MD4200280T2 - Derivați de fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il-etan-1-onă în calitate de modulatori alosterici pozitivi ai receptorului de dopamină D1 - Google Patents

Derivați de fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il-etan-1-onă în calitate de modulatori alosterici pozitivi ai receptorului de dopamină D1 Download PDF

Info

Publication number
MD4200280T2
MD4200280T2 MDE20230653T MDE20230653T MD4200280T2 MD 4200280 T2 MD4200280 T2 MD 4200280T2 MD E20230653 T MDE20230653 T MD E20230653T MD E20230653 T MDE20230653 T MD E20230653T MD 4200280 T2 MD4200280 T2 MD 4200280T2
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
methyl
compound
mmol
disease
fluoro
Prior art date
Application number
MDE20230653T
Other languages
English (en)
Inventor
Junliang Hao
Richard D Johnston
Gregory Lawrence Lackner
Erik J Hembre
Kjell A Svensson
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of MD4200280T2 publication Critical patent/MD4200280T2/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/12—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/14—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring other than aralkyl radicals
    • C07D217/16—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring other than aralkyl radicals substituted by oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Invenţia furnizează anumiţi compuşi înrudiţi cu (fenil)-3,4-dihidroizochinolin2(1H)-il)etan-1-ona, cu formula I, ca modulatori alosterici pozitivi D1 (PAM-uri), şi compoziţii farmaceutice ale acestora. Invenţia furnizează suplimentar metode de utilizare a compusului cu formula I, pentru a trata anumite simptome ale tulburărilor dopaminergice ale CNS incluzând boala Parkinson, Schizofrenia, ADHD sau boala Alzheimer.

Description

Invenţia furnizează anumiţi compuşi înrudiţi cu fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)il)etan-1-ona, compoziţii farmaceutice ale acestora, şi compuşi pentru utilizare în metode pentru tratamentul tulburărilor dopaminergice ale CNS, incluzând boală Parkinson, boală Alzheimer, schizofrenie, şi tulburare de hiperactivitate cu deficit de atenţie (ADHD).
Multe medicamente utilizate în prezent, funcţionează direct sau indirect prin receptorii de dopamină. Aceştia includ agonişti de dopamină şi precursorii de dopamină LDOPA pentru boala Parkinson, eliberatorii de dopamină pentru tulburarea cu deficit de atenţie şi narcolepsie, şi inhibitori ai reabsorbţiei de dopamină pentru depresie. Receptorul D1 are un rol important în activitatea motorie şi recompensare, şi un rol special în menţinerea funcţiilor cognitive superioare pentru memoria de lucru, atenţie, şi funcţii executive (Amsten AF, Cereb. Cortex (2013) 123, 2269-2281). Încercările de a dezvolta agonişti D1 pentru utilizare clinică nu au avut până acum succes, dând impuls căutării de abordări alternative pentru creşterea activităţii receptorului D1.
O astfel de abordare este de a identifica un potenţiator alosteric, cunoscut de asemenea ca modulator alosteric pozitiv sau PAM, al receptorului D1 de dopamină. (Svensson K, şi colab., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). Modulatorii alosterici sunt agenţi care fie potenţează (Modulator Alosteric Pozitiv, sau PAM), sau fie inhibă (Modulator Alosteric Negativ, sau NAM) efectul ligandului natural prin legarea la un situs care este distinct faţă de situsul de legare ortosteric pe receptor (situs de legare alosteric). Prin creşterea afinităţii dopaminei pentru receptorul D1, un potenţiator D1 poate amplifica răspunsul la dopamina endogenă, crescând tonusul D1 când şi unde este eliberată dopamina. Acest mod de activitate este în contrast cu un agonist D1, care va activa toţi receptorii D1 la care el are acces, atâta timp cât este prezent. În modelele de cogniţie şi activitate locomotorie pe animale, agoniştii D1 prezintă relaţii de răspuns la doză în formă de clopot, care sunt datorate probabil suprastimulării la doze mai ridicate. Unii agonişti D1, prezintă de asemenea dezvoltare rapidă de toleranţă din cauza activării constante a receptorului D1. În contrast, deoarece un potenţiator D1 ar fi dependent de tonusul endogen şi supus unui control normal al feedback-ului, el poate avea o tendinţă mult mai scăzută pentru suprastimulare. Dată fiind implicarea semnalizării dopaminei şi a receptorului D1 în aceste funcţii ale sistemului nervos central, un potenţiator D1 care poate creşte activitatea receptorului D1, poate furniza un agent alternativ şi/sau îmbunătăţit pentru tratamentul anumitor boli legate de dopamină.
Boala Parkinson este o tulburare neurodegenerativă cronică, progresivă, caracterizată prin pierderea neuronilor dopaminergici din creier. Boala Parkinson se manifestă prin tremur de repaus împreună cu alte simptome motorii (de exemplu bradikinezie şi instabilitate posturală) şi simptome nemotorii (de exemplu depreciere cognitivă, tulburări de somn, şi depresie). Terapiile curente pentru tratamentul bolii Parkinson includ administrarea de precursori neselectivi ai dopaminei cum ar fi levodopa, şi agonişti ai receptorului de dopamină. Terapiile cu agonişti ai receptorului de dopamină care acţionează direct pot fi de asemenea asociate cu tulburări de control a impulsului, psihoză, şi agravarea cogniţiei, din cauza afinităţii lor relativ mai mari pentru receptorii D2. Schizofrenia este o boală debilitantă cu mecanisme patologice complexe. O componentă a schizofreniei este deprecierea cognitivă, care poate fi asociată cu o deficienţă a activării receptorului D1 sau cu o subreglare a receptorului D1. S-a emis ipoteza că activarea lui D1, selectivă faţă de modularea lui D2, poate fi eficientă în tratamentul deprecierii cognitive asociată cu schizofrenia. Boala Alzheimer este o tulburare neurodegenerativă cronică, progresivă, caracterizată prin pierderea neuronilor şi sinapselor din cortexul cerebral şi din anumite regiuni subcorticale. Progresul bolii include deprecierea cognitivă, despre care se poate emite ipoteza că se datorează, cel puţin parţial activării reduse a receptorului D1; astfel încât activarea lui D1 poate furniza beneficiu terapeutic în tratamentul deprecierii cognitive asociate cu boala Alzheimer. ADHD este o tulburare de neurodezvoltare caracterizată prin dificultăţi de concentrarea atenţiei, activitate excesivă, sau dificultate în controlarea comportamentului potrivit vârstei persoanei. S-a emis ipoteza că activarea lui D1 poate furniza beneficiu terapeutic în tratamentul ADHD. Astfel, rămâne o necesitate nesatisfăcută semnificativă pentru tratamentul sigur şi eficient al deprecierilor cognitive sau al altor deprecieri neurologice asociate cu schizofrenia, boala Parkinson, boala Alzheimer şi/sau ADHD, cum ar fi modulatorii alosterici pozitivi ai receptorului D1 de dopamină alternativi şi/sau îmbunătăţiţi (PAM-uri ale D1).
WO 2014/193781 citează anumiţi compuşi 3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il ca PAMuri ale D1 pentru tratamentul deprecierii cognitive asociate cu boala Parkinson, boala Alzheimer, schizofrenia, depresia sau ADHD.
Prezenta invenţie furnizează anumiţi noi compuşi care sunt PAM-uri selective ale receptorului de dopamină 1 (D1) şi demonstrează o combinaţie avantajoasă de proprietăţi farmacologice, cum ar fi potenţierea semnalizării receptorului D1 uman ca răspuns la dopamină, disponibilitate orală ridicată in vivo, şi eficacitate in vivo în activarea locomotorie a animalelor care sunt adaptate la mediul înconjurător. Ca atare, se crede că compuşii prezentei invenţii sunt utili în tratamentul bolii Parkinson, bolii Alzheimer, schizofreniei, şi/sau ADHD-ului. Compuşii prezentei invenţii pot furniza un tratament alternativ pentru astfel de tulburări. Invenţia este definită în setul anexat de revendicări.
Prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I:
în care:
R1 este
R2 este -F sau -Cl;
R3 este -F sau -Cl; şi R4 este -H sau -F; cu condiţia că atunci când R1 este
atunci R4 este -F.
Compuşii cu formula I sunt în special utili în compuşi pentru utilizare în metodele de tratament ale invenţiei, dar sunt preferate anumite configuraţii. Următoarele paragrafe descriu astfel de configuraţii preferate. Deşi prezenta invenţie aşa cum este concretizată în formula I are în vedere toţi enantiomerii şi diastereomerii individuali, precum şi amestecurile de enantiomeri şi/sau diastereomeri ale respectivilor compuşi, inclusiv racemaţi, sunt preferaţi compuşii cu configuraţie absolută cum s-a stabilit mai jos. Se înţelege că aceste preferinţe sunt aplicabile compuşilor pentru utilizare în metodele de tratament şi compuşilor noi ai invenţiei.
O realizare particulară cu formula I este un compus cu formula Ia:
în care:
R1 este
R2 este -F sau -Cl;
R3 este -F sau -Cl; şi R4 este -H sau -F; cu condiţia că atunci când R1 este
atunci R4 este -F.
O realizare particulară cu formula I este un compus cu formula Ib:
care în forma de bază liberă poate fi denumită de asemenea 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etanonă.
În plus, prezenta invenţie furnizează o compoziţie farmaceutică cuprinzând un compus cu formula I, Ia, şi/sau Ib, şi un purtător acceptabil farmaceutic, diluant sau excipient.
Următoarele realizări particulare sunt compuşi cu formula I sau Ia. Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
Prezenta invenţie furnizează un compus care este
În plus, prezenta invenţie furnizează un compus din una dintre realizările particulare ale listei precedente de imediat mai sus, şi un purtător acceptabil farmaceutic, diluant sau excipient. De exemplu cocristalele sunt avute în vedere pentru realizările compusului descris aici.
Compuşii prezentei invenţii sunt PAM-uri selective ale receptorului de dopamină 1 (D1) cu activitate minimală la recpetorul de dopamină 2 (D2). Compuşii din prezenta invenţie pot furniza în plus beneficiile lor terapeutice în timp ce evită riscurile interacţiunii medicament-medicament. Ca atare, se crede că compuşii prezentei invenţii sunt utili pentru tratamentul afecţiunilor în care activitatea redusă a D1 joacă un rol, şi activarea lui D2 nu este dorită, cum ar fi boala Parkinson şi schizofrenia, incluzând ameliorarea anumitor simptome asociate, cum ar fi simptomele motorii şi deprecierea cognitivă asociate cu boala Parkinson şi deprecierea cognitivă şi simptomele negative asociate cu schizofrenia, ca de exemplu deprecierea cognitivă uşoară sau demenţa. Se crede de asemenea că compuşii prezentei invenţii sunt utili în îmbunătăţirea simptomelor motorii în boala Parkinson ca monoterapie sau în combinaţie cu alte terapii. Se crede de asemenea că, compuşii prezentei invenţii sunt utili în tratarea anumitor simptome ale bolii Alzheimer cum ar fi deprecierea cognitivă, ca de exemplu deprecierea cognitivă uşoară. În plus, se crede că, compuşii prezentei invenţii sunt utili în tratarea anumitor simptome ale ADHD. Se crede de asemenea că, compuşii prezentei invenţii sunt utili în tratarea tulburărilor dopaminergice ale CNS care include boala Parkinsons, boala Alzheimer, demenţa cu corpi Lewy (LBD), demenţa vasculară, schizofrenia, ADHD, depresia, autismul, durerea musculoscheletală cronică, fibromialgia, tulburările de depreciere cognitivă, tulburările de somn, somnolenţa excesivă pe timpul zilei, narcolepsia, tulburările muncii în schimburi, leziune cerebrală traumatică, encefalopatie traumatică cronică, obezitatea şi reglarea apetitului, tulburările de dispoziţie, letargia, apatia, şi tulburările de dependenţă.
În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I, pentru utilizare într-o metodă de terapie. În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula Ia, pentru utilizare într-o metodă de terapie. În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula Ib, pentru utilizare într-o metodă de terapie.
Într-un alt aspect, prezenta invenţie furnizează o compoziţie farmaceutică cuprinzând compusul cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi purtători, diluanţi, sau excipienţi acceptabili farmaceutic. Mai mult, acest aspect al invenţiei furnizează o compoziţie farmaceutică pentru utilizare într-o metodă pentru tratarea bolii Parkinson, ca de exemplu, deprecierea cognitivă asociată cu boala Parkinson, cuprinzând compusul cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic, purtători, sau diluanţi. Într-o altă realizare a acestui aspect al invenţiei, este prevăzută o compoziţie farmaceutică pentru utilizare într-o metodă pentru atenuarea deprecierii motorii asociate cu boala Parkinson, cuprinzând un compus cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic, purtători, sau diluanţi.
Într-o altă realizare a acestui aspect al invenţiei, este prevăzută o compoziţie farmaceutică pentru utilizare într-o metodă pentru tratarea bolii Alzheimer, ca de exemplu atenuarea deprecierii cognitive asociate cu boala Alzheimer, cuprinzând un compus cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic, purtători, sau diluanţi.
O altă realizare a acestui aspect al invenţiei furnizează o compoziţie farmaceutică pentru utilizare într-o metodă pentru tratarea schizofreniei, ca de exemplu atenuarea deprecierii cognitive asociate cu schizofrenia, cuprinzând compusul cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic, purtători, sau diluanţi.
O altă realizare din prezenta invenţie furnizează o compoziţie farmaceutică pentru utilizare într-o metodă pentru tratarea ADHD-ului, cuprinzând compusul cu formula I, Ia sau Ib, şi unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic, purtători, sau diluanţi.
Într-o realizare a acestui aspect, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul bolii Parkinson. Întro realizare particulară invenţia furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul deprecierii cognitive asociate cu boala Parkinson. Într-o altă realizare particulară, invenţia furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru atenuarea deprecierii motorii asociate cu boala Parkinson.
În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul schizofreniei, ca de exemplu în tratamentul deprecierii cognitive asociate cu schizofrenia.
În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul ADHD-ului.
În plus, prezenta invenţie furnizează un compus cu formula I, Ia sau Ib, pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul bolii Alzheimer, ca de exemplu în tratamentul deprecierii cognitive asociate cu boala Alzheimer.
În timp ce este posibilă administrarea compuşilor utilizaţi în metode direct, fără nici o formulare, compuşii sunt uzual administraţi sub formă de compoziţii farmaceutice cuprinzând compusul cu formula I, Ia sau Ib, ca un ingredient activ, şi cel puţin un purtător acceptabil farmaceutic, diluant şi/sau excipient. Aceste compoziţii pot fi administrate pe o varietate de căi, incluzând orală, sublinguală, nazală, subcutanată, intravenoasă, şi intramusculară. Astfel de compoziţii farmaceutice şi procedee pentru prepararea lor sunt bine cunoscute în domeniu. Vezi, de exemplu, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia, ed., a 21-a ed., Lippincott Williams & Wilkins Co., 2005).
Compoziţiile sunt formulate preferabil într-o formă de dozare unitară, fiecare dozaj conţinând de la aproximativ 0,5 până la aproximativ 800 mg de ingredient activ. Termenul
„formă de dozare unitară» se referă la unităţi discrete fizic adecvate ca dozaje unitare pentru subiecţii umani şi alte mamifere, fiecare unitate conţinând o cantitate predeterminată de material activ calculată pentru a produce efectul terapeutic dorit, în asociere cu cel puţin un purtător adecvat acceptabil farmaceutic, diluant şi/sau excipient. Se va înţelege că, cantitatea compusului de fapt administrat va fi determinată de către un medic, în lumina circumstanţelor relevante, incluzând afecţiunea care trebuie tratată, calea de administrare aleasă, compusul actual administrat, vârsta, greutatea, şi răspunsul pacientului individual, şi severitatea simptomelor pacientului. Se are în vedere că compusul invenţiei, ca de exemplu într-o compoziţie farmaceutică a invenţiei, va fi utilizat pentru a trata boala Alzheimer, boala Parkinson şi/sau schizofrenia, ca de exemplu tratamentul deprecierii cognitive uşoare asociate cu aceste boli, prin administrare cronică.
Un compus din prezenta invenţie poate fi pentru utilizare în combinaţie cu alte medicamente care sunt utilizate în tratamentul sau ameliorarea unei tulburări dopaminergice a CNS. Astfel de alte medicamente pot fi administrate, pe o cale şi într-o cantitate utilizată în mod obişnuit, prin urmare, simultan sau secvenţial cu un compus din prezenta invenţie. De exemplu, alte ingrediente active eficiente în tratamentul bolii Parkinson care pot fi combinate cu un compus din prezenta invenţie, includ, dar nu sunt limitate la: (a) precursori de dopamină cum ar fi levodopa; melevodopa, şi etilevodopa; şi
(b) agonişti de dopamină, incluzând pramipexol, ropinirol, apomorfină, rotigotină, bromocriptină, cabergolină, şi pergolidă, (c) inhibitori de oxidază monoamină, incluzând selegilină şi rasagilină, (d) inhibitori ai COMT, incluzând tolcaponă şi entacaponă, (e) inhibitori ai esterazei acetilcolină, incluzând rivastigmină şi donepezil, (f) antidepresive, incluzând sertralină, citalopram, mirtazapină şi trazodonă. În plus, de exemplu, alte ingrediente active eficiente în tratamentul bolii Alzheimer care pot fi combinate cu un compus din prezenta invenţie, includ, dar nu sunt limitate la: inhibitori de acetilcolinesterază incluzând rivastigmină şi donepezil, un antagonist al NMDA incluzând memantină, anumite medicamente antipsihotice incluzând risperidonă, chetiapină, aripiprazol, olanzapină şi pimavanserin, şi antidepresive incluzând sertralină, citalopram, mirtazapină şi trazodonă.
Aşa cum s-a utilizat în acest document, termenul „pacient» se referă la un mamifer, ca de exemplu un om, care are nevoie de tratament pentru o tulburare sau boală. Un om este un pacient preferat. Aşa cum s-a utilizat în acest document, pacienţii care trebuie să fie trataţi cu compuşii prezentei invenţii suferă de o tulburare dopaminergică a CNS, şi ca atare împărtăşesc aspecte etiopatologice prin aceea că se cunoaşte că tulburările semnalizării de dopamină contribuie la aceste boli. Aşa cum s-a utilizat în acest document, tulburările dopaminergice ale CNS includ boala Parkinsons, boala Alzheimer, demenţa cu corpi Lewy (LBD), demenţa vasculară, schizofrenia, ADHD, depresia, autismul, durerea musculoscheletală cronică, fibromialgia, tulburările de depreciere cognitivă, tulburările de somn, somnolenţa excesivă pe timpul zilei, narcolepsia, tulburarile muncii în schimburi, leziunea crebrală traumatică, encefalopatia traumatică cronică, obezitatea şi reglarea apetitutului, tulburările de dispoziţie, letargia, apatia, şi tulburările de dependenţă. Identificarea pacienţilor cu aceste tulburări dopaminergice ale CNS poate fi obţinută prin metode stabilite cunoscute specialistului calificat.
Un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un precursor de dopamină în tratamentul unei tulburări dopaminergice la un pacient. De exemplu, un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un precursor de dopamină în tratamentul bolii Parkinson la un pacient.
Un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un precursor de dopamină în tratamentul bolii Alzheimer la un pacient.
Un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un agonist de dopamină în tratamentul unei tulburări dopaminergice la un pacient. De exemplu, un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un agonist de dopamină în tratamentul bolii Parkinson la un pacient.
Un compus cu formula I, Ia, sau Ib poate fi utilizat în combinaţie simultană, separată, sau secvenţială cu un agonist de dopamină în tratamentul bolii Alzheimer la un pacient.
În realizările invenţiei, un pacient este un om care a fost diagnosticat ca având un risc medical, afecţiune sau tulburare, cum ar fi o tulburare dopaminergică a CNS, care are nevoie de tratament cu un regim de dozare descris aici. În acele cazuri unde tulburările care pot fi tratate cu metodele divulgate sunt cunoscute prin clasificări stabilite şi acceptate, cum ar fi AD, PD, LBD, clasificările acestora pot fi găsite în diferite texte medicale bine cunoscute. De exemplu, în prezent, ediţia a 5-a a Manualului de diagnoză şi statistică a tulburărilor mentale (DSM-5), furnizează o unealtă de diagnoză pentru identificarea multora dintre tulburările descrise aici. De asemenea, Clasificarea internaţională a bolilor, a zecea revizuire (ICD-10), furnizează clasificări pentru multe din tulburările descrise aici. Specialistul calificat va recunoaşte că există nomenclatoare alternative, nosologii, şi sisteme de clasificare pentru tulburările descrise aici, incluzândule pe cele care au fost descrise în DSM-5 şi ICD-10, şi că terminologia şi sistemele de clasificare evoluează odată cu progresul ştiinţific medical. Deprecierea cognitivă la subiecţii cu boala Parkinson este numită în mod obişnuit tulburare neurocognitivă. Criteriile de diagnoză din DSM-5 (ediţia a 5-a a Manualului de diagnoză şi statistică a tulburărilor mentale) descriu dovezi ale declinului cognitiv semnificativ de la un nivel anterior de performanţă (preocuparea individului sau a informatorului documentată prin testare neuropsihologică), şi deficitul cognitiv poate sau poate să nu interfere cu independenţa activităţilor de zi cu zi. Aceasta este calificată ca tulburare neurocognitivă majoră sau uşoară. „Pierdere în greutate» aşa cum s-a utilizat în acest document, se referă la o reducere a greutăţii corporale, şi/sau la gestionarea cronică a greutăţii în care tratamentul promovează întreţinerea greutăţii corporale într-un interval dorit.
Aşa cum s-a utilizat în acest document, termenii „tratament», „tratare», sau „atenuare» sunt meniţi să se refere la toate procesele în care poate exista o încetinire, înterupere, oprire, controlare, sau oprire a progresului unei tulburări existente şi/sau o reducere în simptomele acesteia, dar nu indică în mod necesar o eliminare totală a tuturor simptomelor.
Aşa cum s-a utilizat în acest document, termenul „cantitate eficientă» dintr-un compus cu formula I, Ia sau Ib se referă la o cantitate, care este un dozaj, care este eficientă în potenţierea unui răspuns mediat de dopamină la un pacient. O „cantitate eficientă» preferată poate fi determinată ca o cantitate care poate promova o stare de veghe sau alertă la pacient în comparaţie cu starea pacientului, atunci când nu este tratat. În determinarea unei cantităţi eficiente sau doze dintr-un compus cu formula I, Ia sau Ib, este luat în considerare un număr de factori, incluzând, dar fără a se limita la, compusul care urmează să fie administrat şi formularea particulară a acestuia; dimensiunea, vârsta, şi sănătatea generală a pacienţilor; gradul de implicare sau severitatea tulburării; răspunsul pacientului individual; modul de administrare; şi alte circumstanţe relevante.
Abrevierile utilizate aici sunt definite după cum urmează:
„Bn» se referă la benzil.
„CAS#» se referă la numărul de registru al rezumatelor chimice.
„crotyl» se referă la but-2-en-1-il.
„CNS» se referă la sistemul nervos central.
„1D-NOESY» se referă la spectroscopie RMN cu efect nuclear overhauser unidimensional.
„DCM» se referă la diclorometan sau clorură de metilen.
„DIPEA» se referă la N,N-diizopropiletilamină.
„dmso-d6» se referă la dimetisulfoxid deuterat complet.
„ee» se referă la exces enantiomeric.
„ESMS» se referă la spectrometrie de masă cu electropulverizare.
„EtOAc» se referă la acetat de etil.
„h» se referă la oră sau ore.
„HATU» se referă la 3-oxid hexafluorofosfat de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3triazolo[4,5-b]piridiniu sau N-oxid hexafluorofosfat de N-[(dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridin-1-ilmetilen]-N-metilmetanaminiu.
„HPLC» se referă la cromatografie de lichide de înaltă performanţă.
„LAH» se referă la hidrură de litiu aluminiu.
„MeOH» se referă la metanol sau alcool metilic.
„min» se referă la minut sau minute.
„RMN» se referă la spectroscopie de rezonanţă magnetică nucleară.
„PG» se referă la o grupare de protecţie.
„Ph» se referă la fenil.
„OAc» se referă la acetat.
„rac-» se referă la racemic sau racemat.
„RT» se referă la temperatura camerei sau temperatura ambiantă.
„SFC» se referă la cromatografie în fluid supercritic.
„TBDMS» se referă la terţ-butildimetilsilil.
„TBDPS» se referă la terţ-butildifenilsilil.
„THF» se referă la tetrahidrofuran.
„tR» se referă la timp de retenţie.
„g/g» se referă la masă pentru masă sau masă din masă ca unitate de masă.
„g%» se referă la procentaj din masă.
„Z» se referă la benziloxicarbonil, -C(O)OCH2Ph, ca grupare de protecţie
Chimie generală
Compuşii prezentei invenţii pot fi preparaţi prin metodele generale cunoscute şi apreciate în domeniu sau prin procedeele descrise aici. Condiţiile adecvate de reacţie pentru etapele din aceste scheme sunt bine cunoscute în domeniu şi substituţiile adecvate de solvenţi şi coreactivi sunt de competenţa domeniului. În mod asemănător, se va aprecia de către cei calificaţi în domeniu că intermediarii sintetici pot fi izolaţi şi/sau purificaţi prin diferite tehnici bine cunoscute, după cum este necesar sau se doreşte, şi că frecvent, va fi posibil să se utilizeze diferiţi intermediari direct în etapele ulterioare de sinteză cu purificare redusă sau deloc. Mai mult, specialistul calificat va aprecia că, în unele circumstanţe, ordinea în care radicalii sunt introduşi nu este critică.
Schema 1 ilustrează prepararea compusului 8. O persoană calificată în domeniu va recunoaşte că fenilalanina disubstituită adecvat 1 (de exemplu, X = Br, Cl, I; R4 = H, F), dizolvată într-un solvent protic polar poate fi esterificată cu un acid puternic adecvat pentru a obţine sarea esterificată 2. Acilarea ulterioară prin spălarea sării cu bază apoasă pentru a obţine baza liberă, dizolvarea într-un solvent aprotic, şi adăugarea clorurii acide adecvate, pot fi realizate pentru a obţine 3. Ciclizarea esterului metilic al fenilalaninei Nacilate cu 2 substituţii 3, prin tratament cu paraformaldehidă într-un acid puternic adecvat şi agitarea pentru a obţine tetrahidroizochinolina 4 este bine cunoscută în domeniu. Demetilarea şi decarboxilarea pot fi obţinute prin tratament cu acid apos şi agitare sub reflux, pentru a obţine 5 ca sarea amină corespunzătoare. O persoană calificată în domeniu va recunoaşte că tetrahidroizochinolina N-protejată 6 poate fi formată prin dizolvarea sării amină 5 în solventul aprotic polar adecvat, adăugând baza şi anhidrida adecvată sau cloroformiatul de alchil pentru a obţine carbamatul de terţbutil 6. Reducerea ulterioară la derivatul de metanol 7 poate fi efectuată utilizând o matrice de agenţi reducători, cum ar fi cu o hidrură metalică, sare borohidrat, sau diboran într-un solvent aprotic polar. Tetrahidroizochinolina O-protejată 8 poate fi obţinută prin tratarea mai întâi a tetrahidroizochinolinei N-protejate 7 cu acidul puternic adecvat şi concentrând sub vid. Apoi, sarea amină poate fi dizolvată în solventul aprotic adecvat, tratată cu bază şi o grupare de protecţie (PG) adecvată (de exemplu, PG = OSi, OBn, OMOM, etc.) pentru a furniza 8. De exemplu, protejarea alcoolului primar cu o grupare silil stabilă la acid, cum ar fi TBDMS sau TBDPS, este bine cunoscută în domeniu.
Schema 2 ilustrează o alternativă la prepararea intermediarului substituit necesar 3 (de exemplu, X = Br, Cl, I; R4 = F). O persoană calificată în domeniu va recunoaşte că condensarea Horner-Wadsworth-Emmons între o benzaldehidă substituită adecvat 13 (R4 = F) şi un acetat amino-2-dimetoxifosforil N-protejat 14 poate fi utilizată pentru a prepara ene-carbamatul 15 (de exemplu, PG = Z). Se reduce chiral ulterior sub H2 cu un auxiliar chiral adecvat, de exemplu, cu un catalizator metalic de tranziţie Rh(I), aşa cum este bine descris în domeniu, pentru a obţine N-protejatul 16. Pentru a obţine 3, schimbarea N-grupărilor de protecţie poate fi realizată sub o varietate de condiţii care pot fi recunoscute de o persoană calificată în domeniu. Transformările ulterioare asupra compusului 3 pot fi efectuate ca în Schema 1 până la furnizarea compusului 8 (de exemplu, X = Br, Cl, I; R4 = F).
Schema 3 ilustrează sinteza compuşilor de tip I'. Formarea iminei din tetrahidroizochinolina 8 poate fi realizată sub diferite condiţii oxidative recunoscute de către specialistul calificat, în special halogenarea aminei secundare şi eliminarea ulterioară cu o bază puternică adecvată pentru a furniza dihidroizochinolina 9. O reacţie Grignard stereoselectivă poate fi utilizată prin tratarea iminei 9 cu o halogenură de alchilmagneziu adecvată, pentru a obţine tetrahidroizochinolina trans 10. Configuraţia relativă a tetrahidroizochinolinei 10 poate fi determinată cu experimentul spectroscopic RMN adecvat, în special cu 1D-NOESY. N-acilarea ulterioară poate fi obţinută cu tehnici de cuplare amidice bine cunoscute în domeniu, de exemplu, hexafluorofosfat de benzotriazol1-il-oxitripirolidinofosfoniu în prezenţa unei baze nenucleofilice uşoare, pentru a prepara compusul 11. Formarea legăturii carbon-carbon utilizând compusul substituit adecvat
11 (de exemplu, X = Br, Cl, I, etc.) poate fi efectuată sub cataliză cu metal de tranziţie, cum ar fi utilizând Pd, Pt, Ni, sau Cu, cu un ester boronic adecvat sau sare trifluoroboranuidă, aşa cum este bine cunoscut în domeniu. Alternativ, cuplarea sub condiţii de tip Heck sau Sonogashira, cu o alchenă sau alchină substituită adecvat, respectiv, poate fi obţinută aşa cum este bine cunoscut în domeniu. De exemplu, cuplarea încrucişată mediată de paladiu 11 cu o ciclopropil trifluoroboranuidă substituită adecvat, poate fi realizată pentru a obţine compuşi ciclopropil substituiţi de tip 12. Suplimentar, cuplarea încrucişată mediată de paladiu 11 cu o alchenă substituită adecvat poate fi realizată pentru a obţine compuşi alchil substituiţi de tip 12. Specialistul calificat va recunoaşte că deprotejarea alcoolului protejat 12, în care PG = OSi, OBn, OMOM etc., poate fi executată sub o varietate de condiţii. De exemplu, o grupare de protecţie silil poate fi îndepărtată cu fluorură de tetrabutilamoniu, pentru a obţine compuşi chirali de tip I'.
În următoarele preparări şi exemple ilustrative, solvenţii sunt în general îndepărtaţi sub presiune redusă (evaporaţi). În unele proceduri randamentele indicate sunt randamente brute reprezentative pentru produsele care sunt izolate prin evaporare sau filtrare şi utilizate direct fără purificare suplimentară. Stereochimia relativă din jurul cadrului de lucru al tetrahidroizochinolinei descris, a fost identificată prin spectroscopie RMN adecvată, în special prin 1D-NOESY. În cazurile de configuraţie din jurul grupărilor ciclopropil substituite în substituţiile catenei laterale, configuraţia relativă este descrisă fără determinarea stereochimiei absolute. În cazurile altor centri chirali suplimentari în substituţiile catenei laterale, configuraţia absolută nu a fost determinată. În ambele aceste cazuri, perechile diastereomerice sunt denumite „Izomer 1» sau „Izomer 2» atunci când sunt separate prin tehnici cromatografice chirale.
Preparare 1 Clorhidrat de 2-bromo-D-fenilalaninat de metil
2-Bromo-D-fenilalanina (22,4 g, 91,8 mmol) este dizolvată în MeOH (459 mL). Se adaugă clorură de acetil (65,3 mL, 917,7 mmol) la temperatura camerei şi amestecul de reacţie rezultat este agitat timp de 36 ore. Amestecul de reacţie este concentrat sub presiune redusă pentru a da compusul din titlu (27,2 g, randament >99%). ESMS (m/z) 258/260 [M-Cl, 79Br/81Br].
Preparare 2 2-Bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninat de metil
Clorhidratul de 2-bromo-D-fenilalaninat de metil (27,2 g, 92,3 mmol) este dizolvat într-un amestec bifazic de DCM (923 mL) şi apă (185 mL). Se adaugă NaHCO3 (31 g, 369,4 mmol) şi cloroformiat de metil (7,9 mL, 101,6 mmol) la RT şi amestecul rezultat este agitat timp de 2,5 ore. Amestecul este diluat cu apă şi extras cu DCM. Extractele organice sunt uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 10-75% EtOAc în hexani pentru a da compusul din titlu (29,1 g, randament >99%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 316/318 [M+H, 79Br/81Br].
Preparare 3 (3R)-5-Bromo-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,3-dicarboxilat de dimetil
Un amestec de 2-bromo-N-(metoxicarbonil)-D-fenilalaninat de metil (29,1g 92,1 mmol) şi paraformaldehidă (9,13 g, 101,3 mmol) este agitat în acid acetic glacial (115 mL, 2 mol) conţinând H2SO4 concentrat (38,4 mL, 719,9 mmol) la RT timp de 7 ore. Amestecul de reacţie este partiţionat între apă şi EtOAc, straturile sunt separate, şi stratul apos este extras cu EtOAc. Extractele organice combinate sunt uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-40% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu (27,6 g, randament 91%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 328/330 [M+H, 79Br/81Br].
Preparare 4 Clorhidrat de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-carboxilat de metil
(3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,3-dicarboxilatul de dimetil (27,6 g, 84 mmol) este dizolvat în 5 N HCl (330,6 mL, 1,7 mol) şi amestecul rezultat este încălzit la reflux timp de trei zile. Amestecul este concentrat sub presiune redusă pentru a da un solid alb. Solidul este colectat prin filtrare, spălat cu dietil eter, şi uscat sub vid la 40°C peste noapte pentru a da clorhidratul acidului (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3carboxilic (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol). Se adaugă clorură de acetil (50,6 mL, 711,0 mmol) la un amestec la 0°C de clorhidrat de acid (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3carboxilic (1:1) (20,8 g, 71,1 mmol) în MeOH (474 mL). Amestecul este încălzit la RT şi agitat timp de 36 ore. Amestecul este concentrat sub presiune redusă şi uscat pentru a da compusul din titlu (21,9 g, randament 85%). ESMS (m/z): 270/272 [M-Cl, 79Br/81Br].
Preparare 5 2-Terţ-butil-3-metil-(3R)-5-bromo-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,3-dicarboxilat
Clorhidratul de (3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-carboxilat de metil
(21,0 g, 68,5 mmol) este dizolvat în 1,4-dioxan (685 mL). Se adaugă NaHCO3 apos saturat (685 mL, 17,5 mol) şi di-terţ-butildicarbonat (29,9 g, 137,0 mmol) la RT şi amestecul bifazic este agitat la RT timp de 90 min. Amestecul este extras cu EtOAc, şi extractele organice sunt uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-50% de EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu (19,5 g, randament 77%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. MS (m/z): 270/272 [MtBoc+H, 79Br/81Br].
Preparare 6 (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilat de terţ-butil
O soluţie 2 M de borohidrură de litiu (99,4 mL, 198,8 mmol) în THF şi MeOH (10,1 mL, 248,5 mmol) se adaugă la o soluţie de 2-terţ-butil-3-metil-(3R)-5-bromo-3,4-dihidro1H-izochinolin-2,3-dicarboxilat (18,4 g, 49,7 mmol) în THF (497 mL) şi amestecul rezultat este agitat la RT timp de 40 min. Reacţia este stinsă cu apă şi extrasă cu EtOAc. Extractele organice sunt separate, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-80% EtOAc în hexani. Solventul este evaporat din fracţiunile cromatografice dorite, şi reziduul rezultat este uscat sub vid înaintat peste noapte pentru a da compusul din titlu ca solid alb (19,1 g, randament >99%). ESMS (m/z): 286/288 [MtBu+H, 79Br/81Br].
Preparare 7 [(3R)-5-Bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan
Se adaugă acid trifluoroacetic (75,5 mL, 998,3 mmol) la o soluţie de (3R)-5-bromo3-(hidroximetil)-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilat de terţ-butil (15,5 g, 45,3 mmol) în DCM (226 mL) la temperatura camerei. Amestecul de reacţie este agitat la RT timp de 30 min şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este uscat sub vid pentru a da acidul [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metanol 2,2,2- trifluoroacetic ca solid umed. Acidul [(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metanol 2,2,2trifluoroacetic este dizolvat în DCM (753 mL). Se adaugă 1H-imidazol (51,3 g, 753 mmol), N,N-dimetil-4-piridinamină (460 mg, 3,77 mmol), şi t-butildimetilclorosilan (13,6 g, 90,4 mmol), şi amestecul rezultat este agitat la RT peste noapte. Se adaugă o soluţie saturată de NH4Cl şi amestecul este extras cu DCM. Stratul DCM este separat, uscat pe Na2SO4, şi filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Produsul brut este combinat dintr-o substanţial aceeaşi reacţie rulată cu (3R)-5-bromo-3-(hidroximetil)-3,4dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilat de terţ-butil (6,6 g, 19,4 mmol). Produsul brut combinat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-40% de EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu (14,3 g, randament 89%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 356/358 [M+H, 79Br/81Br].
Preparare 8 [(3R)-5-Bromo-3,4-dihidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan
[(3R)-5-bromo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silanul (4,2 g, 11,8 mmol) este dizolvat în dietil eter (118 mL) şi se adaugă N-clorosuccinimidă (2,36 g, 17,7 mmol). Amestecul rezultat este agitat la RT timp de 30 min şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este dizolvat într-o soluţie 5% de KOH în MeOH (42,0 mL, 30,3 mmol) şi agitat timp de 30 min la RT. Amestecul este turnat în apă şi extras cu DCM. Extractele DCM sunt uscate pe Na2SO4 şi filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe siliciu, eluând cu un gradient de 5-100% EtOAc în hexani, pentru a obţine compusul din titlu (3,40 g, randament 82%). ESMS (m/z): 354/356 [M+H, 79Br/81Br].
Alternativ, se adaugă N-clorosuccinimidă (106,7 g, 790 mmol) la o soluţie de [(3R)5-bromo-3,4-dihidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan (220 g, 520 mmol) în THF (3,85 L) la RT într-un vas adecvat cu agitare timp de 30 min. Amestecul este concentrat sub presiune redusă şi reziduul este dizolvat în 5% g/g KOH în metanol (2,2 L, 1,7 moli) cu agitare la RT timp de 30 min. Amestecul se adaugă în apă (3 L) şi este extras de trei ori cu DCM (3 × 1 L). Extractele organice combinate sunt uscate pe MgSO4 anhidru şi filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă pentru a da compusul din titlu (210 g, randament >99%). ESMS (m/z): 354/356 [M+H, 79Br/81Br].
Preparare 9 [(1S,3R)-5-Bromo-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butildimetilsilan
[(3R)-5-bromo-3,4-dihidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silanul (3,4 g, 9,6 mmol) este dizolvat în dietil eter (160 mL) şi răcit la -78°C într-o baie uscată cu gheaţă - acetonă. Se adaugă în picătură o soluţie 3M de metilclorură de magneziu în THF (26,9 mL, 80,6 mmol). Amestecul este încălzit încet la RT şi agitat peste noapte. Amestecul de reacţie este stins încet prin adăugarea de soluţie saturată de NH4Cl. Amestecul rezultat este extras cu DCM, uscat pe NaSO4, şi filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Produsul brut este combinat cu material dintr-o substanţial aceeaşi reacţie rulată cu 1,7 mmoli de [(3R)-5-bromo-3,4-dihidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan. Reziduurile combinate sunt purificate prin cromatografie rapidă pe siliciu, eluând cu un gradient de 5-65% EtOAc în hexani, pentru a obţine compusul din titlu (3,78 g, randament
>99%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 370/372 [M+H, 79Br/81Br].
Configuraţia relativă \taba \tabcompusului \tab[(1S,3R)-5-bromo-1-metil-1,2,3,4-
tetrahidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan este determinată prin spectroscopie RMN utilizând 1D-NOESY. Excitarea selectivă a grupării metil la 1,30 ppm dă naştere la un NOE pentru Ha la 3,11 ppm. Această îmbunatăţire a NOE este consistentă numai cu o configuraţie în care metilul şi Ha sunt pe aceeaşi parte a inelului (izomer trans) deoarece în izomerul cis, protonii metilului sunt prea îndepărtaţi de Ha pentru a prezenta un NOE. Deoarece chimia absolută pentru poziţia 3 este cunoscută ca fiind R, atunci chimia absolută la poziţia 1 este dedusă ca fiind S.
Preparare 10 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă
Acidul 2,6-diclorofenilacetic (3,7 g, 18 mmol) este combinat cu [(1S,3R)-5-bromo1-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metoxi-terţ-butil-dimetil-silan (5 g, 13,5 mmol), HATU (7,7 g, 20 mmol) şi DIPEA (7,1 mL, 41 mmol) în DCM (70 mL). Amestecul este agitat sub o pătură de azot la RT timp de 2 ore. Soluţia de reacţie este concentrată sub presiune redusă şi reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-25% EtOAc în hexani pentru a da compusul din titlu (6,2g, randament 81%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 558 (M+1). Preparare 11 trans-Etil-2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil) acetil]1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilat
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona (500 mg, 0,9 mmol) este combinată cu [trans2-etoxicarbonilciclopropil]-trifluoro-boranuida de potasiu (300 mg, 1,3 mmol; vezi PCT/FR2013/053057), KH2PO4 (370 mg, 2,7 mmol), şi complex diclorometan de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladiu(II)diclorură (115 mg, 0,1 mmol), în 1,4-dioxan (8 mL, 93,2 mmol) şi apă (2 mL) într-un flacon pentru microunde. Fiola este acoperită, purjată cu azot, şi iradiată la 120°C într-un cuptor cu microunde timp de 2 ore. Soluţia de reacţie este concentrată sub presiune redusă şi reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-25% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu ca un amestec de izomeri trans (245mg, randament 46%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 590 (M+1).
Preparare 12 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[trans-2-(2-hidroxi-2-metil-propil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă
2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil 3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilatul de trans-etil (240 mg, 0,4 mmol) este agitat în THF (4 ml) şi este răcit la 0°C. Se adaugă în picătură o soluţie 3 M de metilclorură de magneziu în THF (1,75 mL, 5,25 mmol) prin seringă la 0°C timp de 5 min. Amestecul rezultat este agitat sub azot timp de 1 oră, stins cu NH4Cl apos saturat, şi extras cu EtOAc. Stratul organic este separat, uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul rezultat este concentrat sub presiune redusă pentru a obţine compusul din titlu ca un amestec de izomeri trans în jurul substituentului ciclopropil, adecvat pentru utilizare fără purificare suplimentară. ESMS (m/z): 576 (M+1).
Preparare 13 2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4dihidro-1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilat de cis-etil
Utilizând în mod esenţial metoda descrisă în Preparare 2, 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-
[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-
diclorofenil)etanona (500 mg, 0,9 mmol) este combinată cu [cis-2-etoxicarbonilciclopropil]-
trifluoro-boranuida de \tabpotasiu \tab(WZ5-E16784-076-B, \tab300 \tabmg, \tab1,3 mmol; vezi PCT/FR2013/053057) pentru a da compusul din titlu ca un amestec de izomeri cis (280mg, randament 53%). ESMS (m/z): 590 (M+1).
Preparare 14
1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metilpropil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă Izomer 1 şi 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2metilpropil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6diclorofenil)etanonă Izomer 2
Utilizând în mod esenţial metoda descrisă în Preparare 3, un amestec de 2-
[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-1-metil-3,4-dihidro-
1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilat de cis-etil (280 mg, 0,5 mmol) şi o soluţie 3M de bromură de metilmagneziu în THF (2 mL, 6 mmol), cu purificare ulterioară prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, utilizând un gradient de 0-25% EtOAc în hexani, dă compuşii din titlu ca izomeri cis separaţi, 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6diclorofenil)etanonă, izomer 1 (110mg, randament 38%) şi 1-[(1S,3R)-3-[[terţbutil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-
1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă, izomer 2 (65 mg, randament 23%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z) pentru fiecare: 576 (M+1).
Preparare 15 4-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil]-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]butan-2-onă
1-[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-
izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona (2 g, 3,7 mmol), tris (dibenzilidenaceton)dipaladiu(0) (169 mg, 0,2 mmol) şi di-terţ-butil-(1-fenilindol-2-il) fosfanul (187 mg, 0,55 mmol) sunt suspendate în DMF (12,3 mL). Se adaugă N,Ndiciclohexilmetilamină (0,9 mL, 4 mmol) şi but-3-en-2-ol (0,45 mL, 5,2 mmol), şi amestecul este degazat prin barbotare cu azot timp de 10 min. Vasul de reacţie este etanşat şi încălzit la 100°C timp de 1,5 ore cu agitare. Amestecul de reacţie este răcit la RT şi diluat cu EtOAc. Stratul organic este separat, spălat cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscat pe Na2SO4, filtrat, şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, utilizând un gradient de 5-30% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu ca spumă albă (1,5 g, randament 75%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 532 (M+1).
Preparare 16
1-((1S,3R)-3-(((terţ-butildimetilsilil)oxi)metil)-5-((R)-4,4-difluoro-3-metil-3((trimetilsilil)oxi)butil)-1-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6fluorofenil)etan-1-onă şi \tab1-((1S,3R)-3-(((terţ-butildimetilsilil)oxi)metil)-5-((S)-4,4difluoro-3-metil-3-((trimetilsilil)oxi)butil)-1-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il)-2-(2cloro-6-fluorofenil)etan-1-onă
4-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-2-[2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil]-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]butan-2-ona (580 mg, 1,1 mmol) şi 18-crown-6 (29 mg,
0,1 mmol) \tabsunt \tabdizolvate \tabîn \tab1,2-dimetoxietan \tab(5,5 \tabmL). \tabSe \tabadaugă
(difluorometil)trimetilsilan (0,30 mL, 2 mmol), urmat de CsF (17 mg, 0,1 mmol). Amestecul este încălzit la 60°C şi agitat peste noapte. Se adaugă suplimentar
(difluorometil)trimetilsilan (0,30 mL, 2 mmol), 18-crown-6 (29 mg, 0,1 mmol,) şi CsF (17 mg, 0,1 mmol) şi amestecul de reacţie este agitat la 60°C timp de 4 ore. Amestecul este răcit la RT, diluat cu EtOAc, şi extractele organice separate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl. Stratul organic este uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe siliciu, utilizând un gradient de 0-10% EtOAc în hexani, pentru a da un amestec al compuşilor din titlu ca spumă albă (493 mg, randament 68%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 656 (M+1).
Preparare 17 (Z)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)acrilat de metil
2-(Benziloxicarbonilamino)-2-dimetoxifosforil-acetatul de metil (25,5 g, 76,9 mmol) este dizolvat în DCM (250 mL) şi soluţia este răcită la 0°C. Se adaugă 1,8diazabiciclo[5,4,0]undec-7-enă (12 mL, 79,9 mmol) şi amestecul este agitat timp de 30 min la 0°C. Se adaugă încet o soluţie de 2-bromo-3-fluoro-benzaldehidă (13,0 g, 64 mmol) în DCM (250 mL) timp de 20 min la 0°C. Amestecul este agitat la 0°C timp de 2 ore. Amestecul este transferat la o pâlnie separatoare şi spălat secvenţial cu soluţie apoasă saturată de NH4Cl (200 mL) şi soluţie apoasă saturată de NaCl (200 mL). Stratul organic este uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă pentru a da un solid alb. Solidul este recristalizat din EtOAc fierbinte şi colectat prin filtrare, pentru a furniza compusul din titlu ca solid alb (25 g, randament 80%). ESMS (m/z): 407 (M+1).
Preparare 18 (R)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanoat de metil BMDE17046-003
În interiorul unui torpedou, se adaugă (Z)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(2bromo-3-fluorofenil)acrilat de metil (26 g, 63,8 mmol) la un vas de autoclavă care conţine MeOH (300 mL). Se adaugă tetrafluoroborat de [((R)-terţ-butilmetilfosfino)(di-terţbutilfosfino)amină](1,5-ciclooctadiene)rodiu(I) (430 mg, 0,8 mmol) şi vasul de autoclavă este etanşat şi îndepărtat de torpedou. Amestecul este stropit cu H2 gazos timp de 15 secunde şi presurizat până la 100 psi H2. Amestecul rezultat este agitat la RT timp de 15 ore. Vasul de autoclavă este ventilat şi amestecul este concentrat sub presiune redusă pentru a obţine compusul din titlu ca solid alb, adecvat pentru utilizare fără purificare suplimentară (26,3 g, randament 98%). ESMS (m/z): 410 (M+1).
Pentru a obţine o mostră pură analitic, o porţiune a produsului brut (66 mg) este purificată prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu 15% EtOAc în hexani, pentru a da produsul ca solid alb după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. Analiza HPLC chirală (CHIRALCEL® OJ-H coloană, 0,2% izopropanol/MeOH, 1 mL/min): tR enantiomer major: 2,981 min, tR enantiomer minor: 3,557 min. Măsurat >99% ee.
Preparare 19
(R)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)-2-((metoxicarbonil)amino)propanoat de metil
(R)-2-(((benziloxi)carbonil)amino)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)propanoatul de metil
(21,25 g, 51,8 mmol) este dizolvat în DCM (110 mL) şi se adaugă o soluţie 33% de HBr în acid acetic (28,1 mL, 155 mmol). Amestecul rezultat este agitat la RT timp de 1 oră. Se adaugă apă (100 mL) şi DCM (100 mL) şi amestecul rezultat este agitat viguros timp de 15 min. Stratul organic este separat şi eliminat. Se adaugă DCM (200 mL) şi Na2CO3 (35,1 g, 331,5 mmol) la stratul apos. Se adaugă cloroformiat de metil (5,2 mL) la amestec şi amestecul rezultat este agitat la RT peste noapte. Amestecul este extras cu DCM. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă pentru a da compusul din titlu ca solid alb (13,6 g, randament 78%). ESMS (m/z): 333 (M+1).
Preparare 20 Clorhidrat de acid (R)-5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-carboxilic
(R)-3-(2-bromo-3-fluorofenil)-2-((metoxicarbonil)amino)propanoatul de metil (17 g, 50,9 mmol) şi paraformaldehida (6,9 g, 76,4 mmol) sunt suspendate în acid acetic (128 mL). Soluţia este răcită la 0°C şi se adaugă H2SO4 concentrat (43 mL). Amestecul rezultat este încălzit la 35°C şi agitat peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la RT şi turnat în apă (200 mL). Suspensia rezultată este extrasă cu EtOAc, şi extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este dizolvat în HCl concentrat (231 mL) şi amestecul rezultat este încălzit la 120°C într-un flacon cu fund rotund echipat cu un condensator de reflux peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la RT şi concentrat sub presiune redusă la 50°C. Reziduul rezultat este uscat la 40°C sub vid timp de 18 ore pentru a da compusul din titlu ca solid incolor (15 g, randament 94%). ESMS (m/z): 273 (M+1).
Preparare 21 (R)-(5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il)metanol
Clorhidratul acidului (R)-5-bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-carboxilic (9,95 g, 32,0 mmol) este suspendat în THF (80 mL) şi amestecul este răcit la 0°C. Se adaugă încet o soluţie 1M de complex boran-tetrahidrofuran (96 mL, 96 mmol). Amestecul este încălzit la 60°C şi agitat peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la 0°C şi se adaugă MeOH (20 mL) şi soluţie apoasă saturată de NH4Cl (40 mL) şi amestecul este agitat la RT timp de 10 min. Se adaugă 5N HCl apos (60 mL) şi amestecul rezultat este încălzit la 45°C timp de 4 ore. Amestecul este răcit la 0°C şi se adaugă 21% din masa de NH4OH concentrat apos. Amestecul este încălzit la RT. Amestecul rezultat este extras cu
3:1 CHCl3:izopropanol. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă pentru a furniza compusul din titlu ca solid bej (9,5 g, randament 86%). ESMS (m/z): 259 (M+1).
Preparare 22
(R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1,2,3,4tetrahidroizochinolină
(R)-(5-Bromo-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il)metanolul (12,6 g, 48,3 mmol) este dizolvat într-un amestec de DCM (185 mL) şi DMF (146 mL). Se adaugă imidazol (16,4 g, 241,5 mmol) şi 4,4-dimetilaminopiridină (118 mg, 1 mmol), urmate de terţbutilclorodifenilsilan (13,8 mL, 53,1 mmol). Amestecul rezultat este agitat la RT timp de 1 oră. Se adaugă MeOH (100 mL) şi amestecul este agitat timp de 1 oră suplimentară. Se adaugă soluţie apoasă saturată de NH4Cl (200 mL) şi amestecul este extras cu DCM. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu eluând cu un gradient de 2-50% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu ca ulei (10,5 g, randament 45%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 498 M+1).
Preparare 23 (R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-3,4-dihidroizochinolină
(R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1,2,3,4-tetra-
hidroizochinolina (10,9 g, 21,9 mmol) este dizolvată în THF (200 mL) şi se adaugă Nclorosuccinimidă (4,4 g, 32,9 mmol). Amestecul rezultat este agitat la RT timp de 40 min şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este dizolvat în 0,75M KOH în MeOH (100 mL) şi agitat la RT timp de 30 min. Amestecul de reacţie este diluat cu apă (50 mL) şi extras cu DCM. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-50% EtOAc în hexani, pentru a obţine compusul din titlu ca ulei incolor (9,63 g, randament 88%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 496 (M+1).
Preparare 24 (1S,3R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4tetrahidroizochinolină
(R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-3,4-dihidroizochinolina (7,5 g, 15 mmol) este dizolvată în eter metil de terţ-butil (190 mL) sub azot şi soluţia este răcită la -15°C. Se adaugă în picătură cu agitare o soluţie 3M de metilclorură de magneziu în THF (20 mL, 60 mmol), şi amestecul de reacţie este încălzit la RT şi agitat timp de 2 ore suplimentare. Amestecul este răcit la 0°C şi se adaugă secvenţial MeOH (4 mL) şi soluţie apoasă saturată de NH4Cl (4 mL). Amestecul rezultat este extras cu DCM. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 2-5% eter metil de terţbutil în DCM, pentru a da compusul din titlu ca ulei galben (1,7 g, randament 23%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 512 (M+1).
Preparare 25 1-[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanonă
(1S,3R)-5-Bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4tetrahidroizochinolina (5,2 g, 10,1 mmol) este dizolvată în DMF (101 mL). Se adaugă secvenţial acid 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)acetic (2,5 g, 13,2 mmol), 3-oxid hexafluorofosfat de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridiniu (5 g, 13,2 mmol) şi DIPEA (8,8 mL, 50,6 mmol), şi amestecul rezultat este agitat la RT peste noapte. Se adaugă apă (200 mL) şi amestecul este extras cu EtOAc. Extractele organice combinate sunt spălate cu soluţie apoasă saturată de NaCl, uscate pe Na2SO4, filtrate, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-25% EtOAc în hexani, pentru a obţine compusul din titlu ca spumă albă (6,3 g, randament 91%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 682 (M+1).
Preparare 26 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metil-but-1-inil)1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etanonă
Se adaugă 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanonă (5,8 g, 8,5 mmol), tri-terţbutilfosfină(cloro)(crotil)paladiu(II) (675 mg, 1,7 mmol) şi 2-tiofenecarboxilat cupros (258 mg, 1,35 mmol) la un flacon cu fund rotund de 500 mL. Flaconul este evacuat şi reumplut cu azot. Se adaugă DMF (60 mL), DIPEA (6 mL, 42,5 mmol), şi 2-metilbut-3-in-2-ol (4,1 mL, 42,2 mmol). Amestecul de reacţie este încălzit la 40°C şi agitat peste noapte. Amestecul este răcit la RT, diluat cu EtOAc, şi fazele sunt separate. Stratul organic este spălat secvenţial cu apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl, uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 20-40% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu ca spumă albă (5,4 g, randament 93%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 686 (M+1).
Preparare 27 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metilbutil)-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanonă
Un agitator Parr este purjat cu azot şi se adaugă 5% din masă platină sulfurată pe carbon (2,5 g). Vasul este purjat din nou cu azot. Se adaugă EtOAc (50 mL). Se adaugă o soluţie de 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metil-but-1inil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil) etanonă (5,4 g, 7,9 mmol) dizolvată în EtOAc (50 mL). Vasul de reacţie este purjat cu H2 gazos şi presurizat până la 60 psi H2. Amestecul de reacţie este agitat timp de 3 ore la RT. Se adaugă suplimentar 5% din masă platină sulfurată pe carbon (1,21 g) suspendată în EtOAc (30 mL), şi vasul este represurizat până la 60 psi H2. Vasul de reacţie este agitat timp de încă 8 ore suplimentare. Vasul este depresurizat şi purjat cu azot. Suspensia rezultată este filtrată şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% EtOAc în hexani (gradient 0-100%), pentru a da compusul din titlu ca spumă albă (5,33 g, 7,72 mmol) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. MS (m/z): 690,4 (M+1).
Preparare 28 2-((1S,3R)-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-2-(2-(2-cloro-6-fluorofenil)acetil)-6fluoro-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-5-il)ciclopropan-1-carboxilat de transetil
1-[(1S,3R)-5-Bromo-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)etanona (665 mg, 1 mmol), [(trans-2etoxicarbonilciclopropil]-trifluoroboratul de racpotasiu (CAS# 1612792-88-7; vezi PCT/FR2013/053057; 12 decembrie 2013) (257 mg, 1,2 mmol), iodura de di(1adamantanil)-n-butilfosfoniu (50 mg, 0,1 mmol), metansulfonatul de [(di(1-adamantil)butilfosfină)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladiu(II) (75 mg, 0,1 mmol) şi Cs2CO3 (631 mg, 1,9 mmol) sunt suspendate într-un amestec de toluen (10 mL) şi apă (1 mL). Amestecul este degazat cu azot timp de 5 min, şi fiola este etanşată şi încălzită la 100°C cu agitare peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la RT şi diluat cu EtOAc. Amestecul rezultat este spălat secvenţial cu apă, NaHCO3 apos saturat, apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl, şi straturile sunt separate. Faza organică este uscată pe MgSO4 şi filtrată, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţbutil de etil în hexani, pentru a obţine un amestec al compuşilor din titlu ca solid galben (448 mg, randament 61%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 716 (M+1).
Preparare 29 1-[(1R,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[(trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etanonă
Un amestec de 2-((1S,3R)-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-2-(2-(2-cloro-6fluorofenil)acetil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-5-il)ciclopropan-1carboxilat de trans-etil, izomer 1, şi 2-((1S,3R)-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-2-(2-(2cloro-6-fluorofenil)acetil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-5-il) ciclopropan-1carboxilat de trans-etil, izomer 2 (440 mg, 0,6 mmol), este dizolvat în THF (4 mL) şi răcit la 0°C. Se adaugă încet timp de 10 minute, o soluţie 1M de bromură de metilmagneziu în THF (1,4 mL, 1,4 mmol), şi amestecul de reacţie rezultat este încălzit la RT şi agitat peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la 0°C şi se adaugă suplimentar soluţie 1M de bromură de metilmagneziu în THF (1,4 mL, 1,4 mmol). Amestecul de reacţie este încălzit la RT şi agitat 8 ore. Amestecul este stins cu MeOH (130 µL) şi agitat la RT peste noapte. Amestecul de reacţie este diluat cu EtOAc şi soluţia rezultată este spălată secvenţial cu NaHCO3 apos saturat, apă, şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile sunt separate, şi faza organică este uscată pe MgSO4 şi filtrată. Filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţ-butil de metil în hexani, pentru a obţine un amestec al compuşilor din titlu ca solid galben (245 mg, randament 42%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 702 (M+1).
Preparare 30 1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă
(1S,3R)-5-bromo-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-1-metil-1,2,3,4tetrahidroizochinolina (500 mg, 1 mmol), acidul 2-(2,6-diclorofenil)acetic (260 mg, 1,3 mmol) şi 3-oxidul hexafluorofosfat de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo [4,5b]piridiniu (482 mg, 1,3 mmol) sunt suspendate în DMF (10 mL). Se adaugă DIPEA (0,85 mL, 4,9 mL) şi amestecul este agitat la RT timp de 72 ore. Amestecul de reacţie este diluat cu EtOAc şi spălat secvenţial cu apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile sunt separate, şi stratul organic este uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 5-15% EtOAc în hexani, pentru a da compusul din titlu ca spumă albă (680 mg, 0,97 mmol) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 698 (M+1). Preparare 31 trans 2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6-diclorofenil)acetil]-6fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilat de etil
1-[(1S,3R)-5-bromo-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanona (604 mg, 0,9 mmol), [(trans-2etoxicarbonilciclopropil]-trifluoroboratul de racpotasiu (CAS# 1612792-88-7; vezi PCT/FR2013/053057; 12 decembrie 2013) (228 mg, 1 mmol), iodura de di(1adamantanil)-n-butilfosfoniu (44 mg, 0,1 mmol), metansulfonatul de [(di(1-adamantil)butilfosfină)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladiu(II) (66 mg, 0,1 mmol) şi Cs2CO3 (565 mg, 1,7 mmol) sunt suspendate într-un amestec de toluen (10 mL) şi apă (1 mL). Amestecul rezultat este barbotat cu azot timp de 5 min, reacţia este etanşată, şi amestecul este încălzit la 100°C cu agitare peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la RT, diluat cu EtOAc, şi spălat secvenţial cu apă, NaHCO3 apos saturat, apă, şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile sunt separate, şi faza organică este uscată pe MgSO4, filtrată, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţ-butil de metil în hexani, pentru a obţine compuşii din titlu ca un amestec de diastereomeri trans ca solid galben
(417 mg, randament 64%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 732 (M+1).
Preparare 32 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil) etanonă
Un amestec de trans 2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-2-[2-(2,6diclorofenil)acetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il] ciclopropancarboxilat de etil, izomer 1, şi trans 2-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil) silil]oximetil]-2-[2-(2,6diclorofenil)acetil]-6-fluoro-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-5-il]ciclopropancarboxilat de etil, izomer 2 (405 mg, 0,6 mmol), este dizolvat în THF (3 mL) şi amestecul este răcit la
0°C. O soluţie 1M de bromură de metilmagneziu în THF (2,8 mL, 2,8 mmol) se adaugă încet timp de 10 min şi amestecul de reacţie este încălzit la RT şi agitat peste noapte. Amestecul de reacţie este răcit la 0°C şi stins cu MeOH (220 µL). Amestecul de reacţie este diluat cu EtOAc şi spălat secvenţial cu apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile sunt separate, şi faza organică este uscată pe MgSO4, filtrată, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţ-butil de metil în hexani, pentru a obţine compuşii din titlu ca un amestec de diastereomeri trans ca solid galben (336 mg, randament 55%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 718 (M+1).
Exemplele 1 şi 2 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1, şi 2-(2,6Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 2
Se adaugă o soluţie 1M de tetrabutilformiat de amoniu în THF (0,8 mL) la o soluţie de 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[(trans-2-(2-hidroxi-2-metilpropil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etanonă (170 mg, 0,3 mmol) în THF (2,5 mL) şi amestecul rezultat este agitat timp de 30 min. Amestecul de reacţie este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-65% EtOAc în hexani cu purificare suplimentară prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-50% EtOAc în DCM, pentru a da compusul din titlu, 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenonă, izomer 2 (20 mg, randament 14%), după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. Fracţiunile amestecate din cromatografia rapidă suplimentară sunt purificate suplimentar prin cromatografie cu fază inversă pe 18C cu gel de siliciu, utilizând un gradient de 5-95% apă care conţine bicarbonat de amoniu în acetonitril) pentru a da compusul din titlu, 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-
5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2il]etenonă, izomer 1 (26mg, randament 18%), după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z) pentru fiecare: 462 (M+1). 1H nmr (400 MHz, dmso-d6) izomer 1: δ 0,66-1,01 (m, 4H), 1,08-1,27 (m, 6H), 1,40-1,89 (m, 1H), 2,00-2,08 (m, 1H), 2,66-3,04 (m, 2H), 3,20-3,32 (m, 2H), 3,63-3,75 (m, 1H), 4,09-4,31(m, 3H), 4,38-4,50 (m, 1H), 4,98-5,25 (m, 2H), 6,88-7,16 (m, 3H), 7,33 (t, 1H), 7,48 (d, 2H). 1H nmr (400 MHz, dmso-d6) izomer 2: δ 0,66-1,01 (m, 4H), 1,06-1,31 (m, 5H), 1,40-1,89 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 1H), 2,67-3,00 (m, 2H), 3,24-3,32 (m, 2H), 3,66-3,77 (m, 1H), 4,09-4,01(m, 3H), 4,404,49 (m, 1H), 4,98-5,25 (m, 2H), 6,92-7,15 (m, 3H), 7,34 (t, 1H), 7,48 (d, 2H).
Exemplele 3 şi 4
2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metil-etil) ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1, şi 2-(2,6Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi-1-metil-etil) ciclopropil]1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 2
Utilizarea în mod esenţial a metodei descrise în Exemplele 1 şi 2, utilizând 1[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etenona, izomerul 1 (100mg, 173 mmol), dă compusul din titlu 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomerul 1 (61 mg, randament 76%). ESMS (m/z): 462 (M+1). 1H nmr (400 MHz, dmso-d6) izomer 1: δ 0,55 (s, 1H), 0,65 (s, 2H), 0,94-1,00 (m, 2H), 1,07-1,22 (m, 7H), 1,40-1,49 (m, 2H), 1,982,07 (m, 1H), 2,60-3,15 (m, 2H), 3,20-3,29 (m, 1H), 3,53-3,65 (m, 1H), 4,09-4,34 (m, 2H), 4,37-4,48 (m, 1H), 4,98-5,34 (m, 2H), 7,00-7,22 (m, 3H), 7,30-7,37 (m, 1H), 7,45-7,51 (m, 2H).
Utilizarea în mod esenţial a metodei descrise în Exemplele 1 şi 2, utilizând 1[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(dimetil)silil]oximetil]-5-[cis-2-(2-hidroxi-2-metil-propil)ciclopropil]-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-diclorofenil)etenona, izomerul 2 (60 mg, 104mmol), dă compusul din titlu 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenona, izomerul 2, (42 mg, randament 87%). ESMS pentru fiecare (m/z): 462 (M+1). 1H nmr (400 MHz, dmsod6) izomer 1: δ 0,81 (s, 3H), 0,83-0,94 (m, 4H), 1,14-1,26 (m, 5H), 1,28-1,37 (m, 1H), 1,50 (d, 1H), 2,09-2,18 (m, 1H), 2,66-3,05 (m, 2H), 3,27-3,32 (m, 1H), 3,56-3,67 (m, 1H), 4,084,32 (m, 2H), 4,39-4,48 (m, 1H), 4,96-5,26 (m, 2H), 7,00-7,16 (m, 3H), 7,33 (t, 1H), 7,48 (d, 2H).
Exemplele 5 şi 6 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-
(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1, şi 2-(2,6Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-(hidroximetil)-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 2
Un amestec de 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[(3R)-4,4-difluoro-3-hidroxi-3metil-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etanonă şi 2-(2,6diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[(3S)-4,4-difluoro-3-hidroxi-3-metil-butil]-3-(hidroximetil)-1-metil3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etanonă (493 mg, 0,75 mmol) este dizolvat în THF (12 mL). Se adaugă o soluţie 1M de fluorură de tetrabutilamoniu în THF (3 mL, 3 mmol) şi amestecul rezultat este agitat la RT timp de 1 oră. Amestecul este diluat cu EtOAc şi spălat cu soluţie apoasă saturată de NaCl. Stratul organic este separat, uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, utilizând un gradient de 0-75% EtOAc în hexani, pentru a da un amestec de compuşi din titlu ca spumă albă (342 mg, randament 97%) după evaporarea fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 470 (M+1).
Doi diastereomeri sunt purificaţi suplimentar şi separaţi prin SFC chirală (coloană CHIRALCEL® OD-H, 21 × 250 mm), eluând cu metanol:CO2 (15:85) la un debit de 80 mL/min şi temperatură de 40°C, pentru a da izomerul 1 (156 mg, randament 46%) şi izomerul 2 (141 mg, randament 41%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite.
Izomerul 1: ESMS (m/z): 470 (M+H). TR SFC analitică: 1,618 min (coloană CHIRALCEL® OD-H, 4 × 150 mm, 15% metanol/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Izomerul 2: ESMS (m/z): 470 (M+H). TR SFC analitică: 2,213 min (coloană CHIRALCEL® OD-H, 4 × 150 mm, 15% metanol/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Exemplul 7 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metilbutil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etanonă
1-((1S,3R)-3-(((terţ-butildifenilsilil)oxi)metil)-6-fluoro-5-(3-hidroxi-3-metilbutil)-1metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il)-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etan-1-ona (5,3 g, 7,7 mmol) este dizolvată în THF (129 mL) şi se adaugă o soluţie 1M de fluorură de tetrabutilamoniu în THF (23 mL, 23 mmol). Amestecul este agitat la RT timp de 1 oră. Amestecul este diluat cu EtOAc, spălat cu soluţie apoasă saturată de NaCl, şi straturile sunt separate. Extractul organic este uscat pe Na2SO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 50-100% EtOAc în hexani, pentru a obţine compusul din titlu ca solid alb (2,75 g, randament 79%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 452 (M+1). Exemplele 8 şi 9
2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1, şi 2(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans -2-(1-hidroxi-1metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etenonă, izomer 2
Un amestec de 1-[(1R,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6-fluorofenil)etanonă, izomerul 1 şi 1-[(1R,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2-cloro-6fluorofenil)etanonă, izomerul 2 (1,1g, 1,5 mmol) este dizolvat în THF (10 mL) şi amestecul este răcit la 0°C. Se adaugă în picătură o soluţie 1M de fluorură de tetrabutil amoniu inTHF (3 mL, 3 mmol) şi amestecul de reacţie este agitat în timp ce este încălzit la RT peste noapte. Amestecul de reacţie este diluat cu EtOAc şi spălat secvenţial cu apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile rezultate sunt separate, şi stratul organic este uscat pe MgSO4, filtrat, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă. Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţ-butil de metil în hexani, pentru a obţine un amestec al compuşilor din titlu ca ulei chihlimbariu (490 mg, randament 69%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 464 (M+1).
Cei doi diastereomeri sunt purificaţi suplimentar şi separaţi prin SFC chirală (coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 21 × 250 mm, 20% izopropanol/CO2, 80
mL/min, 40°C) \tabpentru \taba \tabobţine \tab2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-
(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenona, izomerul 1 (136 mg, randament 28%; tR HPLC analitică: 2,769 min) şi 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1-hidroxi1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenona, izomerul 2 (121 mg, randament 25%; tR HPLC analitică: 3,368 min) ca solid alb după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite.
Izomer 1: ESMS (m/z): 464 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 0,94-1,17 (m, 2H), 1,17-1,25 (m, 3H), 1,25-1,44 (m, 4H), 1,60 (s, 3H), 1,80-1,90 (m, 1H), 2,07-2,37 (m, 1H), 2,91-3,23 (m, 3H), 3,47-3,57 (m, 1H), 3,92 (t, J = 16,1 Hz, 1H), 4,05 (s, 2H), 4,424,66 (m, 1H), 5,04 (q, J = 7,0 Hz, 0,5 H), 5,21 (q, J = 7,0 Hz, 0,5 H). 6,83-7,09 (m, 3H), 7,19-7,26 (m, 2H). TR SFC analitică 2,769 min (coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose2, 4 × 150 mm, 20% izopropanol/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Izomer 2: ESMS (m/z): 464 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 0,71-0,81 (m, 1H), 1,22 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,33-1,44 (m, 4H), 1,48-1,59 (m, 1H), 1,59-1,69 (m, 2H), 1,69-1,81 (m, 1H), 2,87-3,08 (m, 1H), 3,08-3,31 (m, 1H), 3,47-3,57 (m, 1H), 3,70-3,95 (m, 1H), 3,97-4,11 (m, 2H), 4,43-4,60 (m, 1H), 5,01-5,26 (m, 1H), 6,84-7,08 (m, 3H), 7,20-7,26
(m, 2H). TR SFC analitică 3,368 min (coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4 × 150 mm, 20% izopropanol/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Exemplele 10 şi 11
2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1, şi 2-(2,6diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 2
Un amestec de 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5-[trans-2-(1hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6-
diclorofenil)etanonă, izomer 1 şi 1-[(1S,3R)-3-[[terţ-butil(difenil)silil]oximetil]-6-fluoro-5[trans-2-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]-2-(2,6diclorofenil)etanonă, izomer 2 (333 mg, 0,5 mmol), este dizolvat în THF (4,6 mL) şi amestecul este răcit la 0°C. Se adaugă în picătură o soluţie 1M de fluorură de tetrabutilamoniu în THF (0,50 mL, 0,50 mmol) şi amestecul de reacţie rezultat este încălzit la RT cu agitare peste noapte. Amestecul de reacţie este diluat cu EtOAc şi spălat secvenţial cu apă şi soluţie apoasă saturată de NaCl. Straturile sunt separate, şi faza organică este uscată pe MgSO4, filtrată, şi filtratul este concentrat sub presiune redusă.
Reziduul rezultat este purificat prin cromatografie rapidă pe gel de siliciu, eluând cu un gradient de 0-100% eter terţ-butil de metil în hexani, pentru a obţine un amestec al compuşilor din titlu ca ulei chihlimbariu (211 mg, randament 72%) după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite. ESMS (m/z): 480 (M+1).
Cei doi diastereomeri sunt purificaţi suplimentar şi separaţi prin SFC chirală
(coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 21 × 250 mm, 20% IPA/CO2, 80 mL/min,
40°C) pentru a obţine compuşii din titlu 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-
(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin2-il]etenonă, izomer 1 (41 mg, randament 21%; tR HPLC analitică: 3,095 min) şi 2-(2,6diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans-(1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenonă, izomer 2 (47 mg, randament 24%; tR HPLC analitică: 3,793 min) ca solid alb după evaporarea solventului fracţiunilor cromatografice dorite.
Izomer 1: ESMS (m/z): 480 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 0,92-1,07 (m,
2H), 1,20-1,27 (m, 5H), 1,60-1,66 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 1,80-1,90 (m, 1H). 2,93-3,23 (m, 2H), 3,47-3,60 (m, 1H), 3,81-4,00 (m, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,44-4,70 (m, 1H), 5,06 (q, J = 6,7 Hz, 0,5 H), 5,23 (q, J = 6,7 Hz, 0,5 H), 6,84-7,04 (m, 2H), 7,16-7,23 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 2H). TR SFC analitică 3,095 min (coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4,6 × 150 mm, 20% IPA/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Izomer 2: ESMS (m/z): 480 (M+H). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 0,70-0,83 (m, 1H), 1,09-1,18 (m, 1H), 1,23 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 1,32 (s, 3H), 1,35-1,46 (m, 4H), 1,64 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,69-1,82 (m, 1H), 2,90-3,10 (m, 1H), 3,16-3,37 (m, 1H), 3,50-3,61 (m, 1H), 3,70-4,00 (m, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,48-4,63 (m, 1H), 5,09 (q, J = 6,7 Hz, 0,6H), 5,24 (q, J = 6,7 Hz, 0,4H). 6,85-7,05 (m, 2H), 7,15-7,23 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,0 Hz, 2H). TR
SFC analitică 3,793 min (coloană FENOMENEX® LUX® Cellulose-2, 4,6 × 150 mm, 20% IPA/CO2, 5 mL/min, 225 nm).
Test PAM al receptorului D1 uman
Activitatea PAM a compuşilor din prezenta invenţie poate fi măsurată în mod esenţial cum s-a descris în Svensson şi colab., An Allosteric Potentiator of the Dopamine D1 Receptor Increases Locomotor Activity in Human D1 Knock-in Mices without Casusing Stereotypy or Tachyphylaxis. J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128.
Mai specific, celulele HEK293 care exprimă stabil receptorul D1 uman (număr de acces NM 000794) sunt generate prin transducţia genelor utilizând vectorul retroviral pBABE-bleo şi selectate cu Zeocin™ (InvivoGen). La aproximativ 80% confluenţă, celulele sunt recoltate utilizând TrypLE™ Express (Gibco), suspendate în FBS plus 8% DMSO, şi depozitate în azot lichid. Pe ziua de testare, celulele sunt dezgheţate şi resuspendate în tampon STIM (soluţie salină echilibrată Hanks, suplimentată cu 0,1% BSA, 20 mM HEPES, 500 µM IBMX, şi 100 µM acid ascorbic).
Compusul de testat este diluat serial (1:2) cu DMSO în plăci de testare (ProxiPlate384 Plus, PerkinElmer) utilizând distribuirea acustică (Labcyte) pentru a furniza 20 concentraţii pentru curbele de răspuns complet. Compusul de testat (80 nL) se adaugă la
5 µL tampon STIM conţinând 2000 celule, şi 5 µL de soluţie de dopamină cu concentraţie de 2X în tampon STIM care va genera un răspuns al nivelului EC20 (24 nM în soluţie stoc, sau 12 nM final) şi o concentraţie DMSO finală în godeu de 0,8%. Plăcile sunt incubate la temperatura camerei pe un timp total de reacţie de 60 min.
Producţia de AMPc-uri este cuantificată utilizând detecţia HTRF® (Cisbio) în conformitate cu instrucţiunile fabricantului. În general, tamponul de lizare care conţine criptat anti-AMPc (5 µL) şi D2-conjugat (din trusa HTRF®)(5µL), se adaugă la godeuri, plăcile sunt incubate timp de 60-90 de minute suplimentare, şi fluorescenţa rezolvată în timp este detectată utilizând un cititor de placă EnVision™ (PerkinElmer). Datele referitoare la fluorescenţă sunt convertite în concentraţii AMPc utilizând o curbă AMPc standard şi sunt analizate utilizând o ecuaţie logistică neliniară cu 4 parametri (Genedata Screener, versiunea 13.0.5-standard). Pentru curbele de răspuns la concentraţie în mod potenţiator, rezultatele sunt exprimate ca procente ale ferestrei dintre un răspuns la concentraţia EC20 de dopamină singură (normalizat la 0%) şi răspunsul maxim la dopamină (definit printr-un răspuns la 5 µM de dopamină, concentraţie finală, normalizat ca 100%). Valorile EC50 absolute sunt calculate pe baza răspunsurilor maxim şi minim ale agonistului de control (dopamină). % de potenţiere (% din maxim) este determinat din maximul ajustat al curbei de răspuns la concentraţie. Valorile absolute ale EC50 şi % din maxim pentru anumiţi compuşi exemplificativi sunt prezentate în următorul Tabel 1: Tabelul 1:
Compus Valoare absolută EC50 (nM) (SEM, N) % din maxim (SE, N) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenonă, izomer 2 8,28 (0,669, n=3) 96,4 (5,10, n=3) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3metilbutil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etenonă, izomer 1 7,96 (1,66, n=8) 101 (2,79, n=8) 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenonă, izomer 2 13,2 (3,03, n=3) 82,0 (6,80, n=3) 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans- (1-hidroxi-1-metil-etil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenonă, izomer 2 5,19 (0,976, n=3) 92,7 (4,57, n=3) 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etanonă (Exemplul 7) 10,2 (1,40, n=15) 90,9 (2,69, n=15) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[trans-2-(1hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin2-il]etenonă, izomer 1 12,1 (1,76, n=3) 94,2 (5,95, n=3) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi -1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etenonă, izomer 1 11,2 (2,27, n=3) 91,9 (3,95, n=3) Compus Valoare absolută EC50 (nM) (SEM, N) % din maxim (SE, N) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-3-(hidroximetil)-5-[cis-2-(1-hidroxi -1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etenonă, izomer 2 86,7 (29,4, n=3) 93,2 (7,36, n=3) 2-(2,6-Diclorofenil)-1-[(1S,3R)-5-[4,4-difluoro-3-hidroxi-3metilbutil]-3-(hidroximetil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il] etenonă, izomer 2 12,7 (1,83, n=7) 97,0 (3,44, n=7) 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1R,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5[trans-2-(1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1H- izochinolin-2-il]etenonă, izomer 1 33,6 (7,85, n=3) 78,9 (1,43, n=3) 2-(2,6-diclorofenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-[trans- (1-hidroxi-1-metiletil)ciclopropil]-1-metil-3,4-dihidro-1Hizochinolin-2-il]etenonă, izomer 1 12,3 (2,21, n=3) 86,9 (4,11, n=3)
Valorile EC50 absolute furnizate pentru compuşii exemplificativi de mai sus din Tabelul 1 ilustrează potenţierea semnalizării receptorului D1 uman ca răspuns la dopamină, şi ilustrează activitatea compuşilor conform revendicării 1 ca modulatori alosterici pozitivi ai receptorului D1 de dopamină umană. Compuşii exemplificativi 1-6, şi 8-11 din prezenta invenţie reprezintă compuşi chirali, şi cum s-a descris în Exemplele de aici, au fost făcuţi şi testaţi ca stereoizomeri individuali. Vezi Exemplele 1-6, 8-11, şi Tabelul 1 de mai sus. Datele combinate pentru stereoizomerii individuali (valorile EC50 absolute care variază de la 5,6 nM până la 86,7 nM pentru Exemplele 1-6, 8-11) demonstrează că fiecare stereoizomer individual reprezintă o realizare a modulatorului alosteric pozitiv D1 a prezentei invenţii. Caracterizarea şi determinarea stereochimiei absolute a stereoizomerilor individuali din exemplele furnizate aici sunt de competenţa domeniului pentru specialistul obişnuit, şi metodele pentru astfel de determinări sunt bine cunoscute în literatura de chimie medicinală (vezi de ex. Chiral Analysis (a doua ediţie) Advances in Spectroscopy, Chromatography and Emerging Methods, 2018). De exemplu, configuraţiile absolute sunt determinate în mod obişnuit prin RMN pe baza utilizării de CDA-uri: derivaţi diastereomerici care implică faptul că, legarea covalentă între auxiliarul chiral şi substraturile enantiomerice adoptă o conformaţie preferată care poate fi predictată pe baza ecranării diferenţiale care este cauzată de un inel aromatic încorporat în reactivul de discriminare chirală.
Generarea Knock-in-ului receptorului D1 uman la şoarece
Un şoarece transgenic în care receptorul dopaminei murine 1 (D1) este înlocuit cu omologul său uman, poate fi generat prin tehnici standard (vezi în general Svensson şi colab., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). De exemplu, fragmentele genomice de şoarece sunt subclonate din biblioteca cromozomială artificială bacteriană RP23 şi reclonate într-un vector de ţintire PGK-neo. Cadrul de citire deschis al şoarecelui este înlocuit cu cadrul de citire deschis al receptorului D1 uman în exonul 2. Un neo marker de selecţie în amonte de exonul 2 este flancat de situsuri frt pentru îndepărtarea ulterioară. Flancarea exonului 2 cu situsuri de selecţie loxP permite opţiunea de a genera şoareci knock-out D1 prin încrucişarea cu şoareci care exprimă gena nuclează cre.
Linia de celule stem embrionare C57BL/6 N, B6-3, este crescută pe un strat alimentator inactivat mitotic de fibroblaste embrionare de şoarece în DMM cu glucoză ridicată cu 20% FBS şi 2×106 unităţi/l factor inhibitor de leucemie. Zece milioane de celule stem embrionare plus 30 de micrograme de ADN vectorial liniarizat sunt electroporate şi supuse la selecţie G418 (200 µg/ml). Clonele sunt izolate şi analizate prin colorare Southern.
O clonă care conţine inserţia de dimensiune aşteptată, este inserată în blastociste şi şoarecii rezultaţi sunt genotipaţi prin PCR. O himeră masculină este încrucişată cu una feminină conţinând gena nuclează flp pentru a elimina markerul de selecţie. Descendenţii care conţin receptorul D1 uman fără marker-ul de selecţie sunt identificaţi prin PCR. Un heterozigot masculin este împerecheat cu şoareci C57BL/6 femele. Descendenţii masculini şi feminini care conţin receptorul D1 uman sunt împerecheaţi, şi homozigoţii sunt identificaţi prin PCR. Comportamentul şi reproducerea homozigoţilor sunt găsite ca fiind normale, şi colonia este menţinută în stare homozigotă pentru generări succesive.
Activitatea locomotorie de bază (obişnuită)
Se poate demonstra in vivo eficacitatea prezenţilor compuşi care acţionează prin receptorul D1 utilizând activitatea locomotorie a şoarecelui. Activitatea locomotorie este măsurată utilizând un sistem automat de urmărire a mişcărilor la şoareci. Monitorizarea comportamentelor activităţii locomotorii la şoareci are loc în cuşti de pantofi din plastic transparent care au dimensiuni de 45 × 25 × 20 cm, cu o adâncime de 1 cm din aşchii de lemn pentru aşternut absorbant, şi acoperite la partea superioară cu o cuşcă din plastic filtrată ventilată. Cuştile au fost plasate într-un cadru dreptunghiular conţinând o reţea de 12 fascicule fotocelulare într-o configuraţie 8 × 4 (Kinder Scientific, Poway, CA) care este poziţionat la 2,5 centimetri faţă de podeaua cuştii pentru a detecta mişcările corpului (ambulaţii) şi a le înregistra pe calculator.
Şoarecii knock-in masculi cu receptor D1 uman sunt plasaţi în camere şi lăsaţi să se obişnuiască cu incintele timp de 60 min. În timpul perioadei de adaptare, şoarecii au prezentat o scădere locomotorie în timp, după cum s-a aşteptat. După administrarea unui compus al invenţiei, s-a constatat că mişcarea animalului a crescut într-o manieră dependentă de doză.
Şoarecii sunt repartizaţi aleator la grupurile de tratament. În studiul de răspuns la doză, fiecare şoarece este plasat individual în una dintre cuştile de activitate locomotorie pe o perioadă de adaptare de 60 minute. Şoarecii sunt apoi dozaţi oral utilizând compusul de testat într-un vehicul de 20% hidroxipropil-betaciclodextrină şi utilizând un volum de dozare de 10 mL/kg. După dozare, şoarecii sunt plasaţi înapoi în cuştile LMA şi numărul total de ambulaţii este înregistrat la un interval de 10 min pentru fiecare şoarece pe o perioadă de măsurare de 60 minute. Analiza statistică este efectuată utilizând ANOVA unifactorială urmată de analiza post-hoc utilizând testul de comparaţie al lui Dunnett.
Compusul din Exemplul 7 este testat în mod esenţial cum s-a descris mai sus şi sa constatat că îşi creşte mişcarea de bază într-o manieră dependentă de doză (Tabelul 2 de mai jos).
Tabelul 2:
Exemplul 7 (doză, mg/kg, PO) Activitate locomotorie de bază (total ambulaţii timp de 60 min) medie (SEM, %SE), N=8/grup 0,0 (Vehicul - 20% hidroxipropilbeta-ciclodextrină) 421 (138, 33%) Exemplul 7 (doză, mg/kg, PO) Activitate locomotorie de bază (total ambulaţii timp de 60 min) medie (SEM, %SE), N=8/grup 3,0 538 (101, 19%) 6,0 1111 (410, 37%) 10 1471*** (149, 10%) 30 3937**** (393, 10%) 60 4613**** (502, 11%) Analiza statistică este făcută pe datele totale de ambulaţii după transformarea Log10. ANOVA unifactorială: ****p<0,0001, (testul de comparaţie multiplă al lui Dunnett: în comparaţie cu controlul cu vehicul pe datele transformate log10: ***p<0,001, ****p<0,0001)
Datele referitoare la activitatea locomotorie de bază din Exemplul 7 prezentate în Tabelul 2 ilustrează faptul că, compuşii invenţiei, şi Exemplul 7 în particular, sunt eficienţi în activarea locomotorie a animalelor care sunt adaptate la mediu. Se crede că această activitate este rezultatul activării centrale a receptorilor D1 prin potenţiere alosterică (Vezi de exemplu Svensson şi colab., J. Pharmacol. Exp. Ther. (2017) 360:117-128). Datele furnizate în Tabelul 2 pentru Exemplul 7 ilustrează eficacitatea in vivo avantajoasă farmacologic a compuşilor invenţiei pentru potenţierea răspunsurilor endogene mediate de dopamină. Datele furnizate în Tabelul 2 pentru Exemplul 7, ilustrează în plus biodisponibilitatea orală avantajoasă farmacologic a Exemplului 7 şi a compuşilor cu formula I.
Niveluri plasmatice şi ale creierului:
Exemplul 7, 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etenona, a fost dozată oral la un şoarece mascul de la 3 mg/kg până la 60 mg/kg în stare de alimentare, şi concentraţia plasmatică şi a creierului a fost determinată la 1 oră după dozare. Fracţiunea nelegată a compusului a fost determinată in vitro aşa cum s-a descris anterior (Zamek-Gliszczynski MJ, şi colab., Validation of 96-well equilibrium dialysis with non-radiolabeled drug for definitive measurement of protein binding and application to clinical development of highlybound drugs., J. Pharm. Sci. (2011) 100: 2498-2507). Raportul (Kpuu) între concentraţia nelegată a creierului (Cu,creier) vs. concentraţia nelegată a plasmei (Cu,plasma) a fost determinat cum s-a descris anterior (Raub TJ, şi colab., Brain Exposure of Two Selective Dual CDK4 and CDK6 Inhibitors and the Antitumor Activity of CDK4 and CDK6 Inhibition in Combination with Temozolomide in an Intracranial Glioblastoma Xenograft. Drug Metab. Dispos. (2015) 43:1360-71). Datele prezentate mai jos în Tabelul 3 pentru Exemplul 7 sunt mediile de la 3 animale la fiecare doză. „Con.» se referă la concentraţie. Tabelul 3:
Doză mg/kg Timp ore Con. Din plasmă nM Con. Din creier nM fu,plas ma fu,cre ier Cu,plasma nM Cu,creier nM Kpu u 3 1 353 18 0,0141 0,024 9 4,97 0,448 0,12 6 6 1 682 45,1 0,0141 0,024 9 9,62 1,12 0,14 3 Doză mg/kg Timp ore Con. Din plasmă nM Con. Din creier nM fu,plas ma fu,cre ier Cu,plasma nM Cu,creier nM Kpu u 10 1 1210 84,9 0,0141 0,024 9 17,1 2,11 0,12 2 30 1 4980 557 0,0141 0,024 9 70,1 13,9 0,19 4 60 1 9080 1290 0,0141 0,024 9 128 32,1 0,24 8
Compuşi invenţiei, de exemplu Exemplul 7, 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2il]etenona, au prezentat o combinaţie avantajoasă de proprietăţi farmacologice, cum ar fi potenţierea semnalizării receptorului D1 uman ca răspuns la dopamină, disponibilitatea orală ridicată in vivo, disponibilitatea sistemului nervos central, şi eficacitatea in vivo a activării locomotorie a animalelor care sunt adaptate la mediu. De exemplu, Exemplul 7 demonstrează potenţierea semnalizării receptorului D1 uman ca răspuns la dopamină (10,2 ± 1,40 nM (n=15)), şi eficacitatea semnificativă in vivo când se administrează oral la 10, 30, şi 60 mg/kg PO, în activarea locomotorie a şoarecilor knock-in cu receptor D1 uman care sunt adaptaţi la mediu, ilustrând favorabil biodisponibilitatea orală a acestui compus. În plus, Exemplul 7 este în general bine tolerat când se administrează in vivo şobolanilor normali pe un interval de dozare larg, şi prezintă o lipsă avantajoasă de toxicitate în acest experiment in vivo. Astfel, Exemplul 7 demonstrează o combinaţie avantajoasă de proprietăţi farmacologice favorabile care susţin posibila utilizare ca un agent terapeutic administrat oral pentru potenţialul receptor D1 de dopamină, şi tratamentul pentru boala Parkinson, schizofrenie, ADHD, şi/sau boala Alzheimer.
Determinarea fracţiunii compusului eliminată prin metabolismul CYP3A4 (fmCYP3A4)
Fracţiunea de eliminare globală a unui medicament prin metabolismul oxidativ de către citocromul P450 (CYP) este o indicaţie importantă a efectelor adverse mediate de interacţiunea medicament-medicament pentru potenţialele victime (vezi în general Ogu, Chris C., şi Maxa, Jan L., Drug interactions due to cytochrome P450, BUMC Proceedings
2000; 13:421-423.) Cu cât este mai mare o fracţiune de eliminare globală pentru un medicament dat care trece printr-o cale de oxidare a CYP, în special exclusiv printr-un singur CYP, ca de exemplu CYP3A4, cu atât mai mare este potenţialul ca medicamentul să poată fi considerat susceptibil la interacţiuni nedorite victima medicamentuluimedicament când este utilizat în terapie. Pentru a determina fmCYP3A4 (fracţiunea de metabolism prin CYP3A4), este determinată mai întâi fracţiunea de oxidare mediată de P450 (fmCYP) din hepatocitele umane. Se determină apoi contribuţia relativă a oxidării mediate de CYP3A4 (fmCYP3A4_RCP) asupra altor P450, utilizând un test de fenotipare CYP recombinant (RCP). Fracţiunea fmCYP3A4 este calculată utilizând următoarea ecuaţie:
Determinarea fracţiunii de metabolism oxidativ (fmCYP) mediat de citocromul P450 (CYP) în hepatocitele umane
Contribuţia relativă a P450 în metabolismul global al unui compus a fost determinată din eliminarea medicamentului într-un test utilizând hepatocite umane în prezenţa şi absenţa inhibitorului pan P450, 1-aminobenzotriazol (ABT). Eliminarea intrinsecă a fost determinată în hepatocitele umane crioconservate cum s-a descris în mod esenţial în McGinnity DF, şi colab. (2004) Evaluation of fresh and cryopreserved hepatocytes as in vitro drug metabolism tools for the prediction of metabolic clearance.
Drug Metab Dispos 32:1247-1253. În general, incubările de test conţin 0,3 µM compus de testat şi 106 celule/mL hepatocite, cu sau fără 0,5 ore de preincubare cu ABT (1 mM). Pierderea compusului părinte este măsurată prin LC/MS după o incubare de 15, 30, 60 şi
90 minute. Eliberarea intrinsecă (µL/min/106 celule) este calculată utilizând următoarea ecuaţie pentru ambele ± ABT. Fracţiunea de metabolism prin CYP este procentajul de inhibare prin ABT.
CLint = -kdep x volum incubare/106 celule,
în care kdep, constanta de depleţie a substratului (min-1), este panta determinată utilizând regresia liniară de la % transformat log rămas pe axa y vs timp pe axa x (min-1).
Determinarea fracţiunii metabolismului mediat de CYP3A4 utilizând un test de fenotipare CYP recombinant (fmCYP3A4 RCP)
Fracţiunea relativă a metabolismului unui compus, contribuită de un CYP dat, ca de exemplu CYP3A4, din metabolismul P450 total al compusului poate fi determinată după cum urmează:
Un panou de 9 CYP-uri recombinante umane (rCYPs) furnizate ca superzomi (BD Gentest, Woburn, MA), incluzând rCYP-urile 1A2, 2B6, 2C8, 2C9, 2C19, 2D6, 2J2, 3A4, şi 3A5, sunt evaluate pentru metabolismul compusului (vezi în general Cannady EA, şi colab. (2015) Evacetrapib: in vitro and clinical disposition, metabolism, excretion, and assessment of drug interaction potential with strong CYP3A and CYP2C8 inhibitors.
Pharmacol Res Perspect 3:e00179). Incubările şi calculele sunt efectuate în mod esenţial cum s-a descris în Wickremsinhe ER, şi colab. (2014), Disposition and metabolism of LY2603618, a Chk-1 inhibitor following intravenous administration in patients with advanced and/or metastatic solid tumors. Xenobiotica 44:827-841, cu excepţia faptului că incubările sunt efectuate timp de 2 ore, dată fiind rata scăzută de rotaţie a compuşilor de test. Eliminarea intrinsecă (CLint) a rCYP-urilor este scalată la microsmele ficatului uman (CLint scala HLM) în conformitate cu ecuaţia de mai jos:
CLint scalat HLM = -kdep x (volum incubare/pmol rCYP) x RAF
în care kdep este constanta ratei de depleţie a substratului (min-1), pmol rCYP este cantitatea specifică lotului de rCYP din incubare, şi factorul de activitate relativă (RAF) este un factor de activitate relativă (pmol/mg) adecvat pentru perechea rCYP-uri/HLM-uri. Constanta vitezei este determinată in-house prin experiment, panta este determinată utilizând regresia liniara din % transformat log rămas pe axa y vs timp pe axa x(min-1). pmol rCYP şi RAF sunt constante furnizate de vendor pentru superzom.
Fracţiunea metabolismului mediat de CYP3A4 (fmCYP3A4_RCP) este determinată prin împărţirea CLint scalat HLM al CYP3A4 la suma dintre CLint scalat HLM pentru fiecare subtip P450 testat (Cannady şi colab., 2015).
Profilul metabolitului hepatocitar
Profilul metabolic hepatocitar este determinat pentru a confirma formarea metaboliţilor prin căile oxidative mediate de P450 şi prin căile neoxidative mediate de enzima fazei II (de exemplu, UDP-glucuronosiltransferaze şi sulfotransferaze). Este determinat în hepatocitele umane în mod esenţial cum s-a descris în Zhou X, şi colab. (2016), Disposition and metabolism of LY2603618, a Chk-1 inhibitor following intravenous administration in patients with advanced and/or metastatic solid tumors. Pe scurt, incubările sunt efectuate într-un incubator cu CO2 la 37°C utilizând o placă cu 24 de godeuri conţinând 250.000 celule/godeu. O soluţie stoc a compusului de testat se adaugă la mediu pentru a da o concentraţie de incubare finală de 2 µM. Incubările care includ mediul şi celulele sunt stinse cu un volum egal de acetonitril după 4 ore. Mostrele sunt procesate şi analizate utilizând LC/MS în mod esenţial cum a fost prezentat de către Zhou şi colab., 2016.
Calcularea fracţiunii compusului eliminată prin metabolismul CYP3A4 (fmCYP3A4)
Excreţia renală şi biliară a compuşilor testaţi este testată pe câini canulaţi în conducte biliare, în mod esenţial în conformitate cu Burkey JL, şi colab. (2002) Disposition of LY333531, a selective protein kinase C beta inhibitor, in the Fischer 344 rat and beagle dog. Xenobiotica 32:1045-1052. Compusul din Exemplul 7 este testat în mod esenţial cum s-a descris şi excreţia sa renală şi biliară se dovedeşte a fi neglijabilă. Fracţiunea compusului eliminată prin metabolismul CYP3A4 este calculată utilizând ecuaţia de mai jos:
unde fmCYP este fracţiunea compusului metabolizată prin CYP măsurată în hepatocitele testului CLint ± ABT;
fm3A4_RCP este fracţiunea compusului metabolizată prin CYP3A4 în testul de fenotipare CYP recombinant.
Determinarea fracţiunii care iese din metabolismul intestinal de primă trecere (FG)
Estimarea fracţiunii metabolizate în intestin poate fi determinată utilizând următoarele ecuaţii găsite în Yang J, şi colab. (2007) Prediction of intestinal first-pass drug metabolism. Curr Drug Metab 8:676-684:
FG = Qintestin/ (Qintestin + fuintestin x CIint CYP3A, intestin)
Qintestin = Qvilos x CIperm / (Qvilos +CIperm)
CIperm = Paplicaţie x aria suprafeţei intestinale
CIint, CYP3A, intestin = CLint, CYP3A, ficat/fumic x proteine microsomale în intestin x 0,4 (calculat inhouse)
Unde Qintestin este un termen de flux hibrid dependent de fluxul sanguin vilos şi permeabilitatea compusului
Fuintestin este fracţiunea de medicament nelegată în enterocite
Qvilos este fluxul sanguin vilos
Clperm este termenul de eliminare care defineşte permeabilitatea prin enterocite
Paplicaţie este permeabilitatea pasivă măsurată in-house în linia celulară MDCKII fumic este fracţiunea de medicament nelegată la microzomii ficatului uman
Parametrii intestinului uman sunt din Yang şi colab., 2007, şi Gertz M, şi colab. (2010) Prediction of human intestinal first-pass metabolism of 25 CYP3A substrates from in vitro clearance and permeability data. Drug Metab Dispos 38:1147-1158.
Model static mecanicistic pentru estimarea DPI a victimei prin inhibarea CYP3A4
Potenţiala modificare a mărimii expunerii AUC la medicament a compuşilor testaţi în prezenţa itraconazolului poate fi determinată prin utilizarea unui model static mecanicistic, în mod esenţial cum s-a descris în Han B, şi colab. (2013) Prediction of CYP3A Mediated Drug-Drug Interactions: Estimation of Gut Wall and Hepatic Contributions. ASCPT Annual Meeting, Indianapolis, ÎN:
unde
fm este fracţiunea metabolizată de către CYP3A4 hepatic
FG este fracţiunea care iese din metabolismul intestinal în enterocite
Ki este constanta de disociere a itraconazolului din enzimă
[I]h este concentraţia de itraconazol din ficat
[I]gut este concentraţia de itraconazol din intestin
Parametrii itraconazolului ca inhibitori ai CYP3A4 (A= 0,10 şi X= 0,10) sunt din Olkkola KT, şi colab. (1994) Midazolam should be avoided in patients receiving the systemic antimycotics ketoconazole or itraconazole. Clin Pharmacol Ther 55:481-485.
Compusul din Exemplul 7, reprezentativ pentru compuşii de intervenţie este testat în mod esenţial cum s-a descris mai sus şi se constată că este în primul rând metabolizat prin procese neoxidative în hepatocite spre deosebire de metabolismul oxidativ prin P450 (fracţiunile metabolizate de CYP-uri fiind de 32,3%). Compusul nu a fost examinat în test
RCP, dar s-a presupus cazul celui mai rău senariu de 100% metabolizare prin CYP3A4 pentru predictarea raportului AUC în prezenţa intraconazolului. Raportul AUC predictat a fost mai mic de 2. Astfel, se crede că, compuşii invenţiei prezintă un risc de interacţiune minimal victimă a medicamentului-medicament prin orice CYP, incluzând CYP3A4 (Vezi Tabelul 4).
Tabelul 4. fmCYP3A4, FG şi raportul AUC predictat pentru compuşii din Exemplul 7
Compus Exemplul 7 fmCYP 0,322 fm3A4_RCP 1 fmCYP3A4 0,322 CLint, CYP3A, ficat µl/min/mg 25,5 fumic 0,392 Paplicaţie 10-6cm/s 37,9 FG 0,78 Raport AUC predictat (cu itraconazol) 1,76

Claims (13)

1. Un compus cu formula: în care: R1 este
R2 este -F sau -Cl; R3 este -F sau -Cl; şi R4 este -H sau -F; cu condiţia că atunci când R1 este
atunci R4 este -F.
2. Compusul în conformitate cu revendicarea 1 cu formula: în care: R1 este
R2 este -F sau -Cl; R3 este -F sau -Cl; şi R4 este -H sau -F; cu condiţia că atunci când R1 este
atunci R4 este -F.
3. Compusul în conformitate cu revendicarea 1 care este:
4. O compoziţie farmaceutică cuprinzând un compus în conformitate cu oricare dintre revendicările 1 până la 3, şi un purtător acceptabil farmaceutic, diluant sau excipient.
5. O compoziţie farmaceutică în conformitate cu revendicarea 4 cuprinzând:
şi un purtător acceptabil farmaceutic, diluant sau excipient.
6. Un compus în conformitate cu oricare dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare într-o metodă de terapie.
7. Un compus în conformitate cu oricare dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul unei tulburări dopaminergice a CNS, selectată din grupul constând din boală Parkinson, boală Alzheimer, demenţă cu corpi Lewy (LBD), demenţă vasculară, schizofrenie, ADHD, depresie, autism, durere musculoscheletală cronică, fibromialgie, tulburări de depreciere cognitivă, tulburări de somn, somnolenţă excesivă pe timpul zilei, narcolepsie, tulburării ale muncii în schimburi, leziune cerebrală traumatică, encefalopatie traumatică cronică, obezitate şi reglarea apetitului, tulburări de dispoziţie, letargie, apatie, şi tulburări de dependenţă.
8. Un compus în conformitate cu oricare dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul bolii Parkinson.
9. Compusul pentru utilizare în conformitate cu revendicarea 8, în care compusul este 2(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etanonă.
10. Un compus în conformitate cu oricare dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare într-o metodă pentru tratamentul bolii Alzheimer.
11. Compusul pentru utilizare în conformitate cu revendicarea 10, în care compusul este 2-(2-cloro-6-fluoro-fenil)-1-[(1S,3R)-6-fluoro-3-(hidroximetil)-5-(3-hidroxi-3-metil-butil)-1metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-il]etanonă.
12. Un compus conform oricăreia dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare, în combinaţie cu un precursor de dopamină, selectat din grupul constând din levodopa, melevodopa, şi etilevodopa, într-o metodă pentru tratamentul bolii Parkinson.
13. Un compus conform oricăreia dintre revendicările 1 până la 3 pentru utilizare, în combinaţie cu un agonist de dopamină, selectat din grupul constând din pramipexol, ropinirol, apomorfnă, rotigotina, bromocriptină, cabergolină, şi pergolidă, într-o metodă pentru tratamentul bolii Parkinson.
MDE20230653T 2020-10-07 2021-10-05 Derivați de fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il-etan-1-onă în calitate de modulatori alosterici pozitivi ai receptorului de dopamină D1 MD4200280T2 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063088479P 2020-10-07 2020-10-07
PCT/US2021/053578 WO2022076418A1 (en) 2020-10-07 2021-10-05 Phenyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1h)-yl-ethan-1-one derivatives as dopamine d1 receptor positive allosteric modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MD4200280T2 true MD4200280T2 (ro) 2024-08-31

Family

ID=78516911

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDE20230653T MD4200280T2 (ro) 2020-10-07 2021-10-05 Derivați de fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il-etan-1-onă în calitate de modulatori alosterici pozitivi ai receptorului de dopamină D1

Country Status (16)

Country Link
EP (1) EP4200280B1 (ro)
JP (1) JP7591138B2 (ro)
CN (1) CN116601146A (ro)
DK (1) DK4200280T3 (ro)
ES (1) ES2976784T3 (ro)
FI (1) FI4200280T3 (ro)
HR (1) HRP20240466T1 (ro)
HU (1) HUE066426T2 (ro)
LT (1) LT4200280T (ro)
MA (1) MA60976B1 (ro)
MD (1) MD4200280T2 (ro)
PL (1) PL4200280T3 (ro)
PT (1) PT4200280T (ro)
RS (1) RS65365B1 (ro)
SI (1) SI4200280T1 (ro)
WO (1) WO2022076418A1 (ro)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JO3316B1 (ar) 2013-05-30 2019-03-13 Lilly Co Eli مركبات 3، 4-داي هيدرو أيزو كوينولين -2(1h)-يل
HRP20201469T1 (hr) * 2014-10-08 2020-12-11 UCB Biopharma SRL Derivati tetrahidroizokinolina
TWI725408B (zh) * 2018-04-20 2021-04-21 美商美國禮來大藥廠 多巴胺d1受體正向異位調節劑

Also Published As

Publication number Publication date
US20230382869A1 (en) 2023-11-30
HUE066426T2 (hu) 2024-08-28
ES2976784T3 (es) 2024-08-08
HRP20240466T1 (hr) 2024-07-05
FI4200280T3 (fi) 2024-05-03
DK4200280T3 (da) 2024-03-04
PT4200280T (pt) 2024-03-26
SI4200280T1 (sl) 2024-04-30
CN116601146A (zh) 2023-08-15
WO2022076418A1 (en) 2022-04-14
RS65365B1 (sr) 2024-04-30
JP2023545060A (ja) 2023-10-26
JP7591138B2 (ja) 2024-11-27
EP4200280A1 (en) 2023-06-28
PL4200280T3 (pl) 2024-05-20
MA60976B1 (fr) 2024-05-31
LT4200280T (lt) 2024-04-25
EP4200280B1 (en) 2024-02-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112409363B (zh) 用于治疗认知损害的苯并二氮杂䓬衍生物、组合物和方法
KR20210130843A (ko) 1,4-이치환된 피리다진 유사체 및 smn-결핍-관련 상태를 치료하기 위한 그의 용도
CN101910157A (zh) 吲哚化合物和治疗内脏痛的方法
JP2021528427A (ja) 認知障害を処置するためのベンゾジアゼピン誘導体、組成物および方法
EP3781560B1 (en) Pyrazo-tetrahydroisoquinoline derivatives as dopamine d1 receptor positive modulators
KR20220118483A (ko) Oga 억제제 화합물
CA2786072A1 (en) Sulfone compounds as 5-ht6 receptor ligands
Weber et al. Medicinal chemistry of σ1 receptor ligands: pharmacophore models, synthesis, structure affinity relationships, and pharmacological applications
MD4200280T2 (ro) Derivați de fenil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il-etan-1-onă în calitate de modulatori alosterici pozitivi ai receptorului de dopamină D1
US12503442B2 (en) Phenyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1h)-yl-ethan-1-one derivatives as dopamine d1receptor positive allosteric modulators
EP3654959A2 (en) Compositions and methods for treatment of central nervous system tumors
CA3160367A1 (en) Oga inhibitor compounds
HK40087385A (en) Phenyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1h)-yl-ethan-1-one derivatives as dopamine d1 receptor positive allosteric modulators
HK40087385B (en) Phenyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1h)-yl-ethan-1-one derivatives as dopamine d1 receptor positive allosteric modulators
JP2024533306A (ja) 認知および気分症状の処置のためのイミダゾベンゾジアゼピン
WO2007026254A2 (en) Benzodiazepine derivatives , their preparation and the therapeutic use thereof
PL245933B1 (pl) (Chinolino lub izochinolino) sulfonamidy amin cyklicznych, kompozycja je zawierająca, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie medyczne
US20250073217A1 (en) Small molecule adrenoreceptor antagonists and uses thereof
EA041402B1 (ru) Производные пиразотетрагидроизохинолина в качестве положительных модуляторов допаминового d1 рецептора
HK40036940B (en) Pyrazo-tetrahydroisoquinoline derivatives as dopamine d1 receptor positive modulators
HK40036940A (en) Pyrazo-tetrahydroisoquinoline derivatives as dopamine d1 receptor positive modulators
KR20230073197A (ko) 세로토닌 수용체 조절제
CZ2008423A3 (cs) Indolonové slouceniny užitecné pri lécení kognitivní poruchy
WO2013029043A1 (en) Selective kinase inhibitors