MX2007002815A - Esteroides substituidos pro 15( que tienen actividad. - Google Patents

Abstract

La presente invencion proporciona compuestos de esteroides 15( substituidos que tiene una actividad selectiva del receptor de estrogeno de acuerdo con la formula (l), en donde R1 es H, C1-5 alquilo, C1-12 acilo, di (C1-5 alquilo) aminocarbonilo, (C1-5 alquilo) oxicarbonilo o sulfamoilo, R2 es H, C1-3 alquilo, C2-3 alquenilo o C2-3 alquinilo y cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por un halogeno, R3 es C1-2 alquilo, etenilo o etinilo, y cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por un halogeno y R4 es H o C1-12 acilo.

Description

ESTEROIDES SUBSTITUIDOS POR 15B QUE TIENEN ACTIVIDAD ESTROGÉNICA SELECTIVA Campo de la Invención La presente invención se refiere a compuestos de esteroides substituidos por 15ß que tienen actividad estrogénica selectiva, una composición farmacéutica que comprende dicho compuesto, el compuesto para utilizarse en la terapia, y al uso de dicho compuesto para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de enfermedades relacionadas con el receptor de estrógeno o la regulación o tratamiento o prevención de otros padecimientos fisiológicos relacionados con el receptor de estrógeno. Antecedentes de la Invención Los compuestos con afinidad para los receptores de estrógeno, por muchos años encontraron un uso difundido para el tratamiento de un rango de padecimientos médicos. Debido a que la distribución del tejido de los receptores de estrógeno es amplia, la utilidad terapéutica de los ligandos del receptor de estrógeno es importante. En particular, su uso ha estado implicado en los anticonceptivos y la prevención y el tratamiento de: • quejas climatéricas: ondas de calor, sudor y cambios de humor; • pérdida de los huesos debido a: osteoporosis, osteoartritis, hipocalcemia, hipercalcemia, enfermedad de Paget, osteomalacia, osteohalistéresis, mieloma múltiple; • fracturas de los huesos; • incontinencia urinaria, atrofia urogenital, atrofia de la piel y vaginal, acné, melanoma, hirsutismo; • enfermedad del pecho benigna, cáncer de pecho, ginecomastia; y • enfermedad cardiovascular, altos niveles de colesterol, alto nivel de colesterol de alta densidad, enfermedades de la coagulación, restenosis, proliferación de células del músculo liso vascular. A pesar de la larga disponibilidad, no obstante los compuestos, particularmente los esteroides que pueden ser utilizados para proporcionar el alivio para dichos padecimientos relacionados con el receptor de estrógeno, existe la necesidad de nuevos tratamientos de fármacos seguros, efectivos y económicos. Los compuestos que tienen actividad estrogénica actualmente son utilizados en las mujeres como un medicamento para el tratamiento de enfermedades peri-y/o post-menopáusicas (climatéricas) y osteoporosis. Sin embargo, para las mujeres con un útero intacto, estos estrógenos no selectivos, por ejemplo, los estrógenos equinos conjugados, el estradiol-17ß, y el estradiol-17ß etinilo-17a, no pueden ser prescritos para terapia de largo plazo (> 3 meses) debido a que estos compuestos inducen a un alto grado de proliferación del endometrio (cambios similares a la fase folicular) que conducen a un sangrado, la hiperplasia del endometrio y/o cáncer del endometrio. La práctica clínica general es combinar estos estrógenos no selectivos con un compuesto progestagénico, un procedimiento que es bien conocido para reducir el estímulo del endometrio y el cambio del endometrio de un endometrio atrófico y/o similar a la fase luteal para una fase similar a la folicular. Desafortunadamente, la adición de un compuesto progestagénico a este tratamiento, aumenta el riesgo de cáncer de mama como fue demostrado en los estudios de la Iniciativa de la Salud de la Mujer reciente (WHI) (ver el Grupo Writing para los Investigadores de Iniciativa de Salud de la Mujer. Los riesgos y beneficios del estrógeno más la progestina en las mujeres postmenopáusicas saludables: resultados principales de la Iniciativa de Salud de la Mujer aleatorizada con un ensayo controlado. JAMA 2002; 288: páginas 321 a 333). Después del descubrimiento de dos subtipos diferentes de receptores de estrógeno, indicados como ERa y ERß, ahora existe la posibilidad de descubrir ligandos receptores de estrógeno del subtipo-selectivo. Debido a que los dos subtipos tienen una distribución diferente del tejido humano, dichos compuestos selectivos del subtipo pueden proporcionar un tratamiento efectivo o la prevención de padecimientos relacionados con el receptor de estrógeno con efectos laterales mínimos. Ahora se ha descubierto que una serie de derivados de estradiol substituidos-15ß son esteroides potentes que poseen buenos niveles de selectividad funcional para el a-subtipo "del receptor de estrógeno. La presente invención proporciona los compuestos de la Fórmula I: en donde, R1 es H, C1-5 alquilo, C1-12 acilo, d¡-(C?-5 alquilo)aminocarbonilo, (C?-5 alquilo)oxicarbonilo o sulfamoilo, R2 es H, C?-3 alquilo, C2-3 alquenilo ó C2-3 alquinilo, cada uno de los cuales puede ser substituido opcionalmente por un halógeno, R3 es C1-2 alquilo, etenilo o etinilo, cada uno de los cuales puede ser substituido opcionalmente por un halógeno, y R4 es H ó C1-12 acilo. Los esteroides en donde R1 y/o R4 son hidrógeno son de los denominados profármacos. El término C1-5 alquilo, como se usa en la presente denominación de la Fórmula I, representa un grupo alquilo ramificado o sin ramificar que tiene de 1 a 5 átomos de carbono. Los ejemplos de dichos grupos son metilo, etilo, isopropilo, butilo terciario, y pentilo. De un modo similar, el término C?-3 alquilo y C?-2 alquilo significan un grupo alquilo (ramificado o sin ramificar) que tiene de 1 a 3 y de 1 a 2 átomos de carbono, respectivamente. El término C2.3 alquenilo representa un grupo alquenilo ramificado o sin ramificar que tiene de 2 a 3 átomos de carbono y un enlace doble. Los ejemplos de dichos grupos incluyen etinilo y propen-2-ilo. El término C2-3 alquinilo representa un grupo alquinilo que tiene de 2 a 3 átomos de carbono y un enlace triple. Los ejemplos de dichos grupos incluyen etinilo y propinilo. El término C?.-?2 acilo representa un grupo acilo derivado de un ácido carboxílico que tiene de 1 a 12 átomos de carbono. El grupo acilo puede comprender un hidrocarburo el cual puede ser ramificado, sin ramificar, saturado o ¡nsaturado. Los ejemplos de dichos grupos incluyen formilo, acetilo, propanoilo, propenoilo, pivaloilo, heptanoilo, decanoilo y undecanoilo. También están incluidos dentro de la definición de C?.-|2 acilo los grupos derivados de ácidos dícarboxílico como hemi-maloilo, hemi-succinoilo y hemi-glutaroilo. Un ejemplo de un di-(C?-5 alquilo) grupo aminocarbonilo es un dimetilcarbamoilo. Un ejemplo de un (C1-5 alquilo) grupo oxicarbonilo es etoxicarbonilo. Un halógeno puede ser uno o más átomos de halógeno, tal como uno o más átomos de cloro o flúor. En una modalidad de la presente invención, R2 es C?-3 alquilo, C2-3 alquenilo ó C2-3 alquinilo, cada uno de los cuales puede ser substituido opcionalmente por un halógeno. En otra modalidad, R1 y R4 ambos son H.

En otra modalidad, R1 es H, R2 es H, C?-3 alquilo, C2-3 alquenilo ó C2-3 alquinilo, R3 es C -2 alquilo, etenilo o etinilo, y R4 es H. En otra modalidad, R1 es H, R2 es H ó C?-3 alquilo opcionalmente substituido por un halógeno, R3 es C1-2 alquilo opclonalmente substituido por un halógeno, y R4 es H. En otra modalidad, R1 es H, R2 es H ó C1-3 alquilo, R3 es C-?-2 alquilo y R4 es H. En otra modalidad, R1 es H, R2 es H ó C1-2 alquilo, R3 es metilo y R4 es H. En otra modalidad el compuesto es 7a-etíl-15ß-metil-19-nor- 17a-pregna-1,3,5(10)-trien-20-ine-3, 17ß-diol. En otra modalidad, R1 es H, C?-5 alquilo ó C1-12 acilo, R2 es H ó C?-3 alquilo, R3 es C?-2 alquilo y R4 es H ó C1-12 acilo. En otra modalidad, R1 es H, C1.5 alquilo ó CLI2 acilo, R2 es C?.3 alquilo, R3 es metilo y R4 es H ó C1-12 acilo. En otra modalidad, R1 es H, C1.5 alquilo ó C1-12 acilo, R2 es etilo, R3 es metilo y R4 es H ó C1-12 acilo. En otra modalidad, R1 es H ó C?_?2 acilo, R2 es H ó C1-3 alquilo, R3 es C1-2 alquilo y R4 es H ó C1-12 acilo. En otra modalidad, R1 es H ó C1-12 acilo, R2 es H ó C?-3 alquilo, R3 es metilo y R4 es H ó C?.?2 acilo. En otra modalidad, R1 es H ó C^-^ acilo, R2 es etilo, R3 es metilo y R4 es H ó C1-12 acilo. Los compuestos de la presente invención pueden ser sintetizados de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica de la química orgánica, en general y especialmente en la técnica de la química de esteroides. Ver, por ejemplo, los libros de Fried, J. y Edwards, J.A., "Organic Reactions on Steroid Chemistry," Volúmenes I y II, van Nostrand Reinhold Company, New York, 1972; y C. Djerassi, "Steroid Reactions", Holden-Day, Inc., San Francisco, 1963. ("Reacciones Orgánicas en la Química de Esteroides", Volúmenes I y II, van Nostrand Reinhold Company, New York, 1972 y C. Djerassi, "Steroid Reactions", Holden-Day, Inc., San Francisco, 1963.) El procedimiento sintético general utilizado para preparar los compuestos descritos en los ejemplos siguientes, se ¡lustra en el Esquema I. Las variaciones a este esquema pueden ser hechas fácilmente por un experto en la técnica. Esquema I Substrato A, el material de partida para el procedimiento sintético mostrado en el Esquema I es sintetizado en 4 pasos. Primero, las adiciones de conjugados de especies organometálicas (por ejemplo, cuprato) para extra-4,6-dien-3-onas protegidas C17 proporcionan las extra-4-en-3-onas substituidas-7a requeridas. Las cantidades menores de los isómeros 7ß formados pueden ser eliminadas fácilmente, ya sea por medio de cromatografía o cristalización en esta etapa de la síntesis u ocasionalmente en etapas posteriores. Las estrenonas 7a-substituidas son aromatizadas fácilmente utilizando por ejemplo, procedimientos de halogenación/ deshalogenación, para los 7a-estrones, los cuales al momento de la alquilación en la terminal C3 y la desprotección en la C17 proporcionan el substrato A. La cetona C a,ß-insaturada es obtenida al momento de la oxidación del silil enol éter B utilizando, por ejemplo, diacetato de paladio. La adición de Michael a C utilizando una especie organometálica, por ejemplo, cuprato dialquilo, entonces proporciona el aducto D. La estrona D metil al momento de la desprotección utilizando, por ejemplo, complejo de dimetilsulfida trifluoruro de boro entonces proporciona el fenol E, el cual se vuelve a proteger como, por ejemplo, el silil éter F. La adición de, por ejemplo, acetiluro de litio a la cetona F para proporcionar el aducto G seguido por la remoción del grupo protector silil éter utilizando, por ejemplo, fluoruro de amonio tetrabutilo puede entonces proporcionar el producto H deseado.

Los derivados (profármacos) de los grupos hidroxi libres de los compuestos G ó H son fácilmente obtenidos de estos compuestos mediante procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante la acilación utilizando un cloruro de ácido carboxílico en la presencia de base o por medio de la acilación utilizando ácido carboxílico en la presencia de un reactivo de acoplamiento, tal como diciciohexilcarbodiimida, etc., seguido por la remoción del grupo protector silil éter en el caso de los compuestos G. Los compuestos de la Fórmula I que tienen los grupos que se definen en la reivindicación 1 y en donde R1 y R4 son hidrógeno, se ha descubierto que tienen una selectividad consistentemente mejor para el a-subtipo del receptor de estrógeno combinado con una alta potencia del receptor-a de estrógeno, es decir, por una potencia igual a o más grande que el 1.0% (en relación con el 17ß-estradiol el cual tiene un EC50 de aproximadamente 4x10'11 M y, por definición, una potencia del 100%). Dicho compuesto es un agonista en el a-receptor de estrógeno y es por lo menos 10 veces menos activo en el receptor-ß de estrógeno y/o es un agonista parcial en el receptor-ß de estrógeno, con una eficacia igual a o menor del 60% de la activación máxima inducida por el 17ß-estradiol. Esto resulta en alta selectividad funcional para el a-receptor de estrógeno, es decir, la activación selectiva del a-receptor de estrógeno mientras no se activa o solamente se activa parcialmente el receptor-ß de estrógeno. Los esteroides de la Fórmula I en donde R1 y/o R4 no son hidrógeno son profármacos, los cuales no necesariamente cumplen con las definiciones anteriores. Estos profármacos son convertidos mediante procesos metabólicos dentro del cuerpo de los compuestos en donde R1 y R4 son hidrógeno, cuyos compuestos cumplen con dichas definiciones. Además, los ligandos selectivos (estrogénicos) de la presente invención sorprendentemente no inducen un alto grado de proliferación del endometrio (cambios similares a la fase folicular) y puede por lo tanto ser utilizados como un medicamento para el tratamiento (de largo plazo) y/o la prevención de padecimientos peri-y/o post-menopáusicos (climatéricos) y osteoporosis sin la adición de compuestos progestagénicos. El perfil de activación del receptor selectivo de estrógeno de los compuestos de la presente invención los hace adecuados para la aplicación en la terapia. La presente invención se relaciona además con el uso de un compuesto de acuerdo con la Fórmula I para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de padecimientos relacionados con el receptor de estrógeno o la regulación o tratamiento o prevención de otros padecimientos fisiológicos relacionados con el receptor de estrógeno. En un aspecto adicional, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de la Fórmula I para la fabricación de un medicamento para la terapia de reemplazo de hormonas o el tratamiento de hormonas. Dicho uso es particularmente adecuado en mujeres con indicaciones de padecimientos peri-y/o post menopáusicos (climatéricos) y osteoporosis. En un aspecto adicional, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de la Fórmula I para la fabricación de un medicamento para utilizarse como anticonceptivo. Para este propósito un compuesto de acuerdo con la presente invención puede ser administrado como parte de un régimen de tratamiento que comprende también la administración de una cantidad apropiada de un progestagen. Dichos regímenes son bien conocidos en el campo de los anticonceptivos. La administración de un compuesto de acuerdo con la presente invención será ayudada grandemente por la manufactura de formas de dosificación adecuadas. Por lo tanto, la presente invención también se refiere a una composición farmacéutica o forma de dosificación que comprende un compuesto de acuerdo con la presente invención mezclado con (a) excipientes farmacéuticamente aceptables, tales como los que se describen en el libro Gennaro et. al., Remmington: "La Ciencia y Práctica de la Farmacia", (20a Edición, Lippincott, Williams y Wilkins, 2000;) ver especialmente la parte 5: manufactura farmacéutica. Los excipientes adecuados se describen por ejemplo, en el manual de Excipientes Farmacéuticos, 2a Edición; Editors A. Wade y P.J.Weller, American Pharmaceutical Association, Washington, The Pharmaceutical Press, London, 1994. Las mezclas de un compuesto de acuerdo con la presente invención y (a) excipientes farmacéuticamente aceptables pueden ser comprimidas en unidades de dosificación sólidas, tales como tabletas, o ser procesadas en cápsulas o supositorios. Por medio de los líquidos adecuados farmacéuticamente los compuestos también pueden ser aplicados como una preparación de inyección en la forma de una solución, suspensión, emulsión o como un rocío, por ejemplo, un rocío nasal o bucal. Para fabricar las unidades de dosificación, por ejemplo, tabletas, el uso de aditivos convencionales tales como rellenadores, colorantes, enlazadores poliméricos/y similares, también está contemplado. En general, puede ser utilizado cualquier aditivo farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la presente invención también pueden estar incluidos en un implante, anillo vaginal, un parche, un gel o cualquier otra preparación para la liberación inmediata y/o sostenida. Los rellenadores adecuados con los cuales las composiciones farmacéuticas pueden ser preparadas y administradas incluyen lactosa, almidón, celulosa y derivados de los mismos y similares, o mezclas de los mismos utilizados en cantidades adecuadas. Las cantidades de dosificación de la presente invención se encontrarán en un orden normal para los compuestos estrogénicos, por ejemplo, en el orden de 0.01 a 100 mg, más particularmente de 0.1 a 10 mg por administración. La presente invención se ¡lustra en los siguientes ejemplos: Esquema II 9a: R1 = (CH3)3CC(0)- 9b: R1 = (CH3)2NC(0)- 9c: R1 = CH3CH2OC(0)- Eiemplo 1 Preparación de 7a-etil-15ß-metil-19-nor-17a-preqna-1,3,5(10)-trien-20-ine-3.17ß-diol (8) (ver Esquema II). Preparación de 7a-etil-3-metoxi-estra-1 ,3.5(10). 15-tetraen-17-ona Las 7a-Etil-3-metoxiestrona 1 fue preparada a partir de 17ß-17-(acetiloxi)-estra-4,6-dien-3-ona y bromuro de etilmagnesio en analogía con un método descrito en el documento Europeo EP 0869132 A1 (ver Ejemplo 1 y Esquema I, Compuestos 1 a 5). Una solución de 7a-etil-3-metoxiestrona 1 (1g) en THF (3 ml) fue agregada en forma de gotas en una solución a una temperatura de -60°C de LDA [preparada mediante la adición de una solución de 1.6 M de n-BuLi en heptano (4.7 ml) en una temperatura de -50°C para la diisopropilamina (2.1 ml) en THF (15 ml)]. La mezcla fue agitada durante ?A hora a una temperatura de -60°C y luego tratada con cloruro trimetilsililo (2 ml). La mezcla de reacción fue calentada a una temperatura de 0°C en un período de Vz hora y luego vertida en una solución acuosa de NH CI al 10% (100 ml) y fue extractada con acetato de etilo. El lavado, secado (Na2SO4) seguido por la concentración proporciona el sililenolato crudo 2 (1.1 g) el cual fue utilizado en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución de sililenoléter crudo 2, (1.1 g) en acetonitrilo (15 ml) se le agregó Pd(OAc)2 (750 mg). La mezcla fue calentada a reflujo durante 15 minutos. Luego se le agregaron agua y etil acetato, la mezcla orgánica fue filtrada a través de Celita y el producto extractado con acetato de etilo. El material orgánico aislado de esta manera fue purificado pasándolo a través de una columna corta de sílice, eluyendo con acetato de heptano/etilo, para producir el compuesto 3 (710 mg) en la forma de un aceite incoloro. Rf (1) 0.47, Rf(2) 0.80, Rf(3) 0.46, eluyente heptano/etil acetato 8/2. RMN (CDCI3), d 7.58 (1H), 7.21 (1H), 6.74 (1H), 6.66 (1H), 3.79 (3H, CH3O), 1.11 (s,3H, I8-CH3), 1.00 (t,3H, etilo).

Preparación de 7a-etil-15ß-metil-3-metoxi-estra-1 ,3,5(10)-trien-17-ona (4). A una solución de 3, (300 mg) en THF seco (5 ml) se le agregó Cu(OAc)2 (100 mg) anhidro. La mezcla fue agitada durante 2 minutos a una temperatura de -70°C, seguido por la adición en forma de gotas de cloruro de metilmagnesio (1M en THF, 5 ml). La reacción fue calentada en 1 hora a una temperatura de 0°C y extinguida mediante la adición de una solución acuosa al 10% de NH CI. El producto fue extractado con acetato de etilo y luego purificado mediante cromatografía sobre gel de sílice, utilizando como eluyente heptano/etil acetato para producir 4 en la forma de un sólido (280 mg), p.f. de 120°C a 122°C; RMN (CDCI3) d 7.22 (1H), 6.73 (1H), 6.65 (1H), 3.79 (1H), 1.20 (3H,s, 18CH3), 0.98, 0.96 (6H, 2t, 7a y 15ß etilo). Preparación de 7a-etil-15ß-metil-3-í(trimetilsilil)oxi1-estra-1 ,3.5(10)-trien-17-ona(6) A una solución de 4 (270 mg) en diclorometano (1 ml) se le agregó un complejo BF3.DMS (800 µl). La mezcla fue agitada durante 1.5 horas y luego vertida en agua de hielo y extractada con etil acetato. El residuo obtenido de esta manera fue triturado con éter/heptano (1/1) para producir 5, (250 mg) en la forma de un sólido amorfo rosa claro; Rf 0.27 (heptano/etil acetato 8/2). El material fue disuelto en DMF (3 ml), se le agregó imidazol (300 mg) seguido por cloruro t-butildimetilsililo. Después de la agitación durante 2 horas a una temperatura ambiente se terminó la sililación. La reacción fue extinguida mediante la adición de agua helada, seguida por la extracción del producto con etil acetato. La purificación cromatográfica sobre la columna corta de sílice (heptano/etil acetato 9/1) produjo 6 (220 mg) en la forma de un aceite pegajoso incoloro; Rf 0.60 (heptano/acetato de etilo 8/2). RMN (CDCI3) d 7.12(11-1), 6.62 (1H), 6.18 (1H), 1.03 (s, 3H, 18-CH3), 0.98 (s, 9H, ter . b u ti I s i I i I o ) , 0.97, 0.95 (2t, 6H, 7a y 15ß etilo), 0.20 (s, 6H, CH3-sililéter). Preparación de 7a-etil-15ß-metil-19-nor-17a-preqna-1 ,3.5(1 OHrien-20-¡ne-3.17ß-diol (8). Una solución de Li-acetiluro fue generada mediante la adición en forma de gotas de n-butillitio (1.6 M en hexano, 5 ml) a 1,2-dibromoeteno (300 µl) en THF seco (6 ml) a una temperatura de -60°C. Después de la agitación durante 20 minutos, se agregó una solución de 6 (220 mg) en THF (2 ml), el aparato de enfriamiento fue eliminado y la reacción fue agitada durante 1 hora a una temperatura de 0°C. Luego se le agregaron NH4CI al 5% (50 ml), seguido por la extracción con etil acetato. Al momento de pasar el producto crudo a través de la columna corta de sílice (diluyendo con heptano/etil acetato 8/2) compuesto 7 (180 mg) fue obtenida en la forma de una espuma blanca esencialmente en la forma pura; Rf 0.28 (heptano/etil acetato 8/2), material de partida Rf, 0.48. RMN (CDCI3) d 7.14 (1H), 6.62 (1H), 6.57 (1H, 2.60, acetileno), 0.99 (s, 12H, 18-CH3 y ter.butilsililo), 0.95 y 0.86 (2xt, 3H, etilo), 0.20 (s, 6H, dimetilsi I i lo ). Una solución de 7 (180 mg) en THF (1 ml) se le agregó TBAF (1M en THF, 0.7 ml). La mezcla fue agitada durante 15 minutos y luego vertida sobre NH CI acuoso al 10% (20 ml). El producto fue extractado con etil acetato y pasado a través de una columna corta de sílice, utilizando heptano/etil acetato 7/3 como eluyente para producir 8 (120 mg) en la forma de un material amorfo. RMN (DMSO D6) d 8.89 (si fenólico OH), 7.08 (1H), 6.5 (1H), 6.43 (1H), 6.5 (1H), 5.34 (s, 1H, 17-OH), 0.84 (s, 3H, 18-CH3), 0.80 y 0.90 (2x t, 6H, 15ß y 7a-Etil). Ejemplo 2 Preparación de 3-pivaloilox¡-7a-etil-15ß-metil-19-nor-17a-pregna-1.3.5(10)-trien-20-ina-17ß-ol (9a) El compuesto 8 (300 mg) fue disuelto en piridina (10 ml). Se le agregó en forma de gotas cloruro de pivaloilo (1.5 equivalentes). Después de 2 horas la mezcla de reacción fue extinguida con agua. La mezcla de reacción, fue concentrada, se volvió a disolver en acetato de etilo y fue extractada con bicarbonato de sodio acuoso y agua. La capa orgánica fue secada (NA2SO4) y concentrada. El residuo fue purificado mediante cromatografía sobre gel de sílice (heptano-etil acetato (1:0-> 4:1) para producir el compuesto puro 9a (347 mg). RMN (CDCI3) d 1.35 (S, 9H, pivaloilo), 1.08 (d, 3H, 15ß-Me), 0.94 (t, 3H, 7-etil). Compuesto 9b (289 MG; RMN (CDCI3) d 3.0 y 3.08 (2x s, 6H, Nme2) 1.08 (d, 3H15ß-Me), 1.02 (s, 3H, 18 Me), 0.93 (t, 3H, 7-etilo)) y 9c (283 mg; RMN (CDCI3) d 4.32 (q, 2H, OCH2CH3), 1.38 (D, 3H, OCH2CH3), 1.08 (d, 3Hß-Me), 1.02 (s, 3H, 18-Me), 0.93 (t, 3H, 7-etilo)) se prepararon de un modo similar, pero utilizando N,N-dimet¡lcarbamoil cloruro y etiloxi carbonilcloruro, respectivamente. Eiemplo 3 La actividad agonista de los compuestos en los receptores de estrógeno fue determinada en un bioensayo in vitro con células de ovario de hámster chino recombinantes (CHO) co-transfectadas de manera estable con un receptor de estrógeno humano a(hERa) ó ß (hERß), el promotor de oxitocina de rata (RO) y el gen reportador de luciferasa (LUC). La potencia de un compuesto de prueba para estimular la transactivación de la luciferasa de la enzima portada mediante los receptores de estrógeno hERa o hERß es decir, la transactivación agonista estrogénica, es expresada como un porcentaje (%) en relación con el EC50 del 17ß estradiol de estrógeno estándar (prueba de potencia del compuesto = (EC 0 17ß-estradiol/EC50 compuesto de prueba) x 100%). La eficacia, es decir la cantidad de activación máxima del receptor para el compuesto, es expresada como un porcentaje (%) en relación con la activación máxima inducida por el 17ß-estradiol del estrógeno estándar (prueba de eficacia del compuesto = a (prueba de activación máxima del compuesto/ activación máxima 17ß-estradiol) 100%). Una descripción más detallada de la metodología se puede encontrar en la publicación de De Gooyer M.E., Deckers G.H., Schoonen W.G.E.J., Verheul H.A.M. y Kloosterboer H.J., Steroids, vol. 68, 2003, páginas de la 21 a la 30. La selectividad del ERa/ERß es definida como la proporción de potencia ERa-potencia/ERß. Los compuestos de la presente invención son agonistas en el a-receptor de estrógeno, con una potencia igual o mayor del 1.0% (en relación con el 17ß-estradiol), y por lo menos 10 dobleces menos y 10 veces menos activo en el receptor ß de estrógeno (ERa/ERß es igual a, o mayor de 10) y/o son agonistas parciales en el receptor ß de estrógeno, por una eficacia igual a, o menor del 60% de la activación máxima inducida por el 17ß-estradiol. La evaluación histopatológica del tejido uterino de mono Cinomolgus fue realizada mediante una patología después de una prueba oral de 8 semanas con el compuesto de prueba en cuatro animales por grupo de tratamiento. El compuesto comparativo de X fue dosificado una vez al día en 40 µg/kg, el compuesto comparativo Y en 200µg/kg y el compuesto 8 en 40 y 200 µg/kg. Las siguientes características morfológicas fueron examinadas en la sección teñida H&E, basadas en las fases uterinas del ciclo menstrual normal en los monos Cinomolgus. A. Cambios similares a la fase folicular: pérdida de estroma del endometrio glándulas del endometrio rectas - hipertrofia del endometrio figuras mitóticas hipertrofia del miometrio angiogénesis temprana (brotes o proliferación temprana) • secreción basal B. Cambios similares a la fase luteal células del estroma ampliadas seudodesidualmente deformación de las glándulas del endometrio angiogénesis tardía (formación de la arteria espiral) • vacuolación del epitelio del endometrio secreción lumínal C. Ovarectomizada o un endometrio no estimulado (atrófico) estroma compacto del endometrio atrofia del epitelio del endometrio - atrofia de las glándulas del endometrio atrofia del miometrio La severidad de cada uno de los descubrimientos anteriores fue calificada utilizando una escala de calificación: grado 0: descubrimiento no presente • gradol: mínimo, muy poco, muy pequeño grado 2: ligero, poco, pequeño grado 3: moderado, número moderado, tamaño moderado grado 4: marcado, muchos, grande • grado 5: masivo, número extenso, tamaño extenso Por cada animal se hizo está calificación. Luego la calificación promedio por grupo de tratamiento fue calculada por cada característica. Finalmente, fue calculado un promedio de calificación por categoría atrófica, folicular, similar a la fase luteal, de las características promedio individuales. Un perfil de seguridad del endometrio favorable para un compuesto es caracterizado por menos actividad del compuesto similar a la fase folicular inducida por el compuesto, combinada con una característica más similar a la fase luteal y/o endometrio atrófico. Los datos del compuesto 8 y los compuestos comparativos X (17 a-etinil-17ß-estradiol, Fórmula 1 en donde de R1 a R4 son todos H) e Y (17ß estradiol), son presentados en la Tabla 1 (datos similares in vitro) y Tabla 2 (datos in vivo). Tabla 1 Los resultados mostrados en la Tabla 1 demuestran que los compuestos de la presente invención tienen una selectividad funcional consistentemente mejor para el subtipo a del receptor recombinado con una potencia alta del receptor a de estrógeno, es decir, que se activa selectivamente el receptor a de estrógeno mientras no se activa o solamente se activa parcialmente el receptor ß de estrógeno. El compuesto 8 muestra una potencia del receptor a de estrógeno de 23.45%, y es 15.2 veces más selectiva para el receptor a de estrógeno sobre el receptor ß de estrógeno y es un agonista parcial en el receptor ß de estrógeno con una eficacia de 40%. Los compuestos cercanamente relacionados 17 a etinil 17 ß estradiol (compuesto X) y 17 ß estradiol (compuesto Y) muestran una preferencia igual para ambos subtipos de receptores de estrógenos, y son completamente agonistas en el receptor ß de estrógeno. Tabla 2 Un perfil de seguridad del endometrio favorable de los compuestos de la presente invención es sorprendentemente debido a que los compuestos cercanamente relacionados 17 a etinil 17 ß estradiol y 17 ß estradiol, ambos estimulan el endometrio como se demuestran en la tabla 2, por signos claros de una actividad similar a la fase folicular con solamente una actividad similar a la fase luteal marginal y por lo tanto un endometrio no atrófico. Eiemplo 4 En el comportamiento sexual de las ratas hembras es dependiente de las hormonas. En las ratas hembras, preparadas con estrógeno la progesterona claramente aumenta el comportamiento sexual de la hembra o la lordosis. Sin embargo, la progesterona no es efectiva para inducir la lordosis en hembras ovariectomizadas que no han recibido estrógeno (ver también la publicación de J.B.

Becker, S.M.Bree y D. Crews (Eds.), Behavioral Endocrinology, 1992, páginas 82 a 84). La capacidad de los compuestos de prueba para facilitar el comportamiento en la lordosis inducido por la progesterona en las ratas ovariectomizadas hembras fue utilizado para demostrar la actividad estrogénica in vivo al momento de la dosificación oral de dichos compuestos. Las hembras fueron tratadas previamente durante 3 días con el compuesto de prueba seguido por el tratamiento con un progestagen en el cuarto día. Cuatro horas después del tratamiento de progesterona, el comportamiento sexual de la rata hembra fue medido en la presencia de la rata macho contando el número de respuestas de la lordosis durante 10 minutos.

Los profármacos del compuesto 8, en donde R1 es pivaloilo (Compuesto 9a), R1 es dimetil carbamoilo (Compuesto 9b) o R1 es etoxi carbonilo (Compuesto 9c) todos demostraron ser compuestos estrogenicos activos al momento de la dosificación oral en una dosis de un mg/kg, día.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de esteroides 15ß substituido de la fórmula 1: I en donde, R1 es H, C?-5 alquilo, C?-?2acilo, di-(C?.5alquilo)aminocarbonilo, (d.salquilojoxicarbonilo o sulfamoilo, R2 es H, C1-3alquilo, C2-3 alquenilo ó C2-3 alquinilo, cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por un halógeno. R3 es un C-?-2 alquilo, etenilo o etinilo, y cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por un halógeno, y R4 es H ó C?.?2acilo 2. El compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R2 es C?.3 alquilo, C2.3 alquenilo ó C2-3 alquinilo, y cada uno de los cuales puede ser opcionalmente substituido por un halógeno. 3. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porq ue R1 y R4 ambos son H . 4. U na composición farmacéutica que com prende u n com puesto de acuerdo con cualesq u iera de las reivi ndicaciones de la 1 a la 3 y un excipiente farmacéuticamente aceptable. 5. U n compuesto tal y como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 3 para utilizarse en la terapia . 6. El uso de u n compuesto tal y como se describe en cualesqu iera de las reivindicaciones de la 1 a la 3 para la fabricación de u n medica mento para el tratamiento, prevención de enfermedades relacionadas con el receptor de estrógeno o la reg u lación o tratamiento o prevención de otros padecimientos fisiológicos relacionados con el receptor de estrógeno. 7. El uso tal y como se describe en la reivi ndicación 6 para la manufactu ra de un medicamento para el tratamiento de hormonas. 8. El uso tal y como se describe en la reivindicación 7 , caracterizado porque el tratamiento de hormonas es para padecim ientos climatéricos. 9. El uso tal y como se describe en la reivi ndicación 7, caracterizado porque el tratamiento de hormonas es para la osteoporosis. 1 0. El uso tal y como se descri be en la reivindicación 6 para la fabricación de u n medicamento para utilizarse como anticonceptivo.