KR880009127A - 용성 성숙 hIL-β 및 변경된 생물학적 활성을 갖는 유도체를 이 콜라이에서 고도로 발현시키는 플라즈미드 및 그 방법 - Google Patents
용성 성숙 hIL-β 및 변경된 생물학적 활성을 갖는 유도체를 이 콜라이에서 고도로 발현시키는 플라즈미드 및 그 방법 Download PDFInfo
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Abstract
내용 없음.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라즈미드 PDP 506의 제조공정도이고,
제2도는 Pro hIL-1β를 암호화하는 DNA를 함유하는 1.6Kb 절편을 나타내며.
Claims (31)
- 실질적으로 플라즈미드 pUC 8 및 성숙(nature) hlL-1β의 아미노산 서열 5 내지 153을 암호화하는 DNA로 이루어지고, pUC 8의 lac 프로모터 하부에 있는 ATG/Met 해독 출발 코돈이 위치 5의 TCA Ser코돈으로부터 아미노산 코돈 4 내지 18개의 간격을 유지하는, 성숙 hlL-1β의 아미노산 서열 5 내지 153을 함유하는 용성 단백질을 이.콜라이(E.coli)에서 고도로 발현시킬 수 있는 플라즈미드.
- 제1항에 있어서, 성숙 hlL-1β의 아미노산 서열 5 내지 153을 암호화하는 DNA절편이 pUC 8의 Pst I부위에 삽입된 플라즈미드.
- 제2항에 있어서, ATG/Met 해독 출발 코돈이 TCA/Ser 코돈으로부터 4 내지 8개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제3항에 있어서, ATG/Met 해독 출발 코돈이 TCA/Ser코돈으로부터 서열 Thr Asn Ala Pro Val Arg을 암호화하는 6개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제4항에 있어서, pDP 516, 즉 ATCC 부여번호 67303인 플라즈미드.
- 제3항에 있어서, ATG Met/출발 코돈이 TCA/Ser 코돈으로부터 서열 Thr Pro Val Arg을 암호화하는 4개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제6항에 있어서, pDP 516-22A, 즉 ATCC 부여번호 67304인 플라즈미드.
- 제3항에 있어서, ATG Met/출발 코돈이 TCA/Ser코돈으로부터 서열 Thr Val Arg을 암호화하는 4개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제8항에 일어서, pDP 516-18, 즉 ATCC 부여번호 67305인 플라즈미드.
- 제2항에 있어서, ATG/Met 해독 출발 코돈이 TCA/Ser코돈으로부터 서열 Thr Met Ile Thr Asn Ser Arg Gly Ser Val Asp Leu His Asp Ala Pro Val Arg을 암호화하는 18개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제9항에 있어서, pDP 506, 즉 ATCC 부여번호 67302인 플라즈미드.
- 제1항에 있어서, ATG/Met 해독 출발 코돈이 TCA/Ser 코돈으르 4개 코돈의 간격을 유지하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Gly Arg을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Pro Arg을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Leu Arg을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Thr Arg을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Val Glu 을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Val Tyr을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Thr Met Val Lys을 암호화하는 플라즈미드.
- 제12항에 있어서, 4개 코돈이 Ala Pro Val Arg을 암호화하는 플라즈미드.
- 제1항의 플라즈미드로 형질전환된 이.콜라이세포.
- 제21항에 있어서, 이.콜라이 균주가 JM 101인 세포.
- (1) 이.콜라이 세포를 제1,7,9,12,15,19 또는 20항 중 어느 하나의 하이브리드 플라즈미드로 형질전환시키고, (2) 상기 세포를 배양하여 단백질을 발현시키며, (3) 상기 단백질을 균질하게 정제함을 포함하여 용성 단백질을 이.콜라이에서 고노로 발현시키는 방법.
- 위치 1 내지 4의 1개 이상에서 아미노산 치환체를 갖는 성숙 hIL-1β의 유도체.
- 제24항에 있어서, 위치 1 내지 2의 어느 1개 또는 2개에서만 아미노산 치환체를 갖는 유도체.
- 제25항에 있어서, 위치 1에서 아미노산 치환체를 갖는 유도체.
- 제26항에 있어서, 치환체가 Ala 대신 Thr인 유도체.
- 제25항에 있어서, 위치 1 및 2에서 2개의 아미노산 치환체를 갖는 유도체.
- 제28항에 있어서, 치환체가 Ala 및 Pro대신 각각 Thr 및 Met인 유도체.
- 제24항에 있어서, 위치 1 내지 3에서 3개의 아미노산 치환체를 갖는 유도체.
- 제30항에 있어서, 치환체가 Ala, Pro 및 Arg대신 각각 Thr, Met 및 Arg 대신 각각 Thr, Met 및 Glu인 유도체.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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