KR910021478A - 인간 신경성장인자의 발현방법 - Google Patents

인간 신경성장인자의 발현방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

인간 신경성장인자의 발현방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 발명에 따른 인간의 신경성장인자 폴리펩티드, β-서브유니트의 파상형 프로필이다(Hopp et al, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78 : 3824, 1981). -121/104로 표시된 위치는 펩티드 리더이고 +1/+118위치는 인간의 신경성장인자 폴리펩티드, β-서브유니트의 아미노산 시퀀스이다(Ullrich et al. Nature 303 : ;821, 1983). 제2도는 발현벡터 pSVLhNGF의 구조를 다이아그램으로 나타낸 것이다.

Claims (20)

  1. 인위적인 제한부위를 포함하고 성숙한 형태로 또는 생체학적으로 활성인 유도체로 인간 신경성장인자 폴레핍티드 β-서브유니트를 코딩하는 합성 유전자 시퀀스와 상기 유전자 시퀀스의 5'- 말단이 인간 β-NGF초기 영역의 원해 시퀀스의 3'- 말단에 융합되어 있고 인간 β-NGF를 코딩하는 상기 유전자 시퀀스 3'- 말단은 폴리아데닐레이션과 시퀀스 접합으로 융합되어 있으며 유전자 구조물내에 존재하는 DNA시퀀스를 코딩하는 상기 초기 인간 β-NGF의 5'-와 3'- 말단은 폴리히드린 프로모터의 조절인자에 기능적으로 연결되어 있는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
  2. 배양 배지에서 세포감염으로 상기 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 제1항에 따른 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 이제까지 알려진 성숙한 형태의 아미노산 시퀀스에 융합된 하나 이상의 아미노산이 상기 유전자 구조물에서 결여되어 있음을 특징으로 하는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
  4. 제3항에 있어서, 상기 유전자 구조물은 DNA시퀀스를 코딩하는 상기 초기 영역이 없는 상태에서 성숙형의 β-서브유니트를 코딩하는 유전자 시퀀스를 함유하는 것임을 특징으로 하는 이식 유전자 구조물을 함유하는 재조합 바큘로비루스.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 의해 특징지워지는 유전자 구조물을 함유하며 바큘로비루스 제놈에 상기 유전자 구조물을 삽입할 수 있는 재조합 바큘로비루스 이식벡터.
  6. 재조합 바큘로비루스 이식벡터 pSVLhNGF.
  7. 숙주세포에 제5항 또는 제6항을 따르는 재조합 바큘로비루스 이식벡터와 바큘로비루스 수용체를 삽입하고 상기 재조합 바큘로비루스 이식벡터에서 상기 바큘로비루스 수용체로 상기 유전자 구조물을 이식하여 제1항 내지 제4항중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스를 분리하는 제1항 내지 제4항중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스의 제조방법.
  8. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항을 따르는 재조합 바큘로비루스를 함유하고 성숙형의 상기 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 재조합 곤충세포.
  9. 제8항에 있어서, 상기 재조합 곤충세포는 스포돕테라 프루지페다로 부터 유도된 것임을 특징으로 하는 인간 β-NGF를 발현할 수 있는 재조합 곤충세포.
  10. 제8항 또는 제9항을 재조합 세포를 배양하고 배양체로 부터 상기 인간 β-NGF를 회수하여 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
  11. 제10항에 있어서, 상기 제조방법은 본래 상태의 구조를 구성하는 다른 서브유니트로 부터 상기 β-서브유니트를 분리하는 단계를 거치지 않음을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
  12. 제10항 또는 제11항에 있어서, 상기 인간 β-NGF를 인간에서 유래한 다른 생성물이나 다른 단백질에 의해 오염되지 않은 상태로 제조됨을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자의 제조방법.
  13. 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 인간에서 유래한 다른 생성물이나 다른 단백질에 의해 오염되지 않은 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자.
  14. 제13항에 따른 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  15. 제14항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 부가적으로 자연상태의 강글리오시드, 그의 유도체나 반합성 동족체 중 하부, 또는 그의 염들 중 하나를 함유하는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  16. 제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 비경구적으로 또는 뇌로, 경구적으로, 직장을 통하거나 국소에 또는 흡입 경로를 통하여 투여할 수 있음을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  17. 제14항 내지 제16항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 신경기능의 유지 또는 신경기능 상실의 예방, 급성 또는 만성질환에서 신경기능의 회복에 사용되는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  18. 제17항에 있어서, 상기 질환은 뇌혈관성, 전염성, 염증성, 습포성 또는 대사성 질환과 같은 급성병 임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  19. 제17항에 있어서, 상기 질환인 급성질환의 말기 상태를 포함한 만성 신경퇴화성 질환은 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
  20. 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 신경계 노화에 따른 신경질환의 처치 또는 면역계 이상 질환의 처치에 사용되는 것임을 특징으로 하는 생체학적으로 활성인 인간 신경성장인자를 함유하는 약제학적 제제.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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