LT4638B - Paratiroidinio hormono analogai osteoporozės gydymui - Google Patents
Paratiroidinio hormono analogai osteoporozės gydymui Download PDFInfo
- Publication number
- LT4638B LT4638B LT99-010A LT99010A LT4638B LT 4638 B LT4638 B LT 4638B LT 99010 A LT99010 A LT 99010A LT 4638 B LT4638 B LT 4638B
- Authority
- LT
- Lithuania
- Prior art keywords
- lys
- leu
- seq
- hpth
- glu
- Prior art date
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 9
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 title description 44
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 title description 40
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 title description 39
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 title description 39
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title description 10
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- 101001135770 Homo sapiens Parathyroid hormone Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 101001135995 Homo sapiens Probable peptidyl-tRNA hydrolase Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 102000058004 human PTH Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 101
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims description 11
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 8
- RRBGTUQJDFBWNN-MUGJNUQGSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RRBGTUQJDFBWNN-MUGJNUQGSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobutanoic acid Natural products CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N D-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- RLBIQVVOMOPOHC-UHFFFAOYSA-N parathion-methyl Chemical compound COP(=S)(OC)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 RLBIQVVOMOPOHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims 1
- JQSIGLHQNSZZRL-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)N JQSIGLHQNSZZRL-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 52
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 abstract description 51
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 abstract description 51
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 48
- 241000700159 Rattus Species 0.000 abstract description 35
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 abstract description 33
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 abstract description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 13
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 abstract description 12
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 3
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 87
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 86
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 53
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 40
- OXZNHYPGOAWYLT-FISSOZIDSA-N ostabolin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1N=CN=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC(=O)CC[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(C)C)C1C=NC=N1 OXZNHYPGOAWYLT-FISSOZIDSA-N 0.000 description 33
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 29
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 description 28
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 26
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 26
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 26
- JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N His-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JWTKVPMQCCRPQY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 24
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 24
- IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IUKIDFVOUHZRAK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 23
- KHNJVFYHIKLUPD-SRVKXCTJSA-N Gln-Leu-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N KHNJVFYHIKLUPD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 22
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 22
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 22
- HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N Glu-Trp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HGJREIGJLUQBTJ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 21
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 21
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 21
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 21
- NIOYDASGXWLHEZ-CIUDSAMLSA-N Ser-Met-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O NIOYDASGXWLHEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 20
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 19
- ZYLJULGXQDNXDK-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZYLJULGXQDNXDK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 19
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 17
- -1 norieucine Chemical compound 0.000 description 14
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 13
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 11
- CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 10
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 10
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 10
- 208000021822 hypotensive Diseases 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 10
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 9
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 8
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 8
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 7
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 7
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 7
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N BTJVOUQWFXABOI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N His-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- OMSMPWHEGLNQOD-UWVGGRQHSA-N Asn-Phe Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMSMPWHEGLNQOD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 3
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N Ser-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O BRGQQXQKPUCUJQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 3
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000027326 copulation Effects 0.000 description 3
- 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- RRBCHMCWWOHRQL-UMXFMPSGSA-N parathyroid hormone (1-34)amide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)C1=CN=CN1 RRBCHMCWWOHRQL-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001572 5'-adenylyl group Chemical group C=12N=C([H])N=C(N([H])[H])C=1N=C([H])N2[C@@]1([H])[C@@](O[H])([H])[C@@](O[H])([H])[C@](C(OP(=O)(O[H])[*])([H])[H])([H])O1 0.000 description 2
- SVHRPCMZTWZROG-DCAQKATOSA-N Arg-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N SVHRPCMZTWZROG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SSHIXEILTLPAQT-WHFBIAKZSA-N Gln-Asp Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SSHIXEILTLPAQT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ARPVSMCNIDAQBO-YUMQZZPRSA-N Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ARPVSMCNIDAQBO-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N His-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 WSDOHRLQDGAOGU-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N His-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 RNMNYMDTESKEAJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OGCQGUIWMSBHRZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KQBJYJXPZBNEIK-DCAQKATOSA-N Met-Glu-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQBJYJXPZBNEIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 102000014384 Type C Phospholipases Human genes 0.000 description 2
- 108010079194 Type C Phospholipases Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229940116901 diethyldithiocarbamate Drugs 0.000 description 2
- LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N diethyldithiocarbamic acid Chemical compound CCN(CC)C(S)=S LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 2
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002990 parathyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N (2r)-2-azaniumyl-2-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C([C@@](N)(C(O)=O)C)=CC=CC2=C1 OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical class CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BKQQPCDQZZTLSE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-naphthalen-1-ylpropanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CC=CC2=C1 BKQQPCDQZZTLSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPPZWICGMJJBIH-JEDNCBNOSA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 JPPZWICGMJJBIH-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YVTHEZNOKSAWRW-DCAQKATOSA-N Arg-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YVTHEZNOKSAWRW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QBQVKUNBCAFXSV-ULQDDVLXSA-N Arg-Lys-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QBQVKUNBCAFXSV-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N Asn-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O WIDVAWAQBRAKTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 241001391944 Commicarpus scandens Species 0.000 description 1
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- OABOXRPGTFRBFZ-IMJSIDKUSA-N Cys-Cys Chemical group SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O OABOXRPGTFRBFZ-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- MSWBLPLBSLQVME-XIRDDKMYSA-N Cys-Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CS)=CNC2=C1 MSWBLPLBSLQVME-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- UMBKDWGQESDCTO-KKUMJFAQSA-N His-Lys-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UMBKDWGQESDCTO-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 201000002980 Hyperparathyroidism Diseases 0.000 description 1
- 206010020850 Hyperthyroidism Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N Leu-Asn-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MDVZJYGNAGLPGJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- DXYBNWJZJVSZAE-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N DXYBNWJZJVSZAE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- POMXSEDNUXYPGK-IHRRRGAJSA-N Leu-Met-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N POMXSEDNUXYPGK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OWRUUFUVXFREBD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ONPDTSFZAIWMDI-AVGNSLFASA-N Lys-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ONPDTSFZAIWMDI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000027382 Mental deterioration Diseases 0.000 description 1
- 206010027374 Mental impairment Diseases 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005250 Spontaneous Fractures Diseases 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049264 Teriparatide Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)=CNC2=C1 LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000002617 bone density conservation agent Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 125000001951 carbamoylamino group Chemical group C(N)(=O)N* 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010004073 cysteinylcysteine Proteins 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003275 diaphysis Anatomy 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000624 ear auricle Anatomy 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000000367 exoproteolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003668 hormone analog Substances 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N isoamyl nitrite Chemical group CC(C)CCON=O OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 231100000344 non-irritating Toxicity 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 108010067557 parathyroid hormone (1-34)amide Proteins 0.000 description 1
- 108010066022 parathyroid hormone (7-84) Proteins 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000006201 parenteral dosage form Substances 0.000 description 1
- 229960002275 pentobarbital sodium Drugs 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 208000001685 postmenopausal osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 201000009395 primary hyperaldosteronism Diseases 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000007727 signaling mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/635—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/29—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Išradimo kilmė
Osteoporozė yra vyraujanti pagyvenusių žmonių, ypatingai pagyvenusių moterų, invalidumo priežastis. Neseniai buvo nustatyta, kad žmogaus paratiroidinis hormonas (hPTH) ir tam tikri jo analogai yra kaulų augimo stimuliatoriai, ir jie tinka osteoporozės gydymui. Osteoporozė yra progresuojanti liga, kuri pasireiškia bendros kaulų masės sumažėjimu ir padidintu kaulų trapumu. Tai dažniausiai sukelia spontaniškus atraminių kaulų lūžius ir fizinį bei psichini pablogėjimą, būdingą pažeidimams, susijusiems su nejudrumu. Pomenopauzinę osteoporozę sukelia išnykimas estrogenų, kurie reguliuoja dešimtmečių trukmės kaulų akseleracijos kaitą, didėjant neatitikimui tarp seno kaulo rezorbcijos ir naujo kaulo susidarymo. Tai sukelia suplonėjimą, poringumo padidėjimą ir atraminių kaulų trabekulių sunykimą. Osteoporozė taip pat yra susijusi su hipertireoze, hiperparatiroidizmu, Kušingo sindromu ir tam tikrų steroidinių vaistų vartojimu. Istoriškai susiklostęs gydymas apima kalcio kiekio didinimą maiste, estrogeninę terapiją ir padidintas vitamino D dozes, bet pagrindinai yra susijęs su agentais, tokiais-'kaip antirezorbciniai vaistai, kurie inhibuoja osteoklastų sukeliamą kaulo rezorbciją.
Paratiroidinj hormoną (PTH) gamina priešskydinė liauka, ir jis yra pagrindinis kalcio kiekio kraujyje reguliatorius. PTH yra polipeptidas: galima pagaminti sintetinius peptidus metodais, kuriuos aprašė Erickson ir Merrifield, The Proteins, Neurath et ai., Eds., Academic Press, New York, 1976, p. 257, ir Hodges et ai. (1988) Peptide Research 1, 19 arba Atherton, E. and Sheppard,
R.C. Solid Phase Peptide Synthesis, IRL Press, Oxford, 1989 modifikuotu metodu.
Kai kalcio kiekis serume yra sumažintas žemiau normalaus lygio, priešskydinė liauka išskiria PTH, ir kalcio kiekis yra padidinamas dėl kalcio rezorbcijos iš kaulų, dėl padidntos kalcio rezorbcijos iš žarnyno ir dėl padidintos inkstų kalcio reabsorbcijos iš susidariusio šlapimo inkstų kanalėliuose, Nors pastoviai leidžiami nedideli PTH kiekiai gali pašalinti kalci iš kaulų, tos pačios nedidelės dozės, kai jos leidžiamos protarpiais, gali faktiškai skatinti kaulų augimą.
Tregear US patente 4,086,196 aprašo žmogaus PTH analogus ir teigia, kad pirmosios 27-34 aminorūgštys yra efektyviausios adeniiilciklazės stimuliavimo požiūriu in vitro bandymuose su ląstelėmis. Rosenblatt US patente 4,771,124 aprašo hPTH analogų, kuriuose Trp23 yra pakeistas aminorūgštimis fenilalaninu, leucinu, norieucinu, vaiinu, tirozinu, βnaftilalaninu arba a-naftilaianinu, savybę būti PTH antagonistais. Šie modifikuoti hPTH analogai taip pat turi pašalintas 2 ir 6 galines aminorūgštis, ir tai sukelia didelės dalies agonistinio aktyvumo praradimą, naudojant juos osteoporozės gydymui. Šie analogai buvo ketinami panaudoti kaip PTH ir giminingo PTH peptido inhibitoriai. Buvo teigiama, kad šie analogai gali būti naudingi hiperkalcemijos, susijusios su kai kuriais augliais, gydymui.
Pang et ai, WO93/06845, publikuotame 1993 m. balandžio 15 d., aprašo hPTH analogus, kuriuose Arg25, Lys26, Lys27 pakeisti Įvairiausiomis aminorūgštimis, įskaitant alaniną, asparaginą, asparto rūgštį, cisteiną, glutaminą, glutamo rūgštį, gliciną^ histidiną, izoleuciną, leuciną, metioniną.
r* fenilalaniną, proliną, seriną, treoniną, triptofaną, tiroziną arba valiną. Teigiama, kad jie yra efektyvūs gydant osteoporozę, ir turi minimalų poveikį kraujo spaudimui ir lygiesiems raumenims, tačiau jokių patvirtinančių šį teiginį duomenų bandymuose su gyvūnais arba žmonėmis nepateikiama.
PTH veikia per dviejų antrinių mesendžerinių sistemų aktyvaciją - Gsbaltymo aktyvuotą adenililciklazę (AC) ir Gq-baltymo aktyvuotą fosfolipazę Cp. Pastaroji stimuliuoja surištos su membrana proteinkinazės Cs (PKC) aktyvumą. Buvo parodyta, kad šiam PKC aktyvumui reikia PTH 29-32 liekanų (Jouishomme et ai (1994) J. Bone Mineral Bes. 9, (1179-1189)). Nustatyta, kad kaulų augimo padidėjimas, t.y. toks efektas, kuris yra naudingas gydant osteoporozę, yra susijęs su peptido sekos sugebėjimu padidinti AC aktyvumą. Buvo parodyta, kad natyvaus PTH seka pasižymi visais tokiais aktyvumais. hPTH-(1-34) seka paprastai vaizduojama kaip (A):
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His
Leu Asn Ser Met Glu Arg Vai GluTrp Leu Arg Lys Lys Leu
Gln Asp Vai His Asn Phe-OH A
Toliau duodamas linijinis analogas (hPTH-(1-31)-NH2), kurio duomenys įtraukti j žemiau duodamą 1 lentelę, pasižymi tik ACstimuliuojančiu aktyvumu, ir buvo parodyta, kad jis yra labai aktyvus kaulų nykimo atstatymo požiūriu bandymuose su žiurkėmis, kurioms pašalintos kiaušidės (Rixon, R. H. et ai (1994) J. Bone Miner. Bes. 9, 1179-1189; Whitfie!d et ai. (1996), Calcified Tissue Int. 58, 81-87; Willick et ai, US patentas No. 5,556,940, publikuotas 1996 m. rugsėjo 17 d.):
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His
Leu Asn Ser Met Glu Arg Vai GluTrp Leu Arg Lys Lys Leu
Gln Asp Val-NH2 B
Aukščiau pavaizduota molekulė (B) gali turėti laisvą karboksilo galą vietoj parodyto amidinio galo.
Šio išradimo tikslas yra pagaminti naujus PTH analogus, kurie turėtų didesnį metabolinį stabilumą, padidintą kaulų atstatymo aktyvumą, padidintą AC aktyvumą ir minimalius pašalinius klinikinius efektus.
Išradimo santrauka
Pagal vieną šio išradimo aspektą pateikiamas žmogaus paratiroidinis hormonas hPTH, turintis tokią aminorūgščių seką:
R-NH-R1-Val-Ser-Glu-lle-Gln-Leu-R2-His-Asn-Leu-Gly-Lys-R3-R4-R5-R6-R7-GluArg-Val-R8~Trp-Leu-R9~R10--R1'-Leu-R12-Asp-Y, kurioje
R = vandenilis arba bet kokios linijinės arba šakotosios grandinės alkilas, acilas arba arilo grupė,
R1 = Ser, Ala arba Aib,
R2 = Met arba gamtinė hidrofobinė aminorūgštis,
R3 = His arba tirpi vandenyje aminorūgštis,
R4 = Leu arba tirpi vandenyje aminorūgštis,
R5 = Asn arba tirpi vandenyje aminorūgštis,
R6 = Ser arba tirpi vandenyje aminorūgštis,
R7 = Met arba gamtinė hidrofobinė aminorūgštis,
R8 = Glu, Lys arba Asp,
R9 = Cys, Glu arba Orn,
R10 = Arg, Lys, Orn, Gln, Glu arba Asp,
R11 = gamtinė hidrofobinė arba polinė aminorūgštis,
R12 = Gln, Arg, Glu, Asp, Lys arba Orn,
X = OH,NH2ir
Y = X, Val-X, Val-His-X, Val-His-Asn-X, Val-His-Asn-Phe-X, Val-His-Asn-PheVal-X, Val-His-Asn-Phe-Val-AIa-X ir Val-His-Asn-Phe-Val-Ala-Leu-X, ciklizuotas tarp vienos arba dviejų aminorūgščių porų 22 ir 26, 26 ir 30, 27 ir 30 ir 25 ir 29, kai R3 ir R6 yra Lys, Orn, Glu arba Asp, išskyrus ciklo(Lys26Asp30) [Leu27]-hPTH-(1 -34)-NH2l ciklo(Lys27-Asp30)-hPTH-(1 -34)-NH2 ir ciklo(Lys26-Asp30)[Leu27]-hPTH-(1-34)-OH, ir jo farmaciškai tinkamos druskos.
Druskų pavyzdžiais yra neorganinių rūgščių druskos, organinių rūgščių, kaip antai skruzdžių rūgšties, acto rūgšties, vyno rūgšties ir citrinos rūgšties druskos, neorganinių bazių druskos, kaip antai natrio ir amonio druskos ir organinių bazių, kaip antai trietilamino, etilamino ir metilamino druskos.
Pagal kitą šio išradimo ypatybę, atlikta ciklizacija susidarant laktamams, kuriuose kopuliuotos pasirinktų aminorūgščių porų, tokių kaip gamtinių liekanų 22 ir 26 arba 26 ir 30, šoninės grandinės. Taip pat aptariami ir kitokie ciklizacijos tipai, kaip antai disulfido tiltelio sudarymas, pvz. tarp Cys turinčių analogų Cys22-Cys26 ir Cys26-Cys30.
Taip pat buvo rasta, kad yra efektyvūs kai kurie aminorūgščių pakeitimai. Lys27 gali būti pakeistas Leu arba Įvairiomis kitomis gamtinėmis hidrofobinėmis arba polinėmis liekanomis. Kitas faktorius yra liekanos atitikimas receptoriui. Ala nėra toks hidrofobinis kaip Leu. Lys ir Tyr paprastai yra laikomi poliniais, bet nei vienas iš jų neturi hidrofobinių sąveikų su receptoriumi. Pavyzdžiui, Lys gali sudaryti tokią konformaciją, kad hidrofobinės dalys sąveikautų su kitomis receptoriaus hidrofobinėmis liekanomis, o NH2 būtų prieinamas tirpikliui. Tokie pakeitimai apima ornitiną, citruliną, α-aminosviesto rūgšti, alaniną, norleuciną, izoleuciną ir tiroziną arba bet kokią linijinę arba šakotą alifatinę α-aminorūgšti, turinčią 2-10 anglies atomų šoninėje grandinėje, bet koki toki analogą, turinti polinę arba krūvi turinčią grupę alifatinės grandinės gale. Polinių ir krūvį turinčių grupių pavyzdžiais yra: amino-, karboksi-, acetamido-, guanidino- ir ureidogrupės. Nors atrodo, kad geriausias pakeitimas yra Leu27, pasirodo, kad daug kitų tokių 27-padėtyje pakeistų peptidų beveik.visiškai išlaiko aktyvumą ir taip pat gali turėti pageidautinas savybes, tokias kaip padidintas proteolitinis stabilumas arba tirpumas vandenyje: tikimasi, kad aktyviausi bus lle, norleucinas, Met ir ornitinas.
Šis pakeitimas stabilizuoja a-spiralę hormono surišimo srityje. Tai buvo patvirtinta tiriant laktaminių analogų apskritiminio dichroizmo (CD) spektrus, lyginant su linijinės molekulės - [Leu27j-hPTH-(1-31)-NH2 - apskritiminio dichroizmo spektrais. Apskritiminio dichroizmo spektrai yra labai jautrūs aspiralinės antrinės struktūros buvimui, ir ši metodika buvo naudojama parodyti, kad hPTH fragmentuose yra α-spiralinė struktūra (Neugebauer et ai (1991) Biochemistry 31, 2056-2063). Be to, buvo parodyta a-spiralės stabilizacija sudarant aukščiau minėtus laktamus hPTH-(20-34)-NH2 molekulėje (Neugebauer et ai (1994) Int. J. Peptide Res. 43, 555-562). Yra galimybė susidaryti amfifilinei α-spiralei tarp hPTH-(1-31)-NH2 21 ir 31 liekanų, ir buvo pateikti duomenys, kurie rodo, kad šios spiralės hidrofobinė pusė sąveikauja su PTH receptoriumi (Neugebauer, W. et ai (1995) Biochemistry 34, 8835-8842; Gardella, T. J. et ai (1993), Endocrinology 132, 2024-2030).
Buvo rasta, kad efektyviausia ciklizacija yra laktamo sudarymas, pavyzdžiui, arba tarp Glu22 ir Lys26, arba tarp Lys27 ir Asp30 liekanų. Galimos ir kitokios cikiizacijos, kaip antai tarp Lys27 ir Asp30, tačiau buvo rasta, kad toks laktamas turi tam tikrą destabilizuojanti poveikį a-spiralei.
Konkrečiau kalbant, PTH fragmentų receptoriaus surišimo tyrimai parodė pagrindinę surišimo sritį 14-34 liekanų srityje [1], Mes pasiūlėme, kad a-spiralės 17-29 liekanos rišasi su PTH receptoriumi, ir kad šios a-spiralės amfifilinė dalis rišasi su receptoriumi savo hidrofobinė puse [2], Šis modelis atitinka receptoriaus surišimo srities analogų tyrimų rezultatus.
BMR tyrimai parodė, kad nors pagal CD duomenis modelinis peptidas yra labai spiralinis, taip pat yra daug ir nespiralinių konformacijų. Taigi, receptoriaus surišto peptidinio hormono, tokio kaip PTH, struktūra negali būti patikimai nustatyta iš jo laisvosios struktūros tirpale. Konformacinių būsenų, kurias gali sudaryti šis peptidas, skaičiui apriboti buvo panaudoti peptidinio hormono suvaržyti analogai [8], hPTH sekos tyrimas rodo, kad yra galimi 3 druskų tilteliai 17-29 liekanose, kurie gali arba stabilizuoti, arba destabilizuoti α-spiralę. Šie tilteliai yra tarp Glu22 ir Lys26 ir Lys26 ir Asp30 (laukiama, kad abu jie stabilizuos α-spiralę) ir tarp Lys27 ir Asp30 (laukiama, kad jis destabilizuos a-spiralę) [4], Laktamo sudarymas tarp šių liekanų porų apribos konformacijas, kurias gali sudaryti hPTH šioje spiralinėje srityje. Be to, du iš šių laktamų - Glu22-Lys2S ir Lys26-Asp30 - kurie, kaip manoma, stabilizuos aspiralinę struktūrą, yra polinėje α-spiralės amfifilinės dalies pusėje. Laukiama, kad trečiasis laktamas - Lys27-Asp30 - bent jau dalinai destabilizuos a-spiralę, ir jame yra liekana (Lys27), kuri yra šios amfifilinės spiralės hidrofobinėje pusėje. Taip pat gali būti ciklizacija tarp 25 ir 29 padėties, jeigu Lys arba Orn pakeičia Arg 25 padėtyje ir jeigu Gln29 yra pakeistas Glu arba Asp.
Lys27 pakeitimas Leu duoda hidrofobiškesnę liekaną šios amfifilinės spiralės hidrofobinėje pusėje. Tai pasireiškia padidintu adenililcikazės stimuliavimo aktyvumu ROS ląstelių linijoje. Patyrę šios srities specialistai supras, kad tokie aukščiau aptarti pakeitimai taip pat turėtų duoti analogus, turinčius toki pati arba padidintą aktyvumą.
Laukiama, kad jungtinis pakeitimo ir taip pat laktamo sudarymo efektas stabilizuos «-spiralę ir padidins bioaktyvumą bei apsaugos šią molekulės dali nuo proteolitinės degradacijos. Pageidautina, kad C-gale būtų amidas ta prasme, kad jis dar labiau turėtų apsaugoti peptidą nuo egzoproteolitinės degradacijos, nors kai kurios peptidazės ir gali juos hidrolizuoti (Leslie, F. M, and Goldstein, A. (1982) Neuropeptides 2, 185-196).
Taip pat buvo rasta, kad gali būti padaryti kiti naudingi aminorūgščių pakeitimai. Konkrečiau kalbant, mes pakeitėme oksidacijai jautrią Met liekaną 8, 18 padėtyse gamtine hidrofobine liekana (Nle), kaip ir Japonijos patento publikacijoje 61-24598. Taip pat galima tikėtis, kad bus naudingos kitos tokios hidrofobinės liekanos kaip, pavyzdžiui, Leu, Ile, Vai, Phe ir Trp, kaip ir Nakagawa et ai. USP 5,393,869.
Aptariami taip pat ir atvirkštiniai laktamai. Pavyzdžiui, mes parodėme Lys22-Glu26 sujungimo efektyvumą. Todėl galima laukti, kad gali būti padaryti panašūs naudingi sujungimai, pavyzdžiui, tarp 26-30 ir 27-30 laktamų.
Apart minėto Cys-Cys pakeitimo, buvo atliktas kitas pakeitimas pageidautino 22-26 laktamo vietoje, t.y. Asp22-Orn26, norint pailiustruoti, kad gali būti naudingos įvairios ciklizacijos ir žiedų dydžiai.
Nakagavva et ai. USP 5,393,869 ir Fukuda et ai. USP 5,434,246 buvo aprašyta, kad kai kurie pakeisti hPTH analogai turi žymų AC aktyvumą ir jie gali turėti padidintą stabilumą proteolitinei atakai, būtent
1. Ser-1 pakeistas Aib (α-aminoizosviesto rūgštimi);
2. Lys-27 pakeistas Gln (skelbiama, kad turi 2,5 x AC aktyvumą);
3. 14, 15, 16, 17 liekanos pakeistos Lys pilnai arba dalinai (skelbiama, kad aktyvumas labai padidėja - iki 8 x. Tai gali būti dėl didesnio tirpumo vandenyje. Manoma, kad in vivo jie bus labilesni panašiems j tripsiną fermentams). Jie teigia, kad šiame tetrapeptide (14-17 liekanos imtinai) yra bent viena vandenyje tirpi aminorūgštis. Pavyzdžiui, His-14 arba Lys-14; Leu15, Lys-15 arba Arg-15; Asn-16; Orn-16, Hci (homocitrulinas)-16, Asp-16, Arg16, Lys-16, DLys-16, Ser-16 arba Gly-16; ir 17-Ser, 17-Lys, 17-Asp arba 17Arg. Pavyzdžiui, taip pat gali būti Glu;
4. Arg-25 pakeistas His, norint sumažinto proteazės ataką. Kadangi mūsų laktamai, ypatingai su Leu arba kita hidrofobine aminorūgštimi 27padėtyje, gali pasidaryti šiek tiek netirpūs ir juos bus sunku ištirpinti, galima tikėtis, kad tokie patys pakeitimai turėtų būti naudingi ir mūsų laktamams.
Patyrę specialistai taip pat supras, kad nors pirmenybė gali būti teikiama cikliniams 1-31 h-PTH, iš čia pateiktų duomenų galima laukti, kad cikliniai fragmentai nuo 1-30 iki 1-37 ribose taip pat bus efektyvūs. Literatūroje nėra duomenų, kad papildomos aminorūgšties iki 37 padėties buvimas veikia Šio hormono biologines savybes; čia įtraukti konkretūs tai patvirtinantys duomenys apie 1-34.
Šio išradimo laktamai gali būti pagaminami pagal žinomas žemiau aprašytas metodikas ir gali būti naudojami kaulų augimo stimuliavimui, kaulų atstatymui ir kaulo gijimo skatinimui Įvairiose aplinkybėse, tokiose kaip osteoporozės ir normalių lūžių gydymas.
Trumpas brėžiniu aprašymas
Fig.1 parodyta žmogaus gamtinio PTH struktūra, 1-31 liekanos (SEQ ID NO:1);
Fig.2 parodyta [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPH-(1-31)-NH2 (SEQ ID
NO:3);
Fig.3 parodyta [Leu27jciklo(Lys26-Asp30)-hPH-(1-31)-NH2 (SEQ ID
NO:4);
Fig.4 parodyta šio išradimo analogų ROS 17/2 ląstelių adenililciklazės stimuliavimo aktyvumai.
Fig.5 duoti būdingi kaulų histologiniai pjūviai, paruošti praėjus 8 savaitėms po OVX, rodantys skirtingas hPTH-(1-31)NH2 ir jo laktaminių darinių gebąs apsaugoti nuo kaulo nykimo ir sugebėjimą stimuliuoti kaulo augimą Sprague-Dawley žiurkėse, kurioms pašalintos kiaušidės (OVX).
Fig.6 parodyta kontrolinių žiurkių ir hPTH analogu gydytų žiurkių, kurioms iš pradžių buvo sukeltas žymus kaulo sunykimas, trabekulinio kaulo tūris. Gyvuliukai pradėti gydyti praėjus 9 savaitiems po OVX. [Leu27jciklo[Glu22-Lys25jhPTH-(1-31)-NH2 yra pats efektyviausias iš fragmentų, atstatantis kaulus iki kontrolinių žiurkių normalių reikšmių; ir
Fig. 7 parodyta normalių žiurkių, žiurkių, kurioms pašalintos kiaušidės (OVX), kontrole gydytų žiurkių bei hPTH-(1-31)-NH2, [Leu27]ciklo(G!u22-Lys26)hPTH-(1-31)-NH2 ir [Leu27jciklo(Lys26-Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 gydytų žiurkių šlaunikaulių trabekulių storis.
Fig. 8 parodytas maksimalus kraujo spaudimo kritimas ir laikas iki maksimalaus kraujo spaudimo kritimo, imant 0,8 nmol/100 g hPTH-(1-31)NH2, [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 arba [Leu27]ciklo(Lys26Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 dozę. Peptidai buvo leidžiami arba po oda (balti stulpeliai) arba i veną (brūkšniuoti stulpeliai).
Fig.9 parodyta [Leu27]-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:5).
Fig. 10 parodyta ciklo(Lys27-Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID
NO:6).
Fig.11 parodyta [Leu27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-30)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:7).
Fig.12 parodyta įvairių šio išradimo analogų adenililciklazės stimuliavimo aktyvumai.
Fig.13 parodyta hPTH(1-31)NH2 ir hPTH(1-30)NH2 bei jų ciklinių analogų hipotenziniai poveikiai.
Fig.14 yra grafikas, iliustruojantis įvairių linijinio hPTH(1-31)-NH2 dozių efektą j kaulų augimą.
Fig.15 parodyta [Leu27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-OH struktūra (SEQ IDNO:8).
Fig. 16 parodyta [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-34)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:9).
Fig. 17 parodyta [Leu27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-34)-OH struktūra (SEQ ID NO:10).
Fig.18. parodyta [Ala27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ IDNO:11).
Fig.19 parodyta [Nle27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:12).
Fig.20 parodyta [Nie8'l8;Leu27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO: 13).
Fig.21 parodyta ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO: 14).
Fig.22 parodyta [lle27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO: 15).
Fig.23 parodyta [Tyr27]ciklo(Glu22-Lys2S)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:16).
Fig.24 parodyta a-acetil-[Leu27jciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID ΝΟ.Ί7).
Fig.25 parodyta [Leu27]ciklo(Lys22-Glu26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:18).
Fig.26 parodyta [Leu27]ciklo(Asp22-Orn26)-hPTH-(1-31)-NH2 struktūra (SEQ ID NO:19).
Fig.27 parodyta [Cys22:Cys26:Leu27jciklo(Cys22-Cys26)-hPTH-(1-31)NH2 struktūra (SEQ ID NO:20).
Fig.28 parodyta [Cys26;Cys30;Leu27]ciklo(Cys26-Cys30)-hPTH-(1-31)NH2 struktūra (SEQ ID NO:21).
Hormono analogu gavimas
Kietafazės peptidų sintezės metodika, kurią ištobulino R.B. Merrifield (“Solid-Phase Peptide Synthesis, Advances in Enzymoiogy 32, 221-296, 1969) (duodamas čia kaip literatūros šaltinis) yra plačiai ir sėkmingai naudojama polipeptidų, tokių kaip paratiroidinis hormonas, sintezei. Jos strategija paremta tuo, kad peptido aminorūgšties karboksi-gaias yra prijungiamas prie kieto pagrindo. Tada didelėmis išeigomis laipsniškai prijungiamos aminorūgštys. N-galinė α-aminogrupė blokuojama taip, kad šią grupę būtų galima atskelti neatskeliant peptido nuo kieto pagrindo. Čia naudojami cheminiai virsmai apima pradinio Merrifield metodo, vadinamo Fmoc metodu, modifikaciją. Fmoc (fiuorenilmetoksikarbonilo) grupę galima atskelti švelniai šarminėse sąlygose, kurios palieka nepaliestas šarmams stabilias šoninės grandinės apsaugines grupes ir jungtį su pagrindu. Šią metodiką aprašė E. Atherton and R. C. Sheppard, “Solid Phase Peptide Synthesis: a Practical Approach, IRL Press, New York, N.Y. (čia duodamas kaip literatūros šaltinis).
pavyzdys
Linijinio hPTH-(1-31)-amido analogu sintezė ir gryninimas
Kopuliavimo metu aminorūgšties α-aminogrupė blokuojama 9fluorenilmetoksikarbonilu (Fmoc). Kopuliavimo reakcijos vykdomos su hidroksibenzotriazolo (HOBt), 2-(1 H-benzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio tetrafluorborato (TBTU) ir diizopropiletilamino (DIPEA) mišiniu. Prijungiant Asn, Gln, His, Vai ir llę liekanas, dvigubai kopuliacijai naudojamas aktyvuotų aminorūgščių keturgubas perteklius. Prijungiant Arg ir Gly, kopuliavimo laikai pailginami nuo 30 iki 60 minučių. Pirmosios liekanos (Vai31) kopuliacija prie pagrindo (Tentagel* R, Rapp Polymęre, Tubingen, Vokietija) atliekama rankiniu būdu. Visos kitos stadijos atliekamos PerSeptive Biosystems* Model 9050 Plūs automatiniu peptidų sintezatoriumi. Šoninės grupės blokuojamos taip: Arg (2,2,5,7,8-pentametilęhroman-6-sulfonilu); Glu, Asp ir Ser (t-butilu); His, Gln ir Asn (tritilu); Trp (t-buti!oksikarbonilu).
Atskėlus Fmoc nuo N-ga!inio Ser, derva su peptidu plaunama DCM, po to vykdomas atskėlimas nuo dervos, plakant su 7,5 ml reagento K (6,19 ml TFA, po 0,38 ml vandens, 90 % fenolio vandenyje ir tioanizolo ir 0,19 ml 1,2-etanditiolio) 4 vai. 20 °C temperatūroje. Atskeltas peptidų mišinys nufiltruojamas ir nusodinamas, pridedant t-butil-metilo eterio. Nuosėdos nucentrifuguojamos, plaunamos 2x t-butilmetilo eteriu, po to džiovinamos vakuuminio centrifugavimo būdu.
Negrynintas produktas ištirpinamas 14 ml 15 % acetonitrilo tirpalo vandenyje su 0,1 % TFA ir chromatografuojamas per Vydac* Ci8-kolonėlę (10 μ, 1 x 25 cm). Produktas eliuuojamas 1%/min acetonitrilo (14-40 %) 0,1 % TFA vandenyje gradientu. Galutinio produkto grynumas nustatomas analitinės HPLC per Vydac* CiS-kolonėlę (10 μ, 0,4 x 25 cm) metodu ir pagal molekulinę masę, nustatomą elektronų srauto masių spektrometru (VG Ouattro). Taip gauto hPTH-(1-31)-NH2 duomenys pateikti žemiau duodamoje 1 lentelėje.
pavyzdys
Cikliniu analogu sintezė ir gryninimas [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)'hPTH-(1-31)-NH2. Šis peptidas, turintis atitinkamai 26 ir 22 padėtyse Lys-Alloc ir Glu-OAII, buvo sintezuotas pagal 1 pavyzdyje aprašytą metodiką. Prijungus Fmoc-Ser17, derva su peptidu perkeliama iš kolonėlės j reakcijos indą (Minivial*, Applied Science), suspenduojama 1,7 ml tetrakis(trifenilfosfin)paladžio(0) (0,24 mmol), 5 % acto rūgšties ir 2,5 % N-metilmorfolino (NMM) tirpalo dichlormetane (DCM) argono amosferoje, po to purtoma 20 °C temperatūroje 6 vai., norint atskelti alilo ir alloc apsaugines grupes (Sole, N.A. et ai (1993) in Peptides: Chemistry, Structure, and Biology, Smith, J. and Hodges, R. (Eds), ESCOM pp. 93-94) (duodamas kaip literatūros šaltinis). Po-to derva su peptidu plaunama 0,5 % dietilditiokarbamatu (DEDT), 0,5 % NMM DMF (50 ml), po to DMF (50 ml) ir DCM (50 ml). Peptidas (0,06 mmol) ciklizuojamas purtant su 0,06 mmol 1hidroksi-7-azabenzotriazolo (HOAt)/0,12 mmol NMM 2 ml DMF 14 vai. 20 °C temperatūroje (Carpino, L. A. (1993) J. Am. Chem. Soc. 115, 4397-4398). Derva su peptidu nufiltruojama, perplaunama vieną kartą DMF, sudedama j kolonėlę ir plaunama DMF, kol iš suspensijos pašalinami burbuliukai. Toliau sintezė vykdoma taip, kaip aprašyta 1 pavyzdyje, išskyrus tai, kad neatskeliama N-galinė Fmoc grupė. Fmoc-peptidas atskeliamas nuo dervos reagentu K taip, kaip aprašyta aukščiau. HPLC vykdoma kaip ir 1 pavyzdyje, prieš galutinę HPLC atskėlus Fmoc grupę.
[Leu27]ciklo(Lys26-Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 analogas buvo pagamintas pagal analogišką metodiką.
pavyzdys
Adenililciklazės testai hPTH analogų geba susirišti su receptoriais ir aktyvuoti susijusį su adenililciklaze signalini mechanizmą buvo nustatoma, panaudojant galinčią diferencijuotis, panašią į osteoblastus ROS 17/2 žiurkių osteosarkomos (ROS) ląstelių liniją.Yra žinoma, kad šis aktyvumas yra tampriai susijęs su analogo geba atstatyti kaulų masę žiurkėms, kurioms buvo pašalintos kiaušidės. Adenililciklazės stimuliavimo aktyvumas buvo įvertintas iš pradžių pažymint ląstelinio ATP sankaupą [3H]-adeninu, po to matuojant kiekį [3H]ciklinio AMP, susidariusio iš [3H]-ATP per pirmąsias 10 min. sąlyčio su konkrečiu analogu. Šis testas paremtas Whitfield et ai, J. Cellular Physiology 150, 299-303, 1992 aprašyta metodika (duodamas kaip literatūros šaltinis).
Adenililciklazės rezultatai parodyti toliau duodamoje 2 lentelėje, kaip koncentracija, kurios reikia, kad būtų gaunama pusė AC aktyvumo padidėjimo maksimalios reikšmės. Duomenys taip parodyti fig.4. Fig.4 užtušuoti apskritimai rodo hPTH-(1-31)-NH2 adenililciklazės stimuliavimo aktyvumą, o [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 ir [Leu27]ciklo(Lys26Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 aktyvumai parodyti atitinkamai neužtušuotais ir užtušuotais trikampiais.
pavyzdys hPTH analogu anaboliniu aktyvumu nustatymas, panaudojant žiurkių, kurioms pašalintos kiaušidės, modeli
Dozavimas:
Dozės buvo paremtos hPTH(1-31)-NH2 dozės-atsako duomenimis. hPTH(1-31)-NH2 kaulų augimo potencija buvo tiriama, panaudojant keletą dozių (0,8, 0,6, 0,4 ir 0,2 nmol/100 g kūno masės), ir labiau regeneracinį arba gydymo gebos, negu prevencini, modeli [11]. Prieš pradedant 6 savaičių trukmės kasdienines injekcijas, trijų mėnesių amžiaus žiurkės, kurioms buvo pašalintos kiaušidės, buvo laikomos 9 savaites, kad didžioji dalis neplokštelinio šlaunikaulio trabekulinio kaulo būtų gerokai sunykusi. Devintos savaitės pabaigoje jos prarado apie 75 % šlaunikaulio trabekulinio kaulo masės. Fig.14 parodyta priklausantis nuo dozės vidutinio piokšteiinio nusėdimo sukeltas trabekulinio storio padidėjimas, kuri davė šio fragmento 4 skirtingų dozių 36 injekcijos. Šis fragmentas taip pat gali stimuliuoti trabekulinio kaulo augimą ir daug senesnėms žiurkėms. Pavyzdžiui, 36 vidutinio dozių intervalo (0,6 nmol/100 g kūno masės) hPTH-(1-31)-NH2 injecijos gali žymiai padidinti vidutinį trabekulini stori virš normalių pradinių reikšmių prieš tai sunykusio (9 savaitės po OVX) šlaunikaulio trabekulinio kaulo storį 1 metų amžiaus žiurkėms, ir jos veikia taip pat efektyviai, kaip ir hPTH-(1-84) injekcijos, Tuo būdu, kitiems testams buvo pasirinktos 0,6 nmol/100 g kūno masės dozės.
Pilną metodikos aprašymą davė Rixon et ai, J. Bone & Mineral Research 9, 1179-1189, 1994 ir VVhitfield at ai, Clasif. Tissue Int. 58, 81-87, 1996 (duodami kaip literatūros šaltiniai). Normalios, apgaulingai-OVX (pašalintos kiaušidės) ir OVX Sprague-Davvley žiurkės (3 mėn. amžiaus; 255260 g) buvo gautos iš Charles River Laboratories (St. Constant, QC). Žiurkės buvo atsitiktinai paskirstytos grupėmis po 8 gyvuliukus ir gavo Purina žiurkių maistą ir vandeni ad libitum. Neplanuotų mirčių nebuvo. Gyvuliukai gavo 6 (vieną kartą per dieną) injekcijas į savaitę, pradedant nuo antros savaitės galo po OVX ir baigiant aštuntos savaitės gale po OVX (t.y. 36 injekcijas). Aštuonios apgaulingai-OVX ir 8 OVX kontrolinės žiurkės gavo 36 skiediklio injekcijas (0,15 M NaCI, turintis 0,001 N HCI), o 8 OVX žiurkės gavo 0,6 nmol fragmento skiediklyje 100-ui g kūno masės injekcijas. Aštuntos savaitės gale po OVX, šlaunikauliai buvo išimti, nuvalyti, perpjauti per pusę diafizės viduryje ir arčiau kūno esanti pusė buvo išmesta. Pašalinus ilgojo kaulo galą, kiekviena šlaunikaulio pusė buvo perskelta išilgai į dvi dalis ir išimti kaulų čiulpai.
Fragmentų geba atauginti kaulus buvo įvertinama iš skirtingai gydytų gyvuliukų nutolusios nuo kūno vidurio šlaunikaulio pusės trabekulės vidutinio storio (plotas/perimetras). Norint išmatuoti vidutinį trabekulės storį, kiekvienos žiurkės dvi demineralizuotos šlaunikaulio pusės buvo dehidratuotos ir Įtvirtintos parafine. Iš kiekvieno kaulo vidurio plokštumos buvo atpjauti išilginiai 10 ųm pjūviai ir nudažyti Sanderson’o greitaisiais kaulų dažais (Surgipath Medical Industries, Ine., VVinnipeg, MB, Canada). Vidutinis trabekulės storis išmatuotas naudojant M4 vaizdo sistemą ir kaulų morfometrijos programą iš Imaging Research Ine., (St. Catherines, ON, Canada).
Būdingi kaulų histologiniai pjūviai, paruošti aštuntos savaitės gale po OVX, parodyti fig.5. Šie rezultatai taip pat pateikti stulpelinės diagramos pavidalu fig.7. Stulpeliai rodo normalių žiurkių, žiurkių, kurioms pašalintos kiaušidės (OVX), apgaulingai-OVX žiurkių ir hPTH-(1-31)-NH2, [Leu27]ciklo(Glu22-Lys2S)-hPTH-(1-31)-NH2 bei [Leu27]ciklo(Lys26-Asp30)-hPTH(1-31)-NH2 gydytų žiurkių trabekulių storius. [Leu27]ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH(1-31)-NH2rodo ypatingai daug didesni aktyvumą lyginant su linijiniu analogu hPTH-(1-31)-NH2. Buvo parodyta, kad šis linijinis analogas yra pilnai aktyvus kaulų atstatymo požiūriu, bet jis naudoja tik vieną ląstelių signalų perdavimo (AC-aktyvacija) kelią. Taigi, galima laukti, kad šie cikliniai analogai, kaip ir jų linijinis analogas, turės mažiau nepageidautinų klinikinių pašalinių efektų nei jų ilgesni atitikmenys, tokie kaip hPTH-(1-34) arba hPTH-(1-84), kurie aktyvuoja abu ląstelių signalų'perdavimo mechanizmus.
pavyzdys
Žiurkių su žymiai sunykusiais trabekuliniais kaulais kaulu atstatymas hPTH analogais
Šiame antrame kaulų atstatymo pavyzdyje lyginamas laktaminių fragmentų sugebėjimas atstatyti žymiai sunykusius trabekulinius kaulus.
Šiame eksperimente 6 savaičių trukmės programa, kurioje jaunoms seksualiai subrendusioms žiurkėms vieną kartą per dieną leidžiamos 0,6 nmol peptido/100 g kūno masės injekcijos, buvo pratęsta iki devintos savaitės galo po OVX. Per šį laikotarpį buvo prarasta 75 % jų trabekulinio kaulo. Kaip galima matyti iš fig.6, efektyviausias iš fragmentų yra [Leu27]ciklo[Glu22-Lys2S]-hPTH-(1-31)-NH2. Jis atstatė trabekulinio kaulo tūrį iki normalios kontrolinių žiurkių reikšmės.
pavyzdys hPTH analogu hipotenziniai efektai
Sprague-Dawley žiurkių patelės (sveriančios daugiau nei 290 g) buvo anestezuotos intraperitoniškai suleidžiant natrio pentobarbitali (65 mg/kg kūno masės). Rektalinė temperatūra buvo kontroliuojama YSI402 termistoriumi (Yellovv Springs Instrument Co., Ine. Yellovv Springs, OH) ir per visą eksperimentą palaikoma tarp 36,0 ir 38,5 °C. Taip pat kontroliuojama ausies kaušelio temperatūra, naudojant YSI dengtą termistorių. Buvo apnuoginta uodegos arterija ir j ją įleista kaniulė su Jelco-25g/V kateteriu (Johnson and Johnson Medical Ine., Arlington, TX), kuri sujungiama su Statham slėgio davikliu, ir jo signalai registruojami skaitmeniniu būdu Biopac Systems MP100 monitoriumi (Harvard Instruments, Saint Laurent, QC,
Canada). PTH arba vieno iš jo fragmentų intraveninėms injekcijoms buvo apnuoginta šlaunies vena. Po operacijos žiurkei leidžiama stabilizuotis 8 min., po to j šlaunies veną arba po pilvo oda suleidžiamas PTH arba vienas iš jo fragmentų (ištirpintas parūgštintame fiziologiniame tirpale, turinčiame 0,001 N HCI). Duomenys renkami 12 min. po intraveninės injekcijos arba 22 min. po poodinės injekcijos. Fig.8 parodytas maksimalus kraujo spaudimo kritimas ir laikas iki maksimalaus kritimo, suleidus 0,8 nmol/100 g [Leu27]ciklo[Glu22Lys26j-hPTH-(1-31)-NH2 arba [Leu27]ciklo[Lys26-Asp30]-hPTH-(1 -31 )-NH2 dozę arba poodiniu (balti stulpeliai), arba intraveniniu (brūkšniuoti stulpeliai) būdu. [Leu27]ciklo[Glu22-Lys26]-hPTH-(1-31)-NH2 analogas rodo didesnį bioprieinamumą, lyginant su [Leu27]ciklo[Lys26-Asp30]-hPTH-(1-31)-NH2. Tai seka iš daug trumpesnio laiko, kurio reikia, kad kraujo spaudimas nukristų iki minimumo po poodinės injekcijos. Abu cikliniai analogai po poodinio suleidimo rodo sustiprintus hipotenzinius efektus, lyginant su hPTH-(1-31)NH2. Taigi, galima tikėtis, kad abu cikliniai analogai, leidžiant juos po oda, turės tinkamesnes savybes nei jų linijinis atitikmuo. Šios savybės yra: didesni bioprieinamumai, atsirandantys dėl padidnto atsparumo proteazėms, ir/arba padidintos gebos būti transportuojamiems iš lipidinės aplinkos. Pastaroji savybė gali būti susijusi su amfifilinės spiralės ties hormono C-galu stabilizacija.
Kiti rezultatai:
Šiems rezultatams peptidai buvo pažymėti taip: h-PTH-(1-31)-NH2 (1); [Leu27j-hPTH-(1-31)-NH2 (2) (Fig.9); [Leu27]ciklo[Glu22Lys26]-hPTH-(1-31)-NH2 (3) (Fig.2); [Leu27]ciklo[Lys26-Asp30]-hPTH-(1-31)-NH2 (4): ciklo[Lys27-Asp30]-hPTH-(1-31)-NH2 (5) (Fig. 10): hPTH-(1-30)-NH2 (6); [Leu27j-h-PTH-(1-30)-NH2 (7); [Leu27]ciklo[Glu22-Lys26j-hPTH-(1-30)-NH2 (8).
Adenililciklazės aktyvumai. Mes anksčiau aprašėme, kad [Leu27j-hPTH(1-34)-NH2 yra aktyvesnis stimuliuojant AC aktyvumą ROS ląstelių linijoje už hPTH-(1-34)-NH2 [5], Mes taip pat nustatėme, kad peptidas 2 (EC5o, 11,5±5,2 nM) yra aktyvesnis už natyvią seką 1 (EC5o, 19,9=3,9 nM) (Fig.12). Peptidai parodyti simboliais: 1( ·); 2 ( ) ; 3 (N); 4 (A); 5 (o). Laktamo tarp Glu22 ir Lys25 sudarymas (3) indukuoja dar didesnį AC stimuliavimo aktyvumą, ir EC5o reikšmės yra 3,3±0,3 nM (Fig.12). Taigi, vien tik ciklizacijos ir Lys27 pakeitimo Leu efektas yra aktyvumo- padidėjimas 6 kartus. Priešingai, laktamo sudarymas arba tarp Lys26 ir· Asp30 (4) arba tarp Lys27 ir Asp30 (5) sumažina adenililciklazės stimuliavimą, lyginant su pradine linijine seka. Tokiu būdu 2630 laktamas (4) turi šiek tiek mažesnį aktyvumą nei jo linijinė forma (2) (EC5o = 17,0±3,3 nM lyginant su 11,5±5,2 nM). 27-30 laktamas (5) daug labiau sumažina pradinio linijinio peptido (1) aktyvumą (EC5o = 40,3±34,4 nM lyginant su 19±3,9 nM).
Anksčiau paskelbėme, kad hPTH-(1-30)-NH2 (6) turi AC stimuliavimo aktyvumą (EC50 = 20 nM) artimą analogo 1 aktyvumui. Dabar mes nustatėme, kad [Leu27]-hPTH-(1-30)-NH2 (7) ir ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-30)NH2 (8) (Fig.11) turi panašius kaip ir peptido 6 AC stimuliavimo aktyvumus.
Hipotenziniai efektai. Fig.13 parodyta linijinių (6 ir 7) ir ciklinių laktaminių analogų (3 ir 8) hipotenzinis poveikis. Parodyti maksimalūs kraujo spaudimo kritimai (viršuje), gauti suleidus žiurkei 0,8 nmol/100 g kūno masės analogo dozę, ir laikas, per kuri pasiekiamas maksimalus kraujo spaudimo kritimas (apačioje). Analogai (iš kairės j dešinę peptidai 8, 7, 6, 3) buvo suleisti arba intraveniniu būdu (brūkšniuotas stulpelis), arba poodiniu būdu (baltas stulpelis). Vai31 pašalinimas visuose 6, 7 ir 8 analoguose pasireiškė žymiai sumažintais (p<0,05) suleistų po oda peptidų transporto Į kraujagyslių sistemą greičiais (fig.13). Tikras bendras kraujo spaudimo kritimas peptidų 6 ir 8 atveju vis dėlto labai nesiskyrė (p>0,05) nuo kitų analogų, nepriklausomai nuo to, ar jie buvo suleisti intraveniniu ar poodiniu būdu, išskyrus peptidą 5.
Hipotenzinio efekto koreliacijos su osteogeniniu aktyvumu testas
Kaip aprašyta 6 pavyzdyje ir parodyta fig.8, greitas hipotenzinis efektas, stebimas po poodinės hPTH analogų injekcijos, turi savitarpio ryši su osteogeniniu aktyvumu. Tokiu būdu šis testas yra naudingas kandidatinių hPTH analogų, kurie galėtų turėti osteogeninj aktyvumą, atrinkimui ir leistų atmesti nehipotsnzinius darinius, nenužudant laboratorinių gyvuliukų.
Kaip foną mes naudojome unikalų rinkinį osteogeniniu ir. neosteogeninių AC, AC/PLC arba PLC aktyvuojančių PTH fragmentų, norėdami tiksliai įrodyti, kad būtent AC stimuliavimas mažina kraujo spaudimą, ir palyginti šių fragmentų hipotenzinius poveikius, leidžiant juos poodiniu arba intraveniniu būdu žiurkių patelėms. Mes parodėme, kad hipotenzinį atsaką sukelia tik AC arba AC/PLC stimuliuojantys fragmentai, ir kad yra palyginus mažas hipotenzinis atsakas j poodinę injekciją ir ne kuo didesnis atsakas j intraveninę injekciją, kuris koreliuojasi su hPTH-(1-31)NH2, hPTH-(1-34) ir hPTH-(1-84) osteogeniniais aktyvumais bandymuose su OVXžiurkėmis, bet nėra koreliacijos hPTH-(1-30)NH2 atveju, kuris stimuliuoja AC ir mažina kraujo spaudimą, bet nestimuiiuoja kaulų formavimosi.
Konkrečiai imant, hPTH-(1-84) ir jo hPTH-(1-34), hPTH-(1-31)NH2 ir hPTH-(1-30)NH2 fragmentai sumažino anastezuotų Sprague-Dawley žiurkių uodegos arterijos spaudimą 42,4-61,7 % per maždaug 1 min. po injekcijos į šlaunies veną, bet sumažino spaudimą tik 8,5-36,2 % per 2-19 min. po poodinės injekcijos. hPTH-(1-84) ir hPTH-(1-34) stimuliuoja ir adenililciklazę, ir fosfolipazę-C jų tikslinėse ląstelėse, bet hipotenzinis poveikis turėtų būti stimuliuojamas būtent adenililciklazės aktyvavimo, nes hPTH-(1-30)NH2 ir hPTH-(1-31)NH2l kurie gali stimuliuoti tik adenililciklazę, turėjo labai stiprų hipotenzini poveiki, suleidus juos i veną, tuo tarpu kai hPTH-(7-84), kuris gali stimuliuoti tik fosfolipazę-C, turėjo silpną hipotenzini poveikį, suleidus ji j veną. Kadangi PTH’ų osteogeninis veikimas taip pat yra surištas su adenililciklazės stimuliavimu, galima laukti, kad hipotenzinis atsakas galėtų būti panaudotas naujų PTH darinių, kurie gali pasižymėti osteogeniškumu, atrinkimui. Iš tikrųjų, po oda suleistų hPTH-(1-31)NH2, hPTH-(1-34) ir hPTH-(184) osteogeninis aktyvumas glaudžiai koreliuojasi su jų hipotenziniu aktyvumu, iš kurių hPTH-(1-34) turėjo didžiausią hipotenzini poveiki ir daug didesnį nei kitų dviejų molekulių. hPTH-(1-31)NH2 ir hPTH-(1-84) turėjo vienodą osteogeninj ir hipotenzinį poveikį. Tačiau ši koreliacija negalioja hPTH-(1-30)NH2 atveju, kuris stimuliuoja AC beveik taip pat stipriai kaip ir hPTH-(1-31)NH2 ir hPTH-(1-34) ir mažina kraujo spaudimą taip pat kaip ir hPTH-(1-31)NH2l bet nestimuiiuoja kaulų formavimosi. Vis dėlto, sugebėjimas žymiai sumažinti arterinį spaudimą yra bendra osteogeninių PTH ir PTH fragmentų savybė, ir todėl ji yra greitai nustatomas preliminarus PTH fragmentų bioaktyvumo in vivo indikatorius.
Kalbant dar konkrečiau, ir hPTH-(1-34) ir hPTH-(1-31)NH2 turėjo maksimalų hipotenzinį poveikį, imant 0,8 nmol/100 g kūno masės dozes.
Šj hipotenzinį atsaką lydi trumpalaikis (20-30 min.) žiurkės ausų ir letenėlių paraudimas, kuris gali būti laikomas naudingu vizualiniu kokybiniu rodikliu.
Nors AC ir AC/PLC stimuliuojantys fragmentai buvo potencialai hipotenziniai, kai jie suleidžiami j veną, hPTH-(7-84), kuris gali stimuliuoti tik PLC, 0,8 nmol/100 g kūno masės intraveninė injekcija labai lėtai (9,8±2,0 min) ir tik labai nedaug sumažino uodegos arterijos spaudimą 3,28± 1,0 mm Hg, lyginant su staigiu (0,9±0,08 min) 43,2±5,8 mm Hg sumažinimu, kurį sukelia AC/PLC stimuliuojantis hPTH-(1-84) arba taip pat staigiu 51,6±3,3 mm Hg kritimu, kuri sukelia AC stimuliuojantis hPTH-(1-31)NH2.
Viena poodinė AC arba AC/PLC stimuliuojančio fragmento injekcija sukėlė daug lėtesni ir mažesni uodegos arterijos spaudimo sumažėjimą nei tos pačios dozės intraveninė injekcija. Pavyzdžiui, 0,8 nmol/100 g kūno masės hPTH-(1-34) dozė, suleista po oda, sumažino spaudimą tik 27,9±3,6 mm Hg, lyginant su 50,9±5,6 mm Hg, suleidus ją i veną. Ta pati hPTH-(131)NH2 dozė suleista po oda, sumažino spaudimą tik 11,1 ±6,6 mm Hg, lyginant su 51,6±53,3 mm Hg, suleidus ją i veną.
Nėra didelių skirtumų tarp greitų ir didelių uodegos arterijos spaudimo sumažėjimų, kuriuos sukelia į veną suleisti hPTH-(1-84), hPTH-(1-34) ir hPTH(1 -31)NH2, bet hPTH-(1-34) buvo bent jau dvigubai efektyvesnis (p<0,01) nei kitos dvi molekulės, jeigu leidžiama po oda.
Vienas iš faktorių, kuris turi įtaką hipotenziniam poveikiui ir osteogeniškumui po oda suleistų PTH arba PTH fragmentų, yra jų geba keliauti, neprarandant aktyvumo, iš injekcijos vietos į jo tikslinę vietą, pirmiausia per kraujagyslių tinklą, o po to j kaulus. Šią gebą atspindi laikas, kurio reikia, kad po injekcijos uodegos arterijos spaudimas nukristų iki minimalios reikšmės. Sutrumpinus PTH molekulę iš C-galo nuo 84 iki 31 liekanos, eliminuojama geba.stimuliuoti PLC, nesumažinant gebos stimuliuoti AC, ir tai devynis kartus sumažina laiką, kurio reikia, kad uodegos arterijos spaudimas pasiektų minimumą. Pašalinus dar vieną liekaną ir pagaminant hPTH-(1-30)NH2, laikas, kurio reikia, kad kraujo spaudimas pasiektų minimumą, dramatiškai pailgėja nuo 2,0±0,31 min. hPTH-(1-31)NH2 atveju iki 13,8±2,3 min. Tačiau svarbu pažymėti, kad hPTH-(1-31)NH2 atveju kraujo spaudimo mažinimas užtrunka ne ilgiau, kaip hPTH-(1-84) atveju.
Panaudojimas šiame tyrime hPTH-(1-31)-NH2 - pirmojo PTH darinio, kuris gali stimuliuoti AC taip pat stipriai, kaip ir hPTH-(1-34), neaktyvuodamas PLC ir nestimuliuodamas susijusių su membranomis PKC’ų aktyvumo - dabar duoda tiesiogini įrodymą, kad PTH’ų hipotenzinis veikimas yra vien tik dėl AC aktyvacijos. Tokiu būdu, nors intraveninės 0,8 nmo!/100 g kūno masės hPTH(7-84), kuris gali stimuliuoti tik PLC/PKC, injekcijos žymiai nekeičia uodegos arterijos spaudimo, tos pačios dozės hPTH-(1-31)-NH2 intraveninės injekcijos mažina spaudimą taip pat kaip ir h-PTH-(1-34).
Kadangi AC taip pat tarpininkauja PTH sukeltame OVX-žiurkių kortikalinio ir trabekulinio kaulų susidarymo stimuliavime, atrodo, kad hipotenzinio atsako gavimas sveikoms žiurkių patelėms yra paprastas, greitai išmatuojamas PTH darinių galimo osteogeniškumo rodiklis. Antra vertus, negavus arterinio spaudimo sumažėjimo, reikėtų konkretaus fragmento daugiau nebetyrinėti, tokiu būdu išvengiant bereikalingo, brangaus ir ilgalaikio tyrimo su OVX-žiurkėmis. PTH’ų hipotenziniai atsakai j intraveninę injekciją nebuvo koreliuoti su osteogeniškumais. Tačiau daug mažesni hipotenziniai atsakai į suleistus po oda hPTH-(1-31)NH2, hPTH-(1-34) ir hPTH(1-84) eina lygiagrečiai su šių molekulių osteogeniškumais, kur hPTH-(1-34) turi stipriausią hipotenzini ir osteogeninj poveikį, o kitos dvi molekulės yra vienodai veiksmingos, tačiau jos mažiau veikia j kraujo spaudimo sumažėjimą ir kaulų susidarymo stimuliavimą nei hPTH-(1-34). Tačiau ši koreliacija negalioja hPTH-(1-30)NH2 atveju, kuris stimuliuoja AC beveik taip pat stipriai kaip ir hPTH-(1-31)NH2 ir hPTH-(1-34) ir mažina kraujo spaudimą taip pat kaip ir hPTH-(1-31)NH2, bet nestimuliuoja kaulų formavimosi [11], Lieka neaišku, kodėl šiuo atveju nėra osteogeniškumo. Nepanašu, kad taip yra vien tik dėl to, kad po oda suleistam 'hPTH-(1-30)NH2 reikia daugiau laiko kraujo spaudimui sumažinti, nes po oda suleistam hPTH-(1-84) reikia tiek pat laiko, kad sumažėtų kraujo spaudimas, tačiau jis yra labai osteogeninis. Aišku, kad osteogeninis atsakas priklauso nuo daugelio įvairių faktorių, kurių kombinacija apsprendžia pakankamai aktyvaus hormono arba hormono fragmento atkeliavimą iš injekcijos vietos į tikslinius PTH receptorius ekspresuojančius subrendusius osteobastus. AC stimuliuojančio, kraujo spaudimą mažinančio hPTH-(1-30)NH2 nesugebėjimas stimuliuoti kaulų formavimosi gali būti dėl didesnio nestabilumo, šiek tiek didesnės AC stimuliacijos EC5o reikšmės (t.y. 20 nm vietoj 16 nM hPTH-(1-31)NH2 ir hPTH(1-34)) ir ilgesnio laiko, reikalingo patekti j cirkuliaciją iš injekcijos vietos.
Nežiūrint j tai, kad hPTH-(1-30)NH2 nėra osteogeninis, geba žymiai sumažinti arterinį spaudimą vis tik yra bendra osteogeninių PTH’ų savybė, taigi tai yra greitai nustatomas galimo PTH fragmentų bioaktyvumo in vivo rodiklis. Iš to seka, kad hipotenzinis atsakas turėtų taip pat būti efektyvus osteogeninio PTH darinio sugebėjimo pasiekti taikini, Įvedus ji peroraliniu arba kitokiu neinjekciniu būdu, rodiklis.
Hipotenzinės reakcijos kiekvienai injekcijai diskomfortas ir kitokios galimos pasekmės galėtų mažinti osteoporozinių pacientų ryžtą ilgą laiką gydytis PTH arba PTH fragmentu. Laimei, dabartiniu metu kaulų formavimosi stimuliavimui yra naudojamos kaitaliojamos PTH'ų injekcijos, ir šios molekulės turi daug mažesni hipotenzinį poveiki, kai jos leidžiamos po oda, lyginant su intraveninėmis injekcijomis. Kaip anksčiau Įrodėme [6,7], hPTH(1-31)NH2 turėtų turėti papildomą AC stimuliavimo pranašumą, nestimuliuodamas PLC ir jis neturėtų sukelti pašalinių efektų, kuriuose potencialiai tarpininkauja Ca2+ ir PKC.
pavyzdys
Ciklo(Lys27-Asp30)-hPTH-(1-31)-NH2 (5). Sintezė vykdoma taip pat kaip ir [Leu27]-ciklo(Glu22-Lys25)-hPTH-(1-31)-NH2. Nustatyta, kad produkto grynumas yra >95 %, o molekulinė masė 3700,64 (±0,38) (laukiama M + 1 =
3700,14). Laktamo padėties patvirtinimui nustatyta peptido seka.
[Leu27]-ciklo(Glu22-Lys26)-hPTH-(1-31)-NH2 (8). Šis peptidas buvo sintetintas kaip ir peptidas 3, nenaudojant rankinio Vai prijungimo prie pagrindo. Nustatyta, kad produkto grynumas yra >97 %, o molekulinė masė 3586,14 (±0,19) (laukiama M + 1 = 3685,99).
Šio išradimo analogai gali būti skiriami šiltakraujams žinduoliams (jeigu to reikia), konkrečiai žmogui, parenteriniu, topiniu arba rektaliniu būdu, arba inhaliacijomis bei peroraliniu būdu. Gali būti patogiai pagaminama šių analogų parenterinė dozuota forma, kurioje yra maždaug 1-300 mg junginio dozuotame vienete kartu su Įprastu skiedikliu, pagalbine medžiaga, rišikiiu, apsaugine medžiaga, stabilizatoriumi, nuspalvinančiu agentu ir pan., kaip reikalauja Įprasta farmacinė praktika.
Vartojant parenteriniu būdu, ne dažniau kaip vieną kartą per dieną reikia padaryti 1-2 ml neskausmingą injekciją labai plona 30 mm švirkšto adata 1-2 metus (priklausomai nuo ligos aštrumo). Suleidžiamoje medžiagoje turėtų būti viena iš šio išradimo medžiagų vandeniniame izotoniniame steriliame tirpale arba suspensijoje (gali būti su apsaugine medžiaga, tokia kaip fenolis, arba su solubilizuojančiu agentu, tokiu kaip etilendiamino tetraacto rūgštis (EDTA)). Galimais vartoti skiedikiais ir tirpikliais yra vanduo, silpnai parūgštintas vanduo, Ringerio tirpalas ir izotoninis natrio chlorido tirpalas. Be to, kaip tirpikliai arba suspendavimo terpės paprastai yra vartojamos sterilios nelakios alyvos. Injekcijoms skirtų vaistinių formų gamyboje kaip nelakios alyvos randa pritaikymą sintetiniai monogliceridai, digliceridai, riebalų rūgštys (tokios kaip oleino rūgštis).
Rektaliniam vartojimui šio išradimo analogai gali būti paruošiami žvakučių forma, sumaišant juos su tinkama neerzinančia pagalbine medžiaga, tokia kaip kakavos sviestas arba poiletilenglikoiiai.
Topiniam vartojimui šio išradimo analogai gali būti paruošiami tepalų, želė, tirpalų, suspensijų arba derminių pleistrų forma.
Inhaliacijoms skirtos formos gali būti pagaminamos, pavyzdžiui, PCT publikuotoje paraiškoje nr. W094/07514 aprašytais būdais.
Dienos dozė neturėtų viršyti 0,05 mg/kg kūno masės arba maždaug
3,5 mg/70 kg žmogui priklausomai nuo konkretaus junginio aktyvumo, gydomo subjekto amžiaus, svorio, lyties ir būklės. Kaip turėtų būti gerai žinoma, veikliojo ingrediento kiekis, kuris turi būti sumaišomas su nešikliais gaminant atskirus dozuotus vienetus, keisis priklausomai nuo gydomo subjekto ir nuo konkretaus vartojimo būdo.
Toliau duodamose lentelėse pateikiamas sąrašas analogų, kurie buvo pagaminti pagal aukščiau aprašytas metodikas.
CO £
cū zj co
M
CM
Φ ω
co
NT~ co m
co co co
05 | CM |
05 | T- |
LO | LO* |
CO | CO |
LO | CO |
co | co |
M· o
o r^co
CM | CM |
T— | LO |
co | co |
co | co |
co | o |
co | M- |
CM in
Ύ co o
M
M- | CM |
o | T— |
co | io |
st | co |
to | to |
co | co |
M
O σ>
xr co co šito o
hco
CM
T“
LO*
CO to co co *—* >> tO ω
Z3
Cį •Φ ω
co o
+l to sf o
+l cO hK rD co to sr
IO co to co o
sr to co o’ +l co o
to co
LO co co
LO* co co co o
co
I
CO co co o' sT co o
o hco r^.
o o’ +l_ to
LO* co to co co co o
+Į
CM co co' co o
M rco o* iL ’tr <00 o
sjto ro +į o
rcm mto co o>
o +l sLO_ sf
CO co co
CM
X
CM
X sjco
I
X o
I
CO t
io o' +l o
LO
05’ sf
CO co
CM
CO
I sf
C5* +i to to
CO
CO st o' +l_ to rsf co to co lentelė: PTH analogų molekulinės masės
CO
C <
I—
X
-C
c.
ω >>
co
I
I
X
I— CL o;
cm
CM
Z3
O o
Ό
I
X I—‘ CL _C S''
CM to
-J i
CM
CM _Z3 o
o
Ό
X
1Z co co
o co
CM
Z3 r-~
CM W
X 3=
c o
CL· (f) <
I to
CM
CM
Z5 st
I
X I— X cm . CL· V) <
I
CM ω
>5 co
O o
CM
ZJ
Φ (M.
CM
Z3
Φ
X I— X JC
I t0~
CM
C/5 >.
_1
I
CM
CM a
O o
ko
CM
ZJ
Φ _1
I
X I— X ję
CM ω
CD
I
X I— X .c
I o
CM co
CM ω
>5
-J
I
CM
CM .3 ω
co >>
CM cO
CM
Φ a
CM co
CM
X z
co
CL
-C ω
>1
X z
I
V“ co
I x
(X xz
C/5 >.
CM
CM
ZJ
O o
Ό o
ω
LO lentelė: PTH analogų molekulinės masės
Masė (laukiama) (M + 1) | 3735,14 | 3727,12 | 3685,12 | 3657,12 | 3650,1 | 3664,13 |
Masė (nustatyta) | 3734,47 (±0,80) | 3726,25 (±0,42) | 3684,67 (±0,52) | 3656,90 (±0,67) | 3651,26 (±0,31) | 3663,61 (±0,16) |
Analogas | CN X z 1 co 1 1 X 1— Q_ JZ to-' o, ω >. i CN CN ΣΙ o o Ό s. CN L_ >> Į— «—.u | CN X z co 1 t X 1— Q_ 1= l to-' CM ω >, _l 1 CM CM Z3 o o F* o CM =J Φ 1 Φ o CO 1 d | CM X Z 1 co 1 1 X 1— Q_ -C 1 CN 0 1 CM CM ω O jo >- CM Σ3 Φ _I | CN X z 1 co 1 1 X Į— Q_ . -C 1 CO CN C U. O 1 CM CM O. (Λ < O ue Ό >- CM =3 Φ | CN X z i co 1 X Ι- Ο. 1 co CN ω o 1 CN CN ω >> o 'o Ό f·» CN o Φ _J to CM ω O cm' CM ω >> O | CN X z 1 co 1 1 X 1— Q_ ΧΣ o n ω >. O 1 to CM (Λ >. O o -it: Ό r. CM Σ3 Φ _l o to W >s O to’ CM ω >. O |
Q σ LU ω | co | 00 | O) | 20 | CM |
lentelė: Peptidinių analogų adenililciklazės (AC) aktyvumai
Φ a S o φ Ό < | 20 | co | 20 | * r- -κ- ω | 40 | 00 | CO | CD | CD | co | Γ» | σ> | |
Analogas | CSJ X z 1 co 1 1 X 1— Ο- χ: | CN T z 1 co 1 i 1— Ο- Ι! 1 CN ω -j 1 CN CN ZJ o o Ό r^ CN ZJ Φ | CV X Z 1 o CO τ- Τ I- Ο- χ: co CV ΙΛ >> _l CV CV Z3 0 o Ό r- CV □ Φ _J | cu X z 1 co 1 1 T 1— X x: 1 a~ co CL to < ; 1 co CV w >. · -J o Ό v- C\J =3 Φ _l | CN X Z t co 1 1 T 1— 0- -x: 1 a'' co CL to < 1 CN ω o o | X O 1 co 1 X 1— Q_ JZ 1 o”'“ CN ω >> _! t CN CN Σ3 o o Ό r- cv =3 Φ _l | CN X z 1 co 1 1 X (— Ο- χ: 1 co CN ω 2j 1 CN CN n o ~o o, CV Z3 Φ -J | X O 1 co 1 t X t— X jz 1 co“' CV ω >. _J 1 CN CN =3 0 o 2«: Ό CV =3 Φ _l | CN X z 1 co 1 1 X i— X 1Z 1 co”*' CN ω 1 CN CN zs o K Ό N. CN CŪ < | CN X z 1 co t 1 X 1— CL 1 CN ω >s 1 CN CN Z3 0 o o n- CN Φ H | CN X z 1 co 1 X 1— X ΧΣ 1 co-' CV co >< _J CV CV Z! 0 o o r~- cv Z3 Φ _l to co Φ z | cv X z 1 T“ co t X 1— X JZ co CV to >, _l 1 CN CN zs 0 o Ό | CV X z 1 co 1 1 X 1— X JZ 1 co-*' CN ω >> i CN CN □ 0 o Ό h- CN Φ |
SEQ ID | - | co | h- | Ν’ | co | oo | Oi | O | - | C\J | co T“ | ττ | LT) |
lentelė; Peptidinių analogų adenililciklazės (AC) aktyvumai
Adenililciklazė (EC50) | CT> | 24 | St | >200 | to | 24 |
Analogas | CN T 2 1 V co 1 t T l·— CL JZ 1 CN ω 1 CM CN □ 0 0 oe jo r*. CM k_ >> H | CN T 2 1 co 1 T 1— Ο- χ: 1 CN ω >% _ι 1 CN CN Σ3 0 0 jo, >- 04 25 Φ —1 Φ O CO 1 d | CN T 2 1 co 1 1 X 1— Q_ xz 1 CN □ 0 04 OJ O >o 0 Ό r~ OI 23 Φ _J | CN X 2 J co 1 1 X t x: 1 co CN C u. o 1 CN CN O. w < 0 Ό 04 23 Φ _J | CN X 2 1 co J X 1— Q_ X2 1 CN ω >> o 1 CN CN ω 0 0 js: Ό 0- 04 23 Φ _J co 04 W >. O oi 04 ω >> O | OI X 2 1 co 1 t X 1— Ο- χ: 1 o CO ω 0 1 co CN ω >x 0 0 jo, o- 0. 23 Φ _l 0 co ω >o O to’ 04 ω O |
SEQ ID | ω T— | r- | CO | CT> | 20 1 | OJ |
LITERATŪRA
J išradimo aprašymą įtraukti šie literatūros šaltiniai:
[1] Caulfield, M. P.; McKee, R. L.: Goldman, M. E.; Duong, L. T.; Fisher, J. E.; Gay, C. T.; DeHaven, P. A.; Levy, J, J.: Roubini, E.; Nutt, R. F.; Chorev, M.; Rosenblatt, M. The Bovine Renal Parathyroid Hormone (PTH) Receptor Has Equal Affinity for 2 Different Amino Acid Sequencies - The Receptor Binding Domains of PTH and PTH-Related Protein Are Located VVithin the 14-34 Region. Endocrinology 1990, 127, 83-87.
[2] Neugebauer, W.; Barbier, J.-R.: Sung, W. L.; VVhitfield, J. F.; VViIlick, G. E. Solution Structure and Adenylyl Cyclase Stimulating Activities of CTerminai Truncated Human Parathyroid Hormone Analogues. Biochemistry 1995, 34, 8835-8842.
[3] Gardella, T. J.; VVilson, A. K.; Keutmann, H. T.; Oberstein, R.; Potts, J. T.; Kronenberg, H. M., and Nussbaum, S. R. Analysis of Parathyroid Hormone’s Principal Receptor-Binding Region by Site-Directed Mutagenesis and Analog Design. Endocrinology 1993, 732, 2024-2030.
[4] Marqusee, S.; Baldwin, R. L. Helix Stabilization by Glu...Lys+ Salt Bridges in Short Peptides De Novo Design. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1987, 84, 8898-8902.
[5] Surevvicz, W. K.; Neugebauer, W.; Gagnon, L.; MacLean, S,; VVhitfield, J. F.; VViIlick, G. E. Structure-Function Relationships in Human Parathyroid Hormone: The Essential Role of Amphiphilic-Heiix. In Peptides: Chemistry, Structure, and Biology 1993; Smith, J.; Hodges, R., Eds.; ESCOM Leiden, The Netherlandes, 1993, pp.556-558.
[6] VVhitfield, J. F.; Morley, P.; VViIlick, G. E.; Ross, V.; Barbier, J. R.Jsaacs, R. J.; Ohannessianbarry, L, Stimulation of the Growth of Femoral Trabecular Bone in Ovariectomized Rats by the Novel Parathyroid Hormone Fragment, hPTH-(1-31)NH2 (Ostabolin). Calcif. Tissue Int. 1996, 58, 81-87.
[7] VVhitfield, J, F,; Morley, P. Small Bone-Building Fragments of Parathyroid Hormone: New Therapeutic Agents for Osteoporosis. Trends Pharmacol. Sci. 1995, 16, 382-386.
SEKŲ SĄRAŠAS (1) BENDRA INFORMACIJA:
(i) Pareiškėjas:
(A) Pavadinimas: National Research Council of Canada (B) Gatvė: Intelectual Property Services
Montreal Road, Bldg. M-58, Room EG-12 (C) Miestas: Otava (D) Valstija: Ontario (E) Šalis: Kanada (F) ZIP: K1A OR6 (ii) Išradimo pavadinimas: Paratiroidinio hormono analogai osteoporozės gydymui (iii) Sekų skaičius: 33 (iv) Kompiuteriu perskaitoma forma:
(A) Informacijos laikmenos tipas: diskelis (B) Kompiuteris: IBM PC suderinamas (C) Operacinė sistema: PC-DOS/MS-DOS (D) Programinė jranga: Patentln Release #1,0, Version #1.30 (v) Dabartinės paraiškos duomenys:
(A) Paraiškos numeris: PCT/CA97/00547 (B) Užpildymo data: 1997m. rugpjūčio mėn. 1 d.
(vi) Ankstesnės paraiškos duomenys:
(A) Paraiškos numeris: 08/691,647 (B) Užpildymo data: 1996m. rugpjūčio mėn. 2 d.
(2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:1:
(i) Sekos charakteristikos: ~ (A) Ilgis: 31 aminorūgš'tis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:1:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:2 (i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:2:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:3 (i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:3:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 r* (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:4:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:4:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn
10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:5:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:5:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn
10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:6:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:6:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn
10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Vai 20 . 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:7:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 30 aminorūgščių (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:7:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:8:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:8:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:9:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 34 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:9:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5 -- 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai His 20 25 30
Asn Phe (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:10: (i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 34 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:10:
Ser Vai Ser Glu Ile Giri Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai His 20 25 30
Asn Phe (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:11:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:11:
Ser Vai Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Ala Leu Gln Asp Vai
25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:12:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:12:
Ser Vai Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Xaa Leu Gln Asp Vai
25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:13:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:13:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Xaa Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:14:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:14:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:15:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO: 15:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys lle Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:16:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO: 16:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Tyr Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:17:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:17:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Leu Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:18:
(i) Sekos charakteristikos: -p (A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:18:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Lys Trp Leu Arg Glu Leu Leu Gln Asp Vai
25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:19:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO: 19:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Asp Trp Leu Arg Xaa Lys Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:20:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:20:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 1 5 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Cys Trp Leu Arg Cys Lys Leu Gln Asp Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:21:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: cirkuliarinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:21:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn
10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Cys Lys Leu Gln Cys Vai 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:22:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 34 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:22:
Ser Vai Ser Glu lle Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn 15 10 15
Ser Met Glu Arg Vai Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Vai His 20 25 30
Asn Phe (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:23:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 31 aminorūgštis (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: baltymas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:23:
Xaa Vai Ser Glu lle Gln Leu Xaa His Asn Leu Gly Lys Xaa Xaa Xaa 1 5 10 15
Xaa Xaa Glu Arg Vai Xaa Trp Leu Xaa Xaa Xaa Leu Xaa Asp Xaa 20 25 30 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:24:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) ilgis: 4 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:24:
Vai His Asn Xaa (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:25:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 5 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:25:
Vai His Asn Phe Xaa
5 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:26:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 6 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:26:
Va! His Asn Phe Vai Xaa
5 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:27:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 7 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:27:
Vai His Asn Phe Vai Ala Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:28:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 8 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:28:
Vai His Asn Phe Vai Ala Leu Xaa 1 5 (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:29:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 4 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:29:
His Lys Lys Lys (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:30:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 4 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė* (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:30:
His Leu Lys Lys (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:31:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 4 aminorūgštys (B) Tipas; aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:31:
Lys Lys Lys Lys (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:32:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 4 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:32:
His Leu Lys Ser (2) INFORMACIJA APIE SEQ ID NO:33:
(i) Sekos charakteristikos:
(A) Ilgis: 5 aminorūgštys (B) Tipas: aminorūgščių (C) Vijiškumas:
(D) Topologija: linijinė (ii) Molekulės tipas: peptidas (xi) Sekos aprašymas: SEQ ID NO:33:
Vai Leu Asn Phe Xaa
Claims (25)
- IŠRADIMO APIBRĖŽTIS1. Žmogaus paratiroidinio hormono hPTH analogas, turintis tokią aminorūgščių seką:R-NH-R1-Val-Ser-Glu-lle-Gln-Leu-R2-His-Asn-Leu-Gly-Lys-R3-R4-R5-R6-R7-GluArg-Val-R8-Trp-Leu-R9-R10-R11-Leu-R12-R13-Y, kuriojeR = vandenilis arba bet kokios linijinės arba šakotosios grandinės alkilas, acilas arba arilo grupė,R1 = Ser, Ala arba Aib,R2 = Met arba gamtinė hidrofobinė aminorūgštis,R3 = His arba tirpi vandenyje aminorūgštis,R4 - Leu arba tirpi vandenyje aminorūgštis,R3 = Asn arba tirpi vandenyje aminorūgštis,R6 = Ser arba tirpi vandenyje aminorūgštis,R7 = Met arba gamtinė hidrofobinė aminorūgštis,R8 = Glu, Lys, Cys, Orn arba Asp,R9 = Arg, Lys, Orn, His, Cys arba Glu,R10 = Lys, Orn, Cys, Glu arba Asp,R11 = gamtinė hidrofobinė arba polinė aminorūgštis,R12 = Cys, Glu, Asp, Lys arba Orn,R13 = Asp, Cys arba Lys,X = OH, NH2irY = X, Val-X, Val-His-X, Val-His-Asn-X, Val-His-Asn-Phe-X, Val-His-Asn-PheVal-X, Val-His-Asn-Phe-Val-Ala-X irVal-His-Asn-Phe-Val-Ala-Leu-X, ciklizuotas tarp vienos arba dviejų aminorūgščių porų 22 ir 26, 26 ir 30, 27 ir 30 ir 25 ir 29, kai R9 yra Lys arba Orn, ir R12 yra Glu arba Asp, kuriame viena iš ciklizacijų yra tarp aminorūgščių 22 ir 26 arba tarp aminorūgščių 25 ir 29, ir jo farmaciškai tinkamos druskos.
- 2. Analogas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra ciklizuotas laktamine forma tarp aminorūgščių porų 22/26, 26/30, 25/29, kai R9 yra Lys arba Orn ir R12 yra Glu arba Asp, arba tarp aminorūgščių poros27/30, kai R11 ir R13 yra Lys arba Asp; arba ciklizuotas disulfidinio tiltelio forma tarp Cys porų 22/26, 26/30 arba 25/29.
- 3. Analogas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad ciklizacija yra laktaminės formos arba disulfidinio tiltelio formos.
- 4. Analogas pagal bet kurį iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad laktamas yra 22-26 laktamas, Glu22-Lys26 laktamas arba 25-29 laktamas.
- 5. Analogas pagal bet kuri iš 1-4 punktų, besiskiriantis tuo, kad R yra H, o X yra NH2.
- 6. Analogas pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskiriantis tuo, kad R11 yra Lys arba Leu.
- 7. Analogas pagal 6 punktą, besiskiriantis tuo, kad R2 ir R7 yra Met arba Nle.
- 8. Analogas pagal T punktą, besiskiriantis tuo, kad R1 yra Ser,R2 yra Met, R7 yra Met, R8 yra Glu, R9 yra Arg, R10 yra Lys, R12 yra Gln, o R13 yra Asp.
- 9. Analogas pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad R3 yra His arba Lys, R4 yra Leu, Lys arba Arg, R5 yra Asn, Orn, Hci, Asp, Arg, Lys, D-Lys, Ser arba Gly, o R6 yra Ser, Lys, Asp arba Arg.
- 10. Analogas pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad R3-R6 yra His-Lys-Lys-Lys, His-Leu-Lys-Lys, Lys-Lys-Lys-Lys arba His-Leu-Lys-Ser.
- 11. Analogas pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad Y = X, Y = Val-X arba Y = Val-Leu-Asn-Phe-X.
- 12. Analogas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jo seka yra SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO;9, SEQ ID NO.10, SEQ ID NO:11, SEQ ID ΝΟΊ2, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18 arbaSEO ID NO;19.
- 13. Analogas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad R11 yra Lys, Leu, Asp, Gln, Ala, Nle, lle arbaTyr.
- 14. Žmogaus paratiroidinio hormono hPTH (1-31) analogas, besiskiriantis tuo, kad jo 27 padėtyje yra Lys arba jis yra pakeistas tinkama hidrofobine liekana, ir jis yra ciklizuotas tarp Glu22 ir Lys26, sudarant laktamą.
- 15. Analogas pagal 14 punktą, besiskiriantis tuo, kad hidrofobinė liekana yra Leu, o analogas C-gale turi arba amidinę grupę, arba karboksigrupę.
- 16. Analogas pagal 14 punktą, besiskiriantis tuo, kad hidrofobinę liekaną pasirenka iš grupės, susidedančios iš lle, norleucino, Met ir α-aminosviesto rūgšties.
- 17. Analogas pagal 14 punktą, besiskiriantis tuo, kad jo seka yra SEQ ID NO:3.
- 18. Kompozicija skirta vartoti jos reikalingam šiitakraujui gyvūnui, b e s i s k i r i a n t i tuo, kad joje yra žmogaus paratiroidinio hormono (hPTH)-(131) analogas pagal 14 punktą kartu su farmaciškai tinkamu nešikliu arba pagalbine medžiaga.
- 19. Kompozicija pagal 18 punktą, besiskirianti tuo, kad šiame analoge hidrofobinė liekana yra Leu.
- 20. Kompozicija pagal 18 punktą, besiskirianti tuo, kad šiame analoge hidrofobinę liekaną pasirenka iš grupės, susidedančios iš lle, norleucino, Met ir α-aminosviesto rūgšties.
- 21. Kompozicija pagal 18 punktą, besiskirianti tuo, kad šio analogo seka yra SEQ ID NO:3.
- 22. Žmogaus paratiroidinio hormono hPTH (1-31) analogas pagal 14 punktą, skirtas panaudoti šiltakraujo gyvūno gydymui.
- 23. Analogas pagal 22 punktą, besiskiriantis tuo, kad šiame analoge hidrofobinė liekana yra Leu.
- 24. Analogas pagal 22 punktą, besiskiriantis tuo, kad šiame analoge hidrofobinę liekaną pasirenka iš grupės, susidedančios iš lle, norleucino, Met ir α-aminosviesto rūgšties.
- 25. Analogas pagal 22 punktą, besiskiriantis tuo, kad šio analogo seka yra SEQ ID NO:3.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/691,647 US5955425A (en) | 1996-08-02 | 1996-08-02 | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
LT99010A LT99010A (lt) | 1999-12-27 |
LT4638B true LT4638B (lt) | 2000-03-27 |
Family
ID=24777380
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
LT99-010A LT4638B (lt) | 1996-08-02 | 1999-02-02 | Paratiroidinio hormono analogai osteoporozės gydymui |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5955425A (lt) |
LT (1) | LT4638B (lt) |
ZA (1) | ZA976916B (lt) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6110892A (en) * | 1994-06-20 | 2000-08-29 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
AU6510999A (en) * | 1998-10-07 | 2000-04-26 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas, The | Methods of screening for apoptosis-controlling agents for bone anabolic therapies and uses thereof |
US6673771B1 (en) | 1999-07-28 | 2004-01-06 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods of inhibiting osteoclast activity |
JP2003505514A (ja) * | 1999-07-28 | 2003-02-12 | ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルベニア | 破骨細胞生成を阻害する方法 |
US8088734B2 (en) * | 2003-01-21 | 2012-01-03 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides |
CN1822853A (zh) * | 2003-07-15 | 2006-08-23 | 加拿大国家研究委员会 | 用于治疗特征在于过度增殖皮肤细胞的疾病的人类甲状旁腺激素环状类似物 |
US20050215476A1 (en) * | 2004-01-21 | 2005-09-29 | Unigene Laboratories Inc. | Amidated parathyroid hormone fragments and uses thereof |
US20060046969A1 (en) * | 2004-08-25 | 2006-03-02 | Aegis Therapeutics Llc | Antibacterial compositions for drug administration |
US9114069B2 (en) * | 2004-08-25 | 2015-08-25 | Aegis Therapeutics, Llc | Antibacterial compositions for drug administration |
US8268791B2 (en) * | 2004-08-25 | 2012-09-18 | Aegis Therapeutics, Llc. | Alkylglycoside compositions for drug administration |
US9895444B2 (en) | 2004-08-25 | 2018-02-20 | Aegis Therapeutics, Llc | Compositions for drug administration |
US20090047347A1 (en) * | 2005-07-29 | 2009-02-19 | Aegis Therapeutics, Inc. | Compositions for Drug Administration |
US8642564B2 (en) * | 2004-08-25 | 2014-02-04 | Aegis Therapeutics, Llc | Compositions for drug administration |
US20140162965A1 (en) | 2004-08-25 | 2014-06-12 | Aegis Therapeutics, Inc. | Compositions for oral drug administration |
US20060046962A1 (en) | 2004-08-25 | 2006-03-02 | Aegis Therapeutics Llc | Absorption enhancers for drug administration |
EP1933863A4 (en) * | 2005-09-06 | 2010-06-09 | Zelos Therapeutics Inc | PARATHYROIDIAN HORMONE ANALOGS AND METHODS USING SAME |
US20070270341A1 (en) * | 2005-09-06 | 2007-11-22 | Paul Morley | Parathyroid hormone analogues and methods of use |
US20080176787A1 (en) * | 2005-09-06 | 2008-07-24 | Paul Morley | Parathyroid hormone analogues and methods of use |
US20110046059A1 (en) * | 2005-09-06 | 2011-02-24 | Zelos Therapeutics, Inc. | Pharmaceutically acceptable formulations/compositions for peptidyl drugs |
US20090042774A1 (en) * | 2005-09-06 | 2009-02-12 | Paul Morley | Parathyroid hormone analogues and methods of use |
CA2628945A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Board Of Control Of Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
US20090022684A1 (en) * | 2006-05-09 | 2009-01-22 | Paul Morley | Methods for hematopoietic stimulation |
US8226949B2 (en) | 2006-06-23 | 2012-07-24 | Aegis Therapeutics Llc | Stabilizing alkylglycoside compositions and methods thereof |
WO2008016404A2 (en) * | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Zelos Therapeutics, Inc. | Parathyroid hormone analogues and uses thereof |
ES2586032T3 (es) | 2008-03-28 | 2016-10-11 | Hale Biopharma Ventures, Llc | Administración de composiciones de benzodiazepinas |
US8440631B2 (en) | 2008-12-22 | 2013-05-14 | Aegis Therapeutics, Llc | Compositions for drug administration |
CA2782640A1 (en) | 2009-12-07 | 2011-06-16 | Michigan Technological University | Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone |
ES2917973T3 (es) | 2011-06-14 | 2022-07-12 | Neurelis Inc | Administración de benzodiacepina |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4086196A (en) | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
US4771124A (en) | 1987-05-26 | 1988-09-13 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with simplified synthetic methodology |
WO1993006845A1 (en) | 1991-10-10 | 1993-04-15 | Pang Peter K T | PARATHYROID HORMONE ANALOGUES SUBSTITUTED AT aa?25,26,27¿ AND USE IN OSTEOPOROSIS TREATMENT |
US5556940A (en) | 1994-06-20 | 1996-09-17 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4587046A (en) * | 1982-05-18 | 1986-05-06 | The Regents Of The University Of California | Drug-carrier conjugates |
US5149779A (en) * | 1990-07-26 | 1992-09-22 | Merck & Co., Inc. | Humoral hypercalcemic factor antagonists |
US5434246A (en) * | 1992-03-19 | 1995-07-18 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Parathyroid hormone derivatives |
US5654274A (en) * | 1992-06-01 | 1997-08-05 | Magainin Pharmaceuticals, Inc. | Biologically active peptides having N-terminal substitutions |
US5589452A (en) * | 1992-07-14 | 1996-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis |
AU672790B2 (en) * | 1992-07-15 | 1996-10-17 | Novartis Ag | Variants of parathyroid hormone and its fragments |
NZ257212A (en) * | 1992-09-29 | 1996-11-26 | Inhale Therapeutic Syst | Parathyroid hormone formulations comprising a biologically active n-terminal fragment of the hormone |
US5670483A (en) * | 1992-12-28 | 1997-09-23 | Massachusetts Insititute Of Technology | Stable macroscopic membranes formed by self-assembly of amphiphilic peptides and uses therefor |
US5582995A (en) * | 1993-06-11 | 1996-12-10 | The General Hospital Corporation | Methods of screening for compounds which inhibit the direct binding of Ras to Raf |
US5747456A (en) * | 1994-12-19 | 1998-05-05 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Continuous low-dose administration of parathyroid hormone or its agonist |
US5717062A (en) * | 1995-06-07 | 1998-02-10 | Beth Israel Hospital Association | Cyclic analogs of PTH and PTHrP |
US5723577A (en) * | 1995-07-13 | 1998-03-03 | Biomeasure Inc. | Analogs of parathyroid hormone |
-
1996
- 1996-08-02 US US08/691,647 patent/US5955425A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-08-04 ZA ZA976916A patent/ZA976916B/xx unknown
-
1999
- 1999-02-02 LT LT99-010A patent/LT4638B/lt not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4086196A (en) | 1975-03-28 | 1978-04-25 | Armour Pharmaceutical Company | Parathyroid hormone |
US4771124A (en) | 1987-05-26 | 1988-09-13 | Merck & Co., Inc. | Parathyroid hormone antagonists with simplified synthetic methodology |
WO1993006845A1 (en) | 1991-10-10 | 1993-04-15 | Pang Peter K T | PARATHYROID HORMONE ANALOGUES SUBSTITUTED AT aa?25,26,27¿ AND USE IN OSTEOPOROSIS TREATMENT |
US5556940A (en) | 1994-06-20 | 1996-09-17 | National Research Council Of Canada | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
E. ATHERTON ET AL.: "Solid Phase Peptide Synthesis" |
ERICSON ET AL.: "The Proteins", pages: 257 |
RIXON RH ET AL.: "Parathyroid hormone fragments may stimulate bone growth in ovariectomized rats by activating adenylyl cyclase", J BONE MINER RES., 1994, pages 1179 - 1189 |
WHITFIELD, J.F., MORLEY, P., WILLICK, G.E. ET: "Willick, G.E. et al. Stimulation of the growth of femoral trabecular bone in ovariectomized rats by the novel parathyroid hormone fragment, hPTH-(1â€"31)NH2 (Ostabolin)", CALCIF TISSUE INT, 1996, pages 81 - 87, XP009132899 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
LT99010A (lt) | 1999-12-27 |
ZA976916B (en) | 1998-08-28 |
US5955425A (en) | 1999-09-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
LT4638B (lt) | Paratiroidinio hormono analogai osteoporozės gydymui | |
JP4620309B2 (ja) | 骨粗鬆症治療用副甲状腺ホルモン類似体 | |
JP4224111B2 (ja) | 骨粗鬆症の治療のための副甲状腺ホルモン類似体 | |
US5556940A (en) | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis | |
US6541450B1 (en) | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis | |
CN101108878B (zh) | 胰高血糖素样肽-1的类似物 | |
RU2198182C2 (ru) | Аналоги гормона паращитовидной железы | |
SK151599A3 (en) | Peptide parathyroid hormone analogs | |
EP0734396A1 (en) | ANALOGUES OF hGH-RH (1-29)NH 2? HAVING ANTAGONISTIC ACTIVITY | |
US7531621B1 (en) | PTH2 receptor selective compounds | |
US5698672A (en) | Synthetic calcitonin mimetics | |
EP1352912A1 (en) | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis | |
CA2599885A1 (en) | Parathyroid hormone analogues for the treatment of osteoporosis | |
CZ20003999A3 (cs) | Analog PTH, způsob selektivního navázání na receptor, způsob vyvolání agonistické a antagonistické odezvy, farmaceutický prostředek a způsob léčby |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM9A | Lapsed patents |
Effective date: 20040801 |