LV15310B - Amorfus kalcija sāļus saturoša kompozīcija ar osteoprotektīvu iedarbību - Google Patents

Description

IZGUDROJUMA APRAKSTS

Izgudrojums attiecas uz amorfus kalcija sāļus saturošu kompozīciju ar osteoprotektīvu iedarbību, kura var tikt izmantota rahīta un osteoporozes profilaksē un terapijā.

Metaboliskie kaulu bojājumi pieder pie visizplatītākajām patoloģijām. Zems kalcija līmenis uzturā un D vitamīna trūkums bērniem izpaužas rahītā, bet pieaugušajiem osteoporozes formā [Pettifor J.M. Ann.Nutr.Metab., 20l4,64,suppl.2,l 5]. Jāatzīmē, ka pieaugušajiem biežāk par alimentāro ir sastopams sekundārs kalcija deficīts. Kalcija uzsūkšanās zarnās tiek bloķēta endokrinopātiju (endo- un eksohiperkorticisms, menopauze u.c.) gadījumos, pēc kuņģa un zarnu rezekcijām, malabsorbcijas utt. [Babarykin D.et al. J.Renal Nutr.,2004,14,3,149]. Kalcija biopieejamības mazināšana padziļina kalcija trūkumu.

Kalcija karbonāta un D vitamīna kombinācija ir vispopulārākā produktos kalcija deficīta novēršanai.

Par kalcija avotiem kalpo uzturs, uztura bagātinātāji un medikamenti. Kalcija biopieejamība ir atkarīga no tā sāļu šķīdības, kas nosaka kalcija daudzumu jonizētājā formā [Quesada Gomez J.M.et al.Clin.Drug Invest.,2011,31,5,285]. No vienreizējas devas Ca citrāta formā uzsūcās labāk, nekā karbonāta gadījumā [Wang H. et al.Food Nutr.Res.2014,58,23229]

Pēdējos gados arvien populārāka kļūst kalcija preparātu biopieejamības palielināšana, izmantojot smalki disperģēto (amorfo) sāļu kombināciju. Tika pierādīts, ka amorfa kalcija citrāta biopieejamība stipri pārsniedz to, kāda tā ir kalcija karbonātam [CN104529754(A)-2015-04-22]. Tika pierādīts, ka kalcija sāļi amorfajā formā efektīvāk par kristālisko formu veicina kaulu augšanu un lūzumu reparāciju [US2015374747(Al)-2015-12-31ļ. No otras puses, amorfais kalcija karbonāts ir nestabils un oksidējas, kontaktējot ar gaisu [US2016045440(A 1)-2016-0218]. Sausā amorfa kalcija iegūšanai izmanto organiskos šķīdinātājus [HK1209095(Al)-2016-0324], kas sadārdzina tehnoloģiju. Šajā sakarā loģiski ir izmantot ūdenī disperģētos kalcija amorfos sāļus. Amorfo kalcija sāļu maisījums ar magnija sāļu piedevu un tā iegūšana ir aprakstīts Eirāzijas patentā [EA020907(B 1)-2015-02-27].

Piena kalcija samērā augstā biopieejamība daļēji izskaidrojama ar to, ka minerālvielas tur atrodas šķīdumā. Tirgū parādās šķidrie kalcija preparāti, kuri pārsvarā satur kalcija karbonātu, kalcija un magnija citrātus, D vitamīnu [KR20080019966(A)-2—8-03-05]; [US2015224137(Al)2015-08-13]. Bet kalcija preparātu šķidrās formas ir diezgan nestabilas un bieži noslāņojas. Tādēļ tie tiek stabilizēti ar organiskām skābēm, polivinilpirrolidonu, ciklodekstrīnu [KR20080019966(A)-2008-03-05], kas mazina patērētāju līdzestību.

Patentu literatūrā ir atrodama informācija par mēģinājumu veicināt Ca absorbciju, kombinējot kalcija, magnija un cinka sāļus kalcija karbonāta mikrodaļiņu klātbūtnē [KR2016000815 8(A)-2016-01-21].

Ir zināmi uztura bagātinātāji un medikamenti, kas satur Ķīnas tautas medicīnas ārstnieciskos augus. Salvija milthiorrhiza no seniem laikiem tiek izmantota tautas medicīnā kaulu slimību ārstēšanā [Guo Y. Et al.J.Ethnopharmacol.,2014,155,3,1401]. Pārsvarā, izmanto eksotiskās austrumu medicīnas drogas [CN104352945(A)-2015-02-18]; [CN105125860(A)2015-12-09], kuras nav atļautas lietot Eiropas Savienības valstīs.

Tehniskais uzdevums, ko risina piedāvātais izgudrojums, ir izveidot kompozīciju ar osteoprotektīvu iedarbību, kurai ir augsta kalcija biopieejamība un kura ir ar labām organoleptiskām īpašībām un ērti lietojama, tādējādi veicinot pacienta līdzestību tās ilgstošas lietošanas gaitā.

Kalciju saturoša kompozīcija ar osteoprotektīvu iedarbību, kas satur kalcija karbonātu un kalcija citrātu, magnija citrātu un D vitamīnu, atbilstoši izgudrojumam, satur amorfos kalcija un magnija sāļus un papildus satur Salvia milthiorryza saknes ekstraktu, ksantānu un stevioglikozīdu ar ingredientu saturu, gramos uz 100 ml kompozīcijas:

amorfo kalcija sāļu, kuri veidojas, mijiedarbojoties kalcija karbonāta pārākumam ar citronskābi, maisījums ar kopējo kalcija saturu no 4,5 līdz 5,5;

amorfo magnija sāļu, kuri veidojas, mijiedarbojoties magnija karbonāta pārākumam ar citronskābi, maisījums ar kopējo magnija saturu no 0,060 līdz 0,080;

ksantāns no 0,400 līdz 0,600;

Salvia milthiorryza saknes ekstrakts no 0,060 līdz 0,080;

D₃ vitamīns no 45'10'⁶ līdz 55'10'⁶;

stevioglikozīds no 0,020 līdz 0,040;

konservants nizīns ne vairāk kā 0,001;

ūdens - pārējais.

Kalcijs kompozīcijā tiek ievadīts amorfu sāļu maisījuma veidā, kuru iegūst, izmantojot nedaudz modificētu Eirāzijas patentā EA020907(Bl) aprakstīto paņēmienu, ūdenī mijiedarbojoties kalcija karbonāta pārākumam ar citronskābi. Līdzīgā veidā magnijs kompozīcijā tiek ievadīts amorfu sāļu maisījuma veidā, kuru iegūst, ūdenī mijiedarbojoties magnija karbonāta pārākumam ar citronskābi. Minēto mijiedarbību rezultātā veidojas amorfu nešķīstošo sāļu (galvenokārt, karbonātu) maisījuma suspensija labāk šķīstošo sāļu (citrātu, hidrogēncitrātu, hidrogenkarbonātu) šķīdumā. Eksperimentāli tika pārbaudīts, ka šim kalcija un magnija amorfo sālu maisījumam ir augstāka kalcija biopieejamība nekā atsevišķiem kalcija sāļiem (zemāk ir pievienoti dati par kalcija un magnija amorfo sāļu maisījuma ACa, kas satur 5 g kalcija un 70 mg magnija uz 100 ml maisījuma, biopieejamības pētījuma rezultātiem). Ievadāmā kalcija proporcija tika izvēlēta, vadoties no amorfo kalcija sāļu maisījuma konsistences un vēlamā katru dienu ērti lietojamā tilpuma - aptuveni deserta karote, kas satur tipisku pieaugušajam cilvēkam ieteicamo dienas devu (0,5 gramus kalcija).

D3 vitamīna labvēlīgā ietekme uz amorfo kalcija un magnija amorfo sāļu maisījuma biopieejamību tika noteikta eksperimentāli (dati pievienoti). D3 vitamīna daudzums kompozīcijā ir izvēlēts, vadoties no vēlamās diennakts devas.

Amorfo kalcija sāļu maisījuma kombinācijas ar D₃ vitamīnu turpmākai osteoprotektīvas efektivitātes un biopieejamības uzlabošanai tika meklēta viela ar anabolisko efektu uz kaulaudu organisko matriksu. No visām fitoķīmiskajām vielām, kas ir atļautas pielietošanai pārtikas ražošanā, kā piemērotākais tika izvēlēts Salvia milttiorhyzae ekstrakts. Eksperimenta ar steroīdu osteoporozi (skat, zemāk) rezultāti apstiprināja šo izvēli.

Tā kā amorfo kalcija un magnija sāļu maisījums ir suspensijas veidā, ir svarīgi nodrošināt vienmērīgu suspendēto daļiņu sadalījumu gatavajā kompozīcijā. Kalciju saturošajā kompozīcijā tiek ievadīts biezinātājs. Eksperimentāli tika noteikts, ka piemērots biezinātājs ir ksantāns, kuru ievada no 0,400 līdz 0,600 g uz 100 ml kalciju saturošās kompozīcijas. Šis ksantāna daudzums nodrošina, ka suspendētās daļiņas neizgulsnējas. Lietojot kompozīciju, ir nodrošināta precīza kalcija sāļu dozēšana, pie tam nav nepieciešama kompozīcijas rūpīga saskalošana. Ja ksantāna ir mazāk par 0,400 g uz 100 ml kompozīcijas, netiek nodrošināts pietiekams kompozīcijas viendabīgums. Ja ksantāna ir vairāk par 0,600 g uz 100 ml kompozīcijas, konsistence kļūst biezāka par vēlamo.

Kompozīcijas organoleptisko īpašību uzlabošanai tiek pievienota saldviela stevioglikozīds (Rebaudioside A 98%) no 0,020 līdz 0,040 uz 100 ml kompozīcijas.

Konservants nizīns ir izvēlēts kā samērā nekaitīga piedeva un pievienots ne vairāk kā 0,001 g uz 100 ml kompozīcijas.

Amorfo kalcija sāļu maisījums var saturēt no 0,140 līdz 0,180 gramus kalcija hlorīda uz 100 ml kompozīcijas. Kalcija hlorīds ir viens no kalciju saturošajās kompozīcijās bieži izmantotajiem kalcija sāļiem, bet tam nav patīkama garša, tāpēc tas ir ievadīts tik daudz, lai nepasliktinātu kompozīcijas organoleptiskās īpašības.

Kompozīcijā papildus var tikt ievadīta viena garšu veidojoša pārtikas piedeva vai arī vairākas šādas piedevas.

Kā garšu veidojoša piedevu var ievadīt no 0,045 līdz 0,055 gramu vanilīna uz 100 ml kompozīcijas.

1. piemērs

Piedāvāto kalciju saturošu kompozīciju ar osteoprotektīvu iedarbību pagatavo sekojoši (sastāvdaļu daudzums norādīts 100 ml kompozīcijas pagatavošanai). Sākumā samaisa 12,5 g kalcija karbonāta, 0,25 g magnija karbonāta un 4,8 g citronskābes, visas sastāvdaļas ir sīkdispersā veidā. Pievieno 50 ml ūdens, rūpīgi samaisa. Iegūto suspensiju sterilizē, uzsildot autoklāvā pie temperatūras 110-120 °C 30 minūtes. Sildīšanas laikā notiek praktiski nešķīstošo kalcija un magnija karbonātu daļas reakcija ar citronskābes šķīdumu, bet izdalītais oglekļa dioksīds arī mijiedarbojas ar kalcija un magnija savienojumiem. Rezultātā veidojas pusšķidrs amorfo kalcija un magnija sāļu maisījums (sīkdisperso sāļu daļiņu sāļu šķīdumā suspensija). Šim iegūtajam amorfo sāļu maisījumam tika veikti biopieejamības pētījumi (no šāda maisījuma iegūts paraugs, kurš biopieejamības pētījumos apzīmēts kā ACa).

Pievieno iepriekš sterilizētās pārējas sastāvdaļas: ksantāns 0,500 g; Salvia milthiorryza saknes ekstrakts (5:1) 0,150 g; stevioglikozīds (Rebaudioside A 98%) 0,050 g; vanilīns 0,050 g (50 mg 151,5 mg steviola); D3 vitamīns 50 mg; konservants nizīns ne vairāk kā 0,001 g, ūdens līdz kopējam kompozīcijas tilpumam 100 ml (pie 20 °C). Iegūto kompozīciju (veiktajos pētījumos apzīmēta kā ACa-1) padod uz aseptisko pildīšanu.

Tika iegūta kompozīcija baltā krāsā, kurai piemīt patīkama garša un smarža, viendabīga pusšķidra konsistence, kas atgādina jogurtu.

Kompozīcija satur (uz 100 ml kompozīcijas):

maisījums no amorfajiem kalcija sāļiem, kuri veidojas kalcija karbonāta pārākuma un citronskābes mijiedarbībā, ar kopējo kalcija saturu 5 g;

maisījums no amorfajiem magnija sāļiem, kuri veidojas magnija karbonāta pārākuma un citronskābes mijiedarbībā, ar kopējo magnija saturu 0,070 g;

ksantāns no 0,500 g;

Salvia milthiorryza saknes ekstrakts 0,150 g;

D₃ vitamīns 50 mkg;

stevioglikozīds (Rebaudioside A 98%) 0,027 g;

konservants nizīns ne vairāk kā 0,001;

ūdens - pārējais.

Tālāk aprakstītajos pētījumos iegūtā kompozīcija apzīmēta kā ACa-1.

Iegūtajai kompozīcijai ir osteoprotektīvu iedarbība, augsta kalcija biopieejamība, labas organoleptiskās īpašības; tā ir ērti lietojama, tādējādi veicinot pacienta līdzestību tās ilgstošas lietošanas gaitā.

2. piemērs

Kompozīcija tiek gatavota analoģiski 1. punktā aprakstītai. Sākumā samaisa 12,5 g kalcija karbonāta, 0,25 g magnija karbonāta, 4,80 g citronskābes un 0,16 g kalcija hlorīda, visas sastāvdaļas ir sīkdispersā veidā.

Iegūtā kompozīcija satur (uz 100 ml kompozīcijas):

maisījumu no amorfajiem kalcija sāļiem, kuri veidojas kalcija karbonāta pārākuma un citronskābes mijiedarbībā, ar kopējo kalcija saturu 5,06 g, pārējās sastāvdaļas tādās pašās attiecībās kā 1. piemērā.

Kompozīcijas stabilitātes testēšana

1. un 2. piemērā aprakstītās iegūtās kompozīcijas stabilitātes testēšanai tika izmantots paātrinātās „novecošanās” metode, kuras pamatā ir cikliskā uzglabāšanas temperatūras maiņa. Sterilo, hermētiski aizvākoto kompozīciju 24 stundas uzglabā pie 0°C, nākošās 24 stundas - pie 60 ±2°C un gaisa mitruma 75±5%. Testēšana turpinājās 12 ciklus, kas atbilst 12 derīguma termiņa mēnešiem. Pēc katra trešā cikla produkti tika vērtēti organoleptiski. Secināts, ka produkts ir derīgs 12 mēnešus.

Mikrobioloģiskā stabilitāte tika vērtēta produktiem, kas tika uzglabāti istabas temperatūrā (20°C). Vienu gramu produkta suspendēja 10 ml ūdens un gatavoja atšķaidījumus 1:1, 1:10, 1:100. Tika noteikts mezofīlo aerobo un fakultatīvi anaerobo mikroorganismu skaits, kā arī pelējumi un sēnītes. Secināts, ka produkta mikrobioloģiskā stabilitāte tiek nodrošināta 12 mēnešu laikā.

Piedāvātās kompozīcijas un tās ingredientu biopieejamības pētījumi

Amorfo kalcija un magnija sāļu maisījums, kura iegūšana aprakstīta 1. piemērā, tika atštķaidīts ar destilēto ūdeni. Pētījumos tika izmantota suspensija (ACa), kas satur 5 g kalcija un 70 mg magnija 100 ml maisījuma. Tika veikti in vivo eksperimenti ar cāļiem.

Putni tika baroti ar pilnvērtīgas spēkbarības barību līdz 30 dienu vecumam, randomizēti 12 grupās; 18 st. pirms eksperimenta cāļi badojās, dzeramais ūdens - ad libitum. Vienā ml destilētā ūdens per os tika ievadīts kalcija karbonāts, kalcija citrāts, kalcija hlorīds vai ACa devā, kas saturēja 0 - 0,6 - 0,12 - 2,4 mg kalcija. Pēc 0 - 45 - 60 minūtēm putniem tika paņemts asins paraugs; pēc dekapitācijas divpadsmit pirkstu zarna un aknas tika ekstirpētas. Asinīs un zarnas gļotādā ar bioķīmiskā analizatoru RapidLab 1265 noteica kalcija, magnija un dzelzs daudzumu, bet aknās - kalcija daudzumu.

Tika konstatēts, ka pēc kalcija adsorbcijas uz zarnas gļotādas spējas (pēc 60 min.) testētie sāļi sarindojas šādi: ACa > CaCO₃> CaCl₂> kalcija citrāts. Ievadot Ca 1,2 mg devā, minerālvielas saturs zarnas gļotādā palielinājies par 32% (1.tabula). Dubultojot devu (CaCl₂ gadījumā ) minētais rādītājs paaugstinājies par 40%, CaCO₃ - par 59%, bet ACa gadījumā - par 123%, salīdzinot ar kontroli (p<0,01). Pie tam kalcija līmenis asinīs statistiski ticami nemainījās. Tas ir likumsakarīgi, ņemot vērā kalciēmijas fizioloģisko stabilitāti.

.tabula. Minerālvielu saturs cāļu divpadsmitpirkstu zarnas gļotāda pēc kalcija preparātu ievadīšanas per os uz 60 min.

Grupa	Kalcija deva, mg	Minerālvielu saturs zarnas gļotādā
Ca, mmol/1	Fe, mkmol/l	Mg, mmol/1
Kontrole	0	0,53+0,13	0,11+0,03	0,55+0,10
CaCl2	1.2	0,70+0,20	0,12+0,03	0,60+0,13
СаСОз	0,68+0,14	0,10+0,01	0,89+0,16
ACa	0,73+0,18	0,09+0,04	0,81+0,25
CaCl2	2.4	0,98+0,25*	0,09+0,01	0,58+0,20
CaCO3	1,08+0,22* **	0,11+0,04	0,70+0,34
ACa	1,63+0,32* **	0,09+0,01	0,56+0,18

*salīdzinājumā ar kontroli starpības statistiska ticamība p<0,05 **p<0,05

Vielu akumulācija aknās ir integrāls uzsūkšanās procesu raksturojošs rādītājs. Salīdzinot kalcija saturu putnu aknās pēc 2,4 mg CaCl₂ - СаСОз - ACa ievadīšanas uz 60 min kalcija saturs aknās bija 0,130+0,028 - 0,146+0,024 - 0,164+0,022 mkg/g attiecīgi. Iegūtie rezultāti liecina, ka ACa biopieejamība ir labāka, tā pārsniedz visbiežāk osteopātiju profilaksei un ārstēšanai pielietojamo kalcija karbonātu, kā arī kalcija hlorīdu, kas raksturojas ar ātru uzsūkšanās spēju. Iespējams, ka šīs fakts skaidrojams ar ACa kalcija sāļu daudzveidību (ne tikai karbonāts) un fizikāli-ķīmisko īpatnību (amorfie sāļi).

Antirahītiskās iedarbības pētījumi

Lai noskaidrotu, vai ACa var nodrošināt augstāku osteoprotektīvo iedarbību tika pētīta jaunās vielas bioloģiskā aktivitāte pie eksperimentālās D avitaminozes.

Sakarā ar olu dēšanu putni ir jutīgs objekts kalcija metabolisma procesu pētījumiem. Pie D avitaminozes kavējas ķermeņa masas pieaugums, cieš kauli (demineralizācija), notiek izmaiņas asins sastāvā ( hipokalciēmija, hipofosfatemija, pieaug sārmainas fosfatāzes aktivitāte), kalcija balance organismā kļūst negatīva, notiek epitēlķermenīšu hiperplāzija.

Eksperiments tika veikts uz cāļiem (gailīšiem), kuri tika audzēti un baroti ar uz graudiem bāzētu barību, kas nesaturēja D vitamīnu: kukurūzas milti 40%, maltie mieži 30%, sojas šrots 15%, kazeīns 10%, barības raugs 3%, dikalcija fosfāts 0,5%, kalcija karbonāts 0,25%, vāramā sāls 0,5 %. Kalcija saturs barībā bija 0,81%, bet fosfora - 0,64%. Kontroles grupas putni saņēma to pašu barību, bet bagātinātu ar holekalciferolu (400 IU/kg). Divu dienu vecumā putni tika randomizēti sešās grupās (n=7): kontrole, rahīts, kā arī grupas ar ievadīto vielu kombinācijām (kalcija karbonāts, ACa ar un bez D3 vitamīna piedevas). Četru nedēļu vecumā pēc asins ņemšanas cāļi tika dekapitēti.

2. tabulā var redzēt, kā dažādas vielu kombinācijas rahīta gadījumā ietekmēja cāļu asins bioķīmiskos radītājus. Acīmredzami, ACa un vitamīna D3 vitamīna kombinācijas gadījumā kalcija saturs asinīs sasniedza maksimālo vērtību salīdzinājumā ar citām, kā arī sārmainās fosfatāzes vērtība ir minimāla.

2.tabula. Kalcija preparātu ietekme uz rahītisko cāļu asins bioķīmiskiem radītajiem

Grupa	Asins serums
Ca, mmol/l	P, mmol/l	Sārmaina fosfatāze,IV
1. Kontrole, D3 vit.	2,66±0,13	l,52±0,07	14,2±2,18
2. Rahīts	l,98±0,21*	l,14±0,06*	38,7±3,31*
3. Rahīts + СаСОз	2,12 ±0,08*	l,24±0,05*	33,7±3,13*
4.Rahīts +СаСОз+ D3	2,55±0,ll	l,54±0,09	15,3±1,59
5. Rahīts + ACa	2,24±0,ll*	l,20±0,05*	31,1±2,37*
6. Rahīts + ACa+ D3	2,70±0,15	l,53±0,09	13,9±1,74
*starpibas ar kontroli statistiska ticamība p<0,05

Tika veikta jaunā produkta novērtēšana kalcija biopiejamības ziņā pēc iepriekš aprakstītas metodes: 2,4 mg kalcija (ekvivalents) uz 60 minūtēm. Papildus tika noteikta kalcija akumulācija aknās - kā makroelementa absorbcijas integrālais rādītājs.

Secināts, ka kalcija saturs aknās pēc ACa+ D3 ievadīšanas par 57,5% pārsniedza kalcija saturu pēc СаСОз ievadīšanas.

ACa-l specifiskā efektivitāte pie eksperimentālās steroīda osteoporozes

Tā kā iegūtie dati liecina, ka ACa+ D3 kompozīcijai piemīt osteoprotektīva iedarbība, kas pārsniedz СаСОз un D3 vitamīna kombinācijas efektivitāti, ir mērķtiecīgi novērtēt jaunā produkta ietekmi uz kaulaudiem pie eksperimentālās osteoporozes. Šajā gadījumā pētījumos izmantoja 1. piemērā aprakstīto kompozīciju ACa-l.

Pētījumā izmantoja cāļus 4 nedēļu vecumā. Putnus randomizēja 4 grupās (n=8) (3.tab.).

Sintētisko glikokortikoīdu preparātu prednizolonu putniem ievadīja ar barību. Prednizolona tabletes (Gedeon Richter® ) tika smalcinātas un sajauktas ar barību proporcijā 50 mg /1 kg. Vidēji viens cālis saņēma 1,5 mg prednizolona dienā.

3.tabula. Eksperimenta dizains.

Cāļu grupa	Ķermeņa Masa, g	Grupas raksturojums
Kontrole	335+31	Pilnvērtīgs racions
Prednizolons	337+41	Pilnvērtīgs racions + prednizolons ( 50 mg/kg)
Prednizolons + vitamīns D3	336+20	Pilnvērtīgs racions + prednizolons ( 50 mg/kg). Nedēļu pēc prednizolona ievadīšanas uzsākšanas cāļi saņēma kalcija karbonātu (Ca 5 mg/dienā) un D3 vitamīna (0,25 mkg/dienā).
Prednizolons + ACa-l	337+31	Pilnvērtīgs racions + prednizolons ( 50 mg/kg). Nedēļu pēc prednizolona ievadīšanas uzsākšanas cāļi saņēma ACa-l (5 mg kalcija/ dienā)

Sešu dienu vecumā cāļus svēra, ņēma venozās asins paraugu, veica dekapitāciju, ekstirpēja epitēlķermenīšus (svēršanai), lielo kaulu (svēršanai un mērīšanai). Kaulu notīrīja no blakus audiem, žāvēja pie 105° C, attīrīja no taukiem Soksleta aparātā, vēlreiz žāvēja, svēra un noteica kaula apjomu.

Cāļu ķermeņa masas dinamika eksperimenta laikā tiek uzrādīta 4.tabulā.

4.tabula. Kalcija preparātu un prednizolona ievadīšanas ietekme uz putnu ķermeņa masas dinamiku

Putnu grupa	Ķermeņa masa, g
Masa, g	Masas pieaugums 2 nedēļu laikā, g
Kontrole	508,3±28,5	172,9±19,5
Prednizolons	352,2±55,9*	14,9±6,7*
Prednizolons + CaCO3 +D3	363,9±15,9*	26,2±5,6*
Prednizolons+ ACa-1	369,1±14,75*	32,9±4,9* **
*starpības ar kontroli stastistiskā ticamība p<0,05 ** starpības ar „prednizolona ” grupu statistiskā ticamība p<0,05

Prednizolons vairak kā 10 reizes samazinaja cāļu masas pieaugumu; labāko terapeitisko efektu prednizolona nelabvēlīgās ietekmes novēršanā nodrošināja ACa-1 (par 129% labāku nekā CaCO₃+D₃).

Jāatzīmē arī ACa-1 pretosteoporozes efekts. Prednizolona ietekmes rezultātā notiek ne tikai kaulu demineralizācija sekundāra kalcija deficīta dēļ, bet arī kaulaudu īpatnējā svara kritums, jo glikokortikoīdu preparāts nomāc osteoblastu (kas veido organisko matriksu) aktivitāti, par ko, atšķirībā no rahīta, liecina asins sārmainās fosfatāzes aktivitātes kritums. Jaunais produkts, proti, ACa-1, nodrošināja sārmainās fosfatāzes aktivitātes pieaugumu līdz 79,5% no kontroles (5.tab.).

5.tabula. Prednizolona un kalcija preparātu ietekme uz cāļu asins bioķīmiskajiem rādītājiem

Grupa	Sārmainās fosfatāzes aktivitāte, IU
Kontrole	14,01±l,36
Prednizolons	6,98±1,22*
Prednizolons + CaCO3 +D3	8,90±l,15*
Prednizolons + ACa-1	ll,15±0,75* **
*starpību ar kontroles grupu statistiskā ticamība p<0,05 **ar „prednizolona” grupu p<0,05

Claims (4)

1. Pretenzijas

   1. Kalciju saturoša kompozīcija ar osteoprotektīvu iedarbību, kas satur kalcija karbonātu un kalcija citrātu, magnija citrātu un D vitamīnu, atšķiras ar to, ka kompozīcija satur amorfos kalcija un magnija sāļus un papildus satur Salvia milthiorryza saknes ekstraktu, ksantānu un stevioglikozīdu ar ingredientu saturu, gramos uz 100 ml kompozīcijas:

   amorfo kalcija sāļu, kuri veidojas, mijiedarbojoties kalcija karbonāta pārākumam ar citronskābi, maisījums ar kopējo kalcija saturu no 4,5 līdz 5,5;

   amorfo magnija sāļu, kuri veidojas, mijiedarbojoties magnija karbonāta pārākumam ar citronskābi, maisījums ar kopējo magnija saturu no 0,060 līdz 0,080;

   ksantāns no 0,400 līdz 0,600;

   Salvia milthiorryza saknes ekstrakts no 0,060 līdz 0,080;

   D3 vitamīns no 45T0'⁶ līdz 55Ί0’⁶;

   stevioglikozīds no 0,020 līdz 0,040;

   konservants nizīns ne vairāk kā 0,001;

   ūdens - pārējais.
2. 2. Kompozīcija saskaņā ar 1.pretenziju, kas atšķiras ar to, ka amorfo kalcija sāļu maisījums satur no 0,140 līdz 0,180 gramus kalcija hlorīda uz 100 ml kompozīcijas.
3. 3. Kompozīcija saskaņā ar 1. vai 2. pretenziju, kas atšķiras ar to, ka tajā papildus ir ievadīta vismaz viena garšu veidojoša piedeva.
4. 4. Kompozīcija saskaņā ar 3. pretenziju, kas atšķiras ar to, ka tajā kā garšu veidojoša piedeva ir ievadīts no 0,045 līdz 0,055 gramu vanilīna uz 100 ml kompozīcijas.