MX2008009811A - Derivados benzazola, composiciones y metodos de uso como inhibidores de la quinasa aurora - Google Patents

Derivados benzazola, composiciones y metodos de uso como inhibidores de la quinasa aurora

Info

Publication number
MX2008009811A
MX2008009811A MXMX/A/2008/009811A MX2008009811A MX2008009811A MX 2008009811 A MX2008009811 A MX 2008009811A MX 2008009811 A MX2008009811 A MX 2008009811A MX 2008009811 A MX2008009811 A MX 2008009811A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
indazol
group
mmol
compound
formula
Prior art date
Application number
MXMX/A/2008/009811A
Other languages
English (en)
Inventor
C Andrews Robert
Subramanian Govindan
Zhu Jeff
N Arimilli Murty
Mm Mjalli Adnan
S Grella Brian
Gopalaswamy Ramesh
Davis Stephen
Guo Xiaochuan
Original Assignee
C Andrews Robert
N Arimilli Murty
Davis Stephen
Gopalaswamy Ramesh
S Grella Brian
Guo Xiaochuan
Mm Mjalli Adnan
Subramanian Govindan
Transtech Pharma Inc
Zhu Jeff
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by C Andrews Robert, N Arimilli Murty, Davis Stephen, Gopalaswamy Ramesh, S Grella Brian, Guo Xiaochuan, Mm Mjalli Adnan, Subramanian Govindan, Transtech Pharma Inc, Zhu Jeff filed Critical C Andrews Robert
Publication of MX2008009811A publication Critical patent/MX2008009811A/es

Links

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos y métodos para el tratamiento del cáncer. La invención proporciona compuestos que inhiben la quinasa Aurora, composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos que inhiben la quinasa Aurora y métodos para el tratamiento del cáncer usando los compuestos de la presente invención o composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos de la presente invención.

Description

DERIVADOS BENZAZOLA. COMPOSICIONES Y MÉTODOS DE USO COMO INHIBIDORES DE LA QUINASA AURORA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona a derivados azola útiles como inhibidores de la quinasa Aurora y métodos de uso de los derivados benzazola para tratar el cáncer.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Un mejor entendimiento de las rutas de la transducción de señal y las enzimas que sustentan la etiología de la enfermedad y la patofisiología han facilitado grandemente la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos. Una clase importante de enzimas que ha sido el sujeto de investigación intensiva para señalar los procesos de la enfermedad es las proteínas quinasas.
Las proteínas quinasas son reguladores claves del crecimiento celular, la diferenciación, el metabolismo y la función. Las proteínas quinasas son una familia de enzimas estructuralmente relacionadas que son responsables para el control de una variedad de procesos de transducción de señales dentro de la célula {The Protein Kinase Facts Book, I and II, Academic Press, San Diego, Calif.: 1995). Casi todas las quinasas proteínas contienen un dominio catalítico que consiste de aproximadamente 250 a 300 aminoácidos. En general, las proteínas quinasas median su señalización intracelular mediante la transferencia catalítica de un grupo ?-fosforilo del ATP para los sustratos de la proteína blanco. Las proteínas quinasas se clasifican en familias mediante los sustratos que fosforilan. Las porciones de secuencia se han identificado que corresponden a cada una de las familias quinasas tales como proteínas tirosina, proteína-serina/treonina y lípidos (Hanks, S. K., Hunter, T. FASEB J. 1995, 9 576-596; Knighton et al., Science 1991 , 253, 407-414; Hiles et al., Cell 1992, 70, 419-429). En respuesta a una variedad de estímulos, las proteínas quinasas permiten que la célula haga decisiones mediante actuar como un interruptor "encendido/apagado" molecular que puede perturbar o regular la función de la proteína blanco.
La transducción de señales mediada por la proteína quinasa anormal en una célula es la causa subyacente de muchos estados patológicos. Estos estados de enfermedad incluyen pero no se limitan a enfermedad autoinmune, enfermedades de asma y alergias, enfermedades neurodegenerativas y neurológica, enfermedades metabólicas, enfermedad de Alzheimer, enfermedad cardiovascular y cáncer. Por consiguiente, las proteínas quinasas se consideran blancos de fármacos racionales para la intervención terapéutica y los inhibidores proteína quinasa se piensa que son agentes terapéuticos efectivos.
La familia aurora de la de las proteínas quinasas serina/treonina es esencial para la proliferación celular (Trends in Cell Biology 9, 454-459 (1999); Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2, 21 -32 (2001 ); Trends in Cell Biology 1 , 49-54 (2001 )). La familia quinasa aurora humana consiste de tres quinasas altamente homólogas (A ó "2", B ó "1" y C ó "3"). Durante la proliferación celular normal, estas proteínas se involucran en la segregación de cromosomas, función del eje mitótico y citoquinesis. La expresión aurora quinasa es baja en las células latentes y los picos durante la G2 y las fases de mitosis del ciclo celular. Varios sustratos de mamíferos propuestos para las quinasas Aurora que son importantes para la división celular incluyen histona, H3, TPX2, cadena ligera reguladora II miosina, CENP-A y fosfatasa proteína 1.
Dado que la elucidación de su rol clave en el progreso mitótico y la división celular, las quinasas Aurora se han unido cercanamente a la tumoroigénesis. Por ejemplo, la amplificación del gen quinasa Aurora y la sobreexpresión se han reportado en muchos cánceres. Una codificación del polimorfismo de nucleótido simple (SNP) se ha identificado que es significativamente más frecuente en el cáncer gástrico avanzado relativo al cáncer gástrico en etapa temprana y su SNP correlaciona con la actividad quinasa elevada (Cáncer Lett. Enero 10, 2006). La sobreexpresión de la Aurora A induce la amplificación centrosoma, la aneuploidismo y la transformación en los fibroblastos de roedores (Bischoff, J.R. et al. EMBOJ 17, 3052-3065 (1998); Nat. Genet. Oct 20 (2);189-93 (1998)). Esta actividad oncogénica es probable debido a la generación de la inestabilidad del cromosoma. En efecto, existe una fuerte correlación entre la sobreexpresión Aurora A y el aneuploidismo de cromosomas en el cáncer de mama y gástrico (Int., J. Cáncer 92,. 370-373 (2001 ); Revista Británica del Cáncer 84, 824-831 (2001 )). La expresión Aurora B se eleva en las líneas celulares derivadas de los tumores del colon, mama, pulmón, melanoma, riñón, ovarios, páncreas, SNC, tracto gástrico y leucemias (Oncol Res. 2005; 15(l):49-57; Tatsuka et al. 1998, 58, 4811-4816; Revista Británica del Cáncer 84, 824-831 (2001); EMBO J. 17, 3052-3065 (1998)). En el cáncer de próstata, la expresión nuclear incrementada de la Aurora B se observa en los tejidos del cáncer de próstata anaplásticos de alto grado Gleason relativos a bajos e intermedios grados y la expresión Aurora B se acompaña por la fosforilación del sustrato histona H3 (Próstata 66(3): 326-33 (2003)). La Aurora C se sobreexpresa en el cáncer colorectal primario (Revista de Química Biológica 274, 7334-7340 (1999); Japón. J. Cáncer Res. 91 ,1007-1014 (2000)).
Porque la inhibición quinasa Aurora en las células tumorales puede resultar en arresto mitótico y apoptósis, estas quinasas son blancos importantes para la terapia para el cáncer. Dando el rol central de la mitosis en el progreso de virtualmente todas las malignidades, los inhibidores de las quinasas Aurora por lo tanto se expresan por tener el potencial de bloquear el crecimiento de los cánceres o tumores y tienen aplicación a través de un amplio rango de cánceres o tumores en humanos.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN Esta invención proporciona derivados benzazola sustituidos y composiciones que inhiben la quinasa Aurora. En una modalidad, la presente invención proporciona compuestos de la Fórmula (I) como se representa posteriormente. En otra modalidad, la presente invención proporciona métodos para la preparación de compuestos de la Fórmula (I). En otra modalidad, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos de la Fórmula (I). En otra modalidad, la presente invención proporciona métodos para usar los compuestos de la Fórmula (I) y las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la Fórmula (I) en el tratamiento de enfermedades en humanos o animales. Los compuestos de la invención son útiles como inhibidores de la quinasa Aurora y además pueden ser útiles para el manejo, tratamiento, control y tratamiento adjunto de las enfermedades mediadas por la actividad quinasa Aurora tal como las enfermedades proliferativas celulares incluyendo el cáncer.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra curvas de crecimiento tumoral MiaPaCa-2, en donde A representa el vehículo para el Ejemplo 88 y erlotinib o representa erlotinib en una dosis de 50 mg/kg, p.o. diariamente por 14 día; ? representa el Ejemplo 88 en una dosis de 10 mg/kg i.p., b.i.d. diariamente por 10 días y · representa el Ejemplo 88 y erlotinib, en donde: A = Días de estudio B = Peso del tumor medio (mg).
La Figura 2 muestra las curvas de crecimiento tumoral MiaPaca-2, en donde ¦ representa el vehículo para El Ejemplo 88 y gemcitabina; ? representa el Ejemplo 88 en una dosis de 10 mg/kg i.p., b.i.d. diariamente por 10 días; ? representa gemcitabina en una dosis de 120 mg/kg, i.p., q3d x 4 y O representa el Ejemplo 88 y gemcitabina.
La Figura 3 muestra las curvas del crecimiento tumoral BT-474 en ratones SCOD atímicos, en donde ¦ representa el vehículo para el Ejemplo 88, O representa trastuzumab en una dosis de 10 mg/kg, i.p. dos veces semanalmente, por 4 semanas; A representa el Ejemplo 88 en una dosis de 30 mg/kg i.p., b.i.d. diariamente por 3 días, posteriormente 2 días libres, para un total de 5 ciclos, y a representa el Ejemplo 89 y trastuzumab.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona compuestos que inhiben la quinasa Aurora. Estos compuestos son útiles para inhibir la quinasa Aurora in vitro, y pueden ser útiles para el tratamiento de las enfermedades proliferativas celulares, incluyendo el cáncer en un paciente.
En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I): (D en donde X e -NH-, -O- ó S-, E es CH 2 -, -NH-, -O-, ó-S-, G1 y G2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de; arilo, heteroarilo, arilcicloalquilo fusionado, cicloalquilarilo fusionado, cicloalquilheteroarilo fusionado, heterociclilarilo fusionado y el grupo heterociclilheteroarilo fusionado, en donde G1 y G2 se sustituyen opcionalmente 1 a 7 veces con los sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de Rb; L1 se selecciona del grupo que consiste de: un enlace directo, -CH2 -, -O-, -0-CH2-, -CH2-0-, -N(R6)-. -C(O)-, -C(0)N(R6)-, -N(R6)C(0)-, -N(R6)C(0)N(R7)-, -N(R6)C(0)0-, -OC(0)N(R6)-, -N(R6)S02, -S02N(R6)-, -C(0)-0-, -O-C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(0)2-, -N(R6)S02N(R7)-, -N=N-, -C(R8)=C(R9)-, y -C=C-, en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rd y Re; y R8 y R9 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Re y Rf; A es un enlace directo o el grupo -L2-Y-L3-, en donde L2 y L3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: un enlace directo, - alquileno C1-10, -alquenileno C2-10, -alquinileno C2.10, -arileno, -heteroarileno, -cicloalquileno y -heterociclileno, en donde los átomos de carbono de los grupos alquileno, alquenileno, alquinileno, arileno, heteroarileno, cicloalquileno y heterociclileno se sustituyen opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente independientemente seleccionado de Rc; Y es un enlace directo, -O-, -N(R10), -S-, SOz -, -C(0)N(R10)-, -N(R10)-C(O)-, -N(R11)C(0)N(R10)-, -N(R10)SO2-, -S02N(R10)-, -C(0)-0-, -N(R11)S02N(R10)-, -O-CO-, O -N=N-, en donde R 0 y R11 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: Rd y Re, y Q se selecciona del grupo que consiste de en donde R y R se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: R y Re; 2) -heteroarilo; -heterociclilo; -cicloalquilheteroarilo fusionado; -heterociclilarilo fusionado; -heterociclilheteroarilo fusionado; -arilheterociclilo fusionado; -heteroarilcicloalquilo fusionado y -heteroarilheterociclilo fusionado; en donde los grupos heteroarilo, heterociclilo, cicloalquilheteroarilo fusionado, heterociclilarilo fusionado, heterociclilheteroarilo fusionado, arilheterociclilo fusionado, heteróarilcicloalquilo fusionado y heteroarilheterociclilo fusionado se sustituyen opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente opcionalmente seleccionado de R°; y 3) un sistema de anillo que comprende al menos un átomo de nitrógeno seleccionado del grupo que consiste de: en donde n, m, p, q y r son independientemente 0-4 de manera que n+m+p iguales de 2-5 y q+r iguales de 2-5, y el sistema de anillo cicloalquilo o heterociclo se sustituye opcionalmente los átomos de carbono (CH2) 1-2 con R18 ó R19, en donde R18 y R19 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rf y R9, J se selecciona del grupo que consiste de: J3 y J5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -CH2-, -O-, -S-, S(0)2, -C(O)- -C(0)N(H)-, -NHC(O)-, -NHC(0)N(H)-, -NHS02-, -S02N(H)-, -C(0)-0-, -O-C(O)-, -NHS02NH-, R29 y R30 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rd y Re; R31 es Rf; R1 es Rb; Rb es a) -cicloalquilo, b) -ciano, c) -ORd, d) -N02, e) -halógeno, f) -haloalquilo, g) -S(0)sRd, h) -SRd, i) -S(0)2ORd, j) -S(0)sNRdRe, k) -NRdRe, l) -0(CRf R9),NRdRe, m) -C(0)Rd, n) -C02Rd, o) -C02(CRfR9),C(0)NRdRe, p) -0C(0)Rd, q) -C(0)NRdRe , r) -NRdC(0)Re, s) -0C(0)NRdRe, t) -NRdC(0)0Re, u) -NRdC(0)NRdRe, v) -CF3, w) -OCF3 x) -alquilo C1-10, y) -alquenilo C2-i0, z) -alquinilo C2-10, aa) -alquileno-C^o-arilo; bb) -alquileno CMo-heteroarilo 0 ce) -heteroarilo, en donde los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo y cicloalquilo se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente independientemente seleccionado de R°¡ .
Rc es a) -halógeno, b) -amino, c) -carboxi, d) -alquilo C^, e) -O-alquilo C1- , f) -cicloalquilo, g) -O-cicloalquilo, h) -arilo, i) -alquileno C -arilo, j) -hidroxi, k) -CF3, I) -O-arilo, m) -heteroarilo, n) -heteroarilo-alquilo C Mo, 0) heterociclilo, p) -C02-alquilo C1-10 ó q) -C02-alquil d-io arilo, Rd y Re se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo Ci.10, alquenilo C2-10. alquinilo C2-10, cicloalquilo, alquileno C1-10-cicloalquilo, arilo, heterociclilo, en donde los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo, heterociclilo se sustituyen opcionalmente con uno o cuatro sustituyentes independientemente seleccionados de Rc; ó Rd y Re junto con los átomos a los cuales se unen forman un anillo heterocíciico de 5 a 7 miembros que contienen 0-2 heteroátomos adicionales independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y nitrógeno y opcionalmente sustituido con 1-3 veces con Rc, Rf y R9 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo C1-10, cicloalquilo, alquileno C^o-cicloalquilo y arilo, en donde los grupos alquilo, cicloalquilo y arilo se sustituyen opcionalmente con uno a cuatro sustituyentes independientemente seleccionados de R°; o Rf y R9 junto con el carbono al cual se unen forman un anillo de 5 a 7 miembros que contiene 0-2 heteroátomos independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y nitrógeno opcionalmente sustituido con 1-3 veces con Rc, s es un número entero de 1 a 2, t es un número entero de 1 a 10, u es un número entero de 0 a 1 , v es un número entero de 0 a 2, o una sal farmacéuticamente aceptable o profármaco del mismo.
En una modalidad, X es -NH-.
En otra modalidad, X es -NH- y E es -NH-.
En una modalidad del compuesto de la Fórmula (I), G2 se selecciona del grupo que consiste de fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il y 4,5,6,7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]-piridina-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1 -4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste Rb.
En una modalidad adicional, G2 se sustituye con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo C -10, piperazin-1-il, 4-(alquilo C1-10)-piperazin-1-il, alcoxi CMO, haloalquilo, cicloalquilo y alquileno C-Mo-cicloalquilo.
En una modalidad adicional, G2 es fenilo, naftilo, isoquinolin-3-ilo, piridina-2-il, piridina-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, en donde G2 se sustituya o no se sustituye con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: cloro, flúor, metilo, etilo, propilo, isopropilo, tert-butilo, butilo, fenilo, metoxi, trifluorometilo, trifluorometoxi y ciclopentilo.
En una modalidad del compuesto de la Fórmula (I), L es -C(0)-NH- ó -NH-C(O)-.
En otra modalidad del compuesto de la Fórmula (I), L1 es -C(R8)=C(R9)-.
En otra modalidad del compuesto de la Fórmula (I), G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol-6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol-5-il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il , benzotriazol-6-il , benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, indol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H-indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, 1 H-indazol-6-il, quinolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-il, 2-oxindol-5-il, 2-oxindol-6-il, 2- (1 H)-bencimidazolon-5-il, 3- indazolinon-5-il, y 3-indazolinon-6-il, en donde G se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de times Rb.
En una modalidad adicional, G1 se sustituye o no se sustituye con al menos un grupo seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo C1-10, piperazin-1-il, 4-(alquilo Ci.10)-piperazin-1-il, alcoxi ?1-10, -alquileno C1-10-OH, haloalquilo, -cicloalquilo, -alquileno C1- 0-cicloalquilo, morfolin-4-il, pirrol-1-il, -amino, -NH-(alquilo C1-10), -N(alquilo C1 -10)2> -NHC(0)-alquilo d.10, NHC(0)-(1 -(alquilo C^f -piperidina^-il), -NHC(0)-fenilo, -NH-alquileno C1-10-morfilin-4-il, -O-alquileno C1-10-morfolin-4-il y -NH-alquileno C1- 0-OH.
En una modalidad adicional, L1 es -NHC(O)- ó -C(0)-NH- y G1 es 1 H-indazol-5-il ó 1 H-indazol-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
En una modalidad adicional, G1 es 1 H-indazol-5-il ó 1 H-indazol-6-il, en donde G1 se sustituye o no sustituye en la posición 3 con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo CMO, piperazin-1-il, 4-(alquilo C1-10)-piperazin-1-il, -alcoxi C1-10, -alquileno Ci. 10-OH, -haloalquilo, -cicloalquilo, -alquileno C^o-cicloalquilo, morfolin-4-il, -alquileno C1-10-morfolin-4-il, pirrol-1-il, -amino, -NH-(alquilo ?,.,?), -N(alquilo C,.,0)2 . -NHC(0)-alquilo C -10, -NHC(0)-(1-(alquilo Ci.io)-piperidin-4-il), -NHC(0)-fenilo, -NH-alquileno C1-10-morfolin-4-il -O-alquileno C1-10-morfolin-4-il y -NH-alquileno-C^o-OH.
En otra modalidad adicional, u es 1 , A es un enlace directo y Q se selecciona del grupo que consiste de: 4-(alquilo C^oJ-piperazin-l-il, piperadin-1-il, morfolin-4-il, -NH-alquilo C1-10, -N-(alquilo C1-10)2, -N-(alquilo C1-10)(cicloalquilo), y -NH-cicloalquilo.
En una modalidad, u es cero y v es cero. En otra modalidad, u es 1 y v es cero. En otra modalidad, u es cero y v es uno.
En otra modalidad, u es cero y v es uno y R1 se selecciona del grupo que consiste de: -alquilo C1-10, -cicloalquilo, -alquileno d.-io-cicloalquilo, -haloalquilo C1.10, -O-alquilo CM0, -O-cicloalquilo y -O-haloalquilo C,.10.
En otra modalidad, X es -NH-, E es -NH-, v es cero, L 1 es -NHC(O)- ó -C(0)NH-, G1 1 H-indazol-6-il ó 1 H-indazol-5-il, en donde G se sustituye opcionalmente 1 -4 veces con sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb. En otra modalidad, G1 no se sustituye.
En otra modalidad, el compuesto de la Fórmula (I) tiene la fórmula: en donde G1 , G2, L1 , Q, y A son como se definieron anteriormente.
En otra modalidad, el compuesto de la Fórmula (I) tiene la fórmula: en donde G1 , G2, y Q son como se definió anteriormente.
En una modalidad adicional de la Fórmula (Ib), Q se selecciona del grupo que consiste de: 4- (alquilo C1-10)-piperazin-1-il, piperadin-1-il, morfolin-4-il, -NH-alquilo C -10, -N-(alquilo C1 -10)2, -N-(alquilo C1-10)(cicloalquilo), y -NH-cicloalquilo.
E una modalidad adicional de la Fórmula (Ib), Q se selecciona del grupo que consiste de: morfolin-4-il, 4-metil-piperazin-1-il, dietilamino, 2,6-dimetilmorfolin-4-il, (2-dimetilaminoetil)-metilamino, 4-dimetilaminopiperidin-1-il, dipropilamino, bis-(2-metoxietil)amino, 4-hidroxipiperidin-1-il, etil-(2- metoxietil)amino, pirrolidin-1-il, N-etil-N'-(2-metoxietil)amino, etilpropilamino, 4-isopropilpiperazin-l-il, y etilmetilamino.
En una modalidad adicional de la Fórmula (Ib), G2 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, y 4,5,6,7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]-piridin-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
En una modalidad adicional de la Fórmula (Ib), G2 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo y piridin-2-il, en donde G2 no se sustituye o se sustituye con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: metilo, metoxi, trifluorometilo y trifluorometoxi.
En una modalidad adicional de la Fórmula (Ib), G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol-6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol- 5- il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il, benzotriazol-6-il, benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, indol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H-indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, 1 H-indazol-6-il, quinolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-il, 2-oxindol-5-il, 2- oxindol-6-il, 2-(1 H)-bencimidazolon-5-il, 3-indazolinon-5-il, y 3- indazolinon-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb .
En otra modalidad, el compuesto de la Fórmula (I) tiene la fórmula: (Ic) en donde G1, G2, y R1 son como se definió anteriormente.
En una modalidad adicional del compuesto de la Fórmula (le), R1 se selecciona del grupo que consiste de: -alquilo C -10, -cicloalquilo, -alquileno-C^o-cicloalquilo, -haloalquilo C io-fenilo, -O-alquilo ?1-10, -O cicloalquilo y -O-haloalquilo C,.|0- En una modalidad adicional de la Fórmula (le), G2 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, y 4,5,6,7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]-piridin-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
En una modalidad adicional de la Fórmula (Id), G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol-6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol-5-il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il, benzotriazol-6-il, benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, indol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H-indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, IH-indazol-6-il, quinolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-il, 2-oxindol-5-il, 2-oxindol-6-il, 2-(1 H)-bencimidazolon-5-il, 3-indazolinon-5-il, y 3-¡ndazolinon-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1 -4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
En los compuestos de la Fórmula (I), los varios grupos funcionales representados deberán entenderse que tienen un punto de unión en el grupo funcional que tiene el guión. En otras palabras, en el caso de alquileno C1-10-arilo, deberá entenderse que el punto de unión es el grupo alquileno, un ejemplo debería ser bencilo. En el caso de un grupo tal como -C(0)-NH-alquileno 10-arilo, el punto de unión es el carbono carbonilo.
El término "inhibidor quinasa Aurora" o "inhibidor de quinasa Aurora" se usa para significar un compuesto que tiene una estructura como la definida anteriormente, que es capaz de interactuar con una quinasa Aurora e inhibir su actividad enzimática. La inhibición de la actividad enzimática de la quinasa Aurora significa reducir la actividad de una quinasa Aurora para fosforilar un sustrato péptido o proteína. En varias modalidades, dicha reducción de la actividad quinasa Aurora es al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 75%, al menos aproximadamente 90%, al menos aproximadamente 95% o al menos aproximadamente 99%. En varias modalidades, la concentración del inhibidor de la quinasa Aurora requerida para reducir una actividad enzimática quinasa Aurora es menos que aproximadamente 1 µ?, menos que aproximadamente 50 mM o menos de aproximadamente 100 nM.
En algunas modalidades, dicha inhibición es selectiva, es decir, el inhibidor quinasa Aurora reduce la habilidad de una quinasa Aurora para fosforilar un sustrato péptido o proteína en una concentración que es menor que la concentración del inhibidor que se requiere para producir otro, el efecto biológico no relacionado, es decir, la reducción de la actividad enzimática de una quinasa diferente.
Como se usa en este documento, "comprende", significa "incluye, pero no se limita a".
También se incluyen dentro del alcance de la invención los enantiómeros individuales de los compuestos representados por la Fórmula (I) anterior así como cualquier todo o parcialmente mezclas racémicas de los mismos. La presente invención también cubre los enantiómeros individuales de los compuestos representados por la Fórmula (I) anterior como mezclas con diastereoisómeros de los mismos en los cuales uno o más estereocentros se invierten. A menos que se establezca de otra manera, las estructuras representadas en este documento también significan que incluyen compuestos que difieren solamente en la presencia de uno o más átomos isotópicamente enriquecidos. Por ejemplo, los compuestos que tienen la presente estructura excepto por el reemplazo de un átomo de hidrógeno por un deuterio o tritio o el reemplazo de un átomo de carbono por un carbono 13C ó 1 C-enriquecido están dentro del alcance de la invención.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una sal farmacéuticamente aceptable, solvato o profármaco de los compuestos de la Fórmula (I). En una modalidad, el profármaco comprende un éster biohidrolizable o amida biohidrolizable de un compuesto de la Fórmula (I).
Los ejemplos de los compuestos de la Fórmula (I) de la presente invención que tienen actividad biológica potencialmente útil se listan por nombre en la Tabla 1 posterior. La habilidad de los compuestos de la Fórmula (I) para inhibir la actividad quinasa Aurora se estableció con los compuestos representativos de la Fórmula (I) listados en la Tabla 1 usando la prueba de fosforilación de péptidos descrita en el Ejemplo 102. Los compuestos de la Fórmula (I) en la Tabla I pueden inhibir la Quinasa Aurora con un IC50 de menos de o igual a 1 microMolar (µ?; 0"6 M).
Los compuestos que inhiben la actividad quinasa Aurora son potencialmente útiles en el tratamiento de las enfermedades de proliferación celular. Los compuestos de la Fórmula (I) de la presente invención además pueden ser particularmente útiles en el tratamiento del cáncer.
Tabla 1 En otro aspecto, la presente invención comprende una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la Fórmula (I) y un portador, excipiente, diluyente o mezcla farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención además proporciona los usos del compuesto de la Fórmula (I) para inhibir la actividad quinasa Aurora y para tratar las enfermedades mediadas por la quinasa Aurora.
Como se usa en este documento, el término "inferior" se refiere a un grupo que tiene uno o más carbonos.
Como se usa en este documento, el término "alquilo" se refiere a un hidrocarburo de cadena ramificada o lineal que tiene uno a diez átomos de carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquilo" como se usa en este documento incluyen pero no se limitan a metilo, n-butilo, n-pentilo, isobutilo e isopropilo y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquileno" se refiere a un radical hidrocarburo divalente de cadena ramificada o lineal que tiene de uno a cuatro átomos de carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquileno" como se usan en este documento incluyen, pero no se limitan a metileno, etileno y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquilino" se refiere a un radical hidrocarburo trivalente de cadena ramificada o lineal que tiene de uno a diez átomos de carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquilino" como se usa en este documento incluyen peor no se limitan metina, etilina y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquenilo" se refiere a un radical hidrocarburo que tiene de dos a diez átomos de carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono, opcionalmente sustituido y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquenilo" como se usan en este documento incluyen pero no se limitan a 3,3-dimetil-but-1-enil, 4-hex-1-enil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquenileno" se refiere a un radical hidrocarburo divalente de cadena lineal o ramificada que tiene dos a diez átomos de carbono y uno o más dobles enlaces carbono-carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquenileno" como se usa en este documento incluyen pero no se limitan a eteno-1 ,2-diil, propeno-1 ,3-diil, metileno-1 ,1-diil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquinilo" se refiere a un radical hidrocarburo que tiene desde dos a diez átomos de carbono y al menos un triple enlace carbono-carbono, opcionalmente sustituido y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "alquinilo" como se usa en este documento incluyen pero no se limitan a 4-hex-1 inil, 3,3-dimetil-but- inil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "alquinileno" se refiere a un radical hidrocarburo divalente de cadena ramificada o lineal que tiene desde dos a diez átomos de carbono y uno o más triples enlaces carbono-carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Ejemplos de "alquinileno" como se usan en este documento incluyen pero no se limitan a etino-1 ,2-diil, propino-1 ,3-diil y los similares.
Como se usa en este documento, los términos "haloalifático", "haloalquilo", "haloalquenilo" y "haloalcoxi" se refieren a un grupo alifático, alquilo, alquenilo o alcoxi, como el caso puede ser sustituido con uno o más átomos de halógeno.
Como se usa en este documento, "cicloalquilo" se refiere a un grupo hidrocarburo alicíclico no aromático y opcionalmente poseyendo uno o más grados de insaturación, que tiene de tres a doce átomos de carbono, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "cicloalquilo" como se usa en este documento incluyen pero no se limitan a ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo y los similares.
Como se usa en este documento, el término "cicloalquileno" se refiere a un radical hidrocarburo divalente alicíclico no aromático que tiene de tres a doce átomos de carbono y opcionalmente poseyendo uno o más grados de insaturación, opcionalmente sustituidos con sustituyentes y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "cicloalquileno" como se usan en este documento incluyen pero no se limitan a ciclopropil-1 , 1 -diil, ciclopropil-1 ,2-diil, ciclobutil-1 ,2-diil, ciclopentil-1 ,3-diil, ciclohexil-1 ,4-diil, cicloheptil-1 ,4-dii), ciclooctil-1 ,5-diil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heterocíclico" o el término "heterociclilo" se refiere a uno o más anillos heterocíclicos de tres a doce miembros no aromáticos opcionalmente poseyendo uno o más grados de insaturación, conteniendo uno o más sustituyentes heteroatómicos seleccionadas de S, SO, S02, O ó N, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Dicho anillo puede fusionarse opcionalmente a uno a tres de otros anillos "heterocíclicos" ó anillos cicloalquilo. Los ejemplos de "heterociclilo" incluyen pero no se limitan a tetrahidrofurano, tetrahidropirano, 1-4-dioxano, 1 ,3-dioxano, piperidina, pirrolidina, morfolina, piperazina y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heterociclileno" se refiere a un diradical del anillo heterocíclico de tres a doce miembros no aromático que tiene opcionalmente uno o más grados de insaturación conteniendo uno ó más heteroátomos seleccionados de S, SO, S02, O ó N opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Dicho anillo puede fusionarse opcionalmente de uno a tres anillos de benceno ó de uno a tres de otros anillos "heterocíclicos" o anillos cicloalquilo. Los ejemplos de "heterociclileno" incluyen pero no se limitan a tetrahidrofuran-2,5-diil, morfolina-2,3-diil, piran-2,4-diil, 1 ,4-dioxano-2,3-diil, 1 ,3-dioxano-2,4-diil, piperidina-2,4-diil, piperidina-1 ,4-diil, pirrolidina-1 ,3-diil, morfolina-2,4-d¡il, p¡perazina-1 ,4-dül y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arilo" se refiere a un anillo de benceno o un anillo de benceno fusionado a uno a tres anillos de benceno, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de arilo incluyen pero no se limitan a fenilo, 2-naftilo, 1-naftilo, 1-antracenilo y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arileno" se refiere a un diradical del anillo de benceno o a un diradical del sistema de anillo de benceno fusionado a uno a tres anillos de benceno opcionalmente sustituidos, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Los ejemplos de "arileno" incluyen pero no se limitan a benceno-1 ,4-diil, naftaleno-1 ,8-diil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilo" se refiere a un anillo aromático de cinco a siete miembros ó a un anillo aromático policíclico (más de tres anillos), conteniendo uno o más heteroátomos de nitrógeno, oxígeno ó azufre, en donde los N-óxidos y los monóxidos de azufre y los dióxidos de azufre son sustituciones heteroaromáticas permisibles, opcionalmente sustituidas y múltiples grados de sustitución siendo permitidas. Para los sistemas del anillo aromático heteroarilo policíclico, uno o más de los anillos pueden contener uno ó más heteroátomos. Los ejemplos de "heteroarilo" usados en este documento incluyen pero no se limitan a furano, tiofeno, imidazol, pirazola, triazola, tetrazola, tiazola, oxazola, isoxazola, oxadiazola, tiadiazola, isotiazola, piridina, piridazina, pirazina, pirimidina, quinolina, isoquinolina, quinazolina, benzofurano, benzotiofeno, indol e indazol y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarileno" se refiere a un diradical del anillo aromático de cinco a siete miembros o a un diradical del anillo aromático heterocíclico policíclico (más de tres anillos), que contiene uno ó más heteroátomos de nitrógeno, oxígeno o azufre, en donde los N-óxidos y monóxidos de azufre y los dióxidos de azufre son sustituciones heteroaromáticas permisibles, opcionalmente sustituidos y múltiples grados de sustitución siendo permitidos. Para los diradicales del sistema del anillo aromático policíclico, uno o más de los anillos puede contener uno o más heteroátomos. Los ejemplos del "heteroarileno" usados en este documento incluyen pero no se limitan a furan-2,5-diil, tipf eno-2 ,4-d ii 1 , 1 ,3,4-oxadiazoleno-2,5-diil, 1 ,3,4-tiadiazola-2,5-diil, 1 ,3-tiazola-2,4-diil, 1 ,3-tiazola-2,5-diil, piridina-2,4-diil, piridina-2,3-diil, piridina-2,5-diil, pirimidina-2,4-diil, quinolina-2,3-diil y los similares.
Como se usa en este documento, el término "cicloalquilarilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos cicloalquilo fusionados a un grupo arilo, los grupos arilo y cicloalquilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo arilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "cicloalquilarilo fusionado" usados en este documento incluyen 5-indanil, 5,6,7,8-tetrahidro-2-naftilo, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "cicloalquilarileno fusionado" se refiere a un cicloalquilarilo fusionado en donde el grupo arilo es divalente. Los ejemplos incluyen y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arilcicloalquilo fusionado" se refiere a uno o más grupos arilo fusionados a un grupo cicloalquilo, los grupos cicloalquilo y arilo teniendo dos átomos en compón y en donde el grupo cicloalquilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "arilcicloalquilo fusionado" usados en este documento incluyen 1-indanilo, 2-indanilo, 9-fluorenilo, 1-(1 ,2,3,4-tetrahidronaftilo), y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arilcicloalquileno fusionado" se refiere a arilcicloalquilo fusionado en donde el grupo cicloalquilo es divalente. Los ejemplos incluyen 9 fluorenileno, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heterociclilarilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos heterociclilo fusionados a un grupo arilo, los grupos arilo o heterociclilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo arilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "h sados en este documento incluyen 3,4-metilenodioxi-1-fenilo, > y los similares. Como se usa en este documento, el término "heterociclilarileno fusionado" se refiere a un heterociclilarilo fusionado en donde el grupo arilo es divalente. Los ejemplos incluyen y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arilheterociclilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos arilo fusionados a un grupo heterociclilo, los grupos heterociclilo y arilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo heterociclilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "arilheterociclilo fusionado" usados en este documento incluyen 2-(1 ,3-benzodioxolilo), y los similares.
Como se usa en este documento, el término "arilheterociclileno fusionado" se refiere a un arilheterociclilo fusionado en donde el grupo heterociclilo es divalente. Los ejemplos incluyen y los similares.
Como se usa en este documento, el término "cicloalquilheteroarilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos cicloalquilo fusionados a un grupo heteroarilo, los grupos heteroarilo y cicloalquilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo heteroarilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "cicloalquilheteroarilo fusionado" usados en este documento incluyen 5-aza-6-indanilo, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "cicloalquilheteroarileno fusionado" se refiere a un cicloalquilheteroarilo fusionado, en donde el grupo heteroarilo es divalente. Los ejemplos incluyen * y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilcicloalquilo fusionado" se refiere a uno ó más grupos heteroarilo fusionados a un grupo cicloalquilo, los grupos cicloalquilo y heteroarilo teniendo dos átomos en común, y en donde el grupo cicloalquilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "heteroarilcicloalquilo fusionado" usando en este documento incluyen 5-aza-1 -indanil, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilcicloalqueno fusionado" se refiere a un heteroarilcicloalquilo fusionado, en donde el grupo cicloalquilo es divalente. Los ejemplos incluyen y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heterociclilheteroarilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos heterociclilo fusionados a un grupo heteroarilo, los grupos heteroarilo y heterociclilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo heteroarilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "heterociclilheteroarilo fusionado" usados en este documento incluyen 1 ,2,3,4-tetrahidro-beta-carbolin-8-il, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heterociclilheteroarileno fusionado" se refiere a un heterociclilheteoarilo fusionado, en donde el grupo heteroarilo es divalente. Los ejemplos y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilheterociclilo fusionado" se refiere a uno o dos grupos heteroarilo fusionados a un grupo heterociclilo, los grupos heterociclilo y heteroarilo teniendo dos átomos en común y en donde el grupo heterociclilo es el punto de sustitución. Los ejemplos de "heteroarilheterociclilo fusionados" usados en este documento incluyen -5-aza-2,3-dihidrobenzofuran-2-il, y los similares.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilheterociclileno fusionado" se refiere a un heteroarilheterociclilo fusionado, en donde el grupo heterociclilo es divalente. Los ejemplos incluyen y los similares.
Como se usa en este documento, el término "enlace directo" en donde parte de una especificación variable estructural se refiere la unión directa de sustituyentes que flanquean (precedentes y siguientes) la variable tomada como un "enlace directo". En donde dos o más variables consecutivas se especificaron cada una como un "enlace directo", aquellos sustituyentes que flanquean (precedentes y siguientes) aquellos dos ó más "enlaces directos" consecutivos específicos se unen directamente.
Como se usa en este documento, el término "alcoxi" se refiere al grupo RaO-, en donde Ra es alquilo.
Como se usa en este documento, el término "alqueniloxi" se refiere al grupo RaO-, en donde Ra es alquenilo.
Como se usa en este documento, el término "alquiniloxi" se refiere al grupo RaO-, en donde Ra es alquinilo.
Como se usa en este documento, el término "alquilsulfanilo" se refiere al grupo RaS-, en donde Ra es alquilo.
Como se usa en este documento, el término "alquenilsulfanilo" se refiere al grupo RaS-, en donde Ra es alquenilo.
Como se usa en este documento, el término "alquinilsulfanilo" se refiere al grupo RaS-, en donde Ra es alquinilo.
Como se usa en este documento, el término "alquilsulfinilo" se refiere al grupo RaS(0)-, en donde Ra es alquilo.
Como se usa en este documento, el término "alquenilsulfinilo" se refiere al grupo RaS(0)-, en donde Ra es alquenilo.
Como se usa en este documento, el término "alquiniisulfinilo" se refiere al grupo RaS(0)-, en donde Ra es alquinilo.
Como se usa en este documento, el término "alquilsulfonilo" se refiere al grupo RaS02-, en donde Ra es alquilo.
Como se usa en este documento, el término "alquenilsulfonilo" se refiere al grupo RaS02-, en donde Ra es alquenilo.
Como se usa en este documento, el término "alquinilsulfonilo" se refiere al grupo RaS02-, en donde Ra es alquiniló.
Como se usa en este documento, el término "acilo" se refiere al grupo RaC(0)-, en donde Ra es alquilo, alquenilo, alquiniló, cicloalquilo, cicloalquenilo o heterociclilo.
Como se usa en este documento, el término "arilo" se refiere al grupo RaC(0)-, en donde Ra es arilo.
Como se usa en este documento, el término "heteroarilo" se refiere al grupo RaC(0)-, en donde Ra es heteroarilo.
Como se usa en este documento, el término "alcoxicarbonilo" se refiere al grupo RaOC(0)-, en donde Ra es alquilo.
Como se usa en este documento, el término "aciloxi" se refiere al grupo RaC(0)0-, en donde Ra es alquilo, alquenilo, alqúinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo o heterociclilo.
Como se usa en este documento, el término "ariloxi" se refiere al grupo RaC(0)0-, en donde Ra es arilo.
Como se usa en este documento, el término "heteroariloxi" se refiere al grupo RaC(0)0-, en donde Ra es heteroarilo.
Como se usa en este documento, el término "opcionalmente" significa que el (los) evento (s) subsecuentemente descrito (s) puede o no puede ocurrir e incluye ambos eventos que ocurren y los eventos que no ocurren.
Como se usa en este documento, el término "sustituido" se refiere a la sustitución de uno ó más hidrógenos de la porción designada con el sustituyente ó sustituyentes nombrados, múltiples grados de sustitución siendo permitidos a menos que se establezca de otra manera, con la provisión de que la sustitución resulte en un compuesto químicamente factible ó estable. Un compuesto químicamente estable o factible es uno en el cual la estructura química no se altera sustancialmente cuando se conserva en una temperatura de aproximadamente -80°C a aproximadamente +40°C, en la ausencia de humedad u otras condiciones químicamente reactivas, por al menos una semana ó un compuesto que mantiene su integridad lo suficientemente amplia para se útil para la administración terapéutica o profiláctica a un paciente. La frase "uno ó más sustituyentes" como se usa en este documento, se refiere a un número de sustituyentes que se iguala desde un número máximo de sustituyentes posibles con base en el número de sitios de enlace disponibles con la condición de que las condiciones anteriores de estabilidad y factibilidad química se cumplan.
Como se usa en este documento, los términos "contiene" ó "conteniendo" pueden referirse a sustituciones en línea en cualquier posición a lo largo de los sustituyentes alquilo, alquenilo, alquinilo ó cicloalquilo definidos con uno ó más de cualquiera de O, S, SO, S02, N ó N-alquilo, incluyendo por ejemplo, -CH2-0-CH2-, -CH2-SO2-CH2-, -CH2-NH-CH3y así sucesivamente.
En donde los términos "alquilo" ó "arilo" ó cualquiera de sus raíces de prefijo aparezcan en un nombre de un sustituyente (por ejemplo, arilalcoxiariloxi), se interpretarán como incluyendo aquellas limitaciones proporcionadas por el "alquilo" y "arilo" anterior. Los números designados de átomos de carbono (por ejemplo, ?1-10) se referirán independientemente del número de átomos de carbono en una porción alquilo, alquenilo ó alquinilo o alquilo cíclico o a la porción alquilo de un sustituyente mayor en el cual el término "alquilo" aparece como su raíz de prefijo.
Como se usa en este documento, el término "oxo" se referirá al sustituyente Como se usa en este documento, el término "halógeno" ó "halo" incluirá yodo, bromo, cloro y flúor.
Como se usa en este documento, el término "mercapto" se referirá al sustituyente -SH.
Como se usa en este documento, el término "carboxi" se referirá al sustituyente -COOH.
Como se usa en este documento, el término "ciano" se referirá al sustituyente -CN.
Como se usa en este documento, el término "aminosulfonilo" se referirá al sustituyente -S02NH2.
Como se usa en este documento, el término "carbamoil" se referirá al sustituyente -C(0)NH2.
Como se usa en este documento, el término "sulfanilo" se referirá al sustituyente -S-.
Como se usa en este documento, el término "sulfinilo" se refiere al sustituyente -S(O)-.
Como se usa en este documento, el término "sulfonilo" se refiere al sustituyente -S(0)2-.
Los compuestos pueden prepararse de conformidad con los siguientes esquemas de reacción (en los cuáles las variables son como se definió anteriormente o como se definen) usando los materiales y reactivos iniciales rápidamente disponibles. En estas reacciones, también es posible hacer uso de las variantes que son por sí mismas conocidas por aquellos expertos en la técnica pero que no se mencionan en mayor detalle.
La presente invención también proporciona un método para la síntesis de compuestos útiles como intermediarios en la preparación de compuestos de la Fórmula (I) junto con los métodos para la preparación de compuestos de la Fórmula (I). A menos que se especifique de otra manera, las variables estructurales son como se definen en la Fórmula (I).
Como se muestra en el Esquema 1 , el diaminobenzonato (1 )= se reacciona con isoriocianato (6) mediante calentar en un solvente tal cómo, pero no limitado a, THF para proporcionar tiourea (2). El isotiocianato (6) está comercialmente disponible o se prepara de una amina correspondiente (5) mediante reaccionar con 1 ,1'-tiocarbonilimidazola en solvente, tal como pero no limitado a THF. La tiourea (2) se trata con un reactivo de acoplamiento, tal como pero no limitado a, EDC para proporcionar aminobencimidazola, que en hidrólisis, produce ácido carboxílico (3). El ácido carboxílico (3) posteriormente se acopla con una amina en la presencia de un reactivo de acoplamiento tal como peor no limitado a HBTU para formar la amida (4).
Esquema I Alternativamente, la aminobencimidazola (4) también se hace como se muestra en el Esquema II. El ácido carboxílico (7) se acopla con una amina én la presencia de un reactivo de acoplamiento tal como pero no limitado a HBTU para formar una amida (8). El grupo nitro del intermediario (8) posteriormente se reduce bajo condiciones tales como pero no limitadas a Pd/C bajo atmósfera de hidrógeno para proporcionar diamina (9). La diamina (9) posteriormente se reacciona con un isotiocianato, como se describe para el Esquema I, para proporcionar tiourea, que en tratamiento con el reactivo de acoplamiento tal como pero no limitado a EDC para producir aminobencimidazola (4).
Esquema II Como se muestra en el Esquema III, el derivado del cloruro del ácido benzoico (10) que se obtiene del ácido carboxílico correspondiente mediante calentar con un reactivo tal como, pero no limitado a cloruro de oxalilo, se acopla con una amina en la presencia de una base tal como, pero no limitada a piridina para formar una amida (11 ). La amida (1 ) posteriormente se convierte en nitroanilina (12) mediante calentarla con hidróxido de amonio en un solvente tal como pero no limitado a DCM.
La nitroanilina (12) en el calentamiento con un nucleófilo tal como pero no limitado a una amina bajo condiciones pulcras o en la presencia de un solvente, se transforma en intermediario (13). El grupo nitro del intermediario (13) posteriormente se reduce bajo condiciones tales como pero no limitadas a Pd/C bajo atmósfera de hidrógeno para proporcionar la diamina (14). La diamina (14) posteriormente se reacciona con un isotiocianato, como se describe para el Esquema I, para proporcionar tiourea, el cual está en tratamiento con el reactivo de acoplamiento, tal como pero no limitado a EDC para producir aminobencimidazola (15).
Esquema III Los compuestos de esta invención son inhibidores de la quinasa Aurora. Los compuestos pueden probarse in vitro por su habilidad para inhibir una quinasa Aurora. Las pruebas in vitro incluyen pruebas para determinar la inhibición de la habilidad de una quinasa Aurora para fosforilar una proteína o péptido sustrato. Las pruebas in vitro alternas cuantifican la habilidad del compuesto para unir a una quinasa Aurora. El enlace del inhibidor puede medirse mediante la radio marcación del inhibidor antes del enlace, el aislamiento del complejo quinasa Aurora/inhibidor y determinar la cantidad de enlace radiomarcado. Alternativamente, el enlace del inhibidor puede determinarse medíante correr un experimento de competencia en el cual los inhibidores nuevos se incuban con la quinasa Aurora unida a un radioligando conocido. Los compuestos también pueden probarse por su habilidad para afectar las funciones fisiológicas o celulares mediadas por la actividad quinasa Aurora. Las pruebas para cada una de estas actividades se describen en los Ejemplos y/o se conocen en la técnica.
En general, las modalidades de la presente invención útiles para las aplicaciones farmacéuticas pueden tener potencias inhibidoras (IC50'S) para una proteína de interés de debajo de aproximadamente 10 µ?. En una modalidad, las modalidades de la presente invención útiles para las aplicaciones farmacéuticas pueden tener un IC50 para una proteína de interés de debajo de aproximadamente 1 µ?. Para las aplicaciones particulares, las potencias inhibidoras inferiores pueden ser útiles. Además en otra modalidad, los compuestos de la presente invención pueden inhibir la quinasas Aurora con un IC50 en un rango de menos de 100 nM. En otra modalidad, los compuestos de la presente invención pueden inhibir la quinasa Aurora con potencias inhibidoras (IC50 s) de entre 0.1 nM y 100 nM.
En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) en donde el compuesto de la Fórmula (I) se administra en una dosis de menos de 1,000 mg/kg del peso corporal por día. En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) en donde el compuesto de la Fórmula (I) se administra en una dosis de menos de 100 mg/kg de peso corporal por día. En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) en donde el compuesto de la Fórmula (I) se administra en una dosis de menos de 10 mg/kg de peso corporal por día.
Las modalidades de los compuestos de la presente invención demuestran utilidad como inhibidores de la actividad quinasa Aurora o como inhibidores de la proliferación celular. Las modalidades de la invención descrita en este documento son dirigidos adicionalmente . a composiciones farmacéuticas y métodos para inhibir la quinasa Aurora en un sujeto, cuyos métodos comprenden administrar a un sujeto en necesidad de inhibición de la actividad quinasa Aurora una cantidad terapéuticamente aceptable de una compuesto de la Fórmula (I), anteriormente definida, como una forma o formas cristalinas polimórficas o simples, una forma amorfa, un enantiómero simple, una mezcla racémica, un estereoisómero simple, una mezcla de estereoisómeros, un diastereoisómero simple, una mezcla de diastereoisómeros, un solvato, una sal farmacéuticamente aceptable, un solvato, un profármaco, un éster biohidrolizable o una amida biohidrolizable del mismo.
En una modalidad, la invención proporciona un método para inhibir la actividad quinasa Aurora que comprende contactar una célula en la cual la inhibición de la quinasa Aurora se desea con un inhibidor de la quinasa Aurora de la Fórmula (I). En una modalidad, el inhibidor de la quinasa Aurora interactúa con y reduce la actividad de poco más de todas las enzimas quinasa Aurora en la célula. En donde un compuesto de la presente invención selectivamente actúa como un inhibidor de la quinasa Aurora en preferencia de una o más de otras quinasas, el tratamiento de un sujeto con un compuesto selectivo puede poseer ventaja en el tratamiento del cáncer en el sujeto sobre inhibidores quinasa no específicos. Además, en otra modalidad, la presente invención proporciona un método para inhibir selectivamente la actividad quinasa Aurora en la presencia de una o más quinasas que comprenden una célula en la cual la inhibición de la quinasa Aurora se desea con un inhibidor de la quinasa Aurora de la Fórmula (I).
El método de conformidad con este aspecto de la invención causa una inhibición de la proliferación celular de las células contactadas. La frase "inhibir la proliferación celular" se usa para denotar una habilidad de un inhibidor de la quinasa Aurora para inhibir el número celular o crecimiento celular en las células contactadas como se compara con las células no contactadas con el inhibidor. Una valoración de la proliferación celular puede hacerse mediante contactar las células con un contador de células, mediante medir la re-ingesta de un nucleótido marcado o análogo nucleótido o mediante una prueba de viabilidad celular. En donde las células están en un crecimiento sólido (es decir, un tumor u órgano sólido), dicha valoración de la proliferación celular puede hacerse mediante medir el crecimiento, es decir, con calibradores y comparar el tamaño del crecimiento de las células contactadas con las células no contactadas.
El crecimiento de las células contactadas con un inhibidor puede retardarse por al menos 50% como se compara con el crecimiento de las células no contactadas. En varias modalidades, la proliferación celular de las células contactadas se inhibe por al menos 75% como se compara con las células no contactadas. En algunas modalidades, la frase "inhibir la proliferación celular" incluye una reducción en el número de células contactadas, como se compara con las células no contactadas. Además, un inhibidor de la quinasa Aurora que inhibe la proliferación celular en una célula contactada puede inducir a la célula contactada para experimentar un retardo de crecimiento, para experimentar una detención del crecimiento, para experimentar la muerte celular programada (es decir, apoptósis) o para experimentar muerte celular necrótica.
Los sujetos pueden incluir, pero no limitarse a caballos, vacas, ovejas, cerdos, ratones, perros, gatos, primates tales como chimpancés, gorilas, macacos de la India y humanos. En una modalidad, un sujeto es un humano en necesidad de la inhibición de la actividad quinasa Aurora.
Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la invención pueden estar en una forma apropiada para uso oral, por ejemplo, como tabletas, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas y aceitosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas suaves y duras o jarabes o elíxires. Las composiciones intentadas para el uso oral pueden prepararse de conformidad con cualquier método conocido y dichas composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste de agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes preservativos para proporcionar preparaciones sabrosas y farmacéuticamente elegantes. Las tabletas pueden contener el ingrediente activo en mezcla con los excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son apropiados para la fabricación de tabletas. Estos excipientes pueden ser por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio, agentes desintegrantes o de granulación, por ejemplo almidón de maíz o ácido algínico; agentes de unión, por ejemplo, almidón, gelatina o acacia y agentes lubricantes, por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Las tabletas pueden no cubrirse o pueden cubrirse por técnicas conocidas para retrasar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y por lo tanto proporcionar una acción sostenida durante un periodo más grande. Por ejemplo, un material con tiempo de retraso tal como monoestearato de glicerilo o distearato de glicerilo pueden emplearse. También pueden cubrirse mediante las técnicas para formar tabletas terapéuticas osmóticas para liberación controlada.
Las formulaciones para el uso oral también pueden presentarse como cápsulas de gelatina dura en donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o kaolín o una cápsula de gelatina suave en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio aceitoso, por ejemplo, aceite de cacahuate, parafina líquida o aceite de oliva.
Las suspensiones acuosas pueden contener los compuestos activos en una mezcla con los excipientes apropiados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia, los agentes de dispersión o humectantes pueden ser un fosfatido de ocurrencia natural tal como lecitina o productos de condensación de un óxido alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetil-eneoxicetanol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de los ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de sorbitol polioxietileno o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de los ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de sorbitán polietileno. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes y uno o más agentes edulcorantes, tal como sacarosa o sacarina.
Las suspensiones aceitosas pueden formularse mediante la suspensión del ingrediente activo en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de cacahuate, aceite de oliva, aceite de ajonjolí o aceite de copra o en un aceite mineral tal como una parafina líquida. Las suspensiones aceitosas pueden contener un agente espesante por ejemplo, cera de abejas, parafina dura o alcohol cetilo. Los agentes edulcorantes tales como aquellos anteriormente establecidos y los agentes saborizantes pueden agregarse para proporcionar una preparación oral apetitosa. Estas composiciones pueden preservarse por la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.
Los polvos dispersables y los granulos apropiados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proporcionan el compuesto activo en mezcla con un agente humectante o dispersante, agente de suspensión y uno o más preservativos. Los agentes humectantes o dispersantes apropiados y los agentes de suspensión se ejemplifican por aquellos ya anteriormente mencionados. Los excipientes adicionales, por ejemplo agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes también pueden estar presentes.
Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en la forma de emulsiones de aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de oliva o aceite de arachis o un aceite mineral, por ejemplo una parafina líquida o una mezcla de los mismos. Los agentes emulsificantes apropiados pueden ser gomas de ocurrencia natural, por ejemplo goma de acacia o goma de tragacanto, fosfatidos de ocurrencia natural, por ejemplo, soya, lecitina y ésteres o ésteres parciales derivados de los ácidos grasos y anhídridos hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitán y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de sorbitán polioxietileno. Las emulsiones también pueden contener agentes saborizantes y edulcorantes.
Los jarabes y elíxires pueden formularse con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un demulcente, un preservativo y agentes colorantes y saborizantes.
Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de una suspensión oleaginosa o acuosa inyectable estéril. Esta suspensión puede formularse de conformidad con los métodos conocidos usando agentes humectantes o de dispersión apropiados y los agentes de suspensión anteriormente descritos. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución inyectable estéril o suspensión en diluyente o solvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como una solución en 1 ,3-butanediol. Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden emplearse son agua, agua estéril para inyección (SWFI), solución de Ringer y solución de cloruro de sodio isotónico. En adición, los aceites fijados, estériles se emplean convenientemente como solvente o medio de suspensión. Para este propósito, cualquier aceite fijado blando puede emplearse usando mono o diglicéridos sintéticos. En adición, los ácidos grasos tales como aceite oleico encuentran uso en la preparación de inyectables.
Además, en otra modalidad, la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o una sal del mismo.
Una solución de la invención puede proporcionarse en un contenedor sellado, especialmente uno hecho de cristal en una forma de dosis unitaria o en una forma de dosis múltiple.
Cualquier sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la Fórmula (I) puede usarse para preparar una solución de la invención. Los ejemplos de las sales apropiadas pueden ser, por ejemplo, las sales con ácidos inorgánicos minerales tales como clorhídrico, hidrobrómico, sulfúrico, fosfórico, nítrico y los similares y las sales con ciertos ácidos orgánicos tales como acéticos, succínicos, tartáricos, ascórbicos, cítricos, glutámicos, benzoicos, metanosulfónicos, etanosulfónicos y los similares. En una modalidad, el compuesto de la Fórmula (I) es una sal ácida clorhídrica incluyendo un mono, di ó trihidrocloruro.
Cualquier solvente que es farmacéuticamente aceptable y que es capaz de disolver el compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede usarse. La solución de la invención también puede contener uno o más componentes adicionales tales como un agente de co-solubilización (que puede ser el mismo como un solvente), un agente de ajuste de tonicidad, un agente de solubilización, un preservativo o mezclas de los mismos. Los ejemplos de los solventes, los agentes.de co-solubilización, los agentes de ajuste de la tonicidad, los agentes de estabilización y los preservativos que pueden ser apropiados para una formulación de solución como se describió anteriormente.
Los solventes apropiados y los agentes de co-solubilización incluyen pero no se limitan a agua, agua estéril para inyección (SWFI), solución salina fisiológica, es decir etanol, alcohol bencílico y los similares; glicoles y polietilenclicoles, por ejemplo, propilenoglicol, glicerina y los similares, ésteres de polialcoholes, por ejemplo diacetina, triacetina y los similares; poliglicoles y poliéteres, por ejemplo, polietilenglicol 400, metiléteres de propilenoglicol y los similares; dimetilisosorbida; derivados pirrolidona; por ejemplo 2-pirrolidona, N-metil-2-pirrolidona, polivinilpirrolidona (agente de co-solubilización solamente) y los similares; alcoholes grasos polioxietilenados; ésteres de ácidos grasos polioxietilenados; polisorbatos, por ejemplo Tween™, derivados de polioxietileno de polipropilenglicoles, por ejemplo Pluronics™.
Los agentes de tonicidad apropiada pueden incluir pero no se limitan a cloruros inorgánicos farmacéuticamente aceptables, por ejemplo cloruro de sodio, dextrosa, lactosa, manitol, sorbitol y los similares.
Los preservativos apropiados para la administración fisiológica pueden ser por ejemplo, ésteres de ácido parahidroxibenzoico (por ejemplo, metilo, etilo, propilo y ésteres de butilo o mezclas de los mismos), clorocresol y los similares.
Los agentes de solubilización apropiados incluyen pero no se limitan a monosacáridos (por ejemplo galactosa, fructosa y fucosa), disacáridos (por ejemplo, lactosa), polisacáridos (por ejemplo, dextrano), oligosacáridos cíclicos (por ejemplo, alfa, beta, gama-ciclodextrina), polioles alifáticos (por ejemplo, manitol, sorbitol y tioglicerol), polioles cíclicos (es decir, inositol) y solventes orgánicos (por ejemplo, alcohol etílico y glicerol).
Los solventes anteriormente mencionados y los agentes de co-solubilización, los agentes de ajuste de tonicidad, los agentes estabilizantes y los preservativos pueden usarse solos o como una mezcla de dos o más de ellos en una formulación de la solución.
En una modalidad, una formulación de solución farmacéutica puede comprender un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, SWFI y un agente seleccionado del grupo que consiste de solución de cloruro de sodio (es decir, solución salina fisiológica), dextrosa, manitol o sorbitol, en donde el agente está en una cantidad de menos de o igual a 5%. El pH de dicha formulación también puede ajustarse para mejorar la estabilidad de almacenamiento usando un ácido o base farmacéuticamente aceptable.
En las soluciones de la invención la concentración del compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede ser menos de 100 mg/ml o menos de 50 mg/ml o menos de 10 mg/ml o menos de 10 mg/ml y más de 0.01 mg/ml o entre 0.5 mg/ml y 5 mg/ml o entre 1 mg/ml y 3 mg/ml.
El empaque apropiado para las formulaciones de solución farmacéutica pueden ser todos contenedores apropiados intentados para el uso parenteral, tal como contenedores plásticos o de cristal, jeringas listas para usarse y las similares. En una modalidad, el contenedor es un contenedor de cristal sellado, por ejemplo una ampolleta o un frasco. Una ampolleta de cristal herméticamente sellada se prefiere particularmente.
De conformidad con una modalidad de la presente invención, se proporciona en un contenedor de cristal sellado, una solución inyectable estéril que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en un solvente fisiológicamente aceptable y que tiene un pH de 2.5 a 3.5. Para las formulaciones de solución, varios compuestos de la presente invención pueden ser más solubles o estables por periodos más largos en soluciones en un pH inferior que 6. Además, las sales acidas de los compuestos de la presente invención pueden ser más solubles en las soluciones acuosas que sus contra partes de base libre pero cuando las sales acidas se agregan a las soluciones acuosas, el pH de la solución puede ser muy baja para ser apropiada para la administración. Además, las formulaciones de solución que tienen un pH arriba de un pH de 4.5 pueden combinarse antes de la administración con una solución diluyente de pH mayor que 7 de manera que el pH de la formulación de combinación administrada es un pH de 4.5 o mayor. En una modalidad, la solución diluyente comprende una base farmacéuticamente aceptable tal como hidróxido de sodio. En otra modalidad, la solución diluyente está en un pH de entre 10 y 12. En otra modalidad, el pH de la formulación combinada administrada es mayor que 5.0. En otra modalidad, el pH de la formulación combinada administrada es entre un pH 5.0 y 7.0.
La invención también proporciona un proceso para producir una solución estéril con un pH de 2.5 a 3.5 cuyo proceso comprende disolver un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en un solvente farmacéuticamente aceptable. En donde una sal ácida farmacéuticamente aceptable de un compuesto de Fórmula (I) en donde se usa el pH de la solución puede ajustarse usando una solución básica o base farmacéuticamente aceptable agregando un estabilizador o ácido fisiológicamente aceptable para ajusfar el pH dentro de un rango deseado. El método además comprende pasar la solución resultante a través de un filtro de esterilización.
Uno o más componentes adicionales tal como agentes de co-solubilización, agentes de ajuste de tonicidad, agentes estabilizantes y preservativos por ejemplo de la clase previamente especificada pueden agregarse a la solución antes de pasar la solución a través del filtro de esterilización.
Las formulaciones de solución farmacéutica específica con diferentes pHs y concentraciones se ilustran en los Ejemplos que siguen.
Además, de conformidad con la invención, también se proporciona un método para inhibir el crecimiento de un tumor o cáncer, que comprende administrar a un huésped que sufre de dicho tumor o cáncer una solución inyectable de conformidad con la invención conteniendo la sustancia del fármaco activo en una cantidad suficiente para inhibir el crecimiento de dicho tumor.
Las soluciones inyectables de la invención pueden administrarse medíante inyección intravenosa rápida o infusión de conformidad con una variedad de programas de dosis posibles.
Las composiciones también pueden estar en la forma de supositorios para la administración rectal de los compuestos de la invención. Estas composiciones pueden prepararse mediante mezclar el fármaco con un excipiente no irritable apropiado que es sólido en temperaturas ordinarias pero líquido en la temperatura rectal y además se fundirá para la liberación del fármaco. Dichos materiales incluyen mantequilla de cocoa y polietilenglicoles, por ejemplo.
Para uso tópico las cremas, ungüentos, gelatinas, soluciones de suspensiones, etc., que contienen los compuestos de la invención se contemplan. Para el propósito de esta aplicación, las aplicaciones tópicas incluirán lavados bucales y gárgaras.
Los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en la forma de sistemas de liberación de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Las liposomas pueden formarse de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidicolinas.
También se proporcionan por la presente invención los profármacos de la invención. Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención, en donde un grupo ácido o básico está presente en la estructura también se incluyen dentro del alcance de la invención. El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales no tóxicas de los compuestos de esta invención que se preparan generalmente mediante reaccionar la base libre con un ácido orgánico e inorgánico o mediante reaccionar la base libre con un ácido orgánico o inorgánico apropiado o mediante reaccionar el ácido con una base inorgánica u orgánica. Las sales representativas incluyen las siguientes sales: Acetato, Bencenosulfonato, Benzoato, Bicarbonato, Bisulfato, Bitartrato, Borato, Bromuro, Edetato de Calcio, Camsilato, Carbonato, Cloruro, Clavulanato, Citrato, Dihidrocloruro, Edetato, Edisilato, Estolato, Esilato, Fumarato, Gluceptato, Gluconato, Clutamatol Glicolilarsanilato, Hexilresorcinato, Hidrabamine, Hidrobromuro, Hidrocloruro, Hidroxinaftoato, Yoduro, Isetionato, Lactato, Lactobionato, Laurato, Malato, Maleato, Mandelato, Mesilato, Metilbromuro, Metilnitrato, Metilsulfato, Maleato de Monopotasio, Mucato, Mapsilato, Nitrato, N-metilglucamina, Oxalato, Pamoato (Embonado), Palmitato, Pantotenato, Fosfato/Difosfato, Poligalacturonato, Potasio, Silicilato, Sodio, Estearato, Subacetato, Succinato, Tanato, Tartrato, Teoclato, Tosilato, Trietiyoduro, Trimetilamonio y Valerato. Cuando un sustituyente ácido está presente, tal como -COOH, puede formarse el amonio, morfolinio, sodio, potasio, bario, sal de calcio y los similares, para usarse como la forma de dosis. Cuando un grupo básico está presente, tal como amino o un radical heteroarilo básico, tal como piridilo, una sal ácida, tal como hidrocloruro, hidrobromuro, fosfato, sulfato, trifluoroacetato, acetato, oxalato, maleato, piruvato, malonato, succinato, citrato, tartrato, fumarato, mandelato, benzoato, cinamato, metanosulfonato, etanosulfonato, picrato y los similares e incluye ácidos relacionados a las sales farmacéuticamente aceptables listadas en el Boletín de Ciencia Farmacéutica, 66, 2 (1977) p. 1-19.
Otras sales que no son farmacéuticamente aceptables pueden ser útiles en la preparación de compuestos de la invención y éstas forman un aspecto adicional de la invención.
Además, algunos de los compuestos de la presente invención pueden formar solvatos con agua o solventes orgánicos comunes. Dichos solvatos también se contemplan dentro del alcance de la invención.
Además, en una modalidad adicional, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato o profármaco del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable, excipiente, diluyente o mezclas de los mismos.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser útiles en las aplicaciones terapéuticas relacionadas a una enfermedad mediada por la quinasa Aurora. Como se usa en este documento, el término "enfermedad quinasa Aurora" incluye cualquier desorden, enfermedad o condición que se causa o caracteriza por un incremento de la expresión o actividad quinasa Aurora o que requiere la actividad quinasa Aurora. El término "enfermedad mediada por la quinasa Aurora" también incluye cualquier desorden, enfermedad o condición en la cual, la inhibición de la quinasa Aurora es benéfica. Los desórdenes mediados por la quinasa Aurora incluyen enfermedades proliferativas. Los ejemplos no limitantes de las enfermedades proliferativas incluyen enfermedades proliferativas inflamatorias crónicas, por ejemplo soriasis y artritis reumatoide y enfermedades pulmonares crónicas, enfermedades oculares proliferativas, por ejemplo, retinopatía diabética, enfermedades proliferativas benignas, por ejemplo hemangiomas, restenosis, aterosclerosis, angiogénesis y cáncer.
En una modalidad, la composición se formula para la administración a un sujeto que tiene o está en riesgo de desarrollar o experimentar una recurrencia de una enfermedad mediada por la quinasa Aurora. En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la invención son aquellas formuladas para la administración intravenosa o subcutánea. Sin embargo, cualquiera de las formas de dosificación anteriores que contienen una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención están dentro de los límites de la experimentación de rutina y por lo tanto, dentro del alcance de la presente invención. En algunas modalidades, la composición farmacéutica de la invención además puede comprende otro agente terapéutico. En una modalidad, dichos otros agentes terapéuticos es uno administrado normalmente a un sujeto con la enfermedad o condición siendo tratada.
Como se usa en este documento, "cantidad terapéuticamente efectiva" es una cantidad del compuesto de la Fórmula (I) suficiente para causar una disminución detectable en la actividad quinasa Aurora o la severidad de una enfermedad mediada por la quinasa Aurora. La cantidad del inhibidor quinasa Aurora dependerá de la efectividad del inhibidor para el tipo celular dado y la longitud de tiempo requerido para tratar la enfermedad. Deberá entenderse que una dosis específica y régimen de tratamiento para cualquier sujeto dependerá de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el peso corporal, la salud en general, el sexo y la dieta del paciente, el tiempo de administración, la proporción de excreción, las combinaciones de fármacos, el juicio del tratamiento médico y la severidad de la enfermedad particular siendo tratada.
En otro aspecto, la invención proporciona un método para tratar un sujeto que tiene o está en riesgo de desarrollar o experimentar una recurrencia de un desorden mediado por la quinasa Aurora. El método comprende la etapa de administrar al sujeto un compuesto o composición farmacéutica de conformidad con la invención. Los compuestos y las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse para lograr un efecto profiláctico o terapéutico benéfico, por ejemplo, en un sujeto con una enfermedad proliferativa, como se describió anteriormente, tal como el cáncer.
Como se usa en este documento, el término "cáncer" se refiere a una enfermedad celular caracterizada por la proliferación celular sin regulación y descontrolada, la diferenciación celular disminuida, la habilidad inapropiada para invadir el tejido circundante y/o la habilidad para establecer el nuevo crecimiento en los sitios ectópicos. El término "cáncer" incluye pero no se limita a tumores sólidos y tumores de origen sanguíneo. El término "cáncer" abarca las enfermedades de la piel, tejidos, órganos, huesos, cartílagos, sangre y vasos sanguíneos. El término "cáncer" además comprende los cánceres primarios y metastáticos.
Los ejemplos no limitantes de los tumores sólidos que pueden tratarse por los métodos de la invención incluyen cáncer pancreático, cáncer de la vejiga, cáncer colorectal, cáncer de mama, incluyendo cáncer de mama metastático, cáncer de próstata, incluyendo cáncer de próstata andrógeno independiente y andrógeno dependiente, cáncer renal, incluyendo por ejemplo, carcinoma celular renal metastático, cáncer hepatocelular, cáncer de pulmón, incluyendo cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), carcinoma bronquioalveolar (BAC) y adenocarcinoma del pulmón; cáncer de ovario, incluyendo por ejemplo cáncer peritoneal primario o epitelial progresivo, cáncer cervical, cáncer gástrico, cáncer de esófago, cáncer de cuello y cabeza, incluyendo, por ejemplo carcinoma de células escamosas de la cabeza y cuello, melanoma, cáncer neuroendocrino, incluyendo tumores neuroendocrinos metastáticos, tumores cerebrales, incluyendo glioma, oligodendroglioma anaplástico, multiforme glioblastoma adulto y astrocitoma anaplástico en adultos; cáncer de huesos y sarcoma de tejido blanco.
En algunas otras modalidades, el cáncer es una malignidad hematológica. Los ejemplos no limitantes de malignidad hematológica incluyen leucemia mieloide aguda (AML), leucemia mielógena crónica (CML), incluyendo CML acelerada y fase de blastos CML (CML-BP); leucemia linfoblástica aguda (ALL); leucemia linfocítica crónica (CLL); enfermedad de Hodgkins (HD); linfoma de no Hodgkins (NHL), incluyendo linfoma folicular y linfoma celular de capa; linfoma de células B; linfoma de células T; mieloma múltiple (MN); macroglobulinemia de Waldenstrom; síndrome mielodisplásicos (MDS), incluyendo anemia refractaria (RA), anemia refractaria con blastos laterales anillados (RARS), (anemia refractaria con blastos en exceso (RAEB) y RAEB en transformación (RAEB-T) y síndromes mieloproliferativos.
En algunas modalidades, el compuesto o composición de la invención se usa para tratar un cáncer en el cual la actividad de una quinasa Aurora se amplifica. En algunas modalidades, el compuesto o composición de la invención se usa para tratar un paciente que tiene o está en riesgo de desarrollar o experimentar una recurrencia en un cáncer seleccionado del grupo que consiste de cáncer colorectal, cáncer de ovario, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer de próstata y cáncer pancreático. En ciertas modalidades, el cáncer se selecciona del grupo que consiste de cáncer de mama, cáncer colorectal y cáncer pancreático.
En algunas modalidades, el inhibidor quinasa Aurora de la invención se administra junto con otro agente terapéutico. El otro agente terapéutico también puede inhibir la quinasa Aurora o puede operar por un mecanismo diferente. En algunas modalidades, el otro agente terapéutico es uno que se administra normalmente al sujeto con la enfermedad o condición siendo tratada. El inhibidor quinasa Aurora de la invención puede administrarse con el otro agente terapéutico en una forma de dosis simple o como una forma de dosis separada. Cuando se administra como una forma de dosis separada, el otro agente terapéutico puede administrarse antes de, al mismo tiempo como, o siguiendo la administración del inhibidor de la quinasa Aurora de la invención.
En algunas modalidades, el inhibidor quinasa Aurora de la invención se administró junto con un agente terapéutico seleccionado del grupo que consiste de agentes citotóxicos, radio terapia, inmunoterapia u otros inhibidores quinasa. Los ejemplos no limitantes de los ejemplos citotóxicos que pueden ser apropiados para usarse en combinación con los inhibidores quinasa Aurora de la invención incluyen: antimetabolitos, incluyendo por ejemplo, capecitibina, gemcitabina, 5-fluorouracilo ó 5-fluorouracilo/leucovorin, fludarabina, mercaptopurina, tioguanina, pentostatin y metotrexato; inhibidores topoisomerasa, incluyendo por ejemplo, etopósido, teniposido, canfotecina, irinotecan, doxorubicina y daunorubicina, alcaloides vinca, incluyendo por ejemplo, vincristina y vinblastina; taxanos incluyendo por ejemplo paclitaxel y docetaxel; agentes de platino, incluyendo por ejemplo, cisplatin, carboplatin y oxaliplatin; antibióticos, incluyendo por ejemplo, actinomicin D, bleomicin, mitomicin C, adriamicin, daunorubicin, idarubicin, doxorubicin y doxorubicin liposomal pegilado; agentes de alquilación tales como melfalan, clorambucil, busulfan, tiotepa, ifosfamida, carmustina, lomustina, semustina, estreptozocina, decarbazina y ciclosfamida, talidomida; inhibidores quinasa de la proteina tirosina, incluyendo por ejemplo, imatinib, mesilato, erlotinib y gefitinib; anticuerpos incluyendo, por ejemplo, trastuzumab, rituximab, cetuximab y bevacizumab; mitoxantrona, dexametasona, prednisona y temozolomida.
EJEMPLOS La presente invención además puede entenderse por referencia a los siguientes ejemplos no limitantes. Los ejemplos de los compuestos de la presente invención y los procedimientos que pueden usarse para preparar e identificar los compuestos útiles de la presente invención se describen posteriormente.
Abreviaciones usadas en los Ejemplos son como siguen: Boc = tert-butoxicarbonilo DCE = 1 ,2-dicloroetano DCM = diclorometano DIEA = diisopropiletilamina DMF = N,N-dimetilformamida EDC = clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetiolaminopropil)-carbodiimida EtOAc = acetato de etilo HBTU = hexafluorofosfato de 0-benzotriazol-1 -il-N,N,N',N'-tetrametilamonio NMP = N-metil pirrolidina THF = tetrahidrofurano Los datos LC-MS se obtuvieron usando la elusión de gradiente en un sistema MUX , corriendo cuatro bombas HPLC Waters 1525, equipadas con un detector UV-Vis multicanal Mux-UV 2488 (registrado en 215 y 254 n ) y un Auto muestreador HTS PAL Leap Technologies usando una columna Waters Xterra MS C18 4.6 x50 mm. Un gradiente de tres minutos se corrió de 25% B (97.5% de acetonitrilo, 2.5% de agua, 0.05% de TFA) y 75% A (97.5% de agua, 2.5% de acetonitrilo, 0.05% de TFA) a 100% B. El sistema tuvo interfases con un espectrómetro de masa Waters Micromass ZQ usando ionización de electro rocío. Todos los datos MS se obtuvieron en el modo positivo a menos que se establezca de otra manera. Los datos 1 H NMR se obtuvieron en un espectrómetro Varían 400 MHz.
Procedimiento General A: Preparación de Isotiocianato Se agregó 1 ,1 '-tiocarbonilimidazola (1.1 mmol) a una solución de amina (1 mmol) en THF/DMF (2 mi, 1 : 1 ) y la mezcla de reacción se agitó a 65-70°C por 1 hora. El producto así formado, se usó para transformación adicional sin aislamiento.
Procedimiento General: Formación de Tiourea y su Conversión a aminobencimidazola A una solución de isotiocianato (1 mmol) en THF/DMF (2 mi, 1 :1 ) a temperatura amiente, una diamina fenileno (1 mmol) se agregó y los contenidos se agitaron a temperatura ambiente por 2 horas. Posteriormente se agregó EDC (1.2 mmol) a la mezcla de reacción y los contenidos se agitaron a 65-70°C por 1 hora. La mezcla de reacción posteriormente se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua helada con hielo (10 mi) y el sólido se colectó mediante filtración. El producto crudo así obtenido se purificó mediante cromatografía de columna de destello usando DCM/metanol como eluente.
Procedimiento General C: Hidrólisis del éster de benzoato Una solución de LiOH (12 mmol) en agua (5 mL) se agregó a una solución de éster (3 mmol) en 1 :1 THF/MeOH (10 mi) y la mezcla resultante se agitó a reflujo por 6 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y los solventes orgánicos se removieron al vacío. El pH de la suspensión resultante se ajustó por la adición por goteo de 10% de HCI acuoso a un pH ~6 y el precipitado así formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío. El ácido carboxílico deseado así obtenido se usó sin purificación adicional.
Procedimiento General D: Formación de amida usando un agente de unión A una solución de ácido carboxílico (1.0 mmol) en DMF seco o NMP (2.5 mi), se agregó HBTU (1.2 mmol) en una porción, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por -30 min. La mezcla de reacción posteriormente se agregó con la amina (1.1 mmol) y DIEA (1.5 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 6-12 horas o a 70-80°C por 1-3 horas. Los contenidos se diluyeron con agua helada (20 mi) y el producto se precipitó. El producto puro se aisló después de la filtración con lavados subsecuentes con agua y acetato de etilo a través de cromatografía de columna de gel de sílice usando DCM/métanol como eluente.
Procedimiento General E: Formación de amida de cloruro ácido Cloruro de oxalilo (10 mmol) se agregó a una suspensión de un ácido carboxílico (2 mmol) en DCM seco (4 ml_) conteniendo DMF seco (10 µ?) y la mezcla se agitó a 50°C por 6-12 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se removió al vacio para producir un cloruro ácido. Se agregó tolueno (5 mi) al cloruro ácido y el solvente se removió a sequedad al vacío. Este proceso se repitió para asegurar la remoción completa del cloruro de oxalilo residual. El cloruro ácido así obtenido se disolvió en DCM seco (2 mi) y se agregó por goteo a una suspensión de amina (2 mmol) en DCM seco (5 mi) conteniendo piridina (0.5 mi) a 0°C. La mezcla se permitió calentar a temperatura ambiente y se agitó por 3-5 horas. Los volátiles orgánicos se removieron al vacío, el precipitado formado se suspendió en agua (20 mi) y se colectó mediante filtración seguido por el lavado de agua (20 mi). La amida así obtenida se usó sin purificación adicional.
Procedimiento General F: Reducción de nitro a amina 10% de Pd/C (0.1 g) se agregó a una solución del compuesto nitro (10 mmol) en THF/MeOH (1 :1 , 50 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de H2 por -12 horas. Los contenidos posteriormente se filtraron a través de una almohadilla de Celita y el sólido se lavó con porciones de metanol. El filtrado y los lavados se combinaron y evaporaron para producir la amina correspondiente, que no se purificó y usó directamente en la siguiente etapa.
Procedimiento General G: Sustitución loso de o-nitrohaloareno con amoniaco A una suspensión de un o-nitroaloreno (10 mmol) en metanol (40 mL) se agregó NH4OH acuosa concentrado (10 mi). La mezcla se calentó a 50-60°C por 4 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el precipitado formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua (50 mi) y se secó bajo vapor para producir la correspondiente o-nitroanilina, que se usó para transformación adicional sin purificación adicional.
Procedimiento General H: Sustitución loso de p-nitrohaloareno con aminas Una mezcla de un p-nitrohaloareno (5 mmol) y una amina (en exceso) se calentó como limpio o en dioxano a 90°C por 1-3 horas. Los volátiles se removieron al vacío y el residuo resultante se suspendió en agua helada (50 mi) con agitación. El precipitado resultante se colecto mediante filtración, se lavó con agua y se secó bajo vacío para proporcionar el producto deseado, que se uso para la transformación adicional sin purificación adicional.
Ejemplo 1 Síntesis de benzotiazol-6-ilamida del ácido 2-(lsoquinolin-3-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico 3-lsotiocianatoisoquinolina se preparó de 3-aminoisoquinolina (5 mmol) como se describe en el procedimiento general A.
El isotiocianato anterior se reaccionó con 3,4-diaminobenzoato (5 mmol) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener éster metílico del ácido 2-(lsoquinolin-3-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. El éster se hidrolizó para producir el ácido carboxílico correspondiente empleando el procedimiento general C.
La benzotiazol-6-ilamina (0.25 mmol) se acopló con el ácido carboxílico anteriormente mencionado usando HBTU empleando el procedimiento general D para proporcionar benzotiazol-6-ilamida del ácido 2-(lsoquinolin-3-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 437 (M+H)*.
Empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 , los siguientes compuestos, mostrados en la Tabla 1 , se sintetizaron.
Tabla 2 Ejemplo 25 Síntesis de (1 H-im¡dazol-6-il)-amida del ácido 2-(1 -lsopropil-1 H-imidazol-2-ilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico El ácido 4-Amino-3-nitrobenzoico (27 mmol) se acopló con 6-aminoindazola (30 mmol) usando HBTU (30 mmol) en DMF seco como el solvente empleando el procedimiento general D para producir 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-3-nitrobenzamida que se usó para la transformación adicional sin purificación adicional.
La nitroanilina anterior se redujo a 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida bajo atmósfera de nitrógeno como se describió en el procedimiento general F.
Se agregó 2-Bromopropano (7 mmol) y K2C03 (13 mmol) a una solución de 2-nitroimidazola (4 mmol) en DMF (10 mi). La mezcla se agitó a 60°C por 4 horas. Los contenidos se enfriaron a temperatura ambiente y se agregó agua (20 mi) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron y el solvente se removió al vacío para producir 1 -isopropil-2-nitro-1 H-imidazola. El producto se usó para la transformación adicional sin purificación adicional.
La nitroimidazola anterior se redujo a 1 -isopropil-2-amino-1 H-imidazola bajo atmósfera de hidrógeno como se describió en el procedimiento general F. La aminoimidazola (2 mmol) se convirtió en 1 -isopropil-2-isotiocianato-1 H-imidazola siguiendo el procedimiento general A.
El isotiocianato (1 mmol) anterior se reacciono con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (1 mmol) seguido por la ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener ácido 2-(1 -lsopropil-1 H-imidazol-2-ilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico (1 H-indazol-6-il)-amida. MS: m/z 401 (M+H)\ Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 25, la 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida se utilizó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 3.
Tabla 3 Ejemplo 4/8 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-6-(4-metilpiperazin-1 -il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico Con agitación rápida, se agregó ácido 2-cloro-4-fluorobenzoico (10 mmol) en porciones en un matraz que contiene ácido sulfúrico concentrado (5 mi). La mezcla de reacción posteriormente se enfrió a 0°C y se agregó por goteo ácido cítrico 70% (12 mmol). Después de que se completo la adición, la mezcla de reacción se permitió calentar a temperatura ambiente y se agitó por 1 -2 horas. La mezcla de reacción se vertió en 50 g de hielo y el sólido se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó. El producto ácido 2-cloro-4-flúor-nitrobenzoico se usó para transformación adicional sin purificación adicional.
El ácido 2-cloro-4-flúor 5-nitrobenzoico (5 mmol) obtenido como anterior, se convirtió al cloruro ácido correspondiente, que se reaccionó con 6-aminoindazola (5 mmol) siguiendo el procedimiento general E. El producto 2-cloro-4-flúor-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida así obtenida como un sólido naranja claro se usó para transformación adicional sin purificación adicional. MS: m/z 335 (M+H)+.
El tratamiento de 2-cloro-4-flúor-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (4 mmol), obtenido como anterior con hidróxido de amonio (4 mi) como se describe en el procedimiento general G proporciona 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo. MS: m/z 332 (M+H)+.
La 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzam¡da limpia (3 mmol) obtenida como anteriormente se calentó con N-metil piperazina (5 mi) siguiendo el procedimiento general H para producir 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzamida. El producto se redujo a 4,5-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)benzamida bajo condiciones de hidrogenación como se describió en el procedimiento general F.
La diamina (1 mmol) obtenida del anterior se reaccionó con 1-isopropil-2-isotiocianatobenceno (1 mmol) seguido por ciclización usando EDC como se describió en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-6-il) amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 509 (M+H)+.
Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 48, la 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida se usó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 4.
Tabla 4 Ejemplo 66 Síntesis de [3-(2-morfolin-4-il-etilamino)-1 H-indazol-6-il]-amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 2,6-dinitro-2H-indazola (1 mmol) (preparada por nitración de 6-nitroindazola; Wrzeciono et al., E. Pharmazie 1980, 35, 593-596) en THF seco (4 mi) a 0°C, se agregó por goteo 2-morfolin-4-il-etilamino (2 mmol). La mezcla de reacción se permitió calentar a temperatura ambiente y se agitó por 12 horas. Los contenidos se diluyeron con acetato de etilo (20 mi), se lavaron con agua (2x10 mi) y salmuera (10 mi) y se secó sobre sulfato de sodio anhídrido. El solvente se removió al vacío para producir 3-(2-morfolin-4-il-etilámino)-6-nitro-1 H-indazola como un sólido café que se redujo a 3-(2-morfolin-4-il-etilamino)-1 H-indazol-6-ilamina mediante hidrogenación siguiendo el procedimiento general F. 1-lsopropil-2-isotiocianatobenceno (5 mmol) y metil 3,4-diaminobenzoato (5 mmol) se reaccionó siguiendo el procedimiento general B para producir éster metílico del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico que se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/acetato de etilo como eluente.
El éster obtenido como anterior se hidrolizó usando el procedimiento general C para producir ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-1 H-bencimidazol-5-carboxílico. El ácido carboxílico (0.25 mmol) se acopló 3-(2-morfolin-4-il-etilamino)-1 H-indazol-6-ilamina (0.25 mmol) usando HBTU empleando el procedimiento general D. El producto [3-(2-morfolin-4-il-etilamino)-1 H-indazol-6-il]-amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico se obtuvo después de la purificación mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/metanol como eluente. MS: m/z 539 (M+Hf .
Empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 66, los siguientes compuestos, mostrados en la Tabla Tabla 5 Ejemplo 69 Síntesis de (3-amino-H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 2-fluoro-4-nitrobenzonitrilo (10 mmol) en isopropanol (30 mi) se agregó hidracina acuosa (4 mi). La solución resultante se calentó a 80°C por 12 horas. La mezcla de reacción posteriormente se concentró, se agregó agua (30 mi) y la solución se extrajo con acetato de etilo (2x25 mi). Los orgánicos combinados se lavaron con agua (30 mi) y salmuera (30 mi) y se secó sobre sulfato de sodio anhídrido. Los volátiles se removieron al vacío produciendo 3-amino-6-nitroindazola como un sólido naranja, que se usó para la transformación adicional sin purificación adicional.
El compuesto nito anterior se hidrogeno, siguiendo el procedimiento general F para producir 3,6-diaminoindazola. 2-lsotiocianatopiridina (4 mmol) preparado de 2-aminopiridina empleando el procedimiento general A, se reaccionó con metil 3,4-diaminobenzoato como se describe en el procedimiento general B para producir éster metílico del ácido 2-(piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. Este éster se hidrolizó siguiendo el procedimiento general C, para obtener ácido 2-(piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico.
El ácido carboxílico (0.5 mmol) anterior se acopló con la 3,6-diaminoindazola anteriormente mencionada (0.5 mmol) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para producir (3-amino-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 3/85 (M+H)+.
Ejemplo 70 Síntesis de {3-[(1 -metilpiridina-4-carbonil)-amino]-1 H-indazol-6-il}-amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico Cloruro de 1 -Metilpiperidina-4-carbonil (1 mmol), preparado de su ácido carboxílico correspondiente usando el procedimiento general E, se reaccionó con 3,6-diaminoindazola (1 mmol) (ver el Ejemplo 69) empleando el procedimiento general E para producir (6-amino-1 H-indazol-3-il)-amida del ácido 1-metilpiperidina-4-carboxílico.
El ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 66) se acopló con el (6-amino-1 H-indazol-3-il)-amida del ácido 1 -metilpiperidina-4-carboxílico anteriormente mencionado (0.3 mmol) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para producir el producto deseado, {3-[(1-met¡lp¡peridina-4-carbonil)-amino]-1 H-indazol-6-il}-amida del ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxNico. MS: m/z 551 (M+H)+.
Empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 70, los siguientes compuestos, mostrados en la Tabla 6, se sintetizaron.
Tabla 6 Ejemplo 74 Síntesis de (3-metoxi-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 2,6-dinitro-2 - -indazola(l mmol) (preparado mediante nitración de 6-nitroindazola; Wrzeciono, et al., E. Pharmazie, 1980, 35, 593-596) en THF seco (4 mL) a 0o C, se agregó metóxido de sodio (4 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se permitió calentar a temperatura ambiente y se agitó por 12h. Los contenidos se diluyeron con acetato de etilo (20 mL), se lavaron con agua (2x10 mL) y salmuera (10 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhídrido. El solvente se removido al vacío para producir 3-metoxi-6-nitro-IH-indazola como un sólido café, que se redujo a 3-metoxt-1 H-indazol-6-ilamina mediante hidrogenación siguiendo el procedimiento general F.
El ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 66) se acopló con la 3-metoxi-1 H-indazol-6-ilamina anteriormente mencionada (0.3 mmol) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para producir el producto deseado, (3-metoxi-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 441 (M+H)\ Ejemplo 75 Síntesis de [3-(2-morfolin-4-iletoxi)-1 H-indazol-6-il]-amida del ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 2-morfolin-4-il-etanol (3 mmol) en THF seco (6 mL) se agregó hidruro de sodio (4 mmol; 60% de dispersión en aceite) a 0°C en porciones. El alcóxido así formado se reaccionó con 2,6-dinitro-2H-indazola(1 mmol) como se describe in Ejemplo 74 para producir 3-(2-mofolin-4-iletoxi)-6-nitro-1 H-indazola como un sólido café que se redujo a 3-(2-morfolin-4-iletoxi)-1 H-indazol-6-ilamina mediante hidrogenación siguiendo el procedimiento general F.
El ácido 2-(2-lsopropilfen¡lamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 66) se acopló con la 3-(2-morfolin-4-iletoxi)-1 H-indazol-6-ilamina anteriormente mencionada (0.3 mmol) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para producir el producto deseado, [3-(2-morfolin-4-iletoxi)-1 H-indazol-6-il]-amida del ácido 2-(2isopropilfen¡larnino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 540 (M+H)+.
Ejemplo 76 Síntesis de (3-morfolin-4-ilmetil-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 6-nitro-1 /-/-indazola-3-carbaldehído (0.5 mmol; preparado de 6-nitroindol; Zhang et al., J. Med. Chem. 2001 , 44, 1021 - 1024) en THF seco (1 mL),se agregaron morfolina (1 mmol) y ácido acético (2 gotas) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó por 1 h. La mezcla de reacción se trató con NaCNBH3 sólido (2 mmol) con agitación continua por 4h adicionales. Los contenidos se vertieron en agua y se extrajeron con acetato de etilo (2x10 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (10 mL) y salmuera (10 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhídrido. La remoción del solvente al vacío produjo el producto deseado 3-(morfolin-4-il)metil-6-nitro-1 H-indazola.
La hidrogenación del compuesto nitro anteriormente mencionado, siguiendo el procedimiento general F proporcionó 3-(morfolin-4-il)metil-1 H-indazol-6-ilamina. 2,4-Dicloro-1-isotiocianatobenceno (5 mmol) y metil 3,4-diaminobenzoato (5mmol) se reaccionaron siguiendo el procedimiento general B, para producir éster metílico del ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico, que se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/acetato de etilo como eluente.
El éster anteriormente obtenido se hidrolizó usando el procedimiento general C para producir ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. El ácido carboxílico (0.25 mmol) se acopló con 3-(morfolin-4-il)met¡l-1 H-¡ndazol-6-ilamina (0.25 mmol) usando HBTU empleando el procedimiento general D. El producto, (3-morfolin-4-ilmetil-1 H-indazol-6-il)-am¡da del ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico, se obtuvo como un sólido café claro después de la purificación mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/metanol como eluente. MS: m/z 536 (M+H)+.
Ejemplo 77 Síntesis de (3-metil-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 6-nitro-1 H-indazola-3-carbaldehído (0.5 mmol; preparado de 6-nitroindol; Zhang et al., J. Med. Chem. 2001 , 44, 1021 - 1024) en etanol (2 mL), KOH sólido (5 mmol) e hidracina acuosa (0.5 mL) se agregaron y los contenidos se irradiaron bajo condiciones de microondas a 80°C por 10 min. La mezcla de reacción se neutralizó con ácido acético a un pH ~7, se concentró al vacío, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3x8 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (10 mL) y salmuera (10 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhídrido. La remoción del solvente al vacio produjo el producto deseado, 3-metil-1 H-indazol-6-ilamina.
La amina (0.25 mmol), obtenida como anteriormente, se acopló con el ácido 2-(2,4-dicloro-fenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico (0.25 mmol; ver el Ejemplo 76) usando HBTU empleando el procedimiento general D. El producto, (3-metil-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2,4-diclorofenilamino)-3H-benc¡midazola-5-carboxíllco, se obtuvo como un sólido café claro después de la purificación mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/metanol como eluente. MS: m/z 452 (M+H)+.
Ejemplo 78 Síntesis de (3-cloro-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-etilfenilamino)-3H-benc¡midazola-5-carboxílico A una solución de 6-nitroindazola (2 mmol) en DCE (5 mL), se agregó cloruro de sulfurilo (10 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80° C por 3-5 h. La mezcla de reacción se concentró, se agregó con 5% de solución de Na2C03 acuosa (20 mL) y se extrajo con EtOAc (2x15 mL). Los orgánicos combinados posteriormente se lavaron con agua (20 mL) y salmuera (20 mL) y se secaron sobre Na2S04 anhídrido. La remoción de los volátiles produjo 3-cloro-6-nitro-1 H-indazola como un sólido amarillo.
A una solución de compuesto nitro (0.5 mmol) de lo anterior en metanol (2 mL), se agregó hidrosulfuro de sodio sólido (3 mmol) e hidróxido de amonio concentrado (0.25 mL). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 12h. Los contenidos se filtraron a través de Celita y el solvente se removió al vacío. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando acetato de etílo/hexano como eluente para producir 3-cloro-1 H-indazol- 6-ilamina como un sólido café claro. 2-Etil-l-isotiocianatobenceno (3 mmol) y metil 3,4-diaminobenzoato (3mmol) se reaccionaron, siguiendo el procedimiento general B, para producir éster metílico del ácido 2-(2-etilfenilamino)-3H- bencimídazola-5-carboxílico, que se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/acetato de etilo como eluente.
El éster obtenido como anterior se hidrolizó usando el procedimiento general C para producir ácido 2-(2-etilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. El ácido carboxílico (0.25 mmol) se acopló con 3-(morfolin-4-i)lmetil-1 H-indazol-6-ilamina (0.25 mmol) usando HBTU empleando el procedimiento general D. El producto, (3-cloro-1 H-indazol-6-il)-amida del ácido del 2-(2-etilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico, se obtuvo como un sólido café claro después de la purificación mediante cromatografía de gel de sílice usando DC /metanol como eluente. MS: m/z 431 (M+H)+.
Ejemplo 79 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 2-f6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-1 H-bencimidazol-2-ilamino]-6,7-dihidro-4H- tiazolo[5,4-c]piridina-5-carboxílico A una solución de 1-Boc-4-piperidona (5 mmol) en THF seco (20 mL) se agregó Ba2C03 sólido (10 mmol). La mezcla resultante se agitó vigorosamente. La mezcla de reacción se trató con hidrotribromuro de pirrolidona (5.5 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de 3h, los contenidos se filtraron y el solvente se removió. La mezcla de reacción cruda conteniendo el producto, éster tert-butílico del ácido 3-bromo-4-oxo-piperidina-1-carboxílico, se usó para transformación adicional sin purificación adicional.
A una solución del compuesto bromo (5 mmol), obtenido como anteriormente, en acetona (20 mL) se agregó tiourea sólida (6 mmol) y K2C03 sólido (10 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 12h. A la mezcla de reacción se agregó anhídrido BOC (5 mmol), y la reacción se agitó por 4h. Los contenidos posteriormente se filtraron y el solvente se removió. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/metanol como eluente. El producto, éster tert-butílico del ácido 2-amino-6,7-dihidro-4H-tiazolo[5,4-c]piridina-5-carboxílico se obtuvo como un sólido amarillo claro.
La amina (0.5 mmol) anterior se convirtió al isotiocianato correspondiente usando el procedimiento general A, que posteriormente se reaccionó con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 25) de conformidad con el procedimiento general B para producir éster tert-butílico del ácido 2-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-1 H-bencimidazol-2-ilamino]-6,7- dihidro-4H-tiazolo[5,4-c]piridina-5-carboxílico. MS: m/z 531 (M+H)+.
Ejemplo 80 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(4,5,6,7-tetrahidrotiazolo[5,4-c]piridin ilamino)-3H-bencimidazola-5- carboxílico Se agregó a una solución del éster tert-butílico del ácido 2-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)- 1 H-bencimidazol-2-ilamino]-6,7-dihidro-4H-tiazolo[5,4-c]pindina-5-carboxílico (0.25 mmol; ver el Ejemplo 79) en metanol (1 mL), 4M HCI en dioxano (0.5 mL). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 5-6 h. Los volátiles se removieron al vacío, el residuo obtenido se suspendió en éter. El sólido obtenido se colectó mediante filtración, se lavó con éter y se secó al vacío para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(4,5,6,7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]piridin-2- ilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro MS: m/z 431 (M+H)+.
Ejemplo 81 Síntesis de [1 -(2-hidroxi-etil)-1 H-indazol-5-il]-amida ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-3H- bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 2-cloro-5-nitrobenzaldeído (4 mmol) en etanol (10 mL) se agregó hidracina acuosa (5 mmol), y la solución resultante se reflujó por 2h para completar la formación hidrazona. DIEA (10 mmol) se agregó a la mezcla de reacción y la reacción se sometió a irradiación de microondas a 150° C por 8-10 h. Después de la remoción de los volátiles al vacío, el residuo obtenido se disolvió en EtOAc (30 mL), se lavó con agua (20 mL) y salmuera (20 mL) y se secó sobre sulfato de sodio anhídrido. El solvente se removió al vacío para producir el producto, 2-(5-nitroindazol-1 -il)-etanol.
El compuesto nitro anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 2-(5-amino¡ndazol-1 -il)-etanol. La aminoindazola (0.3 mmol) se acopló con ácido 2-(2-lsopropilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 66) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para proporcionar [1 -(2-hidroxi-etil)-1 H-indazol-5-il]-amida del ácido 2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 455 (M+H)+.
Ejemplo 82 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-ciclohexilfenilamino)-3H-benc¡midazola-5-carboxílico A una solución de 1 -bromo-2-ciclohexil-benceno (5 mmol) en dioxano (20 mL) se agregó Pd(OAc)2 sólido(0.1 g) y CsC03 sólido (10 mmol). Se agregó tert-Butil carbamato (7 mmol) a la mezcla de reacción, y los contenidos se calentaron a 80° C por 2h. La mezclad de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de Celita. El solvente se removió al vacío y el residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de columna usando DCM como eluente para producir el éster tert-butílico del ácido (2-ciclohexilfenil)-carbámico.
El carbamato obtenido como anteriormente se trató con 4 M HCI en dioxano siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 80 para producir 2-ciclohexilfenilamina como una sal de hidrocloruro.
A una solución de la amina de hidrocloruro anteriormente mencionada (1 mmol) en D F seco (2 mL) se agregó DIEA (1.5 mmol) y 1 ,1 '-tiocarbonilimidazola (1 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70° C por 1 h para proporcionar 1-ciclohexil-2-isotioc¡anatobenceno como se describe en el procedimiento general A.
El isotiocianato (0.5 mmol) se reaccionó con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 25) de conformidad con el procedimiento general B para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-ciclohexilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS:. m/z 451 (M+H)\ Ejemplo 83 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-metiltiofen-2-ilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxtlico A una solución del ácido 3-metiltiofeno-2-carboxílico (7 mmol) en dioxano anhídrido (20 mL) se agregó azido fosforil difenilo (7 mmol), ferí-butanol (6 mL) y TEA (1 mL). La mezcla resultante se agitó a reflujo por 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con H20 (40 mL), y se extrajo con EtOAc (3x20 mL). Los extractos combinados se secaron (MgS04) y el solvente se removió al vacío. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de columna de destello usando hexanos/EtOAc (7:3) como eluente para producir éster tert-butílico del ácido (3-metiltiofen-2-il)-carbámico.
A una solución de carbamato (3 mmol), obtenida como anteriormente, en DCM seco (10 mL) se agregó con 4M HCI en dioxano (8 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. El solvente se removió al vació. El sólido obtenido se lavó con Et20 anhídrido (3x10 mL) y se secó bajo presión reducida para producir 3-metiltiofen-2-ilamina como sal de hidrocloruro.
A una solución de la amina hidrocloruro anteriormente mencionada (1 mmol) en DMF seco (2 mL) se agregó DIEA (1 .5 mmol) y 1 ,1'-tiocarbonilimidazola (1 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70° C por 1 h para proporcionar 1 -ciclohexil-2-isotiocianatobenceno como se describe en el procedimiento general A.
El isotiocianato (0.5 mmol) se reaccionó con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 25) de conformidad con el procedimiento general B para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-ciclohexilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 389 (M+Hf.
Ejemplo 84 Síntesis de [2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazol- 5-il]-amida del ácido 1 H-indazola-6-carboxílico A una solución de 2-cloro-5-nitro-1 H-bencimidazola (1 .5 mmol; preparado de nitración de 2-cloro-1 H-bencimidazola; Gali et al, J. Heterocicl. Chem. 1997, 34, 6, 1781- 1788) en NMP seco (3 mL) se agregó 2-isopropilanilina (4 mmol). La solución resultante se sometió a irradiación de microondas a 150° C por 1 h. Los contenidos se enfriaron a temperatura ambiente, se diluyeron con agua (20 mL) y se extrajeron con EtOAc (2x15 mL). Los extractos combinados se lavaron con agua (20 mL) y salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhídrido. El solvente se removió al vacío y el residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de gel de sílice usando EtOAc/hexano como eluente para obtener (2-isopropilfenil)-(5-nitro-1 H-bencimidazol-2-il)-amina como sólido amarillo claro.
El compuesto nitro (1 mmol) como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir /V2-(2-isopropilfenil)-1 H-bencimidazola-2,5-diamina.
El Metil lndazola-6-carboxilato (4 mmol; Batt el al, J. Med. Chem. 2000, 43, 41 -58) se hidrolizó como en el procedimiento general C para obtener el ácido H-lndazola-6-carboxílico. El ácido carboxílico (0.5 nmol) se acopló con /V2-(2-isopropilfenil)-1 H-bencimidazola-2,5-diamina anteriormente mencionada (0.5 mmol) usando HBTU como se describe en el procedimiento general D para producir [2-(2-isopropilfenilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-amida del ácido 1 H-indazola-6-carboxílico como un sólido grisáceo. MS: m/z 41 1 (M+H)+.
Ejemplo 85 Síntesis de (1 H-indazol-5-il)-amida del ácido 6-(4-metilpiperazin-l-il)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico 2-Cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida se obtuvo de ácido 2-cloro-4-fluoro-5-nitrobenzoico (5 mmol) y 5-aminoindazola (5 mmol) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 48. El producto, obtenido como un sólido amarillo, se usó para la transformación adicional sin purificación adicional. MS: m/z 335 (M+H)+.
El tratamiento de 2-Cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-5 -il)-5-nitrobenzamida (4 mmol), obtenida como anteriormente, con hidróxido de amonio (4 mL) como se describe en el procedimiento general G proporcionó 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo. MS: m/z 332 ( +H)\ 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida (3 mmol) anterior se reaccionó con N-metilpiperazina (5 mL), siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 48. El producto formado se redujo a 4,5-diamino-N-(1 H-indazol-5-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)benzamida bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F.
La diamina (1 mmol) obtenida del anterior se reaccionó con 1-trifluorometil-2-isotiocianatobenceno (1 mmol) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-5-il) amida del ácido 2-(2-trifluorometilfenilamino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 535 (M+H)+.
Ejemplo 86 Síntesis de (1 H-indazol-5 -il)-amida del ácido 6-morfolin-4-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico 4-Amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida (3 mmol; ver el Ejemplo 85) se reaccionó con morfolina (5 mL), siguiendo el procedimiento G. El producto formado se redujo a 4,5-diamino-N-(1 H-indazol-5-il)-2-morfolin-4-¡l-benzamida bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F.
La diamina (1 mmol) obtenida del anterior se reaccionó con 1-trifluorometil-2-isotiocianatobenceno (1 mmol) seguido por la ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-5-il)-amida del ácido 6-morfolin-4-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H- bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 522 (M+H)+.
Ejemplo 87 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (3 mmol; ver el Ejemplo 48) en dioxano (5 mL) se reaccionó con piperazina (9 mmol) siguiendo el procedimiento general H para producir 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitro-2-piperazin-1-il-benzamida. El producto se disolvió en THF seco (6 mL) y se trató con anhídrido BOC (3.6 mmol) y se agitó por 4-6 h. El solvente se removió a sequedad y el residuo obtenido se suspendió en éter (50 mL) con agitación. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con éter y se secó al vacio para producir éster tert-butílico del ácido 4-[5-amino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-4-nitro-fenil]-piperazina-1-carboxílico.
A una solución del compuesto nitro (1 mmol) anterior en metanol (4 mL) se agregó hidrosulfuro de sodio sólido (4 mmol) e hidróxido de amonio concentrado (0.5 mL). La mezcla resultante se calentó a reflujo por 5-8 h. La reacción se concentró y el residuo se tomó en THF (20 mL) con agitación vigorosa. Los contenidos posteriormente se filtraron a través de Celita y el solvente se removió al vacío para proporcionar éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-fenil]piperazina-1-carboxílico que se usó para la transformación adicional sin purificación adicional.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-trifluorometil-2- isotiocianatobenceno (0.3 mmol) seguido por la ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener el éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometilfeni lamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 621 (M+H)+.
Ejemplo 88 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-piperazin-1-il-2-(2-trifluorometilfen¡lamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico El producto del Ejemplo 87 se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 80 para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-piperazin-1 -il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 521 (M+H)+.
Ejemplo 89 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico Éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-Diamino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-fenil]piperazina-1-carboxílico (ver el ejemplo 87) se reaccionó con 2-isotiocianato-3-metilpiridina (0.3 mmol; preparado de 3-metilpiridin-2-ilamina siguiendo el procedimiento general A) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 568 (M+H)+.
Ejemplo 90 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-6-piperazin-1-il-1 H-bencimidazola-5-carboxílico El producto del Ejemplo 89 se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito por el Ejemplo 80 para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-6-piperazin-1-il-1 H-bencimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 468 (M+H)+.
Ejemplo 91 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2,6-dietilfenilamino)-3H-benc¡midazola-5-carboxílico Una solución de 1 ,3-dietil-2-isotiocianatobenceno (0.5 mmol) en 1 :1 DMF/THF (2 ml_) se reaccionó con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 25) de conformidad con el procedimiento general B para producir (1H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2,6-dietilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 425 (M+H)+.
Ejemplo 92 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-diisobutilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico Una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 48) en NMP (2 mL) se agregó con diisobutilamina (0.5 mL), y la mezcla resultante se sometió a irradiación de microondas a 140° C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (20 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó y se secó al vacío para proporcionar 4-amino-2-diisobutilamino-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida.
El compuesto nitro (0.5 mmol) como el anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-diisobutilamino-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1 -trifluoromet¡l-2- isotiocianatobenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-diisobutilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: miz 564 (M+H)+.
Ejemplo 93 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-dietilamino-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-1 H- Una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 48) en NMP (2 mL) se agregó con dietilamina (1.0 mL), y la mezcla resultante se sometió a irradiación por microondas a 70° C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (20 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 4-amino-2-dietilamino-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida.
El compuesto nitro (0.5 mmol) como anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-dietilamino-N-( H-indazol-6-il)benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 2-isotiocianato-3-metilpiridina (0.3 mmol; preparado de 3-metilpiridin-2-ilamina siguiendo el procedimiento general A) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-dietilamino-2-(3-metil-piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: miz 455 (M+H)\ Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 93, la 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida se usó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 7.
Tabla 7 Ejemplo 1 15 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-Cloropirid¡n-2-ilamino)-6-dietilamino-1 H- benzoimidazola-5- carboxílico A una suspensión de ácido 2-cloro-4-fluoro-5-nitrobenzoico (5 mmol), cloruro de oxalilo (15 mmol) se agregó en DCM seco (5 mL) conteniendo DMF seco (0.2 mL), y la mezcla se agitó a 50° C. Después de que la reacción se completó (-60 min), el solvente se removió al vacío para producir cloruro ácido. Se agregó tolueno (-1 mL) al cloruro ácido y el solvente se removió a sequedad al vacio para asegurar la remoción completa del cloruro de oxalilo. El producto cloruro 4- cloro-2-fluoro-5-nitrobenzoil, se obtuvo como un sólido amarillo claro. El cloruro ácido (-5 mmol) obtenido como anteriormente se disolvió en EtOAc (5 mL) y se agregó por goteo a una suspensión de 6-aminoindazol (4.5 mmol) en EtOAc (15 mL) conteniendo trietilamina (1 mL) a 0-5 0 C. La mezcla posteriormente se permitió calentarse a temperatura ambiente y se agitó por 2-3 h. La mayoría del solvente se removió al vacío y el residuo se agregó con hexano. Los sólidos se colectaron en un filtro, se lavaron dos veces con hexano/ EtOAc (5:1 ) y tres veces con agua. El residuo se secó al vacío para producir el producto 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, como un sólido amarillo que se usó para la transformación adicional sin la purificación adicional. MS: m/z 335 (M+H)+.
A una solución de 2-cloro-4-fluoro-N-( H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (3 mmol) en dioxano (6 mL) se agregó NH OH acuoso concentrado (3 mL). La mezcla de reacción se calentó a 60° C por 2-3 h. La reacción completa produjo el producto, 2-amino-4-fiuoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida. A la mezcla de reacción se agregó dietilamina (45 mmol). La mezcla posteriormente se calentó a 60° C por 6h. Después que la reacción se completó, los volátiles se removieron al vacío y el residuo se suspendió en agua helada. El sólido se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 4-amino-2-dietilamino-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida.
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-dietilamino-N-(1 H- indazol-6-il)benzamida.
A una solución agitada de 2-amino-3-cloropiridina (2 mmol) en CHCI3 (5 mL) se agregó 0.7 M de solución de bicarbonato de sodio acuoso a 0o C. Se agregó tiofosgeno (2.2 mmol) por goteo a 0o C, y los contenidos se permitieron calentar a TA gradualmente en un periodo de 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 mL), y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (2 x 10 mL), seguido de salmuera (10 mL) y se secó sobre Na2S04 anhídrido. Los volátiles se removieron al vacío y el producto 3-cloro-2- isotiocianatopiridina, se usó sin ninguna purificación.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 3-cloro-2- isotiocianatopiridina (0.3 mmol) seguido mediante ciclización en sitio usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-cloropiridin-2-ilamino)-6-dietilamino-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 475 (M+H)*.
Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 1 15, 4,5-diamino-2-dietilamino-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida se utilizó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 8.
Tabla 8 Ejemplo 133 Síntesis de benzotiazol-6-ilamida del ácido 6-dietilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5- carboxílico 6-aminobenzotioazola (4.5 mmol) se reaccionó con cloruro de 4-cloro-2-fluoro-5-nitrobenzoil (5 mmol) empleando las condiciones descritas en el Ejemplo 1 15. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (40 mL) y se lavó con agua (2x40 mL) y salmuera (40 mL) y se seco sobre Na2S0 anhídrido. La remoción produjo el producto, N-benzotiazol-6-il-2-cloro-4-fluoro-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo. MS: m/z 352 (M+H)+.
Una solución de la amida anteriormente mencionada (3 mmol) en dioxano se reaccionó con NH OH acuoso y subsecuentemente con dietilamina usando el procedimiento de una olla descrito para el Ejemplo 1 15 para producir 4-amino-N-benzotiazol-6-il-2-dietilamino-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-N-benzotiazol-6-il-2- dietilaminobenzamida.
La diamina (0.3 mmol) de lo anterior se reaccionó con 1 -isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener benzotiazol-6-ilamida del ácido 6-dietilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 525 (M+H)+.
Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 133, 4,5-diamino-N-benzotiazol-6-il-2-dietilaminobenzamida se utilizó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 9.
Tabla 9 Ejemplo 141 Síntesis de benzotiazol-6-ilamida del ácido 6-(4-metil-piperazin-l-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)- 1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Una solución de N-benzotiazol-6-il-2-cloro-4-fluoro-5-nitrobenzamida (2 mmol) en dioxano (4 mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 1 15. Después de que se completó la formación de 4-amino-N-benzotiazol-6-il-2-cloro-5-nitrobenzamida, la mezcla de reacción se cargó con N-metilpiperazina (12 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielos con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-benzotiazol-6-il-2-(4-metil-piperazin-l-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-Diamino-N-benzotiazol-6-il-2-(4-metil-piperazin-1-il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1 -isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener benzotiazol-6-ilamida 6-(4-metil-piperazin-l-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 552 (M-HH)\ Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 141 , 4-amino-N-benzotiazol-6-il-2-cloro-5-nitrobenzamida se utilizó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 10.
Tabla 10 Ejemplo 145 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(3,5-dimetilpiperazin-l-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Una solución de 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol) en dioxano (2 mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 1 15. Después de que se completó la formación de 2-amino-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, la mezcla de reacción se cargó con 2,6-dimetilpiperazina (6 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4- amino-2-(3,4-dimetil-piperazin-1 -il)-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (0.6 mmol) obtenido como anteriormente, ser redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-Diamino-2-(3,5-dimetilpiperazin-1 -il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1 -isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener (1 H-indazol-6-¡l)-am¡da del ácido 6-(3,5-dimetilpiperazin-l-il)-2-(2-rrifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: miz 549 (M+H)+.
Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 145, 2-amino-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida se utilizó para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 11.
Tabla 11 Ejemplo 154 Síntesis de (1 H-indazol-6-il-amida) del ácido 6-propilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Una solución de 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (2mmol) en dioxano (4mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. Después que se completo la formación de 2-amino-4-fiuoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, los volátiles se removieron al vacío. El residuo obtenido se suspendió en agua helada con agitación. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
Un producto de la solución obtenido como anteriormente (0.5 mmol) en NMP (1 mL) se cargó con propilamina (0.5 mL). Los contenidos se sometieron a irradiación por microondas a 80° C por 60 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (10 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitro-2-propilaminobenzamida.
El compuesto nitro (0.4 mmol) obtenido como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-propilamino-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-propilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 494 (M+H)+.
Ejemplo 155 Síntesis de éster tert-butílico del ácido {1-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenil amino)-3H- benzoimidazol-5-il]-piperidin-4-il}-carbámico A una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 154) en NMP (2 mL) se agregó éster tert-butílico del ácido piperidin-4-il-carbámico (4 mmol). La mezcla resultante se calentó a 100 0 C por 10 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se diluyó con agua (20 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío. El producto crudo se purificó en una cromatografía de columna de gel de sílice usando EtOAc/hexano como eluente para proporcionar éster tert-butílico del ácido {1 -[5-Amino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-4-nitro-fenil]-piperidin-4-il}-carbámico como un sólido amarillos claro.
El compuesto nitro (0.5 mmol) como anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir éster tert-butílico del ácido {1 -[4,5-diamino-2-(1 H-indazol-6- ilcarbamoil)-fenil]-piperidin-4-il}-carbámico La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1 -isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster tert-butílico del ácido {1 -[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperidin-4-il}-carbámico. MS: rrt/z 635 (M+H)\ Ejemplo 156 Síntesis de trihidrocloruro (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(4-Aminopiperidin-1 -il)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-! H- benzoimidazola-5-carboxílico A una solución de éster tert-butílico del ácido {1-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperidin-4-il}-carbámico (0.25 mmol; ver el Ejemplo 155) en metanol (1 ml_) se agregó 4M HCI en dioxano (0.5 ml_). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 5-6 h. Los volátiles se removieron al vacío y el residuo obtenido se suspendió en éter. El sólido obtenido se colectó mediante filtración, se lavó con éter y se secó al vacío para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(4-Amino-piperidin-1-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 535 (M+H)+.
Ejemplo 157 Síntesis de éster tert-butílico del ácido {1-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperidin-4-il}-carbámico Una solución de éster tert-butílico del ácido {1-[4,5-diamino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-fenil]-piperidin-4-il}-carbámico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 155) en DMF (1 mL) se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster tert-butílico del ácido {{1-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperidi carbámico. MS: m/z 582 (M+H)\ Ejemplo 158 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amída tihidrocloruro del ácido 6-(4-Aminopiperidin-1-il)-2-(3-metil-piridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico El producto del Ejemplo 157 se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir (1H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(4-Aminopiperidin-il)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 521 (M+H)+.
Ejemplo 159 Síntesis de [5-(1 H-lndazol-6-iletinil)-1 H-benzoimidazol-2-il]-(2-trifluorometil-fenil)-amina Una mezcla de 4-bromo-2-nitrofenilamina (2.17 g, 10 mmol), etiniltrimetil-silano (2.11 mL, 98%, 15 mmol), diclorobis(trifenilfosfina)paladio(ll) (211 mg, 0.3 mmol) y cloruro de cobre (I) (66.5 mg, 0.35 mmol) en THF (10 mL) y trietilamina (10 mL) se agitó a temperatura ambiente por 3 días. El producto, 2-nitro-4-trimetilsilaniletinilfenilamina se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice. LC-MS m/z: 235 (M+l)+.
Una mezcla de intermediario sililo del carbonato de potasio anterior previo (2.76 g, 20 mmol) y metanol (30 mL) se agitó por dos días.' La purificación mediante cromatografía de columna de gel de sílice proporcionó 4-etinil-2-nitrofenilamina como un sólido rojo (1.306 g, 8.05 mmol, producción 81% para 2 etapas). LC-MS m/z: 163 (M+l)+.
Una mezcla de 4-et¡nil-2-nitro-fenilamina (1.306 g, 8.05 mmol), 6-yodo-1 H- indazol (1.965 g, 8.05 mmol), diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (122 mg, 0.24 mmol) y cloruro de cobre (I) (54.4 mg, 0.28 mmol) en THF (8 mL) y trietilamina (8 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La purificación mediante cromatografía de columna en gel de sílice proporcionó 4-(1 H-indazol-6-iletinil)-2-nitrofenilam¡na como sólido rojo (777 mg, 2.79 mmol, producción 35%). LC-MS m/z: 279 (M+1 )+.
Una mezcla del compuesto nitro anterior (774 mg, 2.78 mmol), polvo de hierro (1.61 g, 97%, 28 mmol) y cloruro de amonio (2.25 g, 42 mmol) en etanol (1.5 mL) y agua (1.5 mL) se reflujó por 6 h. La purificación mediante cromatografía de columna en sílica proporcionó 4-(1 H-indazol-6-iletinil)-benceno-1 ,2-diamina como sólido café (284 mg, 1.14 mmol, Producción 41 %). LC-MS m/z: 249 (M+l)+.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar [5-(1 H-lndazol-6-iletinil)-1 H-benzoimidazol-2-il]-(2-trifluorometilfenil)-amina como sólido amarillo (178 mg, 0.426 mmol, Producción 66%). LC-MS m/z 418 (M+1 )\ Ejemplo 160 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-dimetilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5- carboxílico Una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 157) en DMF (1 mL) se agregó con 10% de solución de K2CO 3 acuosa (0.25 mL). La mezcla posteriormente se sometió a microondas a 80° C por 60 min. Los contenidos se enfriaron a TA y se vertieron en agua helada con hielo (20 L). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar 4-amino-2-dimetilamino-N-(1 H-indazol- 6-il)-5-nitrobenzamida.
El compuesto nitro (0.5 mmol) como anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4, 5-diamino-2-dimetilamino-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-dimetilamino-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 480 (M+H)\ Ejemplo 161 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-dimetilamino-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-1 H-benzoimidazol-5-carboxílico 4,5-diamino-2-dimetilamino-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida (ver el Ejemplo 160; 0.3 mmol) se reaccionó con 2-¡sotiocianato-3-metilpiridina (0.3 mmol; preparado de 2-amino-3-metilpirid¡na y tiofosgeno empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 115) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H- indazol-6-il)-amida del ácido 6-dimetilamino-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-1 H-benzoimidazol-5-carboxílico. MS: miz 427 (M+H)+.
Ejemplo 162 Síntesis de benzotiazol-5-ilamida del ácido 6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico -aminobenzotioazol (4.5 mmol) se reaccionó con cloruro de 4-cloro-2-fluoro-5-nitrobenzoilo (5 mmol) empleando las condiciones descritas en el Ejemplo 133. El producto, N-benzotiazol-5-il-2-cloro-4-fluoro-5-nitrobenzamida, también se aisló de forma similar al Ejemplo 133.
Una solución de la amida anterior (2 mmol) en dioxano (4 ml_) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. Después que se completo la formación de 4-amino-N-benzotiazol-5-il-2-cloro-5-nitrobenzamida, la mezcla de reacción se cargó con N-metilpiperazina (12 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h, y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se' vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-benzotiazol-5-il-2-(4-metil-piperazin-l-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-N-benzotiazol-5-il-2-(4-metilpiperazin-1 -il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener benzotiazol-5-ilamida del ácido 6-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazol-5-carboxílico. MS: m/z 552 (M+H)+.
Ejemplo 163 Éster tert-butílico del ácido 4-[6-(Benzotiazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]piperazina-1-carboxílico Una solución de 4-amino-N-benzotíazol-6-il-2-cloro-5-nitrobenzamida (2 mmol; preparado como en el Ejemplo 141 ) en dioxano (5 mL) se cargó con piperazina (10 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-benzotiazol-6-il-5-nitro-2-piperazin-1-il-benzamida como un sólido amarillo.
La amida (1 mmol) anterior se disolvió en THF (3 mL) y se trató con BOC anhídrido (1.2 mmol) y se agitó por 2h a TA. El solvente se removió a sequedad, y el residuo obtenido se suspendió en 10% EtOAc/hexano (10 mL) con agitación. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con 10% EtOAc/hexano y se secó al vacío para producir éster tert-butílico del ácido 4-[5-amino-2-(benzotiazol-6-ílcarbamoil)-4-nitro-fenil]piperazina-l-carboxílico.
El compuesto nitro (0.8 mmol) como anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir éster tert-metílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(benzotiazol-6- ilcarbamoíl)-fenil]piperazina-1-carboxílico.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster ter-butílico del ácido 4-[6-(Benzotiazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 638 (M+H)+.
Ejemplo 64 Síntesis para producir trihidrocloruro benzotiazol-6-ilamida del ácido 6-piperazin-1 -il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola- 5-carboxílico El producto del Ejemplo 163 se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir benzotiazol-6-ilamida del ácido 6-piperazin-1-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazol-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro. MS: miz 538 (M+H)+.
Ejemplo 165 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 4-[6-(Benzotiazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]piperazina-1 -carboxílico El éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(benzotiazol-6-ilcarbamoil)-fenil]piperazina-1-carboxílico (ver el Ejemplo 163; 0.3 mmol) se reaccionó con 2-isotiocianato-3-metilpiridina (0.3 mmol; preparado de 2-amino-3-metilpiridina y tiofosgeno empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 115) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster tert-butílico del ácido 4-[6-(Benzotiazol-6-ilcarbarnoil)-2-(3-metil-piridin-2-ilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 585 (M+H)+.
Ejemplo 166 Síntesis de benzotiazol-6-ilamida del ácido 2-(3-Metil-piridin-2-ilamino)-6-piperazin-1 -il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro El producto del Ejemplo 165 se reaccionó con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir benzotiazol-6-ilamida del ácido 2-(3-Metil-piridin-2-ilamino)-6-piperazin-1-il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 485 (M+H)+.
Ejemplo 167 Síntesis de benzotiazol-6-ilamida del ácido 2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazol-5-carboxílico Una solución de ácido 3,4-diaminobenzoico (3 mmol) en DMF (10 ml_) se cargó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (3.3 mmol) y la solución resultante se agitó a TA por 4 h. Después de que se completo la formación de tiourea, se agregó K2C03 sólido (10 mmol) a la mezcla de reacción, y la mezcla se calentó a 90 ° C por 10 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se acidificó con 10% de HCl acuoso para un pH 7. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielo (30 mL) con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, ácido 2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico como un sólido amarillo.
El ácido carboxílico obtenido como anteriormente (0.25 mmol) se acopló con 6-aminobenzotiazola (0.25 mmol) usando HBTU empleando el procedimiento general D. El producto, benzotiazol-6-ilamida 2-(2-Trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico, se obtuvo como un sólido café claro después de la purificación mediante cromatografía de gel de sílice usando DCM/metanol como eluente. S: m/z 454 (M+H)+.
Ejemplo 168 Síntesis de (5-metil-1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-piperaz¡n-1-il-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5- carboxílico A una mezcla de 2,4-dimetilanilina (10 mmol) en 5 mL de H2S04 concentrado, HN03 humeante (90%; 0.6 mL) se agrego por goteo a 0° C. La mezcla resultante se agitó por 12 h a TA y posteriormente se vertió lentamente en hielo. El sólido se colectó mediante filtración y se secó para producir 2,4-dimetil-5-nitroanilina como un sólido amarillo.
Una solución de nitroanilina (5 mmol) obtenido como anteriormente en HOAc (5 mL) a TA se agregó por goteo con nitrito de /so-amilo (6 mmol). La mezcla resultante se agitó a TA por 14 h y posteriormente se vertió lentamente en la solución de NaHC03 acuosa saturada (15 mL). Los contenidos se extrajeron con acetato de etilo (3 x 20 mL), y los orgánicos combinados se lavaron con 5% de solución de Na2C03 acuosa (30 mL). Los volátiles se removieron al vacío para dar 6-nitro-5-metilindazola como un sólido café.
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 6-amino-5-metilindazola como un sólido café. La aminoindazola anterior (1.5 mmol) se reaccionó con cloruro de 4-cloro-2-fluoro-5-nitrobenzoilo (1.5 mmol) empleando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. El producto, 2-cloro-4-fluoro-N-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, también se aisló de manera similar al Ejemplo 115.
Una solución de la amida anterior (1 mmol) en dioxano (2 mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. Después que se completo la formación de 4-amino-2-cloro-N-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, se cargó con piperazina (5 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 horas y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5-nitro-2-piperazin-1-il-benzamida como un sólido amarillo.
El producto anterior (0.6 mol) se trató con BOC anhídrido empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 163.
La nitro anilina anterior (0.5 mmol) se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(5-metil-1 H-indazol-6- ilcarbamoil)-fenil]piperazina-1-carboxílico.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1 -isotiocianato-2- trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster tert-butílico del ácido 4-[6-(5-Metil-1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 635 (M+H)+.
El producto antérior se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir (5-metil-1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-piperazin-1-il-2-(2-trif1uorometil-fenilam¡no)-1 H-benzo¡midazola-5-carboxílico como sal de hidrocloruro. MS: m/z 535 (M+H)+.
Ejemplo 169 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 4-[2-((1S,2S,4R)-Biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)- 3H-benzoimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico Una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 154) ser reaccionó con piperazina siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 163 para producir 4-am¡no-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitro-2-piperazin-1-ilbenzamida. El producto así obtenido se trató con Boc anhídrido como en el Ejemplo 163 para obtener éster tert-butílico del ácido 4-[5-amino-2-(1 H- indazol-6-ilcarbamoil)-nitro-fenill-piperazina-1-carboxíl¡co.
El compuesto nitro (0.6 mmol) anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para el éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(1 H-indazol-6-ilcarbamoiil)-feniljpiperazina-1-carboxílico.
La diamina (0.3 mmol) del anterior se reaccionó con (S)-2-lsotiocianato-biciclo[2.2.1]heptano (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar éster tert-butílico del ácido 4-[2-((1 S,2S,4R)-Biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-(1 H-indazol-ó-ilcarbamoil)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperazina-1^ carboxílico. MS: m/z 571 (M+H)\ Ejemplo 170 Síntesis de trihidrocloruro (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 2-((1 S,2S,4R)-Biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-piperazin-1 -il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico El producto del Ejemplo 169 se reaccionó con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 2-((1 S,2S,4R)-biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-piperazin-1-il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido como una sal de hidrocloruro. MS: miz 471 (M+H)+.
Ejemplo 171 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-Cloro-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (2 mmol; ver el Ejemplo 154) en etanol (5 ml_) y AcOH (1 mL) se agregó con polvo de hierro (10 mmol). La mezcla de reacción posteriormente se calentó a reflujo por 6 h. Los contenidos se enfriaron a TA, se filtraron a través de una almohadilla de Celita y la almohadilla se lavó con etanol. Los filtrados se combinaron y concentraron al vacío. El residuo obtenido se purificó en una cromatografía de columna de gel de sílice usando MeOH/DCM como eluente para producir 4,5-diamino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida. La diamina (0.3 mmol) del anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-cloro-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 471 (M+H)+.
Ejemplo 172 Síntesis de (I H-indazol-ó-il)amida del ácido 2-((1S,2S,4R)-biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-cloro-1 H- 4,5-Diamino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)benzamida (0.3 mmol; ver el Ejemplo 171 ) se reaccionó con (1S,2S,4R)-2-lsotiocianato-biciclo[2.2.1]heptano (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 2-((1S,2S,4R))-biciclo[2.2.1]hept-2-ilamino)-6-cloro-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 421 (M+H)+.
Ejemplo 173 Síntesis de (I H-indazol-ó-il)amida del ácido 6-[4-(2-hidroxietil)-piperazin-1-il]-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de trihidrocloruro (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-piperazin-1-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico (0.2 mmol; ver el Ejemplo 88) en metanol (2 mL) se agregó gliceraldehído (2 mmol), y la mezcla resultante se agitó a TA por 60 min. La mezcla de reacción posteriormente se cargó con cianoborohidruro de sodio sólido (1 mmol), y la agitación se continúo a TA por 10 h. La mezcla de reacción posteriormente se concentró al vacío y el residuo se suspendió en agua (10 mL) con agitación vigorosa. Después de 30 min, el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó bajo vacío para producir (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 6-[4-(2-hidroxietil)-piperazin-1 -il]-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico como un sólido blanco. MS: m/z 565 (M+H)\ Ejemplo 174 Síntesis del ácido {4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzo¡midazol-5-il]-piperazin-1 -il}acético A una solución de trihidroclorurp (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-piperazin-1-il-2-(2-trifluorometilfenilatnino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico (0.25 mmol; ver el Ejemplo 88) en metanol (1 mL) se agregó ácido glioxílico (0.5 mmol), y la mezcla resultante se agitó a TA por 60 min. La mezcla de reacción posteriormente se cargó con cianoborohidruro de sodio sólido (0.6 mmol), y la agitación se continuó a TA por 10 horas. A la mezcla de reacción posteriormente se agregó unas pocas gotas de ácido acético glacial y la mezcla se agitó por 30 min. Los volátiles posteriormente se removieron al vacío y el residuo se suspendió en agua (10 mL) con agitación vigorosa. Después de 30 min, el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó bajo vacío para producir ácido {4-[6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperazin-1-il}acético como un sólido blanco. MS: m/z 579 (M+H)+.
Ejemplo 175 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(4-Dimetilsulfamoil-piperazin-1 -il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Una solución de trihidrocloruro (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-piperazin-1 -il-2-(2-trifluorometilfenilaniino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico (0.3 mmol; ver el Ejemplo 88) en DMF (1 mL) se agregó con trietilamina (1.5 mmol) ay cloruro de N,N-dimetilsulfamoil (0.4 mmol). La mezcla resultante se agitó a TA por 4 h y se agregó con hidrato de hidracina (2 mmol). Los contenidos se calentaron a 50 ° C y se agitaron vigorosamente por 60 min. La mezcla de reacción posteriormente se vertió en agua fría con hielo y el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó bajo vacío. El producto crudo posteriormente se purificó en una cromatografía de columna de gel de sílice usando MeOH/DCM como eluente para producir (I H-indazol-ó-il)-amida del ácido 6-(4-dimetilsulfamoil-piperazin-1 -il)-2-(2-trifluorometil-fenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico como un sólido blanco. MS: m/z 628 (M+H)+.
Ejemplo 176 Síntesis de {6-[5-(1 H-lndazol-6-il)-1 H-imidazol-2-il]-1 H-bencimidazol-2-il}-(2-trifluorometilfenil)-amina Metil-3-nitroacetofenona (10 mmol) se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir l-(3-amino-4-metil-fenil)etanona (1 .4 g).
HCI concentrado (2 mL) se agregó a una mezcla de 1 -(3-amino-4-metil-fenil)etanona (8.4 mmol) y NaBF (1 .2 g, 11 mmol) en H20 (10 mL) y la solución se enfrió a 0o C. Una solución de NaN02 (0.58 g, 8.4 mmol) en H20 (1.5 mL) se agregó por goteo y la mezcla se agitó a 0°C por 30 min. El sólido que se formó se colectó mediante filtración y se lavó con H20 (5 mL) seguido por Et20 (5 mL) y se secó bajo una presión reducida. CH2CI2 (20 mL), KOAc (0.91 g, 9.3 mmol) y 18-corona-6 (50 mg, 0.2 mmol) se agregó al sólido y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 4 h. Se agregó H20 (20 mL) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó (MgS0 ) y el solvente se removió a presión reducida para producir 1 -(1 H-indazol-6-il)etanona (0.52 g).
Se agregó hidrotribromuro de Pirrolidona (1.8 g, 3.6 mmol) a una solución de 1-(1 H-indazol-6-il)etanona (0.5 g, 3 mmol) en THF (10 mL) y la solución se calentó a reflujo por 2 h. La solución se permitió enfriar a temperatura ambiente y se agregó H20 (30 mL) y la se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL) y se secó (MgS04). El solvente se removió a presión reducida para producir 2-bromo-1-(1 H-indazol-6-il)-etanona, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
DIEA (0.7 mL, 3.6 mmol) se agregó a una solución de 2-bromo-1 -(1 H-indazol-6-il)etanona (3 mmol) y ácido 4-amino-3-nitrobenzoico (0.643 g, 3.5 mmol) en DMF (10 mL) y la solución se agitó a temperatura ambiente por 2 h. Se agregó NH4OAc (5 g, 65 mmol) a la solución, seguido por HOAc (10 mL) y la mezcla se agitó a 140° C por 2 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en H20 (30 mL). El precipitado se colectó mediante filtración, se lavó con H20 (10 mL) y se secó bajo presión reducida para producir 4-[5-(1 H-indazol-6-il)-1 H-imidazol-2-il]-2-nitrofenilamina (0.56 g).
La nitro anilina del anterior (1 mmol) se reflujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4-[5-(1 H-indazol-6-il)-1 H-imidazol-2-il]-benceno-1 ,2-diamina.
La diamina (0.5 mmol) del anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifiuorometilbenceno (0.5 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para producir {6-[5-(1 H-lndazol-6-il)-1 H-imidazol-2-il]-1 H-bencimidazol-2-il}-(2-trifluorometilfenil)-amina. MS: m/z 460 (M+H)+.
Ejemplo 177 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(2-dimetilamino-etilsulfanil)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico NaH (2 mmol) se agregó a una solución de 2-dimetilaminoetanotiol (2 mmol) en NMP (2 mL), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 10 min. Se agregó 4-Amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-S-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 154) a la mezcla y la mezcla se agitó a 60-65 0 C por 3 h. Se agregó (4 mL) agua a la mezcla y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 mL) y se secó sobre MgS0 . Los extractos combinados se secaron (MgS04), y el solvente se removió a presión reducida para producir el producto deseado, 4-amino-2-(2-dimetilaminoetilsulfanil)-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitro-benzamida, que se usó sin purificación adicional.
La nitro anilina del anterior (1 mmol) se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-(2-dimetilaminoetilsulfanil)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida.
La diamina (0.5 mmol) del anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.5 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-(2-dimetilaminoetilsulfanil)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 540 (M+H)+.
Ejemplo 178 Síntesis de 5-etil-8-(1 H-indazol-6-il)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-5,6,7,8-tetrahidro-3H-1 ,3,5,8- A una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (5 mmol; ver el Ejemplo 154) en dioxano (10 mL) se agregó 2-etilaminoetanol (15 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo por 10 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (20 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío. La 4-amino-2-[etil(2-hidroxietil)amino]-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, se usó sin ninguna purificación.
Se agregó por goteo MeS02CI (0.5 mL, 6.3 mmol) a una solución de la nitroanilina anterior (1 g, 3.0 mmol) en THF (10 mL) conteniendo DIEA (1.6 mL) y piridina (1.5 mL). La solución se agitó a temperatura ambiente por 1 h y se vertió en agua (10 mL).
La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 mL), y los extractos combinados se secaron sobre MgS0 . El solvente se removió bajo presión reducida para producir éster 2-{[5-amino-2-(1-metanosulfonil-1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-4-nitrofenil]etilamino}etilo del ácido metanesulfónico (1.4 g, 2.6 mmol).
NaH (60%, 266 mg, 6.7 mol) se agregó a una solución de éster 2-{[5-amino-2-(1-metanosulfonil-1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-4-nitrofenil]etilamino}etilo del ácido metanesulfónico crudo (2.6 mmol) en THF (10 mL) a temperatura ambiente. La solución se agitó a reflujo por 3 h. El solvente se removió bajo presión reducida y el residuo se tomó en EtOAc y se lavó con agua (10 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre MgS04 , y el solvente se removió bajo presión reducida para producir 8-amino-1-etil-4-(1-metanosulfonil-1 H-indazol-6-il)-7-nitro-l,2,3,4-tetrahidro-benzo[e][1 ,4]diazepin-5-ona (1.1 g, 2.5 mmol).
Se agregó hidracina (0.6 mL) a una solución de 8-amino-1-etil-4-(1-metanosulfonil-1 H-indazol-6-il)-7-nitro-1 ,2,3 ,4-tetrahidro-benzo[e][1 ,4]diazepin-5-ona (1.1 g, 2.5 mmol) en 1 :1 THF/MeOH (20 mL). La solución se agitó a temperatura ambiente por 16 h. El solvente se removió bajo presión reducida para producir 8-amino-1-etil-4-(1 H-indazol-6-il)-7-nitro-1 ,2,3,4-tetrahidrobenzo[e][l,4]diazepin-5-ona (815 mg).
La nitro anilina anterior (1 mmol) se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 7,8-Diamino-1-etil-4-(1 H-indazol-6-il)-1 ,2,3,4-tetrahidrobenzo[e][1 ,4]diazepin-5-ona.
La diamina (0.5 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.5 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar 5-etil-8-(1 H-indazol-6-il)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-5,6,7,8-tetrahidro-3H-l,3,5,8-tetraazaciclohepta[fl]inden-9-ona. MS: miz 506 (M+H)\ Ejemplo 179 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-imidazol-1-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 154) en NMP (2 mL) se agregó con imidazola (5 mmol). La mezcla resultante se sometió a irradiación de microondas a 120° C por 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (30 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío. El producto, 4-arnino-2-imidazol-1-il-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitro-benzamida, obtenido como un sólido amarillo se usó sin ninguna purificación.
El compuesto nitro (0.5 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-imidazol-l-il-N-(1 H- indazol-6-il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifiuorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-imidazol-1-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 503 (M+H)+.
Ejemplo 180 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2-trifluorometilfenilamino)-benzooxazola-5-carboxílico Siguiendo el procedimiento general E, el ácido 4-Hidroxi-3-nitrobenzoico (5 mmol) y 6-aminoindazola (5 mmol) se usaron para preparar 4-hidroxi-N-(1 H-indazol-6-il)-3-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El nitrofenol (3 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 3-amino-4-hidroxi-N-(1 H-¡ndazol- 6-il)-benzamida.
Una solución del aminofenol (0.5 mmol) anterior en DMF (2 ml_) se agregó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.6 mmol) y DIEA (1 mmol). La mezcla de reacción se sometió a irradiación por horno de microondas a 120° C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (20 mL). El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío. El producto crudo fue purificado mediante cromatografía de columna de gel de sílice usando MeOH/DCM como eluente para proporcionar (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(2- trifluorometilfenilamino)-benzooxazola-5-carboxílico ácido, obtenido como un sólido amarillo. MS: m/z 438 (M+H)+.
Ejemplo 181 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(1-bencil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico Una solución de 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (10 mmol) en dioxano (20 mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. Después que se completo la formación de 2-amino-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, la mezcla de reacción se cargó con N-metilpiperazina (40 mmol) (NMP). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con huelo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se seco al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (6 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1-il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida.
Se agregaron Bencilbromuro (3 mmol) y K2C03 (6 mmol) a una solución de 2-nitroimidazola (2 mmol) en DMF (6 mL). La mezcla se agitó a 60-70° C por 4 h o durante la noche. Los contenidos se enfriaron a temperatura ambiente, y se agregó agua (30 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 15 mL). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04, se filtraron y el solvente se removió al vacío para producir 1-bencil-2-nitro-1 H-imidazola. El producto se usó para transformación adicional sin purificación adicional.
La nitroimidazola (1.5 mmol) anterior se redujo usando polvo de hierro y cloruro de amonio empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 159 para producir 1-bencil-2-amino-1 H-imidazola que se usó son ninguna purificación.
El derivado aminoimidazola anteriormente mencionado se convirtió a 1-bencil-2-isotiocianato-1 H-imidazola siguiendo el procedimiento general A.
El isotiocianato (1 mmol) anterior se reaccionó con 3,4-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (1 mmol) seguido mediante ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(1-bencil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazln-1-il )-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 547 (M+H)+.
Ejemplo 182 Síntesis de éster tert-butílico del ácido 4-[2-(l-ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(1 H-indazol-6-il-carbamoil)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico Bromociclopentano (14 mmol) y 2-nitroimidazola (10 mmol) se usaron para preparar 1-ciclopentil-2-nitro-1 H-¡midazola siguiendo el procedimiento de alquilación descrito en el Ejemplo 181. El producto así obtenido se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 1-ciclopentil-amino-1 H-imidazola. Este derivado aminoimidazola se convirtió a 1-ciclopentil-2-isotiocianato-1 H-imidazola siguiendo el procedimiento general A.
El isotiocianato (1 mmol) anterior se reaccionó con éster tert-butílico del ácido 4-[4,5-diamino-2-(1 H-indazol-ó-ilcarbamoi)-feniljpiperazina-1-carboxílico (1 mmol; ver el Ejemplo 169) seguido por ciclización usando EDC como se describe en el procedimiento general B para el éster tert-butílico del ácido 4-[2-(1 -ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-3H-benzoimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico. MS: m/z 611 (M+H)+.
Ejemplo 183 Síntesis de trihidrocloruro (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 2-(1 -ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilam¡no)-6-piperazin-1 -il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico El producto del Ejemplo 182 se trató con 4M HCI en dioxano empleando el procedimiento descrito para el Ejemplo 156 para producir (I H-indazol-ó-il)amida del ácido 2-(1 -ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-piperazin-1 -il-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrocloruro. MS: m/z 51 1 (M+H)+.
Ejemplo 184 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)amida del ácido 2-(l-ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-isopropilpiperazin-1 -il)-1 H- bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida (1 mmol; ver el Ejemplo 154) en dioxano (2 mL) se agregó con N-isopropilpiperazina (4 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo por 10 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (20 mL) con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-(4-isopropil-piperazin-1 -il)-5-nitro-benzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (0.5 mmol) anterior se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-N-(1 H-indazol-6-il)-2-(4-isopropilpiperazin-1 -il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) del anterior se reaccionó con 1-ciclopentil-2-isotiocianato-1 H-imidazola (0.3 mmol; ver el Ejemplo 182) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-6- il)amida del ácido 2-(1 - ciclopentil-1 H-imida2ol-2-ilamino)-6-(4-isopropilpiperazin-1 -il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 553 (M+H)+.
Siguiendo el procedimiento en el Ejemplo 184, se usó 4-amino-2-cloro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida para sintetizar los compuestos listados en la Tabla 13.
Tabla 13 Usando 1 -alquil-2-isotiocianato-1 H-imidazola (preparado usando el procedimiento en el Ejemplo 182) y 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1 -il)-N-( H-indazol-6-il)-benzamida (ver el Ejemplo 181 ), |os siguientes compuestos (Tabla 14) se sintetizaron empleando el procedimiento general B: Tabla 14 Usando 1 -alquil-2-isotiocianato-1 H-imidazola (preparado usando el procedimiento en el Ejemplo 182) y 4,5-Diamino-N-benzotiazol-6-il-2-(4-metilpiperazin-1 -il)-benzamida (ver el Ejemplo 141 ), los siguientes compuestos (Tabla 15) se sintetizaron empleando el procedimiento general B: Tabla 15 Ejemplo 199 Síntesis de (1 H-indazol-5-il)-amida 2-(1 -ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazin-1 -il)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico -aminobenzotioazola (5 mmol) se reaccionó con cloruro de 4-cloro-2-fluoro-5-nitrobenzoilo (5 mmol) empleando el procedimiento descrito en el Ejemplo 115. El producto, 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida, se usó para la transformación adicional sin ninguna purificación.
Una solución de 2-cloro-4-fluoro-N-(1 H-indazol-5-il)-5-nitrobenzamida (2 mmol) en dioxano (4 mL) se reaccionó con NH4OH acuoso usando las condiciones descritas en el Ejemplo 115. Después que se completo la formación de 2-amino-4-fluoro-N-(1 H-indazol-6-il)-5-nitrobenzamida, la mezcla de reacción se cargó con N-metilpiperazina (8 mmol). Los contenidos se calentaron a reflujo por 10 h y la mezcla de reacción se enfrió a TA. Los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto, 4-amino-N-(1 H-indazol-5-il)-2-(4-metilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzamida como un sólido amarillo.
El compuesto nitro (1 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para producir 4,5-diamino-2-(4-Tnetilpiperazin-1 -il)-N-(1 H-indazol-5-il)-benzamida.
La diamina (0.3 mmol) anterior se reaccionó con 1-ciclopentil-2-isotiocianato-1 H-imidazola (0.3 mmol; ver el Ejemplo 182) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-5- il)-amida del ácido 2-(1 -ciclopentil-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-metil-piperazin-1-il)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 525 ( +H)+.
El procedimiento descrito en el in Ejemplo 199 se adaptó para sintentizar los siguientes compuestos en la Tabla 16.
Tabla 16 Ejemplo 206 Síntesis de (1 H-indazol-5-il)-amida del ácido 2-(1 -tietan-3-il-1 H-imidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazin-1 -il)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico Se agregó 2-Nitroimidazola (0.5 g, 4.4 mmol) a una solución de KOH (6.6 mmol) en agua (10 mL). Se agregó 2-(Clorometil)tiirano (0.72 g, 6.6 mmol) a la solución y la solución se agitó a 65-70 0 C por 1 h. El solvente se removió mediante destilación y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna con CH2CI2 como eluente para producir 0.43 g del producto deseado 2-nitro-1 -tietan-3-il-1 H-imidazola (52%).
El compuesto nitro (2 mmol) obtenido como anteriormente, se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para 2-amino-1-tietan-3-il-1 H-imidazola.
El derivado aminoimidazola anteriormente mencionado se convirtió a 1 -tietan-3-il-2-isotiocianato-1 H-imidazola siguiendo el procedimiento general A. 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1-il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 181 ) se reaccionó con 1-tietan-3-il-2-isotiocianato-1 H-imidazola (0.5 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar (1 H-indazol-5-il)-amida del ácido 2-(1-tietan-3-il-1 H-imidazol-2-¡lamino)-6-(4-metilpiperazin- -il)-1 H-benzoimidazola-5-carboxílico ácido. MS: m/z 529 (M+H)+.
Ejemplo 207 Síntesis de hidrobromuro (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-amino-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1-il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (2 mmol; ver el Ejemplo 181 ) en 10% EtOH acuoso (6 ml_) se agregó bromuro de cianógeno (2.2 mmol), y la mixture se calentó a reflujo por 4 h. La mezcla de reacción posteriormente se concentró al vacío y el residuo obtenido se suspendió en éter dietílico con agitación vigorosa. El sólido obtenido se colectó mediante filtración, se lavó con éter dietílico y se secó al para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-amino-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico como una sal de hidrobromuro. MS: m/z 391 (M+H)+.
Ejemplo 208 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-ciclopentil-3-etilureido)-6-(4-metil-piperazin-1-il)-1 H-bencimidazola- 5-carboxílíco Una solución de ciclopentiletilamina (3 mmol) en THF anhídrido (3 mL) se agregó por goteo a una solución de fosgeno (4 mmol) a 0o C. Después de que la adición se completo, la mezcla de reacción se agitó por 30 min a 0o C. Los volátiles se removieron al vacío y el residuo obtenido se secó bajo vacío y el residuo obtenido se secó bajo vacío. El producto crudo, cloruro de ciclopentiletilcarbamoil se usó para la transformación adicional sin purificación.
Una solución para producir hidrobromuro (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-amino-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico (0.5 mmol) en DMF (2 mL) se agregó con DIEA (2 mmol) seguido mediante cloruro de carbamoilo (0.6 mmol), obtenido como anteriormente, a TA. La mezcla de reacción se agitó por 4 h. Se agregó hidrato de hidracina (0.25 mL) a la mezcla de reacción. Los contenidos se calentaron a 50 0 C y se agitó por 60 min. La mezcla de reacción posteriormente se enfrió a TA, se diluyó con agua fría con hielo (10 mL) y se extrajo con EtOAc (2x10 mL). Los extractos combinados se lavaron con agua (10 mL) y salmuera (10 mL). Después de la remoción del solvente, el residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice para producir (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3-ciclopentil-3-etilureido)-6-(4-metil-piperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico. MS: m/z 530 (M+H)+.
Ejemplo 209 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-mercapto-6-(4-metilpiperazín-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico A una solución de 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1-il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 181 ) en DMF (1 mL) se agregó tiocarbonil diimidazola (0.55 mmol). Siguiendo la adición, la mezcla se calentó a 45° C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, y los contenidos se vertieron en agua fría helada con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-mercapto-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H- bencimidazola-5-carboxílico como un sólido amarillo.
Ejemplo 210 Síntesis de (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(1-ciclopentil-1 H-bencimidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico Una solución de 2-fluoro-1-nitrobenceno (2 mmol) en TBDF se agregó con ciclopentilamina (2.5 mmol) y K2C03 (3 mmol). La mezcla resultante se calentó a 60°C por 4 h. Los contenidos se enfriaron a TA, los contenidos se enfriaron a TA y el sólido se filtró. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se secó bajo vapor. El producto 2-ciclopentilamino-1-nitrobenceno, se usó para transformación adicional sin ninguna purificación.
La nitroanilina (2 mmol) obtenida como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para N-ciclopentilbenceno-1 ,2-diamina.
Una solución de la diamina (1.5 mmol) obtenida como anteriormente en 10% de EtOH acuoso (4 ml_) se agregó con bromuro de cianógeno (1.7 mmol) y se calentó a reflujo por 4 h. La mezcla de reacción posteriormente se enfrió a TA, se agregó con K2C03 sólido (2 mmol) y se agitó vigorosamente por 30 min. El sólido posteriormente se filtró y el filtrado se concentró bajo vacío para producir 1l-ciclopent¡l-1 H-benzoimidazol-2-ilamina que se usó para la transformación adición sin ninguna purificación.
El derivado aminobencimidazola anteriormente mencionado (1 mmol) se convirtió a .1-ciclopentil-2-isotiocianato-1 H-bencimidazola siguiendo el procedimiento general A. 4,5-diamino-2-(4-metilpiperazin-1-il)-N-(1 H-indazol-6-il)-benzamida (0.5 mmol; ver el Ejemplo 181 ) se reaccionó con 1-ciclopentil-2-isotiocianato-1 H-bencim¡dazola (0.5 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(1-ciclopentil-1 H-bencimidazol-2-ilamino)-6-(4-metilpiperazin-1-il)-1 H-bencimidazola-5-carboxíl¡co. MS: m/z 575 (M+H)+.
Ejemplo 211 Síntesis de [6-(1 H-indazol-6-iloxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-(2-trifluorometilfenil)-amina A una suspensión agitada de 6-aminoindazola (20 mmol) en HCI concentrado (6 mL) a 0o C se agregó a una solución de NaN02 (22 mmol) en agua (12 mL) en porciones. Durante la adición, la temperatura de la mezcla de reacción es mantuvo a 0-5 ° C, y la agitación continuada por 45 min. Adicionales. Los contenidos posteriormente se agregaron en un matraz conteniendo 1 % de HCI acuoso (200 mL), y se calentaron a 100° C. La mezcla de reacción posteriormente se agitó a 100° C por 5 h. Los contenidos se enfriaron a TA, se neutralizaron a pH 7 usando 5% de Na2C03 acuoso y se extrajeron con EtOAc (2x70 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera y se secaron sobre Na2S04. La remoción del solvente bajo vacío proporcionó 6-hidroxiindazola como sólido café oscuro, que se usó para la transformación adicional sin ninguna purificación.
A una solución agitada de 2-cloro-4-fluoro-1-nitrobenceno (3 mmol) en DMF (5 mL) se agregó 6-hidroxiindazola (3 mmol) y K2C03 (6 mmol). Los contenidos se calentaron a 90° C por 6 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, y los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el producto 6-(3-cloro-4-nitrofenoxi)-1 H-indazola como un sólido amarillo, que se usó para transformación adicional sin ninguna purificación. Una solución agitada del compuesto nitro (2 mmol) en DMF (4 mL) se agregó con bencilamina (4 mmol) y los contenidos se calentaron a 100 0 C por 6 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, y los contenidos se vertieron en agua fría con hielo con agitación vigorosa. El sólido formado se colectó mediante filtración, se lavó con agua y se secó al vacio. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice usando hexano/EtOAC como eluente para proporcionar el producto, bencil-[5-(1 H-indazol-6-iloxi)-2-nitrofenil]-amina como un sólido amarillo.
La nitroanilina (1 mmol) obtenida como anteriormente se redujo bajo condiciones de hidrogenación como se describe en el procedimiento general F para 4-(1 H-lndazol-6-iloxi)-benceno-1 ,2-diamina.
La diamina (0.3 mmol) del anterior se reaccionó con 1-isotiocianato-2-trifluorometilbenceno (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para proporcionar [6-(1 H-indazol-6-iloxi)-1 H-bencimidazol-2-il]-(2-trifluorornetilfenil)-amina. MS: m/z 410 (M+H)+.
Ejemplo 212 Síntesis de {5-[2-(1 H-indazol-6-il)-etil]-1 H-bencimidazol-2-il}-(2-trifluorometilfenil)amina Una solución de [5-(1 H-lndazol-6-iletinil)-1 H-benzoimidazol-2-il]-(2-trifluorometilfenil)-amina (0.3 mmol; ver el Ejemplo 159) en etanol (3 mL) se redujo bajo condiciones de hidrogenación a 50 psi como se describe en el procedimiento general para producir {5-[2-(1 H-indazol-6-il)-etil]-1 H-bencimidazol-2-il}-(2-trifluorometilfenil)amina. MS: m/z 422 (M+H)+.
Ejemplo 213 Síntesis de ácido 3-[6-Dietilamino-5-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-1 H-bencimidazol-ilamino]-benzoico A una solución de éster metílico del ácido 3-[6-dietilamino-5-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-1 H-bencimidazol-2-ilamino]-benzoico (0.2 mmol; ver el Ejemplo 115) en metanol (2 mL) y THF (2 mL) se agregó 1M de solución de LiOH acuoso (2 mL). La solución resultante posteriormente se agitó a TA hasta que la reacción se completó. El pH de la mezcla de reacción se ajustó con 5% de solución de ácido cítrico acuoso para proporcionar su pH a 4-5. El sólido obtenido se filtró, se lavó con agua fría con hielo y se secó bajo vapor para producir ácido 3-[6-dietilamino-5-(1 H-indazol-6-ilcarbamoil)-1 H-bencimidazol-2-ilamino]-benzoico como un sólido blanco. MS: m/z 484 (M+H)+.
Ejemplo 214 Síntesis de éster metílico del ácido 3-[5-(Benzotiazol-6-ilcarbamoil)-6-dietilam benzoimidazol-2-ilamino]-benzoico 4,5-Diamino-N-benzotiazol-6-il-2-dietilaminobenzamida (0.3 mmol; ver el Ejemplo 133) del anterior se reaccionó con éster metílico del ácido 3-isotiocianatobenzoico (0.3 mmol) seguido mediante ciclización in situ usando EDC como se describe en el procedimiento general B para obtener éster metílico del ácido 3-[5-(benzotiazol-6-ilcarbamoil)-6-dietilamino-1 H-benzoimidazol-2-ilamino]-benzoico. MS: m/z 515 (M+H)+.
Ejemplo 215 Síntesis del ácido 3-[5-(Benzotiazol-6-ilcarbamoil)-6-dietilamino-1 H-benzoimidazol-2-ilamino]-benzoico El éster metílico (0.2 mmol) del Ejemplo 214 se hidrolizó empleando las condiciones descritas para el Ejemplo 216 para producir ácido 3-[5-(benzotiazol-6-ilcarbamoil)-6-dietilamino-1 H-benzoimidazol-2-ilamino]-benzoico como un sólido blanco. MS: m/z 501 (M+H)+.
Datos Biológicos Los compuestos de la presente invención provocan las respuestas de medición farmacológicas. Los compuestos de la presente invención en la Tabla 1 tienen una afinidad de enlace (IC50 < 1 µ?) para las quinasas aurora y pueden ser selectivos para las quinasas aurora como se compara con las otras quinasas. Además a la adición a las quinasas aurora, los compuestos de la presente invención también pueden inhibir en forma medible la proliferación de las células tumorales.
Ejemplo 216 Pruebas de la Enzima Aurora A. B. C Las pruebas de la quinasa aurora usan el sustrato péptido biotin-ahx-LRRWSLGLRRWSLG como un aceptor del grupo fosforilo.
Las pruebas se realizaron en placas de fondo en forma de U de 96 pozos. Las enzimas Aurora C y Aurora A se compraron en PanVera, la enzima Aurora B se compró en BPS Bioscience. Los compuestos se diluyeron en DMSO antes de la adición de la enzima. Típicamente, las pruebas se realizaron mediante incubar la enzima (0.2 - 10 nM) con o sin inhibidor, 0.1-1 µ?? ?33?-??? (Perkin Elmer), 0.1-100 µ? ATP, 0.1-10 mM MnCI2, 1-10 µ? de ortovanadato de sodio, 1-10 mM DTT, y 1-100 µ? de péptido juntos por el rango de tiempo de 5-120 min a 37 C en un volumen de prueba final de 60 µ?. El estabilizador usado para proporcionar el volumen de prueba final arriba de 60 µ? es 50 mM MOPS, pH 7.0, conteniendo 1-5% DMSO y 0.05 % BSA. Las reacciones se terminaron mediante la adición de 0.2 - 2 volúmenes de ácido 0.75% fosfórico.
La detección de la fosforilación del péptido se llevó a cabo mediante el conteo por centelleo usando un contador beta (TopCount) siguiendo la colección del péptido en placas de filtro de 96 pozos P81 (Whatman). El cpm de control total (C+) y el cpm de los pozos de control de fondo (C~) contuvieron DMSO en lugar del compuesto. Los pozos de control de fondo (C") carecen de péptido. El total (C+) menos los conteos de fondo (C) se asumen para ser proporcionales a la velocidad de reacción inicial. El por ciento de la inhibición de la enzima se calcula como 1-[(cpm muestra - C")/(C+ -C")] x 100%. Los valores IC50 se determinaron del % de inhibición de enzima en contra de los gráficos de la curva de concentración del compuesto usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de 4 parámetros de logística Y = lnferior+(Superior-lnferior)/1+10A((LogEC50-X)*lnclinación de la cima)) en donde X es el logaritmo de la concentración del compuesto e Y es el porcentaje de inhibición .
Cada uno de los compuestos en la Tabla 1 exhiben un valor IC50 de menos que o igual a 1.0 µ? por al menos uno de la quinasa Aurora, A, B ó C en la prueba anterior.
Ejemplo 217 Prueba de la Enzima EGF RTK La prueba de la quinasa tirosina del receptor EGD usa el sustrato péptido biotina-ahx-EEEEIFELVAKKK-C(0)NH 2 (Advanced Chemtech, # PX9197) como aceptor del grupo fosforilo.
Las pruebas se realizaron en placas de fondo U de 96 pozos. El dominio de quinasa tirosina del receptor EGF se compró en Upstate (#14-531 ). Los compuestos se diluyeron en DMSO antes de la adición en la prueba. Típicamente, las pruebas se realizaron mediante la incubación de la enzima (0.2 - 10 nM) con o sin inhibidor, 0.1-1 Ci ?33?-??? (Perkin Elmer), 0.1-100 µ? ATP, 0.1 -10 mM MnCI2, 1 - 10 µ? de ortovanadato de sodio, 1-10 mM DTT, y 1 -100 µ? del péptido juntos por el rango de tiempo de 5-120 min a 37 0 C en un volumen de prueba final de 60 pL El estabilizador usado para proporcionar el volumen de prueba final arriba de 60 pL es 50 mM MOPS, pH 7.0, conteniendo 1-5% DMSO. Las reacciones se terminaron mediante la adición de 0.2 - 2 volúmenes de 0.75% de ácido fosfórico. Los compuestos se diluyeron en DMSO antes de la adición en la prueba.
La detección de la fosforilación del péptido se llevó a cabo mediante el conteo de centelleo usando un contador beta (TopCount) siguiendo la colección del péptido en placas de filtro de 96 pozos P81 (Whatman). El cpm de control total (C+) y los pozos de cpm de control de fondo (C) contuvieron DMSO en lugar del compuesto. Los pozos de control de fondo (C ) carecieron de péptido. El total (C+) menos los conteos de fondo (C) se asumieron para ser proporcionales a la velocidad de reacción inicial. El porcentaje de la inhibición de la enzima se calculó como 1-[(cpm muestra - C")/( C+-C")] x 100%. Los valores IC50 se determinaron del % de la inhibición de la enzima en contra de los gráficos de la curva de concentración del compuesto usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de los 4 parámetros de logística Y=lnferior+(Superior- lnferior)/1 +10A((LogEC50-X)*lncl¡nac¡ón de la cima)) en donde X es el logaritmo de la concentración del compuesto e Y es el porcentaje de inhibición.
Cada uno de los Ejemplos 1-92 en la Tabla 1 exhiben un valor IC50 de mayor que o igual a 0.3 pM de esta prueba.
Ejemplo 218 Prueba de enzima IGF-1 RTK La prueba de la quinasa tirosina del receptor IGF-1 usa el sustrato péptido biotina-ahx-EQEDEPEGDIFEWLE-C(0)NH2 (Synpep) como aceptor del grupo fosforilo.
Las pruebas se realizaron en placas negras de 384 pozos (Nunc). El dominio quinasa del receptor IGF-1 se compró en (No de catálogo 14-465M). La enzima se pre-activó en hielo por 15 minutos en la presencia de 100 µ? ATP y 20 mM MgCI2 Los compuestos se diluyeron en D SO antes de la adición en la prueba. Típicamente, las pruebas se realizaron mediante la incubación de la enzima (0.2 - 10 nM) con o sin inhibidor, 30 µ? ATP, 5 mM MgCI2 , 400 nM de péptido e incubado por 40 min a 25 0 C en un volumen de prueba final de 20 pL. El estabilizador de prueba usado es 50 mM Tris-HCI, pH 7.5. Las reacciones se terminaron mediante la adición de 10 pL de 0.15 M EDTA.
La detección de la fosforilación del péptido se llevó a cabo mediante la fluorescencia resuelta en tiempo homogéneo (HTRF) siguiendo la adición de 25 pL de anticuerpo anti-fosfotirosina Eu-W1024 marcado pTyr-100 (Perkin Elmer) (concentración final 20 nM) y 25 pL de estreptavidina-APC (Perkin Elmer, conc. final 20 nM) en un volumen total de 80 pL. Ambos reactivos de detección HTRF se diluyeron en 50 mM Tris-HCI, pH 7.5 de estabilizador conteniendo 0.5% de BSA. La placa de prueba se incubó por 15 min a 25 0 C y se leyó en Envision en el modo de fluorescencia en tiempo resuelto con configuraciones de instrumento para excitación a 340 nm y emisión a 665 nM. Las unidades de fluorescencia de control total (C+) y los pozos rfu de control de fondo (C ) que contienen DMSO en lugar del compuesto. Los pozos de control de fondo (C) carecen de péptido. El porcentaje de inhibición de la enzima se calcula como 1-[(cpmmuestra- C")/(C+-C")] x 100%. Los valores IC50 se determinaron del % de inhibición de la enzima contra el gráfico de la curva de la concentración del compuesto usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de 4 parámetros de logística Y=lnferior+(Superior-lnferior)/1+10A((LogEC50-X)*lnclinación de la cima)) en donde X es el logaritmo de la concentración del compuesto e Y es el porcentaje de inhibición.
Cada uno de los Ejemplos 1 -92 en la Tabla 1 exhibieron un valor IC50 de más de o igual a 3.0 µ? de ésta prueba.
Ejemplo 219 Prueba de Enzima CDK2 La prueba de quinasa CDK2 usa el sustrato del péptido Biotina- ahx-ARRPMSPKKKA como el aceptor del grupo fosforilo.
Las pruebas se realizaron en placas de forma inferior U de 96 pozos. La enzima CDK2 se compró de PanVera. Las pruebas típicamente se realizaron mediante incubación de enzima (0.2 -10 nM) con o sin inhibidor, 0.1-1 µ???33?-??? (Perkin Elmer), 0.1-100 µ? ATP, 0.1-10 mM MgCI2, 1- 100 µ? de ortovanadato de sodio, 1-10 mM DTT, y 1 -100 µ? de péptido juntos para el rango de tiempo de 5-120 min a 25° C en un volumen de prueba final de 60 µ?. El estabilizador usado para proporcionar el volumen de prueba final a más de µ? es 50 mM Tris-HCI, pH 7.5, conteniendo 1-5% DMSO y 0.1 % BSA. Las reacciones se terminaron mediante la adición de 0.2 - 2 volúmenes de 0.75% de ácido fosfórico. Los compuestos se diluyeron en DMSO antes de la adición en la prueba.
La detección de la fosforilación del péptido se lleva a mediante el conteo de centelleo usando un contador beta (TopCount) siguiendo la colección del péptido en las placas de filtro de 96 pozos P81 (Whatman). El cpm de control total (C+) y los pozos del cpm de control de fondo (C ) que contienen DMSO en lugar del compuesto. Los pozos de control de fondo (C ) carecen de péptido. El total (C*) menos los conteos de fondo (C") se asumen para ser proporcionales a la velocidad de reacción inicial. El porcentaje de inhibición de enzima se calcula como 1 -[(cpm -C")/(C+-C-)]x 100%. Los valores IG50 se determinaron del % de inhibición de enzima contra la concentración del compuesto, los gráficos de la curva usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de 4 parámetros de logística Y=lnferior+(Superior-lnferior)/1 +10A((LogEC50-X)*lnclinación de cima)) en donde X es el logaritmo de la concentración del compuesto e Y es el porcentaje de inhibición.
Cada uno de los Ejemplos 1-92 en la Tabla 1 exhibieron un valor IC50 de más de o igual a 3.0 µ? de esta prueba.
Ejemplo 220 Prueba de Enzima VEGFR-2 TK La prueba de quinasa tirosina VEGFR-2 usa el sustrato péptido biotina-ahx-EQEDEPEGDIFEWLE-C(0)NH2 como el aceptor del grupo fosforilo.
El dominio quinasa de VEGFR-2 se compra de ProQuinase. La enzima se preactiva en hielo por 15 min en la presencia de 100 µ? ATP y 20 mM MgCI2 Las pruebas se realizaron en una placa de fondo en U de 96 pozos. Típicamente, las pruebas se realizaron mediante la incubación de enzima (0.2 - 10 nM) con o sin inhibidor, 30 µ? ATP, 5 mM MgCI2 , y 400 nM de péptido juntos por 30 min a 25° C en un volumen de prueba final de 20 µ?. El estabilizador usado para proporcionar el volumen de prueba final a más de 20 µ? es 50 mM Tris-HCI, pH 7.5. Las reacciones se terminaron mediante la adición de 10 µ? de 0.15 M EDTA.
La detección de la fosforilación del péptido se llevó a cabo mediante la fluorescencia de tiempo resuelta homogénea (HTRF) siguiendo la adición de 25 pL del anticuerpo anti-fosfotirosina Eu-W1024 marcada pTyr-100 (Perkin Elmer) (concentración final.20 nM) ay 25 µ? de estreptavidina-APC ((Perkin Elmer, conc. final 20 nM) en un volumen 80 µ?. Ambos reactivos de detección HTRF se diluyeron en 50 mM Tris-HCI, pH 7.5 estabilizador conteniendo 0.5% de BSA. La placa de prueba se incubó por 15 min a 25 ° C y se leyó en el modo de fluorescencia en tiempo resuelto Envision con las configuraciones del instrumento para la excitación a 340 nm y la emisión a 665 nM. Los pozos de control Positivo (C+) y control negativo (C") contienen DMSO en lugar del compuesto. Los pozos de control negativo (C") carecen de péptido. El porcentaje de la inhibición de la enzima se calcula como 1-[(RFU C")/(C+-C")] x 100%. Los valores IC50 se determinaron del % de los gráficos de la curva de concentración del compuesto contra la inhibición de enzima usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de los 4 parámetros de logística Y=lnferior+(Superior-lnferior)/1 +10A((LogEC50-X)*inclinación de cima)) en donde X es el logaritmo de la concentración del compuesto e Y es el porcentaje de inhibición.
Cada uno de los Ejemplos 1-92 en la Tabla 1 exhiben un valor IC50 de mayor a o igual a 3.0 µ? de esta prueba.
Ejemplo 221 Proliferación Celular In Vitro Los compuestos se probaron por su habilidad para inhibir la proliferación celular y viabilidad. La reducción metabólica de alamarBIue™ (Biosource No. de catálogo DAL1100) se usó para medir la viabilidad celular.
La actividad anti-proliferativa de los compuestos se estudió usando un panel de células tumorales: HCT-116 (línea celular del carcinoma colorectal en humanos), BxPC-3 (línea celular del adenocarcinoma pancreático en humanos), A549 (línea celular del carcinoma de pulmón en humanos), BT-549 (línea celular del carcinoma en el seno), LNCaP (línea celular del carcinoma de próstata en humanos), y MIA Paca-2 (línea celular del carcinoma pancreático en humanos). Estas células adherentes (1 ,000 - 20,000) se colocaron en placas en el medio completo (RPMI-1640, DMEM, F12K, ó McCoy's 5A) conteniendo 10% de suero de bovino fetal (Gibco) en el cultivo del tejido tratado en placas de 96 pozos (Costar) y se colocaron en un incubador humificado a 37° C, 95% 02 , 5% C02 por 18 - 24 hr. El medio se removió y se reemplazó con 90 µ? de medio fresco. El compuesto se diluyó en el medio conteniendo 3% de DMSO y se agregó a las células. Las unidades fluorescentes relativas de fondo (C ) se determinaron mediante incubación del reactivo alamarBIue™ por 6 hr usando células no tratadas colocadas en placas 18 hr más temprano. Las células no tratadas o las células que contienen el compuesto se incubaron por 96 hr. Durante las últimas 6 hr del periodo de incubación, el reactivo alamarBIue™ (10 µ?) se agregó a cada pozo y se incubó en un incubador humificado a 37°C, 95% 02 , 5% C02.
La reducción AlamarBIue™ se midió en el lector de placa fluorescente con las configuraciones del instrumento para la excitación a 530rim y la emisión a 590nm. El porcentaje de inhibición del crecimiento celular se calculó como H -[(RFUmuestra- C")/(RFUno tratado- C")] x 100%. Los valores del compuesto IC50 se determinaron del % de inhibición en contra de la concentración de los gráficos de la curva de concentración del compuesto usando GraphPad Prism™ de conformidad con la ecuación de los 4 parámetros de logística Y=lnferior+(Superior-lnferior)/1 +10A((LogEC50-X)*lnclinación de cima)).
Los varios componentes en la Tabla 1 exhibieron un valor IC50 de menos que o igual a 3.0 µ? en contra de uno o más de los paneles de las células tumorales. En particular, los Ejemplos 27, 35, 36, 48, 50, 54, 57, 58, y 60 tienen un valor IC50 de menos que o igual a 3 µ? en contra de al menos una de las células HCT-1 16, MIA Paca-2, o LNCaP en el uso de las condiciones de prueba anteriormente descritas.
Estudios Farmacológicos de Combinación de Fármacos Mientras los compuestos de la presente invención pueden usarse como un agente simple, también pueden usarse como parte de una terapia por combinación. Por ejemplo, el Ejemplo 88 cuando se administra como un agente simple demostró actividad antitumor en los xenógrafos de tumor en humanos establecidos en ratones atimicos derivados de tejidos del páncreas y del seno (Ver las curvas de dosis del agente simple para el Ejemplo 88 en los Ejemplos 222-224 posteriores). Para evaluar la eficacia terapéutica del Ejemplo 88 en combinación con otros agentes terapéuticos y para identificar las interacciones sinergísticas potenciales, varios estudios en animales se realizaron usando el Ejemplo 88 en combinación con Gemcitabina (Gemzar™), erlotinib (Tarceva™) o trastuzumab (Herceptin™).
La gemcitabina, el erlotinib y el trastuzumab son agentes terapéuticos que pueden tratar un espectro de tumores sólidos. Cada uno de gemcitabina, erlotinib y trastuzumab tienen diferentes mecanismos propuestos de acción de uno del otro y de los compuestos de la presente invención. La gemcitabina es un inhibidor de la síntesis del ADN vía la inhibición de la reductasa del ribonucleótido de la enzima. El erlotinib es un inhibidor de la quinasa tirosina del receptor EGF que bloquea la función del factor de crecimiento EGF. La gemcitabina y el erlotinib se usan actualmente para el tratamiento del cáncer pancreático avanzado. El trastuzuma es un anticuerpo monoclonal humanizado recombinante que une y bloquea la función del receptor p185HER2. El trastuzumab es el tratamiento de primera línea para pacientes con carcinoma de mama metastásico cuyos tumores sobreexpresan la proteína HER2.
Ejemplo 222 La actividad antitumoral del Ejemplo 88 administrado solo y en combinación con erlotinib se evaluó en contra de los injertos heterólogos pancreáticos MiaPaCa-2 humanos establecidos en los ratones atímicos (un modelo pre-clínico del cáncer pancreático). Los compuestos se dosificaron en los siguientes programas: 1 ) Ejemplo 88 se dosificó i.p. b.i.d. diariamente por 10 días (días 1-10). 2) El erlotinib se dosificó 50 mg/kg, p.o. diariamente por 14 días (días 1-14).
La actividad anti-tumoral se evaluó mediante la inhibición del crecimiento tumoral y mediante la valoración de la regresión de los tumores individuales caracterizados por las respuestas parciales (mayores que 50% de reducción en el tamaño del tumor) o respuestas completas (100% de la reducción en el tamaño del tumor).
El tratamiento del fármaco inicio cuando los tamaños del tumor principal alcanzaron aproximadamente 120 mg (día 8). Los tumores se que soportan los ratones se aleatorizaron y los grupos de tratamiento consistieron de 8 ratones. El tamaño del tumor medio para cada grupo en varios puntos en el estudio se listaron posteriormente en la Tabla A.
Tabla A. Modelo de Injerto Heterólogo MiaPaCa-2 Las curvas de crecimiento tumoral MiaPaCa2 se muestran en la Figura 1 , en donde ? - representa el vehículo para el Ejemplo 88 y el eriotinib; ° - representa el eriotinib en una dosis de 50 mg/kg, p.o. diariamente por 14 días. ° - representa el Ejemplo 88 en una dosis de 10 mg/kg, i.p. b.i.d. diariamente por 10 días y • - representa el Ejemplo 88 y eriotinib.
Los estudios de respuesta de dosis previa en este modelo se encuentran en el Ejemplo 88 (10 mg/kg) fue una dosis moderadamente efectiva para la inhibición del crecimiento tumoral en este modelo. El ejemplo 88 (10 mg/kg) produjo 67% de la inhibición del crecimiento tumoral relativo a los tumores tratados con el vehículo en el día 23. El eriotinib (50 mg/kg) produjo 16% de la inhibición del crecimiento tumoral en el día 23. En contraste, la combinación del ejemplo 88/ eriotinib produjo 89% de la inhibición del crecimiento tumoral en el día 23. El análisis del perfil de la regresión del tumor individual en el día 42 reveló que la terapia por combinación del Ejemplo 88/erlotinib produjo el contestador parcial 1 y los contestadores completos 2 fuera de un total de 8 ratones (Tabla AA); sin embargo, el agente simple produjo una respuesta.
Tabla AA. Ejemplo 88 Resumen de la Respuesta para los Injertos Heterólogos MiaPaCa-2 En resumen, el Ejemplo 88 (10 mg/kg) produjo mayores proporciones de respuesta antitumor en el modelo MiaPaCa-2 combinado con eriotinib (50 mg/kg) que cuando el Ejemplo 88 o el eriotinib se dosificaron como un solo agente.
Ejemplo 223 La actividad antitumoral del Ejemplo 88 administrado solo y en combinación con gemcitabina se evaluó en contra de los injertos heterólogos pancreáticos MiaPaCa-2 humanos establecidos en los ratones atímicos (un modelo pre-clínico del cáncer pancreático). Los compuestos se dosificaron en los siguientes programas: 1 ) Ejemplo 88 se dosificó i.p. b.i.d. diariamente por 10 días (1-10 días). 2) La gentamicina se dosificó 50 mg/kg, p.o. diariamente por 14 días (1-14 días).
La actividad anti-tumoral se evaluó mediante la inhibición del crecimiento tumoral y mediante la valoración de la regresión de los tumores individuales caracterizados por las respuestas parciales (mayores que 50% de reducción en el tamaño del tumor) o respuestas completas (100% de la reducción en el tamaño del tumor).
El tratamiento del fármaco inicio cuando los tamaños del tumor principal alcanzaron aproximadamente 120 mg (día 8). Los tumores se que soportan los ratones se aleatorizaron y los grupos de tratamiento consistieron de 8 ratones. El tamaño del tumor medio para cada grupo en varios puntos en el estudio se listaron posteriormente en la Tabla B.
Tabla B. Modelo de Injerto Heterólogo MiaPaCa-2 Las curvas de crecimiento tumoral MiaPaCa2 se muestran en la Figura 1 , en donde ¦ - representa el vehículo para el Ejemplo 88 y la gemcitabina; A - representa el Ejemplo 88 en una dosis de 10 mg/kg i.p., b.i.d. diariamente por 10 días; a - representa la gemcitabina en una dosis de 120 mg/kg i.p. q3d x 4 y 0 - representa el Ejemplo 88 y la gemcitabina.
Los estudios de respuesta de dosis previa en este modelo se encuentran en el Ejemplo 88 (10 mg/kg) fue una dosis moderadamente efectiva para la inhibición del crecimiento tumoral en este modelo. El ejemplo 88 (10 mg/kg) produjo 67% de la inhibición del crecimiento tumoral relativo a los tumores tratados con el vehículo en el día 23. La gemcitabina (120 mg/kg) produjo 60% de la inhibición del crecimiento tumoral en el día 23. En contraste, la combinación del ejemplo 88/ gemcitabina produjo 90% de la inhibición del crecimiento tumoral en el día 23. El análisis del perfil de la regresión del tumor individual en el día 42 reveló que la terapia por combinación del Ejemplo 88/gemcitabina produjo el contestador parcial 1 y el contestador completo 1 fuera de un total de 8 ratones, sin embargo el agente simple produjo una respuesta (Tabla BB).
Tabla BB. Ejemplo 88 Resumen de la Respuesta para los Injertos Heterólogos MiaPaCa-2 En resumen, el Ejemplo 88 (10 mg/kg) produjo mayores proporciones de respuesta antitumor en el modelo MiaPaCa-2 combinado con gemcitabina (120 mg/kg) que cuando el Ejemplo 88 o la gemcitabina se dosificaron como un solo agente.
Ejemplo 224 El trastuzumab es el tratamiento de primera línea para los pacientes con carcinoma de mama metastásico cuyos tumores sobre-expresan la proteína HER2. El ejemplo 88 en combinación con el trastuzumab se probo en el modelo xenográfico de seno BT-474. El tratamiento con fármacos inició cuando los tamaños del tumor medio alcanzaron aproximadamente 10 mg (día 35 post-implantación). Los tumores se que soportan los ratones se aleatorizaron y los grupos de tratamiento consistieron de 10 ratones. Los compuestos se dosificaron en los siguientes programas: 1 ) Ejemplo 88 se dosificó 30 mg/kg i.p. b.i.d. diariamente por 3 días, posteriormente 2 días fuera por un total de 5 ciclos; 2) El trastuzumab se dosificó 10 mg/kg, i.p. dos veces a la semana, por 4 semanas.
El tamaño del tumor medio para cada grupo en varios puntos en el estudio se listaron abajo en la Tabla C.
Tabla C. Modelo de Injerto Heterólogo BT-474 Las curvas del crecimiento tumoral BT-474 en ratones SCID atímicos se muestran en la Figura 3 en donde el día 1 es cuando se inició el tratamiento y en donde ¦ - representa el vehículo para el Ejemplo 88; ° - representa el trastuzumab en una dosis de 10 mg/kg i. o. dos veces por semana, por 4 semanas; ? - representa el Ejemplo 88 en una dosis de 30 mg/kg, i.p. b.i.d. diariamente por 3 días, posteriormente 2 días fuera, para un total de 5 ciclos; ° - representa el Ejemplo 88 y el trastuzumab.
Las curvas de crecimiento tumoral MiaPaCa2 se muestran en la Figura 1 , en donde - representa el vehículo para el Ejemplo 88 y el erlotinib; ° - representa el erlotinib en una dosis de 50 mg/kg, p.o. diariamente por 14 días. ° - representa el Ejemplo 88 en una dosis de 10 mg/kg, i.p. b.i.d. diariamente por 10 días y • - representa el Ejemplo 88 y erlotinib.
El ejemplo 88 (30 mg/kg) produjo 77% de la inhibición del crecimiento tumoral relativo a los tumores tratados con el vehículo en el día 24. El trastuzumab (10 mg/kg) produjo 33% de la inhibición del crecimiento tumoral en el. día 24. En contraste, la combinación del ejemplo 88/ trastuzumab produjo 88% de la inhibición del crecimiento tumoral en el día 24. El análisis del perfil de la regresión del tumor individual en el día 24 reveló que la terapia por combinación del Ejemplo 88/trastuzumab produjo 4 contestadores parciales y 6 contestadores completos fuera de un total de 10 ratones (Tabla CC); sin embargo, el agente simple produjo una respuesta.
Tabla CC. Ejemplo 88 Resumen de la Respuesta para los Injertos Heterólogos BT-474 En resumen, la combinación Ejemplo 88 (30 mg/kg) y trastuzumab (10 mg/kg) produjo una proporción de regresión del tumor completa superior cuando se compara con el Ejemplo 88 o trastuzumab solo en el modelo de injerto heterólogo BT-474.
Los siguientes procedimientos son para preparar la formulación farmacéutica que contiene un compuesto de la presente invención.
Ejemplo 225 Una formulación farmacéutica que contiene 2.0 mg/ml del Ejemplo 88 (que es equivalente a 2.7 mg/ml del Ejemplo 88 como una sal de trihidrocloruro) se preparó como sigue.
El ejemplo 88 como una sal de trihidrocloruro (1.350 gr) se disolvió con agitación en Agua Estéril para Inyección (SWFI). La SWFI puede desgasificarse con gas de nitrógeno estéril antes de usarse. La cantidad de SEFI en cuyo Ejemplo 88 se disolvió es una cantidad en la cual el compuesto se disolverá. En una modalidad, la cantidad de SWFI en la cual el compuesto se disuelve es arriba del 50% del volumen final y puede ser 75% del volumen final.
El D-Manitol se agregó a la solución y se disolvió con agitación. Antes de la adición de manitol, el pH de la mezcla se ajustó a entre 3.0 y 3.6 ± 0.1 con adición gradual de pequeñas cantidades de una solución básica tal como 1 N NaOH. La SWFI posteriormente se agregó el volumen final requerido de 500 mi.
La solución se filtró a través de un filtro PVDF de 0.22 µ?t? en un contenedor. Un PVDF de 0.45 µ?? puede usarse para pre-filtrar la solución. Finalmente, 10.25 mi de la solución filtrada se transfirió en ampolletas de 20 mi (ampolletas de cristal de boro-silicato tipo I) que se habían igualado con gas de nitrógeno estéril antes de usarse. Las ampolletas llenas posteriormente se obturan usando obturadores Fluorotec B2-40. Las ampolletas pueden almacenarse a o debajo de 8°C y arriba de congelación.
Ejemplo 226 Usando un procedimiento similar al del Ejemplo 225, una solución de 7 mg/ml ±0.3 de solución del Ejemplo 88 puede prepararse en donde el pH de la solución final es pH 2.5 a 3.0±0.1 y el volumen final en cada ampolleta es 35 mi. Las ampolletas pueden almacenarse en o debajo de 8°C y arriba de congelación.
Ejemplo 227 Un diluyente para usarse en combinación con una formulación de los Ejemplos 225 o con otras formulaciones que contienen un compuesto de la presente invención pueden prepararse como sigue.
La SWFI (490 mi) que se desgasificó con gas de nitrógeno estéril se transfirió en un contenedor y el pH se ajustó a un pH 11.0 a 11.4 ±0.1 La SWFI posteriormente se agrego al volumen final requerido de 500 mi. La solución posteriormente se filtró a través de un filtro PVDF de 0.22 µ?? en un contenedor. Finalmente, 10.285 mi de la solución filtrada se transfirieron en ampolletas de 20 mi (ampolletas de cristal de boro-silicato tipo I) que se habían igualado con gas de nitrógeno estéril antes de usarse.
Ejemplo 228 Usando un procedimiento similar a uno en el Ejemplo 227, un diluyente se preparó teniendo un pH 11.0 a 11.4 ± 0.1 y en donde 65 mi de la solución filtrada se transfirió en ampolletas de 100 mi.
Ejemplo 229 Antes de la administración, la formulación en el Ejemplo 225 se diluyó con el diluyente en el Ejemplo 227 en donde los contenidos del diluyente (10.25 mi) se transfirió en pequeñas cantidades en la ampolleta conteniendo el Ejemplo 225 de tal manera que la concentración final del Ejemplo 88 fue 1 mg/ml y el pH final fue 5.5 ± 0.1. La solución combinada no mostró precipitado y fue estable en entre 15 a 30°C por un periodo suficiente estable para permitir la preparación de la dosis y la dosificación. Dicho periodo fue al menos 1 a 6 horas.
Ejemplo 230 Antes de la administración, la formulación en el Ejemplo 226 se diluyó con el diluyente en el Ejemplo 228 en donde los contenidos del diluyente (65 mi) se transfirieron en pequeñas cantidades en la ampolleta que contiene el Ejemplo 226 de manera que la concentración final del Ejemplo 88 fue 2 mg/ml y el pH final fue 4.5 ±0.1. La solución combinada no mostró el precipitado y fue estable en entre 15 a 30°C por un periodo de tiempo suficiente para permitir la preparación de la dosis y la dosificación. Dicho periodo fue al menos de 1 a 6 horas y puede ser tan largo como 24 horas.
Mientras la invención se ha descrito e ilustrado con referencia a ciertas modalidades de la misma, aquellos expertos en la técnica apreciarán que varios cambios, modificaciones y sustituciones pueden hacerse en la misma sin apartarse del alcance y espíritu de la invención. Por ejemplo, las dosis efectivas más que las dosis como se establecen en este documento pueden apreciarse como una consecuencia de variaciones en la sensibilidad del sujeto siendo tratado par una enfermedad mediada por la quinasa Aurora. Así mismo las respuestas farmacológicas específicas observadas pueden variar de conformidad con y dependiendo del compuesto activo particular ó si existen portadores farmacéuticos aceptables, así como el tipo de formulación y el modo de administración empleado y dichas variaciones o diferencias esperadas en los resultados se contemplan de conformidad con los objetos y prácticas de la presente invención.

Claims (40)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de la Fórmula (I): 0) en donde X e -NH-, -O- ó S-, E es CH 2 -, -NH-, -O-, ó-S-, G y G2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de; arilo, heteroarilo, arilcicloalquilo fusionado, cicloalquilarilo fusionado, cicloalquilheteroarilo fusionado, heterociclilarilo fusionado y el grupo heterociclilheteroarilo fusionado, en donde G1 y G2 se sustituyen opcionalmente 1 a 7 veces con los sustituyentes independientemente seleccionados del grupo que consiste de Rb; L1 se selecciona del grupo que consiste de: un enlace directo, -CH2 -, -O-, -0-CH2-, -CH2-0-, -N(R6)-, -C(O)-, -C(0)N(R6)-, -N(R6)C(0)-, -N(R6)C(0)N(R7)-, -N(R6)C(0)0-, -OC(0)N(R6)-, -N(R6)S02, -S02N(R6)-, -C(0)-0-, -O-C(O)-, -S-, -S(O)-, -S(0)2-, -N(R6)S02N(R7)-, -N=N-, C(R8)=C(R9)-, y -C=C-, en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rd y Re; y R8 y R9 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Re y Rf; A es un enlace directo o el grupo -L2-Y-L3-, en donde L2 y L3 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: un enlace directo, - alquileno C^o, -alquenileno C2-10, -alquinileno C2.i0, -arileno, -heteroarileno, -cicloalquileno y -heterociclileno, en donde los átomos de carbono de los grupos alquileno, alquenileno, alquinileno, arileno, heteroarileno, cicloalquileno y heterociclileno se sustituyen opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente independientemente seleccionado de Rc; Y es un enlace directo, -O-, -N(R10), -S-, S02 -, -C(0)N(R10)-, -N(R10)-C(O)-, - N(R11)C(0)N(R10)-, -N(R10)SO2-, -S02N(R10)-, -C(0)-0-, -N(R1 )S02N(R10)-, -O-CO-, o -N=N-, en donde R10y R1 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: Rd y Re, y Q se selecciona del grupo que consiste de en donde R16 y R17 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de: Rd y Re; 2) -heteroarilo; -heterociclilo; -cicloalquilheteroarilo fusionado; -heterociclilarilo fusionado; -heterociclilheteroarilo fusionado; -arilheterociclilo fusionado; -heteroarilcicloalquilo fusionado y -heteroarilheterociclilo fusionado; en donde los grupos heteroarilo, heterociclilo, cicloalquilheteroarilo fusionado, heterociclilarilo fusionado, heterociclilheteroarilo fusionado, arilheterociclilo fusionado, heteroarilcicloalquilo fusionado y heteroarilheterociclilo fusionado se sustituyen opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente opcionalmente seleccionado de Rc; y 3) un sistema de anillo que comprende al menos un átomo de nitrógeno seleccionado del grupo que consiste de: en donde n, m, p, q y r son independientemente 0-4 de manera que n+m+p iguales de 2-5 y q+r iguales de 2-5, y el sistema de anillo cicloalquilo o heterociclo se sustituye opcionalmente los átomos de carbono (CH2) 1-2 con R18 ó R 9, en donde R18 y R19 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rfy R9, J1 se selecciona del grupo que consiste de: J3 y J5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de -CH2-, -O-, -S-, S(0)2, -C(O)-, -C(0)N(H)-, -NHC(O)-, -NHC(0)N(H)-, -NHS02-, -S02N(H)-, -C(0)-0-, -O-C(O)-, -NHS02NH-, R29 y R30 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de Rd y Re R31 es Rf; R1 es R ; Rbes a) -cicloalquilo, b) -ciano, c) -ORd, d) -N02, e) -halógeno, f) -haloalquilo, 9) -S(0)sRd, h) -SRd, i) -S(0)2ORd, j) -S(0)sNRdRe, k) -NRdRe, l) -0(CRf R9)tNRdRe, m) -C(0)Rd, n) -C02Rd, o) -C02(CRfR9)tC(0)NRdRe, p) -OC(0)Rd, q) -C(0)NRdRe , r) -NRdC(0)Re, s) -OC(0)NRdRe, t) -NRdC(0)ORe, u) -NRdC(0)NRdRe, v) -CF3, w) -OCF3 x) -alquilo C1-10, y) -alquenilo C2-io, z) -alquinilo C2-io, aa) -alquileno-Cv!o-arilo; bb) -alquileno C1-10-heteroarilo 0 cc) -heteroarilo, en donde los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo y cicloalquilo se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente independientemente seleccionado de Rc; R°es a) -halógeno, b) -amino, c) -carboxi, d) -alquilo C^, e) -O-alquilo C1-4, f) -cicloalquilo, g) -O-cicloalquilo, h) -arilo, i) -alquileno C -4-arilo, j) -hidroxi, k) -CF3, I) -O-arilo, m) -heteroarilo, n) -heteroarilo-alquilo C t-io, o) heterociclilo, p) -C02-alquilo C1-10 ó q) -C02-alquil CMo arilo, Rd y Re se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo d-io, alquenilo C2-io. alquinilo C2-io, cicloalquilo, alquileno Ci.i0-cicloalquilo, arilo, heterociclilo, en donde los grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo, heterociclilo se sustituyen opcionalmente con uno o cuatro sustituyentes independientemente seleccionados de Rc; ó Rd y Re junto con los átomos a los cuales se unen forman un anillo heterocíclico dé 5 a 7 miembros que contienen 0-2 heteroátomos adicionales independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y nitrógeno y opcionalmente sustituido con 1-3 veces con Rc, Rf y R9 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo C1-10, cicloalquilo, alquileno C^o-cicloalquilo y arilo, en donde los grupos alquilo, cicloalquilo y arilo se sustituyen opcionalmente con uno a cuatro sustituyentes independientemente seleccionados de Rc; o Rf y R9 junto con el carbono al cual se unen forman un anillo de 5 a 7 miembros que contiene 0-2 heteroátomos independientemente seleccionados de oxígeno, azufre y nitrógeno opcionalmente sustituido con 1-3 veces con Rc, s es un número entero de 1 a 2, t es un número entero de 1 a 10, u es un número entero de 0 a 1 , v es un número entero de 0 a 2, o una sal farmacéuticamente aceptable o profármaco del mismo.
2. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es -NH-.
3. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es -NH y E es -NH-.
4. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G2 se selecciona del grupo que consiste de fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il y 4,5,6,7-tetrahidro-tiazol[5,4-c]-piridina-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
5. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G2 se sustituye con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo Ci.i0, piperazin-1 -il, 4-(alquilo C1-10)-piperazin-1-il, alcoxi C-MO, haloalquilo, cicloalquilo y alquileno C1-10-cicloalquilo.
6. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G2 es fenilo, naftilo, isoquinolin-3-ilo, piridina-2-il, piridina-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, en donde G2 se sustituya o no se sustituye con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: cloro, flúor, metilo, etilo, propilo, isopropilo, tert-butilo, butilo, fenilo, metoxi, trifluorometilo, trifluorometoxi y ciclopentilo.
7. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde L1 es -C(0)-NH- ó -NH-C(O)-.
8. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde L1 es -C(R8)=C(R9)-.
9. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol-6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol-5-il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il, benzotriazol-6-il, benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, ¡ndol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H-indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, 1 H-indazol-6-il, quinolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-il, 2-oxindol-5-il, 2-oxindol-6-il, 2-(1 H)-bencimidazolon-5-il, 3-indazolinon-5-il, y 3-indazolinon-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de times Rb.
10. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 se sustituye o no se sustituye con al menos un grupo seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo Ci.i0, piperazin-1-il, 4-(alquilo C^o^piperazin-l -il, alcoxi C,. 0l -alquileno C1-10-OH, haloalquilo, -cicloalquilo, -alquileno C1-10-cicloalquilo, morfolin-4-il, pirrol-1-il, -amino, -NH-(alquilo CM0), -N(alquilo Ci.i0)2> -NHC(0)-alquilo C1-10, NHC(0)-(1 -(alquilo -NHC(0)-fenilo, -NH-alquileno C -10-morfilin-4-il, -O-alquileno Ci_i0-nnorfolin-4-il y -NH-alquileno C1-10-OH.
1 1. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde L1 es -NHC(O)- ó -C(0)-NH- y G1 es 1 H-indazol-5-il ó 1 H- indazol-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de R .
12. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 es 1 H-indazol-5-il ó 1 H-indazol-6-il, en donde G1 se sustituye o no sustituye en la posición 3 con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: halo, fenilo, alquilo C1-10, piperazin-1 -il, 4-(alquilo C1-10)-piperazin-1 -il, -alcoxi C1-10, -alquileno Ci.10-OH, -haloalquilo, -cicloalquilo, -alquileno C1-10-cicloalquilo, morfolin-4-il, -alquileno Ci.io-morfolin-4-il, pirrol-1-il, -amino, -NH-(alquilo Ci.10), -N(alquilo C,.|0)2 , -NHC(O)-alquilo C -10, -NHC(0)-(1 -(alquilo C -10)-piperidin-4-il), -NHC(0)-fenilo, -NH-alquileno d.io-morfolin-4-il -O-alquileno C1-10-morfolin-4-il y -NH-alquileno-C1-10-OH.
13. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde u es 1 , A es un enlace directo y Q se selecciona del grupo que consiste de: 4-(alquilo C1- 0)-piperazin-1 -il, piperadin-1 -il, morfolin-4-il, -NH-alquilo C1-10, -N-(alquilo C1 -10)2, -N-(alquilo C^oXcicloalquilo), y -NH-cicloalquilo.
14. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde u es cero y v es cero.
15. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde u es 1 y v es cero.
16. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde u es cero y v es uno.
17. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde u es cero, v es uno y R se selecciona del grupo que consiste de: -alquilo C1-10, -cicloalquilo, -alquileno C1-10-cicloalquilo, -haloalquilo C1-10, -O-alquilo C1-10, -O-cicloalquilo y -O-haloalquilo C1-10.
18. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X es -NH-, E es -NH-, v es cero, L1 es -NHC(O)- ó -C(0)NH-, G1 es 1 H-indazol-6-il ó 1 H-indazol-5-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
19. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 no se sustituye.
20. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 que tiene la fórmula: (la) en donde G1, G2, L1, Q, y A son como se definieron en la reivindicación 1.
21. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que tiene la fórmula: en donde G1, G2, y Q son como se definió en la reivindicación 1.
22. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 21 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Q se selecciona del grupo que consiste de: 4-(alquilo C^oJ-piperazin-l -N, piperadin-1 -il, morfolin-4-il, -NH-alquilo C^o, -N-(alquilo C1.10)2, -N-(alquilo C^oXcicloalquilo), y -NH-cicloalquilo.
23. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 21 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G2 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, y 4,5,6,7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]-piridin-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
24. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 21 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol- 6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol-5-il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il, benzotriazol-6-il, benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, indol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H- indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, 1 H-indazol-6-il, qutnolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-¡I, 2-oxindol-5-il, 2- oxindol-6-il, 2-(1 H)-bencimidazolon-5-il, 3-¡ndazolinon-5-il, y 3- indazolinon-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1 -4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb .
25. El compuesto de la Fórmula (1 b) de conformidad con la reivindicación 21 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 es 1 H-indazol-6-il ó 1 H-indazol-5-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb .
26. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que tiene la fórmula: en donde G1, G2, y R son como se definieron en la reivindicación 1 .
27. El compuesto de la Fórmula (le) de conformidad con la reivindicación 26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de: -alquilo ?1-10, -cicloalquilo, -alquileno-C1-10-cicloalquilo, -haloalquilo C^o-f nilo, -O-alquilo Ci.10, -O cicloalquilo y -O-haloalquilo C1-10.
28. El compuesto de la Fórmula (le) de conformidad con la reivindicación 26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde
G2 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, naftilo, isoquinolin-3-il, piridin-2-il, piridin-3-il, piridin-4-il, tiofen-2-il, tiazol-2-il, imidazol-2-il, benzotiazol-2-il, y 4,5,6, 7-tetrahidro-tiazolo[5,4-c]-piridin-2-il, en donde G2 se sustituye opcionalmente 1 -4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de R . 2 . El compuesto de la Fórmula (le) de conformidad con la reivindicación 26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde G1 se selecciona del grupo que consiste de: fenilo, pirazol-3-il, benzotiazol-5-il, benzotiazol-6-il, bencimidazol-5-il, bencimidazol-6-il, benzoxazol-5-il, benzoxazol-6-il, benzotriazol-5-il, benzotriazol-6-il, benzoisoxazol-5-il, benzoisoxazol-6-il, indol-5-il, indol-6-il, 2H-indazol-6-il, 1 H-indazol-3-il, 1 H-indazol-4-il, 1 H-indazol-5-il, IH-indazol-6-il, quinolin-6-il, quinolin-7-il, quinazolin-4-il, 2-oxindol-5-il, 2-oxindol-6-il, 2-(1 H)-bencimidazolon-5-il, 3-indazolinon-5-il, y 3-indazolinon-6-il, en donde G1 se sustituye opcionalmente 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de Rb.
30. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 26 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde: G1 es 1 H-indazol-6-il ó 1 H-indazol-5-il, en donde G1 es opcionalmente sustituido 1-4 veces con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste dé Rb.
31. El compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste de: éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(2-trifluorometilfenilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1 -carboxílico, ( H-indazol-6-il)-amida del ácido 6-Piperazin-1-il-2-(2-trifluorometilfenilamino)-1 H-bencimidazola-5-carboxílico, éster tert-butílico del ácido 4-[6-(1 H-lndazol-6-ilcarbamoil)-2-(3-metilpiridin-2-ilamino)-3H-bencimidazol-5-il]-piperazina-1-carboxílico, (1 H-indazol-6-il)-amida del ácido 2-(3- etilpiridin-2-ilamino)-6-piperazin-1-il-1 H-indazol-6-il)-amida, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
32. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable.
33. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 32, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
34. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 32, que además comprende un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de antimetabolitos, inhibidores de la proteína quinasa tirosina y anticuerpos.
35. Un método para inhibir la actividad de la quinasa Aurora que comprende contactar una célula en un sujeto en el cual se desea la inhibición de la quinasa Aurora A ó B con un compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
36. Un método para tratar una enfermedad mediada por la quinasa Aurora en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I) de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
37. El método de conformidad con la reivindicación 36, en donde la enfermedad mediada por la quinasa Aurora es un cáncer.
38. El método de conformidad con la reivindicación 37, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste de cáncer colorectal, cáncer de ovario, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer de próstata, cáncer cerebral, cáncer de huesos, cáncer de vejiga, cáncer de cuello y cabeza, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer pancreático, sarcoma, leucemia y linfoma.
39. El método de conformidad con la reivindicación 38, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste de: cáncer de mama, cáncer colorectal y cáncer pancreático.
40. El método de conformidad con la reivindicación 36, que además comprende la etapa de administrar a un sujeto un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de: antimetabolitos, inhibidores de la proteína quinasa tirosina y anticuerpos.
MXMX/A/2008/009811A 2006-02-10 2008-07-31 Derivados benzazola, composiciones y metodos de uso como inhibidores de la quinasa aurora MX2008009811A (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US60/772,497 2006-02-10
US60/791,187 2006-04-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MX2008009811A true MX2008009811A (es) 2008-10-03

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2641744C (en) Benzazole derivatives, compositions, and methods of use as aurora kinase inhibitors
JP4968860B2 (ja) アニリノピペラジン誘導体およびアニリノピペラジン誘導体を使用する方法
JP5752232B2 (ja) プロテインキナーゼ阻害剤としての置換ピロロトリアジン化合物
EP2331530B1 (en) Fused multicyclic compounds as protein kinase inhibitors
JP5063700B2 (ja) アニリノピペラジン誘導体およびアニリノピペラジン誘導体を使用する方法
JP5255438B2 (ja) プロテインキナーゼ阻害薬として有用なベンズイミダゾール
CA2709536C (en) Indazolyl, benzimidazolyl, benzotriazolyl substituted indolinone derivatives as kinase inhibitors useful in the treatment of cancer
WO2017215485A1 (zh) 一种具有fgfr抑制活性的新型化合物及其制备和应用
MX2011006997A (es) Compuestos de heteroarilo utiles como inhibidores de cinasa de factor recombinante activado (raf).
JP2011530500A (ja) Ｃｈｋ−１阻害剤としての６置換２−ヘテロシクリルアミノピラジン化合物
CA2946130A1 (en) Quinoxaline compounds and uses thereof
US11008318B2 (en) 2-phenylimidazo[4,5-b]pyridin-7-amine derivates useful as inhibitors of mammalian tyrosine kinase ROR1 activity
WO2020150545A1 (en) Pyrazole derivatives as modulators of the wnt/b-catenin signaling pathway
JP2022533710A (ja) Ｎを含むヘテロアリール誘導体およびこれを有効成分として含むがんの予防または治療用薬学的組成物
CN113164481A (zh) 环烷-1,3-二胺衍生物
CA3227194A1 (en) Compounds for the treatment of pain, in particular neuropathic pain, and/or other diseases or disorders that are associated with at2r and/or at2r mediated signaling
KR102329720B1 (ko) 단백질 키나아제 저해 활성을 갖는 신규한 피리미도[4,5-d]피리미딘-2-온 유도체
MX2008009811A (es) Derivados benzazola, composiciones y metodos de uso como inhibidores de la quinasa aurora
US11660303B2 (en) 2-phenylimidazo[4,5-b]pyridin-7-amine derivates useful as inhibitors of mammalian tyrosine kinase ROR1 activity
KR102329723B1 (ko) 단백질 키나아제 저해 활성을 갖는 신규한 피리미도[4,5-d]피리미딘-2-온 유도체