MX2008007782A - Metodos para tratar infecciones del tracto gastrointestinal con tigeciclina - Google Patents

Abstract

En la presente se describen métodos para tratar al menos una infección bacteriana, tal como infecciones gastrointestinales inferiores, que comprenden administrar oralmente una composición farmacéutica que comprende tigeciclina. La composición puede tomar formas sólidas o líquidas, tal como soluciones, dispersiones o formas sólidas que comprenden tigeciclina que tiene al menos un revestimiento entérico.

Description

MÉTODOS PARA TRATAR INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL CON TIGECICLINA CAMPO DE LA INVENCIÓN En una modalidad, esta invención se refiere a métodos para tratar infecciones del tracto gastrointestinal con formulaciones orales que comprenden tigeciclina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La tigeciclina es un antibiótico de glicilciclina, es decir, una base libre de naftacenocarboxamida sustituida con t-butilglicilo, y un análogo de la tetraciclina semisintética, la minociclina.

Tegeciclina Las tetraciclinas tales como clorhidrato de clortetraciclina (Aueromicina) y oxitetraciclina (Terramicina) son seguras y se han usado terapéuticamente como antibióticos de amplio espectro desde 1948. Sin embargo, el surgimiento de Ref. : 193358 resistencia a estos antibióticos ha limitado su uso extendido continuo. De esta manera se desarrolló tigeciclina como un agente para restituir potencialmente la utilidad terapéutica a las tetraciclinas al superar el mecanismo de resistencia a tetraciclina. La tigeciclina también puede proporcionar actividad contra patógenos emergentes resistentes a múltiples fármacos. Las glicilglicinas, que incluyen tigeciclina, son activas contra muchas bacterias patógenas gram-positivas, resistentes a antibióticos, tal como Staphylococcus aureus, 0 resistente a meticilina, Streptococcus pneumoniae resistente a penicilina, y enterococus resistente a vancomicina (Weiss et al., 1995; Fraise et al., 1995). La tigeciclina también es activa contra cepas bacterianas que tienen las dos formas principales de resistencia a tetraciclina, efluvio y ¡- protección ribosómica (Schnappinger y Hillen 1995). Ha habido investigaciones en el tratamiento de infecciones en el tracto gastrointestinal. Por ejemplo, VancocinMR es una forma de cápsula oral del fármaco I.V. vancomicina que se usa para tratar infecciones del colon y del n intestino, incluyendo aquellas provocadas por las cepas del Staphylococcus bacterium o Clostridi um Difficile que no responden a los antibióticos más comunes. C. diffi cil e es una bacteria, que bajo ciertas circunstancias, típicamente después de terapia con antibióticos, puede colonizar el tracto ¡- gastrointestinal inferior donde puede producir toxinas que pueden provocar inflamación del colón y diarrea, y posiblemente complicaciones asociadas de la enfermedad. La edad avanzada, cirugía/manipulación gastrointestinal, largas estancias en ambientes de cuidado de la salud, enfermedad subyacente, y condiciones inmunocomprometidas , se pueden asociar con riesgo incrementado de enfermedad. De acuerdo a la CDC, hay aproximadamente 3,000,000 de casos de diarrea asociada a antibióticos, por año, de los cuales de 15 a 25 por ciento, se provocan por C. diffi ci le . La vancomicina no se absorbe en el tracto gastrointestinal, cuando se dosifica de manera oral. Además, VancocinMR tiene actividad relativamente baja (M.I.C.) contra Clos tridi um Difficile, que puede dar por resultado la necesidad de altas dosis de vancomicina oral (125 mg ó 250 mg) . Las altas dosis también puede tener el potencial de producir efectos secundarios indeseables. Aunque se ha preparado una formulación intravenosa de tigeciclina, los prototipos de liberación inmediata oral simple que contiene tigeciclina han dado por resultado pobre biodisponibilidad en animales. (Petersen et al., An timicrobial Agen ts and Chemotherapy, Abril 1999, Vol. 43, No. 4 p. 738-744). Sin embargo, la efectividad de estas formulaciones orales nos se ha probado contra las condiciones de Clos tridi um Diffi ci le . La tigeciclina es muy soluble en agua con solubilidad de más de 295 mg/mL sobre el intervalo completo de pH de 1 a 14. Sin embargo, los estudios de permeabilidad en monocapa celular de tigeciclina (1 mM en etanol y amortiguador, pH 6 a 6.4) muestran un bajo valor de 0.4 nm s" 1 , sugiriendo una baja permeabilidad en Gl, que es consistente con la baja biodisponibilidad oral encontrada en animales. Por consiguiente, permanece la necesidad de desarrollar un método para tratar infecciones del tracto gastrointestinal con tigeciclina.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 es una gráfica del porciento de liberación de tigeciclina (eje y) versus tiempo (eje x, min); La Figura 2 muestra el desempeño analítico de tigeciclina en plasma de mono, QC bajo (control de calidad) -300 ng/mL como una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número de curva (eje x) ; La Figura 3 muestra el desempeño analítico de tigeciclina en plasma de mono, QC medio A-663 ng/mL como una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número de curva (eje x) ; La Figura 4 muestra el desempeño analítico de tigeciclina en plasma de mono, QC medio, B-556 ng/mL como una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número'de curva (eje x) ; La Figura 5 muestra el desempeño analítico de tigeciclina en plasma de mono, QC alto, 3000 ng/mL como una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje x) versus número de curva (eje x) ; La Figura 6 es una gráfica del perfil de concentración en plasma (eje y) versus tiempo (eje ex) de tigeciclina en monos después de una dosis intravenosa individual de 5 mg/kg; La Figura 7 es una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número de curva (eje x) , que muestra el desempeño analítico del ensayo de tigeciclina en plasma de mono; QC bajo (control de calidad) - 30 ng/mL; La Figura 8 es una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número de curva (eje x) , r que muestra el desempeño analítico del ensayo de tigeciclina en plasma de mono; QC medio - 300 ng/mL; La Figura 9 es una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (eje y) versus número de curva (eje x) , que muestra el desempeño analítico del ensayo de tigeciclina n en plasma de mono; QC alto - 800n/mL; y La Figura 10 es una gráfica de concentración en plasma de tigeciclina (ng/ml, eje y) versus tiempo (h, eje x) después de una dosis oral individual (capsula de micropartículas encapsulada de 100 mg) en mono cynomolgus „,- macho, ayunado.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Una modalidad de la presente invención proporciona un método para tratar al menos una infección bacteriana, que comprende: administrar oralmente a un sujeto en necesidad del mismo una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de tigeciclina. En otra modalidad, da por lo menos una infección bacteriana es una infección gastrointestinal (Gl), es decir, la infección se presenta en el tracto gastrointestinal. El tracto gastrointestinal incluye el tracto Gl superior e inferior. El tracto Gl superior incluye el estómago y esófago. En una modalidad, el "tracto gastrointestinal inferior" como se usa en la presente se refiere al íleo e intestino grueso. El "íleo" como se usa en la presente se refiere a una tercera parte del intestino delgado que continua al duodeno y yeyuno. El "intestino grueso" como se usa en la presente comprende el intestino ciego, colón y recto. El "intestino ciego" se refiere a un saco ciego (cul-de-sac) que inicia desde el intestino grueso y en un extremo del cual se abre el íleo. En una modalidad, la por lo menos una infección bacteriana se provoca por bacterias anaeróbicas. En una modalidad, la por lo menos una infección bacteriana se provoca por Clostridi um diffi ci l e . C . diffi cile es una bacteria, que bajo ciertas circunstancias puede colonizar el tracto gastrointestinal inferior donde puede producir toxinas que pueden provocar inflamación del colón y diarrea. En una modalidad, el tratamiento puede dar por resultado tratamiento de la infección y/o complicaciones asociadas de enfermedad. Además, un genotipo emergente de C. diffi cile produce niveles de toxinas que son 16-23 veces mayores que en cepas anteriormente identificadas. Aunque los estudios anteriores (Petersen et al.), han mostrado baja biodisponibilidad sanguínea de tigeciclina 0 cuando se administró un prototipo de liberación inmediata oral simple, la alta bioactividad de la tigeciclina (por ejemplo, en comparación a la vancomicina) contra infecciones bacterianas, tal como C. diffi ci l e, puede dar por resultado sin embargo un tratamiento efectivo. En una modalidad, cuando r se tratan infecciones del tracto gastrointestinal, la baja biodisponibilidad sanguínea indica que la biodisponibilidad en el tracto Gl es alta, es decir, la mayoría de la formulación está presente en el estómago. Otra modalidad proporciona un método para tratar n colitis pseudomembranosa asociada a antibióticos, provocada por C. diffi cile y enterocolitis provocada por S . aereus y cepas resistentes a meticilina, asociadas, que comprenden: administrar oralmente a un sujeto en necesidad del mismo una composición farmacéutica que comprende una cantidad ,- terapéuticamente efectiva de tigeciclina.

En una modalidad, "administrada oralmente" comprende permitir que el paciente degluta la composición farmacéutica. En otra modalidad, la administración oral se realiza mediante un tubo nasal-gástrico para la distribución al intestino grueso . La "composición farmacéutica"0 como se usa en la presente se refiere a una composición médica en forma sólida o líquida. La composición farmacéutica puede contener al menos un portador farmacéuticamente aceptable.

En una modalidad, la composición comprende además al menos un excipiente o portador inerte, farmacéuticamente aceptable. El "excipiente farmacéuticamente aceptable" como se usa en la presente se refiere a portadores o vehículos farmacéuticos adecuados para la administración de tigeciclina , r que incluyen cualquier portador conocido por aquellos expertos en la técnica que sea adecuado para administración oral. En una modalidad, la formulación oral no libera una cantidad sustancial de tigeciclina en el estómago y se presenta una liberación sustancial cuando la formulación pn alcanza el tracto gastrointestinal, tal como el tracto gastrointestinal inferior. En una modalidad, la composición farmacéutica comprende tigeciclina que tiene un revestimiento entérico. En una modalidad, "que tiene un revestimiento entérico" se refiere a que circunda una masa de tigeciclina. P .. En otra modalidad, el revestimiento entérico circunda sustancialmente cada partícula de tigeciclina. "Revestimiento" puede comprender ya sea un revestimiento o un revestimiento secundario. "Revestimiento", o "circunda" como se usa en la presente, puede variar, por ejemplo, de un revestimiento al menos parcial o que circunda hasta y que incluye un revestimiento completo o circundación completa. En una modalidad, el revestimiento o circundación se refiere a revestimiento sustancial, tal como 90 %, 95 %, y 99 % de revestimiento en peso. En una modalidad, el revestimiento entérico puede ser suficientemente uniforme para conferir estabilidad física a la tigeciclina, por ejemplo, al prevenir la degradación por cualquier método descrito en la presente. En una modalidad, un "revestimiento entérico" puede permitir que al menos una porción sustancial de una , r formulación pase a través del estómago y se desintegre en los intestinos. Los materiales de ejemplo para la preparación de revestimientos entéricos incluyen, pero no se limitan a, copolímero de éster ácido de dimetilaminoetil-metacrilato- metacrilato, resinas acrílicas aniónicas tal como copolímero pn de ácido metacrílicos/acrilato de metilo y copolímero de ácido metacrílico/acrilato de etilo, copolímero de acrilato de etilo-metacrilato de metilo, succinato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCAS), ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCAP) , ftalato de acetato de pe celulosa (CAP), ftalato de acetato de carboximetilcelulosa (CMCAP) , hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, metilhidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilcelulosa, polivinilpirrolidona, goma laca, metilcelulosa, y etilcelolusa, y mezclas y copolímeros de los mismos . En una modalidad, el revestimiento entérico se puede formar por métodos conocidos en la técnica para formar películas poliméricas. En una modalidad, la composición comprende además un revestimiento de sello. En una modalidad, el revestimiento de sello se coloca por debajo del revestimiento entérico. En otra modalidad, la composición puede contener al menos un revestimiento adicional de sello que cubre el revestimiento entérico, que a su vez cubre un primer revestimiento de sello.

En una modalidad, el revestimiento de sello comprende cualquier material adecuado para formar revestimientos entéricos, tal como hidroxipropil-celulosa, polivinil- pirrolidona, carboximetilcelulosa sódica, e hipromelosa, o cualquier otro material de revestimiento entérico descrito en la presente. En una modalidad, el por lo menos un revestimiento entérico puede proteger a la tigeciclina de degradación sustancial. La tigeciclina puede tener al menos dos mecanismos de degradación. A pH bajo, la epimerización del grupo r- dimetilamino en la posición 4 se ha identificado como una ruta ¿ principal de degradación. A pH mayor que 7.4, el mecanismo de degradación se desplaza a oxidación, puesto que los grupos fenólicos pueden llegar hacer desprotonados . Por ejemplo, la tigeciclina se puede estabilizar tanto en estados sólidos como en solución al eliminar oxígeno. Una vez que se elimina oxígeno, el pH de la estabilidad óptima cambia de 4.5 a 8 donde la epimerización está en su mínimo. En una modalidad, la composición comprende además al menos un agente quelante. El calcio se une a tetraciclinas, lo que reduce su solubilidad en agua. Puede haber una pérdida de 30 a 40 % de tigeciclina debido a la precipitación del complejo de calcio a pH 7.4. De esta manera, la unión de calcio y la precipitación subsiguiente de la sal de calcio/tigeciclina puede ser al menos parcialmente responsable de la baja biodisponibilidad oral. Los agentes quelantes de ejemplo incluyen ácido etilendiaminatetraacético (EDTA), ácido 0,0' -bis (2-aminoetil) etilenglicol-N,N,N'N'-tetraacético (EGTA), citratos y tartratos. En una modalidad, la composición comprende además al menos una base. En una modalidad, la por lo menos una base proporciona la composición con un microambiente que tiene un pH que varía de 4 a 8.5 cuando se libera, tal como un pH que varía de 7.8 a 8.5 cuando se libera. En una modalidad, el pH del microambiente se refiere al pH del área que circunda inmediatamente la composición. En otra modalidad, el microambiente se refiere al área dentro del revestimiento de sello. Las bases de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, fosfatos, tal como al menos un fosfato de sodio, carbonatos tal como carbonato de sodio y potasio, bicarbonatos, tal como bicarbonatos de sodio y potasio, citratos, tal como citrato de sodio, y tartratos. Adicionalmente, en algunas modalidades, las especies de amortiguador pueden afectar negativamente la estabilidad de la tigeciclina. En una modalidad, la por lo menos una base puede ser capaz de contrarrestar los efectos de estas especies amortiguadoras . En una modalidad, la composición comprende además al menos un biopolímero. Por ejemplo, en modalidades donde la composición se usa para tratar infecciones en el tracto Gl, ., ¡- tal como el tracto Gl inferior o superior, el por lo menos un polímero puede actuar como un adhesivo al tracto Gl interior y por lo tanto permitir la absorción mejorada de tigeciclina. Los biopolímeros de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, hipromelosa y goma de xantano, y carbomero. P„ Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo (a) agentes de relleno o extendedores tal como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, mannitol, y ácido silícico; (b) aglutinantes tal como celulosa y derivados de celulosa (tal como hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa y P r carboximetilcelulosa), alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y goma de acacia; (c) humectantes tal como glicerol; (d) agentes desintegrantes tal como almidón-glicolato de sodio, croscarmelosa, agar-agar, carbonato de calcio, almidón de patata o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio; (e) agentes que retardan la solución tal como parafina; (f) aceleradores de absorción tal como compuestos de amonio cuaternario; (g) agentes humectantes, tal como alcohol cetílico y monoesterarato de glicerol, esteres de ácidos grasos de sorbitan, poloxámeros, y polietilenglicoles, (h) absorbentes tal como caolín y arcilla de bentonita; (i) lubricantes tal como talco, estearato de calcio, estearato de -magnesio, polietilenglicoles sólidos, lauril-sulfato de sodio, y mezclas de los mismos; y (j) deslizantes (antiadherentes ) tal como talco, y dióxido de silicio. Otros excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, citrato de sodio o fosfato de dicalcio. Las formas de dosis también pueden comprender agentes amortiguadores . Las formulaciones orales también pueden emplear agentes de relleno en cápsulas de gelatina de relleno duro y blando que usan excipientes tal como lactosa o azúcar láctea así como polietilenglicoles de alto peso molecular. En una modalidad, la composición farmacéutica está en la forma líquida. Estas composiciones pueden comprender soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas, farmacéuticamente aceptables, así como polvos estériles y/o polvos liofilizados para reconstitución en soluciones o dispersiones estériles justo antes del uso. Los ejemplos de portadores, diluyentes, solventes o vehículos acuosos y no acuosos adecuados incluyen agua, etanol, polioles (tal como glicerol, propilenglicol, y polietilenglicol, y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales (tal como aceite de oliva) , y esteres orgánicos tal como oleato de etilo. Se puede mantener la fluidez apropiada, por ejemplo, por el uso de materiales de revestimiento tal como lecitina, por el mantenimiento del tamaño requerido de partícula en el caso de dispersiones, y por el uso de agentes tensioactivos . En una modalidad, la forma líquida es una solución o suspensión que tiene un pH de menos de 7.5. , j. En una modalidad, la forma líquida se proporciona en frascos u otros recipientes adecuados. Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tal como conservadores, agentes humectantes, agentes emulsionadores y agentes dispersantes. También pueden pn contener identificadores u otros agentes anti-falsificación, que son bien conocidos en la técnica. La prevención de la acción de microorganismos se puede asegurar por la inclusión de varios agentes antibacterianos y antifungoideos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, y acido fenol-sórbico .

P¡- También puede ser deseable incluir agentes isotónicos tal como azúcares, y cloruro de sodio. La absorción prolongada de la forma farmacéutica líquida se puede dar por la inclusión de agentes, que retrasan la absorción tal como monoestearato de aluminio y gelatina. Las formas líquidas de dosis incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas líquidas de dosis pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tal como agua u otros solventes, agentes solubilizadores y emulsionadores tal como ciclodextrinas, alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1 , 3-butilenoglicol, dimetilformamida, aceites (en particular aceites de semilla de algodón, de cacahuate, maíz, germen, oliva, ricino y ajonjolí), glicerol, alcohol tetrahidrofosforílico, polietilenglicoles, y esteres de ácido graso de sorbitano, y mezclas de los mismos. Las suspensiones además de los compuestos activos, pueden contener al menos un agente de suspensión tal, por ejemplo, goma de xantano, goma de guar, goma arábiga, hidroxipropilmetilcelulosa, alcoholes isoestearílieos etoxilados, polioxietilensorbitol y esteres de sorbitano, celulosa o derivados de celulosa (por ejemplo celulosa microcristalina), metahidróxido de aluminio, bentonita, agar agar, y tragacanto, y mezclas de los mismos. Las composiciones farmacéuticas pueden contener opcionalmente agentes o pacificadores y colorantes. También pueden estar en una forma capaz de liberación controlada o sostenida. Los ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden usar para estos propósitos incluyen sustancias y ceras poliméricas. Donde la composición sea una suspensión que contiene tigeciclina en polvo, la suspensión puede comprender además, por ejemplo, de aproximadamente 0.05 % a 5 % de agente de suspensión en peso, jarabes que contiene, por ejemplo, de aproximadamente 10 % a 50 % de azúcar en peso y elixires que contienen, por ejemplo, de aproximadamente 20 % a 50 % de etanol en peso. , e Las composiciones farmacéuticas descritas en la presente pueden contener, por ejemplo, una cantidad que varía de aproximadamente 25 a aproximadamente 90 % del ingrediente activo en peso con relación al peso total de la composición, o de aproximadamente 5 % y 60 % en peso. P„ La tigeciclina se puede proporcionar como una sal farmacéuticamente aceptable. Los términos "sal farmacéuticamente aceptable" pueden referirse a sales de adición de base o sales de adición de ácido de los compuestos de la presente descripción. Una sal farmacéuticamente pe aceptable es cualquier sal que retenga la actividad del compuesto de origen y no imparta ningún efecto nocivo e indeseable en el sujeto a quien se administre y en el contexto en el cual se administre. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen complejos metálicos y sales tanto de ácidos inorgánicos como orgánicos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de metales tal como sales de aluminio, calcio, hierro, magnesio, manganeso y sales complejas. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales acidas tal como acético, aspártico, alquilsulfónico, arilsulfónico, axetil, bencenosulfónico, benzoico, bicarbónico, bisulfúrico, bitartárico, butírico, edetato de calcio, camsílico, carbónico, clorobenzoico, cilexetil, cítrico, edético, edisílico, estolico, esilo, esílico, fórmico, fumárico, glucéptico, glucónico, glutámico, , e glicólico, glicolilarsanílico, hexámico, hexilresorcmoico, hidrabámico, hidrobrómico, clorhídrico, yodhídrico, hidronaftoico, ísetionico, láctico, lactobiónico, maleico, málico, malómco, mandélico, metanosulfónico, metilnítrico, metilsulfúrico, mucico, mucónico, nafsílico, nítrico, oxálico, Pfi p-nitrometanosulfonico, pamoico, pantoténico, fosfórico, fosfórico monoácido, fosfórico diácido, itálico, poligalactourónico, propiónico, salicílico, esteárico, succínico, sulfamico, sulfanílico, sulfónico, sulfúrico, tánnico, tartárico, teoclico, toluensulfónico, y similares. pe Las sales farmacéuticamente aceptables se pueden derivar de aminoácidos que incluyen pero no se limitan a cisteína. Otras sales aceptables se pueden encontrar, por ejemplo, en Stahl et al., Pharma ceutical Sal ts : Properties , Selection , and Use, Wiley-VCH; lst edition (June 15, 2002) . Otra modalidad proporciona un método para preparar una composición farmacéutica que comprende revestir tigeciclina con al menos un revestimiento entérico. El revestimiento se puede realizar usando cualquier proceso conocido en la técnica, tal como al introducir la tigeciclina en un procesador de lecho fluido (u otro dispositivo de revestimiento, tal como un revestidor de placa) que contiene el material de revestimiento entérico. Antes de su introducción en el dispositivo de revestimiento, la tigeciclina se puede combinar con uno o más de al menos una , c base/amortiguador, al menos un agente quelante, al menos un biopolímero, y otros ingredientes adecuados para formulación oral . En una modalidad, la "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad de un compuesto que da por pn resultado prevención o mejora de síntomas en un paciente o un resultado biológico deseado, por ejemplo, signos clínicos mejorados, comienzo retrasado de enfermedad, niveles reducidos/elevados de linfocitos y/o anticuerpos, etc. La cantidad efectiva se puede determinar por un experto en la pe técnica. El intervalo seleccionado de dosis puede depender de la severidad de la condición que se trate, y de la condición y de la historia médica anterior del paciente que se trate. Sin embargo, está dentro de la habilidad de la técnica e iniciar dosis del compuesto a niveles menores que los requeridos para lograr el efecto terapéutico deseado e incrementar gradualmente la dosis hasta que se logre el efecto deseado. En una modalidad, el sujeto tratado puede ser un mamífero, tal como un humano. En una modalidad, el sujeto se sospecha que tiene una infección bacteriana, por ejemplo, muestra al menos un síntoma asociado con la infección. En otra modalidad, el sujeto es uno susceptible a tener la infección bacteriana, por ejemplo, un sujeto colocado genéticamente para tener la enfermedad. "Tratamiento" como se usa en la presente se refiere tanto a tratamiento terapéutico como a medidas profilácticas/preventivas. Aquellos en necesidad de tratamiento pueden incluir individuos y ya tienen una enfermedad médica particular así como aquellos en riesgo por la enfermedad (es decir, aquellos quienes probablemente adquieran finalmente el trastorno) . Un método terapéutico da por resultado la prevención o mejora de síntomas o un resultado biológico de otro modo deseado y se puede evaluar por signos clínicos mejorados, comienzo retrasado de enfermedad, niveles reducidos/elevados de linfocitos y/o anticuerpos, etc.

Los niveles reales de dosis de tigeciclina en las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden variar para obtener la cantidad terapéuticamente efectiva necesaria para lograr la respuesta terapéutica deseada para un paciente particular . En general, se pueden administrar niveles de aproximadamente 0.1 µg/kg a aproximadamente 50 mg/kg, tal como un nivel que varía de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg de compuesto activo por kg de peso corporal por día, de forma tópica, oralmente o de manera intravenosa a un paciente mamífero. Otros niveles de dosis varían de aproximadamente 1 µg/kg a aproximadamente 20 mg/kg de aproximadamente 1 µg/kg a aproximadamente 10 mg/kg, de aproximadamente 1 µg/kg a aproximadamente 1 mg/kg, de a 10 µg/kg a 1 mg/kg, de 10 µg/kg , e a 100 µg/kg, de 100 µg a 1 mg/kg, y de aproximadamente 500 µg/kg a aproximadamente 5 mg/kg por día. Si se desea, la dosis diaria efectiva se puede dividir en múltiples dosis para propósitos de administración, por ejemplo, dos a cuatro dosis separadas por día. En una modalidad, la composición pn farmacéutica se puede administra una vez o dos veces por día. En una modalidad, la tigeciclina es de múltiples partículas. Como se usa en la presente, "tigeciclina de múltiples partículas" se refiere a una colección de partículas de tigeciclina. En una modalidad, la tigeciclina de múltiples pe partículas tiene un tamaño promedio de partícula que varía de 0.3 mm a 1.5 mm. La tigeciclina de múltiples partículas se puede proporcionar como un polvo, o se proporciona como una cápsula encerrada dentro de una cubierta, o cualquier otra forma de dosis descrita en la presente. En una modalidad, las formas de dosis para administración oral incluyen, pero no se limitan a, cápsulas, tabletas, pildoras, polvos (por ejemplo, polvos dispersables, suspensiones que contienen estos polvos (grageas), granulos, y tortas y polvos liofilizados . Estas formas pueden incluir formas que se disuelven o desintegran rápidamente en el ambiente oral. En otra modalidad, la forma de dosis oral disminuye la disolución del fármaco inmediatamente después de la administración oral y permite una porción sustancial de la disolución para que se presente en el tracto Gl, tal como el , tracto Gl inferior. En una modalidad, la forma de dosis (por ejemplo, polvos, toras) se proporciona en frascos u otros recipientes adecuados. En una modalidad, la composición farmacéutica es una solución salina que contiene tigeciclina. P„ En otra modalidad, la composición es una dispersión que comprende tigeciclina. En una modalidad, la composición farmacéutica comprende una tableta comprimida que contiene tigeciclina en una cantidad que varía de 100 mg a 300 mg . pe En una modalidad, la composición farmacéutica comprende granulos de múltiples partículas, con revestimiento entérico incorporados en una cápsula de gelatina dura, y cada granulo comprende tigecicl a celulosa microcristalma, y una combinación de uno o más de lo siguiente: al menos una base/amortiguador (por ejemplo, al menos un fosfato de sodio) , al menos un agente quelante (por ejemplo, EDTA) , y al menos un biopolímero (por ejemplo, goma de xantano). En una modalidad, la composición farmacéutica comprende una tableta con revestimiento entérico que comprende tigeciclma y celulosa microcristalma, y comprende además uno o más de lo siguiente: al menos una base/amortiguador (por ejemplo, al menos un fosfato de sodio), al menos un agente quelante (por ejemplo, EDTA), y al menos un biopolímero (por ejemplo, goma de xantano). En una modalidad, la composición farmacéutica comprende granulos de múltiples partículas incorporados en una cápsula de gelatina blanda con revestimiento entérico, y cada granulo comprende tigeciclma y/o celulosa microcristalina, y uno o mas de lo siguiente: al menos una base/amortiguador (por ejemplo, al menos un fosfato de sodio), al menos un agente quelante (por ejemplo, EDTA), y al menos un biopolímero (por ejemplo, goma de xantano). En una modalidad, la composición farmacéutica comprende una cápsula de gel líquido, blanda, con revestimiento entérico, y además que comprende una solución no acuosa de tigeciclina, y comprende además uno o más de lo siguiente: al menos una base/amortiguador (por ejemplo, al menos un fosfato de sodio) , al menos un agente quelante (por ejemplo, EDTA), y al menos un biopolímero (por ejemplo, goma de xantano) . En una modalidad, la composición farmacéutica comprende una tableta de bi-capa o cápsula que comprende tanto una porción de liberación inmediata como una porción de liberación prolongada. En una modalidad, "liberación prolongada" comprende liberación de sustancialmente toda la tigeciclina durante un periodo de tiempo de al menos 4 horas, tal como un periodo de tiempo de al menos 6 horas, al menos 12 horas, al menos 24 horas, o al menos 48 horas. En una modalidad, la composición farmacéutica , e comprende tigeciclina en forma sólida, la composición que comprende además lactosa y al menos un agente acidificante. El por lo menos un agente acidificante puede incluir cualquiera de los ácidos orgánicos o inorgánicos descritos en la presente. En una modalidad, el por lo menos un agente pn acidificante es HCl. En una modalidad, la composición farmacéutica comprende una suspensión, en donde la suspensión comprende granulos y al menos un agente de suspensión. Los agentes de suspensión de ejemplo se eligen de goma de xantano, goma de pe guar, goma arábiga, e hidroxipropilmetilcelulosa, y cualquier otro agente de suspensión descrito en la presente. En una modalidad, la composición farmacéutica se puede usar como un tratamiento contra bacterias resistentes a fármacos. Por ejemplo, puede ser activa contra Staphylococcus a ureus resistente a meticilina, Streptococcus pneumoniae resistente a penicilina, enterococus resistente a vancomicina (D. J. Beidenbach et al., Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 40: 173-177 (2001); H. W. Boucher et al., Antimicrobial Agents & Chemotherapy 44: 2225-2229 (2000); P.

A. Bradford Clin. Microbiol. Ne slett. 26: 163-168 (2004); D. Milatovic et al., Antimicrob. Agents Chemother. 47: 400-404 (2003); R. Patel et al., Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 38: 177-179 (2000); P. J. Patersen et al., Antimicrob. Agents Chemother. 46:2595-2601 (2002); y P. J. , e Petersen et al., Antimicrob. Agents Chemother. 43:738-744 (1999), y contra organismos que tienen cualquiera de las formas principales de resistencia a tetraciclina: efluvio y protección ribosómica (C. Betriu et al., Antimicrob. Agents Chemother. 48:323-325 (2004); T. Hirata et al. Antimicrob. Agents Chemother. 48: 2179-2184 (2004); y P. J. Petersen et al., Antimicrob. Agents Chemother. 43:738-744 (1999). En una modalidad, la composición farmacéutica se puede usar en el tratamiento de muchas infecciones bacterianas, tal como infección intra-abdominal complicada pe (ciAI), infecciones complicadas de piel y estructura de piel (cSSSI), Neumonía Adquirida en Comunidad (CAP), y Neumonía Adquirida en Hospital (HAP) , que se pueden provocar por patógenos gram-negativos y gram-positivos, anaerobios, y cepas tanto resistentes a meticilina como susceptibles a meticilina de Staphylococcus a ureus (MSSA y MRSA) . Adicionalmente, la composición farmacéutica se puede usar para tratar o controlar infecciones bacterianas en animales de sangre caliente provocadas por bacterias que tienen determinantes resistentes de TetM y TetK. También, la composición farmacéutica se puede usar para tratar infecciones de huesos y articulaciones, neutropenia relacionada a catéter, infecciones obstétricas y ginecológicas, o para tratar otros patógenos resistentes, tal como VRE, ESBL, entéricos, micobacteria de crecimiento rápido, y similares.

Ejemplos Ejemplo 1 En este ejemplo, el comportamiento de disolución de granulos de tigeciclina con revestimiento entérico en cápsulas se investigó en una solución de HCl 0.1N, luego en amortiguador de fosfato, pH 6.8 a 37°C. Estas condiciones imitan el sistema gástrico (0.1N) y el tracto intestinal inferior (pH 6.8). La formulación usada se describe en el Ejemplo 3, posterior. Se adicionaron cápsulas de gelatina de granulos con revestimiento entérico de 100 mg de tigeciclina a tres recipientes separados (Cápsulas 1, 2 y 3) . Las cápsulas se disolvieron en un Aparato USP 2 (paletas) a 100 rpm en 750 mL de HCl 0.1N a 37°C. La disolución se dejó que se presente durante 2 horas, seguido por la adición de 250 mL de Na3P04 0.2M. El pH de esta mezcla se ajustó a 6.8. La Tabla I a continuación lista los datos de disolución.

Tabla I.- Por ciento de liberación de cápsulas de gelatina de granulos de tigeciclina de 100 mg con revestimiento entérico La Figura 1 es una gráfica de los datos de la Tabla I del por ciento de liberación (eje x) versus tiempo (min) . La relación de AUC a mg/mL es de acuerdo a la ecuación y = 16279x - 58.773. Este ejemplo demuestra que la formulación libera sustancialmente la mayoría de la tigeciclina a pH mayor, por ejemplo, después de 2 horas.

Ejemplo 2 Este ejemplo demuestra la biodisponibilidad oral de tigeciclina en monos cynomolgus cuando se administra como una formulación oral (cebadura) . La farmacocinética de la tigeciclina después de la administración intravenosa y oral individual también se presenta en este ejemplo. Primero se administraron monos machos con una dosis oral (cebadura) de 15 mg/kg de tigeciclina y luego una dosis intravenosa de 5 mg/kg de tigeciclina después de un periodo de limpieza de una semana.

Materiales y Métodos Diseño de Estudio Se usaron cuatro monos cynomolgus machos en este estudio. En un primer periodo de dosificación, cada mono se administró con una dosis oral (cebadura) de 15 mg/kg individual de tigeciclina en solución salina al 0.9 %. El volumen de dosificación fue de 10 mL/kg. Se obtuvieron muestras sanguíneas (2 mL por muestra) antes de la dosificación (0 horas) y a 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 32 y 48 horas después de la dosis oral. Después de un periodo de limpieza de una semana, a cada mono se le administró una dosis intravenosa individual de 5 mg/kg de tigeciclina en solución salina al 0.9 %. Se obtuvieron muestras sanguíneas (2 mL) antes de la dosis (0 horas) y a 5 minutos, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 32 y 48 horas después de la dosis. Se recolectaron muestras sanguíneas usando una aguja de acero inoxidable y un tubo Vacutainer que contiene heparina sódica como el anticoagulante. Las muestras sanguíneas se colocaron en hielo después de la recolección y se centrifugaron a aproximadamente 4°C. Las muestras de plasma se separaron, se congelaron y almacenaron a aproximadamente -70°C antes del análisis.

Cuantificación de Tigeciclina en Plasma de Mono Se determinaron las concentraciones de tigeciclina usando un método de CLAR que se validó anteriormente en plasma de rata y perro, aunque este método se modificó para ser usado en plasma de mono. En este método, se extrajo tigeciclina en 0.2 mL de muestras de plasma de mono por precipitación de proteína con acetonitrilo y las proteínas precipitadas se separaron por centrifugación. El sobrenadante se evaporó y el extracto se reconstituyó en HCl 0.05N para análisis de CLAR. Se realizó el análisis de regresión en la curva de calibración usando un ajuste cuadrático con un factor de ponderación de 1/ (concentración) 2. Al usar 0.2 mL de muestra de plasma de mono, el límite del ensayo de cuantificación (LOQ) fue de 100 ng/mL y el intervalo de la curva estaba entre 100 y 6400 ng/mL.

Cálculos Farmacocinéticos Se calcularon los parámetros farmacocinéticos usando el programa de análisis farmacocinético WinNonlin, versión 2.1 (Scientific Consulting Inc.), de los perfiles de concentración versus tiempo de animales individuales. Este programa analiza los datos usando un planteamiento independiente del modelo y , r los métodos estándar descritos por Gibaldi y Perrier (Gibaldi M, Perrier D., Pharmacokinetics, 2nd ed., Marcel Dekker, Inc., NY, 1982) . Para el propósito de este análisis, no se hizo intento de retro-extrapolar la concentración inmediatamente después de la dosis de bolo IV, más bien la concentración a 0 pn horas (C0, inmediatamente después de la dosificación) se asumió que es igual a la primera concentración medida (a 5 minutos, C5m?n) . Para determinar las concentraciones promedio en plasma del fármaco, todos los valores por abajo del límite inferior de cuantificación (LOQ = 100 ng/mL) se trataron como pe cero. La vida media (t?/2) terminal se determinó por 0.693?, donde ? es la constante de velocidad terminal y se determina por un ajuste logarítmico-lineal de la porción terminal de la curva de concentración-tiempo. Se calculó AUC0-4 por AUC0-t + Ct/?, donde AUC0-t fue la AUC desde el tiempo 0 a t, el último punto de tiempo cuantificable y Ct fue la última concentración cuantificable . El área bajo la curva de concentración en plasma-tiempo desde el tiempo 0 a t (AUCn-t) se calculó usando el método trapezoidal lineal. La depuración sistémica (CLT) después de la dosis iv se calculó usando la fórmula Dosis/AUCo- . El volumen de distribución en estado estable (Vdss) se calculó usando la fórmula de MRT1V x CLT, en donde MRT1V es el tiempo promedio de residencia después de la dosificación iv y es igual a AUMCo- /AUCn- . Para la dosis oral, los valores de Cmax y tmax se obtuvieron por inspección de , e las curvas de concentración versus tiempo. Debido a la escasez de concentraciones cuantificables después de la administración oral, no se puede calcular la AUC0- .

Realización Analítica del Método de CLAR para Tigeciclina en 0 Plasma de Mono Se realizaron cinco corridas analíticas para el análisis de las muestras. Los valores retro-calculados de las curvas de calibración se presentan en la Tabla II. La CV de las normas de calibración de tigeciclina estuvieron entre 2.1 y 6.3 % y los valores de desviación variaron desde -5.4 a 3.8 %.

Tabla II.- Realización Analítica de Ensayo de Tigeciclina en Plasma de Mono: Valores retro-Calculados de Normas de Calibración de Tigeciclina NA: no aplicable Los parámetros de la curva de calibración se muestran en la Tabla III.

Tabla III.- Realización Analítica de Ensayo de Tigeciclina en Plasma de Mono: Parámetros de Curva de Calibración Se realiza el análisis de regresión con la siguiente ecuación: y = ax2 + bx + c en donde: a = Constante de línea de regresión de 2do orden, b = Constante de línea de regresión de 1er orden, c = Intercepción y = Relación de altura pico de norma interna de tigeciclina . x = Concentración de tigeciclina (ng/mL) En todas las corridas analíticas, los coeficientes de determinación (R2) fueron >0.99. En todas las corridas analíticas, se analizaron junto con las muestras de estudio dos réplicas de muestras de QC de intervalo bajo, medio y alto. El QC bajo y el QC alto tienen concentraciones nominales de 300 y 3000 ng/mL, respectivamente. Para el QC de intervalo medio, la concentración nominal objetivo fue de 900 ng/mL. Se prepararon dos lotes separados de QC de intervalo medio y ambos tuvieron concentraciones por abajo del objetivo (aproximadamente 600 ng/mL) . Las concentraciones objetivo de los lotes de QC de intervalo medio se determinaron al analizar cuatro (lote A) u ocho (lote B) réplicas de cada lote de QC de intervalo medio. El lote A de QC de intervalo medio (concentración determinada de 663 ng/mL) se analizó con curvas 1 y 2. El lote B de QC de intervalo medio (concentración determinada de 556 ng/mL) se analizó con curvas 3, 4 y 6. El resultado de las muestras de QC para todas las corridas analíticas se muestran en la Tabla IV.

Tabla IV.- Realización Analítica de Ensayos- de Tigeciclina en Plasma de Mono: Resultados de Muestras de QC NA: No aplicable; este lote de QC no se analizó en esta corrida .

La CV de las muestras de QC estuvieron entre 5.9 y 13.1 % y las desviaciones estaban entre -1.0 y 7.7 %. Los resultados de QC también se representan en las gráficas de QC y se presentan en las Figuras 2 a 5.

Farmacocinética de Tigeciclina en Monos Cynomolgus Las concentraciones de tigeciclina después de una dosis oral individual de 15 mg/kg en monos se presentan en la Tabla V.

Tabla V.- Concentraciones en Plasma (ng/mL) de Tigeciclina en Monos Después de una Dosis Oral Individual (cebadura) de 15 mg/kg Las concentraciones de tigeciclina después de una dosis iv individual de 5 mg/kg se muestran en la Tabla VI.

Tabla VI.- Concentraciones en Plasma (ng/mL) de Tigeciclina en Monos Después de una Dosis Intravenosa Individual de 5 mg/kq Los perfiles de concentraciones en plasma versus tiempo después de una dosis iv individual de tigeciclina en monos se representan en la Figura 6. Los parámetros farmacocinéticos de animales individuales se tabulan en la Tabla VII.

Tabla VII.- Parámetros Farmacocinéticos Individuales y Medios (± SD) de Tigeciclina en Monos Después de una Dosis Oral Individual (cebadura) de 15 mg/kg o Después de una Dosis Intravenosa individual de 5 mg/kg aCmax = C5m?n después de dosis iv. bt = 2 horas para determinación de AUC. ct = 1 hora para determinación de AUC. NA = No aplicable. nc : AUCo-4 o valor de t?2 no calculado debido a datos insuficientes en la fase terminal aparente.

Después de una dosis oral individual de 15 mg/kg (cebadura) , se detectó tigeciclina en muestras hasta 2 horas después de la dosis. El valor de Cmax media (± SD) fue 163 ± 27.1 ng/mL y los valores de tmax estuvieron entre 1 y 2 horas. Debido a la escasez de concentraciones cuantificables en la fase terminal de las curvas de concentración versus tiempo ,e después de la dosificación oral, los valores de AUC0-4 y t?2 no se estimaron después de la dosis oral. También, debido al número limitado de puntos de tiempo con concentración cuantificable de tigeciclina y los valores parciales de AUC estimados, no se puede determinar la biodisponibilidad pn absoluta de tigeciclina después de la dosificación oral. Es adecuada una biodisponibilidad sanguínea de 0.5 % para tratar infecciones del tracto Gl puesto que el sitio deseado de acción está en el tracto Gl y no en la sangre. De esta manera, una biodisponibilidad sanguínea de 0.5 % puede pe traducirse a aproximadamente 99 % de biodisponibilidad en el tracto Gl. Después de una dosis intravenosa individual de 5 mg/kg en los monos, las concentraciones en plasma de tigeciclina declinaron de forma poliexponencial . El valor medio de t?/2 estimado de la fase terminal de las curvas de concentración en plasma versus tiempo fue de 14.1 ± 3.4 horas, que fue similar a MRT1V de 12.8 ± 5.4 horas. El valor medio de AUCo-4 (± SD) de tigeciclina fue 18267 ± 3030 ng©hr/mL. La Clt media de tigeciclina fue 0.280 ± 0.053 L/kg/hora y el Vdss medio fue 3.47 ± 1.09 L/kg.

Análisis Los resultados de este estudio mostraron que la biodisponibilidad sanguínea de tigeciclina fue baja después de ,e la administración oral. La baja biodisponibilidad sanguínea se desea debido a que el fármaco se mantiene dentro del estómago para acción local contra los organismos en el tracto Gl . La biodisponibilidad absoluta no se puede estimar después de una dosis oral individual de 15 mg/kg debido a datos insuficientes pn en la fase terminal para la estimación de valores de AUCn-4. Después de una dosis iv individual en monos, declinaron de forma poliexponencial las concentraciones en plasma de tigeciclina. Las vidas medias terminales estimadas de la fase terminal de las curvas de concentración en plasma versus pe tiempo estuvieron entre 11.4 y 19.1 (media 14.1) horas y fueron similares al MRT1V (media 12.8 horas) . La depuración sistémica (Clt) de GAR-93 6 en monos fue relativamente baja (media 0.280 L/kg/hora) pero similar a aquélla en perros (aproximadamente 0.26 L/kg/hora después de una dosis individual de 5 mg/kg) . El volumen de distribución (Vdss) en estado estable de tigeciclina en monos fue mayor (3.47 L/kg) y en exceso del volumen del agua corporal total en esta especie (ver Davies B. Morris T. "Physiological parameters in laboratory animáis and humans . , " Pharm. Res. 1993; 10: 1093- 95), sugiriendo que la tigeciclina se debe distribuir a varios tejidos y órganos.

Ejemplo 3 Este ejemplo demuestra la biodisponibilidad oral en , e monos cynomolgus machos ayunados de una formulación de microcápsulas (100 mg) encapsulada, administrada como una formulación oral individual con revestimiento entérico. Se determinaron las concentraciones en plasma de tigeciclina para el tipo de formulación por un método de LC/MS/MS.

Materiales y Métodos Formulación La formulación de tigeciclina fue una formulación de múltiples partículas, encapsulada, de 100 mg, que tiene los pe componentes listados en la Tabla VIII a continuación: Tabla VIII Granulación % p/p Mg/250 mg Tigeciclina, 98 % de potencia 30.00 76.53 Celulosa microcristalina (Avicel PH101)a 2222..0000 53.47 Manitol grado DC 30.00 75.00 HPMC K100 (Dow) 5.00 12.50 Fosfato de sodio (dibásico) 8.00 20.00 Estearilfumarato de sodio (Pruv) 1.50 3.75 EDTA 0.50 1.25 Almidón glicolato de sodio 3.00 7.50 aPotencia de tigeciclina se aj usta contra celulosa microcristal ina (MCC ) El revestimiento entérico comprendió Revestimiento de Sello, YS-1-7006, y REVESTIMIENTO entérico (Acril-EZE) . La potencia final para tigeciclina de revestimiento entérico fue 209 mg/g . Cada cápsula de 100 mg contuvo 478. 5 mg de granulos con revestimiento entérico.

Diseño Experimental y Recolección de Muestras Se investigó la biodisponibilidad de tigeciclina con cuatro monos cynomolgus machos , cada uno que tiene pesos corporales que varían de 5 . 5 a 7 . 1 kg . Los monos se aloj aron en un vivario de Bioresources con acceso l ibre a agua y alimento. Los cuatro monos recibieron la formulación oral descrita anteriormente (1 x cápsula de múltiples partículas de 100 mg) . La formulación se administró con 10 mL de agua. Todos los monos se ayunaron durante la noche antes de la dosificación (con acceso libre a agua) y se alimentaron 4 horas después de la administración de la dosis. Se extrajeron muestras sanguíneas de la vena safenosa a 0 (pre-dosis), 0.5, 1, 2, 3, 4, 8, 12 y 24 horas después de la dosificación. Se retiraron aproximadamente 3 mL de sangre en tubos VacutainerMR que contienen heparina sódica como el anticoagulante. Se separó plasma en una centrífuga refrigerada y se almacenó a -70°C. Se distribuyeron muestras de plasma al sitio de ensayo empacado en hielo seco. Se determinaron las concentraciones en plasma de c tigeciclina por un método de LC/MS/MS descrito anteriormente. En base a un volumen de muestra de 0.5 mL, el método tiene un límite de cuantificación de 10 ng/mL. Determinación de Concentraciones de Tigeciclina en Plasma de Mono Las concentraciones de tigeciclina se determinaron por P„ un método de LC/MS/MS. Usando 0.50 mL de plasma de mono con heparina sódica, el límite inferior de cuantificación (LLOQ) fue 10.0 ng/mL y el intervalo de ensayo fue de 10.0 a 1000 ng/mL. Para monitorizar el desempeño del ensayo, todas las corridas analíticas se analizaron con muestras de control de calidad (QC) pe de concentración en intervalo bajo, medio y alto (concentraciones nominales de 30, 300 y 800 ng/mL) en quintupletos. Realización Analítica del Ensayo de LC/MS/MS de Tigeciclina en Plasma de Mono Hubo una corrida analítica para la cuantificación de tigeciclina en muestras de plasma de mono de este estudio. Los valores retro-calculados de las normas de calibración de tigeciclina preparadas en plasma de mono y las constantes de regresión de la curva de calibración se muestran en la Tabla IX.

Tabla IX.-- Realización Analítica de Ensayo de Tigeciclina en Plasma de Mono: Concentraciones Retro-Caleuladas de Normas de Calibración y Constantes de Regresión de Curva de Calibración (A) Concentraciones retro-Calculadas de Normas de Calibración de Tigeciclina en Plasma de Mono aSe usó un método de regresión lineal con 1/concentración2 como el factor de ponderación.

Se realizó regresión lineal usando un factor de ponderación de 1/ (concentración) 2. Las desviaciones promedio de las normas de calibración retro-calculadas variaron de -11.6 % a 13.0 %. El valor R2 de la curva de calibración fue 0.9895. Los resultados de las muestras de control de calidad (QC) de tigeciclina, preparadas en plasma de mono y analizadas con las muestras de estudio, se resumen en la Tabla X.

Tabla X.- Realización Analítica de Ensayo de Tigeciclina en Plasma de Mono: Resultados de Muestras de Control de Calidad (QC) Muestras de QC de Tigeciclina El CV de las muestras de QC varió de 1.9 % a 6.1 % y las desviaciones promedio variaron de -14.3 % a -2.7 %. Los resultados de QC también se representan gráficamente en las Figuras 7 a 9.

Concentraciones en Plasma de Tigeciclina en Monos En la Tabla XI se presentan concentraciones en plasma (ng/mL) de tigeciclina en monos ayunados después de una dosis oral individual (cápsula de 100 mg) de tigeciclina de una formulación encapsulada de micropartículas, y se muestran gráficamente en la Figura 10.

Tabla XI . - Concentraciones en Plasma ( ng/mL ) de Tigeciclina Después de una Dosis Oral Individual ( cápsula de Micropartículas , Encapsulada , de Tigeciclina , de 100 mg ) en Monos Cynomolgus Machos Ayunados *SAN: Número de animal de estudio Análisis de Datos de Concentración en Plasma-Tiempo El análisis sin división de los perfiles de concentración en plasma de tigeciclina-tiempo de monos individuales se realizó usando inNonlin, Modelo 200. El área bajo las curvas de concentración en plasma de tigeciclina-tiempo (AUC) se calcularon por la regla trapezoidal de logaritmo/lineal. Las concentraciones pico en plasma de tigeciclina (Cmax) y el momento para alcanzar Cmax (tmax) se perciben directamente de los perfiles de concentración en plasma de tigeciclina-tiempo. El valor de AUC (ng.hr/mL, media ± desviación estándar) para la formulación fue 2830 ± 1111. El valor de Cn^x (ng/mL, media ± desviación estándar) para la formulación fue 225 ± 92.4. Farmacocinéticas Los parámetros farmacocinéticos de monos, individuales y promedio se reportan en la Tabla XII.

Tabla XII.- Parámetros Farmacocinéticos Individuales y Promedio de Tigeciclina Después de una Dosis Individual (Cápsula de Microparticulas, Encapsulada de 100 mg, lote L23290-29B) de Mono Cynomolgus Machos Ayunados La Tabla XIII compara los parámetros farmacocinéticos promedio y la biodisponibilidad absoluta y relativa de tigeciclina en la formulación encapsulada de micropartículas a la solución salina de tigeciclina al 0.9 % administrada IV y oralmente (cebadura), como se describe en el Ejemplo 2 anterior.

Tabla XIII.- Comparación de Parámetros Farmacocinéticos [Media (n=4)] en Monos Cynomolgus Macho Después de una Administración de Dosis Individual de Tigeciclina 1Ver Ejemplo 2 El valor de AUC (ng.hr/mL, media ± desviación estándar) para la formulación fue 2830 ± 1111. Los valores de Cmax (ng/mL, media ± desviación estándar) para la formulación fue 225 ± 92.4. Se ha llevado a cabo un estudio de biodisponibilidad de una formulación de tigeciclina de mono cynomolgus para valorar la biodisponibilidad de una formulación de dosis oral, de micropartículas, encapsulada, mejorada. Los resultados de este estudio mostraron que la biodisponibilidad absoluta de tigeciclina en la sangre fue 5 % después de la administración oral. La formulación de cápsula (16 mg/kg) demostró valores significativamente mayores de exposición oral (AUC) en comparación a los estudios anteriores llevados a cabo a 15 mg/kg. De esta manera, 95 % del fármaco está presente en el tracto Gl .

Ejemplo 4 Este Ejemplo describe un proceso de estratificación de polvo seco para la preparación de una formulación oral. La Tabla XIV lista los ingredientes de la formulación.

Tabla XIV En este ejemplo, se mezclaron tigeciclina, lactosa, fosfato de sodio y EDTA conjuntamente y se alimentaron a través de una alimentación de tornillo en un granulador de rotor de lecho fluido que contiene sacarosa o esferoides microcristalinos . Una solución aglutinante al 5-10 % de hipromelosa se roció simultáneamente en el lecho giratorio de los esferoides en tanto que se adicionó lentamente la mezcla de tigeciclina. Después de que la cantidad deseada de mezcla de tigeciclina se adicionó a las esferas, se secaron y descargaron para revestimiento entérico. Se aplicó revestimiento entérico mediante un procesador de lecho fluido usando polimetacrilatos . También se pueden usar otros polímeros entéricos normalmente usados en la industria. Otras modalidades de la invención serán evidentes para aquellos expertos en la técnica a partir de la consideración de la especificación y de la práctica de la invención descrita en la presente. Se propone que la especificación y los ejemplos se consideren como sólo de ejemplo, con un alcance y espíritu verdadero de la invención que se indica por las siguientes reivindicaciones. A menos que se indique de otro modo, todos los números que expresan cantidades e ingredientes, condiciones de reacción, y demás usados en la especificación y , e reivindicaciones se van a entender como que se modifican en todos los casos por el término "aproximadamente". Por consiguiente, a menos que se indique lo contrario, los parámetros numéricos expuestos en la siguiente especificación y reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar pn dependiendo de las propiedades deseadas que se busca obtener por la presente invención. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la pr presente descripción de la invención.

Claims (17)

1. REIVINDICACIONES
2. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Método para tratar al menos una infección bacteriana, caracterizado porque comprende: administrar oralmente a un sujeto en necesidad del mismo una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de tigeciclina. 2. Método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la por lo menos una infección bacteriana es una infección gastrointestinal.
3. 3. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la por lo menos una infección bacteriana se provoca por Clostridium difficile.
4. 4. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la composición farmacéutica es una solución o suspensión que tiene un pH de menos de 7.5.
5. 5. Método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición farmacéutica es una suspensión que comprende tigeciclina.
6. 6. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 3, caracterizado porque la composición farmacéutica está en una forma sólida elegida de tabletas, cápsulas, polvos y tortas y polvos liofilizados .
7. 7. Método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la composición farmacéutica comprende tigeciclina que tiene al menos un revestimiento entérico elegido de copolímero de éster ácido de dimetilaminoetil- metacrilato-metilacrilato, resinas acrílicas aniónicos tal como copolímero de ácido metacrílico/acrilato de metilo y copolímero de ácido metacrílico/acrilato de etilo, copolímero 10 de acrilato de etilo-metacrilato de metilo, succinato de acetato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCAS) , ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCP) , ftalato de acetato de celulosa (CAP) , ftalato de acetato de carboximetilcelulosa (CMCAP) , hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, , e metilhidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilcelulosa, polivinilpirrolidona, goma laca, metilcelulosa, y etilcelulosa, y mezclas y copolímeros de los mismos.
8. 8. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la forma de dosis pn oral se elige de cápsulas, tabletas, pildoras, polvos y granulos.
9. 9. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque además comprende al menos una base elegida de fosfatos, carbonatos, bicarbonatos, citratos y tartratos, y al menos un agente pe quelante elegido de EDTA, EGTA, tartratos, y citratos.
10. 10. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque además comprende al menos un biopolímero elegido de hipromelosa, goma de xantano, y carbómero.
11. 11. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 6, 7, 8, 9 y 10, caracterizado porque la composición farmacéutica comprende granulos de múltiples partículas, con revestimiento entérico, incorporados en una cápsula de gelatina dura, cada granulo que comprende 10 tigeciclina y celulosa microcristalina, y al menos un componente elegido de al menos una base, al menos un agente quelante, y al menos un biopolímero.
12. 12. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5-6, 7, 8, 9 y 10, caracterizado , r porque la composición farmacéutica comprende tigeciclina y celulosa microcristalina, y que comprende además al menos un componente elegido de al menos una base, al menos un agente quelante, y al menos un biopolímero.
13. 13. Método de conformidad con cualquiera de las pn reivindicaciones 1, 2, 3, 6, 7, 8, 9 y 10, caracterizado porque la composición farmacéutica comprende granulos de múltiples partículas incorporados en una cápsula de gelatina blanda con revestimiento entérico, cada granulo que comprende tigeciclina y celulosa microcristalina, y que comprende además pe al menos un componente elegido de al menos una base, al menos un agente quelante, y al menos un biopolímero.
14. 14. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 6, 7, 8, 9 y 10, caracterizado porque la composición farmacéutica comprende una cápsula de gel líquido, blanda, con revestimiento entérico, y que comprende además una solución no acuosa de tigeciclina y al menos un componente elegido de al menos una base, al menos un agente quelante, y al menos un biopolímero.
15. 15. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la 10 tigeciclina está en una forma sólida, y la composición farmacéutica comprende además lactosa y HCl.
16. 16. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4 y 5, caracterizado porque la . e, composición farmacéutica comprende una suspensión, en donde la suspensión comprende granulos y al menos un agente de suspensión elegido de goma de xantano, goma de guar, goma arábiga, e hidroxipropilmetilcelulosa.
17. 17. Método para tratar colitis pseudomembranosa P^ asociada a antibióticos provocada por C. di ffi cile y enterocolitis provocada por S . a ureus y cepas resistentes a meticilina asociadas, caracterizado porque comprende: administrar oralmente a un sujeto en necesidad del mismo una composición farmacéutica que comprende una cantidad pe terapéuticamente efectiva de tigeciclina.