KR910021478A - 인간 신경성장인자의 발현방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명에 따른 인간의 신경성장인자 폴리펩티드, β-서브유니트의 파상형 프로필이다(Hopp et al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78 : 3824, 1981). -121/104로 표시된 위치는 펩티드 리더이고 +1/+118위치는 인간의 신경성장인자 폴리펩티드, β-서브유니트의 아미노산 시퀀스이다(Ullrich et al. Nature 303 : ;821, 1983). 제2도는 발현벡터 pSVLhNGF의 구조를 다이아그램으로 나타낸 것이다.
Claims (20)
- 인위적인 제한부위를 포함하고 성숙한 형태로 또는 생체학적으로 활성인 유도체로 인간 신경성장인자 폴레핍티드 β-서브유니트를 코딩하는 합성 유전자 시퀀스와 상기 유전자 시퀀스의 5'- 말단이 인간 β-NGF초기 영역의 원해 시퀀스의 3'- 말단에 융합되어 있고 인간 β-NGF를 코딩하는 상기 유전자 시퀀스 3'- 말단은 폴리아데닐레이션과 시퀀스 접합으로 융합되어 있으며 유전자 구조물내에 존재하는 DNA시퀀스를 코딩하는 상기 초기 인간 β-NGF의 5'-와 3'- 말단은 폴리히드린 프로모터의 조절인자에 기능적으로 연결되어 있는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
- 배양 배지에서 세포감염으로 상기 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 제1항에 따른 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 이제까지 알려진 성숙한 형태의 아미노산 시퀀스에 융합된 하나 이상의 아미노산이 상기 유전자 구조물에서 결여되어 있음을 특징으로 하는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
- 제3항에 있어서, 상기 유전자 구조물은 DNA시퀀스를 코딩하는 상기 초기 영역이 없는 상태에서 성숙형의 β-서브유니트를 코딩하는 유전자 시퀀스를 함유하는 것임을 특징으로 하는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 의해 특징지워지는 유전자 구조물을 함유하며 바큘로비루스 제놈에 상기 유전자 구조물을 삽입할 수 있는 재조합 바큘로비루스 이식벡터.
- 재조합 바큘로비루스 이식벡터 pSVLhNGF.
- 숙주세포에 제5항 또는 제6항을 따르는 재조합 바큘로비루스 이식벡터와 바큘로비루스 수용체를 삽입하고 상기 재조합 바큘로비루스 이식벡터에서 상기 바큘로비루스 수용체로 상기 유전자 구조물을 이식하여 제1항 내지 제4항중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스를 분리하는 제1항 내지 제4항중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스의 제조방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스를 함유하고 성숙형의 상기 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 재조합 곤충세포.
- 제8항에 있어서, 상기 재조합 곤충세포는 스포돕테라 프루지페다로 부터 유도된 것임을 특징으로 하는 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 재조합 곤충세포.
- 제8항 또는 제9항을 재조합 세포를 배양하고 배양체로 부터 상기 인간 β-NGF를 회수하여 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
- 제10항에 있어서, 상기 제조방법은 본래 상태의 구조를 구성하는 다른 서브유니트로 부터 상기 β-서브유니트를 분리하는 단계를 거치지 않음을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
- 제10항 또는 제11항에 있어서, 상기 인간 β-NGF를 인간에서 유래한 다른 생성물이나 다른 단백질에 의해 오염되지 않은 상태로 제조됨을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
- 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 인간에서 유래한 다른 생성물이나 다른 단백질에 의해 오염되지 않은 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자.
- 제13항에 따른 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제14항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 부가적으로 자연상태의 강글리오시드, 그의 유도체나 반합성 동족체 중 하부, 또는 그의 염들 중 하나를 함유하는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 비경구적으로 또는 뇌로, 경구적으로, 직장을 통하거나 국소에 또는 흡입 경로를 통하여 투여할 수 있음을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제14항 내지 제16항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 신경기능의 유지 또는 신경기능 상실의 예방, 급성 또는 만성질환에서 신경기능의 회복에 사용되는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제17항에 있어서, 상기 질환은 뇌혈관성, 전염성, 염증성, 습포성 또는 대사성 질환과 같은 급성병 임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제17항에 있어서, 상기 질환인 급성질환의 말기 상태를 포함한 만성 신경퇴화성 질환은 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
- 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 신경계 노화에 따른 신경질환의 처치 또는 면역계 이상 질환의 처치에 사용되는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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