KR850000415B1

KR850000415B1 - 아실펩타이드의 제조방법

Info

Publication number: KR850000415B1
Application number: KR1019800004748A
Authority: KR
Inventors: 린크 한스; 지이버 피터; 브루노캄버
Original assignee: 시바-가이기 에이지; 아놀드 자일러, 에른스트 알테르
Priority date: 1979-12-14
Filing date: 1980-12-13
Publication date: 1985-03-26
Also published as: DK532180A; DD154098A5; ATE6251T1; DE3066654D1; NO803757L; EP0030920A3; EP0030920A2; NZ195817A; GR73621B; KR830004216A; AU6534580A; ES8200861A1; EP0030920B1; JPS5692850A; US4369179A; ZA807796B; IL61696A0; FI803849L; PT72191B; CA1161033A

Abstract

내용 없음.

Description

아실펩타이드의 제조방법

본 발명은 소마토스타틴 및 그의 동족체로부터 유도된 신규의 아실펩타이드의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 아실펩타이드는 소마토스타틴 및 그의 동족체의 유도체로 9위치의 라이신 잔기중의 ε-아미노그룹 및 임의로는 또한 4위치의 라이신 잔기중의 ε-아미노그룹 또는 N-말단아미노그룹이 카복실산잔기로 치환되어 있고, 개개의 아미노산을 제거시키거나 이들을 타아미노산으로 교환시킴으로써 소마토스타틴의 아미노산 서열이 변형된 것이다.

공지되어 있는 바와 같이, 다음 구조식의 환상 테트라데카펩타이드인 소마토스타틴 [science 179, 77(1973)]은 뇌하수체에 의해 조절되는 성장촉진 호르몬(소마토트로핀)의 분비를 억제한다.

또한 인슐린 및 글루카곤 분비와 같은 췌장 내분비선의 분비작용을 억제시킨다. 소마토스타틴 자체는 작용지속 시간이 너무 짧기 때문에 실제로는 이러한 중요작용이 충분히 이용될 수 없다. 또한 활성물질이 상기 언급된 호르몬중 하나에만 억제효과를 탁월하게 발휘하는 것이 바람직하다. 이러한 이유로 본래의 개개의 아미노산을 제거시키거나 이들을 기타의, 흔히 비천연성인, 아미노산으로 교환시켜 기본 서열을 변형시킴으로써 억제효과를 분리시키고 작용 시간을 가능한한 지속시키려는 시도가 행해져 왔다.

놀랍게도 본 발명에 의해, 소마토스타틴이나 동일한 작용을 지닌 그의 구조적 동족체의 9위치의 라이신 잔기중 ε-아미노산을 임의 치환된 알칸 카복실산으로 아실화시킴을 특징으로 하여 기본 구조를 매우 특이적으로 변형시킴으로써 기본 구조에서의 본래의 작용이 유지될 뿐만 아니라 흔히는 상기에 논의된 관점에서도 작용이 증가되며 특히 작용지속시간도 증가된 아실펩타이드가 제조됨이 밝혀졌다. 이러한 결과로 소마토스타틴이나 동족 활성물질의 생물학적 작용에 필수적인 것으로 생각되었던 Lys

잔기중의 말단 아미노그룹이 제거되었다는 사실이 더욱 놀랍다.

본 발명에 따르는 화합물은 기술적인 견지에서도 보다 작은 골격블룩(building blocks)으로 합성되므로 관련 아미노그룹 특히 라이신 잔기중의 ε-아미노그룹을 선택적으로 보호시킬 필요가 없으므로 합성법이 간편한 잇점이 있다.

이러한 관절에서, 본 발명의 아실펩타이드와 하기에 특별히 강조되는 이들의 대표적 화합물중 관련아미노그룹이 모두 동일 아실잔기를 수반하는 화합물이 바람직하다.

본 발명은 특히 소마토스타틴과 그의 동족체로부터 유도된 일반식(Ⅰ)의 아실펩타이드, 그의 무독성염 및 약물학적으로 허용되는 콤플렉스의 제조 방법에 관한 것이다.

상기 일반식에서

A_c는 유리 아미노그룹에 존재하는 임의 치환된 알칸카복실산의 아실잔기를 나타내고

또는 부분 구조식-NH-CH(R)-(CH₂)_n-CO-의 ω-아미노-저급알칸카복실산 잔기(구조식중 n은 0 또는 1 내지 6의 정수를 나타내고 R은 수소 또는 카복실을 나타내며, n=2이고 R이 수소이면, 환상 하이드로카빌잔기로 치환될 수 있으며 이러한 경우를 Gaba(Ar)로 표시한다)를 나타내며

B는 Lys, Lys(Ac)또는 Lys(X)(여기에서 X는 ε-아미노-보호그룹)을 나타내고

C는 Asn, Ala 또는 His를 나타내며

trp는 L-Trp, D-Trp 또는 예를들면 인돌핵중의 5-위치에 할로겐원자 특히 불소를 수반하는 동족체잔기를 나타내며,

G는 L-Ser, D-Ser 또는 탄소수 최대 8인 2급 α-아미노산잔기를 나타내며

a,b,c,f 및 g는 각기 독립적으로 0 또는 1을 나타낸다.

아실잔기 Ac를 생성하는 알칸카복실산은 치환되지 않았을 경우에는 탄소수 18이하인 경우가 바람직하며, 치환되었을 경우에는 탄소수 8이하인 경우가 바람직하다. 치환체로는 한편 하이드록실, 메르캅토, 메틸티오와 같은 저급알킬티오, 구아니디노, 카복실, 카복스아미도 및 특히 1급 아미노 그룹, 두개의 다른 탄소원자에 결합된 이미노그룹이 있는 반면 페닐, P-하이드록시페닐, 1-또는 2-나프틸, 2-, 3- 또는 4-피리틸, 2-또는 3- 인돌릴, 2-또는 4-이미다졸릴, 2-, 4-, 또는 5-티아졸릴, 2-티에닐 또는 2-푸릴 등의 모노- 또는 비사이클릭 하이드로카빌 또는 헤테로사이클릴 잔기가 있다. 산은 동일 또는 이종의 1개 이상의 치환체를 수반하며 탄소함유 치환체를 포함한 총탄소수는 바람직하게는 18이하이다. 한편으로 아세트산, 프로피온산, 부티르산, 이소부티르산, 발레르산, 이소발레르산, 카프로산, 에난트산, 운데카노산, 라우르산, 미리스트산, 팔미트산 및 스테아르산, 또 한편으로는 말론산, 석신산, 글루타르산, 아디프산, 피멜산 및 수베르산과 같이 단일하게 분지된 또는 비치환된 직쇄알칸-(모노 또는 디)-카복실산(전자는 탄소수 최대 18개, 후자는 탄소수 최대 9개)으로부터 유도된 아실잔기가 특히 바람직하다.

또한 펩타이드 골격블록으로써 천연적으로 존재하는 L-계열 α-아미노산 및 비천연의 D계열 에난티오머와 같이 그와 밀접한 관계의 동족체로부터 유도된 아실잔기가 특히 바람직하다. 바람직한 α-아미노산중 예를 들면 다음이 특히 적절하다 : 글리신, 알라닌, 발린, 로이신, 이소로이신, 페닐알라닌, 아스파르산, 글루탐산, 아르기닌, 라이신 및 히스티딘, 또한 β-알라닌, α-아미노부티르산, γ-아미노부티르산, 노발린, 이소발린, 노르로이신 및 오르니틴 및 또한 아스파라긴, 글루타민, 티로신, 트립토판, 메티오닌, 트레오닌, 세린 및 특히 α-아미노그룹이 알킬 잔기와 폐환되어 환을 형성한 프롤린과 하이드록시프롤린.

X로 표시되는 Lys

잔기중의 ε-아미노 보호그룹은 하기 기술된 바와 같이 정의된다. 상기의 아실그룹 Ac는 선택적으로 제거되어 아미노 그룹을 생성하나 ε-아미노그룹중의 아실그룹 Ac는 펩타이드 아미드결합을 손상시키지 않고는 분리될 수 없다는 점에서 근본적으로 구별된다.

Gaba(Ar)로 표시되는 잔기를 더 정확히 나타내면 다음 일반식과 같다.

상기식에서

R_α, R_β및 R_γ중의 하나는 비치환되거나 치환된 환상 하이드로카빌잔기 Ar이고 나머지 둘은 수소를 나타낸다. 잔기 Gaba(Ar)에 상응하는 치환된 γ-아미노부티르산은 H-Gaba(Ar)-OH의 간단한 구조식을 갖는다.

환상 하이드로카빌 잔기 Ar은 모노-, 디- 또는 폴리사이클릭 사이클로알킬 잔기 또는 적어도 한개의 방향족환을 함유하고 환탄소원자 최대 18, 바람직하개는 최대 12개를 함유하는 상응하는 아릴잔기이다. 사이클로알킬잔기중 바람직한 것은 3- 내지 8-원, 특히 5- 및/또는 6-원환을 갖는 것으로 예를들면 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸 및 특히 사이클로펜틸과 사이클로헥실, 또한 1-비사이클로[2,2,2]옥틸, 2-비사이클로[2,2,2]옥틸, 2-비사이클로[2,2,1]헵틸, 1- 또는 2-아다만틸 및 1-또는 2-퍼하이드로나프틸, 즉 비사이클로[4,4,0]데실이 있다. 아릴 잔기로는 특히 1- 또는 2-나프틸과 같은 나프틸 잔기, 1-, 2-, 5- 또는 6-(1,2,3,4-테트라하이드로나프틸)과 같이 상응하는 부분적으로 수소화된 나프틸잔기, 페닐, 안트릴, 플루오레닐 또는 아주 레닐이 있다. 이들 환상 하이드로카빌 잔기는 모두 1개 이상의 저급 지방족 하이드로카빌, 특히 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필 또는 부틸과 같이 탄소수 최대 4의 알킬잔기 및 또는 상기에 정의된 바와 같이 탄소원자 총수가 최대 18이 되는 환상, 특히 모노사이클릭, 하이드로카빌잔기를 수반한다. 환상 하이드로카빌 잔기의 예로는 4,4-디메틸사이클로헥실, 2-,3- 또는 4-톨릴과 같은 톨릴 및 4-비페닐릴과 같은 비페닐릴이 있다.

환상 하이드로카빌 잔기중의 방향족 잔기는 염소, 브롬, 요오드 및 특히 불소와 같은 할로겐, 페녹시, 메톡시를 포함한 탄소원자를 최대 4개 함유하는 상기 언급된 저급알킬 잔기중의 하나에서 유도된 저급알콕시, 니트로 및 아미노, 특히 1급 아미노, 디-저급 알킬 아미노 및 아실아미노, 예를 들면 아세트 아미노와 같은 알카노일 아미노 등의 치환체중 1개, 2개 또는 2개 이상의 동일하거나 다른 치환체로 치환될 수 있다. 특히 바람직한 것은 언급된 치환체로 치환된 페닐 잔기이다.

전기 Ar은 γ-아미노부티르산의 α-, γ- 또는 바람직하게 β-위치에 존재한다. 따라서 구조식 Gaba(Ar)의 특히 바람직한 잔기는 다음의 부티르산으로부 부터 유도된 것이다 : 4-아미노-3-페닐-, 4-아미노-3-사이클로헥실-, 4-아미노-3-(2-나프틸) 및 특히 4-아미노-3-(1-나프틸)-부티르산 및 4-아미노-3-(3-페녹시페닐)-부티르산.

심볼 G에서 언급된, 탄소원자를 최대 8개 갖는 2급 α-아미노산은 두개의 저급알킬잔기가 C-C결합, 산소원자, 유황(Ⅱ)원자 또는 임의로 저급알킬화된 질소원자에 의해 서로 연결되어 있고, 각각의 저급알킬 잔기는 탄소원자를 최대 6개 함유하며 두 개의 저급알킬잔기가 함께는 탄소원자를 최대 7개 함유하는, α-저급알킬아미노-저급알킬카복실산이다. 카복실산의 탄소골격의 기본이 되는 저급알킬잔기는 바람직하게 한개 이상의 탄소원자를 함유하며 특히 천연 아미노산중에 존재하는 것으로 예를 들면 부틸, 이소부틸, 펜틸 및 특히 에틸 또는 이소펜틸이 있다. 아미노그룹이나 질소 브리지의 치환체로써 존재하는 저급알킬잔기로는 메틸이 바람직하다. 두개의 저급알킬잔기를 임의로 연결시키는 C-C결합은 바람직하게 단일결합이다. α-아미노그룹은 바람직하게 천연아미노산 즉 L-아미노산에 상응하는 입체 배위로 되어 있다. 2급 α-아미노산의 잔기로는 L-프롤린과 같이 천연 아미노산으로 공지되어 있는 것 또는 4-옥사프롤린 및 특히 다음 일반식의 4-티아프롤린이나 N-저급알킬화된, 특히 N-메틸화된 지방족 아미노산 특히 N-메틸-L-로이신과 같이 구조적으로 이들과 직접적인 동족 체인 것이 특히 바람직하다.

상기 일반식중

Z는 산소 또는 유황이다.

본 발명에 따르는 아실펩타이드중 공지되어 있는 소마토스타틴-양 기본 펩타이드로부터 유도되었고 하기에 기술된 바와 같은 특정구조식을 지닌 경우를 주목해야 한다.

따라서 소마토스타틴, D-Trp

-소마토스타틴, [D-Trp

-D-Cys¹⁴-]-소마토스타틴, [(5-F)-D-Trp

]-소마토스타틴 및 데스-[Ala

-Gly

]-소마토스타틴은 다음 일반식(IA)의 아실펩타이드 골격을 이룬다 :

상기 일반식중

A'는 Ala-Gly-, Ac-Ala-Gly-, H- 또는 Ac-를 나타내고

Ac, B, trp 및 Cys는 처음에 기술된 바와 같다. 데스-[Ala

-Gly²]-데스아미노-Cys

-소마토스타틴 및 그의 구조적 동족체로부터 유도된 것이 일반식(IB)의 아실펩타이드이다.

상기 일반식중

Ac, Bmp, B, trp 및 G는 처음에 언급된 바와 같고 C'는 Asn 또는 His를 나타낸다. 일반식(Ic)의 아실펩타이드는 [D-Trp

]-소마토스타틴이나 [D-Trp

-D-Cys¹⁴]-소마토스타틴중 1,2,4,5,12 및 13위치에서 1개 이상의 아미노산이 제거된 올리고 펩타이드로부터 유도된다.

상기 일반식중

Ac, B 및 Cys는 처음에 언급된 바와 같고 a,b,c,f 및 g는 각기 독립적으로 0 또는 1을 나타낸다. A가 ω-아미노헵타노산잔기를 나타내고 D와 E가 함께 잔기

를 나타내며 a는 1을 나타내고 b,c,f 및 g는 0을 나타내며 일반식(ID)에 상응하는 일반식(I)의 비사이클릭 아실펩타이드는 (6-11)-시스틴 브리지를 갖는 동족체로부터 유도된다.

상기 일반식중

Ac 및 trp는 처음에 언급된 바와 같다. 최종적으로 소마토스타틴 환중 6개 이상 11개 이하의 아미노산의 부분서열을 지닌 유황을 함유하지 않은 사이클로펩타이드는 일반식(IE)의 아실펩타이드골격을 이룬다.

상기 일반식중

a,b,c,f 및 g는 각기 독립적으로 0 또는 1을 나타내며, Ac, trp 및 B는 처음에 언급된 바와 같고, A''는 잔기-NH-CH(R)-(CH₂)_n-CO-또는 전술된 Gaba(Ar)을 나타내며, C''는 Asn 또는 Ala를 나타낸다.

일반식(IE)의 아실펩타이드로는, Ac가 앞에서 정의된 바와 같이 일반적이면서 특히 강조된 의미를 가지며, trp는 D-Trp를 나타내고, A''는 ω-아미노-저급 알칸카복실산 잔기를 나타내고(이때 R은 수소를 나타내며 n은 0 또는 정수 1 내지 3을 나타냄), B는 Lys, Lys(Ac) 또는 Lys(INOC)(이때 INOC는 ε-아미노그룹에 존재하는 이소니코티닐옥시카보닐을 나타낸다)을 나타내며 f 및 a,b,c와 g중 적어도 하나는 1인 반면에 나머지는 각기 독립적으로 0 또는 1을 나타내는, 예를들면 a=0, b,c,f,g=1이거나, a,,b=0, c,f,g,=1이거나 a,b,c,=0, ,f,g=1이거나, a,b,g=0, c,f=1인 화합물이 특히 바람직하다.

일반식(IE)의 아실펩타이드중 가장 특히 바람직한 것은 Ac가 앞에서 정의된 바와같이 일반적이면서 특히 강조된 의미를 가지며 trp는 D-Trp를 나타내고 A''는 앞에서 정의된 잔기 Gaba(Ar), 특히 β-위치에 하이드로카빌 Ar을 갖는 것이나 ω-아미노-저급알킬카복실산 잔기(이때 n온 0 또는 정수 1 내지 6, 특히 1 내지 3, 더욱 특히 2를 나타내며 R은 카복실 및 특히 수소를 나타냄)를 나타내며, C''는 Ala 및 특히 Asn을 나타내고, a=1, c=0 또는 특히 1이고 b,f 및 g=0인 것이다. 이들 중에서 잔기 A''중 n=5이고 R은 수소 또는 카복실을 나타내며, a=1이고 b,c,f 및 g=0인 화합물 및 일반식(IF)의 화합물이 특히 중요하다.

상기 일반식중 trp₀는 5-위치에 불소를 수반할 수 있는 D-Trp를 나타내고,

Ac는 앞에서 정의된 바와같이 일반적이면서 특히 강조된 의미를 갖고

u는 수소 또는 앞에서 정의된 잔기 Ar 특히 페닐, 사이클로헥실, 2-나프틸 및 특히 1-나프틸 또는 m-페녹시페닐 잔기를 나타낸다.

잔기 Ar로 치환된 결과 r-아미노부티르산의 β-탄소원자에 비대칭 중심이 생성되며 그 결과 각 경우 본 발명에 따르는 사이클로펩타이드가 두개의 부분입체 이성체 형태로 존재하게 되며 따라서 동일목적에 경우에 따라서는 별도로 또는 부분입체 이성체 혼합물로서 사용될 수 있다.

가장 특히 바람직한 것은 Ac가 제조방법을 시행하는 실시예에 따르는 아실 잔기를 나타내거나 실시예중에 나타낸 아실펩타이드중의 하나와 같은 기본 구조를 갖는 상기 일반식(Ⅰ) 내지 (IF)의 아실펩타이드이다. 실시예중에 나타낸 아실펩타이드가 가장 바람직하다.

상기에서 일반적용어 또는 바람직하다고 정의된 유리 카복실그룹을 갖는 일반식(Ⅰ)의 아실펩타이드는 나트륨, 칼륨, 칼슘 또는 마그네슘염 등의 염이나 암모니아 또는 생리학적으로 무독한 유기 질소함유 염기로부터 유도된 암모늄 염의 형태로 존재할 수도 있다. 상기에서 일반적용어 또는 바람직한 것으로 정의된 유리 아미노그룹을 갖는 일반식(Ⅰ)의 아실펩타이드는 그들의 염의 형태 즉 산부가염의 형태로 존재할 수도 있다. 적절한 산부가염은 특히 통상적인 치료학적으로 무독한 산과의 생리학적으로 무독한 염이다 : 무기산중에는 염산과 같은 하이드로할산 및 황산, 인산 또는 피로인산 등이 언급되어야 하며 유기산중에는 벤젠설폰산 및 P-틀루엔설폰산과 같은 설폰산 또는 메탄설폰산과 저급알칸설폰산, 또한 아세트산, 락트산, 팔미트산 및 스테아르산, 말산, 티타르산, 아스코르브산 및 시트르산과 같은 카복실산 등이 언급되어야 한다.

본 발명에 따르는 일반식(Ⅰ)의 아실펩타이드는 콤플랙스와 형태로 존재할 수 도 있다. 콤플랙스는 구조가 아직 충분히 밝혀지지 않았고 펩타이드에 특정 무기 또는 유기물질을 가하여 제조된 것으로 펩타이드에 지속작용을 주는 화합물인 것으로 이해되어야 한다. 이들 물질로는 예를 들면 ACTH 및 기타의 부신피질 자극 활성펩타이드가 기술된다. 언급되어야 할 것으로는 예를들면 칼슘, 마그네슘, 알루미늄, 코발트 및 특히 아연과 같은 금속으로부터 유도된 무기화합물로 특히 포스페이트, 피로포스페이트 및 폴리포스페이트등의 용성이 적은 염은 물론 이들 금속의 하이드록사이드 또한 알칼리 금속 폴리포스페이트 예를들면 Calgon

N, Calgon

322, Calgon

188 또는 Polyron

B12이 있다. 작용을 지속시키는 유기물질로, 예를들면 폴리옥시젤라틴과 같은 비항원성 타입의 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 및 카복시메틸셀루로즈, 또한 알긴산의 설폰산 인산 에스테르, 덱스트란, 폴리페놀 및 폴리알콜 특히 폴리플로레틴 포스페이트 및 파이트산 및 또한 프로타민이나 폴리글루탐산과 같은 염기성 또는 특히 산성 아미노산의 중합체 및 공중합체가 있다.

달리 표시된 바가 없다면, 단축형 아미노산 잔기는 천연에 존재하는 L-계열 α-아미노산잔기를 의미한다.

달리 표시된 바가 없다면, 유기 잔기 또는 화합물과 관련하여 표시된 용어 "저급"은 탄소원자를 최대 7개, 바람직하게는 탄소원자를 최대 4개 함유하는 잔기나 화합물을 나타낸다.

본 발명에 따르는 신규의 아실펩타이드는 소마토스타틴의 작용과 근본적으로 유사한 생리작용을 지닌다. 따라서 소마토스타틴과 유사한 치료적 적용증, 예를들면 말단 비대증 또는 당뇨병의 경우와 같이 성장촉진호르몬이나 글루카곤의 분비가 비정상적으로 높은 기능성 질환 치료에 유리하게 사용될 수 있다. 이들 화합물은 또한 위장관에서의 혈액소실을 억제시키므로 이 분야의 적용증에도 성공적으로 이용될 수 있다. 이들 화합물은 또한 다른 치료적으로 유효한 화합물 예를들면 더욱 변형된 아실 잔기 Ac를 갖는 화합물 제조의 유용한 중간 물질로서 이용될 수 있다.

본 발명에 따르는 아실펩타이드는 공지되어 있는 펩타이드화학의 통상의 제조방법에 의해 제조된다. 따라서, 예를들면 9-위치에 라이신잔기중의 유리 ε-아미노그룹을 갖는 상응하는 펩타이드를 아실화시켜 제조하며 이때 유리하이드록실그룹 및/또는 기타의 유리 아미노그룹을 일시적으로 임의 보호시킨다. 일반식(Ⅱ)의 펩타이드를 알칸카복실산 Ac₀OH(이때 Ac₀는 앞에서 정의된 아실잔기 Ac에 상응하는 잔기를 나타내며, 여기에 존재하는 아미노 및 하이드록실그룹은 각기 보호그룹 X 및 X' 또한 Y를 수반한다)이나 산의 반응성 유도체로 아실화되고 경우에 따라 또는 필요에 따라 생성물에서 보호그룹 X 및 X', 또한 Y를 제거하여 아미노그룹과 하이드록실그룹을 유리시킨다.

상기 일반식중

A₀는 전술된 잔기 A에 상응하는 잔기를 나타내며, 이때 N-말단 아미노산 잔기의 α-아미노 그룹은 하기에 기술된 바와같이 정의되는 α-아미노-보호그룹 X'를 수반할 수 있고, Y₀는 산소원자에 존재하는 수소원자 또는 하기에 기술된 바와같이 정의되는 하이드록실보호 그룹 Y를 나타내며 다른 부호는 전술된 정의를 나타낸다.

상기 언급된 N-만단 아미노산 잔기는 모든 A 또는 A₀에 존재하는 것이 아니라 심볼 A'로 표시되는 경우에만 존재하며 잔기 H-Ala-또는

를 나타낸다.

심볼 X'는 매우 광범위하게는 펩타이드쇄의 합성에 사용되며 하기에 자세히 기술되는 α-아미노-보호그룹에 상응한다. 잔기 A₀및 잔기 Ac₀모두에 바람직하게는 유사한 보호그룹, 더욱 바람직하게는 동일한 보호그룹을 사용하며 아실화 반응후에는 동시에 제거시킨다.

산 Ac₀OH의 반응성 유도체로는 예를들면 무수물 특히 구조식 Ac₀-O-Ac₀의 대칭 무수물 또는 석시닐 무수물이나 글루타릴 무수물과 같은 디카복실산의 환상 무수물이나, 트리플루오로 아세트산과 같은 이종유기산이나 무기산과의 혼합무수물, 산아지드 또는 산할라이드 특히 산클로라이드가 있다. 반응성 산유도체로는 활성화된 에스테르가 바람직하며 예를들면 산 Ac₀OH가 2,4,5-트리클로로페놀, 펜타클로로페놀, 펜타플루오로페놀, 2-니트로페놀 또는 특히 4-니트로페놀, 또는 N-하이드록시석신이미드, 1-하이드록시벤조트리아졸 또는 N-하이두록시피페리딘과 같은 N-하이드록시화합물 또는 특히 N, N'-디사이클로헥실이소우레아와 같은 N, N'-디치환된 이소우레아 또는 펩타이드 화학에 공지되어 있는 유사 활성성분(cf, Hou-ben-Weyl: Methoden der Organischen chemie : 4th edition, Vol. 15/I and II, E. t17 : Synthese Von Peptiden(Georg Thieme Verlag, Stuttgart ; 1974)으로 에스테르화된 것이다.

아실화는 바람직하게는 디옥산, 테트라하이드로푸란, 아세토니트릴, 피리딘, 디메틸포롬아미드, 디메틸아세트아미드, 디메틸 설폭시드, N-메틸피롤리돈, 헥사메틸포스포르산 트리아미드, 클로로포룸 및 메틸렌클로라이드와 같은 통상의 용매 및 이들의 혼합물중에서 공지된 방법에 의해 시행한다. 다른 방법으로는 4급 또는 특히 트리에틸아민, N-에틸모르폴린 또는 N-메틸피페리딘과 같은 3급 아민 등의 유기염기를 가하여 아실화될 수 있는 아미노그룹을 탈양자화된 상태로 제조할 수 있다. 반응온도는통상 -20 내지 +70℃ 바람직하게는 약 0℃내지 실온이다.

활성 에스테르는 하이드록실그룹보다 아미노그룹을 우선적으로 아실화시키므로 하이드록실그룹을 보호할 필요가 없게되므로 아실화제로써 일반적으로 유리하다. 그러나 디카복실산을 이용한다면 환상무수물이 바람직하다. 바람직하지 않은 0-아실화를 피하기 위하여서는 일반식(Ⅱ)의 출발물질의 유리아미노그룹당 아실화제를 통상 1당량만 사용한다.

그러나 산클로라이드와의 반응에서와 같이 선택적 아실화를 하지 않는 것이 더욱 유리할 경우에는 아실화제를 과량 사용하고, 동시에 아실화된 하이드록실그룹은 보호된 하이드록실그룹에서와 동일한 통상의 방법 특히 물의 존재하에 수산화 나트륨 또는 수산화 칼륨으로 염기성 가수분해시키는 방법으로 하이드록실그룹을 유리시킨다.

보호그룹이 존재할 경우 이를 제거시키는 방법은 보호그룹의 종류에 따르며 각 경우 하기에 기술된 바와 같이 공지된 통상의 방법으로 시행한다. 잔기 A₀및 Ac₀에 존재하는 하이드록실-보호그룹 Y 및 α-아미노-보호그룹 X'의 제거는 의무적으로 하며 반면에 4-위치의 라이신 잔기중의 ε-아미노보호그룹 X는 원하는 경우에만 제거시킨다.

본 발명에 따르는 아실펩타이드는 유리의 하이드록실, 카복실 및 또는 아미노그룹을 일시적으로 보호시키면서 아실펩타이드에 상응하는 선상 펩타이드를 폐환시킴으로써 제조할 수 있다. 상응하는 선상 펩타이드는 아미노산 서열이 본 발명에 따르는 환상 펩타이드와 동일하나, 환을 형성하는 두 개의 인접 아미노산 사이의 결합이 끊어져 있고 활성형으로 존재할 수도 있는 상응하는 말단 기능그룹으로 대체된다. 환이 두개의 연속 아미노산사이의 아미드 결합에서 절단되어 있으면, 선상 펩타이드의 만단 그룹은 카복실그룹 및 아미노그룹이지만, 환이 두 개의 시스틴잔기, 특히 3- 및 14-위치의 잔기에서 절단되어 디설파이드 결합이 끊어져 있으면, 상응하는 선상펩타이드는 말단 그룹으로써 두개의 유리 또는 작용적으로 변형된 메르캅토그룹을 갖는다. 말단그룹의 종류에 따라 적절한 폐환법을 사용한다. 따라서 본 발명에 따르는 화합물은 일반식(Ⅲ)의 상응하는 선상펩타이드를 폐환시켜 제조할 수 있다.

H-[Ia]-V (Ⅲ)

상기 일반식중

Ia는 펩타이드 환중의 두 개의 인접 아미노산 잔기사이의 아미드결합이 절단되어 있는 일반식(Ⅰ)에 상응하는 잔기를 나타내며, V는 유리의 하이드록실그룹, 활성그룹에 의해 변형된 하이드록실그룹 또는 하이드라지노 그룹-NH-NH₂을 나타내고, 폐환 반응에 관여하지 않는 아미노, 카복실 및 하이드록실그룹은 필요하면 보호시켰다가 반응후에 보호그룹을 제거한다.

일반식(Ⅲ)의 선상펩타이드중 잔기 A가 잔기 [Ia] 중에 말단 아미노산으로써 존재하는 경우가 바람직하다. 이들 바람직한 출발물질은 일반식(Ⅲ_a) 및 특히 일반식(Ⅲ_b)로 특징지울 수 있다.

상기 일반식중

Ac, A, B, C, D, trp, E 및 G 또한 a, b, c, f 및 g는 앞에서 정의된 바와 같으며, V는 바로 상기에서 정의된 바와 같다. 특히 바람직한 것은 잔기 A중에 유황-함유아미노산이 존재하지 않는 일반식(Ⅲ_a) 및 (Ⅲ_b)화합물이다.

심볼 V로 표시되는 작용성 그룹은 C-만단 아미노산 잔기의 카보닐그룹을 보조하며 이 그룹과 함께 경우에 따라 유리 카복실그룹, 활성화에스테르그룹 또는 카바졸릴 그룹을 형성한다.

하이드록실그룹을 변형시키는 활성그룹은 특히 N-하이드록시석신이미드, 1-하이드록시벤조트리아졸, N,N'-디사이클로헥실이소우레아, 2,4,5-트리클로로페놀, 2-니트로페놀, 4-니트로페놀, 펜타클로로페놀 또는 펜타플루오로페놀의 활성화 에스테르를 생성시키는 것이나 또한 펩타이드화학(cf. Houben-Weyl, Volume 15/Ⅱ)에 공지된 것도 무방하다.

일반식(Ⅲ)의 선상 펩타이드를 본 발명에 따라 폐환시키는 방법은 아미드결합 생성에 통상적으로 사용되는 커플링 방법에 의한 공지된 방법으로 시행하며, 분자간 복축합을 희생하고 분자내 폐환에 유리하도록 커플링 조작에 영향을 주기 위해서 펩타이드 출발물질은 매우 낮은 농도로 사용하여야 한다.

선상 펩타이드는 중량/용적 농도가 약 0.01 내지 1.0%, 바람직하게는 0.1%에 상응하도록 약 1.10^-4내지 1.10^-2M, 바람직하게는 약 1.10^-3M로 사용하는 것이 좋다. 반응혼합물은 처음부터 상응하게 희석시키거나 반응혼합물에 출발물질 및 임의로는 나머지 시약을 천천히 적가하여 계속적으로 희석할 수도 있다.

폐환반응은 바람직하게 a) V가 유리하이드록실그룹을 나타내는 일반식(Ⅲ)의 출발물질을 아미노, 카복실 및 하이드록실그룹을 일식적으로 보호시키면서 활성에스테르 생성 성분의 임의 존재하에 카보디이미드로 처리하거나 b) V가 변형되어 활성화 에스테르를 형성한 하이드록실그룹을 나타내고 말단 아미노그룹은 양자화된 상태로 존재하며, 적어도 폐환반응에 관계하지 않는 아미노그룹 및 카복실그룹은 보호된 일반식(Ⅲ)의 출발물질을 유기 염기와 반응시키거나 c) 먼저 V가 그룹-NHNH₂를 나타내며 적어도 폐환반응에 관계하지 않는 아미노그룹은 보호된 일반식(Ⅲ)의 출발물질을 산성조건하에서 아질산 또는 그의 저급알킬에스테르로 처리한 후 상기 언급된 저농도에서 과량의 유기염기로 폐환시킴으로써, 상기에 표시한 출발농도에서 시행한다.

카복실그룹은 하기에 기술된 방법에 의해 보호그룹 W로 보호시킨다. 아미노 및 하이드록실그룹을 보호하기 위해서는 각기 그룹 X와 X', 및 Y를 사용한다.

폐환반응은 디옥산, 테트라하이드로푸란, 아세토니트릴, 피리닌, 티메틸포룸아미드, 디메틸아세트아미드, 디메틸설폭시드, N-메틸피롤리돈, 헥사메틸포스포르산 트리아미드, 클로로포름, 메틸렌클로라이드 또는 에틸 아세테이트 및 그의 혼합물과 같은 적절한 용매중에서 시행한다.

변형방법 a)에서는 폐환반응을 카보디이미드, 바람직하게는 N,N'-디사이클로헥실 카보디이미드를 사용하여 시행하며 과량 사용하는 것이 좋다 : 이때 유리 카복실그룹을 갖는 일반식(Ⅲ)의 출발물질은 먼저 디사이클로헥실이소우레아(또는 동족 이소우레아)의 활성화 에스테르로 전환되고 생성된 활성화에스테르가 동일반응 계내에서 즉시 계속 반응하는 것으로 추측된다. 활성 에스테르의 중간물질 생성은 의심할 바 없이 보조제로서 활성에스테르 생성성분을 첨가시켰기 때문이며 이러한 목적으로 펩타이드 화학에서 통상 사용하는 활성 에스테르 생성성분으로는 특히 2,4,5-트리클로로페놀, 2-또는 4-니트로페놀, 펜타클로로페놀 및 펜타플루오로페놀이 있으며 더욱 특히는 N-하이드록시화합물 그중에서도 N-하이드록시 석신이미드, N-하이록시피페리딘 및 무엇보다도 1-하이드록시벤조트리아졸이 특히 유리하다. 이 방법의 경우, 조작온도는 일반적으로 0 내지 70°, 바람직하게는 35 내지 55°이다.

미리 제조된 활성에스테르 특히 이미 지적된 화합물로 시행하는 방법 b)의 경우에는, 말단 아미노그룹이 유기 염기에 의해 탈양자화되는 즉시 자연적으로 폐환이 이루어진다. 사용되는 염기는 바람직하게 4급 또는 특히 3급 아민이며, 예를들면 트리에틸아민 또는 N-에틸모르폴린이다. 이 조작은 10°내지 30°에서 특히 실온에서 시행하는 것이 바람직하다.

방법 c)에서는, 1단고 즉 아질산이나 그외 에스테르로 처리하여 산 아지드를 생성하는 과정은 계속되는 폐환과정에서 보다 현저히 높은 농도의 출발물질로 서행하는 것이 좋다. 이 조작은 에틸 나이트라이트, 이소아밀 나이트라이트 및 특히 3급 부틸 나이트라이트와 같은 저급알킬나이트라이트 약 1당량으로 염산매질중, 약 -30°내지 -5°, 바람직하게는 약 -20°온도에서 시행하는 것이 유리하다. 나이트라이트는 약간 과량 사용하는 것도 무방하다. 생성된 아지드용액을 필요한 정도로 희석시킨 후 약 0°내지 35°온도에서 과량의 유기 염기, 예를들면 상기 언급된 것중 하나를 사용하여 염기성화시키면 방법 b)에서와 같이 자연적으로 폐환이 이루어진다.

본 발명에 따르는 화합물이 D- 또는 L-시스테인이나 β-메르캅토프로피온산과 같은 유황함유아미노산 잔기를 1쌍 함유하는 특정한 경우에는, 일반식(Ⅳ)의 상응하는 선상펩타이드를 산화시켜 디설파이드 브리지를 생성시키고, 임의로는 메르캅토 보호그룹 T는 미리 또는 동시에 제거시키며 임의로 보호된 상태로 존재하는 아미노, 카복실 및 또는 하이드록실그룹을 유리시킴으로써 제조할 수 있다.

T₀-[Is]-T₀(Ⅳ)

상기 일반식중

Is는 유황 함유아미노산 잔기사이의 디설파이드 결합이 절단되어 있는 일반식(Ⅰ)에 상응하는 잔기를 나타내며, T₀는 수소 또는 메르캅토 보호그룹 T을 나타낸다.

선상 펩타이드(Ⅳ)는 특히 일반식(Ⅵ_a) 중의 하나이다.

T₀-A₁-(b)_b-(c)_c-Phe-Phe-trp-Lys(Ac)-Thr-E-(Thr)_f-(G)_g-A₂-T₀(Ⅳ_a)

상기 일반식중

T₀는 바로 위에서 정의된 바와 같으며, 기타의 부호는 전술된 바와 같다.

그러나 선상 펩타이드(Ⅳ)는 일반식(Ⅳ_b)중의 하나이기도 하다.

상기 일반식중

A''는 A에서 언급된 유황을 함유하지 않는 아미노산잔기를 나타내며, T₀는 바로 위에서 정의된 바와 같으며 나머지 부호는 전술된 바와같다.

산화에 의한 폐환반응은 일반적으로 공지된 통상의 방법에 의해 시행한다. 모든 보호그룹을 미리 제거시킨 일반식(Ⅳ)의 선상펩타이드를 산화시킬 수 있다. 선행 합성법에 의해 대부분의 경우에서 제조되는 바와 같이 일반식(Ⅳ)의 선상펩타이드가 보호된 아미노, 하이드록실 및 또는 카복실 그룹을 갖는 형태일 때는 먼저 폐환시킨 후에 보호그룹(즉 그룹 X, X', Y 및 W)을 제거시키는 것이 유리하다. 이러한 경우 존재하는 카복실그룹은 3급 부틸 에스테르로 보호시키고, ε-아미노그룹은 3급-부톡시카보닐그룹에 의해 보호시키고, 세린 및 트레오닌 잔기중의 하이-드록실그룹은 3급-부틸 에테르로 보호시키며 메르캅토그룹은 트리틸, 아세트 아미노 메틸, P-메톡시벤질, PCH 또는 MPCH 또는 테트라하이드로 피라닐그룹(Thp)에 의해 보호시키는 것이 바람직하다. 아세트아미노메틸의에는 이들 모든 작용성 그룹은산을 1단계로 작용시켜(산첨가분해)제거시킬 수 있다. 그러나 트리틸, 아세트아이노메틸 또는 테트라하이드로피라닐 타입의 메르캅토 보호 그룹은 경우에 따라 초산제이수온과 같은 중금속염 및 황화수소로 선택적으로 제거시킬 수 있으며 이때 3급부틸 타입의 보호그룹은 그대로 유지된다. 이러한 방법으로 유리 메르캅토 그룹을 갖는 선상 펩타이드가 제조되며 이는 공지된 방법에 의해 요오드, 유기용매중의 디요도에탄 또는 산소 특히 액체 암모니아중의 대기산소와 같이 대기중의 산소로 산화시킴으로써 폐환될 수 있다. 또한 메르캅토그룹을 보호하는 트리틸, 테트라하이드로피라닐 또는 아실아미노 메틸그룹을 제거시키는 동시에 메탄올, 아세트산 또는 특히 디메틸포름아미드 중에서 요오드로 디설파이드 브리지를 생성시키고, 언급된 타입의 나머지 보호그룹은 그대로 두었다가 다음에 제거시키는 것이 더욱 유리하다.

보호그룹의 제한적 선택은 특정 목적에 따라 결정하며, 이는 수개의 작용성 그룹을 보호시켜야 할 경우에 특히 유리한 조합을 선택하기 위해 필요하다.

ε-아미노 보호그룹 X 로는 적절한 참고문헌(예를들면 Houben-Weyl : Methoden der Origanischen chemie 4th edition, Vol. 15/I.E.

: Synthese Von Peptiden : (Georg Thieme Verlag, Stuttgart : 1974)에 개략적으로 기술되어 있는 바와같이 펩타이드 화학에서 통용되는 아미노 보호그룹이면 어느 것이든 사용이 가능하다.

따라서 예를들면 환원이나 염기에 의해 제거될 수 있는 아미노보호그룹이 사용될 수 있으며 예를들면 특히 벤질옥시카보닐그룹 및 방향족 잔기가 할로겐원자, 니트로그룹, 저급알콕시그룹 및 저급알킬잔기로 치환된 벤질옥시카보닐그룹 예를들면 P-클로로-및 P-브로모 벤질옥시카보닐, P-니트로벤질옥시카보닐, P-매톡시벤질 옥시카보닐, P-톨릴옥시카보닐그룹, 또는 이소니코티닐옥시카보닐그룹과 아실그룹 예를들면 P-톨루엔설포닐, 벤젠설포닐, 0-니트로벤젠 설페닐그룹, 포밀, 트리플루오로아세틸 또는 프탈로일이 있다.

유리한 ε-아미노보호그룹 X는 β-위치에 3개의 탄화수소잔기로 치환된 실릴그룹 예를들면 트리페닐 실릴, 디메틸부틸-실릴 또는 특히 트리메틸실릴그룹을 수반하는 에록시카보닐 그룹이다. β-(트리저급알킬실릴)-에록시카보닐그룹 예를들면 특히 β-(트리메틸실릴)-에톡시카보닐그룹과 같은 β-(트리하이드로카빌실릴)-에톡시카보틸그룹은 보호시킬 ε-아미노그룹과 함께 상응하는 β-트리하이드로 카빌실릴 에톡시카보닐아미노그룹(예를들면 β-트리메틸실릴에톡시 카보닐아그룹)을 형성하며, 이는 산가수분해 및 가수소분해에 대해서는 안정하나 매우 특이적이고 매우 온화한 조건하에서 플루오라이드 이온의 작용에 의해서는 제거될 수 있다. 이러한 점에서는 카복실보호그룹으로써 하기에 기술된 β-실릴에틸 에스테트그룹과 유사하게 작용한다(합성시에 이러한 유사점을 특히 고려하여야 한다 : 그러나 어떠한 경우에는 이들 보호그룹중의 하나를 사용하면 다른 보호그룹의 동시 사용이 배제된다). β-실릴에틸 에스테트에 의한 카복실그룹의 보호에 관련한 내용은 하기에 자세히 기술한다.

산첨가분해에 의해 제거될 수 있는 그룹으로는 3급-아밀옥시카보닐, 이소프로폭시카보닐, 디이소프로필메톡시카보닐, 알릴옥시카보닐, 사이클로펜틸옥시카보닐, 사이클로헥실옥시카보닐, d-이소보닐옥시카보닐 및 아다만틸옥시카보닐그룹과 같은 3급 부톡시카보닐그룹 및 동족그룹 및 벤즈히드릴과 트리페닐메틸(트리틸)과 같은 아랄킬 타입의 그룹, 또는 스위스 연방 특허 제509,266호에 기술된 2-(P-비페닐릴)-2-프로폭시카보닐타입의 특정 아랄콕시카보닐그룹이 가장 바람직하다.

하이드록실 보호그룹 Y로는 펩타이드 화학에서 이러한 목적으로 통상 사용하는 그룹중 어느 것이나 사용될 수 있다. 상기의 인용문헌 참조(Houben-Weyl). 2-테트라하이드로 피라닐 및 더욱 특히는 3급-부틸 또는 3급-부톡시 카보닐과 같이 산첨가분해에 의해 제거될 수 있는 그룹이 바람직하다. 또는 환원이나 염기를 사용하여 제거될 수 있는 하이드록실 보호그룹이 사용될 수 있으며 예를들면 벤질 및 방향족 잔기가 할로겐, 니트로 및 또는 저급알콕시, 또는 아세틸과 같은 저급알카노일잔기 또는 벤조일과 같은 아로일 잔기에 의한 치환될 수 있는 벤질옥시카보닐 그룹이 있다. 또한 특정한 제한적 방법이 관찰되면 하이드록실그룹을 보호시키지 않는 방법도 가능하다.

카복실 보호그룹 W로는 이러한 목적으로 통상 사용되는 그룹이면 어느 것이나 사용될 수 있다. 상기의 참조문헌 참조(Houben-Weyl). 따라서 카복실그룹은 예를들면 하이드라지드를 생성시키거나 에스테르화시킴으로써 보호시킨다. 에스테트화에 적합한 것은 예를들면 메탄올, 에탄올, 시아노 메틸 알콜, 2,2,2-트리클로로에탄올, 벤조일 메틸알콜 또는 특히 3급-부틸 알콜 등의 저급의 임의 치환된 알콜 또는 그외에 임의 치환된 벤질 알콜이 있다. 특히 유리한 범위의 치환된 알칸올은 β-위치에 삼-치환된 실릴그룹 예를들면 트리페닐실린, 디메릴-부틸실릴 또는 특히 트리메틸실릴그룹을 함유하는 옙틸 알콜이다. 벨기에 왕국 특허 제851,576호에 기술된 바와같이 이들 알콜은 특히 카복실그룹 보호에 적합하며 이는 β-(트리메틸실릴)-에틸에스테르와 같은 상응하는 β-실리에틸 에스테르가 통상의 알킬 에스테르의 안정성을 지니며, 온화한 조건하에서 플루오르화 이온의 작용에 의해 나머지 보호그룹에는 아무 영향없이 선택적으로 제거될 수 있기 때문이다.

메르캅토 보호그룹 T로는 펩타이드 화학에서 이러한 목적으로 통상 사용되는 그룹중의 어느 것이나 사용될 수 있으며 메르캅토그룹은 특히 적절히 아실화 또는 알킬화시킴으로써 보호시킨다. 아실화에 적절한 것으로는 예를들면 아세틸 또는 벤조일잔기, 저급알킬카바모일 그룹(예를들면 에틸카바모일) 또는 상기에 언급된 바와같이 임의 치환된 벤질옥시카보틸 그룹이 있다. 알킬화에 적절한 것으로는 예를들면 3급 부틸, 이소부톡시 메틸, 벤질티오메틸 또는 테트라하이드로피라닐 잔기 또는 할로겐, 저급알콕시 또는 니트로에 의해 임의 치환된 아릴메틸잔기, 예를들면 벤질, β-메톡시벤질, 디페닐메틸, 디메톡시벤즈히드릴 또는 더욱 특히 트리틸 및 또한 페틸사이클로헥실(PCH), P-메톡시페닐 사이클로헥실(MPCH), 티엔-2-일사이클로 헥실이 있다(참조:Ber. 101, 681(1968)). R_t-CO-가 카복실산 잔기를 나타내는 일반식 R_t-CO-NH-CH₂-의 아실아미노 메틸잔기가 또한 매우 유리하다(참조 : Tetrahedron Letters 1968(26), 3056 및 독일연방공화국 공개공보 제2,060,969호). 아실잔기 R_t-CO-는 지방족, 지환족, 방향족, 아르지방족 또는 헤테로사이클릭 카복실산 또는 카본산 모노-유도체(예를들면 카본산모노 에스테르 또는 카밤산)로부터 유도될 수 있다. R_t는 특히 임의로 치환된 저급알킬잔기, 예를들면 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸 또는 3급 부틸 잔기이며 염소, 트리폴루오로메틸 또는 니트로그룹과 같은 치환체를 함유할 수 있다. R_t는 또한 환구성 원자를 3 내지 8, 바람직하게는 5 또는 6개 함유하는 임의 치환된 사이클로알킬잔기, 예를들면 사이클로 펜틸이나 사이클로 헥실잔기, 또는 임의 치환된 방향족 또는 아르지방족, 바람직하게는 모노사이클릭잔기, 특히 임의 치환된 페닐 또는 벤질잔기, 예를들면 비치화된 페닐이나 벤질 또는 페닐잔기가 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐 또는 니트토로 치환된 페닐이나 벤질, 또는 티에닐이나 푸릴과 같은 모노사이클릭헤테로 사이클릭잔기를 나타낸다. 아실아미노 메틸그룹중 아세틸아미노메틸 그룹이 특히 바람직하다.

보호그룹 Y와 W 및 또한 하기에 자세히 기술된 α-아미노보호그룹 X'는 유사한 조건하에서 제거될 수 있도록 선택하는 것이 바람직하다: 이와 관련하여 특히 바람직한 것은 상기에서 이미 지적된 바와 같이 산첨가분해에 의해 제거될 수 있는 그룹이다. 따라서 모든 이들 보호그룹은 단일조작에 의해 제거될 수 있다 : 그러나 또한 이종의 보호그룹을 사용하여 각기 개별적으로 제거시킬 수도 있다.

그러나 보호그룹 X 즉 Lys⁴잔기중에 존재하는 ε-아미노보호그룹이 일반식(Ⅰ)의 최종 생성물에서 보존되어야 할 경우에는 잔기 X', Y 및 W를 그룹 X는 그대로 두고 이들만이 제거될 수 있도록 선택하여야 한다.

보호그룹은 일반적으로 공지된 방법에 의해 제거시킨다 : 산가수분해(산첨가분해)는 예를들면 트리플루오로 아세트산, 염산 또는 하이드로플루오로산을 사용하거나 보호그룹이 산에 민감할 경우에는 포름산 및 또는 아세트산과 같은 저급 지방족 카복실산을 사용하여 물 및 임의로 폴리할로겐화된 저급알칸올이나 저급알카논, 예를들면 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로프로판-2-을 또는 헥사플루오로아세톤 존재하에 시행한다. 환원에 의해 제거될 수 있는 그룹, 특히 벤질잔기를 함유하는 그룹은 가수소분해에 예를들면 팔라듐촉매하에 수소화시킴으로써 제거시키는 것이 바람직하다. 이소니코 티닐옥시 카보닐그룹은 아연 환원시켜 제거하는 것이 바람직하다.

염기성 그룹을 함유하는 본 발명에 따르는 최종 생성물은 분리방법에 따라 염기 또는 산부가염으로써 수득된다 : 계속하여 이들을 공지된 방법에 의해 상호전환시킬 수 있다. 마찬가지로 산성그룹을 갖는 최종생성물도 또한 염의 형태로 존해할 수 있으며 각 형태는 공지된 방법에 의해 나머지 다른 형태로 전환될 수 있다.

상기 언급된 콤플렉스 제조도 또한 공지된 방법에 따라 시행한다. 난용성 금속 화합물, 예를들면 알루미늄 또는 아연화합물과의 콤플렉스는 ACTH에 관해 공지된 것과 유사한 방법, 예를들면 염화아연이나 황산아연과 같은 관련금속의 용성염과 반응시켜 알칼리금속 포스페이트 및 또는 하이드록사이드로 침전시켜 제조하는 것이 바람직하다. 폴리옥시젤라틴, 카복시메틸셀루로즈, 폴리비닐피롤리돈, 폴리플로레탄 포스페이트, 폴리글루탐산 등의 유기화합물과의 콤플렉스는 이들 물질을 수용액중의 펩타이드와 혼합시켜 제조한다. 또한 알카리금속 폴리포스페이트를 사용하여 동일한 방법에 의해 불용성 화합물을 제조할 수 있다.

상기에 특징 지워진 일반식(Ⅲ) 및 (Ⅳ)의 출발물질과 달리 언급된 바가 없다면 그의 합성에 이용되는 중간 물질은 신규이며 또한 몇몇의 경우에서는 기타의 소마토스타틴 동족체, 예를들면 유사한 아미노산 부분 서열을 갖는 경우의 합성시 이용될 수 있다. 본 발명은 이들 출발물질 및 그의 제조방법도 포함한다. 이들은 공지된 방법으로 합성에 필요한 아미노산이나 펩타이드단위를 순서대로 서로 축합시켜 CO-NH결합을 생성시킴으로써 제조하며 이때 반응에 관계하지 않는 작용성 그룹은 일시적으로 보호시킬 수 있다.

이들 출발물질 및 필요한 모든 중간물질 제조시에 말단 α-아미노 및 카복실그룹의 보호그룹으로는 특히 장쇄 펩타이드합성에 통상적으로 사용되며 가용매분해나 환원에 의해 쉽게 선택적으로 제거될 수 있는 보호그룹이 적합하다. 이들 보호그룹은 이미 상기에서 수차례에 걸쳐 각기 심볼 X' 및 W로 언급되었다.

α-아미노보호그룹 X'의 예로는 다음이 있다. 벤즈히드릴, 트리틸, 디-(P-메톡시)-벤즈히드릴등의 디페닐메틸이나 트리페닐메틸그룹과 같이 할로겐, 니트동, 저급알킬 또는 저급 알콕시에 의해 임의 치환된 디 또는 트리시릴-저급알킬그룹 또는 예를들면 벤질옥시카보닐, P-브로모 또는 P-클로로벤질옥시카보닐, P-니트로벤질 옥시카보닐, P-메톡시벤질옥시 카보닐등의 방향족 잔기가 할로겐원자, 니트로그룹, 저급알킬 또는 저급알콕시그룹에 의해 임의 치환된 벤질옥시카보닐그룹, 또한 2-(P-비페닐릴)-2-프로폭시카보닐 및 스위스연방 특허 제509,266호에 기술된 유사 아릴옥시카보닐그룹과 같이 가수소분해에 의해 제거될 수 있는 카본산으부터 유도된 그룹. 4-위치의 라이신 잔기중에 임의 존재하는 ε-아미노 보호그룹 X는 보존되면서 α-아미노-보호그룹 X'는 선택적으로 제거될 수 있어야 한다. 또한 대부분의 경우 α-아미노보호 그룹제거시 임의 존재하는 카복실-또는 하이드록실-보호그룹 W 또는 Y로 손상되지 않은 것이 유리하다.

이러한 목적으로 사용되는 카복실보호그룹은 심볼 W의 정의와 관련하여 상기에 논의된 것과 동일하다.

이들 보호그룹은 공지된 방법에 의해 제거될 수 있다. 따라서 벤질옥시카보닐 그룹은 가수소분해에 의해 제거될 수 있으며 N-트리틸 그룹은 하이드로할산, 예를들면 하이드로플루 오르산 또는 바람직하게 염산과 같은 무기산과 포름산, 아세트산, 클로로아세트산 또는 트리플루오로아세트산과 같은 유기산으로 용매로서의 수성 또는 무수 트리플루오로 에탄올중에서(독일연방 공화국 공개공보 2346147호)제거될 수 있으며 3급 부톡시카보닐그룹은 트리플루오로아세트산 또는 염산으로 제거될 수 있고 2-(P-비페닐린)-이소프로폭시-카보닐그룹은 아세트산 수용액 또는 빙초산, 포름산(82.8%) 및 물(7 : 1 : 2)의 혼합물로 제거되거나 독일연방공화국 공개공보 제2,346,147호에 기술된 방법에 따라 제거될 수 있다.

β-실릴에틸 에스테르 그룹은 4급 유기염기의 플루오라이드 예를들면 테트라에틸암모늄 플루오라이드와 같은 플루오르화이온을 생성하는 시약으로 제거하는 것이 바람직하다. 또는 이들을 통상의 알킬에스 테르와 동일한 방법에 의해 알칼리 금속 하이드록사이드, 카보네이트 또는 비카보네이트를 사용한 알카리 가수분해시킴으로세 제거시키거나 하이드라진 하이드레이트를 사용한 하이드라진 첨가분해에 의해 상응하는 카바조일그룹으로 전환시킬 수 있다. 3급 부틸에스 테르는 산첨가분해로 제거시키는 것이 바람직하며 벤질에스 테르는 가수소분해로 제거시킨다.

일반식(Ⅲ) 또는 (Ⅳ)의 출발물질 제조시에 행해야 하는 아미노산 및 또는 펩타이드 단위의 축합은 공지된 방법으로 바람직하게는 보호된 α-아미노그룹과 임의로 활성화된 말단 카복실그룹을 갖는 아미노산 또는 펩타이드(=활성성분)를 유리 α-아미노그룹과 유리 또는 보호된, 예를들면 에스테르화된 말단 카복실그룹을 갖는 아미노산 또는 펩타이드(=수동적 성분)에 결합시키고 따라서 생성된 생성물 중의 말단 아미노그룹을 유리시키며, 유리 α-아미노그룹과 임의로 보호된 말단 카복실그룹을 함유하는 이 펩타이드를 다시 활성성분 즉 활성화된 카복실그룹과 보호된 α-아미노그룹을 갖는 아미노산이나 펩타이드와 반응시키는 방법에 의해 시행한다. 카복실그룹은 산아지드, 무수물, 이미다졸리드, 이속사졸리드 또는 활성화 에스테르, 예를들면, 하기에 기술되는 것중의 하나로 전환시키거나 N,N'-디사이클로헥실 카보디이미드와 같은 카보디이미드와 N-하이드록시석신이미드 또는 비치환되었거나 할로겐-, 메틸- 또는 메톡시 치환된 1-하이드록시벤조트리아졸이나 4-하이드록시벤조-1,2,3-트리아진-3-옥사이드(참조:독일연방공화국 공개공보 제1917690호, 제1937656호, 2202613호) 또는 특히 N-하이드록시-5-노르보넨-2,3-디카복시미드를 임의로 가하여 반응시키거나 또는 N,N'-카보닐디이미다졸과 반응시킴으로써 활성화시킬 수 있다. 카보디이미드법, 또한 아지드법, 활성화에스테르법과 무수물법, 메리필드법 및 N-카복시 무수물 또는 N-티오카복시무수물을 사용한 방법등은 가장 통상적인 커플링 방법이다.

상기에 언급된 바와같은 활성화에스테르를 생성하기 위해서는 페놀, 티오페놀, 티오크레솔, P-니트로티오페놀, 2,4,5-및 2,4,6-트리클로로 페놀, 펜타클로로페놀, 0- 및 P-니트로페놀, 2,4-디니트로페놀 및 P-사이클로페놀과 같이 친전자성 치환체로 임의 치환된 페놀 및 티오페놀, 또한 N-하이드록시석신이미드, N-하이드록시프탈 이미드 및 N-하이드록시피페리딘을 사용하는 것이 적합하다.

일반식(Ⅲ) 및 (Ⅳ)의 펩타이드를 제조하는 특히 바람직한 방법에서 사용되는 커플링 방법은 1-하이드록시벤조트리아졸 존재하에 N,N'-디사이클로헥실 카보디이미드를 사용하는 카보디이미드법이다. 말단 카복실그룹은 β-(트리메틸실릴)-에틸 에스테르 형태로 보호시키며 활성성분중의 α-아미노그룹은 벤질옥시카보닐그룹으로 보호하여 각 커플링단계후에는 가수소분해하여 제거한다. 4-위치의 라이신 잔기중의 ε-아미노그룹을 보호하기 위해서는 3급 부톡시카보닐그룹으로 아실화시키는 방법이 사용되며 세린 및 트레오닌 잔기중의 하이드록실그룹을 3급 부틸그룹으로 에테르화한다. 경우에 따라 이 두 보호그룹은 예를들면 트리플루오로 아세트산, 염산 또는 하이드로플루오르산을 사용한 산가수분해에 의해 1단계로 제거시킬 수 있다. 9-위치의 라이신 잔기중의 ε-아미노그룹은 아실화된 형태로 존재하므로 보호시킬 필요가 없다.

공지되어 있는 바와 같이 유황존재시에는 수소화 촉매의 활성도가 손상되며 기타의 매우 유용한 그룹은 가수소분해에 의해 제거될 수 있어 사용이 염려되기 때문에 유황함유 아미노산 잔기(Bmp 및 Cys)를 합성 최종단계에서 도입시키는 것이 바람직하다. 언급된 산중의 메르캅토그룹은 바람직한 방법의 시행에 특히 적합한 트리틸그룹으로 보호시키는 것이 유리하다.

사용된 방법에 따라 일반식(Ⅲ) 및 (Ⅳ)의 화합물은 염기나 산부가염의 상태로 또는 산이나 그의 염의 상태로 제조된다. 염기는 산부가염으로부터 공지된 방법에 의해 제조할 수 있다. 치료적으로 허용되는 산부가염 역시 염기를 상기에 언급된 염의 생성시키는 산과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 산과 그의 염은 각기 서로 유사한 관계에 있다. 유리 카복실그룹과 염기성 그룹 모두를 갖는 화합물은 내염의 형태로 존재할 수 있다.

유리상태와 염의 상태인 신규 화합물은 밀접한 관계를 갖고 있으므로 전술 및 후술된 용어 "유리화합물"에는 경우에 따라 그의 염이 포함되며 또한 "염"에는 경우에 따라 유리화합물이 포함된다(의미 및 목적에 따라).

본 발명은 또한 공정중의 어느 단계에서 중간물질로 수득되는 화합물을 출발물질로 사용하여 남은 공정단계를 수행하거나 출발물질이 반응조건하에서 생성되거나 유도체 예를들면 염의 형태로서 사용되는 공정의 태양에도 관한 것이다.

본 발명의 공정중 사용되는 출발물질은 특히 중요한 것으로 전술된 화합물을 생성시키는 것이 바람직하다

본 발명은 또한 일반식(I)의 화합물이나 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 콤플렉스를 함유하는 약제학적제제에 관한 것이다. 이들 제제는 정맥내, 근육내 또는 피하 또한 비강내로 비경구 투여함으로써 상기 언급된 적응증에 사용할 수 있다. 필요 용량은 치료해야 할 질환, 질환의 중중도 및 치료기간에 따른다. 인개용량 투여법은 관련환자의 개별적 시험에 따라 결정하는 것이 최선이다. 이들 인자를 결정하는 방법은 본 분야의 숙련자에게는 공지되어 있다. 그러나 일반적으로 주사시 화합물의 치료적 활성용량은 약 0.001 내지 0.2mg/체중 kg범위이다. 바람직한 범위는 약 0.0025내지 0.15mg/체중 kg이며 정맥주입 또는 피하주사로 투여한다. 따라서, 단위용량형으로 비경구투여시 약제학적제제는 투여방법에 따라 용량당 본 발명에 따르는 화합물중의 하나를 약 0.08내지 15mg함유한다. 활성물질외에 또한 약제학적 제제에는 통상 pH를 약 3.5 내지 7로 유지시키기 위한 완충제, 예를 들면 포스페이트 완충제와 등장이 되도록 염화나트륨, 만니틀 또는 솔비톨을 함유한다. 이들은 동결 건조형 또는 용액으로 존재할 수 있으며 용액에도 항균적으로 활성인 보존제 예를들면 0.2내지 0.3%의 4-하이드록시벤조산 메틸에스테르 또는 에틸에스테르를 함유시키는 것이 유리하다. 이들 제제중의 활성물질이 지속적인 작용 시간을 갖는 콤플렉스형이어야 할 경우에는 제조된 주사용 용액에 콤플렉스 생성성분을 가하여 상기 언급된 방법에 따라 직접 제조할 수 있다. 첨가제로는 주사용액 총용적에 대해 계산할때 프로타민(예를들면 설페이트로써) 0.5 내지 5.0중량%와 함께 아연(Ⅱ)염(예를들면 설페이트) 0.1내지 1.0중량%가 적절하다. 이 제제는 pH 약 3.5 내지 6.5의 용액이나 pH 약 7.5내지 8.0의 현탁액으로 제형화한다.

비강내 투야제제는 수용액 또는 겔, 유상용액 또는 현탁액 또는 지방함유연고 형태이다. 수용액 상태의 제제는 예를들면 일반식(I)의 활성물질 또는 그의 치료적으로 허용되는 산부가염을 7.2까지의 pH를 지닌 완충수용액중에 용해시키고 등장화제를 가하여 제조한다. 중합접착제, 예를들면 폴리비닐피롤리돈 및/또는 보존제를 수용액에 가하는 것이 유리하다. 단위용량으로 용액 약 0.05ml 나겔 0.05g 중에 약 0.08내지 15mg, 바람직하게는 0.25 내지 10mg을 함유시킨다.

유상의 비강내 투여용 약품은 예를들면 일반식(I)의 펩타이드 또는 그의 치료적으로 혀용되는산부가염을 오일중에 현탁시키고 알루미늄 스테아레이트와 같은 팽윤제 및 또는 글리세린 모노스 테아레이트, 소르비탄모노라우레이트, 소르비탄모노스테아레이트 또는 소르비탄 모노레이트등의 다가 알콜의 지방산 모노에스테르와 같이 HLB치("친수성-친유성균형"가 10미만인 계면활성제를 임의로 가하여 제조한다. 지방 함유연고는 예를들면 본 발명에 따르는 활성물질을 도포성이 좋은 지방성 기제중에 현탁시키고 HLB치가 10미만인 계면활성제를 임의로 가하여 제조한다. 유제연고는 유연하며 도포성이 좋은 지방성기제중의 펩타이드활성물질의 수용액을 HLB치가 10미만인 계면활성제로 연마하여 제조한다. 또한 이들의 모든 비강내투여용 약품에는보존제를 함유시킬 수 있다. 단위용량으로 기제물질 약 0.05 내지 0.1g중에 약 0.08 내지 15mg, 바람직하게는 0.25 내지 10mg을 함유시킨다.

또한 비강내 투여용으로는 활성물질이 분말상태로 흡기와 함께 취입되도록 하는 취입캡슐이나 약물학적 활성 물질을 분말 또는 용액이나 현탁액의 적(drop)상태로 분산시키는 에어로솔이나 분무제와 같은 흡입 또는 취입용 제제를 사용하는 것이 적합하다. 분말 분산작용을 갖는 제제는 활성물질외에 보조제를 함유한다 : 취입용캡슐은 예를들면 락토즈와 같은 고체담체를 함유하며 에어로졸이나 분무제는 실온이하의 비등점을 갖는 액체분사제와, 경우에 따라서는 액체 또는 고체의 비이온성이나 음이온성 계면활성제 및 또는 고체 희석제 등의 기타의 담체를 함유한다. 약물학적 활성 물질이 용액중에 함유되어 있는 제제에는 이외에 적절한 분사제와 필요에 따라 추가의 용매 및 또는 안정제를 함유한다. 적절한 압축 및 방출기를 사용할 필요가 있을때는 분사제 대신 압축공기를 사용할 수도 있다.

본 발명은 또한 약물학적 활성화합물로서 일반식(I)의 신규화합물과 그의 치료적으로 허용되는 산부가염을 전술된 적용중에 바람직하게는 약제학적 제제로서 사용하는 방법에 관한 것이다. 체중 약 70kg의 온혈동물의 1일 투여용량은 약 0.1내지 120mg이다. 본 발명을 다음 실시예에서 설명하며 여기에 제한적 의미는 없다. 온도는 섭씨를 나타낸다 : 아미노산, 펩타이드, 보호그룹등의 표시는 통상의 단축형, 예를들면 "Synthese von Peptiden"(

), volume XV of "Methoden der Org. Chemie" (Houben-Weyl)(1974 ; G Thieme, Stuttgart)에 기술된 약어를 사용한다.

다음 약어가 특히 사용된다:

Boc 3급-부톡시카보닐

Boc 3급-부틸(에테르생성그룹으로서)

OTmse 2-(트리메틸실릴)-에톡시(에테르생성그룹으로서)

Z 벤질옥시카보닐

TLC 박층크로마토그라피

TLC에서 달리 지시된 바가 없으면 흡착제로서는 실리카겔이 사용되고 용출제로서는 다음 시스템이 사용된다.

시스템 52 : n-부탄올/아세트산/물(71.5 : 7.5 : 21)

101 : n-부탄올/피리딘/아세트산/물(38 : 24 : 8 : 30)

104 : 클로로포름/메탄올/17%수성암모니아(41 : 41 : 8)

111B : n-부탄올/피리딘/25%수성암모니아/물(40 : 24 : 6 : 30)

112A : n-부탄올/피리딘/포름산/물(42 : 24 : 4 : 20)

151 : 클로로포름/메탄올/물/아세트산(0 : 42 : 10 : 0.5)

157 : 클로로포름/메탄올/물/아세트산(70 : 42 : 10 : 0.5)

157B : 클로로포름/메탄올/물/아세트산(85 : 13 : 1.5 : 0.5)

157C : 클로로포름/메탄올/물/아세트산(75 : 27 : 5 : 0.5)

157E : 클로로포름/메탄올/물/아세트산(55 : 47 : 13 : 5)

[실시예1]

[N^α-아세틸-Ala¹, N^ε-아세틸-Lys⁴, N^ε-아세틸-Lys⁹]소마토스타틴

디메틸포름아미드 175μl중의 소마토스타틴(펩타이드 함량 82%, 나머지는 물과 아세트산) 50mg을 4-니트로페닐 아세테이트 16mg과 트리에틸아민 12ul와 함께 2시간동안 실온에서 교반한다. 에테르/헥산으로 침전시킨 생성물을 세파덱스 LH-20

컬럼상 클로로포름/메탄올(1 : 1)중에서 여과시키고 TLC에 의한 순수한 분획을 분리시킨다.

수득량 : 44mg

TLC : [클로로포름/메탄올/물/빙초산(55 : 47 : 13 : 05)]

Rf : 0.46

[실시예 2]

[D-Trp⁸, N^ε-아세틸-Lys⁹-Gaba¹²]사이클로소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드

(아세테이트상태의) 100mg을 N-메틸모르폴린 15μl와 P-니트로페닐 아세테이트 20mg와 함께 디메틸포름 아미드 1.0ml에 응해시켜 실온에서 20시간동안 방치한다. 반응혼합물을 에틸아세테이트 20ml에 녹여 매회 물 5ml로 3회 세척한다. 황산나트륨상에서 건조시킨 후 유기상을 진공중에서 증발 농축시킨다. 잔류물에 에테르 5ml로 분쇄하여 여과한 후 에테르로 세척한다. 조생성물을 실리카겔 컬럼(70g)상에서 클로로포름/메탄올 혼합물을 사용하여(메탄올의 양은 5에서 15%로 점차 증량시킴) 크로마토그라피한다. 박층크로마토그라피에 의할 때 균일한 분획물을 합하여 진공중에서 증발농축시킨 후 3급 부탄올 20ml에 용해시켜 동결건조 한다.

TLc :[CHCl₃/CH₃OH/H₂O(14 : 6 : 1)] Rf : 0.65

[CHCl₃/CH₃OH (85 : 15)] Rf : 0.20

[n-부탄올/아세트산/H₂O (3 : 1 : 1)] Rf :0.77

다음의 N^ε-아실-Lys⁹유도체는 동일 펩타이드(유리 염기상태의)로부터 동일한 방법에 의해 제조되며 다음 실시예 3의 최종 생성물의 중간 물질로서 사용된다.

a)N^ε-(N-벤질옥시카보닐글리실)-Lys⁹유도체(Ac=Z-Gly)를 Z-Gly-P-니트로페닐에스테르 33mg으로 제조한다.

TLC : [CHCl₃/CH₃OH/H₂O(14 : 6 : 1)] Rf : 0.74

[CHCl₃/CH₃OH (85 : 15)] Rf : 0.29

b)N^ε-(N-벤질옥시카보닐로이실)-Lys⁹유도체(Ac=Z-Leu)를 Z-Leu-P-니트로페닐에스테르 38mg으로 제조한다.

TLC : [CHCl₃/CH₃OH/H₂O(14 : 6 : 1)] Rf : 0.80

[CHCl₃/CH₃OH (85 : 15)] Rf : 0.35

c)N^ε-(N-벤질옥시카보닐페닐알라닐)-Lys⁹유도체(Ac=Z-Phe)를 Z-Phe-P-니트로페닐에스테르 42mg으로 제조한다.

TLC : [CHCl₃/CH₃OH/H₂O(14 : 6 : 1)] Rf : 0.84

[CHCl₃/CH₃OH (85 : 15)] Rf : 0.39

d)N^ε-(N-벤질옥시카보닐프롤릴)-Lys⁹유도체(Ac=Z-Pro)를 Z-Pro-P-니트로페닐에스테르 39mg으로 제조한다.

TLC : 시스템 157B Rf : 0.35

e)N^ε-(N-3급-부톡시카보닐-N-벤질옥시카보닐-라이실)-Lys⁹유도체(Ac=Boc-Lys(Z)]를 Boc-Lys(Z)-P-니트로페닐에스테르 49mg으로 제조한다.

TLC : [CHCl₃/CH₃OH (8 : 2)] Rf : 0.55

[실시예 3]

[D-Trp⁸, N^ε-글리실-Lys⁹-Gaba¹²] 사이클로소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드

팔라듐-탄소(10%) 10mg을 가한후 메탄올 10ml와 1N아세트산 용액 0.5ml중의

(실시예 2a 참조) 78mg의 용액을 실은 및 정압하에서 10시간동안 수소화시킨다.

촉매를 여과시키고 여액을 진공중에서 증발농축시킨 후 잔류물을 3급-부탄올 20ml에 용해하여 동결 건조 한다. 상응하는 N^ε로이실-(Ac=Leu),N^ε-페닐알라닐-(Ac=Phe),N^ε-프롤릴-(Ac=Pro) 및 N^ε-(N^α-3급-부톡시카보닐) 라이실 유도체(Ac=Boc-Lys)를 동일한 방법에 의해 제조한다 :

TLC : (실라카켈)

시스템 Rf[Ac=Gly] Rf[Ac=Leu] Rf[Ac=Phe] Rf[Ac=Pro] RF[Ac=Boc Lys]

101 0.60 0.69 0.71 - -

111 0.62 0.80 0.80 - -

112 0.58 0.70 0.82 - -

151 0.59 0.70 0.70 - -

157 - - - - 0.65

157 - - - 0.73 -

또한 제일 나중에 명기된 N^ε-(N^α-3급-부톡시카보닐)라이실유도체(Ac=Boc-Lys)를 라이실 잔기가 없는 상응하는 펩타이드로 전환시킨다. 즉 다음 방법에 의해 다음 구조식의 [D-Trp⁸- N^ε-라이실-Lys-Gaba¹²]사이클로소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드를 제조한다.

100mg을 5°, 질소하에서 트리플루오로아세트산 89용량%, 물10용량%, 티오글리콜산 1용량%의 혼합물 1.9ml에 응해시키고 용액을 즉시 25

로 가열한 후 질소하 실온에서 25분간 방치시킨다. 생성물을 에테르 20ml로 침전시키고 3급-부탄올로 동결건조시킨다.

TLC : 시스템 101 Rf : 0.55

[실시예 4]

[D-Trp⁸- N^ε-옥타노일-Lys⁹-Gaba¹²]사이클로 소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드

트리에틸아민 10μl와 카프틸산무수물(옥탄산무수물) 23mg을 디메틸포름아미드 0.25ml중의

( 아세테이트상태) 69mg에 가하고 혼합물을 15시간동안 실온에서 방치한다. 물로 침전시킨 생성물을 계속하여 세파덱스 LH-20

컨럼상에서 클로로포름/메탄올(1 : 1)중에서 여과하여 정제시킨다.

TLC에 의할때 순수한 분획을 분리시킨다.

TL : [클로로포름/메탄올/물/빙초산(90 : 10 : 1 : 0.5)] Rf : 0.23

[실시예 5]

[D-Trp⁸,^εN-스테아로일-Lys⁹-Gaba¹²]사이클로 소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드

디메틸포름아미드 0.2ml중의

(아세데이드 상태의) 66mg, 스테아르산 P-니트로페닐 에스테르 26mg 및 트리에틸아민 9μl 용액을 실온에서 밤세 방치한다. 물로 침전시킨 물질을 계속하여 세파덱스 LH-20

컬럼상에서 클로로포름/메탄올(1 : 1)중에서 여과하고 TLC에 의할때 순수한 분획을 분리시킨다.

TLC : 클로로포름/메탄올/물/빙초산(75 : 26 : 5 : 0.5) Rf : 0.18

[실시예 6]

[D-Trp⁸, N^ε-(β-카복시프로피오닐)-Lys⁹-Gaba¹²]사이클로소마토스타틴(5-12)옥타펩타이드

(아세테이트상태) 100g을 디메틸포름아미드 0.8ml에 용해시키고 여기에 N-메틸모르폴린 9μl과 석신산 무수물 8.2mg을 가한다. 1시간동안 실온에서 반응시킨 후 에테르(과산화물이 함유되지 않은) 5ml를 가한다. 더욱 경제 시키기 위해 침전된 유상조생성물을 에테르 5ml로 연마하고 3급-부탄을 5ml에 용해시킨 후 동결건조한다.

TLC : [n-부탄올/아세트산/물(3 : 1 : 1)] Rf : 0.65

시스템 52 Rf : 0.63

시스템 104 Rf : 0.60

시스템 111B Rf : 0.50

시스템 157E Rf : 0.58

Claims

일반식(II)의 펩타이드를 아실화시킴을 특징으로 하여 소마토스타틴 또는 그의 유도체로 부터 유도된 일반식(I)의 아실펩타이드 및 그의 염을 제조하는 방법.

상기식에서

Ac는 C₂내지 C₁₈의 직쇄 포화 지방족 모노카복실산의 아실잔기, 말단카복실을함유하는 C₂내지 C₁₈의 직쇄포화 지방족 모노카복실 산의 아실잔기, 천연 α-아미노산 또는 아미노 그룹이 보호된 천연 α-아미노산의 아실잔기를 나타내고 ;
또는 D-Cys를 나타내고 Bmp는 데스아미노씨스테인 잔기를 나타낸다)또는 부분 구조식 -NH-CH(R)-(CH₂)_n-CO-의 ω-아미노-저급알칸 카복실산잔기(구조식중 n은 0 또는 1 내지 6의 정수를 나타내고 R은 수소 또는 카복실을 나타낸다 ; n=2이고 R이 수소이면, 환상하이드로 카빌 잔기로 치환될 수 있으며 이러한 경우를 Gaba(Ar)로 표시한다)를 나타내며 ; B는 Lys, Lys(Ac) 또는 Lys(X)(여기서 X는 ε-아미노-보호그룹이다)을 나타내고 ; C는 Asn, Ala 또는 His를 나타내며 ; D는 Phe 또는 잔기 A중 황-함유 아미노산 잔기가 존재하지 않을 경우에는 E와 함께 잔기
를 나타내고 trp는 L-Trp, D-Trp 또는 예를들면 인돌핵 중의 5-위치에 할로겐원자 특히 불소를 수반하는 동족체 잔기를 나타내며 ; E는 Phe 또는 Tyr또는 D와 함께 잔기
를 나타내고 ; 를 나타내고 ; G는 L-Ser, D-ser 또는 탄소수 최대 8인 2급 α-아미노산 잔기를 나타내며 ; a, b, c, f 및 g는 각기 독립적으로 0 또는 1을 나타내고 ; A₀는 잔기 A에 상응하는 잔기를 나타내며 이때 N-말단 아미노산 잔기의 α-아미노 그룹은 α-아미노-보호그룹을 수반할 수 있고 ; Y₀는 수소 또는 하이드록실 보호그룹을 나타내며, 유리 하이드록시그룹 또는 유리아미노 그룹은 반응도중 보호시킨다.