MD1068Z - Bull sperm thawing medium - Google Patents

Bull sperm thawing medium Download PDF

Info

Publication number
MD1068Z
MD1068Z MDS20160037A MDS20160037A MD1068Z MD 1068 Z MD1068 Z MD 1068Z MD S20160037 A MDS20160037 A MD S20160037A MD S20160037 A MDS20160037 A MD S20160037A MD 1068 Z MD1068 Z MD 1068Z
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
thawing
medium
bull sperm
sperm
thyroxine
Prior art date
Application number
MDS20160037A
Other languages
Romanian (ro)
Russian (ru)
Inventor
Теодор ФУРДУЙ
Георге БОРОНЧУК
Ион БАЛАН
Юлия КАЗАКОВ
Николае РОШКА
Мелания БУКАРЧУК
Original Assignee
Институт Физиологии И Санокреатологии Академии Наук Молдовы
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Физиологии И Санокреатологии Академии Наук Молдовы filed Critical Институт Физиологии И Санокреатологии Академии Наук Молдовы
Priority to MDS20160037A priority Critical patent/MD1068Z/en
Publication of MD1068Y publication Critical patent/MD1068Y/en
Publication of MD1068Z publication Critical patent/MD1068Z/en

Links

Landscapes

  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

The invention relates to cryobiology and zootechny, namely to a bull sperm thawing medium.The bull sperm thawing medium comprises sodium citrate, L-thyroxine and distilled water, in the following component ratio:The result is to maintain at a high level the mobility of gametes and the integrity of acrosome after thawing.

Description

Invenţia se referă la criobiologie şi zootehnie, şi anume la un mediu pentru decongelarea spermei de taur. The invention relates to cryobiology and zootechnics, namely to a medium for thawing bull sperm.

Este cunoscut un mediu pentru decongelarea spermei de taur, care conţine citrat de sodiu şi apă distilată [1]. A medium for thawing bull sperm is known, which contains sodium citrate and distilled water [1].

Dezavantajul acestui mediu constă în aceea că el conţine doar electrolit, ceea ce asigură o protejare mai slabă la acţiunea factorilor de decongelare, în consecinţă indicii fiziologici şi morfologici ai spermei după decongelare rămân la un nivel scăzut comparativ cu sperma nativă. The disadvantage of this medium is that it contains only electrolyte, which provides weaker protection against the action of thawing factors, consequently the physiological and morphological indices of sperm after thawing remain at a low level compared to native sperm.

De asemenea este cunoscut un procedeu de sporire a calităţii spermei decongelate de taur, care constă în adăugarea lichidului peritoneal (abdominal) în procesul de decongelare [2]. A process for increasing the quality of thawed bull sperm is also known, which consists of adding peritoneal (abdominal) fluid to the thawing process [2].

Dezavantajul acestei soluţii constă în aceea că lichidul abdominal al embrionilor după conţinutul chimic şi biochimic diferă de indicii analogici ai plasmei seminale de taur. Pe de o parte, lichidul abdominal este o sursă suplimentară de dialdehidă malonică, ce se formează în procesul peroxidării lipidelor şi are un efect toxic, pe de altă parte reprezintă un solvent, care poate influenţa negativ asupra structurilor membranare ale celulelor reproductive. The disadvantage of this solution is that the abdominal fluid of embryos differs in chemical and biochemical content from the analogous indices of bull seminal plasma. On the one hand, the abdominal fluid is an additional source of malonic dialdehyde, which is formed in the process of lipid peroxidation and has a toxic effect, on the other hand, it is a solvent, which can negatively affect the membrane structures of reproductive cells.

Cea mai apropiată soluţie după esenţa invenţiei propuse este mediul pentru decongelarea spermei de taur, care conţine citrat de sodiu, glucoză, trilon B, β-amilază, catalază, aldolază şi apă distilată [3]. The closest solution according to the essence of the proposed invention is the medium for thawing bull sperm, which contains sodium citrate, glucose, trilon B, β-amylase, catalase, aldolase and distilled water [3].

Dezavantajul acestui mediu constă în aceea că el conţine multe componente, trei dintre care sunt enzime, ceea ce complică tehnologia preparării mediului, deoarece necesită o respectare strictă a condiţiilor de pregătire şi aplicare, totodată enzimele conţinute în mediu sunt costisitoare, ceea ce reduce accesibilitatea lui. The disadvantage of this medium is that it contains many components, three of which are enzymes, which complicates the technology of preparing the medium, as it requires strict adherence to the conditions of preparation and application, while the enzymes contained in the medium are expensive, which reduces its accessibility.

Problema pe care o soluţionează invenţia constă în menţinerea la un nivel înalt a mobilităţii gameţilor şi a integrităţii acrozomului după decongelare, crearea unui mediu pentru decongelarea spermei de taur accesibil, necostisitor, care să asigure stabilizarea structurilor morfologice ale spermatozoizilor după decongelare, stimularea metabolismului energetic şi sporirea indicilor morfologici şi fiziologici ai materialului seminal după decongelare. The problem solved by the invention consists in maintaining a high level of gamete mobility and acrosome integrity after thawing, creating an accessible, inexpensive environment for thawing bull sperm, which ensures the stabilization of the morphological structures of sperm after thawing, stimulating energy metabolism and increasing the morphological and physiological indices of semen after thawing.

Problema tehnică este soluţionată în invenţia propusă prin simplificarea componenţei mediului cunoscut, în care se include L-tiroxină. The technical problem is solved in the proposed invention by simplifying the composition of the known medium, which includes L-thyroxine.

Mediul pentru decongelarea spermei de taur conţine citrat de sodiu, L-tiroxină şi apă distilată, în următorul raport al componentelor: The medium for thawing bull sperm contains sodium citrate, L-thyroxine and distilled water, in the following ratio of components:

citrat de sodiu, g 1,5…2,0 L-tiroxină, µg 30…50 apă distilată, ml până la 100.sodium citrate, g 1.5…2.0 L-thyroxine, µg 30…50 distilled water, ml up to 100.

Rezultatul constă în menţinerea la un nivel înalt a mobilităţii gameţilor şi a integrităţii acrozomului după decongelare. The result is the maintenance of a high level of gamete mobility and acrosome integrity after thawing.

Efectul mediului este asigurat de proprietatea L-tiroxinei de a stimula activitatea metabolică şi regenerarea fiziologică a celulelor, de a regla permeabilitatea membranelor şi spori formarea energiei celulare. Prezenţa legăturilor conjugate în structura L-tiroxinei, responsabile de stabilitatea energetică şi termodinamică a sistemelor, poate determina şi rezistenţa celulelor la influenţa factorilor nefavorabili ai congelării. Deoarece acrosoma conţine setul de enzime proteolitice şi lipolitice ce determină procesul de fecundare, menţinerea integrităţii acrosomei şi, deci, a conţinutului acestor enzime după decongelare la un nivel înalt sporeşte capacitatea de fecundare a spermei decongelate. The effect of the environment is provided by the property of L-thyroxine to stimulate metabolic activity and physiological regeneration of cells, to regulate membrane permeability and enhance the formation of cellular energy. The presence of conjugated bonds in the structure of L-thyroxine, responsible for the energetic and thermodynamic stability of systems, can also determine the resistance of cells to the influence of unfavorable factors of freezing. Since the acrosome contains the set of proteolytic and lipolytic enzymes that determine the fertilization process, maintaining the integrity of the acrosome and, therefore, the content of these enzymes after thawing at a high level increases the fertilizing capacity of thawed sperm.

Conţinutul optimal al L-tiroxinei în componenţa mediului elaborat a fost determinat în mod experimental. The optimal content of L-thyroxine in the composition of the developed medium was determined experimentally.

Pregătirea mediului se realizează în modul următor. Într-un vas de sticlă, cotat de 100 ml, în condiţii sterile se adaugă 50 ml apă distilată, în care se dizolvă prin agitare citrat de sodiu triplu substituit pentahidratat (C6H5O7Na3x5H2O). După dizolvarea totală a citratului de sodiu se adaugă L-tiroxina conform exemplelor de realizare a invenţiei, soluţia se amestecă energic, după care se aduce cu apa distilată până la cotă. Mediul obţinut este omogen, transparent, fără precipitat sau fulgi. Mediul se pregăteşte nemijlocit înainte de întrebuinţare, având următorul raport al componentelor: The preparation of the medium is carried out as follows. In a glass vessel, with a capacity of 100 ml, under sterile conditions, 50 ml of distilled water is added, in which triple-substituted sodium citrate pentahydrate (C6H5O7Na3x5H2O) is dissolved by stirring. After the complete dissolution of the sodium citrate, L-thyroxine is added according to the embodiments of the invention, the solution is mixed vigorously, then it is brought to the mark with distilled water. The medium obtained is homogeneous, transparent, without precipitate or flakes. The medium is prepared immediately before use, having the following ratio of components:

Exemplul 1 Example 1

citrat de sodiu, g 1,5 L-tiroxină, µg 50 apă distilată, ml până la 100.sodium citrate, g 1.5 L-thyroxine, µg 50 distilled water, ml to 100.

Exemplul 2 Example 2

citrat de sodiu, g 1,7 L-tiroxină, µg 40 apă distilată, ml până la 100.sodium citrate, g 1.7 L-thyroxine, µg 40 distilled water, ml to 100.

Exemplul 3 Example 3

citrat de sodiu, g 2,0 L-tiroxină, µg 30 apă distilată, ml până la 100.sodium citrate, g 2.0 L-thyroxine, µg 30 distilled water, ml to 100.

Mediul a fost experimentat în condiţii de laborator. În prima serie de experienţe pentru decongelare au fost selectate variantele de mediu conform exemplelor 1-3. Rezultatele decongelării spermei de taur în mediul din variantele propuse în invenţie sunt incluse în tabelul 1. The medium was tested under laboratory conditions. In the first series of experiments for thawing, the medium variants according to examples 1-3 were selected. The results of thawing bull sperm in the medium from the variants proposed in the invention are included in table 1.

Tabelul 1 Table 1

Indicii morfologici şi fiziologici studiaţi Variantele experimentale Exemplul 1 Exemplul 2 Exemplul 3 Mobilitatea, bal 4,20 ± 0,14 5,00 ± 0,14 4,50 ± 0,15 Integritatea acrosomei, % 61,20 ± 1,30 61,40 ± 2,07 61,40 ± 1,52Morphological and physiological indices studied Experimental variants Example 1 Example 2 Example 3 Mobility, bal 4.20 ± 0.14 5.00 ± 0.14 4.50 ± 0.15 Acrosome integrity, % 61.20 ± 1.30 61.40 ± 2.07 61.40 ± 1.52

Varianta optimală a compoziţiei mediului în care s-au manifestat cele mai pronunţate proprietăţi stabilizatoare este cea de a doua. The optimal variant of the medium composition in which the most pronounced stabilizing properties were manifested is the second one.

În a doua serie de experienţe decongelarea spermei de taur a fost realizată în trei variante: martor, cea mai apropiată soluţie, invenţia propusă. Sperma de taur a fost decongelată în conformitate cu varianta martor în soluţie izotonică de citrat de sodiu, în mediul conform celei mai apropiate soluţii şi în mediul propus în invenţie. In the second series of experiments, the thawing of bull sperm was carried out in three variants: control, the closest solution, the proposed invention. Bull sperm was thawed according to the control variant in isotonic sodium citrate solution, in the medium according to the closest solution and in the medium proposed in the invention.

În tabelul 2 sunt prezentaţi indicii morfologici şi fiziologici ai spermei decongelate conform celei mai apropiate soluţii şi invenţiei propuse. Table 2 presents the morphological and physiological indices of thawed sperm according to the closest solution and the proposed invention.

Tabelul 2 Table 2

Indicii morfologici şi fiziologici studiaţi Sperma nativă Martor Cea mai apropiată soluţie Invenţia propusă Mobilitatea, bal 7,20 ± 0,11 3,70 ± 0,23 4,80 ± 0,10 5,20 ± 0,07 Integritatea acrosomei, % 70,40 ± 1,34 50,20 ± 1,48 55,00 ± 1,00 61,20 ± 0,84Morphological and physiological indices studied Native sperm Control Closest solution Proposed invention Mobility, bal 7.20 ± 0.11 3.70 ± 0.23 4.80 ± 0.10 5.20 ± 0.07 Acrosome integrity, % 70.40 ± 1.34 50.20 ± 1.48 55.00 ± 1.00 61.20 ± 0.84

Analiza rezultatelor obţinute demonstrează că după decongelare indicii studiaţi conform invenţiei sunt superiori în comparaţie cu cea mai apropiată soluţie. Astfel, mobilitatea spermatozoizilor conform invenţiei, în comparaţie cu varianta martor, constituie 40,5%, pe când mobilitatea conform celei mai apropiate soluţii, comparativ cu martorul, constituie 29,7%. Integritatea acrosomei conform invenţiei constituie 21,9%, conform celei mai apropiate soluţii - 9,56%. The analysis of the obtained results demonstrates that after thawing the studied indices according to the invention are superior in comparison with the closest solution. Thus, the mobility of spermatozoa according to the invention, in comparison with the control variant, constitutes 40.5%, while the mobility according to the closest solution, in comparison with the control, constitutes 29.7%. The integrity of the acrosome according to the invention constitutes 21.9%, according to the closest solution - 9.56%.

Comparativ cu sperma nativă indicii studiaţi după decongelare conform invenţiei sunt majoraţi faţă de cea mai apropiată soluţie - mobilitatea spermatozoizilor constituie 72,2%, iar integritatea acrosomei atinge 86,9%, contra 66,6% şi 78,1% respectiv. Compared to native sperm, the indices studied after thawing according to the invention are increased compared to the closest solution - sperm motility is 72.2%, and acrosome integrity reaches 86.9%, compared to 66.6% and 78.1% respectively.

Mediul propus stabilizează structurile morfologice ale spermatozoizilor, stimulează metabolismul energetic şi restabilirea fiziologică a gameţilor, ceea ce duce la creşterea mobilităţii spermatozoizilor după decongelare. Menţinerea integrităţii acrosomei la un nivel înalt asigură o capacitate sporită de fecundare a spermei de taur. Mediul este necostisitor, accesibil, aplicarea lui asigură o calitate eficientă a materialului reproducător decongelat. The proposed medium stabilizes the morphological structures of spermatozoa, stimulates energy metabolism and physiological restoration of gametes, which leads to increased sperm mobility after thawing. Maintaining acrosome integrity at a high level ensures an increased fertilization capacity of bull sperm. The medium is inexpensive, accessible, its application ensures an efficient quality of thawed reproductive material.

1. Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по исскуственному осеменению сельскохозяйственных животных. Москва, Колос, 1981 1. Instruction on organization and technology of work stations and enterprises on artificial insemination of agricultural animals. Moscow, Kolos, 1981

2. RU 2358689 C1 2009.06.20 2. RU 2358689 C1 2009.06.20

3. SU 880420 A1 1981.11.15 3. SU 880420 A1 1981.11.15

Claims (1)

Mediu pentru decongelarea spermei de taur, care conţine citrat de sodiu, L-tiroxină şi apă distilată, în următorul raport al componentelor:Medium for thawing bull sperm, containing sodium citrate, L-thyroxine and distilled water, in the following ratio of components: citrat de sodiu, g 1,5…2,0 L-tiroxină, µg 30…50 apă distilată, ml până la 100.sodium citrate, g 1.5…2.0 L-thyroxine, µg 30…50 distilled water, ml up to 100.
MDS20160037A 2016-03-18 2016-03-18 Bull sperm thawing medium MD1068Z (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20160037A MD1068Z (en) 2016-03-18 2016-03-18 Bull sperm thawing medium

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MDS20160037A MD1068Z (en) 2016-03-18 2016-03-18 Bull sperm thawing medium

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MD1068Y MD1068Y (en) 2016-09-30
MD1068Z true MD1068Z (en) 2017-04-30

Family

ID=57014929

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDS20160037A MD1068Z (en) 2016-03-18 2016-03-18 Bull sperm thawing medium

Country Status (1)

Country Link
MD (1) MD1068Z (en)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU880420A1 (en) * 1980-02-27 1981-11-15 За витель 880420 (И) Medium for defrosting bull sperm
MD638F1 (en) * 1996-05-03 1996-12-31 Inst De Fiziol Al Academiei De Medium for bull's sperm decongelation
RU2358689C1 (en) * 2007-10-02 2009-06-20 Волгоградская государственная сельскохозяйственная академия Method for increasing activity, survivability and breeding efficiency of frozen bulls' semen
UA47713U (en) * 2009-07-09 2010-02-25 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины Medium for defrosting deep-frozen sperm of bulls
UA50908U (en) * 2009-12-29 2010-06-25 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины Method for preserving sperm of hogs
UA51245U (en) * 2009-12-29 2010-07-12 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины method for decryoconservation of bull sperm

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU880420A1 (en) * 1980-02-27 1981-11-15 За витель 880420 (И) Medium for defrosting bull sperm
MD638F1 (en) * 1996-05-03 1996-12-31 Inst De Fiziol Al Academiei De Medium for bull's sperm decongelation
RU2358689C1 (en) * 2007-10-02 2009-06-20 Волгоградская государственная сельскохозяйственная академия Method for increasing activity, survivability and breeding efficiency of frozen bulls' semen
UA47713U (en) * 2009-07-09 2010-02-25 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины Medium for defrosting deep-frozen sperm of bulls
UA50908U (en) * 2009-12-29 2010-06-25 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины Method for preserving sperm of hogs
UA51245U (en) * 2009-12-29 2010-07-12 Национальный Университет Биоресурсов И Природопользования Украины method for decryoconservation of bull sperm

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Инструкция по организации и технологии работы станций и предприятий по исскуственному осеменению сельскохозяйственных животных. Москва, Колос, 1981 *

Also Published As

Publication number Publication date
MD1068Y (en) 2016-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5728228B2 (en) Use of globin, globin protomer or extracellular hemoglobin for the preservation of organs, tissues, organ cells, tissue cells and cell cultures
Rath et al. Recent advances in boar semen cryopreservation
Andrabi Factors affecting the quality of cryopreserved buffalo (Bubalus bubalis) bull spermatozoa
Çoyan et al. Effects of cysteine and ergothioneine on post-thawed Merino ram sperm and biochemical parameters
Bucak et al. Effect of anti-oxidants and oxidative stress parameters on ram semen after the freeze–thawing process
Pena et al. The impact of reproductive technologies on stallion mitochondrial function
Omur et al. Protective effects of the antioxidants curcumin, ellagic acid and methionine on motility, mitochondrial transmembrane potential, plasma membrane and acrosome integrity in freeze-thawed Merino ram sperm.
CN111296412A (en) A kind of serum-free low DMSO cell cryopreservation solution and its application
Judycka et al. The effect of supplementation of a trehalose-based extender with KCl on rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) sperm freezability and post-thaw motility
CN113115767B (en) In-vitro preservation solution for fish eggs and application thereof
JP3694730B2 (en) Tissue cold preservation solution
Uysal et al. The role of different trehalose concentrations and cooling rates in freezing of ram semen
CN111149795A (en) Cryoprotectant and application thereof, sperm freezing liquid and preparation method thereof
Forouzanfar et al. Supplementation of sperm cryopreservation media with cell permeable superoxide dismutase mimetic agent (MnTE) improves goat blastocyst formation
CN103070162B (en) Muscovy duck semen diluent
Ansari Effect of L-cysteine in tris-citric egg yolk extender on post-thaw quality of Nili-Ravi buffalo (Bubalus bubalis) bull spermatozoa
Lomba et al. Advances in cryopreservatives: exploring safer alternatives
Mori et al. The effect of betaine for mouse sperm cryopreservation
Henry et al. Early carbonic anhydrase induction in the gills of the blue crab, Callinectes sapidus, during low salinity acclimation is independent of ornithine decarboxylase activity
MD1068Z (en) Bull sperm thawing medium
CN112790189B (en) Organ perfusion and preservation solution and application thereof
Kulaksiz et al. The effects of different extenders and myo-Inositol on post-thaw quality of ram semen
CN116965401A (en) Immune cell cryopreservation liquid
Kumar et al. Effect of trehalose on cryopreservation of Hariana bull spermatozoa
CN115088707A (en) A kind of high body amberjack sperm dilution and its preparation method and application

Legal Events

Date Code Title Description
FG9Y Short term patent issued
ND4Y Validity of short term patent extended [from 6 to 10 years]

Expiry date: 20260318

KA4Y Short-term patent lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4Y Short-term patent definitely lapsed due to non-payment of fees