternativamente, las composiciones farmacéuticamente aceptables se pueden formular en una loción o crema adecuada que contiene los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más portadores farmacéuticamente aceptables . Los portadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, monoestearato de sorbitan, - polisorbato .60, ..cera .de ásteres cetílieos, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol , alcohol bencílico y agua .

Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticamente aceptables se pueden formular, por ejemplo, como suspensiones micronizadas en solución salina estéril isotónica de pH ajustado u otra solución acuosa, o, preferiblemente, como soluciones en solución salina estéril isotónica de pH ajustado u otra solución acuosa, ya sea con o sin un conservador tal como cloruro de bencilalconio . Alternativamente, para uso oftálmicos, las composiciones farmacéuticamente aceptables se pueden formular . en un ungüento tal como petrolato. Las composiciones • farmacéuticamente aceptables de esta invención también se pueden administrar por aerosol o inhalación nasal. Tales composiciones se preparan de acuerdo con técnicas bien conocidas en el arte de formulación farmacéutica y se pueden preparar como soluciones en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservadores adecuados, promotores de absorción para mejorar la biodisponibilidad, fluorocarburos , y/u otros agentes de solubilización o dispersión convencionales.

Muy preferiblemente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se formulan para administración oral.

Las formas de dosificación liquidas 1 para administración oral incluyen, pero no se limitan a, emulsiones, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en el arte tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes de solubilización y emulsionantes tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de, etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol , dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, oliva, ricino, y sésamo) , glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácido graso de sorbitan, y mezclas de los mismos) . Además de los diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y de suspensión, . agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes.

Las preparaciones inyectables, por ejemplo, suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables estériles se pueden formular de acuerdo con el arte conocido usando agentes de dispersión o humectación y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución, suspensión o emulsión inyectable estéril en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solución en 1 , 3 -butanodiol . Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden emplear están agua, solución de Ringer, U.S.P. y solución isotónica de cloruro de sodio. Además, los aceites fijos estériles son convencionalmente empleados como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo blando se puede emplear incluyendo mono- y diglicéridos sintéticos . Además, los ácidos grasos tal como ácido oleico se usan en la preparación de inyectables.

Las formulaciones inyectables se pueden esterilizar, por ejemplo, por filtración a través de un filtro retenedor de bacterias, o incorporando agentes de esterilización en la forma de composiciones sólidas estériles las cuales se pueden disolver o dispersar en agua estéril u otro medio inyectable estéril antes del uso.

Para prolongar el efecto de un compuesto de la presente invención, frecuentemente es deseable disminuir la absorción del compuesto de inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede realizar mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con pobre solubilidad en agua. La velocidad de absorción del compuesto entonces depende de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño de cristal y forma cristalina. Alternativamente, la disolución o suspensión del compuesto en un vehículo aceitoso realiza la absorción retardada de una forma de compuesto parentéralmente administrada. Las formas depot inyectables se hacen formando matrices microencapsuladas del compuesto en polímeros biodegradables tal como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación del compuesto a polímero y la naturaleza del polímero particular empleado, la velocidad de liberación del compuesto se puede controlar. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli (ortoésteres) y poli (anhídridos) . Las formulaciones inyectables depot también se preparan atrapando el compuesto en liposomas o microemulsiones que son compatibles con los tejidos corporales.

Las composiciones para administración rectal o vaginal son preferiblemente supositorios los cuales se pueden preparar mezclando los compuestos de esta invención con excipientes o portadores no irritantes adecuados tales como manteca de cacao, polietilenglicol o una cera para supositorio que son sólidos a temperatura ambiente: pero líquidos a temperatura corporal y por lo tanto se funden en el recto o cavidad vaginal y liberan el compuesto activo.

Las formas de dosificación sólidas para administración oral incluyen cápsulas, tabletas, pildoras, polvos, y granulos. En tales formas de dosificación sólidas, el compuesto activo se mezcla con al menos un excipiente o portador inerte farmacéuticamente aceptable tal como citrato de sodio o fosfato de dicalcio y/o a) rellenadores p extendedores tales como almidones, lactosa, sucrosa, glucosa, manitol, y ácido silícico, b) aglutinantes tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidinona, sucrosa, y acacia, c) humectantes tal como glicerol, d) agentes de desintegración tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio, e) agentes retardantes de solución tal como parafina, f) aceleradores de absorción tales como compuestos amonio cuaternario, g) agentes humectantes tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol, h) absorbentes tales como caolín y arcilla bentonita, e i) lubricantes tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, lauril sulfato de sodio, y mezclas de los mismos. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, la forma de dosificación también puede comprender agentes amortiguadores.

Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como rellenadores en cápsulas de gelatina rellenadas blandas y duras usando tales excipientes como lactosa o azúcar de leche así como también polietilenglicoles de alto peso molecular y similares. Las formas de dosificación sólidas de tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, y granulos se pueden preparar con recubrimientos y cubiertas tales como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos bien conocidos en el arte de formulación¦ farmacéutica. Opcionalmente pueden contener agentes opacificantes y también pueden ser de una composición que liberan los ingredientes activos solamente, o preferiblemente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, en una manera retardada. Los ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden usar incluyen sustancias poliméricas y ceras . Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden emplear como rellenadores en cápsulas de gelatina rellenadas blandas y duras usando tales excipientes como lactosa y azúcar de leche así como también polietilenglicoles de alto peso molecular y similares .

Los compuestos activos también pueden estar en forma micro-encapsulada con uno o más excipientes como se señaló anteriormente. Las formas de dosificación sólidas de tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, y gránulos se pueden preparar con recubrimientos y cubiertas tales como recubrimientos entéricos, recubrimientos de control de liberación y otros recubrimientos bien conocidos en el arte de formulación farmacéutica. En tales formas de dosificación sólidas el compuesto activo se puede mezclar con al menos un diluyente inerte tal como sucrosa, lactosa o almidón. Tales formas de dosificación también pueden comprender, como es práctica normal, sustancias adicionales diferentes de diluyentes inertes, por ejemplo, lubricantes de tableteado y otros auxiliares de tableteado tales como estearato de magnesio y celulosa microcristalina. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguadores. Opcionalmente pueden contener agentes opacificantes y también pueden ser de una composición que liberan los ingredientes activos solamente, o preferiblemente, en una cierta parte del tracto intestinal, opcionalmente, en una manera retardada. Los ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden usar incluyen sustancias poliméricas y ceras.

Las formas de dosificación para administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, aerosoles, inhalantes o parches. El componente activo se mezcla bajo condiciones estériles con un portador farmacéut camente aceptable y cualquiera de los conservadores o amortiguadores necesarios como se puedan requerir. La formación oftálmica, gotas para oídos, y gotas para ojos también se contempla que están dentro del alcance de esta invención. Adicionalmente, la presente invención contempla el uso de parches transdérmicos , los cuales tienen la ventaja agregada de proporcionar suministro controlado de un compuesto al cuerpo. Tales formas de dosificación se pueden hacer disolviendo o distribuyendo el compuesto en el medio apropiado. Los mejoradores de absorción también se pueden usar para incrementar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad se puede controlar ya sea proporcionando una membrana de control de velocidad o distribuyendo el compuesto en una matriz polimérica o gel.

Los compuestos de la invención preferiblemente se formulan en forma unitaria de dosificación para la fácil administración y uniformidad de dosificación. La expresión "forma unitaria de dosificación" como se usa en la presente se refiere a una unidad físicamente discreta de agente apropiada para el paciente que es tratado. Se entenderá-, sin embargo, que el uso diario total de los compuestos y composiciones de la presente invención será decidido por el médico que atiende dentro del alcance del juicio médico acertado. El nivel de dosis efectivo específico para cualquier paciente u organismo particular dependerá de una variedad de factores incluyendo el trastorno que es tratado y la severidad del trastorno; la actividad del compuesto específico empleado; la composición específica empleada; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente; el tiempo de administración, ruta de administración, y la velocidad de excreción del compuesto específico empleado; la duración del tratamiento; fármacos usados en combinación o coincidentes con el compuesto específico empleado, y factores similares bien conocidos en las artes médicas.

La cantidad de los compuestos de la presente invención que se puede combinar con los materiales portadores para producir una composición en una forma de dosificación única variará dependiendo del -huésped tratado, el modo de administración particular. Preferiblemente, las composiciones se deberán formular de modo que una dosificación entre 0.01 -100 mg/kg de peso corporal/día del inhibidor se puede administrar a un paciente que recibe estas composiciones.

Dependiendo de la afección particular, o enfermedad, que es tratada o prevenida, los agentes terapéuticos adicionales, los cuales son normalmente administrados para tratar o prevenir esta afección, también pueden estar presentes en las composiciones de esta invención. Como se usa en la presente, los agentes terapéuticos adicionales que normalmente se administran para tratar o prevenir una enfermedad particular, o afección, son conocidos como "apropiados para la enfermedad, o afección, que es tratada". Los ejemplos de agentes terapéuticos adicionales se proporcionan infra.

La cantidad de agente terapéutico adicional presente en las composiciones de esta invención será no más de la cantidad que podría normalmente ser administrada en una composición que comprende este agente terapéutico como él único agente activo. Preferiblemente, la cantidad de agente terapéutico adicional en las composiciones actualmente descritas variará desde aproximadamente 50% a 100% de la cantidad normalmente presente en una composición que comprende este agente como el único agente terapéuticamente activo.

Usos de los Compuestos y Composicion s de la Invención En una modalidad, la invención proporciona un método para inhibir la actividad de PI3K en el cerebro o médula espinal de un paciente, el método comprende administrar al paciente un compuesto o composición de la invención .

En otra modalidad, la invención comprende un método para tratar o disminuir la severidad de una afección o enfermedad mediada por PI3K en el cerebro o médula espinal de un paciente. El término "enfermedad mediada por PI3K" , como se usa en la presente significa cualquier enfermedad u otra afección perjudicial en la cual una isoforma de PI3K se conoce que juega un papel. En una modalidad, la isoforma de PI3K es ??3??. En otra modalidad, la isoforma de PI3K es PI3Ka. En una modalidad adicional, la invención comprende un método para tratar una enfermedad mediada por . PI3K del sistema nervioso central. Tales afecciones incluyen, sin limitación, enfermedades - inflamatorias, cáncer, y enfermedades relacionadas autoinmunitarias del sistema nervioso central.- Por-consiguiente, la invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad o afección seleccionada de un cáncer, j una enfermedad autoinmunitaria, o una enfermedad inflamatoria del sistema nervioso central de un paciente, que comprende i administrar al paciente un compuesto o composición ; de la invención. '. \ En una modalidad, la invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de cánceres del I cerebro y médula espinal. Los ejemplos de tales cánceres incluyen, sin limitación, astrocitomas invasivos de j alto grado (por ejemplo, astrocitoma anaplásico, glioblástoma multiforme), astrocitomas invasivos de alto grado, -oligodendrogliomas , ependimomas, metástasis de cerebro, meningitis carcinomatosa/linfomatosa, linfoma primario de CNS, y tumores espinales metastásicos ..

En otra modalidad, la invención proporciona un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad o trastorno antiinflamatorio o autoinmunitario del sistema nervioso central. En otra modalidad, la invención proporciona un método para tratar o disminuir lá severidad de un síntoma de una enfermedad o trastorno antiinflamatorió o autoinmunitario del sistema nervioso central. En una modalidad adicional, la invención proporciona un método para tratar neuroinflamación. Tales enfermedades o trastornos incluyen, sin limitación, esclerosis múltiple, mielitis transversa, leucoencefalopatía multifocal progresiva, meningitis, encefalitis, mielitis, encefalomielitis abscesos intracraneales o intraespinales, flebitis o tromboflebitis de senos venosos intracraneales, apoplejía, Enfermedad de Parkinson, Enfermedad de Alzheimer, Enfermedad de Huntington, Enfermedad de Pick, esclerosis lateral amiotrófica, demencia tipo I por VIH, demencia de lóbulo frontotemporal , ; lesión traumática de médula espinal o cerebro, autismo, o una enfermedad por priones .

Los compuestos o composiciones de la invención se pueden administrar con uno o más agentes terapéuticos adicionales, en donde el agente terapéutico adicional es apropiado para la enfermedad que es tratada y el agente terapéutico adicional se administra conjuntamente con un compuesto o composición de la invención como una forma de dosificación única o separadamente del compuesto o composición como parte de una forma de dosificación múltiple. El agente terapéutico adicional se puede administrar al mismo tiempo como un compuesto de la invención o en un tiempo diferente. En el último caso, la administración se puede graduar, por ejemplo, por 6 horas, 12 horas, 1 día, 2 días, 3 días, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 1 mes, ó 2 meses.

Los ejemplos no limitantes de agentes quimioterapéuticos ú otros agentes anti-proliferativos que se pueden combinar con los compuestos de esta invención incluyen taxanos, inhibidores de aromatasa, antraciclinas , fármacos dirigidos a microtubulos, fármacos de veneno de topoisomerasa, anticuerpos policlonales o monoclonales de objetivo, inhibidores de un objetivo o enzima molecular (por ejemplo, un inhibidor de cinasa) , o análogos de citidina. En una modalidad, el agente quimioterapéutico adicional es amsacrina, anástrozol, asparaginasa, Avastin" (bevacizumab) azatioprina, bicalutamida, bleomicina, camptotécina, carmustina, clorambucil, ciclofosfamida, citarrabina (araC) , daunonibicina, dactinomicina, doxorrubicina (adriamicina) , epirrubicina, epotilona, etóposido, exemestano, fludarrábina, 5-fluorouracilo (5-FU) , flutamida, Gemzar5 (gemcitabina) , Gleevec* (imatanib) , Herceptin (trastuzumab) , idarrubicina, ifosfamida, un interferón, una interleucina, irinotecan, letrozol, leuprolido, lomustina, lovastatina, mecloretamina, megestrol, melfalan, 6-mercaptopurina, metotrexato (MTX) , minosina, mitomicina, mitoxantrona, navelbina, nocodazol, derivados de platino tales como cisplatina, carboplatina y oxaliplatina, raloxifeno, tamoxifeno, Taxotere* (docetaxel) , Taxol* (paclitaxel) , teniposido, topotecan, factor de necrosis de tumor (TNF) , vinblastina, vincristina, vindesina, vinorrelbina, o Zoladex® (goserelin) . Otro agente quimioterapéutico también puede ser una citocina tal como G-CSF (factor estimulante de colonia de granulocitos) . En todavía otra modalidad, un compuesto de la presente invención, o una sal, profármaco, metabolito, análogo o derivado del mismo farmacéuticamente aceptable, se puede administrar en combinación con cirugía, terapia de radiación, o con combinaciones de quimioterapia estándares tales como, pero no restringidas a, CMF (ciclofosfamida, metotrexato y 5-fluorouracilo) , CAF (ciclofosfamida, adriamicina y 5-fluorouracilo) , AC (adriamicina y ciclofosfamida) , FEC (5-fluorouracilo, epirrubicina, y ciclofosfamida) , ACT o ATC (adriamicina, ciclofosfamida, y paclitaxel) , o CMFP (ciclofosfamida, metotrexato, 5-fluorouracilo y prednisona) .

Los agentes terapéuticos adicionales también incluyen aquellos útiles para tratar esclerosis múltiple (MS) , tal como, por ejemplo, beta intérferón (por ejemplo, Avonex® y Rebif®) , glatiramir (Copaxone®) , Tysabri® (natalizumab) , Betaseron® (IFN-beta) , y mitoxantrona.

La invención proporciona un método para inhibir la actividad de PI3K cinasa en una muestra biológica que incluye poner en contacto la muestra ' iológica con un compuesto o composición de la invención. El término "muestra biológica", como se usa en la presente,, significa una muestra fuera de un organismo viviente e incluye, sin limitación, cuítivos celulares o extractos de los mismos; material biopsado obtenido de un mamífero y extractos del mismo; y sangre, saliva, orina, heces, semen, lágrimas, u otros fluidos i corporales o extractos de los mismos. La inhibición de la actividad de cinasa, particularmente la actividad de! PI3K cinasa, en una muestra biológica es útil para una variedad de propósitos conocidos por uno de experiencia en el arté. Los ; i ejemplos de tales propósitos incluyen, pero no se limitan a, almacenamiento de espécimen biológico y ensayos biológicos . En una modalidad, el método para inhibir la actividad de PI3K cinasa en una muestra biológica se limita a métodos no „ ' I terapéuticos.

Preparación de Compuestos de la Invención Como se usa en la presente, todas las abreviaturas, símbolos y convenciones son consistentes con' aquellos1 usados i en la literatura científica contemporánea. Ver, por ejémplo, Janet S. Dodd, ed., The ACS Style Guide : A Manual for Authors and Editors, 2nd Ed. , Washington, D.C.: American Chemical Society, 1997. Las siguientes definiciones describen términos y abreviaturas usadas en la presente: ' ATP trifosfato de adenosina Boc t-butoxilcarbonilo Salmuera una solución saturada de NaCl en agua DC diclorometano DMAP 4 -dimetilaminopiridina DMF dimeti1formamida DMSO metilsulfóxido DTT' ditiotreitol ESMS espectrometría de masas por electrorrocío- Et20 éter etílico EtOAc acetato de etilo EtOH alcohol etílico HEPES ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetansulfónico HPLC cromatografía líquida de alta resolución LC-MS cromatografía liquida-espectrometría de masas Me metilo MeOH metanol MC metil celulosa NMP N-metilpirrolidina PBS solución salina amortiguada con fosfato Ph fenilo RT o rt temperatura ambiente tBu butilo terciario TCA ácido. tricloroacético THF tetrahidrofurano TFA ácido trifluoacético Las purificaciones por HPLC de fase inversa fueron realizadas en una columna Waters 20 x 100mm Y C-Pack Pro C18 usando un gradiente lineal agua/acetonitrilo (0.1%TFA, 0.2% ácido fórmico, o 5 mmol formiato de amonio) a una velQcidad de flujo de 28 mL/minutos. La composición del comienzo y final del gradiente varió para cada compuesto entre 0-40 y 50-90% acetonitrilo, respectivamente.

Procedimientos Sintéticos Generales En general, los compuestos de esta invención se pueden preparar por métodos descritos en la presente o por otros métodos conocidos por aquellos expertos en el arte.

Ejemplo 1. Preparación general de los compuestos de fórmula I La preparación de los compuestos de fórmula I, en donde 1 es -C(0)Rla o -C(0)N(Rla)2 se muestra en el esquema de reacción 1. Por consiguiente, un compuesto de fórmula Al, donde R1 y X son como se definen para un compuesto de I, es boronado. Los procedimientos para preparar un boronato o ácido borónico a partir de un haluro de arilo se describen en Boronic Acids, ISBN: 3-527-30991-8, iley-VCH, 2005 (Dennis G. Hall, editor) . En un ejemplo, el halógeno es bromo y un boronato se prepara haciendo reaccionar el bromuro de arilo con 4,4,5, 5-tetrametil-2- (4,4,5 , 5-tetrametil-l , 3,2-dioxaborolan-2-il) -1, 3, 2-dioxaborolano para producir un compuesto de fórmula A2, donde -B(OR)2 es una porción 4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l, 3 , 2 -dioxaborolán- 2 -ilo . El compuesto de fórmula A2 se hace reaccionar con un compuesto de fórmula A3 , donde R2 y Z son como se definen para un compuesto de fórmula I y L es un grupo saliente, tal como, por ejemplo, un haluro o sulfonato, para producir un compuesto de fórmula I. Alternativamente, un compuesto de fórmula A3 se puede boronar como se describió anteriormente y posteriormente se hace reaccionar con un compuesto de fórmula Al para producir un compuesto de fórmula I .

Esquema de reacción 1 Ejemplo 2. Preparación de N- (6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) benzo [d] tiazol-2-il) acetamida (Compuesto 1002) Como se muestra en la etapa 2- i del Esquema de reacción 2, la 6-Bromobenzo [d] tiazol-2 -amina (13.0 g, ¡56.74 mmol, obtenida de Alfa-Sigma Chemical Co.) se disuelve en piridina (100 mL) a temperatura ambiente para formar una solución amarilla, la cual se purga con nitrógeno por 10 minutos y luego se enfría a 0°C. Se adiciona por 'goteo anhídrido acético, (10.69 mL, 113.5 mmol) y la mezcla se deja calentar a temperatura ambiente. La reacción se calienta a 60 °C por 7 horas y luego se enfría a temperatura ambiente. Se adiciona agua (300 mi) y la mezcla de reacción se agita por 1 hora. El precipitado resultante se colecta por filtración, se lava dos veces con agua, y se seca para producir N- (6-bromobenzo [d] tiazol-2-il) acetamida (Compuesto 1001, 13.74 g, 89% de rendimiento) como un sólido amarillo pálido: , ESMS (M+H) 271.22, 273.24; XH NMR (300.0 MHz , DMSO-d6) d 12.44 (s, 1H) , 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 7.67 (d, J = 8.6 Hz , 1H) , 7.56 (dd, J = 2.0, 8.6 Hz, 1H) , 2.22 (d, J = 5.5 Hz , 3H) .

Como se muestra en la etapa 2-ii del Esquema de reacción 2, la N- (6-bromobenzo [d] tiazol-2-il) acetamida (10.0 g, 36.88 mmol), bis (pinacol) diboro (14.05 g, 55.32 mmol), y KOAc (14.48 g, 147.5 mmol) se disuelven en DMSO (70 mL) y la mezcla de reacción se lava a chorro con nitrógeno por 10 minutos. Se adiciona Pd(PPh3)4 (2.557 g, 2.213 mmol), el recipiente de reacción se sella, y la mezcla se agita a 90°C por 7 horas, produciendo una solución anaranjada. La mezcla de reacción se diluye con EtOAc y se filtra a través de un tapón de Florisil®, el cual se lava a chorro con acetato de etilo adicional. Los orgánicos combinados se lavan con NaCl (3x) , se secan sobre Na2S04, se filtran, y se evaporan bajo presión reducida para producir la N- (6- (4,4,5, 5 -tetrametil- 1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) enzo [d] tiazol-2-il) acetamida (Compuesto 1002, 8.406 g, 72% de rendimiento): ESMS (M+H) 319.44; XH NMR (300.0 MHz, DMSO-d6) d 12.44 (s, 1H) , 8.26 (s, 1H) , 7.71 (s, 2H) , 2.54 (s, H) , 2.21 (s, 3H) , 1.31 (s, 12H) . (etapa 2-i¡) Esquema de reacción 2 ' Ejemplo 3. Preparación de 1- (6- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) benzo [d] tiazol-2-il) -3- (3-isopropoxipropil) urea (Compuesto 3).

Como se muestra en la etapa 3-i del Esquema de reacción 3, 3 -bromo-5- (trifluorometil) iridina (2.0 g, 8.85 mmol) y N- [6- (4, 4 , 5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) -1, 3-benzotiazol-2-il] acetamida (4.23 g, 13.3 mmol) se combinan en DMSO (60.0 mL) y se agitan. Una vez que los reactivos se han disuelto, se adicionan Cs2C03 (8.65 g, 26.55 mmol), seguido por adición de agua (12.0 mL) . La mezcla de reacción se lava a chorro con gas nitrógeno por 30 min. , y se adiciona Pd(dppf)Cl2 (648 g, 0.885 mmol) . La reacción se calienta a 110°C por 3 horas.

Después de que la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente se forma un precipitado, el cual es filtrado : en un embudo Buchner para proporcionar N-(6-(5- (trifluorometil) piridin-3-il) benzo [d] tiazol- 2 -il) acetamidá i (Compuesto 1002a , 1.72 g, 5.0 mmol, 56.4% de rendimiento) como un sólido gris: ESMS ( +H) 338.28.

Como se muestra en la etapa. 3-ii del Esquema de reacción 3 , N- (6- (5- (trifluorometil) piridin- 3- il) benzo [d] tiazol-2 -il) acetamidá (Compuesto 1002a , 1.69 g, 4.9 mmol) se agita en HC1 6 a 80°C por 1 hora. La mezcla de reacción se enfría y las sustancias volátiles se remueven bajo alto vacío para producir clorhidrato de 6- (5- (trifluorometil)piridin-3-il)benzo[d] tiazol -2-amina (Compuesto 1003 , 1.26 g, 84% de rendimiento) : ESMS !(M+H) 296.26; ¾ MR (DMSO-d6) d 9.21(s,lH), 8.89(2,1H), 8.44(s,lH), 8.22(d,J=1.7 ??,??), 7.71(dd, J=1.8, 8.4Hz, 1H) , 7.67(s, 2H) , 7.44 (d, J=8.4Hz, 1H) .

Como se muestra en la etapa 3-iii del Esquema de reacción 3, el clorhidrato de 6- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) benzo [d] tiazol-2-amina (Compuesto 1003 , 1.23 g, 4.18 mmol) se combina con carbonil diimidazol (745 mg, 4.59 mmol, 1.1 equiv.) y DCM (37 mL) . La DMF (5 mL) se adiciona : para solubilizar completamente los reactivos, seguido por la adición de trietilamina (728 iL, 5.22 mmol, 1.25 equiv.) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo por 4 horas. Después del enfriamiento, el producto sólido resultante es filtradoi para producir N- (6- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) benzo [d] tiazol-2-il) -lH-imidazol-l-carboxamida (Compuesto 1004 , 1.31 g, 76.7% de rendimiento): ESMS (M+H) 390.32.

Como se muestra en la etapa 3-iv del Esquema reacción 3, N- (6- (5- (trifluorometil) iridin-3-il) enzo [d] tiazol-2-il) -lH-imidazol-l-carboxamida (Compuesto 1004, 50 mg, 0.128 mmol) se disuelve en 1.0 mL de DMF. A la solución resultante se adiciona 3-isopropoxipropan-l-amina (178 µ?_, 1.28 mmol, 10 equiv. ) . La reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche y posteriormente se purifica por HPLC de fase inversa para proporcionar 1- (6-.(5- (trifluorometil) iridin-3-il) benzo [d] tiazol-2-il) -3- (3-isopropoxipropil) urea (Compuesto 3 , 15 mg, 26% de rendimiento): ESMS (M+H) 439.30. etapa - v Esquema de Reacción 3 Ejemplo 4. preparación de 1- (5- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) tiazolo [5, 4-J ] piridin-2 -il) -3- (2-propoxietil) urea (Compuesto 1) .

Como se muestra en la etapa 4 -i del Esquema de reacción 4, el acetilisotiocianato (6.824 g, 67.48 mmol) se adiciona a la solución de 6-bromo-2-cloropiridin-3-amina (14.0 g, 67.48 mmol) en isopropanol (300 mL) . La reacción se calienta por 16 horas a 80°C. El análisis de LCMS indica que la mezcla resultante contiene 85% del producto deseado y 15% del intermediario tiourea. La mezcla de reacción se enfría a RT se filtra, y la torta de filtración se lava con solución de bicarbonato de sodio saturada y salmuera. El sólido se seca con aire para producir N- (5 -bromotiazolo [5 , 4 -£>] piridin-2-iDacetamida (Compuesto 1005, 12.0 g) : ¾ MR (DMSOd6) d 8.10(d, 1H) , 7.68(d, 1H) , 2.3(s, 3H) .

Como se muestra en la etapa 4-ii del Esquema de reacción 4, el Compuesto 1005 (5.44 g, 20 mmol) se suspende en HC1 6 N (100 mL) . La mezcla de reacción se calienta a reflujo por 1 h, en este periodo todo el material entra en solución. La mezcla se enfría a RT y la reacción se hace básica a un pH de 10, en este tiempo el producto es precipitado. El sólido se colectado en un embudo sinterizado y se seca para producir 5-bromotiazolo [5 , -b] iridin-2 -amina (Compuesto 1006, 4.35 g, 93% de rendimiento): ESMS (M+H) 230, 232; XH NMR (DMSO-d6) d 7.9 (br, 2H) , 7.6 (d, 1H) , 7.4 (d, 1H) .

Como se muestra en la etapa 4-iii del Esquema de reacción 4, el Compuesto 1006 (1.5 g, 6.5 mmol) se disuelve en THF (100 mL) , y se adicionan trietilamina (1.2 mL, 8.48 mmol) y DMAP (80 mg, 0.65 mmol). El dicarbonato de Di- tere-butilo (2.0 g, 8.47 mmol) se adiciona y la reacción se agita a RT por 5 h. El solvente se remueve bajo presión reducida, y el residuo se divide entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lava con agua muy ligeramente acida (75 mL H20/5 mL HC1 1 N) y salmuera, se seca sobre Na2S04, y se concentra bajo presión reducida. El producto se tritura con DCM para producir terc-butil 5-bromotiazolo [5, 4 -£] piridin-2-ilcarbamato (Compuesto 1007, 1.65 g, 76% de rendimiento) como un sólido blanco: ESMS (M-H) 328, 330; ¾ NMR (DMSO-ds) d 12.08 (s, 1H) , 7.99 (d, 1H) , 7.64 (d, 1H) , 1.52 (s, 9H) .

Como se muestra en la etapa 4-iv del Esquema de reacción 4, el 5-bromotiazolo [5 , 4-b] piridin-2-ilcarbamato de tere-butilo (Compuesto 1007, 1.00 g, 3.03 mmol) y el ácido 5- (trifluorometil) piridin-3-il-3-borónico (1.0 g, 5.2 mmol, 1.7 equiv.) y carbonato de cesio (2.96 g, 9.08 mmol) se disuelven en DMSO (30 mL) . La solución se lava a chorro con nitrógeno por 5 minutos y se adiciona Pd(dppf)Cl2 (247 mg, 0.303 mmol). La mezcla de reacción se agita en un tubo sellado a 100°C por 1.25 horas. Después del enfriamiento, la mezcla se diluye con acetato de etilo y se lava con agua. Los orgánicos se concentran y el sólido resultante se suspende en DCM. El producto sólido se filtra para proporcionar 5- (5- (trifluorometil) iridin-3-il) tiazolo [5,4-£>]piridin-2-ilcarbamato de tere-butilo (Compuesto 1008, 1.0 g, 83% de rendimiento): ESMS (M+H) 397.19.

Como se muestra en la etapa 4-v del Esquema de reacción 4, el 5- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) tiazolo[5,4-b] piridin-2-ilcarbamato de tere-butilo (Compuesto 1008, 1.0 g, 2.52 mmol) se hace pasta aguada en aproximadamente 5 mL de DCM y se adicionan 15 mL de TFA. La solución oscura resultante se agita por 30 minutos y luego se vierte lentamente en 160 ¡mL de NaOH 2N. El precipitado resultante se colecta por filtración y se lava con agua. Después del secado bajo alto vacío, el producto sólido se seca adicionalmente sometiendo a azeotropía cantidades de trazas de agua con tolueno (3X) y luego DCM (3X) para proporcionar la 5- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) tiazolo [5, 4-J]piridin-2-amina (Compuesto 1009, 730 mg, 98% de rendimiento): ESMS (M+H) 297.05.

Como se muestra en la etapa 4-vi del Esquema de reacción 4, la 5- (5- (trifluorometil) piridin-3- il) tiazolo[5,4-Jb] piridin-2-amina (Compuesto 1009, 350 mg, 1.18 mmol), 2-propoxietilcarbamato de 4-nitrofenilo (634 mg, 2.36 mmol, 2.0 equiv. ) y diisopropiletilamina (412 pL, 2.36 mmol, 2.0 equiv. ) se disuelven en 2.36 mL de DMF y calientan a 100°C por 2 horas.

Después del enfriamiento, la mezcla se diluye con acetato de etilo y se lava con agua (3X) . Las capas acuosas combinadas se extraen de nuevo con acetato de etilo y los orgánicos combinados se secan sobre sulfato de sodio. Después de la filtración, los orgánicos se concentran y el sólido resultante se agita con Et20 durante la noche. El producto sólido se filtra, se recupera en DCM con una cantidad mínima de metanol, y se purifica por cromatografía en gel -de. sílice de media presión (0-3% MeOH/DCM) para producir 1- (5- (5- (trifluorometil) piridin-3-il) tiazolo [5,4-£>] piridin-2-il) -3- (2-propoxietil) urea (Compuesto 1 , 153 mg, 23% de rendimiento): ES S (M+H) 426.25; 1H-NMR (DMSO-d6) d 9.60- (d, J = 1.9 Hz, 1H) , 9.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H) , 8.80 (s, 1H) , 8.26 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 8.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 6.87 (t, J = 5.3 Hz, 1H) , 3.49 - 3.46 (m, 2H) , 3.41 - 3.33 (m, 4H) , 2.32 (s, 3H) , 1.54 (td, J = 14.1, 7.1 Hz, 2H) , 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 3H) .

Esquema de Reacción 4 Ejemplo,. 5. Preparación de l-etil-3- (6- (5- (trifluorometil) piridin-3-iDbenzo [d] tiazol-2-il) urea (Compuesto 13) Como se muestra en la etapa 5 del Esquema de reacción 5, la 6- (5- (trifluorometil)piridin-3-il) benzo [d] tiazol-2-amina (Compuesto 1003, 26 mg, 0.088 mmol) se disuelve en 2 mi de DMF . A la solución se adiciona isociañato de etilo (69.15 yL, 0.88 mmol, 10 equiv. ) y la mezcla de reacción se calienta por 5 minutos a 120°C bajo radiación de microondas. La reacción se juzga aún no completa por análisis de HPLC de modo que otros 69.15 µ? de isociañato de etilo sé adicionan y la mezcla de reacción se calienta unos 10 minutos adicionales bajo radiación de microondas. La mezcla se purifica por cromatografía en gel de sílice de media presión para proporcionar l-etil-3- (6- (5-(trifluorometil) piridin-3 -il) benzo [d] tiazol-2-il) urea (Compuesto 13, 22.7 mg, 85.3% de rendimiento) como un sólido blanco: ESMS (M+H) 367.19; 1H- MR (metanol-d4) d 9.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 9.09 (m, 1H) , 8.84 (s, 1H) , 8.36 - 8.35 (m, 1H) , 7.92 - 7.82 (m, 1H) , 3.37 (m, 2H) , 2.72 (s, 3H) y 1.21 (t, J Esquema de Reacción 5 compuestos 2, 4-12, y 14 se sintetizan por procedimientos análogos a aquellos proporcionados anteriormente en los Ejemplos 1-5.

La Tabla 2 proporciona datos de caracterización analíticos para ciertos compuestos de fórmula I (células blancas indican que la prueba no fue realizada) . Los números de compuestos en la Tabla 2 corresponden a aquellos representados en la Tabla 1.

Tabla 2.

XH NMR (300 MHz , a menos que se Compuesto ESMS indique de otra forma) No. (M+H) picos de NMR dados como valores (DMS0-d6) : 9.60 (d, J = 1.9 Hz, 1H) , 9.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H) , 8.80 (s, 1H) , 8.26 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 8.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 426.25; 6.87 (t, J = 5.3 Hz, 1H) , 3.49 - 3.46 (m, 2H) , 3.41 - 3.33 (m, 4H) , 2.32 (s, 3H) , 1.54 (td, J = 14.1, 7.1 Hz, 2H) , 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 3H) (DMSO-de) : 11.04 (s, 1H) , 9.60 (d, J = 2.1 Hz, 1H) , 9.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H) , 8.80 (s, 1H) , 8.26 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 8.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 6.82 (s, 1H) , 3.42 (t, J 440.14 = 6.2 Hz, 2H) , 3.36 - 3.22 (m, 4H) , 1.72 (qn, J = 6.5 Hz, 2H) , 1.52 (td, J = 14.1, 7.1 Hz, 2H) , 0.87 (t, J = 7.4 Hz, 3H) , 0.20 (s, H) 439.30 425.30 411.20 1H NMR (300 MHz, a menos que se Compuesto ESMS indique de otra forma) No. (M+H) picos de NMR dados como valores d 6 397. 20 7 425. 30 8 439. 30 9 411. 20 (DMSO-dg) : 11.05 (s, IH) , 9.60 (d, J = 1.8 Hz, IH) , 9.02 (d, J = 1.3 Hz, IH) , 8.80 (s, IH) , 8.26 (d, J 10 412. 15 = 8.5 Hz, IH) , 8.11 (d, J = 8.4 Hz, IH) , 6.85 (s, IH) , 3.39 (t, J = 6.2 Hz, 2H) , 3.27 - 3.21 (m, 5H) , 1.72 (qn, J = 6.5 Hz, 2H) (DMSO-dg): 11.04 (s, IH) , 9.60 (s, IH) , 9.02 (s, IH) , 8.80 (s, IH) , 8.26 (d, J =.8.5 Hz, IH) , 8.11 (d, J = 8.5 Hz, IH) , 6.82 (s, IH) , 11 426. 18 3.43 (q, J = 7.0 Hz, 2H) , 3.38 (m, 2H) , 3.28 - 3.24 (m, 2H) , 1.72 (t, J = 6.6 Hz, 2H) , 1.13 (t, J = 7.0 Hz, 3H) (metanol-d4) : 9.31 (d, J = 2.0 Hz, IH) , 9.09 (m, IH) , 8.84 (s, IH) , 12 367. 19 8.36 - 8.35 (m, IH) , 7.92 - 7.82 (m, IH) , 3.37 (m, 2H) , 2.72 (s, 3H) y 1.21 (t, J = 7.2 Hz, 3H) (metanol-d4) : 9.61 (d, J = 1.5 Hz, IH) , 9.05 (s, 2H) , 8.16 (d, J = 8.5 Hz, IH) , 8.08 (d, J = 8.5 Hz, 13 368 25 IH) , 3.34 (m, 3H, sobrepuesta con señal de CD30D) ) , 2.62 (m, DMSO- d6)) y 1.21 (t, J = 7.2 Hz, H) (DMSO-de) : 9.27 (d, J = 1.9 Hz, ¦ IH) , 8.95 (d, J = 1.1 Hz, IH) , 8.53 (s, IH) , 8.47 (d, J = 1.7 Hz , IH) , 7.88 (dd, J = 1.9, 8.5 Hz , 14 377 .2 IH) , 7.75 (d, J = 8.5 Hz, IH) , 7.18 - 7.14 (m, IH) , 3.99 (dd, J = 2.4, 5.5 Hz, 2H) , 3.20 (t, J = 2.4 Hz, IH) , 3.17 (s, IH) , y 2.35 (s, •6H) ; Ensayo biológico de los compuestos de la invención Ejemplo 6. Ensayo de Inhibición de PI3K Usando un Biomek FX de Beckman Coulter, 1.5 µ?? de cada una de las diez diluciones en serie de 2.5 partes de un compuesto de la invención en 100% DMSO se adiciona a una cavidad individual (después, "cavidad de prueba") en una placa de poliestireno de 96 cavidades [Corning, Costar Item No. 3697] . Una cavidad de prueba también contiene 1.5 µ?? de DMSO sin compuesto. Otra cavidad contiene un inhibidor en DMSO a una concentración conocida por inhibir completamente la enzima, (después "cavidad . antecedente"). Usando un Titertek Multidrop, 50 µ?? de la Mezcla de Reacción [100 mM HEPES pH 7.5, 50 mM NaCl, 10 mM DTT, 0.2 mg/mL BSA, 60 µ? fosfatidilinositol (4 , 5) bisfosfato diC16 (PI(4,5)P2; Avanti Polar Lipids, Cat . No. 840046P) y la isoforma PI3K de interés (ver Tabla 3 para concentraciones de isoforma) ] se adiciona a cada cavidad. Para iniciar la reacción, 50 µ? de Mezcla de ATP [20 mM MgCl2, 6 µ? ATP (100 µ??/µp??? 33P-ATP) ] se adiciona a cada cavidad, seguido por incubación de las cavidades por 30 min. a 25 °C. Las concentraciones finales en cada cavidad son 50 mM HEPES 7.5, 10 mM MgCl2, 25 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.1 mg/mL BSA, 30 µ? PI(4,5)P2, 3 µ? ATP, y la isoforma de PI3K de interés (ver Tabla 3) . Las concentraciones del compuesto final en cada cavidad varían desde 10 µ? a 1 nM.

Tabla 3 Después de la incubación, las reacciones en cada cavidad se apagan por adición de 50 µ?, de solución de detención [30% TCA/Agua, lOmM ATP] . Cada mezcla de reacción apagada luego se transfiere a una placa de filtro de fibra de vidrio de 96 cavidades [Corning, Costar Item No. 3511] . La placa se filtra en vacío y se lava tres veces con 150 jiL de 5% TCA/agua en un Lavador de Placas Automático Bio-Tek , Instruments ELX-405 modificado. 50 L de fluido de escintilación se adicionan a cada cavidad y la placa se lee en un contador de escintilación líquido Perkin-Elmer TopCount® NXT para obtener valores de inhibición que representan los conteos de 33P.

El valor de la cavidad antecedente se sustrae del valor obtenido para cada cavidad de prueba y los datos se ajustan a la ecuación de Ki de enlace estrecho competitivo descrita por Morrison and Stone, Comments Mol. Cell Biophys. 2: 347-368, 1985.

Los compuestos que tienen una Ki menor que o igual a 0.010 µ para la inhibición de ??3 ? incluyen: Compuestos 10, 11, 13, y 14.

Los compuestos que tienen una Ki mayor que 0.010 µ? y menor que o igual a 0.100 µ? para la inhibición de ??3?? incluyen: Compuestos 1-9, y 12.

Los compuestos que tienen una ¾ mayor que 0.010 µ? y menor que o igual a 0.100 µ? para la inhibición de ,Pl3Ka incluyen: Compuestos 6, 10, y 12-14.

Los compuestos que tienen una ¾ mayor que 0.100 µ? y menor que o igual a 4 µ? para la inhibición de PI3KOÍ incluyen:. Compuestos 1-5, 7-9, y 11.

Ejemplo 7. Evaluación de las Concentraciones en Cerebro/Plasma Los compuestos seleccionados de la invención se evalúan para su capacidad de cruzar la barrera hematoencef lica . Por consiguiente, un compuesto de la invención se administra a ratas Sprague-Dawley [10 mg/kg como una solución 1 mg/mL 0.5% MC] vía suministro intragástrico oral. Dos horas después de la administración del compuesto, las ratas se anestesian por administración intramuscular de un cóctel de 2 mL/kg de cetamina/Rompun/Acepromazina y se colocan sobre la mesa de necropsia. La cavidad abdominal luego se abre con un corte en V y 300 microlitros de sangre luego se extraen directamente del ventrículo izquierdo para análisis de concentración en plasma. La muestra de sangre se almacena en hielo en un tubo Eppendorf de 1.5 mL (que contiene K2EDTA) y posteriormente se centrifuga por 2 minutos a 2000 rpm. Después de la centrifugación, 110 microlitos de plasma se transfieren a un tubo nuevo y se almacenan a -70°C hasta el análisis. La rata se perfusiona con solución salina fría (que contiene 50 IU de heparina) a 20 mL/min desde una bomba de infusión a través del ventrículo izquierdo del corazón. Inmediatamente después de iniciar la perfusión, se hace un pequeño corte en el atrio derecho de modo que la solución salina heparinizada puede fluir a través del cuerpo. La perfusión se continúa hasta que el hígado aparece de color pálido (aproximadamente 60 mL de solución salina fría) . El cerebro se remueve y se coloca en hielo, se seca, pesa, coloca en un tubo, se congela con nitrógeno líquido, y se almacena a -70°C hasta que se realiza el análisis adicional.

Para determinar la concentración del compuesto en el plasma, la muestra de sangre se prepara por precipitación de proteína con adición de acetonitrilo a una relación de 1:4. Después del vórtice y centrifugación, el sobrenadante se analiza por espectrometría de masas en tándem con cromatografía líquida de alta resolución en modo de ionización Ionización Química a Presión Atmosférica (APCI) positiva. El análisis se hace usando cromatografía líquida de alta resolución de fase inversa con una columna analítica 5.0 pm Xterra C18 (2.1 x 50 mm) . La fase móvil consiste de una mezcla de 10 mM acetato de amonio y acetonitrilo corriendo en un gradiente lineal de 1.5 minutos. Las alícuotas de la matriz se adicionan con concentraciones conocidas del compuesto de interés y un estándar interno. Las muestras de estudio se adicionan con el estándar interno solo. La curva de calibración generalmente contiene concentraciones finales en la matriz de control de 1 a 5000 ng/mL. La curva de calibración se analiza y la respuesta del instrumento (conteos de área para el compuesto de interés/Conteos dé Área para el Estándar interno) se usan para generar una curva de calibración. La respuesta del instrumento para las muestras de estudio se comparan con la curva de calibración y la concentración se calcula de nuevo de la curva. La concentración en plasma de los compuestos 1, 4, 10, 11, y 14 se muestra en la Tabla 3 posterior.

Para determinar la concentración del compuesto en el cerebro, la muestra del cerebro se descongela a RT, y un equivalente de 0.5 en peso de agua se adiciona a la muestra. La muestra luego se homogeniza completamente. Dos a cuatro volúmenes de acetonitrilo se adicionan al homogenado de cerebro, el homogenado mezclado y la muestra se centrifugan para remover la proteína. Similar al método usado: para obtener las concentraciones en sangre, una alícuota del sobrenadante de homogenado de muestra se inyecta sobre una LC/MS/MS que corre un gradiente adecuado para detectar el compuesto de interés. La respuesta del instrumento se compara con la respuesta del instrumento de las muestras de calibración del homogenado de cerebro adicionado con concentraciones conocidas del compuesto para determinar la concentración en el cerebro. La concentración en el cerebro de los Compuestos 1, 4, 10, 11, y 14 se muestra en la Tabla 3 posterior, donde los valores presentados son un promedio de los resultados obtenidos para dos o tres animales.

Tabla 3. * basado en una densidad de plasma de rata de 1.0 g/mL - ** relación promedio de cerebro/plasma basada en los datos obtenidos para cada animal .

Ejemplo 8. Eficacia del Compuesto 10 en un modelo de Encefalomielitis Autoinmunitaria Experimental (EAE) El compuesto 10 se utiliza para demostrar la eficacia de los compuestos de la invención en encefalomielitis autoinmunitaria experimental (EAE) , el cual es un modelo de ratón útil de esclerosis múltiple (MS) .

Materiales Ratones SJL/J hembra de 8-10 semanas de edad se adquirieron de Jackson Laboratories. El péptido PLP139.1S1 (HSLGKWLGHPDKF) . es sintetiza por Anaspec, Inc. con una pureza de >95%. Una solución madre de_4 mg/mL se prepara con PBS. M. tuberculosis, H37 Ra se obtiene de Difco Laboratories y 100 mg se resuspenden en 2.5 mL de PBS para una concentración final de 40 mg/mL. Adyuvante completo de Freund (CFÁ) se obtiene de MP Biomedicals. Un volumen de 50 mL de CFA contiene 25 mg de M. tuberculosis suspendido en una mezcla de 7.5 mi Arlacel A y 42.5 mi aceite de parafina. La toxina pertussis se obtiene de List Biological Laboratories, Inc. y 50 yg se resuspenden en 500 L de agua estéril más 29.5 mL de PBS para una concentración final de 1.67 µg/µL. Un volumen de 50 mi contiene 25 mg de M. tuberculosis suspendido en una mezcla de .7.5 mL de Arlacel ?F y 42.5 mL de aceite de parafina.

Protocolo de Estudio Cada ratón se sintetiza con una inyección de una mezcla de homogenado de solución de PLP139-151 (25 µL) /suspensión CFA (100 L) /suspensión de M. tuberculosis (10 µL) en 55 µL de PBS en cada flanco posterior para un total de 0.2 mL usados para inducir EAE. Además, cada ratón se inyecta con 200 µL de suspensión de pertussis al inicio, del experimento y de nuevo a 48 horas. Antes de la sensibilización con PLP, cada ratón se trata con vehículo (0.5% MC) , Compuesto 10 a 120 mg/kg BID, Compuesto 10 a 150" mg/kg BID, o dexametasona (como un control positivo) a 2 mg/kg QD. Los animales son monitoreados diariamente para el comienzo de la enfermedad y registros clínicos durante 21 días. Los pesos corporales se miden tres veces a la semana. Resultados La administración profiláctica del Compuesto 10 resulta en la supresión de la enfermedad cuando se compara con animales administrados con vehículo solo.

Todas las publicaciones y patentes citadas en esta especificación se incorporan en la presente para referencia como si cada publicación o patente individual fuera específicamente e individualmente indicada para ser incorporada para referencia. Aunque la invención anterior se ha descrito en algún detalle por vía de ilustración y éj'emplo para propósitos de claridad del entendimiento, será fácilmente evidente por aquellos de experiencia ordinaria en el arte a la luz de las enseñanzas de esta invención que ciertos cambios y modificaciones se pueden hacer a esta sin apartarse del espíritu o alcance de las reivindicaciones anexas.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante paira llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (16)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en ' las siguientes reivindicaciones :

1. Un compuesto que tiene la fórmula: o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque: X es N o CH; R1 es -C(0)N(Rla) (Rlb) , en donde Rla es alifático de Ci-4 o cicloalifático de C3 3--6 opcionalmente sustituido con JR; cada J es independientemente fluoro, JR1, o -0JR1; | TR1 se selecciona de alifático de Ci-4 o cicloalifático de C3-6 ,1b es hidrógeno o Rla y Rlb, conjuntamente con el nitrógeno al cual se unen, forman un anillo heterocíclico de 4-6 miembros, en donde el anillo heterocíclico opcionalmente comprende un átomo de oxígeno adicional y es opcionalmente sustituido con JR2; y TR2 se selecciona independientemente de fluoro, alquilo de C1-2, cicloalifático de C3-6, o -OCi-2alquilo .

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque X es N.

3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque X es CH.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque R1 se selecciona de o

5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque R1 se selecciona de

6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque, R1 se selecciona de

1. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque R1 es -C (0) NH-C2-3alquil-0-Ci-3alquilo .

8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable, caracterizado porque se selecciona de

9. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 ó 2 y un portador, adyuvante, o vehículo farmacéuticamente aceptable.

10. La composición de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque adicionalmente comprende un agente terapéutico seleccionado de un agente para tratar esclerosis múltiple, un agente anti-inflamatorio, un agente inmunomodulador, o un agente inmunosupresor .

11. La composición de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada porque el agente terapéutico es beta interferón, glatiramir, natalizumab, o mitoxantrona .

12. Un método para tratar o disminuir la severidad de una enfermedad o afección seleccionada de una enfermedad autoinmunitaria o una enfermedad inflamatoria del cerebro o médula espinal, caracterizado porque comprende la etapa de administrar al paciente un compuesto o sal del mismo de conformidad con la reivindicación 1, o una composición farmacéutica del mismo.

13. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la enfermedad o trastorno es esclerosis múltiple.

14. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque comprende la etapa adicional de administrar al paciente un agente terapéutico adicional, en donde el agente terapéutico adicional es apropiado paira la enfermedad que es tratada y el agente terapéutico adicional se administra conjuntamente con el compuesto o composición como una forma de dosificación única, o separadamente del compuesto o composición como parte de una forma ' de dosificación múltiple. i

15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el agente terapéutico adicional es útil para tratar esclerosis múltiple y se selecciona de beta interferón, glatiramir, natalizumab, o mitoxantrona .

16. Un método para inhibir la actividad de PI3K-gamma cinasa en una muestra biológica, caracterizado porque comprende poner en contacto la muestra biológica con un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o una composición de conformidad con la reivindicación 9.