KR920701474A - 독성 박테리아의 진단법 - Google Patents

독성 박테리아의 진단법

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KR920701474A
KR920701474A KR1019910701247A KR910701247A KR920701474A KR 920701474 A KR920701474 A KR 920701474A KR 1019910701247 A KR1019910701247 A KR 1019910701247A KR 910701247 A KR910701247 A KR 910701247A KR 920701474 A KR920701474 A KR 920701474A
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엘란고 산무감
라자라트남 산타
라마챤드란 바산티
쿠마르 로이 라만
산카란 크리쉬난
벤카타 발라크리쉬나 수브라만얌 예라밀리
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클래스 빌헬름슨
악티에볼라게트 아스트라
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Abstract

내용 없음

Description

독성 박테리아의 진단법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
1도 : 독성 및 비독성 쉬겔라에 의한 CR의 흡수 독성 쉬겔라가 37℃ 및 42℃(0-0; △-△)에서는 콩고레드를 세포내 흡수시키는 반면 30℃(0-0)에서는 사이토졸에서 콩고레드의 농도가 거의 나타나지 않았다. 흡수량은 배지 중의 염료 농도에 대해 직선 비례 관계를 나타낸다. 배지 중의 염료 농도가 100㎍/㎖인 상태에서 유기체는 4×109세포 당 15㎍의 염료를 흡수할 수 있다. 대조적으로 비독성 쉬겔라(△-△)는 유사한 조건 하에 염료를 5㎍만 흡수한다. 43KDa단백질(■-■)의 유도된 농도는 사이토졸 내의 콩고 레드의 축적 증가와 깊은 연관이 있지만, 얻을 수 있는 최대 유도량(단백질의 150㎍/㎎)은 배지 중의 염료 농도 50㎍/㎖에서 도달된다. 또한 염료 농도의 증가는 43KDa단백질의 농도에 영향을 미치지 않는다. 제2도 : 에스. 플랙스네리 2a의 사이토졸 및 막 분획물의 SDS-PAGE(9-15% 구배 겔)분석 패널 A는 37℃에서 CR의 부재(1-4) 및 존재(5-8)하에 성장시킨 독성쉬겔라. 사이토졸(1,5), 완전막(2,6), 사르코실-불용성 막(3,7) 및 사르코실-용해성 막(4,8), 패널 B는 37℃에서 CR의 부재(1-4) 및 존재(5-8)하에 성장시킨 비독성 쉬겔라. 사이토졸(1,5), 완전막(2,6), 사르코실-불용성 막(3,7) 및 사르코실-용해성 막(4,8), 분자량 표지(M), CR조절된 단백질을 나타낸다. 레인당 단백질 하중 : 50㎍(A 레인 3,7;B레인 3,7) ; 100㎍(A레인 1,4-6,8; B레인 1,2,4-6,8) ; 150㎍(A레인 2).

Claims (33)

  1. 독성 병원성 박테리아를 유도 개시 인자의 존재 하에 성장시킴을 특징으로하는 독성 병원성 박테리아내의 독성 관련 단백질의 유도 방법.
  2. 제1항에 있어서, 콩고 레드(CR)를 유도체로서 사용함을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항 또는 2항에 있어서, 박테리아가 쉬겔라의 독성종임을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항 또는 2항에 있어서, 박테리아가 장내침입성 대장균임을 특징으로 하는 방법.
  5. 독성 침입성 병원성 박테리아 내의 독성 관련 단백질을 유도하기 위한 유도 개시 인자의 용도.
  6. 제5항에 있어서, 콩고 레드(CR)의 유도 인자로서의 용도.
  7. 제5항 또는 6항에 있어서, 박테리아가 쉬겔라의 독성종임을 특징으로 하는 용도.
  8. 제5항 또는 6항에 있어서, 박테리아가 장내침입성 대장균임을 특징으로 하는 용도.
  9. 박테리아, 단일세포 및 다중세포 유기체, 기생체 및 바이러스를 포함한 침입성 병원체의 특이적 검출제로서의 유도된 단백질의 용도.
  10. 제9항에 있어서, 독성 쉬겔라 종의 검출을 위한 유도된 단백질의 용도.
  11. 제10항에 있어서, 분자량이 63KDa, 58KDa 또는 43KDa의 겉보기 분자량을 갖는 유도된 단백질의 용도.
  12. 제9항에 있어서, 장내침입성 대장균의 검출을 위한 유도 단백질의 용도.
  13. 상기 병원체의 검출제로서의 독성 병원체로 세포내 흡수되는 외부 물질의 용도.
  14. 제13항에 있어서, 쉬겔라의 독성종의 검출제로서의 콩고레드(CR)의 용도.
  15. 제13항에 있어서, 장내침입성 대장균의 검출제로서의 CR의 용도.
  16. a. 독성에 대한 허용 온도에서 독성 관련 단백질을 유도시키기에 충분한 시간 동안 유도 개시 인자를 함유한 성장배지에서 박테리아 시료를 성장시키는 단계, b. 박테리아 세포를 수거하고 용균에 의해 단백질을 방출시키는 단계, c. 필요시에, 단백질을 용해시키는 단게, d. 흡착 표면 상에 용해된 용균물을 피복시키는 단계, e. 사용되지 않은 표면을 비간섭 단백질로 차단시키는 단계, f. 상기 피복면을 상기 유도 단백질에 대한 1차 항체 또는 항체들과 반응시키는 단계, g. 상기 1차 항체 또는 항체들을 리포터 효소와 같은 라벨에 포합된, 1차 항체 또는 항체들에 대한 2차 항체로 검출하는 단계 및 h. 상기 라벨의 분석에 의해 독성 박테리아를 검출하는 단계로 이루어지는 독성 박테리아의 진단법.
  17. a. 독성에 대한 허용 온도에서 독성 관련 단백질을 유도시키기에 충분한 시간 동안 유도 개시 인자를 함유한 성장 배지에서 박테리아 시료를 성장시키는 단계, b. 박테리아 세포를 수거하고 용균에 의해 단백질을 방출시키는 단계, c. 흡착 표면 상에 유도된 단백질에 대한 항체를 피복시키고 사용되지 않은 면을 비간섭 단백질로 차단시킴으로써 얻어진 피복면을 박테리아 용균물과 반응시키는 단계, d. 리포터 효소와 같은 라벨에 포합된 단계 c에서와 같은 항체를 사용하여 유도된 단백질을 검출하는 단계 및 e. 라벨의 분석에 의해 독성 박테리아를 검출하는 단계로 이루어지는 독성 박테리아의 진단법.
  18. 제16항 또는 17항에 있어서, 쉬겔라의 독성종 진단을 위한 방법.
  19. 제16항 또는 17항에 있어서, 장내침입성 대장균 진단을 위한 방법.
  20. 제16항 내지 19항 중 어느 한 항에 있어서, 유도 개시 인자로서 콩고 레드(CR)를 사용함을 특징으로 하는 방법.
  21. 제16항 내지 20항 중 어느 한 항에 있어서, 콩고 레드(CR)를 0.0001%(w/v)내지 0.1%(w/v)의 농도로 사용함을 특징으로 하는 방법.
  22. 제16항 내지 21항 중 어느 한 항에 있어서, 박테리아 시료를 약 2내지 약 24시간 동안 성장시킴을 특징으로 하는 방법.
  23. 제16항 내지 22항 중 어느 한 항에 있어서, 나트륨 라우릴 사르코신을 용균 및 용해에 사용함을 특징으로 하는 방법.
  24. 제16항 내지 23항 중 어느 한 항에 있어서, 쉬겔라의 시료를 37℃에서 성장시킴을 특징으로 하는 방법.
  25. 제21항 내지 24항 중 어느 한 항에 있어서, CR을 0.01%(w/v)의 농도로 사용함을 특징으로 하는 방법.
  26. 제20항 내지 25항 중 어느 한 항에 있어서, 쉬겔라 또는 장내침입성 대장균 내에서 CR로 유도된 단백질의 겉보기 분자량이 63KDa, 58KDa 및 43KDa임을 특징으로 하는 방법.
  27. 제16항 내지 23항 중 어느 한 항에 있어서, 장내침입성 대장균의 시료를 37℃에서 성장시킴을 특징으로 하는 방법.
  28. 제16항 내지 27항 중 어느 한 항에 있어서, 박테리아를 항생물질의 존재하에 성장시킴을 특징으로 하는 방법.
  29. a. 독성에 대한 허용 온도에서 독성 관련 단백질을 유도시키기에 충분한 시간 동안 유도 개시 인자를 함유한 성장 배지에서 병원체 시료를 성장시키기는 단계, b. 병원체를 수거하고, 단백질을 방출시키는 단계, c. 필요시에, 단백질을 용해시키는 단계, d. 흡착 표면 상에 용해된 단백질을 피복시키는 단계, e. 사용되지 않은 표면을 비간섭 단백질로 차단시키는 단계, f. 상기 피복면을 상기 유도된 단백질에 대한 차 항체 또는 항체들과 반응시키는 단계, g. 상기 1차 항체 또는 항체들을 리포터 효소와 같은 라벨에 포합된, 1차 항체 또는 항체들에 대한 2차 항체로 검출하는 단계 및 h. 상기 라벨의 분석에 의해 독성 박테리아를 검출하는 단계로 이루어지는 독성 병원체의 진단법.
  30. a. 독성에 대한 허용 온도에서 독성 관련 단백질을 유도시키기에 충분한 시간 동안 유도 개시 인자를 함유한 성장 배지에서 병원체 시료를 성장시키는 단계, b. 병원체를 수거하고, 단백질을 방출시키는 단계, c. 필요시에, 단백질을 용해시키는 단계, d. 흡착 표면 상에 유도된 단백질에 대한 항체를 피복시키고 사용되지 않은 면을 비간섭 단백질로 차단시킴으로써 얻어진 피복면을 상기 단백질과 반응시키는 단계, e. 리포터 효소와 같은 라벨에 포합된 단계 c에서와 같은 항체를 사용하여 유도된 단백질을 검출하는 단계 및 f. 라벨의 분석에 의해 독성 병원체를 검출하는 단계로 이루어지는 독성 박테리아의 진단법.
  31. 제29항 또는 30항에 있어서, CR을 유도 개시 인자로서 사용함을 특징으로 하는 방법.
  32. 쉬겔라 또는 장내침입성 대장균의 독성종을 콩고 레드(CR)로 유도시켜 얻은 겉보기 분자량이 63KDa, 58KDa 또는 48KDa인 단백질.
  33. 질병의 예방 및 억제를 위한 백신 요법을 비롯한 예방 절차에 있어서 제32항에 따른 유도된 단백질의 용도.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019910701247A 1989-04-05 1990-04-03 독성 박테리아의 진단법 KR920701474A (ko)

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