LT5143B

LT5143B - Monoamino sunaudojimo slopintojas

Info

Publication number: LT5143B
Application number: LT2003075A
Authority: LT
Inventors: Edward Luis Mattiuz; John-Michael Sauer; William Joe Wheeler; David Taiwai Wong
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 2001-03-06
Filing date: 2003-08-11
Publication date: 2004-06-25
Also published as: DE60226715D1; EA005768B1; CN1229331C; ES2201942A1; HRP20030710A2; HUP0303341A3; EP1379492B1; ZA200306882B; WO2002070457A1; GB2389851A; FI20031191A; OA12494A; LU91038B1; ES2305221T3; LT2003075A; EE200300419A; IL157779A0; DK200301267A; ES2201942B2; SE0302361D0

Abstract

Šis išradimas pateikia junginius, skirtus monoamino sulaikymo slopinimui žinduoliams. ą

Description

Monoamino sunaudojimo slopintojas

Nustatytas ryšys tarp monoamino sunaudojimo ir eilės neurologinių sutrikimų žinduoliams, ir 3-ariloksi-3-pakeistieji-l-aminopropanai parodė puikią įvairovę jų gebėjime slopinti monoaminų sulaikymą. Tam tikri 3-ariloksi-3-pakeistiųjų-l10 aminopropanų klasės junginiai pripažinti naudingais gydant neurologinius sutrikimus. ! avyzdžiui, fluoksetinas, N-metilo 3-((4-trifluormetilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochloridas, yra selektyvus serotonino sulaikymo slopintojas, kuris pasižymi didele paklausa gydant depresiją, ir buvo aprobuotas eilės kitų negalavimų gydymui. Atomoksetinas, (-) -N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochloridas, yra selektyvus norepinefrino sulaikymo slopintojas, kuris yra kliniškai tiriamas dėmesio deficito/per didelio aktyvumo negalavimo gydymui. Duloksetinas, (+)-Nmetilo 3-(l-naftaleniloksi)-3-(2-tienil-l-aminopropano hidrochloridas, slopina tiek norepinefrino, tiek serotonino sulaikymą ir šiuo metu yra vykdomi jo klinikiniai bandymai depresijos gydymui. Šie junginiai yra tarp daugelio 3-ariloksi-3-pakeistųjų-l20 aminopropanų, aprašytų JAV patentuose: Nr. 4 018 895, Nr. 4 194 009, Nr. 4 314 081, Nr. 4 956 388 ir Nr. 5 023 269. Tačiau galimybė naudoti hidroksilintą 3-fenoksi-3-fenil-laminopropaną iki šiol nebuvo įvertinta........

Siūlomas išradimas apima junginį formulės I

HO

CH,

O

I

CH, arba farmaciniu požiūriu priimtinąjo druską.

Išradimas taip pat pateikia farmacines kompozicijas, kartu su farmaciniu požiūriu priimtinais nešikliais, skiedikliais arba ekscipientais, turinčiais junginį formulės I.

Siūlomas išradimas pateikia norepinefrino ir serotonino slopinimo žinduoliams būdą apimantį farmaciškai veiksmingo kiekio junginio formulės I skyrimą žinduoliams.

Dar vienas šio išradimo įgyvendinimo pavyzdys yra norepinefrino ir serotonino slopinimo žinduoliams būdas gydant daugybę negalavimų, susijusių su sumažėjusiu žinduolių norepinefrino ir/arba serotonino perdavimu neuronais. Šie negalavimai apima: depresiją migrenos skausmą bulimiją priešmenstruacinį sindromą arba vėlyvos lutealinės fazės sindromą alkoholizmą piktnaudžiavimą tabaku, panikos būseną baimę, bendrą skausmą potrauminį sindromą atminties praradimą senėjimo demenciją socialinę fobiją dėmesio trūkumą/ per didelio aktyvumo negalavimą psoriazę, priešiško nepaklusnumo negalavimą elgesio sutrikimą asmenybės ribų suvokimo sutrikimą persekiojimo neįveikiamo potraukio negalavimą chroniško nuovargio sindromą pirmalaikę ejakuliaciją erekcijos sunkumą nervinę anoreksiją miego sutrikimus, autizmą mutizmą alerginius rinitus, šalčio pojūčio simptomus, narkolepsiją inkontinenciją trichotilomaniją trišakio nervo neuralgiją dantų skausmą arba skausmą dėl temperomandibuliarinės bendros disfunkcijos. Bet kuriame iš šių būdų naudoja formulės 1 junginį.

Siūlomas išradimas taip pat apima junginio formulės I panaudojimą vaistų norepinefrino ir serotonino sulaikymo slopinimui gamybai. Papildomai šis išradimas apima farmacinę kompoziciją skirtą norepinefrino ir serotonino sulaikymo slopinimui, turinčią junginį formulės I arba jo metabolinį pirmtaką.

Išradimas dar pateikia junginio formulės I gamybos būdą apimantį tokias stadijas:

a) junginį formulės (i)

O-Pg (i) kurioje „Pg“ yra deguonį apsauganti grupė, jungia su l-chlor-3-fenil-3-hidroksipropanu, kad gauti junginį formulės (ii)

kurioje „Pg“yra deguonį apsauganti grupė;

b) junginį formulės (ii) veikia jodo jonų šaltiniu, kad gauti junginį formulės (iii)

kurioje „Pg“ yra deguonį apsauganti grupė;

c) junginį formulės (iii) veikia metilaminu, kad gauti R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropaną; ir

d) nebūtinai apdoroja R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-laminopropaną farmaciniu požiūriu priimtina rūgštimi.

Išradime taip pat pateikiamas junginio formulės I gamybos būdas, apimantis tokias stadijas:

a) junginį formulės (i)

OH

O-Pg (i) kurioje „Pg“ yra deguonį apsauganti grupė, jungia su (S)-l-fenil-3-metilaminopropan-Ioliu, kad gauti junginį formulės (iv)

kurioje „Pg“yra deguonį apsauganti grupė;

b) junginį formulės (iv) veikia apsaugojimą pašalinančiu agentu, kad gauti R-(-)-Nmetilo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-l-aminopropaną; ir

c) nebūtinai apdoroja R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-laminopropaną farmaciniu požiūriu priimtina rūgštimi.

Formulių (ii), (iii) ir (iv) junginiai yra naudotini tarpiniais junginiais formulės I junginių gamybai ir atstovauja kitus šio išradimo įgyvendinimo atvejus.

Junginys formulės I bendrai yra nurodomas kaip R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropanas. Kadangi šis junginys yra aminas, jis yra bazinės prigimties ir atitinkamai reaguoja su bet kuria iš eilės neorganinių ir organinių rūgščių, sudarydamas farmaciniu požiūriu priimtinas druskas su rūgštimis. Naudojimo skyrimo palengvinimui pageidautina paversti laisvą aminą į farmaciniu požiūriu priimtiną druską su rūgštimi. Rūgštys, paprastai naudojamos druskų sudarymui, yra neorganinės rūgštys, tokios kaip druskos rūgštis, hidrobromido rūgštis, hidrojodido rūgštis, sieros rūgštis, fosforo rūgštis ir panašiai, ir organinės rūgštys, tokios kaip p-toluensulfonrūgštis, metansulfonrūgštis, oksalo rūgštis, p-bromfenilsulfonrūgštis, karbonato rūgštis, gintaro rūgštis, citrinų rūgštis, benzoinė rūgštis, acto rūgštis ir panašiai. Tokių farmaciniu požiūriu priimtinų druskų pavyzdžiai yra sulfatas, pirosulfatas, bisulfatas, sulfitas, bisulfitas, fosfatas, mono-rūgštusis fosfatas, di-rūgštusis fosfatas, metafosfatas, pirofosfatas, chloridas, bromidas, jodidas, acetatas, propionatas, dekanoatas, kaprilatas, akrilatas, formatas, izobutiratas, kaproatas, heptanoatas, propioliatas, oksalatas, maloatas, sukcinatas, suberatas, sebacatas, fumaratas, maleatas, butin-l,4-dioatas, heksin-l,6-dioatas, benzoatas, chlorbenzoatas, metilbenzoatas, dinitrobenzoatas, hidroksibenzoatas, metoksibenzoatas, ftalatas, sulfonatas, ksilensulfonatas, fenilacetatas, fenilpropionatas, fen ii būti ratas, citratas, laktatas, α-hidroksibutiratas, glikoliatas, tartratas, metansulfonatas, propansulfonatas, naftalen-l-sulfonatas, naftalen-2-sulfonatas, mandelatas irpan.

Geriausios farmaciniu požiūriu priimtinos druskos yra druskos, gautos su druskos rūgštimi ir oksalo rūgštimi.

Junginys formulės I yra chiralinis ir gali būti paruoštas junginio formulės I raceminės arba enantiomerais praturtintų formų chiraline chromatografija arba druskų, gautų iš raceminio arba enantiomerais praturtinto laisvo amino ir chiralinės rūgšties, frakcine kristalizacija. Arba laisvą aminą veikia chiraliniu priedu ir enantiomerus perskiria chromatografiškai, po to seka chiraliniu priedų pašalinimas laisvo amino regeneravimui.

Be to, enantiomerų perskyrimas gali būti atliktas bet kurioje tinkamoje išradimo junginių sintezės stadijoje. Pageidautina išradimo junginius pradėti gaminti iš chiraliniu pradinių medžiagų.

Siūlomas išradimas pateikia norepinefrino ir serotonino sulaikymo slopinimo būdą. Šis mechanizmas galioja žinduoliams ir optimaliausias žinduolis yra žmogus.

3-ariloksi-3-pakeistųjų-l-aminopropanų struktūrinė junginių klasė istoriškai buvo patrauklus sintezės objektas, ir eilė naudingų sintezių buvo aprašyta literatūroje. Atomoksetino ( R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano, anksčiau žinomo kaip tomoksetinas) ir fluoksetino sintezė, pavyzdžiui, yra aprašyta Tetrahedron Letters. 30(39), 5207 (1989); Tetrahedron Letters, 35(9), 1339 (1994); Tetrahedron

Letters, 53(20), 6739 (1997); WO 99/18947; WO 00/58262; ir _WO 00/61540. R-(-)-Nmetilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)-3-fenil-l-aminopropanas gali būti pagamintas įprastu būdu, kaip pavaizduota toliau schemoje, kurioje „Pg“ yra deguonį apsauganti grupė ir „X“ yra arba chloras, arba NHMe.

I schema

Reikalingi fenoliai formulės (i) gali būti paruošti iš komerciškai prieinamo etilhidrochinono, įvedant atitinkamą deguonį apsaugančią grupę standartiniais sintezės metodais. Tinkamos deguonį apsaugančios grupės fenoliams yra gerai žinomos specialistams ir yra aprašytos Greene ir Wuts (Protective Groups in Organic Synthesis, Thitd Edition, John Wiley and Sons, New York (1999). Tinkamesnės apsauginės grupės šio išradimo gavimo būdui yra alkanoilo esteriai ir siiilo eteriai. Labiau tinkamos deguonį apsaugančios grupės yra acetilo, tret-butoksikarbonilo. ir tretbutildimetilsililo. Labiausiai tinkamas tret-butoksikarbonilo panaudojimas.

Junginiai formulės (v) gerai žinomi šioje mokslo srityje ir gali būti gaunami įprastais sintezės būdais. l-fenil-l-hidroksi-3-chlorpropano (v, X=C1) sintezė buvo išdėstyta Corey ir Reichard (Tetrahedron Letters. 30(39), 5207-5210 (1989); Srebnik ir kt. (Journal of Organic Chemistry, 53, 2916-2020 (1988); ir Schneider ir Goergens (Tetrahedron Asymmetry, 3(4), 525528 (1992). l-fenil-l-hidroksi-3-(metilamino)propano (v, X=NHMe) sintezė buvo išdėstyta Koenig ir Mitchell (Tetrahedron Letters. 35(9), 1339-1342 (1994); Gao ir Shaipless (Journal of Organic Chemistry, 53,4081-4084(1988); ir EP0909754 Al.

Atitinkamą fenolį (i) jungia arba su l-fenil-l-hidroksi-3-chlorpropanu (v, X=CI), arba su lfenil-l-hidroksi-3-(metilamino)propanu (v, X=NHMe), esant dialkilo azodikarboksilatui ir trifenilfosfinui standartinėmis Mitsunobu reakcijos sąlygomis siekiant gauti arilo eterį (ii) arba arilo eterį (iv), atitinkamai. Paprastai fenolio (i) ekvivalento ir alkoholio (v) ekvivalento tirpalas yra sumaišomi tinkamame tirpiklyje su nuo 1,0 iki 1,1 trifenilfosfino ekvivalentais. Tinkami tirpikliai apima bet kurį tirpiklį, kuris ištirpina pakankamą reagentų kiekį, kad leistų reakcijai vykti be žymaus konkuravimo su norima reakcija. Tinkami tirpikliai yra dioksanas, dietilo eteris ir tetrahidrofuranas. Geriausias tirpiklis yra tetrahidrofuranas. Šis tirpalas yra atšaldomas iki -5°C - 5°C, geriausiai nuo 0°C iki 5°C. Reakcijos mišinys laikomas azoto arba argono inertinėje atmosferoje. Į reakcijos mišinį yra pridedama nuo 1,0 iki 1,5 ekvivalentų, geriausiai 1,1 ekvivalentų, dialkilo azodikarboksilato, geriausiai diizopropilo azodikarboksilato. Gautas mišinys yra maišomas nuo 1 valandos iki 24 valandų ir po to reikalingą arilo eterį atskiria ir grynina įprastais būdais.

Arilo eterio (ii) tirpalą tinkamame tirpiklyje, geriausiai acetone, apdoroja su nuo vieno molinio ekvivalento iki didelio pertekliaus jodo jonų šaltinio. Bet koks jodo jonų šaltinis, kuris yra suderinamas su pasirinktu tirpikliu ir arilo eteriu (ii), yra priimtinas. Jodo jonų geriausias šaltinis apima natrio ir kalio jodidą. Geriausias jodo jonų šaltinis yra natrio jodidas. Gautą arilo eterį (iii) atskiria ir valo įprastais būdais.

Arilo eterio (ii) tirpalą tinkamame tirpiklyje, paprastai tetrahidrofurane, veikia metilaminu nuo ekvivalento iki žymaus pertekliaus. Metilaminas gali būti įleistas dujų pavidalu, kondensuotas reakcijos mišinyje kaip skystis arba pridėtas į reakcijos mišinį vandeninio tirpalo pavidalu. Kai pridėjimas yra baigtas, reagentai yra maišomi nuo 1 valandos iki 24 valandų. Pu to reikalingą aminą atskiria ir grynina įprastais būdais. Specialistams aišku, kad, priklausomai nuo konkrečios deguonies apsaugančios grupės (Pg) prigimties, šioje stadijoje bus gautas arba junginys formulės (iv) arba R(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropanas. Pavyzdžiui, kai Pg yra acetilas, apsaugančią grupę pašalina amininimo stadijoje.

Kai konkreti junginio formulės (iv) apsauganti grupė Pg turi būti pašalinta atskiroje stadijoje, specialistas žinos, kad fenolio fragmento regeneravimo specifinės sąlygos priklausys nuo apsaugančios grupės prigimties. Standartiniai deguonies apsaugančių grupių pašalinimo būdai aprašyti Green ir Wuts. Kai, pavyzdžiui, Pg yra tret-butildimetilsililas, apsauganti grupė paprastai yra pašalinama apdorojant pradinį sililo eterį (iv) fluoro jono šaltiniu tinkamame tirpiklyje. Arba, kai Pg yra tret-butoksikarbonilas, apsauganti grupė paprastai pašalinama apdorojant rūgštimi, būtent druskos rūgštimi. Gaunamas R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-laminopropanas po to gali būti atskirtas ir išgrynintas įprastais būdais.

Sekantys preparatai ir pavyzdžiai gali labiau iliustruoti išradimo įgyvendinimo pavyzdžius ir R-(-)-N-metiI 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano gamybą.

I preparatas

4-acetoksi-2-metilfenolis

Acetanhidridas (4,73 gm, 37 ml, 46,3 mmol) buvo lašinama į 4-hidroksi-2metilfenolio (5 gm, 46,3 mmol) ir cezio karbonato (15,1 gm, 46,3 mmol) mišinį acetonitrile (50 ml). Mišinys po maišymo per naktį buvo nufiltruotas ir filtratas buvo koncentruotas sumažintame slėgyje. Su liekana buvo atlikta chromatografija silikagelyje, naudojant eliuentu pentaną: etilo acetatą 5:1. Turinčios produktą frakcijos buvo sujungtos ir koncentruotos sumažintame slėgyje; gauta 0,24 gm (3%) pageidaujamo junginio. 'H-BMR(CDC1₃) δ 1.54 (1H, bs), 2.18 (3H, s), 2.22 (3H, s), 6.59 (1H, m), 6.65 (1H, m), 6.82 (lH,m).

II preparatas (S )-3-chlor-l -fenil-l-propanolis

Į (S)-l-fenil-l,3-propandioIio (125 g, 0,822 mol) tirpalą metiltret-butilo eteryje (500 ml) buvo įdėta trietilamino (135 ml). Reakcijos mišinys buvo atšaldomas iki 0°C ir 420 brombenzensulfonilo chlorido (230 g, 0,92 mol) tirpalas mettilo tret-butilo eteryje (300 ml) ir tetrahydrofurane (300 ml) buvo lašinamas 3 valandas. Po įlašinimo reakcijos mišinys buvo maišomas 0°C temperatūroje tris valandas ir po to buvo šildomas iki aplinkos temperatūros. Po 18 valandų maišymo aplinkos temperatūroje buvo įdėtas benziltrietilamonio chloridas (210 g, 0,92 mol) ir gautas mišinys buvo šildomas 55°C temperatūroje tris valandas. Reakcijos mišinys buvo atvėsintas iki aplinkos temperatūros ir praskiestas vandeniu. Po organinės fazės atskyrimo vandeninė fazė buvo du kartus ekstrahuota dietilo eteriu. Sujungti organiniai ekstraktai buvo plaunami 1,0 N druskos rūgštimi, vandeniu, prisotintu vandeniniu natrio bikarbonatu, vandeniu, prisotintu vandeniniu natrio chloridu, džiovinami esant magnio sulfatui ir koncentruoti sumažintame slėgyje siekiant gauti beveik baltą kietą medžiagą (160 g). Su šia medžiaga buvo atlikta chromatografija silikagelyje, eliuentu naudojant etilo acetatą : heksaną (1:9); gauta 110 gramų (80%) galutinio produkto.

’H-BMR (CDC1₃) (400 MHz) 6:2.20 (m, l H), 2.45 (m, I H), 3.60 (m, l H), 3.75 (m, l H), 4.95 (m, l H), 7.45 (m,5H).

MS(FAB); m/z = 172.0 (10%), 170 (23%), 154 (10%), 132 (25%), ll7 (5%), 107 (100%), 79 (54%), 77 (45%), 51(19%).

III preparatas

4-{(tret-butoksikarboniI)oksi)-2-metiIfenolis

Di-tret-butoksikarbonatas (52,4 g, 0,24 mol) tetrahidrofiirane (100 ml) buvo įlašintas į metilhidrochinono (99,2 g, 0,80 mol) ir dimetilamino- piridino (4,8 g, 4,0 mmol) tirpalą dietilo eteryje (1,11) aplinkos temperatūroje. Po 45 minučių maišymo reakcijos mišinys buvo užgesintas

1 N druskos rūgštimi (200 ml). Organinį sluoksnį atskyrė, plovė prisotintu vandeniniu natrio chloridu (200 ml), džiovino su natrio sulfatu ir koncentravo į aliejaus pavidalo produktą kuris bestovint sukietėjo. Kietą medžiagą išgryninus Biotage Flash 75 chromatografija eliujuojant su 94/6 heksanu/etilo acetatu (94/6) gavo beveik baltą kietą medžiagą kurią perkristalino iš dichlormetano/heksano (15/85), kad gauti 28,5 (53%) galutinio junginio.

'H-BMR (CDC1₃) δ: (300 MHz) 1 .55 (s, 9H), 2.22 (s, 3H), 4.76 (s, 1H), 6.68 (d, J = 8.78 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 8.78 Hz ir 2.92 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.92 Hz, 1H). MS(FAB): m/z = 225.3,211.3, 169.3,155.2,124.2.

I PAVYZDYS

R-(-)-N-metil 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi>3-fenil-l-aminopropano oksalatas (R)-3 -chlor-1 -fen ii-1 42-metil-4-acetoksifaioksi)propanas . (S)-(-)-3-chIor-l-fenil-I-propanolio (0,204 gm, 1,20 mmol), 4- acętoksi-2-metiIfęnolio (0,200 gm, 1,20 mmol) ir trifenilfosfino (0,346 g, 1,32 mmol) tirpalas 10 ml tetrahidrofurane buvo atvėsintas iki 0-5°C temperatūros argono atmosferoje. Į šį mišinį buvo lašinamas di25 izopropilazodikarboksilatas (0,26 ml, 1,32 mmol) tetrahidrofurane (2 ml). Gautas mišinys buvo maišomas 1 valandą 0-5°C temperatūroje ir po to paliktas sušilti iki kambario temperatūros. Po maišymo kambario temperatūroje per naktį reakcijos mišinį koncentravo sumažintame slėgyje ir liekanątrituravo 10% etilo acetatu pentane ir maišė kol suspenduota medžiaga susikristalizavo. Suspensiją nufiltravo ir gautą kristalinę medžiagąplovė 10% etilo acetatu pentane. Sujungtus filtratus koncentravo sumažintame slėgyje ir likutį chromatografavo silikogelyje eliuantu naudojant tolueną. Turinčias produktą frakcijas sujungė ir koncentravo sumažintame slėgyje, kad gauti 0.205 gm (54%) norimo junginio gelsvo aliejaus pavidalu.

MS(FD): m/e = 3l8(M⁺) (R)-3-iod-l-fenil-l-(2-metil-4-acetoksifenoksi)propanas (R)-3-chlor-l-feniI-l-(2-metil-4-acetoksifenoksi)propano (0,200 gm, 0,63 mmol) ir 15 ml acetono mišinį prisotino kalio jodidu, maišė disriliavimo temperatūroje per naktį argono atmosferoje. Reakcijos mišinį supylė į 50 ml dietilo eterio ir gautą suspensiją filtravo. Filtratąplovė prisotintu vandeniniu natrio rūgščiuoju sulfitu, po to vandeniu. Likusią organinę fazę džiovino su magnio sulfatu ir koncentravo sumažintame slėgyje, kad gauti 0, 18 gm (70%) reikiamo junginio bespalvio aliejaus pavidalo.

MS(FD):m/e = 410(Nf)

Amininimas (R)-3-jod-l-feniI-I-(2-metil-4-acetoksifenoksi)propane (0,180 gm, 0.44 mmol) ir 70% vandeninio metilamino (5 ml, 71 mmol) mišinį 15 ml tetrahidrofurane per naktį maišė kambario temperatūroje. Reakcijos mišinį koncentravo sumažintame slėgyje ir likutį paskirstė į vandenį ir etilo acetatą. Etilo acetato fazę plovė vandeniu, džiovino su magnio sulfatu ir koncentravo sumažintame slėgyje. Likutį ištirpino etilo acetate ir apdorojo oksalo rūgštimi (0,04 gm, 0,44 mmol). Gautą baltą kietą medžiagą atskyrė filtruojant, plovė etilo acetatu ir džiovino sumažintame slėgyje, kad gauti 0,107 gm (67%) galutinio junginio.

MS(FD):m/e = 271(NC _________ EA: Apskaičiuota dėl C19H23NO6: Teoriškai: C,63.15; h, 6,41; N, 3,88. Rasta: C, 63.32; H, 6.59; N, 3.99.

ΠPAVYZDYS

R-(-)-N-metilo 3-((2-metil4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-1 -aminopropano hidrochloridas (R)-3-chlor-1 -fenil-142-metil4-Q-tret-butoksikaiboksi-fenoksi)propanas

Į krosnyje išdžiovintą 2 1 trigurklę apvalaus dugno kolbą buvo įdėta (S)-(-)-3-chlor-l-fenilpropanolio (52 g, 304 mmol), 4-((tret-butoksikarbonil)oksi)-2-metiIfenolio (73,86 g, 329 mmol), trifenilfosfmo (87,36 g, 333 mmol) ir bevandenio tetrahidrofurano (600 ml). Į atvėsintą iki 0°C temperatūros reakcijos mišinį 6 valandas buvo lašinamas diizopropilazadikarboksilato (76 ml, 365

II mmol) tirpalas sausame tetrahidrofurane (l OO ml). Reakcijos mišinį maišė papildomai dvi valandas 0°C temperatūroje ir po to palaipsniui leido įšilti iki kambario temperatūros. Reakcijos mišinį toliau maišė kambario temperatūroje 24 valandas ir koncentravo sumažintame slėgyje. Likutį apdorojo 2 l pentanu: etilacetatu 9:1. Gautą suspensiją laikė -20°C temperatūroje 24 valandas ir netirpias medžiagas nufiltravo. Nuosėdas plovė 9:15 pentanu:etilo acetatu (200 ml). Sujungtus filtratus kondensavo sumažintame slėgyje. Gautą likutį (150 g) valė 150 Flash Biotage iš anksto užpildytoje kolonėlėje eliuavimu 3% etilo acetatu heksane, kad gauti (R)-3-chlor-l-fenil-l-(2-metiI4-((tret-butoksikarbonil)oksi}-fenoksi)propano (100 g) su 85% išeiga.

’H-BMR (CDCl₃) 5: (400 MHz) 1.50 (s, 9H), 2.20 (m, 1 H), 2.27 (s, 3H), 2.46 (m, 1 H),

3.60 (m, 1H), 3.76 (m, 1H), 5.31 (m, 1H), 6.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.72 (m, 1H), 7.24 (m, 1H),

7.32 (s, 4H).

^UC-BMR (CDC1₃) 6: (75 MHz) 15.27, 16.59, 27.69,41.25, 41.48, 83.20, 113.15, 113.71, 118.42, 118.84,122.21,123.42,125.39,125.81,127.93,128.17,128.80,140.77,144.29,152.46,153.44. MS(FAB):m/z = 376.145.

EA: Apskaičiuota C21H25CIO4: C, 66.93; H, 6.69; Cl, 9.41. Rasta: C, 66.94; H, 6.74; CI, 9.67.

(RĮ-3-iod-l-fenil-l-(2-metil-4-((tret-butoksikarbonil)-oksi)fenoksi)Dropanas

Į sausą 1 1 apvalaus dugno (R.B.) kolbą buvo pridėta (R)-3-chlor-l-fenil-l -{2-metil-4-((tret20 butoksikarbonil)-oksi)fenoksi)propano (18.00 g, 47.80 mmol), natrio jodido (90.0 g, 600 mmol) ir 2-butanono (550 ml). Reakcijos kolba buvo saugoma nuo šviesos. Reakcijos mišinį maišė distiliavimo temperatūroje azoto atmosferoje 16 valandų, Mišinį atvėsino iki kambario temperatūros ir supylė į eterį (1 1). Netirpias neorganines druskas (baltas nuosėdas) nufiltravo. Filtratas buvo koncentruojamas sumažintame slėgyje; gautas likutis buvo ištirpintas dietilo eteiyje (1 1). Eterinį sluoksnį plovė su šaltu prisotintu natrio bisulfito tirpalu (2 X 200 ml), vandeniu ir prisotintu vandeniniu natrio chloridu. Organinį sluoksnį džiovino su bevandeniu magnio suliatu ir koncentravo sumažintame slėgyje. Likutis buvo chromatografuojamas greitos (flash) chromatografijos būdu, naudojant eliuentu 20% etilo acetatą heksane; gauta 20,5 g (91%) norimo junginio.

'H-BMR(CDCl₃400MHz)5 1.56 (s, 9H), 2.30 (s, 3H), 2.40(1 H, m), 2.50(1 H, m), 3.25 (m, 1H), 3.35 (m, 1H), 5.21 (m, 1H), 6.55 (d, J = 8.8,1H), 6.75 (m, 1H), 6.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.25 (m, 1H), 7.37 (m, 4H). MS(FAB): m/z = 468.0 (100%), 342 (10%). 5

EA: Apskaičiuota C₂i H^IO^C, 53.86, H, 5.38. Rasta: C, 53.36, H, 4.79.

Amininimas/Apsauginiu grupių pašalinimas/Druskos sudarymas (R)-3-jod-i-fenii-l-(2-metiI-4-((tret-butoksi-karbonil)oksi)fenoksi)propaną(20,0g,

42,66 mmol) ištirpino bevandeniame tetrahidrofurane (100 ml). Tirpalą apdorojo metilaminu (300 ml, 2M tirpalas tetrahidrofurane) azoto atmosferoje ir reakcijos mišinys buvo maišomas aplinkos temperatūroje 15 valandų, per šį laiką reakcijos mišinys susikoncentravo iki sausumo. Sausą likutį apdorojo etilo acetatu šaltame vandenyje. Buvo atskirti du sluoksniai. Vandeninis sluoksnis buvo ekstrahuojamas etilo acetatu. Sujungti organiniai sluoksniai buvo kruopščiai plaunami šaltu prisotintu natrio bisulfito tirpalu, šaltu vandeniu, džiovinami su magnio sulfatu ir koncentruojami sumažintame slėgyje. Likutį ištirpino etilo acetate. Tirpalas buvo ekstrahuojamas su ledine 0.1 N druskos rūgštimi. Vandeninio tirpalo liofilizavimu gauta geltona kieta medžiaga, kurią ištirpino metanolyje, praleido per trumpą aktyvuotos anglies kolonėlę (Norių 100 akytumo milteliai, 2% medžio anglis). Pašalinus tirpiklį gautą hidrochlorido druską nusodino trituravimu su minimaliu vandens kiekiu. Hidrochlorido druska buvo perkristalinta iš vandens ir gautas norimas produktas (7.22 g, 55%).

’H-BMR (dmso 300 MHz) 5 2.12 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.99 (m, 2H), 5.31 (m, 1H), 6.33 (dd, J = 8.7 Hz ir 2.56 Hz, 1H), 6.51 (m, 1H), 7.29 (m,lH), 7.34 (m, 5H), 8.77 (s, 1H), 8.85 (brs, 1H). MS(FAB): m/z=272.4.

EA: Apskaičiuota C17H21NO2-HCI :C, 66.33, H, 7.20. N, 4.55, Cl, 11.52. Rasta: C, 66.23, H, 7.22, N, 5.37, Cl, 11.23.

Visi siūlomi junginiai gali būti naudojami peroraliniu būdu ir paprastai skiriami peroraliai; peroralinis skyrimas pageidautinas. Tačiau peroralinis skyrimas nėra vienintelis būdas, ir netgi vienintelis tinkamiausias būdas. Transderminis skyrimas, pavyzdžiui, gali būti tinkamesnis pacientams, kurie pamiršta arba nesilaiko vaisto peroralinio paėmimo tvarkos. Junginiai formulės (1) taip pat konkrečiais atvejais gali būti skiriami po oda, į veną, į raumenį į nosį arba į tiesiąją žarną. Skiriamas kursas gali būti įvairinamas bet kokiais būdais, ribojamas vaistų fizinėmis savybėmis, paciento ir slaugytojo patogumu ir kitomis tiesiogiai susijusiomis sąlygomis (Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18* Edition, Mack Publishing Co.( 1990)).

Farmacinės kompozicijos pagamintos farmacijoje gerai žinomu būdu. Nešiklis arba ekscipientas gali būti kieta, pusiau kieta arba skysta medžiaga, kuri gali tarnauti kaip nešiklis arba veiksmingo ingrediento terpė. Tinkami nešikliai arba ekscipientai specialistams gerai žinomi. Farmacinės kompozicijos gali būti pritaikytos peroraliniam, inhaliaciniam, parenteraliniam arba vietiniam naudojimui ir pacientui gali būti skiriamos tablečių, kapsulių, aerozolių, inhaliantų, žvakučių, tirpalų, suspensijų ir kitomis formomis.

Šio išradimo junginiai gali būti skiriami peroraliai, pavyzdžiui, su inertiniu 10 skiedikliu, arba kapsulėmis arba supresuotos į tabletes. Peroralinio terapinio skyrimo reikmėms junginiai gali būti sujungti su ekscipientais ir naudojami tablečių, tablečių- troče, kapsulių, eliksyrų, suspensijų, sirupų, vaflių, kramtomų gumų ir panašiose formose. Šios kompozicijos gali turėti mažiausiai 4 % šio išradimo junginio veiksminguoju ingredientų, tačiau, priklausomai nuo formos ypatybių, gali keistis, paprastai sudarant nuo 4% iki 70% pagal vieneto masę. Kompozicijoje esantis junginio kiekis yra toks, kad būtų gautas tinkamas dozavimas. Tinkamiausias kompozicijas ir preparatus pagal šį išradimą gali nustatyti šios srities specialistas.

Tabletės, piliulės, kapsulės, granulės ir pan. taip pat gali turėti vieną arba daugiau šių adjuvantų: rišikliai, tokie kaip mikrokristalinė celiuliozė, tragakanto derva arba želatina;

ekscipientai, tokie kaip krakmolas arba laktozė, dezintegruojantys agentai tokie kaip algino rūgštis, Primogelis, kukurūzų krakmolas ir panašiai; lubrikantai, tokie kaip magnio stearatas arba Steroteksas; glidantai, tokie kaip koloidinis silikono dioksidas; ir gali būti pridėti saldinimo agentai, tokie kaip sacharozė arba sacharinas, arba aromatizatoriai tokie kaip pipirmėtė, metilo salicilatas arba apelsinų skonio suteikimo agentas. Kai dozavimo vieneto forma yra kapsulė, ji gali turėti, priedo prie aukščiau išvardintų tipų medžiagų, skystą nešiklį, tokį kaip polietilenglikolį arba riebųjį aliejų. Kitos dozavimo formos gali turėti kitas įvairias medžiagas, kurios modifikuoja dozavimo vieneto fizinę formą, pavyzdžiui, padengimus. Tokiu būdu, tabletės arba piliulės gali būti padengtos cukrumi, šelaku arba kitais padengimo agentais. Sirupas gali turėti, priedo prie turimų junginių, sacharozę arba saldinimo agentą ir tam tikrų konservantų, dažų ir spalvos ir skonio

I4 medžiagų. Medžiagos, naudojamos gaminant šias įvairias kompozicijas, turi būti farmaciniu požiūriu grynos ir naudojamais kiekiais netoksiškos.

Kompozicija, naudojama R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-1 aminopropano hidrochlorido (atomoksetino) skyrimui, R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-45 hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano metabolinis prekursorius, turi R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochlorido sausą mišinį su skiedikliu ir lubrikantu. Krakmolas, toks kaip pregelatinizuotas kukurūzų krakmolas, yra tinkamas skiediklis, ir silikono aliejus, toks kaip dimetikonas, yra tinkamas lubrikantas, tinkamas naudoti kietose želatinos kapsulėse. Paruoštos tinkamos kompozicijos turi apie 0,4-26% R10 (-)-N-metilo 3-((2-metiIfenii)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochlorido, apie 73-99% krakmolo ir apie 0,2-1,0% silikono aliejaus.

Lentelės iliustruoja tinkamiausias kompozicijas:

Ingredientai (%)	2,5 mg	5 mg	10 mg	18 mg	20 mg	25 mg	40 mg	60 mg
R-(-)-N-metilo 3-((2- metilfenil)oksi)-3-feniI-1 - aminopropano hidrochloridas	1,24	2,48	4,97	8,94	9,93	12,42	19,87	22,12
Dimetikonas	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Pregelatinizuotas krakmolas	98,26	97,02	94,53	90,56	89,57	87,08	79,63	77,38

Ingredientai (mg/kapsulėje)	2,5 mg	5 mg	10 mg	18 mg	20 mg	25 mg	40 mg	60 mg
R-(-)-N-metilo 3- ((2-metilfenil)oksi)- 3-fenil-l - aminopropano hidrochloridas	2,86	5,71	11,43	20,57	22,85	28,57	45,71	68,56
Dimetikonas	1,15	1,15	1,15	1,15	1,15	1,15	1,15	1,55
Pregelatinizuotas krakmolas	225,99	223,14	217,42	208,28	206,00	200,28	183,14	239,89
Kapsulės užpildymo masė (mg)	230	230	230	230	230	230	230	310
Kapsulės dydis	3	3	3	3	3	3	3	2

Parenteralinio terapinio skyrimo tikslui išradimo junginiai gali būti tirpalo arba suspensijos sudėtyje. Tokie preparatai paprastai turi mažiausiai 0,1% šio išradimo junginio, bet gali keistis nuo 0,1 iki 90% masės. Junginio formulės I kiekis, esantis tokioje kompozicijoje, yra toks, kad būtų gautas tinkamas dozavimas. Tirpalai arba suspensijos taip pat gali turėti vieną arba kelis iš šių adjuvantų: sterilus skiediklis, toks kaip vanduo injekcijoms, druskos tirpalas, tam tikri aliejai, polietilenglikolis, glicerinas, propilenglikolis, arba kiti sintetiniai tirpikliai; antibakteriniai agentai, tokie kaip benzilo alkoholis arba metilo parabenas; antioksidantai tokie kaip askorbo rūgštis arba natrio bisulfitas; chelantai, tokie kaip etilendiamintetraacto rūgštis; buferiai, tokie kaip acetatai, citratai arba fosfatai ir agentai tonuso reguliavimui, tokie kaip natrio chloridas arba dekstrozė. Parenteralinis preparatas gali būti patalpintas į ampules, vienkartinius švirkštus, arba daugkartinio dozavimo indelius, padarytus iš stiklo arba plastiko. Specialistas gali parinkti geriausią kompoziciją ir preparatą.

Šio išradimo junginiai taip pat gali būti skiriami vietiškai ir, kai taip yra daroma, tinkamas nešiklis gali būti tirpalo, tepalo arba gelio pagrindu. Pagrindas, pavyzdžiui, gali būti viena arba daugiau iš šių medžiagų: petrolatumas, lanolinas, polietilenglikolis, bičių vaškas, mineralinis aliejus, skiedikliai, tokie kaip vanduo ir alkoholis, ir emulsikliai ir stabilizatoriai. Vietinės kompozicijos gali turėti formulės l junginių arba jų farmaciniu požiūriu priimtinos druskos koncentraciją 0, l -10% m/t (masė /tūrio vienetui).

Specialistas įvertins, kad R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-laminopropanas gali būti gautas, pavyzdžiui, naudojant fermentinę arba rūgštinę katalizę iš • R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano metabolinių pirmtakų. R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-l -aminopropano metabolinis pirmtakas yra junginys, kuris yra paverčiamas į R-(-)-N-metiIo 3-((2-metil-410 hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropaną in vivo po metabolinio pirmtako davimo žinduoliui. Tačiau, papildomai aprašytiems ankstesniuose paragrafuose būdams, R-(-)-Nmetilo 3-((2-metiI-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano skyrimas taip pat gali būti atliktas duodant R-(-)-N-metiIo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l -aminopropano metabolinį pirmtaką. Toks metabolinis pirmtakas skirtinas dozės kiekiais, veiksmingais sukelti efektyvų serotonino ir norepinefrino sulaikymo slopinimą nesukeliant žalingų arba nepageidautinų pašalinių efektų.

R-(-)-N-metilo3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano metabolinis pirmtakas apima karboksirūgščių esterius, sulfonato esterius, aminorūgščių esterius ir formulės I hidroksi fragmento eterius. Be to buvo atrasta, kad R-(-)-N-metilo 320 ((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-I-aminopropanas gali būti gautas R-(-)-N-metilo 3((2-metil-feniI)oksi)-3-fenil-l-aminopropano, atomoksetino, in vivo fermentų poveikyje. Tačiau R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano sisteminio skyrimo geriausias būdas yra peroralinis R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfeniI)oksi)-3-fenil-laminopropano hidrochlorido, atomoksetino, skyrimas žinduoliams. Tai yra, sisteminis R-(25 )-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-l-aminopropano skyrimas geriausiai gali būti atliktas R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l -aminopropano hidrochlorido, atomoksetino, kaip R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil1-aminopropano metabolinio pirmtako, peroraliniu skyrimu žinduoliams.

Monoaminų mikrodializės bandymai

Sprague-Dawley žiurkėms (Harlan arba Charles upės), sveriančioms 270-300 gramų, buvo chirurgiškai implantuoti mikrodializės bandiniai su chloralhidrato/ pentobarbitalio anestezija (170 ir 36 mg/kg i. p. 30% propilenglikolio, 14% etanolio) kaip aprašyta Perry ir Fuller, (Perry and Fuller, Effect of fluoxetine on serotonin and dopamine concentration in rat hypothalamus after administration of fluoxetine plūs L-5hydroxytryptophan, Life Sci., 50, 1683-90 (1992). Davido Kopfo stereotaksinis prietaisas buvo naudojamas implantuoti bandinį vienoje pusėje į pagumburį su koordinatėmis rostraliai -1,5 mm, lateraliai - 1,3 mm ir ventraliai 9,0 mm (Paxinos ir Watson, 1986). Po

48 valandų atsigavimo periodo žiurkės buvo suleistos į didelį plastikinį rezervuarą su sumontuota hidrauline sukimo sistema (CMą/120 sistema laisvai judantiems gyvūnams, Bioanalytical Systems, West Lafayette, IN). Filtruotas dirbtinis cerebrospinalinis skystis (CSF) (150 mM NaCI, 3,0 mM KC1, 1,7 mM CaCl₂, ir 0,9 mM MgCl₂) buvo perleistas per bandinį 1,0 ml/min greičiu. Dializato linijos išėjimas yra pritaikytas prie HPLC vožtuvo su

20 μΐ kilpa. Kiekvieno 30 min bandinio ėmimo periodo pabaigoje surinktas kilpoje dializatas buvo suleidžiamas į analitinę kolonėlę (Spherisorb 3 μ ODS2, 2X150 mm, Keystone Scientific).

Monoaminų nustatymui naudojamas būdas, koks yra aprašytas Perry ir Fuller (1992). 20 μΐ kilpoje surinktas dializatas buvo ištiriamas 5-HT ir NE. 20 ml injekcija buvo paduodama į koloną su judria faze, kuri atskyrė 5-HT ir NE: 75 mM kalio acetato, 0,5 mM tilendiamintetraacto rūgšties, 1,4 mM natrio oktansulfonrūgšties ir 8% metanolio, pH 4,9. Judri fazė amino kolonėlei buvo pateikiama srautą programuojančiu siurbliu su pradiniu srovės greičiu 0,2 ml/min, 5 min didinant iki 0,3 ml/min, po to 26 min vėl mažinant iki 0,2 ml/min, kai bendras tyrimo laikas 30 min. Buvo naudojamas toks srovės programavimas, kad 5-HT būtų eliujuotas 25 min laikotarpiu. Elektrocheminis detektorius (EG&G, Modelis 400) amino kolonėlėje buvo nustatytas prie 400 mV potencialo ir su 0,2 nA/V jautrumu. Mažiausiai 90 min prieš vaistų suleidimą buvo matuojami pagrindiniai lygiai. Vaistai buvo paruošiami filtruotame dejonizuotame vandenyje (tūris 0,25-0,3 ml) skyrimui nustatytomis dozėmis.

R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-l-aminopropanas buvo ištirtas iš esmės kaip aprašyta anksčiau ir buvo nustatyta, kad slopina tiek serotonino (Ki=43nM), tiek ir norepinefrino (Kį=3,0 nM) sulaikymą.

R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-fenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano metabolizmas į R-(-)-Nmetilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropanąpas žmones.

Atviro žymėjimo tyrinėjimas buvo atliktas septyniems sveikiems CYP2D6 genotipo žmonėms, identifikuotiems EM (ekstensyvaus metabolizmo subjektas) arba PM (silpno metabolizmo subjektas) prieš pradedant tyrimus. CYP2D6 yra fermentas su genetiniu polimorfizmu, pasireiškiančiu mažiausiai 2 populiacijose asmenų su arba aktyvia, arba silpna medžiagų apykaita. Dauguma žmonių priskiriami prie (ekstensyvaus metabolizmo subjektų) (EM) ir turi „normalų“ CYP2D6 aktyvumą. Geno CYP2D6 mutacija arba deleciją pasireiškia mažumoje žmonių (5%-10% kaukaziečių; 1% azijiečių) kurie yra žinomi kaip „silpno metabolizmo subjektai“ (PM) CYP2D6 substrato.

Buvo skiriamos kartotinės 20 mg R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-fenil)oksi)-3-fenil-laminopropano dozės dukart per dieną 5 dienas, po to sekant vienkartinei radioaktyviai pažymėtai tomoksetino 20 mg dozei (veiksminga dozė 19,66 mg) šeštos dienos ryte. Radioaktyviai pažymėtas [3-¹⁴C]-R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfeniI)oksi)-3-fenil-l20 aminopropanas buvo pateiktas 20 mg R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-laminopropano hidrochlorido kapsulėmis, turinčiomis pakankamą kiekį [3-¹⁴C]-R-(-)-Nmetilo 3-((2-metilfemI)oksi)-3-fehil-l-amiri0propano hidrochlorido, apytikriai 3,7 Mbq(100 pCi) dozės užtikrinimui.

1-5 dienomis apytikriai po 12 valandų po rytinės dozės buvo skirta sekanti 20 mg kapsulė su 240 ml vandens. Ši vakarinė dozė buvo skiriama mažiausiai 30 min po nemaistingo vakarinio maisto. 6-tos dienos ryte R-(-)-N-metiIo 3-((2-metiIfenil)oksi)-3fenil-l-aminopropano hidrochlorido 20mg kapsulė, turinti 100 pCi [3-^l4C]-R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochlorido, buvo duota perorališkai su 240 ml vandens 30 min po įprastinių pusryčių pabaigos.

Pilnutiniai kraujo mėginiai buvo surinkti iš EM subjektų prieš 12 valandų ir iš karto prieš [3-^,4C]-R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochlorido

I9 skyrimą (išankstinis dozės kontrolinis pavyzdys) ir apytikriai suėjus I, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 18, 24, 36, 48 ir 72 valandoms po dozės davimo. Visi pilni kraujo pavyzdžiai buvo surinkti iš PM subjektų prieš I2 valandų ir iš karto prieš [3-^l4C]-R-(-)-N-metilo 3-((2metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochlorido skyrimą (išankstinis dozės kontrolinis pavyzdys) ir apytikriai suėjus 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 18, 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 192 ir 216 valandoms po dozės davimo. Pilnutiniai kraujo pavyzdžiai (apytikriai 12 ml) buvo surinkti kiekvienu laiko momentu į stiklinius vamzdelius su heparinu kaip antikoaguliantu. Pilni kraujo pavyzdžiai iki centrifugavimo buvo saugomi lede. Plazmos paruošimui kraujas buvo centrifuguotas apytikriai 15 min esant 3000 aps/min apytikriai

4°C temperatūroje 1 valandos bėgyje po surinkimo. Plazmos alikvotos buvo paimtos radioekvivalentų koncentracijos nustatymui. Likusi plazma buvo laikoma apytikriai -70°C temperatūroje prieš nustatant konjuguotų ir nekonjuguotų N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)3-fenil-l-aminopropano, R-(-)-N-metiIo 3-((2-metil-4-hidroksifeniI)oksi)-3-fenil-l aminopropano, 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano koncentracijas arba metabolito profiliavimą.

Heparinizuoti žmogaus plazmos pavyzdžiai buvo analizuoti dėl N-metilo 3-((2metilfenil)oksi)-3-fenil-1-aminopropano, R-(-)-N-metiIo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)3-fenil-l-aminopropano ir naudojant patvirtintą APČI LC/MS/MS (atmosferinio slėgio cheminio jonizavimo skysčių chromatografijos/masės spektrometrijos/ masės spektrometrijos) metodiką koncentracijų intervale 1,00-800 ng/ml N-metilo 3-((2metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano ir R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano ir 2,50-2000,00 ng/ml 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-laminopropano. Tolimesnės analizės buvo atliekamos naudojant žemesnės srities patvirtintą APCI LC/MS/MS metodiką koncentracijų intervale 1,00-100,00 ng/ml R-(-)-N-metilo 325 ((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano ir R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano ir 0,25-25,00 ng/ml R-(-)-3-((2metilfeniI)oksi)-3-fenil-l -aminopropano.

Pirminis R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l -aminopropano hidrochlorido metabolitas, pasigaminantis abiems CYP2D6 EM ir PM subjektams, yra R30 (-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropanas. EM subjektai metabolizavo 86,5% R-(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-l -aminopropano hidrochloridą į R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropaną. PM subjektai metabolizavo 40% R*(-)-N-metilo 3-((2-metilfenil)oksi)-3-fenil-laminopropano hidrochlorido į R-(~)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-laminopropaną.

Claims

IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

1. Junginys formulės I:

I arba farmaciniu požiūriu priimtina jo druska.
2. Junginys R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochloridas.
3. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo kad turi junginį formulės I:

arba farmaciniu požiūriu priimtina jo druska derinyje su farmaciniu požiūriu priimtinu nešikliu, skiedikliu arba ekscipientu.
4. Farmacinė kompozicija pagal 3 punktą, besiskirianti tuo kad junginys 5 formulės I yra R-(-)-N-metilo 3-((2-metil-4-hidroksifenil)oksi)-3-fenil-l-aminopropano hidrochloridas.
5. Junginys formulės I pagal l punktą skirtas naudoti žinduolių norepinefrino ir serotonino sulaikymo slopinimui, kai žinduoliui, kuriam reikalingas toks slopinimas,
10 skiriamas farmaciniu požiūriu veiksmingas kiekis junginio formulės I arba farmaciniu požiūriu priimtinos jo druskos.
15 6. Junginys pagal 5 punktą besiskiriantis tuo kad junginys formulės I skirtas sistemingam skyrimui.