MX2008009425A - Composiciones detergentes - Google Patents

Abstract

Esta invención se refiere a composiciones que comprenden ciertas variantes de lipasa y un fotoblanqueador, y a los procesos para elaborar y usar tales composiciones. Incluye el uso de esas composiciones para limpiar o tratar un sitio.

Description

COMPOSICIONES DETERGENTES CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a composiciones que comprenden lipasas y fotoblanqueadores y a los procesos para elaborar y utilizar estos productos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La aparición de enzimas lipasas adecuadas para aplicaciones detergentes ha proporcionado al formulador un nuevo enfoque para mejorar la remoción de grasa. Esas enzimas catalizan la hidrólisis de los triglicéridos que constituyen un componente principal de muchas suciedades de grasa habituales, tales como sebo, grasas de origen animal (p. ej., manteca de cerdo, ghee, manteca) y aceites vegetales (p. ej., aceite de oliva, aceite de girasol, aceite de cacahuate). Sin embargo, estas enzimas, por lo general, mostraron un rendimiento débil en el primer ciclo de lavado y despedían un mal olor que aparentemente provenía de la hidrólisis de grasas presentes en grasas lácteas como leches, crema, manteca y yogur. Sin limitaciones teóricas de ninguna especie, se cree que esas suciedades tienden a generar mal olor inducido por las lipasas, ya que contienen triglicéridos que tienen grupos funcionales de unidades acilo graso de cadena corta (p. ej., C4) que liberan ácidos grasos volátiles de mal olor después de la lipólisis. Aunque el rendimiento de esas enzimas mejoró, no se pudo eliminar el problema del mal olor. Por consiguiente, se limitó el uso de esta tecnología. Se ha comprobado que la combinación de un fotoblanqueador con ciertas variantes de lipasas produce un mayor beneficio para el desempeño de limpieza y al mismo tiempo minimiza los malos olores indeseados. Sin intención de estar limitados por la teoría, se cree que los siguientes mecanismos probablemente produzcan tales beneficios: la remoción mejorada de manchas para manchas que comprenden carotenoides, antocianinas, porfirinas, taninos y flavinas, por ejemplo, curry, salsa de pimientos, salsas para pastas a base de tomates, café y té, debido a la acción sinérgica entre la lipasa y el fotoblanqueador; y la oxidación de la enzima lipasa por parte del fotoblanqueador luego del lavado, por ejemplo, durante el secado del sitio limpiado o tratado, lo cual conduce a la reducción de los malos olores.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a composiciones que comprenden un fotoblanqueador y una variante de lipasa con un menor potencial para generar olor y un rendimiento relativo adecuado, sin la unión de una extensión C-terminal. La variante de lipasa se obtiene al incorporar mutaciones en una o más regiones identificadas en la lipasa de origen. La variante obtenida de ese modo debe tener una actividad de lipasa no menor que 80 % de la actividad de la lipasa de origen expresada como rendimiento relativo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra el alineamiento de lipasas.

LISTADO DE SECUENCIAS La SEQ ID NO: 1 muestra la lipasa que codifica la secuencia de ADN de Thermomyces lanoginosus. La SEQ ID NO: 2 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Thermomyces lanoginosus. La SEQ ID NO: 3 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Absidia reflexa. La SEQ ID NO: 4 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Absidia corymbifera. La SEQ ID NO: 5 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Rhizomucor miehei. La SEQ ID NO: 6 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Rhizopus oryzae. La SEQ ID NO: 7 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus niger. La SEQ ID NO: 8 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus tubingensis.

La SEQ ID NO: 9 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Fusarium oxysporrum. La SEQ ID NO: 10 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Fusarium heterosporum. La SEQ ID NO: 11 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus oryzae. La SEQ ID NO: 12 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Penicillium camemberti. La SEQ ID NO: 13 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus foetidus. La SEQ ID NO: 14 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus niger. La SEQ ID NO: 15 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus oryzae. La SEQ ID NO: 16 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Landerina penisapora.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones Como se utiliza en la presente, a menos que se indique de cualquier otra forma, la expresión "composición de limpieza" incluye agentes de lavado en forma granular o en polvo de gran rendimiento o multipropósito, en especial detergentes para lavandería; agentes de lavado multipropósito en forma líquida, en pasta o en gel, en especial, los tipos líquidos denominados de gran rendimiento; detergentes líquidos para telas delicadas; agentes para el lavado manual de vajilla o agentes de bajo rendimiento para el lavado de vajilla, en especial, los del tipo que producen abundante espuma; agentes para el lavado automático de vajilla, lo que incluye los distintos tipos formulados en tableta, en granulos, líquidos y auxiliares de enjuague para uso doméstico e institucional; agentes de limpieza y desinfectantes líquidos, lo que incluye los de tipo antibacteriano para el lavado de manos, agentes en barra para lavandería, enjuagues bucales, limpiadores de prótesis dentales, champús para alfombras o automóviles, limpiadores para baños; champús o enjuagues para el cabello; baños de espuma y geles para ducha, y limpia metales; así como auxiliares de limpieza, tales como aditivos de blanqueador y los del tipo "quitamanchas en barra" o específicos para pretratamiento. Como se utiliza en la presente, la frase "se selecciona independientemente del grupo que comprende..." significa que las entidades o los elementos del referido grupo Markush que se seleccionen pueden ser los mismos, pueden ser diferentes, o cualquier mezcla de elementos. Se deben utilizar los métodos de prueba expuestos en la Sección de Métodos de prueba de la presente solicitud para determinar los valores respectivos de los parámetros de las invenciones de los solicitantes. A menos que se especifique de cualquier otra forma, todos los niveles del componente o composición se expresan en referencia al nivel activo de ese componente o composición y son exclusivos de impurezas, por ejemplo, solventes residuales o subproductos, los cuales pueden estar presentes en las fuentes comercialmente disponibles. Todos los porcentajes y proporciones están calculados en peso, a menos que se indique de cualquier otra forma. Todos los porcentajes y proporciones están calculados en base a la composición total, a menos que se indique de cualquier otra forma. Se debe entender que todo límite numérico máximo dado en esta especificación incluye todo límite numérico inferior, como si los límites numéricos inferiores se hubieran anotado en forma explícita en la presente. Todo límite numérico mínimo dado en esta especificación incluirá todo límite numérico mayor, como si los límites numéricos mayores se hubieran anotado explícitamente en la presente. Todo intervalo numérico dado en esta especificación incluirá todo intervalo numérico menor que caiga dentro del intervalo numérico mayor, como si todos los intervalos numéricos menores se hubieran anotado explícitamente en la presente.

Las partes relevantes de todos los documentos citados se incorporan en la presente como referencia; la mención de cualquier documento no debe interpretarse como admisión de que constituye una industria precedente con respecto a la presente invención. Composiciones Las composiciones de la presente invención contienen, por lo general, de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 1 %, de aproximadamente 0.0002 % a aproximadamente 0.5 %, o incluso de aproximadamente 0.0005 % a aproximadamente 0.3 % de fotoblanqueador, y de aproximadamente 0.0005 % a aproximadamente 0.1 %, de aproximadamente 0.001 % a aproximadamente 0.05 %, o incluso de aproximadamente 0.002 % a aproximadamente 0.03 % de lipasa. Estas composiciones pueden presentarse en cualquier forma, por ejemplo, como una composición de limpieza o una composición de tratamiento. La csp de cualquiera de los aspectos de las composiciones limpiadoras antes mencionadas está conformada por uno o más materiales auxiliares. Variantes de lipasa adecuadas La lipasa de la composición de la presente invención es una variante de lipasa sin extensión C-terminal, pero con mutaciones introducidas en ciertas regiones de una lipasa de origen, con lo que se reduce la tendencia a generar olor.

Lipasa de origen La lipasa de origen puede ser una lipasa fúngica con una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 50 % de homología, según se define en la sección "Homología y alineamiento", con la secuencia de la lipasa 7. lanuginosus mostrada en la SEQ ID NO: 2. La lipasa de origen puede ser un polipéptido de levaduras, tal como un polipéptido obtenido a partir de las levaduras Candida, Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces o Yarrowia; o, con mayor preferencia, un polipéptido de hongos filamentosos, tal como un polipéptido obtenido a partir de Acremonium, Aspergillus, Aureobasidium, Cryptococcus, Filobasidium, Fusarium, Humicola, Magnaporthe, Mucor, Myceliophthora, Neocallimastix, Neurospora, Paecilomyces, Penicillium, Piromyces, Schizophyllum, Talaromyces, Thermoascus, Thielavia, Tolypocladium o Trichoderma. En un aspecto preferido, la lipasa de origen es un polipéptido con actividad de lipasa proveniente de Saccharomyces carisbergensis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces diastaticus, Saccharomyces douglasii, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces norbensis o Saccharomyces oviformis. En otro aspecto preferido, la lipasa de origen es un polipéptido de Aspergillus aculeatus, Aspergillus awamori, Aspergillus fumigatus, Aspergillus foetidus, Aspergillus japonicus, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Aspergillus turbigensis, Fusarium bactridioides, Fusarium cerealis, Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium graminum, Fusarium heterosporum, Fusarium negundi, Fusarium oxysporum, Fusarium reticulatum, Fusarium roseum, Fusarium sambucinum, Fusarium sarcochroum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium sulphureum, Fusarium torulosum, Fusarium trichothecioides, Fusarium venenatum, Humicola insolens, Thermomyces lanoginosus (sinónimo: Humicola lanuginose), Mucor miehei, Myceliophthora thermophila, Neurospora crassa, Penicillium purpurogenum, Trichoderma harzianum, Trichoderma koningii, Trichoderma longibrachiatum, Trichoderma reesei o Trichoderma viride. En otro aspecto preferido, la lipasa de origen es una lipasa de Thermomyces. En un aspecto más preferido, la lipasa de origen es una lipasa de Thermomyces lanuginosus. En una modalidad aún más preferida, la lipasa de origen es la lipasa de SEQ ID NO: 2. Identificación de regiones y sustituciones. Las posiciones a las que se hace referencia desde la Región I hasta la Región IV a continuación son las posiciones de los residuos de aminoácidos en la secuencia identificada como SEQ ID NO: 2. Para hallar las posiciones (u homologas) correspondientes en una lipasa diferente, se utiliza el procedimiento descrito en Homología y alineamiento. Sustituciones en la Región I La Región I comprende los residuos de aminoácidos que rodean el residuo N-terminal de E1. En esta región se prefiere sustituir un aminoácido de la lipasa de origen con un aminoácido más positivo. Los residuos de aminoácidos que corresponden a las posiciones siguientes están comprendidos por la Región I: 1 a 11 y 223-239. Las siguientes posiciones son de especial interés: 1 , 2, 4, 8, 11 , 223, 227, 229, 231, 233, 234 y 236. Específicamente, se han identificado las siguientes sustituciones: X1 N/*, X4V, X227G, X231 R y X233R. En una modalidad preferida, la lipasa de origen tiene por lo menos 80 %, tal como 85 % o 90 %, tal como por lo menos 95 %, o 96 % o, 97 % o, 98 % o 99 %, de identidad con la SEQ ID NO: 2. En una modalidad especialmente preferida, la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2. Sustituciones en la Región II La Región II consiste en residuos de aminoácidos en contacto con el sustrato en un lado de la cadena de acilo y un lado de la parte de alcohol. En esta región se prefiere sustituir un aminoácido de la lipasa de origen con un aminoácido más positivo o con un aminoácido menos hidrófobo. Los residuos de aminoácidos que corresponden a las posiciones siguientes están comprendidos por la Región II: 202 a 211 y 249 a 269. Las siguientes posiciones son de especial interés: 202, 210, 211 , 253, 254, 255, 256, 259. Específicamente, se han identificado las siguientes sustituciones: X202G, X210KA //A, X255YA//A, X256K/R y X259G/M/Q/V. En una modalidad preferida, la lipasa de origen tiene por lo menos 80 %, tal como 85 % o 90 %, tal como por lo menos 95 %, o 96 %, o 97 %, o 98 % o 99 % de identidad con la SEQ ID NO: 2. En una modalidad especialmente preferida, la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2.

Sustituciones en la Región III La Región III consiste en residuos de aminoácidos que forman una estructura flexible y, por consiguiente, permiten que el sustrato entre en el sitio activo. En esta región se prefiere sustituir un aminoácido de la lipasa de origen con un aminoácido más positivo o un aminoácido menos hidrófobo. Los residuos de aminoácidos que corresponden a las posiciones siguientes están comprendidos por la Región III: 82 a 102. Las siguientes posiciones son de especial interés: 83, 86, 87, 90, 91 , 95, 96, 99. Específicamente, se han identificado las siguientes sustituciones: X83T, X86V y X90A/R. En una modalidad preferida, la lipasa de origen tiene por lo menos 80 %, tal como 85 % o 90 %, tal como por lo menos 95 %, o 96 % o, 97 % o, 98 % o 99 % de identidad con la SEQ ID NO: 2. En una modalidad especialmente preferida, la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2. Sustituciones en la Región IV La Región IV consiste en residuos de aminoácidos que se unen electrostáticamente a una superficie. En esta región se prefiere sustituir un aminoácido de la lipasa de origen con un aminoácido más positivo. Los residuos de aminoácidos que corresponden a las posiciones siguientes están comprendidos por la Región IV: 27 y 54 a 62. Las siguientes posiciones son de especial interés: 27, 56, 57, 58, 60. Específicamente, se han identificado las siguientes sustituciones: X27R, X58N/AG/T/P y X60V/S/G/N/R/K/A/L. En una modalidad preferida, la lipasa de origen tiene por lo menos 80 %, tal como 85 % o 90 %, tal como por lo menos 95 %, o 96 % o, 97 % o, 98 % o 99 % de identidad con la SEQ ID NO: 2. En una modalidad especialmente preferida, la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2. Aminoácidos en otras posiciones La lipasa de origen puede comprender, opcionalmente, sustituciones de otros aminoácidos, en particular, menos de 10 o menos de 5 sustituciones. Algunos ejemplos son sustituciones que corresponden a una o más de las posiciones 24, 37, 38, 46, 74, 81 , 83, 115, 127, 131, 137, 143, 147, 150, 199, 200, 203, 206, 211 , 263, 264, 265, 267 y 269 de la lipasa de origen. En una modalidad específica, hay una sustitución por lo menos en una de las posiciones que corresponden a la posición 81 , 143, 147, 150 y 249. En una modalidad preferida, por lo menos una de las sustituciones se selecciona del grupo que comprende X81Q/E, X143S/C/N/D/A, X147M/Y, X150G/K y X249R/I/L. La variante puede comprender sustituciones fuera de las Regiones I a IV definidas; la cantidad de sustituciones fuera de las Regiones I a IV definidas es, preferentemente, menor que seis, menor que cinco, menor que cuatro, menor que tres o menor que dos, tal como cinco, cuatro, tres, dos o uno. Alternativamente, la variante no comprende una sustitución fuera de las Regiones I a IV definidas. Otras sustituciones pueden hacerse, por ejemplo, de conformidad con los principios conocidos en la industria, por ejemplo, sustituciones descritas en las patentes WO 92/05249, WO 94/25577, WO 95/22615, WO 97/04079 y WO 97/07202.

Variantes de la lipasa de origen En un aspecto, la variante, cuando se compara con la lipasa de origen, comprende en total al menos tres sustituciones; esas sustituciones se seleccionan de uno o más de los siguientes grupos de sustituciones: a) al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos seis, tales como dos, tres, cuatro, cinco o seis sustituciones en la Región I; b) al menos una, al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos seis, tales como una, dos, tres, cuatro, cinco o seis sustituciones en la Región II; c) al menos una, al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos seis, tales como una, dos, tres, cuatro, cinco o seis sustituciones en la Región III; d) o al menos una, al menos dos, al menos tres, al menos cuatro, al menos cinco o al menos seis, tales como una, dos, tres, cuatro, cinco o seis sustituciones en la Región IV. La variante, comparada con la lipasa de origen de la variante, puede comprender sustituciones que corresponden a las sustituciones enunciadas más adelante en el Cuadro 1.

Cuadro 1 : Algunas variantes especiales.

En otra modalidad específica, la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2 y, por consiguiente, las variantes del Cuadro 1 son: Cuadro 2: Algunas variantes especiales de la SEQ ID NO: 2 Nomenclatura para las modificaciones de los aminoácidos Al describir las variantes de la lipasa de conformidad con la invención, se usa la siguiente nomenclatura para facilitar la referencia: Aminoácido(s) original(es):posición(es):aminoácido(s) sustituido(s) De acuerdo con esta nomenclatura, por ejemplo, la sustitución de ácido glutámico por glicina en la posición 195 se muestra como G195E. Una supresión de glicina en la misma posición se muestra como G195*, y la inserción de un residuo de aminoácido adicional, por ejemplo, lisina, se muestra como G195GK. En donde una lipasa específica contiene una supresión en comparación con otras lipasas y se realiza una inserción en esa posición, esto se indica como *36D para la inserción de un ácido aspártico en la posición 36. Las mutaciones múltiples se separan con signos más (+), es decir: R170Y+G195E, que representa mutaciones en las posiciones 170 y 195 que sustituyen tirosina y ácido glutámico por arginina y glicina, respectivamente. X231 indica el aminoácido en un polipéptido de origen que corresponde a la posición 231 , cuando se aplica el procedimiento de alineamiento descrito. X231 R indica que el aminoácido se reemplaza por R. Para la SEQ ID NO: 2 X es T y, por consiguiente, X231 R indica una sustitución de T por R en la posición 231. En donde el aminoácido en una posición (p. ej., 231) puede sustituirse por otro aminoácido seleccionado de un grupo de aminoácidos, por ejemplo, el grupo que comprende R y P e Y, esto se indicará como X231 R/P/Y.

En todos los casos se usa la abreviatura del aminoácido compuesta de una o tres letras aceptada por la IUPAC (Unión Internacional de Química Pura y Aplicada, por sus siglas en inglés). Agrupamiento de aminoácidos En esta especificación, los aminoácidos se clasifican en aminoácidos de carga negativa, de carga positiva o de carga eléctrica neutra, de acuerdo con su carga eléctrica a un pH de 10. Por ello, los aminoácidos negativos son E, D, C (cisteína) e Y, en especial E y D. Los aminoácidos positivos son R, K y H, en especial, R y K. Los aminoácidos neutros son G, A, V, L, I, P, F, W, S, T, M, N, Q y C cuando forman parte de un puente disulfuro. Una sustitución con otro aminoácido en el mismo grupo (negativo, positivo o neutro) se denomina sustitución conservadora. Los aminoácidos neutros pueden dividirse en hidrófobos o no polares (G, A, V, L, I, P, F, W y C como parte de un puente disulfuro) e hidrófilos o polares (S, T, M, N, Q). Identidad de los aminoácidos La relación entre dos secuencias de aminoácidos o entre dos secuencias de nucleótidos se describe por medio del parámetro "identidad". Para los fines de la presente invención, el alineamiento de dos secuencias de aminoácidos se determina utilizando el programa Needle, versión 28.0 del paquete EMBOSS (http://emboss.org). El programa Needle implementa el algoritmo de alineamiento global descrito en Needleman, S. B. y Wunsch, C. D. (1970) J. Mol. Biol. 48, 443-453. La matriz de sustitución utilizada es BLOSUM62, con una penalización de apertura de un gap es 10, y la penalización por extensión de gap es 0.5. El grado de identidad entre una secuencia de aminoácidos de la presente invención ("secuencia de la invención"; p. ej., aminoácidos 1 a 269 de la SEQ ID NO:2) y una secuencia de aminoácidos diferente ("secuencia foránea") se calcula como el número de coincidencias exactas en un alineamiento de las dos secuencias dividido por la longitud de la "secuencia de la invención" o la longitud de la "secuencia foránea", cualquiera de ellas que sea la más corta. El resultado se expresa en porcentaje de identidad. Una concordancia exacta se produce cuando la "secuencia de la invención" y la "secuencia foránea" tienen residuos idénticos de aminoácidos en las mismas posiciones de la superposición. La longitud de una secuencia es el número de residuos de aminoácidos en la secuencia (p. ej., la longitud de la SEQ ID NO: 2 es 269). La lipasa de origen tiene una identidad de aminoácidos de al menos 50 % con la lipasa T. lanuginosus (SEQ ID NO: 2), en especial, al menos 55 %, al menos 60 %, al menos 75 %, al menos 85 %, al menos 90 %, mayor que 95 % o mayor que 98 %. En una modalidad específica, la lipasa de origen es idéntica a la lipasa T. lanuginosus (SEQ ID NO:2). El procedimiento anterior puede usarse para calcular la identidad y también la homología y el alineamiento. En el contexto de la presente invención, la homología y el alineamiento se han calculado como se describe más adelante.

Homología y alineamiento Para los propósitos de la presente invención, el grado de homología puede determinarse adecuadamente por medio de programas informáticos conocidos en la industria, tal como el programa GAP incluido en el paquete GCG (Program Manual for the Wisconsin Package (Manual del programa para el paquete Wisconsin), Versión 8, agosto de 1994, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, EE.UU. 53711) (Needleman, S.B. and Wunsch, C.D., (1970), "Journal of Molecular Biology" (Revista de biología molecular), 48, 44345), configurando GAP de la siguiente manera para la comparación de secuencias de polipéptidos: Penalización por creación de gap: 3.0 y penalización por extensión del gap: 0.1. En la presente invención, las posiciones correspondientes (u homologas) en las secuencias de las lipasas de Absidia reflexa, Absidla corymbefera, Rhizmucor miehei, Rhizopus delemar, Aspergillus niger, Aspergillus tubigensis, Fusarium oxysporum, Fusarium heterosporum, Aspergillus oryzea, Penicilium camembertii, Aspergillus foetidus, Aspergillus niger, Thermomyces lanoginosus (sinónimo: Humicola lanuginose) y Landerina penisapora están definidas por el alineamiento ilustrado en la Figura 1. Para hallar las posiciones homologas en las secuencias de lipasa que no se muestran en el alineamiento, se alinea la secuencia de interés con las secuencias que se muestran en la Figura 1. La nueva secuencia se alinea con el alineamiento presente en la Figura 1 utilizando el alineamiento de GAP con la secuencia más homologa hallada por el programa GAP. El programa GAP está incluido en el paquete GCG (Program Manual for the Wisconsin Package (Manual del programa para el paquete Wisconsin), Versión 8, agosto de 1994, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, EE.UU. 53711) (Needleman, S.B. and Wunsch, C.D., (1970), "Journal of Molecular Biology" (Revista de biología molecular), 48, 44345). Para comparar las secuencias de los polipéptidos se usan las siguientes configuraciones: penalización de creación del gap es 3.0 y la penalización de extensión del gap es 0.1. La lipasa de origen tiene una homología de al menos 50 % con la lipasa T. lanuginosus (SEQ ID NO: 2), especialmente, al menos 55 %, al menos 60 %, al menos 75 %, al menos 85 %, al menos 90 %, mayor que 95 % o mayor que 98 %. En una modalidad específica, la lipasa de origen es idéntica a la lipasa T. lanuginosus (SEQ ID NO:2). Hibridación La presente invención se refiere también a polipéptidos aislados que tienen actividad de lipasa y que están codificados por polinucleótidos que se hibridan bajo condiciones de muy baja astringencia, preferentemente, condiciones de baja astringencia, con mayor preferencia, condiciones de astringencia media, con mayor preferencia, condiciones de astringencia media-alta, todavía con mayor preferencia, condiciones de alta astringencia y, con la máxima preferencia, condiciones de muy alta astringencia con (i) nucleótidos 178 a 660 de la SEQ ID NO: 1 , (¡i) la secuencia del ADNc contenida en nucleótidos 178 a 660 de SEQ ID NO:1, (iii) una subsecuencia de (i) o (ii), o (iv) una cadena complementaria de (i), (ii) o (iii) (J. Sambrook, E.F. Fritsch, y T. Maniatus, 1989, Molecular Cloning, A Laboratory Manual (Clonación molecular, Manual de laboratorio), 2o edición, Cold Spring Harbor, New York). Una subsecuencia de SEQ ID NO: 1 contiene al menos 100 nucleótidos contiguos o, preferentemente, al menos 200 nucleótidos contiguos. Además, la subsecuencia puede codificar un fragmento polipeptídico que tiene actividad de lipasa. Para sondas largas, de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, se definen condiciones de astringencia que van de muy bajas a muy altas como prehibridación o hibridación a 42 °C en 5X SSPE, 0.3 % de SDS, 200 ug/mL de ADN de esperma de salmón desnaturalizado y fragmentado y, o bien 25 % de formamida para condiciones de astringencia muy bajas y bajas, 35 % de formamida para condiciones de astringencia intermedias y de intermedias a altas, o 50 % de formamida para condiciones de astringencia altas y muy altas, siguiendo los procedimientos estándar de técnicas de análisis Southern blotting durante un período que es, óptimamente, de 12 a 24 horas. Para sondas largas de por lo menos 100 nucleótidos de longitud, el material portador se lava finalmente tres veces, cada vez durante 15 minutos, utilizando 2X SSC, 0.2 % de SDS, preferentemente, por lo menos a 45 °C (condiciones de astringencia muy bajas), con mayor preferencia, por lo menos a 50 °C (astringencia baja), con mayor preferencia, por lo menos a 55 °C (astringencia intermedia), con mayor preferencia, por lo menos a 60 °C (astringencia de intermedia a alta), incluso con mayor preferencia, por lo menos a 65 °C (astringencia alta) y, con la máxima preferencia, por lo menos a 70 °C (astringencia muy alta). Secuencia de ADN, vector de expresión, célula huésped, producción de lipasa La invención proporciona una secuencia de ADN que codifica la lipasa de la invención, un vector de expresión que contiene la secuencia de ADN y una célula huésped transformada que contiene la secuencia de ADN o el vector de expresión. Éstos pueden obtenerse por métodos conocidos en la industria. La invención proporciona también un método para producir la lipasa por medio del cultivo de la célula huésped transformada en condiciones propicias para la producción de la lipasa y para recuperar la lipasa del caldo obtenido. El método puede practicarse de acuerdo con los principios conocidos en la industria. Actividad de lipasa - Actividad de lipasa en tributirina a pH neutro (LU) Se prepara un sustrato para la lipasa por medio de la emulsificación de la tributirina (tributirato de glicerina) usando goma arábiga como emulsionante.

La hidrólisis de la tributirina a 30 °C, a pH 7 ó 9 continúa en un experimento de titulación a pH estático. Una unidad de actividad de lipasa (1 LU) es igual a la cantidad de enzima capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico/minuto a pH 7. - Beneficio-Riesgo El factor Beneficio-Riesgo que describe el rendimiento comparado con el riesgo menor de olor se define como: BR (beneficio-riesgo) = Pa g (rendimiento relativo promedio) / R- Las variantes lipasa descritas en la presente pueden tener valores de BR mayores que 1 , mayores que 1.1 , o incluso mayores que 1 a aproximadamente 1000. -Rendimiento relativo promedio El procedimiento para calcular el rendimiento relativo promedio (RPavg) se encuentra en el Ejemplo 5 de la presente especificación. Las variantes lipasa descritas en la presente pueden tener un rendimiento relativo promedio (RPavg) de por lo menos 0.8, por lo menos 1.1 , por lo menos 1.5, o incluso de por lo menos 2 a aproximadamente 1000. Fotoblanqueadores adecuados Los fotoblanqueadores adecuados incluyen fotoblanqueadores catalíticos y fotoiniciadores. Los fotoblanqueadores catalíticos adecuados incluyen fotoblanqueadores catalíticos seleccionados del grupo que comprende ftalocianinas solubles en agua de la fórmula: (1a) [Mß]-[PCHQ,]X" O ( b> [MeMpcí-tal en donde: PC es el sistema de anillos de la ftalocianina; Me es Zn; Fe(ll); Ca; Mg; Na; K; Al-Z^ Si(IV); P(V); Ti(IV); Ge(IV); Cr(VI); Ga(lll); Zr(IV); ln(lll); Sn(IV) o Hf(VI); Zi es un ion haluro; sulfato; nitrato; carboxilato; alcanolato o hidroxilo; q es 0; 1 ó 2; r es de 1 a 4; Q1 , es un grupo sulfo o carboxilo; o un radical de la fórmula -S02X2-RrX3+; -0-R X3+; o -(CH2),-Y?+; en donde R-i es un alquileno C-i-Cß ramificado o no ramificado; o 1 ,3- o 1 ,4-fenileno; X2 es -NH-; o -N-alquilo C C5; X3+ es un grupo de la fórmula en el caso en donde Ri = alquileno CrC8, también un grupo de la fórmula Y/ es un grupo de la fórmula t es 0 ó 1 las fórmulas anteriores R2 y R3 son, independientemente entre sí, alquilo C Cß R4 es alquilo C1-C5; cicloalquilo C5-C7 o NR7Rß; R5 y R6 son, independientemente entre sí, alquilo C1-C5; R y Re son, independientemente entre sí, hidrógeno o alquilo C1-C5; R9 y R10 son, independientemente entre sí, alquilo C-?-C6 no sustituido o alquilo C?-C6 sustituido con hidroxilo, ciano, carboxilo, carbo-alcoxi CrC6, alcoxi C-pCß, fenilo, naftilo o piridilo; u es de 1 a 6; Ai es una unidad que completa un heterociclo aromático nitrogenado de 5a 7 miembros, el cual también puede contener, donde corresponda, uno o dos átomos adicionales de nitrógeno como miembros del anillo, y B1 es una unidad que completa un heterociclo nitrogenado saturado de 5 a 7 miembros, el cual también puede contener, donde corresponda, de 1 a 2 átomos de nitrógeno, oxígeno o azufre como miembros del anillo; Q2 es hidroxilo; alquilo d- C22; alquilo C3-C22 ramificado; alquenilo C2- C22; alquenilo C3-C22 ramificado y mezclas de éstos; alcoxi C C22; un radical sulfo o carboxilo; un radical de la fórmula ] -SO2(CH2)VOSO3M; -SO2(CH2)v-SO3M; R17 R« ~ n i 17 • ~SQ,-X,-{CrU-N -CH,-Y,-(CH,)„-N -S0?-N-(CH?)v OSO3 - 2 2w *R1 z 2 2V ^R< R« RI4 cr Cl" un radical alcoxi ramificado de la fórmula CH?-(0)s{CH -(OCH H2) -B, -O-CH, — O-CH CH-(0)a(CH2)l7(OCH?CHz)c-B2 ; \ CH^OWCH?-(OCH,CH '22V'ü-B w2, CH2-(0)a(CH2)b-(OCH2CH2)c-Ba una unidad alquiletilenoxi de la fórmula -s.)d-(CH2)b(OCH2CH2)3-B3 o un éster de la fórmula COOR 13 en donde B2 es hidrógeno; hidroxilo; alquilo C1-C30; alcoxi C-r C30; -C02H; -CH2COOH; -SOa-M^ - OSOa-M^ -POa^M-,; -OPOS^MT ; y mezclas de éstos; B3 es hidrógeno; hidroxilo; -COOH; -SO3-M1; -OS03 M-i o alcoxi Mi es un catión soluble en agua; Ti es -O-; o -NH-; X1 y X4 son, independientemente entre sí, -O-; -NH- o -N-alquilo C1-C5; R11 y R12 son, independientemente entre sí, hidrógeno; un grupo sulfo y sales de éste; un grupo carboxilo y sales de éste o un grupo hidroxilo; por lo menos uno de los radicales R-n y R12 son un grupo sulfo o carboxilo o sales de éstos, Y2 es -O-; -S-; -NH- o -N-alquilo C1-C5; R-13 y R-14 son, independientemente entre sí, hidrógeno; alquilo CrC6; hidroxi-alquilo C-?-C6; ciano-alquilo C-?-C6; sulfo-alquilo C1-C6; carboxi o halógeno-alquilo C-i-Cß; fenilo no sustituido o fenilo sustituido por halógeno, alquilo C1-C4 O alcoxi C1-C4; sulfo o carboxilo o R13 y R-u junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un anillo heterocíclico saturado de 5 ó 6 miembros que también puede contener además un átomo de nitrógeno u oxígeno como miembro del anillo; R15 y R16 son, independientemente entre sí, alquilo C-i-Cß o radicales aril-alquilo C?-C6; R-?7 es hidrógeno; un alquilo d-Cß no sustituido o alquilo Ci-Ce sustituido con halógeno, hidroxilo, ciano, fenilo, carboxilo, carbo- alcoxi C-1-C6 O alcoxi C-i-Cß; Ríe es alquilo C C22; alquilo C3-C22 ramificado; alquenilo C C22 o alquenilo C3- C22 ramificado; glicol C3-C22; alcoxi C1-C22; alcoxi C3-C22 ramificado y mezclas de éstos; M es hidrógeno; o un ion de metal alcalino o ion de amonio, Z2" es un ion de cloro, bromo, alquilsulfato o arilsulfato; a es 0 ó 1 ; b es de 0 a 6; c es de O a 100; d es 0 ó 1 ; e es de 0 a 22; v es un entero de 2 a 12; w es 0 ó 1 ; y A" es un anión orgánico o inorgánico, y s es igual a r en los casos de aniones monovalentes A " y menor o igual que r en los casos de aniones polivalentes, siendo necesario que los A compensen la carga positiva; en donde, cuando r no es igual a 1 , los radicales Q1 pueden ser ¡guales o diferentes, y en donde el sistema de anillos de la ftalocianina también puede comprender otros grupos de solubilización.

Otros fotoblanqueadores catalíticos adecuados incluyen los colorantes de xanteno y mezclas de éstos. En otro aspecto, los fotoblanqueadores catalíticos adecuados incluyen fotoblanqueadores catalíticos seleccionados del grupo que comprende ftalocianina de zinc sulfonada, ftalocianina de aluminio sulfonada, Eosina Y (tetrabromofluoresceína, Rojo ácido 87), floxina B, Rosa de Bengala, Rojo alimenticio 14 y mezclas de éstos. En otro aspecto, un fotoblanqueador adecuado puede ser una mezcla de ftalocianina de zinc sulfonada y ftalocianina de aluminio sulfonada; la relación en peso entre la ftalocianina de zinc sulfonada y la ftalocianina de aluminio sulfonada de esta mezcla es mayor que 1 , mayor que 1 pero menor que aproximadamente 100, o incluso de aproximadamente 1 a aproximadamente 4. Los fotoiniciadores adecuados incluyen fotoiniciadores seleccionados del grupo que comprende aromáticos como 1 ,4-quinonas, tales como antraquinonas y naftaquinonas; alfa-amino cetonas, en especial las que contienen una porción benzoílo, denominadas de otro modo alfa-amino acetofenonas; alfa-hidroxi cetonas, en especial alfa-hidroxi acetofenonas; fotoiniciadores que contienen fósforo, incluidos los óxidos y sulfuros de monoacil, diacil y triacilfosfina; dialcoxi acetofenonas; alfa-haloacetofenonas; óxidos de triacilfosfina; fotoiniciadores de benzoína y a base de benzoína, y mezclas de éstos. En otro aspecto, los fotoiniciadores adecuados incluyen fotoiniciadores seleccionados del grupo que comprende 2-etil antraquinona; vitamina K3; 2-sulfato-antraquinona; 2-metil 1-[4-fenil]-2-morfolinopropan-1-ona (Irgacure® 907); (2-bencil-2-dimetilamino-1-(4- morfolinofenil)-butan-1-ona (Irgacure® 369); (1-[4-(2-hidroxietoxi)-fenil]-2 hidroxi-2-metil-1-propan-1-ona) (Irgacure® 2959); 1-hidroxi-ciclohexil-fenil-cetona (Irgacure® 184); oligo[2-hidroxi 2-metil-1-[4(1-metil)-fenil] propanona (Esacure® KIP 150); óxido de fenil bis(2,4,6- trimetilbenzoil)-fosfina, óxido de fenil bis(2,4,6-trimetilbenzoilo)-fosfina (Irgacure® 819); etiléster del ácido fenil (2,4,6 trimetilbenzoil) fosfínico (Lucirin® TPO-L); y mezclas de éstos. Los fotoblanqueadores mencionados previamente se pueden utilizar combinados (se puede utilizar cualquier mezcla de fotoblanqueadores). Los fotoblanqueadores adecuados pueden obtenerse de Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, EE.UU.; Frontier Scientific, Logan, Utah, EE.UU.; Ciba Specialty Chemicals, Basel, Suiza; BASF, Ludwigshafen, Alemania; Lamberti S.p.A, Gallarate, Italia; Dayglo Color Corporation, Mumbai, India; Organic Dyestuffs Corp., East Providence, Rhode Island, EE.UU.; o prepararse de acuerdo con los ejemplos incluidos en la presente. Materiales auxiliares Aunque no es esencial para los propósitos de la presente, la lista no limitante de componentes adicionales incluidos más adelante es adecuada para utilizarse en las composiciones de la presente y se pueden incorporar convenientemente en ciertas modalidades preferidas de la invención, por ejemplo, para facilitar o mejorar el rendimiento de limpieza, para tratar el sustrato que se limpiará o para modificar la estética de la composición limpiadora, como es el caso de los perfumes, colorantes, tintes o lo similar. La naturaleza precisa de estos componentes adicionales y los niveles de su incorporación dependerán de la forma física de la composición y del tipo de operación de limpieza en la que se utilizarán. Los materiales adicionales adecuados incluyen, pero no se limitan a, surfactantes, aditivos, agentes quelantes, agentes inhibidores de transferencia de colorantes, dispersantes, enzimas adicionales y estabilizadores de enzimas, materiales catalíticos, activadores de blanqueador, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados, agentes dispersantes poliméricos, agentes de remoción/antirredepósito de suciedad de arcilla, abrillantadores, supresores de espuma, colorantes, agentes tonalizadores de telas, perfumes, agentes elastizantes de estructuras, suavizantes de telas, portadores, hidrótropos, auxiliares de procesamiento, solventes o pigmentos. Además de la exposición siguiente, los ejemplos adecuados de estos auxiliares adicionales y concentraciones de uso se incluyen en las patentes de los EE.UU. núms. 5,576,282, 6,306,812 B1 y 6,326,348 B1 , las cuales se incorporan como referencia. Como se mencionó anteriormente, los ingredientes adicionales no son esenciales para las composiciones de los solicitantes. De este modo, ciertas modalidades de las composiciones de los solicitantes no contienen uno o más de los siguientes materiales adicionales: surfactantes, aditivos, agentes quelantes, agentes inhibidores de transferencia de colorantes, dispersantes, enzimas adicionales y estabilizadores de enzimas, materiales catalíticos, activadores de blanqueador, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados, agentes dispersantes poliméricos, agentes de remoción/antirredepósito de suciedad de arcilla, abrillantadores, supresores de espuma, colorantes, perfumes, agentes elastizantes de estructuras, suavizantes de telas, portadores, hidrótropos, auxiliares de procesamiento, solventes y pigmentos. Sin embargo, cuando la composición contiene uno o más componentes adicionales, ese o esos componentes deben estar presentes como se especifica a continuación: Agentes blanqueadores. Las composiciones limpiadoras de la presente invención pueden comprender uno o más agentes blanqueadores. - Los agentes blanqueadores adecuados distintos a los catalizadores blanqueadores incluyen fotoblanqueadores, activadores de blanqueador, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados y mezclas de éstos. En general, cuando se utiliza un agente blanqueador, las composiciones de la presente invención pueden comprender de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 50 %, o incluso de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 25 % del agente blanqueador, en peso de la composición de limpieza de la presente. Los ejemplos de agentes blanqueadores adecuados incluyen: (1) Perácidos preformados: Los perácidos preformados adecuados incluyen, pero no se limitan a, compuestos seleccionados del grupo que comprende sales y ácidos percarboxílicos, sales y ácidos percarbónicos, sales y ácidos perimídicos, sales y ácidos peroximonosulfúricos, por ejemplo, Oxzone ®, y mezclas de éstos. Los ácidos percarboxílicos adecuados incluyen perácidos hidrófobos e hidrófilos que tienen la fórmula R-(C=0)0-0-M, en donde R es un grupo alquilo, opcionalmente ramificado, que tiene, cuando el perácido es hidrófobo, de 6 a 14 átomos de carbono o de 8 a 12 átomos de carbono y, cuando el perácido es hidrófilo, menos de 6 átomos de carbono o incluso menos de 4 átomos de carbono; y M es un contraión, por ejemplo, sodio, potasio o hidrógeno; (2) fuentes de peróxido de hidrógeno: por ejemplo, sales de perhidrato inorgánico, incluidas las sales de metales alcalinos, tales como las sales sódicas de perborato (generalmente mono o tetrahidrato), percarbonato, persulfato, perfosfato, sales persilicato, y mezclas de éstos. En un aspecto de la invención, las sales inorgánicas de perhidrato se seleccionan del grupo que comprende sales sódicas de perborato, percarbonato y mezclas de éstas. Cuando se utilizan, las sales de perhidrato inorgánico están presentes, por lo general, en cantidades de 0.05 a 40 % en peso, o de 1 a 30 % en peso de la composición total y, por lo general, se incorporan en esas composiciones como un sólido cristalino que puede estar recubierto. Los recubrimientos adecuados incluyen sales inorgánicas, tales como sales de silicato, carbonato o borato de metales alcalinos o mezclas de éstas, o materiales orgánicos, tales como polímeros dispersables o solubles en agua, ceras, aceites o jabones grasos; y (3) activadores de blanqueador que tienen R-(C=0)-L, en donde R es un grupo alquilo, opcionalmente ramificado, que tiene, cuando el activador blanqueador es hidrófobo, de 6 a 14 átomos de carbono o de 8 a 12 átomos de carbono y, cuando el activador blanqueador es hidrófilo, menos de 6 átomos de carbono o incluso menos de 4 átomos de carbono; y L es el grupo saliente. Los ejemplos de grupos salientes adecuados son ácido benzoico y derivados de éste, en especial el bencenosulfonato. Los activadores de blanqueador adecuados incluyen dodecanoil oxibenceno sulfonato, decanoil oxibenceno sulfonato, ácido decanoil oxibenzoico o sales de éste, 3,5,5- trimetil hexanoiloxibenceno sulfonato, tetraacetiletilendiamina (TAED) y nonanoiloxibenceno sulfonato (NOBS). Los activadores de blanqueador adecuados también se describen en la patente WO 98/17767. Aunque puede emplearse cualquier activador de blanqueador adecuado, en un aspecto de la invención, la composición de limpieza de la presente puede comprender NOBS, TAED o mezclas de éstos. Cuando está presente, por lo general, el perácido o activador de blanqueador está presente en la composición en una cantidad de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 60 % en peso, de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 40 % en peso o incluso de aproximadamente 0.6 a aproximadamente 10 % en peso, en base a la composición. Uno o más de éstos perácidos hidrófobos o precursores pueden utilizarse en combinación con uno o más de éstos perácidos hidrófilos o precursores. Las cantidades de la fuente de peróxido de hidrógeno y perácido o activador de blanqueador se pueden seleccionar para que la relación molar entre el oxígeno disponible (de la fuente de peróxido) y el perácido sea de 1 :1 a 35:1 , o incluso de 2:1 a 10:1. Surfactantes: las composiciones limpiadoras de conformidad con la presente invención pueden comprender un surfactante o sistema de surfactantes, en donde el surfactante puede seleccionarse de surfactantes no iónicos, surfactantes aniónicos, surfactantes catiónicos, surfactantes anfolíticos, surfactantes zwitteriónicos, surfactantes no iónicos semipolares y mezclas de éstos. Cuando se usa un surfactante, éste se encuentra presente, por lo general, en una concentración de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 % o incluso de aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 % en peso de la composición de la presente. Aditivos: las composiciones limpiadoras de la presente invención pueden comprender uno o más aditivos o sistemas aditivos detergentes. Por lo general, cuando se utiliza un aditivo, la composición comprenderá, al menos, aproximadamente 1 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 60 % o, incluso, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 40 % del aditivo, en peso de la composición. Los aditivos incluyen, pero no se limitan a, sales de metales alcalinos, amonio y alcanolamonio de polifosfatos, silicatos de metales alcalinos, carbonatos de metales alcalinos y alcalinotérreos, aditivos de aluminosilicato y compuestos de policarboxilato, hidroxipolicarboxilatos de éter, copolímeros de anhídrido maleico con etileno o vinil metil éter, ácido, 1 , 3, 5-trihidroxibenceno-2, 4, 6-trisulfónico, y ácido carboximetiloxisuccínico, las diversas sales de metales alcalinos, amonio y amonio sustituido de ácidos poliacéticos, tales como ácido etilendiaminotetraacético y ácido nitrilotriacético, y también los policarboxilatos, tales como ácido melifico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido oxidisuccínico, ácido polimaléico, ácido benceno 1 ,3,5-tricarboxílico, ácido carboximetiloxisuccínico, y sales solubles de éstos. Agentes quelantes: las composiciones limpiadoras de la presente pueden contener un agente quelante. Los agentes quelantes adecuados incluyen agentes quelantes de cobre, hierro o manganeso y mezclas de éstos. Cuando se utiliza un agente quelante, la composición de la presente puede comprender de aproximadamente 0.005 % a aproximadamente 15 % o incluso de aproximadamente 3.0 % a aproximadamente 10 % de agente quelante en peso de la composición de la presente. Agentes inhibidores de transferencia de colorantes: las composiciones limpiadoras de la presente invención también pueden incluir uno o más agentes inhibidores de transferencia de colorantes. Los agentes poliméricos inhibidores de transferencia de colorantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, polímeros de polivinilpirrolidona, polímeros de poliamina N-óxido, copolímeros de N-vinilpirrolidona y N-vinilimidazol, poliviniloxazolidonas y polivinilimidazoles o mezclas de éstos. Cuando se incluyen en la composición, los agentes inhibidores de transferencia de colorantes pueden estar presentes en concentraciones de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 0.01 % a aproximadamente 5 % o incluso de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 3 % en peso de la composición. Abrillantadores: las composiciones limpiadoras de la presente invención pueden también comprender componentes adicionales que pueden teñir los artículos que se limpian, por ejemplo, abrillantadores fluorescentes. Las concentraciones adecuadas de abrillantadores fluorescentes incluyen niveles inferiores de aproximadamente 0.01 , de aproximadamente 0.05, de aproximadamente 0.1 o incluso de aproximadamente 0.2 % en peso, a niveles superiores de 0.5 o incluso 0.75 % en peso. Dispersantes: las composiciones de la presente invención también pueden contener dispersantes. Los materiales orgánicos solubles en agua adecuados incluyen los ácidos homo o copoliméricos o sus sales, en las cuales el ácido policarboxílico comprende al menos dos radicales carboxilo separados entre sí por no más de dos átomos de carbono. Enzimas adicionales: las composiciones de limpieza pueden comprender una o más enzimas que proporcionan un rendimiento de limpieza o beneficios de cuidado de telas. Los ejemplos de enzimas adecuadas incluyen, pero no se limitan a, hemicelulasas, peroxidasas, proteasas, celulasas, xilanasas, lipasas, fosfolipasas, esterasas, cutinasas, pectinasas, mannanasas, pectato liasas, queratinasas, reductasas, oxidasas, fenoloxidasas, lipoxigenasas, ligninasas, pululanasas, tanasas, pentosanasas, malanasas, ß-glucanasas, arabinosidasas, hialuronidasas, condroitinasas, laccasas y amilasas, o mezclas de éstas. Una combinación típica es una mezcla de enzimas que comprende, por ejemplo, una proteasa y lipasa junto con amilasa. Cuando se incluyen en una composición de limpieza, las enzimas adicionales mencionadas anteriormente pueden estar presentes en concentraciones de aproximadamente 0.00001 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 0.0001 % a aproximadamente 1 % o incluso de aproximadamente 0.001 % a aproximadamente 0.5 % de proteína enzimática en peso de la composición. Estabilizadores de enzimas: las enzimas para detergentes pueden estabilizarse por diversas técnicas. Las enzimas empleadas aquí pueden estabilizarse por la presencia de fuentes de iones de magnesio o calcio solubles en agua en las composiciones terminadas que proporcionen los iones a las enzimas. Cuando las composiciones acuosas comprenden proteasa, puede añadirse un inhibidor reversible de la proteasa, tal como un compuesto de boro, para mejorar aún más la estabilidad. Complejos catalíticos de metales: las composiciones de los solicitantes pueden incluir complejos catalíticos de metales. - Un tipo de catalizador de blanqueador a base de metal es un sistema catalizador que comprende un catión de metal de transición de actividad catalizadora blanqueadora definida, tales como cationes de cobre, hierro, titanio, rutenio, tungsteno, molibdeno o manganeso, un catión auxiliar de metal de poca actividad o sin actividad catalizadora blanqueadora, tal como cationes de zinc o aluminio, y un secuestrante con constantes definidas de estabilidad para los cationes de metal catalíticos y auxiliares, en especial ácido etilendiaminotetraacético, ácido etilendiaminotetra(metilen)fosfónico y sales solubles en agua de éstos. Estos catalizadores se describen en la patente de los EE.UU. núm. 4,430,243. Si se desea, las composiciones en la presente pueden catalizarse por medio de un compuesto de manganeso. Estos compuestos y los niveles de uso son muy conocidos en la industria e incluyen, por ejemplo, los catalizadores a base de manganeso descritos en la patente de los EE.UU. núm. 5,576,282. Los catalizadores blanqueadores de cobalto útiles en la presente son conocidos y se describen, por ejemplo, en las patentes de los EE.UU. núms. 5,597,936; 5,595,967. Estos catalizadores de cobalto se preparan fácilmente mediante procedimientos conocidos, tales como los que se describen, por ejemplo, en las patentes de los EE.UU. núms. 5,597,936, y 5,595,967. Las composiciones de la presente también pueden incluir adecuadamente un complejo de metal de transición con ligandos, tal como bispidonas (patente WO 05/042532 A1) o ligandos rígidos macropolicíclicos -abreviados como "MRL". Por una cuestión práctica y no en forma limitante, las composiciones y los procesos de la presente pueden ajustarse para proporcionar como mínimo una parte por cien millones de las especies activas de MRL en el medio de lavado acuoso y, por lo general, preferentemente, proporcionarán de aproximadamente 0.005 ppm a aproximadamente 25 ppm, de aproximadamente 0.05 ppm a aproximadamente 10 ppm, o incluso de aproximadamente 0.1 ppm a aproximadamente 5 ppm, del MRL en el licor de lavado.

Los metales de transición adecuados en el catalizador de blanqueador de metal de transición incluyen, por ejemplo, manganeso, hierro y cromo. Los MRL adecuados incluyen 5,12-dietil-1 ,5,8,12-tetraazobiciclo[6.6.2]hexadecano. Los MRL de metales de transición adecuados se preparan fácilmente mediante procedimientos conocidos, tal como se describe, por ejemplo, en la patente WO 00/32601 , y en la patente de los EE.UU. núm. 6,225,464. Solventes: los solventes adecuados incluyen agua y otros solventes, como fluidos lipofílicos. - Los ejemplos de fluidos lipofílicos adecuados incluyen siloxanos, otras siliconas, hidrocarburos, glicoléteres, derivados de glicerina, tales como éteres de glicerina, aminas perfluoradas, solventes perfluorados y de hidrofluoroéter, solventes orgánicos no fluorados poco volátiles, solventes a base de dioles, otros solventes compatibles con el medio ambiente y mezclas de éstos. Procesos para preparar composiciones Las composiciones de la presente invención pueden formularse en cualquier forma adecuada y prepararse mediante cualquier proceso seleccionado por quien las formula; los ejemplos no limitantes de estos procesos se describen en los ejemplos de los solicitantes y en las patentes de los EE.UU. núms. 4,990,280; 20030087791 A1 ; 20030087790A1 ; 20050003983A1 ; 20040048764A1 ; 4,762,636; 6,291 ,412; 20050227891 A1 ; la patente europea EP 1070115A2; las patentes de los EE.UU. núms. 5,879,584; ,691 ,297; 5,574,005; 5,569,645; 5,565,422; 5,516,448; 5,489,392; 5,486,303, todas ellas incorporadas en la presente como referencia. Método de uso La presente invención incluye un método para limpiar o tratar un sitio, entre otros, una superficie o tela. Estos métodos incluyen las etapas de poner en contacto una modalidad de la composición limpiadora de los solicitantes, en forma pura o diluida en un líquido de lavado, con al menos una porción de una superficie o tela para luego, opcionalmente, enjuagar la superficie o tela. La superficie o tela se pueden lavar antes de la etapa de enjuague. Para los propósitos de la presente invención, el lavado incluye, pero no se limita a, restregado y agitación mecánica. Como apreciará un experimentado en la industria, las composiciones limpiadoras de la presente invención son ideales para utilizarse en aplicaciones de lavandería. En consecuencia, la presente invención incluye un método para el lavado de telas. El método comprende el paso de poner en contacto una tela que se lavará con la solución de limpieza para lavandería que comprende al menos una modalidad de la composición limpiadora de los solicitantes, aditivo de limpieza, o una mezcla de éstos. Se puede utilizar cualquier tela que el consumidor habitualmente lave en condiciones normales. La solución tiene, preferentemente, un pH de aproximadamente 8 a aproximadamente 10.5. Las composiciones pueden emplearse en concentraciones de aproximadamente 500 ppm a aproximadamente 15,000 ppm en solución. Las temperaturas del agua varían, por lo general, de aproximadamente 5 °C a aproximadamente 90 °C. La relación de agua-tela es, por lo general, de aproximadamente 1 :1 a aproximadamente 30:1.

Ejemplos Ejemplos de variantes de lipasas Los químicos usados como amortiguadores y sustratos son productos comerciales de un grado al menos reactivo. Medios y soluciones: LAS (Surfac PS™) y zeolita A (Wessalith P™). Otros ingredientes usados son reactivos estándar de laboratorio. - Materiales: EMPA221 , de EMPA St. Gallen, Lerchfeldstrasse 5, CH9014 St. Gallen, Suiza Ejemplo 1 : Producción de la enzima Se forma un plásmido que contiene el gen que codifica la lipasa y se transforma en una célula huésped adecuada usando métodos estándar en la industria. Se lleva a cabo la fermentación como una fermentación de alimentación por lotes utilizando un medio de temperatura constante a 34 °C y un volumen inicial de 1.2 litros. Se fija el pH inicial del medio en 6.5.

Cuando el pH ha aumentado a 7.0 se mantiene este valor mediante la adición de 10 % de H3P04. Se controla el nivel de oxígeno disuelto en el medio variando la velocidad de agitación y utilizando un índice fijo de aereación de 1.0 litros de aire por litro del medio por minuto. La velocidad de adición de la alimentación se mantiene a un nivel constante durante toda la fase de alimentación por lote. El medio del lote contenía jarabe de maltosa como fuente de carbono, urea y extracto de levadura como fuente de nitrógeno y una mezcla de metales traza y sales. La alimentación añadida continuamente durante la fase de alimentación por lote contiene jarabe de maltosa como fuente de carbono, mientras que el extracto de levadura y la urea se añaden para asegurar un suministro suficiente de nitrógeno. La lipasa puede purificarse usando métodos estándar conocidos en la industria, por ejemplo, filtración del sobrenadante de fermentación y la posterior cromatografía hidrófoba e intercambio aniónico, por ejemplo, como se describe en la patente europea núm. 0 851 913, Ejemplo 3.

Ejemplo 2: AMSA - o ensayo automático de esfuerzo mecánico - para calcular el rendimiento relativo (RP, por sus siglas en inglés). Las pruebas de las variantes de enzimas de la presente solicitud se hacen con el Ensayo automático de esfuerzo mecánico (AMSA, por sus siglas en inglés). Con el AMSA se puede analizar el desempeño de lavado de una gran cantidad de soluciones detergentes que tienen enzimas de volumen reducido. La placa del AMSA tiene una cantidad de ranuras para soluciones de prueba y una tapa que aprieta firmemente la muestra de tela que se va a lavar contra todas las aberturas de la ranura. Durante el lavado, se agita vigorosamente la placa, las soluciones de prueba, la tela y la tapa para poner la solución de prueba en contacto con la tela y para aplicar esfuerzo mecánico. Para una descripción más completa, véase la patente WO 02/42740, en especial, el párrafo "Modalidades de métodos especiales" en la página 23-24. Los recipientes, que contienen la solución de prueba del detergente, comprenden orificios cilindricos (6 mm de diámetro, 10 mm de profundidad) en una placa metálica. La tela manchada (material de prueba) se coloca en la parte superior de la placa metálica y se usa en los recipientes como tapa y sello. Para evitar derrames, se coloca otra placa metálica en la parte superior de la tela manchada de cada recipiente. Se aplica vibración arriba y abajo de las dos placas metálicas junto con la tela manchada a una frecuencia de 30 Hz con una amplitud de 2 mm. El ensayo se realiza en las condiciones experimentales especificadas a continuación: Cuadro 3 Se preparan trozos de tejidos de muestra con crema y cúrcuma mezclando 5 g de cúrcuma (Santa Maria, Dinamarca) con 100 g de crema (38 % de grasa, Arla, Dinamarca) a 50 °C; la mezcla se deja a esta temperatura durante aproximadamente 20 minutos y se filtra (50 °C) para eliminar cualquier partícula que haya quedado sin disolver. Se enfría la mezcla a 20 °C) y los trozos de tejido de algodón utilizados como muestra, EMPA221 , se sumergen en la mezcla de crema y cúrcuma, luego se dejan secar a temperatura ambiente durante la noche y se congelan hasta el momento de utilizarlos. La preparación de muestras de crema y cúrcuma se describe en la solicitud de patente PA 2005 00775 presentada el 27 de mayo de 2005. El rendimiento de la variante enzimática se mide como el brillo del color de las muestras de tela lavadas con esa variante enzimática específica. El brillo se puede expresar también como la intensidad de la luz reflejada por la muestra de tela cuando se ilumina con luz blanca. Cuando la tela está manchada, la intensidad de la luz reflejada es menor que la de una tela limpia. Por ello, la intensidad de la luz reflejada puede usarse para medir el rendimiento de lavado de una variante enzimática. Las mediciones de color se realizan con un escáner profesional de cama plana (PFU DL2400pro), que se utiliza para obtener una imagen de las muestras de tela lavadas. Las exploraciones se realizan con una resolución de 200 dpi y con una profundidad de salida de color de 24 bits. Para obtener resultados precisos, el escáner se calibra frecuentemente con una calibración reflectante IT8 de Kodak. Para extraer un valor para la intensidad de la luz a partir de las imágenes exploradas, se usa una aplicación de software diseñada especialmente (Novozymes Color Vector Analyzer). El programa recupera los valores de 24 bits por píxel de la imagen y los convierte en valores para rojo, verde y azul (RGB, por sus iniciales en inglés). El valor de la intensidad (Int) se calcula sumando los valores RGB juntos como vectores y tomando luego la longitud del vector resultante: El rendimiento de lavado (P) de las variantes se calcula de conformidad con la fórmula: P = lnt(v) - lnt(r) en donde lnt(v) es el valor de la intensidad de la luz de una superficie de tela lavada con la enzima probada e lnt(r) es el valor de la intensidad de la luz de la superficie de la tela lavada sin la enzima probada. El puntaje del rendimiento relativo se proporciona como el resultado del lavado AMSA de conformidad con la definición: los puntajes de Rendimiento relativo (RP) se obtienen sumando los rendimientos (P) de las variantes de las enzimas probadas con respecto a la enzima de referencia: RP = P(enzima de prueba)/P(enzima de referencia). El valor RPavg indica el rendimiento relativo promedio comparado con la enzima de referencia en las cuatro concentraciones de enzimas (0.125, 0.25, 0.5, 1.0 mg ep/l) RPavg = avg(RP(0.125), RP(0.25) RP(0.5), RP(1.0)) Se considera que el rendimiento de lavado de una variante es mejor si su rendimiento es mejor que el de la referencia. En el contexto de la presente invención, la enzima de referencia es la lipasa de SEQ. con ID N°: 2 con las sustituciones T231 R + N233R.

Ejemplo 3: Cromatografía de gas (GC, por sus siglas en inglés) para calcular el factor de riesgo. — La liberación de ácido butírico de las muestras lavadas con lipasa se mide por medio de Microextracción en fase sólida y Cromatografía de gases (SPME-GC, por sus siglas en inglés) usando el siguiente método. Se transfieren cuatro trozos de tela (5 mm de diámetro) lavados en la solución especificada en el Cuadro 3, que contiene 1 mg/l de lipasa, a un frasco de Cromatografía de gases (GC). Se analizan las muestras en un cromatógrafo de gases Varian 3800 provisto de una columna Stabilwax-DA con tecnología Integra-Guard (30 m, ID: 0.32 mm, df: 0.25 mieras) y con una fibra de carboxen-polidimetilsiloxano (Car-PDMS) para microextracción en fase sólida (75 mieras). Cada muestra se preincuba durante 10 minutos a 40 °C seguida de un muestreo de 20 minutos con la fibra para microextracción en fase sólida en el espacio vacío sobre los trozos de tela. Se inyecta luego la muestra en la columna (temperatura del inyector=250 °C). Caudal de la columna = 2 mL de helio/minuto. Gradiente de temperatura del horno de la columna: 0 min = 40 °C, 2 min = 40 °C, 22 min = 240 °C, 32 min = 240 °C. El ácido butírico se detecta con detección de ionización por llama o FID, por sus siglas en inglés, y la cantidad de ácido butírico se calcula en base a una curva estándar del ácido butírico. El Riesgo de desarrollo de olor, R, de una variante de lipasa es la relación entre la cantidad de ácido butírico liberado por la variante de lipasa de la muestra de tela lavada y la cantidad de ácido butírico liberado de la muestra de tela lavada con la lipasa de SEQ ID NO: 2 con las sustituciones T231 R + N233R (enzima de referencia), luego de que los dos valores han sido corregidos para la cantidad de ácido butírico liberado de un trozo de tejido de muestra lavado sin lipasa. El riesgo (R) de las variantes se calcula de conformidad con la siguiente fórmula: Olor = medido en micro g de ácido butírico producido por 1 mg de enzima proteica/l, corregido por blanco Qenzima de prueba = OlOT enzima de prueba — tslanCO Genzima de referencia — Olor enzima de referencia — BlanCO — Q enzima de prueba Uenzima de referencia Se considera que el olor de una variante es reducido en comparación con la referencia si el factor R es menor que 1.

Ejemplo 4: Actividad (LU) relativa a la absorbancia a 280 nm La actividad de una lipasa en relación con la absorbancia a 280 nm se determina mediante la siguiente prueba de LU/A280: La actividad de la lipasa se determina como se describió anteriormente en la sección Actividad de la lipasa. Se mide la absorbancia de la lipasa a 280 nm (A280) y se calcula el índice LU/A280. Se calcula el valor LU/A280 relativo como el LU/A280 de la variante dividido por el LU/A280 de una enzima de referencia. En el contexto de la presente invención, la enzima de referencia es la lipasa de SEQ. con ID N°: 2 con las sustituciones T231 R + N233R.

Ejemplo 5: BR - Beneficio-Riesgo El factor Beneficio-Riesgo que describe el rendimiento comparado con el riesgo menor de olor se define, por consiguiente, como: BR = RPavg / R Se considera que el rendimiento de lavado de una variante es mejor y el olor de la variante es menor si el factor BR es mayor que 1.

Al aplicar los métodos anteriores se obtienen los siguientes resultados: Cuadro 4 La lipasa de referencia y las variantes 7 y 8 del Cuadro 4 se describen en la patente WO 2000/060063.

Ejemplo 6 Beneficio-Riesgo (BR, por sus siglas en in lés)- Se midió el factor de beneficio-riesgo para las variantes enumeradas en el Cuadro 5. El factor Beneficio-Riesgo se midió de la misma manera que se describe en el Ejemplo 5 y se comprobó que estaba por encima de 1 para todas las variantes listadas.

Cuadro 5 La lipasa de referencia se describe en la patente WO 2000/060063.

Ejemplos de composiciones A menos que se indique de cualquier otra forma, los materiales pueden obtenerse de Aldrich, P.O. Box 2060, Milwaukee, Wl 53201 , EE.UU.

Ejemplos 1-6 Composiciones detergentes granulares para lavandería diseñadas para el lavado a mano o en lavadoras de carga por la parte superior.

Cualquiera de las composiciones anteriores se utiliza para lavar telas en una concentración de 600 - 10,000 ppm en agua, en condiciones normales promedio de 2500 ppm, 25 °C, y una relación de agua:tela de 25:1.

Ejemplos 7-10 Composiciones detergentes granulares para lavandería diseñadas para lavadoras automáticas de carga frontal.

Cualquiera de las composiciones citadas anteriormente se utiliza para lavar telas en una concentración de 10,000 ppm en agua, a 20-90 °C, y una relación de agua:tela de 5:1. El pH típico es de aproximadamente 10.

Ejemplos 11-16 Composiciones detergentes líguidas de gran rendimiento para lavandería Materias primas y notas para las composiciones de los Ejemplos 1-16 Alquilbencenosulfonato lineal con una extensión promedio de cadena alifática carbonada de Cp-C-?2, suministrado por Stepan, Northfield, Illinois, EE.UU. Cloruro de dimetilhidroxietilamonio de C12-14, suministrado por Clariant GmbH, Sulzbach, Alemania AE3S es alquil etoxi C?2-15 sulfato (3), suministrado por Stepan, Northfield, Illinois, EE.UU. AE7 es etoxilato de alcohol C?2-15, con un grado promedio de etoxilación de 7, suministrado por Huntsman, Salt Lake City, Utah, EE.UU.

El tripolifosfato de sodio es suministrado por Rhodia, París, Francia La zeolita A es suministrada por Industrial Zeolite (Inglaterra) Ltd, Grays, Essex, Inglaterra 1.6R Silicato es suministrado por Koma, Nestemica, República Checa El carbonato de sodio es suministrado por Solvay, Houston, Texas, EE.UU. El poliacrilato PM 4500 es suministrado por BASF, Ludwigshafen, Alemania La carboximetilcelulosa es Finnfix® BDA, suministrada por CPKelco, Arnhem, Países Bajos Savinase®, Natalase®, Termamyl®, Mannaway® son suministradas por Novozymes, Bagsvaerd, Dinamarca Variantes de lipasa 1 a 5 descritas en el Ejemplo 5, Cuadro 4, y combinaciones de éstas. El abrillantador fluorescente 1 es TinopaKE) AMS; el abrillantador fluorescente 2 es Tinopal® CBS-X; ftalocianina de zinc sulfonada, suministrados por Ciba Specialty Chemicals, Basel, Suiza El ácido dietilentriaminapentaacético es suministrado por Dow Chemical, Midland, Michigan, EE.UU. El percarbonato de sodio es suministrado por Solvay, Houston, Texas, EE.UU.

El perborato de sodio es suministrado por Degussa, Hanau, Alemania NOBS es nonanoiloxibencensulfonato de sodio, suministrado por Eastman, Batesville, Arkansas, EE.UU. TAED es tetraacetiletilendiamina, suministrada con el nombre comercial de Peractive® por Clariant GmbH, Sulzbach, Alemania El agente para desprendimiento de manchas es Repel-o-tex® PF, suministrado por Rhodia, París, Francia El copolímero de ácido acrílico/ácido maleico tiene un peso molecular de 70,000 con una relación de acrilato:maleato de 70:30, suministrado por BASF, Ludwigshafen, Alemania La proteasa es FN3, suministrada por Genencor International, Palo Alto, California, EE.UU. La sal sódica del isómero (S,S) del ácido etilendiamina-N.N'-disuccínico (EDDS) es suministrada por Octel, Ellesmere Port, Inglaterra El hidroxietano difosfonato (HEDP, por sus siglas en inglés) es suministrado por Dow Chemical, Midland, Michigan, EE.UU. El aglomerado supresor de espuma es suministrado por Dow Corning, Midland, Michigan, EE.UU. HSAS es un alquil sulfato ramificado en mitad de la cadena, tal como se describe en las patentes de los EE.UU. núms. 6,020,303 y 6,060,443 El óxido de dimetilamina C?2-?4 es suministrado por Procter & Gamble Chemicals, Cincinnati, Ohio, EE.UU. El material no iónico es, preferentemente, un etoxilato de C-12-C13, preferentemente, con un grado promedio de etoxilación de 9. La proteasa es suministrada por Genencor International, Palo Alto, California, EE.UU. * Los números son mencionados en mg de enzima/100 g 1 Tal como se describe en la patente de los EE.UU. núm. 4,597,898. 2 Disponible con el nombre comercial de LUTENSIT® de BASF y tal como los descritos en la patente WO 01/05874 t Lipasa descrita en la presente especificación. Aunque se han ilustrado y descrito modalidades particulares de la presente invención, será evidente para los experimentados en la industria que se pueden hacer diversos cambios y modificaciones sin alejarse del espíritu y el alcance de la invención. Se ha pretendido, por consiguiente, abarcar en las reivindicaciones anexas todos los cambios y modificaciones dentro del alcance de la invención.

Claims (33)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Una composición que comprende un fotoblanqueador y una variante de una lipasa de origen; la variante, cuando se compara con la lipasa de origen, comprende al menos tres sustituciones en total; las sustituciones se seleccionan de uno o más de los siguientes grupos de sustituciones: a.) al menos dos sustituciones en la Región I, b) al menos una sustitución en la Región II, c) al menos una sustitución en la Región III, y/o d) al menos una sustitución en la Región IV.

2.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque las sustituciones en la Región I comprenden sustituciones en las posiciones que corresponden a las posiciones 231 y 233.

3.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque las sustituciones en las posiciones 231 y 233 están sustituidas con un R.

4.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque la variante comprende una sustitución en la posición que corresponde a la posición 4 de la SEQ ID NO:2.

5.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada además porque la sustitución en la posición que corresponde a la posición 4 de la SEQ ID NO: 2 es V.

6.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque la variante comprende una sustitución en la posición que corresponde a la posición 227 de la SEQ ID NO:2.

7 '.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada además porque la sustitución en la posición que corresponde a la posición 227 de la SEQ ID NO: 2 es G.

8.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región II comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende sustituciones en las posiciones que corresponden a las posiciones 202, 211 , 255 y 256.

9.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región II comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende X202G, X211 L, X255Y/V y X256K.

10.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región II comprende una sustitución en la posición que corresponde a la posición 210.

11.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada además porque la sustitución en la posición que corresponde a la posición 210 comprende X210K.

12.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque al menos una sustitución de la Región III comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende sustituciones en las posiciones que corresponden a las posiciones 86 y 90.

13.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región III comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende X86V y X90A/R.

14.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región III comprende una sustitución en la posición que corresponde a la posición 83.

15.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada además porque la sustitución en la posición que corresponde a la posición 83 comprende X83T.

16.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región IV comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende sustituciones en las posiciones que corresponden a las posiciones 27, 58 y 60.

17.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada además porque al menos una sustitución en la Región IV comprende una sustitución seleccionada del grupo que comprende X27R, X58N/A/G/Pp" y X60S/V/G/N/R/K/A/L.

18.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , que comprende por lo menos dos sustituciones en la Región IV que corresponden a las posiciones 27, 58 y 60.

19.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , que comprende por lo menos dos sustituciones en la Región IV seleccionadas del grupo que comprende X27R, X58N/A/G/P/T y X60S/V/G/N/R/K A/L.

20.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la variante comprende por lo menos una sustitución fuera de las Regiones I a IV definidas.

21.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque al menos una sustitución fuera de las Regiones I a IV definidas se selecciona del grupo que comprende sustituciones en las posiciones que corresponden a la posición 81 , 147, 150 y 249.

22.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque al menos una sustitución fuera de las Regiones I a IV definidas se selecciona del grupo que comprende X81Q/E, X147M/Y, X150G y X249R/I/L.

23.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque la lipasa de origen tiene por lo menos 90 % de identidad con la SEQ ID NO:2. 24.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2, y la variante comprende uno de los siguientes grupos de sustituciones: a) T231 R + N233R + I255Y; b) I202G + T231 R + N233R; c) I86V + L227G + T231 R + N233R + P256K; d) Q4V + S58N + V60S + T231 R + N233R; e) S58N + V60S + I90R + T231 R + N233R; f) I90A + T231 R + N233R + I255V; g) S58N + V60S + I86V + A150G + L227G + T231 R + N233R +

P256K; h) S58N + V60S + L147M + F211 L + T231 R + N233R; i) Q4V + S58A

+ V60S + S83T + I86V + A150G + E210K + L227G + T231 R + N233R +

P256K; j) S58N + V60S + I86V + A150G + L227G + T231R + N233R + P256K. 25.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la lipasa de origen es idéntica a la SEQ ID NO: 2, y la variante comprende uno de los siguientes grupos de sustituciones: a) Q4V + S58A + V60S + S83T + I86V + A150G + E210K + L227G + T231R + N233R + P256K; b) S58N + V60S + I86V + A150G + L227G + T231 R + N233R + P256K. 26.- La composición de detergente de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la variante de lipasa se caracteriza porque el factor Beneficio-Riesgo, cuando se mide según lo indicado en la especificación, es mayor que 1.

27.- Una composición detergente que comprende un fotoblanqueador y un polipéptido que tiene una actividad lipasa y que además tiene un valor de rendimiento relativo promedio de por lo menos 0.8 y un factor Beneficio-Riesgo de por lo menos 1.1 en las condiciones de prueba dadas en la especificación.

28.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la composición comprende de 0.1 a 40 % de surfactante aniónico.

29.- La composición de conformidad con la reivindicación 28, caracterizada además porque la composición es una composición de limpieza o tratamiento.

30.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la composición comprende ftalocianina de zinc sulfonada.

31.- La composición de conformidad con la reivindicación 25, caracterizada además porque la composición comprende una mezcla de ftalocianina de zinc sulfonada y ftalocianina de aluminio sulfonada; la mezcla tiene una relación en peso de ftalocianina de zinc sulfonada a ftalocianina de aluminio sulfonada mayor que 1.

32.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la composición comprende ftalocianina de aluminio sulfonada.

33.- La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada además porque el fotoblanqueador comprende un colorante de xanteno, antraquinona o naftaquinona. 34.- Un proceso para limpiar o tratar una superficie o tela; el proceso comprende los pasos de lavar o enjuagar opcionalmente la superficie o tela, poner la superficie o tela en contacto con la composición de la reivindicación 1 y luego, opcionalmente, lavar o enjuagar esa superficie o tela. 35.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la variante de lipasa es una variante de SEQ ID NO: 2 que comprende por lo menos una de las mutaciones Q4V, S58N/A/G/P/T, I90R o Q249I/L.