LT4684B

LT4684B - N-metil,n-(4-metansulfonamidofenilkarbamoilmetil)morfolinio chloridas, pasižymintis antiaritminiu poveikiu

Info

Publication number: LT4684B
Application number: LT99-128A
Authority: LT
Inventors: Laima Janušienė; Dalia Raižienė; Antanas Stankevičius
Original assignee: Kauno Medicinos Universiteto Kardiologijos Institutas
Priority date: 1999-10-28
Filing date: 1999-10-28
Publication date: 2000-07-25
Also published as: LT99128A

Description

Išradimas priskirtinas farmacijos sričiai ir gali būti naudojamas širdies ritmo sutrikimų gydymui.

Yra žinoma, kad lidokainas, prokainamidas, chinidinas pasižymi širdies aritmijas koreguojančiu efektu, tačiau jie, kaip ir kiti I-os klasės antiaritmikai, sukelia šalutinius poveikius, iš kurių pavojingiausi - proaritmija, laidumo sutrikimai, širdies nepakankamumas [The CASCADE Invcstigators. Amer. J. Cardiol.- 1993.-Vol.72.- P.2S3J.

Mes nustatėme, kad kvaternizuojant artimiausio lidokaino analogo trimekaino amino grupę, antiaritminis veikimas prailgėja bei sustiprėja ir išvengiama dalies šalutinių poveikių, tačiau ketvirtinių amonio druskų ūminis toksiškumas ryškiai padidėja, atskirais atvejais net iki 10 kartų [Janušienė L. Resp. konf. organinių medžiagų chemijos ir technologijos klausimais, skirtos akad. A.Purėno 110-sioms gimimo metinėms pažymėti, medžiaga. -Kaunas, 1991.- P.22; Janušienė L., Stankevičius A., Raižienė D., Vyžas V. Ischcmic Heart Discase/ Ed. J.Blužas. Kaunas.-1993.-P.285-295J.

Pareiškiamas junginys - N-metil, N-(4-metilsulfonamidofenilkarbamoilmetil)rnorfolinio chloridas (1), palyginus ji su aukščiau minėtais antiaritmikais. yra pranašesnis tuo, kad pirmą kartą siūlomas modifikuotos struktūros lidokaino analogas 1. susintetintas, atsisakant klasikinių metilo grupių 2,6-bcnzeno ciklo padėtyse, o Į 4-ą padėtį įvedant metansulfonamido grupę. Būtent šių struktūrinių pokyčių dėka netikėtai pavyko ženkliai sumažinti toksiškumą ir sustiprinti antiaritminį efektą, lyginant su žinomais antiaritmiko lidokaino analogais - trimekainu. piromekainu ir jo artimiausiu ketvirtiniu analogu - N.Ndietil,N-butil,N-(2,4,6-trimetilfcnilkarbamoilmctil)amonio jodidu (2). Pastarojo LDso yra

53,5 mg/kg [Janušienė L., Stankevičius A., Raižienė D., Vyžas V. Ischcmic Heart Discase/ Ed. J.Blužas. Kaunas.-1993.-P.285-295].

Tuo tarpu siūlomo 1 junginio esminiai požymiai yra mažas toksiškumas (LDsp yra 225 mg/kg), ir žymiai stipresnis antiaritminis efektas tiek kalcio chloridu sukeltos aritmijos (gyvūnų išgyvenimo procentą didina 9 kartus), tiek ir strofantinu sukeltos aritmijos modeliuose, nes jo poveikyje neįvyksta ne tik sunkiausias ritmo sutrikimas - skilvelių fibriliacija, bet ir skilvelių tachikardija pasireiškia tik vienu atveju.

N-metil,N-(4-metansulfonamidofeniIkarbamoilmetiI)inorfolinio chlorido (1) sintezė.

Pradinėms medžiagoms susintetinti buvo panaudotos klasikinės metodikos. N-acetilp-fenilcndiaminą veikiant mctansulfochloridu buvo gautas 4-(metansulfonamido)acetanilidas. Jį hidrolizinant šarminėje aplinkoje, susintetintas 4-metansuIfonamidoanilinas. Veikiant chloracctilchloridu 4-mctansuIfonamidoaniliną acto rūgšties ir vandeninio natrio acetato tirpale, gautas 4-mctan.sulfonamidochloracctanilidas. kurį kaitinant su ekvimoliniu N-metilmorfolino kiekiu acetonitrile gautas N-mctil,N-(4-mctansulfonamidofenilkarbamoilmctiljmorfolinio chloridas (1):

4-(MetansuIfonaniido)acetaniIidas. 10,5lg (0,07M) 4-aminoacetanilido ištirpinta 40ml bevandenio piridino truputį pašildant. Šaldant mišinį (0 - 5°C temperatūroje) per 1 h sulašinta 11,5g (O,1M) mctansulfonilchlorido. Po to mišinys atskiestas vandeniu, kol tirpalas vos pradeda drumstis ir paliktas stovėti kambario temperatūroje per naktį. Nufiltruotos iškritę nuosėdos, gauta 8 g (50%) rausvų kristalinių miltelių. T|_V[|. virš 190ⁿ C (izopropilo alkoholis). Gauta, %: N 12,16: S 13,82. C9H12N2O3S. Turi būti, %: N 12,27; S 14.05.

4-(Metansu1fonaniido)anilina.s. 7,53g (0.033M) 4-(metansulfonamido)acetanilido ištirpinta natrio šarmo tirpale iš 4g NaOH ir 25 ml vandens ir šildyta prie 100°C temperatūroje 6 h. Reakcijos mišinys neutralintas 6 % druskos rūgštimi iki pH 8, po to acto rūgštimi. Gauta 4,3g (70 %) rusvų kristalinių miltelių. Tuo. 120-l21°C (kristalinta iš vandens). Gauta, %: N 14,89, S 16,06. C7HH1N2O2S. Turi būti, %: N 15,04, S 17.22.

ChIoracetil-4-(metansuIfoiiamido)aniIidns. Į tirpalą, gautą ištirpinus 4,3 g (0.02 mol) 4-metansulfonamidoanilino 50 ml acto rūgšties, ir atšaldytą iki 10° C temperatūros, sulašinta pastoviai maišant 2,82 g (0,025M) chloracctilchlorido. Po to reakcijos mišinys išpiltas į tirpalą iš 6,4 g natrio acetato ir 20 ml vandens. Praėjus maždaug 1 h, nuosėdos nufiltruotos, praplautos vandeniu, išdžiovintos. Gauta 4,46 g (85%) rausvo atspalvio miltelių. Tlv_Ci.· 173-174°C (kristalinta iš vandens). Gauta, %: Cl 13.4: N 10,59; S 11.96. C9H11CIN2O3S. Turi būti, %: Cl 13,5; N 10,66; S 12,2.

N-nictil-N-(4-nietansulfonainidofeniIkarbamoilinetil)inorfolinio chloridas (1) susintetintas kaitinant 100°C temperatūroje 2,63g (0.01M) chloracctil-4(mctansulfonamido)anilido, ištirpinto acetonitrile, su 1.52 g (0.015M) N-metilmorfolino. chromatografiškai nustatant reakcijos pabaigą. Mišinį atšaldžius ir atskiedus eteriu, nuosėdos nufiltruotos ir gauta 2,62 g (72%) šviesiai rusvo atspalvio kristalinių miltelių. T|_Vd.186-187 °C (iš atskiesto etanolio). Gauta, %: Cl 9,62; N 11,39; S 8,71. C14H22CIN3O4S. Turi būti, %: Cl 9,74; N 11.55; S 8,81.

N,N-dietiI,N-butil,N-(2,4,6-triinctilfenilkarbamoilmctil)amonio jodidas (2) gautas analogiškai metodikai, aprašytai [Janušienė L. Resp. konf. organinių medžiagų chemijos ir technologijos klausimais, skirtos akad. A.Purėno 110-sioms gimimo metinėms pažymėti, medžiaga. -Kaunas. 1991.- P.22] virinant acetone ekvimolinius 2-dietilamino-N-(2.4.6trimetilfenil)acetamido ir butilo jodido kiekius.

Reakcijų eiga ir medžiagų grynumas buvo kontroliuoti chromatografiškai. panaudojant silufolio UV-254 plokšteles n-butilo alkoholio - etanolio - acto rūgšties - vandens (8:2:1:3) sistemoje ir ryškinimą jodo garais. Junginių struktūra atitinka elementinės analizės duomenis, UV ir PMR spektrų duomenis.

Farmakologinės patentuojamo junginio savybės

Ūmini junginių toksiškumą nustatėme abiejų lyčių baltoms pelėms, sveriančioms 1730 g (visi gyvūnai eksperimentui gauti iš KMU vivariumo), sušvirkštė Į pilvo ertmę tiriamo junginio vandeninio tirpalo tokios koncentracijos, kad būtų injekuojama ne daugiau, kaip 0,5 ml tirpalo. Gauti rezultatai vertinti Litčfildo ir Wilkoksono metodu [BeneHbKHH M.JI. SneMeHTbi KOJimiecTBeHHoii oueHKtt φηρΜηκοποηηιεεκοΓΟ οφφεκτη. Μεππη. JfeHHHrpaA. -1963.-C. 152|.

Antiaritminiam junginių aktyvumui ištirti panaudotas kalcio chloridu [Malinov M.R., Battle F.F., Malamud B. Amer. J.Physiol.- 1953.-Vol. 175.-P.8] vyriškos lyties baltoms žiurkėms, sveriančioms 80-140g, bei strofantinu (abiejų lyčių jūrų kiaulytėms, sveriančioms 300-600g) [Laubic M., Chcymol G., Mouille P. et ai. Areli.Intcrn.Pharmacodyn.Thcr.- 1973.-Vol. 201.- P. 323] sukeltų aritmijų modeliai.

Žiurkės buvo narkotizuotos, suleidžiant į pilvo ertmę 50 mg/kg 1% nembutalio tirpalo. Po 30 min. sušvirkštus joms j šlaunies veną tiriamojo junginio (5% nuo LDjo reikšmės dozę), dar po 5 min. injekavome aritmogeninę kalcio chlorido dozę ir visą eksperimento laiką rašėme EKG. Įšvirkštus Į šlaunies veną kontrolinės grupės žiurkėms kalcio chlorido (CaCŲ - 140 mg/kg) tirpalo, per pirmąsias minutes žuvo 90% gyvūnų, daugiausia - nuo skilvelių fibriliacijos. Junginių antiaritmini aktyvumą vertinome pagal žiurkių išgyvenimo procentą ir fibriliacijos atsiradimą, lygindami su kontroline gyvūnų grupe ir tradiciniais preparatais - prokainamidu, trimekainu, piromekainu.

Antifibriliacinėms savybėms nustatyti panaudojome strofantinu sukeltos aritmijos modelį. Jūrų kiaulytėms, narkotizuotoms 900mg/kg uretano ir 50mg/kg chloralozės (suleidžiant į pilvo ertmę), injekavome Į šlaunies veną tiriamo junginio 5% nuo LDso reikšmės dozę. Po 3 min švirkštėme 0,008% strofantino tirpalo 8ųg/min. greičiu. Intervalai tarp šių švirkštimų buvo 90 s. Analogiški bandymai atlikti ir su žinomais antiaritmikais: prokainamidu, trimekainu ir piromekainu. Eksperimento laikotarpiu rašėme EKG ir fiksavome strofantino dozes, kurių poveikyje pasireiškė šie ritmo sutrikimai: sinusinė bradikardija (SB), skilvelių ekstrasistolės (SE), skilvelių tachikardija (ST), skilvelių fibriliacija (SF) ir mirtis (M). Aktyviausi buvo junginiai, kurių fone SF ir ST neišsivystė. Be to, buvo ištirtas junginių poveikis Į širdies susitraukimo amplitudę, EKG duomenis įvertinant pagal metodiką [Ohbhh PI. A. CTaTHCTHuecKan oSpačoTKa pe3yjiBTaTOB 3KcnepnMett-TaJii>Hbix Hccjie^OBaHHH. Πβτ. φΗ3ΐιοπ. u 3Kcn. Tepantis. 1960, t. 4, c. 76-85],

Nustatyta, kad 1 junginys (LDso=225mg/kg) yra apie 4 kartus mažiau toksiškas už N,N-dictil,N-butil,N-(2.4,6-trimctilfcnilkarbamoilmetil)amonio jodidą (2) (1 lentelė).

lentelė. Junginių ūminio toksiškumo rezultatai

Junginys*	n	LDso ir patikimumo ribos, (mg/kg)
1	36	225,0 (184,7^-265,3)
2	36	53,5 (38,7 + 73,8)
Trimckainas Piromekainas	36 36.....	150,0 (131,2-168,8) 75,0 (62.3 - 87,7)
Prokainamidas	36	380,0 (343,0-421,0)

n - baltų pelių skaičius;

Nustatyta, kad 1 junginio poveikyje kalcio chloridu sukeltos aritmijos metu išgyveno

90% gyvūnų, o 10% žūsta, įvykus širdies asistolijai. Tuo tarpu kontrolinėje gyvūnų grupėje išgyvena tik 10%, o 90% žūsta, pasireiškus skilvelių fibriliacijai. Sušvirkštus 2 junginio, žuvo visos žiurkės (2 lentelė).

2lentelė. Junginių antiaritminis aktyvumas kalcio chloridu žiurkėms sukeltos aritmijos modelyje

Junginys	n	Dozė, mg/kg	Išgyvenimo 7c	Žuvimo %
Kontrolė	10		10	90
1	10	11,3	90	10*
2	10	2,7	0	100*
Trimekainas	10	7,5	0	100*
Piromekainas	10	3,8	40	60*
Prokainamidas	10	19,5	29	71*

n - gyvūnų skaičius, * - išsivystė fibriliaeija, ** - įvyko asistolija;

ir 2 junginius ištyrus ir gliukozidinės aritmijos metodika, nustatyta, kad prieš skilvelių tachikardijos atsiradimą profilaktiškai geriau veikė 1 junginys, nes jo fone, sušvirkštus aritmogeninę strofantino dozę, šio pobūdžio ritmo sutrikimai įvyko tik vienu atveju. Tuo tarpu skilvelių fibriliacija tiek 1, tiek ir 2 (3 lentelė) junginių poveikyje aplamai nepasireiškė (3 lentelė).

3lentelė. Antiaritminis aktyvumas strofantinu (jurų kiaulytėms) sukeltame aritmijos modelyje

Junginys, (n)	Dozė, mg/kg	Vidutinės strofantino dozės ųg/kg. sukeliančios ritmo sutrikimus
SB	S F	ST	SF	M
Kontrolė (10)		141,8±24,1	239,6±45,4	403,6±46,2	472.0±55,5	519,4+44.6
1 (6)	11,2	120,0±15,0	167,0+28,4			387,5 ±88.7
2 (4)	2,7	296,6±39,4	301,3+40,3	412,3±56,6		482,0+60,5
Trimekainas (5)	7,5	432,3±17,0	432,3+17,0		467,6+26,8	496,1 + 19,9
Piromekainas (5)	1,8	430,0±54,6	438,6+39,4	*		600,0+43,1
Prokainamidas (7)	19.0	510,0±28,7	530,0+29,8	558,6±26,5		631,7+27.1

n - jūrų kiaulyčių skaičius;

SB-sinusinė bradikardija, SE-skilvelių ekstrasistolės, ST-skilvelių tachikardija. SF-skilvelių fibriliacija, M - mirtis;

*ST ir SF įvyko pavieniais atvejais;

** S F neįvyko

Įvertinus 1 ir 2 junginių poveikį į žiurkių širdies inotropinę funkciją, pastebėta, kad jie veikia teigiamai: abudu didina širdies inotropinę funkciją, o tradiciniai antiaritmikai trimekainas, piromekainas šią funkciją slopina (4 lentelė).

lentelė. Junginių 1 ir 2 poveikis į žiurkių širdies inotropinę funkcijų

R(n=4)	R(l)	%	R	R(2)	%	R	R(T)	%	R	R(P)	%
0,9	1,0	+ 11	0,8	1,5	+ 87,5	0,85	0,8	-5,9	1,3	1,2	-7,7
0,5	0,7	+ 40	0,4	0,5	+ 25	1,1	0,88	-20,0	1,36	1,23	-9.6
0,46	0,73	+ 58	0,65	0,8	+ 23	0,96	0,6	-37,5	0,9	0,78	-13,4
0,61	0,7	+ 14	0,6	0,7	+ 7.6	1,15	0,85	-26,1	1,23	1,16	-5,7

R - R dantelio aukštis (mm) normoje; R( 1) - R dantelio aukštis po 1 junginio sušvirkštimo;

R (2) - R dantelio aukštis po 2 junginio sušvirkštimo; R(T) - R dantelio aukštis po trimekaino suleidimo; R (P) - R dantelio aukštis po piromekaino suleidimo;

+ - širdies inotropinę funkcija padidėjo;

- -širdies inotropinę funkcija sumažėjo;

n - gyvūnų skaičius;

Iš gautų duomenų matosi, kad N-metil,N-(4-metilsulfonamidofenilkarbamoilmctiljmorfolinio chlorido (1) ūminis toksiškumas lyginant su artimiausiu jo struktūriniu analogu - N,N-dietil,N-butil,N-(2,4.6-trimetilfenilkarbamoilmetil)amonio jodidu (2) bei trimekainu ir piromekainu ženkliai sumažėjo, o antiaritminis efektas sustiprėjo.

Claims

IŠRADIMO APIBRĖŽTIS LT 4684 B

1. N-metil,N-(4-metansuIfonamidofenilkarbamoilmetil)morfolinio chloridas, turintis formulę:
2. Junginys pagal 1 punktą, pasižymintis antiaritminiu aktyvumu ir nedideliu toksiniu poveikiu.
3. Junginys pagal 1 punktą , p a s i ž y m i n t i s mažu ūminiu toksiškumu (LDfo=225 ^mcAg) ir ženkliu antifibriliaciniu poveikiu.