MX2007009077A - Metodos y materiales con trans-clomifeno para el tratamiento de la infertilidad masculina. - Google Patents

Abstract

Las composiciones que comprenden trans-clomifeno para tratar la infertilidad masculina pueden utilizarse para tratar la infertilidad masculina.

Description

MÉTODOS Y MATERIALES CON TRANS-CLOMIFENO PARA EL TRATAMIENTO DE LA INFERTILIDAD MASCULINA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con el tratamiento de la infertilidad masculina. Más específicamente, la presente invención se relaciona con el uso de una composición que comprende trans-clomifeno para tratar la infertilidad. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La testosterona es el andrógeno masculino primario, que juega un papel vital en la salud masculina global. La testosterona es esencial para el desarrollo y el mantenimiento de los tejidos reproductivos específicos (testículos, próstata, epidídimo, vesícula seminal, y pene) y de las características sexuales masculinas secundarias. Juega un papel crucial en la libido y en la función eréctil y es necesaria para la iniciación y el mantenimiento de la espermatogénesis. La testosterona también tiene funciones importantes no relacionadas con los tejidos reproductivos. Por ejemplo, afecta positivamente la composición del cuerpo mediante el incremento de la retención de nitrógeno, que soporta la masa magra del cuerpo, el tamaño y la fuerza de los músculos. También actúa sobre los huesos para estimular la formación ósea.

La secreción de testosterona es el producto final de una serie de procesos hormonales. La hormona que libera gonadotropina (GnRH) , la cual se secreta en el hipotálamo, controla la secreción pulsátil de la hormona luteinizante (LH) y la hormona estimulante de los folículos (FSH) , las cuales se secretan por la pituitaria anterior. La LH, a su vez, regula la producción y la secreción de testosterona en las células Leydig de los testículos, mientras que la FSH asiste en la inducción de la espermatogénesis. La testosterona se mide más a menudo como "testosterona total". Esta medición incluye la testosterona que se enlaza a la globulina de enlace a la hormona sexual (SHBG) (~ 44%) y por consiguiente que no está biodisponible y a la testosterona que está ya sea libre (- 2%) o débilmente enlazada a otras proteínas (no enlazada a SHBG) (- 54%) . Los resultados de un estudio WHO indican que la testosterona normalmente se secreta en un ritmo circadiano, con niveles más altos en la mañana y niveles en el punto más bajo que se presentan alrededor de 8 a 10 horas. Esta variación en la secreción de testosterona durante todo el día se vuelve mucho menos pronunciada en hombres mayores (edad media igual a 71 años) . Hasta hora no se conoce la importancia de este ritmo.

Se obtuvieron muestras a partir de ambos pacientes; jóvenes y mayores, cada 10 minutos durante 24 horas vía una cánula residente. De acuerdo a Tenover (1987) los niveles medios de testosterona en suero total a 24 horas en hombres jóvenes saludables (rango de edad 22 años - 35 años, promedio 27.3 años) fueron 4.9 ± 0.3 (± SEM) mg/ml (17.0 nmol/L) mientras que los hombres mayores (rango de edad 65 años - 84 años, promedio 70.7 años) tuvieron un nivel medio de testosterona en suero total a 24 horas significativamente menor de 4.1 ± 0.4 mg/ml. (P < 0.5; 14.2 nmol/L). Los niveles de testosterona en suero total, obtenidos de muestras únicas aleatorias fueron también significativamente inferiores en los hombres mayores (4.0 ± 0.2 mg/ml [13.9 n nmol/L]) comparados a 4.8 ± 0.2 mg/ml [16.6 nmol/L] en los hombres jóvenes saludables. La deficiencia de testosterona puede resultar del padecimiento subyacente o de los desórdenes genéticos y también es frecuentemente una complicación del envejecimiento. Por ejemplo, el hipogonadismo primario resulta de la falla testicular primaria. En esta situación, los niveles de testosterona son menores y los niveles de las gonadotropinas pituitarias (LH y FSH) son elevados. El hipogonadismo secundario se debe la secreción inadecuada de las gonadotropinas pituitarias. Además de un nivel bajo de testosterona, los niveles LH y FSH están bajos o bajo-normales. Algunas de las secuelas de la deficiencia de testosterona en adultos incluyen una amplia variedad de síntomas incluyendo: pérdida de libido, disfunción eréctil, oligospermia o azoospermia, ausencia o regresión de las características sexuales secundarias, disminución progresiva en la masa muscular, fatiga, humor deprimido y riesgo incrementado de osteoporosis. Muchos de estos desórdenes son genéricamente referidos como menopausia masculina (andropausia) . Hoy en día, existen varias formas de terapia de testosterona en los Estados Unidos. Recientemente, las preparaciones transdérmicas han ganado favor en el mercado. Sin embargo, un parche escrotal de testosterona resulta en niveles suprafisiológicos de 5a-dihidrotestosterona (DHT) debido a la alta concentración de 5 -reductasa en piel escrotal. No es conocido si estos niveles de DHT elevados tienen alguna consecuencia en la salud a largo plazo. Los sistemas no escrotales se consideran más convenientes y la mayoría de los pacientes logran concentraciones promedio en suero dentro del rango normal y tienen niveles normales de DHT. La terapia de testosterona oral no se recomienda debido a que las dosis requeridas para la terapia de reemplazo se asocian con un riesgo significativo de hepatotoxicidad.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Se proporciona un método pata tratar la infertilidad masculina. Una composición que comprende trans-clomifeno o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, puede administrarse a un sujeto en necesidad del tratamiento, del mismo, una composición que comprende una cantidad efectiva de trans-clomifeno o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo y opcionalmente uno o más diluentes, adyuvantes, portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables. La composición puede comprender trans-clomifeno y cis-clomifeno en proporción mayor que 71/29. La composición también puede comprender 0% a aproximadamente 29% peso/peso de cis-clomifeno y aproximadamente 100% a aproximadamente 71% de trans-clomifeno . La composición también puede consistir esencialmente de una cantidad efectiva de trans-clomifeno o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. La composición puede administrarse en una dosis de 1-200 mg de trans-clomifeno por día. La composición también puede administrarse en una dosis de aproximadamente 50 mg de trans-clomifeno por día. La composición también puede administrarse en una dosis de 1.5 mg/Kg. de trans-clomifeno por día. La composición puede formularse en cualquier forma, incluyendo una cápsula.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIGURA 1 es un gráfico representativo de los perfiles normales de testosterona en suero total secretorio, en hombres saludables (jóvenes y mayores) . La FIGURA 2 muestra la estructura química del citrato de trans-clomifeno . La FIGURA 3 es una demostración gráfica del curso de tiempo de los niveles de testosterona en suero con Clomid, Enclomid y Zuclomid. La FIGURA 4 es una demostración gráfica del curso de tiempo de los niveles de colesterol en mandriles varones tratados con Clomid, Enclomid y Zuclomid. La FIGURA 5 demuestra el efecto del Androxal™ o del Androgel® en los niveles de testosterona. La FIGURA 6 demuestra el efecto del Androxal™ o del Androgel® en los niveles de LH . La FIGURA 7 demuestra el efecto del Androxal™ o del Androgel® en los niveles de FSH. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se proporciona una composición que comprende trans-clomifeno para tratar la infertilidad en mamíferos machos. El clomifeno (FIGURA 2) es un antiestrógeno relacionado con el tamoxifen que bloquea la retroalimentación normal de estrógeno en el hipotálamo y la retroalimentación negativa subsiguiente en la pituitaria. Esto conduce a incrementos en la hormona luteinizante (LH) y en la hormona estimulante de los folículos (FSH) . En los hombres, estos niveles incrementados de gonadotropinas estimulan las células Leydig de los testículo y dan como resultado la producción de niveles más altos de testosterona. El citrato de clomifeno tiene la siguiente estructura : A partir de J. Pharmaceut . Sci. 65:148 (1976), se ha mostrado que el clomifeno es una mezcla de dos isómeros geométricos a los que refieren como cis , -Z- , clomifeno (cis-clomifeno o zuclomifeno) y trans- , E- , clomifeno, (trans-clomifeno o enclomifeno) . De acuerdo Ernst, et. al . , el trans-clomifeno HCl (clorhidrato de trans-clomifeno) tiene un punto de fusión de 149 °C-150.5 °C, mientras que el cis-clomifeno HCl (clorhidrato de cis-clomifeno) tiene un punto de fusión de 156.5 °C - 158 °C. Ernst et. al . , también ha notado que (el trans-isómero) es antiestrogénico (AE) mientras que el cis-isómero es la forma más potente y más estrogénica y también se ha reportado que tiene actividad antiestrogénica. Los autores atribuyen el efecto del fármaco sobre la actividad ovulatoria a ambas formas manifestando que la mezcla es más efectiva que el trans-clomifeno aisladamente. El trans-isómero auxilia la ovulación en el nivel del hipotálamo. El isómero estrogénico cis-clomifeno contribuye a la ovulación mejorada en la trayectoria fisiológica que conduce a la ovulación. Se reporta también que los isómeros reportados tienen diferente vida media in vivo . Además, se ha reportado que la forma cis reportada deja los niveles residuales en sangre en exceso de un mes después de una sola dosis. Vandekerc hove , et. al . (Cochrane Datábase Syst Rev 2000; (2) :CD000151 (2000)) notó que diez estudios que involucran a 738 hombres han sugerido que los antiestrógenos parecen tener un efecto benéfico en los resultados endocrinos, es decir, en la testosterona, pero no hay suficiente evidencia para evaluar los efectos sobre la fertilidad. No obstante la administración del clomifeno debería mejorar los niveles de testosterona, así bien se podría concluir fácilmente que el fármaco debería impactar positivamente los efectos laterales de la privación de testosterona mientras los testículos aún retienen la habilidad para responder a la estimulación de la gonadotropina . El clomifeno está actualmente aprobado como una mezcla de ambos isómeros; cis- y trans-, el cis- isómero estando presente como aproximadamente 30% a 50% (Manual Merck) para la mejora de la fertilidad en el paciente anovulatorio . El clomifeno mejora la ovulación iniciando una serie de eventos endocrinos culminando en un surgimiento de gonadotropina preovulatoria y una subsiguiente ruptura folicular. Se recomienda administrar el fármaco durante 5 días en una dosis de hasta 100 mg diariamente. El clomifeno también se ha asociado con numerosos efectos laterales incluyendo: visión borrosa, molestia abdominal, ginecomastia, tumores testiculares, afluencia vasomotora o enrojecimiento, náuseas y dolores de cabeza. Además, otros estudios sugieren que el clomifeno posee ambos efectos; genotóxicos y de mejor del tumor. El resultado neto de estas observaciones es que el clomifeno en su formato actual, teniendo entre 30% y 50% del isómero cis, sería inaceptable para la terapia crónica en hombres para el tratamiento de deficiencia de testosterona. El clomifeno también se ha utilizado para la intervención terapéutica en hombres con bajos niveles de testosterona. Tenover et. al . , J. Clin. Endocrinol. Metab. 64:1103, (1987) y Tenover et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 64:1118 (1987) encontraron un incremento en FSH, LH tanto en los hombres jóvenes como en los mayores después del tratamiento con clomifeno. También encontraron incrementos en la testosterona libre y total en hombres, mostrando incrementos significativos en los hombres jóvenes También se condujeron estudios para determinar si o no, el clomifeno podría usarse para mejorar la fertilidad en hombres mejorando la calidad del semen. Homonnai et. al .

Fértil, and Steril 50:801 (1988) observó incrementos en la concentración y conteo de esperma pero otros no. (Vea por ejemplo, Sokel, et al, Fértil, and Steril. 49: 865 (1988); Check, et al, Int. J. Fértil. 34:120 (1989); Purvis, et al, Int. J. Androl 27:109 (1989); y Breznik, Arch. Androl. 21:109 (1993) ) . Un grupo presenció un deterioro en el porcentaje de esperma normal con tratamiento de largo plazo. Shamis, et al, Arch. Androl 27:109 (1991). Un estudio WHO no mostró cambios en la calidad de semen o en la fertilidad después de 6 meses de tratamiento. (Anonymous Androl. 15:299 (1992).) Un meta-análisis parece confirmar que los niveles de testosterona suben en hombres con esperma de calidad pobre pero no la fertilidad. (Vanderkerckhove, et al, 2000) . Los estudios también han sugerido que el tratamiento de largo plazo con clomifeno no parece tener un efecto deletéreo drástico en la salud, aunque mostró que el tratamiento resultó en calidad de esperma más pobre después de 4 meses . Los estudios han mantenido a los hombres con clomifeno durante tan largo como 18 meses y en niveles de 25 mg por día o 100 mg un día si y un día no. En 1991, Guay et al (Urology 35:377 (1991)) sugirió que el clomifeno podría tratar la disfunción sexual en hombres. Su hipótesis parece ser que la función sexual sigue los niveles de testosterona. Esto fue soportado por estudios anteriores que muestran la influencia positiva de los andrógenos y la función sexual, Davidson, et. al . , J. Clin. Endocrinol. Metab. 48:955 (1979), y por estudios que calculan las erecciones relacionadas al dormir como una fuerte respuesta para T, Cunningham, et al, J. Clin. Endocrinol. Metab. 70:792 (1990). Sin embargo, en 1995, Guay et. al . (Gray, et. al . , J. Clin. Endocrinol. Metab. 80:3546 (1995)) publicó un estudio en el cual vieron un incremento en LH, FSH, y en la testosterona después de 2 meses de clomifeno pero sin efectos en la disfunción eréctil. Podría haber algunas ventajas para los hombres jóvenes y grupos específicos de hombres mayores, pero parece que la solo elevación de los niveles de testosterona no es suficiente. Los efectos de la testosterona sobre las erecciones relacionadas al dormir pudieron haberse tomado muy seriamente (Herskowitz, et. al . , J. Psychosomat . Res. 42:541 (1997) ) . La composición que comprende trans-clomifeno o una mezcla predefinida de los isómeros trans- y cis-, del clomifeno puede usarse para tratar la infertilidad masculina. Se administra a un paciente que tiene una necesidad o un deseo para tratar la infertilidad masculina, una o más dosis de una cantidad efectiva de la composición que comprende trans-clomifeno en una dosis entre un mg a aproximadamente 200 mg (aunque la determinación de las dosis óptimas es con el nivel de habilidad ordinaria en el arte) . El compuesto también puede estar presente en la composición con tal de que la proporción de trans-clomifeno a cis-clomifeno sea mayor que 1. Los análogos de los isómeros trans- y cis- del clomifeno tales como aquellos descritos en Ernst, et. al . supra también son útiles en la práctica de la presente invención. Las dosis preferentemente (pero no necesariamente) se administran como parte de un régimen de dosis diseñado para dar lugar a los niveles de testosterona en suero que imitan o corresponden al perfil normal de testosterona en suero total secretorio descrito en la FIGURA 1. Por ejemplo, de acuerdo a la FIGURA 1 puede administrarse una dosis de la composición preferida en una formulación farmacéutica que daría lugar a niveles máximos de testosterona en suero en alrededor de las 8 a.m. Tales formulaciones farmacéuticas pueden estar de la forma de formulaciones de liberación sostenida preparadas como se describe por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 6,221,399, la Patente Japonesa 4-312522, Meshali et . al., Int. J. Phar. 89:177-181 (1993), Kharenko et . al., Intern. Symp. Control Reí. Bioact. Mater. 22:232-233 (1995), WO 95/35093, Dangprasit et. al . , Drug. Devel. e Inel . Pharm. 2JL (20):2323-2337 (1995); Patentes Norteamericanas Nos. 6,143,353, 6,190,591, 6,096,338, 6,129,933, 6,126,969, 6,248,363 y otras formulaciones de liberación sostenida bien conocidas en el arte . Las composiciones farmacéuticas o formas de dosificación unitaria adecuadas, pueden estar de la forma de sólidos, tal como tabletas o cápsulas llenas o de líquidos tal como suspensiones de soluciones, emulsiones, elixires o cápsulas llenas de lo mismo, todas para el uso oral. Las composiciones también pueden estar en la forma de soluciones inyectables estériles o emulsiones para el uso parenteral (incluyendo subcutáneo) . Tales composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitaria de la misma pueden comprender ingredientes en proporciones convencionales. Las composiciones de acuerdo la presente invención también pueden administrarse por la ruta intravenosa, subcutánea, bucal, transmucosa, intrathecal, intradérmica, intracisternal u otras rutas de administración. Después de la administración de la composición, los niveles de testosterona en suero pueden medirse como se describe anteriormente y pueden alterarse las dosis para lograr un incremento suficiente en los niveles de testosterona en suero para lograr los resultados fisiológicos deseados asociados con la testosterona normal descrita anteriormente. Las composiciones de acuerdo a la presente invención puede comprender trans-clomifeno en una dosis entre un mg a aproximadamente 200 mg (aunque la determinación de las dosis óptimas está dentro del nivel de habilidad ordinaria en el arte) . La composición puede comprender trans-clomifeno en una dosis de aproximadamente 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 60 mg, 65 mg, 70 mg, 75 mg, 80 mg, 85 mg, 90 mg, 95 mg, 100 mg, 110 mg, 120 mg, 130 mg, 140 mg, 150 mg, 160 mg, 170 mg, 180 mg, 190 mg, 200 mg, o intermedios. La composición puede comprender trans-clomifeno y cis-clomifeno en una proporción de aproximadamente 71/29, 72/28, 73/27, 74/26, 75/25, 76/24, 77/23, 78/22, 79/21 ,80/20, 81/19,82/18, 83/17, 84/16, 85/15, 86/14, 87/13, 88/12, 89/11, 90/10, 91/9, 92/8, 93/7, 94/6, 95/5, 96/4, 97/3, 98/2, 99/1, 99.5/0.5, o allí en medio. Los análogos de los isómeros trans-y cis- del clomifeno tales como aquellos descritos en Ernst, et al. supra también son útiles en la práctica de la presente invención. Los siguientes Ejemplos pretenden ser ilustrativos de la invención y no pretenden limitar el alcance de la invención como se establece en las reclamaciones anexas. EJEMPLO 1 Efectos de los Clomids sobre la Testosterona y el Colesterol en Suero en Mandriles Machos A los mandriles adultos, machos se les dio 1.5 mg/Kg. de Clomid, Enclomid (trans-Clomid) o Zuclomid (cis-Clo id) durante 12 días consecutivos. Las muestras analizadas fueron los sueros tomados en el día del primer tratamiento antes de recibir el artículo de prueba (día 0) , después de 12 días del tratamiento (día 12) y 7 días después del último tratamiento (final o suspendido) . 1. Efectos sobre el Peso Corporal y LH, FSH, PRL y testosterona en Suero; Hubo incrementos significativos en la testosterona en suero total en el grupo que recibe el Enclomid. Vea la Tabla 1. No hubo diferencias entre los grupos en el período de la línea base o en el día 0. Tampoco hubo diferencia alguna entre los tres grupos 7 días después del tratamiento (período de suspensión) . Sin embargo, el Enclomid produjo niveles mayores de testosterona comparado al Clomid y Zuclomid en el día 6 (p = 0.03 y p = 0.00002 respectivamente) y comparado al Zuclomid en el día 12 (p = 0.047) . El Zuclomid claramente no elevó en grado alguno la testosterona en suero total . Comparado con los animales que reciben el Enclomid, los animales que reciben Clomid exhibieron niveles de testosterona total más variables en el día 6 y más tarde como se juzgó por sus coeficientes de variación. Cuando miramos el curso de tiempo de los efectos (FIGURA 3) , determinamos que sólo el Enclomid elevó significativamente y estadísticamente la testosterona en suero total en los días 6 y 12 comparado con ya sea los valores de la línea base o del día 0. Además, la cesación del tratamiento de Enclomid, dio como resultado una caída significativa en el nivel de testosterona en suero total entre el día 12 y el día 18 (suspensión) . Esto señala que el Enclomid se remueve fácilmente de la circulación consistente con la eliminación metabólica vista para el Enclomid en los humanos. El Enclomid fue claramente mejor y más consistente que el propio Clomid y el Zuclomid fue ineficaz.

Tabla 1 - Niveles de Testosterona en Suero (ng/dl) ANOVA p=0.61 p=0 43 p=0.007 p=0.57 p=0.256 K-W p=0.56 p=0 84 p=0.051 p=0.079 p=0.252 No hubo cambios en la LH o FSH en suero. La proporción de la testosterona en suero total para la LH siguió el mismo patrón como la testosterona en suero total, sugiriendo una falta de dependencia (no se muestran los datos) . Tampoco hubo cambio alguno en el peso corporal durante el estudio de 12 días. Hubo una disminución en la prolactina en suero (PRL) durante el estudio en el grupo que recibe el Enclomid, sugiriendo un efecto de antiestrógeno que se ha descrito en parte (Ben-Jonathan y Hnasko, 2001) y esperado con base en el hecho de que mientras los hombres envejecen, la testosterona declina e incrementa la Prolactina (Feldman et al , 2002) . 2. Efectos en los niveles de colesterol El tratamiento con Enclomid tendió a disminuir el colesterol en suero y el Zuclomid tendió a aumentar el mismo parámetro. El análisis preliminar señaló que los cambios en los niveles de colesterol no son estadísticamente significativos y que los cambios están dentro del rango normal. Debido a la tendencia observada de los dos isómeros de demostrar efectos opuestos sobre los niveles de colesterol en un corto periodo de tiempo, se realizó un análisis adicional.

El análisis detallado señaló que el Enclomid dio como resultado una disminución del 8% en los niveles de colesterol en suero. Inversamente, el tratamiento con Zuclomid dio como resultado un incremento del 22% en los niveles de colesterol en suero. El tratamiento con Clomid dio como resultado un ligero incremento en los niveles de colesterol en suero. El efecto opuesto del Enclomid y Zuclomid sobre los niveles de colesterol en suero no es inesperado dado que los isómeros tienen, alternativamente, actividad de estrógeno agonista o antagonista. Estos resultados señalan que el Enclomid puede usarse para tratar pacientes con altos niveles de colesterol . Estos resultados también señalan que el Enclomid puede ser más benigno que el Zuclomid con respecto al colesterol en suero si se usa crónicamente para incrementar los niveles de testosterona . 3. Efectos en los Parámetros de Química Clínica Los valores medios para cada parámetro no difirieron entre los tres grupos para cualquier parámetro de prueba al principio del estudio como se determina por ANOVA o por la prueba de Kruskal-Wailis. Todos los grupos exhibieron valores normales en cada parámetro excepto por (1) sodio en suero; un parámetro calculado relacionado, la separación aniónica, que fue menor para todos los nueve mandriles a todo lo largo de la prueba; (2) la glucosa en suero; y (3) BUN que fue alto en el día 0 para el grupo que se trató con Enclomid. En el día 12 de tratamiento y 7 días después del tratamiento (suspensión) , no hubo diferencias entre los grupos para cualquier parámetro excepto la separación aniónica que mostró que los grupos de Clomid y Zuclomid tuvieron valores inferiores que el grupo de Enclomid. Los valores de sodio en suero y de la separación aniónica parecen ser anomalías asociadas con este grupo de mandriles . Hubo efectos sustantivos sobre la población de células rojas de la sangre con el Enclomid y Zuclomid y sobre el hematócrito con Zuclomid. Todos los compuestos aminoran la concentración media de hemoglobina celular (MCHC) ya sea en el día 0 o en el punto final . Sin cambio en la hemoglobina media celular (MCH) y con un incremento en el volumen medio celular (MCV), es previsible el aminoramiento de la MCHC. Aunque podría esperarse que la testosterona eleve el hematocrito, sólo el tratamiento de Zuclomid, que no aumentó la testosterona en suero total, demostró una diferencia estadística. Claramente, los hombres en una prueba clínica que usa el Zuclomid deberían monitorearse para las características de su población de células rojas de la sangre. Se predeciría que el Enclomid tiene menos de un efecto. Parece haber un claro efecto del tratamiento de Enclomid de 12 días sobre las plaquetas aunque los valores encontrados permanecieron dentro del rango normal . Una cosa a considerar aquí es el dimorfismo sexual en los conteos de plaquetas entre los mandriles machos y hembras (279 para machos vs . 348 para hembras) . Esto es probablemente debido a las hormonas. Debido a que el grupo de Enclomid demostró testosterona aumentada, el aminoramiento del conteo de plaquetas podría ser secundario para el cambio en la testosterona en este grupo. Además, el tratamiento con Enclomid presionó el conteo de plaquetas a su nivel normal del macho de un nivel del día 0 que fue el extremo superior del rango normal para este grupo. El Enclomid no predeciría necesariamente un efecto deletéreo en las plaquetas . Todos los Clomids probados tuvieron efectos sobre la población de células blancas de la sangre (WBC) , lo más sorprendente fue que el Enclomid elevó los conteos de linfocitos y eosinófilos. Los efectos no son directos como parecería que fueran. Parece haber un fuerte efecto del Enclomid en la aminorar el por ciento de granulocitos en la sangre. Los efectos son muy fuertes después del período de suspensión de 7 días cuando los valores disminuyen debajo del rango normal. (Este tiempo de curso podría reflejar el tiempo relativamente largo requerido para afectar el cambio de la población WBC.) Existe un pequeño dimorfismo sexual en los mandriles con respecto a las poblaciones de células blancas de la sangre, de manera que los efectos son más probablemente debidos al compuesto mismo que a los cambios en la testosterona. Sin embargo, cuando miramos el conteo calculado de granulocitos usando el conteo de WBC, no encontramos diferencias en la cuenta de granulocitos debidas a algún compuesto. Concomitantemente, es la historia del linfocito lo que es lo más interesante. Ambos; el conteo y el por ciento de los linfocitos en la población aumentan con el tratamiento de Enclomid. Mientras que los valores medios de los linfocitos por ciento se mantienen en el rango normal, dada la tendencia para un incremento en el conteo de WBC, el efecto neto es un incremento en el conteo de linfocitos con el Enclomid. Este resultado eosinófilo es análogo. Hay una clara implicación para tratar a hombres que tienen bajos linfocitos, tales como los hombres que son VIH positivo. Debido a que el Enclomid es improbable para aminorar los linfocitos basado en este resultado, podría hacerse un caso para su uso en la población de hombres con SIDA. Estos individuos se tratan a menudo con agentes que pretenden subir la testosterona debido a los efectos de consunción del padecimiento. Baja toxicidad del hígado y del riñon y efectos favorables sobre el colesterol y los lípidos son también atributos altamente favorecidos para cualquier medicación pretendida para usar hombres con VIH positivo que ya están comprometidos por su padecimiento. El incremento de la glucosa en suero con el Clomid o con el Zuclomid estuvo dentro del rango normal . En caso del Enclomid donde los valores medios de la glucosa en suero fueron altos en el día 0, no hubo incrementos con el tratamiento. No hubo evidencia de que el Enclomid tuviera un efecto deletéreo en la glucosa de la sangre.

Ninguno de los efectos claramente adversos en la función del hígado es aparente como se juzga por las enzimas AST y ALT. La tendencia en estos valores fue una disminución con el tratamiento. Un incremento en el nivel de enzimas en el suero indicaría daño del hígado. La ALT/SGPT estuvo fuera del rango bajo al final del estudio para el grupo de Clomid aunque las diferencias sobre el período de tratamiento no fueron estadísticamente significativas. Los cambios con el Enclomid y Zuclomid estuvieron dentro del rango normal . El AST se deprime en el embarazo; de esta manera podría racionalizarse la acción de un agonista del estrógeno tal como el Zuclomid en la aminoración del nivel marginal del AST. La fosfatasa alcalina (ALP) también se encuentra en el hígado y se eleva en varios estados del padecimiento. El aminoramiento del ALP argumenta adicionalmente en contra del daño hepático. No hubo cambios en la albúmina en suero, también un producto del hígado. Una supresión fuerte de la albúmina en suero sobre un periodo de tiempo extendido podría contribuir para liberar los niveles de hormona esteroidal en suero en los humanos, aunque la globulina que enlaza la hormona sexual juega un más papel importante. Como una línea inferior, ninguno de los compuestos podría enlazarse al daño del hígado con base en los parámetros analizados .

La actividad osteoblástica y el padecimiento de los huesos están acompañados por altos valores de ALP en suero. El ALP no se elevó siguiendo el tratamiento de Zuclomid y decreció en valor siguiendo el tratamiento de Enclomid. Las tendencias predecirían un resultado más benigno para el uso del Enclomid comparado al Zuclomid. Aunque el BUN y el BUN/creatinina se alteraron durante el estudio en los grupos de Clomid y Enclomid, la falta de un cambio definitivo en la creatinina argumenta en contra de la disfunción renal . Una pérdida de capacidad de filtración glomerular resultaría en un incremento en el BUN. El BUN disminuido ocurre en los humanos debido a la pobre nutrición (no probable en una aplicación controlada) , o alta admisión de fluidos (probablemente acompañado por edema) . También, a pesar de un incremento en la testosterona en suero total entre el día 0 y el día 12 con Enclomid, no hubo diferencias entre los valores de creatinina en suero, argumentando en contra de un incremento en la masa muscular sobre este corto intervalo de tiempo. Los niveles de sodio en suero fueron menores que los valores de referencia para todos los animales a todo lo largo del estudio. El dióxido de carbono en suero fue mayor que los valores de referencia en el día 12 para los grupos de Clomid y Zuclomid. La separación aniónica en suero fue inferior para todos los animales a todo lo largo del estudio, igualando los resultados del sodio. El Enclomid elevó este parámetro hacia los valores normales. Los desequilibrios de electrólitos detectados en los animales de prueba a todo lo largo de todos los periodos de tratamiento permanecen elusivos pero podrían ser parte del mismo fenómeno de desarreglo de fluidos sugerido por los resultados del BUN. Los resultados anteriores señalan que el Enclomid es más efectivo que el Clomid o el Zuclomid en la mejora de la testosterona en suero total . El Zuclomid es claramente no efectivo y esa deficiencia limita cualquier uso del Clomid para el hipogonadismo, particularmente debido a que el componente Zuclomid del Clomid predominaría en la circulación a través del tiempo dada su vida media más larga. El Enclomid pareció ser relativamente benigno en todos los aspectos cuando se comparó al Zuclomid y, a menudo, incluso con el Clomid. Esto es particularmente cierto cuando la consideración se da a la tendencia del Enclomid para bajar el colesterol, y las enzimas del hígado como es opuesto a la tendencia del Zuclomid para subir los mismos parámetros. La tendencia sorprendente del Enclomid para subir el conteo del linfocitos puede relacionarse con SIDA si puede mostrarse que la sub-población CD4+ de linfocitos no se aminora o se mejora.

EJEMPLO 2 Método para Incrementar el Nivel de Testosterona en Hombres Usando Trans-Clomifeno y Mezclas de Trans-Clomifeno y Cis- clomifeno en Proporciones Mayores a 1 Antes de la administración del trans-clomifeno, se tomaron muestras de sangre de sujetos varones y se midieron los niveles de testosterona usando las metodologías descritas por ejemplo en Matsumoto, et. al . Clin. Endocrinol. Metab. 56;720 (1983) (incorporada aquí por referencia). La globulina que enlaza la hormona sexual (SHBG) , que tanto se libera y enlaza a la testosterona, también puede medirse como se describe por ejemplo en Tenover et. al . J. Clin. Endocrinol. Metab. 65:1118 (1987) que describe la medición de SHBG mediante ambos; un análisis de saturación de [3H] de dihidrotestosterona y mediante radioinmunoensayo. Los niveles de testosterona no enlazada a SHBG (testosterona biodisponible) también se miden por ejemplo de acuerdo a Tenover et. al . J. Clin. Endocrinol and Metab. 65:1118 (1987). Vea también Soderguard et al J. Steroid Biochem 16:801 (1982) incorporado aquí por referencia. Se les da a los pacientes dosis diarias de 1.5 mg/Kg. de clomifeno, en donde la proporción de trans-clomifeno a cis-clomifeno es mayor que 1. Los pacientes son monitoreados para los niveles de testosterona tal que la cantidad de la dosis y la frecuencia de la dosis pueden ajustarse para lograr los niveles terapéuticos de testosterona en el paciente. EJEMPLO 3 Comparación del Androxal™ con el Androgel® Se condujo un estudio para provocar actividad fisiológica por expansión controlada al placebo en Research Biological Research, Inc. (ABR) Clinical Research Center en Hackensack, Nueva Jersey para comparar el Androxal™ (trans-clomifeno) administrado oralmente con el Androgel® en hombres hipogonadales . El Androgel® (Solvay Pharmaceuticals, Inc.) consiste de una crema que administra testosterona exógena en una matriz transdérmica. El estudio enroló 62 hombres hipogonadales con niveles de testosterona de menos que 300 ng/dl (normal 298-1034 ng/dl) a los que se les aplicó aleatoriamente en 6 brazos diferentes, tres dosis de Androxal™ (12.5 mg, 25 mg, y 50 mg) , placebo, y ambas dosis; alta y baja de Androgel. A la mitad de los hombres, en cada uno de los brazos de Androxal™ y del placebo, se les aplicaron aleatoriamente cohortes que experimentaron en sesiones clínicas en los días 1 y 14 para determinar los parámetros farmacocinéticos para el Androxal™ así como también los cambios cíclicos en la testosterona. Se administraron dosis de placebo y Androxal™ en una manera de doble ciego. El Androgel® crema se administró en una manera de etiqueta abierta. La mitad de los pacientes de Androgel® experimentaron sesiones clínicas similares a los otros pacientes en el estudio. Después de que los pacientes se expusieron a dos semanas de fármaco siguieron durante unos siete a diez días adicionales para determinar el estado de sus niveles de testosterona. No hubo efectos laterales notados en ya sea los brazos de Androxal™ o de Androgel® del estudio que fue diferente al placebo. 1. Efectos sobre los Niveles de Testosterona Todas las dosis de Androxal™ o Androgel® produjeron cambios estadísticamente significativos en la testosterona a partir de los niveles de testosterona de la línea base (FIGURA 5) . Las dosis baja, media y alta de Androxal™ lograron incrementos medios de 169, 247, y 294 ng/dl respectivamente, mientras que aquellas de Androgel® 5G, la dosis más baja aprobada, y el Androgel®10G, la dosis más alta aprobada, produjeron cambios de la línea base que fueron 212 y 363 ng/dl . Estos valores fueron estadísticamente indistinguibles de aquellos cambios logrados con el Androxal™. Esta incapacidad para mostrar diferencias entre el Androxal™ y el Androgel® parece resultar de los resultados altamente variables encontrados cuando se usa el Androgel®. Por ejemplo la dosis de 50 mg de Androxal™ elevó la testosterona media total a 589+172 ng/dl después de 15 días, un coeficiente de variación (CV) de 29% y similar al grupo del placebo (36%) . Por otra parte el Androgel® 5G y 10G produjeron valores de testosterona media total de 473±289 ng/dl y 608±323 ng/dl, CVs del 61% y 53% respectivamente. Después de 14 días de terapia de Androxal™ todas las dosis se asociaron con un patrón diurno de testosterona total similar al grupo del placebo, es decir, un máximo en la mañana, un medio a través del día y una elevación en la noche. Sin estar atado por la teoría, este patrón puede deberse al modo de acción del Androxal™, que parece ser mediado a través de los efectos sobre el eje hipotalámico-pituitaria como se muestra debajo. El patrón diurno para los hombres sobre Androgel® fue casi plano. Sin embargo, los máximos en la testosterona total para el Androgel® se asociaron con la dosificación y a menudo excedieron el nivel normal alto de 1,034 ng/dl. Ciertos individuos sobre Androgel® 10G fueron capaces de lograr niveles máximos de testosterona total de sobre 2500 ng/dl. 2. Efectos sobre los Niveles de LH y FSH El tratamiento con Androxal™ produjo un incremento estadísticamente en los niveles de suero del LH en sujetos varones hipogonadales (FIGURA 6) . Como en el caso de la testosterona en suero total, hubo una continuación inesperada en el nivel de LH en suero en el período de seguimiento (es decir, 7-10 días después de la cesación del tratamiento oral diario) donde aquellos niveles se mantuvieron altos para lo tres concentraciones de Androxal™. En contraste, el tratamiento con Androgel® inicialmente decreció el LH y después de la cesación hubo un rebote aparente hacia los niveles de pre-tratamiento. El tratamiento con Androxal™ también produjo uno incremento estadísticamente en los niveles de suero del FSH en los sujetos varones hipogonadales (FIGURA 7) . El patrón de incremento del FSH es similar a aquel visto en el caso del LH, esto es, todas las dosis de Androxal™ elevan el FSH en suero que permanece alto durante el período de seguimiento considerando que el Androgel® suprime el nivel de FSH en suero y la cesación del tratamiento permite al FSH rebotar hacia las concentraciones más parecidas a los niveles de pretratamiento . 3. Efectos sobre los Parámetros de Química Clínica También se midió el efecto sobre los niveles de dihidroxitestosterona (DHT) en suero. Los hombres sobre Androxal™ experimentaron un cambio favorable en su DHT a la testosterona total. Por ejemplo los hombres sobre la dosis de 50 mg de Androxal™ experimentaron una proporción de DHT/TT del 0,83 comparado a la proporción del grupo del placebo de 1.07. En contraste, la proporción de DHT/TT para cualquiera de los grupos de Androgel® fue > 1.5. Los resultados señalan que los hombres sobre Androgel® ganaban DHT más rápido que testosterona total . Así los niveles normales de DHT fueron desestabilizados relativo a la testosterona en hombres sobre la terapia de Androgel®. Los resultados de los parámetros de química clínica también indicaron, inesperadamente, que los hombres sobre Androxal™ experimentaron una reducción en los triglicéridos no dependiente de la dosis. La reducción en los triglicéridos promedió una disminución del 19.1% después de dos semanas de terapia. Esto comparado a una reducción del 5.9% para el grupo del placebo e incrementos del 0.3% y 22% para el Androgel® 5G y 10G respectivamente. 4. Discusión Basado en este estudio inferimos un número de ventajas potenciales para el Androxal™ como una terapia potencial. El Androxal™ parece elevar la testosterona total en el rango normal en una manera altamente consistente sin máximos anormalmente altos en la testosterona en suero. Además, el uso del trans-clomifeno para tratar a hombres que sufren de hipogonadismo secundario, ofrece un nuevo acercamiento que potencialmente podría desplazar uno de los principales efectos laterales de las terapias exógenas tal como el Androgel®. Las terapias exógenas proporcionan retroalimentación negativa, suspendiendo por consiguiente la producción de FSH y LH. El FSH es una hormona reproductiva esencial y en el varón estimula la espermatogénesis. La exposición a largo plazo a la testosterona exógena, como un resultado de sus efectos en la producción de FSH, provoca una reducción en la síntesis del esperma, conduciendo al potencial para la infertilidad transitoria debido al bajo conteo de esperma y por consiguiente a un encogimiento resultante del testículo, debido a que el volumen del testículo está relaciona al nivel de espermatogénesis dentro de los túbulos seminíferos. El incremento en los niveles de FSH también señala que el Androxal™ puede utilizarse para tratar la infertilidad en los varones, incluyendo los varones hipogonadales.

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES 1. Una composición que comprende una cantidad efectiva de trans-clomifeno o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo y opcionalmente uno o más diluentes, adyuvantes, portadores, o excipientes farmacéuticamente aceptables, para usarse en la fabricación de un medicamento para tratar la infertilidad masculina, en donde la composición se caracteriza por lo siguiente: (a) la proporción de trans-clomifeno a cis-clomifeno es mayor que 71/29; o (b) la composición comprende 0% a aproximadamente 29% peso/peso de cis-clomifeno y aproximadamente 100% a aproximadamente 71% de trans-clomifeno.
2. 2. El uso de la reivindicación 1, caracterizado porque la composición consiste esencialmente de una cantidad efectiva de trans-clomifeno o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
3. 3. El uso de la reivindicación 1, en donde la composición es para la administración a una dosis de 1-200 mg de trans-clomifeno por día.
4. 4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en donde el medicamento es para la administra a una dosis de aproximadamente 50 mg de trans-clomifeno por día.
5. 5. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizado porque el medicamento es para la administración a una dosis de 1.5 mg/Kg. de trans-clomifeno por día.
6. 6. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el medicamento está en forma de cápsula.
7. 7. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el medicamento es para la administración a una dosis de 1-200 mg de trans-clomifeno por día.
8. 8. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el medicamento es para la administración a una dosis de aproximadamente 50 mg de trans-clomifeno por día.
9. 9. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el medicamento es para la administración a una dosis de 1.5 mg/Kg. de trans-clomifeno por día.
10. 10. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el medicamento está en forma de cápsula.