MX2007015151A - Composiciones de vacunas y metodos para el tratamiento de la incontinencia urinaria. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere al uso de composiciones que comprenden una vacuna anti-LHRH para el control o el tratamiento de la incontinencia urinaria; la presente invencion ademas se refiere a metodos para tratar o controlar la incontinencia urinaria en mamiferos y, en particular, en aquellos que han sido castrados quirurgicamente, por ejemplo perros hembra a las que se les han extraido los ovarios.

Description

COMPOSICIONES DE VACUNAS Y MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE LA INCONTINENCIA URINARIA CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere al uso de composiciones que comprenden una vacuna anti-LHRH para el control o tratamiento de la incontinencia urinaria. La presente invención además se refiere a métodos para tratar o controlar la incontinencia urinaria en mamíferos y, en particular, en los que se han sido castrados quirúrgicamente, por ejemplo perras a la que se le han extraído los ovarios.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La incontinencia urinaria es la pérdida involuntaria o el paso de orina como consecuencia de disfunción de la vejiga o del esfínter uretral. Durante el almacenamiento normal de orina, a medida que la vejiga se Hiena el esfínter uretral se cierra fuertemente para impedir las pérdidas. A continuación, cuando la orina se debe evacuar, el esfínter uretral se relaja y permite que la orina pase a través de la uretra. La incontinencia urinaria a menudo es el resultado de pérdida de tono del esfínter uretral, que disminuye su capacidad para tensarse. En tales casos, la incontinencia urinaria se produce de forma incontrolada siempre que la presión en el interior de la vejiga supera la presión requerida para cerrar la uretra. Este problema suele ser más marcado cuando el mamífero está relajado, como durante el sueño profundo, o cuando la presión en la vejiga aumenta de forma momentánea, como cuando el mamífero tose o estornuda. Los familiarizados con el trastorno apreciarán que la incontinencia urinaria es prevalente entre mujeres adultas. A causa del estigma social que se asocia con la incontinencia urinaria, muchos de los que la sufren ni siquiera comunican el problema a un profesional de la asistencia sanitaria. Como resultado, se diagnostican muchos menos casos de este problema médico y se comunica mucho menos. La incontinencia urinaria es también bastante frecuente en perros. Normalmente se produce en perros hembra y, más a menudo, en el perro hembra a la que se le han extirpado los ovarios. Asimismo, los perros macho son propensos a este trastorno, pero con menos frecuencia que su homólogo hembra. Anteriormente se ha explicado que el mecanismo subyacente de la incontinencia en perros a los que se han exíirpado los ovarios o han sido castrados está relacionado con bajas concentraciones posquirúrgicas de estrógenos o testosterona tras la extracción de los ovarios o los testículos. En el caso de las perras hembra, se cree que la hormona estrógeno es la responsable de proporcionar tono al músculo del esfínter uretral. Después de la extracción de los ovarios la hormona estrógeno se produce en cantidades significativamente menores que antes de la extracción de los ovarios. Aunque las glándulas suprarrenales producen cantidades pequeñas de hormona estrógeno, se creía que los niveles producidos son insuficientes como para proporcionar tono al esfínter. En tales casos, se puede producir incontinencia y se requiere alguna forma de tratamiento para mantener el tono del esfínter. Del mismo modo, los perros macho pueden desarrollar incontinencia urinaria tras la castración, ya que se extraen los testículos, la principal fuente de testosterona. Tradicionalmente, el tratamiento para la incontinencia urinaria ha estado dirigido hacia la mejora de la presión del cierre uretral. A este respecto, se han prescrito sustancias que incrementan la resistencia de la uretra o el cuello de la vejiga urinaria. En particular, estos medicamentos incluyen sustancias alfa adrenérgicas, tales como efedrina o fenilpropanolamina ("PPA"). Normalmente, el tralamienlo con los anteriores implica un uso a largo plazo de los medicamentos y se ha mostrado que causa graves efectos secundarios electrofisiológicos cardíacos en seres humanos. Estos efectos secundarios adversos pueden incluir, entre otros, fibrilación ventricular y arritmias cardíacas. Tales efectos secundarios cardíacos potencialmente letales han conducido a la retirada del mercado de varias medicaciones para seres humanos, incluida la PPA, que recientemente ha sido retirada por la Food and Drug Admínistration ("FDA") de E.U.A. Las sustancias alfa adrenérgicas también están contraindicadas en caso de glaucoma y neuropatía progresiva. Como terapia alternativa se pueden usar formas de estrógeno o estradiol, por ejemplo tratamiento de sustitución con dietilestilbestrol, (o testosterona en el caso de los perros macho), que mejoran la capacidad de respuesta de los receptores de catecolaminas de la uretra. No obstante, el tratamiento con estrógeno está ampliamente considerado como menos seguro que el uso de sustancias alfa adrenérgícas, ya que puede producir supresión de la médula ósea en perros, lo que puede ser letal. Más recientemente, se ha postulado la hipótesis de que son las concentraciones en suero aumentadas de las gonadotropinas hormona estimulante del folículo ("FSH") y hormona luteinizante ("LH"), en lugar de los niveles bajos de estrógeno por sí mismos, la causa de la incontinencia urinaria en mujeres adultas o en perros hembra a las que se han extraído los ovarios. Reichler, I.M. y col., The Effect of GnRH Analogs on Urinary Incontinence after Ablation of the Ovaries in Dogs, Theriogenology, 60: pág. 1207-1216 (2003); la publicación de la solicitud de patente de E.U.A. N°. US 2005/0043342 (en conjunto, denominada en lo sucesivo "Reichler y col."). Según se ha informado, la hipófisis libera LH y FSH en el sistema como respuesta a la producción de hormona liberadora de la hormona luteinízante ("LHRH", también denominada normalmente Hormona Liberadora de Gonadotropina o "GnRH" o Factor liberador de Gonadotropina "GnRF"). La LHRH es liberada desde el hipotálamo hacía el torrente sanguíneo de forma pulsátil como respuesta a una serie de factores y su control suele considerarse complejo. En su liberación influye de forma positiva la actividad neuronal del hipotálamo y está controlada de forma negativa por los niveles bajos de estrógeno y de otros esteroides y hormonas gonadales tales como la inhibina A y B. La LHRH liberada viaja a través de la sangre hasta la hipófisis. Las células receptoras de la hipófisis anterior responden al incremento de los niveles de LHRH mediante la liberación de las gonadotropinas, FSH y LH. Los niveles relativos de FSH y LH que varían con el curso del ciclo estral, a su vez estimulan la producción de estrógeno en los ovarios. En los perros hembra a las que se han extraído los ovarios, después de la extracción de los ovarios (es decir, la principal fuente de estrógeno), el estrógeno sólo se puede medir en concentraciones séricas muy bajas. Otras hormonas que normalmente se originan en las gónadas, tales como las inhíbinas que están secretadas en el ovario por las células granulosas, inhiben de forma selectiva la secreción hipofisaria de FSH. En consecuencia, dado que ya no existe un mecanismo de retroalimentación, la FSH y la LH se secretan sin dificultades, lo que tiene como resultado un incremento de las concentraciones de las dos gonadotropinas. Reichler y col. sostienen que, tanto en mujeres posmenopáusicas como en perros hembra a las que se han extraído los ovarios que padecen incontinencia urinaria, los niveles de FSH y LH están elevados por encima de los niveles normales. De acuerdo con esto, Reichler y col. han propuesto el uso de análogos de la LHRH, tales como agonistas, antagonistas o anticuerpos en medicamentos para controlar o tratar la incontinencia urinaria. No obstante, existen distintas desventajas asociadas con este enfoque. En particular, normalmente se requieren dosis elevadas de antagonistas o agonistas de la LHRH para alcanzar los efectos antigonadotrópicos deseados. Es más, mientras que los efectos de usar tales análogos son inmediatos, su duración es breve y, por tanto, requieren que se administren con frecuencia. Además, en algunos casos cantidades grandes de estos análogos pueden causar efectos secundarios indeseables o adversos. Asimismo son muy caros, ya que su uso, y por tanto su disponibilidad, suele estar limitado al tratamiento de tumores dependientes de hormonas. Asimismo, los anticuerpos frenle a la LHRH, además de ser bastante costosos, poseen la desventaja de tener unas semividas bastante cortas, lo que tiene como resultado duraciones breves del tratamiento y un potencial requerimiento de múltiples dosis. Por tanto, la necesaria frecuente y continua administración de anticuerpos frente a la LHRH al usar este enfoque sería costosa e inconveniente para los propietarios de perros. En consecuencia, los análogos de LHRH no son de uso práctico para aplicaciones veterinarias como estas. Por tanto, a pesar de los informes de algunos de los tratamientos frente a la incontinencia urinaria disponibles en la actualidad, las respuestas completas a estos tratamientos se observan con poca frecuencia, se acompañan de efectos secundarios graves, carecen de un efecto duradero o su mantenimiento es demasiado caro o es inconveniente. El desarrollo de regímenes terapéuticos nuevos, particularmente de los capaces de un control duradero y del tratamiento de la inconlinencia urinaria de forma rentable, mientras que reducen los efectos secundarios potencialmente letales de los productos terapéuticos actuales (tales como arritmia cardiaca o supresión de la médula ósea), sigue siendo necesario. La presente invención satisface estas necesidades.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA ¡NVENCIOM Una alternativa y/o enfoque adicional al tratamiento de la incontinencia urinaria hasta este momento no reconocido es apuntar al sistema inmunológico a través del uso de composiciones de vacunas. Un potencial beneficio de la inmunoterapia activa consiste en proporcionar una eficacia mejorada potenciando la propia respuesta inmunológica del sujeto frente al control eficaz y duradero de la producción y liberación sin restricciones de las gonadotropinas FSH y LH. De acuerdo con esto, la presente invención se refiere a vacunas anti-LHRH y el uso de las mismas para el tratamiento o el control de la incontinencia urinaria en mamíferos. En particular, la presente invención proporciona un método para el tratamienlo de la incontinencia urinaria en un mamífero que necesite tal tratamiento, en donde el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de una vacuna antí-LHRH. En un aspecto de la invención, el mamífero que necesite el tratamiento de la incontinencia urinaria es una hembra, preferentemente una hembra con concentraciones séricas elevadas de hormona luteinízante u hormona estimulante del folículo. En otro aspecto, el mamífero que necesite el tratamiento de la incontinencia urinaria es un perro hembra. En una modalidad particularmente preferida, el mamífero es uno que ha sido castrado quirúrgicamente, por ejemplo un perro hembra a las que se han extraído los ovarios. En un aspecto de la presente invención, la vacuna anti-LHRH comprende un conjugado inmunogénico entre un portador y la LHRH. Preferentemente, el portador comprende una proteína seleccionada del extenso abanico de proteínas portadoras conocidas, incluidos, entre otros, los toxoides bacterianos. Más preferentemente, el portador comprende el toxoide diftérico. En otro aspecto, el portador puede ser un péptido sintético que comprende un epítope de célula T auxiliar. En cualquiera de los aspectos, una forma eficaz del péptido LHRH se une al portador, bien a través de conjugación o durante la síntesis de una célula T auxiliar - péptido LHRH contiguo. En otro aspecto de la invención, la vacuna anti-LHRH comprende además un adyuvante. Preferentemente, el adyuvante comprende un polisacárido iónico; más preferentemente dietílaminoetil dextrano (DEAE dextrano). En una modalidad particularmente preferida, el adyuvante es un DEAE dextrano en combinación con un complejo inmunoestimulante que comprende una saponina y colesterol. En otro aspecto más, la invención se refiere a un método para tratar o controlar la incontinencia urinaria en un mamífero que comprende administrar al mamífero una composición qué comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un conjugado inmunogénico entre un portador y la LHRH. Para una vacuna basada en el conjugado proteína - péptído LHRH, la cantidad eficaz se encuentra en el intervalo de aproximadamente 100 a aproximadamente 300 µg, y para la vacuna basada en la célula T auxiliar-péptido LHRH en el intervalo de aproximadamente 20 a aproximadamente 200 µg- DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA 1NVENCI La invención se refiere a composiciones inmunogénicas y vacunas que son adecuadas para provocar una respuesta ¡nmunológica contra la hormona liberadora de la hormona luteinizante ("LHRH", u hormona liberadora de gonadotropina o "GnRH"). La invención además se refiere al uso de una vacuna anti-LHRH tal o una composición fisicoquímícamente estable en un método de inmunización de un mamífero contra la LHRH para controlar o tratar la incontinencia urinaria. El término "vacuna anti-LHRH" incluye cualquier vacuna, composición o preparación farmacéutica que sea capaz de provocar una respuesta ¡nmunológica a la LHRH en un huésped. Más específicamente, las vacunas anti-LHRH de la presente invención comprenden al menos un inmunógeno o antígeno de LHRH en un portador farmacéuticamente aceptable útil para inducir una respuesta inmunológica en dicho huésped. Únicamente a modo de ejemplo, las vacunas anti-LHRH que se pueden usar en relación con la presente invención, y métodos para producirlas, incluyen, entre otras, las que se describen en la Solicitud Internacional n° PCT/AU99/01167, publicada el 21 de enero de 1999 como documento WO 99/02180, la Solicitud Internacional n° PCT/AU98/00532, publicada el 20 de julio de 2000 como WO 99/41720, y la patente de E.U.A. n° 6,685,947, que se incorporan como referencia en la presente memoria descriptiva. Se debe considerar que el término "LHRH" incluye referencias a todas las formas LHRH y derivados de la misma, incluidos, entre otros, todos los péptídos con inmunogenicidad a LHRH. El término "derivados" incluyen fragmentos, partes, porciones, equivalentes químicos, mutantes, homólogos y análogos de fuentes naturales, sintéticas o recombinantes, incluidas proteínas de fusión. La LHRH se puede obtener de cualquier fuente adecuada y en la técnica se conocen bien los métodos para producir, aislar y purificar LHRH nativa y sintética. En una modalidad preferida, la LHRH comprende un fragmento C Terminal de la LHRH de al menos cinco aminoácidos. Dado que la propia LHRH es demasiado pequeña para ser inmunogéníca, la LHRH usada en el contexto de la presente invención debe transformarse en una forma inmunogénica. Los expertos habituales en la técnica saben bien que hay diferentes métodos para producir una forma inmunogéníca de una sustancia que no es, por sí misma, inmunogénica. Un método adecuado es acoplar la LHRH a un portador inmunogénico. De acuerdo con esto, en el contexto de la presente invención, la LHRH puede administrarse tras conjugación con un portador inmunogéníco a un mamífero como antígeno para inducir la formación de anticuefos en el huésped frente a la LHRH. El portador funciona estimulando las células T auxiliares que se requieren para una respuesta de anticuerpos eficaz. Por tanto, el portador puede comprender péptidos pequeños de al menos 9 aminoácidos de longitud que forman un epítope de la célula T auxiliar. Tales epílopes de las células T auxiliares pueden derivar del Virus del moquillo canino (VMC), que son particularmente adecuados para su aplicación en perros, ya que la mayoría de los perros ya están vacunados contra el VMC. Los anticuerpos inducidos por tales vacunas actuarán posteriormente contra la LHRH propia del cuerpo, lo que proporciona un efecto antígonadotrópico prolongado. En una modalidad preferida, la LHRH se administra a un mamífero a través de vacunas tras conjugación con un portador inmunogéníco para estimular el sistema inmunológico y producir anticuefos anti-LHRH que reaccionan con la LHRH y reducen de forma eficaz su concentración en el cuefo. Por tanto, los efectos causados por la presencia de LHRH, incluidas concentraciones séricas elevadas de FSH y LH, que se cree que causan incontinencia urinaria, se reducen o eliminan. Los portadores inmunogénícos usados en la preparación de los conjugados de LHRH descritos antes incluyen cualquier sustancia que sea capaz de incrementar la inmunogenícidad de la LHRH. Los portadores inmunogénicos usados en los conjugados de la presente invención pueden ser naturales o sintéticos. En un aspecto, el portador inmunogénico es una proteína. En la vacuna conjugada de la presente invención se puede usar una cualquiera de una variedad de proteínas portadoras ¡nmunogénicas bien conocidas para los expertos en la técnica. Entre las clases adecuadas de proteínas se incluyen pili, proteínas de la membrana externa y toxinas excretadas de bacterias patógenas, formas inocuas o "toxoides" de tales toxinas excretadas, proteínas inocuas antigénicamente similares a las toxinas bacterianas y otras proteínas. Enlre los ejemplos no limitantes de toxoides bacterianos cuyo uso se contempla en la presente invención se incluyen la toxina/toxoide del tétanos, la toxina/toxoide diftérica, la toxina A destoxificada de P. aeruginosa, la toxina/toxoide del cólera, la toxina/toxoíde pertussis y exotoxinas/toxoide de Clostridium perfringens. Se prefieren las formas toxoides de estas toxinas bacterianas. Más preferentemente, el portador inmunogéníco usado en los conjugados de LHRH de la presente invención es el toxoide diftérico. Debe entenderse que cuando se hace referencia al toxoide diftérico se incluyen todas las formas de toxoide diftérico y derivados del mismo. El término "derivados" posee el mismo significado que el definido anteriormente en la presente memoria descriptiva. Los derivados pueden incluir, por ejemplo, moléculas que comprenden epítopes de células T del toxoide diftérico o epítopes de células T aislados. . En otro aspecto de la presente invención, el portador puede ser un péptido sintético que comprenda al menos un epítope de célula T auxiliar. Los epítopes pueden ser sencillos o estar unidos entre sí para formar un polipéptido sencillo. Deberá entenderse que cuando los epítopes están unidos en un polipéptido individual, los epítopes pueden estar contiguos o separados por aminoácidos adicionales que no son por sí mismos parte de los epítopes de células T auxiliares. En una modalidad, el epítope de las células T auxiliares está contenido en una secuencia peptídico que se selecciona de entre las descritas en la patente de E.U.A. n° 6.685.947, que se incorpora en la presente memoria descriptiva como referencia. En una modalidad preferida, la vacuna de péptido sintético además comprende al menos un epítope de al menos un epítope de célula B y/o al menos un epítope de CTL(linfocitos T citotóxicos). En una modalidad más preferida, la vacuna de péptido sintético comprende de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 epítopes de células T auxiliares, cada uno en secuencia lineal con una forma 4-10 de LHRH, siendo el contenido total de péptido de aproximadamente 120 µg péptido/dosis en combinación con aproximadamente 80 µg de un adyuvante. Preferentemente, el adyuvante comprende un complejo inmunoestímulante. Los expertos habiíuales en la técnica conocen bien métodos adecuados para acoplar LHRH a un portador inmunogénico. Sin pretender limitar la invención a ningún método, se puede, por ejemplo, acoplar la LHRH a un portador del modo descrito en Ladd y col., American J. Reprod?ctive Immunology 22:56-63 (1990) o en Bonneau y col., J. Animal Science 72:14-20 (1994). El conjugado resultante puede procesarse para eliminar cualquier péptido sin unir restante u otros subproductos de la conjugación. Tal procesamiento se puede conseguir mediante diálisis convencional o por ultrafiltración. Las vacunas de la presente invención se pueden combinar con, o pueden además incluir, un adyuvante. Los adyuvantes se incluyen o añaden a las vacunas y otras formulaciones inmunogénicas para incrementar, y en algunos casos dirigir, la respuesta inmunitaria. Los expertos habituales en la técnica apreciarán que en la presente invención se puede usar cualquier adyuvante estándar bien conocido. Entre los adyuvantes adecuados para usar en las vacunas de la presente invención se incluyen, entre otros, sales insolubles de aluminio, particularmente las formas hidróxido y fosfato (colectivamente "alumbre"), murabutide, adyuvante incompleto de Freund, adyuvante completo de Freund, polisacáridos iónicos, tales como el grupo dietil-aminoelil ("DEAE"), saponinas, complejos inmunoestimulantes y combinaciones de los mismos. En una modalidad preferida se usan adyuvantes, que no provocan reacciones secundarias o éstas son sólo leves. Entre otros adyuvantes adecuados que se pueden usar en relación con la presente invención se incluyen, entre otros, aquéllos que se describen en la Solicitud Internacional N° PCT/AU99/01167, publicada el 21 de enero de 1999 como WO 99/02180 y la Solicitud Internacional n° PCT/AU98/00532, publicada el 20 de julio de 2000 como WO 99/41720, que se ¡ncofora en la presente memoria descriptiva como referencia. En una modalidad preferida, el adyuvante es un DEAE dextrano. En una modalidad más preferida, el adyuvante es un DEAE dextrano en combinación con un complejo inmunoestimulante que comprende una saponina y colesterol. Sin limitar la presente invención a ninguna teoría o modo de acción, la administración de una cantidad eficaz de la vacuna anti-LHRH de la presente invención induce una respuesta ¡nmunitaria a la LHRH, y, por tanto, impide la liberación de las hormonas LH y FSH desde la hipófisis anterior. Preferentemente, la cantidad de dicha vacuna anti-LHRH es eficaz a la hora de mejorar los efectos secundarios asociados con la ovariectomía o los síntomas asociados con la senescencia reproductora, en particular, la incontinencia urinaria, mediante la reducción de la concentración sérica de FSH y/o LH circulante en un mamífero hembra al que se administra la vacuna. Debe entenderse que la eficacia es una medida funcional y no está definida en relación con el título de anticuerpos anti-LHRH solo, ya que la presencia de un anticuefo circulante solo no es necesariamente indicativa de la capacidad de dicho anticuefo circulante para controlar la incontinencia urinaria. Por tanto, como con todas las composiciones inmunogénicas para provocar anticuerpos, las cantidades inmunológícamente eficaces de las vacunas de la presente invención deben determinarse empíricamente. Los factores que deben considerarse incluyen la elección de adyuvante, la molécula inmunogénica a la que se acopla la LHRH, la vía de administración y el número de dosis que se van a administrar. Tales factores se conocen en la técnica de las vacunas, y un experto habitual en la técnica sería capaz de realizar tales determinaciones sin experimentaciones innecesarias. De acuerdo con esto, mediante los métodos de la presente invención, los efectos secundarios de la ovariectomía o los síntomas asociados con la senescencia reproductora, en particular la incontinencia urinaria, en mamíferos hembra, tales como perros hembra a las que se han extraído los ovarios, se pueden tratar o controlar. En una modalidad preferida, la presente invención se refiere a un método para tratar o controlar la incontinencia urinaria en un mamífero, comprendiendo dicho método la administración a dicho mamífero de una cantidad eficaz de una vacuna anti-LHRH. Preferentemente, la vacuna anti-LHRH está en la forma de un conjugado LHRH-portador inmunogénico. En una modalidad más preferida, el conjugado comprende un conjugado LHRH-toxoide diftérico. En una modalidad alternativa, la vacuna anti-LHRH se encuentra en la forma de un péptido sintético que comprende un epítope de célula T auxiliar. Preferentemente, la vacuna de péptido sintético comprende de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 epítopes de células T auxiliares, cada uno en secuencia lineal con una forma 4-10 de LHRH, siendo el contenido total de péptido de aproximada 120 µg péptido/dosis en combinación con aproximadamente 80 µg de un complejo inmunoestimulante. El mamífero preferido que se va a tratar de acuerdo con la vacuna de la presente invención es una hembra, más preferentemente una hembra con niveles séricos elevados de FSH o LH o ambos. En una modalidad más preferida, el mamífero es un perro hembra, y en particular un perro hembra que ha sido castrada o se le han extraído los ovarios quirúrgicamente. En otra modalidad, la invención proporciona un método para prevenir el inicio de incontinencia urinaria en un perro al que se le han extifado los ovarios, mediante la administración al perro de una cantidad eficaz de una vacuna antí-LHRH después de la extracción de los ovarios. Las vacunas de la presente invención se pueden administrar por cualquier método adecuado conocido en la técnica, incluida, entre otros, la administración oral o mediante inyección. Las formas farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones acuosas estériles (cuando son hidrosolubles) o dispersiones y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones inyectables estériles o dispersiones. Deben ser estables, tanto física como químicamente, en las condiciones de fabricación y almacenamiento, y deben protegerse de la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un disolvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido, y similares), mezclas adecuadas de los mismos, y aceites vegetales. La fluidez adecuada se puede mantener, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de la dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos se puede llevar a cabo mediante diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo azúcares o cloruro sódico. La absorción prolongada o la liberación retardada de las composiciones inyectables se puede realizarse medíante el uso en las composiciones de agentes que retrasen la absorción, por ejemplo monoesteareatú de aluminio y gelatina. Las soluciones inyectables estériles se preparan mediante la incorporación de los compuestos activos en la cantidad requerida en el disolvente adecuado con diversos de los otros ingredientes enumerados anteriormente, según se requiera, seguido por esterilización filtrada. En general, las dispersiones se preparan medíanle la incorporación de los diversos ingredientes activos esterilizados en un vehículo estéril que contiene el medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En el caso de los polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son secado al vacío, la técnica de liofilización y la técnica de secado por nebulización, que proporcionan un polvo de los ingredientes activos más cualquier ingrediente adicional deseado de la solución de los mismos previamente esterilizada por filtración. Cuando los ingredientes activos están protegidos de forma adecuada, pueden administrarse por vía oral, por ejemplo con un diluyente inerte o con un portador comestible asimilable, o pueden incluirse en una cápsula de gelatina con cubierta dura o blanda, o comprimirse en comprimidos, o incorporarse directamente en los alimentos de la dieta. Para la administración oral, el compuesto activo puede estar incorporado con excipientes y usarse en la forma de comprimidos ingeribles, comprimidos orales, trociscos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas, y similares. Tales composiciones y preparaciones deberán contener al menos un 1% en peso de compuesto activo. El porcentaje de las composiciones y preparaciones puede, por supuesto, variar y, convenientemente, puede ser de entre aproximadamente un 5% a aproximadamente un 80% del peso de la unidad. La cantidad de compuesto activo en tales composiciones útiles es tal que se obtendrá una dosificación adecuada. Las composiciones o preparaciones preferidas según la presente invención se preparan de forma que una forma de unidad de dosificación oral contenga entre aproximadamente O.l µg y 2000 µg de compuesto activo. Los comprimidos, trociscos, las pildoras, las cápsulas y similares también pueden contener los componentes de la lista mostrada más adelante. Un aglutinante, tal como goma, goma arábiga, almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato dicálcico; un agente disgregante tal como almidón de maíz, almidón de patata, ácido algínico y similares, y un lubricante tal como estearato de magnesio. Cuando la forma de unidad de dosificación es una cápsula, puede contener, además de materiales del tipo anterior, un portador líquido. Pueden estar presentes diversos otros materiales como recubrimientos o para, de oíro modo, modificar la forma física de la unidad de dosificación, Un jarabe o elixir puede contener el compuesto activo, metil y propilparabenos como conservantes, y un colorante. Por supuesto, todo material usado en la preparación de cualquier forma de unidad de dosificación deberá ser veterinariamente puro y sustancialménte inocuo en las cantidades empleadas. Además, el o los compuestos activos pueden incorporarse en preparaciones y formulaciones de liberación sostenida. Entre los vehículos y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables se incluyen todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúpgicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, y similares. El uso de tales medios y agentes para las sustancias veterinariamente activas es bien conocido en la técnica. Excepto en la medida en la que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con el ingrediente aclivo, se contempla el uso de los mismos en las composiciones terapéuticas. En las composiciones también se pueden incorporar ingredientes activos complementarios. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de unidad de dosificación para la facilidad de la administración y la uniformidad de la dosificación. Para la administración al ganado es particularmente ventajoso usar un envase multidosis asociado a un disparador de vacuna de repetición. Forma de unidad de dosificación, como se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a unidades físicamente diferenciadas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos que se van a tratar; donde cada unidad contiene una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéulico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación de las nuevas formas de unidad de dosificación de la invención viene dictada y depende directamente de (a) las características únicas del material activo y el particular efecto terapéutico que se va a alcanzar, y (b) las limitaciones inherentes a la técnica de mezclar tal maíerial aclivo para el tratamiento de la enfermedad en sujetos vivos que presentan un traslomo patológico en donde la salud corporal está alterada como se describe con detalle en la presente memoria descriptiva. El principal ingrediente activo se mezcla para su administración conveniente y eficaz en cantidades eficaces con un vehículo adecuado farmacéuticamente aceptable en forma de unidad de dosificación como se ha descrito anteriormente en la presente memoria descriptiva. Una forma de unidad de dosificación puede, por ejemplo, contener el principal compuesto activo en cantidades que varían desde aproximadamente 0.5 µg a aproximadamente 2000 µg. Expresado en proporciones, el compuesto activo suele estar presente en de aproximadamente 0.5 µg a aproximadamente 2000 µg/ml de vehículo. Las cantidades relativas del ingrediente activo, el vehículo farmacéuticamente aceptable y cualquier ingrediente adicional en una composición farmacéutica de la invención variarán, dependiendo de la identidad, el tamaño y el trastorno del sujeto tratado y además dependiendo de la vía por la cual la composición se va a administrar. La invención se describe además con detalle con referencia a los siguientes ejemplos experimentales. Estos ejemplos se proporcionan únicamente con fines ilustrativos, y no se pretende que sean limitantes a menos que se especifique otra cosa. Por tanto, la invención no debe interpretarse de ninguna manera como limitada a los ejemplos siguientes, sino que debe interpretarse que abarca todas y cada una de las variaciones que se ponen de manifiesto como resultado de las enseñanzas que se proporcionan en la presente memoria descriptiva. Aunque la invención se ha descrito en referencia a modalidades específicas, es evidente que otros expertos en la técnica pueden concebirse otras modalidades y variaciones de esta invención sin desviarse del espíritu verdadero y alcance de la invención. Se pretende que las reivindicaciones adjuntas se interpreten para incluir todas estas modalidades y variaciones equivalentes.

EJEMPLO 1 Alcance del estudio clínico: Los perros hembra (perras) que se han castrado o a las que se han extraído los ovarios quirúrgicamente suelen padecer incontinencia urinaria. Se ha comunicado una incidencia de esta enfermedad tal elevada como del 20%. Los tratamientos actuales residen en la administración diaria de fármacos tales como estrógenos siníéticos durante periodos prolongados, lo que es tanto caro como inconveniente. El uso de una vacuna de acción prolongada sería una mejora significativa en el tratamiento de este trastorno habitual de perros hembra a las que se han extraído los ovarios.

Consideraciones: Una formulación para tratar la incontinencia urinaria en perros incluye cualquier vacuna anti-LHRH eficaz. En la técnica anterior se han descrito muchas de estas vacunas, aunque la mayoría de ellas no proporcionan eficacia y seguridad lo bastante elevadas para ser comercialmente viables. Ha habido muy pocos ejemplos de vacunas eficaces en perros descritas en la bibliografía. En la actualidad se dispone comercialmente de varios ejemplos de vacunas de LHRH, particularmente en Australia y Nueva Zelanda. Entre estas se incluyen IMPROVAC®, para el control del olor sexual en cerdos macho, y EQUITY® para el control del comportamiento relacionado con el estro en yeguas y potrancas, ambos productos se pueden obtener comercialmente en Pfizer Animal Health. Estas formulaciones son para aplicar en animales grandes, por lo que cabría esperar que no fueran seguras en animales más pequeños tales como perros, y cabría esperar que requirieran modificaciones para un uso seguro y eficaz en animales caninos y otros animales de compañía. Otra formulación se ha registrado condicionalmente con la USDA en E.U.A. para el tratamiento de la hiperplasia prostática benigna en perros macho adultos intactos. Se ha demostrado que esta vacuna es segura y eficaz en perros macho adultos y se contempla su uso en la presente invención para controlar la incontinencia urinaria canina (IUC), del siguiente modo: Se realizo un estudio como un estudio doble ciego, con dos grupos que reciben vacuna para la IUC o placebo, consistiendo el placebo en adyuvante solo. Ni los propietarios ni los veterinarios clínicos conocen el tratamiento que se les están administrando.

Animales: Las perras (en un número de hasta 35) conservadas como animales domésticos por miembros de la comunidad se seleccionan de un registro clínico sin limitaciones, tal como, por ejemplo, el registro de la Universidad de Melbourne / Clínica Veterinaria. Para el estudio sólo se seleccionan las perras a las que se han extraído los ovarios mayores de 2 años de edad, con el trastorno clínico de incontinencia urinaria de larga duración y que han sido tratadas previamente por este trastorno (con otros tratamientos reconocidos, tales como estilbestrol, una forma sintética de estrógeno) o con un estimulador alfa adrenérgico tal como PPA.

Vacunas: En una modalidad, la vacuna comprende la que está provisionalmente autorizada por la USDA a Pfizer Animal Health para el tratamiento de la hiperplasia prostática benigna, que contiene 200µg/dosís de conjugado de forma 2-10 de péptido LHRH conjugado con el toxoide diftérico como portador, con un sistema adyuvante combinado de 10 mg de DEAE dextrano y 80 ug de un complejo inmunoestimulante como se describe en la Solicitud Internacional N° PCT/AU99/01167, publicada el 21 de enero de 1999 como WO 99/02180. En otra modalidad, la vacuna comprende una vacuna de péptido sintético comprendida por de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 epítopes de células T auxiliares, cada uno en secuencia lineal con una forma 4-10 de LHRH, siendo el contenido total de péptido de 120 µg péptido/dosis en combinación con 80 µg de complejo inmunoesíimulante. La vacuna se administra a cada perro del estudio al menos dos veces a intervalos de 28 días. Los siguientes parámetros se miden directamente tras cada vacunación: temperatura corporal, comportamiento, incluidos letargo, dolor en el punto de la inyección y tumefacción en el punto de la inyección. Además, se toman muestras de suero para medir los niveles de LH y las respuestas de anticuerpos a la LHRH. La puntuación de la incontinencia urinaria en cada perra la realizan los propietarios individuales, de acuerdo con un sistema de puntuación común, comenzando 2 semanas antes de la primera vacunación. De este modo, cada perro individual actúa como su propio control para los cambios posteriores al tratamiento.

Claims (33)

NOVEDAD DE LA INVENCI N REIVINDICACIONES

1.- El uso de una vacuna anti-LHRH para la elaboración de un medicamento útil para el tratamiento de la incontinencia urinaria en un mamífero que necesite tal tratamiento.

2.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicho mamífero es una hembra.

3.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicho mamífero es una hembra que presenta concentraciones séricas elevadas de una gonadotropina.

4.- El uso como se reclama en la reivindicación 3, en donde dicha gonadotropina se selecciona del grupo compuesto por hormona luteinizante y hormona estimuladora de los folículos.

5.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicho mamífero está castrado quirúrgicamente.

6.- El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde dicho mamífero es un perro hembra a la que se le han extraído los ovarios.

7.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicha vacuna anti-LHRH comprende un conjugado inmunogénico entre un portador y la LHRH.

8.- El uso como se reclama en la reivindicación 7, en donde dicho portador comprende una proteína.

9.- El uso como se reclama en la reivindicación 8, en donde dicha proteína comprende un toxoide bacteriano.

10.- El uso como se reclama en la reivindicación 9, en donde dicho toxoide bacteriano es el toxoide diftérico.

11.- El uso como se reclama en la reivindicación 7, en donde dicho portador comprende un péptido sintético que comprende al menos un epítope de célula T auxiliar.

12.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicha vacuna además incluye un adyuvante.

13.- El uso como se reclama en la reivindicación 12, en donde dicho adyuvante comprende un DEAE-dextrano.

14.- El uso como se reclama en la reivindicación 13, en donde dicho adyuvante además comprende un complejo inmunoestimulante, en donde dicho complejo inmunoestimulante está comprendido por una saponina y un componente colesterol.

15.- El uso como se reclama en la reivindicación 7, en donde dicho conjugado inmunogénico comprende un conjugado LHRH-toxoide diftérico.

16.- El uso de una composición que comprende un conjugado inmunogénico entre un portador y la LHRH, para la elaboración de un medicamento útil para tratar o controlar la incontinencia urinaria en un mamífero.

17.- El uso como se reclama en la reivindicación 16, en donde dicho portador comprende una proíeína.

18.- El uso como se reclama en la reivindicación 17, en donde dicho portador comprende toxoide diftérico.

19.- El uso como se reclama en la reivindicación 16, en donde dicho portador comprende un epítope de células T.

20.- El uso como se reclama en la reivindicación 16, en donde dicha composición además incluye un adyuvante.

21.- Una vacuna que comprende LHRH, útil para el tratamiento o control de la incontinencia urinaria en un mamífero hembra.

22.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizada además porque comprende un adyuvante.

23.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizada además porque la LHRH se conjuga con un portador inmunogénico.

24.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque dicho portador inmunogénico comprende una proteína.

25.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque dicho portador inmunogénico comprende un epítope de células T auxiliares.

26.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 24, caracterizada además porque dicha proteína comprende toxoide diftérico.

27.- La vacuna de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizada además porque dicho mamífero hembra comprende un perro al que se le han extraído los ovarios quirúrgicamente.

28.- El uso de LHRH para la elaboración de un medicamento útil para potenciar la respuesta inmunitaria de un mamífero que padezca incontinencia urinaria a causa de la producción y liberación de una gonadotropina.

29.- El uso como se reclama en la reivindicación 28, en donde el medicamento se formula para ser adminislrable en la forma de un antígeno.

30.- El uso como se reclama en la reivindicación 28, en donde el medicamento se formula para ser administrable en forma de una vacuna.

31.- El uso de una vacuna anti-LHRH, para la elaboración de un medicamento útil para tratar la incontinencia urinaria en un perro castrado o al que se le han extraído los ovarios quirúrgicamente.

32.- El uso como se reclama en la reivindicación 31 , en donde el perro es una hembra.

33.- El uso de una vacuna anti-LHRH en la elaboración de un medicamento útil para prevenir el inicio de la incontinencia urinaria en un perro hembra a la que se le han extraído los ovarios.