LU502916B1 - Method for detecting cycle morphology of cancer cells - Google Patents

Claims (10)

Revendications

1. Un procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses, caractérisé en ce qu'il comprend: extraire 4 portions de milieu de culture contenant un certain nombre de cellules cancéreuses du milieu de culture, et respectivement embouteiller dans des flacons de culture différents, ajouter des inhibiteurs du cycle cellulaire dans trois des flacons de culture et traiter pour 24 heures de façon à ce que les trois parties de cellules cancéreuses restent respectivement en phase G1, en phase G2 et en phase M; couper une pluralité de lames infrarouges de la taille de 1cmx1cm, respectivement, mettre dans un flacon de culture stérile en rangée après désinfection, et laminer une lame sur chaque lame infrarouge; goutter les solutions de culture mises en culture dans chaque flacon de culture contenant une certaine concentration cellulaire dans différentes lames, et effectuer une imagerie microspectrale infrarouge à rayonnement synchrone sur les solutions de culture sur chaque lame pour obtenir quatre copies de la distribution de concentration de groupes fonctionnels et différents états de croissance des cellules cancéreuses.

2. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, le milieu de culture est du milieu de culture RPMI-1640 contenant 10% de sérum bovin foetal inactivé thermiquement et 1% de pénicilline-streptomycine-L- glutamine.

3. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, le milieu de culture est stocké à 37 °C sous une atmosphère humide contenant 5% de CO».

4. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, avant de déposer la solution de culture sur la lame, comprenant en outre:

ajouter un agent de suspension cellulaire à chacun des flacons de culture pour HUS02916 suspendre les cellules cancéreuses des flacons de culture.

5. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 4, caractérisé en ce que, l'agent de suspension cellulaire est la trypsine ou l'acide éthylènediamine tétraacétique.

6. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 4, caractérisé en ce que, après avoir ajouté un agent de suspension cellulaire dans chaque flacon de culture, comprenant en outre: aspirer la solution de culture contenant la certaine concentration cellulaire de chaque flacon de culture et la goutter dans différents trous de culture de la plaque de culture cellulaire; parmi eux, la solution de culture égouttée sur la lame est aspirée du trou de culture.

7. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, après avoir rempli respectivement quatre portions de la solution de culture dans différents flacons de culture, comprenant en outre: effectuer respectivement un traitement de concentration par centrifugation sur des solutions de culture dans les quatre flacons de culture ou un lavage par 1x solution physiologique tamponnée au phosphate avec un pH de 7,4.

8. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, le mode de désinfection de la lame infrarouge est le suivant: laver la lame infrarouge dans de l'éthanol à 70 % et exposer au rayonnement ultraviolet pendant la nuit après le lavage.

9. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, l'inhibiteur du cycle cellulaire est de HUS02916 100 g/ml de L-momicine ou de 50 ng/ml de nocodazole.

10. Le procédé de détection de la morphologie du cycle de cellules cancéreuses selon la revendication 1, caractérisé en ce que, la concentration cellulaire déterminée est de 10 %.