MD1091Z - Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro - Google Patents
Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- MD1091Z MD1091Z MDS20160032A MDS20160032A MD1091Z MD 1091 Z MD1091 Z MD 1091Z MD S20160032 A MDS20160032 A MD S20160032A MD S20160032 A MDS20160032 A MD S20160032A MD 1091 Z MD1091 Z MD 1091Z
- Authority
- MD
- Moldova
- Prior art keywords
- plants
- mentha
- vitro
- gattefossei
- maire
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 241001161432 Mentha gattefossei Species 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 7
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 15
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 5
- 235000016254 Mentha gattefossei Nutrition 0.000 description 3
- 241001479543 Mentha x piperita Species 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 235000004357 Mentha x piperita Nutrition 0.000 description 2
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021580 Cobalt(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 241000207923 Lamiaceae Species 0.000 description 1
- 235000016257 Mentha pulegium Nutrition 0.000 description 1
- 229910004619 Na2MoO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052927 chalcanthite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229910052564 epsomite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011066 ex-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000001050 hortel pimenta Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910052603 melanterite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001771 mentha piperita Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 235000017807 phytochemicals Nutrition 0.000 description 1
- 229930195732 phytohormone Natural products 0.000 description 1
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 description 1
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 description 1
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro.Procedeul, conform invenţiei, include inocularea minibutaşilor şi cultivarea lăstarilor obţinuţi din mugurii axilari cu inducerea rizogenezei pe un mediu nutritiv, care conţine ½ săruri minerale faţă de mediul Murashige-Skoog, totodată cultivarea se efectuează la temperatura de 26°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, cu o fotoperioadă de 16 ore lumină, intensitatea iluminării de 2000 lx şi pH-ul 5,8, timp de 4…5 săptămâni.
Description
Invenţia se referă la biotehnologie, şi anume la un procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro.
Mentha gattefossei Maire este o plantă medicinală rară din familia Lamiaceae, endemică din Maroc, cu un areal de răspândire foarte restrâns, estimat la 2000 km2.
Partea aeriană a plantei sintetizează ulei volatil şi alte clase de compuşi biologic activi (polifenoli, flavonoide) cu efect antioxidant pronunţat. Conform studiului bibliografic de specialitate planta până în prezent rămâne a fi insuficient cercetată din punct de vedere fitochimic.
Specia este protejată la nivel internaţional, fiind inclusă în Lista Roşie a IUCN (International Union for the Conservation of Nature) la categoria plantelor Near Threatened. Efectivul populaţiilor naturale este în continuă descreştere ca rezultat al colectării intensive în scopuri medicinale şi ca sursă alimentară. Se exploatează, de asemenea, intensiv şi pentru extragerea uleiului volatil la nivel local şi internaţional.
În Republica Moldova se menţine pe terenul experimental al Grădinii Botanice (I) a AŞM, fiind obţinută prin schimbul internaţional de seminţe cu Grădina Botanică din Coimbra, Portugalia. Numărul redus de exemplare nu asigură materialul iniţial de înmulţire pentru o eventuală extindere în cultură pe suprafeţe mai mari, precum şi a materialului vegetal suficient pentru studii chimice ulterioare. Acest fapt implică necesitatea elaborării metodei de multiplicare rapidă în cultura in vitro a plantelor de Mentha gattefossei Maire, fiind în acelaşi timp o măsură eficientă de conservare ex situ a acestui taxon puternic periclitat la nivel mondial.
Se cunoaşte procedeul de micropropagare a plantelor de Mentha piperita, ce constă în activarea mugurilor axilari, prezenţi la nivelul internodurilor, respectiv la subsuoara frunzelor. Pentru activarea şi creşterea intensivă a mugurilor axilari, explantele au fost cultivate pe mediul nutritiv de bază cu un conţinut de săruri minerale după Murashige-Skoog (Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio-assays with tobaco tissue cultures. Physiology Plantarum, 1962, v.15, N95, p.473), suplinit cu 6-benzilaminopurină - 0,6 mg/l, agar - 0,6%; valoarea pH-lui a fost ajustată la 5,8 până la autoclavare [1].
Însă acest procedeu are un dezavantaj, ce se manifestă prin perioada dublă de micropropagare.
Dezavantajul menţionat poate fi înlăturat cu ajutorul procedeului revendicat.
Problema pe care o rezolvă invenţia constă în reducerea perioadei de micropropagare, sporirea coeficientului de multiplicare a plantelor şi, respectiv, diminuarea cheltuielilor pentru a obţine o plantă nouă de Mentha gattefossei Maire.
Procedeul, conform invenţiei, include inocularea minibutaşilor şi cultivarea lăstarilor obţinuţi din mugurii axilari cu inducerea rizogenezei pe un mediu nutritiv, care conţine 1⁄2 săruri minerale faţă de mediul Murashige-Skoog, totodată cultivarea se efectuează la temperatura de 26°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, cu o fotoperioadă de 16 ore lumină, intensitatea iluminării de 2000 lx şi pH-ul 5,8, timp de 4…5 săptămâni.
Avantajele invenţiei sunt:
- posibilitatea de a obţine dintr-un explant (minibutaş) în decurs de 4…5 săptămâni, lăstari cu lungimea de 8…9 cm a câte 7…9 internoduri (invenţia), în comparaţie cu lăstari de 2…3 cm a câte 4…5 internoduri dintr-un explant în aceeaşi perioadă de timp (cea mai apropiată soluţie);
- sporirea coeficientului de micropropagare de la aproximativ 4000 plante în şase luni (cea mai apropiată soluţie) până la 150000 plante (invenţia) în aceeaşi perioadă de timp;
- în comparaţie cu cea mai apropiată soluţie, procesul de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire prin procedeul revendicat se caracterizează prin reducerea timpului de menţinere in vitro şi diminuarea numărului de explante necesare pentru multiplicare cu ≈50%.
Rezultatul invenţiei constă în sporirea coeficientului de multiplicare de la aproximativ 4000 plante în şase luni (cea mai apropiată soluţie) până la 150000 plante (invenţia) de Mentha gattefossei Maire în aceeaşi perioadă de timp, datorită modificării conţinutului mediului nutritiv (1⁄2 săruri minerale după Murashige-Skoog). Aceste modificări induc creşterea lăstarilor cu majorarea numărului de internoduri (ceea ce sporeşte coeficientul potenţial de multiplicare).
Exemplu de realizare concretă a invenţiei
Plantele de Mentha gattefossei Maire au fost obţinute din lăstarii plantelor cultivate din seminţe pe terenul experimental al Grădinii Botanice (I) a AŞM. Pentru a asigura sterilizarea, lăstarii de Mentha gattefossei Maire au fost trataţi cu preparatul comercial ACE (agent de înălbire pe bază de clor) de 20% pe parcursul a 10 minute şi spălaţi de trei ori cu apă sterilă. Inducerea lăstarilor şi creşterea plantulelor a fost realizată pe mediul nutritiv Murashige-Skoog (MS) cu pH-ul 5,8, la regimul de temperatură de 26°C, cu fotoperioada de 16 ore lumină (2000 lx) şi 8 ore întuneric.
O parte din minibutaşi (controlul) a fost cultivată pe mediul nutritiv Murashige-Skoog, cu următorul conţinut de săruri minerale (mg/l): NH4NO3 - 1650, KNO3 - 1900, MgSO4·7H2O -370, KH2PO4 -170, CaCl2·2H2O - 440, H3BO3 - 6,2, MnSO4·4H2O - 22,3, CoCl2·6H2O-0,025, CuSO4 ·5H2O - 0,025, ZnSO4·7 H2O - 8,6, Na2MoO4·2H2O - 0,25, KI - 0,83, FeSO4·7H2O - 27,8, Na2EDTA - 37,3; agar - 0,6%. Altă parte a fost cultivată pe acelaşi mediu, dar suplimentat cu regulatorul de creştere 6-benzilaminopurină, valoarea pH-lui fiind ajustată înainte de autoclavare până la 5,8 (cea mai apropiată soluţie). A treia parte de minibutaşi a fost cultivată pe mediul nutritiv Murashige-Skoog ce conţinea 1⁄2 săruri minerale indicate în control, pH-ul fiind 5,8, fără fitohormoni (invenţia). În aşa fel mediile de cultivare se deosebeau după concentraţia şi conţinutul unor componenţi. Minibutaşii celor trei variante au fost cultivaţi la temperatura 26°C, cu fotoperioada de 16 ore lumină (2000 lx) şi 8 ore întuneric. Umiditatea relativă a aerului a fost de 70%.
Creşterea şi dezvoltarea lăstarilor de la baza mugurilor axilari şi a rădăcinilor, pe mediul nutritiv conform invenţiei, a fost observată după 3 zile de la momentul inoculării, iar după 4…5 săptămâni lăstarii au atins înălţimea de 7…9 cm. După 4…5 săptămâni de la momentul inoculării, fiecare plantă a fost secţionată în internoduri, care ulterior au fost inoculaţi pentru următorul ciclu de dezvoltare pe acelaşi mediu nutritiv. În aşa fel, pe acelaşi mediu nutritiv este posibilă iniţierea culturii in vitro şi cultivarea minibutaşilor pentru a obţine plantule, care sunt pregătite pentru cultivarea în condiţii ex vitro. În cazul celei mai apropiate soluţii, lăstarii cultivaţi după 4…5 săptămâni au atins înălţimea de numai 2,5…3 cm.
Spre deosebire de cea mai apropiată soluţie, procedeul revendicat contribuie la micşorarea de două ori a cheltuielilor pentru reagenţii utilizaţi la cultivarea in vitro; diminuarea duratei de cultivare in vitro pentru obţinerea unei noi generaţii de plantule în decurs de 4…5 săptămâni; sporirea coeficientului de micropropagare de la 4 la 8. Pe parcursul a 3 cicluri s-au obţinut aproximativ 500 de plante (invenţia), faţă de cele 60 plante (cea mai apropiată soluţie), luând în consideraţie faptul că în conformitate cu invenţia propusă se obţin până la unsprezece cicluri pe parcursul unui an, faţă de cele cinci cicluri (cea mai apropiată soluţie), pe parcursul a jumătate de an se pot obţine cel puţin 150000 plante.
Prin urmare, procedeul revendicat permite de a diminua de două ori cheltuielile pentru reagenţi, durata menţinerii in vitro pentru a obţine o nouă generaţie pregătită pentru transferul ex vitro; de a spori de 35 ori numărul de plantule multiplicate pe parcursul unui an, utilizând aceeaşi suprafaţă a camerei de cultivare.
1. Santoro M.V., Nievas F., Zygadlo J., Giordano W., Banchio E. Effects of Growth Regulators on Biomass and the Production of Secondary Metabolites in Peppermint (Mentha piperita) Micropropagated in vitro. American Journal of Plant Sciences, 2013, 4, 49-55 <http://dx.doi.org/10.4236.2013.45A008> Mai, 2013
Claims (1)
- Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro, care include inocularea minibutaşilor şi cultivarea lăstarilor obţinuţi din mugurii axilari cu inducerea rizogenezei pe un mediu nutritiv, care conţine 1⁄2 săruri minerale faţă de mediul Murashige-Skoog, totodată cultivarea se efectuează la temperatura de 26°C, umiditatea relativă a aerului de 70%, cu o fotoperioadă de 16 ore lumină, intensitatea iluminării de 2000 lx şi pH-ul 5,8, timp de 4…5 săptămâni.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDS20160032A MD1091Z (ro) | 2016-03-04 | 2016-03-04 | Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MDS20160032A MD1091Z (ro) | 2016-03-04 | 2016-03-04 | Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| MD1091Y MD1091Y (ro) | 2016-11-30 |
| MD1091Z true MD1091Z (ro) | 2017-06-30 |
Family
ID=57424888
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| MDS20160032A MD1091Z (ro) | 2016-03-04 | 2016-03-04 | Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| MD (1) | MD1091Z (ro) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD605Y (ro) * | 2012-07-09 | 2013-03-31 | Inst De Genetica Si Fiziol A Plantelor Al Academiei De Stiinte A Moldovei | Procedeu de micropropagare a plantelor de Actinidia arguta in vitro |
-
2016
- 2016-03-04 MD MDS20160032A patent/MD1091Z/ro not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD605Y (ro) * | 2012-07-09 | 2013-03-31 | Inst De Genetica Si Fiziol A Plantelor Al Academiei De Stiinte A Moldovei | Procedeu de micropropagare a plantelor de Actinidia arguta in vitro |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Santoro M.V., Nievas F., Zygadlo J., Giordano W., Banchio E. Effects of Growth Regulators on Biomass and the Production of Secondary Metabolites in Peppermint (Mentha piperita) Micropropagated in vitro. American Journal of Plant Sciences, 2013, 4, 49-55 <http://dx.doi.org/10.4236.2013.45A008> Mai, 2013 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MD1091Y (ro) | 2016-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Salazar-Mercado et al. | Asymbiotic seed germination and in vitro propagation of Cattleya trianae Linden & Reichb. f.(Orchidaceae) | |
| Abbas et al. | Optimization of germination, callus induction, and cell suspension culture of African locust beans Parkia biglobosa (Jacq.) Benth | |
| Naz et al. | In vitro propagation of tuberose (Polianthes tuberosa) | |
| Bhattacharjee et al. | Effects of plant growth regulators on multiple shoot induction in Vanda tessellata (Roxb.) Hook. Ex G. Don an endangered medicinal orchid | |
| Puhan et al. | In vitro propagation of Aegle marmelos (L.) corr., a medicinal plant through axillary bud multiplication | |
| Nandy et al. | Hemidesmus indicus L. Br.: critical assessment of in vitro biotechnological advancements and perspectives | |
| Kadhim et al. | impact of plant growth regulators and adenine sulfate on gardenia Jasminoides micropropagation | |
| Pebam et al. | In vitro immature embryo germination and propagation of Vanda stangeana Rchb. f., an orchid endemic to India | |
| MD605Z (ro) | Procedeu de micropropagare a plantelor de Actinidia arguta in vitro | |
| CN103039360B (zh) | 韭菜组织培养快繁的方法 | |
| Karimi et al. | Effect of different growth regulators on callus induction and plant regeneration of Satureja species | |
| Samala et al. | Influences of organic additives on asymbiotic seed germination of Dendrobium cruentum Rchb. F. for in vitro micropropagation | |
| Islam et al. | Axenic seed culture and in vitro mass propagation of Malaysian wild orchid Cymbidium finlaysonianum Lindl | |
| Thokchom et al. | In vitro mass propagation of endangered terrestrial orchid Phaius tankervilliae (L’Her.) blume through green seed pod culture | |
| MD1091Z (ro) | Procedeu de micropropagare a plantelor de Mentha gattefossei Maire in vitro | |
| JP6823504B2 (ja) | 花に含まれる二次代謝物質の増量方法 | |
| Kirillov et al. | In vitro micropropagation of ornamental rare species Sibiraea altaiensis: an endemic of Altai. | |
| Bhowmik et al. | Micropropagation of Dendrobium crepidatum Lindl. and Paxt.: An epiphytic medicinal orchid of Bangladesh | |
| Latif et al. | Light quality affects shoot multiplication of vanilla pompana schiede in micropropagation | |
| Obsuwan et al. | The response of growth and development from in vitro seed propagation of Dendrobium orchid to chitosan | |
| Giri et al. | Induction of somatic embryogenesis in vulnerable medicinal plant Hedychium spicatum Buch-Ham ex Smith | |
| JP2018143203A (ja) | ジャーマンカモミールの形態制御方法 | |
| Al-Hawamdeh et al. | In vitroPropagation of SilybummarianumL | |
| CN104206274A (zh) | 一种石蒜再生植株的快速繁殖方法 | |
| Agud et al. | Treatment with low temperatures applied to the bulbs of Narcissus poeticus L for the stimulation of the in vitro regeneration and bulbification. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG9Y | Short term patent issued | ||
| KA4Y | Short-term patent lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration) |