MD4244221T2 - Promedicament al derivaților de pirolidonă сa activator al glucokinazei - Google Patents

Abstract

Prezenta dezvăluire se referă la un compus cu formula (I) sau la un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia; o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus cu formula (I); şi utilizarea unui compus cu formula (I) sau a unei compoziţii farmaceutice a acestuia în tratamentul diabetului zaharat şi al simptomelor asociate.

Description

[0001] DOMENIUL INVENŢIEI

[0002] Prezenta dezvăluire se referă la promedicamente ale derivaţilor de pirolidonă ca activator de glucokinază (GKA), compoziţii farmaceutice ale acestora şi utilizarea lor în tratamentul diabetului zaharat şi al bolilor înrudite. Mai precis, prezenta dezvăluire se referă la derivaţi ai HMS5552, compoziţii farmaceutice care îl cuprind şi utilizarea lor în fabricarea medicamentelor pentru tratamentul diabetului zaharat şi al bolilor înrudite.

[0003] CADRUL INVENŢIEI

[0004] Diabetul zaharat a devenit o boală răspândită la nivel mondial. Conform datelor de la cea de-a 24-a Conferinţă Naţională a Societăţii Chineze de Diabet (CDS), China are cea mai mare populaţie de pacienţi cu diabet zaharat din lume, iar aproximativ 129,8 milioane de adulţi au diabet. Diabetul zaharat de tip II, adică diabetul zaharat non-insulinodependent (NIDDM), care cuprinde peste 90% dintre pacienţii cu diabet, este o disfuncţie metabolică cronică hiperglicemică, rezultată dintr-un dezechilibru al homeostaziei glucozei din sânge în corpul uman, cauzat de tulburarea secreţiei de insulină şi rezistenţa la insulină.

[0005] Glucokinaza (GK) joacă un rol central în stabilizarea echilibrului glucozei din sânge în corpul uman. GK, care acţionează ca un senzor de glucoză în homeostazia glucozei din sânge, detectează modificările glicemiei, reglează secreţia hormonilor mesageri care controlează glucoza, de insulină, glucagon şi GLP-1 şi constituie un sistem de detectare pentru reglarea homeostaziei glucozei din sânge în corpul uman. GK este distribuită în principal în ficat, unde transformă rapid glucoza în glicogen hepatic pentru depozitare ca răspuns la creşterea glicemiei, reducând în acelaşi timp nivelul de glucoză din sânge. Rezerva de glucoză în timpul ingerării glucozei şi aportul de glucoză în timpul postului, controlate de hormonii care controlează glucoza, constituie reglarea homeostaziei glucozei din sânge în corpul uman.

[0006] Funcţia şi expresia afectate ale glucokinazei, precum şi disfuncţia senzorului de glucoză, duc la disfuncţia secreţiei de fază incipientă a hormonilor care controlează glucoza, afectând absorbţia şi producţia de glucoză şi rezultând hiperglicemie postprandială şi hipoglicemie preprandială. Semnalizarea anormală a hormonilor care controlează glucoza provoacă funcţii şi expresii anormale ale proteinelor cheie din sistemul de execuţie a absorbţiei şi producţiei de glucoză, formând stări de funcţionare anormale şi ducând la diabet zaharat de tip II.

[0007] Activatorii de glucokinază au fost dezvoltaţi având în vedere caracteristicile GK ca ţintă, care pot îmbunătăţi funcţia de secreţie a insulinei, glucagonului şi GLP-1 pentru reglarea glucozei prin creşterea sensibilităţii celulelor α, β şi L la modificările concentraţiei de glucoză.

[0008] WO2009/127546A1 descrie activatori de glucokinază din seria pirolidonei, în special acid (S)-2-[4-(2-cloro-fenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-pirol-1-il]-4-metil-pentanoic [1-((R)-2,3-dihidroxi-propil)-1H-pirazol-3-il]-amida, denumită Dorzagliatin (sau HMS5552).

[0009] Având în vedere rolul important al activatorilor glucokinazei în reglarea homeostaziei glucozei din sângele uman, există o cerere pentru activatori ai glucokinazei în acest domeniu.

[0010] REZUMATUL INVENŢIEI

[0011] Inventatorii prezentei dezvăluiri au dezvoltat o clasă de compuşi, care sunt derivaţi ai HMS5552, pot fi convertiţi eficient (de exemplu, pot suferi transformări enzimatice şi/sau chimice) în HMS5552 in vivo (în special în intestinul subţire) şi, astfel, sunt absorbiţi în sistemul circulator pentru a atinge scopul de a trata sau preveni unele boli ale sindromului metabolic. Alternativ, compuşii descrişi aici sunt caracterizaţi prin faptul că sunt stabili în fluidul gastric şi pot fi convertiţi eficient în HMS5552 în celulele intestinale şi ale intestinului subţire. În plus, derivaţii HMS5552 descrişi aici au o stabilitate fizico-chimică şi o solubilitate bune.

Într-un aspect, invenţia oferă un compus cu formula (II-1), (II-2), (II-3) sau (II-4) sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia:

sau

în care:

[0013] R3 este selectat din cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R;

[0014] R este selectat independent dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, - L-C(O)ORa, -L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6;

[0015] în care m este 1 sau 2;

[0016] Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri;

[0017] Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri; şi

[0018] L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

Într-un alt aspect, invenţia se referă la un compus cu formula (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4), sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care compusul este:

sau

în care:

[0020] R9 este selectat dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, -L-C(O)ORa, - L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural;

[0021] în care m este 1 sau 2;

[0022] Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri;

[0023] Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri; şi

[0024] L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

[0025] Într-un alt aspect, invenţia oferă o compoziţie farmaceutică, care cuprinde compusul invenţiei sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; şi opţional unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.

[0026] Într-un alt aspect, invenţia oferă un compus al invenţiei sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia sau o compoziţie farmaceutică a invenţiei, pentru utilizare într-o metodă de tratare sau prevenire a uneia sau mai multor boli selectate dintre diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, supraponderalitate, obezitate, hipertensiune arterială, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic, opţional în care tratarea diabetului zaharat de tip I sau a diabetului zaharat de tip II cuprinde vindecarea diabetului, inducerea remisiunii sau regresia diabetului.

[0027] DESCRIERE DETALIATĂ A INVENŢIEI

[0028] Definiţii

[0029] Dacă nu se specifică altfel, toţi termenii tehnici şi ştiinţifici utilizaţi aici au aceleaşi semnificaţii ca cele înţelese în mod obişnuit de către specialiştii în domeniul căruia îi aparţine prezenta dezvăluire, dar în caz de conflict, vor prevala definiţiile din această specificaţie.

[0030] Aşa cum sunt utilizate în specificaţie şi revendicări, formele de singular „un», „un» şi „numitul/respectivul» includ formele de plural, cu excepţia cazului în care se specifică în mod clar altfel în context.

[0031] Toate valorile sau expresiile numerice legate de cantităţile componentelor utilizate în specificaţie şi revendicări trebuie înţelese ca fiind modificate prin „aproximativ» în toate cazurile. Termenul „aproximativ», atunci când se referă la o cantitate sau un interval numeric, înseamnă că respectiv cantitatea sau intervalul numeric la care se face referire este o valoare aproximativă în limita variabilităţii experimentale (sau în limita erorii experimentale statistice). Prin urmare, cantitatea sau intervalul numeric poate fi variat între, de exemplu, ±5% din cantitatea sau intervalul numeric la care se face referire.

[0032] Când este listat un interval de valori, se intenţionează ca acesta să cuprindă fiecare valoare şi subinterval din interval. De exemplu, „alchil C1-6» este destinat să includă alchil C1, C2, C3, C4, C5, C6, C1-6, C1-5, C1-4, C1-3, C1-2, C2-6, C2-5, C2-4, C2-3, C3-6, C3-5, C3-4, C4-6, C4-5 şi C5-6.

[0033] „Alchil C1-6» se referă la un radical al unei grupări hidrocarbonate saturate, liniare sau ramificate, având 1 până la 6 atomi de carbon. În unele variante de realizare, alchilul C1-4 este alternativ. Exemple de alchil C1-6 include metil (C1), etil (C2), n-propil (C3), izo-propil (C3), n-butil (C4), terţ-butil (C4), sec-butil (C4), izo-butil (C4), n-pentil (C5), 3-pentil (C5), pentil (C5), neopentil (C5), 3-metil-2-butil (C5), terţ-pentil (C5) şi n-hexil (C6). Termenul „alchil C1-6» include şi heteroalchil, în care unul sau mai mulţi (de exemplu, 1, 2, 3 sau 4) atomi de carbon sunt substituiţi cu heteroatomi (de exemplu, oxigen, sulf, azot, bor, siliciu, fosfor). Grupările alchil pot fi opţional substituite cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent. Abrevierile convenţionale pentru alchil includ Me (-CH3), Et (-CH2CH3), iPr (-CH(CH3)2), nPr (-CH2CH2CH3), n-Bu (-CH2CH2CH2CH3) sau i-Bu (-CH2CH(CH3)2).

[0034] „Alchenil C2-6» se referă la un radical al unei grupări hidrocarbonate liniare sau ramificate având 2 până la 6 atomi de carbon şi cel puţin o legătură dublă carbon-carbon. În unele variante de realizare, alchenilul C2-4 este alternativ. Exemple de alchenil C2-6 includ vinil (C2), 1-propenil (C3), 2-propenil (C3), 1-butenil (C4), 2-butenil (C4), butadienil (C4), pentenil (C5), pentadienil (C5), hexenil (C6), etc. Termenul „alchenil C2-6» include şi heteroalchenil, în care unul sau mai mulţi (de exemplu, 1, 2, 3 sau 4) atomi de carbon sunt înlocuiţi cu heteroatomi (de exemplu, oxigen, sulf, azot, bor, siliciu, fosfor). Grupările alchenil pot fi opţional substituite cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0035] „Alchinil C2-6» se referă la un radical al unei grupări hidrocarbonate liniare sau ramificate având 2 până la 6 atomi de carbon, cel puţin o legătură triplă carbon-carbon şi opţional una sau mai multe legături duble carbon-carbon. În unele variante de realizare, alchinilul C2-4 este o alternativă. Exemple de alchinil C2-6 includ, dar nu se limitează la, etinil (C2), 1-propinil (C3), 2-propinil (C3), 1-butinil (C4), 2-butinil (C4), pentinil (C5), hexinil (C6), etc. Termenul „alchinil C2-6» include şi heteroalchinil, în care unul sau mai mulţi (de exemplu, 1, 2, 3 sau 4) atomi de carbon sunt înlocuiţi cu heteroatomi (de exemplu, oxigen, sulf, azot, bor, siliciu, fosfor). Grupările alchinil pot fi substituite cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0036] „Alchilen C1-6, alchenilen C2-6 sau alchinilen C2-6» se referă la o grupare divalentă de „alchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6» aşa cum este definit mai sus.

[0037] „Alchilen C1-6» se referă la o grupare divalentă formată prin îndepărtarea unui alt hidrogen al alchilului C1-6 şi poate fi substituit sau nesubstituit. În unele variante de realizare, alchilen C1-4 este încă o alternativă. Grupările alchilenice nesubstituite includ, dar nu se limitează la, metilen (-CH2-), etilen (-CH2CH2-), propilen (-CH2CH2CH2-), butilen (-CH2CH2CH2CH2-), pentilen (-CH2CH2CH2CH2CH2-), hexilen (-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-), etc. Exemple de grupări alchilenice substituite, cum ar fi cele substituite cu una sau mai multe grupări alchil (metil), includ, dar nu se limitează la, metilen substituit (-CH(CH3)-, -C(CH3)2-), etilen substituit (-CH(CH3)CH2-, -CH2CH(CH3)-, -C(CH3)2CH2-, -CH2C(CH3)2-), propilen substituit (-CH(CH3)CH2CH2-, -CH2CH(CH3)CH2-, -CH2CH2CH(CH3)-, -C(CH3)2CH2CH2-, -CH2C(CH3)2CH2-, -CH2CH2C(CH3)2-), etc.

[0038] „Alchenilen C2-6» se referă la o grupare alchenil C2-6 în care un alt hidrogen este îndepărtat pentru a furniza un radical divalent de alchenilen şi care poate fi substituit sau nesubstituit. În unele variante de realizare, alchenilen C2-4 este încă o alternativă. Exemple de grupări alchenilenice nesubstituite includ, dar nu se limitează la, etenilen (-CH=CH-) şi propenilen (de exemplu, - CH=CHCH2-, -CH2-CH=CH-). Exemple de grupări alchenilenice substituite, de exemplu, substituite cu una sau mai multe grupări alchil (metil), includ, dar nu se limitează la, etenilen substituit (-C(CH3)=CH-, -CH⁻=C(CH3)-), propenilen substituit (de exemplu, -C(CH3)=CHCH2-, - CH=C(CH3)CH2-, -CH=CHCH(CH3)-, -CH=CHC(CH3)2-, -CH(CH3)-CH=CH-, -C(CH3)2-CH=CH-, -CH2-C(CH3)=CH-, -CH2-CH=C(CH3)-) şi altele asemenea.

[0039] „Alchinilen C2-6» se referă la o grupare alchinil C2-6 în care un alt hidrogen este îndepărtat pentru a furniza un radical divalent de alchinilen şi care poate fi substituit sau nesubstituit. În unele variante de realizare, alchinilen C2-4 este încă o alternativă. Exemple de grupări alchinilenice includ, dar nu se limitează la, etinilen (-C≡C-), propinilen substituit sau nesubstituit (-C≡CCH2-), şi altele asemenea.

[0040] „Halo» sau „halogen» se referă la fluor (F), clor (Cl), brom (Br) şi iod (I).

[0041] Astfel, „haloalchil C1-6» se referă la „alchil C1-6» de mai sus, care este substituit cu unul sau mai mulţi halogeni. În unele variante de realizare, haloalchilul C1-4 este încă alternativ şi încă alternativ haloalchil C1-2. Exemple de grupări haloalchil includ, dar nu se limitează la, -CF3, -CH2F, -CHF2, - CHFCH2F, -CH2CHF2, -CF2CF3, -CCl3, -CH2Cl, -CHCl32, 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetil-etil şi altele asemenea. Haloalchilul poate fi substituit în orice punct de ataşare disponibil, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0042] „Cicloalchil C3-10» se referă la un radical al unei grupări hidrocarbonate ciclice nearomatice având de la 3 la 10 atomi de carbon în ciclu şi zero heteroatomi. În unele variante de realizare, cicloalchil C3-7 şi cicloalchil C3-6 sunt încă alternativi şi încă alternativ cicloalchil C5-6. Cicloalchilul include, de asemenea, un sistem ciclic în care cicloalchilul descris aici este condensat cu una sau mai multe grupări aril sau heteroaril, unde punctul de ataşare este pe ciclul cicloalchil şi, în acest caz, numărul de atomi de carbon continuă să reprezinte numărul de atomi de carbon din sistemul cicloalchil. Exemple de grupări cicloalchil includ, dar nu se limitează la, ciclopropil (C3), ciclopropenil (C3), ciclobutil (C4), ciclobutenil (C4), ciclopentil (C5), ciclopentenil (C5), ciclohexil (C6), ciclohexenil (C6), ciclohexadienil (C6), cicloheptil (C7), cicloheptenil (C7), cicloheptadienil (C7), cicloheptatrienil (C7), etc. Cicloalchilul poate fi substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0043] „Halocicloalchil C3-10» se referă la „cicloalchil C3-10» de mai sus, care este substituit cu unul sau mai mulţi halogeni.

[0044] „Heterociclil cu 3 până la 12 membri» se referă la un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 3 până la 12 membri, având atomi de carbon şi 1 până la 5 heteroatomi, în care fiecare dintre heteroatomi este selectat independent dintre azot, oxigen, sulf, bor, fosfor şi siliciu. În heterociclilul care conţine unul sau mai mulţi atomi de azot, punctul de ataşare poate fi un atom de carbon sau de azot, atâta timp cât valenţa permite. În unele variante de realizare, heterociclilul cu 4 până la 12 membri este alternativ, adică un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 4 până la 12 membri, având atomi de carbon şi 1 până la 5 heteroatomi. În unele variante de realizare, heterociclilul cu 3 până la 10 membri este alternativ, adică un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 3 până la 10 membri, având atomi de carbon şi 1 până la 5 heteroatomi în inel. În unele variante de realizare, heterociclilul cu 3 până la 7 membri este alternativ, acesta fiind un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 3 până la 7 membri având atomi de carbon şi 1 până la 4 heteroatomi în inel. Heterociclilul cu 3 până la 6 membri este alternativ, acesta fiind un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 3 până la 6 membri având atomi de carbon şi 1 până la 3 heteroatomi în inel. Heterociclilul cu 4 până la 8 membri este alternativ, acesta fiind un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 4 până la 8 membri având atomi de carbon şi 1 până la 3 heteroatomi în inel. Heterociclilul cu 5 până la 6 membri este mai alternativ, acesta fiind un radical al unui sistem ciclic nearomatic cu 5 până la 6 membri având atomi de carbon şi 1 până la 3 heteroatomi în inel. Heterociclilul include, de asemenea, un sistem ciclic în care heterociclilul descris mai sus este condensat cu una sau mai multe grupări cicloalchil, unde punctul de ataşare este pe inelul cicloalchil, sau heterociclilul descris mai sus este condensat cu una sau mai multe grupări aril sau heteroaril, unde punctul de ataşare este pe inelul heterociclil; şi în astfel de cazuri, numărul de membri ai inelului continuă să reprezinte numărul de membri ai inelului din sistemul ciclic heterociclil. Exemple de grupări heterociclil cu 3 membri care conţin un heteroatom includ, dar nu se limitează la, aziridinil, oxiranil şi tiorenil. Exemple de grupări heterociclil cu 4 membri care conţin un heteroatom includ, dar nu se limitează la, azetidinil, oxetanil şi tietanil. Grupările heterociclil cu 5 membri, exemplificate, care conţin un heteroatom includ, dar fără a se limita la, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidrotiofenil, dihidrotienil, pirolidinil, dihidropirolil şi pirolil-2,5-dionă. Grupările heterociclil cu 5 membri, exemplificate, care conţin doi heteroatomi includ, dar fără a se limita la, dioxolanil, oxasulfuranil, disulfuranil şi oxazolidin-2-onă. Grupările heterociclil cu 5 membri, exemplificate, care conţin trei heteroatomi includ, dar fără a se limita la, triazolinil, oxadiazolinil şi tiadiazolinil. Grupările heterociclil cu 6 membri, exemplificate, care conţin un heteroatom includ, dar fără a se limita la, piperidil, tetrahidropiranil, dihidropiridil şi tianil. Grupările heterociclil cu 6 membri, exemplificate, care conţin doi heteroatomi, includ, dar fără a se limita la, piperazinil, morfolinil, ditianil şi dioxanil. Grupările heterociclil cu 6 membri, exemplificate, care conţin trei heteroatomi, includ, dar fără a se limita la, triazinanil. Grupările heterociclil cu 7 membri, exemplificate, care conţin un heteroatom, includ, dar fără a se limita la, azepanil, oxepanil şi tiepanil. Grupările heterociclil cu 5 membri, exemplificate, condensate cu un aril C6 (denumit şi heterociclil 5,6-biciclic în acest document) include, dar nu se limitează la, indolinil, izoindolinil, dihidrobenzofuranil, dihidrobenzotiofenil, benzoxazolinonil etc. Exemple de grupări heterociclil cu 6 membri condensate cu un aril C6 (denumit aici şi heterociclil 6,6-biciclic) include, dar nu se limitează la, tetrahidrochinolinil, tetrahidroizochinolinil etc. Heterociclilul poate fi substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0045] „Aril C6-10» se referă la un radical al unui sistem ciclic aromatic 4n+2 monociclic sau policiclic (de exemplu, biciclic) având 6-10 atomi de carbon în ciclu şi zero heteroatomi (de exemplu, având 6 sau 10 electroni π partajaţi într-o matrice ciclică). În unele variante de realizare, gruparea aril are şase atomi de carbon în ciclu („aril C6»; de exemplu, fenil). În unele variante de realizare, gruparea aril are zece atomi de carbon în inel („aril C10»; de exemplu, naftil, de exemplu, 1-naftil şi 2-naftil). Gruparea aril include, de asemenea, un sistem ciclic în care ciclul aril descris mai sus este condensat cu una sau mai multe grupări cicloalchil sau heterociclil, iar punctul de ataşare este pe ciclul aril, caz în care numărul de atomi de carbon continuă să reprezinte numărul de atomi de carbon din sistemul ciclic aril. Arilul poate fi substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0046] „Heteroaril cu 5 până la 10 membri» se referă la un radical dintr-un sistem ciclic aromatic 4n+2 monociclic sau biciclic cu 5 până la 10 membri (de exemplu, având 6 sau 10 electroni π partajaţi într-o matrice ciclică) având atomi de carbon în inel şi 1-4 heteroatomi în inel, în care fiecare heteroatom este selectat independent dintre azot, oxigen şi sulf. În gruparea heteroaril care conţine unul sau mai mulţi atomi de azot, punctul de ataşare poate fi un atom de carbon sau azot, atâta timp cât valenţa permite. Sistemele biciclice heteroaril pot include unul sau mai mulţi heteroatomi într-unul sau două inele. Heteroarilul include, de asemenea, sisteme ciclice în care inelul heteroaril descris mai sus este condensat cu una sau mai multe grupări cicloalchil sau heterociclil, iar punctul de ataşare este pe inelul heteroaril. În acest caz, numărul atomilor de carbon continuă să reprezinte numărul de atomi de carbon din sistemul ciclic heteroaril. În unele variante de realizare, grupările heteroaril cu 5 până la 6 membri sunt încă alternative, acestea fiind radicali ai sistemelor de inele aromatice 4n+2 monociclice sau biciclice cu 5 până la 6 membri, având atomi de carbon în inel şi 1-4 heteroatomi în inel. Grupările heteroaril cu 5 membri exemplificative care conţin un heteroatom includ, dar fără a se limita la, pirolil, furil şi tienil. Grupările heteroaril cu 5 membri exemplificative care conţin doi heteroatomi includ, dar fără a se limita la, imidazolil, pirazolil, oxazolil, izoxazolil, tiazolil şi izotiazolil. Grupările heteroaril cu 5 membri exemplificative care conţin trei heteroatomi includ, dar fără a se limita la, triazolil, oxadiazolil (cum ar fi 1,2,4-oxadiazolil) şi tiadiazolil. Grupările heteroaril cu 5 membri exemplificative care conţin patru heteroatomi includ, dar fără a se limita la, tetrazolil. Grupările heteroaril cu 6 membri exemplificative care conţin un heteroatom includ, dar fără a se limita la, piridil. Grupările heteroaril cu 6 membri exemplificative care conţin doi heteroatomi includ, dar fără a se limita la, piridazinil, pirimidinil şi pirazinil. Grupările heteroaril cu 6 membri exemplificative care conţin trei sau patru heteroatomi includ, dar fără a se limita la, triazinil şi respectiv tetrazinil. Grupările heteroaril cu 7 membri exemplificative care conţin un heteroatom includ, dar fără a se limita la, azepinil, oxepinil şi tiepinil. Grupările heteroaril 5,6-biciclice exemplificative includ, dar fără a se limita la, indolil, izoindolil, indazolil, benzotriazolil, benzotiofenil, izobenzotiofenil, benzofuranil, benzoizofuranil, benzimidazolil, benzoxazolil, benzoizoxazolil, benzoxadiazolil, benzotiazolil, benzoizotiazolil, benzotiadiazolil, indolizinil şi purinil. Grupările heteroaril 6,6-biciclice exemplificative includ, dar fără a se limita la, naftiridinil, pteridinil, chinolil, izochinolil, cinolinil, chinoxalinil, ftalazinil şi chinazolinil. Heteroarilul poate fi substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi, de exemplu, cu 1 până la 5 substituenţi, 1 până la 3 substituenţi sau 1 substituent.

[0047] Alternativ, exemple specifice de grupări heteroaril includ: pirolil, imidazolil, pirazolil, 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, triazolil (4H-1,2,4-triazolil, 1H-1,2,3-triazolil, 2H-1,2,3-triazolil), piranil, 2-furanil, 3-furanil etc., 2-tienil, 3-tienil, oxazolil, izoxazolil, oxadiazolil (1,2,4-oxazolil, 1,3,4-oxazolil, 1,2,5-oxazolil), tiazolil, tiadiazolil (1,2,4-tiadiazolil, 1,3,4-tiadiazolil, 1,2,5-tiadiazolil), triazinil sau tetrazinil.

[0048] Termenul „aminoacid natural» este unitatea structurală de bază a proteinelor, care stă la baza modificării ulterioare a proteinelor de către organisme. Există în total 20 de tipuri de aminoacizi naturali. În plus, pe baza acestor aminoacizi de bază, organismele pot sintetiza şi anumite tipuri de aminoacizi derivaţi, cum ar fi hidroxiprolina, hidroxilizina şi altele asemenea. La firefly, se pot sintetiza chiar şi aminoacizi în formă D. Aceşti aminoacizi biosintetici sunt denumiţi colectiv „aminoacizi naturali». Aminoacizii naturali sunt în general în formă L. Cei mai comuni 20 de aminoacizi naturali sunt prezentaţi în tabelul de mai jos:

Abreviere viaţie

Nume

Ramură

Greutate moleculară

Punct izoelectric

Grupare R

Gly

G

Glicină

Hidrofil

75,07

5,97

-H

Ala

A

Alanină

Hidrofob

89,09

6,02

-CH3

Val

V

Valină

Hidrofob

117,15

6,48

-CH-(CH3)2

Leu

L

Leucină

Hidrofob

131,17

5,98

-CH2-CH(CH3)2

Ile

I

Izoleucină

Hidrofob

131,17

6,05

-CH(CH3)-CH2-CH3

Phe

F

Fenilalanină

Hidrofob

165,19

5,49

-CH2-C6H5

Trp

W

Triptofan

Hidrofob

204,23

5,89

-C8NH6

Tyr

Y

Tirozină

Hidrofil

181,19

5,64

-CH2-C6H4-OH

Asp

D

Acid aspartic

Acid

133,10

2,85

-CH2-COOH

Asn

N

Asparagină

Hidrofil

132,12

5,41

-CH2-CONH2

Glu

E

Acid glutamic

Acid

147,13

3,15

-(CH2)2-COOH

Lys

K

Lizină

Alcalin

146,19

9,60

-(CH2)4-NH2

Gln

Q

Glutamină

Hidrofil

146,15

5,65

-(CH2)2-CONH2

Met

M

Metionină

Hidrofob

149,21

5,74

-(CH2)2-S-CH3

Ser

S

Serină

Hidrofil

105,09

5,68

-CH2-OH

Thr

T

Treonină

Hidrofil

119,12

5,60

-CH(CH3)-OH

Cys

C

Cisteină

Hidrofil

121,16

5,05

-CH2-SH

Pro

P

Prolină

Hidrofob

115,13

6,30

-C3H6

His

H

Histidină

Alcalin

155,16

7,60

-CH2-C3H3N2

Arg

R

Arginină

Alcalin

174,20

10,76

-(CH2)3-NHC(NH)NH2

[0050] Aşa cum este utilizat în această specificaţie şi în revendicări, „şi/sau» trebuie înţeles ca însemnând „oricare sau ambele» elemente asociate, adică elementele există împreună în unele cazuri şi separat în alte cazuri. Mai multe elemente enumerate cu „şi/sau» trebuie interpretate în acelaşi mod, adică „unul sau mai multe» elemente asociate. Pe lângă elementele identificate în mod specific prin expresia „şi/sau», pot exista opţional şi alte elemente, fie ele înrudite sau neînrudite cu acele elemente identificate în mod specific. Astfel, ca exemplu nelimitativ, o referinţă la „A şi/sau B», atunci când este utilizată împreună cu un limbaj deschis, cum ar fi „cuprinzând», se poate referi, într-o formă de realizare, doar la A (incluzând opţional alte elemente decât B); într-o altă formă de realizare, doar la B (incluzând opţional alte elemente decât A); într-o altă formă de realizare, atât la A, cât şi la B (incluzând opţional alte elemente); etc.

[0051] Abrevierile utilizate aici au semnificaţiile lor uzuale în domeniile chimiei, biologiei şi formulării.

[0052] Compuşii cu formula (I) din prezenta dezvăluire conţin unul sau mai mulţi centri asimetrici şi, prin urmare, pot exista în diverse forme stereoizomerice, de exemplu, forme enantiomerice şi/sau diastereomerice. De exemplu, compuşii din prezenta dezvăluire pot fi enantiomeri individuali, diastereomeri sau izomeri geometrici (cum ar fi izomeri cis şi trans) sau pot fi sub formă de amestecuri de stereoizomeri care cuprind amestecuri racemice şi amestecuri îmbogăţite cu unul sau mai mulţi stereoizomeri. Izomerii pot fi separaţi din amestecuri prin metode cunoscute de specialiştii în domeniu, inclusiv cromatografie lichidă chirală la presiune înaltă (HPLC) şi formarea şi cristalizarea sărurilor chirale; sau izomeri alternativi pot fi preparaţi prin sinteză asimetrică.

[0053] Prezenta dezvăluire cuprinde, de asemenea, compuşi marcaţi cu izotopi echivalenţi cu promedicamentul, dar unul sau mai mulţi atomi sunt înlocuiţi cu atomi având o masă atomică sau un număr de masă diferit de cel al atomilor comuni în natură. Exemple de izotopi care pot fi introduşi în compuşii dezvăluirii includ izotopi de hidrogen, carbon, azot, oxigen, fosfor, sulf, fluor şi clor, cum ar fi 2H, 3H, 13C, 11C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F şi 36Cl, respectiv. Compuşii prezentei dezvăluiri care cuprind izotopii de mai sus şi/sau alţi izotopi ai altor atomi, promedicamentele acestora şi sărurile acceptabile farmaceutic ale compuşilor sau promedicamentelor respective se încadrează în domeniul de aplicare al prezentei dezvăluiri. Anumiţi compuşi marcaţi cu izotopi ai prezentei dezvăluiri, cum ar fi cei care încorporează izotopi radioactivi (de exemplu, 3H şi 14C), pot fi utilizaţi pentru măsurarea distribuţiei medicamentului şi/sau a substratului în ţesut. Tritiul, care este 3H şi carbon-14, care este izotopul 14C, sunt totuşi alternative, deoarece sunt uşor de preparat şi detectat. În plus, sunt înlocuiţi cu izotopi mai grei, cum ar fi deuteriul, care este 2H, poate oferi beneficii terapeutice datorită stabilităţii metabolice mai mari, cum ar fi prelungirea timpului de înjumătăţire in vivo sau prin scăderea cerinţelor de dozaj şi, prin urmare, poate reprezenta o alternativă în unele cazuri. Compuşii marcaţi cu izotopi de formula (I) din prezenta dezvăluire pot fi preparaţi în general utilizând reactivi marcaţi cu izotopi uşor disponibili pentru a înlocui reactivii nemarcaţi cu izotopi în următoarele scheme şi/sau procedurile dezvăluite în exemple şi exemple de preparare.

[0054] Prin „disponibil farmaceutic» sau „acceptabil farmaceutic» se înţelege un material care nu este indezirabil din punct de vedere biologic sau în alt mod, adică materialul poate fi administrat unui individ fără a provoca efecte biologice nedorite sau a interacţiona într-un mod dăunător cu orice altă componentă a unei compoziţii care cuprinde materialul.

[0055] Termenul „sare acceptabilă farmaceutic» se referă la o sare care nu irită semnificativ un organism şi îşi păstrează activitatea biologică şi proprietăţile unui compus.

[0056] Termenul „purtător acceptabil farmaceutic» se referă la un ingredient inactiv care nu irită semnificativ organismul şi nu afectează activitatea biologică şi proprietăţile unui compus administrat. Aşa cum sunt utilizate aici, „purtător» şi „excipient» au aceeaşi semnificaţie.

[0057] Termenul „cantitate eficientă terapeutic» se referă la o cantitate dintr-un agent suficientă pentru a oferi un rezultat biologic dorit. Rezultatul poate fi reducerea şi/sau ameliorarea unui semn, simptom sau o cauză a unei boli sau orice altă modificare dorită a unui sistem biologic. De exemplu, o „cantitate eficientă terapeutic» pentru utilizare terapeutică se referă la o cantitate necesară dintr-o compoziţie care cuprinde un compus descris aici ca ingredient activ pentru a asigura o scădere semnificativă clinic a unei boli. În orice caz individual, o „cantitate eficientă terapeutic» adecvată poate fi determinată de către o persoană cu competenţe obişnuite în domeniu utilizând experimente de rutină. Astfel, expresia „cantitate eficientă terapeutic» se referă în general la o cantitate dintr-o substanţă activă la care aceasta are un efect terapeutic.

[0058] Aşa cum este utilizat aici, termenul „tratează» este sinonim cu termenii „previne» şi „ameliorează» şi are scopul de a însemna întârzierea progresiei bolii, prevenirea progresiei bolii şi/sau reducerea severităţii simptomelor care se vor dezvolta sau se aşteaptă să se dezvolte. Astfel, aceşti termeni includ ameliorarea simptomelor existente ale bolii, prevenirea simptomelor suplimentare, ameliorarea sau prevenirea cauzelor metabolice subiacente ale simptomelor, inhibarea tulburării sau bolii, de exemplu, prevenirea dezvoltării tulburării sau bolii, ameliorarea tulburării sau bolii, provocarea unei regresii a tulburării sau bolii, ameliorarea unei afecţiuni cauzate de o boală sau o tulburare sau oprirea simptomelor unei boli sau tulburări.

[0059] Aşa cum este utilizat aici, termenul „subiect» cuprinde mamiferele şi non-mamiferele. Exemple de mamifere includ, dar nu se limitează la, orice membru al clasei mamiferelor: oameni, primate non-umane, cum ar fi cimpanzeii şi alte specii de maimuţe şi primate; animale de fermă, cum ar fi bovine, cai, oi, capre, porcine; animale domestice, cum ar fi iepuri, câini şi pisici; animale de laborator, inclusiv rozătoare, cum ar fi şobolani, şoareci şi cobai şi altele asemenea. Exemple de non-mamifere includ, dar nu se limitează la, păsări, peşti şi altele asemenea. Într-o formă de realizare a prezentei dezvăluiri, mamiferul este un om. Termenul „subiect» include un pacient confirmat, dar „subiectul» nu trebuie să aibă nicio identitate specială faţă de un spital, o clinică sau o unitate de cercetare (de exemplu, ca pacient confirmat, participant la studiu etc.).

[0060] SCURTĂ DESCRIERE A DESENELOR

[0061] FIG. 1 este un grafic care prezintă comparaţia dintre rata rămasă / rata de generare - timpul de incubare al compusului 3 şi HMS5552 în fluid gastric simulat artificial.

[0062] FIG. 2 este un grafic care prezintă comparaţia dintre rata rămasă / rata de generare - timpul de incubare al compusului 7 şi HMS5552 în fluid gastric simulat artificial.

[0063] FIG. 3 este un grafic care prezintă comparaţia dintre rata rămasă / rata de generare - timpul de incubare al compusului 3 şi HMS5552 în fluid intestinal simulat artificial.

[0064] FIG. 4 este un grafic care prezintă comparaţia dintre rata rămasă / rata de generare - timpul de incubare al compusului 7 şi HMS5552 în fluid intestinal simulat artificial.

[0065] FIG. 5 este un grafic care prezintă curba OGTT a glicemiei în funcţie de timp şi AUC0-120 min comparând HMS5552, Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 la şoareci C57BL/6J. În grafic, * înseamnă P<0,05 şi ** înseamnă P<0,01, comparativ cu grupul de control cu vehicul; iar # înseamnă P<0,05 şi ## înseamnă P<0,01, comparativ cu grupul de dozare corespunzător cu HMS5552.

[0066] FIG. 6 este un grafic care prezintă nivelurile de insulină (0 min şi 15 min) comparând HMS5552, Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 la şoareci C57BL/6J. În grafic, * înseamnă P<0,05 şi ** înseamnă P<0,01, comparativ cu grupul de control cu vehicul; iar # înseamnă P<0,05 şi ## înseamnă P<0,01, comparativ cu grupul de dozare HMS5552 corespunzător.

[0067] EXEMPLE DE REALIZARE DETALIATE

[0068] În prezenta invenţie este descris un compus cu formula (I) sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia:

în care

[0069] * indică un centru chiral,

[0070] R1 este selectat dintre H, -C(O)R6, -C(O)OR6, -C(O)NR7R8, -S(O)mR6, -S(O)mOR6, sau - S(O)mNR7R8;

[0071] R2 este selectat dintre -C(O)R3, -C(O)OR3, -C(O)NR4R5, -S(O)mR3, -S(O)mOR3, sau - S(O)mNR4R5;

[0072] sau R1 şi R2 sunt conectaţi pentru a forma -CHRd-, -SiRdRe-, -C(O)-, -S(O)1-2-, -P(O)ORd- sau -CRdRe-CRdRe-;

[0073] R3 este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R;

[0074] R4 şi R5 sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, R4 şi R5 sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0075] R6 este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6;

[0076] R7 şi R8 sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, R7 şi R8 sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0077] R este selectat independent dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, -L-C(O)ORa, -L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural;

[0078] în care m este 1 sau 2;

[0079] Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri;

[0080] Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0081] Rd şi Re sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, Rd şi Re sunt luaţi împreună cu atomul de C pentru a forma =O, =S, cicloalchil C3-7 sau heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0082] L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

Într-un alt exemplu, prezenta dezvăluire se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care compusul are următoarele structuri:

sau

în care

[0084] R1 este selectat dintre H, -C(O)R6, -C(O)OR6, sau -C(O)NR7R8;

[0085] R2 este selectat dintre -C(O)R3, -C(O)OR3, sau -C(O)NR4R5;

[0086] sau R1 şi R2 sunt conectaţi pentru a forma -SiRdRe-, -C(O)-, -S(O)1-2-, -P(O)ORd- sau -CRdRe-CRdRe-;

[0087] R3 este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6;

[0088] R4 şi R5 sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, R4 şi R5 sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0089] R6 este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6;

[0090] R7 şi R8 sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, R7 şi R8 sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0091] Rd şi Re sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6 sau haloalchil C1-6; alternativ, Rd şi Re sunt luaţi împreună cu atomul de C pentru a forma =O, =S, cicloalchil C3-7 sau heterociclil cu 3 până la 7 membri.

[0092] Într-un alt exemplu, prezenta dezvăluire se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care

[0093] R1 este selectat dintre H, -COMe sau -COOEt,

[0094] R2 este selectat dintre -COMe, -COOEt sau -CONHMe;

[0095] sau R1 şi R2 sunt conectaţi pentru a forma -CHMe-, -SiMe2-, -C(O)-, -S(O)1-2- sau -P(O)OEt-.

Invenţia se referă la un compus cu Formula (II-1), (II-2), (II-3) sau (II-4), sau la un produs, enantiomer, diastereomer sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia marcat izotopic, în care compusul are următoarele structuri:

sau

în care

[0097] R3 este selectat dintre cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R;

[0098] R este selectat independent dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, -L-C(O)ORa, -L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6;

[0099] în care m este 1 sau 2;

[0100] Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri;

[0101] Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0102] L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

[0103] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care

[0104] R3 este selectat dintre aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 6 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R;

[0105] R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH, -NH2, -C(O)OH, -C(O)NH2, -S(O)mOH, -S(O)mNH2, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6;

[0106] unde m este 1 sau 2.

[0107] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care

[0108] R3 este selectat dintre fenil, naftil, pirolil, furil, tienil, imidazolil, pirazolil, oxazolil, izoxazolil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, oxadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil sau tetrazinil, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R;

[0109] R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH, -NH2, -C(O)OH, -C(O)NH2, -S(O)mOH sau -S(O)mNH2;

[0110] unde m este 1 sau 2.

[0111] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care

[0112] R3 este selectat dintre fenil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil sau tetrazinil, care este opţional substituit cu 1, 2 sau 3 grupări R;

[0113] R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH sau -NH2.

Invenţia oferă în plus un compus cu Formula (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4), sau un produs, enantiomer, diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care compusul are următoarele structuri:

, sau\tab

în care

[0115] R9 este selectat dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, -L-C(O)ORa, -L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural;

[0116] în care m este 1 sau 2;

[0117] Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri;

[0118] Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri;

[0119] L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

[0120] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care R9 este selectat dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural.

[0121] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care R9 este selectat dintr-un lanţ lateral al următorilor aminoacizi naturali: glicină, alanină, valină, leucină, izoleucină, fenilalanină, triptofan, tirozină, acid aspartic, asparagină, acid glutamic, lizină, glutamină, metionină, serină, treonină, cisteină, prolină, histidină şi arginină.

[0122] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care R9 este catena laterală a alaninei (Me) sau catena laterală a valinei (iPr).

[0123] Orice soluţie tehnică din oricare dintre variantele de realizare specifice de mai sus sau orice combinaţie a acestora poate fi combinată cu orice soluţie tehnică din alte variante de realizare specifice sau orice combinaţie a acestora. Prezenta dezvăluire are scopul de a include toate combinaţiile acestor soluţii tehnice, care nu sunt enumerate una câte una din cauza limitărilor de spaţiu.

[0124] Într-o altă formă de realizare, prezenta invenţie se referă la compusul menţionat mai sus sau la produsul, enantiomerul, diastereomerul sau sarea acceptabilă farmaceutic a acestuia marcat izotopic, în care compusul reprezentativ este selectat dintre

sau o sare a acestuia acceptabilă farmaceutic.

[0125] Combinaţie de medicamente şi/sau compoziţie farmaceutică

[0126] Compuşii prezentei dezvăluiri pot fi utilizaţi singuri sau în combinaţie cu alţi agenţi terapeutici pentru a trata o varietate de afecţiuni sau boli. Compuşii prezentei dezvăluiri şi alţi agenţi terapeutici pot fi administraţi simultan (în aceeaşi formă de dozare sau în forme de dozare separate) sau secvenţial.

[0127] Într-o formă de realizare, celălalt agent terapeutic în combinaţie cu medicamentul conform prezentei dezvăluiri este un agent hipoglicemiant.

[0128] Într-o altă formă de realizare, este prezentată aici o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus al prezentei invenţii sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; şi opţional unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.

[0129] Utilizare pentru tratamentul şi/sau prevenirea bolilor

[0130] Un alt exemplu al prezentei dezvăluiri se referă la utilizarea unui compus de formula (I) sau a unui produs marcat izotopic, a unui enantiomer, a unui diastereoizomer sau a unei sări farmaceutic acceptabile a acestuia; sau a unei compoziţii farmaceutice a acestuia în fabricarea unui medicament. În special, un exemplu specific al prezentei dezvăluiri se referă la utilizarea unui compus de formula (I) din prezenta dezvăluire sau a unui produs marcat izotopic, a unui enantiomer, a unui diastereoizomer sau a unei sări farmaceutic acceptabile a acestuia, sau a unei compoziţii farmaceutice a acestuia în fabricarea unui medicament pentru tratamentul şi/sau prevenirea următoarelor boli şi afecţiuni medicale, în special una sau mai multe boli selectate dintre diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, supraponderalitate, obezitate, hipertensiune arterială, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic.

[0131] Un alt exemplu al prezentei dezvăluiri se referă la utilizarea unui compus cu formula (I) a prezentei dezvăluiri sau a unui produs marcat izotopic, a unui enantiomer, a unui diastereoizomer sau a unei sări acceptabile farmaceutic a acestuia sau a unei compoziţii farmaceutice a acestuia în fabricarea unui medicament pentru vindecarea diabetului, inducerea remisiunii sau regresiei diabetului.

[0132] Metodă de tratare şi/sau prevenire a bolilor

[0133] Invenţia oferă în plus compusul invenţiei pentru utilizare într-o metodă de tratare şi/sau prevenire a uneia sau mai multor boli selectate dintre diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, supraponderalitate, obezitate, hipertensiune arterială, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic, în care metoda cuprinde administrarea către un subiect a unei cantităţi eficiente terapeutic dintr-un compus al invenţiei sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; sau, administrarea către un subiect a unei cantităţi eficiente terapeutic dintr-o combinaţie de medicamente sau o compoziţie farmaceutică.

[0134] Metoda pentru tratamentul şi/sau prevenirea diabetului zaharat şi a bolilor înrudite cuprinde:

•

prevenirea, încetinirea progresiei, întârzierea sau tratarea unei tulburări metabolice selectate din grupul constând din diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, hipertensiune arterială, supraponderalitate, obezitate, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic; sau

•

vindecarea diabetului, inducerea remisiunii sau regresia diabetului; sau

o

îmbunătăţirea controlului glicemic şi/sau pentru reducerea glicemiei à jeun, a glicemiei postprandiale şi/sau a hemoglobinei glicozilate HbA1c; sau

o

prevenirea, încetinirea, întârzierea sau inversarea progresiei de la toleranţă alterată la glucoză, rezistenţă la insulină şi/sau de la sindrom metabolic la diabet zaharat de tip II; sau

o

prevenirea, încetinirea progresiei, întârzierea sau tratarea unei afecţiuni sau tulburări selectate din grupul constând din complicaţii ale diabetului zaharat, cum ar fi cataracta şi bolile micro- şi macrovasculare, cum ar fi nefropatia, retinopatia, neuropatia, disfuncţia de învăţare şi memorie, tulburările neurodegenerative sau cognitive, bolile cardio- sau cerebrovasculare, ischemia tisulară, piciorul diabetic sau ulcerul diabetic, arterioscleroza, hipertensiunea arterială, disfuncţia endotelială, infarctul miocardic, sindromul coronarian acut, angina pectorală instabilă, angina pectorală stabilă, accidentul vascular cerebral, boala arterială periferică ocluzivă, cardiomiopatia, insuficienţa cardiacă, tulburările de ritm cardiac şi restenoza vasculară; sau

o

reducerea greutăţii corporale şi/sau a grăsimii corporale sau prevenirea unei creşteri a greutăţii corporale şi/sau a grăsimii corporale sau facilitarea unei reduceri a greutăţii corporale şi/sau a grăsimii corporale; sau

o

prevenirea, încetinirea, întârzierea sau tratarea degenerării celulelor beta pancreatice şi/sau a declinului funcţionalităţii celulelor beta pancreatice şi/sau pentru îmbunătăţirea şi/sau restabilirea sau protejarea funcţionalităţii celulelor beta pancreatice şi/sau restabilirea funcţionalităţii secreţiei de insulină pancreatică; sau

o

prevenirea, încetinirea, întârzierea sau tratarea bolilor sau afecţiunilor atribuite unei acumulări anormale de grăsime hepatică sau ectopică; sau

o

menţinerea şi/sau îmbunătăţirea sensibilităţii la insulină şi/sau pentru tratarea sau prevenirea hiperinsulinemiei şi/sau a rezistenţei la insulină; sau

•

prevenirea, încetinirea progresiei, întârzierea sau tratarea diabetului zaharat nou apărut după transplant (NODAT) şi/sau a sindromului metabolic post-transplant (PTMS); sau

•

prevenirea, întârzierea sau reducerea complicaţiilor asociate cu NODAT şi/sau PTMS, inclusiv boli şi evenimente micro- şi macrovasculare, rejecţia grefei, infecţia şi decesul; sau

o

tratarea hiperuricemiei şi a afecţiunilor asociate cu aceasta.

[0136] Într-o variantă alternativă, boala cuprinde diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, supraponderalitate, obezitate, hipertensiune arterială, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic.

[0137] Conform unei alte variante de realizare, metoda cuprinde tratarea diabetului zaharat de tip II prin administrarea orală a unei cantităţi eficiente terapeutic dintr-un compus cu formula (II-1), (II-2), (II-3), (II-4), (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4) sau a unei compoziţii farmaceutice a prezentei invenţii unui subiect care are nevoie de tratament. Într-o variantă de realizare, subiectul care are nevoie de tratament este o fiinţă umană. Într-o altă variantă de realizare, compoziţia farmaceutică este sub formă de tabletă.

[0138] Conform unei alte variante de realizare, metoda cuprinde administrarea unui subiect a unuia sau mai multor alte tratamente medicamentoase combinate simultan sau secvenţial cu tratamentul cu o cantitate eficientă terapeutic dintr-un compus de formula (II-1), (II-2), (II-3), (II-4), (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4) sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia sau o cantitate eficientă terapeutic dintr-o compoziţie farmaceutică.

[0139] Compusul cu formula (II-1), (II-2), (II-3), (II-4), (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4) şi compoziţia farmaceutică a prezentei invenţii pot fi administrate o dată pe zi (QD), de două ori pe zi (BID) sau de trei ori pe zi (TID).

[0140] EXEMPLE

[0141] Materialele sau reactivii utilizaţi aici sunt disponibili comercial sau preparaţi prin metode sintetice cunoscute în mod obişnuit în domeniu.

[0142] Următoarele exemple descriu şi ilustrează în detaliu exemple de realizare care se încadrează în domeniul de aplicare al prezentei dezvăluiri. Cu toate acestea, prezenta dezvăluire nu se limitează la exemple, iar orice modificări şi înlocuiri efectuate pe baza tehnică a prezentei dezvăluiri se încadrează în domeniul de aplicare protector al setului de revendicări anexat. Exemplele 1, 2, 5 şi 8 au doar scop ilustrativ.

[0143] În exemplele următoare, se pot utiliza semnificaţiile abrevierilor prezentate în Tabelul 1.

[0144] Tabelul 1. Semnificaţiile abrevierilor

Abreviere

Sens

DMF

N,N-dimetilformamidă

HATU

Hexafluorofosfat de 2-(7-azabenzotriazolil)-N,N,N',N'-tetrametiluroniu

HMS5552

(S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-N-(1-((R)-2,3-dihidroxipropil)-1H-pirazol-3-il)-4-metilpentanamidă

TBAF

Fluorură de tetrabutilamoniu

TBSCl

Terţ-butildimetilclorosilan

THF

Tetrahidrofuran

MTBE

Eter metil terţ-butilic

DMA

Dimetilacetamidă

PEG400

Polietilen glicol 400

Tween 80

Tween 80

PMSF

Fluorură de fenilmetilsulfonil

[0146] Schemă sintetică

[0147]

[0148] Compusul HMS5552 reacţionează cu reactivi precum anhidridă acidă, clorură acidă, cloroformiat, cloroformamidă, clorură de sulfonil, acid, aminoacid sau acid sulfonic în prezenţa unei baze şi/sau opţional a unui agent de condensare, astfel încât gruparea hidroxil primară a HMS5552 este esterificată printr-o reacţie convenţională de esterificare; opţional, gruparea hidroxil secundară a HMS5552 poate fi esterificată prin reacţia ulterioară cu aceiaşi reactivi sau cu reactivi diferiţi, cum ar fi anhidridă acidă, clorură de acil, cloroformiat, cloroformamidă, clorură de sulfonil, acid, aminoacid sau acid sulfonic. Când R1 este acelaşi cu R2, un produs în care grupările hidroxil primare şi secundare sunt ambele esterificate poate fi obţinut printr-o reacţie într-o singură etapă prin creşterea cantităţii unui reactiv.

[0149] Exemplul 1: Prepararea Compusului 1

[0150]

[0151] Etape sintetice:

[0152] 6 g (13 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552 au fost dizolvaţi în 20 mL de piridină şi s-au adăugat picătură cu picătură 16 mL (168 mmoli, 13 echivalenţi) de anhidridă acetică. Amestecul de reacţie a fost agitat la 20 °C timp de 18 ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de două ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate secvenţial cu acid citric apos saturat, bicarbonat de sodiu apos saturat şi saramură saturată, apoi uscate peste sulfat de magneziu anhidru şi filtrate. Filtratul a fost concentrat până la uscare pentru a obţine 6 g de Compus 1 (84,6% randament, solid galben strălucitor).

[0153] MS[M+H]+: 547,18; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,85(s, 1H), 7,52-7,67(m, o, 2H), 7,45-7,49(m, 2H), 7,35-7,39(m, 1H), 6,46(d, J=1,48, 1H), 5,25-5,30(m, 1H), 4,89-4,93(m, 1H), 4,80(s, 1H), 4,59-4,64(d, J=18,48, 1H), 4,20-4,33(m, o, 4H), 4,02-4,06(m, 1H), 2,03(s, 3H), 1,99(s, 3H), 1,74-1,80(m,1H), 1,54-1,61(m, 1H), 1,45-1,58(m, 1H), 0,90-0,92(d, J=6,48, 3H), 0,94-0,95(d, J=6,4, 3H).

[0154] Exemplul 2: Prepararea Compusului 2

[0155]

[0156] Etape sintetice:

[0157] 5,0 g (10,8 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552 au fost dizolvaţi în acetat de etil şi s-au adăugat 6,8 g (86 mmoli, 8,0 echivalenţi) de piridină şi 4,7 g (43,3 mmoli, 4,0 echivalenţi) de cloroformiat de etil la 0°C. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 20 de ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă, iar produsul a fost extras de două ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată şi concentrate până la uscare. Reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 4,5 g de Compus 2 (68,6% randament, pulbere albă).

[0158] MS[M+H]+: 607,18; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,87(s, 1H), 7,60-7,67(m, 2H), 7,45-7,54(m, 2H), 7,35-7,39(m, 1H), 6,47(s, 1H), 5,15-5,25(m, 1H), 4,89-4,93(dd, J1=10,80, J2=4,56, 1H), 4,79(s, 1H), 4,59-4,64(d, J=18,44, 1H), 4,24-4,39(m, o, 4H), 4,06-4,19(m, 5H), 1,70-1,82(m, 1H), 1,52-1,62(m, 1H), 1,35-1,50(m, 1H), 1,16-1,23(o, 6H), 0,94-0,95(d, J=6,48, 3H), 0,90-0,92(d, J=6,36, 3H).

[0159] Exemplul 3: Prepararea Compusului 3

[0160]

[0161] Etape sintetice:

[0162] 1,73 g (14,1 mmoli, 1,3 echivalenţi) de acid nicotinic au fost dizolvaţi în DMF şi s-au adăugat 4,19 g (32,4 mmoli, 3,0 echivalenţi) de diizopropiletilamină şi 5,34 g de HATU (14,0 mmoli, 1,3 echivalenţi) la 0 °C. Amestecul de reacţie a fost agitat la 0 °C timp de 30 de minute, apoi s-au adăugat în şarje 5,0 g (10,8 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552. Reacţia a fost agitată la temperatura camerei timp de 20 de ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de trei ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată, uscate peste sulfat de magneziu anhidru şi filtrate. Filtratul a fost concentrat, iar reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a da 3,3 g de Compus 3 (randament 53,7%, solid roz-maroniu).

[0163] MS[M+H]+: 568,11; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,81(s, 1H), 9,16(s, 1H), 8,82-8,84(d, J=4,52, 1H), 8,32-8,34(d, J=8,00, 1H), 7,62-7,66(t, J=8,78, 2H), 7,57-7,60(dd, J1=7,88, J2=4,68, 1H), 7,52-7,54(d, J=8,04, 1H), 7,45-7,49(t, J=7,72, 1H), 7,35-7,39(t, J=7,62, 1H), 6,45(s, 1H), 5,40-5,60(br, 1H), 4,89-4,92(dd, J1=10,60, J2=4,72, 1H), 4,80(s, 1H), 4,60-4,64(d, J=18,44, 1H), 4,012-4,29(m, 6H), 1,68-1,80(m, 1H), 1,48-1,62(m, 1H), 1,32-1,50(m, 1H), 0,94-0,95(d, J=6,52, 3H), 0,90-0,92(d, J=6,52, 3H).

[0164] Exemplul 4: Prepararea Compusului 4

[0165]

[0166] Etape sintetice:

[0167] 10,0 g (72,4 mmoli, 1,0 echivalent) de acid 2-hidroxibenzoic au fost dizolvaţi în DMF şi 14,8 g (217,4 mmoli, 3,0 echivalenţi) de imidazol şi 24,0 g (159,2 mmoli, 2,2 echivalenţi) de TBSCl au fost adăugaţi, respectiv, la 0 °C. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de două ori cu MTBE. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată, uscate peste sulfat de magneziu anhidru şi filtrate. Filtratul a fost concentrat până la uscare pentru a da 27 g de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoat de terţ-butildimetilsilil, randament brut 101,7%.

[0168] 12 g (32,7 mmoli, 1,0 echivalent) de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoat de terţ-butildimetilsilil au fost dizolvaţi în diclormetan şi s-au adăugat patru picături de DMF. 4,8 g (37,8 mmoli, 1,2 echivalenţi) de clorură de oxalil au fost adăugaţi picătură cu picătură la 0 °C şi reacţia a fost agitată la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul de reacţie a fost stins cu metanol şi apoi concentrat până la uscare pentru a da 8,2 g de clorură de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoil, randament brut 92,5%.

[0169] 6,0 g (13,0 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552 au fost dizolvaţi în acetat de etil şi s-au adăugat 4,1 g (51,8 mmoli, 4,0 echivalenţi) de piridină la 0°C, apoi s-au adăugat picătură cu picătură 5,27 g (19,5 mmoli, 1,5 echivalenţi) de clorură de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoil. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de două ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată şi concentrate până la uscare. Reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 5,5 g de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil, randament 60,8%.

[0170] 5,5 g (7,89 mmoli, 1,0 echivalent) de 2-((terţ-butildimetilsilil)oxi)benzoat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil au fost dizolvaţi în tetrahidrofuran şi s-au adăugat picătură cu picătură şi 9 mL de soluţie 1M de TBAF (9 mmoli, 1,14 echivalenţi) în tetrahidrofuran. Reacţia a fost agitată la temperatura camerei timp de 6 ore. Reacţia a fost stinsă prin adăugarea de apă, iar produsul a fost extras de trei ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată şi concentrate până la uscare. Reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă în fază inversă pentru a obţine 1,0 g de Compus 4 (21,7% randament, pulbere albă).

[0171] MS[M+H]+: 583,06; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,84(s, 1H), 10,49(s, 1H), 7,25-8,05(m, o, 7H), 6,80-7,15(m, 2H), 6,30-6,60(m, 1H), 5,55(s, 1H), 4,50-5,05(m, 3H), 3,95-4,65(m, 6H), 1,30-1,75(m, 3H), 0,70-0,95(m, 6H).

[0172] Exemplul 5: Prepararea Compusului 5

[0173]

[0174] Etape sintetice:

[0175] 6,0 g (13,0 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552 au fost dizolvaţi într-un amestec de 45 mL de THF şi 45 mL de piridină şi 24,24 g (259 mmoli, 20 echivalenţi) de N-metilcloroformamidă au fost adăugaţi la -10°C în şarje. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 20 de ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de două ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată şi concentrate până la uscare. Reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 2,5 g de Compus 5 (37,1% randament, pulbere albă).

[0176] MS[M+H]+: 520,12; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,82(s, 1H), 7,65-7,67(m, 1H), 7,45-7,54(m, 3H), 7,35-7,37(m, 1H), 7,04-7,05(m, 1H), 6,43(s, 1H), 5,26(br, 1H), 4,91-4,92(m, 1H), 4,80(s, 1H), 4,60-4,64(d, J=18,44, 1H), 4,19-4,24(d, J=18,44, 1H), 3,87-4,07(m, 4H), 2,51(s, 3H), 2,08(s, 1H), 1,73-1,80(m, 1H), 1,54-1,61(m, 1H), 1,40-1,49(m, 1H), 0,94-0,95(d, J=6,52, 3H), 0,90-0,92(d, J=6,32, 3H).

[0177] Exemplul 6: Prepararea Compusului 6 şi a sării citrat a acestuia

[0178]

[0179] Etape sintetice:

[0180] 4 g (21 mmoli, 1,4 echivalenţi) de acid (S)-2-((terţ-butoxicarbonil) amino)propionic au fost dizolvaţi în DMF şi s-au adăugat 7,8 g (60,3 mmoli, 4,0 echivalenţi) de diizopropiletilamină şi 8,1 g (21,3 mmoli, 1,4 echivalenţi) de HATU la 0°C. Amestecul a fost agitat timp de 30 de minute, apoi s-au adăugat în şarje 7,0 g (15,1 mmoli, 1,0 echivalent) de HMS5552. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 20 de ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de trei ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată, uscate peste sulfat de magneziu anhidru şi filtrate. Filtratul a fost concentrat până la uscare. Reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 5,3 g de (S)-2-((terţ-butoxicarbonil) amino)propionat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil (randament 55,3%).

[0181] 5,3 g (8,4 mmoli, 1,0 echivalent) de S)-2-((tert-butoxicarbonil)amino)propionat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil (au fost dizolvaţi în diclormetan şi s-au adăugat 20 mL de acid trifluoroacetic la 0°C. Reacţia a fost agitată la temperatura camerei timp de 4 ore. Soluţia de reacţie a fost concentrată până la uscare, iar reziduul a fost ajustat la un pH de 8-9 cu carbonat de sodiu saturat. Produsul a fost extras cu diclormetan şi concentrat până la uscare pentru a obţine 4,2 g de Compus 6 (94,1% randament, pulbere albă).

[0182] MS[M+H]+: 534,11; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,81(s, 1H), 7,65-7,67(m, 1H), 7,45-7,58(m, o, 3H), 7,36-7,39(m, 1H), 6,43(s, 1H), 5,37(s, 1H), 4,88-4,92(m, 1H), 4,79(s, 1H), 4,59-4,64(d, J=18,44, 1H), 4,19-4,24(d, J=18,44, 1H), 3,90-4,19(m, 4H), 3,35-3,43(m, 1H), 1,90-2,10(m, 1H), 1,73-1,80(m, 1H), 1,54-1,61(m,1H), 1,45-1,46(m, 1H), 1,17-1,19(d, J=6,92, 3H), 0,94-0,95(d, J=6,52, 3H), 0,90-0,92(d, J=6,40, 3H).

[0183] Sare citrat a Compusului 6

[0184] 4,2 g (7,9 mmoli, 1,0 echivalent) de Compus 6 s-au dizolvat în 50 mL de THF şi s-a adăugat picătură cu picătură la 0 °C o soluţie de 604 mg (3,14 mmoli, 0,4 echivalenţi) de acid citric în THF (20 mL). Soluţia de reacţie a fost agitată la 0 °C timp de 1 oră. Soluţia de reacţie a fost concentrată până la uscare, apoi la concentrat s-au adăugat 30 mL de acetat de etil pentru a obţine o soluţie limpede. Apoi s-au adăugat lent 60 mL de MTBE şi o cantitate mare de solid a precipitat. Amestecul a fost filtrat. Solidul a fost recristalizat cu acetat de etil/MTBE pentru a obţine 3,4 g de sare citrat a Compusului 6 cu o puritate de 95,0% prin HPLC. [MS[M+H]+: 534,11]

[0185] Exemplul 7: Prepararea Compusului 7 şi a sării citrat a acestuia

[0186]

[0187] Etape sintetice:

[0188] 3,7 g (17 mmoli, 1,3 echivalenţi) de acid (S)-2-((terţ-butoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoic au fost dizolvaţi în DMF şi s-au adăugat 5,0 g (38,7 mmoli, 3,0 echivalenţi) de diizopropiletilamină şi 6,4 g (16,8 mmoli, 1,3 echivalenţi) de HATU la 0 °C. Amestecul a fost agitat la temperatura camerei timp de 30 de minute, apoi s-au adăugat în şarje 6,0 g (13,0 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552. Reacţia a fost agitată la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul de reacţie a fost stins prin adăugarea de apă şi extras de trei ori cu acetat de etil. Fazele organice au fost combinate, spălate cu saramură saturată, uscate peste sulfat de magneziu anhidru şi filtrate. Filtratul a fost concentrat, iar reziduul a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 3,9 g de (S)-2-((terţ-butoxicarbonil)amino)-3-metil butirat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil (randament 45,4%).

[0189] 3,9 g (5,9 mmoli, 1,0 echivalent) de (S)-2-((terţ-butoxicarbonil)amino)-3-metil butirat de (R)-3-(3-((S)-2-(4-(2-clorofenoxi)-2-oxo-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-4-metilpentanamido)-1H-pirazol-1-il)-2-hidroxipropil au fost dizolvaţi în diclormetan. S-au adăugat 13 mL de acid trifluoroacetic la 0 °C. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 4 ore. Soluţia de reacţie a fost concentrată până la uscare, iar reziduul a fost ajustat la un pH de 8-9 cu carbonat de sodiu saturat. Produsul a fost extras cu diclormetan şi concentrat până la uscare pentru a da 2,7 g de Compus 7 (randament 81,6%, pulbere albă).

[0190] MS[M+H]+: 562,29; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,80(s, 1H), 7,65-7,67(m, 1H), 7,47-7,57(m, o, 3H), 7,35-7,35(m, 1H), 6,43-6,44(d, J=5,48, 1H), 5,35(s, 1H), 4,92-4,93(m, 1H), 4,89(s, 1H), 4,59-4,64(d, J=18,48, 1H), 4,19-4,27(o, 2H), 3,90-4,10(m, 4H), 3,13-3,14(d, J=5,32, 1H), 1,45-1,89(m, o, 6H), 0,77-0,95(o, 12H).

[0191] Sare citrat a Compusului 7

[0192] 2,3 g (4,1 mmoli, 1,0 echivalent) de Compus 7 s-au dizolvat în 30 mL de tetrahidrofuran şi s-a adăugat picătură cu picătură la 0 °C o soluţie de 314 mg (1,63 mmoli, 0,4 echivalenţi) de acid citric în THF (10 mL). Soluţia de reacţie a fost agitată la 0 °C timp de 1 oră şi apoi concentrată până la uscare. La concentrat s-au adăugat 20 mL de acetat de etil pentru a obţine o soluţie limpede. Apoi s-au adăugat lent 40 mL de eter metil terţ-butilic, iar produsul a fost precipitat. Precipitatul a fost filtrat şi uscat pentru a obţine 2,1 g de sare citrat a Compusului 7 cu o puritate de 94,8% prin HPLC. [MS[M+H]+: 562,29]

[0193] Exemplul 8: Prepararea Compusului 8

[0194]

[0195] 6,0 g (13,0 mmoli, 1,0 echivalent) de compus HMS5552 au fost dizolvaţi în diclormetan şi 493 mg (2,9 mmoli, 0,22 echivalenţi) de acid p-toluensulfonic au fost adăugaţi la 0 °C. 4,6 g (38,9 mmoli, 3,0 echivalenţi) de acetal dietilic al acetaldehidei au fost apoi adăugaţi prin picurare. Amestecul de reacţie a fost agitat la temperatura camerei timp de 96 de ore. Soluţia de reacţie a fost concentrată până la uscare, iar produsul brut a fost purificat prin cromatografie preparativă pentru a obţine 4,0 g de Compus 8 (63,1% randament, pulbere albă).

[0196] MS[M+H]+: 489,05; 1H-RMN (d6-DMSO, 400 MHz): δ 10,83(s, 1H), 7,62-7,67(m, 2H), 7,45-7,54(m, 2H), 7,35-7,39(m, 1H), 6,45-6,46(d, J=1,88, 1H), 4,90-4,98(m, 2H), 4,80(s, 1H), 4,60-4,64(d, J=18,48, 1H), 4,33-4,35(m, 1H), 4,24-4,20(d, J=18,48, 1H), 4,09-4,16(m, 2H), 3,80-3,84(m, 2H), 1,73-1,80(m,1H), 1,54-1,61(m, 1H), 1,40-1,49(m, 1H), 1,22-1,27(dd, J=13,70, J=4,74, 3H), 0,94-0,95(d, J=6,52, 3H), 0,90-0,92(d, J=6,32, 3H).

[0197] Exemplul 9: Test de stabilitate a compuşilor în fluidul gastric simulat (SGF)

[0198] Prepararea fluidului gastric simulat (SGF): Se dizolvă 0,04 g de NaCl şi 0,064 g de pepsină în 0,14 mL de HCl şi se adaugă suficient H₂O pentru a aduce volumul final la 20 mL. PH-ul soluţiei de testat a fost de aproximativ 1,20 ± 0,05.

[0199] Prepararea soluţiilor de lucru ale compusului de testare: Se adaugă 5 µL de soluţie stoc a compusului testat 30 mM la 745 µL de DMSO pentru a obţine o soluţie de lucru de 200 µM a compusului testat.

[0200] 1) Se introduc 2 µL de soluţie de lucru a compusului de testare 200 µM în godeurile corespunzătoare ale plăcilor T0, T60, T120, T360 şi T1440 (au fost preparate duplicate, n=2) cu 96 de godeuri adânci.

[0201] 2) Se transferă 198 µL de soluţie SGF în godeurile corespunzătoare de mai sus, cu excepţia T0, pentru a atinge 2 µM ca şi concentraţie finală a compusului testat pentru fiecare moment (60, 120, 360 şi 1440 de minute). Concentraţia finală de DMSO în amestecul de incubare a fost de 1%.

[0202] 3) Incubaţi probele la 37°C, 600 rpm pentru timpul stabilit.

[0203] 4) Probele la momentele de timp corespunzătoare (60, 120, 360 şi 1440 de minute) au fost prelevate la sfârşitul timpului de incubare şi amestecate imediat complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/ml de tolbutamidă (standard intern).

[0204] 5) 200 µL de supernatant a fost îndepărtat şi amestecat din nou complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern).

[0205] 6) Prepararea probelor T0: Se transferă 198 µL de soluţie SGF în godeul corespunzător după adăugarea a 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern) şi se amestecă complet. Apoi, 200 µL de supernatant au fost pipetaţi şi amestecaţi din nou complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern).

[0206] 7) Toate probele au fost centrifugate la 4000 rpm, 4°C, timp de 20 de minute.

[0207] 8) 60 µL de supernatant au fost pipetaţi şi amestecaţi cu 180 µL de apă ultrapură, iar amestecul a fost complet omogenizat pentru analiza LC-MS/MS.

[0208] Concentraţiile compuşilor testaţi şi ale compusului HMS5552 convertit au fost măsurate, iar rata rămasă/de generare în funcţie de timpul de incubare a fost reprezentată grafic pentru a evalua stabilitatea compuşilor testaţi în fluidul gastric simulat (SGF).

[0209] Condiţii LC-MS/MS:

[0210] LC: Shimadzu LC 30-AD,

[0211] MS: QTRAP 6500+,

[0212] Autoeşantionator: CTC PAL,

[0213] Fază mobilă: A: 0,1% acid formic în apă, B: 0,1% acid formic în acetonitril,

[0214] Coloană: ACQUITY UPLC Protein BEH C4 300 Å 2,1 * 50 mm Cod piesă 186004495,

[0215] Debit total: 600 µL/min,

[0216] Tip de scanare: monitorizare a reacţiilor multiple (MRM).

[0217] Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 2, Figura 1 şi Figura 2.

[0218] Tabelul 2 Date de stabilitate ale compuşilor testaţi în fluidul gastric simulat

ID-ul compusului

Moment de timp (ore)

Compus testat rămas (%)

Medicamentul iniţial HMS5552 (%)

Compusul 3

0

100,00

0,92

1

90,35

0,86

2

95,99

0,87

6

90,10

1,02

24

89,48

1,63

Compusul 7

0

100,00

0,39

1

103,14

0,44

2

104,44

0,53

6

102,68

0,49

24

108,07

0,72

[0220] Rezultatele din Tabelul 2, Figura 1 şi Figura 2 arată că respectiv Compusul 3 şi Compusul 7 au fost stabili în SGF timp de 24 de ore şi ambii s-au degradat doar uşor în medicamentul de bază HMS5552.

[0221] Exemplul 10: Test de stabilitate a compuşilor în fluid intestinal simulat (SIF)

[0222] Prepararea fluidului intestinal simulat (SIF): Se dizolvă 0,136 g de KH2PO4 şi 0,2 g de pancreatină cu apă şi se completează volumul final la 20 ml. PH-ul soluţiei de testat a fost de aproximativ 6,80 ± 0,05.

[0223] Prepararea soluţiei de lucru a compusului de testare: Se adaugă 10 µL de soluţie stoc a compusului de testare 10 mM la 490 µL de DMSO pentru a obţine o soluţie de lucru a compusului de testare 200 µM.

[0224] 1) Se introduc 2 µL de soluţie de lucru 200 µM în godeurile corespunzătoare ale plăcilor T0, T60, T120, T360 şi T1440 (au fost preparate duplicate, n=2) cu 96 de godeuri adânci.

[0225] 2) Se transferă 198 µL de soluţie SIF în godeurile corespunzătoare de mai sus, cu excepţia T0, pentru a atinge 2 µM ca şi concentraţie finală a compusului testat pentru fiecare moment (60, 120, 360 şi 1440 de minute). Concentraţia finală de DMSO în amestecul de incubare a fost de 1%.

[0226] 3) Incubaţi probele la 37°C, 600 rpm pentru timpul stabilit.

[0227] 4) Probele la momentele de timp corespunzătoare (60, 120, 360 şi 1440 de minute) au fost prelevate la sfârşitul timpului de incubare şi amestecate imediat complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/ml de tolbutamidă (standard intern).

[0228] 5) 200 µL de supernatant a fost îndepărtat şi amestecat din nou complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern).

[0229] 6) Prepararea probelor T0: Se transferă 198 µL de soluţie SIF în godeul corespunzător după adăugarea a 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern) şi se amestecă complet. Apoi, s-au pipetat 200 µL de supernatant şi s-au amestecat din nou complet cu 400 µL de acetonitril rece conţinând 200 ng/mL tolbutamidă (standard intern).

[0230] 7) Toate probele au fost centrifugate la 4000 rpm, 4°C, timp de 20 de minute.

[0231] 8) 60 µL de supernatant au fost pipetaţi şi amestecaţi cu 180 µL de apă ultrapură, iar amestecul a fost complet omogenizat pentru analiza LC-MS/MS.

[0232] Concentraţiile compuşilor testaţi şi ale compusului HMS5552 convertit au fost măsurate, iar rata rămasă/de generare în funcţie de timpul de incubare a fost reprezentată grafic pentru a evalua stabilitatea compuşilor testaţi în fluidul intestinal simulat (SIF).

[0233] Condiţii LC-MS/MS:

[0234] LC: Shimadzu LC 30-AD,

[0235] MS: API4000,

[0236] Autoeşantionator: CTC PAL,

[0237] Fază mobilă: A: 0,1% acid formic în apă, B: 0,1% acid formic în acetonitril,

[0238] Coloană: ACQUITY UPLC BEH C18 1,7 µm 2,1 × 50 mm Cod piesă 186002350,

[0239] Tip de scanare: monitorizare a reacţiilor multiple (MRM).

[0240] Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 3, Figura 3 şi Figura 4.

[0241] Tabelul 3 Date de stabilitate ale compuşilor testaţi în fluid intestinal simulat

ID-ul compusului

Moment de timp (ore)

Compus testat rămas (%)

Medicamentul iniţial HMS5552 (%)

Compusul 3

0

100,00

0,86

1

53,14

35,61

2

37,56

46,64

6

2,35

72,79

24

0,00

73,43

Compusul 7

0

100,00

2,36

1

25,13

73,25

2

3,50

97,05

6

4,88

98,51

24

0,00

103,39

[0243] Rezultatele din Tabelul 3, Figura 3 şi Figura 4 arată că respectiv Compusul 3 şi Compusul 7 au fost degradaţi extensiv în SIF, iar majoritatea au fost convertite în HMS5552.

[0244] Exemplul 11: Test metabolic simulat al compuşilor din intestinul uman S9

[0245] Prepararea tamponului fosfat (PB): Se dizolvă 73,21 g K2HPO4•3 H2O (grad AR) şi 10,78 g KH2PO4 (grad AR) în apă ultrapură pentru a aduce volumul final la 4000 mL şi concentraţia finală la 100 mM. PH-ul soluţiei finale de testare a fost ajustat la 7,40 ± 0,10 cu H3PO4/KOH.

[0246] Prepararea soluţiei de lucru a compusului de testare: 5 µL de soluţie stoc a compusului testat (10 mM în DMSO) au fost diluaţi cu 995 µL de acetonitril (ACN) pentru a obţine o soluţie de lucru a compusului testat (concentraţie intermediară a soluţiei: 50 µM, 99% ACN).

[0247] Principalele materiale ale testului sunt prezentate în Tabelul 4, iar parametrii componentelor de preparare a soluţiei de S9 intestinal uman (HIS9) sunt prezentaţi în Tabelul 5.

[0248] Tabelul 4 Materiale principale ale testului

Materiale

Informaţii despre produs

Sursă

HumanIS9(HIS9)

Nr. cat. H0610.IS9(NP) Nr. lot1710039

Xenotech

Acid D-glucaric-1,4-lactonă (100 mM)

S0375

Sigma

[0250] Tabelul 5 Parametrii componentelor de preparare a soluţiei intestinale S9 umane

Componentele amestecului intestinal S9 uman

Volum (µL)

Concentraţia soluţiei de lucru a compusului de testare

Concentraţia finală

HIS9 (4 mg-proteină/mL)

675

1,0 mg/ml

0,5 mg/ml

Acid D-glucaric-1,4-lactonă (100 mM)

270

10 mM

5 mM

100 mM PB

1755

-

-

Volum total

2700

-

-

[0252] O staţie de lucru automată Apricot a fost utilizată pentru a adăuga 50 µL/godeu de soluţie HIS9 în godeurile corespunzătoare ale tuturor plăcilor de reacţie (de control, T0, T5, T15, T30, T45, T60).

[0253] Folosind o staţie de lucru automată Apricot, s-au adăugat 2 µL/godeu de soluţie de lucru a compusului testat în godeurile corespunzătoare ale tuturor plăcilor de reacţie cu 96 de godeuri, cu excepţia probei de control (T0, T5, T15, T30, T45, T60).

[0254] O staţie de lucru automată Apricot a fost utilizată pentru a adăuga 48 µL/godeu de PB în godeurile corespunzătoare ale fiecărei plăci de reacţie (De control, T0, T5, T15, T30, T45, T60) pentru a începe reacţia.

[0255] Plăcile de reacţie au fost incubate la 37°C şi cronometrul a fost pornit. O staţie de lucru automată Apricot a fost utilizată pentru a adăuga 300 µL/godeu de soluţie de oprire (acetonitril rece conţinând 200 ng/ml tolbutamidă (standard intern)) în godeurile corespunzătoare ale fiecărei plăci de reacţie la momentul final corespunzător pentru a termina reacţia.

[0256] Fiecare placă a fost sigilată şi agitată timp de 10 minute. După agitare, fiecare placă a fost centrifugată la 4000 rpm şi 4°C timp de 20 de minute. După centrifugare, 100 µL de supernatant au fost transferaţi de pe fiecare placă de reacţie pe placa de bioanaliză corespunzătoare şi amestecaţi bine cu 300 µL de apă ultrapură.

[0257] Fiecare placă de bioanaliză a fost sigilată pentru analiza LC-MS/MS pentru a obţine concentraţia compuşilor testaţi şi a compusului HMS5552 convertit, astfel încât să se evalueze transformarea metabolică a compusului testat în intestinul uman S9.

[0258] Condiţii LC-MS/MS:

[0259] LC: Shimadzu LC 30-AD,

[0260] MS: API4000,

[0261] Autoeşantionator: CTC PAL,

[0262] Fază mobilă: A: 0,1% acid formic în apă, B: 0,1% acid formic în acetonitril,

[0263] Coloană: ACQUITY UPLC BEH C18 1,7 µm 2,1 × 50 mm Cod piesă 186002350,

[0264] Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 6.

[0265] Tabelul 6 Rezultatele simulării compusului testat în S9 intestinal uman

ID-ul compusului

Moment de timp (min)

HIS9

Compus testat rămas (%)

Medicamentul iniţial HMS5552 (%)

Compusul 3

0

100

1,1

5

0

80,0

15

0

77,2

30

0

79,8

45

0

81,2

60

0

90,5

Compusul 7

0

100

5,0

5

30,7

64,6

15

18,8

73,3

30

7,2

76,1

45

3,9

87,1

60

2,7

103,0

[0267] Rezultatele simulării S9 intestinal uman din Tabelul 6 arată că respectiv Compusul 3 şi Compusul 7 au fost bine metabolizaţi în S9 intestinal uman şi aproape tot a fost convertit în medicamentul de bază HMS5552 în decurs de 60 de minute. Compusul 3 a fost complet metabolizat şi convertit în medicamentul de bază HMS5552 în decurs de 5 minute.

[0268] Exemplul 12: Test folosind celule Caco-2 pentru a evalua bidirecţional permeabilitatea Compusului 3

[0269] Cultura celulelor Caco-2: Celulele Caco-2 (achiziţionate de la American Type Culture Collection, ATCC) au fost inoculate pe o folie de polietilenă (PET) sau pe o placă de cultură cu 96 de godeuri la o concentraţie de 1x105 celule/cm2. Mediul de cultură a fost înlocuit la fiecare 4 zile până la confluenţa celulară pentru a forma un monostrat celular în ziua 21 sau 28.

[0270] Testul de transport: Tamponul de transport utilizat în test a fost soluţia salină echilibrată Hanks (HBSS) conţinând 10 mM acid 2-[4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil]etansulfonic (HEPES) la un pH de 7,40 ± 0,05. Studiile de permeabilitate in vitro au fost efectuate cu Nadolol, Metoprolol şi digoxină ca permeabili model. Compusul testat 3 a fost evaluat bidirecţional cu concentraţii de testare de 2,00, 10,0 şi respectiv 30,0 µM (n=2). Digoxina a fost evaluată bidirecţional cu o concentraţie de testare de 10,0 µM (n=2). Nadololul şi Metoprololul au fost evaluate unidirecţional cu o concentraţie de testare de 2,00 µM (n=2). Concentraţia finală de DMSO în sistemul de incubare a fost ajustată la <1%.

[0271] Etape specifice:

[0272] 1) Placa a fost incubată timp de 2 ore în incubator cu CO22 la 37±1°C, cu 5% CO2 la umiditate saturată fără agitare.

[0273] 2) La sfârşitul incubării, toate probele au fost amestecate cu acetonitril conţinând standard intern şi centrifugate la 3200 g timp de 10 minute.

[0274] 3) Pentru compusul 3 din grupele 10,0 µM şi 30,0 µM, proba T0 şi proba din partea donorului au fost diluate de 10 ori cu supernatantul probei de control.

[0275] 4) Pentru Nadolol şi Metoprolol, 200 µL de supernatant au fost diluaţi cu 600 µL de apă ultrapură pentru analiza LC-MS/MS.

[0276] 5) Pentru digoxină şi compusul testat, 200 µL de supernatant au fost diluaţi cu 200 µL de apă ultrapură pentru analiza LC-MS/MS.

[0277] 6) Concentraţia Compusului 3, a medicamentului de bază HMS5552 şi a compusului de control din soluţia iniţială, soluţia din partea donorului şi soluţia din partea receptorului au fost determinate cantitativ prin raportul dintre aria vârfului substanţei testate şi standardul intern, prin LC-MS/MS.

[0278] Rezultatele testelor de permeabilitate ale compusului sunt prezentate în Tabelul 7.

[0279] Tabelul 7 Rezultatele testelor de permeabilitate ale Compusului 3

Concentraţia compusului 3 (µM)

Permeabilitatea aparentă medie Paplicaţie (10-6 cm/s)

Raportul de eflux

Rata medie de recuperare (%)

Rata medie de conversie la medicamentul iniţial HMS5552 (%)

A→B

B→A

A→B

B→A

A→B

B→A

2,00

0,02977

11,9

401

52,9

87,1

26,5

5,8

10,0

0,03187

12,0

376

37,5

81,6

37,4

5,6

30,0

0,04322

11,9

276

37,6

82,2

26,8

3,4

[0281] Rezultatele din Tabelul 7 arată că permeabilitatea Compusului 3 de la A la B este scăzută, în timp ce de la B la A este ridicată, ceea ce sugerează că este probabil ca respectiv Compusul 3 să fie substratul pentru transportorii de eflux.

[0282] Exemplul 13: Studii farmacocinetice

[0283] Optsprezece şobolani SD masculi au fost împărţiţi în trei grupe în funcţie de greutatea corporală (Grupul HMS5552, Grupul Compusului 3 şi Grupul Compusului 7). Fiecare grup a fost împărţit în 2 subgrupe (grupul cu bolus intravenos (IV) şi grupul cu gavaj (PO)). Grupul cu bolus intravenos (IV) a primit o doză de 10 mg/kg HMS5552, 10 mg/kg Compus 3 sau 10 mg/kg Compus 7 printr-o singură injecţie intravenoasă în bolus. Grupul cu gavaj (PO) a primit o doză de 30 mg/kg HMS5552, 30 mg/kg Compus 3 sau 30 mg/kg Compus 7 printr-o singură injecţie cu gavaj.

[0284] Probele de sânge integral (aproximativ 0,2 ml per punct temporal) au fost colectate la orele premergătoare administrării dozei (0), 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12 şi 24 de ore după administrare, prin puncţie în vena jugulară. Toate probele de sânge au fost transferate imediat în tuburi de microcentrifugă comerciale, etichetate şi răcite, conţinând 4 µL de 0,5M EDTA-K2 şi 10 µL de stabilizator pentru cocktail. Probele au fost plasate pe gheaţă umedă până la centrifugare (în decurs de 30 de minute). Probele de plasmă au fost apoi preparate prin centrifugarea probelor de sânge la aproximativ 4°C, 3200×g timp de 10 minute. Supernatantul de plasmă a fost pipetat, apoi congelat rapid peste gheaţă carbonică şi păstrat la -60°C sau la o temperatură mai scăzută până la analiza LC-MS/MS.

[0285] Stabilizatorul pentru cocktail a fost preparat conform următorului Tabel 8:

[0286] Tabelul 8 Formula stabilizatorului pentru cocktailuri

Componente pentru stabilizatorul de cocktailuri

Concentraţia stocului de componente

Solvent stoc

Volum

Concentraţia componentelor

Raportul stabilizatorului de cocktail cu proba de sânge integral

Concentraţia finală a componentelor

Acid citric

600 mM

Apă

0,5 ml

150 mM

1:20 (v:v), de exemplu, 0,1 ml stabilizator pentru cocktail + 2,0 ml sânge integral

7,5 mM

PMSF

400 mM

DMSO

0,5 ml

100 mM

5 mM

NaF

400 mM

Apă

0,5 ml

100 mM

5 mM

Diclorvos

400 mM

Apă

0,5 ml

100 mM

5 mM

[0288] Concentraţiile plasmatice au fost supuse unei analize farmacocinetice non-compartimentale utilizând programul software WinNonlin™ (versiunea 6.3). Regula liniară/logaritmică trapezoidală a fost aplicată pentru obţinerea parametrilor PK, iar rezultatele sunt prezentate în Tabelul 9.

[0289] Tabelul 9 Rezultate farmacocinetice

grup

grup #1

grup #2

grup #3

Compusul testat

HMS5552

Compusul 3

Compusul 7

Traseu

IV (medicamentul parental)

PO (medicament parental)

IV (promedicament)

PO (promedicament)

IV (medicamentul parental)

PO (medicament parental)

IV (promedicament)

PO (promedicament)

IV (medicamentul parental)

PO (medicament parental)

Cmax (ng/ml)

/

2459

/

0,973

/

1346

/

27,0

/

1973

Cmax Raport (%, Promedicament/Substanţă parentală)

/

/

/

0,07

/

/

/

1,4

/

/

Cmax Raport (%, substanţă parentală convertită din promedicament/substanţă parentală în grupul 1)

/

/

/

/

/

67,2**

/

/

/

97,4**

Tmax (h)*

/

1 [1-1]

/

0,25 [0,25-0,25]

/

1 [0,5-1]

/

1 [0,083-2]

/

2 [1-2]

AUC0-ultimul (h·ng/mL)

5049

7737

576

1,4

3422

5063

382

31,6

2993

6503

AUCinformaţii (h·ng/mL)

5051

7758

577

2,05

3423

5069

383

ND

2997

6521

Raportul AUC (%, Promedicament/Substanţă parentală)

/

/

/

0,04

/

/

/

0,5

/

/

Raportul AUC (%, substanţă parentală convertită din promedicament/substanţă parentală în grupul 1)

/

/

/

/

/

80,2**

/

/

/

102,1**

CL (ml/min/kg)

33,1

/

290

/

/

/

437

/

/

/

Vd (L/kg)

1,66

/

2,49

/

/

/

7,55

/

/

/

T1/2 (h)*

3,51

3,34

0,33

/

3,59

2,63

1,64

/

4,34

3,25

Biodisponibilitate (%)

/

51,2

/

0,08

/

/

/

2,8

/

/

*: Tmax este mediana [Min, Max]; **: convertit în funcţie de densitatea molară (greutatea moleculară a HMS5552, Compusului 3 şi Compusului 7 este 462,93, 568,03 şi respectiv 562,06).

[0292] Rezultatele din Tabelul 9 arată că respectiv Compusul 3 şi Compusul 7 sunt metabolizaţi foarte rapid la şobolani prin injecţie intravenoasă. Când sunt administrate oral, expunerile (Cmax, raportul Cmax, AUC, raportul AUC) la Compusul 3 şi Compusul 7 au fost comparabile cu cele ale medicamentului de bază HMS5552. Rezultatele studiului de mai sus arată că respectiv Compusul 3 şi Compusul 7 sunt metabolizaţi în tractul gastrointestinal şi enterocite în HMS5552, care este absorbit şi apoi intră în sistemul circulator.

[0293] Exemplul 14: Studiu farmacodinamic

[0294] Pentru a studia efectul de scădere a glicemiei al HMS5552, Compusului 3, Compusului 6 şi Compusului 7 la şoareci C57BL/6J.

[0295] Metodă

[0296] 104 Şoarecii C57BL/6J au fost împărţiţi aleatoriu în 13 grupe în funcţie de greutatea corporală, câte 8 şoareci per grup. Primului grup i s-a administrat solvent vehicul (5 mL/kg, PO) ca grup de control, celelalte grupuri au primit o concentraţie corespunzătoare de compuşi testaţi (5 mL/kg, PO). Nivelurile de doze mici, medii şi mari ale grupurilor de tratament cu Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 sunt echivalente (echimolare) cu grupele HMS5552 cu 5, 15 şi 40 mg/kg. Testul de toleranţă orală la glucoză (TTGO) a fost efectuat la 1 oră după administrarea compuşilor testaţi. Glicemia (GB) a fost măsurată la -60 min (înainte de administrare), 0 min (înainte de administrare), 15 min, 30 min, 60 min şi 120 min după tratamentul cu glucoză. Probele de sânge (40 µl) au fost colectate din venele cozii la 0 min (înainte de administrare) şi 15 min (post-administrare) pentru a separa plasma pentru detectarea insulinei.

[0297] Prelucrarea şi analiza datelor

[0298] Toate datele au fost transferate într-o foaie de calcul Excel. Glicemia a fost exprimată în mg/dL. Toate valorile au fost exprimate ca medie ± SEM. Semnificaţia diferenţelor dintre grupuri a fost evaluată prin ANOVA cu o singură direcţie sau ANOVA cu două direcţii, urmată de testul Dunnett pentru comparaţii multiple sau testul Tukey pentru comparaţii multiple utilizând GraphPad Prism 8. O valoare p mai mică de 0,05 este considerată semnificativă statistic.

[0299] Rezultate

[0300] Greutatea corporală (GC): În timpul experimentului, valorile GC ale tuturor grupelor sunt similare, nefiind constatate diferenţe semnificative între grupuri.

[0301] Rezultatul TTGO este prezentat în Figura 5. Figura 5 arată că valorile glicemiei (BG) ale tuturor grupurilor la -60 min (înainte de administrare) sunt similare, nefiind constatate diferenţe semnificative între grupuri.

[0302] După tratamentul cu HMS5552, Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7, valorile glicemiei (GB) ale tuturor grupurilor de tratament la 0 min (pre-glucoză) au fost în general mai mici decât cele ale grupului de control cu substanţă placebo, existând o relaţie doză-răspuns.

[0303] După tratamentul cu glucoză, valorile glicemiei (GB) ale fiecărui grup au crescut semnificativ. Valorile GB ale grupului tratat cu HMS5552-40 mg/kg au fost semnificativ mai mici decât cele ale grupului de control tratat cu substanţă placebo la 30 min, 60 min şi 120 min. Valorile GB ale grupului tratat cu Compus 3-49,1 mg/kg au fost semnificativ mai mici decât cele ale grupului de control tratat cu substanţă placebo la 15 min, 30 min, 60 min şi 120 min şi au fost semnificativ mai mici decât cele ale grupului tratat cu HMS5552-40 mg/kg la 30 min, 60 min şi 120 min. Valorile GB ale grupului tratat cu Compus 6-46,1 mg/kg şi Compus 7-48,6 mg/kg au fost semnificativ mai mici decât cele ale grupului tratat cu HMS5552-40 mg/kg la 15 min, 30 min, 60 min şi 120 min.

[0304] AUC0-120 min din toate grupurile tratate cu doze mici, medii şi mari de HMS5552, Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 au fost semnificativ mai mici decât grupul de control tratat cu substanţă placebo, existând o relaţie doză-răspuns. AUC0-120 min din grupurile de tratament cu Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 la niveluri de doze medii şi mari au fost semnificativ mai mici decât grupurile corespunzătoare cu HMS5552 (P<0,01).

[0305] Rezultatul TTGO arată că toţi compuşii testaţi au prezentat un efect bun de scădere a glicemiei la şoareci.

[0306] Rezultatul testului de insulină este prezentat în Figura 6. Figura 6 arată că nivelurile de insulină ale grupului de control tratat cu substanţă placebo au fost de 0,13±0,02 (µg/L) la 0 min şi de 0,50±0,05 (µg/L) la 15 min. Nivelurile de insulină ale grupurilor tratate cu HMS5552 au fost uşor mai mari decât cele ale grupului de control tratat cu substanţă placebo la 0 min şi 15 min, fără diferenţe semnificative. Nivelurile de insulină ale grupului tratat cu Compus 3-49,1 mg/kg, grupului tratat cu Compus 6-46,1 mg/kg şi grupului tratat cu Compus 7-48,6 mg/kg au fost semnificativ mai mari decât cele ale grupului de control tratat cu substanţă placebo şi grupului tratat cu HMS5552-40 mg/kg la 0 min. Nivelurile de insulină ale grupului tratat cu Compus 3-18,4 mg/kg, grupului tratat cu Compus 3-49,1 mg/kg, grupului tratat cu Compus 6-46,1 mg/kg, grupului tratat cu Compus 7-18,2 mg/kg şi grupului tratat cu Compus 7-48,6 mg/kg au fost semnificativ mai mari decât cele ale grupului de control la 15 minute. Nivelurile de insulină ale grupului tratat cu Compus 3-18,4 mg/kg, grupului tratat cu Compus 6-46,1 mg/kg şi grupului tratat cu Compus 7-48,6 mg/kg au fost semnificativ mai mari decât cele ale grupurilor corespunzătoare de HMS5552 la 15 minute.

[0307] Acest studiu arată că toţi compuşii testaţi ai prezentei invenţii au un efect bun de scădere a glicemiei la şoarecii C57BL/6J. Compusul 3, Compusul 6 şi Compusul 7 duc la o secreţie crescută de insulină şi la un efect de scădere a glicemiei mai mare, în comparaţie cu HMS5552.

Claims (15)

1. Un compus cu Formula (II-1), (II-2), (II-3) sau (II-4) sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia:sauîn care: R3 este selectat dintre cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R; R este selectat independent dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, - L-C(O)ORa, -L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6; în care m este 1 sau 2; Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri; şi L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

2. Compusul conform revendicării 1, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în care R3 este selectat dintre aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 6 membri, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R; R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH, -NH2, -C(O)OH, -C(O)NH2, -S(O)mOH, -S(O)mNH2, alchil C1-6, haloalchil C1-6, alchenil C2-6 sau alchinil C2-6; şi unde m este 1 sau 2.

3. Compusul conform revendicării 1, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în care R3 este selectat dintre fenil, naftil, pirolil, furil, tienil, imidazolil, pirazolil, oxazolil, izoxazolil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, oxadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil sau tetrazinil, care este opţional substituit cu 1, 2, 3, 4 sau 5 grupări R; R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH, -NH2, -C(O)OH, -C(O)NH2, -S(O)mOH sau -S(O)mNH2; şi unde m este 1 sau 2.

4. Compusul conform revendicării 1, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în care R3 este selectat dintre fenil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil sau tetrazinil, care este opţional substituit cu 1, 2 sau 3 grupări R; şi R este selectat independent dintre H, halogen, -CN, -NO2, -OH, -SH sau -NH2.

5. Un compus cu formula (III-1), (III-2), (III-3) sau (III-4) sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care compusul este:sauîn care: R9 este selectat dintre H, -L-halogen, -L-CN, -L-NO2, -L-ORa, -L-SRa, -L-NRbRc, -L-C(O)ORa, - L-C(O)NRbRc, -L-S(O)mORa, -L-S(O)mNRbRc, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural; în care m este 1 sau 2; Ra este selectat independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; Rb şi Rc sunt selectaţi independent dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10 sau heteroaril cu 5 până la 10 membri; alternativ, Rb şi Rc sunt luaţi împreună cu atomul de N pentru a forma heterociclil cu 3 până la 7 membri; şi L este selectat dintre o legătură chimică, -alchilen C1-6-, -alchenilen C2-6- sau -alchinilen C2-6-.

6. Compusul conform revendicării 5, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care R9 este selectat dintre H, alchil C1-6, alchenil C2-6, alchinil C2-6, haloalchil C1-6, cicloalchil C3-7, heterociclil cu 3 până la 7 membri, aril C6-10, heteroaril cu 5 până la 10 membri sau o catenă laterală a unui aminoacid natural.

7. Compusul conform revendicării 5, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care R9 este catena laterală a aminoacizilor naturali selectaţi din grupul format din glicină, alanină, valină, leucină, izoleucină, fenilalanină, triptofan, tirozină, acid aspartic, asparagină, acid glutamic, lizină, glutamină, metionină, serină, treonină, cisteină, histidină şi arginină.

8. Compusul conform revendicării 5, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care R9 este catena laterală a alaninei (Me) sau catena laterală a valinei (iPr).\tab

9. Compusul conform revendicării 1 sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care compusul este:

10. Compusul conform revendicării 9 sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în care compusul este:\tab

11. Compusul conform revendicării 5 sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care compusul este:

12. Compusul conform revendicării 5 sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care compusul este:

13. Compusul conform revendicării 11 sau 12, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, în care sarea acceptabilă farmaceutic a compusului este:\tab

14. O compoziţie farmaceutică, care cuprinde compusul conform oricăreia dintre revendicările 1-13 sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia; şi opţional unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.\tab

15. Un compus aşa cum este definit în oricare dintre revendicările 1-13, sau un produs marcat izotopic, un enantiomer, un diastereoizomer sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, sau o compoziţie farmaceutică aşa cum este definită în revendicarea 14, pentru utilizare într-o metodă de tratare sau prevenire a uneia sau mai multor boli selectate dintre diabet zaharat de tip I, diabet zaharat de tip II, toleranţă alterată la glucoză, glicemie à jeun alterată, hiperglicemie, hiperglicemie postprandială, supraponderalitate, obezitate, hipertensiune arterială, rezistenţă la insulină şi sindrom metabolic, opţional în care tratarea diabetului zaharat de tip I sau a diabetului zaharat de tip II cuprinde vindecarea diabetului, inducerea remisiunii sau regresia diabetului.