MX2007008010A - Metodos para desviar celulas cd4+ en la induccion de una inmuno respuesta. - Google Patents

Abstract

Modalidades de la invencion aqui descrita se refieren a metodos y composiciones para desviar la participacion de celulas CD4+ cuando se generan respuestas inmunes I-restringidas de clase MHC y anticuerpo, controlando la naturaleza y magnitud de la respuesta, y promoviendo intervencion inmunologica efectiva en patogenesis viral. Mas especificamente, modalidades se refieren a composiciones inmunogenicas para vacunacion particularmente vacunacion terapeutica, contra VIH (HIV) y otros patogenos microbianos, que impactan el funcionamiento del sistema inmune, su naturaleza, y el orden, sincronizacion y ruta de administracion por los cuales se emplean efectivamente.

Description

MÉTODOS PARA DESVIAR CÉLULAS CD4+ EN LA INDUCCIÓN DE UNA INMUNO RESPUESTA Referencia Cruzada a Solicitudes Relacionadas Esta solicitud reclama prioridad de acuerdo con 35 U.S.C. § 119 (e) de la Solicitud provisional de Patente de los E.U.A. No. de Serie 60/640,821, presentada en diciembre 29, 2004, con título "METHODS TO BYPASS CD4+ CELLS IN THE INDUCTION OF AN IMMUNE RESPONSE" ; la descripción de la cual aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Antecedentes de la Invención Campo de la Invención Modalidades de la invención aquí descrita se refieren a métodos y composiciones para desviar la participación de células CD4+ cuando se generan respuestas inmune restringidas Clase I de MHC y anticuerpo, controlar la naturaleza y magnitud de la respuesta y promover intervención inmunológica efectiva en patogénesis viral. Más específicamente, modalidades se refieren a composiciones inmunogénicas para vacunación particularmente vacunación terapéutica, contra HIV y otros patógenos microbianos que impactan el funcionamiento del sistema inmune, su naturaleza y el orden, sincronización y ruta de administración por las cuales se emplean efectivamente.

Descripción de la Técnica Relacionada El complejo de histocompatibilidad mayor y reconocimiento de objetivo de célula T Los linfocitos T (células T) son células inmunes específicas de antígeno que funcionan en respuesta a señales de antígeno específicas. Los linfocitos B y los anticuerpos que producen también son entidades específicas de antígeno. Sin embargo, a diferencia de los linfocitos B, las células T no responden a antígenos en una forma libre o soluble.

Para que una célula T responda a un antígeno, requiere que el antígeno se ligue a una molécula de presentación conocida como un complejo de histocompatibilidad mayor (MHC = major histocompatibility complex) antígeno/proteína/marcador . Las proteínas MHC proporcionan los medios por los cuales las células T distinguen células propias "sanas" de células extrañas o infectadas (no-propias) . Las moléculas MHC son a categoría de receptores inmune que presentan epítopes péptido potenciales al supervisar subsecuentemente por las células T. Hay dos tipos de MHC, MHC Clase I y MHC Clase II. Las células T CD4+ interactúan con las proteínas MHC Clase II y predominantemente tienen un fenotipo auxiliar mientras que las Células T CD8+ interactúan con proteínas MHC clase I y predominantemente tienen un fenotipo citolítico, pero cada una de ellas puede también exhibir función regulatoria, particularmente supresiva. Ambas clases de proteínas MHC son proteínas transmembrana con una mayoría de su estructura en la superficie externa de la célula. Adicionalmente, ambas clases de MHC tienen una fisura de enlace péptido en sus porciones externas. Es en esta fisura que pequeños fragmentos de proteínas, nativos o extraños, se ligan y presentan al ambiente extracelular. El antígeno receptor de células T, o receptor de células T (TCR = T cell receptor) , reconoce el complejo formado por péptido y marcador MHC al ligar con el. El MHC es altamente polimórfico con el resultado de que la especificidad exhibida por un TCR depende tanto del péptido como el marcador MHC en el complejo reconocido. Este requerimiento se denomina restricción MHC. Respuestas inmune de célula T se inducen cuando las células T reconocen complejos marcador MHC-péptido exhibidos por células denominadas células que presentan antígeno profesionales (pAPCs = Professional antigen presenting cells) . Funciones efectoras, tales como actividad citolítica o secreción de citosina, son accionadas cuando las células T subsecuentemente reconocen complejos marcadores MHC-péptido en otras células del cuerpo. HIV El virus de inmunodeficiencia humana (HIV = Human Immunodeficiency Virus) es un miembro del genero Lentivirus de la familia Retroviridae . Esta familia de virus se conoce por latencia, viremia persistente, infección del sistema nervioso y respuestas inmune de anfitrión débil. HIV tiene alta afinidad para linfocitos T CD4+ y monócitos. HIV liga a células T CD4+ en la superficie de la célula y se internaliza. El virus se replica al generar una copia de ADN (DNA) por transcriptaza inversa. El ADN viral se incorpora en el ADN anfitrión, permitiendo mayor replicación. HIV es el agente causante del síndrome de inmunodeficiencia adquirida, SIDA (AIDS = adquire inmune deficiency síndrome) . A pesar de más de 20 años de investigación relacionada a HIV, la infección con HIV permanece una consideración principal de la salud pública. Globalmente, más de 42 millones de personas están infectadas, incluyendo aproximadamente 5 millones recientemente infectados en el año 2003 (Garber, D. et al., The Lancet Infectious Diseases 4:397-413, 2004). Las manifestaciones clínicas más comunes de HIV se deben a inmunodeficiencia progresiva provocada por una pérdida selectiva de linfocitos CD4+ (Buckland, M.S. & Pinching, AJ. Intern . J of STD & AISA 15:574-583, 2004). Tanto células T CD4+ como CD8+ son importantes en el control de replicación viral, incluyendo HIV. Células auxiliares T CD4+ activadas producen citosinas e interactúan con receptores de superficie celular que promueven a las células B a producir anticuerpos, e interactúan indirectamente (mediante células de presentación de antígeno) o directamente con linfocitos T CD8+ para inducir diferenciación en células citotóxicas. HIV crece bastante mejor en células activadas que en células en reposo (Roberts, J.P. The Scientist 18:26-27, 2004). Consecuentemente, las propias células centrales para orquestar la lucha contra patógenos virales, células T CD4+ pueden ser perdidas por apoptosis, citolisis, o citoxicidad mediada por células. El resultado es una inmunorespuesta ineficaz debido a la rápida deleción de células T activadas, con repercusiones esperadas en inducción, expansión y diferenciación de células T CD8+ y células B que reconocen antígenos virales. Inicialmente, la velocidad de producción de células T CD4+ es mayo que la destrucción periférica, y de esta manera la producción de generación de anticuerpos de un repertorio expandido de células T CD8+ para exterminar objetivos viralmente infectados, procede correctamente.

Con el tiempo, la rápida velocidad de mutación de HIV, deficientes características inmunogénicas de proteínas HIV, y la escala de replicación HIV abruman al sistema inmune del anfitrión. Ya que las células T CD4+ se requieren para soportar el conjunto de células T CD8+ más específicas de HIV, la perdida de células CD4+ específicas de HIV lleva a una perdida de células T CD8+ específicas de HIV. La contención inmune de infección HIV falla y surge el avance clínico en SIDA. La mayoría de los pacientes infectados no exhiben manifestaciones clínicas abiertas de la enfermedad por seis a diez años después de la infección inicial. Sin embargo, un pequeño grupo permanece como no-progresores de largo plazo (LTNP = long-term non-progressors) , y permanece libre de enfermedad por diez o más años . Exhiben menores cargas virales y conteos de células CD4+ estables en parte se han atribuido a inmunidad mediada por células. La naturaleza de supresión viral en este grupo ha sido el foco de mucha investigación. Ha habido una gran cantidad de esfuerzo realizado para comprender las características de LTNP y el mecanismo por el cual se logra el estado libre de enfermedad, de manera tal que pueden diseñarse mejores terapéuticas y profilaxis. Terapéuticas La morbidez y mortalidad asociada con infección de HIV se han reducido dramáticamente con el surgimiento de terapia antiretroviral que hace blanco en dos enzimas clave: transcriptaza inversa y proteasa. Sin embargo, los efectos benéficos pueden ser tratamientos prolongados variables que inducen considerable toxicidad y efectividad es minada por el surgimiento de mutaciones resistentes a droga. También, el alto costo de terapias antiretrovirales limita el acceso y disponibilidad en los países en desarrollo. De esta manera, estrategias menos costosas capaces de lograr supresión viral sostenida se requieren desesperadamente . La inmunización terapéutica como un tratamiento para infección HIV puede demostrar ser tal alternativa. Sin embargo, varios aspectos críticos de infección HIV presentan retos novedosos al desarrollo de una vacuna efectiva. Estas propiedades incluyen partículas virales que son difíciles de neutralizar con anticuerpos; infección destrucción y regeneración deteriorada selectiva de células auxiliares T CD4+; rápida evolución de virus que proporciona escape de inmunorespuestas celulares y humorales; y alta diversidad, distribución y predominio de genética virales (Garber, D. et al., The Lancet Infectious Diseases 4:397-413, 2004). También recientemente se ha sugerido que un sistema inmune cebado con vacuna puede ser más susceptible a infección. El reforzar las células auxiliares específicas de HIV, un resultado de la vacunación, puede dar al virus más dianas u objetivos a infectar. Ya que más estrategias de vacunación convencionales dependen de co- inducción de células auxiliares T (Th) , se espera que su eficacia sea baja o el efecto total nocivo en un ambiente en donde la función de célula Th se deteriora por HIV (Roberts, J.P. The Scientist 18:26-27, 2004). El sistema inmune puede eliminar efectivamente células infectadas con virus durante el curso clínico de infección HIV-1 utilizando actividad CTL restringida clase I (de complejo de histocompatibilidad mayor (MHC) específico de virus (Koup, et al . J Exp Med. 180(3) :779-82, 1994; Koup et al. "Nature, 370 (6489) :416 , 1994; y Koup et al., J" Virol . 68 (7) : 4650-5, 1994). Hay evidencia que sugiere que la actividad CTL específica de HIV-1 es importante para controlar la dispersión viral durante el curso clínico de infección HIV-1 (Klein, 1995; Koup, 1994), para mantener bajos niveles de carga viral durante la fase asintomática (Musey, 1997; Rinaldo, 1995; Koup, 1994; Walker, 1987), y posiblemente para eliminación completa de células infectadas con virus, como se implica de la observación de niños y mujeres expuestos a HIV, pero negativos a virus (Rowland-Jones, 1995; Rowland-Jones, 1993). Además, observaciones de estudios en sección transversal han mostrado la ausencia de niveles severamente disminuidos de respuestas CTL específicas de HIV-I durante las etapas avanzadas de infección HIV-I (Carmichael, 1993) . En conjunto, reciente estrategia de vacuna se ha enfocado en producir respuestas de célula T CD8+ antivirales para controlar el nivel de replicación HIV in vivo (Garber, D. et al., The Lancet Infectious Diseases 4:397-413, 2004). El raciocinio para eficacia potencial de vacuna de SIDA basada en célula T CD8+ es que la reducción del nivel de la carga viral de punto de ajuste puede frenar la velocidad de avance de SIDA y eliminar depósitos activos de infección. Otros Patógenos HIV no es el único patógeno para el cual se asocia la activación o expansión de células CD4+ con procesos patológicos. Por ejemplo, incidente de cicatrización córnea a infección de virus herpes simplex (HSV = herpes simplex virus) se atribuye a la acción de células T CD4+ y las citosinas que producen. (Osorio, Y. et al., Ocul . Im unol . Inflamm . 10: 105-116, 2002; Altmann, D.M. & Blyth, W.A. J Gen . Virol . 66:1297-1303, 1985; Xu, M. et al., J. Iw unol . 173:1232-1239, 2004). HIV tampoco es el único patógeno para el cual el deterioro de la respuesta celular T CD4+ resulta en falla para montar una inmuno respuesta más efectiva, persistente de infección y mayor morbidez o mortalidad. La falla de células dendríticas (DC = dendritic cells) en incrementar la expresión MHC de clase II y de esta manera interactuar en forma productiva con células T CD4+, contribuye a la persistencia de infección de virus de Hepatitis B (HBV hepatitis B virus) (Zheng, BJ., et al., J". Viral Hepat . 11:217-224, 2004; Lohr, H.F., et al., Clin . Exp . Inmuno 1 . 130:107-104, 2002).

Interacciones de células T DC-CD4+ similarmente deterioradas están involucradas en las deficientes inmuno respuestas a y persistencia de infección por el virus de Hepatitis C (HCV = hepatitis C virus) (Murakami, H., et al. Clin . Exp . Immunol . 137:559-565, 2004) . Modalidades aquí descritas se refieren a métodos y composiciones que alivian o superan los retos anteriormente descritos asociados con el tratamiento de infecciones microbianas, incluyendo aquellas asociadas con HIV, virus herpes simplex (HSV) , HBV, HCV, virus de hepatitis G (HGV = Hepatitis G virus, virus de papiloma humano (HPV = huiman papilloma virus) , citomegalovirus (CMV) , virus de influenza, virus de leucemia de célula T humanas (HTLV = human T-cell leukemia virus) , virus sincitial respiratorio (RSV = respiratory syncytial virus) , virus Epstein Barr (EBV) , virus de sarampión y virus Ebola, por ejemplo. Compendio de la Invención Modalidades de la presente invención en general se refieren a una forma general para producir la inducción, expansión y/o diferenciación de la población de células T CD8+ mientras que produce solo una respuesta auxiliar T CD4+ modesta o nula (en una forma independiente de la respuesta auxiliar T CD4+) . Algunas modalidades incluyen métodos y composiciones para inducir, atrapar y/o amplificar la respuesta inmune de epítopes HIV restringidos clase I MHC. Algunas modalidades se refieren a métodos para generar una inmuno respuesta, incluyendo métodos de inmunización, que pueden incluir las etapas de suministrar a un sistema linfático de un mamífero, una composición que incluye un inmunógeno, este inmunógeno incluye un epítope restringido MHC clase I o un epítope de célula B, en donde el inmunógeno no incluye un epítope restringido MHC clase II efectivo; administrar un inmuno potenciador al mamífero; y obtener o detectar una respuesta inmune específica de epítope sin activación o expansión substancial de células CD4+. El término "epítope restringido MHC clase II efectivo" como se emplea aquí, puede significar una secuencia péptido que puede procesarse del antígeno natural y presentarse por una molécula MHC clase II expresada por las especies o individuo en cuestión a fin de generar una inmuno respuesta restringida clase II. En modalidades preferidas el epítope puede ser HIV, HSV, HBV, HCV, HGV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, virus sincitial respiratorio (RSV) , EBV, virus de sarampión y epítope de virus Ebola, o un epítope asociado con un antígeno objetivo o diana para cualquier enfermedad en donde puede ser ventajoso el evitar la activación o expansión de células CD4+. De preferencia, el inmunógeno y el inmuno potenciador pueden ser co-administrados al sistema linfático. Además, en algunos aspectos preferidos, la composición puede incluir un primer inmunógeno que incluye un epítope restringido MHC clase I y un segundo inmunógeno que incluye un epítope de célula B, por ejemplo. De preferencia, el primer inmunógeno y el segundo inmunógeno pueden ser iguales. El método además puede incluir co-administrar un primer inmunógeno que incluye o codifica el epítope restringido MHC clase I -con el inmuno potenciador y subsecuentemente suministrar un segundo inmunógeno que incluye el epítope, en la forma de un péptido epitópico, al sistema linfático del mamífero. El intervalo entre la etapa de administración y la etapa de suministro puede ser al menos aproximadamente 7 días, por ejemplo. El primer inmunógeno puede incluir un ácido nucleico que codifica el epítope. El inmuno potenciador puede incluir por ejemplo una molécula de ADN que incluye una secuencia CpG. El ácido nucleico puede incluir una molécula de ADN que incluye una secuencia CpG que constituye el inmunopotenciador . El inmunopotenciador puede incluir por ejemplo un ARNds . El primer inmunógeno puede incluir un polipéptido. En modalidades preferidas, el suministro al sistema linfático puede incluir el suministro a un nodo linfático o un bazo linfático. Algunas modalidades se refieren a métodos que pueden incluir administración intranodal de un adyuvante y péptido. También, algunas otras modalidades se refieren a inducir una respuesta, y amplificar la respuesta con péptidos sin requerir adyuvante para amplificación. En algunos aspectos, la etapa de amplificación puede incluir el suministro de un inmunógeno junto con un modificador de respuesta biológica, tal como un adyuvante. De preferencia, en algunos aspectos, la amplificación puede lograrse sin adyuvante. También, en algunos casos, la etapa de amplificación puede realizarse sin suministro de ningunos epítopes restringidos MHC clase II de esta manera minimizando o evitando cualesquiera células CD4+. También, algunas modalidades se refieren a métodos de inmunización, que pueden incluir por ejemplo, una etapa para potenciar una inmuno respuesta; una etapa para exponer el sistema linfático a un epítope restringido MHC clase I o un epítope de célula B; y obtener una inmuno-respuesta específica de epítope sin activación sustancial o expansión de células CD4+. Adicionales modalidades se refieren a métodos para inmunización que incluyen el suministro a un mamífero de una primer composición que incluye un inmunógeno, este inmunógeno puede incluir o codificar al menos una porción de un primer antígeno; administrar una segunda composición que incluye amplificar un péptido directamente a un sistema linfático del mamífero, en donde el péptido corresponde a un epítope del primer antígeno, en donde la primer composición y la segunda composición no son las mismas, e inducir una respuesta de linfocito T citotóxico sin una respuesta auxiliar T. En algunos aspectos, el inmunógeno puede ser un inmunógeno de HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, virus sincitial respiratorio (RSV) , EBV, virus de sarampión, o virus de Ébola (o un inmunógeno que incluye una secuencia relacionada a más de uno de los mismos) y/o un inmunógeno asociado con cualquier enfermedad en la que puede ser ventajosa evitar la activación o expansión de células CD4+. De preferencia, el primer antígeno puede ser un antígeno HIV. La primer composición puede incluir un ácido nucleico que codifica el antígeno, el antígeno o su fragmento inmunogénico; o un ácido nucleico capaz de expresar el epítope en un pAPC, por ejemplo. El ácido nucleico puede suministrarse como un componente de un protozoario, bacteria, virus, vector viral, o semejantes. En algunos aspectos la primer composición puede incluir un polipéptido inmunogénico y un inmunopotenciador. De preferencia, el inmunopotenciador puede ser una citocina que desvía TI, por ejemplo IL-12, IFN-gamma, o semejantes. También, el inmunopotenciador puede ser un ligando receptor tipo Tool que desvía TI. El adyuvante puede ser una secuencia inmunoestimulatoria. El adyuvante puede incluir ARN . El polipéptido inmunogénico puede ser un péptido de amplificación. El polipéptido inmunogénico puede ser el primer antígeno. El polipéptido inmunogénico puede suministrarse como un componente de un protozoario, bacteria, virus, vector viral, partícula tipo virus, o semejantes. El adyuvante puede suministrarse como un componente de un protozoario, bacteria, virus, vector viral, partícula tipo virus, o semejantes. La segunda composición puede ser libre de adyuvante o libre de inmunopotenciador. La etapa de suministro puede incluir administración directa al sistema linfático del mamífero. En algunos aspectos, la administración directa al sistema linfático del mamífero puede incluir administración directa a un nodo linfático o un vaso linfático. La administración directa puede ser a dos o más nodos linfáticos o vasos linfáticos. El nodo linfático puede ser por ejemplo, nodos inguinales, axilares, cervicales o tonsilares. El método además puede incluir obtener una respuesta de célula T efectora al primer antígeno, y la respuesta de célula T efectora puede incluir la producción de una citoquina pro-inflamatoria, incluyendo por ejemplo, gamma- IFN o TNFa (alfa) . La respuesta de célula T efectora puede incluir la producción de una quimiocina de célula T, por ejemplo, RANTES o MlP-la. El epítope puede ser un epítope doméstico o un epítope inmune, por ejemplo. Los términos "epítope doméstico" y "epítope inmune" se definen en la publicación de los E.U.A. No. 2003-0215425, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad. La etapa de suministro o la etapa de administración pueden incluir una inyección de bolo sencilla, inyecciones de bolo repetidas, o una infusión continua, por ejemplo. La infusión puede tener una duración de entre aproximadamente 8 horas a aproximadamente 7 días, por ejemplo. El método puede incluir un intervalo entre terminación de la etapa de suministro y el inicio de la etapa de administración, en donde el intervalo es cuando menos aproximadamente siete días, entre aproximadamente 7 y aproximadamente 14 días, o de aproximadamente 14 a aproximadamente 75 días o más de aproximadamente 75 días por ejemplo. El método puede emplearse para tratar SIDA (AIDS) . El primer antígeno puede ser un antígeno asociado a objetivo. El objetivo puede ser una célula infectada con HIV, por ejemplo. Adicionalmente, el método puede emplearse para tratar otras infecciones virales o cualquier enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar la activación o expansión de células CD4+. Ejemplos de infecciones virales incluyen aquellas provocadas por HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, virus sincitiales respiratorio (RSV) , EBV, virus de sarampión, o virus ébola. La respuesta de célula T efectora puede detectarse por al menos un indicador, por ejemplo, un ensayo de citocina, un ensayo Elispot, un ensayo de citotoxicidad, un ensayo tetrámero, una respuesta DTH, una respuesta clínica, título de patógeno disminuido, liberación de patógeno, mejora de un síntoma de la enfermedad, o semejantes. La respuesta de célula T efectora puede ser una respuesta de célula T citotóxica. En algunas modalidades se refieren a métodos para generar una inmuno respuesta, que incluye métodos para inmunización contra HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, EBV, virus sincitial respiratorio (RSV) , virus de sarampión, virus Ebola, o cualquier enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar activación o expansión de células CD4+. Los métodos pueden incluir, por ejemplo suministro a un mamífero de una primer composición que incluye un primer antígeno, un fragmento inmunogénico del mismo, o un ácido nucleico que codifica cualquiera de los mismos; y administrar una segunda composición que incluye un péptido, directamente al sistema linfático del mamífero, en donde el péptido corresponde a un epítope del primer antígeno. El método además puede incluir obtener una respuesta de célula T efectora al antígeno. Algunas modalidades se refieren a métodos para aumentar una inmuno respuesta específica de antígeno existente, que incluye administrar una composición que incluye un péptido, directamente al sistema linfático de un mamífero, en donde el péptido corresponde a un epítope del antígeno, y en donde la composición no se emplea para inducir la inmuno respuesta; y obtener aumento de una respuesta inmune específica de antígeno HIV. El aumento puede incluir sostener la respuesta con el tiempo, reactivar células T inactivas, incluyendo células CD8+. El aumento puede incluir expansión de la población de células T específicas de antígeno HIV, en algunos aspectos, la composición no incluye un inmunopotenciador, mientras que en otros, incluye un inmunopotenciador. La inmunorespuesta específica de antígeno puede ser por ejemplo, de HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, virus sincitial respiratorio (RSV) , EBV, virus de sarampión, o virus Ebola, o inmuno respuesta específica de antígeno asociado con cualquier otra enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar la activación o expansión de células CD4+. De preferencia, es una inmuno respuesta específica de antígeno HIV. Adicionales modalidades se refieren a métodos de inmunización que incluyen, por ejemplo suministro a un mamífero de una primer composición que incluye un inmunógeno HIV, este inmunógeno incluye o codifica al menos una porción de un primer antígeno y al menos una porción de un segundo antígeno; y administrar una segunda composición que incluye un primer péptido, y una tercer composición que incluye un segundo péptido, directamente al sistema linfático del mamífero, en donde el primer péptido corresponde a un epítope del primer antígeno, y en donde el segundo péptido corresponde a un epítope del segundo antígeno, en donde la primer composición no es la misma que la segunda o tercer composiciones . El método además puede incluir obtener una respuesta de célula T efectora al antígeno. La segunda y tercer composiciones cada una pueden incluir el primero y segundo péptidos. Habrá de entenderse que en algunas modalidades, el inmunógeno HIV mencionado anteriormente puede ser reemplazado por un inmunógeno HSV, un inmunógeno HBV, un inmunógeno HCV, un inmunógeno HPV, un inmunógeno CMV, un un inmunógeno de virus de influenza, un inmunógeno HTLV, un inmunógeno (RSV) , un inmunógeno EBV, o un inmunógeno de virus de sarampión, un inmunógeno de virus Ebola, o un inmunógeno asociado con cualquier otra enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar o minimizar la activación o expansión de CD4+. Algunas modalidades se refieren a métodos de inmunización contra HIV que incluyen, por ejemplo, administrar una serie de dosis inmunogénicas directamente al sistema linfático de un mamífero en donde la serie incluye al menos 1 dosis de modular y al menos 1 dosis de amplificar, y en donde la dosis de modular incluye un ácido nucleico que codifica un inmunógeno y en donde la dosis de amplificar está libre de cualquier virus, vector viral, vector competente de replicación, o semejantes. El método puede incluir aproximadamente 1-6 dosis de modulación, por ejemplo, o incluso más de 6, por ejemplo 1-7, 1-8, 1-9, 1-10 o más. El método puede incluir administrar una pluralidad de dosis de modular, en donde las dosis se administran sobre un curso de uno a aproximadamente siete días. Las dosis de modulación o de modular, dosis de amplificación, o dosis de modulación y amplificación pueden suministrarse en múltiples pares de inyecciones, en donde un primer miembro de un par se administra dentro de aproximadamente 1, 2, 3, 4 o 5 días y de preferencia dentro de aproximadamente 4 días de un segundo miembro del par, y en donde un intervalo entre primeros miembros de diferentes pares es al menos aproximadamente, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 días, por ejemplo. De preferencia, un intervalo entre primeros miembros de diferentes pares es al menos aproximadamente 14 días, por ejemplo. El intervalo entre una última dosis de modulación y una primer dosis de amplificación puede estar entre aproximadamente 1 y aproximadamente 150 días, aproximadamente 3 y aproximadamente 125 días, y de preferencia aproximadamente 7 y aproximadamente 100 días, por ejemplo. El método además puede incluir el obtener una respuesta inmune específica de antígeno. Habrá de entenderse que en algunas modalidades, los métodos de inmunización anteriormente mencionados contra HIV pueden modificarse para generar una inmuno respuesta, incluyendo inmunización contra HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión, virus Ebola, o contra cualquier otra enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar o minimizar la activación o expansión de CD4+. También, algunas modalidades se refieren a conjuntos de composiciones inmunogénicas para inducir una inmuno respuesta en un mamífero que incluyen aproximadamente 1-6 o más dosis de modulación y al menos una dosis de amplificación, en donde las dosis de modulación incluyen un ácido nucleico que codifica un inmunógeno HIV, y en donde la dosis de amplificación incluye un epítope péptido, y en donde el epítope se presenta por (pAPC = professional antigen presenting cell) que expresa el ácido nucleico. En algunos aspectos, los conjuntos de composiciones pueden incluir más de 6 dosis de modulación, por ejemplo, aproximadamente 1-7, 1-8, 1-9, 1-10 o más, en algunos aspectos al menos una dosis además incluye un adyuvante, por ejemplo, ARN . Las dosis de modulación y amplificación pueden estar en un portador adecuado para administración directa al sistema linfático, por ejemplo un nodo linfático. El ácido nucleico puede ser un plásmido. El epítope puede ser un epítope MHC clase I. El MHC puede ser cualquier MHC, incluyendo por ejemplo, aquellos citados en las Tablas 1-4, incluyendo combinaciones de los mismos, mientras que otras modalidades excluyen específicamente cualquiera uno o más de los MHCs o sus combinaciones. Las Tablas 3-4 incluyen frecuencias para los antígenos HLA listados. De preferencia, HLA puede ser por ejemplo, HLA-A2 , HLA-B7, y semejantes. El inmunógeno puede incluir un arreglo de epítope, que puede incluir por ejemplo, una secuencia de liberación. El término "secuencia de liberación" como se emplea aquí, se define en la publicación de patente de los E.U.A. ?o . 2003-0228634, publicada en diciembre 11, 2003, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad. El inmunógeno puede ser un antígeno asociado objetivo, por ejemplo, un antígeno de una célula infectada con HIV. El inmunógeno puede ser un fragmento de un antígeno asociado a objetivo que incluye un enjambre de epítope. Habrá de entenderse que en algunas modalidades, el ácido nucleico que codifique el inmunógeno HIV anteriormente mencionado, puede ser reemplazado por un ácido nucleico que codifica uno o más de los siguientes: un inmunógeno HSV, un inmunógeno HBV, un inmunógeno HCV, un inmunógeno HPV, un inmunógeno CMV, un inmunógeno de virus de influenza, un inmunógeno HTLV, un inmunógeno RSV, un inmunógeno EBV, o un inmunógeno de virus de sarampión, un inmunógeno de virus Ebola, o un inmunógeno asociado con cualquier otra enfermedad en donde puede ser ventajoso evitar o minimizar la activación o expansión CD4+. Adicionales modalidades se refieren a conjuntos de composiciones inmunogénicas para inducir una inmuno respuesta restringida MHC clase I en un mamífero, estos métodos pueden incluir por ejemplo, 1-6, o más dosis de modulación y al menos una dosis de amplificación, en donde las dosis de modulación incluyen un inmunógeno HIV (u otro inmunógeno como se describió anteriormente o en otra parte aquí) o un ácido nucleico que codifica un inmunógeno (o codifica otro inmunógeno como se describe anteriormente o en otra parte aquí) y un inmunopotenciador, y en donde la dosis de amplificación incluye un epítope péptido, y en donde el epítope está presentado por pAPC . En algunos aspectos, los conjuntos de composiciones pueden incluir más de 6 dosis de modulación, por ejemplo aproximadamente 1-7, 1-8, 1-9, 1-10 o más. El ácido nucleico que codifica el inmunógeno HIV además puede incluir una secuencia inmunoestimuladora que sirve como el agente inmunopotenciador. El inmunógeno puede ser por ejemplo, un virus o vector competente de replicación que incluye o induce un agente inmunopotenciador. El inmunógeno puede ser por ejemplo, una bacteria, lisado bacteriano, componente de pared celular purificado, o semejantes, en donde el componente de pared celular bacteriano es capaz de funcionar como el agente inmunopotenciador. El agente inmunopotenciador puede ser por ejemplo, un ligando TLR, una secuencia inmunoestimulatoria, un ADN que contiene CpG, un ARNds, un ligando Receptor de Reconocimiento de Patrón (PRR = Pattern Recognition Receptor) endocítico, un lipopolisacárido (LPS lipopolysacharide) , una quillaja saponina, tucaresol, una citosina pro-inflamatoria, y semejantes. Algunas modalidades se refieren a métodos de inmunización, estos métodos pueden incluir la etapa de suministrar a un mamífero una primer composición que incluye un primer inmunógeno, el primer inmunógeno incluye o codifica cuando menos una porción de un primer antígeno; y administrar subsecuentemente una segundan composición que incluye un péptido epitópico directamente al sistema linfático del mamífero, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I del primer antígeno, en donde la segunda composición no es la misma que la primer composición tal que la inmuno respuesta específica de epítope se amplifica sin activación o expansión sustancial de células T CD4+. En algunos aspectos, la etapa de suministro además puede incluir el suministro de un inmunopotenciador o adyuvante. También, algunas modalidades se refieren a métodos para generar una inmuno respuesta contra un antígeno relacionado a enfermedad en donde es ventajoso minimizar la expansión de linfocitos CD4+. Los métodos pueden incluir suministrar a un animal un primer inmunógeno y un inmunopotenciador, el primer inmunógeno incluye o codifica una primera porción como mínimo de un primer antígeno, en donde una porción cómo mínimo de un primer antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal; y administrar, de preferencia después de la etapa de suministro, de un péptido epitópico directamente a un sistema linfático del animal, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I del primer antígeno, en donde el péptido epitópico no es el mismo que el primer inmunógeno. El animal puede ser, por ejemplo, un humano o un no humano, de preferencia un mamífero. En algunos aspectos, el animal puede ser, por ejemplo, un felino, un canino, un ave tal como por ejemplo, un pollo o un pavo, un bovino, un equino, otro animales de granja o ganado, o cualquier otro animal. En algunas modalidades, la porción como mínimo de un primer antígeno puede incluir un epítope restringido clase II. En algunas modalidades el termino "corresponde" puede significar que el péptido tiene secuencia epítope nativa o de tipo silvestre del antígeno o que el péptido es reactivo en forma cruzada o un análogo de la secuencia epítope del tipo silvestre. Ejemplos de estos reactivos cruzados y análogos, incluyendo como producir los mismos, se encuentran en la Publicación de patente de los E.U.A. número 2003-0220239, publicada en diciembre-noviembre 27, 2003; la solicitud de patente de los E.U.A. número 11/155,929, presentada en junio 17, 2005, con titulo NY-ESO-I PEPTIDE ANALOGS ; y la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 11/156,253, presentada en junio 17, 2005, con titulo SSX-2 PEPTIDE ANALOGS ; cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. La enfermedad se provoca por ejemplo por, HIV, HSV, HBV, HCV, HGV, EBV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión, virus Ebola, y semejantes. El primer inmunógeno y el inmunopotenciador pueden suministrarse a un sistema linfático del animal, por ejemplo a un nodulo linfático o un vaso linfático. El primer inmunógeno y el inmunopotenciador pueden suministrarse a un mismo sitio en o sobre el animal. También, pueden suministrarse simultáneamente, por ejemplo al mismo tiempo o dentro de aproximadamente 1 a 2 minutos entre si o sobre un periodo de tiempo en conjunto. Pueden suministrarse dentro de más de 2 minutos, por ejemplo, dentro de aproximadamente 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10 minutos, dentro de 15, 30, 45 o 60 minutos entre si, dentro de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 o 12 horas, o dentro del mismo día. Además, el péptido epitópico puede suministrarse a un sistema linfático del animal, por ejemplo a un nodulo linfático o un vaso linfático. El primer inmunógeno y el inmunopotenciador pueden suministrarse como parte de una misma composición. La porción como mínimo de un primer antígeno puede incluir por ejemplo, un antígeno entero, menos de la longitud integra de un antígeno entero, un fragmento contiguo menor a 80%, 70%, 60%., 50, %, 40%, 30%, 20% o 10% del antígeno entero, uno o más epítopes de célula T clase I, epítope de célula B, o sus combinaciones, una molécula quimérica que incluye más de un epítope de célula T clase I, epítope de célula B, o sus combinaciones, y semejantes. El primer inmunógeno puede codificar la porción como mínimo de un primer antígeno y puede incluir una secuencia inmunoestimulatoría que sirve como el inmunopotenciador. El primer inmunógeno puede codificar uno o más epítopes, en donde el uno o más epítopes son epítopes de célula T restringidos en clase I o epítopes de célula B. El primer inmunógeno puede codificar una secuencia de ácido nucleico quimérico que incluye más de un epítope de célula T clase I, epítope de célula B, o una combinación de los mismos. El inmunógeno como se emplea en la etapa de suministro también puede ser cualquier otro inmunógeno, incluyendo aquellos descritos en otra parte aquí, y en las referencias citadas e incorporadas. La etapa de administración puede realizarse subsecuente a la etapa de suministro, por ejemplo, a aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, o 6 días después, de preferencia aproximadamente 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30 días o más después de la etapa de suministro . También, en algunas instancias, la primera porción como mínimo de un primer antígeno no incluye o codificar cualquier epítope restringido clase II MHC para las especies del animal, o no incluye o codifica ningún epítope restringido clase II humano. El primer inmunógeno además puede incluir o codifica al menos una segunda porción del primer antígeno, en donde una segunda porción como mínimo del primer antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal . El primer inmunógeno puede codificar la primera porción como mínimo de un primer antígeno y una segunda porción como mínimo del primer antígeno. El primer inmunógeno además puede incluir o codificar una o más porciones adicionales del primer antígeno, en donde la una o más porciones adicionales del primer antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal. El primer inmunógeno además puede incluir o codificar al menos a primera porción de un segundo antígeno. La etapa de suministro además puede incluir suministrar un segundo inmunógeno que incluye o codifica al menos una primera porción de un segundo antígeno, en donde una primera porción como mínimo de un segundo antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal . Los métodos además pueden incluir detectar u obtener una inmuno respuesta específica de epítope sin activación o expansión substancial de células T CD4+. La detección o determinación de obtención pueden realizarse por cualquier método conveniente. En algunas modalidades, "substancial" puede emplearse en el contexto de "activación o expansión substancial" de, por ejemplo, células T CD4+. En este contexto, "activación o expansión substancial" en general indica un nivel de activación o expansión que puede alcanzar un nivel de significancia fisiológica o significancia de enfermedad más allá de simple detección. Por ejemplo, si una población de células T CD4+ activadas o expandidas a un nivel sobre el corte de detección, pero por debajo de un nivel que cambiaría las características de la población para funcionar como una población objetivo o diana para agentes infecciosos o para cumplir con otras funciones de la población, pero por debajo de un nivel que produzca un cambio clínicamente relevante en las características, se entiende que la población no ha experimentado activación o expansión substancial . También, algunas modalidades se refieren a métodos de generar un inmuno respuesta contra una infección HIV. Los métodos pueden incluir las etapas de suministrar a un animal, una composición que incluye un ácido nucleico que codifica primer inmunógeno y que incluye una secuencia inmunoestimulatoría que puede servir como un inmunopotenciador, el ácido nucleico que codifica al menos una primera porción de un primer antígeno HIV, en donde al menos una porción de un primer antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal; y administrar, de preferencia subsecuente a la etapa de suministro, un péptido epitópico directamente a un sistema linfático del animal, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I de la primera porción como mínimo de un primer antígeno HIV, en donde el péptido epitópico no es el mismo que el primer inmunógeno. En algunas modalidades, la porción como mínimo de un primer antígeno HIV puede incluir un epítope restringido clase II. El primer antígeno HIV- puede por ejemplo ser, gag. pol. env. tat. Gpl20, gpl60, gp41. nef, gag p, gp, gag p24. rt . y semejantes. El ácido nucleico puede codificar una o más de SEQ ID NOs: 1-473, de preferencia una o más de SHQ ID NOs : 1-6, o cualquier otro epítope HIV. Además, algunas modalidades se refieren a métodos de generar una inmuno respuesta contra una célula infectada por un HIV. Los métodos puede incluir suministrar a un paciente una composición que incluye un ácido nucleico que codifica una o más de SEQ ID NOs: 1-473, de preferencia una o más de SEQ ID NOs: 1-473, y un adyuvante, el ácido nucleico puede codificar al menos una primera porción de un primer antígeno HIV, en donde una porción como mínimo de un primer antígeno no incluye un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el paciente, en donde el adyuvante puede ser cualquier adyuvante, de preferencia un CpG, ARNds , poli IC o un mímico de TLR; y administrar, de preferencia después de la etapa de suministro, uno o más péptidos epitópicos directamente a un nodulo linfático de un paciente, en donde el péptido es aquel que se codifico por el ácido nucleico y es un análogo del mismo. En algunas modalidades, la porción como mínimo de un primer antígeno HIV puede incluir un epítope restringido clase II. Algunas modalidades se refieren a conjuntos de de composiciones inmunogénicas, que puede incluir, por ejemplo, cualquiera de las composiciones aquí descritas, incluye como se muestra en los ejemplos. Algunas modalidades se refiere a uno o más productos inmunogénicos, que puede incluir, por ejemplo, uno o más inmunógenos, virus, vectores, antígenos, péptidos, epítopes o sus combinaciones. También, algunas modalidades se refieren a equipos que pueden incluir uno o más de los siguientes: una composición inmunogénica como se describe o ejemplifica aquí, conjuntos de estas composiciones, productos, o conjunto de productos, cualquier otro material, sustancia o composición de materia aquí descrita, instrucciones para uso, vehículos de suministro, y combinaciones de cualquiera de los anteriores . Otras modalidades se refieren a conjuntos de composiciones inmunogénicas para inducir una inmuno respuesta en un mamífero, que incluyen 1 a 6 o más dosis de modulación y al menos una dosis de amplificación, en donde las dosis de modulación pueden incluir un ácido nucleico que codifica un inmunógeno, y en donde la dosis de amplificación puede incluir un epítope péptido, y en donde el epítope puede estar presente o es presentable por pAPC que exprese el ácido nucleico. La dosis además puede incluir un adyuvante, por ejemplo, ARN. Las dosis de modulación y amplificación pueden estar en un portador adecuado para administración directa al sistema linfático, un nodulo linfático y semejantes. El ácido nucleico puede ser un plasmido. El epítope puede ser un epítope HLA clase I, por ejemplo, uno citado en las Tablas 1-4. El HLA de preferencia puede ser HLA-A2. El inmunógeno puede incluir un arreglo de epítope, este arreglo puede incluir una secuencia de liberación. El inmunógeno puede consistir esencialmente de un antígeno asociado con objetivo. El antígeno asociado con objetivo puede ser un antígeno asociado con tumor, un antígeno microbiano, cualquier otro antígeno y semejantes. El inmunógeno puede incluir un fragmento de un antígeno asociado con objetivo o diana que puede incluir un enjambre de epítopes. Adicionales modalidades pueden incluir conjuntos de composiciones inmunogénicas para inducir una inmuno respuesta restringida MHC clase I en un mamífero incluyendo 1 a 6 dosis de modulación y al menos una dosis de amplificación, en donde las dosis de modulación pueden incluir un inmunógeno o un ácido nucleico que codifica un inmunógeno y un inmunopotenciador, y en donde la dosis de amplificación puede incluir un epítope péptido, y en donde el epítope puede ser presentado por pAPC . El ácido nucleico que codifica el inmunógeno además puede incluir una secuencia inmuno estimulatoria que puede ser capaz de funcionar como el agente de inmunopotenciado. El inmunógeno puede ser un virus o vector competente de replicación que puede incluir o puede induce un agente inmunopotenciador. El inmunógeno puede ser una bacteria, lisado bacteriano o componente de pared celular purificado. También, el componente de pared celular bacteriano puede ser capaz de funcionar como el agente inmunopotenciador. El agente inmunopotenciador puede ser, por ejemplo, un ligando TLR, una secuencia inmunoestimulatoria, un ADN que contiene CpG, un ARNds, un ligando de receptor de reconocimiento de patrón (PRR) endosítico, un LPS, una quillaja saponina, tucaresol, una citosina pro- inflamatoria y semejantes. En algunas modalidades preferidas para promover respuestas multivalentes, los conjuntos pueden incluir múltiples dosis de modulación y/o múltiples dosis de amplificación correspondientes a diversos antígenos individuales, o combinaciones de antígenos, por cada administración. Las múltiples dosis de modulación pueden administrarse como parte de una sola composición o como parte de más de una composición. Las dosis de amplificación pueden administrarse en tiempos diferentes y/o a más de un sito, por ejemplo. Breve Descripción de los Dibujos La figura 1: muestra la respuesta citolítica a un epítope HBV inducido por administración intranodal de péptido más poli(IC) . La figura 2 : muestra la respuesta citolítica a un epítope modelo PSMA inducido por administración intranodal de péptido más poli(IC) . La figura 3: muestra la respuesta citolítica a un par de epítopes modelo PRAME inducidos por administración intranodal de péptido más poli(IC) . La figura 4 : muestra la susceptibilidad específica de linfocitos CD8 a una activación in vitro subsecuente a inmunización. Descripción Detallada de la Modalidad Preferida Algunas modalidades aquí descritas se refieren a métodos y composiciones para derivar la participación de células CD4+ cuando se genera anticuerpo y respuestas inmunes restringidas MHC clase I, controlando la naturaleza y magnitud de la respuesta, y promoviendo intervención inmunológica efectiva en patogénesis viral, o en otros ambientes en los que puede ser ventajoso evitar activación o expansión de célula CD4+. Más específicamente, algunas modalidades se refieren a composiciones inmunogénicas para vacunación, particularmente para vacunación terapéutica contra HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión, virus Ebola y otros patógenos microbianos que impactan el funcionamiento del sistema inmune, su naturaleza, y el orden, sincronización, y ruta de administración por los cuales se emplean efectivamente. Algunas modalidades se refieren a métodos para generar una inmuno respuesta contra HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión, virus Ebola y otros patógenos microbianos mientras que se minimiza, limita o evitan los efectos adversos asociados con la activación o expansión de células CD4+. Diversos ejemplos de virus y microbios se proporcionan en las Tablas 5-7 y en las otras referencias aquí mencionadas que se incorporan por referencia en su totalidad. Otras modalidades se refieren a métodos para expansión de la respuesta de anticuerpo y/o CD8+ mientras que se mitiga cualquier efecto dañino provocado por la activación o expansión del subconjunto CD4+. Adicionales modalidades se refieren a métodos para expansión de la respuesta de anticuerpo y/o CD8+ mientras que supera cualquier deterioro de las respuestas de célula T CD4+. También, algunas modalidades se refieren a métodos para amplificar una célula T CD8+ anti-HIV T y/o respuesta de anticuerpo mientras que provocan poco o ningún efecto en, o expansión de células CD4+. Estas modalidades también pueden ser empeladas particularmente en situaciones en donde un antígeno tiende a generar células regulatorias T CD4+ indeseables, o en donde las células T CD4+ contribuyen a una inmunopatología . Métodos y composiciones aquí descritos son útiles en la generación de una respuesta inmune o una respuesta terapéutica a HIV, HSV, HBV, HCV, HPV, CMV, virus de influenza, virus HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión, virus Ebola que puede lograrse en una forma que evite consideraciones que el propio proceso de inmunización promoverá diseminación de la infección y exacerbará avance de una enfermedad relacionada y además, en una forma que no requiera una población de células Th totalmente funcional . Algunas modalidades se refieren a un protocolo de inmunización de dos etapas para la generación de una respuesta CTL. En la primera etapa, una respuesta inmune que comprende una respuesta de memoria CTL a uno o más epítopes restringidos con MHC clase I el antígeno objetivo, puede establecerse. Típicamente, esto puede lograrse por administración intranodal de un plásmido de ADN desnudo capaz de expresión de un antígeno apropiado en una célula de presentación de antígeno profesional (pAPC) . En otras modalidades preferidas, puede combinarse un inmunógeno con un ligando receptor tipo toll apropiado (TLR = toll-like receptor) tal como un oligonucleótido CpG o ARNds sintético (poliLC) . Sin embargo la administración hitralinfática no es una característica esencial de esta primera etapa del protocolo y rutas más convencionales de administración pueden emplearse. En modalidades preferidas el término "inmunógeno" puede ser definido como una molécula capaz de inducir una inmuno respuesta contra un antígeno, un vector que expresa esta molécula, o una composición que comprende una o más de estas moléculas o vectores . La magnitud de la respuesta en esta etapa no es crucial . Son suficientes respuestas bastante modestas, aunque también pueden ocurrir respuestas moderadas y fuertes, y de esta manera, puede tolerarse la participación de las respuestas CD4+ en esta etapa de procedimiento sin destruir la utilidad del protocolo completo. Respuestas CD4+ en general pueden evitarse por el uso de inmunógenos que no comprenden o expresan epítopes restringidos MHC clase II, o al menos no aquellos que pueden presentarse por los alelos MHC clase II expresados en un sujeto particular. Inmunógenos que no contienen epítopes restringidos MHC clase II potencialmente problemáticos pueden ser modificados, por ejemplo por deleción, supresión, mutación o cualquier otra modificación de el o los epítopes, para inhibir o evitar procesamiento, transporte, y/o enlace MHC del epítope clase II. El inmunopotenciador empleado en la primer etapa en general puede ser aquel que actúa primordialmente en pAPC, por ejemplo, células dendríticas, y no directamente en linfocitos. De esta manera, no serán una causa mayor de activación o proliferación de linfocitos CD4+. La administración intranodal además puede reducir cualesquiera efectos generalizados de estos agentes. En la segunda etapa de este protocolo, uno o más péptidos epitópicos, correspondientes a el o los epítopes contra los que se inmunizan en la primer etapa, pueden ser administrados directamente al sistema linfático. En modalidades preferidas, el término "péptido epitópico" puede significar un péptido que comprende, consiste esencialmente de o consiste de un epítope. El o los péptidos pueden emplearse sin ningún inmunopotenciador u otro adyuvante, aunque pueden emplearse inmunopoteneiadores u otros adyuvantes opcionalmente. En modalidades preferidas, la administración puede ser directamente a un nodo linfático, y en el caso de múltiples péptidos puede preferirse que solo un péptido se administre a cualquier nodo linfático particular en cualquier ocasión particular, aunque en algunos aspectos, los más que uno o todos péptidos puedan administrarse al mismo nodo linfático. En algunas modalidades, por ejemplo aquellos que promueven una respuesta multivalente y en donde se emplean múltiples péptidos de amplificación, puede ser ventajoso que solo un péptido sencillo se administre a cualquier nodo linfático particular en cualquier ocasión particular. De esta manera, un péptido puede administrarse al nodo linfático inguinal derecho y un segundo péptido al nodo linfático inguinal izquierdo al mismo tiempo, por ejemplo. Péptidos adicionales pueden administrarse a otros nodos linfáticos incluso si no fueran sitios de inducción ya que no es esencial que las dosis de inicio y amplificación se administren al mismo sitio debido a migración de linfocitos T. En forma alterna, cualesquiera péptidos adicionales pueden administrarse a aproximadamente uno, dos días después a el o los mismos nodos linfáticos, de preferencia aproximadamente tres, cuatro, cinco o seis días después en el o los mismos nodos linfáticos empleados para los péptidos de amplificación previamente administrados, ya que el intervalo de tiempo entre inducción y amplificación no es un parámetro crucial, aunque en modalidades preferidas, el intervalo de tiempo puede ser mayor que aproximadamente una semana, por ejemplo, aproximadamente siete, ocho, nueve, diez, once, doce, trece, catorce o más días después. La segregación de administración de péptidos de amplificación en general puede ser de menor importancia si sus afinidades de enlace MHC son similares, pero crece en importancia conforme las afinidades se vuelven más diferentes. Formulaciones incompatibles de diversos péptidos también pueden hacer preferible la administración segregada. Cuando las afinidades de enlace MHC de los diversos péptidos son similares, puede ser menor preferido que la administración de solo un péptido sencillo se realice a un nodo linfático particular durante una ocasión particular. Cuando las afinidades de enlace MHC de los diversos péptidos son o se vuelven más disparadas, puede ser más preferido que solo un péptido sencillo se administre a cualquier nodo linfático particular en cualquier ocasión particular. Estos péptidos en general no ligarán a marcadores MHC de clase II, de manera tal que típicamente solo la respuesta CD8+ restringida clase I se amplificará. Mayores detalles referentes a esta metodología se describen en la solicitud de patente de los E.U.A. No. de Serie 10/871,707 (publicación No. 2005-0079152 Al), presentada en junio 17, 2004, publicación No. 20050079152A1 , con título METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPÍTOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad. Metodología adicional referente a la generación de inmuno respuestas, incluyendo respuestas multivalentes, se describe en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. No. de Serie 60/640,402, presentada en diciembre 29, 2004 y en la solicitud de patente de los E.U.A. no provisional No. de Serie / , (Pub. No J (Expediente del Agente No. MANNK.047A), presentada en la misma fecha que esta solicitud, ambas con título METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAI? IMMU?E RESPO?SES AGAI?ST MHC CLASS I-RESTRICTED EPÍTOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES, cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. La inmunización intralinfática para inducción de respuestas CTL se ilustra en las solicitudes de patente de los E.U.A. Nos. de Serie 09/380,534; 09/776,232 (Publicación No. 20020007173), ahora patente de los E.U.A. No. 6,977,074, presentada en febrero 6, 2001, con título METHOD OF INDUCING A CTL RESPONSE cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. En algunas modalidades, un inmunógeno puede ser co-administrado intralinfáticamente con un modificador de respuesta biológica inmunopotenciador (BRM = biological response modifier) . En un aspecto el inmunógeno puede incluir uno o más epítopes de péptido restringido de MHC clase I y una respuesta CTL puede ser generada, en otro aspecto, el inmunógeno puede incluir uno o más epítopes de célula B y una respuesta de anticuerpo puede ser generada. En cualquier aspecto, puede preferirse que el inmunógeno carezca de epítopes restringidos MHC clase II, o al menos unos que puedan presentarse por alelos MHC clase II expresados por un sujeto particular. Esta característica puede asegurar al utilizar procedimientos predictivos in sílico y caracterización estándar de enlace péptido a moléculas clase I y II MHC, utilizando métodos experimentales bien conocidos. El uso y ventajas de administración intralinfática de BRMs se describen en la solicitud de patente de los E.U.A. provisional co-pendiente No. de Serie 60/640,727, presentada en diciembre 29, 2004, y en la solicitud de patente de los E.U.A. no provisional No. de Serie / (Expediente del Agente No.

MANNK.046A), presentada en la misma fecha que esta solicitud, ambas con título METHODS TO TRIGGER, MAINTAIN AND MANIPÚLATE I MMUNE RESPO?SES BY TARGETED ADMI?ISTRATIO? OF BIOLOGICAL RESPO?SE MODIFIERS I?TO LYMPHOID ORGA?S , cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. En algunas modalidades, inmunógenos preferidos para epítopes restringidos MHC clase I son péptidos epitópicos. Como en el protocolo de inmunización anterior, puede ser preferido el administrar solo un péptido sencillo a cualquier nodo linfático particular en cualquier ocasión particular. Para epítopes de célula B, péptidos libres no son inmunógenos ideales. De preferencia, el epítope objetivo es multivalente en el inmunógeno. Ejemplos incluyen conjugación múltiple a una proteína portadora; proteínas recombinantes y polipéptidos que comprenden el epítope, por ejemplo, IgG con el epítope injertado en la posición CDR3 ; proteínas de fusión de Ig-péptido (con péptido en la posición terminal ? o C) ; y cadenas iterativas del epítope con o sin secuencias espaciadoras ; y dendrímeros. Se prefiere que cualquier proteína portadora, ya sea monovalente o multivalente para el epítope, sea una auto-proteína, de manera tal que el receptor tendrá cuando menos un grado de tolerancia para cualesquiera epítopes restringidos MHC clase II presentables en el portador, en humanos, albúmina de suero humano e inmunoglobulinas son selecciones potenciales como portadores. Células CD8+ secretan diversas citocinas además de tener actividad citolítica. De esta manera, inmunización con ambos tipos de inmunógeno puede mejorar la respuesta al inmunógeno célula B, especialmente en el caso que el inmunógeno de célula B sea monovalente para el epítope objetivo. Los métodos descritos son ventajosos frente a muchos protocolos en terapéutica de vacunación HIV. Las vacunas actuales comúnmente se basan en interacción con, o resultan en expansión de la población CD4+ en un intento por controlar infección viral, pero de hecho pueden proporcionar en forma nociva nuevos objetivos para infección viral. El método de refuerzo de péptido-cebado de ADN descrito en sí mismo es ventajoso frente a otros protocolos que utilizan solo péptido o no siguen la metodología de modular-y-amplificar . La inmunización basada en péptido o estrategia de amplificación inmune tiene ventajas frente a otros métodos, particularmente ciertos vectores microbianos, por ejemplo. Esto se debe al hecho de que vectores más complejos, tales como vectores bacterianos o virales atenuados en vivo, pueden inducir efectos secundarios nocivos, por ejemplo replicación o recombinación in vivo; o volverse ineficaces ante administración repetida debido a generación de anticuerpos neutralizantes contra el propio vector. Adicionalmente, cuando se aprovechan de manera tal que se vuelvan fuertes inmunógenos, los péptidos pueden superar la necesidad por procesamiento mediado por proteasqma (como con proteína o antígenos más complejos, en el contexto de "procesamiento cruzado" o subsecuente a infección celular) . Esto es debido a que el procesamiento de antígeno celular para la presentación restringida de clase I MHC es un fenómeno que elige en forma inherente epítopes dominantes (favorecidos) frente a epítopes subdominantes, interfiriendo potencialmente con la inmunogeneicidad de epítopes correspondientes a objetivos válidos. De esta manera, si las células que presentan antígeno son defectuosas, el uso de péptidos puede superar la necesidad por procesamiento competente que es un pre-requisito para efectividad de vectores complejos. Finalmente, inmunización basada en péptido efectiva simplifica y acorta el proceso de desarrollo de inmunoterapéutica . De esta manera, métodos de amplificación immune basados en péptido efectivos, particularmente incluyendo aquellos aquí descritos, pueden ser de beneficio considerable para generación profiláctica y/o terapéutica de una respuesta inmune contra HIV, HSV, EBV, HBV o HCV, incluyendo beneficio para vacunación contra los mismos. Beneficios adicionales pueden lograrse al evitar uso simultáneo de técnicas auxiliares problemáticas no seguras o complejas, aunque estas técnicas pueden emplearse en diversas modalidades aquí descritas . Métodos de inmunización HIV previos exhiben ciertas limitaciones importantes incluyendo la alta velocidad de mutación de HIV crea mutantes de escape inmune con facilidad, y la proteína de superficie viral gpl20 es un deficiente inmunógeno inherentemente resistente a ataque de anticuerpo. Métodos de inmunización en general también exhiben ciertas limitaciones: muy a menudo, conclusiones respecto a la potencia de vacunas se extrapolaron de datos de inmunogenicidad generados de uno o más de un panel muy limitado de ensayos de lectura ultrasensibles. Frecuentemente, a pesar de la potencia inferida de un régimen de vacunación, la respuesta clínica no fue significante o en la mejor de las condiciones fue modesta. En segundo lugar, subsecuente a inmunización, células reguladores T, junto con células efectoras T más convencionales, pueden generarse y/o expandirse, estas células pueden interferir con la función de la respuesta inmune deseada. La importancia de estos mecanismos en inmunoterapia activa se ha reconocido solo recientemente . Administración intranodal de inmunógenos proporciona una base para el control de magnitud y perfil de inmuno respuestas. La carga in vivo efectiva de pAPC lograda como resultado de esta administración, permite una magnitud substancial de inmunidad, incluso al utilizar un antígeno en su forma más simple - un epítope péptido, de otra forma generalmente asociado con deficiente farmacocinética. La calidad de respuesta además puede controlarse por la naturaleza de inmunógenos, vectores y protocolos de inmunización. Estos protocolos pueden aplicarse para mejorar/modificar la respuesta en infecciones tales como HIV. Además, administración intranodal de BRMs nos permite aprovechar su actividad inmunopotenciadora mientras que evita la toxicidad comúnmente asociada con dosis de otra forma requeridas .

Inmunización tradicionalmente se ha basado en administración repetida de antígeno para aumentar la magnitud de la respuesta inmune. El uso de vacunas de ADN ha resultado en respuestas de alta calidad, pero ha sido difícil obtener respuestas de alta magnitud utilizando estas vacunas, incluso con dosis de refuerzo repetidas. Ambas características de la respuesta, alta calidad y baja magnitud, son probablemente debidas a los niveles relativamente bajos de carga de epítope en MHC que se logra con estos vectores. Por el contrario se ha vuelto más común el reforzar estas vacunas utilizando antígeno codificado en un vector de virus vivo a fin de lograr la alta magnitud de respuesta requerida para utilidad clínica. Sin embargo, el uso de vectores vivos puede involucrar varias desventajas incluyendo aspectos de seguridad potencial, disminuyendo la efectividad de posteriores refuerzos debido a respuesta humoral al vector inducido por administraciones previas, y los costos de creación y producción. De esta manera, el uso de vectores vivos o ADN solo, aunque produce respuestas de alta calidad, puede resultar en una magnitud o sostenibilidad de respuesta limitada debido a una velocidad de transfección (previa) in vivo reducida o generación de respuestas de neutralización anti -vector (lo último) .

Aquí se describen modalidades que se relacionan a protocolos y a métodos que, cuando se aplican a partidos, los hacen efectivos como herramientas terapéuticas inmunes. Estos métodos superan el deficiente PK de péptidos, y si se aplican en contexto de regímenes específicos, y a menudo más complejos, resultan en amplificación robusta y/o control de respuesta inmune. En modalidades preferidas, administración directa de péptido en órganos linfoides resulta en una amplificación inesperadamente fuerte de respuestas inmune, siguiendo a un agente de cebado que induce una respuesta inmune fuerte, moderada o incluso ligera (en o por debajo de niveles de detección por técnicas convencionales (que consiste de cédulas Tcl . Mientras que las modalidades preferidas pueden emplear administración intralinfática de antígeno en todas las etapas de inmunización, la administración intralinfática de péptido libre de adyuvante puede ser más preferida. Amplificación de péptido que utiliza administración intralinfática puede aplicarse a inmuno-respuestas existentes que pueden haber sido previamente inducidas. Inducción previa puede ocurrir mediante exposición natural al antígeno o mediante rutas de administración comúnmente empleadas, incluyendo sin limitación subcutánea, intradérmica, intraperitoneal, intramuscular y mucosal . También como se muestra aquí, un inicio óptimo, que resulta en expansión subsecuente de células T específicas, puede lograrse mejor por exposición de las células T sin tratamiento previo a cantidades limitadas de antígeno (como puede resultar de la expresión a menudo limitada de antígeno codificado con plásmido) en un contexto co-estimulatorio rico (tal como en un nodo linfático) . Eso puede resultar en activación de células T que transportan receptores de célula T que reconocen con alta afinidad los complejos péptido-MHC en células que presentan antígeno y puede resultar en generación de células de memoria que son más reactivas a estímulo subsecuente. Puede aumentarse o asegurarse el ambiente co-estimulatorio benéfico a través del uso de agentes inmuno-potenciadores y de esta manera administración intralinfática, mientras que es ventajosa no se requiere en todas las modalidades para iniciar la respuesta inmune. Mientras que la deficiente farmacocinética de los partidos libres ha evitado su uso en la mayoría de las rutas de administración, una administración directa en órganos linfoides secundarios, particularmente nodos linfáticos, ha demostrado ser efectiva cuando el nivel de antígeno se mantiene más o menos continuamente por infusión continua o inyección frecuente (por ejemplo diariamente) . Esta administración intranodal para la generación de CTL se ilustra en las solicitudes de patente de los E.U.A. números de serie 09/380,534; 09/776,232 (Pub. No. 20020007173A1) , ahora patente de los E.U.A. No. 6,977,074; en la solicitud del TCP (PCT) número PCTUS98/14289 (Pub. No. WO 99/02183 A2) cada una titulada METHOD OF INDUCING A CTL RESPONSE y en la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 10/871,707 (Pub. No. 2005-0079152 Al), presentada en junio 17, 2004, con título METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPÍTOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Administración intranodal de péptido fue efectiva para amplificar una respuesta inicialmente inducida con una vacuna de ADN plásmido. Aún más, el perfil de citosina fue distinto, con amplificación de péptido/inducción de ADN plásmido que resulta generalmente en mayor quimiocina (citosina quimioatrayente) y menor producción de citosina inmunosupresora que cualquiera de los protocolos de ADN/ADN o péptido/péptido . De esta manera, esos protocolos de amplificación de péptido/inducción de ADN pueden mejorar la efectividad de composiciones, incluyendo vacunas terapéuticas para cáncer e infecciones crónicas. Principios de selección de epítopes benéficos para estas inmunoterapias se describen en las solicitudes de patente de los E.U.A. números de serie 09/560,465, 10/026,066 (Pub. No. 20030215425 Al), 10/005,905, presentada en noviembre 7, 2001, 10/895,523 (Pub. No. 2005-0130920 Al), presentada en julio 20, 2004, y 10/896,325 (Pub No. ), presentada en julio 20, 2004, todas con título EPÍTOPE SYNCHRONIZATION IN ANTIGEN PRESENTING CELLS; 09/561,074, ahora patente de los E.U.A. número 6,861,234, y 10/956,401 (Pub. No. 2005-0069982 Al), presentada en octubre 1, 2004, ambas con título METHOD OF EPÍTOPE DISCOVERY; 09/561,571, presentada en abril 28, 2000, con título EPÍTOPE CLUSTERS; 10/094,699 (Pub. No. 20030046714 Al), presentada en marzo 7, 2002, 11/073,347, (Pub.

No. ), presentaba en junio 30, 2005, cada una con título -NEOVASCULATURE PREPARATIONS FOR CÁNCER; y 10/117,937 (Pub. No. 20030220239 Al), presentada en abril 4, 2002 11/067,159 (Pub. No. 2005-0221440 Al), presentada en febrero 25, 2005, 10/067,064 (Pub. No. 2005-0142114 Al) , presentada en febrero 25, 2005, y 10/657,022 (Publication No. 2004-0180354 Al), y la solicitud del TCP número PCT/US2003/027706 (Pub. No. WO 04/022709 A2) , cada una con título EPÍTOPE SEQUENCES y cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Aspectos del diseño total de plásmidos de vacunas se describen en las solicitudes de patente de los E.U.A. números de serie 09/561,572, presentada en abril 28, 2000, y 10/225,568 (Pub. No. 2003-0138808 Al), presentada en agosto 20, 2002, ambas con título EXPRESSION VECTORS ENCODING EPÍTOPES OF TARGET-ASSOCIATED ANTIGENS y las solicitudes de patente de los E.U.A. números de serie 10/292,413 (Pub. No.20030228634 Al), 10/777,053 (Pub.. No. 2004-0132088 Al), presentadas en febrero 10, 2004, y 10/837,217 (Pub. No. ), presentada en abril 30, 2004, todas con título EXPRESSION VECTORS ENCODING EPÍTOPES OF TARGET-ASSOCIATED ANTIGENS AND METHODS FOR THEIR DESIGN; 10/225,568 (Pub No. 2003-0138808 Al), solicitud del TCP númeroPCT/US2003/026231 (Pub. No. WO 2004/018666) y patente de los E.U.A. número 6,709,844 y solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 10/437,830 (Pub. No. 2003-0180949 Al), presentada en mayo 13, 2003, cada una con título AVOIDANCE OF UNDESIRABLE REPLICATION INTERMEDIATES IN PLASMID PROPAGATION, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Combinaciones antigénicas especificas de beneficio particular para dirigir una inmuno-respuesta contra cánceres particulares se describen en la solicitud provisional de patente de los E.U.A. número de serie 60/479,554, presentada en junio 17, 2003, la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 10/871,708 (Pub. No. 2005-0118186 Al), presentada en junio 17, 2004, la solicitud de patente del TCP número PCT/US2004/019571 (Pub. No. WO 2004/112825), la solicitud provisional de patente de los E.U.A. número de serie 60/640,598, presentada en diciembre 29, 2005, y la solicitud de patente de los E.U.A. número /(Pub.

No. ), (expediente del agente número MANNK.049A) presentadas en la misma fecha que esta solicitud, todas con título COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN VACCINES FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS, cada una de las cuales aquí se incorporan por referencia en su totalidad. Combinaciones antigénicas especificas de beneficio particular para dirigir una inmuno-respuesta contra HIV, se describen en un artículo por Kiepiela et al., ("Dominant influence of HLA-B in mediating the potential co-evolution of HIV and HLA," Nature, vol. 432, páginas 769-775 (diciembre 9, 2004)) que aquí también se incorpora por referencia en su totalidad. El uso y ventajas de administración intralinfática de BRMs se describen en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/640,727, presentada en diciembre 29, 2005 y la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie No. / , (Pub. No. ) (expediente del agente número MANNK.046A), presentada en la misma fecha que esta solicitud, ambas con título METFODS TO TRIGGER MANTAIN AND MANIPÚLATE INMUNE RESPONSES BY TARGETED ADMINISTRATION OF BIOLOGICAL RESPONSE MODIFIERS INTO LYMPHOID ORGANS, cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. Metodología a composiciones péptidos y análogos de péptidos adicionales se describen en la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 09/999,186, presentada en noviembre 7, 2001, con título METHODS OF COMMERCIALIZING AN ANTIGEN; y la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/640,402, presentada en diciembre 29, 2005 y la solicitud número / , (Pub. No. ) (expediente del agente número MANNK.047A), presentada en la misma fecha que esta solicitud, ambas con título METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPÍTOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. La integración de técnicas de diagnóstico para estimar y supervisar respuesta inmune con métodos de inmunización, se discute más completamente en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/580,964, presentada en junio 17, 2004, y 11/155,928 (Pub. No. ), presentada en junio 17, 2005, ambas con título IMPROVED EFFICACY OF ACTIVE IMMUNOTHERAPY BY INTEGRATING DIAGNOSTIC WITH THERAPEUTIC METHODS, cada una de las cuales aquí se incorporan por referencia en su totalidad. Metodología a composiciones péptidos y análogos de péptidos adicionales se describen en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/581,001, presentada en junio 17, 2004 y la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 11/156,253 (Pub. No. ), presentada en junio 17, 2005, ambas con título SSX-2 PEPTIDE ANALOGS; y la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/580,962, presentada en junio 17, 2004, y la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 11/155,929 (Pub. No. ), presentada en junio 17, 2005, ambas con título NY-ESO PEPTIDE ANALOGS; la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 09/999,186, presentada en noviembre 7, 2001, y con título METHODS OF COMMERCIALIZING AN ANTIGEN; cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Diversos virus, antígenos virales y epítopes de antígenos virales que pueden emplearse en las modalidades aquí descritas se describen en la solicitud de patente de los E.U.A. número 20020007173A1 (ahora patente de los E.U.A. número 6,977,074) . En algunos aspectos, uno o más, incluyendo cualquier combinación de los citados virus, antígenos virales o epítopes virales pueden incluirse o excluirse específicamente de una modalidad de un método. Otras descripciones relevantes se presentan en la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 11/156,369 (Pub. No. ), y en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/691,889, ambas presentadas en junio 17, 2005, ambas con título EPÍTOPE ANALOGS y cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. También son relevantes las solicitudes de patente- provisionales de los E.U.A. números de serie 60/691,579, presentada en junio 17, 2005, con título METHODS AND COMPOSITIONS TO ELICIT MULTIVALENT IMMUNE RESPONSES AGAINST DOMINANT AND SUBDOMINANT EPÍTOPES, EXPRESSED ON CÁNCER CELLS AND TUMOR STROMA, 60/691,581, presentada en junio 17, 2005, con título MULTIVALENT ENTRAIN-AND-AMPLIFY IMMUNOTHERAPEUTICS FOR CARCINOMA, y la solicitud de patente de los E.U.A. número de serie 11/155,288 (Pub. No. ), presentada en junio 17, 2005, con título COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN DIAGNOSTICS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Inducción con un agente tal como ADN recombinante sin replicación (plásmido) pueden y han mostrado un impacto en las dosis subsecuentes, permitiendo amplificación robusta de inmunidad a epítopes expresados por el ADN recombinante y péptido y modular su naturaleza citolítica. De hecho, cuando administraciones sencillas o múltiples de vector ADN recombinante o péptido logran separadamente modesta respuesta inmune o no, induciendo en con ADN y amplificando con péptido logran respuestas sustancialmente superiores, tanto como una proporción de respuestas como una magnitud de respuesta. Como se muestra en las solicitudes de patentes de los E.U.A. números de serie 10/871,707, presentada en junio 17, 2004, con título METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPÍTOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES, (publicación número. 2005-0079152-A1) ; y 60/640,727, presentada en diciembre 29, 2004, con título METHODS TO TRIGGER, MAINTAIN AND MANIPÚLATE IMMUNE RESPONSES BY TARGETED ADMINISTRATION OF BIOLOGICAL RESPONSE MODIFIERS INTO LYMPHOID ORGANS ; / , (expediente del agente número 047A) citada anteriormente; y WO05002621 (cada uno de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad) la velocidad de respuesta fue al menos el doble y la magnitud de respuesta (promedia y mediana) fue al menos el triple al utilizar un protocolo de amplificación de péptido/inducción de ADN recombinante. De esta manera, protocolos preferidos resultan en inducción de inmunidad (inmunidad Tcl) que es susceptible a tratar con células antigénicas in vivo, dentro de órganos linfoides y no linfoides. Estos protocolos de inducción y amplificación que involucran secuencias específicas de dosis de modulación de ADN recombinante, seguido por refuerzos de péptido administrados a órganos linfoide, de esta manera son útiles para los propósitos de inducción, amplificación y mantenimiento de fuertes respuestas de célula T, por ejemplo para profilaxis o terapia de enfermedades infecciosas enfermedades objetivo pueden incluir aquellas provocadas por priones, por ejemplo. Ejemplares enfermedades, organismos y antígenos y epítopes asociados con organismos, células y enfermedades objetivo o diana se describen en la solicitud de patente de los E.U.A. números de serie 09/776,232 (presentada en febrero 2, 2001; Pub. No. 20020007173 Al) con título METHODS OF INDUCING A CTL RESPONSE. Entre las enfermedades infecciosas que pueden ser atendidas son aquellas provocadas por agentes que tienden a establecer infecciones crónicas (HIV, virus herpes simples, CMV, virus de hepatitis B y C, virus de papiloma y semejantes) y/o aquellos que se conectan con infecciones agudas (por ejemplo virus de influenza, sarampión, RSV, virus ébola) . Todos estos agentes infecciosos tienen antígenos definidos o definibles que pueden utilizarse como base para diseñar composiciones tales como epítopes de péptido. La práctica de diversas modalidades metodológicas puede requerir el uso de al menos dos composiciones diferentes y especialmente cuando hay más de un antígeno objetivo sencillo, pueden involucrar varias composiciones a administrarse en conjunto y/o en diferentes tiempos. De esta manera, algunas modalidades pueden relacionarse a conjuntos y subconjuntos de composiciones inmunogénicas y sus dosis individuales. La multivalencia puede lograrse utilizando composiciones que incluyen inmunógenos multivalentes, combinaciones de inmunógenos monovalentes, uso coordinado de composiciones que incluyen un inmunógeno monovalente o diversas de sus combinaciones. Múltiples composiciones, fabricadas para utilizar en un régimen de tratamiento o protocolo particular de acuerdo con estos métodos, pueden definir un producto inmunoterapéutico. En algunas modalidades, todo o un subconjuntos de las composiciones del producto puede empacarse en un paquete. En algunos casos, las composiciones de inducción y amplificación que hacen objetivo a un solo epítope o conjunto de epítopes, pueden empacarse en conjunto. En otros casos, múltiples composiciones de inducción pueden ensamblarse en un equipo o en un paquete y las composiciones de amplificación correspondientes ensamblarse en otro equipo. En forma alterna, composiciones pueden empacarse y venderse individualmente junto con instrucciones, en forma impresa o en medio legible por máquina, escribiendo como pueden emplearse en conjunto entre sí para lograr los resultados benéficos de los métodos. Mayores variaciones serán aparentes a una persona con destreza en la especialidad. El uso de diversos esquemas de empaque que comprenden menos que la totalidad de las composiciones que pueden emplearse en un protocolo o régimen particular, facilita la personalización del tratamiento, por ejemplo con base en la respuesta observada a la inmunoterapéutica o sus diversos componentes, como se describe en la solicitud de patente provisional de los E.U.A. número de serie 60/580,964, y la solicitud de patente de los E.U.A número de serie 11/155,928 ambas con título IMPROVED EFFICACY OF ACTIVE IMMUNOTHERAPY BY INTEGRATING DIAGNOSTIC WITH THERAPEUTIC METHODS, cada una de las cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Modalidades se dirigen a métodos, usos, terapias y composiciones relacionadas a epítopes y composiciones con especificidad para MHC, incluyendo por ejemplo aquellas citadas en las tablas 1-4. Otras modalidades incluyen uno o más de los MHCs citados en las tablas 1-4, incluyendo combinaciones de los mismos, mientras que otras modalidades excluyen específicamente cualquiera uno o más de los MHCs o sus combinaciones. Las tablas 3-4 incluyen frecuencias para los antígenos HLA citados. Tabla 1 Moléculas MHC clase I Clase I Humano HLA-A1 HLA-A* 0101 HLA-A*0201 HLA-A*0202 HLA-A*0203 HLA-A*0204 HLA-A*0205 HLA-A*0206 HLA-A*0207 HLA-A*0209 HLA-A*0214 HLA-A3 HLA-A*0301 HLA-A* 1101 HLA-A23 HLA-A24 HLA-A25 HLA-A*2902 HLA-A*3101 HLA-A*3302 HLA-A*6801 HLA-A*6901 HLA-B7 HLA-B*0702 HLA-B*0703 HLA-B*0704 HLA-B*0705 HLA-B8 HLA-B 13 HLA-B 14 HLA-B*1501 (B62) HLA-B 17 HLA-B 18 HLA-B22 HLA-B27 HLA-B*2702 HLA-B*2704 HLA-B*2705 HLA-B*2709 HLA-B35 HLA-B*3501 HLA-B*3502 HLA-B*3701 HLA-B*3801 HLA-B*39011 HLA-B*3902 HLA-B40 HLA-B*40012 (B60) HLA-B*4006 (B61) HLA-B44 HLA-B*4402 HLA-B*4403 HLA-B*4501 HLA-B*4601 HLA-B51 HLA-B*5101 HLA-B*5102 HLA-B*5103 HLA-B* 5201 HLA-B*5301 HLA-B*5401 HLA-B*5501 HLA-B*5502 HLA-B*5601 HLA-B*5801 HLA-B*6701 HLA-B*7301 HLA-B*7801 HLA-Cw*0102 HLA-Cw*0301 HLA-Cw*0304 HLA-Cw* 0401 HLA-Cw*0601 HLA-Cw*0602 HLA-Cw*0702 HLA-Cw8 HLA-Cw* 1601 M HLA-G Murino H2-Ks H2-Dc H2-L° H2-KD H2-Dc H2-Kk H2-Kkml Qa-la Qa-2 H2-M3 Rata RTl.Aa RTI. A1 Bovino Bota-All Bota-A20 Pollo B-F4 B-F12 B-F15 B-F19 Chimpancé Patr-A*04 Patr-A*ll Patr-B*01 Patr-B*13 Patr-B*16 Mandril Papa-A*06 Macaco Mamu-A*01 Cerdo SLA (haplotype d/d) Homólogo de virus Homólogo hCMV clase I UL18 Tabla 2 Moléculas MHC clase I Clase I Humano HLA-A1 HLA-A*0101 HLA-A*0201 HLA-A*0202 HLA-A*0204 HLA-A*0205 HLA-A*0206 HLA-A*0207 HLA-A*0214 HLA-A3 HLA-A* 1101 HLA-A24 HLA-A*2902 HLA-A*3101 HLA- A*3302 HLA-A*6801 HLA-A*6901 HLA-B7 HLA-B*0702 HLA-B*0703 HLA-B*0704 HLA-B*0705 HLA-B8 HLA-B14 HLA-B* 1501 (B62 ) HLA-B27 HLA-B*2702 HLA-B*2705 HLA-B35 HLA-B* 3501 HLA-B* 3502 HLA-B*3701 HLA-B*3801 HLA-B*39011 HLA-B* 3902 HLA-B40 HLA-B*40012 (B60) HLA-B*4006 (B61) HLA-B44 HLA-B*4402 HLA-B*4403 HLA-B*4601 HLA-B51 HLA-B*5101 HLA-B*5102 HLA-B*5103 HLA-B*5201 HLA-B*5301 HLA-B*5401 HLA-B*5501 HLA-B*5502 HLA-B*5601 HLA-B*5801 HLA-B*6701 HLA-B*7301 HLA-B*7801 HLA-Cw*0102 HLA-Cw*0301 HLA-Cw*0304 HLA-Cw*0401 HLA-Cw*0601 HLA-Cw*0602 HLA-Cw*0702 HLA-G Murino H2-Ku H2-Da H2-Ld H2-Kc H2-Dc H2-Kk H2_?kmi Qa-2 Rata RTl.Aa RTI. A1 Bovino Bota-All Bota-A20 Pollo B-F4 B-F12 B-F15 B-F19 Homólogo de virus Homólogo hCMV clase I UL18 Tabla 3 Frecuencias de gen estimadas de antígeno HLA-A frecuencia de genes error estándar Tabla 4 Frecuencias de gen estimadas para antígenos HLA-B frecuencia de gen bError estándar. CE1 conteo de gen observado fue cero. Algunas modalidades se refieren a métodos, usos, terapias, equipos, productos y composiciones relacionadas a generar inmuno-respuestas contra enfermedades, tales como enfermedades virales y otras enfermedades microbianas, incluyendo sin limitación los microbios y virus citados en las tablas 5-7. Además, algunas modalidades se refieren a o pueden utilizar antígenos de diversos animales así como epítopes de célula B y célula T clase I de los antígenos. Sin estar limitado a ello, ejemplos de algunos antígenos y epítopes se citan en las tablas 5-7 y las otras referencias ahí citadas que se incorporan aquí por referencia en su totalidad. Habrá de entenderse que en algunas modalidades, o una o más o combinaciones de los virus antígenos y epítopes citados y referidos aquí pueden ser excluidos específicamente, mientras que en algunas modalidades, uno o más o sus combinaciones pueden incluirse. Los epítopes de célula B y epítopes de célula T clase I que pueden emplearse con las diversas modalidades no se limitan a aquellos que se citan específicamente ya que epítopes adicionales pueden determinarse fácilmente por la persona con destreza utilizando cualquier técnica conveniente. Como un ejemplo, epítopes de célula T clase I adicionales pueden ser identificados utilizando un método conveniente tales como epítopes con especificidad de enlace para cualquier molécula MHC. Cualquier epítope de célula B para cualquier microbio o antígeno aquí citado puede determinarse fácilmente utilizando cualquier técnica conveniente por una persona con destreza en la especialidad. Por ejemplo, estos epítopes pueden identificarse utilizando técnicas de modelación de homología y utilizando la base de datos Bcipep solo o en combinación con técnicas predictivas. También, la identificación de epítopes de célula B que son capaces de producir una respuesta de anticuerpo puede lograrse fácilmente utilizando técnicas bien conocidas en la especialidad. Ver por ejemplo Geysen et al. (1984) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 81:3998-4002 (método general de síntesis rápida de péptidos para determinar la ubicación de epítopes inmunogénicos en un antígeno determinado) ; la patente de los E.U.A. número 4,708,871 (procedimientos para identificar y sintetizar químicamente epítopes de antígenos) ; y Geysen et al. (1986) Molecular Immunology 23:709-715 (técnica para identificar péptidos con alta afinidad para un anticuerpo determinado) ; cada una de los cuales aquí se incorpora por referencia en su totalidad. Tabla 5 Virus Proteína Posición Epítope de Molécula AA Célula T MHC ligando MHC (Antígeno) EBV EBNA-3 325-333 AYPLHEQHG (SEQ HLA-B8 ID NO: 12) EBV EBNA-3 158-166 YlKSFVSDA (SEQ HLA-B8 ID NO: 13) EBV LMP-2 236-244 RRRWRRLTV (SEQ HLA- ID NO: 14) B*2704 EBV EBNA-6 258-266 RRIYDLIEL (SEQ HLA- ID NO: 15) B*2705 EBV EBNA-3 458-466 YPLHEQHGM (SEQ HLA- ID NO: 16) B*3501 EBV EBNA-3 458-466 YPLHEQHGM (SEQ HLA- ID NO: 17) B*3503 EBV LMP-2 426-434 CLGGLLTMV (SEQ HLA- ID NO: 18) A*0201 EBV EBNA-1 480-484 NIAEGLRAL (SEQ HLA- ID NO: 19) A*0201 EBV EBNA-1 519-527 NLRRGTALA (SEQ HLA- ID NO: 20) A*0201 EBV EBNA-1 525-533 ALAIPQCRL (SEQ HLA- ID NO: 21) A*0201 EBV EBNA-1 575-582 VLKDAIKDL (SEQ HLA- ID NO: 22) A*0201 EBV EBNA-1 562-570 FMVFLQTHI (SEQ HLA- ID NO:23) A*0201 EBV EBNA-2 15-23 HLIVDTDSL (SEQ HLA- ID NO:24) A*0201 EBV EBNA-2 22-30 SLGNPSLSV (SEQ HLA- ID NO:25) A*0201 EBV EBNA-2 126-134 PLASAMRML (SEQ HLA- ID NO:26) A*0201 EBV EBNA-2 132-140 RMLWMANYl (SEQ HLA- ID NO:27) A*0201 EBV EBNA-2 133-141 MLWMANYIV (SEQ HLA- ID NO:28) A*0201 EBV EBNA-2 151-159 ILPQGPQTA (SEQ HLA- ID NO:29) A*0201 EBV EBNA-2 171-179 PLRPTAPTI (SEQ HLA- ID NO:30) A*0201 EBV EBNA-2 205-213 PLPPATLTV (SEQ HLA- ID NO:31) A*0201 EBV EBNA-2 246-254 RMHLPVLHV (SEQ HLA- ID NO:32) A*0201 EBV EBNA-2 287-295 PMPLPPSQL (SEQ HLA- ID NO:33) A*0201 EBV EBNA-2 294-302 QLPPPAAPA (SEQ HLA- ID NO:34) A*0201 EBV EBNA-2 381-389 SMPELSPVL (SEQ HLA- ID NO: 35) A*0201 EBV EBNA-2 453-461 DLDESWDYI (SEQ HLA- ID NO: 36) A*0201 EBV BZLF1 43-51 PLPCVLWPV (SEQ HLA- ID NO: 37) A*0201 EBV BZLF1 167-175 SLEECDSEL (SEQ HLA- ID NO: 38) A*0201 EBV BZLFl 176-184 EIKRYKNRV (SEQ HLA- ID NO:39) A*0201 EBV BZLFl 195-203 QLLQHYREV (SEQ HLA- ID NO:40) A*0201 EBV BZLFl 196-204 LLQHYREVA (SEQ HLA- ID NO:41) A*0201 EBV BZLFl 217-225 LLKQMCPSL (SEQ HLA- ID NO:42) A*0201 EBV BZLFl 229-237 SIIPRTPDV (SEQ HLA- ID NO:43) A*0201 EBV EBNA- 6 284-293 LLDFVRFMGV (SEQ HLA- ID NO:44) A*0201 EBV EBNA-3 464-472 SVRDRLARL (SEQ HLA- ID NO:45) A*0203 EBV EBNA-4 416-424 IVTDFSVK (SEQ HLA-A* ID NO:46) 1101 EBV EBNA-4 399-408 AVFDRKSDAK (SEQ HLA- ID NO: 47) A*0201 EBV EBNA-3 246-253 RYSIFFDY (SEQ HLA-A24 ID NO:48) EBV EBNA- 6 881-889 QPRAPIRPI (SEQ HLA-B7 ID NO: 49) EBV EBNA-3 379-387 RPPIFIRRI (SEQ HLA-B7 ID NO: 50) EBV EBNA-1 426-434 EPDVPPGAI (SEQ HLA-B7 ID NO:51) EBV EBNA-1 228-236 IPQCRLTPL (SEQ HLA-B7 ID NO: 52) EBV EBNA-1 546-554 GPGPQPGPL (SEQ HLA-B7 ID NO: 53) EBV EBNA-1 550-558 QPGPLRESI (SEQ HLA-B7 ID NO: 54) EBV EBNA-1 72-80 R.PQKRPSCI (SEQ HLA-B7 ID NO: 55) EBV EBNA-2 224-232 PPTPLLTVL (SEQ HLA-B7 E) NO:56) EBV EBNA-2 241-249 TPSPPRMHL (SEQ HLA-B7 ID NO: 57) EBV EBNA-2 244-252 PPRMHLPVL (SEQ HLA-B7 ID NO: 58) EBV EBNA-2 254-262 VPDQSMHPL (SEQ HLA-B7 ID NO: 59) EBV EBNA-2 446-454 PPSIDPADL (SEQ HLA-B7 ID NO: 60) EBV BZLFl 44-52 LPCVLWPVL (SEQ HLA-B7 ID NO:61) EBV BZLFl 222-231 CPSLDVDSII (SEQ HLA-B7 ID NO: 62) EBV BZLFl 234-242 TPDVLHEDL (SEQ HLA-B7 ID NO -.63) EBV EBNA- 3 339-347 FLRGRAYGL (SEQ HLA-B8 ID NO: 64) EBV EBNA-3 26-34 QAKWRLQTL (SEQ HLA-B8 ID NO:65) HCV NS3 389-397 HSKKKCDEL (SEQ HLA-B8 ID NO: 66) HCV env E 44-51 ASRCWVAM (SEQ HLA- ID NO:67) B*3501 HCV proteína 27-35 GQIVGGVYL (SEQ HLA- núcleo ID NO: 68) B*40012 HCV NSI 77-85 PPLTDFDQGW (SEQ HLA- ID NO:69) B*5301 HCV proteína 18-27 LMGYIPLVGA (SEQ H2-Dd núcleo ID NO:70) HCV proteína 16-25 ADLMGYPLV (SEQ H2-Dd núcleo ID NO:71) HCV NS5 409-424 MSYSWTGALVT H2-Dd PCAEE (SEQ ID NO: 72) HCV NS1 205-213 KHPDATYSR (SEQ Papa-A06 ID NO: 73) HCV-1 NSI 159-167 TRPPLGNWF (SEQ Patr-B13 ID NO: 74) HCV-1 NS3 351-359 VPHPNIEEV (SEQ Patr-B13 ID NO:75) HCV-1 NS3 438-446 YTGDFDSVI (SEQ Patr-BOl ID NO:76) HCV-1 NS4 328-335 SWAIKWEY (SEQ Patr-Al ID NO:77) 1 HCV-1 NSI 205-213 KHPDATYSR (SEQ Patr-A04 ID NO: 78) HCV-1 NS3 440-448 GDFDSVIDC (SEQ Patr-A04 ID NO:79) HCV-1 NS3 400-409 KLVALGINAV (SEQ HLA- ID NO:80) A*0201 HCV-1 NS3 440-448 GDFDSVIDC (SEQ Patr-B16 ID NO: 81) HCV-1 env E 118-126 GNASRCWVA (SEQ Patr-BI6 ID NO: 82) HIV Nef 117-125 TQGYFPQWQ (SEQ HLA- ID NO:83) B*3701 HIV gagp24 143-151 HQAISPRTL (SEQ HLA- ID NO: 84) Cw*0301 HIV gagp24 140-151 QMVHQAISPRTL HLA- (SEQ ID NO: 85) Cw*0301 HIV gpl20 431-440 MYAPPIGGQI (SEQ H2-Kd ID NO:86) HIV gpl60 318-327 RGPGRAFVTI (SEQ H2-Dd ID NO:87) HIV gpl20 17-29 MPGRAFVTI (SEQ H2-Ld ID NO:88) HIV gp41 583-591 RYLKDQQLL (SEQ HLA_A24 ID NO: 89) HIV gagp24 267-275 IVGLNKIVR (SEQ HLA- ID NO: 90) A*3302 HIV gagp24 262-270 EIYKRWIIL (SEQ HLA-B8 ID NO: 91) 10 HIV gagp24 261-269 GE1YKRWI1 (SEQ HLA-B8 ID NO: 92) HIV gagpl7 93-101 EIKDTKEAL (SEQ HLA-B8 ID NO: 93) HIV gp41 586-593 YLKDQQLL (SEQ HLA-B8 ID NO: 94) HIV gagp24 267-277 ILGLNKIVRMY HLA- (SEQ ID NO: 95) B*1501 HIV 9P 1 584-592 ERYLKDQQL (SEQ HLA-B 14 ID NO: 96) 20 HIV Nef 115-125 YHTQGYFPQWQ HLA-B 17 (SEQ ID NO: 97) HIV Nef 117-128 TQGYFPQWQNY T HLA-B 17 (SEQ ID NO:98) HIV gpl20 314-322 GRAFVT1GK (SEQ HLA- 25 ID NO:99) B*2705 HIV gagp24 263 - 271 KRW?LGLN (SEQ HLA- ID NO: 100) B*2702 HIV Nef 72 - 82 QVPLRPMTYK (SEQ HLA- ID NO:101) B*3501 HIV- 1 gagp 17 24 - 31 GGKKKYKL (SEQ HLA-B8 ID NO: 102) HIV- 1 gpl 20 2 - 10 RVKEKYQHL (SEQ HLA-B8 ID NO: 103) HIV-1 gagp24 298-306 DRFYKTLRA (SEQ HLA-B 14 ID NO: 104) HIV-1 NEF 132-147 GVRYPLTFGWC HLA-B18 YKLVP (SEQ ID NO: 105) HIV-1 gagp24 265-24 KRWIILGLNK (SEQ HLA- ?D NO:106) B*2705 HIV-1 nef 190-198 AFHHVAREL (SEQ HLA- ID NO: 107) B*5201 HIV- 1 RT 476-484 ILKEPVHGV (SEQ HLA- ID NO: 108) A*0201 HIV-1 Nef 190-198 AFHHVAREL (SEQ HLA- ID NO: 109) A*0201 HIV-1 gpI60 120-128 KLTPLCVTL (SEQ HLA- ID NO: 110) A*0201 HIV-1 Gp 160 814-823 SLLNATDIAV (SEQ HLA- ID NO: 111) A*0201 HIV-1 RT 179-187 VIYQYMDDL (SEQ HLA- ID NO: 112) A*0201 HIV-1 gagp 17 77-85 SLYNTVATL (SEQ HLA- ID NO: 113) A*0201 HIV-1 gpl60 315-329 RGPGRAFVTl (SEQ HLA- ID NO:114) A*0201 HIV-1 gp41 768-778 RLRDLLLIVTR HLA-A3 (SEQ ID NO: 115) HIV-1 Nef 73-82 QVPLRPMTYK (SEQ HLA-A3 ID NO: 116) HIV-1 gpl20 36-45 TVYYGVPVWK (SEQ HLA-A3 ID NO: 117) HIV-1 gagp 17 20-29 RLRPGGKKK (SEQ HLA-A3 ID NO: 118) HIV-1 gpl20 38-46 VYYGVPVWK (SEQ HLA-A3 ID NO: 119) HIV-1 Nef 74-82 VPLRPMTYK (SEQ HLA- ID NO: 120) a*1101 HIV-1 gagp24 325-333 AIFQSSMTK (SEQ HLA- ID NO:121) A*1101 HIV-1 Nef 73-82 QVPLRPMTYK (SEQ HLA- ID NO: 122) A*1101 HIV-1 Nef 83-94 AAVDLSHFLKEK HLA- (SEQ ID NO: A*1101 123) HIV-1 Nef 128-137 TPGPGVRYPL (SEQ HLA-B7 ID NO: 126) Mv HA 343-351 DPVIDRLYL (SEQ H2-Ld ID NO: 127) MV HA 544-552 SPGRSFSYF (SEQ H2-Ld ID NO: 128) Virus de Glll 455-463 IAGIGILAI (SEQ HLA- pseudo ID NO: 129) A*0201 rabia gp Virus de NS 197-205 VEAEIAHQI (SEQ H2-Kk rabia ID NO: 130) RSV M2 82-90 SYIGSINNI (SEQ H2-Kd ID NO: 131) SIV gagpllC 179-190 EGCTPYDTNQM Mamu- (SEQ ID NO: A*01 132) EBV EBNA-6 335-343 KEHVIQNAF (SEQ HLA-B44 ID NO: 133) EBV EBNA-6 130-139 EENLLDFVRF (SEQ HLA- ID NO: 134) B*4403 EBV EBNA-2 42-51 DTPLIPLTIF (SEQ HLA-B51 ID NO: 135) EBV EBNA-6 213-222 QNGALAINTF (SEQ HLA- 1362 ID NO: 136) EBV EBNA-3 603-611 RLRAEAGVK (SEQ HLA-A3 ID NO: 137) HBV sAg 348-357 GLSPTVWLSV (SEQ HLA- ID NO:138) A*0201 HBV SAg 335-343 WLSLLVPFV (SEQ HLA- ID NO:139) A*0201 HBV cAg 18-27 FLPSDFFPSV (SEQ HLA- ID NO: 140) A*0201 HBV cAg 18-27 FLPSDFFPSV (SEQ HLA- ID NO: 141) A*0202 HBV cAg 18-27 FLPSDFFPSV (SEQ HLA- ID NO: 142) A*0205 HBV cAg 18-27 FLPSDFFPSV (SEQ HLA- ID NO: 143) A*0206 HBV pol 575-583 FLLSLGIHL (SEQ HLA- ID NO:144) A*0201 HBV pol 816-824 SLYADSPSV (SEQ HLA- ID NO: 145) A*0201 HBV pol 455-463 GLSRYVARL (SEQ HLA- ID NO: 146) A*0201 HBV env 338-347 LLVPFVQWFV (SEQ HLA- ID NO: 147) A*0201 HBV pol 642-650 ALMPLYACI (SEQ HLA- ID NO: 148) A*0201 HBV env 378-387 LLPIFFCLWV (SEQ HLA- ID NO: 149) A*0201 HBV pol 538-546 YMDDWLGA (SEQ HLA- ID NO: 150) A*0201 HBV env 250-258 LLLCLIFLL (SEQ HLA- ID NO: 151) A*0201 HBV env 260-269 LLDYQGMLPV (SEQ HLA- ID NO: 152) A*0201 HBV env 370-379 SIVSPFEPLL (SEQ HLA- ID NO: 153) A*0201 HBV env 183-191 FLLTRILTI (SEQ HLA- ID NO: 154) A*0201 HBV CAg 88-96 YVNVNMGLK (SEQ HLA- ID NO: 155) A*1101 HBV cAg 141-151 STLPETTWRR HLA- (SEQ ID NO: A*3101 156) HBV cAg 141-151 STLPETTWRR HLA- (SEQ ID NO: A*6801 157) HBV CAg 18-27 FLPSDFFPSV (SEQ HLA- ID NO:158) A*6801 HBV SAg 28-39 PQSLDSWWTSL H2-Ld (SEQ ID NO: 159) HBV cAg 93-100 MGLKFRQL (SEQ H2-Kb ID NO: 160) HBV preS 141-149 STBXQSGXQ (SEQ HLA- ID NO: 161) A*0201 HCMV gp B 618-628 FIAGNSAYEYV HLA- (SEQ ID NO: A*0201 162) HCMV El 978-989 SDEEFAIVAYTL HLA-B 18 (SEQ ID NO: 163) HCMV pp65 397-411 DDVWTSGSDSD HLA-b35 EELV (SEQ ID NO: 164) HCMV pp65 123-131 IPSINVHHY (SEQ HLA- ID NO: 165) B*3501 HCMV pp65 495-504 NLVPMVATVO (SEQ HLA- ID NO: 166) A*0201 HCMV pp65 415-429 RKTPRVTOGGA HLA-B7 MAGA (SEQ ID NO: 167) HCV MP 17-25 DLMGYIPLV (SEQ HLA- ID NO: 168) A*0201 HCV MP 63-72 LLALLSCLTV (SEQ HLA- ID NO: 169) A*0201 HCV MP 105-112 ILHTPGCV (SEQ HLA- ID NO: 170) A*0201 HCV env E 66-75 QLRRHIDLLV (SEQ HLA- ID NO: 171) A*0201 HCV env E 88-96 DLCGSVFLV (SEQ HLA- ID NO: 172) A*0201 HCV env E 172-180 SMVGNWAKV (SEQ HLA- ID NO: 173) A*0201 HCV NSI 308-316 HLIIQNrVDV (SEQ HLA- ID NO: 174) A*0201 HCV NSI 340-348 FLLLADARV (SEQ HLA- ID NO: 175) A*0201 HCV NS2 234-246 GLRDLAVAVEP W HLA- (SEQ ID NO: A*0201 176) HCV NSI 18-28 SLLAPGAKQNV HLA- (SEQ ID NO: A*0201 177) HCV NSI 19-28 LLAPGAKQNV (SEQ HLA- ID NO: 178) A*0201 HCV NS4 192-201 LLFNILGGWV (SEQ HLA- ID NO: 179) A*0201 HCV NS3 579-587 YLVAYQATV (SEQ HLA- ID NO: 180) A*0201 HCV proteína 34-43 YLLPRRGPRL (SEQ HLA- núcleo ID NO: 181) A*0201 HCV MP 63-72 LLALLSCLTI (SEQ HLA- ID NO: 182) A*0201 HCV NS4 174-182 SLMAFTAAV (SEQ HLA- ID NO: 183) A*0201 HCV NS3 67-75 CINGVCWTV (SEQ HLA- ID NO: 184) A*0201 HCV NS3 163-171 LLCPAGHAV (SEQ HLA- ID NO: 185) A*0201 HCV NS5 239-247 ILDSFDPLV (SEQ HLA- ID NO: 186) A*0201 HCV NS4A 236-244 ILAGYGAGV (SEQ HLA- ID NO: 187) A*0201 HCV NS5 714-722 GLQDCTMLV (SEQ HLA- ID NO: 188) A*0201 HCV NS3 281-290 TGAPVTYSTY (SEQ HLA- ID NO: 189) A*0201 HCV NS4A 149-157 HMWNFISGI (SEQ HLA- ID NO: 190) A*0201 HCV NS5 575-583 RVCEKMALY (SEQ HLA- ID NO: 191) A*0201- A3 HCV NS1 238-246 TINYTIFK (SEQ HLA- ID NO: 192) A*1101 HCV NS2 109-116 YISWCLWW (SEQ HLA-A23 ID NO: 193) HCV proteína 40-48 GPRLGVRAT (SEQ HLA-B7 núcleo ID NO: 194) HIV-1 gpl20 380-388 SFNCGGEFF (SEQ HLA- ID NO: 195) Cw*0401 HIV-1 RT 206-214 TEMEKEGKI (SEQ H2-Kk ID NO: 196) HIV-1 pl7 18-26 KIRLRPGGK (SEQ HLA- ID NO: 197) A*0301 HIV-1 P17 20-29 RLRPGGKKKY (SEQ HLA- ID NO: 198) A*0301 HIV-1 RT 325-333 AIFQSSMTK (SEQ HLA- ID NO: 199) A*0301 HIV-1 pl7 84-92 TLYCVHQRI (SEQ HLA-All ID NO:200) HIV-1 RT 508-517 IYQEPFKNLK (SEQ HLA-All ID NO:201) HIV-1 pl7 28-36 KYKLKHIVW (SEQ HLA-A24 ID NO:202) HIV-1 gagpl20 53-62 LFCASDAKAY (SEQ HLA-A24 ID NO:203) HIV-1 gagp24 145-155 QAISPRTLNAW HLA-A25 (SEQ ID NO: 204) HIV-1 gagp24 167-175 EVIPMFSAL (SEQ HLA-A26 ID NO:205) HIV-1 RT 593-603 ETFYVDGAANR HLA-A26 (SEQ ID NO:206) HIV-1 gp41 775-785 RLRDLLLIVTR HLA-A31 (SEQ ID NO:207) HIV-1 RT 559-568 PIQKETWETW (SEQ HLA-A32 ID NO:208) HIV-1 gpl20 419-427 RIKQIINMW (SEQ HLA-A32 ID NO: 209) HIV-1 RT 71-79 ITLWQRPLV (SEQ HLA- ID NO:210) A*6802 HIV-1 RT 85-93 DTVLEEMNL (SEQ HLA- ID NO:211) A*6802 HIV-1 RT 71-79 ITLWQRPLV (SEQ HLA- ID NO :212) A*7401 HIV-1 gagp24 148-156 SPRTLNAWV (SEQ HLA-B7 ID NO:213) HIV-1 gagp24 179-187 ATPQDLNTM (SEQ HLA-B7 ID NO:214) HIV-1 gpl20 303-312 RPNNNTRKSI (SEQ HLA-B7 ID NO:215) HIV-1 gp41 843-851 IPRRIRQGL (SEQ HLA-B7 ID NO:216) HIV-1 pl7 74-82 ELRSLYNTV (SEQ HLA-B8 ID NO: 217) HIV-1 Nef 13-20 WPTVRERM (SEQ HLA-B8 ID NO :218) HIV-1 Nef 90-97 FLKEKGGL (SEQ HLA-B8 ID NO: 219) HIV-1 gag?24 183-191 DLNTMLNTV (SEQ HLA-B14 ID NO:220) HIV-1 P17 18-27 KIRLRPGGKK (SEQ HLA-B27 ID NO:221) HIV-1 pl7 19-27 IRLRPGGKK (SEQ HLA-B27 ID NO:222) HIV-1 gp41 791-799 GRRGWEALKY (SEQ HLA-B27 ID NO:223) HIV-1 Nef 73-82 QVPLRPMTYK (SEQ HLA-B27 ID NO:224) HIV-1 GP41 590-597 RYLKDQQL (SEQ HLA-B27 ID NO:225) HIV-1 Nef 105-114 RRQDILDLWI (SEQ HLA- ID NO:226) B*2705 HIV-1 nef 134-141 RYPLTFGW (SEQ HLA- ID NO:227) B*2705 HIV-1 P17 36-44 WASRELERF (SEQ HLA-B35 ID NO:228) HIV-1 GAG P24 262-270 TVLDVGDÍA (SEQ HLA-B35 ID NO:229) HIV-1 Gpl20 42-52 VPVWKEATTTL HLA-B35 (SEQ ID NO:230) HIV-1 P17 36-44 NSSKVSQNY (SEQ HLA-B35 ID NO:231) HIV-1 gagp24 254-262 PPIPVGDIY (SEQ HLA-B35 ID NO:232) HIV-1 RT 342-350 HPDGVGYQY (SEQ HLA-B35 ID NO:233) HIV-1 gp41 611-619 TAVPWNASW (SEQ HLA-B35 ID NO:234) HIV-1 gag 245-253 NPVPVGN1Y (SEQ HLA-B35 ID NO:235) HIV-1 nef 120-128 YFPDWQNYT (SEQ HLA-B37 ID NO:236) HIV-1 gagp24 193-201 GHQAAMQML (SEQ HLA-B42 ID NO:237) HIV-1 pl7 20-29 RLRPGGKKKY (SEQ HLA-B42 ID NO: 238) HIV-1 RT 438-446 YPGpCVRQL (SEQ HLA-B42 ID NO:239) HIV-1 RT 591-600 GAETFYVDGA (SEQ HLA-B45 ID NO:240) HIV-1 gagp24 325-333 NANPDCKTI (SEQ HLA-B51 ID NO:241) HIV-1 gagp24 275-282 RMYSPTSI (SEQ HLA-B52 ID NO: 242) HIV-1 gpl20 42-51 VPVWKEATTT (SEQ HLA- ID NO:243) B*5501 HIV-1 gagp24 147-155 ISPRTLNAW (SEQ HLA-B57 ID NO:244) HIV-1 gagp24 240-249 TSTLQEQIGW (SEQ HLA-B57 ID NO:245) HIV-1 gagp24 162-172 KAFSPEVIPMF HLA-B57 (SEQ ID NO:246) HIV-1 gagp24 311-319 QASQEVKNW (SEQ HLA-B57 ID NO:247) HIV-1 gagp24 311-319 QASQDVKNW (SEQ HLA-B57 ID NO:248) HIV-1 nef 116-125 HTQGYFPDWQ (SEQ HLA-B57 ID NO:249) HIV-1 nef 120-128 YFPDWQNYT (SEQ HLA-B57 ID NO:250) HIV-1 gagp24 240-249 TSTLQEQIGW (SEQ HLA-B58 ID NO:251) HIV-1 P17 20-29 RLRPGGKKKY (SEQ HLA-B62 ID NO:252) HIV-1 p24 268-277 LGLNKJVRMY (SEQ HLA-B62 ID NO:253) HIV-1 RT 415-426 LVGKLNWASQI HLA-B62 (SEQ ID NO:254) HIV-1 RT 476-485 ILKEPVHGVY (SEQ HLA-B62 ID NO:255) HIV-1 nef 117-127 TQGYFPDWQNY HLA-B62 (SEQ ID NO:256) HIV-1 nef 84-91 AVDLSHFL (SEQ HLA-B62 ID NO:257) HIV-1 gagp24 168-175 VIPMFSAL (SEQ HLA- ID NO:258) Cw*0102 HIV-1 gpl20 376-384 FNCGGEFFY (SEQ HLA-A29 ID NO:259) HIV-1 gpl20 375-383 SFNCGGEFF (SEQ HLA-B15 ID NO:260) HIV-1 nef 136-145 PLTFGWCYKL (SEQ HLA- ID NO:261) A*0201 HIV-1 nef 180-189 VLEWRFDSRL (SEQ HLA- ID NO:262) A*0201 HIV-1 nef 68-77 FPVTPQVPLR (SEQ HLA-B7 ID NO:263) HIV-1 nef 128-137 TPGPGVRYPL (SEQ HLA-B7 ID NO:264) HIV-1 gagp24 308-316 QASQEVKNW (SEQ HLA- ID NO:265) Cw*0401 HIV-1 RT 273-282 VPLDEDFRKY (SEQ HLA-B35 IIIB ID NO:266) HIV-1 RT 25-33 NPDIVIYQY (SEQ HLA-B35 IIIB ID NO:267) HIV-1 gp41 557-565 RAIEAQAHL (SEQ HLA-B51 IIIB ID NO:268) HIV-1 RT 231-238 TAFTIPSI (SEQ HLA-B51 IIIB ID NO:269) HIV-1 p24 215-223 VHPVHAGPIA (SEQ HLA- IIIB ID NO:270) B*5501 HIV-1 gpl20 156-165 NCSFNISTSI (SEQ HLA-Cw8 IIIB ID NO:271) HIV-1 gpl20 241-249 CTNVSTVQC (SEQ HLA-Cw8 IIIB ID NO:272) HIV-1 gpl20 312-320 IGPGRAFHT (SEQ H2-Dd 5F2 ID NO:273) HIV-1 pol 25-33 NPDrvrYQY (SEQ HLA- 5F2 ID NO:274) B*3501 HIV- pol 432-441 EPIVGAETFY (SEQ HLA- 15F2 ID NO:275) B*3501 HIV-1 pol 432-440 EPrVGAETF (SEQ HLA- 5F2 ID NO:276) B*3501 HIV-1 pol 6-14 SPAIFQSSM (SEQ HLA- 5F2 ID NO:277) B*3501 HIV-1 pol 59-68 VPLDKDFRKY (SEQ HLA- 5F2 ID NO:278) B*3501 HIV-1 pol 6-14 PLTEEAEL (SEQ HLA- 5F2 ID NO:279) B*3501 HIV-1 nef 69-79 RPQVPLRPMTY HLA- 5F2 (SEQ ID NO:280) B*3501 HIV-1 nef 66-74 FPVRPQVPL (SEQ HLA- 5F2 ID NO:281) B*3501 HIV-1 env 10-18 DPNPQEWL (SEQ HLA- 5F2 ID NO:282) B*3501 HIV-1 env 7-15 RPrVSTQLL (SEQ HLA- 5F2 ID NO:283) B*3501 HIV-1 pol 6-14 IPLTEEAEL (SEQ HLA-B51 5F2 ID NO:284) HIV-1 env 10-18 DPNPQEWL (SEQ HLA-B51 5F2 ID NO:285) HIV-1 gagp24 199-207 AMQMLKETI (SEQ H2-Kd 5F2 ID NO:286) HIV-2 gagp24 182-190 TPYDrNQML (SEQ HLA- ID NO:287) B*5301 HIV-2 gag 260-269 RRWIQLGLQKV HLA- (SEQ ID NO:288) B*2703 HIV-1 gp41 593-607 GIWGCSGKLICT HLA-B17 5F2 TAV (SEQ ID NO:289) HIV-1 gp41 753-767 ALIWEDLRSLCL HLA-B22 5F2 FSY (SEQ ID NO: 290) HPV 6b E7 21-30 GLHCYEQLV (SEQ HLA- ID NO:291) A*0201 HPV 6b E7 47-55 PLKQHFQIV (SEQ HLA- ID NO:292) A*0201 HPV11 E7 4-12 RLVTLKDIV (SEQ HLA- ID NO:293) A*0201 HPV16 E7 86-94 TLGIVCPIC (SEQ HLA- ID NO:294) A*0201 HPV16 E7 85-93 GTLGIVCPI (SEQ HLA- ID NO:295) A*0201 HPV 16 E7 12-20 MLDLQPETT (SEQ HLA- ID NO:296) A*0201 HPV16 E7 11-20 YMLDLQPETT (SEQ HLA- ID NO:297) A*0201 HPV16 E6 15-22 RPRKLPQL (SEQ HLA-B7 ID NO:298) HPV16 E6 49-57 RAHYNPVTF (SEQ HW-Db ID NO:299) HSV gp B 498-505 SSIEFARL (SEQ H2-Kb ID NO:300) HSV- 1 gp c 480-488 GIGIGVLAA (SEQ HLA- ID NO:301) A*0201 HSV-I ICP27 448-456 DYATLGVGV (SEQ H2-Kd ID NO:302) HSV-I ICP27 322-332 LYRTFAGNPRA H2-Kd (SEQ ID NO: 303) HSV-I UL39 822-829 QTFDFGRL (SEQ H2-Kb ID NO: 304) HSV-2 gpc 446-454 GAGIGVAVL (SEQ HLA- ID NO:305) A*0201 HLTV- I TAX 11 - 19 LLFGYPVYV ( SEQ HLA- ID NO : 306 ) A* 0201 Influenz MP 58-66 GILGFVFTL (SEQ HLA- a ID NO:307) A*0201 Influenz MP 59-68 ILGFVFTLTV (SEQ HLA- a ID NO:308) A*0201 Influenz NP 265-273 ILRGSVAHK (SEQ HLA-A3 a ID NO:309) Influenz NP 91-99 KTGGPIYKR (SEQ HLA- a ID NO:310) A*6801 Influenz NP 380-388 ELRSRYWAI (SEQ HLA-B8 a ID NO:311) Influenz NP 381-388 LRSRYWAI (SEQ HLA- a ID NO:312) B*2702 Influenz NP 339-347 EDLRVLSFI (SEQ HLA- a ID NO:313) B*3701 Influenz NSI 158-166 GEISPLPSL (SEQ HLA-B44 a ID NO: 314) Influenz NP 338-346 FEDLRVLSF (SEQ HLA-B44 a ID NO: 315) Influenz NSI 158-166 GEISPLPSL (SEQ HLA- a ID NO:316) B*4402 Influenz NP 338-346 FEDLRVLSF (SEQ HLA-a ID NO:317) B*4402 Influenz PBI 591-599 VSDGGPKLY (SEQ HLA-A1 a ID NO:318) Influenz NP 44-52 CTELKLSDY (SEQ HLA-Al a A ID NO:319) Influenz NSI 122-130 AIMDKNIIL (SEQ HLA- a ID NO:320) A*0201 Influenz NSI 123-132 IMDKNIILKA (SEQ HLA- a A ID NO:321) A*0201 Influenz NP 383-391 SRYWAIRTR (SEQ HLA- a A ID NO:322) B*2705 Influenz NP 147-155 TYQRTRALV (SEQ H2-Kd a A ID NO:323) Influenz HA 210-219 TYVSVSTSTL (SEQ H2-Kd a A ID NO:324) Influenz HA 518-526 IYSTVASSL (SEQ H2-Kd a A ID NO:325) Influenz HA 259-266 FEANGNLI (SEQ H2-Kk a A ID NO:326) Influenz HA 10-18 IEGGWTGM1 (SEQ H2-Kk a A ID NO:327) Influenz NP 50-57 SDYEGRLI (SEQ H2-Kk a A ID NO:328) Influenz NSI 152-160 EEGAIVGEI (SEQ H2-Kk a a ID NO:329) Influenz NP 336-374 ASNENMETM (SEQ H2Db a A34 ID NO:330) Influenz NP 366-374 ASNENMDAM (SEQ H2Db a A68 ID NO:331) Influenz NP 85-94 KLGEFYNQMM (SEQ HLA- a B ID NO:332) A*0201 Influenz NP 85-94 KAGEFYNQMM (SEQ HLA- a B ID NO:333) A*0201 Influenz HA 204-212 LYQNVGTYV (SEQ H2Kd a JAP ID NO: 334) Influenz HA 210-219 TYVSVGTSTL (SEQ H2-Kd a JAP ID NO: 335) Influenz HA 523-531 VYQILATYA (SEQ H2-Kd a JAP ID NO: 336) Influenz HA 529-537 IYATVAGSL (SEQ H2-Kd a JAP ID NO: 337) Influenz HA 210-219 TYVSVGTSTI (L>I ) H2-Kd a JAP (SEQ ID NO: 338) Influenz HA 255-262 FESTGNLI (SEQ H2-Kk a JAP ID NO: 339) JHMV cAg 318-326 APTAGAFFF (SEQ H2-Ld ID NO:340) LCMV NP 118-126 RPQASGVYM (SEQ H2-Ld ID NO: 341) LCMV NP 396-404 FQPQNGQFI (SEQ H2-Db ID NO: 342) LCMV GP 276-286 SGVENPGGYCL H2-Db (SEQ ID NO:343) LCMV GP 33-42 KAVYNFATCG (SEQ H2-Db ID NO:344) MCMV pp89 168-176 YPHFMPTNL (SEQ H2-Ld ID NO:345) MHV Proteína 510-518 CLSWNGPHL (SEQ H2-Db de ID NO:346) adición MV Proteína 437-447 SRRYPDAVYLH HLA- F (SEQ ID NO:347) B*2705 Mv Proteína 438-446 RRYPDAVYL (SEQ HLA- F ID NO:348) B*2705 Mv NP 281-289 YPALGLHEF (SEQ H2-Ld ID NO:349) Tabla 6 Motivos HLA de Clase I *Números de referencia son para las referencias citadas en Han-Georg Rammensec, Jutta Bachmann, y Stefan Stevanovic con titulo "MHC Ligands y Peptide Motifs, " Springer-Vcrlag, Germany, 1997 Landes Bioscience, Austin, Texas), que se incorporado aquí por referencia en su totalidad para cualquier propósito, incluyendo por ejemplo, técnica de predicción de epítope, antígeno, tipo de microbio o célula. Tabla 7 Cita de Diversos Virus, Antígenos Virales, y Epítopes Tabla 7 (continúa) HIV Virus de Citomegalovirus papiloma Humano (CMV) (HPV Human papiloma virus) Antígenos : CMV gB y gH Proteínas, Env, Gag, Nef y Pol Tat incluyen-do proteínas de envoltura gp 120, gp 160, gp41, p24gag, p55gag derivadas de HIV tales como, incluyendo miembros de los diversos Subtipos Genéticos de aislados HIV HIV.sub.IIIb, Los siguientes ejemplos son para propósitos ilustrativos solamente y no se pretende que limiten el alcance de las diversas modalidades en forma alguna. Ejemplo 1. Composiciones Inmunogénicas (por ejemplo, Vacunas Virales) . Seis grupos (n=6) de ratones transgénicos HLA-A2 se inyectan con 25 /g de vector plásmido bilateralmente en los nodos linfáticos inguinales, de acuerdo con el siguiente programa: día 0, 3, 14 y 17. El vector codifica tres epítopes restringidos A2 de HIV gag (SLYNTVATL (SEQ ID N0:1), VLAEAMSQV (SEQ ID NO : 2 ) , MTNNPPIPV (SEQ ID N0:3)), dos de pol (KLVGKLNWA (SEQ ID NO:4), ILKEPVHGV (SEQ ID NO:5)) y uno de env (KLTPLCVTL (SEQ ID NO: 6)). Dos semanas después del último ciclo de modulación, se inyectan ratones con mezclas que abarcan todos estos cinco péptidos (5 g/péptido/nodo bilateralmente separados tres días) . En paralelo, cinco grupos de ratones se inyectan con péptidos individuales (5 //g/péptido/nodo bilateralmente tres días separado).

Siete días después los ratones se sangran y la respuesta se estima por tinción con tetrámero contra cada péptido. Posteriormente, la mitad de los ratones se prueban con virus Vaccinia recombinantes que expresan env, gag o pol (103 TdD50/ratón) y a 7 días, el titulo viral se mide en los ovarios al utilizar un ensayo de placa convencional. La otra mitad se sacrifica, los esplenocitos se estimulan con péptidos por 5 días y se mide la actividad citotóxica contra células objetivo revestidas con péptidos. Como controles, se inyectan ratones con plásmidos o péptidos solo. Los ratones modulados con plásmido y amplificados con péptidos muestran más fuerte inmunidad contra todos los cinco péptidos, por tinción con tetramero y citotoxicidad. De esta manera, la inmunidad citotóxica puede generarse en diversos casos, por la metodología descrita, sin incluir epítopes que ligan a MHC clase II y de esta manera tienen la posibilidad de interactuar, activar y/o producir expansión de células Th. Resulta entonces que la inmunidad citotóxica puede generase en ausencia de células Th funcionales (condiciones en las cuales células Th se afectan por un proceso patológico - tal como que resultan de infección HIV; o condiciones que afectan la función de célula T indirectamente, debido a anormalidades de células que presentan antígeno provocadas por virus tales como HBV, HCV y EBV) . Además, uso de péptidos correspondientes a epítopes restringidos de clase I MHC en contexto de la metodología anteriormente mencionada, supera la necesidad por procesamiento de antígeno y de esta manera pueden tratar con las situaciones mencionadas anteriormente, en donde la función de APC se diminuye. Además, la derivación del empleo de células Th que para inducir una respuesta terapéutica que comprende CTL, puede superar la inmunopatológia potencial mediada por respuesta Th CD4+ expandida en infecciones virales tales como aquellas provocadas por HSV. Más en general, a fin de romper la tolerancia, restaurar inmuno respuesta o inducir inmunidad contra no-auto antígenos tales como viral, bacterial, parasitaria o microbiana, los sujetos, tales como ratones, humanos u otros mamíferos, se inmunizan con: vectores tales como plásmidos; virus; péptido más adyuvante (CpG, ARNds , mímicos de TLR) ; proteína recombinante más un adyuvante (CpG, AR?ds, mímicos de TLR); microbios exterminados o antígenos purificados, tales como componentes de pared celular; y se refuerzan por inyección intranodal con péptido (correspondiente a un epítope objetivo para el cual se inmunizaron) sin adyuvante. La inmuno respuesta medida antes y después de refuerzo por tinción con tetrámero y otros métodos muestra un aumento substancial en la magnitud de la inmuno respuesta. Esta estrategia puede utilizarse para proteger contra infección o tratar infecciones crónicas causadas por agentes tales como HBV, HCV, HPV, CMV, virus influenza, HIV, HTLV, RSV, etc. Habrá de notarse que la metodología anterior y las otras metodologías descritas en otra parte aquí pueden utilizarse para tratar animales no humanos, en donde es ventajoso evitar o minimizar células CD4+. Por ejemplo los métodos pueden emplearse para tratar infecciones por virus en felinos y caninos, aves tales como por ejemplo, pollos y pavos, bovinos, equinos, otros animales de ganado y granja y cualquier otro animal. Ver Tabla 7, anterior. Ejemplo 2. Inducción de inmuno respuesta a epítopes restringidos clase I MHC por administración intranodal de péptidos correspondientes a estos epítopes definidos y adyuvante (ARNds sintético) Un ratón transgénico *0201 (n=4/grupo) se inmunizaron con los siguientes epítopes de péptido restringido clase I MHC conocidos: HBVc 18-27 (FLPSDFFPSD; SEQ ID NO:7), PSMA 730-739 (RQIYVAAFTV; SEQ ID NO:8), PRAME 300-309 (SLLQHLIGL; SEQ ID N0:9) o PRAME 425-433 (ALYVDSLFFL; SEQ ID NO: 10) en mezcla con ARNds sintético (poli(IC), por inoculación directa en los nodos linfáticos inguinales utilizando 12.5 µ g de péptido + 12.5 µ g de adyuvante, en 25 / l de PBS / cada nodo linfático inguinal en el día 0, 3, 14 y 17) . Una semana después de la administración final, los esplenocitos se estimulan ex vivo con 10 /g/ml del mismo péptido en presencia de 5 U/ml de rIL-2 y prueban en un ensayo citotóxico estándar, contra: células objetivo etiquetadas 51Cr (células T2) sin revestir, revestidas con péptido conato o péptido control negativo, en diversas proporciones de efector: objetivo (Figuras 1-2) ,- o células MCF-7 etiquetadas similarmente revestidas con PR7?ME 730-739, PRAME 425-433 o sin revestir. La radioactividad liberada en el sobrenadante durante 4 horas se midió utilizando un contador ? (gamma) . La respuesta se cuantifico como % de lisis = (señal muestra — fondo) / (señal máxima - fondo) x 100, en donde fondo representa la radioactividad liberada por células objetivo o diana solo cuando se incuban en medio de ensayo, y la señal máxima es la radioactividad liberada por células objetivo usadas con detergente. Ejemplo 3. Activación Específica en el subconjunto de linfocitos CD8+ Esplenocitos aislados de ratones transgénicos HHD-I reforzados con péptido Melan-A 26-35 (A27L; SEQ ID NO: 11) cebado con plásmido pSEM, se estimularon con un reactivo tetrámero específico de Melan-A por 4 horas. Una descripción completa de pSEM puede encontrarse en la publicación de patente de los E.U.A. número 2003-0228634, publicada en diciembre 11, 2003, y en la publicación de patente de los E.U.A. número 2005-0079152, publicada en abril 14, 2005 cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia en su totalidad. Las células después se lavan y tiñen con un anticuerpo CD8+ anti-ratón rata por 30 minutos. Las células se lavaron, permeabilizaron y después se tiñeron intracelularmente con anticuerpo anti-ratón-IFN-^ por 30 minutos. Las células se lavaron, fijaron y analizaron en un citómetro de flujo FACS Calibur. Una compuerta (Rl) se dirige alrededor de la población linfositica total (figura 4A) y el por ciento CTLs específicos de antígeno Melan-A se determina por cotinción con CD8+ (figura 4B) . Se ve en la figura 4C que solo células CD8+ positivas dentro de la población total de linfocitos se activaron siguiendo estimulo de antígeno con 15.7% de estas células capaz de producir IFN-g comparado con 0.2% de la fracción negativa CD8. Esto demuestra que siguiendo la inmunización Melan-A, solo se activaron células T citotóxicas ante estimulo de antígeno adicional, reflejando el efecto predominante de este protocolo de inmunización en la población CD8+ en vez de la población CD4+. Los resultados mostrados en las Figuras 1-4, demuestran inducción exitosa de inmunidad citotóxica específica de péptido contra células objetivo que expresan MHC clase I (que se conoce es mediado por CTL -o linfocitos citotóxicos que son Célula T CD8+ restringidas MHC clase I) , por administración intranodal de péptidos correspondientes a epítopes clase I MHC conocidos, junto con poli IC. La literatura científica es rica con descripciones tanto de anticuerpo como de epítopes CTL (restringidos MHC clase I) de proteínas objetivo virales, incluyendo HIV, HSV, HBV, HCV, y EBV, que pueden utilizarse en las diversas modalidades aquí descritas. Selecciones ventajosas de proteínas diana particulares serán aparentes para una persona con destreza en la técnica que pertenecen a los virus individuales (u otros patógenos) . En algunos casos CTL o epítopes de anticuerpo, o su uso, se describen en la literatura junto con epítopes restringidos MHC clase II. Sin duda, la inclusión de epítopes restringidos MHC clase II en algunos casos en la literatura se reporta como preferida o esencial. Sin embargo, cuando dichos epítopes CTL o anticuerpos se utilizan en algunas modalidades preferidas, de preferencia pueden utilizarse sin inclusión de estos epítopes restringidos MHC clase II. Ejemplos de epítopes CTL para HIV se describen en la patente de los E.U.A. número 6,656,471; y en Wilson, CC, et al . , J. Immunol . 171:5611-5623, 2003. Muchos otros epítopes se conocen por aquellos con destreza en la especialidad. El término "que esencialmente consiste de" como se emplea aquí significa que el alcance que lo que se incluye, se limita a los materiales o etapas especificadas y aquellos que no afectan materialmente la o las características básicas y novedosas de la modalidad. En algunas modalidades, los números que expresan cantidades de ingredientes, propiedades tales como peso molecular, condiciones de reacción y así en adelante utilizados para describir y reclamar ciertas modalidades de la invención habrá de entenderse modificados en algunos casos por el término "aproximadamente" . De acuerdo con esto, en algunas modalidades, los parámetros numéricos establecidos en la descripción escrita y reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se buscan obtener por una modalidad particular. En algunas modalidades, los parámetros numéricos deberán considerarse a la luz del número de dígitos significantes reportados y al aplicar técnicas de redondeo ordinarias. No obstante que los rangos y parámetros numéricos establecen el amplio alcance de algunas modalidades de la invención son aproximaciones, los valores numéricos establecidos en los ejemplos específicos se reportan lo más preciso como sea práctico. Los valores numéricos presentados en algunas modalidades de la invención pueden contener ciertos errores que necesariamente resultan de la desviación estándar que se encuentra en sus medidas de prueba respectivas . En algunas modalidades, los números que expresan cantidades de ingredientes, propiedades tales como peso molecular, condiciones de reacción, y así en adelante utilizados para describir y reclamar ciertas modalidades de la invención habrá de entenderse modificados en algunos casos por el término "aproximadamente" . De acuerdo con esto, en algunas modalidades, los parámetros numéricos establecidos en la descripción escrita y reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se buscan obtener por una modalidad particular. En algunas modalidades, los parámetros numéricos deberán considerarse a la luz del número de dígitos significantes reportados y al aplicar técnicas de redondeo ordinarias. No obstante que los rangos y parámetros numéricos establecen el amplio alcance de algunas modalidades de la invención son aproximaciones, los valores numéricos establecidos en los ejemplos específicos se reportan lo más preciso como sea práctico. Los valores numéricos presentados en algunas modalidades de la invención pueden contener ciertos errores que necesariamente resultan de las desviaciones estándar que se encuentran en sus medidas de prueba respectivas . En algunas modalidades, los términos "un" y "una" y "el/la" y referencias similares empleadas en el contexto de describir una modalidad particular de la invención (especialmente en el contexto de ciertas de las siguiente reivindicaciones) pueden considerarse que cubren tanto singular como plural . La recitación de rangos de valores aquí simplemente se pretende para servir como un método breve para referirse individualmente a cada valor separado que cae dentro del rango. A menos que se indique de otra forma aquí, cada valor individual se incorpora en la especificación como si se describiera individualmente aquí. Todos los métodos aquí descritos pueden realizarse en cualquier orden conveniente a menos que se indique de otra forma o se contra indique claramente por el contexto. El uso de cualquier y todos los ejemplos, o lenguaje ejemplar (por ejemplo "tal como") que se proporcionan respecto a ciertas modalidades aquí, se pretende solamente para mejor iluminar la invención y no presenta una limitación en el alcance de la invención de otra forma reivindicada. No habrá de considerarse lenguaje en la especificación que indique ningún elemento reivindicado esencial para la práctica de la invención. Agrupamientos de elementos o modalidades alternos de la invención aquí descritos no habrán de considerarse como limitaciones. Cada miembro de grupo puede ser referido y reivindicado individualmente o en cualquier combinación con otros miembros del grupo u otros elementos aquí encontrados. Se anticipa que uno o más miembros de un grupo pueden incluirse en, o eliminarse de, un grupo por razones de conveniencia y/o patentabilidad. Cuando ocurre esta inclusión o eliminación, la especificación aquí se considera que contiene al grupo como se modifica de esta manera cumpliendo con la descripción escrita de todos los grupos Markush empleados en las reivindicaciones anexas. Modalidades preferidas de esta invención se describen aquí, incluyendo el mejor modo conocido para los inventores para llevar a cabo la invención. Variaciones en esas modalidades preferidas serán aparentes para aquellos con destreza ordinaria en la especialidad ante lectura de la descripción anterior. Se contempla que las personas con destreza pueden emplear estas variaciones según sea apropiado y que la invención puede practicarse de otra forma a como se describe específicamente aquí. De acuerdo . con esto, muchas modalidades de esta invención incluyen todas las modificaciones y equivalentes de la materia descrita en las reivindicaciones aquí agregadas como se permite por la ley aplicable. Aún más, cualquier combinación de los elementos anteriormente descritos en todas sus variaciones posibles es abarcada por la invención a menos que se indique de otra forma aquí o de otra forma sea contra-indicado claramente por el contexto. Además, se han hecho numerosas referencias a patentes y publicaciones impresas a través de esta especificación. Cada una de las referencias y publicaciones impresas anteriormente citadas aquí se incorporan individualmente por referencia en su totalidad para cualquiera de los materiales, sustancias, composiciones de materia, metodologías y dispositivos aquí descritos. En conclusión, habrá de entenderse que las modalidades de la invención aquí descritas son i ilustrativas de los principios de la presente invención.

Otras modificaciones que pueden emplearse pueden estar dentro del alcance de la invención. De esta manera, a manera de ejemplo, pero no de limitación, pueden emplearse configuraciones alternas de la presente invención de acuerdo con las presentes enseñanzas. De acuerdo con esto, la presente invención no se limita a lo ilustrado y descrito precisamente

Claims (45)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método de inmunización, el método se caracteriza porque comprende las etapas de: suministrar a un sistema linfático de un mamífero, una composición que comprende un inmunógeno, el inmunógeno comprende un epítope restringido MHC clase I o un epítope de célula B, en donde el inmunógeno no comprende un epítope restringido MHC clase II efectivo; y administrar un inmunopotenciador al mamífero, de manera tal que se induce una inmuno respuesta específica de epítope sin activación sustancial o expansión de células T CD4+.
2. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el epítope es un epítope de HIV.
3. 3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inmunógeno y el inmunopotenciador se co-administran al sistema linfático.
4. 4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición comprende un primer inmunógeno que comprende un epítope restringido MHC clase I y un segundo inmunógeno que comprende un epítope de célula B.
5. 5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el primer inmunógeno y el segundo inmunógeno son el mismo.
6. 6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende coadministrar un primer inmunógeno que comprende codificar el epítope restringido MHC clase I con el inmunopotenciador, y suministrar subsecuentemente un segundo inmunógeno que comprende el epítope, en la forma de un péptido epitópico, al sistema linfático del mamífero .
7. 7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el intervalo entre la etapa de administración y la etapa de suministro es de al menos aproximadamente siete días.
8. 8. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el primer inmunógeno comprende un ácido nucleico que codifica el epítope .
9. 9. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el inmunopotenciador comprende una molécula de ADN que comprende una secuencia de CpG.
10. 10. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el ácido nucleico comprende una molécula de ADN que comprende una secuencia de CpG que constituye el inmunopotenciador.
11. 11. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el inmunoptenciador comprende ARNds.
12. 12. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el primer inmunógeno comprende un polipéptido.
13. 13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el suministro al sistema linfático comprende suministro a un nodo linfático o vaso linfático.
14. 14. Un método de inmunización, caracterizado porque comprende: una etapa para potenciar una inmuno respuesta, una etapa para exponer el sistema linfático a un epítope restringido MHC clase I o un epítope de célula B, en donde una inmuno-respueta específica de epítope se induce sin activación sustancial o expansión de células T CD4J
15. 15. Un método de inmunización, caracterizado porque comprende: suministrar a un mamífero, una primera composición que comprende un primer inmunógeno, el primer inmunógeno comprende o codifica al menos una porción de un primer antígeno; y subsecuentemente administrar una segunda composición que comprende un péptido epitópico directamente al sistema linfático del mamífero, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I del primer antígeno, en donde la segunda composición no es la misma que la primera composición, de manera tal que una inmuno-respuesta específica de epítope se amplifica sin activación o expansión sustancial de las células T CD4+.
16. 16. Un método para generar una immuno respuesta contra un antígeno relacionado a enfermedad, en donde es ventajoso minimizar la expansión de linfocitos CD4+, caracterizado porque comprende: suministrar a un animal, un primer inmunógeno y un inmunoprecipitador, el primer inmunógeno comprende o codifica al menos una primera porción de un primer antígeno; en donde al menos una porción de un primer antígeno no comprende un epítope MHC restringido clase II para un MHC expresado por el animal; y administrar subsecuente a la etapa de suministro un péptido epitópico directamente a un sistema linfático del animal, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I del primer antígeno, en donde el péptido epitópico no es el mismo que el primer inmunógeno.
17. 17. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la enfermedad es provocada por HIV.
18. 18. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la enfermedad es provocada por un virus seleccionada del grupo que consiste de HSV, HBV, HCV, EBV, HPV, CMV, virus de influenza, HTLV, RSV, EBV, virus de sarampión y virus Ebola.
19. 19. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el animal es un humano .
20. 20. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el animal es un animal no humano .
21. 21. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el animal no humano es un mamífero.
22. 22. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran a un sistema linfático del animal.
23. 23. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran a un nodo linfático.
24. 24. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el péptido epitópico se suministra a un nodo linfático.
25. 25. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran a un mismo sitio en o dentro del animal.
26. 26. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran simultáneamente .
27. 27. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran el mismo día.
28. 28. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno y el inmunopotenciador se suministran como parte de una misma composición.
29. 29. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque al menos una porción de un primer antígeno comprende un antígeno entero.
30. 30. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque al menos una porción de un primer antígeno comprende menos de la longitud íntegra del antígeno entero.
31. 31. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque al menos una porción de un primer antígeno comprende un fragmento contiguo de menos de 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20% o 10% de todo el antígeno.
32. 32. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno codifica al menos una porción de un primer antígeno y comprende una secuencia inmuno-estimulatoria que sirve como el inmunopotenciador.
33. 33. El método de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque el primer inmunógeno codifica uno o más epítopes, en donde el uno o más epítopes son epítopes de célula T restringidos clase I o epítopes de célula B.
34. 34. El método de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado porque la etapa de administración se realiza aproximadamente 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30 días o más después de la etapa de suministro.
35. 35. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque al menos una primera porción de un primer antígeno no comprende o codifica cualquier epítope restringido clase II MHC para la especie del animal o no comprende o codifica ningún epítope restringido clase II humano.
36. 36. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno además comprende o codifica al menos una segunda porción del primer antígeno, en donde la segunda porción como mínimo del primer antígeno no comprende un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal .
37. 37. El método de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque el primer inmunógeno codifica la primera porción como mínimo del primer antígeno y la segunda porción como mínimo del primer antígeno.
38. 38. El método de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porque el primer inmunógeno además comprende o codifica una o más porciones adicionales del primer antígeno, en donde la una o más porciones adicionales del primer antígeno no comprenden un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal .
39. 39. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el primer inmunógeno además comprende o codifica al menos una t primera porción de un segundo antígeno.
40. 40. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la etapa de suministro además comprende suministrar un segundo inmunógeno que comprende o codifica al menos una primera porción de un segundo antígeno, en donde la primera porción como mínimo de un segundo antígeno no comprende un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal .
41. 41. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque además comprende detectar u obtener una inmuno respuesta específica de epítope sin activación o expansión sustancial de células T CD4+.
42. 42. Un método para generar una inmuno respuesta contra una infección HIV, caracterizado porque comprende: suministrar a un animal una composición que comprende un ácido nucleico que codifica un primer inmunógeno y un inmunopotenciador, el ácido nucleico codifica una primera porción como mínimo de un primer antígeno HIV, en donde la porción como mínimo de un primer antígeno no comprende un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el animal; y administrar subsecuente a la etapa de suministro un péptido epitópico directamente a un sistema linfático del animal, en donde el péptido corresponde a un epítope restringido MHC clase I de la primera porción como mínimo de un primer antígeno HIV, en donde el péptido epitópico no es el mismo que el primer inmunógeno.
43. 43. El método de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque el primer antígeno HIV se elige del grupo que consiste de gag, pol, env, tat, gpl20, gpldO, gp41, nef, gag p, gp, gag p24, y rt.
44. 44. El método de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque el ácido nucleico codifica uno o más de SEQ ID NOs: 1-6.
45. 45. Un método para generar una inmuno respuesta contra una célula infectada por un HIV, caracterizado porque comprende: suministrar a un paciente una composición que comprende un ácido nucleico que codifica uno o más de SEQ ID NOs : 1-6 y un adyuvante, el ácido nucleico codifica una primera porción como mínimo de un primer antígeno HIV, en donde la porción como mínimo de un primer antígeno no comprende un epítope restringido MHC clase II para un MHC expresado por el paciente; en donde el adyuvante es un CpG, un poli IC ARNds, o un mímico de TLR; y administrar uno o más péptidos epitópicos directamente a un nodo linfático del paciente, en donde el péptido es aquel que se codificó por el ácido nucleico o es un análogo del mismo.