KR960031992A - 혈청 시료중의 ldl을 특이적으로 측정하기 위한 방법 및 시약 - Google Patents

혈청 시료중의 ldl을 특이적으로 측정하기 위한 방법 및 시약 Download PDF

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Abstract

본 발명은 다른 혈청 지방단백질의 존재하에서 수용성 중합체의 LDL-응집제 및 쯔비터이온성 및/또는 비이온성 세제를 첨가함으로써 LDL분획을 특이적으로 측정하기 위한 방법 및 시약에 관한 것이다. LDL응집체는 직접적인 혼탁 측정법으로 측정된다. 바람직한 LDL-응집체는 산기가 있는 가지화된 구조, 특히 측쇄로서 가지화된 알칼 술폰산기를 갖는 다중음이온이다. 바람직한 세제는 "양쪽성 작용제"로 공지된 세제이다.
* 선택도 제1도

Description

혈청 시료중의 LDL을 특이적으로 측정하기 위한 방법 및 시약
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 VLDL의 함량에 대한 LDL의 회수율을 나타낸 그래프.

Claims (14)

  1. 다른 혈청 지방단백질의 존재하에 완충제, LDL 침전제 또는 수용성 중합체의 LDL-응집제 및 쯔비터이온성 및/또는 비이온성 세제를 첨가함으로써 LDL 분획을 특이적으로 측정하고 LDL 응집체를 직접 측정하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, LDL-응집제로서 덱스트란 황산염, 폴리비닐 황산염, 헤파린, 또는 20,000내지 5,000,000 Dalton(겔 투과 크로마토그래프로 측정함)의 분자량을 갖는 알칼 술폰산 측쇄기, 알칸 포스폰산 측쇄기 및/또는 알칸 카르복실산 측쇄기를 가지는 수용성 중합체를 첨가하고, 세제로서 하기의 일반식(II)의 화합물이 첨가되고, 완충제가 초산 나트륨, 트리스·HCI, 비스 트리스 메탄 또는 MES 및/또는 이미다졸이고, pH범위가 5 내지 9임을 특징으로 하는 방법;
    상기 식에서 x는 1과 20사이의 수이고, y는 0과 8사이의 수이고, R1은 수소, 인산염 잔기에 의해 결합된 콜라미도기 또는 모노 -또는 디글리세리드기이고, R2은 수소, 히드록실기 또는 산소음이온, 산 잔기, 히드록시 알킬 술폰산기 또는 카르복실기이다.
  3. 제1항 또는 2항에 있어서, x가 11과 17사이의 홀수이고, y가 1과 3사이의 수이고 또는 R2가 술폰산기, 카르복실기, 히드록시에틸 술폰산기 또는 히드로프로필 술폰산 잔기이고, R1이 수소인 상기의 일반식(II)의 세제가 첨가됨을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항 내지 3항 중 어느 한 항에 있어서, N-데실-, N-도데실-, N-테트라데실- 또는 N-헥사데실-N, N-디메틸암모니오-3-프로판 술폰산염 또는 상응하는 유도체가 첨가됨을 특징으로 하는 방법.
  5. 제1항 내지 4항 중 어느 한 항에 있어서, 세제로서 플루로릭 F68 및/또는 트윈 20이 첨가됨을 특징으로 하는 방법.
  6. 제1항 내지 5항 중 어느 한 항에 있어서, LDL 응집제가 반응 혼합물에 있어서 0.005 내지 1.0㎎/㎖농도로 존재되고 또는 세제가 0.001 내지 1.0%(w/v) 농도로 존재됨을 특징으로 하는 방법.
  7. 제1항 내지 6항 중 어느 한 항에 있어서, 2가 금속 이온염의 0.001 내지 0.20몰/ℓ농도로 첨가됨을 특징으로 하는 방법.
  8. 제1항 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서, 처리온도가 10 내지 40℃범위내에 있고, LDL 응집체가 혼탁적으로 측정됨을 특징으로 하는 방법.
  9. 제1항 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서, 저밀도 지방단백질, LDL 콜레스테롤, LDL 아포지방단백질 B 또는 LDL 입자의 다른 분자 성분이 측정됨을 특징으로 하는 방법.
  10. 다른 혈청 지방단백질의 존재하에서 LDL을 특이적으로 측정하기 위한 (1) 덱스트란 황산염, 폴리비닐 황산염, 알칼 술폰산, 알칸 포스폰산 및/또는 알칼 카르복실산 측쇄기를 갖는 중합체, (2) pH를 5 내지 9로 조절하는 완충제, 및 (3) 세제를 함유하는 시약으로서, 다중 음이온은 20,000 내지 5,000,000 Dalton(겔 투과 그로마토그래피)의 분자량을 갖고, 세제는 하기의 일반식(II)의 화합물이고, 완충제는 초산 나트륨, 트리스·HCI, 비스 트리스 메탄 또는 MES 및/또는 이미다졸 인 것을 특징으로 하는 시약;
    상기 식에서 x는 1과 20사이의 수이고, y는 0과 8사이의 수이고, R1은 수소, 인산염 잔기에 의해 결합된 콜라미도기 또는 모노 -또는 디글리세리드기이고, R2은 수소, 히드록실기 또는 산소음이온, 산 잔기, 히드록시 알킬 술폰산기 또는 카르복실기이다.
  11. 제10항에 있어서, 사용된 세제가 N-데실-, N-도데실-, N-테트라데실- 또는 N-헥사데실-N, N-디메틸암모니오-3-프로판 술폰산염 또는 이것들의 유도체임을 특징으로 하는 시약.
  12. 제10항 또는 11항에 있어서, 함유된 세제가 플루로닉 F68 및/또는 트윈 20임을 특징으로 하는 세제.
  13. 제10항 또는 11항에 있어서, 세제가 잎-형 담체중에 또는 담체상에 함침된 형태로 존재됨을 특징으로 하는 세제.
  14. 생물학적 시료중에 LDL이 존재하는 경우, 이것을 선택적으로 측정하기 위한 하기의 일반식(II)의 화합물의 용도;
    상기 식에서 x는 1과 20사이의 수이고, y는 0과 8사이의 수이고, R1은 수소, 인산염 잔기에 의해 결합된 콜라미도기 또는 모노 -또는 디글리세리드기이고, R2은 수소, 히드록실기 또는 산소음이온, 산 잔기, 히드록시 알킬 술폰산기 또는 카르복실기이다.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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